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FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais A laringotraqueíte infecciosa (LTI) é uma doença viral respiratória altamente contagiosa, que acomete galinhas e frangos de todas as idades. No ano de 2010, foi descrito um surto de LTI em Minas Gerais, envolvendo 27 granjas de postura e interdição da movimentação de aves da região. A agência governamental de saúde avícola autorizou e implementou a utilização de vacinas recombinantes vetorizadas HVT-LT e FPV-LT para o controle da LTI na região. Entre os anos de 2014 a 2018, avaliou-se em condições de campo a influência destas vacinas no controle da LTI utilizando diferentes protocolos vacinais. Este é o primeiro estudo de campo com longa duração avaliando a eficácia do uso de vacinas recombinantes vetorizadas em uma região com alta densidade de aves com múltiplas idades. Foram examinadas amostras de 1.284 aves, provenientes de coletas programadas (vigilância ativa) e das coletas por notificação (vigilância passiva). Novecentas e vinte e três aves (vigilância ativa) foram analisadas pela PCR da traqueia (TQ) e dos gânglios dos nervos trigêmeos (GTs). Em 278 (28,86%) aves detectou-se DNA do VLTI na TQ, GTs ou ambos. Nestas mesmas aves, foi realizada a histopatologia dos tecidos respiratórios e conjuntiva. Em seis (0,66%) aves foram encontradas lesões consistentes com LTI e em duas aves obteve-se resultado positivo para o VLTI por PCR da TQ. Trezentas e onze (311/963) aves foram avaliadas por ELISA. Em 173 (55,6%) aves, títulos variáveis de anticorpos anti- VLTI foram detectados. Destas 311 aves, uma foi positiva na avaliação histopatológica, PCR da TQ e sorologia, 41 foram positivas tanto na sorologia quanto na PCR, com ausência de lesões histológicas, e 185 foram positivas por ELISA ou PCR na ausência de lesões histológicas. Oitenta e quatro aves foram negativas em todos os testes. Das 321 aves amostradas por vigilância passiva, 124 (38,62%) apresentaram lesões histológicas compatíveis ou consistentes com LTI. Quando avaliados estatisticamente os resultados dos exames de PCR, a proporção de aves positivas e negativas foi diferente entre os anos (p

A recent (November 2010) outbreak of infectious laryngotracheitis (ILT) in a multi-age laying hen facility in Minas Gerais state, Brazil, is described. Previous ILT outbreak in laying hens was only notified in São Paulo state, Brazil, in 2002. In the outbreak described here, the affected population was approximately eight million hens, with flock sizes ranging from 100,000 to 2,900,000 chickens. The average mortality ranged from 1 to 6%, and morbidity was around 90% (most of the twenty seven farms of the area were positive for ILT virus). Three multi-age laying farms from one company were selected for this report. Clinical signs included prostration, dyspnea, conjunctivitis, occasional swelling of the paranasal sinuses and bloody mucous nasal discharge. Severely affected chickens presented with dyspnea, gasping and became cyanotic before death. At necropsy, these chickens had fibrinous exudate blocking the larynx and the lumen of cranial part of the trachea. In addition, conjunctivitis with intense hyperemia, edema and sinuses with caseous exudate were present. On histopathology, there were marked necrosis and desquamation of respiratory ephitelium and conjunctiva with numerous syncytial cells formation and fibrinous exudate. Moderate to marked non suppurative (especially lymphocytes and plasma cells) infiltration in the lamina propria also was observed. Sixteen out of 20 examined chickens, eosinophilic intranuclear inclusion bodies were observed in the syncytial cells. The DNA extracted from larynx and trachea produced positive PCR results for ILT virus (ILTV) DNA using formalin-fixed, paraffin embedded (FFPE) samples. Amplicons from a small region of ICP4 gene were submitted to sequencing and showed 100% identity with ILTV EU104910.1 (USA strain), 99% with ILTV JN596963.1 (Australian strain) and 91% with ILTV JN580316.1 (Gallid herpesvirus 1 CEO vaccine strain) and JN580315.1 (Gallid herpesvirus 1 TCO vaccine strain).

