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Pigs have difficulty in performing heat exchange and; therefore, it is important to consider the environmental factors that impact their productive performance. This study evaluated the effect of thermal comfort and photoperiod on the productive performance of sows during pregnancy and of nursery piglets. Zootechnical data were obtained from a commercial farm. The temperature-humidity index (THI) was used as the parameter to determine comfort or thermal stress of the sow. The parameters of the sows during pregnancy and nursery piglets were analyzed considering the criteria of comfort, stress, and four photoperiods. The correlation between photoperiod and THI was high and positive, which demonstrated the associated effect of these variables. More significant effects were observed under conditions of comfort and shorter photoperiods. In conclusion, thermal comfort and photoperiod influenced the parameters evaluated during pregnancy and in the nursery, and the strong association between THI and photoperiod suggested that environmental control favors productive parameters in commercial farms. RESUMO: Os suínos são animais que apresentam dificuldade em realizar trocas de calor, por esse motivo é importante considerar os fatores ambientais que impactam seu desempenho produtivo. O objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito do conforto térmico e do fotoperíodo, sobre o desempenho produtivo das porcas na gestação e leitões na maternidade. Os dados zootécnicos foram obtidos de uma granja comercial. O índice de temperatura e umidade (ITU) foi utilizado como parâmetro para o conforto ou o estresse térmico da matriz. Foram analisados os parâmetros das fêmeas no período gestacional e dos leitões na maternidade, considerando os critérios de conforto, estresse e quatro faixas de fotoperíodos. A correlação entre o fotoperíodo e ITU foi alta e positiva, demonstrando efeito associado dessas variáveis. Foram observados mais efeitos significativos em situações de conforto e faixas de menor fotoperíodo. Em conclusão, o conforto térmico e o fotoperíodo influenciaram os parâmetros avaliados na gestação e na maternidade e a alta associação ITU e fotoperíodo sugere que o controle ambiental pode favorecer parâmetros produtivos em granjas comerciais.

The spermatic membrane is rich in polyunsaturated fatty acids, which makes it sensitive to the action of reative species of oxygen, which can damage the seminal quality of the scraps. The purpose of this study was to evaluate the effect of the supplementation of two selenium sources at different doses. Third five scraps were allocated in four groups: (INOR30) 0.30 ppm sodium selenite; (COMP30) 0.30 ppm selenium metal-amino acid; (MIXED15+15) 0.15 ppm sodium selenite + 0.15 ppm selenium metal-amino acid and (COMP15) 0.15 ppm selenium metal-amino acid. The ejaculates of the scraps were evaluated over 22 weeks, resulting in 210 samples evaluated for volume, motility, pH, presence of agglutination and morphological changes, and 140 samples for spermatic concentration. The data was analyzed with repeated measures in time in a mixed model with type of selenium supplementation, periods of evaluation (one period of two weeks + five periods of four weeks) and their interactions as fixed effects, and animal and the worker that collected the ejaculates as random effects. Results showed no difference in selenium supplementation with the sources and doses used. In this way, it was possible to verify that the metal amino acid of selenium at the dose of 0.15 ppm promotes the same effect as the diets formulated with 0.30 ppm of sodium selenite.

The goal of this study was to assess the effects of uniformization management, birth order (BO), birth weight (BiW) and their interactions on the performance of piglets in the maternity phase. Sows (n = 25) and their litters (n = 388 piglets) were distributed into two treatments, namely: UNIF - uniformization of piglets between different litters right after birth; and BIOM - piglets kept up to 12 hours after birth with their biological mothers. In both treatments, the effect of BO was assessed in three groups characterised by BO of 1-6, 7-12, and ≥13. The effect of BiW was assessed in four groups defined as ‘very light’, ‘light’, ‘medium’, and ‘heavy’. The design was completely randomised in a 2×3×4 factorial scheme, totalling 24 treatments with 16 piglets/treatment, on average. Weight gain from birth to 72 hours after birth (WG72h) was greater in the BIOM treatment. The colostrum intake (CI) was lower in piglets with BO ≥13. In general, piglet performance increased in response to the increase in BiW. There was interaction between uniformization management and BiW with respect to CI related to body weight (CIBW), which was greater in very light piglets in the UNIF treatment (27.48% BW), and lower in heavy piglets in the BIOM treatment (16.82% BW). It was possible to obtain satisfactory piglet performance by keeping the litters with their biological mothers until 12 hours after birth. The CI expressed on an absolute basis (g) was greater; however, CI expressed on relative basis with respect to body weight (% BW) was lower in heavy piglets. Resumo O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos de manejo de uniformização, ordem de nascimento (ON), peso ao nascimento (PN) e suas interações no desempenho de leitões na fase de maternidade. Porcas (n = 25) e suas leitegadas (n = 388 leitões) foram distribuídas em dois tratamentos: UNIF - uniformização de leitões entre leitegadas distintas logo após o nascimento; MBIO - leitões mantidos até 12 horas pós-parto com a mãe biológica. Nos dois tratamentos o efeito da ON foi avaliado em três grupos caracterizados pela ON de 1-6, 7-12 e ≥ 13; o efeito de PN foi avaliado em quatro grupos definidos como Muito leve, Leve, Médio e Pesado. O delineamento foi inteiramente casualizado em esquema fatorial 2 × 3 × 4, totalizando 24 tratamentos com 16 leitões/tratamento, em média. O ganho de peso do nascimento até 72 horas de vida (GP72h) foi maior em MBIO. A quantidade de colostro ingerida (QCI) foi menor em leitões de ON ≥ 13. Em geral, o desempenho dos leitões aumentou em resposta ao aumento do PN. Houve interação entre manejo de uniformização e PN para QCI em relação ao peso corporal (QCIPC), que foi maior em leitões Muito leves em UNIF (27,48% PC) e menor em leitões Pesados em MBIO (16,82% PC). É possível obter bom desempenho de leitões mantendo a leitegada com a mãe biológica até 12 horas pós-parto. A quantidade de colostro ingerida em base absoluta (g) é maior, mas relativa ao peso corporal (% PC) é menor em leitões pesados.

The endemic character of urinary infections (UI) in sows makes collective antimicrobial therapies via feed a routine. This, however, generates sub-doses unable to heal and contribute to the selection of antibiotic-resistant bacteria. The use of individual therapy is the most appropriate procedure to be performed on animals with UI. With this study, we aimed to evaluate the occurrence of UI in sows housed in the western region of Paraná and the efficacy and cost-benefit of individual treatment. A total of 353 females were selected from five different herds, submitted to urine collection in the final third of pregnancy by spontaneous urination method. The samples were analyzed physically and chemically with the use of reagent strips, and the presence of nitrite was a determinant for positivity for UI. The animals with UI had urine submitted to a bacteriological evaluation, were treated with parenteral medication (marbofloxacin - single dose - 8 mg/kg), and submitted to a new urine collection 24h and 48h after the first. UI was observed in 4.53% of the females evaluated (16/353). Escherichia coli and Streptococcus sp. were the most frequently isolated agents. Seven days after the use of marbofloxacin 87.5% (14/16) of the animals were negative for UI, which demonstrates the efficacy of UI parenteral control. The diagnosis associated with individual therapy at the expense of collective medication was highly cost-effective, made it possible to drastically reduce the number of medicated animals, and was efficient in controlling UI. Thus, it is concluded that it is possible to make rational use of antibiotics by treating only sows that are proven to be positive for UI. This reduces the number of unnecessarily medicated animals and reduces the cost due to the use of antimicrobials only in sick animals. Resumo O caráter endêmico das infecções urinárias (IU) em porcas faz com que seja rotina o uso de terapias antimicrobianas coletivas via ração, as quais geram subdoses que não promovem a cura e contribuem para a seleção de bactérias resistentes aos antibióticos. O uso de terapia individual é procedimento mais adequado a ser realizado nos animais com IU. Com este estudo objetivou-se avaliar a ocorrência de IU em matrizes alojadas na região Oeste do Paraná e a eficácia e custo-benefício do tratamento individual. Foram selecionadas 353 fêmeas, de cinco rebanhos distintos, submetidas à coleta de urina no terço final da gestação pelo método de micção espontânea. As amostras foram analisadas física e quimicamente com o uso de tiras reagentes, sendo que a presença de nitrito foi determinante de positividade para IU. Os animais com IU tiveram a urina submetida a avaliação bacteriológica, foram tratados com medicação parenteral (marbofloxacina - dose única - 8 mg/kg) e submetidos a nova coleta de urina 24h, 48h e sete dias após a primeira. IU foi observada em 4,53% das fêmeas avaliadas (16/353). Escherichia coli e Stretococcus sp. foram os agentes isolados com maior frequência. Sete dias após o uso da marbofloxacina 87,5% (14/16) dos animais foram negativos para IU, o que demonstra a eficácia do controle parenteral da IU. O diagnóstico associado à terapia individual em detrimento da medicação coletiva apresentou custo-benefício altamente vantajoso, possibilitou reduzir drasticamente o número de animais medicados e apresentou eficiência no controle da IU. Desta forma se conclui que é possível fazer uso racional de antibióticos mediante o tratamento apenas de porcas comprovadamente positivas para IU. Isto reduz o número de animais medicados desnecessariamente e reduz o custo em função do uso de antimicrobianos apenas em animais enfermos.

