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Phytoalexins may be induced by biotic and abiotic agents known as elicitors. In this work, you can evaluate the potential of the essential oil of Cymbopogon citratus Stapf., From the fungus Trichoderma sp. and yeast for phytoalexin induction in sorghum (Sorghum bicolor (L.) Moench) and soybean cotyledons (Glycine max L.) mesocotyls. As yeast Sacharomyces cerevisiae, Sacharomyces boulardii and fungus Trichoderma sp. were tested on samples 0.5; 5; 25; 50; 75 and 100%. Cymbopogon citratus Stapf oil. at 625, 1250, 2500, 5000 and 7500 µg / mL configurations. The trade product accorda® was used as a positive control for soybean testing and Biozyme® for sorghum. Sterile distilled water was tested negative for testing on cultures as well as cultures. As two resistance induction methodologies in different sera are not as follows: in the first the mesocotyls were excised 0.5 cm above the listener node and application tubes, we applied 1 mL of the sample to be tested. The second time the seedlings are sprayed 2 mL of the samples are tested in different sizes. All evaluated substances promote or accumulate phytoalexins in soy and sorghum. Oil treatment was the most efficient, however, in the case of sorghum, as high oil temperatures caused inhibition of seedling growth. The second sorghum resistance induction methodology yields the best results of the first one due to the large number of phytoalexins and the possibility of observing the seedling reaction to each treatment., As fitoalexinas podem ser induzidas por agentes bióticos e abióticos conhecidos como eliciadores. Neste trabalho, objetivou-se avaliar o potencial do óleo essencial de Cymbopogon citratus Stapf., do fungo Trichoderma sp. e de leveduras na indução de fitoalexinas em mesocótilos de sorgo (Sorghum bicolor (L.) Moench) e cotilédones de soja (Glycine max L.). As leveduras Sacharomyces cerevisiae, Sacharomyces boulardii e o fungo Trichoderma sp. foram testados nas concentrações 0,5; 5; 25; 50; 75 e 100%. O óleo de Cymbopogon citratus Stapf. nas concentrações de 625, 1250, 2500, 5000 e 7500 µg/mL. O produto comercial acorda® foi utilizado como testemunha positiva para os testes em soja e o Biozyme® para sorgo. Água destilada esterilizada foi testemunha negativa para os testes em ambas as culturas. As duas metodologias de indução de resistência em sorgo diferiram-se no seguinte: na primeira os mesocótilos foram excisados 0,5 cm acima do nó escutelar e colocados em tubos, contendo 1 mL da amostra a ser testada. Na segunda as plântulas receberam aspersão de 2 mL das amostras a serem testadas em diferentes concentrações. Todas as substâncias avaliadas promoveram o acúmulo de fitoalexinas em soja e sorgo. O tratamento com o óleo foi o mais eficiente, porém, no caso do sorgo, as altas concentrações de óleo provocaram inibição no crescimento da plântula. A segunda metodologia de indução de resistência em sorgo gerou melhores resultados que a primeira devido ao grande acúmulo de fitoalexinas e à possibilidade de observação da reação da plântula a cada tratamento.

RESUMO O gênero Saccharomyces tem sido usado como indutor de resistência ou para controle biológico em muitos patossistemas. Neste trabalho objetivou-se a indução de fitoalexinas em mesocótilos de sorgo e cotilédones de soja pela levedura Saccharomyces boulardii na forma do produto comercial Floratil (Merck) (com 2 x 106 células/mg produto comercial - pc) e massa de células obtidas de meio líquido YEPG (primeiramente com 14 dias de cultivo e, posteriormente, com 7, 14, 21, 28 e 35 dias) ambos em concentrações de 0,005; 0,05; 0,5; 5; 15 e 25 mg/mL, além de filtrado desse meio nas concentrações de 0,01; 0,1; 1; 5; 10 e 20%. Como tratamentos controle utilizou-se água e S. cerevisiae (25 mg/mL de pc) para soja e água e acibenzolar-S-metil (ASM) (125 mg i.a./L) para sorgo. Em soja os três produtos apresentaram efeito dose-dependente, com ajustes de equações de 1° grau e R2 de 0,64; 0,94 e 0,98 não tendo efeito do tempo de cultivo da levedura na indução de fitoalexinas. Em sorgo apenas o filtrado e Floratil tiveram efeito dose-dependente com equação de 1° grau e R2 de 0,63 e 0,94 respectivamente e obteve-se nos diferentes dias de cultivo R2 de 0,62 com a massa de células somente. Portanto, pode-se evidenciar o potencial indutor de fitoalexinas dos produtos a base de S. boulardii para ensaios com indução de resistência em patossistemas envolvendo sorgo e soja. ABSTRACT Saccharomyces yeast compounds have been used as a resistance elicitor or for biological control in many pathosystems. Thus, the aim of this research was to verify the induction of phytoalexins in sorghum mesocotyls and soybean cotyledons by using Saccharomyces boulardii in the form of the commercial product Floratil (Merck) (with 2 x 106 cells/mg) and yeast-cell mass obtained from liquid culture in YEPG medium (with 7, 14, 21, 28 and 35 days old), both at concentrations of 0.005, 0.05, 0.5, 5, 15 and 25 mg/mL, as well as the filtrate of this medium in concentrations of 0.01, 0.1, 1, 5, 10 and 20%. The control treatments consisted of distilled water and S. cerevisiae (25 mg of commercial product per mL) for the soybean tests and distilled water and acibenzolar-S-methyl (125 mg of active ingredient per L) for the sorghum tests. In soybeans the three tested S. boulardii products presented a dose-dependent effect with R2 of 0.64, 0.94 and 0.98 for the culture filtrate, cell suspension and commercial product of S. boulardii, respectively, with no effect of culture time of yeasts on phytoalexin induction. In sorghum, only the culture filtrate and Floratil presented a dose-dependent effect, with R2 of 0.63 and 0.94, respectively, and the cell suspension of S. boulardii showed dependence of culture time with R2 of 0.62. Thus, S. boulardii and its derivates induce phytoalexins and have potential to be used as an elicitor for assays with induction resistance in pathosystems involving sorghum and soybean plants.