A bronquite infecciosa das galinhas (BIG) e responsavel por altas perdas financeiras na industria avicola brasileira. O objetivo desse estudo foi verificar o comportamento dos titulos de anticorpos especificos para o virus da bronquite infecciosa em poedeiras comerciais de varias empresas avicolas. Os soros foram coletados de 76 lotes provenientes de oito empresas durante o periodo de junho de 1998 a junho de 2001 no Estado do Ceara. Entre a primeira e a segunda coleta nao houve vacinacao. As aves das diversas empresas e lotes receberam o mesmo programa vacinal e foram submetidas a duas coletas de sangue (10 amostras/lote) com um intervalo medio de cinco semanas. Os titulos de anticorpos foram medidos atraves do teste de ELISA indireto. Para analise dos dados utilizou-se a analise de variância ANOVA e a comparacao entre as coletas de sangue o teste t de Student com p

A laringotraqueíte infecciosa (LTI) é uma doença que acomete o aparelho respiratório de galinhas. Em novembro de 2010, foi notificada sua ocorrência no sul do Estado de Minas Gerais. Visando a necessidade de controle da doença, foram realizadas coletas periódicas programadas em 17 das 27 granjas da região. No total, 159 galinhas de postura de idades múltiplas foram necropsiadas, sendo coletadas amostras de seios e conchas nasais, laringe, traqueia, pulmões, conjuntiva e encéfalo para posterior processamento histopatológico. Para extração de DNA, foram coletados apenas traqueia e gânglio trigêmeo, e em seguida era procedida a PCR. Durante a vigência do projeto (2012-2013), ocorreram três episódios isolados (em diferentes momentos) sugestivos de LTI, relacionados com a introdução de aves não vacinadas. As galinhas foram examinadas por veterinários do Instituto Mineiro de agropecuária (IMA), e amostras foram coletadas e enviadas ao laboratório de patologia da UFMG (um total de 18 galinhas). Cinco amostras positivas para o vírus da LTI (GaHV-1), incluindo uma amostra de estudos anteriores (2011), tiveram fragmentos do genoma sequenciados. Dois fragmentos para o gene ICP4, e um fragmento para o gene TK, onde foram alinhados a outras estirpes depositadas no GenBank. As galinhas coletadas durante as visitas foram examinadas também quanto à presença de lesões histopatológicas sugestivas de outros patógenos respiratórios, e à PCR foram pesquisados Mycoplasma gallisepticum e Mycoplasma synoviae. Um fragmento da região intergênica (IGSR) e um fragmento do gene mgc2, do genoma do M. gallissepticum, foram sequenciados e caracterizados. Dezoito codornas (Coturnix japonica) de postura da região também foram avaliadas quanto à presença de lesões para LTI à histopatologia, assim como para DNA viral à PCR. As galinhas coletadas durante as visitas programadas às granjas apresentaram lesões inespecíficas, e apenas quatro apresentaram células sinciciais à histopatologia, porém sem corpúsculo de inclusão. Já as galinhas enviadas pelo IMA, apresentaram lesões compatíveis com LTI, que consistiam em laringite e traqueíte fibrinosa aguda difusa moderada associada a descamação do epitélio e fusão de células epiteliais formando sincícios contendo corpúsculo de inclusão intranuclear. As amostras sequenciadas tiveram 100% de identidade entre elas, não havendo alteração nos fragmentos analisados durante três anos consecutivos (2011, 2012 e 2013). Além disso, as estirpes de Minas Gerais apresentaram mutações não sinônimas quando comparadas com as estirpes de um surto ocorrido em 2002, em São Paulo. As sequências obtidas não foram caracterizadas como de origem vacinal por não apresentaram as deleções observadas nas vacinas vivas atenuadas (CEO e TCO). Na análise do fragmento do gene TK não foi observada a mutação na posição 252 do gene, de uma treonina para metionina (relacionada a maior virulência da estirpe). Os achados epidemiológicos (baixa mortalidade e morbidade) associados à análise molecular do gene TK sugeriram que as estirpes eram de menor virulência. As vacinas vectoradas para LTI (FPV e HVT) foram implementadas na região em Agosto de 2011, porém, como esta alternativa começou a ser testada pela primeira vez no Brasil, tornou-se extremamente importante o seu acompanhamento. A introdução das vacinas vectoradas foram efetivas em reduzir a infecção viral, prevenindo a doença clínica e reduzindo a presença do DNA viral, especialmente no gânglio trigêmeo. Dentre as coinfecções observadas, a micoplasmose foi a principal, e a partir do sequenciamento de fragmentos do genoma, o M. gallisepticum foi caracterizado com alta variação nucleotídica entre as estirpes. As codornas não apresentaram lesões para GaHV-1 e os tecidos foram negativos à PCR, sugerindo que estas não estão envolvidas na manutenção do vírus na área. Embora a região não tenha apresentado outros surtos significativos de LTI, os