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La sangre o tejido sanguíneo es un tejido líquido que está contenido y circula por los vasos que forman parte de un sistema tubular cerrado, el sistema circulatorio cardiovascular, y se mantiene en movimiento regular impulsada por la contracción del corazón. Este capítulo describe sus componentes. Facultad de Ciencias Veterinarias

Este capítulo comenta el desarrollo del microscopio y su tipología (óptico, electrónico), para luego centrarse en la descripción de la técnica histológica, la histoquímica, la de los sudanes y la del estudio de los tejidos duros., Facultad de Ciencias Veterinarias

Lagostomus maximus es un roedor histricomorfo con características reproductivas muy peculiares, entre ellas, la poliovulación de 200-800 ovocitos/estro y una tasa de resorción embrionaria del 80%, que involucra a las implantaciones craneales y medias. Habiendo realizado numerosos estudios estructurales sobre todos los órganos y en diferentes momentos de la vida reproductiva de las hembras, decidimos estudiar la muerte embrionaria que se observa en esta especie. Recientemente, los diferentes análisis realizados en fetos y hembras adultas demostraron la heterogeneidad de los cuernos uterinos en sentido craneocaudal. A partir de estos resultados se construyó la hipótesis de cómo la heterogeneidad estructural podría influir en la supervivencia diferencial de las implantaciones embrionarias, que finalmente origina la muerte de las implantaciones craneales y medias y permite la viabilidad de las caudales. Si bien la heterogeneidad uterina también se observa en otros mamíferos, en ninguna de estas especies estudiadas la masividad de las implantaciones afectadas es similar a lo observado en Lagostomus maximus. La caracterización de las implantaciones, en resorción y viables, y sus similitudes a las observadas en modelos experimentales, permiten considerar a la vizcacha como un modelo no convencional para el estudio de la muerte embrionaria y/o enfermedades asociadas con la preñez. Lagostomus maximus is a histricomorphic rodent with very peculiar reproductive characteristics, including polyovulation of 200-800 oocytes/estrus and an embryo resorption rate of 80%, which involves cranial and middle implantations. Having carried out numerous structural studies on all the organs and at different moments of the reproductive life of the females, we decided to study the embryonic death observed in this species. Recently, the different analyzes carried out in fetuses and adult females demonstrated the heterogeneity of the uterine horns in the craniocaudal direction. Based on these results, the hypothesis of how structural heterogeneity could influence the differential survival of embryonic implantations, which ultimately causes the death of cranial and middle and allows the viability of the caudal implantations was constructed. Although uterine heterogeneity is also observed in other mammals, in none of these species is the massiveness of the affected implants like that observed in Lagostomus maximus. The characterization of implantations, in resorption and viable, and their similarities to those observed in experimental models, allow us to consider viscacha as an unconventional model for the study of embryonic death and/or diseases associated with pregnancy. Fil: Acuña, Francisco. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Ciencias Básicas. Cátedra de Histología y Embriología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata; Argentina Fil: Barbeito, Claudio Gustavo. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Ciencias Básicas. Cátedra de Histología y Embriología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata; Argentina Fil: Miglino, María Angélica. Universidade de Sao Paulo; Brasil Fil: Ranea, Guadalupe. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Ciencias Básicas. Cátedra de Histología y Embriología; Argentina Fil: Nishida, Fabian. Universidad Nacional Arturo Jauretche; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina Fil: Portiansky, Enrique Leo. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Academia Nacional de Agronomía y Veterinaria; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata; Argentina Fil: Flamini, Mirta Alicia. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Ciencias Básicas. Cátedra de Histología y Embriología; Argentina

