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Background: In this report, we describe the clinical, macro-, and microscopic findings of a newborn zebra victim of a fatal trauma and its possible causes are discussed in detail.Case Description: A plains zebra (Equus quagga) born in a Portuguese zoo was found in hypothermia and unable to get up. The animal was admitted to the hospital 36 hours later and, after the first hour of treatment and no attempts to get up, it began to convulse and died. At necropsy, subdural hematoma and atlantoaxial dislocation were the main findings.Conclusion: The inability to pinpoint the exact moment of the lesions’ onset determines the importance of a thorough surveillance of the periparturient period and parturition of captive animals. Furthermore, literature concerning zebras, their reproduction, and neonatal period is scarce, reinforcing the need to report these cases.

In the last decades, hydrogels have attracted great interest in biomedical applications, namely as systems for targeted and controlled release of therapeutic molecules. One of the most exciting properties of hydrogels is their tunability to respond to several stimuli, such as pH, temperature, and ion concentration. In therapeutic release, this is a key feature since it enables a release triggered/ controlled by specific stimuli. Among the hydrogels, injectable and self-healing hydrogels gained special attention due to its minimally invasive character and ability to fit the target easily. Photothermal therapy is an emerging treatment methodology known to be highly effective, selective, minimally invasive and able to eliminate several types of cancers. Aiming the synergistic association of both targeted and controlled release and photothermal therapy, this thesis explores the development of a chitosan copolymer (CS-g-PNIPAAm) hydrogel incorporating the polyoxometalate {Mo154} as photothermal conversion agent. The prepared hydrogel showed fast self-healing and injectability, as well as pH and temperature-responsiveness in the release of two distinct cargo molecules: doxorubicin and horseradish peroxidase. In addition, the developed hydrogel demonstrated to have an enhanced photothermal conversion ability when compared to a {Mo154} aqueous solution, causing a temperature increase of around 35 ºC with low irradiance (0.1 or 0.82 W/cm2 with an excitation wavelength of 785 or 808 nm, respectively). Overall, the composite described herein can be used in applications needing a dual combination therapy, i.e., simultaneous drug and photothermal therapy, delivered through an injectable hydrogel where in situ administration is needed. Nas últimas décadas, os hidrogéis têm atraído um enorme interesse na área biomédica, nomeadamente como sistemas de libertação direcionada e controlada de moléculas terapêuticas. Uma das propriedades mais interessantes dos hidrogéis é o facto de poderem ser preparados de forma a responder a diferentes estímulos tais como o pH, a temperatura e a concentração iónica. Esta é uma característica fundamental na libertação de compostos terapêuticos uma vez que permite o controlo da libertação do fármaco em resposta a estímulos específicos. Entre os diversos tipos de hidrogéis, os hidrogéis injetáveis capazes de se auto-recuperar têm atraído um enorme interesse devido ao seu carater minimamente invasivo e à sua capacidade de se adaptar facilmente ao local alvo. A terapia fototérmica é uma metodologia de tratamento emergente, conhecida por ser altamente efetiva, seletiva, minimamente invasiva, e capaz de eliminar diversos tipos de cancros. Tendo em vista a associação sinergética entre a libertação controlada e direcionada de moléculas terapêuticas e a terapia fototérmica, esta tese explora o desenvolvimento de um hidrogel injetável e capaz de se autoreparar, constituído por um copolímero de quitosano (CS-g-PNIPAAm) e incorporando o polioxometalato {Mo154} como agente de conversão fototérmica. O hidrogel preparado apresentou propriedades como injectabilidade e uma auto-reparação rápida, tendo ainda mostrado ser responsivo ao pH e à temperatura na libertação de dois tipos distintos de moléculas, nomeadamente a doxorrubicina e a peroxidase de rábano silvestre. Para além disto, o hidrogel demonstrou também possuir uma grande capacidade de conversão fototérmica quando comparado com uma solução de {Mo154}, causando um aumento de temperatura de cerca de 35 ºC com uma baixa irradiância (0,1 ou 0,82 W/cm2 com um comprimento de onda de excitação de 785 ou 808 nm, respetivamente). De uma forma geral, o compósito descrito nesta tese apresenta potencialidades para aplicações que exijam uma terapia de combinação dupla, i.e., terapia fototérmica e farmacológica, através de um hidrogel injetável quando é necessária uma administração in situ. Mestrado em Materiais e Dispositivos Biomédicos