Orientadora: Prof.ª Dr.ª Kátia Regina Freitas Schwan-Estrada Coorientador: Prof. Dr. Carlos Moacir Bonato Dissertação (mestrado em agronomia) - Universidade Estadual de Maringá, 2018 RESUMO: A prata coloidal é usada nos mais variados ramos da indústria devido a seu conhecido poder antimicrobiano. Estudos têm sido feitos almejando sua utilização na agricultura tendo em vista seu amplo espectro e sua ação em baixas concentrações. Porém, para que seja usada na agricultura com segurança são necessários estudos também sobre seu efeito sobre as plantas e no ecossistema. O fungo Sclerotinia sclerotiorum, agente causal do mofo branco, causa grades prejuízos na cultura da soja. Não existem variedades com resistência completa a doença, além disso, o fato do fungo possuir vários hospedeiros e gerar estruturas de sobrevivência configura-o como sendo de difícil manejo. Tendo em vista essa dificuldade torna-se interessante a inserção de novas técnicas que possam auxiliar em seu manejo, dentre elas o uso de homeopatia e a indução de resistência. Deste modo o objetivo desse trabalho foi avaliar os possíveis efeitos deletérios da prata coloidal às plantas de soja e à sua nodulação bem como os efeitos in vitro da prata coloidal e preparados homeopáticos de prata coloidal no fungo S. sclerotiorum, na indução de gliceolina em cotilédones de soja e na indução de resistência a S. sclerotiorum em plantas de soja. No primeiro experimento testaram-se as concentrações 0, 14,64 mg L-1, 2,28 mg L-1, 43,92 mg L-1 e 58,57 mg L-1 de prata coloidal na irrigação de plantas de soja e avaliou-se biomassa fresca, comprimento da parte aérea e da raiz da planta, número e biomassa fresca dos nódulos e teor de clorofilas a, b e totais. Em nenhum dos parâmetros avaliados foi encontrado diferença significativa em relação à testemunha. Os demais ensaios foram divididos em dois experimentos, um com as doses ponderais (não homeopáticas) usando 0,58 mg L-1, 1,17 mg L-1, 1,75 mg L-1, 2,34 mg L-1 e 2,92 mg L-1 de prata coloidal e outro com as dinamizações 6, 12, 18, 24 e 30CH (Centesimal Hahnemanniana) do medicamento homeopático feito a partir da prata coloidal. O segundo trabalho avaliou o crescimento micelial de S. sclerotiorum e viabilidade de escleródios na presença dos tratamentos. Em todas as concentrações a prata coloidal atrasou o desenvolvimento do fungo e quanto às doses homeopáticas as dinamizações 12 e 18CH estimularam o crescimento do fungo. Nenhum dos tratamentos influenciou na germinação carpogênica dos escleródios. Na avaliação da gliceolina todas as concentrações da prata coloidal foram superiores a testemunha e a dinamização homeopática 18CH também foi superior à testemunha. Nos experimentos que avaliaram a indução de resistência a S. sclerotiorum as concentrações 1% e 3% da prata coloidal atrasaram o desenvolvimento da doença até o 4º dia após a inoculação, porém, nas demais avaliações, nenhuma das concentrações diferiu da testemunha. No experimento com os medicamentos homeopáticos a avaliação realizada no 4º dia após a inoculação apenas o 30CH não diferiu da testemunha e os demais tratamentos apresentaram menor comprimento da lesão. Nas avaliações posteriores todos os medicamentos homeopáticos foram melhores que a testemunha. A prata coloidal, tanto na forma ponderal quanto homeopática tem potencial para a utilização no manejo de S. sclerotiorum na cultura da soja ABESTRACT: Colloidal silver is used in the most varied branches of the industry due to its known antimicrobial power. Studies have been done aiming at its use in agriculture in view of its broad spectrum and its action in low concentrations. However, for that to be used safely in agriculture, studies are also needed on its effect on plants and the ecosystem. The fungus Sclerotinia sclerotiorum, causal agent of white mold, causes serious damages in the soybean crop. There are no varieties with complete resistance to disease, furthermore, the fact that the fungus has several hosts and generate resistance structures configures it as being difficult to control. In view of this difficulty, it is interesting to insert new techniques that may aid in its control, among them the use of homeopathy and the induction of resistance. The aim of this work was to evaluate the possible deleterious effects of colloidal silver on soybean plants and their nodulation as well as the effects of colloidal silver and colloidal silver homeopathic preparations on S. sclerotiorum in vitro, on induction of gliceolin in soybean cotyledons and induction of resistance to S. sclerotiorum in soybean plants. In the first experiment the concentrations 0, 14,64 mg L-1, 2,28 mg L-1, 43,92 mg L-1 and 58,57 mg L-1 of colloidal silver were tested in the irrigation of soybean plants and the fresh biomass, shoot and root length of the plant, number and biomass of nodules and the chlorophyll content