La citología exfoliativa o colpocitograma es un método de laboratorio de uso frecuente para reconocer cambios cíclicos en el epitelio vaginal. Se describen los tipos de células del epitelio vaginal de la vizcacha (Lagostomus maximus) y se establece un patrón de referencia de los cambios morfológicos que experimenta la vagina de estas hembras en sus diferentes estados fisiológicos. Los animales fueron divididos en cuatro grupos: no preñadas en anestro, no preñadas en fase folicular, con preñadas con implantaciones múltiples y con preñez a término. Se observaron células basales, cianófilas intermedias y superficiales, eosinófilas superficiales, cornificadas o escamas, mucosas y leucocitos. Las hembras en anestro presentaron gran cantidad de leucocitos y células basales. Durante la fase folicular predominaron las células eosinófilas superficiales y descendió el número de leucocitos. En las hembras gestantes las células mucosas son abundantes. Las células cianófilas intermedias y basales están en mayor proporción en estas hembras que en las de fase folicular. El colpocitograma es una práctica que puede ser utilizada en la vizcacha para el diagnóstico de preñez por el alto porcentaje de células mucosas que se observan. Si bien los leucocitos estuvieron presentes en todos los extendidos, el porcentaje de células eosinófilas superficiales podría ser tomado como un indicador para la detección del inicio del estro. Exfoliative cytology or colpocytogram is a common laboratory method for recognizing cyclical changes in the vaginal epithelium. Different types of viscacha (Lagostomus maximus) vaginal epithelial cells are described. A reference pattern of morphological changes occurring in the vagina of these females in different physiological states is established. Animals were divided into four groups: anestrous, follicular phase, early pregnancy and pregnancy at term. Basal, intermediate and superficial cyanophilic, superficial eosinophilic, cornifiedand mucous cells as well as leukocytes were observed. Abundant leukocytes and basal cells were observed in females with anestrous. Superficial eosinophilic cells prevail during the follicular phase while the number of leukocytes decreased. In pregnant females mucous cells were abundant. Cyanophilic intermediate and basal cells were more abundant in these females than during the follicular phase. Colpocytogram is a technique that can be used in the viscacha for diagnosing pregnancy due to the high percentage of mucous cells observed. While leukocytes were present in all samples, the percentage of superficial eosinophilic cells could be taken as an indicator for the detection of estrus. Sociedad de Ciencias Morfológicas de La Plata

La citología exfoliativa o colpocitograma es un método de laboratorio de uso frecuente para reconocer cambios cíclicos en el epitelio vaginal. Se describen los tipos de células del epitelio vaginal de la vizcacha (Lagostomus maximus) y se establece un patrón de referencia de los cambios morfológicos que experimenta la vagina de estas hembras en sus diferentes estados fisiológicos. Los animales fueron divididos en cuatro grupos: no preñadas en anestro, no preñadas en fase folicular, con preñadas con implantaciones múltiples y con preñez a término. Se observaron células basales, cianófilas intermedias y superficiales, eosinófilas superficiales, cornificadas o escamas, mucosas y leucocitos. Las hembras en anestro presentaron gran cantidad de leucocitos y células basales. Durante la fase folicular predominaron las células eosinófilas superficiales y descendió el número de leucocitos. En las hembras gestantes las células mucosas son abundantes. Las células cianófilas intermedias y basales están en mayor proporción en estas hembras que en las de fase folicular. El colpocitograma es una práctica que puede ser utilizada en la vizcacha para el diagnóstico de preñez por el alto porcentaje de células mucosas que se observan. Si bien los leucocitos estuvieron presentes en todos los extendidos, el porcentaje de células eosinófilas superficiales podría ser tomado como un indicador para la detección del inicio del estro., Exfoliative cytology or colpocytogram is a common laboratory method for recognizing cyclical changes in the vaginal epithelium. Different types of viscacha (Lagostomus maximus) vaginal epithelial cells are described. A reference pattern of morphological changes occurring in the vagina of these females in different physiological states