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Cushing's disease is caused by the corticotrophic pituitary adenoma which increases the level of cortisol and consequently blood glucose levels and the deposition of fat in tissues and organs. This study proposes to report the case of a patient with this rare pathology in order to understand the syndrome that hypercortisolism/adenoma results in and discuss the clinical challenge. This is a case study whose data were obtained by evaluating the patient's medical records, analyzing the diagnostic tests performed and reviewing the literature. The 21-year-old patient complained of difficult-to-control obesity. Physical examination, laboratory and imaging tests were performed, which led to the diagnostic hypothesis of pituitary adenoma. After the surgical removal procedure, the material was sent to the anatomopathological examination for biopsy, which confirmed the diagnosis of corticotrophic pituitary adenoma. It is necessary to pay attention to the clinical abnormalities caused by excess cortisol related to the diagnosis, considering the need for a multidisciplinary treatment. La enfermedad de Cushing es causada por el adenoma pituitario corticotrófico que aumenta el nivel de cortisol y, en consecuencia, los niveles de glucosa en sangre y la deposición de grasa en los tejidos y órganos. Este estudio se propone relatar el caso de un paciente con esta rara patología con el fin de comprender el síndrome que provoca el hipercortisolismo/adenoma y discutir el desafío clínico. Se trata de un estudio de caso cuyos datos se obtuvieron mediante la evaluación de la historia clínica del paciente, el análisis de las pruebas diagnósticas realizadas y la revisión de la literatura. El paciente de 21 años se quejaba de obesidad de difícil control. Se realizaron exámenes físicos, de laboratorio y de imagen, lo que llevó a la hipótesis diagnóstica de adenoma hipofisario. Luego del procedimiento de remoción quirúrgica, el material fue enviado al examen anatomopatológico para biopsia, que confirmó el diagnóstico de adenoma hipofisario corticotrófico. Es necesario prestar atención a las alteraciones clínicas provocadas por el exceso de cortisol relacionadas con el diagnóstico, considerando la necesidad de un tratamiento multidisciplinario. Doença de Cushing é causada pelo adenoma de hipófise corticotrófico que aumenta o nível de cortisol e consequentemente os níveis de glicose no sangue e o depósito de gordura nos tecidos e órgãos. Esse estudo propõe relatar o caso de uma paciente portadora dessa patologia rara visando entender a síndrome que o hipercortisolismo/adenoma resulta e discorrer sobre o desafio clínico. Trata-se de um estudo de caso cujos dados foram obtidos por meio de avaliação de prontuário cedido pela paciente, análise dos exames diagnósticos realizados e revisão da literatura. A paciente de 21 anos queixava de obesidade de difícil controle. Foram realizados exame físico, exames laboratoriais e de imagem os quais levaram a hipótese diagnóstica de adenoma de hipófise. Após o procedimento de retirada cirúrgica, o material foi encaminhado ao anatomopatológico para biópsia, que confirmou o diagnóstico de adenoma de hipófise corticotrófico. Há que se atentar para as anormalidades clínicas causadas pelo excesso de cortisol relacionados ao diagnóstico, contemplando a necessidade de um tratamento multidisciplinar.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Objetivos: Identificar fatores de risco para hiperglicemia durante o tratamento da Leucemia Linfocítica Aguda (LLA) em pediatria e avaliar sua associação com eventos de gravidade. Comparar a incidência de hiperglicemia entre os pacientes submetidos aos protocolos de tratamento GBTLI-2009 e BFM 95 e 2002. Métodos: Foi realizada coleta de dados de um banco anonimizado incluindo os 188 pacientes pediátricos tratados por LLA no Instituto de Oncologia Pediátrica da Universidade Federal de São Paulo (IOP/UNIFESP) no período de 2004 a 2017. Analisou-se o efeito do sexo, idade, etnia, história familiar de diabetes, puberdade, estado nutricional, linhagem celular da LLA, cromossomo Philadelphia e síndrome de Down na ocorrência de hiperglicemia através de modelos de regressão logística uni e multivariada. O efeito da hiperglicemia como fator preditor de infecção foi avaliado através de regressão logito ordenado. Foram ajustados modelos de riscos competitivos de Fine e Gray para avaliação da hiperglicemia como fator de risco de recidiva tumoral e modelos de regressão de Cox uni e multivariado para análise da sobrevida. Resultados: A incidência de hiperglicemia foi 43,6%. Os pacientes em puberdade apresentam chance 7,9 vezes maior de desenvolver hiperglicemia do que os pacientes impúberes (p=0,017). Para os indivíduos impúberes, o aumento de um ano na idade acarretou a redução de 14% na chance de ocorrência de hiperglicemia (p=0,039). A chance de hiperglicemia em pacientes com risco intermediário de recidiva foi 67% menor do que em pacientes com alto risco (p=0,020). No entanto, não se verificou diferença entre pacientes com risco baixo e alto de recidiva. No modelo de regressão logito ordenado, a hiperglicemia não representou fator de risco para a ocorrência de infecções durante o tratamento da LLA (p=0,840). Nos modelos de riscos competitivos de Fine e Gray, a hiperglicemia não se comportou como fator de risco para recidiva da LLA. Da mesma forma, nos modelos de regressão de Cox univariado e multivariado a hiperglicemia não se associou à ocorrência ou risco aumentado de óbito. Conclusões: Foram identificados como fator de risco para hiperglicemia durante o tratamento da LLA: idade (indivíduos impúberes mais jovens), puberdade em evolução ou completa e alto risco para recidiva da doença. A hiperglicemia não representou fator de risco para a ocorrência de infecções, recidiva da LLA ou óbito. Não foi observada diferença na incidência de hiperglicemia entre os indivíduos submetidos aos protocolos GBTLI-2009 e BFM 95 e 2002. Objectives: To identify risk factors for the development of hyperglycemia during Acute Lymphocytic Leukemia (ALL) chemotherapy in pediatrics and to analyze its association with uneventful outcomes. To compare the incidence of hyperglycemia between patients treated according to different protocols, GBTLI-2009 and BFM 95 and 2002. Methods: Data were obtained from an anonymized database including a cohort of 188 pediatric patients diagnosed with ALL and treated at IOP/GRAACC/UNIFESP between 2004 and 2017. The effect of variables such as sex, age, ethnicity, family history of diabetes, puberty, nutritional status, ALL cell line, Philadelphia chromosome and Down syndrome on hyperglycemia development was analyzed by univariate and multivariate logistic regression models. The role of hyperglycemia as a risk factor for infection during ALL treatment was verified by ordinal logit regression. To analyze the effect of hyperglycemia on ALL incidence relapse and death, Fine and Gray competing risks models and univariate and multivariate Cox regression were adjusted, respectively. Results: The incidence of hyperglycemia was 43,6% in this cohort. Patients in puberty and post puberty were found to have 7,9-fold increased risk on developing hyperglycemia than pre-pubertal (p=0,017). Considering pre-pubertal patients, each subsequent year of age leaded to a 14% reduction on the chance to develop hyperglycemia (p=0,039). Patients with intermediate risk for ALL relapse had 67% less chance for hyperglycemia development than the ones with high risk of ALL relapse (p=0,020), although there were no differences between low-risk and high-risk individuals. Hyperglycemia was not found to be a risk factor for infection during ALL treatment on the ordinal logit regression model (p=0,840). Furthermore, it was not a significant risk factor for ALL relapse on Fine and Gray competing risks model, neither for death, on univariate and multivariate Cox regression. Conclusions: The identified risk factors for hyperglycemia during ALL chemotherapy were as follows: age (younger prepubertal individuals), puberty and intermediate risk for ALL relapse. Hyperglycemia did not lead to increased risk of infection, ALL relapse or death. There was no difference on hyperglycemia incidence between patients treated according GBTLI2009 or BFM 95 and 2002 protocols.

