Search

La esquizofrenia es en la actualidad una de las enfermedades mentales que mayor grado de incapacidad genera. Se caracteriza por la presencia de tres tipos de síntomas: positivos, negativos y cognitivos. Hoy en día no existe cura para este trastorno, y los tratamientos farmacológicos se orientan a la mejora de la sintomatología de los pacientes. A pesar de que los tratamientos farmacológicos actuales mejoran los tratamientos clásicos, siguen sin constituir una terapia óptima para el tratamiento de todos los síntomas de esta enfermedad, en especial los síntomas cognitivos. Es por esto que es imprescindible desarrollar nuevos tratamientos que permitan mejorar la calidad de vida de los pacientes. Para poder evaluar nuevas moléculas con potencial terapéutico, los modelos de estudio se basan en ensayos con varias líneas celulares, sin embargo, no constituyen modelos de estudio idóneos por no reflejar un fenotipo similar al de la patología. Durante este TFG se ha trabajado en la diferenciación de la línea celular SH-SY5Y con el fin de desarrollar un modelo celular in vitro de esquizofrenia para ensayos de cribado de alto rendimiento, Schizophrenia is currently one of the most disabling mental illnesses. It is characterized by the presence of three types of symptoms: positive, negative and cognitive. Nowadays there is no cure for this disorder, and pharmacological treatments are oriented to the improvement of patients' symptoms. Although current pharmacological treatments improve the classical treatments, they still do not constitute an optimal therapy for the treatment of all the symptoms of this disease, especially the cognitive symptoms. This is why it is essential to develop new treatments to improve the quality of life of patients. In order to evaluate new molecules with therapeutic potential, study models are based on assays with several cell lines, however, they are not suitable study models because they do not reflect a phenotype similar to that of the pathology. During this TFG we have worked on the differentiation of the SHSY5Y cell line in order to develop an in vitro cell model of schizophrenia for high-throughput screening assays

O mercurio (Hg) é un metal tóxico empregado historicamente para diferentes propósitos como a minería de metais preciosos, constituíndo un contaminante ambiental a nivel mundial. As súas características fisicoquímicas permítenlle experimentar unha serie de procesos bioxeoquímicos a partir dos cales, mediante a participación da microbiota acuática, prodúcense diferentes especies derivadas, entre as cales destaca o metilmercurio (MeHg+ ). Trátase dun potente neurotóxico que pode supoñer un risco para aquela poboación que se vexa exposta a el mediante o consumo de especies marítimas contaminadas. O metilmercurio pode exercer a súa toxicidade en diferentes partes do organismo, sen embargo, o sistema nervioso central é particularmente sensible ós seus efectos. A exposición neurolóxica a este tóxico conleva unha ampla colección de alteracións moleculares e celulares entre as que se inclúen estrés oxidativo, disfunción mitocondrial, dishomeostase de glutamato e Ca2+ , alteracións epixenéticas ou apoptose celular. Neste traballo de fin de grao realizarase unha análise dos aspectos relativos ó ciclo bioxeoquímico deste elemento, ademais do estudo dos efectos a nivel celular e molecular do MeHg+ , indicando os tipos celulares e os mecanismos polos que se ven afectados, Mercury (Hg) is a toxic heavy-metal element widely known for its different historical applications such as the mining of precious metals, which also constitutes an environmental pollutant worldwide. Its physicochemical properties allow it to experience a series of biogeochemical processes from which, through the participation of aquatic microbiota, different derived species are produced, among which methylmercury (MeHg+ ) stands out. It is a potent neurotoxicant that can pose a risk to those who expose themselves to it through the consumption of contaminated marine species. Methylmercury can exert its toxicity in distinct parts of the human being; however, the central nervous system is particularly susceptible to its effects. A wide collection of molecular and cellular alterations such as oxidative stress, mitochondrial dysfunction, glutamate and Ca2+ dishomeostase, epigenetic alterations or cell apoptosis are included among the main effects after neurological exposure to methylmercury. In this thesis, both an analysis of the aspects related to the biogeochemical cycle of Hg and a study of the cellular and molecular effects of MeHg+ , indicating affected cell types and prevalent cellular toxic mechanisms will be made

La inmunoterapia ha demostrado su gran potencial en el tratamiento del cáncer, una de las principales causas de muerte a nivel mundial, ya que incrementa la respuesta del sistema inmune del paciente que juega un papel protagonista en la defensa, progresión y pronóstico tumoral. La terapia celular adoptiva (TCA) ha sido una de las inmunoterapias más investigadas en los últimos años; ésta mejora el reconocimiento de antígenos tumorales y aprovecha los mecanismos efectores de las células inmunitarias propias del individuo. Ha manifestado gran utilidad en el manejo de diferentes tipos de neoplasias, logrando incluso la completa regresión tumoral. Sigue en investigación y desarrollo para aumentar su efectividad, especificidad y seguridad; ya que no está exenta de limitaciones y efectos adversos. Actualmente, en España se dispone únicamente de dos medicamentos aprobados por las agencias reguladoras que se basan en esta técnica, indicados en casos refractarios a otros tipos de tratamiento. En la presente revisión bibliográfica se exponen los aspectos más importantes respecto a la inmunidad antitumoral y su relación con la inmunoterapia; así como el fundamento, las diferentes estrategias y los desafíos a solventar de la TCA, Cancer is one of the leading causes of death worldwide, and immunotherapy has proven to have great potential in its treatment as it increases the patient's immune system response, thus playing a key role in tumour defence, progression and prognosis. Adoptive cell therapy (ACT) has been one of the most investigated immunotherapies in the recent years; it enhances the recognition of tumour antigens and harnesses the effector mechanisms of the body’s own immune cells. It has been proven to be very useful in the management of different types of malignancies, achieving complete tumour regression in some cases. However, ACT is currently still under research and development to increase its effectiveness, specificity and safety, as it is not free of limitations and adverse side effects. Currently there are only two drugs approved by the Spanish regulatory agencies that are based on this technique which are indicated in cases refractory to other types of treatment. This review presents the most important aspects of antitumour immunity and its relationship with immunotherapy as well as the basis, the different strategies and the challenges of ACT

La epilepsia dependiente de piridoxina (EDP) es una enfermedad rara producida por la mutación en el gen ALDH7A1 que codifica para la antiquitina (ATQ), una enzima que participa en el metabolismo degradativo de la L-lisina. El déficit de antiquitina produce una interrupción del catabolismo de dicho aminoácido, que se traduce en la acumulación de metabolitos tóxicos (responsables de la afectación cognitiva) y en el desequilibrio entre neurotransmisores inhibidores y excitadores (responsable de las crisis convulsivas). Las crisis convulsivas de esta enfermedad se consiguen tratar con piridoxina a dosis farmacológicas, sin embargo, hasta un 75% de los pacientes presentan problemas relacionados con el neurodesarrollo. Dado que los compuestos neurotóxicos acumulados son los productos formados por la alfa aminoadipato semialdehído sintetasa humana (hAASS), se ha desarrollado un ensayo de actividad reductasa in vitro con la finalidad de una posterior identificación de compuestos inhibidores. Para ello, a partir de un plásmido comercial clonado con el cDNA que codifica para la hAASS (previamente amplificado y purificado) se llevó a cabo la expresión de la proteína recombinante hAASS-myc-His6 en células HEK293T mediante un proceso de transfección química y se purificó en su forma activa mediante cromatografía de afinidad a Ni2+ y diálisis. Finalmente, se validó la actividad reductasa de la hAASS-myc-His6 mediante el desarrollo y optimización de un ensayo de absorbancia (monitorización del consumo de Nicotinamida Adenina Dinucleótido Fosfato o NADPH), al que se acopló un ensayo de detección luminiscente para evitar interferencias de compuestos coloreados y aumentar la sensibilidad, Pyridoxine dependent epilepsy (PDE) is a rare disease caused by the mutation in ALDH7A1 gene which encodes for antiquitin (ATQ), an enzyme that participates in L-lysine degradative metabolism. Antiquitin deficiency produces catabolism interruption of aforementioned aminoacid, which leads to 5 the accumulation of toxic metabolites (responsibles for cognitive affectation) and the imbalance between inhibitory and excitatory neurotransmitters (responsible for convulsive crisis). The convulsive crisis of this disease can be trated with pharmacologic doses of pyridoxine nevertheless, up to 75% of patients show problems related with neurodevelopment. Due to neurotoxic compounds accumulated are the products formed by human alpha aminoadipic semialdehyde synthase (hAASS), a reductase activity in vitro assay has been developed with the purpose of the later identification of inhibitor compounds. For this, a commercial plasmid was cloned with cDNA which codifies for hAASS (previously amplified and purified), the recombinant protein hAASS-myc-His6 was expressed in HEK293T cells by a chemical transfection and purified in its active form through affinity chromatography to Ni2+ and dialysis. Finally, hAASS-myc-His6 reductase activity was validated by development and optimization of an absorbance assay (monitorization of Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate or NADPH consumption), coupling a luminescent assay detection to avoid coloured compounds interferences and to increase sensitivity