Swine wastes obtained from farming activities have the greatest impact on the environment by environmental agencies. Swine wastes together with poor management represent risks to the environment. In Brazil, these activities significantly increased in the last years and from 2014, the country became the fourth largest producer in the world. Swine wastes are generated in high amounts due to the confinement system used nowadays. This, coupled with the poor management of these wastes is now a serious problem to the environment. Therefore, the treatment of this waste is essential to maximize integration between environment and production. Based on this, the aim of this study is to perform a bibliographic survey of the swine waste treatment used mostly in Brazil and the ones that stand out most. Key words: Swine waste, reuse, environment.

In this study, we used primary cultures of fish hepatic cells as a tool for evaluating the effects of environmental contamination. Primary hepatic cell cultures derived from the subtropical fish Metynnis roosevelti were exposed to different concentrations (0.275, 2.75 and 27.5 μg L(-1)) of the herbicides 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) and 4-chloro-2-methylphenoxyacetic acid (MCPA). Cellular respiratory activity was evaluated by polarography using three substrates: 0.5 M glucose, 0.5 M succinate and 0.5 M α-ketoglutarate. Significant changes were observed in cellular oxygen consumption with 0.5 M α-ketoglutarate. Even at low concentrations, 2,4-D and MCPA were potent uncouplers of oxidative phosphorylation. Primary cultures of M. roosevelti liver cells may provide a useful tool for the evaluation of environmental contaminant effects. A review of regulations regarding permitted concentrations of these herbicides is needed.

Physical form effect of the pre-starter diet supplied during the post-weaning period from 21 to 41 days of age on diet digestibility and animal performance in terms of zootechnical performances of light-weight (5.82kg) and heavy-weight weaning piglets (6.32kg) was evaluated, as well as the residual effects of the treatments until slaughter. Forty-eight female pigs at 21 days of age were evaluated. The experimental design was completely randomized in a 2x2 factorial scheme (meal/pelleted diet vs. light-weight/heavy-weight piglets), with six replicates for the nursery phase and 12 replicates for the growing-finishing phases. Animals received the experimental diet from 21 to 41 days of age. Data were analyzed with ANOVA, setting the significance in 5%. Feeding with the pelleted diet resulted in a 39% greater daily weight gain and a 28% greater feed conversion rate for piglets from weaning to 40 days of age. Pelleting also resulted in a decrease in feed wastage during the first week after weaning (9.15% for meal diet vs. 1.68% for pelleted diet) and; consequently, the results showed an increase in feed consumption. Digestible energy of the pelleted diet (3,626kcal kg-1) was greater than that of the meal diet (3,424kcal kg-1). The physical form improved the performance of weaning pigs and the digestibility of the pre-starter diet, but there wasn't residual effect of the physical form and the weight of a piglet at weaning on live weight at slaughter. RESUMO: Avaliou-se o impacto da forma física da dieta pré-inicial em leitões leves (5,82kg) e pesados (6,32kg) no período pós-desmame sobre o desempenho zootécnico e digestibilidade da dieta, bem como o efeito residual dos tratamentos até o abate. Foram utilizados 48 leitões fêmeas com 21 dias de idade, distribuídos em delineamento inteiramente ao acaso, em esquema fatorial 2x2 (farelada/peletizada vs. leitões leves/pesados), com seis repetições na fase de creche e 12 repetições na fase de crescimento e terminação. Os leitões receberam as dietas experimentais dos 21 aos 40 dias de idade. Os dados foram submetidos à análise de variância ao nível de 5% de probabilidade. Observou-se que a peletização melhorou em 39% o ganho de peso diário e 28% a conversão alimentar do desmame aos 40 dias de idade. Ao considerar a redução de desperdício da ração peletizada (9,15 vs. 1,68%) na primeira semana pós-desmame, a peletização da dieta proporcionou aumento do consumo de ração. Ao avaliar a digestibilidade da dieta, observou-se que a energia digestível aumentou de 3.424kcal kg-1 na forma farelada para 3.626kcal kg-1 na forma peletizada. A forma física da dieta proporcionou efeitos positivos sobre o peso vivo dos leitões desmamados e energia digestível da dieta. Porém, não foi observado efeito residual da forma física ou peso ao desmame sobre o peso vivo ao abate.

Porcine teschovirus (PTV), Porcine sapelovirus (PSV) and Enterovirus G (EV-G) have been associated with enteric, respiratory, reproductive and neurological disorders. Although Brazil is the world's fourth largest producer and exporter of pork, no information on the occurrence of PTV, PSV and EV-G infections is available for Brazilian pig herds. This study aimed to investigate the occurrence of Porcine enteric picornavirus infections in pig farms located in three distinct geographical regions of Brazil. Forty randomly selected diarrhoeic and normal consistency faeces of suckling (n = 22) and nursery (n = 18) pigs from farms located in 21 distinct cities of the Southern, Southeast, and Midwest regions of Brazil were evaluated by nested-RT-PCR assays. Suckling piglets presented the expected amplicon size for PTV (158 bp) and EV-G (313 bp) in single and mixed infections in 40.9 % (9/22) of the faecal samples. PSV amplicon (212 bp) was not detected in this age group. For nursery pigs, Porcine enteric picornaviruses amplicons were present in 77.8 % (14/18) of the faecal samples. PTV and EV-G were detected in single and mixed infections, while PSV was detected only in two samples in co-infection with PTV and EV-G in this age group. The Brazilian regions evaluated presented at least two of the tested viruses. Sequencing analysis revealed high similarities to the related viruses (95.3 to 99.2 % for PTV, 94.2 to 98.5 % for PSV and 86 to 100 % for EV-G). For the first time PTV, PSV and EV-G have been molecularly detected and characterised in pig faecal samples in Brazil.

Um dos principais problemas sanitarios da suinocultura e a alta prevalencia de doencas respiratorias, que podem ser causadas por uma serie de agentes bacterianos e virais. Visando identificar os agentes bacterianos causadores das lesoes pulmonares que geram condenacao de carcaca de suinos, os pulmoes de 150 animais em idade de abate foram submetidos a exames anatomopatologicos e bacteriologicos. Foram escolhidas as lesoes pulmonares que causaram o desvio das carcacas na linha do abate para o Departamento de Inspecao Final do Servico de Inspecao Federal. Pelo exame macroscopico as lesoes foram classificadas em broncopneumonia supurativa, broncopneumonia fibrinosa, pleurite ou pneumonia embolica. Na pesquisa bacteriologica isolou-se Pasteurella multocida Tipo D (27,3%), Pasteurella multocida Tipo A (24%), Actinobacillus pleuropneumoniae (13,3%), Streptococcus suis (6,7%), Arcanobaterium pyogenes (5,3%) e outras bacterias (10,0%). Dentre o total de amostras, 16,7% foram negativas. As lesoes de onde se isolou P. multocida e A. pleuropneumoniae foram classificadas, em sua maioria, como broncopneumonia fibrinosa ou sequelas desta lesao. Streptococcus sp e A. pyogenes relacionaram-se com pequenos abscessos, em lesoes com caracteristicas de pneumonia embolica ou broncopneumonia supurativa.

