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Milenariamente los agricultores han seleccionado de manera empírica el material de siembra de sus cultivos. Recientemente, de manera sistemática y con base en conocimiento teórico y práctico, los científicos, durante décadas, han venido produciendo variedades, híbridos y clones en todas las especies comerciales comestibles y no comestibles que existen hoy en día. Estos procesos se enmarcan en el mejoramiento genético de plantas (Fitomejoramiento), que a través del tiempo sigue evolucionando, como resultado de la aparición e integración de nuevas tecnologías para lograr procesos más rápidos, más eficientes y menos costosos.

Problemas en la Meiosis. Poliploidía y aneuploidía, Hay que ver el vídeo y revisionarlo anticipando que va a pasar y respondiendo a las preguntas abiertas propuestas

La obtención de doble haploides mediante ginogénesis es una novedosa técnica que se utiliza dentro del campo de la mejora vegetal, la cual se basa en la producción de embriones haploides a partir de células del gametofito femenino, siempre y cuando no haya ocurrido el proceso de fecundación. Una vez obtenidas las plantas haploides, se obtienen individuos doble haploides por un proceso de duplicación cromosómica que puede ser espontáneo o inducido y que da lugar a plantas homocigotas para todos sus loci. En este trabajo, se ha llevado a cabo una revisión bibliográfica sobre las diferentes técnicas de ginogénesis que se utilizan en Cucumis melo y Cucumis sativus, dos de los cultivos más importantes dentro de la familia. La metodología comúnmente más empleada en C. melo para la obtención de plantas haploides es la técnica de ginogénesis in situ inducida por polen irradiado, a pesar del inconveniente que representan la adquisición del aparataje para la irradiación del polen. En el caso de C. sativus, la técnica más utilizada es la de ginogénesis in vitro basada en el cultivo de ovarios, por ser la más eficiente y requerir de una metodología más sencilla. En ambas especies, debido a los bajos porcentajes de generación espontánea de plantas doble haploides obtenidos, estas técnicas de ginogénesis suelen estar acompañadas de un tratamiento con colchicina como agente inductor de duplicación cromosómica que da lugar a plantas doble haploides que podrán ser utilizadas directamente como un nuevo cultivar, o como parentales para la obtención de híbridos comerciales. Abstract: Obtaining double haploids by gynogenesis is a innovative technique used within the field of plant improvement, which is based on the production of haploid embryos from the cells of the female gametophyte if the fertilization process has not occurred. Once haploid plants are obtained, double haploid individuals are obtained by a chromosomal duplication process which can be spontaneous or induced giving rise to homozygous plants for all its loci. In this work, a bibliographic review has been carried out on the different techniques of gynogenesis used in Cucumis melo and Cucumis sativus, two of the most important crops within the family of Cucurbits. The most used methodology in C. melo for obtaining haploid plants is the technique of in situ gynogenesis induced by irradiated pollen, despite the inconvenience of acquiring the equipment for pollen irradiation. In the case of C. sativus, the most used technique is in vitro gynogenesis which is based on the cultivation of ovaries, being the most efficient and requiring a simpler methodology. In both species, due to the low percentages of spontaneous generation of double haploid plants obtained, these gynogenesis techniques are usually accompanied by a colchicine treatment as a chromosomal duplication inducing agent which results in double haploid plants that can be used directly as a new cultivar, or as parents for obtaining commercial hybrids.

Accelerating international trade and climate change make pathogen spread an increasing concern. Hymenoscyphus fraxineus, the causal agent of ash dieback, is a fungal pathogen that has been moving across continents and hosts from Asian to European ash. Most European common ash trees (Fraxinus excelsior) are highly susceptible to H. fraxineus, although a minority (~5%) have partial resistance to dieback. Here, we assemble and annotate a H. fraxineus draft genome, which approaches chromosome scale. Pathogen genetic diversity across Europe and in Japan, reveals a strong bottleneck in Europe, though a signal of adaptive diversity remains in key host interaction genes. We find that the European population was founded by two divergent haploid individuals. Divergence between these haplotypes represents the ancestral polymorphism within a large source population. Subsequent introduction from this source would greatly increase adaptive potential of the pathogen. Thus, further introgression of H. fraxineus into Europe represents a potential threat and Europe-wide biological security measures are needed to manage this disease.