Histochemical staining consists of a set of specific chemical reactions of structures or tissue-endogenous substances. Immunohistochemistry allows verification of proteins in tissues related to biological and pathological factors. The standardization of methods to assess angiogenesis resulting from formation of new blood vessels in procedures with stimulants is important to facilitate the implementation of research as well as to assist interpretation of data. In rabbits some markers of angiogenesis antibodies in the skin are not standardized because of cross-reactions that may occur because the antibodies are made from such animals.The aim of this study was to analyze the immunohistochemical methods through dyes and immunohistochemical markers angiogenesis in rabbits (Oryctolagus cuniculus) having undergone reconstructive surgery with skin grafts associated with plasma angiogenesis stimulator rich in platelets, in order to evaluate which method would be better to visualize the vessels, as well as to evaluate which antibody would promote better immunostaining, and find the differences between the methods and to standardize the methodology to be applied in experiments using rabbits. Sixteen rabbits were used, split into two groups of eight animals: Gprp (plasma rich in platelets) and Gc (control, saline solution, 9%). The same technique of reconstructive surgery using graft mesh was performed on each rabbit. The groups differed only in the application of platelet-rich plasma before the surgical wound synthesis. Samples for evaluation of angiogenesis were collected 15 days after the surgical procedure. The dyes Hematoxylin & Eosin and Masson’s Trichrome were used in the histochemical study to evaluate vascular proliferation. Markers CD31, CD34 and Caveolin-1 was used for the immunohistochemical study. The evaluation between the groups (Gprp and Gc) in regard to the categorical variable (vascular proliferation intensity) used the Kruskal-Wallis test with p values equal to or less than 0.05 being considered significant. The immunohistochemistry was subjected to analysis of variance for a completely randomized design, with two groups and five repetitions (medium) and 5% significance level. Multiple comparison of groups resulted in the Tukey test (p=0.05) used. The amount of vascular proliferation assessed by histochemical method HE and Masson’s Trichrome was found to be a significant variable in Gprp when compared with group Gc. When evaluating the methods used, there was no significant difference. There was no difference in the three markers which were used for correlating microvessels; however, there was more intense staining of vessels when Caveolin-1 Antibody was used. This caused intense marking of the capillaries and small vessels, as well as of larger vessels. When using CD31 and CD34, the same was observed, but it was not as intense as with Caveolin-1; though some cases showed sincere and discreet marking. The results of this study demonstrated that the histochemical methods performed are effective for semi-quantitative assessment of angiogenesis. The immunohistochemical comparison of Caveolin-1, CD31, and CD34 as markers of angiogenesis in rabbits showed that both antibodies could immunostain the newly formed vessels; but the Caveolin-1 showed better immunostaining in small and medium-sized vessels, as well as a minor presence in the background. Although not specific markers for angiogenesis, they can be used as immunohistochemical markers of vascular endothelium in rabbits. RESUMO: Colorações histoquímicas consistem de um conjunto de reações químicas específicas das estruturas ou substâncias endógenas do tecido. Logo a Imunohistoquímica permite observar proteínas presentes nos tecidos relacionadas com fatores determinantes do comportamento biológico e patológico. A padronização dos métodos que avaliam a angiogênese decorrente de procedimentos que