a, b and total was evaluated. In none of the evaluated parameters a significant difference was found in relation to the control. The other trials were divided in two experiments one with the allopathic doses (non-homeopathic) using 0,58 mg L-1, 1,17 mg L-1, 1,75 mg L-1, 2,34 mg L-1 and 2,92 mg L-1 of colloidal silver and another with the dynamizations 6, 12, 18, 24 and 30CH of the homeopathic medicine made from colloidal silver. The second work evaluated the mycelial growth of S. sclerotiorum and the viability of its sclerotium mass in the presence of treatments. At all concentrations the colloidal silver delayed the development of the fungus and in the homeopathic doses the dynamizations 12 and 18CH stimulated the fungus growth. None of the treatments influenced sclerotium mass germination. In the evaluation of glycerol all concentrations of colloidal silver were superior to control and the homeopathic dynamization 18CH was also superior to the control. In the trials that evaluated the induction of resistance to S. sclerotiorum as concentrations 0,58 mg L-1 and 1,75 mg L-1 of the colloidal silver delayed the development of the disease until the 4th day after an inoculation, however in the other evaluations none of the concentrations differed from the control. In the experiment with the homeopathic medicines the evaluation performed on the 4th day after inoculation only the 30CH did not differ from the control and the other treatments had a shorter lesion length. In subsequent evaluations all homeopathic medicines were better than the control

The use of elicitors in plants for disease control is demonstrated by the accumulation of phytoalexins. Among these elicitors, metabolic products from fungi have been shown to be effective in the activation of mechanisms of induced resistance. Thus, this study aimed to evaluate the effects of filtrates from the saprobic fungi Curvularia inaequalis, Pseudobotrytis terrestris, Memnoniella echinata and Curvularia eragrostidis in inducing phaseolin, glyceolin and deoxyanthocyanidins. For this, fungal mycelial disks were liquid-subcultured in potato dextrose (BD) media and maintained in BOD at 25 °C and 12 h of light and darkness. After 20 days, the cultures were filtered and, the filtrates were used in the experiments. Phaseolin was measured in etiolated hypocotyls of bean. For glyceolin evaluation, cotyledons of soybean were used. The deoxyanthocyanidin accumulation was evaluated in etiolated mesocotyls of sorghum. The results were subjected to analysis of variance and compared by regression tests (p < 0.05). The filtrates of the saprobic fungi C. eragrostidis, C. inaequalis, P. terrestris and M. echinata promoted 9, 8, 9 and 7% greater increases in the concentration of phaseolin accumulations, respectively. The glyceolin accumulation varied with the concentration of C. eragrostidis, C. inaequalis and P. terrestris by adjusting the behavior to a cubic model. The deoxyanthocyanidin accumulation increased with concentration, while the filtrates of M. echinata and C. eragrostidis promoted 2 to 3 times more increases than the application of water. The filtrates of P. terrestris, C. eragrostidis, C. inaequalis and M. echinata induced accumulations of phytoalexins in soybean, beans and sorghum. RESUMO O uso de elicitores em plantas para o controle de doenças tem demonstrado ação no acúmulo de fitoalexinas. Dentre estes, produtos do metabolismo de fungos apresentam eficiência na ativação de mecanismos de resistência induzida das plantas. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de filtrados dos fungos sapróbios Curvularia inaequalis, Pseudobitritis terrestris, Memnomiella echinata e Curvularia eragrostidis na indução de faseolina, gliceolina e deoxiantocianidinas. Para isso, discos de micélio dos fungos foram repicados em meio líquido BD (batata e dextrose) e mantidos em B.O.D. a 25 ºC, 12h luz/escuro. Após 20 dias foi realizada filtragem e utilizado os filtrados nos experimentos. A faseolina foi determinada em hipocótilos estiolados de feijão. Para avaliação da gliceolina, foram utilizados cotilédones de plântulas de soja. O acúmulo de deoxiantocianidinas foi avaliado em mesocótilos estiolados de sorgo. Os Resultados foram submetidos à análise de variância e comparados pelo teste de regressão (p