Introduction: sepsis is a systemic inflammatory disease associated with an infection with severe manifestations that occurs throughout the body. However, this infection does not necessarily have to be everywhere in the body, it can be restricted to just one place, but cause an inflammatory response throughout the body to try to control the cause of the infection. Objective: to demonstrate the current evidence on the use of corticosteroids in the treatment of sepsis in patients hospitalized in intensive care units (ICUs). Methodology: this is a descriptive research of the integrative literature review type. The descriptors were crossed, in English: "sepsis", "hemodynamic", "corticosteroids" in Portuguese: "sepsis", "hemodynamics", "corticosteroids" and in Spanish: "sepsis", "hemodynamic", "corticosteroids", in the following databases: National Library of Medicine (PubMed MEDLINE), Scientific Electronic Library Online (Scielo), Cochrane Database of Systematic Reviews (CDSR), Google Scholar, Virtual Health Library (BVS) and EBSCO Information Services. Results and discussion: treatment can be done with corticosteroids in order to attenuate and modify the inflammatory response, in addition to offering an affordable cost. However, some side effects and adequate forms of administration corroborate the fact that there are some controversies regarding the use of corticosteroids, such as hydrocortisone, for the treatment of patients with sepsis, even with satisfactory results. Final considerations: corticosteroids, especially hydrocortisone, can be used to treat patients with sepsis. According to the literature used, the results are satisfactory and costing is easy to adhere to. However, the use of these drugs, even with benefits, is still controversial, due to the side effects caused, the dosage and the form of administration. Thus, discussions on this subject exist. Introducción: la sepsis es una enfermedad inflamatoria sistémica asociada a una infección con manifestaciones graves que se presenta en todo el organismo. Sin embargo, esta infección no necesariamente tiene que estar en todas partes del cuerpo, puede estar restringida a un solo lugar, pero causar una respuesta inflamatoria en todo el cuerpo para tratar de controlar la causa de la infección. Objetivo: demostrar la evidencia actual sobre el uso de corticoides en el tratamiento de la sepsis en pacientes hospitalizados en unidades de cuidados intensivos (UCI). Metodología: se trata de una investigación descriptiva del tipo revisión integrativa de la literatura. Se cruzaron los descriptores, en inglés: "sepsis", "hemodynamic", "corticosteroids", en portugués: "sepsis", "hemodynamics", "corticosteroids" y en español: "sepsis", "hemodynamic", "corticosteroids", en las siguientes bases de datos: National Library of Medicine (PubMed MEDLINE), Scientific Electronic Library Online (Scielo), Cochrane Database of Systematic Reviews (CDSR), Google Scholar, Virtual Health Library (BVS) y EBSCO Information Services. Resultados y discusión: el tratamiento puede realizarse con corticoides para atenuar y modificar la respuesta inflamatoria, además de ofrecer un costo accesible. Sin embargo, algunos efectos secundarios y formas de administración adecuadas corroboran el hecho de que existen algunas controversias en cuanto al uso de corticoides, como la hidrocortisona, para el tratamiento de pacientes con sepsis, incluso con resultados satisfactorios. Consideraciones finales: los corticosteroides, especialmente la hidrocortisona, pueden usarse para tratar pacientes con sepsis. De acuerdo con la literatura utilizada, los resultados son satisfactorios y el costeo es fácil de cumplir. Sin embargo, el uso de estos fármacos, aun con beneficios, sigue siendo controvertido, debido a los efectos secundarios que provocan, la posología y la forma de administración. Por lo tanto, existen discusiones sobre este tema. Introdução: a sepse consiste em uma doença inflamatória sistêmica associada a uma infecção com manifestações graves que ocorre por todo o organismo. No entanto, essa infecção não precisa estar necessariamente em todos os locais do organismo, pode estar restrita em apenas um local, mas causar uma resposta inflamatória por todo o corpo para tentar controlar a causa da infecção. Objetivo: demonstrar as atuais evidências sobre o uso de corticosteroides no tratamento da sepse em paciente hospitalizados nas unidades de terapia intensiva (UTI’s). Metodologia: trata-se de uma pesquisa descritiva do tipo revisão integrativa da literatura. Foi realizado o cruzamento dos descritores, em inglês: "sepsis", "hemodynamic", "corticosteroids" em português: "sepse", "hemodinâmica", "corticosteroides" e em espanhol: "sepsis", "hemodinámico", "corticosteroides", nas seguintes bases de dados: National Library of Medicine (PubMed MEDLINE), Scientific Electronic Library Online (Scielo), Cochrane Database of Systematic Reviews (CDSR), Google Scholar, Biblioteca Virtual em Saúde (BVS) e EBSCO Information Services. Resultados e discussão: o tratamento pode ser feito com corticosteroides a fim de atenuar e modificar a resposta inflamatória, além de oferecerem um custo acessível. Porém, alguns efeitos colaterais e as formas adequadas de administração corroboram para que haja algumas controvérsias quanto ao uso dos corticoides, como a hidrocortisona, para tratamento de pacientes com sepse, mesmo com resultados satisfatórios. Considerações finais: os corticoides, em especial a hidrocortisona, podem ser utilizados para o tratamento dos pacientes com sepse. Conforme as literaturas utilizadas, os resultados são satisfatórios e possuem um custeio de fácil adesão. Contudo, o uso destes medicamentos, mesmo apresentando benefícios, ainda é controverso, devido aos efeitos colaterais causados, à posologia e à forma de administração. Desta forma, discussões acerca deste assunto existem.

Objective: To assess intermittent abdominal pain in IgA vasculitis patients and its relation to demographic data, clinical manifestations and treatments. Methods: A retrospective cohort study included 322 patients with IgA vasculitis (EULAR/PRINTO/PRES criteria) seen at the Pediatric Rheumatology Unit in the last 32 years. Sixteen patients were excluded due to incomplete data in medical charts. Intermittent abdominal pain was characterized by new abdominal pain after complete resolution in the first month of disease. Results: Intermittent abdominal pain was observed in 35/306 (11%) IgA vasculitis patients. The median time between first and second abdominal pain was 10 days (3–30 days). The main treatment of intermittent abdominal pain included glucocorticoid [n=26/35 (74%)] and/or ranitidine [n=22/35 (63%)]. Additional analysis showed that the frequency of intermittent purpura/petechiae (37 vs. 21%; p=0.027) and the median of purpura/petechiae duration [20 (3–90) vs. 14 (1–270) days; p=0.014] were significantly higher in IgA vasculitis patients with intermittent abdominal pain compared to those without. Gastrointestinal bleeding (49 vs. 13%; p

Orientador: Jose Roberto Bosqueiro Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: A resistência à insulina (RI) é uma condição que exige maiores níveis de insulina circulante e que normalmente são providenciados pelo aumento da função e população de células ß. A RI pode ser observada a partir de diversos modelos experimentais em roedores tais como os modelos transgênicos, de gravidez, submetidos às dietas hiperlipídicas e hipercalóricas e a partir de infusão venosa de glicose. Estes modelos têm sido úteis para a compreensão dos mecanismos compensatórios observados durante a RI. Os glicocorticóides são amplamente utilizados na indução farmacológica da RI em modelos animais e em seres humanos, com fins científicos. A ativação da sinalização da insulina e das proteínas reguladoras do ciclo celular é crucial para a função e crescimento das células ß adultas. No presente trabalho, apresentamos modelos para investigação da função e crescimento de células ß pancreáticas in vivo a partir da administração diária de três concentrações distintas de dexametasona (DEX) (0,1, 0,5 e 1,0 mg/kg, peso corpóreo, intraperitoneal - DEX 0.1, DEX 0.5 e DEX 1.0, respectivamente) por 5 dias consecutivos. A sensibilidade periférica à glicose e à insulina, parâmetros de secreção de insulina e histomorfométricos foram investigados. A análise dos níveis de proteínas relacionados à função e crescimento de células ß foi realizada por Western blotting. O tratamento com DEX induziu RI de maneira dose- dependente. Aumento da secreção de insulina em resposta à glicose foi observado tanto in vivo quanto ex vivo nos três grupos tratados com DEX. Ratos DEX 1.0, que apresentam hiperglicemia moderada e marcante hiperinsulinemia, exibiram aumento de 5,1 vezes na proliferação além de hipertrofia de células ß, com aumento significativo na massa de células ß comparado aos ratos CTL. Os ratos DEX 0.5, hiperinsulinêmicos, porém normoglicêmicos, também apresentaram aumento significante de 3,6 vezes na proliferação e modesta hipertrofia de células ß. Entretanto, os ratos DEX 0.1, que desenvolveram o menor grau de RI, compensaram à demanda de insulina apenas com aumento da função de células ß. Nenhuma alteração da freqüência de morte celular foi observada nas células ß dos três grupos DEX comparados ao grupo CTL. Foi observada ativação da via IRS-2/PI3- K/Akt/p70S6K, bem como da proteína retinoblastoma nas ilhotas do grupo DEX 1.0 e, em menor grau, no grupo DEX 0.5 quando comparados com as ilhotas do grupo CTL. Assim, aumentando a concentração de dexametasona induzem-se três graus de requerimento de insulina in vivo, servindo como modelo para investigação de alterações compensatórias em células ß. O aumento da demanda de insulina é compensado por aumento da função das células ß (em todos os GRUPOS DEX) e por hiperplasia e hipertrofia de células ß nos GRUPOS DEX 1.0 e DEX 0.5. Baseado nos presentes resultados concluímos que o aumento dos níveis circulantes de insulina parece ser o maior estímulo para proliferação e hipertrofia das células de células ß observado na RI induzida pela dexametasona. Abstract: Insulin resistance (IR) is a condition that demand increased levels of circulating insulin that are normally provided by increase of ß-cell function and mass. The IR can be observed in several experimental rodent models such as transgenic, pregnancy, high-fat or high-caloric diet and from glucose infusion model. These models have aided in elucidating the compensatory mechanisms observed during the IR. The glucocorticoids are widely used to induce the pharmacological IR in animal models and in humans, with scientific purpose. Activation of insulin signaling and cell cycle proteins are crucial to the function and growth of adult ß-cells. At the present study, we showed models to investigation of pancreatic ß-cell function and growth in vivo from the daily administration of three different dexamethasone (DEX) concentration (0.1, 0.5 e 1.0 mg/kg, body weight, intraperitoneal - DEX 0.1, DEX 0.5 and DEX 1.0, respectively) for 5 consecutive days. The peripheral sensibility to glucose and insulin, insulin secretion and histomorphometrical parameters were investigated. The analyses of proteins related to ß -cell function and growth were done by Western blotting. DEX treatment induced IR in a dose-dependent manner. Incease of glucose-stimulated insulin secretion was observed in vivo as well as ex vivo in the three DEX groups. DEX 1.0 rats, that present moderate hyperglicemya and marked hyperinsulinemia, ehibited a 5.1-fold increase in ß-cell proliferation besides hypertrophy, with significant increase of ß -cell mass compared to CTL rats. DEX 0.5 rats, that are hiperinsulinemic and normoglicemic, also exhibited a significant 3.6-fold increase in ß-cell proliferation as well as ß -cell hypertophy. However, DEX 0.1 rats, which exhibited the lowest degree of insulin resistance, compensate for insulin demand by improving only ß -cell function. No alteration in cell death frequency was noted in ß -cells from the three DEX groups compared to CTL group. Activation of IRS-2/PI3-K/Akt/p70S6K pathway as well as the retinoblastoma protein in islets from DEX 1.0 and, in lesser extend, in DEX 0.5 group was observed compared to islets from CTL group. Therefore, increasing doses of dexamethasone induce three different degrees of insulin requirement in living rats, serving as a model to investigate compensatory beta-cell alterations. The increased insulin demand is compensated by increase of ß-cell function (in all DEX groups) and ß -cell hyperplasia and hypertrophy in DEX 0.5 and DEX 1.0 groups. Based on the present results we concluded that the augmented levels of circulating insulin seem to be the major stimulus for ß-cell proliferation and hypertrophy observed in dexamethasone-induced insulin resistance. Doutorado Fisiologia Doutor em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Lea Rodrigues Simioni Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar as alterações induzidas pelo glicocorticóide prednisolona sobre os processos fisiológicos normais da junção neuromuscular de ratos e camundongos, através de técnica miográfica e eletrofisiológica in vitro e in vivo. Prednisolona, na concentração de 0,3 mM, antagonizou os efeitos bloqueadores produzidos pela d-Tubocurarina (1,45 ~M) tanto in vitro como in vivo. Nesta mesma concentração, produziu um aumento na força de contração muscular induzida pela ß -BuTx 1 µM em preparação nervo frênico-diafragma de camundongo e também alterou o padrão de resposta contrátil da guanidina. Além disso, Prednisolona causou efeitos pré sinnpticos como demonstrado pelo discreto aumento da freqqüncia dos potenciais de placa terminal em' miniatura (270 :t 4%) allm do aparecimento de potenciais gigantes. Contudo a prednisolona', nno determinou qualquer alteraaço sobre os valores do potencial de membrana. Assim, estes resultados confirmam os dados da literatura que apontam para uma induuço por parte do glicocorticcide prednisolona, de efeitos diretos sobre a transmissso neuromuscular, possivelmente aumentando a liberaaço de acetilcolina no terminal nervoso motor Abstract: The neuromuscular effects of glucocorticoids have been studied extensively since the clinical benefits of these hormones in the myasthenia gravis were reported by WARMOLTs et aI. in 1970. In this work we examined neuromuscular effects of the synthetic glucocorticoid prednisolone in isolated mammalian preparations in vitro and in vivo with supramaximal stimuli of the 0,1 Hz and 0,2 ms duration. Prednisolone (0.3 mM) antagonized the blockade produced by d¬ tubocurarine in vitro and in vivo. At this same concentration prednisolone increased in the muscle twitch tension responses to ß BuTx 1 µM in isolated phrenic nerve-diaphragm preparations but did not alter the contractile responses to 3,4-diaminopyridine; prednisolone also dimi~uished the neuromuscular effects induced by guanidine. In addition, prednisolone acted presynaptically to increase the amplitude and frequency of m.e.p.ps and generated a considerable number of giant m.e.p.ps without altering the resting membrane. These results suggest that a direct action of prednisolone on the neuromuscular transmission may increase the release of acetylcholine from the nerve terminal Mestrado Mestre em Farmacologia