La esencia y los orígenes de la genética hay que buscarlos en los principales experimentos que Gregor Mendel publicó por los años 1866. A partir de ellos es cuando la misma genética empieza a tomar forma y se desarrolla diferentes ramas de estudio con técnicas y metodología más avanzadas que nos permiten avanzar en el conocimiento y la aplicación de los mismos en diversos ámbitos, muchos de los cuales permiten mejorar nuestra calidad de vida, especialmente en la medicina. Se abordan los contenidos fundamentales de la Teoría cromosómica de la herencia y del concepto, utilidad y tipos de mutaciones. The essence and origins of genetics are to be found in the main experiments that Gregor Mendel published by the years 1866. From them it is when the same genetic begins to take shape and different branches of study techniques and methodology most advanced develops that allow us to advance the knowledge and application thereof in various fields, many of which can improve our quality of life, especially in medicine. The fundamental contents of the chromosomal theory of inheritance and concept, utility and types of mutations are addressed.

Flor yeasts of Saccharomyces cerevisiae have been extensively studied for biofilm formation, however the lack of specific haploid model strains has limited the application of genetic approaches such as gene knockout, allelic replacement and Quantitative Trait Locus mapping for the deciphering of the molecular basis of velum formation under biological ageing. The aim of this work was to construct a set of flor isogenic haploid strains easy to manipulate genetically. The analysis of the allelic variations at 12 minisatellite loci of 174 Saccharomyces cerevisiae strains allowed identifying three flor parental strains with different phylogenic positions. These strains were characterized for sporulation efficiency, growth on galactose, adherence to polystyrene, agar invasion, growth on wine and ability to develop a biofilm. Interestingly, the inability to grow on galactose was found associated with a frameshift in GAL4 gene that seems peculiar of flor strains. From these wild flor strains, isogenic haploid strains were constructed by deleting HO gene with a loxP-KanMX-loxP cassette followed by the removal of the kanamycin cassette. Haploid strains obtained were characterized for their phenotypic and genetic properties and compared with the parental strains. Preliminary results showed that the haploid strains represent new tools for genetic studies and breeding programs on biofilm formation.The inability to metabolize galactose was found to be a useful selectable marker in flor yeast strain development programs.The inability to metabolize galactose was found to be a useful selectable marker in flor yeast strain development programs.

The lines used for onion hybrid production are partially homozygous due to the existence of endogamy depression during selfing. The production of haploid plants through in vitro gynogenesis, and later chromosome doubling allows reaching complete homozygosis. There are several factors that influence onion gynogenesis like, the genotype of the donor plant, the conditions and media of the growth culture. The duplication of chromosome number is a necessary step once obtained the haploid embryos, because spontaneous doubling is very low. There are several antimitotic substances that can be used for chromosome doubling, among them colchicine and APM, both with 70 % of efficiency, and others like oryzalin and trifluralin. The principal factors that affect doubling techniques are: the explant type, the antimitotic substances used, the duration and conditions under which the treatments are performed. For these reasons is necessary to optimize the duplication methods adjusting the concentration used and the duration of the treatments. This technique step represents today one of the main constraints for usein the improvement plans.--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------Las líneas autofecundadas de cebolla utilizadas para la obtención de híbridos son líneas parcialmente homocigotas, debido a que la cebolla presenta alto grado de depresión por endogamia.La producción de plantas haploides mediante ginogénesis in vitro y posterior duplicación de número de cromosomas es una estrategia que permite obtener una completa homocigosis. Existen varios factores que afectan la ginogénesis, entre ellos se encuentran el genotipo de la planta donadora, las condiciones y el medio de cultivo, los cuales han sido ampliamente estudiados en los genotipos locales. Una vez obtenidos los embriones haploides es necesaria la duplicación de los cromosomas, debido a la escasa duplicación espontánea. Para tal propósito existen diferentes sustancias antimitóticas, la de mayor uso es la colchicina y luego el amiprophos-methyl que presentan una eficiencia del 70 % y en menor proporción se utilizan la trifluralina y la orizalina de menor eficiencia de duplicación. Losprincipales factores que afectan a las técnicas de duplicación son: el tipo de explanto utilizado, la sustancia duplicadora, la duración y las condiciones bajo las cuales se realizan los tratamientos. Este paso de la técnica representa hoy en día una de las principales limitantes para su uso en los planes de mejoramiento.