is established. Animals were divided into four groups: anestrous, follicular phase, early pregnancy and pregnancy at term. Basal, intermediate and superficial cyanophilic, superficial eosinophilic, cornifiedand mucous cells as well as leukocytes were observed. Abundant leukocytes and basal cells were observed in females with anestrous. Superficial eosinophilic cells prevail during the follicular phase while the number of leukocytes decreased. In pregnant females mucous cells were abundant. Cyanophilic intermediate and basal cells were more abundant in these females than during the follicular phase. Colpocytogram is a technique that can be used in the viscacha for diagnosing pregnancy due to the high percentage of mucous cells observed. While leukocytes were present in all samples, the percentage of superficial eosinophilic cells could be taken as an indicator for the detection of estrus., Sociedad de Ciencias Morfológicas de La Plata

Morphological and histochemical analyses were performed to characterize the histology, ultrastructure, and glycosylation pattern of the jejunum and ileum of the wild rodent Lagostomus maximus. Enterocytes, goblet cells, Paneth cells, and enteroendocrine cells were identified in both intestinal epithelia. Two morphological types of enterocytes wereidentified only in the ileum based on their cytoplasm electron density. Although the histological and ultrastructural examination showed that the epithelia of both anatomical regions were morphologically similar, a certain specialization in their secretory products was evident. The glycosylation pattern of the jejunum and ileum was characterized in situ by histochemical and lectin histochemical methods. Histochemical results revealed the presence of carboxylated and sulfated gycoconjugates in both regions, although sulfomucins were clearly prevalent in the ileum. Sialic acid was highly O-acetylated and particularly abundant in the jejunum. The KOH/PA*/Bh/PAS technique evidenced a more intense histochemical reaction in the jejunal than in the ileum goblet cells, demonstrating a reduction of neutral mucin secretion in the distal small intestine. Further specific differences were revealed by lectin histochemistry. These data evidenced that the nature of mucus varies at different anatomical regions, probably adapted to physiological requirements. Fil: Tano de la Hoz, María Florencia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones Marinas y Costeras. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Investigaciones Marinas y Costeras; Argentina Fil: Flamini, Mirta Alicia. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Ciencias Básicas. Cátedra de Histología y Embriología; Argentina Fil: Díaz, Alcira Ofelia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones Marinas y Costeras. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Investigaciones Marinas y Costeras; Argentina

Se presenta el resumen en castellano y en inglés de la tesis mencionada en el título., Es revisión de: http://sedici.unlp.edu.ar/handle/10915/1590, Sociedad de Ciencias Morfológicas de La Plata

Biología Celular es un curso obligatorio del primer cuatrimestre de la carrera de Medicina Veterinaria, dictado por primera vez en 2006. Debido a su carácter innovador se diseñaron un documento de circulación general y cuadernillos de trabajo específicos. En este trabajo presentamos los criterios empleados en su elaboración y su evaluación por los docentes y los estudiantes. Los formatos adoptados para las mismas fueron diversos: completamiento de esquemas y textos, preguntas de respuesta breve y de selección múltiple, lectura y discusión grupal de textos. Estas ejercitaciones se vinculan con el procesamiento, retención y recuperación de datos y conceptos. Para propiciar el desarrollo de habilidades y estrategias de aprendizaje, se sumaron la interpretación de imágenes, la producción de textos cortos y la resolución de situaciones problemáticas sencillas. La evaluación de los cuadernillos fue realizada mediante un cuestionario a los estudiantes (n=184) y la autoevaluación de los docentes (n=11). La valoración de los estudiantes sobre los materiales curriculares elaborados coincidió de manera general con la de los docentes, tanto en los aspectos positivos como en los negativos. Nuestra satisfacción por la evaluación general favorable de los materiales, que se refleja en muchos comentarios de los estudiantes, nos estimula a continuar nuestras tareas de enseñanza., Facultad de Ciencias Veterinarias