A verificação da capacidade indutora de fitoalexinas a partir de extratos e tinturas de espécies vegetais pode representar uma forma potencial de controle de doenças em plantas cultivadas. O objetivo foi verificar a capacidade de indução de fitoalexinas em cotilédones de Soja e mesocótilos de Sorgo a partir de extratos brutos aquosos (EBAs) e tinturas de espécies medicinais. As espécies utilizadas foram as plantas medicinais Arruda (Ruta graveolens), Manjerona (Origanum majorana) e Carqueja (Baccharis trimera). Os resultados obtidos mostraram que os EBAs são eficientes na indução de fitoalexinas em cotilédones de Soja. Em mesocótilos de Sorgo os EBAs das plantas medicinais Carqueja e Manjerona induzem a produção de fitoalexinas em concentrações elevadas (15, 20, 25 e 50%). As tinturas são capazes de induzir a produção de fitoalexinas em cotilédones de Soja nas concentrações de 10 e 15%, porém, não são capazes de induzir acúmulo de fitoalexinas em mesocótilos de Sorgo. The verification of the capacity to induce phytoalexins from the biological activity of plant species may represent a potential way to control diseases in crops. This research studied the induction of phytoalexins in cotyledons of Soybean and Sorghum mesocotyles from crude aqueous extracts (CAEs) and tinctures of plants of medicinal and forest species. The species used were the medicinal plants Ruta graveolens, Baccharis trimera and Origanum majorana. The results showed that CAEs are efficient in the induction of phytoalexins in cotyledons of soybean. , while CAEs of medicinal plants Baccharis trimera and Origanum majorana induce phytoalexin production in high concentrations (15, 20, 25 and 50%). Tinctures are able of inducing the production of phytoalexin in concentrations of 10 and 15% in Soybean cotyledons; however, they are not able to induce the accumulation of phytoalexins in Sorghum mesocotyles.

Plantas medicinais apresentam potencial para o controle de fitopatógenos devido ao efeito direto sobre o agente patogênico ou indireto pela ativação de mecanismos de defesa como as fitoalexinas. Assim, o presente trabalho teve por objetivo verificar o efeito antifúngico e elicitor de frações obtidas da citronela (Cymbopogon nardus), a partir dos extratos brutos metanólico (EME) e etanólico (EET) dessa planta. Os extratos EME e EET foram fracionados em cromatógrafo de coluna de filtração em gel (CFG) obtendo-se três frações a partir do extrato metanólico (FMI, FMII e FMIII) e duas frações para o extrato etanólico (FEI e FEII). Os pesos moleculares para as frações FMI, FMII, FMIII, FEI e FEII foram 69,29; 40,51; 18,72; 65,89 e 24,11 kDa, respectivamente. As frações obtidas nas CFG foram utilizadas em bioensaios de germinação de esporos e formação de apressórios por Colletotrichum lagenarium e, de indução de fitoalexinas em mesocótilos de sorgo e cotilédones de soja. Observou-se que não houve efeito significativo das frações de EME e EET analisadas sobre a germinação e formação de apressórios pelo patógeno. Quanto ao acúmulo de fitoalexinas em cotilédones de soja, não houve efeito significativo das frações FMI, FMII, FMIII, FEI e FEII. Entretanto, observou-se efeito significativo das frações obtidas na CFG, sobre a produção de fitoalexinas em mesocótilos de sorgo, onde os maiores acúmulos destas fitoalexinas foram promovidas pelas frações FMI e FMIII, diferindo significativamente do tratamento controle. Com base nos resultados obtidos, é possível concluir que frações parcialmente purificadas obtidas de EME de C. nardus apresentam potencial para induzir o acúmulo de fitoalexinas em mesocótilos de sorgo.Medicinal plants present potential to control phytopathogens due to the direct effect or by the activation of defense mechanisms like phytoalexins. Then, the present work had the objective to verify the antifungal and elicitor effect of citronella (Cymbopogon nardus) obtained from methanolic and ethanolic extracts. It was studied the accumulation of phytoalexins in the mesocotyls of sorghum and in cotyledon of soybean, in response to application of fractions from crude extracts methanolic (EME) and ethanolic extracts (EET) of citronella. The EME and EET extracts were fractioned by gel filtration chromatography (CFG) and three fractions were obtained from the methanolic extract (FMI, FMII and FMIII), and two fractions from the ethanolic extract (FEI and FEII). The molecular weight for the FMI, FMII, FMIII, FEI and FEII were 69.29, 40.51, 18.72, 65.89 and 24.11 kDa, respectively. The fractions obtained from the CFG were used in a bioassay of germination of C. lagenarium spores and of induction of phytoalexins in the mesocotyls of sorghum and cotyledon of soybean. There was no significative effect of the fractions EME and EET on germination and appressorium formation by the pathogen. In the accumulation of phytoalexins in soybean cotyledons there was no significant effect of the fractions FMI, FMII, FMIII, FEI and FEII. However, it was detected a significative effect of fractions obtained by CFG on the production of phytoalexins in mesocotyls of sorghum. The highest accumulation of phytoalexin in mesocotyls of sorghum was obtained in the FMI and FMIII fractions, which differed significantly to the control. Based on the obtained results, it is possible to conclude that fractions partially purified obtained from EME of C. nardus present potential to induce phytoalexins in sorghum mesocotyls.