resultados indicam que o vírus ainda encontra-se presente e circulante entre as aves e as granjas. Medidas de biosseguridade devem ser adotadas, e visam reduzir ou impedir oportunidades de disseminação do vírus. Além disso, o programa de vacinação deve ser uniforme para evitar a infecção de aves susceptíveis e a ocorrência de doença clínica, e este deveria ser estendido não só as aves comerciais, como também às aves de subsistência. Infectious laryngotracheitis (ILT) is a disease that affects the respiratory tract of chickens. In November 2010, its occurrence has been reported in southern Minas Gerais. For control of the disease, regular scheduled collections of tissues in 17 of the 27 farms in the area were carried out. In total, 159 laying hens of multiple ages were necropsied, and samples of sinuses and nasal turbinates, larynx, trachea, lungs, brain and conjunctiva were collected for further histological processing. For DNA extraction only trachea and trigeminal ganglion were collected, and then PCR was performed During the period of the project (2012-2013), three isolated episodes (at different times) suggestive of ILT, related to the introduction of unvaccinated birds occurred. The chickens (total of 18) were examined by veterinarians of Instituto Mineiro de Agropecuária (IMA), and samples were collected and sent to the pathology laboratory at UFMG. Five positive samples for ILT virus (GaHV -1), including a sample from previous studies (2011), had their genome fragments submitted to sequencing. Two fragments of ICP4 gene and a fragment of TK gene, which have been aligned to other strains, were deposited in GenBank. The chickens collected during the visits were also examined for the presence of histopathological lesions suggestive of other respiratory pathogens, and PCR was performed for Mycoplasma gallisepticum and Mycoplasma synoviae. Specific regions of the M. gallisepticum genome, a fragment of the intergenic region (IGSR) and a fragment of mgc2 gene, were sequenced and characterized. Eighteen egg-laying quails (Coturnix japonica) of the region were also evaluated for the presence of lesions for ILT by histopathology, as well as PCR for viral DNA. The chickens collected during scheduled visits to the farms had nonspecific lesions, and only four showed syncytial cells at histopathology, but without intranuclear inclusion bodies. On the other hand, chickens sent by IMA showed lesions compatible with ILT, which consisted of acute moderate diffuse fibrinous laryngitis and tracheitis associated with desquamation of epithelium and fusion of epithelial cells forming syncytia containing intranuclear inclusion bodies. The samples were sequenced and 100 % identity was observed among them, with no change in the fragments analyzed for three consecutive years (2011, 2012 and 2013). Furthermore, strains of Minas Gerais showed non-synonymous mutations compared with strains from an outbreak occurred in 2002, in São Paulo. The sequences obtained were not characterized as vaccine strains because no deletions were seen, in contrast to the sequence of the live attenuated vaccines (CEO and TCO). In the analysis of the TK gene fragment , mutation were not observed at position 252 of the gene for a threonine to methionine (related to the increased virulence of the strain). The epidemiological findings (low mortality and morbidity) associated with molecular analysis of the TK gene suggested less virulent strains. The vector vaccines for ILT (HVT and FPV) were implemented in the region in August 2011; however, as this alternative began to be tested for the first time in Brazil, it has become extremely important to monitor the birds from that area. The introduction of vector vaccines was effective in reducing viral infection, preventing clinical disease and reducing the presence of viral DNA, especially in the trigeminal ganglion. Among the co-infections observed, mycoplasmosis was the most prevalent, and from the sequencing of genomefragments, the M. gallisepticum was characterized with high nucleotide variation among the strains. No lesions to GaHV-1 were observed in tissue of quails by histopathology and in addition, all of them were negative by PCR, suggesting that they are not involved in the maintenance of the virus in the area. Although no other significant outbreaks of ILT was reported in the area, these results indicate that the virus is still present and circulating among birds and poultry farms. Biosecurity measures must be adopted with the aim to reduce or prevent chances of spreading the virus. Moreover, the vaccination program should be uniform in order to avoid infection of susceptible birds and the occurrence of clinical disease, and this should be extended not only to commercial poultry, but to backyard chickens as well.