Numerosos tumores han demostrado producir factores con acción sobre el crecimiento tisular. En el presente trabajo se utiliza el extracto del tumor mamario EA34 que inyectado por vía intraperitoneal promueve el crecimiento hepatocítico del hígado del ratón joven con el propósito de extraer algunas conclusiones sobre la especificidad de su acción estimulante. Se utilizaron ratones endocriados, machos, estandarizados para análisis de periodicidad distribuidos en tres grupos: 1) jóvenes intactos, 2) adultos intactos, 3) adultos sub hepatectornizados. La mitad de cada grupo recibió una dosis de extracto de tumor EA34 y la mitad restante solución fisiológica, por vía intraperitoneal (IP). Todos los animales se sacrificaron después de recibir una dosis de colchicina. Se determino en los cortes el índice mitótico - metafases colchicínicas. Resultados: no se encontraron diferencias significativas entre los grupos comparados. Se concluye que la acción promotora observada, únicamente, sobre la población hepatocítica del ratón de 28 días de edad es compatible con la existencia: 1) en el extracto del tumor EA34, de un factor (o factores) estimulantes de la mitosis de los hepatocitos del animal joven; 2) de receptores en los hepatocitos del animal joven para el factor [o factores) estimulante detectado., The presence of a transplantable tumour may alter the mitotic activity of any of the normal host cell poputations. The effect of transplanted EA31 mammary carcinoma cells on the mitotic index of both the tongue keratinocytes and the liver hepatocytes and sinusoidal cells of adult female mice throughout a circadian cycle as compared with the corresponding values from normal animals is reported. Intact tumour bearing mice and non transplanted controls, standardized for periodicity analysis, were divided into groups. The tongues and livers were processed for the scoring of colchicines-arrested metaplasias. The keratinocytes and hepatocytes of both groups evidenced a circadian variation in mitotic index with the tumour-bearing mice showing a modification in the temporal distribution as well as a significant depression in the values. By contrast, the mitotic indices of the liver sinusoidal cells were both unaltered throughout the circadian cycle and unaffected by the presence of the transplanted tumour. The abnormal cellular proliferation in the tumour bearing animals could result from a substance elaborated by the neoplastic cells and/or from a factor produced by the normal host tissues. The possibility of mediation by some member of the TGFβ family is also considered., Facultad de Ciencias Veterinarias

En la década del 70, Barbara Weir describió las características del sistema reproductor de la hembra de Lagostomus maximus, vizcacha de llanura, como así también ciertos eventos reproductivos y gestacionales como la poliovulación de 200-800 ovocitos/estro y la muerte embrionaria de múltiples implantaciones (las ubicadas en los segmentos craneales y medias de los cuernos uterinos) a partir de los 26 dpc. Esta autora concluyó que la muerte embrionaria no se debía a factores endógenos (diferencias morfológicas, vasculares, y superfetación) o exógenos (agentes etiológicos). A partir del año 2000 se realizaron estudios morfológicos y endocrinológicos con la finalidad de comprender con mayor profundidad dicho evento. A partir de los resultados preexistentes, se desarrolló esta tesis doctoral con el fin de investigar el origen de la muerte embrionaria espontánea en L. maximus. Para ello, se diseñó un estudio cuya hipótesis fue “existen diferencias morfológicas y moleculares en las distintas porciones de los cuernos uterinos de la vizcacha que determinan la supervivencia de aquellas implantaciones más próximas al cuello uterino”. Los resultados obtenidos a partir de la metodología planteada corroboran la hipótesis. Las similitudes en la morfología microscópica de los segmentos uterinos sin preñez en aspectos como la expresión de los glicoconjugados, los residuos glicosídicos, los marcadores de renovación celular y los receptores hormonales demuestran la capacidad del órgano en permitir la implantación en toda su extensión. Sin embargo, se observan diferencias significativas en cuanto al espesor de la pared uterina y sus túnicas, y en las áreas glandular y vascular a lo largo del eje craneocaudal que