Osteoporosis is a multifactorial skeletal disease that alters microarchitecture and reduces bone mass, causing loss of mechanical strength and increased risk of fracture. Among the forms of osteoporosis, glucocorticoid-induced (GIO) is the most frequent type of secondary osteoporosis. Knowing that the prevention and treatment of GIO will still remain a challenge, natural products and physical exercises have been the focus of study. In this context, Kefir, an oral probiotic, stands out for presenting benefits to the bone and minimizing the pharmacological effects of medications. Thus, this study aimed to evaluate the effect of physical exercise on osteoporosis and the effect of kefir associated with resistance exercise on bone tissue in the GIO. Initially, 2 systematic reviews were evaluated, with preclinical and clinical studies, to analyze the effects of exercise on bone tissue during osteoporosis. It was observed that exercise for enhanced bone mineral strength (BMD), bone and trabecular volume (BV/TV) and decreased trabecular separation (Tb.Sp), beneficial effects of exercise for bone tissue in animal models. 60% of clinical studies confirm a positive association between decreased bone resorption markers and exercise, suggesting reduced resorption in patients with osteoporosis. Finally, to analyze the effect of the association of exercise + kefir on bone tissue submitted to OIG, 60 male Wistar rats were divided into 2 groups: normal (N), and performing GIO, which was subdivided into 4 groups according to treatment: control (C), Kefir (K), Exercise (Ex) and Exercise+Kefir (ExK). GIO was induced by dexamethasone (7mg/kg; i.m.). Kefir was administered by gavage (0.7 ml/animal/day) for 16 weeks. The exercise was performed 3 days/week, with an intensity of 20% to 80% of the maximum individual load, for 16 weeks. After euthanasia, the femur was collected for macro and microscopic analyses, imaging examinations and biomechanical tests. In light of our knowledge, this is the first time that an in vivo evaluation of exercise + Kefir in bone tissue from rats with GIO has been performed. GIO reduced by 35% BV/TV, 33% trabecular thickness (Tb.Th), 26% mineral and collagen content (56%). There is also a reduction in flexion strength (81%), fracture load (80%) and number of osteocytes (84%) after GIO. Glucocorticoids altered bone remodeling (p < 0.05), marked by a reduction in the number of osteoblasts while an increased number of osteoclasts, and roughness of bone tissue. After the 16-week intervention, association of ExK improved microarchitecture evolution and bone quality, marked by an increase in fractal dimension (38%), cortical volume (34%), 13 BV/TV (34%), Tb.Th (33%), mineral content and collagen maturity, while reducing Tb.Sp (34%) and bone roughness. Thus, ExK improved bone strength and biomechanics, in addition to stimulating bone formation and modular bone remodeling. It is concluded that exercise had antiresorptive effects on bone tissue and that kefir potentiated the beneficial effects of exercise on bone tissue, improving microarchitecture, femur quality and biomechanical properties and stimulated bone formation. Thus, treatment with kefir and physical exercises are provided as adjuvant tools to improve the bone loss picture caused by GIO. A osteoporose é uma doença esquelética multifatorial que altera microarquitetura e reduz massa óssea, causando perda de força mecânica e aumento do risco de fratura. Dentre as formas de osteoporose, a induzida por glicocorticoides (OIG) é o tipo mais frequente de osteoporose secundária. Sabendo que a prevenção e tratamento da OIG ainda permanecerem como um desafio, produtos naturais e exercícios físicos têm sido foco de estudo. Neste contexto, Kefir, um probiótico oral, destaca-se por apresentar benefícios ao osso e minimizar os efeitos colaterais farmacológicos das medicações. Assim, este estudo objetivou avaliar o efeito do exercício físico na osteoporose e o efeito do Kefir associado ao exercício resistido no tecido ósseo na OIG. Inicialmente, foram realizadas 2 revisões sistemáticas, com estudos pré-clínicos e clínicos, para analisar os efeitos do exercício no tecido ósseo durante a osteoporose. Foi observado que exercício de força aumentou densidade mineral óssea (DMO), volume ósseo e trabecular (BV/TV) e diminuiu separação trabecular (Tb.Sp), indicando efeitos benéficos do exercício para tecido ósseo em modelos animais. 60% dos estudos clínicos confirmaram associação positiva entre diminuição dos marcadores de reabsorção óssea e exercício, sugerindo redução da reabsorção em pacientes com osteoporose. Finalmente, para analisar o efeito da associação de exercício+Kefir no tecido ósseo submetido a OIG, 60 ratos Wistar machos foram divididos em 2 grupos: normal (N), e submetidos a OIG, que foi subdividido em 4 grupos de acordo com o tratamento: controle (C), Kefir (K), Exercício (Ex) e Exercício+Kefir (ExK). A OIG foi induzida por dexametasona (7mg/kg; i.m.). Kefir foi administrado por gavagem (0,7 ml/animal/dia) por 16 semanas. O exercício foi realizado 3 dias/semana, com intensidade de 20% a 80% da carga individual máxima, durante 16 semanas. Após eutanásia, o fêmur foi coletado para análises macro e microscópicas, exames de imagens e testes biomecânicos. À luz dos nossos conhecimentos, esta é a primeira vez que uma avaliação in vivo de exercício+Kefir em tecido ósseo de ratos com OIG foi realizada. OIG reduziu em 35% BV/TV, 33% espessura trabecular (Tb.Th), 26% conteúdo mineral e colágeno (56%). Houve ainda redução da resistência à flexão (81%), carga de fratura (80%) e número de osteócitos (84%) após OIG. Os glicocorticoides alteraram a remodelação óssea (p