Compostos secundários presentes em plantas medicinais desempenham funções importantes em interações planta-patógeno, por ação antimicrobiana direta ou induzindo a síntese de mecanismos de defesa em outras plantas. Para verificar o efeito fungitóxico do eucalipto sobre o crescimento micelial de Rhizoctonia solani, Sclerotium rolfsii, Phytophthora sp, Alternaria alternata e Colletotrichum sublineolum, o extrato bruto (EB) foi incorporado ao BDA e o óleo essencial (OE) foi distribuído na superfície do meio com alça de Drigalski. A germinação de esporos de C. sublineolum também foi avaliada na presença de diferentes alíquotas de OE. Para verificar a indução de fitoalexinas, mesocótilos de sorgo foram aspergidos com EB a 20% ou então, mergulhados em suspensões do OE. Para a indução de gliceolina, 20 µL do EB foram colocados em cotilédones de soja. A presença de compostos fungitóxicos no OE e EB através da cromatografia de camada delgada também foi avaliada. Os resultados evidenciaram inibição do crescimento micelial dos fungos para concentrações do EB acima de 20%. Todas as alíquotas do óleo inibiram o crescimento micelial dos fungos testados, com exceção de R. solani cuja inibição ocorreu para alíquotas acima de 20µL. Houve inibição de 100% na germinação dos conídios para todas as alíquotas do OE testadas na primeira metodologia, porém, na segunda metodologia o OE não promoveu inibição da germinação de esporos. Entretanto, foram observadas alterações na morfologia dos tubos germinativos e inibição da formação de apressórios. Observou-se a presença de apenas uma fração fungitóxica no OE, e o EB não apresentou frações fungitóxicas. Houve a produção de fitoalexinas apenas em mesocótilos de sorgo tratados com o EB.Secondary compounds found in medicinal plants play important role in plant-pathogen interactions by having direct antimicrobian effect on them or inducing the defense mechanisms on defense of other plants. To verify the fungi toxic effect of the eucalyptus on the micelial growth of Rhizoctonia solani, Sclerotium rolfsii, Phytophthora sp, Alternaria alternata and Colletotrichum sublineolum, the crude extract (CE) was incorporate to PDA and the essential oil (EO) and distributed in the surface of the middle with Drigalski loop. Germination of spores of C. sublineolum was also evaluated in the presence of different brackets of EO using two methodologies. In order to verify the induction phytoalexins sorghum mesocotyls were asperged with CE to 20% or then dived in suspensions of EO. For the gliceolin induction, 20 µL of CE were put in cotyledons soybean. The presence of fungitoxic compounds in EO and CE through the thin layer chromatography was also evaluated. The results evidenced inhibition of the fungus micelial growth for concentrations of CE above 20%. All of the aliquots of the oil inhibited micelial growth micelial fungi, except for R. solani whose inhibition happened for aliquots above 20µL. There was inhibition of 100% in conidia germination for all of the aliquots of EO tested in the first methodology. However, in the second methodology EO did not promote inhibition of conidia germination. It was observed the presence of one fraction fungitoxic in EO, and CE did not present fungitoxic fractions. There was the phytoalexins production just in sorghum mesocotyls treated with CE.

Compostos secundários presentes em plantas medicinais desempenham funções importantes em interações planta-patógeno, por ação antimicrobiana direta ou induzindo a síntese de mecanismos de defesa em outras plantas. Para verificar o efeito fungitóxico do eucalipto sobre o crescimento micelial de Rhizoctonia solani, Sclerotium rolfsii, Phytophthora sp, Alternaria alternata e Colletotrichum sublineolum, o extrato bruto (EB) foi incorporado ao BDA e o óleo essencial (OE) foi distribuído na superfície do meio com alça de Drigalski. A germinação de esporos de C. sublineolum também foi avaliada na presença de diferentes alíquotas de OE. Para verificar a indução de fitoalexinas, mesocótilos de sorgo foram aspergidos com EB a 20% ou então, mergulhados em suspensões do OE. Para a indução de gliceolina, 20 µL do EB foram colocados em cotilédones de soja. A presença de compostos fungitóxicos no OE e EB através da cromatografia de camada delgada também foi avaliada. Os resultados evidenciaram inibição do crescimento micelial dos fungos para concentrações do EB acima de 20%. Todas as alíquotas do óleo inibiram o crescimento micelial dos fungos testados, com exceção de R. solani cuja inibição ocorreu para alíquotas acima de 20µL. Houve inibição de 100% na germinação dos conídios para todas as alíquotas do OE testadas na primeira metodologia, porém, na segunda metodologia o OE não promoveu inibição da germinação de esporos. Entretanto, foram observadas alterações na morfologia dos tubos germinativos e inibição da formação de apressórios. Observou-se a presença de apenas uma fração fungitóxica no OE, e o EB não apresentou frações fungitóxicas. Houve a produção de fitoalexinas apenas em mesocótilos de sorgo tratados com o EB. Secondary compounds found in medicinal plants play important role in plant-pathogen interactions by having direct antimicrobian effect on them or inducing the defense mechanisms on defense of other plants. To verify the fungi toxic effect of the eucalyptus on the micelial growth of Rhizoctonia solani, Sclerotium rolfsii, Phytophthora sp, Alternaria alternata and Colletotrichum sublineolum, the crude extract (CE) was incorporate to PDA and the essential oil (EO) and distributed in the surface of the middle with Drigalski loop. Germination of spores of C. sublineolum was also evaluated in the presence of different brackets of EO using two methodologies. In order to verify the induction phytoalexins sorghum mesocotyls were asperged with CE to 20% or then dived in suspensions of EO. For the gliceolin induction, 20 µL of CE were put in cotyledons soybean. The presence of fungitoxic compounds in EO and CE through the thin layer chromatography was also evaluated. The results evidenced inhibition of the fungus micelial growth for concentrations of CE above 20%. All of the aliquots of the oil inhibited micelial growth micelial fungi, except for R. solani whose inhibition happened for aliquots above 20µL. There was inhibition of 100% in conidia germination for all of the aliquots of EO tested in the first methodology. However, in the second methodology EO did not promote inhibition of conidia germination. It was observed the presence of one fraction fungitoxic in EO, and CE did not present fungitoxic fractions. There was the phytoalexins production just in sorghum mesocotyls treated with CE.