[EN] The existence of the imprinting mechanism in zebrafish may be useful for studying the role this same phenomenon has in mammals. To try to figure out how the imprinting occurs in zebrafish, androgenote and gynogenote haploid larvae are built. Gynogenote haploid larvae are produced by fertilization of oocytes with UV light irradiated spermatozoa, and androgenote haploid larvae by UV light irradiated oocyte fertilized with sperm. Differences in the obtaining of these larvae are noted and the effectiveness of the applied radiation may be analyze. With the haploid larvae that survive after 24 hours and diploid larvae, cell cultures were performed. Using cultures derived from such larvae, somatic cell nuclear transplant experiments make it possible to assess the capacity of the oocyte to reprogram the nucleus from somatic haploid cells from already differentiated larvae., [ES] La existencia del mecanismo de imprinting en pez cebra puede ser útil para estudiar el papel que cumple este mismo fenómeno en mamíferos. Para intentar averiguar cómo tiene lugar el imprinting en el pez cebra, se construyen larvas haploides ginogenotas y androgenotas. Las larvas haploides ginogenotas se producen por fertilización de ovocitos con espermatozoides radiados con luz UV, y las larvas haploides androgenotas por fertilización de ovocitos radiados con luz UV con espermatozoides. Se observan diferencias en la obtención de estas larvas y se podrá analizar la eficacia de la radiación aplicada. Con las larvas haploides que sobrevivan tras 24 horas y con larvas diploides se realizan cultivos celulares. El uso de los cultivos derivados de tales larvas en experimentos de transplante nuclear de células somáticas, permitirá evaluar mejor la capacidad del ovocito para reprogramar el núcleo de células somáticas haploides procedentes de larvas ya diferenciadas.

Introducción: el trasplante alogénico de progenitores hematopoyéticos (TPH) es actualmente la única opción de tratamiento curativo disponible para un número de neoplasias hematológicas de alto riesgo, así como para algunas enfermedades no malignas hereditarias o adquiridas. El TPH haploidéntico (HI) es una opción válida para pacientes que no tienen un hermano HLA-idéntico. Objetivo: describir los resultados obtenidos con TPH HI en pediatría. Material y método: en el año 2005 se inició en el Centro Hemato-Oncológico Pediátrico del Centro Hospitalario Pereira Rossell un programa de TPH HI para aquellos pacientes sin donante relacionado HLA-idéntico. Resultados: se trasplantaron 32 pacientes, 24 con neoplasias hematológicas y 8 con enfermedades no malignas. Se utilizaron dos estrategias de prevención de la enfermedad injerto contra huésped (EICH), depleción de linfocitos T (DLT) in vitro (28 pacientes) y DLT alorreactivos in vivo con altas dosis de ciclofosfamida postrasplante (4 pacientes). Veintisiete pacientes (84%) tuvieron un implante con quimerismo total del donante. La incidencia de EICH agudo y crónico fue de 26,9% y 11,8%, respectivamente. La muerte no relacionada a recaída al año del trasplante fue de 21,9%. Con una mediana de seguimiento de 32 meses, la sobrevida global a dos años fue de 52,4%. Conclusiones: el TPH HI ha demostrado ser una opción factible en nuestro medio para aquellos pacientes sin donante HLA-idéntico. Los resultados son comparables a los obtenidos con otros donantes alternativos y con costos más accesibles. Uruguay está hoy día mejor posicionado para ofrecer un TPH a los pacientes que así lo requieran. Abstract Introduction: allogenic hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) is the only currently available curative treatment for a number of high-risk hematologic malignancies and for a range of inherited and acquired non-malignant diseases. Haploidentical (HI) HSCT is a valid option for patients who lack an HLA-identical brother. Objective: to describe the results obtained with HI HSCT in pediatrics. Method: in 2005 an HI HSCT program was started at the Pediatric Hemato-Oncological Department of the Centro Hospitalario Pereira Rossell, for patients who lack an HLA-matched related donor. Results: Thirty two patients were transplanted, 24 of them with hematological malignancies and 8 with non-malignant diseases. Two strategies were used to prevent the Graft-Versus-Host-Disease (GVHD), in- vitro T-cell depletion (28 patients) and in-vivo depletion of aloreactives T-cells with high-dose post-transplantation cyclophosphamide (4 patients). Successful engraftment occurred in 27 patients (84%), with full-donor chimerism. Incidence of acute and chronic GVHD was 26.9% and 11.8% respectively. One year non-relapsed mortality was 21.9%. With a median follow-up of 32 months, the overall survival was 52.4%. Conclusions: HI HSCT has proved to be a feasible option in our country for those patients without an HLA-identical donor. The results obtained are comparable to those obtained with other alternative donors and costs are more reasonable. Today, Uruguay is in a better position to offer a HSCT to patients who need it. Resumo Introdução: o transplante alogênico de células-tronco hematopoiéticas (TCH) atualmente é a única opção terapêutica curativa disponível para várias neoplasias hematológicas de alto risco, e também para algumas patologias não malignas hereditárias ou adquiridas. O TCH haploidêntico (HI) é uma opção válida para pacientes que não tem irmão HLA-id. Objetivo: descrever os resultados obtidos com TCH HI em Pediatria. Material e método: em 2005 no Centro Hemato-Oncológico Pediátrico do Centro Hospitalario Pereira Rossell começou um programa de TCH HI para pacientes sem doador relacionado HLA-idêntico. Resultados: foram transplantados 32 pacientes, 24 com neoplasias hematológicas e 8 com patologias não malignas. Foram utilizadas duas estratégias para a prevenção da doença enxerto versus hospedeiro (DEVH): depleção de linfócitos T (DLT) in vitro (28 pacientes) e DLT alorreativos in vivo com altas doses de ciclofosfamida pós-transplante (4 pacientes). Vinte e sete pacientes (84%) tiveram um implante com quimerismo total do doador. A incidência de DEVH aguda e crônica foi de 26,9% e 11,8% respectivamente. A porcentagem de óbito não relacionado à recaída um ano depois do transplante foi de 21,9%. A sobrevida global aos dois anos do transplante foi de 52,4% com uma mediana de seguimento de 32 meses. Conclusões: o TCH HI mostrou ser uma opção viável no nosso meio para pacientes sem doador HLA-idêntico. Os resultados são comparáveis aos obtidos com outros doadores alternativos com custos más acessíveis. Atualmente o Uruguai tem melhores condições para oferecer TCH aos pacientes que o necessitem.

