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Fusarium oxysporum es el hongo fitopatógeno de suelo causante de la marchitez vascular, una enfermedad fúngica que origina importantes pérdidas económicas en una gran variedad de cultivos de interés agronómico. F. oxysporum f. sp. dianthi (Fod) es la ‘forma specialis’ que causa la marchitez vascular en clavel (Dianthus caryophyllus). Actualmente no existe ningún método de control eficiente para esta enfermedad, y por ello diversos estudios se han dirigido a la búsqueda de nuevas herramientas de control, incluyendo la utilización de micovirus como agentes de control biológico de los hongos fitopatógenos. Los micovirus son virus que infectan hongos. Estos virus se han descrito infectando a la mayoría de grupos taxonómicos de hongos, incluyendo hongos fitopatógenos. La mayoría de estos virus poseen genomas de ARN, de doble cadena (dsRNA) o de cadena sencilla (ssRNA), aunque se han descrito unos pocos con genomas de ADN circular (ssDNA). Generalmente, los micovirus carecen de una vía de infección extracelular, y solo se transmiten entre aislados mediante anastomosis hifal (transferencia horizontal), o durante la producción de esporas (transferencia vertical). La mayoría de las infecciones por micovirus son crípticas, es decir, no tienen un efecto sobre su huésped fúngico, pero en algunos casos la infección viral se ha asociado a la alteración de determinados caracteres fenotípicos, siendo el de mayor relevancia la reducción de la virulencia (hipovirulencia). En estudios recientes se ha identificado y caracterizado el micovirus ‘Fusarium oxysporum f. sp. dianthi virus 1’ (FodV1), detectado infectando una cepa de F. oxysporum f. sp. dianthi. Hasta el momento, FodV1 es el único micovirus de F. oxysporum que ha sido asociado a la inducción de hipovirulencia. En esta tesis se ha usado la microscopia laser confocal y dos cepas isogénicas de Fod, infectada y no infectada con FodV1, marcadas ambas con el gen que expresa la proteína fluorescente GFP, para analizar el efecto del micovirus sobre el patrón de colonización fúngica en el sistema vascular de la planta. Los resultados obtenidos han demostrado que la infección por FodV1 produce una disminución en la velocidad y una restricción en la distribución espacial de la colonización fúngica en el interior de la planta. Además, también se ha analizado la incidencia de infecciones por FodV1 en una colección de 221 aislados de Fod obtenidos entre 2008 y 2012 en la misma área geográfica que la cepa originalmente infectada, observándose finalmente una baja incidencia de la infección viral entre los aislados analizados (

Interestingly, a microarray analysis identified an important overlap in the genes under Vst1 and Vph1 regulation. We propose that different downstream targets allow the fungus to regulate particular aspects of morphogenesis and virulence through the same pathways. The specific role and putative connection with other components of the signalling pathways of each TF characterized will be discussed., The soildborne pathogen Verticillium dahliae poses a threat to many important crops worldwide. V. dahliae produces highly durable structures, the microsclerotia, which germinate in the presence of root exudates from the host, producing hyphae that penetrate the root cortex. Upon reaching the xylem, a combination of sporulation and filamentous growth is thought to contribute to vascular colonization. A number of genes have been identified whose alteration affects both virulence and microsclerotium development. This led to postulate that these processes are inextricably linked and co-regulated. Two major signalling pathways, MAPK cascades and cAMP signalling, have been implicated in the regulation of morphogenesis and virulence in fungi. In this work, we functionally characterized three regulatory proteins which are potential downstream targets of these regulatory pathways, revealing that microsclerotium development and virulence can be fully uncoupled. Thus, deletion of the APSES transcription factor (TF) gene vst1 abolished microsclerotium production and altered sporulation processes but did not diminish the ability of the fungus to colonize the host. By contrast, deletion of vph1, a putative homolog of the major target of MAPK signalling ste12, did not affect vegetative growth but rendered strains avirulent. Deletion of vhb1, encoding a protein similar to homeobox TFs involved in sporulation and putative targets of cAMP signalling, greatly impacted sporulation but not microsclerotium development and also rendered strains avirulent. Confocal microscopy showed that ∆vph1 could not penetrate the root cortex while ∆vhb1 was impaired in its ability to proliferate in the xylem.