La TB y el VIH/SIDA son dos de las enfermedades infecciosas que más muertes han provocado a lo largo de la historia de la humanidad. Al combinarse constituyen un binomio perfecto de morbilidad y mortalidad, ya que una acelera la progresión de la otra. En las últimas décadas se han desarrollado distintos métodos diagnósticos y fármacos para detectar y tratar estas enfermedades. La terapia de la TB está formada por numerosos fármacos, sin embargo, en los últimos años las micobacterias han adquirido resistencias al tratamiento clásico, lo que ha obligado al desarrollo de nuevos fármacos para poder continuar tratando a los pacientes. En el caso del VIH, el desarrollo del ART ha supuesto un gran avance para hacer frente a la infección. Los pacientes que siguen esta terapia pueden llevar una vida prácticamente normal. Para tratar la coinfección se utilizan los mismos fármacos combinados que para cada infección por separado, teniendo en cuenta algunos factores al empezar este tratamiento. En los últimos años los casos de TB han aumentado, especialmente aquellos vinculados al VIH en países en vías de desarrollo. Por ello, es muy importante concienciar a la población sobre el problema e incentivar la prevención y el acceso al tratamiento para todas las personas que lo necesiten, TB and HIV/AIDS are two of the deadliest infectious diseases in human history. Together, they form a perfect combination of mortality and morbidity, as one accelerates the progression of the other. In the last decades, different diagnostic methods and drugs have been developed to detect and treat these diseases. Therapy of TB consists of many drugs, however, in the last years the mycobacteria have acquired resistance against the classic treatment, which have forced the development of new drugs to be capable to continue treating patients. For HIV, the increasing of ART was very significant to treat the infection. Patients who follow the ART can lead almost normal lives. The same combined drugs are used to treat the coinfection. We must focus on some factors when starting this treatment. In recent years, cases of TB have increased, especially those linked to HIV in developing countries. It’s therefore very important to raise public awareness of the problem and encourage prevention and access to treatment for all those who need it

Antibiotic resistance is one of the main public health concerns of this century. This resistance is also associated with oxidative stress, which could contribute to the selection of resistant bacterial strains. Bearing this in mind, and considering that flavonoid compounds are well known for displaying both activities, we investigated a series of hydroxy-3-arylcoumarins with structural features of flavonoids for their antibacterial activity against different bacterial strains. Active compounds showed selectivity against the studied Gram-positive bacteria compared to Gram-negative bacteria. 5,7-Dihydroxy-3-phenylcoumarin (compound 8) displayed the best antibacterial activity against Staphylococcus aureus and Bacillus cereus with minimum inhibitory concentrations (MICs) of 11 µg/mL, followed by Staphylococcus aureus (MRSA strain) and Listeria monocytogenes with MICs of 22 and 44 µg/mL, respectively. Moreover, molecular docking studies performed on the most active compounds against Staphylococcus aureus tyrosyl-tRNA synthetase and topoisomerase II DNA gyrase revealed the potential binding mode of the ligands to the site of the appropriate targets. Preliminary structure–activity relationship studies showed that the antibacterial activity can be modulated by the presence of the 3-phenyl ring and by the position of the hydroxyl groups at the coumarin scaffold

Monoamine oxidase inhibitions are considered as important targets for the treatment of depression, anxiety, and neurodegenerative disorders, including Alzheimer’s and Parkinson’s diseases. This has encouraged many medicinal chemistry research groups for the development of most promising selective monoamine oxidase (MAO) inhibitors. A large number of plant isolates also reported for significant MAO inhibition potential in recent years. Differently substituted flavonoids have been prepared and investigated as MAO-A and MAO-B inhibitors. Flavonoid scaffold showed notable antidepressant and neuroprotective properties as revealed by various and established preclinical trials. The current review made an attempt to summarizing and critically evaluating the new findings on the quercetin and related flavonoid derivatives functions as potent MAO isoform inhibitors

The main goal of this thesis has been the development of various RNA-based therapies to modulate cell phenotypes in two different disease contexts: cancer and tissue engineering. Given the poor cell-permeability of naked RNA molecules, as well as their short half-life in biorelevant media, a critical aspect of the work has been the design and development of biomaterial-based systems intended to overcome these limitations. On the one hand, we developed a nanocarrier capable of co-allocating RNAi and chemokines to revert the tumor immunosuppression mediated by myeloid derived suppressor cells. On the other hand, we investigated a new concept of gene-activated matrices (GAMs) activated with mRNA-encoded transcription factors (TFs) to direct stem cell chondrogenic and myogenic specification. We finally optimized GAM mechanics in order to enhance TF transfection and cell differentiation driven by TF overexpression.

The main goal of this thesis has been the generation of knowledge towards the advancement of the oral administration of peptides. The specific objective has been to study how the composition and surface properties of lipid-based nanocarriers influence i) their capacity to load hydrosoluble peptides and ii) their ability to overcome the biological barriers associated to the oral modality of administration. Throughout this study, we developed a novel mixed nanosystem (nanoemulsion co-existing with micelles) able to load hydrophobically-modified insulin with a 100 % association efficiency. In brief, this nanosystem showed a great stability and miscibility in bio-relevant media, acceptable mucodiffusive properties and ability to interact and enter the intestinal cells, without relevant cytotoxic effects. Interestingly, the promising in vitro behavior of this insulin-loaded nanosystem was translated into a moderate hypoglycemic response (≈ 20−30 %) following intestinal administration to rats.

This thesis project covers the design, development and in vivo evaluation of a novel self-assembled injectable biodegradable drug delivery system (DDS). The system is composed of in situ hydrogel combined with nanocapsules for lipophilic anti-inflammatory drugs, aiming prolonged intra-articular (IA) residence time and controlled drug release. The moderate initial viscosity allows good syringeability, while rheological properties of the assembled DDS enable resistance to high deformations, displaying the hydrogel suitable for IA application. In this regard, to validate the new delivery system, dexamethasone was used as a model drug. Besides, a novel and potential lead compound for immunotherapeutic anti-rheumatic drug candidate – galectin-3 antagonist – was synthesized, characterized and evaluated in this study. The preliminary in vivo results demonstrated remarkable suppression of acute joint inflammation by galectin-3 inhibitor encapsulated within hydrogel and administrated IA at microgram scale doses compared to the non-treated control. Overall, the work presented here portrays the DDS with encapsulated synthetic galectin-3 inhibitor as a capable in situ nanotechnology-based platform for arthropathies treatment, intended to contribute to efficient joints therapies.