El níspero (Eriobotrya japonica Lindl.) es originario de China y se introdujo en Europa desde Japón en el S. XVIII. El níspero se cultiva principalmente en países subtropicales y mediterráneos, siendo España la zona de mayor producción en el Mediterráneo. Sin embargo, la producción se basa en una estrecha gama varietal por lo que en el IVIA se inició un programa de mejora varietal. La producción de plantas haploides y doble haploides (DH) ofrece una valiosa herramienta biotecnológica para la mejora de especies leñosas, reduciendo el tiempo necesario para la obtención de líneas homocigotas en comparación con la mejora convencional. En el caso de árboles frutales, que presentan un alto nivel de heterocigosidad, largo periodo juvenil, gran tamaño de planta y en algunos casos autoincompatibilidad, no existe otra vía para la obtención de estas líneas homocigotas que no implique la autofecundación de varias generaciones (Germanà, 2009). El uso del polen se ha convertido en una de las más importantes aplicaciones en el campo de la mejora genética para la obtención de haploides y DH. La regeneración a partir de gametos masculinos ha sido descrita en manzano, frutales de hueso y cítricos (Ochatt y Zhang, 1996; Germanà, 2006). El objetivo principal de este estudio se centra en la obtención de plantas haploides o DH mediante la inducción a embriogénesis de las microsporas a través del cultivo in vitro de anteras.

Este objeto docente describe un protocolo sencillo de cultivo de anteras de tabaco para la obtención de plantas haploides y doble-haploides, Se utilizará en el contexto de las prácticas de Cultivo in vitro y transformación genética de plantas y para afianzar conceptos teóricos

La producción de doble haploides a través del cultivo de microsporas aisladas es una alternativa para obtener líneas puras mucho más eficaz que las técnicas de mejora genética clásica. Esta técnica presenta las ventajas de reducir considerablemente el tiempo y los recursos, materiales y humanos, necesarios para la obtención de líneas puras. En berenjena (Solanum melongena) esta técnica no está todavía puesta a punto. En este trabajo hemos conseguido optimizar esta técnica en berenjena, regenerando doble haploides de forma eficiente. Hemos demostrado también que tras la inducción, las microsporas forman embriones y que es en etapas más tardías de la embriogénesis cuando tiene lugar una desdiferenciación a callo. Los doble haploides regenerados fueron analizados mediante técnicas de citometría de flujo y marcadores moleculares, demostrando su origen androgénico. Ésta técnica ha sido aplicada a distintos genotipos de berenjena para seleccionar el que mejor responde a la inducción de androgénesis y a la regeneración. A partir del genotipo seleccionado, hemos ensayado una serie de factores que en otras especies tienen un efecto positivo en la inducción de androgénesis como son: butionin sulfoximina, ácido abcísico, epibrasinólido, fuentes de carbono alternativas a la sacarosa, osmóticos, cocultivo con microsporas de Brassica napus y goma arábiga. Con la mayoría de los factores se observaron efectos positivos a nivel de la respuesta androgénica, crecimiento o mejora en la calidad del material obtenido, llegando a obtener embriones en estadios más avanzados del desarrollo. Se ensayaron también métodos de disgregación mecánica del material obtenido, para la realización posterior de estudios de regeneración a planta completa de forma independiente del genotipo. Además de lo dicho, los resultados obtenidos abren nuevos caminos para continuar mejorando la eficiencia de los cultivos de microsporas de berenjena, y conseguir la obtención de doble haploides de forma rutinaria para su uso en programas de mejora.