A laringotraqueíte infecciosa (LTI) é uma doença do aparelho respiratório de galinhas que possui distribuição mundial sendo responsável por grandes perdas econômicas. Em novembro de 2010, o Instituto Mineiro de Agropecuária (IMA) notificou pela primeira vez ao MAPA (Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento) uma suspeita da doença no sul do Estado de Minas Gerais que posteriormente foi confirmada nos municípios Itanhandu, Pouso Alto, Passa Quatro, Itamonte e Pedralva, pertencentes às Terras Altas da Mantiqueira. Alguns dados epidemiológicos foram coletados e realizadas necropsias de aves com sinais clínicos respiratórios e coletadas amostras de laringe, traqueia, pulmão, conjuntiva, conchas e seios nasais, gânglio trigêmio e encéfalo de 78 galinhas de granjas de postura comercial da região onde ocorreu o surto. Amostras dos mesmos tecidos de 12 galinhas de subsistência e suabes laringotraqueais de outras 21 galinhas dessa região também foram coletadas. Além disso, foram coletadas amostras de tecidos de 18 galinhas de outras regiões do Estado de Minas Gerais. A imuno-histoquímica foi realizada em tecidos de 30 das 78 aves de postura comercial utilizando um anticorpo monoclonal específico para a glicoproteína gJ do envelope viral. Para a extração de DNA, foram utilizados tecidos fixados em formol e embebidos em parafina das 78 galinhas de postura comercial, de 8/12 galinhas de subsistência, 10/18 galinhas de outras regiões do Estado de MG e também das amostras de suabes laringo-traqueais. A reação em cadeia pela polimerase (PCR) foi realizada utilizando primers que amplificam um produto de 237 pares de base correspondentes a uma região diplóide invertida do gene ICP4. Duas amostras fixadas e duas de suabe foram encaminhadas para sequenciamento e alinhadas a outras cepas depositadas no GenBank. Os sinais clínicos caracterizaram-se por dificuldade respiratória, tosse, espirros, secreção nasal, por vezes sanguinolenta, apatia e em algumas aves, aumento de volume dos seios paranasais e da conjuntiva. A mortalidade observada variou de 1% a 6% entre as diferentes granjas. À necropsia, algumas aves apresentaram laringite e traqueíte fibrinosa aguda difusa moderada; outras apresentaram laringite e traqueíte fibrino-necrótica (diftérica) aguda moderada além de formação e acúmulo de material necrótico amarelado obstruindo a laringe. Foram observadas também lesões fibrinonecróticas nos seios nasais e conjuntiva. Na histopatologia, observou-se lesão caracteristica de LTI em 25/78 (32%) laringes e traqueias, caracterizadas por hiperplasia e descamação do epitélio e fusão de células epiteliais formando sincícios contendo corpúsculo de inclusão intranuclear. Em 15/78 (19%) aves observaram-se células sinciciais com corpúsculo de inclusão intranuclear nos seios paranasais e, na conjuntiva de 24/78 (30%) aves, essas células também foram observadas. Nos pulmões, observou-se lesão característica de LTI em 21/78 (26%) aves. Na imuno-histoquímica, detectou-se marcação positiva no citoplasma de sincícios com corpúsculo de inclusão e também em algumas células aparentemente normais nos quatro tecidos testados- laringe/traqueia, conjuntiva, pulmão e seios paranasais. Observou-se maior sensibilidade da PCR no diagnóstico de LTI quando comparado à histopatologia. As estirpes enviadas para sequenciamento tiveram 100% de identidade com uma estirpe dos Estados Unidos (EU104910.1); 99% com uma da Austrália (JN596963.1) e 91% com estirpes vacinais CEO (JN580316.1) e TCO (JN580315.1). O tecido onde se observou maior incidência de lesões características de LTI foi a laringe/traqueia; porém, além de lesões na traqueia, observou-se também em várias aves lesões nos pulmões, seguidos pelos seios nasais e conjuntiva. A validação da PCR em material fixado em formol e embebido em parafina oferece a vantagem de permitir o teste em tecidos fixados por formol, que viabiliza estudos retrospectivos e alternativa de conservação onde não há congelamento adequado. O alinhamento da sequencia LTI BRASIL/2011/UFMG (KC182579) mostrou algumas diferenças em nível de nucleotídeos que determinaram também diferenças em nível de aminoácidos (mutações) quando comparada às sequencias das estirpes vacinais TCO e CEO. Porém, sequenciamentos futuros de regiões maiores do gene ICP4 devem ser feitos para determinar se há correlação entre a estirpe envolvida no surto de LTI no sul de MG e outras estirpes selvagens e vacinais. Infectious laryngotracheitis (ILT) is a respiratory disease of chickens that has worldwide distribution resulting in severe economic losses. In November 2010, the Instituto Mineiro de Agropecuária (IMA) notified the MAPA (Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento) a suspicion of the disease in the southern state of Minas Gerais, which later was confirmed. The municipalities involved, included Itanhandu, Pouso Alto, Passa Quatro, Itamonte and Pedralva, belonging to the Highlands of Mantiqueira. Some epidemiological data were collected, necropsies of birds with respiratory clinical signs were performed and samples from larynx, trachea, lung, conjunctiva, turbinates and sinuses, trigeminal ganglia and brain of 78 chickens from laying hens farms in the area where the outbreak occurred were collected. Samples from the same tissues from 12 