As fraturas em vértebras lombossacrais acontecem com frequência durante o abate de suínos, sendo desencadeadas pela forte contração muscular que ocorre nesta região em consequência da insensibilização elétrica. O objetivo deste estudo foi descrever as características das fraturas de vértebras lombossacrais provocadas pelo processo de abate e verificar se existe diferença anatômica entre os animais com e sem fratura e entre linhagens genéticas comerciais com histórico de porcentual de fraturas diferentes. Em um abatedouro localizado no estado do Paraná foram coletadas 50 peças anatômicas contendo vértebras L6 até S2 de animais de duas linhagens genéticas distintas de suínos com frequências diferentes de animais fraturados ao abate (GAF – grupo alta fratura – n=32 – linhagem genética com 5% de fratura e GBF – grupo baixa fratura – n=18 – linhagem genética com 0,5% de fraturas), tanto de suínos normais (n=28) como de suínos fraturados (n=22). As peças foram dissecadas e submetidas à morfometria com paquímetro digital, tomando-se as medidas dos processos espinhoso, transverso e faceta articular; comprimento vertebral; espessura do corpo vertebral e o diâmetro do canal medular. As fraturas foram classificadas em transversa, oblíqua e cominutiva. O tipo de fratura predominante foi a cominutiva e a vértebra mais acometida foi a S2. Houve diferença anatômica entre os grupos GAF e GBF e entre os fraturados e não fraturados, sendo que os animais do GAF e os fraturados apresentaram vértebras maiores, mais longas e mais finas, o canal medular mais caloroso, os processos espinhosos maiores e a faceta articular menor. Conclui-se que suínos que fraturam no abate possuem vértebras lombossacrais anatomicamente mais propensas às fraturas.

O Mycoplasma hyosynoviae e um dos agentes causadores de artrite em suinos em fase de recria e terminacao. Esta infeccao provoca atraso no crescimento, gastos com tratamento e condenacoes de carcacas. O presente trabalho teve como objetivo padronizar a tecnica de isolamento e identificacao do M. hyosynoviae e investigar a presenca deste agente na articulacao de suinos artriticos no matadouro. Procedeu-se o exame microbiologico das articulacoes de 50 carcacas de suinos recentemente abatidos e julgados artriticos pelo Servico de Inspecao Federal. Utilizaram-se tecnicas de isolamento adequadas para o crescimento dos principais agentes artritogenicos dos suinos com especial atencao ao isolamento do M. hyosynoviae. Dos 50, 40 (80%) eram assepticas, de sete (14%) foi isolado o Erysipelothrix rhusiopathiae e de tres (6%), o M. hyosynoviae , sendo este ultimo isolado pela primeira vez no Brasil. O M. hyosynoviae apresentou crescimento rapido nos meios de cultivos liquidos e solidos. O crescimento deste agente foi evidenciado pela alcalinizacao do meio, com consequente alteracao da cor original salmao para cor vinho. Dos tres isolamentos de campo, em dois foi observado o crescimento nos tubos 24 horas apos e em um, cinco dias apos a semeadura. Conclui-se que o M. hyosynoviae cresce abundantemente e com rapidez nos meios liquidos e solidos enriquecidos com arginina e mucina.

Porcine teschovirus (PTV), porcine sapelovirus (PSV), and enterovirus G (EV-G) are infectious agents specific to pig host species that are endemically spread worldwide. This study aimed to investigate the natural infection by these porcine enteric picornaviruses in wild boars (Sus scrofa scrofa) of Paraná state, Brazil, and to evaluate peccaries (Pecari tajacu and Tayassu pecari) as alternative host species for these viruses. Fecal samples (n=36) from asymptomatic wild boars (n=22) with ages ranging from 2 to 7 months old (young, n=14) and 2 to 4 years old (adult, n=8) and from peccaries (6 to 8 months old, n=14) were collected from a farm and a zoo, respectively, both located in Paraná state. Reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) and nested-PCR (n-PCR) assays targeting the 5'non-translated region of the virus genome were used for screening the viruses. Porcine enteric picornaviruses were detected in 12 out of the 22 wild boar fecal samples. According to each of the viruses, EV-G was most frequently (11/22, 50%) detected, followed by PTV (10/22, 45.5%) and PSV (4/22, 18.2%). Regarding the age groups, young wild boars were more frequently (9/14, 64.3%) infected with PTV, PSV, and EV-G than adult animals (3/8, 37.4%). One n-PCR amplified product for each of the viruses was submitted to sequencing analysis and the nucleotide sequences were compared with the related viruses, which showed similarities varying from 97.7% to 100% for PTV, 92.4% to 96.2% for PSV, and 87.1% to 100% for EV-G. Peccaries tested negative for the viruses and in this study they did not represent infection reservoirs. This study is the first to report the molecular detection of PTV, PSV, and EV-G from captive wild boars in a South American country and the first to screen peccaries as alternative host species for porcine enteric picornavirus. ResumoTeschovírus suíno (PTV), sapelovírus suíno (PSV) e enterovírus G(EV-G) são agentes infecciosos específicos da espécie suína que estão endemicamente disseminados em todo o mundo. O objetivo deste estudo foi investigar a infecção natural por estes picornavírus entéricos suínos em javalis (Sus scrofa scrofa) do estado do Paraná, Brasil e avaliar pecaris (Pecari tajacu e Tayassu pecari) como hospedeiros alternativos para estes vírus. Amostras fecais (n=36) de javalis assintomáticos (n=22) com idades de 2 a 7 meses (jovens, n=14) e 2 a 4 anos (adultos, n=8) e de pecaris (6 a 8 meses de idade, n=14) foram coletadas em um cativeiro e zoológico, respectivamente, ambos localizados no estado do Paraná. A transcrição reversa seguida por reações da polimerase em cadeia (RT-PCR) e nested-PCR com alvo na região 5'-não traduzida do genoma viral foram utilizadas para a identificação dos vírus. Picornavírus entéricos suínos foram detectados em 12 das 22 amostras fecais de javalis. De acordo com cada um dos vírus, EV-G foi mais frequentemente (11/22, 50%) detectado, seguido pelo PTV (10/22; 45,5%) e PSV (4/22; 18,2%). Considerando os grupos de idade, javalis jovens foram mais frequentemente (9/14; 64,3%) infectados com PTV, PSV e EV-G do que os javalis adultos (3/8; 37,4%). Um produto amplificado na nested-PCR para cada um dos vírus foi submetido à análise de sequenciamento e as sequências de nucleotídeos foram comparadas com vírus relacionados, o que mostrou que as similaridades variaram entre 97,7% a 100% para o PTV, 92,4% a 96,2% para o PSV e 87,1% a 100% para o EV-G. Os pecaris foram negativos para as viroses investigadas e neste estudo não se apresentaram como hospedeiros alternativos para as infecções. Este estudo é o primeiro a relatar a detecção molecular de PTV, PSV e EV-G em javalis de cativeiro de um país da América Latina e o primeiro a avaliar pecaris como espécie hospedeira alternativa para picornavírus entéricos suínos.

This study examined the relationship between birth weight and growth performance when suck- ling piglets were reared in litters standardized by birth weight. Forty-four gilts (Landrace × Large White) due to farrow during the same week were selected. Piglets born to those gilts were individually weighed at birth and cross-fos- tered to obtain litters with 11 piglets and standardized birth weight (CV, lower than 5%). Based on average birth weight, 4 litter weight classes were established: class 1 (> 1.10 kg to ≤ 1.33 kg), class 2 (> 1.34 kg to ≤ 1.46 kg), class 3 (> 1.47 kg to ≤ 1.57 kg), and class 4 (> 1.58 kg to ≤ 1.88 kg). At 21 d of age, piglets were weighed to determine BW and calculate ADG and weight gain relative to birth weight. A complete- ly randomized experimental design was used with birth weight classes as treatments. At 21 d of age, the average BW of piglets from the heaviest birth weight class (5.67 kg) was greater (P < 0.05) than the lightest class (5.06 kg); how- ever, all classes had the same ADG (P < 0.05). There was a positive correlation (r = 0.184; P < 0.01) between birth weight and weight at 21 d of age, but birth weight was not correlated (r = -0.040; P = 0.37) with ADG during the suck- ling phase. Therefore, piglet birth weight did not influence weight gain when piglets were reared by sows in litters with standardized birth weight.