Hidrolato é o líquido resultante da extração de óleo essencial de plantas aromáticas por arraste a vapor apresentando em sua composição importantes metabólitos do vegetal de origem. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade indutora de fitoalexinas, bem como as propriedades antifúngica e antibacteriana do hidrolato de carqueja (Baccharis trimera). Foram testadas as concentrações de 1, 10, 25, 50, 75 e 100%. A atividade indutora de fitoalexinas foi avaliada em mesocótilos estiolados de sorgo e em cotilédones de soja. A atividade antifúngica foi avaliada sobre a germinação de esporos de Pseudocercospora vitis, Cercospora kaki e Hemileia vastatrix. A atividade antibacteriana foi avaliada sobre a multiplicação de Xanthomonas campestris pv. passiflorae, Erwinia carotovora e Bacilllus subtilis. O hidrolato não induziu a produção de fitoalexinas em soja, mas promoveu esta atividade em sorgo a partir da concentração de 50%. Atividade antibacteriana ocorreu para os três isolados a partir da concentração de 75%, com inibição de até 87,9% sobre B. subtilis. O hidrolato não mostrou atividade antifúngica. Hydrolate is a product resulting from the extraction of a plant essential oil using steam distillation, which presents major metabolites of such plants in its composition. The objective of this work was to evaluate the phytoalexin induction and the antifungal and antibacterial activities of the Baccharis trimera hydrolate, in the concentrations of 1, 10, 25, 50, 75 and 100%. Phytoalexin induction was evaluated in etiolated sorghum mesocotyl and in soybean cotyledons. The antifungal activity was evaluated on the spore germination of Pseudocercospora vitis, Cercospora kaki and Hemileia vastatrix, while the antibacterial activity was evaluate on the Xanthomonas campestris pv. passiflorae, Erwinia carotovora and Bacillus subtilis multiplication. The hydrolate did not induce the phytoalexin synthesis in soybean, but it provided activity in sorghum in the concentration of 50% and above. Antibacterial activity occurred for the three isolates tested at the concentrations of 75 and 100%, with inhibition up to 87.9% for B. subtilis. The hydrolate showed no antifungal activity.

Foram desenvolvidos três experimentos com o objetivo de avaliar o potencial de preparados a base de calêndula (Calendula officinalis L.) na indução de fitoalexinas em cotilédones de soja, na indução de mecanismos de resistência em frutos de morango, e o efeito fungistático sobre Botrytis cinerea in vitro. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com quatro repetições, para 15 tratamentos resultantes da combinação de três formas de extração (extrato alcoólico, infusão, e maceração) em cinco concentrações (zero; 1,25; 2,5; 5; e 10%). Os resultados demonstram que os preparados de C. officinalis apresentaram capacidade de indução das fitoalexinas gliceolinas em cotilédones de soja. Na aplicação dos preparados em pós-colheita de morangos ocorreu alteração no teor de flavonóides, bem como a atividade da enzima FAL foi estimulada pela aplicação dos extratos; no entanto, não foi constatado o controle de podridão dos frutos. O efeito fungistático foi observado na extração por maceração em todas as suas concentrações reduzindo o crescimento do fungo B. cinerea in vitro sendo que, a partir de 2,5%, observou-se inibição total. A extração por infusão também apresentou resposta positiva na redução do crescimento de B. cinerea, com melhor resposta na concentração de 10% do preparado. Three experiments were carried out to evaluate the potential of calendula (Calendula officinalis L.) extracts for phytoalexin induction in soybean cotyledons, resistance mechanism induction in strawberry fruits and fungistatic effect on Botrytis cinerea in vitro. Experimental design was completely randomized with 15 treatments resulting from the combination of three forms of extraction (alcohol extract, infusion and maceration) at five concentrations (zero, 1.25, 2.5, 5 and 10%). Results showed that C. officinalis extracts could induce the phytoalexins glyceollins in soybean cotyledons. In the application of extracts during the strawberry postharvest, there was a change in flavonoid content, as well as in the activity of the enzyme PAL, which was stimulated by the application of extracts; however, fruit rot control was not noted. Fungistatic effect was observed for the extract obtained by maceration at all used concentrations, reducing in vitro the growth of the fungus B. cinerea, and from 2.5% there was total inhibition. The extract obtained by infusion also showed a positive response in reducing B. cinerea growth, with better response at the concentration of 10% extract.