En esta presentación se muestra la utilización del citómetro de flujo para analizar la ploidía en plantas. En la introducción se definen conceptos relacionados y se comenta la importancia de su análisis. Como ejemplo para presentar la metodología se analizan plantas regeneradas a partir de cultivo in vitro de anteras, técnica de gran importancia en mejora vegetal muy utilizada para la obtención de plantas haploides. También en esta presentación se comentan los fundamentos de la citómetría de flujo., En este video se introduce la importancia de determinar la plodía y se muestra como utilizar el citómetro de flujo para ello con un ejemplo. En el caso de que el usuario necesite únicamente conocer el procedimiento a seguir para utilizar el citómetro puede pasar directamente a la parte de resultados del objeto

A modification of a protocol used to induce tobacco microspore embryogenesis was tested in eggplant (Solanum melongena L.). In tobacco, uninucleate microspores are subjected to stress treatment by culturing in mannitol containing "B" medium at 33ºC for six days. The microspores are then transferred to maltose containing AT3 medium for further development. In the experiment presented here late uninucleate and bi-nucleate microspores of the eggplant cultivar Bambino were pre-cultured in B medium and then incubated at +4ºC, 25ºC and 33ºC, respectively, for two days. After the pre-treatments, microspore cultures were transferred to AT3 medium containing 0.25 M maltose and maintained at 25ºC in the dark. Presence of symmetrical division and multinucleate structures was checked with DAPI staining of the nucleus after one and two weeks. Symmetrical division of the nucleus and multinucleate structures were observed only in uni-nucleate microspores pre-treated at 33ºC for two days. The frequency of multinucleate structures was 19.4% under these conditions. We demonstrated that eggplant is responsive to the modified tobacco protocol in the production of symmetrically division and multinucleate structures. These results may be used as a basis for adaptation fully of the tobacco system in eggplant. Uma modificação de um protocolo utilizado para induzir embriogênese a partir de micrósporos de tabaco foi testada em berinjela (Solanum melongena L.). Em tabaco, micrósporos uninucleados são submetidos a um tratamento de estresse em meio "B" contendo manitol a 33ºC por seis dias. Os micrósporos são então transferidos para um meio AT3 contendo maltose para as fases posteriores de desenvolvimento. Neste estudo, micrósporos uninucleados e binucleados tardios do cultivar de berinjela Bambino foram pré-cultivados em meio "B" e, posteriormente, incubados a 4ºC, 25ºC e 33ºC por dois dias. Após os pré-tratamentos, as culturas de micrósporos foram transferidas para o meio AT3 contendo maltose 0,25 M e mantidas a 25ºC no escuro. A presença de divisão simétrica e estruturas multinucleadas foram verificadas com coloração DAPI do núcleo após uma e duas semanas. Foram observadas divisões simétricas dos núcleos e estruturas multinucleadas somente em micrósporos uninucleados, pré-tratados a 33ºC por dois dias. A frequência de estruturas multinucleadas foi de 19,4% sob essas condições. Nós demonstramos que a berinjela responde ao protocolo modificado de tabaco para produção de divisões simétricas e estruturas multinucleadas. Esses resultados podem ser utilizados como base para uma completa adaptação do sistema de tabaco em berinjela.