O diagnóstico de infecção do trato urinário (ITU) em porcas geralmente é feito com o auxílio de tiras reagentes, por ser um método rápido, prático e passível de ser realizado na própria granja. O exame microscópico da urina raramente é utilizado em granjas por ser uma técnica mais demorada e trabalhosa. No entanto, não existem estudos sobre a precisão destas duas técnicas no diagnóstico de ITU nesta espécie. O objetivo deste estudo foi avaliar a precisão da tira reagente e do exame microscópico da urina no diagnóstico de ITU em porcas, comparando-os com o exame bacteriológico da urina. Para selecionar as porcas que iriam compor o estudo foi realizado um exame químico prévio com tira reagente, do qual foram selecionadas 139 porcas, 66 positivas para nitrito na tira reagente e 73 negativas. No dia seguinte foi realizada uma nova coleta de urina destas 139 porcas para realização da urinálise completa, que incluiu os exames físico, químico, microscópico e microbiológico destas amostras de urina. Os resultados demonstraram que a prova de nitrito da tira reagente apresentou 100% de especificidade e 93% de sensibilidade. A especificidade do exame microscópico para bacteriúria foi de 82% e a sensibilidade de 100%. O diagnóstico de ITU com o uso de tiras reagentes e/ou com exame microscópico da urina é confiável, quando comparado com o exame bacteriológico da urina, o que torna possível o diagnóstico rápido de ITU em porcas na granja. The diagnosis of the urinary tract infection (UTI) in sows is usually performed by using reagent test strips, since it is a fast and practical method, and capable of being done at the farm. The microscopic examination of the urine is rarely used at the farm since it is a more time consuming and difficult technique. However, there are no studies on the accuracy of those two techniques for the UTI diagnosis on this species. This study aims to assess the accuracy of the reagent test strip and the urine microscopic examination in the diagnosis of ITU in sows, comparing them with the bacteriological examination of urine. In order to select the sows for this study, a chemical reagent test strip was carried out previously and a total of 139 sows were selected, 66 sows of which showed positivity to nitrite in the reagent test strip and 73 without nitrituria. Then, the next day, a new sample collection for performing a complete urinalysis was carried out from those 139 sows, which included physical, chemical, microscopic and microbiological examination of these urine samples. The results revealed that the nitrite test of the reagent strip showed 100% of specificity and 93% of sensitivity. The specificity of the microscopic examination for bacteriuria was 82% and the sensitivity was 100%. The UTI diagnosis by using reagent strips and/or the urine sediment test is reliable if compared to the urine bacteriological examination, which makes possible the rapid diagnosis of UTI in sows at the farm.

RESUMO: O experimento consistiu na avaliação da eficácia de um produto comercial a base de extrato de oxicoco (pHD® - Biomin LTDA) no tratamento de infecções do trato urinário (ITU) em porcas. Foram utilizadas 42 porcas, com idade gestacional variando entre 50 e 70 dias, portadoras ou não de ITU. Os animais sadios foram diferenciados dos animais afetados mediante resultados de urinálise e urocultivo. O ensaio foi composto por: porcas com ITU que receberam o produto a base de extrato de oxicoco na ração por um período de 14 dias; porcas negativas para ITU (controle negativo); e porcas positivas para cistite (controle positivo). Foram coletadas amostras de urina nos dias zero, sete e 14 dias após o início do tratamento. Realizou-se urinálise completa dessas amostras, avaliação da densidade, do pH, contagem bacteriana e isolamento bacteriano. A E. coli foi o agente mais freqüente no isolamento bacteriano (90,62%). Os resultados demonstraram que o produto a base de extrato de oxicoco foi eficaz em promover redução do pH urinário, porém não interferiu em mais nenhum dos outros parâmetros avaliados.

A doença de Aujeszky (DA) ou pseudoraiva é uma enfermidade causada pelo Herpesvirus suis. Esta doença afeta grande número de espécies animais e, na suinocultura, possui especial relevância sanitária e econômica. O presente trabalho teve como objetivo demonstrar a prevalência de DA em granjas de reprodutores suídeos certificadas (GRSC), granjas comerciais de suínos (GS), granjas de javalis (JA) e criações de subsistência (CS) no estado do Paraná no período de 2000 a 2009. O estudo foi realizado pela Secretaria de Estado da Agricultura e do Abastecimento (SEAB) do Paraná e foi divido em três etapas: 1) Monitoria sorológica de GRSC no período de 2000 a 2009; 2) Inquérito soroepidemiológico para DA em 283 municípios do estado no ano de 2003; 3) Avaliação dos surtos de DA ocorridos no período de 2000 a 2009. O estudo demonstrou que houve 21 focos de DA no período 2000-2009, sendo 10 constatados a partir de notificação de suspeita da doença. Destes, cinco ocorreram em GS e cinco em CS. No inquérito soroepidemiológico, constatou-se 11 focos em 10 municípios, sendo dois em granjas de JA e nove em CS. Em todos os focos de DA foram adotadas medidas sanitárias de saneamento. Conclui-se que a prevalência de DA no estado do Paraná no período de 2000 a 2009 foi de 21 focos, com predomínio em granjas de javalis e em criações de subsistência.

This study investigated the presence of genome sequences of the porcine circovirus type 2 (PCV2) and porcine parvovirus (PPV) in 147 porcine stillbirths and mummified fetuses. These samples, originated from 39 farms located in eight Brazilian states, were collected between 2006 and 2008. Heart and lung fragments were used for extraction of total DNA and later amplification of correspondent fragments of the virus pathogens through polymerase chain reaction (PCR) technique. Out of 147 samples, 74 (50.3%) were positive for PCV2 while nine samples (6.2%) were positive for PCV2 and PPV. None of the samples were positive just for PPV. Out of 39 investigated farms, 21 (53.8%) had fetuses positive for PCV2 while co-infection with PCV2 and PPV was detected in 3 farms (7.7%). These results indicate that PCV2 could be an important infection agent in cases of porcine stillbirths and mummified fetuses in Brazil and must be included at differential diagnostic list. KEY WORDS: Polymerase chain reaction (PCR), porcine circovirus type 2 (PCV2), porcine parvovirus (PPV), reproductive failure, swine.

Investigou-se por meio de análises sorológicas e pela técnica da reação em cadeia da polimerase (PCR) a presença do Mycoplasma hyopneumoniae em fêmeas reprodutoras suínas durante o procedimento de quarentena. O estudo foi realizado em um lote de 300 fêmeas da linhagem Landrace x Large White de 150 dias de idade em uma unidade de quarentena no estado do Paraná no ano de 2007. Os animais foram provenientes de uma única granja, sendo esta, considerada livre do Mycoplasma hyopneumoniae. Os exames foram realizados no laboratório Microvet localizado em Viçosa-MG. Não foram observados sinais clínicos sugestivos de problemas respiratórios bem como não foi detectado soroconversão para o M. hyopneumoniae nas 130 análises sorológicas, realizadas em amostras de soro coletadas nos dias 0, 55 e 76 após o alojamento dos animais. Entretanto, o M. hyopneumoniae foi detectado por meio da PCR (fragmento de 649 pb do gente rRNA 16S) de lavado traqueobronqueal e tecido pulmonar de uma fêmea com análise sorológica não conclusiva na amostra coletada no dia 55 após o alojamento. Desta forma, a associação entre as análises sorológicas e a PCR foi importante no diagnóstico do Mycoplasma hyopneumoniae durante o procedimento de quarentena.

A utilização de métodos moleculares baseados em PCR é fundamental na detecção do Actinobacillus pleuropneumoniae, sendo capaz de identificar a infecção antes do estabelecimento da doença no rebanho. Estes métodos apresentam maior sensibilidade quando comparados com métodos tradicionais de isolamento bacteriano, mas podem sofrer influência de substâncias que reduzem a especificidade do teste e proporcionam o aparecimento de amplificações inespecíficas. No intuito de reduzir as amplificações inespecíficas, observadas quando aplicada a PCR para o gene cpx em amostras de tecido tonsilar, procedeu-se a otimização da técnica, na qual foram analisados o efeito do pré-cultivo bacteriano e as diferentes temperaturas de anelamento dos iniciadores e foi introduzido, no protocolo, um anticorpo que se liga na enzima Taq DNA Polimerase, aumentando a especificidade do teste. Paralelamente, foi realizado um experimento para verificar o efeito inibidor do tecido tonsilar sobre os resultados da PCR. Para isso, porções de tonsila de animais negativos para A. pleuropneumoniae foram contaminadas artificialmente com a amostra referência do sorotipo 5B. A adição do anticorpo para a enzima Taq DNA Polimerase e o aumento da temperatura de anelamento dos iniciadores para 57°C diminuiu o aparecimento de amplificações inespecíficas. Os resultados obtidos no experimento demonstraram que o tecido tonsilar possui efeito inibidor nas amplificações da PCR. Além disso, a amplificação depende de, no mínimo, 675 UFC presentes na alíquota da amostra usada na PCR (equivalente a 1,35 x 10(5) UFC mL-1), assim, amostras de fragmentos de tecido de infecções iniciais e/ou com poucas células podem apresentar resultados falsos negativos.