A demanda mundial por alimentos isentos de agrotóxicos tem impulsionado a pesquisa para a busca de métodos alternativos ao controle de patógenos em plantas. A ativação dos mecanismos de defesa com o uso de indutores vem demonstrando ser uma alternativa viável e promissora. O uso de extratos de plantas medicinais tem demonstrado capacidade para induzir a produção de fitoalexinas, como um mecanismo de defesa em plantas tratadas. O objetivo deste trabalho foi verificar o potencial da planta Eugenia uniflora L. (pitangueira) em induzir fitoalexinas em cotilédones de soja (Glycine max). Os derivados de extrato alcoólico, infusão, maceração e decocção, obtidos de folhas de pitangueira, foram usados nas concentrações de 0,1; 1; 10 e 40%, além de óleo essencial. Água foi utilizada como controle e quitosana (1%) como indutor de referência. Os preparados de pitangueira apresentaram capacidade de indução das fitoalexinas gliceolinas em cotilédones de soja, respondendo ao aumento das concentrações dos preparados. O óleo essencial apresentou destacável efeito na indução de fitoalexinas, sendo superior aos demais preparados. Quitosana induziu fitoalexinas em cotilédones de soja e pode ser utilizado em estudos similares como um indutor de referência. The worldwide demand for food without pesticides has stimulated the research on alternative methods to control pathogens in plants. The activation of defense mechanisms by inductors seems a viable and promising alternative. The use of medicinal plants extracts has demonstrated capacity to induce the production of phytoalexins, as a mechanism of defense in treated plants. The objective of this research was to verify the potential of Eugenia uniflora L. (surinan cherry) to induce phytoalexins in cotyledons of soybean (Glycine max). The derivatives alcoholic extract, infusion, maceration and decoction, obtained of surinan cherry were used in the concentrations of 0.1; 1; 10 and 40%, beyond essential oil. Water was used for the control and chitosan (1%) as inductor reference. The preparations of surinan cherry presented capacity of induction of the phytoalexins glyceolin in cotyledons of soybean, with the increasing concentration of the preparations. The essential oil presents detachable effect in the induction of phytoalexins in relation to the other preparations. Chitosan induces phytoalexins in cotyledons soybean and can be used in similar studies as a reference inductor.

Made available in DSpace on 2017-07-10T17:37:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Camila Peiter Beninca.pdf: 379262 bytes, checksum: 2683f759673a0f79789d731e9e40a850 (MD5) Previous issue date: 2007-05-25 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior The induced resistance is an alternative for control of plant diseases, because the incorrect use of chemical products have been caused several problems to the environment. With the induced resistance, plants can produce secondary compounds, as the phytoalexins with antimicrobial activity. Additionally, peroxidases can be activated, causing cell walls reinforcement, through the formation of lignin that blocking the attack of pathogens. The resistance induced can be carried through by several substances, as secondary compounds produced by fungus, as the Basidiomycota Pycnoporus sanguineus. This work aimed to verify the phytoalexins induced and the peroxidases activity in sorghum and soybean treated with P. sanguineus basidiocarp extracts. With this purpose, the dichloromethanic, hexanic and ethanolic extracts, in concentrations of 100, 250, 500 and 750 mg L-1 were used for phytoalexins production and peroxidases activity in soybean cotyledons and sorghum etiolated mesocotyls. The acybenzolar-S-metil (ASM) (100 mg L-1 of active ingredient) and distilled water + Tween 20 (0.5%) were used as positive and negative patterns, respectively. For the phytoalexins assay in sorghum mesocotyls, the hexanic extract in concentration of 750 mg L-1 provided the highest induction in comparison to the control with water, however without differences to ASM. For the phytoalexins assay in the soybean cotyledons, the P. sanguineus extracts not induced activity significantly different of the positive and negative patterns, but also causing a suppression of the glyceollin synthesis for the dichloromethanic extract. In relation to the peroxidases activity, the dichloromethanic extracts for sorghum and soybean and ethanolic for soybean had inhibited the enzymatic activity. The induction verified for the hexanic extract in sorghum was not different from ASM control. The specific activity of peroxidase in soybean was inhibited by the ethanolic extract and it was induced by the hexanic, but with no differences of the treatment with ASM. These results indicate the weak potential of these extracts for the resistance induction in sorghum and soybean A indução de resistência em plantas ganhou destaque como alternativa no controle de doenças em decorrência dos problemas do uso indevido de produtos químicos. Através desta técnica, algumas plantas respondem com a produção de compostos secundários, como as