Orientador: Vilma Regina Martins Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: Os hormônios glicocorticóides, com conhecida ação antiinflamatória e antitumoral, agem apenas em células com receptores citoplasmáticos específicos ( GR ), portanto se toma extremamente importante conhecer os mecanismos envolvidos na regulação da expressão destes receptores para avaliar a resposta ao hormônio. Trabalhos preliminares realizados pelo nosso grupo em células transformadas pelo oncogene EJ-ras apontam para uma regulação negativa de GR a nível transcricional de GR decorrente desta transformação. Entretanto, a oncoproteína não pode regular diretamente a transcrição gênica já que está ancorada à membrana celular. O promotor do gene de GR possui um elemento similar a AP-I e isto, aliado ao fato de que Ras participa diretamente do processo de fosforilação de c-Jun, sugere que o produto deste proto-oncogene pode ser um dos alvos nucleares de Ras para a regulação do promotor do gene de GR. O presente trabalho teve como objetivo determinar o papel de c-Jun na regulação do promotor do gene de GR e analisar a capacidade de ligação da proteína c-Jun ao elemento AP-l presente neste promotor. Para tanto foram gerados clones de células NIH3 T3 transfectadas com c-jun e estes foram analisados quant.o à expressão do RNA mensageiro ( RNAm ) de c-jun e GR, bem como as respectivas proteínas por eles codificadas. A análise dos dados da expressão de c-Jun e GR, a nível de RNAs mensageiros e de proteínas, mostram que nos clones onde há aumento do RNAm de c-jun há decréscimo do RNAm de GR, sugerindo que a presença de c-Jun possa atenuar a transcrição do gene de GR. Entretanto nem sempre se encontrou uma correlação inversamente proporcional entre o RNAm de c-jun e de GR. Os valores obtidos após a determinação da concentração das proteínas c-Jun e GR evidenciam um padrão de regulação gênica muito mais complexo. Novamente ficou constatado que não havia correspondência entre os valores dos RNAs mensageiros e proteínas c-Jun e GR. Foram realizados ainda ensaios de retardamento de mobilidade eletroforética, utilizando a seqüência AP-l do promotor do gene de GR e extratos nucleares dos clones NIH3 T3 c-jun. Estes experimentos comprovam uma regulação mais complexa, pois mostram que a proteína c-Jun contida nos extratos nucleares não é capaz de se ligar à seqüência similar à AP-l contida no promotor do gene de GR. Concluindo que. a regulação do gene de GR por c-Jun não é dada diretamente por sua interação com o elemento específico contido no promotor deste gene Abstract: Glucocorticoid receptors ( GR ) mediate the cellular response to glucocorticoid hormones which are known for their anti-inflammatory and anti-tumoral actions. The mechanisms involved on the regulation of GR gene expression are extremely important for the cellular response to the hormone and remain unknow. Using transient transfections, we have previously reported that cells transformed with the oncogene EJ-ras had an attenuation on the GR gene transcription. However, this effect could not be mediated through a direct action of the oncoprotein on the gene transcription, once Ras is anchored at the cellular membrane. An AP-l like site was found in GR gene promoter and the fact that Ras protein activates fosforilation of c-Jun suggests that it might be a Ras' nuclear target and oÍle of the transcription factors responsible for the regulation of GR gene expression. The aim of this work was to settle the role of c-Jun on GR expression and evaluate the c-Jun ability to bind the AP-l like site present on GR gene promoter. In this study we generated NIH3T3 cells dones stabled transfected with c-jun and analyzed their c-Jun and GR mRNA and protein contents. We observed that dones with higher c-jun mRNA levels have lower GR mRNA when compared with non transfected cells suggesting that c-Jun can attenuate the GR gene transcription. We did not find a direct correlation between mRNA and protein levels of both c-jun and GR. These data indicate that a more complex mechanism may be involved. Eletrophoretic mobility shift assays were performed to test the binding of c-Jun to the AP-l like site present on the GR gene promoter. The results showed that this association is much lower than the one observed by the consensus AP-l, suggesting that the GR gene expression regulation by c-Jun does not seem to be due to its interaction with the AP-l like site present on the GR gene promoter Mestrado Farmacologia Mestre em Ciências

Orientador: Maria Lucia Furlan Wada Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: Células Vero foram cultivadas sobre géis 3D de colágeno tipo I ou em lamínulas de vidro por 48h com 10% de soro fetal bovino (SFB). Após este tempo de cultivo as células passaram a ser mantidas em meio sem SFB, com 10 % de SFB, com 10 % de SFB mais dexametasona (DEX) e com 20 % de SFB. Amostras foram fixadas após 48h, 120h e 240h de cultivo. Os géis foram incluidos em paraplast e cortados com 7Jlm de espessura. As amostras foram coradas com hematoxilina-eosina (HE), cresil violeta (CV), azul de toluidina (A T) e xylidine ponceau (XP). Foi realizado também imunocitoquímcia para colágeno IV (CaL IV) e para fibronectina (FN). Com as células cultivadas sobre lamínulas foram obtidos os índices mitóticos e as curvas de crescimento da cultura. Células cultivadas em colágeno por 24h, foram analizadas em microscopia eletrônica de varredura (MEV). Um ensaio em microplacas para a adesão celular com 24h de cultivo também foi realizado. As células que foram cultivadas sobre lamínulas e coradas com CV, em todos os casos analisados, mostravam morfologia irregular e com alguns prolongamentos, exceto nas regiões confluentes onde encontramos apenas células com formas poliédricas. Encontramos também a formação de grumos celulares nas amostras tratadas com DEX. Material bem corado com XP foi evidenciado tanto com 120h quanto com 240h de cultivo. Os grumos celulares nas amostras tratadas com DEX foram os pontos onde encontramos coloração mais intensa. O A T mostrou nas primeiras 48h células com citoplasma, núcleo e nucléolo metacromáticos. Com 120h de cultivo foram detectadas células com núcleos ortocromáticos, nucléolo basófilos e citoplasma levemente metacromático em quase todas as amostras, exceto nas tratadas com DEX, onde encontramos citoplasma intensamente metacromático. Com 240h de cultura encontramos células com citoplasma, núcleo e nucléolos metacromáticos (S/SFB e 10% SFB) e células com núcleos ortocromáticos, nucléolos e citoplasma metacromáticos (10% SFB+DEX e com 20% SFB). A imunocitoquímica mostrou a presença de CaL IV nas amostras mantidas S/SFB, com 10% SFB e com 20% SFB, mas não nas células cultivadas com DEX. Encontramos a presença de FN em todos os casos, porém foi encontrado um arranjo mais homogêneo nas células que cresceram na presença de 10% SFB+DEX e 20% SFB. Dados citoquímicos e imunocitoquímicos mostraram que o DEX interfere no padrão de crescimento de células sobre lamínulas. A MEV mostrou um grande espalhamento celular e deposição de material fibrilar, cuja deposição é estimulada pela variação da concentração dos componentes do SFB. O ensaio com microplacas mostrou que a adesão das células ao substrato também é estimulada pelo SFB. A análise morfológica feita com HE mostrou nos géis nas primeiras 48h uma monocamada de células achatadas, embora em alguns pontos as mesmas mostravam-se com duas ou três camadas de células arredondadas. Ambos os casos mostraram-se bem evidenciados pelo XP e as células apresentavam também metacromasia quando corado com AT. Com 120h e 240h em meio S/SFB ou com 10% de SFB, coradas com HE, foram observadas células formando um estrato com várias camadas arredondadas além de vários pontos de infiltração para o interior do substrato. Estas células apresentavam núcleos e citoplasma metacromáticos, quando corados com A T. Também encontramos granulações metacromáticas ao redor das células no interior do gel. Nesses experimentos o XP mostrou células bem coradas tanto no citoplasma como no núcleo. O gel também foi levemente corado pelo XP. As granulações presentes na matriz colagênica junto as células infiltradas também foram coradas pelo XP. A análise imunocitoquímica mostrou deposição de FN mas não de COL IV. Concluimos que nessas condições experimentais, S/SFB ou com 10% de SFB, as células cultivadas nos géis de colágeno, organizam uma estrutura semelhante a um tecido conjuntivo frouxo. Por outro lado, a HE mostrou que as células que foram tratadas com DEX (um inibidor da síntese de colagenases) e com 20% de SFB (que contém