The aim of this work is to establish the serum levels of total, ionic and albumin calcium for gestation and lactating sows and to study the correlation between these data and reproductive indices. Fifty sows were used. The blood was taken at 60 days on gestation sows and at the farrowing moment, from the front cava venipuncture. The total, ionic and albumin calcium estimated for gestation and in farrowing sows was 9.71±1.21 mg/dL and 10.09±2.17 mg/dL, 3.78±0.83 mg/dL and 3.28±0.65 mg/dL, 2.8±0.4 g/dL and 2.9±0.5 g/dL, respectively. Hypocalcemia was observed in 16% of in farrowing labor sows. The average time for farrowing was 164 minutes. The average interval of piglets’ birth was 16 minutes and 0.88 was the observed stillbirth number. The correlation between the low levels of calcium and the reproductive indices were not observed. Statistic differences were not observed between the total, ionic and albumin levels of calcium for gestation and in farrowing labor sows

Estudou-se por meio de exames anatomopatológico, microbiológico, citológico e físico-químico, as articulações de 130 suínos abatidos em um matadouro localizado em Concórdia – SC. Os animais foram escolhidos de forma direcionada e as articulações foram classificadas macroscopicamente de acordo com as lesões presentes na membrana sinovial, cartilagem articular e no linfonodo regional. Dos 130 suínos escolhidos, 25 apresentavam-se com as articulações normais, 36 com artrite causada pela osteocondrose, 50 com artrite infecciosa e 19 com artrite traumática. Em todos os casos de artrite infecciosa havia reação do linfonodo regional e, da mesma forma, sempre que os linfonodos regionais estavam reativos, havia artrite infecciosa no membro relacionado. Dos 50 casos de artrite infecciosa, 40 (80%) eram assépticos, de sete (14%) foi isolado o Erysipelothrix rhusiopathiae e de três (6%), o Mycoplasma hyosynoviae, pela primeira vez isolado no Brasil. Nas demais categorias de artrite, não foram isolados nenhum agente infeccioso e nem visualizadas alterações nos linfonodos regionais. Conclui-se que as artrites infecciosas são acompanhadas de reação dos linfonodos regionais e as artrites causadas pela osteocondrose são estéreis. Pathological, microbiological, cytological and physical-chemical studies of joints from arthritic swines in the abattoir Abstract The joints of one hundred and thirty pigs from an abattoir in Concórdia - SC, were studied, by means of pathological, microbiological, cytological and physical-chemical procedures. The choice of the pigs was not made by random distribution and the joints were grouped grossly according of lesions of the synovial membrane, cartilage and of the draining lymph node. From 130 pigs, 36 showed lesions of osteochondrosis, 50 infectious arthritis, 19 traumatic arthritis and 25 normal joints. In all cases of infectious arthritis there was a reaction of the corresponding draining lymph node. Whenever the draining lymph node was reactive, there was infectious arthritis in the related limb. Of the 50 infectious arthritis, 40 (80%) were aseptic, 7 (14%) yielded Erysipelothrix rhusiopathiae and 3 (6%) yielded Mycoplasma hyosynoviae, for the first time isolated in Brazil. In the remaining arthritis categories, no infectious agents nor alterations in the draining lymph node was diagnosed.

O presente trabalho teve como objetivo determinar a prevalência de infecção urinária e da bactéria Actinomyces suis na urina de 1745 porcas gestantes da região Sul do Brasil e correlacionar essa prevalência com parâmetros físicos e químicos da urina. A prevalência de infecção urinária e de A. suis foi de 28,31% e 20,63%, respectivamente. Observou-se correlação negativa entre infecção urinária e A. suis, ou seja, as porcas que apresentaram infecção urinária tinham menor prevalência de A. suis (13,67%) do que as que não a apresentaram (23,12%). Da mesma forma, as porcas portadoras de A. suis, tinham menor prevalência de infecção urinária (17,43%) do que as não portadoras (28,62%). Apenas 3,60% das porcas examinadas eram positivas para infecção urinária e A. suis simultaneamente. A cor predominante da urina foi a amarelo claro, tanto para as porcas portadoras ou não portadoras de infecção urinária ou de A. suis. Constatou-se a presença de turbidez em 83,15% das amostras, sendo que em 96,18% das amostras turvas observou-se a presença de cristais. Finalmente, a cor, aspecto, densidade, pH e presença de cristais, foram considerados como parâmetros sem valor para o diagnóstico presuntivo de infecção urinária em porcas gestantes. Prevalence of urinary tract infections and of Actinomyces suis in urine from pregnant sows. Correlation with some urine’s physical and chemical parameters Abstract A survey has been carried out in urine samples from 1745 pregnant sows from Southern Brazil, in regard to the prevalence of urinary infections and of Actinomyces suis and its correlation with some of the urine physical and chemical parameters. Prevalence of urinary infections was of 28.31% and that of A. suis, 20.63%. However, a negative correlation has been found between the incidence of urinary infection and the presence of A. suis, the prevalence of the latter being lower in sows which are positive for urinary infections (13.67%) than in those without urinary infection (23.12%). At the same time, sows positive for A. suis display a lesser number of urinary infection (17.43%) than those negative for the bacteria (28.62%). Only in 3.60% of the sows, urinary infection and A. suis occurred simultaneously. Due to the presence of crystals, turbidity was frequently observed in sow’s urine (83.15%). Crystals were present in 96.18% of sow’s turbid urine samples. Furthermore, color, turbidity, density, pH and the presence of crystals were not considered of value for the presumptive diagnosis of urinary tract infections in pregnant sows.

O presente trabalho teve o objetivo principal de determinar a prevalência de infecção urinária e a prevalência de Actinomyces suis na urina de 1745 porcas gestantes da região Sul do Brasil. As porcas eram criadas em confinamento, em granjas que apresentavam problemas reprodutivos e criadas ao ar livre em granjas que não apresentavam problemas reprodutivos. A presença do A. suis na urina foi determinada através de imunofluorescência indireta. Foram consideradas portadoras de infecção urinária as porcas que apresentaram nitritúria e/ou hematúria. Adicionalmente, estudaram-se alguns parâmetros físicos e químicos da urina para verificar suas significâncias no diagnóstico presuntivo de infecção urinária. A prevalência de infecção urinária foi de 29,54% para as porcas criadas em confinamento e de 16,46% para as porcas criadas ao ar livre. A prevalência geral de infecção urinária foi de 28,31%. Observouse a presença do A. suis na urina de 22,24% das porcas criadas em confinamento e em 6,71% das porcas criadas ao ar livre. A prevalência geral de A. suis foi de 20,63 %. Observou-se correlação negativa entre infecção urinária e A. suis, ou seja, as porcas que apresentaram infecção urinária tinham menor prevalência de A. suis (13,67%) do que as que não a apresentaram (23,12%). Da mesma forma, as porcas portadoras de A. suis, tinham menor prevalência de infecção urinária (17,43%) do que as não portadoras (28,62 %). Apenas 3,60% das porcas examinadas eram positivas para infecção urinária e A. suis simultaneamente. Conclui-se a partir destes resultados que as porcas podem ser portadoras sadias do A. suis e que este microrganismo pode competir com microrganismos eventualmente capazes de causar infecção urinária. Por outro lado, observou-se correlação entre hematúria e a presença de A. suis na urina. Deste modo, das 32 porcas que apresentavam hematúria, 75% eram portadoras de A. suis, o que demonstra que quando a infecção urinária é acompanhada de hematúria, geralmente o A. suis está participando da patogenia da infecção. Também foi possível observar correlação entre hematúria e nitritúria. Tendo em vista que o A. suis não transforma nitrato em nitrito, pode-se concluir que infecções urinárias causadas pelo A. suis geralmente são mistas. A cor predominante da urina foi o amarelo claro, tanto para as porcas portadoras ou não portadoras de infecção urinária ou de A. suis. Constatou-se a presença de turbidez em 83,15% das amostras, sendo que em 96,18% das amostras turvas observou-se a presença de cristais. O pH da urina foi de 6,51, não diferindo para as porcas portadoras de infecção urinária ou de A. suis. A densidade média da urina foi de 1,016. Observou-se correlação entre infecção urinária e proteinúria. Foi observado proteinúria em 29,47% das amostras. Constatou-se cristalúria em 54,90% das amostras examinadas. Contudo, não se observou correlação entre infecção urinária e a presença de cristais na urina.