fitoalexinas, que são substâncias capazes de impedir a atividade de agentes causadores de doenças. Além destas, há a ativação de peroxidases que contribuem no fortalecimento das paredes celulares, pela formação de lignina em resposta ao ataque de patógenos, bloqueando a entrada do agente causador da doença. A indução de resistência pode ser realizada por diversas substâncias, como os compostos secundários presentes nos fungos, tendo como exemplo o Basidiomycota Pycnoporus sanguineus. Este trabalho teve como objetivo avaliar a indução de fitoalexinas e a atividade de peroxidases em sorgo e soja tratados com extratos de basidiocarpos de P. sanguineus. Com essa finalidade, os extratos diclorometânico, hexânico e etanólico nas concentrações de 100, 250, 500 e 750 mg L-1 foram testados em relação à produção de fitoalexinas e atividade de peroxidases em cotilédones de soja e mesocótilos estiolados de sorgo. Acibenzolar-S-metil (ASM) (100 mg L-1 i.a.) e água destilada + Tween 20 (0,5%) foram utilizados como tratamentos controle positivo e negativo, respectivamente. Para o ensaio de fitoalexinas em mesocótilos de sorgo, o extrato hexânico na concentração de 750 mg L-1 proporcionou a maior indução, sendo estatisticamente superior à testemunha negativa, porém sem diferir significativamente do ASM. Para fitoalexinas em cotilédones de soja, os extratos de P. sanguineus não induziram atividade significativamente diferente dos tratamentos controles positivo e negativo, havendo inclusive uma tendência de supressão da síntese de gliceolina pelo extrato diclorometânico. Em relação à atividade de peroxidases, os extratos diclorometânico para sorgo e soja e etanólico para soja inibiram a atividade enzimática. A atividade específica de peroxidase em soja foi inibida pelo extrato etanólico e induzida pelo hexânico, mas sem diferença do tratamento com ASM. Esses resultados indicam o pequeno potencial destes extratos para a indução de resistência em sorgo e soja

Compostos secundários presentes em plantas medicinais podem desempenhar funções importantes em interações planta-patógeno, através de ação antimicrobiana direta ou ativando mecanismos de defesa de outras plantas que venham a ser tratadas com esses compostos. Com o objetivo de verificar o potencial de eucalipto (Eucalyptus citriodora) no controle alternativo de antracnose em pepino (Cucumus sativus), extrato aquoso (EA) desta essência florestal, autoclavado ou não autoclavado, nas concentrações de 0,1, 1, 5, 10, 15, 20 e 25% foi utilizado nos seguintes ensaios: indução de fitoalexinas em mesocótilos estiolados de sorgo (Sorghum bicolor) e em cotilédones de soja (Glycine max); fungitoxicidade in vitro sobre conídios de Colletotricum lagenarium; indução de resistência local ou sistêmica em plantas de pepino. Água e Bion foram utilizados como tratamentos controle. Os resultados indicaram que os EAs autoclavados e não autoclavados induziram a síntese de fitoalexinas em sorgo a partir da concentração de 1%. Em soja ocorreu síntese de gliceolina a partir de 10% e 15% dos EAs autoclavados e não autoclavados, respectivamente. Houve inibição total na germinação de esporos e formação de apressórios de C. lagenarium em concentrações de 20% e 1% do EA autoclavado, respectivamente. Para o extrato não autoclavado houve 75% de inibição da germinação de esporos em 25% do EA e inibição total da formação de apressórios em 15% do EA. Baseado no parâmetro tamanho de lesão, o extrato aquoso de E. citriodora, não autoclavado, apresenta potencial para induzir resistência local em pepino contra C. lagenarium. Secondary compounds present in medicinal plants can play important roles in plant-pathogen interactions, through immediate antimicrobial action or by inducing a defence mechanism in other plants that may be treated with such compounds. With the objective of verifying the potential of Eucalyptus citriodora in the alternative control of anthracnose in cucumber (Cucumus sativus), aqueous extract (AE) of this forest essence, autoclaved or unautoclaved, in concentrations of 0,1, 1, 5, 10, 15, 20 e 25% was used in the following experiments: induction of phytoalexins in sorghum (Sorghum bicolor) etiolated mesocotyls and soybean (Glycine max) cotyledons; fungitoxicity in vitro against Colletotrichum lagenarium conidia; local or systemic induction of resistance in cucumber plants. Water and Bion were used as control treatments. The results indicated that the autoclaved and unautoclaved AE induced phytoalexin synthesis in sorghum starting from the concentration of 1%. In soybean, gliceollin synthesis took place in 10% and 15% of the autoclaved and unautoclaved AEs, respectively. There was total inhibition in the spores germination and apressoria formation in concentrations of 20% and 1% of the autoclaved AE, respectively. As for the unautoclaved extract, there was 75% inhibition of the spores germination in 25% of AE and total inhibition in the apressoria formation in 15% of AE. Based on the parameter size of lesion, the unautoclaved aqueous extract of E. citriodora could potentially induce local resistance in cucumber against C. lagenarium.