Orientador: Maricilda Palandi de Mello Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: O defeito enzimático mais comum na síntese de esteróide é a deficiência da 21-hidroxilase da esteroidogênese da adrenal. A inibição da formação do cortisol faz com que o ACTH produzido na pituitária, estimule o cortéx da adrenal à super produção de androgénos. Este estado hormonal afeta o desenvolvimento genético feminino indiretamente na diferenciação da genitália externa, em direção ao tipo masculino. Desde que o gene da enzima da 21-hidroxilase foi isolado (1984), deleção gênica, conversão gênica em larga escala, e microconversões foram determinadas como responsáveis pela doença. Neste trabalho, nós mostramos um estudo desse defeito genético em 23 famílias com um ou mais indivíduos afetados, tendo a forma clássica da Hiperplasia Congênita da Adrenal. O DNA de 30 pacientes foi analisado com três enzimas de restrição. As hibridizações com a sonda de cDNA da 21-hidroxilase e com o final 5' da sonda genômica de C4 revelaram deleção gênica em 9,5% (4/42) dos cromossomos afetados. A taxa de conversão gênica em larga escala foi de 19% (8/42), e uma padrão de hibridização normal foi observado em 62% (26/42) dos alelos afetados. A densitometria das autoradiografias foi usada para determinar a taxa relativa de intensidade do gene da 21-hidroxilase (CYP21B) pelo do pseudogene (CYP21A). As diferenças no fenótipo, a baixa frequência de deleção gênica, e a alta frequência de conversão gênica comparada com outros estudos em diferentes populações, indicou que a deficiência da 21-hídroxilase na população Brasileira pode envolver diferentes mutações moleculares Abstract: The most common enzymatic defect of steroid synthesis is deficiency of the adrenal steroid 21-hydroxylase. Inhibition of the formation of cortisol results in an increased pituitary release of ACTH which in tum drives the adrenal cortex to overproduce androgens. This hormonal setting affects the development of genetic females by misdirecting the differentation of external genitalia towards the male type. Since the isolation of the gene encoding 21-hydroxylase enzyme in 1984, gene deletions, large gene conversions, and microconversions have been reported to be responsible for the disease. ln this work, we report a study of thes genetic defect in 23 families with one or more affected off spring diagnosed as having the classical form of congenital adrenal hyperplasia. The DNA from 30 patients was analyzed with three restriction enzymes. Hybridization with a 21-hydroxylase cDNA probe and the 5' end of a C4 genomic probe disclosed gene deletion in 9,5% (4/42) of the disease-related chromosomes. The rate of large gene conversion was 19% (8/42), and no abnormality in the hybridization pattem was observed in 62% (26/42) of the disease alleles. Densitometry of the autoradiographs was used to determine the ratio of the copy-number of the 21-hydroxylase gene (CYP21B) to the copy-number of its pseudogene (CYP21A). Differences in phenotype. The low frequency of gene deletion, and the high frequency of gene conversion compared with other studies in different popuIations indicated that 21-hydroxylase deficiency in the Brazilian population may involve different molecular mutations Mestrado Genética Humana Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Wirla Maria da Silva Cunha Tamashiro Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: Foi demonstrado anteriormente que macrófagos peritoneais de ratos, elicitados pelo tioglicolato e estimulados "in vitro" com lipopolissacarídeo (LPS) de E. coli, liberavam no sobrenadante de cultura fator indutor (MNCF) e inibidor (NRIF) da migração de neutrófilos para o foco inflamatório (CUNHA & FERREIRA, 1986; TAVARES et alli, 1989, TAMASHIRO et alli, 1992). O MNCF foi recentemente caracterizado como uma proteína de 54 KDa, cuja atividade se faz através de um sítio ligante à D-galactose (DIAS-BARUFFI et alli, 1993). Ao contrário de outras citocinas, o MNCF induz migração de neutrófilos em ratos pré-tratados com glicocorticóides. Resultados preliminares apontam que o NRIF e o MNCF são na verdade o mesmo fator (TAVARES-MURTA et alli, 1993). No presente trabalho, procuramos investigar a produção de fatores similares ao MNCF /NRIF por macrófagos peritoneais de camundongos, estimulados ¿in vitro" com LPS, através de protocolo semelhante ao descrito por CUNHA & FERREIRA (1986). Os resultados aqui obtidos mostraram que macrófagos de camundongos, sob estímulo com LPS, liberam fatores capazes de induzir a migração de neutrófilos para cavidades peritoneais de camundongos e ratos. Esses fatores também foram ativos em animais tratados com dexametasona, à semelhança do que ocorre com o MNCF. Esses sobrenadantes foram capazes ainda de quando administrados endovenosamente, inibir a migração de neutrófilos induzida por estímulos inflamatórios, similarmente ao NRIF. A atividade indutora de migração de neutrófilos foi abolida desses sobrenadantes pela sua pré-incubação anticorpos anti-TNF. Esses resultados sugeriam que o TNFa detectado nos sobrenadantes de cultura de macrófagos era a com citocina responsável sobrenadante. A administração de TNFa recombinante murino (mrTNFa)reproduziu os resultados encontrados com os sobrenadantes de macrófagos, isto é, foi capaz de induzir, de modo dosedependente, a migração de neutrófilos para as cavidades peritoneais de camundongos pré-tratados com dexametasona. A migração de neutrófilos induzida pelo mrTNFa também foi bloqueada por anticorpo específico. Observou-se ainda que o pré-tratamento dos animais com anticorpo monoclonal anti-TNFa bloqueou a migração de neutrófilos induzida pela administração intraperitoneal de LPS. Esses resultados reforçam a hipótese de que entre as citocinas liberadas por macrófagos,residentes ou ativados,o TNFa é a que induz migração de neutrófilos em camundongos tratados com dexametasona Mestrado Imunologia Mestre em Ciências Biológicas

Background: COVID-19 has emerged as a pandemic that spread throughout the world in less than 6 months, leaving hundred thousand deaths behind. Surprisingly, old drug arsenal has now been applied as an option of treatment. Objective: The aim of this article was to accomplish a literature review concerning the antiparasitic chloroquine, ivermectin, nitazoxanide; as well as glucocorticoids as possible therapeutic agents to be applied in patients with COVID-19 in Brazilian hospitals. Methodology: clinical evidence of COVID-infected patients and literature consultation have been used for the construction of this article. On line searches and gray literature have also been consulted, whose database include PUBMED Central, BVS/BIREME, Web of Science, Science Direct, Higher Level Personnel Improvement Coordinator (CAPES), Periodic Door (Portal de Periódicos da CAPES, The Cochrane Library and PROSPERO). Results: chloroquine, ivermectin and nitazoxanide present antiviral characteristics to support their usage in phase 1 of COVID-19 symptoms. Glucocorticoids such as methylprednisolone and dexamethasone seem to be more efficient in patients with pulmonary symptoms such as those in phase 2B and 3. Conclusion: According to the articles raised in this review, antiparasitic agents are promising for patients with COVID-19 in the very beginning of the symptoms. Methylprednisolone and dexamethasone are best indicated for hospitalized patients with pulmonary commitment. Background: COVID-19 ha surgido como una pandemia que se extendió por todo el mundo en menos de 6 meses, dejando cientos de miles de muertos. Sorprendentemente, el antiguo arsenal de medicamentos se ha aplicado ahora como una opción de tratamiento. Objetivo: El objetivo de este artículo fue realizar una revisión de la literatura sobre los antiparasitarios cloroquina, ivermectina, nitazoxanida; así como glucocorticoides como posibles agentes terapéuticos para ser aplicados en pacientes con COVID-19 en hospitales brasileños. Methodología: La evidencia clínica de pacientes infectados por COVID y la consulta bibliográfica se han utilizado para la construcción de este artículo. También se han consultado búsquedas en línea y literatura gris, cuya base de datos incluye PUBMED Central, BVS / BIREME, Web of Science, Science Direct, Higher Level Personnel Improvement Coordinator (CAPES), Periodic Door (Portal de Periódicos da CAPES, The Cochrane Library y PRÓSPERO). Resultados: la cloroquina, la ivermectina y la nitazoxanida presentan características antivirales para respaldar su uso en la fase 1 de los síntomas de COVID-19. Los glucocorticoides como la metilprednisolona y la dexametasona parecen ser más eficaces en pacientes con síntomas pulmonares como los de las fases 2B y 3. Conclusión: Según los artículos planteados en esta revisión, los agentes antiparasitarios son prometedores para los pacientes con COVID-19 al comienzo de los síntomas. La metilprednisolona y la dexametasona están mejor indicadas para pacientes hospitalizados con compromiso pulmonar. Background: COVID-19 emergiu-se como uma pandemia que se espalhou por todo o mundo em menos de 6 meses, causando a morte de milhões. Surpreendentemente, medicamentos antigos estão sendo aplicados para o tratamento. Objetivo: O objetivo desse artigo foi realizar uma revisão de literatura abordando antiparasitários como a Cloroquina, Ivermectina e Nitazoxanida; assim como os glicocorticóides como um possível agente terapêutico para ser aplicado em pacientes com COVID-19 nos hospitais brasileiros. Metodologia: Foi utilizado para a construção desse artigo, evidências clínicas de pacientes infectados e tratados pela COVID-19, além de consulta a literatura. Pesquisas online e literature cinzenta foram também consultadas, database inclui PUBMED Central, BVS/BIREME, Web of Science, Science Direct, Higher Level Personnel Improvement Coordinator (CAPES), Periodic Door (Portal de Periódicos da CAPES, The Cochrane Library and PROSPERO). Resultados: Cloroquina, Ivermectina e Nitazoxanida apresentaram eficiência para ser usado na fase 1 dos sintomas da COVID-19. Glicocorticóides assim como o Metilprednisolona e a dexametasona pareceram ser mais eficientes em pacientes com sintomas pulmonares assim como nas fases 2B e 3. Conclusão: De acordo com os artigos utilizados nessa revisão, agentes antiparasitários são promissores para pacientes com COVID-19 no começo dos sintomas. Metilprednisolona e a Dexametasona são os mais indicados para pacientes hospitalizados com comprometimento pulmonar.