This study evaluated the effect of birth weight and weight gain during the suckling phase on the piglet daily weight gain during the nursery phase (21-61 days of age). Piglets (n= 534) derived from 55 first-parity sows were weighed at birth, weaning, and end of the nursery phase. The data were analyzed according to a completely randomized experimental design, with three classes of birth weight (BW) and two classes of weight gain during the suckling phase (SDWG). High BW and low SDWG piglets were 0.2kg lighter at weaning than low BW and high SDWG animals (P< 0.05). However, at the end of the nursery phase, this situation was inverted, with high BW and low SDWG piglets 2.20kg heavier (P< 0.05). Low BW and high SDWG piglets were heavier at weaning and at the end of the nursery phase than low BW and low SDWG piglets (P< 0.05). At the same time, intermediate and high BW and low and high SDWG piglets presented body weight differences at weaning (P< 0.05), but not at the end of the nursery phase (P< 0.05). Piglets with 1.25 to 2.30kg BW and low weight gain during suckling presented a partial compensatory growth during the nursery phase.

A gastroenterite em leitões lactentes e recém-desmamados representa a principal causa de morbidade e mortalidade durante o período neonatal. A síndrome é caracterizada por infecção entérica multifatorial e multietiológica. Entre as causas infecciosas, o rotavírus (RV) é o principal agente etiológico viral. Por serem mais frequentes, as espécies de rotavírus A (RVA) e C (RVC) são as mais estudadas. No entanto, surtos de diarreia causados por espécies de rotavírus B (RVB) em leitões lactentes estão sendo relatados em rebanhos de suínos das regiões sul e centro-oeste do Brasil. Por sua vez, a espécie de rotavírus H (RVH) foi descrita apenas recentemente na suinocultura brasileira. Os objetivos deste estudo foram avaliar a presença de cepas de RV em um surto de diarreia em leitões lactentes e recém-desmamos que ocorreu em uma granja com programa de vacinação contra patógenos entéricos, incluindo RVA, e realizar a caracterização molecular das cepas de RVB e RVH identificadas. Para isso, três estudos independentes foram realizados. O objetivo do primeiro estudo foi determinar as sequências de nucleotídeos (nt) e de aminoácidos (aa) dos genes que codificam as proteínas VP6, VP7, VP4 e NSP4 de seis cepas de campo identificadas como RVH (BR59, BR60, BR61, BR62, BR63 e BR64) no surto de diarreia. A partir da cepa de RVH suína, SKA-1, primers específicos foram selecionados para amplicação dos genes citados acima. Com base nas altas identidades encontradas entre as sequências de nt (~99%) dos genes VP6, VP4, VP7 e NSP4 entre cinco das cepas estudadas (BR59 a BR63), é possível considerá-las pertencentes a mesma linhagem de RV, denominada RVH / BRA-1. Em contraste, uma vez que a amostra fecal BR64 apresentou uma diferença relativamente alta (81,6% e 83,4% de identidade para nt e aa, respectivamente) na sequência referente à proteína VP7, quando comparada com as outras cinco amostras, a mesma foi denominada cepa RVH / BRA-2. No segundo estudo, com o objetivo de triar todas as amostras diarreicas (n = 50) obtidas no surto para RVA, B, C e H, realizou-se RT-PCR com primers específicos para cada espécie. De acordo com os testes, RVC (78%) foi mais prevalente nas infecções singulares (34%) e mistas (44%), seguido pelo RVA (46%), RVB (32%) e RVH (18%). A análise filogenética de três cepas de RVA permitiu a caracterização de dois genotipos G / P distintos, representados por G5P[13] e G9P[23], diferentemente do G5P[7] presente em vacinas comerciais. Independentemente da espécie de RV, as infecções mistas (54%) foram mais prevalentes do que as infecções por um único agente. RVB e RVH foram detectados apenas em associação com outros grupos de RV, sugerindo uma ação secundária dessas espécies no surto relatado. Finalmente, no terceiro estudo, com base na qualidade do produto amplificado por RT-PCR, a amostra fecal de RVB identificada como BR62, foi selecionada para análises moleculares adicionais. As sequências de nt e aa do gene VP7 foram determinadas e a análise comparativa desta cepa com as cepas dos outros 21 genotipos de VP7 previamente identificados mostraram que a cepa suína brasileira pertence a um novo genotipo, G22, e parece estar circulando em diferentes partes do mundo. Os estudos reforçam o papel dos RV como importantes agentes causadores de diarreia demonstram a variabilidade genética entre as espécies. Além disso, esta é a primeira detecção do genotipo de RVB, G22, em rebanhos suinícolas brasileiros. Gastroenterits in suckling and newly weaned piglets represents the major cause of morbidity and mortality during the neonatal period. The syndrome is a multifactorial and multi etiologic enteric infection. Among the infectious causes, rotavirus (RV) is the main viral etiologic agent. To be more frequent rotavirus species A (RVA) and C (RVC) are most studied. However, outbreaks of diarrhea caused by rotavirus species B (RVB) in suckling piglets are being reported from pig herds of the southern and midwest regions of Brazil. The rotavirus species H (RVH) was only recently described in Brazilian pig farming. The aims of this study was to evaluate the presence of RV strains in suckling and newly post-weaning diarrhea outbreak that occurred in a pig farm with vaccination program against enteric pathogens, including RVA, and perform the molecular characterization of RVB and RVH field strains identified in this diarrhea outbreak. For this, three independent studies were carried out. The objective of the first study was to determine the VP6, VP7, VP4, and NSP4 nucleotide (nt) and amino acid (aa) sequences of six (BR59, BR60, BR61, BR62, BR63, and BR64) RVH field strains identified in the diarrhea outbreak. Specific primers were designed based on the porcine RVH strain SKA-1. Based on the high nt sequence identities (~99%) of the VP6, VP4, VP7, and NSP4 genes among five of the studied specimens (BR59 to BR63), they are considered the same local RV strain denominated RVH/BRA-1. In contrast, once that the fecal sample BR64 showed a relatively high difference (81.6% nt identity and 83.4% aa identity) in the VP7 sequence when compared to the other five specimens it was named RVH/BRA-2 strain. On the second study, with the objective of screening all the diarrheic samples (n = 50) obtained from the outbreak for RVA, B, C, and H, RT-PCR with specific primers were performed. RVC (78%) was the most prevalent group found in single (34%) and mixed (44%) infections, followed by RVA (46%), RVB (32%), and RVH (18%). Phylogenetic analysis of three RVA strains allowed the characterization of two distinct G/P genotypes represented by G5P[13] and G9P[23], different from G5P[7] present in commercial vaccines. Regardless of the RV group, mixed infections (54%) were more prevalent than single infections. Detection of RVB or RVH was associated with the presence of other RV groups, suggesting a secondary action of these RV groups in the reported outbreak. Finally, in the third study, based on the quality of the RT-PCR amplified product, the RVB-positive fecal sample identified as BR62 was selected for further molecular analyses. The VP7 nt and deduced aa sequences were determined and comparative analysis of this strain with the strains of the other 21 previously identified VP7 genotypes showed that the Brazilian porcine RVB strain belongs to a novel G22 VP7 genotype, and seems to be circulating in different parts of the world. The studies reinforce the rule of RV as important diarrhea agents and contribute to show the genetic variability among the species. Additionally, this is the first detection of RVB G22 genotype in Brazilian pig herds.