utilizam substâncias estimulantes à formação de novos vasos são importantes, a fim de facilitar a execução das pesquisas, bem como auxiliar na interpretação dos dados, visto que em coelhos alguns anticorpos marcadores de angiogênese na pele ainda não são padronizadas em virtude das reações cruzadas que podem ocorrer devido aos anticorpos serem confeccionados a partir de tais animais. Objetivou-se analisar os métodos histoquímicos por meio das colorações e imunohistoquímicas com marcadores de angiogênese em coelhos (Oryctolagus cuniculus) submetidos ao emprego de enxertos cutâneos associado com estimulador de angiogênese plasma rico em plaquetas, a fim de avaliar qual método seria melhor para visualização dos vasos, bem como avaliar qual anticorpo promoveria melhor imunomarcação, buscando-se assim encontrar a diferenças entre os métodos e padronizar a metodologia a ser aplicada em experimentos que utilizem coelhos. Utilizou-se 16 coelhos, separados em dois grupos com oito animais, compreendendo os grupos Gprp (plasma rico em plaquetas) e Gc (controle, solução fisiológica 0,9%). Em todos os animais foi realizada a mesma técnica de cirurgia reconstrutiva de enxertia do tipo malha, os grupos diferiram apenas a aplicação do plasma rico em plaquetas antes da síntese da ferida cirúrgica. As amostras para avaliação da angiogênese foram coletadas após 15 dias do procedimento cirúrgico. Utilizou-se no estudo histoquímico as colorações Hematoxilina & Eosina e Tricrômico de Masson para avaliação da proliferação vascular, e os anticorpos CD31 e CD34 e Caveolina - 1 para avaliação imunohistoquímica. A comparação entre os grupos (Gprp e Gc) em relação à variável categórica (intensidade de proliferação vascular) foi utilizado o teste de Kruskal-Wallis, com valores de p iguais ou inferiores a 0,05 foram considerados significativos. Os dados imuno-histoquímico foram submetidos à análise de variância para um delineamento inteiramente ao acaso, com 2 grupos e 5 repetições (médias) e nível de significância de 5%. Nas comparações múltiplas das médias dos grupos, utilizou-se o teste de Tukey (α = 0,05). A intensidade de proliferação vascular avaliada pelo método histoquímico HE e Tricômico de Masson encontrou-se que tal variável foi significativa no Gprp, quando comparado com o Gc. Avaliando os métodos utilizados não houve diferença significativa. A contagem microvascular (MVC) realizada com os diferentes marcadores (Caveolina-1, CD31 e CD34) foi significativa no Gprp. Correlacionando a contagem microvascular dos três marcadores utilizados não houve diferença significativa, no entanto observou-se marcação mais intensa dos vasos utilizando o anticorpo Caveolina-1, sendo intensa a marcação dos capilares, vasos de pequeno calibre, bem como em vasos maiores. Nas avaliações de CD31 e CD34 observou que houve imunomarcação dos vasos, porém não foi intensa como a Caveolina-1, alguns casos apresentaram fundo, bem como marcação discreta. Os resultados encontrados neste estudo evidenciaram os métodos histoquímicos são eficazes para avaliação semiquantitativa da angiogênese. A comparação imunohistoquímicas da Caveolina-1, CD31 e CD34 como marcadores de angiogênese em coelhos evidenciaram que ambos os anticorpos são capazes de imunomarcar os vasos neoformados, porém a Caveolina-1 apresentou melhor imunomarcação de vasos de pequeno e médio calibre, bem como menor presença de fundo, embora não seja um marcador específico para angiogênese pode ser utilizada como marcador imunohistoquímico de endotélio vascular em coelhos.

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Este artigo tem por objectivo analisar os actos terroristas enquanto fenómenos mediáticos e reflectir como deverá ser delineada a cobertura jornalística deste tipo de acontecimentos. A ideia passa por encontrar uma forma de actuação de modo a que os media não sejam usados como meras plataformas de divulgação dos objectivos das organizações terroristas. Em contrapartida, cumpre-lhes o dever de informar a opinião pública sobre estas acções, desde as consequências, à identificação dos autores, até ao acompanhamento da actuação das autoridades. Neste contexto, são analisadas três grandes acções terroristas do início do século XXI – o 11 de Setembro, em Nova Iorque e Washington; o 11 de Março, em Madrid; e o 7 de Julho, em Londres – que mereceram coberturas mediáticas completamente diferentes.