Orientador: Gabriel Forato Anhê Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: Os ritmos circadianos de ingestão alimentar se estabelecem com objetivo de manter a homeostasia de nutrientes no meio celular, frente a variações intrínsecas ao ciclo claro/escuro. Neste sentido, a gliconeogênese de roedores é suprimida no período noturno, no qual há ocorrência de um surto alimentar bifásico que compreende aproximadamente 90% de todo o aporte calórico diário. Estes eventos apresentam, entre si, uma relação causal, onde o próprio aumento dos nutrientes circulantes, principalmente a glicose, controla a gliconeogênese. O padrão inverso é observado na fase clara do ciclo claro/escuro. Recentes estudos têm demonstrado que, a ativação farmacológica de vias da Unfolded Protein Response (UPR), no sistema nervoso central, resulta em resistência à ação anorexigênica da insulina e, consequentemente, aumento da ingestão alimentar através de um mecanismo não completamente esclarecido. A UPR é uma resposta celular adaptativa que atenua a taxa de tradução de mRNAs, aumenta a proteólise e, deste modo, recupera o fenótipo celular. Esta reposta, quando ativada cronicamente, pode resultar em morte celular programada e resistência à insulina. No entanto, ainda não estava claro se a via do ATF6 da UPR tem, de fato, uma relação com o ritmo alimentar. Para responder a esse questionamento, realizamos análises da variação circadiana das proteínas envolvidas na via da UPR, imunoprecipitações com animais adrenalectomizados, e aplicação de dexametasona subcutânea. Os resultados demonstram que o ATF6 teve um aumento noturno atingindo o máximo de transição da fase clara para fase escura. A partir desse fato, foram realizados ensaios de imunuprecipitações em ratos adrenalectomizados para evidenciar as associações dos complexos CRTC2/ATF6 e CRTC2/CREB1. Contudo, nossos dados suportam a hipótese que os níveis fisiológicos de glicocorticóides podem reprimir a expressão CRH e estimular a ingestão de alimentos, através de uma via dependente de ATF6. Estes eventos, por consequência, poderão reduzir a atividade transcricional do CREB1, sobre o CRH, corroborando com os dados da literatura que apontam que os glicocorticóides endógenos dos roedores (principalmente a corticosterona) exercem um conhecido papel no controle da ingestão alimentar, decorrente principalmente da modulação da expressão do neurotransmissor anorexigênico CRH Abstract: The circadian cycles of food intake have an important role in the homeostasis of cellular environment, acting over intrinsic changes to the sleep/wake cycle. Therefore, mice gluconeogenesis is suppressed at night where a food outbreak, responsible by 90% of all daily caloric ingestion, occurs. These events are connected by a causal relation, where the current nutrient increasing, mostly glucose, controls gluconeogenesis. The oppose pattern is verified during the light stage of the sleep/wake cycle. Recent studies have indicated that pharmacological activation of Unfolded Protein Response (UPR) pathways, at central nervous system, implies in resistance to the anorectic insulin effect, and, consequently, increase of the food intake activity trough a not fully explained engine. UPR is an adaptive cellular response that reduces mRNA¿s transcriptional rate, increases proteolysis, and therefore, restores cellular phenotype. This response, when constantly enabled, may induce cellular death and insulin resistance. However, it was not clear yet if the UPR¿s ATF6 pathway has, indeed, a connection with the feed rhythm. To answer to this question, we did several analysis of the circadian variation of the proteins connected to the UPR¿s pathway, adrenalectomized animals immunopreciptations and subcutaneous dexamethasone applications. The results demonstrated that ATF6 has a nightly increase and has reached the maximum of transcription rate from the light to the dark cycle. From this point, it was made immunopreciptations tests in adrenalectomized mice to evidence the association between CRTC2/ATF6 and CRTC2/CREB1 complexes. However, our data support the hypothesis that the physiological levels of glucocorticoids may suppress CHR expression and stimulate food intake trough an ATF6 dependent pathway. Those events, therefore, may reduce CREB1¿s transcriptional activity, confirming other studies data that indicates that endogenous mice glucocorticoids (mainly corticosterone) play an well-known role in food intake control, mainly due from modulation of the expression of the anorectic neurotransmitter CRH Doutorado Farmacologia Doutora em Farmacologia FAPESP CNPQ

Orientador: Alba Regina Monteiro Souza Brito Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: A dor é definida como uma sensação complexa e indefinida envolvendo múltiplos fatores como estilo de vida, ambiente. Muitas vezes a dor é produto de um processo inflamatório. As inflamações são uma resposta do sistema imune a diferentes estímulos, microorganismos, danos teciduais, estímulos miogênicos ou até traumas cirúrgicos que liberam mediadores endógenos. Ao receber o estímulo, diferentes enzimas como fosfolipases e ciclooxigenases originam mediadores inflamatórios (prostaglandinas, citocinas, leucotrienos) dando continuidade à cascata inflamatória muitas vezes de maneira exacerbada, que é caracterizada pelos cinco sinais cardinais da inflamação: calor, rubor, tumor, dor e perda de função. Para o tratamento das inflamações as drogas de primeira escolha são os antiinflamatórios não esteroidais (DAINES), que atuam na inibição da ciclooxigenase (COX-2), contudo, o uso das DAINES pode provocar o advento de úlceras pépticas, ou até mesmo falência renal e problemas cardíacos no caso dos inibidores seletivos da COX. Em inflamações crônicas utilizam-se os Glicocorticóides (GC), que são potentes antiinflamatórios, mas provocam efeitos colaterais sistêmicos como hipoglicemia, ação no sistema nervoso central e uma deficiência no sistema imune. A utilização de princípios ativos vegetais é uma alternativa para o controle das inflamações, entre elas destacam-se plantas da família Agavaceae, principalmente do gênero Agave, com destaque para Agave sisalana rica em saponinas esteroidais. As saponinas são uma classe de metabólitos secundários que apresentam diferentes funções terapêuticas, de grande interesse comercial e farmacológico. Esses compostos apresentam um núcleo esteroidal envolto por cadeias de açúcares denominado aglicona ou sapogenina. A partir das folhas da Agave sisalana obteve-se a fração hexânica de Agave sisalana (FHAS), que teve seu potencial terapêutico avaliado em diferentes testes de inflamação, algesia e toxicidade. A FHAS apresentou uma redução significativa (p

Orientador: Patrícia Aline Boer, José Antonio Rocha Gontijo Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: Em países desenvolvidos e em desenvolvimento a desnutrição materno-infantil tem repercussões evidentes sobre a saúde de populações. Isto se deve a alterações no desenvolvimento ontogênico, vinculada à manifestação programada de alterações no desenvolvimento morfológico e funcional de órgãos e sistemas. A programação fetal por desnutrição ou restrição protéica, leva à exposição fetal aumentada aos glicocorticóides maternos e altera a função pós-natal do eixo hipocampo-hipotálamo-pituitária-adrenal podendo ocasionar, no adulto, exposição aumentada cronicamente a glicocorticóides (GC) ou exacerbação na resposta ao estresse. O núcleo da estria terminal (BNST) está localizado em uma posição chave para regular a resposta ao estresse e tem sido implicado no comportamento de ansiedade. Evidências sugerem que esta região cerebral é altamente plástica em termos da morfologia e química neuronal frente a estímulos deletérios...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digitaL Abstract: In developed and developing countries maternal and child malnutrition has obvious repercussions on the population health f. This is due to changes in ontogenetic development, linked to the manifestation of programmed changes in morphological and functional development of organs and systems. The fetal programming by malnutrition or protein deficiency leads to increased fetal exposure to maternal glucocorticoids and alters the function of postnatal hippocampal-hypothalamic-pituitary-adrenal axis that may result in chronically increased exposure to glucocorticoids (GC) or exacerbated stress response in adults. The BNST is located in a key position to regulate stress response and has been implicated in anxiety behavior. Evidence suggests that this brain region is highly plastic and responsive to deleterious stimuli in terms of neuronal morphology...Note: The complete abstract is available with the full electronic document Mestrado Fisiopatologia Médica Mestre em Fisiopatologia Médica

Orientadoesr: Patrícia Aline Boer, José Antônio Rocha Contijo Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: Estudos têm demonstrado que a deficiência de nutrientes durante a gravidez ou nos primeiros anos de vida pós-natal resultam em anormalidades estruturais no hipocampo da prole, bem como comprometimento cognitivo em animais com 16 semanas de vida. Na tentativa de analisar se a restrição protéica gestacional pode induzir a déficits de aprendizagem e perda de memória associada a alterações estruturais no hipocampo, realizou-se teste de water maze (MWM) e uma análise detalhada morfométrica da citoarquitetura dendrítica do hipocampo de ratos machos adultos. Além disso, analisamos no hipocampo dorsal e ventral a expressão e localização de receptores de mineralocorticóides (MR) e glicocorticóides (GR), angiotensina II receptor tipo 1 (AT1) e receptores específicos de serotonina (5HT1A e 5HT2A). No MWM não foram encontradas diferenças significativas entre os grupos LP e NP, em qualquer um dos parâmetros analisados no teste de memória espacial, sugerindo que tais funções de hipocampo não foram alteradas com a restrição proteica gestacional. No entanto, através da aplicação da técnica de Gogi-Cox realizamos a reconstrução dendrítica nos neurônios do hipocampo dorsal. Nossos resultados demonstram que a restrição proteica gestacional leva a uma diminuição do comprimento dos dendritos basais e no número de intersecções dos dendritos apicais de CA3. A citoarquitetura de CA1 e do giro denteado não foi alterada. O presente estudo revelou uma clara dissociação entre a resposta do teste comportamental e alterações de neurônios do hipocampo, como conseqüência da programação fetal. Encontramos diferentes padrões de expressão dos receptores analisados no hipocampo dorsal e ventral o que sugere que redução na expressão de GR e 5HT1A paralelamente a maior expressão de 5HT2A estão envolvidos no comportamento ansioso e que a significativa diminuição na expressão de AT1 pode ter um efeito protetor. Essas alterações neuroquímicas podem ter consequências importantes para comportamento de ansiedade e depressão. Nosso estudo não é capaz de responder se as alterações encontradas estão relacionadas com subdesenvolvimento no útero ou resulta de uma adaptação pós-natal para a fisiologia programada na vida adulta. Outros estudos devem ser feitos para responder essas questões Abstract: Studies have demonstrated that maternal nutritional restriction during pregnancy or in early postnatal life results in hippocampus cognitive impairment and structural abnormalities in the 16-wk-old offspring. In an attempt to analyze whether gestational protein restriction might induce learning and memory impairment associated with structural changes in the hippocampus we carried out MWM test and a detailed morphometric analysis of dendritic cytoarchitecture of the hippocampus from male adult rats. In addition, we analyzed the dorsal and ventral hippocampal expression and localization of mineralo- (MR) and glucocorticoid (GR), type 1 angiotensina II receptor (AT1) and serotonin specific receptors (5HT1A and 5HT2A). By MWM we did not found significant differences between LP and NP groups, in any of the parameters analyzed, suggesting that such functions of hippocampus were not altered by gestational protein restriction. However, by applying 3-dimensional analysis of dendrites from the dorsal hippocampus, this study demonstrates that gestational protein restriction leads to decreases in total basal dendritic length and inapical intersections of CA3 pyramidal neurons. The dendritic architecture of CA1 and dentate gyros was unchanged. The current study revealed a clear dissociation between behavioral test response and hippocampal neuron changes as consequence of fetal programming. We found different patterns of dorsal and ventral expression of analyzed receptors and we suggests that reduced GR and 5HT1A and enhanced 5HT2A expression are involved in anxious behavior and that AT1 down regulation may has a protective effect. These neurochemical alterations may have important consequences for anxiety- and depressive-like behavior. Our study is not able to answer the question whether these alterations are related to in uteri underdevelopment or results from a postnatal adaptation to programmed physiology in adult life. Further time-course studies should be done to answer this question Mestrado Clínica Médica Mestre em Clínica Médica