En la actualidad se cuenta con un protocolo de regeneración de plántulas de onoto, Bixa orellana L., mediante la embriogénesis somática (ES) a partir del cultivo de anteras, el cual ha sido probado eficientemente en varios genotipos. Con la finalidad de determinar si las plántulas obtenidas eran haploides, o si había ocurrido una duplicación espontánea de los cromosomas, se realizaron estudios citogenéticos a embriones normales y anormales, así como a plántulas cultivadas in vitro y plantas aclimatadas regeneradas por esta técnica en umbráculo. Se describen los procesos de prefijación, fijación, hidrólisis y tinción más eficientes para cada uno de los materiales evaluados. Las observaciones citológicas realizadas mostraron que fueron haploides (n=8 cromosomas), percibiéndose una gran estabilidad en el número cromosómico en las diferentes fases evaluadas. Estos estudios ponen en evidencia la importancia de obtener información relevante sobre la estabilidad genética que permitiría establecer protocolos con el uso de agentes mutagénicos (colchicina) en programas de mejoramiento en onoto donde se pretenda obtener plantas dihaploides ciento por ciento homocigotas, mediante la técnica de ES a partir del cultivo de anteras. At this time, a protocol for regeneration of plantlets through somatic embryogenesis from annatto, Bixa orellana L., anthers has been efficiently achieved in different genotypes. In order to verify if plantlets obtained were haploid or if spontaneous chromosome duplication had occurred, cytogenetic studies were made on normal and abnormal embryos, as well as on in vitro cultivated and acclimatized plants regenerated by this technique in the greenhouse. A description of the most efficient processes of prefixation, fixation, hydrolysis and dyeing for each genetic material evaluated is presented. According to mitotic countings, they were all haploids (n=8 chromosomes), showing great stability in chromosome number at different phases. These studies indicate the importance of obtaining relevant information on genetic stability in order to establish protocols using mutagenic agents such as colchicine in breeding programs where dihaploids annatto plants are to be obtained by means of somatic embryo techniques from anther culture.

Two hallmark features of meiosis are i) the formation of crossovers (COs) between homologs and ii) the production of genetically-unique haploid spores that will fuse to restore the somatic ploidy level upon fertilization. In this study we analysed meiosis in haploid [i]Arabidopsis thaliana[/i] plants and a range of haploid mutants to understand how meiosis progresses without a homolog. Extremely low chiasma frequency and very limited synapsis occurred in wild-type haploids. The resulting univalents segregated in two uneven groups at the first division, and sister chromatids segregated to opposite poles at the second division, leading to the production of unbalanced spores. DNA double-strand breaks that initiate meiotic recombination were formed, but in half the number compared to diploid meiosis. They were repaired in a RAD51- and REC8-dependent manner, but independently of DMC1, presumably using the sister chromatid as a template. Additionally, turning meiosis into mitosis (MiMe genotype) in haploids resulted in the production of balanced haploid gametes and restoration of fertility. The variability of the effect on meiosis of the absence of homologous chromosomes in different organisms is then discussed.

Le comportement en croisement de génotypes haploïde-doublés (HD) et hybrides de #Coffea canephora$ a été établi par des tests in vitro et des observations du seed-set. L'utilisation de HD offre l'opportunité de travailler avec des parents mâles et femelles génétiquement homogènes. La méthode (ABF) basée sur la fluorescence du bleu d'aniline a été utilisée pour observer l'accumulation de callose dans le pollen et le pistil. Des situations tranchées de compatibilité/incompatibilité sont observées et confirmées par l'analyse du seed-set. Le comportement en croisement de combinaisons hybrides corrobore celui observé chez les phénotypes HD. L'expression de l'auto-incompatibilité ne semble donc pas modifiée par la faible vigueur des HD. La distribution du comportement en croisement observée au sein des génotypes HD dérivés du clone IF 200 confirme que l'auto-incompatibilité chez #C. canephora$ est un système gamétophytique contrôlé par 1 locus (S). Le faible seed-set observé dans des cas de croisements incompatibles pourrait indiquer l'existence de pseudo-incompatibilité. Une analyse de liaison par des marqueurs moléculaires indique que le locus S est associé à un marqueur RFLP sur le groupe de liaison 9. La disponibilité d'un marqueur associé devrait faciliter l'analyse génétique de l'auto-incompatibilité en relation avec les programmes d'amélioration génétique des caféiers. (Résumé d'auteur)