As doenças vesiculares são de grande importância para a Medicina Veterinária. A febre aftosa, a doença vesicular suína, o exantema vesicular suíno e a estomatite vesicular são doenças vesiculares clássicas de etiologia viral. Na família Picornaviridae estão incluídos o vírus da febre aftosa e o vírus da doença vesicular suína que ocasionam lesões vesiculares em suínos. Entretanto, dois estudos realizados no Canadá e nos EUA a partir de 2008 identificaram uma nova espécie de picornavírus, denominada Senecavirus A, como o mais provável agente etiológico de doença vesicular, similar à febre aftosa, em suínos. No final de 2014 e início de 2015 houve diversos relatos de doença vesicular em suínos nas fases de creche e terminação, além do aumento da incidência de doença multissistêmica em leitões, com altas taxas de mortalidade, nos principais estados brasileiros produtores de suínos. O objetivo deste estudo foi investigar a infecção natural pelo Senecavirus A em suínos de diferentes categorias de produção provenientes de granjas dos estados brasileiros de maior importância para a suinocultura. Para isso foram realizados três estudos. O primeiro estudo teve como objetivo investigar a infecção pelo Senecavirus A em surtos de doença vesicular de origem desconhecida em suínos das categorias de creche e adultos. Um conjunto de primers específico para amplificar um produto de 542 pb da região VP3/VP1 do genoma do vírus foi desenhado para ser utilizado na técnica de RT-PCR. Amostras clínicas de suínos foram coletadas em oito granjas com surto da doença vesicular, incluindo fluido vesicular (n=4), swabs de vesículas rompidas (n=7) e raspados de lesões ulcerativas (n=5). Foram também analisadas raspados de pele (n=52) de suínos assintomáticos provenientes de granjas com e sem histórico da doença. Os agentes virais de doenças vesiculares clássicas foram investigados e não foram detectados. O RNA do Senecavirus A foi detectado em todas as amostras (16/16) provenientes de animais acometidos pela doença vesicular, enquanto nenhuma das amostras de animais assintomáticos foram positivas para o vírus. O segundo e o terceiro estudos descrevem, respectivamente, novas manifestações clínicas associadas ao Senecavirus A assim como os achados patológicos, imunohistoquímicos e moleculares associados à infecção, ambos em leitões neonatos com 1 a 5 dias de idade. No segundo estudo, foram analisadas amostras de órgãos/tecidos (n=81) e de fezes (n=6) de 10 leitões, provenientes de cinco granjas dos estados do Paraná, Santa Catarina e Mato Grosso do Sul. O terceiro estudo é complementar ao segundo e foram incluídas amostras clínicas de mais dois leitões provenientes dos estados de São Paulo e Santa Catarina, totalizando 102 amostras de órgãos/tecidos e 8 amostras de fezes. Todos os leitões incluídos nos estudos manifestaram sinais clínicos de fraqueza, letargia, salivação excessiva, hiperemia cutânea, sinais neurológicos, diarreia e/ou morte espontânea. Em conjunto, os resultados desses dois estudos revelaram que os achados de necropsia mais comuns foram impressão das costelas em pulmões (n=9), glossite diftérica (n=6) e lesões ulcerativas na banda coronária (n=5). A histopatologia revelou pneumonia intersticial (n=12), miocardite (n=6), glossite diftérica (n=3), encefalite (n=3) e atrofia das vilosidades intestinais com vacuolização das células epiteliais superficiais (n=6). A imunohistoquímica com anticorpos monoclonais específicos para Senecavirus A demonstrou imunorreatividade no plexo coróide do cérebro, epitélio degenerado de lesões ulcerativas da língua, uroepitelio do rim e vesícula urinária e nas células superficiais do intestino e em vários tecidos dos leitões; os ensaios moleculares para os outros vírus avaliados apresentaram resultados negativos. Os estudos descrevem pela primeira vez a infecção pelo Senecavirus A fora da América do Norte e sugerem que o vírus seja o agente causal dos surtos de doença vesicular descritos no Brasil, bem como a participação do vírus em múltiplas lesões observadas em leitões neonatos, caracterizando-se como um vírus pantrópico capaz de causar doença multissistêmica em suínos infectados precocemente. Vesicular diseases are of great importance for Veterinary Medicine. Foot-and-mouth disease, swine vesicular disease, vesicular exanthema of swine, and vesicular stomatitis are classical vesicular diseases of viral etiology. In the Picornaviridae family are included the foot-and-mouth disease virus and swine vesicular disease virus that cause vesicular lesions in pigs. However, two studies conducted in Canada and in the United States from 2008 identified a new species of picornavirus, known as Senecavirus A, as the most likely etiological agent of vesicular disease, similar to foot-and-mouth disease, in swine. At the end of 2014 and early 2015 there were several reports of vesicular disease in pigs at nursery and finishing ages, as well as an increasing in the incidence of multisystemic disease in piglets with high mortality rates in the major Brazilian pig-producing states. The objective of this study was to investigate the natural infection by Senecavirus A in pigs of different production categories from herds of the Brazilian states of greater importance for pork industry. Three studies were carried out. The first study aimed to investigate the Senecavirus A infection in outbreaks of vesicular disease of unknown etiology in weaned and adult pigs. A specific primer set for amplifying a 542 bp product from the VP3/VP1 region of the virus genome was designed for use in the RT-PCR technique. Clinical samples of pigs were collected from eight farms with vesicular disease outbreak, including vesicular fluid (n=4), swabs of ruptured vesicle (n=7), and scrapping of ulcerative lesions (n=5). Cutaneous scrappings (n=52) of asymptomatic pigs from farms with and without vesicular disease history were also analyzed. The viral agents of classic vesicular diseases were investigated and were not detected. Senecavirus A RNA was detected in all samples (16/16) of vesicular disease-affected animals, while none of the samples from asymptomatic pig were positive for the virus. The second and third studies describe, respectively, new clinical manifestations associated with Senecavirus A and pathological, immunohistochemical, and molecular findings associated with infection, both in neonatal piglets at 1 to 5 days of age. In the second study, organ/tissue samples (n=81) and feces (n=6) of 10 piglets from five herds of the states of Paraná, Santa Catarina, and Mato Grosso do Sul were analyzed. The third study is complementary to the second, and clinical samples of two more piglets from the states of São Paulo and Santa Catarina were included, totalizing 102 organ/tissue samples and 8 fecal samples. All piglets included in the studies showed clinical signs of weakness, lethargy, excessive salivation, cutaneous hyperemia, neurological signs, diarrhea, and/or spontaneous death. Overall, the results of these two studies revealed that the most common necropsy findings were faint rib impressions on the pleural surface of the lungs (n=9), diphtheritic glossitis (n=6), and ulcerative lesions at the coronary band (n=5). Histopathology revealed interstitial pneumonia (n=12), myocarditis (n=6), diphtheritic glossitis (n=3), encephalitis (n=3), and atrophy of intestinal villi with vacuolation of the superficial epithelial cells (n=6). Immunohistochemistry with monoclonal antibodies specific for Senecavirus A demonstrated immunoreactivity of the choroid plexus of the cerebrum, degenerate epithelium of ulcerative lesions of the tongue, the urothelium of the kidney and urinary bladder, and the superficial cells of the intestine and in various tissues of the piglets. The molecular tests for the other viruses evaluated showed negative results. The studies describe for the first time the infection by Senecavirus A outside of North America and suggest that the virus is the causative agent of the outbreaks of vesicular disease described in Brazil, as well as the participation of the virus in multiple lesions observed in neonatal piglets, characterizing as a pantropic virus able to produce a multisystemic disease entity in pigs infected at an early age.