Los GPCRs de dopamina D2 y de serotonina 5-HT2A constituyen las principales dianas de los antipsicóticos. Tras el hallazgo del heterodímero D2−5-HT2A, varios autores han defendido su implicación en la patología de la esquizofrenia. En esta investigación, se ha estudiado in vitro el cross-talk funcional en el heterocomplejo D2−5-HT2A. Se observó que la expresión y bloqueo del receptor D2 desencadenaron, respectivamente, procesos de cooperatividad positiva y negativa, en la eficacia de activación del receptor 5-HT2A por el alucinógeno (±)DOI. Además, se determinó que la estimulación del receptor 5-HT2A por (±)DOI generó una modulación de la vía de señalización dependiente de Gi/o del receptor D2 activado por dopamina y antagonizado por los antipsicóticos típicos haloperidol y clorpromazina, y atípicos clozapina, risperidona y aripiprazol. Estos resultados han sustentado la existencia de múltiples fenómenos de alosterismo entre los receptores del heterocomplejo D2−5-HT2A, en rutas de señalización dirigidas por agonistas alucinógenos y fármacos antipsicóticos.

Introduçom A compreensom e o tratamento das doenças neurodegenerativas constituem ainda um desafio apesar da pesquisa intensiva. Novos algoritmos computacionais inspirados no processamento cerebral da informaçom e a disponibilidade pública de dados experimentais permitem umha nova abordagem para este enigma. Métodos A partir da base de dados ChEMBL construímos um conjunto de dados unificado de ensaios independentes sobre interaçons de fármaco-alvo implicadas principalmente na neuroprotecçom. Logo transformamos as características moleculares dos compostos neuroquímicos a números através de diferentes descritores moleculares para estabelecer umha relaçom quantitativa estrutura-actividade. Também utilizamos operadores de media móbel de Box-Jenkins para incorporar informaçom categórica sobre subconjuntos específicos de condiçons experimentais. Posteriormente, aplicamos a análise discriminante linear e diversos métodos de redes neurais artificiais para inferir modelos que resumem todas estas observaçons específicas. Ao mesmo tempo, uma nova série de derivados de rasagilina forom sintetizados, validando a sua actividade neuroprotectora empiricamente e teoricamente através do nosso modelo. Resuldados e Discusom Estes modelos tenhem o potencial de ultrapassar certas limitaçons experimentais porque podem prever o resultado provável de uma interacção fármaco-alvo em um conjunto generalizado de condiçons empíricas. De todos os métodos analisados, os algoritmos baseados na aprendizage profunda apresentaram o melhor desempenho, com uma precisom do 85%, e um tempo de treinamento mais rápido. Os diferentes derivados de rasagilina mostraram um perfil diferente de actividade neuroprotectora empiricamente, e esta actividade foi congruente com as prediçons teóricas deduzidas apartir de nosso modelo. Conclusom Tirando proveito de métodos computacionais inspirados no processo cerebral da informaçom construímos modelos do interactoma cerebral. Na nossa opiniom, os métodos de aprendizage

The main goal of this thesis has been the development of hyaluronic acid nanocapsules (HA-NCs) as a multifunctional platform for the encapsulation and delivery of diverse anticancer drugs, such as hydrophobic drugs and hydrophilic biomolecules. The first step was the development of a spontaneous emulsification method, where HA-NCs were formulated without the need of organic solvents, heat or high energy input, providing conditions for the incorporation of sensible biomolecules while decreasing the environmental impact. Another advantage of this system is based on the use of a hydrophobically modified HA derivative that allowed the preparation of HA-NCs by hydrophobic interactions rather than by electrostatic forces, and thus, it reduced the toxicity associated to the addition of a cationic surfactant as counterion. Once formulated, HA-NCs had a size around 130 nm and a negative zeta potential about -20 mV. Moreover, these NCs were markedly stable under storage conditions and diluted in human plasma, taking forward this system as a potential carrier for intravenous administration. The versatility of this nanocarrier was confirmed by the incorporation of different drug models: docetaxel, a cytostatic drug, was incorporated into the oil core, whereas anti-gasdermin B, a monoclonal antibody, was entrapped into the polymeric shell. Docetaxel was highly encapsulated, released in a sustained manner and its cytotoxicity in A549 lung cancer cell line was maintained. Finally, anti-gasdermin B was successfully associated to the polymeric shell of HA-NCs and its intracellular delivery confirmed by confocal microscopy. Once inside the cell, anti-gasdermin B was able to escape the endosomal compartment and to target the intracellular protein gasdermin B, promoting an important decrease in the migratory and invasive behavior of HCC1954 breast cancer cell line. All these results highlight the potential of self-emulsifying HA-NCs as multifunctional systems to carry diverse anticance

A comprehensive evaluation of the primary bioreceptivity to phototrophic biofilms of several varieties of granite was carried out. The bioreceptivity of the granites was more strongly affected by the physical characteristics of the stones than by their chemical composition. Growth of phototrophic biofilms was strongly enhanced by high open porosity, capillary water content and surface roughness. The findings of the study enabled us to develop a robust and well-founded bioreceptivity index (BI) for granitic rocks. The proposed BI has two components: BIgrowth, which quantifies the extent of the biological growth, and BIcolour, which quantifies the colour change undergone by the stone due to the colonisation and which can be considered the bioreceptivity perceptible by the human eye. The index was fitted to a qualitative scale of 0-10 and can therefore be used as a decision-making tool for selection of appropriate lithotypes for building and/or ornamental purposes.

[ES]Las adopciones internacionales son un tema muy presente en nuestra sociedad. Los niños adoptados proceden de diferentes zonas geográficas y conforman una población con necesidades específicas en el ámbito de la salud. Una de las patologías presentes en ellos son las parasitosis, muchas veces no consideradas a pesar de las graves complicaciones que pueden acarrear. Por ello se hace una revisión general de las parasitosis más frecuentes, su diagnóstico, tratamiento y datos disponibles de prevalencia en esta población. A partir de ello se proponen protocolos generales para el diagnóstico de las parasitosis en niños procedentes de adopción internacional, [EN]International adoptions are a frequent current issue in our present society. Adopted children come from different geographical areas and make up a population with specific characteristics and health necessities. One of the pathologies they present is parasitosis, which is not often considered in spite of the serious complications they might lead to. For this reason, a general review of the most frequent parasitosis, their diagnosis, their treatment, and available prevalence data are shown. This leads to the proposal of general protocols for the diagnosis of parasitic infections in internationally adopted children

Las reacciones catalizadas por cobre constituyen herramientas sintéticas excepcionales dentro de la Química Orgánica actual. El trabajo descrito en la presente Tesis Doctoral se enmarca en un proyecto general, que desarrolla ComBioMed, encaminado a explotar las ventajas de los reactivos soportados en el descubrimiento preliminar de fármacos. En el marco de este trabajo se han desarrollado nuevos sistemas catalíticos basados en cobre soportados sobre diferentes matrices poliméricas que han demostrado su eficacia, reciclabilidad y potencial interés sintético. En conjunto, estos catalizadores constituyen excelentes herramientas durante la implementación de metodologías sintéticas de alto rendimiento (High Throughput Synthesis).

The use of nanotechnologies to develop nanocarriers for oral insulin delivery is one of the strategies that has received significant attention. The basis for this development has been that nanocarriers can protect the peptides against the harsh gastric environment including enzymatic degradation, while controlling drug release and increasing their absorption in the small intestine. With a higher surface-to-volume ratio than that of conventional drug systems, nanocarriers can significantly increase their cellular contact with the intestinal epithelium, thereby offering more chances for the drug to get across this epithelium. The main aim of this work was to elucidate the potential of protamine nanocapsules as an effective oral drug delivery system for insulin (and other similar peptides). Nanocapsules consisting of an oily core and polymeric shell will be developed and characterized. Their stability in different simulated intestinal media with and without enzymes will be studied including their capacity to protect the loaded peptide from enzymatic degradation. Their toxicity and transport across Caco-2 cells will also be elucidated and thereafter their in vivo efficacy will be determined in rats.

