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Marek's disease virus (MDV) is an alphaherpesvirus that causes Marek's disease, a malignant lymphoproliferative disease of domestic chickens. While MDV vaccines protect animals from clinical disease, they do not provide sterilizing immunity and allow field strains to circulate and evolve in vaccinated flocks. Therefore, there is a need for improved vaccines and for a better understanding of innate and adaptive immune responses against MDV infections. Interferons (IFNs) play important roles in the innate immune defenses against viruses and induce upregulation of a cellular antiviral state. In this report, we quantified the potent antiviral effect of IFNα and IFNγ against MDV infections in vitro. Moreover, we demonstrate that both cytokines can delay Marek's disease onset and progression in vivo. Additionally, blocking of endogenous IFNα using a specific monoclonal antibody, in turn, accelerated disease. In summary, our data reveal the effects of IFNα and IFNγ on MDV infection and improve our understanding of innate immune responses against this oncogenic virus.

Marek´s disease virus (MDV) is a herpesvirus causing a lymphoproliferative disorder of domestic chickens worldwide. The early signs of disease like apathy, anorexy and the transient paralysis as well as the symptoms at the later stages (Neoplasia and death) causes large economical problems in the chicken industry. With the development of an effetive Vaccine, the first practical vaccine against an oncogenic disease of any type in any spieces, most of the serious problems were solved. However recent reports describing an increased virulence resulting in vaccine breaks, indicates a demand for better vaccines. To be able to enhance the prophylaxis against Marek´s disease virus, the understanding of the interaction between host and virus needs to be expanded. Interferons are cytokines with antiviral activity. On the basis of their structural and functional features they can be divided into type I (IFN-alpha and IFN-beta) and type II (IFN-gamma) interferons. Type I plays an important role during the early phase of viral infections, while IFN-gamma has a prominent role later during the infection through its immunmodulatory functions. In this study it was shown that chicken embryocellcultures responds to the infection with either an apathogenic strain of MDV (CVI 988) or a highly pathogenic strain (RB1B), with the secretion of an antiviral factor. Neutralisation with cytokine specific antibodies revealed that this activity could only be attributed to IFN-alpha but not IFN-beta. In addition, synthesis of IFN-gamma was not observed in any of the experiments. Treatment of MDV infected embryocellcultures with either recombinant chicken IFN-alpha (rChIFN-alpha) or recombinant chicken IFN-gamma (rChIFN-gamma) led to a significant reduction in plaque numbers. This antiviral effect was still observed when cultures were treated 48 hours after infection. In order to understand the functional role of the IFNs in vivo, leghorn birds were repeatedly treated with rChIFN-alpha or rChIFN-gamma for ten weeks starting on the day of hatch. The birds were then challanged on the second day of life with a highly virulent MDV-strain (vv+, EU-1). Treatment with IFN-gamma delayed the mortality to a very small degree. In contrast, IFN-alpha treatment delayed the mortality for 3 weeks. However, prevention of the disease was not achieved regardless of the used IFN-alpha dose. The functional relevance of IFN-alpha was further underscored by experiments where birds were treated with a neutralizing monoclonal antibody to ChIFN-alpha and thereafter infected with the EU-1 strain at the second day of life. Birds in this group died 3 weeks earlier than those in the untreated control group. These data shows that Interferons play a role in the progression of Mareks disease, however, regardless the IFN-dose applicated, the disease could not be prevented by the cytokines on their own., Die durch des Marek Disease Virus (MDV) ausgelöste Mareksche Krankheit ist eine der bedeutesten Krankheiten der Geflügelwirtschaft. Zu den frühen Krankheitserscheinungen gehören Apathie, Anorexie, und eine transiente Paralyse, im weiteren Verlauf der Erkrankung treten Tumoren auf. Die Krankheit ist durch eine hohe Mortalität gekennzeichnet. Die Impfprophylaxe stellt die wichtigste Bekämpfungsmaßnahme dar. Da zunehmend pathogenere Feldstämme auftreten kommt es aber immer wieder zu Impfdurchbrüchen. Um bessere Bekämpfungsmaßnahmen entwickeln zu können, sind detaillierte Kenntnisse der Wirt-Virus-Interaktion notwendig. Interferone (IFN) sind antiviral wirksame Botenstoffe des Immunsystems. Sie werden aufgrund ihrer Eigenschaften in Typ I (IFN-alpha und IFN-beta) und Typ II (IFN-gamma) Interferone unterteilt. Typ I IFNs spielen insbesondere in der frühen Phase einer Virusinfektion eine wichtige Rolle, während IFN-gamma als potenter Immunmodulator auch in späteren Phasen der Infektion von Bedeutung ist. In dieser Arbeit konnte in in vitro Versuchen gezeigt werden, dass Embryofibroblastenkulturen auf Infektionen mit dem Impfvirus CVI 988 oder dem hochpathogenen Virusisolat RB1B mit der Synthese eines antiviral wirksamen Faktors reagieren. Neutralisationsexperimente mit spezifischen Antikörpern zeigten, dass es sich dabei um IFN-alpha nicht aber IFN-beta handelte. Ebenso wenig konnte eine Synthese von IFN-gamma in diesen Kulturen nachgewiesen werden. Die Behandlung von infizierten Fibroblastenkulturen mit rekombinantem Hühner IFN- alpha (rChIFN-alpha) oder rekombinanten Hühner IFN-gamma (rChIFN-gamma) führte zu einer hochgradigen Reduktion der Plaquezahlen. Diese konnte auch dann beobachtet werden, wenn die Interferone erst 48 Stunden nach der Infektion der Kulturen zugesetzt wurden.Diese in vitro Studien wurden durch in vivo Versuche ergänzt, bei denen leghorn Hennen über einen Zeitraum von 10 Wochen wiederholt entweder mit rChIFN-alpha oder rChIFN-gamma behandelt und mit einem hochpathogenen MDV-1 Isolat (EU-1) infiziert wurden. Während die Behandlung mir rChIFN-gamma nur zu einer geringgradigen Verzögerung der Mortalität führte, konnte mit rChIFN-alpha eine deutliche Verzögerung erzielt werden. Einen Prävention der MD wurde aber in keinem Fall erzielt. Die funktionelle Bedeutung