A 1ª etapa do 1° projeto objetivou verificar se camundongos se infectam com fezes de suínos inoculados com L. intracellularis. Camundongos (C1) ou (C2) foram expostos à fezes de suínos infectados ou negativos, respectivamente. Os camundongos foram testados pela nested-PCR e IHQ. A segunda etapa objetivou induzir contaminação de suínos com fezes de camundongos inoculados com o agente. Foram expostos 12 suínos às fezes dos camundongos positivos (S1) e dois à fezes negativas (S2). Os suínos foram testados pela sorologia, PCR e IHQ. A nested-PCR dos C1 foi positiva em pelo menos uma coleta e três C1 foram IHQ positivos. Onze suínos S1 foram positivos na PCR, nove soroconverteram e cinco foram positivos na IHQ. O segundo projeto objetivou padronizar a técnica IPMC para detecção de anticorpos anti-L. intracellularis em FO. Suínos foram separados em controle (T1) e inoculados com L. intracellularis (T2). Amostras individuais e coletivas de FO e sangue foram coletadas, testadas pela IPMC para detectar IgG no soro e IgA e IgG em FO. A maior porcentagem de animais positivos para IgA e IgG no FO foi na 5ª semana. A sensibilidade da IPMC foi de 84,62% para IgA e 88,46% para IgG no FO e 100% no soro, com especificidade de 100%. Houve alta concordância entre FO individual e baias. Conclui-se que camundongos são capazes de se infectar e eliminar o agente em quantidade suficiente para infectar suínos, e que FO possui potencial para ser utilizado como alternativa ao soro na detecção de IgG anti-L. intracellularis This thesis was divided in two studies. The first part of first study aimed to check if mice could be infected by feces from L. intracellularis infected pigs. Thirty-four mice received feces of experimentally infected pigs (C1) and 11 received feces from negative pigs (C2). Mice were test by nested-PCR and immunohistochemistry (IHC). The second aimed to test if pigs could be infected when exposed to infected mice. Twelve pigs received positive mice feces (S1), and 2 received negative mice feces (S2). Pigs were tested by serology, PCR and IHC. C1 mice were nested-PCR positive at least one collection and 3 mice were IHC positive. Ten S1 were PCR positive, 9 seroconverted and 5 were IHC positive. The second study aimed to investigate the presence of IgA and IgG anti-L. intracellularis in oral fluid (OF) samples. Pigs were separate into control (T1) and inoculated groups (T2). Blood and OF samples were collected from each animal and pen. These samples were tested by immunoperoxidase monolayer assay (IPMA) for detection IgG in serum and IgA and IgG in OF. The IPMA showed 84.62% of sensitivity in detection of IgA, 88.46% in IgG in OF and 100% in serum, and specific was 100% in both samples. There was high agreement between the individual and pen OF. In conclusion, this thesis demonstrated that mice may be infect and eliminate the agent in sufficient quantity to infect pigs. And, OF samples might be useful for profiling herds, but on farm experiments are still pending.

Projeto/Plano de Ação: 11.11.11.111.

Com o objetivo de avaliar os efeitos sistêmicos da contaminação por micotoxinas, enfatizando aspectos imunológicos e morfológicos, dois experimentos foram realizados. No primeiro experimento, 24 leitões de 5 semanas de idade foram divididos em 4 grupos, cada um recebendo dieta controle, dieta contaminada com 2,8 mg/Kg DON ou 5,9 mg/Kg FB ou 6,5 mg/Kg DON+FB. Os animais foram imunizados com ovalbumina no 4º e 16º dia e amostras de sangue foram coletadas. Após 35 dias, os animais foram eutanasiados. Amostras de tecidos foram coletadas e fixadas em formol 10% e em nitrogênio líquido a -80ºC. Com as amostras de sangue, realizaram-se exames hematológicos, bioquímicos e imunológicos. As amostras de tecidos fixadas em formol 10% foram submetidas a processamento histológico e imunoistoquímico, enquanto que as amostras congeladas foram submetidas a Western Blot e PCR para avaliação da expressão de proteínas de junção e citocinas. No segundo experimento foram utilizados dois modelos experimentais. No modelo in vivo, 24 leitões de 4 semanas de idade foram distribuídos em 2 grupos. Durante 28 dias, um grupo recebeu dieta controle e o outro dieta contaminada com 2,3 mg/Kg DON. Ao término do experimento, seis animais de cada grupo foram eutanasiados e amostras de jejuno e íleo foram coletadas e fixadas em formol a 10% e em nitrogênio líquido a -80ºC. Para realização do modelo ex vivo foram eutanasiados seis animais de 4 semanas de idade para a obtenção dos explantes jejunais, os quais foram expostos a 5 e 10µmol/L de DON durante 4 horas, sob agitação constante a 39ºC. Após a incubação, estes foram fixados em formol 10% ou nitrogênio líquido a -80ºC. Com as amostras obtidas nos 2 modelos experimentais foram realizadas as técnicas de Western Blot e histopatologia, para avaliação da expressão de MAPK’s e morfologia intestinal. A ingestão de dietas contaminadas com 2,8 mg/Kg de DON induziu ao aumento da expressão de citocinas de jejuno e íleo, enquanto que a ingestão de dietas contaminadas com 5,9 mg/Kg de FB aumentou a expressão de citocinas no íleo. Nos animais que ingeriram dietas contaminadas com 6,5 mg/Kg DON+FB houve uma diminuição na resposta imune sistêmica. Alterações morfológicas em fígado, pulmão, rins e intestinos foram observadas em animais que ingeriram as micotoxinas de forma isolada ou em associação. A expressão das proteínas de junção E-caderina e Ocludina diminuiu significativamente nos animais que ingeriram dietas contaminadas com 2,8 mg/Kg DON e 6,5 mg/Kg DON+FB. No segundo experimento, os dados obtidos no modelo ex vivo demonstraram a capacidade de DON, nas doses de 5 e 10 µmol/L, de provocar lise de enterócitos, edema intersticial e fusão de vilosidades. Em ambos os modelos experimentais, verificou-se que DON ativou a expressão das MAPK’s p44/42 ERK ½ e phospho p38, não sendo observada a ativação de SAPK/JNK. Em conclusão, os dados obtidos indicam que a ingestão de dietas mono ou co-contaminadas induziram alterações morfológicas e imunológicas que podem predispor os animais a infecções secundárias. Two experiments were conducted in order to evaluate the systemic effects of mycotoxin contamination, emphasizing morphological and immunological aspects. In the first study, 24 5-week-old piglets were divided into four groups, each group receiving a diet: one diet negative control and 3 diets contaminated with 2.8 mg/Kg DON, 5.9 mg/Kg FB and 6.5 mg/Kg DON + FB respectively. The animals were immunized with ovalbumin on the 4th and 16th days and blood samples were collected. After 35 days, the animals were euthanized. Tissue samples were collected and fixed in 10% formalin and in liquid nitrogen at -80 °C. The blood samples were used in hematological, biochemical and immunological tests. The tissue samples fixed in formaldehyde 10% were subjected to histological and immunohistochemical processing while the frozen samples were subjected to Western Blot and PCR to evaluate the expression of junction proteins and cytokines. In the second experiment, an in vivo study, twenty four 4-weeks-old piglets were distributed into two groups. For 28 days, one group received a control diet and the other a diet contaminated with 2.3 mg/Kg DON. At the end of the experiment, six animals from each group were euthanized. Samples of jejunum and ileum were collected and fixed in 10% formalin and in liquid nitrogen at -80°C. Using the ex vivo model , six 4-week-old animals were euthanized to obtain jejunal explants, which were exposed to 5 and 10μmol/L of DON for 4 hours, under constant stirring at 39°C. After incubation, these were fixed in 10% formalin and in liquid nitrogen at -80°C. The samples obtained from the two experimental models were analyzed with western blot techniques and histopathology, to evaluate the expression of MAPK's and intestinal morphology. Ingestion of diets contaminated with 2.8 mg /Kg DON induced increased expression of cytokines in the jejunum and ileum, whereas the intake of diets contaminated with 5.9 mg/Kg FB increased the expression of cytokines in the ileum. In animals fed diets contaminated with 6.5 mg/Kg DON + FB there was a decrease in systemic immune response. Morphological changes in liver, lung, kidneys and intestines were observed in animals fed mycotoxins in isolation or in combination. The expression of junction protein e-cadherin and ocludin decreased significantly in animals fed diets contaminated with 2.8 mg/Kg DON and 6.5 mg/Kg DON + FB. In the second experiment, the data obtained in the ex vivo model demonstrated the ability of DON, at doses of 5 and 10 μmol/L, to cause lysis of enterocytes, interstitial edema and fusion of villi. In both experimental models, it was observed that DON activated the expression of MAPK’s p44/42 ERK ½ and phospho p38, with no observed activation of SAPK/JNK. In conclusion, these data indicate that intake of mono or co-infected diets induced morphological and immunological changes that may predispose animals to secondary infections.