El consumo, tanto activo como pasivo, de tabaco por parte de las mujeres gestantes representa un importante problema de salud en nuestro país. Las matrices biológicas empleadas para el estudio de la exposición a sustancias intra-útero en toxicología son variadas e incluyen el pelo (considerado el “gold standard”), el meconio, y más recientemente, la placenta y el cordón umbilical. Estas dos últimas constituyen muestras materno-fetales alternativas con un gran potencial ya que son tejidos en estrecho contacto con el feto, son considerados productos de “desecho”, y además están disponibles en grandes cantidades y pueden obtenerse en el momento del parto mediante métodos no invasivos. En el presente trabajo se ha desarrollado y validado un método para la detección de nicotina, cotinina e hidroxicotinina en placenta y cordón umbilical. El análisis se realizó mediante LC-MS/MS, utilizándose para ello una columna de interacción hidrofílica (Atlantis® HILIC Silica) y un gradiente con Formiato amónico 2mM+AF 0,1% y ACN+0,1% AF, en un tiempo total de 15 min. Para la detección se ha utilizado un triple cuadrupolo con interfase ESI+. El método ha sido validado satisfactoriamente en ambas matrices para los parámetros de: linealidad, exactitud, imprecisión, límite de detección y límite de cuantificación, selectividad, efecto matriz, rendimiento de la extracción, eficacia total del proceso y estabilidad. Finalmente, el método fue aplicado a muestras procedentes de 32 partos, y los resultados fueron comparados con la entrevista materna y los resultados analíticos obtenidos en el pelo materno

El programa de notificación de reacciones adversas de medicamentos (RAMs) basado en el uso tarjetas amarillas continúa siendo uno de los principales métodos utilizados para la generación de señales en farmacovigilancia. Sin embargo, la infranotificación es una de las desventajas de este sistema puesto que retrasa la aparición de señales de alerta lo cual afecta negativamente a la salud pública. La primera revisión bibliográfica evalúa las influencias de las características personales y profesionales así como identifica los conocimientos y actitudes relacionados con la notificación de RAM. Mientras que los factores personales y profesionales muestran una débil influencia, los conocimientos y actitudes de los profesionales sanitarios aparecen fuertemente relacionados con la notificación de RAMs en una elevada proporción de estudios. Los resultados podrían tener importantes implicaciones en términos de salud pública puesto que el conocimiento y las actitudes son considerados como factores potencialmente modificables. A través de otra revisión crítica de estudios publicados evaluamos la efectividad de diferentes intervenciones diseñadas para aumentar la notificación de RAMs. Todas las intervenciones evaluadas, excepto una, aumentaron la notificación de RAMs. Sin embargo, la mayoría de estudios revisados presentan importantes limitaciones metodológicas y formales las cuales disminuyen su grado de evidencia científica. El impacto observado en los estudios más antiguos es mayor. Este hecho posiblemente esté relacionado con una tasa de notificación más baja, un peor diseño del estudio o del análisis de resultados. Se observa que las intervenciones en farmacovigilancia no sólo aumentan la notificación total de RAMs sino que mejoran la relevancia de las RAM notificadas, es decir, aquellas graves, inesperadas, que presentan elevado grado de causalidad y las que implican a medicamentos de reciente incorporación al mercado.

El salmón Coho (Oncorhynchus kisutch), también denominado salmón plateado, ha adquirido recientemente un papel relevante debido a su producción acuícola creciente en países como Chile, Japón y Canadá, en paralelo con importantes capturas en países como Estados Unidos de Norteamérica, Rusia, Canadá y Japón. Este proyecto de tesis se centra en esta especie y en sus productos derivados de tipo refrigerado, congelado, cocido y enlatado, susceptibles de ser empleados en la dieta humana. En una primera fase se llevó a cabo el estudio de su conservación en refrigeración (hielo tradicional) y en congelación (-20 °C), haciéndose hincapié en su tiempo de vida útil, así como en el desarrollo relativo de las distintas vías de alteración. En una segunda fase, se estudió la aplicación de distintas tecnologías avanzadas de conservación al objeto de inhibir los distintos mecanismos de degradación y por tanto de prolongar el tiempo de vida útil. Entre estas tecnologías ensayadas se encuentran el hielo líquido, envases activos incluyendo antioxidantes naturales, altas presiones hidrostáticas y alimentación con dietas enriquecidas en antioxidantes naturales durante el periodo de crecimiento. Los análisis de calidad llevados a cabo a lo largo del desarrollo de los distintos experimentos incluyeron los químicos y microbiológicos, pero de un modo especial los de tipo sensorial y físico.

Introducción: La hemorragia gastrointestinal alta (HGIA) es una causa común de hospitalización con alta morbilidad, mortalidad y costes. Se considera una patología multicausal en la que pueden intervenir diferentes factores en su aparición. En este trabajo se ha evaluado el riesgo de HGIA asociado a diferentes factores de riesgo y sus interacciones. Métodos: Se realizó un estudio de casos y controles en cuatro hospitales españoles. Incluyendo como casos los sujetos con HGIA diagnosticada por endoscopia, y como controles sujetos sanos candidatos a cirugías de procesos no dolorosos. A todos se les realizó una anamnesis farmacológica, determinación de presencia de infección por H. pylori y Anisakis y un cuestionario de antecedentes previos de problemas gástricos y de otras variables relacionadas con las HGIA. Resultados: Se reclutaron 474 casos y 1160 controles. La automedicación con antiinflamatorios no esteroideos (AINE) aumentó el riesgo de HGIA en 5,4 (IC95% 3,2-9,0). Los AINE en combinación con antiagregantes incrementó el riesgo de HGIA en 8,8 veces (IC95% 3,9-19,6), en combinación con H. pylori en 10,7 (IC95% 5,4-21,0) y en combinación con Anisakis en 14,4 (IC95% 6,5-32,3). Por el contrario, en combinación con inhibidores de la bomba de protones el riesgo de HGIA dejaba de ser estadísticamente significativo (OR 1,45 IC95% 0,7-3,1). Conclusión: La interacción del consumo de AINE con otros factores como antiagregantes, H. pylori o Anisakis incrementan en varias veces el riesgo de HGIA. Dada la prevalencia de estas exposiciones, se podrían disminuir el número de HGIA evitando las exposiciones conjuntas con el consumo de AINE.

[ES]La miostatina es un miembro de la familia del factor de crecimiento transformante beta que se produce principalmente en el músculo esquelético y ejerce una función negativa sobre su desarrollo. La inhibición de la actividad de la miostatina está relacionada con un aumento marcado de la musculatura esquelética. Hoy en día, son muchas las patologías relacionadas con el desgaste muscular y la atrofia en las que se cree que la miostatina podría estar implicada. Esto ha motivado el estudio de potenciales fármacos que inhiban la miostatina o bloqueen sus vías de señalización celular. También existe la posibilidad de su uso ilícito como sustancias estimulantes para potenciar el rendimiento deportivo. En este estudio se aborda la obtención de miostatina humana empleando como vehículo de expresión una línea celular humana. Además, se realiza una revisión bibliográfica de la utilidad de la miostatina como biomarcador y de la detección de sus inhibidores en controles antidopaje., [EN]Myostatin is a family member of the transforming growth factor beta that is produced mainly in skeletal muscle and plays a negative role on its development. Inhibition of myostatin activity is related with a marked increase in skeletal muscle. Nowadays, myostatin is believed to be involved in many pathologies related with muscle wasting and atrophy. This has motivated the study of potential drugs that inhibit myostatin or its cell signaling pathways. Likewise, there is also the possibility of its misuse as stimulant substances to enhance athletic performance. In this research obtaining human myostatin using a human cell line as an expression vehicle is addressed. In addition, a literature review of the usefulness of myostatin as a biomarker and detection of its inhibitors in drug testing is performed

El presente proyecto de tesis comprende el estudio en profundidad de la mejora de la calidad de las principales especies salmónidas comerciales cultivadas tanto en Galicia como en la zona sur de Chile. El objetivo común ha consistido en aplicar diferentes estrategias de conservación a nivel de las distintas etapas de la cadena productiva de salmónidos al objeto de inhibir el desarrollo de la alteración de la fracción grasa (oxidación e hidrólisis). La mejora de la calidad y el incremento de la vida útil se abordaron mediante distintas técnicas de aplicación de compuestos preservantes de origen natural a las especies de salmónidos elegidas para su conservación como productos refrigerados, congelados, enlatados y secados. Para verificar el efecto inhibidor de la alteración de las distintas estrategias ensayadas, se realizaron análisis bioquímicos, físicos y sensoriales de las muestras tratadas en el laboratorio.