La théorie de la sélection naturelle par compétition locale pour les partenaires sexuels (LMC) prédit que les espèces endogames effectuant la totalité de leur développement, ainsi que leur accouplement, en habitat extrêmement fragmenté, présentent des sex-ratios biaisés en faveur des femelles. Chez de telles espèces, les femelles contrôlent le sex-ratio de leur progéniture en produisant des oeufs fécondés, donnant des femelles diploïdes, et des oeufs non fécondés, donnant des mâles haploïdes (arrhénotoquie). Le scolyte du café, #Hypothenemus hampei$, présente de telles charactéristiques, à la différence près que ses mâles sont fonctionnellement haploïdes, mais caryologiquement diploïdes (pseudo - arrhénotoquie). Néanmoins, nous montrons ici qu'en conditions expérimentales, les femelles #H. hampei$ contrôlent avec précision le sex-ratio de leur progéniture. Cependant, l'ajustement du sex-ratio en fonction du nombre de fondatrices en compétition au moment de la ponte pourrait être simplement dû à la conjonction de 2 facteurs : la précocité de l'éclosion des mâles et la limitation de la taille de la fratrie adulte imposée par la capacité portante du milieu. Ainsi, bien qu'en accord qualitatif avec les prédictions théoriques, la réponse aux conditions locales pourrait dans ce cas s'avérer purement fortuite en ce sens qu'elle ne résulterait pas d'une adaptation du comportement de la mère au moment de la ponte. Nous remarquons que les taux d'endogamie estimés dans les populations naturelles de #H. hampei$, bien qu'étant inférieurs à l'attendu théorique chez une espèce où les croisements entre frères et soeurs seraient la règle, restent compatibles avec les conditions de la LMC. (Résumé d'auteur)

Une carte de liaison génétique du caféier (#Coffea canephora$) totalisant 1402 cM a été établie sur la base d'une population de plantes haploïde-doublées. Des marqueurs RFLP comme des marqueurs utilisant la PCR (RAPD) ont permis la construction de 15 groupes de liaison. Des clones de DNA génomiques de caféier ainsi que des DNAc ont été utilisés. Au total, 47 RFLP et 100 RAPD sont positionnés sur la carte de liaison. Un niveau relativement faible de polymorphisme est observé. 81 % des marqueurs RAPD et 85 % des marqueurs RFLP présentent une ségrégation significativement non différente (P < 0.01) du ration 1:1. La disponibilité d'une carte de liaison moléculaire du caféier offre de nombreuses perspectives tant pour des études génétiques que pour l'amélioration des espèces de caféiers qui constituent une culture de grande importance économique. (Résumé d'auteur)

Methods of gynogenesis, androgenesis and polyploidy induction were developed with the aim of genetic improvement in the rainbow trout, the Pacific oyster, the Manila clam and black scallop. In the trout, haploid and diploid androgenesis were induced by pressure shocks, and homozygous gynogenetic lines were produced by a heat shock (and with UV-irradiated sperm). In the mollusks, triploidy was induced egg treatment with cytochalasin B (clam and scallop), tetraploidy was attempted using a pressure shock (oyster) and cytochalasin B (clam). Gynogenesis was induced with UV-irradiated sperm. Subsequent treatments of eggs with cytochalasin B resulted in diploid and tetraploid eggs., A des fins d'amélioration génétique, des méthodes d'induction de la gynogenèse, de l'androgenèse et de la polyploïdie ont été développées chez la truite arc-en-ciel, l'huître creuse, la palourde japonaise et le pétoncle noir.Chez la truite, des androgenèses haploïde et diploïde ont été induites par choc de pression sur des œufs, probablement au moment de la caryogamie. Leur insémination par du sperme de mâle tétraploïde permet l'obtention directe d'individus androgénétiques diploïdes. Un choc chaud capable de supprimer la première division mitotique a été mis au point. Ce traitement permet la création de lignées gynogénétiques homozygotes lorsqu'il est appliqué sur des œufs inséminés par du sperme irradié aux UV. Il permet aussi la tétraploïdie lorsqu'il est appliqué à des œufs diploïdes.Chez les mollusques, l'induction de la triploïdie avec la cytochalasine B a été mise au point chez la palourde et le pétoncle. La tétraploïdie a été tentée chez l'huître creuse, par un choc de pression, et chez la palourde, avec la cytochalasine B. Les embryons tétraploïdes ainsi obtenus sont inviables. La gynogenèse a été induite chez l'huître en inséminant des ovules avec du sperme irradié aux UV. Un traitement de ces œufs par la cytochalasine B permet d'obtenir des embryons gynogénétiques diploïdes et tétraploïdes dont la viabilité reste à démontrer.