Os corticoesteroides sao uma classe de hormonios esteroides produzidos no cortex da suprarrenal e estao relacionados com diversas funcoes orgânicas, como a resposta ao stress, resposta imunitaria, regulacao da inflamacao, metabolismo dos carboidratos, catabolismo das proteinas, regulacao hidroeletrolitica e comportamento. Estes hormonios podem ser sintetizados em laboratorios dando origem a uma classe de medicamentos muito utilizados atualmente em certos tipos de doencas ou ainda como tratamento profilatico no caso de transplantes. Apesar da sua importância, o tratamento com esse tipo de medicamento, deve ser acompanhado pelo medico com parcimonia, pois podem causar varios efeitos colaterais que comprometem a qualidade de vida do paciente. Dessa forma, o presente estudo buscou identificar e discorrer sobre as principais manifestacoes adversas no organismo que resultam do uso dessa classe de medicamentos. Para esse fim, foi feita uma revisao de literatura, a partir da busca nas bases de dados do “Pubmed” e do “UptoDate”. Com isso, identificamos um amplo espectro de manifestacoes metabolicas e neuropsiquiatricas que dependem da dose e da duracao do tratamento com glicocorticoides e selecionamos as que sao dignas de maior detalhamento. Conclui-se que antes de se iniciar a administracao de glicocorticoides, e necessaria uma avaliacao detalhada do individuo, levando em consideracao os possiveis riscos e os beneficios ao paciente como um todo.

Submitted by Ananda Finco Raposo Franco (ananda.finco@unesp.br) on 2021-02-26T13:37:25Z No. of bitstreams: 1 Franco - Dissertação Final - 24-02-21 (1).pdf: 1126633 bytes, checksum: 0c61dca1163b1db21bdb51926d329f71 (MD5) Approved for entry into archive by ROSANGELA APARECIDA LOBO null (rosangelalobo@btu.unesp.br) on 2021-02-26T17:32:15Z (GMT) No. of bitstreams: 1 franco_afr_me_bot.pdf: 1210191 bytes, checksum: 8babbf1f280241b4a4eca6aebac6d638 (MD5) Made available in DSpace on 2021-02-26T17:32:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 franco_afr_me_bot.pdf: 1210191 bytes, checksum: 8babbf1f280241b4a4eca6aebac6d638 (MD5) Previous issue date: 2020-12-23 Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia da associação entre cefoperazona e prednisolona no tratamento de casos naturais de mastite clínica (MC) em bovinos leiteiros durante a lactação. Animais de 14 rebanhos comerciais foram distribuídos aleatoriamente em dois grupos experimentais, denominados como: 1) grupo PCEF: receberam tratamento intramamário contendo 250 mg de cefoperazona e 4 mg de prednisolona a cada 48h, totalizando 2 aplicações (N=147) e 2) grupo CEF: tratados somente com cefoperazona, conforme tratamento do grupo PCEF (N=141). Foram coletadas amostras de leite para cada quarto mamário incluído no estudo no dia da detecção do caso (D0), e 14 (D14) e 21 (D21) dias após D0, para realização de diagnóstico microbiológico e contagem de células somáticas (CCS). Os desfechos estudados foram cura microbiológica, cura clínica, recorrência de MC, risco de novas IMI em D14 e D21, CCS em D14 e D21 e produção de leite e CCS no 1o, 2o e 3o exames mensais após MC. Um total de 288 casos de MC foram randomizados em PCEF (n = 147) ou CEF (n = 141). A cura clínica (PCEF = 81,63% e CEF = 82,27%) e o tempo mediano (1o - 3o quartil) até a cura clínica [PCEF = 3,0 (2,5-4,0 dias) e CEF = 3,50 (3,0-4,0) dias] não foram diferentes entre os tratamentos. O risco de cura clínica foi 1,86 (IC 95%: 1,38-2,51) vezes maior para os casos leves, em relação aos moderados. A cura microbiológica (PCEF = 68,87% e CEF = 54,21%) não diferiu entre os tratamentos. Os casos associados a patógenos Gram-negativos foram 5,40 (IC 95%: 1,84-15,91) vezes mais propensos a serem curados do que aqueles associados a patógenos Gram-positivos. A recorrência de MC (PCEF = 26,67% e CEF = 21,93%) e o tempo mediano até a recorrência (PCEF = 63,5 e CEF = 65 dias) não diferiram entre os tratamentos. Para os casos com cultura negativa em D0, a incidência de nova IMI em D14 (PCEF = 18,75% e CEF = 34,78%) e D21 (PCEF = 28,13% e CEF = 39,13%) não foi diferente entre os tratamentos. A CCS foi numericamente maior em CEF do que em PCEF em D14 e D21, embora as diferenças não tenham sido estatisticamente xi significantes. Da mesma forma, não foram encontradas diferenças significantes entre a CCS ou a produção de leite no 1o, 2o e 3o teste mensal após o caso de MC. Os resultados deste estudo indicam que o tratamento intramamário de casos naturais de MC com PCEF não foi superior ao tratamento com CEF, com base no risco de cura clínica e microbiológica, recorrência de MC, risco de nova IMI, produção de leite e CCS. The objective of this study was to evaluate the efficacy of a combination of cefoperazone and prednisolone for treatment of natural cases of clinical mastitis (CM) in dairy cattle. Cows from 14 commercial herds were randomly assigned to two experimental groups, as follows: 1) PCEF: received intramammary treatment (IMM) containing 250 mg of cefoperazone and 4 mg of prednisolone every 48 hours, totaling 2 applications (N = 143) and 2) CEF: treated only with cefoperazone, as previously described (N = 130). Milk samples were collected for each mammary quarter included in the study on the day of detection of the case (D0), and 14 (D14) and 21 (D21) days after D0, to perform microbiological diagnosis and somatic cell count (SCC). The outcomes were microbiological cure, clinical cure, recurrence of CM, risk of new IMI at D14 and D21, SCC at D14 and D21, and cow-level milk production and SCC at the 1st, 2nd, and 3rd monthly tests after CM. A total of 288 CM cases were randomized into PCEF (n = 147) or CEF (n = 141). Clinical cure (PCEF = 81.63% and CEF = 82.27%) and the median (1st - 3rd quartile) time to clinical cure [PCEF = 3.0 (2.5-4.0 days) and CEF = 3.50 (3.0-4.0) days] were not different between the treatments. The risk of clinical cure was 1.86 (95% CI: 1.38-2.51) times higher for mild cases, as compared with moderate cases. Microbiological cure (PCEF = 68.87% and CEF = 54.21%) was not different between the treatments. Cases associated with Gram-negative pathogens were 5.40 (95% CI: 1.84-15.91) times more likely to cure than those associated with Gram-positive pathogens. Recurrence of CM (PCEF = 26.67% and CEF = 21.93%) and the median time to recurrence (PCEF = 63.5 and CEF = 65 days) were not different between the treatments. For culture-negative quarters at D0, the incidence of new IMI at D14 (PCEF = 18.75% and CEF = 34.78%) and D21 (PCEF = 28.13% and CEF = 39.13%) were not different between the treatments. Quarter milk SCC was numerically higher in CEF than in PCEF at D14 and D21, although the differences were not statistically xiii significant. Likewise, no significant differences were found between cow-level SCC or milk production at the 1st, 2nd, and 3rd monthly DHI test after CM. The results of this study indicate that intramammary treatment of natural CM cases with PCEF was not superior to treatment with CEF, based on the risk of clinical and microbiological cure, CM recurrence, risk of new IMI, milk production, and SCC. CNPq: 0081/2018