The work reported in this thesis, has been oriented to the design of multifunctional nanocapsules for the administration of antitumoral drugs. These systems are based on the use of hyaluronic acid or modified hyaluronic. These materials provide nanocapsules with specific affinity for cancer cells through specific cancer cell receptors, respectively. The physico-chemical characterization showed these prototypes present favourable properties for the administration of antitumoral drugs. Additionally, the study of in vivo fate in a cancer animal model showed a marked increase of drug accumulation in tumour tissue, especially for ligand modified nanocapsules, which have achieved also an improvement in therapeutic efficacy.

En este trabajo, se investigó en primer lugar la relevancia de ciertos determinantes estructurales en el bolsillo de unión de receptores acoplados a proteínas G (GPCRs) pertenecientes al receptoroma de antipsicóticos, para la afinidad y selectividad de dos antipsicóticos atípicos de gran relevancia farmacológica y clínica, clozapina y olanzapina. Partiendo de un análisis biocomputacional multirreceptorial de los perfiles de afinidad de ambos fármacos por distintos GPCRs así como de datos de modelización y acoplamiento ligando-receptor disponibles, se generaron receptores (serotoninérgico 5-HT2A, dopaminérgico D2) mutados en posiciones de interés y se determinó la afinidad de ambos antipsicóticos mediante ensayos de unión de radioligandos de competición en el equilibrio, identificándose posiciones aminoacídicas cuya identidad es relevante para el perfil de afinidad y selectividad de estos fármacos. Por otra parte, se abordó un estudio de las cinéticas de interacción del antipsicótico atípico lurasidona con uno de los GPCRs diana más relevante en su perfil farmacológico, el receptor de serotonina 5-HT7. Así, se cuantificó el parámetro tiempo de residencia del fármaco en dicho receptor en ensayos de unión de radioligandos cinéticos mediante el método de competición cinética de Motulsky y Mahan. Esto supuso la puesta a punto y la ejecución de un primer paso de cara a la caracterización del perfil de selectividad cinético de lurasidona. La determinación de este parámetro permitió obtener información farmacológica relevante relativa al fármaco. Por último, se estudió la relevancia para las cinéticas de interacción ligando-receptor de la identidad de un residuo en el bucle extracelular 3 del receptor de adenosina A2A, receptor postulado como de interés terapéutico en esquizofrenia. Mediante ensayos de unión de radioligandos cinéticos, se pudo comprobar que dicho residuo, identificado como de potencial interés en base a datos de simulación de dinámica molecular, resulta det

Despite the increasing therapeutic potential of peptide drugs, their exploitation has been greatly hampered due to their necessity of being injected. The possibility to deliver these complex molecules by the oral route would highly increase their therapeutic value. However, the gastrointestinal tract (GIT) has several biological barriers that make the administration of peptides a very important challenge. The objective of this thesis has been to design and develop polymer-based peptide nanocarriers with the potential to overcome the low stability and poor intestinal permeability of these fragile macromolecules. Beyond this ambitious objective, this thesis is expected to significantly contribute to the understanding of the processes involved in the interaction of the nanostructures with the GIT barriers.

Biofilms are complex communities of autotrophic and heterotrophic organisms immersed in a matrix mainly composed by polysaccharides. They are ubiquitous over wet surfaces and provide protection for microorganisms. In river environments there is evidence that biofilms play an important role in the biogeochemical cycles of nutrients and contaminants. The objective of this work is to evaluate the effect of the fluvial epipsammic biofilm on the retention and transformation of As and to understand its interaction with this metalloid in the Anllóns River (Galicia, NW Spain), where As pollution has been observed. The results revealed that biofilms play a key role in As biogeochemistry in freshwater environments, favouring As immobilization, especially in environments where As and P occur simultaneously, and promoting As detoxification by inhibiting the reduction of AsV to AsIII and methylating inorganic As.

En general, las algas marinas son una buena fuente de fibra al mismo tiempo que proporcionan vitaminas, minerales y nutracéuticos de interés para la alimentación humana. Por ello, en este estudio se analiza cómo influye la ingesta de las algas marinas Porphyra purpurea, Undaria pinnatifida, Himanthalia elongata, Ulva rigida y Codium tomentosum en la calidad nutritiva del alimento y en diversos parámetros hemáticos. Debido a que las enzimas implicadas en los procesos digestivos se adaptan a la dieta, se analiza el efecto del consumo de un alga verde, una parda y una roja en la actividad de las enzimas disacaridasas: maltasa, sacarasa y lactasa; así como en la actividad enzimática leucino aminopeptidasa y gamma-glutamil transpeptidasa en mucosa intestinal, hígado y riñón, órganos fundamentales en el metabolismo. Teniendo en cuenta que la composición de las algas incluidas en la dieta puede modular la producción de radicales libres, se valora, en los órganos antes mencionados, su influencia sobre la peroxidación lipídica y sobre la actividad de enzimas antioxidantes tales como superóxido dismutasa, catalasa y glutatión peroxidasa, como mecanismo endógeno que protege del daño oxidativo.

La semilla es el propágulo utilizado por las plantas Espermatófitas para perpetuarse, y constituye un hito trascendental en la historia evolutiva de las especies vegetales. Su éxito evolutivo radica en la adquisición de la tolerancia a la desecación y la existencia de un período de inactividad metabólica inducida en la fase final de su desarrollo (denominada dormición primaria) que le permite asegurar la dispersión y la supervivencia de la descendencia durante largos períodos de tiempo. La regulación hormonal de la dormición y la germinación está determinada principalmente por la relación ABA:GAs. Mientras que las GAs promueven la germinación, el ABA actúa como hormona clave en el establecimiento y mantenimiento de la dormición. Sisymbrium officinale (L.) Scop., la especie utilizada en este estudio, es una planta herbácea anual perteneciente a la familia Brassicaceae. La dormición primaria en S. officinale es intensa y para provocar su pérdida se precisa un almacenamiento a baja humedad relativa y temperaturas medio-altas; proceso conocido como “after-ripening” (AR) o post-maduración. La germinación de sus semillas es dependiente de nitrato (NO3-), dependencia que es aminorada por el AR. En esta Memoria se describe, desde una perspectiva integradora, la influencia del AR, NO3-, GAs y ABA en la capacidad germinativa de la semillas de S. officinale. Se demuestra por primera vez que el NO3- estimula la expresión de SoGA3ox2 (biosíntesis de GAs) y SoCYP707A2 (catabolismo de ABA) durante la imbibición de las semillas no durmientes, mientras que altera negativamente la expresión de SoRGL2 (regulador negativo de la señalización de GAs). Durante la imbibición de semillas durmientes (AR0), el NO3- disminuye la expresión de SoNCED6,9 (biosíntesis de ABA), SoRGL2 y SoABI5 (señalización de ABA) y aumenta la de SoCYP707A2. La expresión de SoDOG1 (gen relacionado con la respuesta a ABA) durante la imbibición disminuye durante el transcurso de la germinación respecto a semilla sec