podrían relacionarse con las diferencias regionales uterinas en la posibilidad de permitir la continuidad de la preñez. Estas similitudes y diferencias se mantienen en las hembras con implantaciones tempranas, en donde además se encuentra que el sitio de implantación caudal de cada cuerno tiene un aspecto viable, lo que no ocurre en el craneal y el medio que se caracterizan por la presencia de infiltración leucocitaria, hemorragia y depósito de fibrina. Por su parte, en las hembras con gestación intermedia se observaron mayores diferencias en el estado de las implantaciones. Algunas de estas características, como la desorganización y la desintegración tisular, actuarían como DAMPs, promoviendo una respuesta inflamatoria esteril en la que hay infiltración neutrofílica, mastocitos, macrófagos, células gigantes de cuerpo extraño y fibrosis. Por otro lado, los estudios amplian las características del desarrollo prenatal de la vizcacha, siendo algunas de ellas exclusivas para los histricomorfos. Por otro lado, se describen nuevas estructuras como la mesoplacenta. De esta manera, se concluye que los cuernos uterinos de L. maximus presentan aspectos heterogéneos en su sentido craneocaudal a diferentes niveles de organización, y que estas diferencias son, al menos parcialmente, las causantes del origen de la muerte embrionaria espontánea y sectorizada de la especie. Si bien la muerte embrionaria espontánea en un evento reproductivo conservado entre los diferentes taxones de mamíferos, en ninguno de ellos se observa la masividad y la sectorización presente en L. maximus. En consecuencia, esta especie representa un modelo no convencional de muerte embrionaria espontánea, cuyas características permiten el diseño de múltiples estudios para comprender la biología reproductiva de otras especies con este tipo de muerte, como así también enfermedades relacionadas con la preñez, principalmente, durante periodos tempranos., In the 1970s, Barbara Weir described the characteristics of the female reproductive system of Lagostomus maximus, plains viscacha, as well as certain reproductive and gestational events such as poliovulation of 200-800 oocytes / estrus and embryonic death from multiple implantations (those located in the cranial and middle segments of the uterine horns) from 26 dpc. At that time and with fewer techniques than the current ones, this author concluded that this embryonic death was not due to endogenous factors (morphological and vascular differences, and superfetation) or exogenous (etiological agents). Since 2000, morphological and endocrinological studies have been carried out in order to understand this event in greater depth. Consequently, and starting from the pre-existing results, this doctoral thesis was developed in order to investigate the origin of spontaneous embryonic death in L. maximus. So, a study was designed whose hypothesis was “there are morphological and molecular differences in the different portions of the uterine horns of the viscacha that determine the survival of those implantations closest to the cervix”. The results obtained from the proposed methodology corroborate the hypothesis. The similarities in the microscopic morphology of the uterine segments without pregnancy in aspects such as the expression of glycoconjugates, glycosidic residues, cell renewal markers, and hormone receptors demonstrate the organ's ability to allow implantation to its full extent. However, significant differences are observed in terms of the thickness of the uterine wall and its tunics, and in the glandular and vascular areas along the craniocaudal axis that could be related to regional uterine differences in the possibility of allowing pregnancy to continue. These similarities and differences are maintained in females with early implantations, where it is also found that the caudal implantation site of each horn has a viable appearance, which does not occur in the cranial and the middle, which are characterized by the presence of infiltration leukocyte, hemorrhage, and fibrin deposition. On the other hand, in females with intermediate gestation, greater differences were observed in implantation status. Some of these characteristics, such as tissue disorganization and disintegration, would act as DAMPs, promoting a sterile inflammatory response in which there is neutrophilic infiltration, mast cells, macrophages, foreign body giant cells, and fibrosis. On the