backyard chickens and laryngotracheal swabs from other 21 commercial chickens of this region were also collected. Additionally, tissue samples were collected from 18 chickens in other regions of the Minas Gerais state. Immunohistochemistry on 30 out 78 tissues from commercial laying hens was performed using a monoclonal antibody specific for the protein gJ. For DNA extraction, formalin fixed and paraffin embedded (FFPE) tissues from 78 commercial laying hens, eight backyard chickens and chickens from other regions of Minas Gerais state were used. Also, laryngotracheal swabs were made and used for DNA extraction. Later, polymerase chain reactions (PCR) were made using primers that amplify a product of 237 base pairs corresponding to a region of reversed diploid gene ICP4. Two FFPE and two swabs samples were sent for sequencing and aligned to other strains deposited in GenBank. Clinical signs were characterized by difficulty breathing, coughing, sneezing, nasal discharge, sometimes bloody, apathy and in some birds, swelling of the sinuses and conjunctiva. Mortality varied from 1% to 6% between different farms. At necropsy, some chickens had diffuse moderate acute fibrinous laryngitis and tracheitis; others had acute laryngitis and tracheitis fibrino-necrotic (diphtheric membrane) or formation and accumulation of yellowish necrotic material obstructing the larynx. Fibrinonecrotic lesions were also observed in the sinuses and conjunctiva. Histopathology revealed lesions characteristic of ILT in 25/78 (32%) larynx and trachea, characterized by hyperplasia and desquamation of the epithelium and fusion of epithelial cells forming syncytia containing intranuclear inclusion body. In 15/78 (19%) birds were observed syncytial cells with intranuclear inclusion body in the paranasal sinuses, and in 24/78 (30%) birds these cells were also observed in the conjunctiva. In the lung, 21/78 (26%) birds had ILT characteristic lesions. In the immunohistochemistry, positive marker was detected in the cytoplasm of syncytia cells, which inclusion body cells were visualized and also in some no syncytial cells of the four tested tissues. For PCR test, we observed a higher sensitivity for the diagnosis of ILT compared to histopathology. Samples sent for sequencing had 100% identity with United States (EU104910.1) strain, 99% with Australia (JN596963.1) strain and 91% with vaccine strains CEO (JN580316.1) and TCO (JN580315.1) strains. The tissue with more incidences of ILT characteristics lesions was the larynx/trachea. Nevertheless, lesions also were observed in the lungs and sinuses followed by conjunctiva. Validation of PCR on FFPE tissues offers the advantage of allowing the test tissue fixed by formalin, which enables retrospective and conservation alternative where there is no appropriate freezing. The sequence alignment of ILT BRASIL/2011/UFMG (KC182579) showed some differences in nucleotide that determined differences in the level of amino acid sequences (mutations) compared to the TCO and CEO vaccine strains. However, future sequencing of larger regions of the ICP4 gene should be made to determine if there is relation between the strain involved in the outbreak in southern LTI MG and other wild and vaccine strains.

Os estudos sobre o comportamento das aves, principalmente as galinhas, datam de 1912, quando o gênero Gallus passou a ser estudado com mais intensidade na área da Genética. Tais estudos eram simplesmente filosóficos até o início da década de 80, quando uma nova era da produção industrial avícola surgiu, objetivando um maior volume de produção econômica em todas as áreas de exploração. Esse objetivo reativou de maneira científica os estudos de comportamento das aves face à tecnologia de produção empregada nos sistemas de exploração, tornando-os mais acentuados já na década de 90, culminando com um simpósio internacional realizado nos Estados Unidos onde foram traçados os objetivos ou linhas de pesquisas na exploração avícola. O intuito era evitar problemas com os movimentos ambientalistas, traçando novos rumos para uma produção eficiente sem interferir no comportamento das aves já no início do novo milênio. Esta revisão, tem como objetivo principal uma análise científica e filosófica sobre o comportamento das aves em diversos métodos de exploração. Studies on poultry behavior initiated in 1972, at that time, fowls from Gallus domesticus species were the most important animal for the initial studies of Genetic. Since then, just the philosophical concepts where involved in those studies. However, at the beginning of 80 decade, these studies were intensified taking into account technological approaches for an economical industrial poultry production. Meanwhile, the reactions from activists involved in the behavior of the animal subjected to production became more strong at the beginning of 90's as well as those studies on chicken behavior. Finally, in 1998, an international symposium, promoted by chicken behavior scientists were held in the United States, in order to establish new methods of exploitation of poultry without interfering in its normal behavior, at the beginning of new millenium. The main objective of this article is concerned to philosophical and scientific aspects of poultry behavior under different systems of production.