El tipo de monocapa generada por los ácidos grasos estudiados depende de sus características estructurales de tal forma que la saturación de las cadenas hidrocarbonadas de las moléculas de ácido esteárico (18:0) facilita la constitución de una monocapa muy condensada y un valor del área límite muy pequeño. La presencia de insaturaciones en las cadenas hidrocarbonadas de las moléculas reduce drásticamente su grado de empaquetamiento, lográndose la formación de monocapas en estado superficial líquido expandido. Al aumentar el número de dobles enlaces, los valores de las áreas límites aumentan y los de los módulos de compresibilidad decrecen. El aumento del número de átomos de carbono en la cadena hidrocarbonada incrementa ligeramente el área límite de la monocapa, sin apenas afectar al módulo de compresibilidad de la misma. Mediante el uso de modelos moleculares se interpretaron, a partir del registro de espesores relativos, las diferentes conformaciones experimentadas por las moléculas de las sustancias estudiadas para cada uno de los estados físicos por los que atraviesan las monocapas. Las monocapas de tipo condensado (colesterol y ácido esteárico) presentan sus moléculas en una posición perpendicular respecto a la superficie del sustrato acuoso en el momento previo al colapso; durante la fase gas se hallan en una posición casi horizontal, con un grado de inclinación de 13°. Las monocapas expandidas (ácidos grasos insaturados) están posicionadas prácticamente de forma perpendicular a la horizontal instantes antes del colapso, mientras que, en la fase gas, presentan una inclinación de entre 36 y 42° respecto de la superficie del agua. El estudio de las características de las monocapas mixtas formadas por colesterol y ácidos grasos evidencia la existencia de interacciones de tipo atractivo entre los componentes en el caso de ácidos grasos insaturados. En el sistema colesterol-ácido esteárico (saturado) ambos componentes son inmiscibles en la interfaz aire/agua. Las e

El objetivo principal de esta tesis ha sido el desarrollo y evaluación de nanocápsulas de poliaminoácidos diseñadas para favorecer el transporte selectivo de fármacos al sistema linfático. Estas nanocápsulas constituidas por un núcleo oleoso y una cubierta polimérica de ácido poliglutámico (PGA), ácido poliglutámico PEGilado (PGA-PEG) o poliasparagina (PASN), poseen atractivas características fisicoquímicas para promover su acceso al sistema linfático, como un tamaño de partícula reducido cercano a 100 nm, potencial zeta negativo y una superficie hidrofílica. Estas formulaciones presentan una adecuada estabilidad y capacidad para encapsular y liberar de forma controlada fármacos hidrofóbicos como el docetaxel. Los estudios de biodistribución realizados mediante imagen de fluorescencia y radioactividad han demostrado que las nanocápsulas basadas en ácido poliglutámico logran una notable distribución a los ganglios linfáticos tras su administración subcutánea o intravenosa. Se ha estudiado el potencial de las nanocápsulas de PGA-PEG como plataforma de liberación de docetaxel para el tratamiento del cáncer metastásico de pulmón. Además, las nanocápsulas de PGA-PEG mostraron una reducida toxicidad in vivo en comparación con la formulación comercial Taxotere® y mejoraron de forma significativa la eficacia antitumoral en un modelo de cáncer de pulmón metastatizante, tanto en el tumor primario como en las metástasis linfáticas. De hecho, a diferencia del Taxotere®, las nanocápsulas de PGAPEG lograron producir la regresión de la carga tumoral en los ganglios mediastinos, aumentando considerablemente su supervivencia. Todos estos resultados ponen de manifiesto la capacidad de estas nanocápsulas para liberar fármacos al sistema linfático y su potencial para tratar diversas patologías como el cáncer metastásico.

Aínda que as vacinas baseadas en vesículas de membrana externa son eficaces fronte ás cepas epidémicas de N. meningitidis do serogrupo B, estas continúan a presentar importantes limitacións e estase a realizar un grande esforzo no desenvolvemento de novas vacinas e na reformulación das xa existentes. A resposta inmune fronte a estas vacinas diríxese principalmente fronte aos complexos de porinas. Este traballo pretende un mellor coñecemento dos complexos de porinas e do papel da RmpM mediante a renaturalización de complexos proteicos en liposomas. Ademais, avalíase o potencial vacinal dos proteoliposomas que conteñen complexos de porinas/RmpM. Os proteoliposomas preparados por diálise-extrusión que conteñen diferentes combinacións das proteínas recombinantes PorB, PorA, e RmpM permiten a renaturalización dos complexos de porinas e un perfil moi similar ao existente nas OMVs producidas pola bacteria. As análises realizadas mostran que a RmpM se unen aos complexos de porinas a través do seu extremo N-terminal mediante a interacción coa PorB, sendo un péptido de seis aminoácidos (VSGQSN) crucial para esta interacción. A asociación a outros complexos proteicos suxire un importante papel da RmpM no transporte de ións a través das membranas celulares, na translocación de proteínas a través do periplasma e na adhesión ás células do hóspede. Todos os proteoliposomas ensaiados induciron unha boa resposta inmune fronte á cepa homóloga, incluso en ausencia da PorA, mais a reactividade cruzada fronte as cepas heterólogas foi baixa. Os sistemas mostraron unha boa estabilidade a longo prazo a temperatura ambiente tras liofilización, sen se observaren diferenzas entre os dous axentes crioprotectores ensaiados, glicosa e trealosa. Polo tanto, os proteoliposomas son sistemas estábeis, de composición ben definida e cun grande interese como alternativa ás vacinas de OMVs e como vehículo para as novas vacinas de subunidades.

En la presente tesis doctoral se plantea el diseño y desarrollo racional de nanoestructuras como vehículos para la liberación de antígenos. Para ello, y con el objetivo de incrementar la respuesta inmune a antígenos de distinta naturaleza se eligieron biomateriales tales como polisacáridos, poli aminoácidos y lípidos, con propiedades inmunoestimulantes y/o inmunoadyuvantes. A partir de ellos, se desarrollaran tres tipos de nanoestructuras: i) Sistemas basados en el recubrimiento de antígeno particulados mediante biopolímeros tales como la protamina, la poliarginina, el sulfato de dextrano, el alginato o el polinucleótido, poli (I:C); ii) Nanopartículas de quitosano conteniendo moléculas inmunoestimulantes poly (I:C) encapsulado y asociadas a un péptido T-Helper; iii) Nanoemulsiones y nanoemulsiones recubiertas (nanocápsulas) basados en la lisofosfatidilcolina, el ácido linoléico, el escualeno y el quitosano. Estas nanoestructuras fueran constituidos por nanotecnologías sencillas y fácilmente escalables, tales como la complejación iónica, gelificación iónica y el desplazamiento del solvente según las características de los biomateriales utilizados y de la naturaleza del antígeno a que se destina. Los sistemas desarrollados presentan en general una adecuada estabilidad en suspensión y pudieron ser liofilizados sin alterar sus propiedades fisicoquímicas originales. A estos sistemas se asociaron diferentes antígenos tales como el antígeno recombinante particulado de la hepatitis B y un antígeno peptídico derivado del virus del papiloma humano. Las formulaciones resultantes fueron analizadas mediante una variedad de técnicas in vitro y/o in vivo. En general, las nanoestructuras desarrolladas demostraron tener un interesante potencial como adyuvantes de vacunas, habiendo logrado modular la respuesta inmune frente a antígenos de distinta naturaleza tras su administración parenteral y/o mucosa. Más allá de estos resultados, el trabajo recogido en esta tesis pone de manifies

El presente proyecto de tesis supone el estudio en profundidad de la mejora de la calidad de las principales especies marinas capturadas por la flota gallega que pesca en caladeros comunitarios, incluyendo una especie infrautilizada e infravalorada hasta la actualidad. El objetivo común ha consistido en aplicar técnicas de conservación susceptibles de mejorar o posibilitar su conservación a bordo. El aumento de la vida útil se abordó mediante distintas técnicas de aplicación de compuestos preservantes a las especies elegidas para su conservación en refrigeración o congelación. Para verificar el posible efecto inhibidor de la alteración de las distintas estrategias ensayadas, se realizaron análisis bioquímicos, microbiológicos y sensoriales en las muestras tratadas en el laboratorio o a bordo.