other hand, the studies broaden the characteristics of the prenatal development of the viscacha, some of them being exclusive for histricomorphs. On the other hand, new structures such as the mesoplacenta are described. In this way, it is concluded that the uterine horns of L. maximus present heterogeneous aspects in their craniocaudal axis at different levels of organization, and that these differences are, at least partially, the cause of the origin of the spontaneous and sectorized embryonic death of the species. Although spontaneous embryonic death is a conserved reproductive event among the different mammalian taxa, the massiveness and sectorization present in L. maximus is not observed in any of them. Consequently, this species represents an unconventional model of spontaneous embryonic death, whose characteristics allow the design of multiple studies to understand the reproductive biology of other species with this type of death, as well as diseases related to pregnancy, mainly during periods early., Facultad de Ciencias Veterinarias

El presente trabajo de tesis consistió en evaluar el efecto del zinc (Zn) durante la maduración de los ovocitos de bovino sobre la capacidad de desarrollo embrionario posterior. Para tal fin, se han establecido los siguientes objetivos: 1) estudiar el efecto de distintas concentraciones de Zn sobre la maduración del ovocito bovino; 2) evaluar el efecto de distintas concentraciones de Zn durante la maduración in vitro (MIV) sobre la capacidad de desarrollo posterior hasta el estadio de blastocisto y 3) determinar el rol de las células del cúmulus como puente metabólico entre el medio externo y el ovocito. Para ello, se utilizó como modelo experimental, la técnica de Producción in vitro (PIV) de embriones bovinos que comprende tres etapas: MIV, Fertilización in vitro y Cultivo in vitro de embriones hasta el estadio de blastocisto. La PIV se realizó con ovocitos obtenidos a partir de ovarios bovinos de frigorífico. Los resultados mostraron que: 1) la suplementación con Zn no modificó la concentración intracelular de GSH/GSSG en ovocitos y células del cúmulus excepto cuando se utilizó una concentración de 0,7 μg/ml Zn, 2) disminuye la tasa de apoptosis y el daño en el ADN en dichas células y 3) aumenta la actividad SOD en los complejos ovocito-cúmulus. Además, 4) el agregado de Zn incrementó la tasa de blastocistos y 5) mejoró la calidad de los embriones. La tasa de blastocistos aumentó independientemente de la presencia de CC durante la MIV. En consecuencia, todas las evidencias obtenidas sugerirían que el Zn actuaría como un factor importante durante la maduración del ovocito bovino favoreciendo el desarrollo embrionario temprano. Estas evidencias sugerirían además, la posible existencia de transportadores de Zn en el ovocito bovino., This study evaluated the effect of zinc (Zn) during bovine oocyte maturation on preimplantational embryo development. For this purpose, we have established the following objectives: 1) Effect of different Zn concentrations on in vitro maturation (IVM) of bovine oocytes; 2) Effect of different Zn concentrations during IVM of bovine oocytes on subsequent embryo development to the blastocyst stage, and 3) Role of cumulus cells (CC) as metabolic bridge between the external medium and the oocyte. For this end, bovine in vitro embryo production (IVP) was used as experimental model. The IVP technique consists of three steps: IVM, in vitro fertilization and in vitro culture of embryos until blastocyst stage. The IVP was performed using bovine oocytes obtained from slaughterhouse ovaries. The results obtained here showed that: 1) The addition of Zn to IVM medium did not affect intracellular GSH-GSSG content in oocytes and CC with the exception of 0,7 μg/ml Zn; 2) The rates of apoptosis and DNA damage, in both oocytes and CC, were reduced when Zn was added to IVM medium; 3) SOD activity was higher in cumulus-oocyte complexes matured with the addition of Zn to IVM medium; 4) the addition of Zn in IVM medium improved the blastocyst rate and embryo quality; 5) the percentage of blastocysts was enhanced regardless of the presence of CC during IVM. Consequently, all evidences obtained suggest that Zn acts as an important factor during bovine oocyte maturation promoting early embryo development. Besides, these evidences suggest that Zn transporters might exist in the oocytes., Facultad de Ciencias Veterinarias