L'auteur présente ici un rappel des recherches effectuées depuis 1972 en Côte d'Ivoire sur l'haploïdie chez les cacaoyers, décrit les caractères phénotypiques de ces cacaoyers puis les travaux qui ont permis d'aboutir à leur diploïdisation. L'obtention de cacaoyers homozygotes diploïdes, fertiles, en nombre pratiquement illimité et de diversité génétique suffisante apparaît désormais possible

Orientador: Yoko Bomura Rosato Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: Linhagens haplóides, bem como heterocários e diplóides do fungo Aspergillus nidulans foram analisados quanto à produção das enzimas extracelulares lipase, amilase, protease, fosfatase e urease. Foram utilizados três linhagens normais e oito mutantes morfológicos, além de diferentes combinações entre ambos. Os ensaios foram efetuados em meios de cultura sólidos, contendo cada qual, um substrato especifico. As linhagens morfológicas do tipo compacto foram também analisadas microscopicamente, e comparadas às demais, previamente descritas. Pelos resultados obtidos, foi constatado que as colônias de crescimento reduzido em um ou mais meios de cultura foram sempre as mais alteradas também no aspecto enzimático, bem corno no microscópico. As compactas B-VIII e B-6, bem corno os heterocários pp+M-32 e pp+M-35, destacaram-se por apresentar a maior produção de lipase, amilase, protease, enquanto que outras linhagens e heterocários mostraram maior produção em relação a apenas uma ou outra dessas enzimas. A linhagem compacta pp-6 constituiu uma exceção, já que não apresentou produção de protease, embora o heterocário MSE + pp-6 tenha produzido o mais alto nível de atividade dessa mesma enzima. Para fosfatase e urease ocorreu o inverso, isto é, as colônias de menores dimensões apresentaram evidências de menor atividade enzimática. Quanto aos diplóides, houve restauração do fenótipo enzimático original bm ou pp em todos os casos. As alterações aqui descritas foram discutidas, considerando-se a possibilidade de problemas de permeabilidade nos mutantes morfológicos utilizados Abstract: The production of extracellular enzynes such as lipase, amylase, protease, phosphatase and urease by haploids, heterocaryons and diploids of A. nidulans were analysed. Three normal strains, eight morphological mutants and differents combinations among them were utilized. The enzymatic test were carried out using solid culture medium containing specific substrate for each enzyme under assay. The results shwed that slow growing colonies in one or more culture medium showed also more alterations in the enzyme production. In general compact colonies (B-VIII and B-6) and some heterocaryons (pp+M-32 and pp+M-35) showed higher production of lipase, amylase and protease. For specific enzymes there are others strains and heterocaryons that must be considered. The strain pp-6 was a special compact strain showing no activity of protease at all; however in the heterocaryon MSE + pp-6 there was a strong interaction producing the highest level of protease activity. For phosphatase and urease the results were quite different, the smaller colonies having lower enzymatic activity. There were no differences in the diploids and the level of enzymes production returned to the respective original strain bm ou pp. All the alterations described, specially in haploids and heterocaryons were discussed considering permeability problems in the morphological mutants Mestrado Genética Mestre em Ciências Biológicas

Des ovules non fécondés et des ovules prélevés 8 jours après pollinisation chez 3 génotypes de pommier « R1-49 », « Lodi » et « Erovan » ont été mis en culture in vitro sur des milieux comportant le milieu de base de MURASHIGE & SKOOG complété avec diverses combinaisons en phytohormones et saccharose. Deux embryoïdes chez « R1-49 » et des cals chez « Lodi » et « Erovan » ont été induits après culture des ovules non fécondés. De nombreuses plantes issues soit de germination directe, soit de néoformation de bourgeons adventifs ont été obtenues sur les 3 génotypes par culture des embryons prélevés 8 jours après pollinisation ; toutes ces plantes présentent un phénotype normal, comparable au phénotype de plantes diploïdes. L’intérêt de la culture d’embryons prélevés à un stade très précoce est discuté., Unfertilized ovules and ovules collected 8 days after pollination on three apple cultivars "R1-49", "Lodi" and "Erovan" were cultivated in vitro media made with MURASHIGE & SKOOG basic medium complemented with various phytohormones and sucrose combinations. Two embryoids from "R1-49" and calluses from "Lodi" and "Erovan" were induced after culture of the unfertilized ovules. Plants from either direct germination or neoformation of adventitious shoots were obtained in the three cultivars by culture of immature embryos collected 8 days after pollination ; all these plants showed, normal phenotype, similar to that of diploid plants. The value of in vitro culture of very young embryos is discussed.