Esta investigación pretende evaluar los riesgos que amenazan la conservación de las pinturas murales de A Ribeira Sacra. Para alcanzar este objetivo, se determinó la composición de las pinturas mediante distintas técnicas analíticas y se estudiaron las condiciones ambientales en las iglesias que las acogen. También se identificaron las principales patologías presentes tanto en los edificios como en los murales y se diagnosticó el estado de conservación. A partir de la aplicación de varios modelos generales de evaluación de riesgos, se determinaron aquellos de mayor magnitud, que fueron investigados en detalle mediante herramientas específicas. Los resultados obtenidos serán de utilidad para la investigación en Historia del Arte, las intervenciones de restauración y conservación preventiva y la propuesta de una metodología de estudio extensible al resto de pinturas murales de Galicia.

El consumo de drogas es una práctica habitual tanto en población general como en conductores de vehículos, mostrándose un incremento potencial del riesgo asociado al consumo en este último caso. La información relativa a la detección de sustancias psicoactivas en la conducción se ha incrementado notablemente en los últimos años, principalmente debido al impulso de dos grandes proyectos de colaboración internacional (proyectos ROSITA y DRUID) que permitieron establecer el fluido oral (FO) como matriz de detección de sustancias, sentar las bases de los dispositivos de toma de muestra y realizar por primera vez un análisis epidemiológico unificado y a gran escala del consumo de estas sustancias en la población de conductores así como su impacto, entre otras muchas actividades. Todas las tareas llevadas a cabo han ido proporcionado los datos necesarios para establecer una legislación referente al consumo de sustancias psicoactivas en conductores de vehículos y específica al consumo de drogas, que ha ido experimentando continuos cambios a lo largo de todo el período hasta dar lugar a las distintas leyes vigentes actualmente que regulan el consumo de todas aquellas sustancias que afecten a la capacidad de manejar un vehículo de forma segura y establecen las medidas destinadas a tal efecto

[ES]La cistinosis ocular es una enfermedad rara, caracterizada por la acumulación de cristales de cistina en el interior de los lisosomas de las células, por un defecto en el transportador de la cistina, conocido como cistinosina. El único tratamiento capaz de detener la progresión de la enfermedad, es la cisteamina. Esta es un aminotiol, que se combina con la cistina y permite su salida de los lisosomas. En este trabajo se busca tratar los síntomas oculares de la enfermedad, mediante la formulación de un hidrogel ion sensible y demostrar su estabilidad y seguridad. Se ha realizado un estudio de estabilidad del gel en dos condiciones de conservación diferentes: a temperatura ambiente y en nevera (4-8˚C). Los parámetros medidos han sido; pH, osmolalidad, transparencia, bioadhesión, esterilidad y ausencia de partículas. También se han realizado dos estudios para valorar la seguridad de la formulación, uno que mide la irritación aguda (HET-CAM) y otro que analiza la citotoxicidad mediante RTCA (real time cell analyzer). No hubo diferencias significativas en la estabilidad del gel con respecto a la medida inicial, para ninguno de los dos almacenamientos. La cisteamina se mostró citotóxica pero no irritante, mientras que los polímeros que componen el gel, no son irritantes ni citotóxicos. El uso de un gel hidrogel ion sensible, favorece la permanencia del fármaco en el área precorneal, dando tiempo a que penetre en la córnea y disminuye el número de aplicaciones diarias., [EN]Ocular cystinosis is a rare disease characterized by the accumulation of cystine crystals within the lysosomes of cells, by a defect in the transporter of cystine, known as cystinosin. Cysteamine is the only treatment capable of reducing the progression of the disease. It is an aminothiol, which combined with cystine permits the output of lysosomes. This paper seeks to treat eye symptoms of the disease through the formulation of an ion-sensitive hydrogel and to demonstrate its stability and security. A stability study with two different storage conditions (room temperature and in a refrigerator 4-8˚C) was conducted. The measured parameters have been; pH, osmolality, transparency, bioadhesion, sterility and absence of particles. Also two studies to assess the safety of the formulation was conducted, one measures acute irritation (HET-CAM) and the other analyzes the cytotoxicity by RTCA (real time cell analyzer). Significant differences in gel stability were not appreciated with respect to the initial determination, in any storage. Cysteamine has demonstrated cytotoxic but not acute irritation, while polymers of the gel are not cytotoxic neither acute irritatives. Using an ion sensitive hydrogel gel favors retention of the drug in the precorneal area, increasing time to penetrate the corneal and decreases the number of daily applications.

La transformación de terrenos de cultivo en forestales (forestación) debería provocar una serie de transformaciones en la dinámica de los nutrientes y de la materia orgánica del suelo, en cuya mineralización intervienen una serie de enzimas que son, además, buenos indicadores de los cambios sufridos por el suelo a nivel metabólico. Con esta Tesis Doctoral se pretenden evaluar las modificaciones producidas en el metabolismo de los suelos al cambiar su uso, de agrícola a forestal, mediante el empleo de las actividades enzimáticas.

[ES]El tejido adiposo posee un papel central en el metabolismo energético, por lo que su funcionamiento inadecuado podría dar lugar a patologías metabólicas como la obesidad o la diabetes mellitus tipo 2. Este estado disfuncional se caracteriza por hipertrofia e hiperplasia de los adipocitos, así como por un exceso de lipólisis. Asimismo, se acompaña de la acumulación de lípidos en tejidos ectópicos. Esto conduce a la aparición del síndrome metabólico, que se caracteriza por resistencia a la insulina, intolerancia a la glucosa, dislipemia, obesidad e hipertensión. En la regulación del tejido adiposo participan distintas kinasas. Recientemente, se aislaron moléculas inhibidoras de kinasas que aumentan la adipogénesis y se identificaron sus dianas moleculares. Debido a su papel en la señalización de la insulina, en este trabajo se ha seleccionado a PI3K (fosfatidilinositol 3-kinasa) para continuar su identificación y validación como enzima reguladora del metabolismo. Para ello se emplea un ensayo fenotípico de adipogénesis en el que los inhibidores de PI3K conducen a una mejora de este proceso. Por otro lado, los inhibidores de PI3K dan lugar a una inhibición parcial de la lipólisis como resultado de su evaluación en un ensayo de este tipo. Así, es posible identificar a PI3K como una diana candidata en la regulación de la adipogénesis y, por consiguiente, en el tratamiento del síndrome metabólico, la obesidad y la diabetes mellitus tipo 2, [EN]Adiposse tissue plays a central role in energy metabolism, so its impaired function could lead to metabolic diseases such as obesity or type 2 diabetes mellitus. This dysfunctional state is characterized by hypertrophy and hyperplasia of adypocytes, as well as an excessive lipolysis. Likewise, it is acompaneid by lipid accumulation in ectopic tissues. This leads to the emergence of the metabolic syndrome, which is characterized by insulin resistance, glucose intolerance, dyslipidemia, obesity and hypertension. Different kinases are involved in regulating adiposse tissue. Recently, kinase inhibitors molecules which increase adipogenesis were isolated, and their molecular targets were identified. Because of its role in insulin signalling, PI3K (phosphatidylinositol 3-kinase) has been selected in order to continue its identification and validation as a metabolism regulator enzyme. For this reason, an adipogenesis phenotypic assay was employed, where PI3K inhibitors lead to an improvement on this process. On the other hand, PI3K inhibitors result in a partial inhibition of lipolysis as a consequence of its evaluation in a lipolysis assay. Thus, PI3K can be identified as a candidate target in regulating adipogenesis and therefore, in the treatment of metabolic syndrome, obesity and type 2 diabetes mellitus

La extrusión por fusión (EF) es una técnica que, ampliamente utilizada en la industria de plásticos y alimentaria, está recibiendo, en el ámbito farmacéutico, una atención creciente en los últimos años. A grandes rasgos, consiste en hacer pasar una mezcla de materiales sólidos, a una velocidad determinada y en condiciones de presión y temperatura específicas, a través de un orificio de diámetro fijo dando lugar a un producto homogéneo y uniforme denominado extruido. De esta forma, en el campo de la tecnología farmacéutica, se consigue la mezcla íntima de un fármaco con el agente portador (habitualmente una sustancia polimérica) y, opcionalmente, otras sustancias auxiliares que facilitan el proceso, como agentes plastificantes o lubrificantes (Crowley y col., 2007).