Orientador: José Andrés Yunes Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: A Leucemia Linfoide Aguda (LLA) é o tipo de câncer mais comum na infância, representando cerca de 30% de todos os casos de cânceres e 80% de todas as leucemias que ocorrem até a faixa etária de 15 anos. Apesar da melhora da terapia para LLA, essa doença ainda é a causa mais comum de morte relacionada a câncer em crianças em todo o mundo. Na última década, alguns trabalhos demostraram que a maior expressão de IGFBP7 estaria relacionada a um pior prognóstico dos pacientes com LLA. Mostramos anteriormente que as células de LLA são a principal fonte de IGFBP7 no microambiente da leucemia, a qual exerce um efeito parácrino sobre as células estromais da medula óssea, refletindo na resistência a terapia primária pelos pacientes. Aqui, demostramos que IGFBP7 exerce também um efeito autócrino sobre as células de LLA (linhas celulares e células primárias). Observamos que os efeitos positivos de proliferação mediados por Insulina/IGFs nas linhagens celulares de LLA são significativamente aumentados pela adição de IGFBP7 recombinante, promovendo a maior ativação da via PI3k/Akt/mTOR. Todavia, o silenciamento de IGFBP7 prejudica este efeito, impulsionando a ativação da via p53 nas células silenciadas. Ainda, ilustramos que o knockdown de IGFBP7 sensibiliza as células de LLA diante das ações citostáticas mediadas pelo fármaco Dexametasona e confirmamos que IGFBP7 promove resistência quimioterápica aos glicocorticoides na LLA. Nossos dados demostram ainda que a neutralização de IGFBP7 com anticorpo monoclonal é prejudicial para a viabilidade in vitro e in vivo da leucemia. Por fim, relatamos também que a associação do anticorpo anti-IGFBP7 com Dexametasona reduz drasticamente a viabilidade celular da LLA, confirmando a importância da IGFBP7 na progressão desta neoplasia Abstract: Acute Lymphoblastic Leukemia (ALL) is the most common pediatric cancer, corresponding to about 30% of all cases of cancer and 80% of all leukemia in patients of less than 15 years old. Despite the improvement on the therapy of ALL, this disease is still the most common cause of cancer-related death in young people around the world. In the last decade, some studies have shown that high expression of IGFBP7 would be related to a worse prognosis in ALL patients. We have previously shown that ALL cells are the main source of IGFBP7 in the leukemia microenvironment, where it exerts a paracrine effect on bone marrow stromal cells, reflecting resistance to primary therapy by patients. Here we show that IGFBP7 exerts also an autocrine effect on ALL cells (cell lines and primary cells). We observed that the positive effects of INS/IGF on ALL cell lines viability were significantly enhanced by recombinant IGFBP7, promoting PI3k/Akt/mTOR pathway activation. However, IGFBP7 silencing impairs this effect, boosting the p53 pathway activation in the silenced cells. Furthermore, we illustrate that IGFBP7 knockdown sensitizes ALL cells to cytostatic actions mediated by Dexamethasone and confirmed that IGFBP7 promotes chemo-therapeutic resistance to glucocorticoids in ALL. Our data further demonstrates that IGFBP7 neutralization with monoclonal antibody is detrimental to the in vitro and in vivo leukemia viability. Finally, we have shown that association of anti-IGFBP7 antibody plus Dexamethasone dramatically reduces the ALL cellular viability, revealing the importance of IGFBP7 in leukemia progression Mestrado Genética Animal e Evolução Mestre em Genética e Biologia Molecular FAPESP 2017/03239-5 CAPES

Objective: To review the impacts of child stress on the neuroendocrine maturation of the stress response system and the relationships between stress indicators and psychopathologies. Methods: This is a narrative review of literature carried out through a bibliographic survey in books and in the Medline-Pubmed database. The research was carried out without limit of dates using the following keywords: maternal deprivation, psychopathology, maternal care and HPA-axis. Bibliographic Review: With this research, 292 works were found, of these the works were selected to compose this review, classified as works related to the themes: maternal deprivation, attachment and predisposition to psychopathologies. Results: The pioneering laboratory studies on the effects of maternal care date back to the 50s, after that period, many studies were carried out to describe the molecular, neurobiological and behavioral bases of attachment. These studies demonstrate the involvement of cytokines and the HPA-axis in the modulation of attachment. The research carried out shows that the interference in the attachment system between mother and puppies leads to unfavorable changes for the CNS maturation. Conclusion: It is concluded that the maturation of the stress response system is strongly modulated by the quality of the neonatal experience, with close relationships between early stress and predisposition to psychopathologies in adulthood being described. Objetivo: Revisar los impactos del estrés infantil en la maduración neuroendocrina del sistema de respuesta al estrés y las relaciones entre los indicadores de estrés y las psicopatologías. Métodos: Se trata de una revisión narrativa de la literatura realizada a través de un relevamiento bibliográfico en libros y en la base de datos Medline-Pubmed. La investigación se realizó sin límite de fechas utilizando las siguientes palabras clave: privación materna, psicopatología, atención materna y eje HPA. Revisión Bibliográfica: Con esta investigación se encontraron 292 artículos, de los cuales se seleccionaron los artículos para componer esta revisión, clasificados como artículos relacionados con el tema - privación materna, apego y predisposición a psicopatologías. Resultados: Los estudios de laboratorio pioneros sobre los efectos del cuidado materno se remontan a los años 50, luego de ese período se realizaron numerosos estudios para describir las bases moleculares, neurobiológicas y conductuales del apego. Estos estudios demuestran la participación de las citocinas y el eje HPA en la modulación de la unión. La investigación realizada muestra que la interferencia en el sistema de apego entre madre y cachorros conduce a cambios desfavorables para la maduración del SNC. Conclusión: Se concluye que la maduración del sistema de respuesta al estrés está fuertemente modulada por la calidad de la experiencia neonatal, describiéndose estrechas relaciones entre el estrés precoz y la predisposición a psicopatologías en la edad adulta. Objetivo: Revisar os impactos do estresse infantil na maturação neuroendócrina do sistema de resposta ao estresse e as relações entre sinalizadores de estresse e psicopatologias. Métodos: Trata-se de uma revisão narrativa de literatura realizada através de um levantamento bibliográfico em livros e na base de dados Medline-Pubmed. A pesquisa foi realizada sem limite de datas empregando as seguintes palavras-chave: maternal deprivation, psychopatology, maternal care and HPA-axis. Revisão Bibliográfica: Foram encontrados 292 trabalhos, destes, foram selecionados os trabalhos para compor esta revisão, classificados como trabalhos relacionados aos temas: privação maternal, apego e predisposição para psicopatologias. Resultados: Os estudos laboratoriais pioneiros sobre os efeitos da privação dos cuidados maternos datam da década de 50, após esse período, muitos estudos foram realizados para descrever as bases moleculares, neurobiológicas e comportamentais do apego. Esses estudos demonstram o envolvimento das citocinas e do eixo-HPA na modulação do apego. A pesquisa realizada evidencia que a interferência no sistema de apego entre mãe e filhotes leva a alterações desfavoráveis para a maturação do SNC. Conclusão: Conclui-se que a maturação do sistema de resposta ao estresse é fortemente modulada pela qualidade da experiência neonatal, sendo descritas relações estreitas entre o estresse precoce e predisposição para psicopatologias na vida adulta.

Resumo Fundamento Os glicocorticóides (GCs) são amplamente prescritos para o tratamento de numerosos distúrbios clínicos devido às suas propriedades anti-inflamatórias e imunomoduladoras, e um dos efeitos indesejáveis mais comuns desses medicamentos é a dislipidemia. Objetivo Avaliar o efeito da quercetina, um flavonoide derivado de plantas, no perfil lipídico de ratos tratados com glicocorticóides em altas doses. Métodos Um total de 32 ratos Sprague-Dawley foram distribuídos aleatoriamente entre quatro grupos (8 ratos por grupo) e tratados por 6 semanas com uma das seguintes opções : (i) solução salina normal; (ii) 40 mg/kg de succinato sódico de metilprednisolona (MP); (iii) MP + 50 mg/kg de quercetina; (iv) MP + 150 mg/kg de quercetina. O MP foi injetado por via subcutânea e a quercetina foi administrada por gavagem oral 3 dias por semana. No final do estudo, o perfil lipídico dos animais foi medido através de kits enzimáticos. Os dados foram analisados e a significância estatística foi estabelecida em p

A função do eixo hipotálamo-hipófise-adrenal pode estar comprometida em pacientes com doenças críticas, em especialcasos de sepse, sendo nomeada de Insuficiência Corticosteroide Relacionada à Doença Crítica (ICRDC). O presentetrabalho analisou a função do eixo hipotálamo-hipófise-adrenal em cães normais (n=10) e cães portadores de doençascríticas (n=16), por meio de determinações de ACTH (hormônio adrenocorticotrófico) endógeno, de cortisol basal e decortisol após estímulo com baixa dose de ACTH sintético (1,0μg/kg/IV). Constatou-se que o teste de estimulação comACTH na dose testada se mostrou eficaz para avaliação da função adrenal em cães sadios e doentes. Os cães doentesdiferiram dos sadios ao apresentar valores maiores de cortisol basal. Oito cães doentes apresentaram diminuição do ACTHendógeno, do cortisol basal ou do Δ-cortisol. Não foram encontradas diferenças significativas entre os grupos Controlee Criticamente enfermos para os valores de ACTH endógeno, cortisol após estimulação ou Δ-cortisol. Concluiu-se queo teste de estimulação com baixa dose de ACTH mostrou-se eficaz para avaliação da função adrenal, assim como, umaparcela considerável da população de cães críticos aqui estudados, em especial com sepse, apresentaram evidências deresposta corticosteroide inadequada frente ao estresse. The hypothalamus-pituitary-adrenal axis function may be impaired in patients with critical illnesses, especially casesof sepsis, named critical illness-related corticosteroid insufficiency (CIRCI). This study examined the function ofthe hypothalamic-pituitary-adrenal axis in normal dogs (n = 10) and dogs with critical diseases (n = 16), throughdeterminations of endogenous ACTH (adrenocorticotropic hormone), basal cortisol and cortisol after stimulation inlow doses of synthetic ACTH (1.0μg/kg/IV). The stimulation test with ACTH dose tested was verified as effective forevaluation of adrenal function in healthy and sick dogs. Ill dogs differed from healthy dogs by presenting higher basalcortisol values. Eight sick dogs presented a decrease in endogenous ACTH, basal cortisol, or Δ-cortisol. No significantdifferences were found between the control groups and critically ill dogs for the values of endogenous ACTH, cortisolafter stimulation or Δ-cortisol. We concluded that the stimulation test with low-dose ACTH was effective for evaluationof adrenal function, as well as the fact that a considerable portion of critically ill dogs studied here, especially with sepsis,had evidence of inadequate corticosteroid response to stress.&nbsp