En esta Memoria se describe un trabajo de diseño, síntesis y evaluación farmacológica de derivados cumarinícos de diferente complejidad, mostrando la versatilidad química de este esqueleto y algunas de sus aplicaciones en la Química Farmacéutica. En esta Memoria se hace una selección del trabajo global realizado, mostrando un conjunto de 134 compuestos que han sido los publicados hasta este momento de un total de más de 500. Todos ellos incorporan en una sola estructura el núcleo de la cumarina y del estilbeno, o bien de la cumarina y funciones de tipo éster, amida o carbamato. Modificaciones sencillas de estos esqueletos han permitido además la obtención de compuestos con diferentes sustituyentes (átomos de bromo o cloro, y/o grupos metilo, metoxilo, etoxilo, hidroxilo, nitro, amino, etc) en diversas posiciones de las moléculas. La síntesis de estos compuestos, con pureza y en cantidad suficiente para sus ensayos farmacológicos, se ha realizado utilizando metodologías directas, eficientes y generalizables. Se presentan los resultados obtenidos en la posterior evaluación farmacológica de estos derivados como inhibidores enzimáticos (MAO-A, MAO-B, AChE, BuChE y tirosinasa), ligandos de adenosina, antioxidantes y antimicrobianos. La selección de los mismos se hizo teniendo en cuenta el conocimiento previo ayudado por herramientas de diseño racional (QSAR y docking) y se obtuvieron muy buenos resultados en todos los campos estudiados.

En la presente memoria, titulada: Química de coordinación de tiazolidín‐4‐onas funcionalizadas con anillos pirazina, frente a iones metálicos de los grupos X y XI, se describe la síntesis, mediante un procedimiento convencional y un procedimiento asistido por microondas, de los siguientes compuestos: 2‐(pirazín‐aminometilen‐hidrazono)‐tiazolidín‐4‐ ona (HPzAm4DHotaz), 4‐metil‐2‐(pirazín‐aminometilen‐hidrazono)‐tiazolidín‐4‐ona (PzAm4Motaz) y 4‐etil‐2‐(pirazín‐aminometilen‐hidrazono)‐tiazolidín‐4‐ona (PzAm4Eotaz), por reacción en medio básico de las tiosemicarbazonas recientemente preparadas: 2‐ pirazínformamida tiosemicarbazona (HPzAm4DH), 2‐pirazínformamida 4Nmetiltiosemicarbazona (HPzAm4M) y 2‐pirazínformamida 4N‐etiltiosemicarbazona (HPzAm4E), con ácido cloroacético, respectivamente. Tales tiazolidina‐4‐ona se han utilizado como ligandos en la preparación de series de complejos de NiII, PdII, PtII, CuII y AgI. Los ligandos y complejos se han caracterizado mediante análisis elemental de C, H, N y S, espectrometría de masas, métodos espectroscópicos de IR, UV‐visible, RMN de 1H, 13C, 31P y 195Pt, así como por difracción de rayos X de cristales únicos.

El AMP cíclico (AMPc) es un segundo mensajero que juega un papel crucial en la regulación de numerosos procesos y funciones en las células endoteliales en condiciones fisiológicas y patológicas. Entre dichas funciones cabe destacar su participación en la regulación del tono vascular. Aunque durante muchos años se pensó que la relajación vascular inducida por el AMPc se producía mediante efectos directos sobre el músculo liso vascular y de forma independiente de la presencia de un capa endotelial funcional, ahora es ampliamente aceptado que el endotelio también participa en este proceso. Sin embargo los mecanismos que subyacen a esta acción no son aún plenamente comprendidos. Tradicionalmente, se creía que el AMPc ejercía sus efectos casi en exclusiva mediante la activación de PKA, sin embargo, el descubrimiento en los últimos años de una nueva clase de proteínas implicadas en la transducción de la señal mediada por el AMPc, las proteínas Epac, ha abierto nuevos horizontes en la investigación en el campo del AMPc. Por otra parte, en los últimos años, se ha hecho evidente que la disfunción endotelial podría estar implicada el origen de diversas patologías. En situaciones de estrés hipóxico, las células endoteliales sufren cambios adaptativos que conducen a múltiples anormalidades estructurales y funcionales que pueden contribuir aún más a la patogénesis de varias enfermedades vasculares. Sin embargo, los mecanismos involucrados en la respuesta vascular a la hipoxia son complejos y no se conocen totalmente. Teniendo en cuenta, la gran cantidad de procesos que son regulados por el AMPc en el endotelio, una alteración en las rutas de señalización de este nucleótido podría estar implicada en la disfunción endotelial inducida por la baja tensión de oxígeno.

Los compuestos fenólicos se encuentran ampliamente distribuidos en el reino vegetal, constituyen una parte esencial de la dieta humana y cada vez cobran mayor importancia debido a sus funciones bioactivas, propiciadas fundamentalmente por sus propiedades antioxidantes. En los últimos años ha aumentado el interés por los compuestos antioxidantes de origen natural para reducir al mínimo el empleo de los aditivos sintéticos en la conservacion de los alimentos. La posible toxicidad de algunos antioxidantes sintéticos, conjuntamente con la sensibilización de los consumidores en lo que respecta a cuestiones de seguridad y toxicidad alimentaria, ha motivado un creciente interés en la identificación de antioxidantes alternativos y seguros de origen natural como la vitamina E, o extractos naturales ricos en compuestos fenólicos y/o terpénicos.

La incorporación de moléculas terapéuticas en las estructuras de los materiales implantables hace posible la liberación de fármacos in situ dando lugar a una nueva generación de sistemas biofuncionales. Este trabajo de investigación aborda la obtención de cerámicas a partir de precursores naturales mediante un proceso en dos etapas, lo que permite la síntesis de carburos de silicio biomórficos (bioSiCs). Se estableció el potencial de los bioSiCs para la regeneración de tejido óseo, evaluando sus características morfológicas, las respuestas celulares que producen y su capacidad para cargar y liberar moléculas terapéuticas.

En la presente Memoria se describe una selección del trabajo realizado de diseño, síntesis y estudio preliminar de compuestos oxacíclicos con interés farmacológico inspirados en productos naturales. De la amplia quimioteca preparada, se presenta más en detalle los resultados de aquellos compuestos que hasta el momento han sido publicados o están en fase de publicación. La mayoría de los compuestos presentados son híbridos con núcleo cumarínico sobre el cual se incorpora el esqueleto de estilbeno o de chalcona en 3 y 8 de la cumarina, o bien con modificaciones en los anillos aromáticos de los mismos. Se presentan también metodologías sintéticas para la preparación de derivados de la rocaglamida. Respecto de los híbridos cumarina-chalcona, se presentan 4 series principales de compuestos sintetizados, en las que se han realizado modificaciones sencillas como la introducción de sustituyentes de distinta naturaleza, en distinto número y en diferentes posiciones de modo que nos fuese posible obtener una relación estructura-actividad para cada serie y para cada diana estudiada. Las metodologías y rutas sintéticas empleadas han sido seleccionadas de manera que nos permitiesen acceder a las estructuras diseñadas de la forma más sencilla, eficiente, directa y versátil posible en la cantidad y con la pureza necesaria para la realización de los estudios estructurales y biológicos. Hasta el presente, fueron realizados estudios preliminares de series seleccionadas de los compuestos sintetizados como inhibidores enzimáticos (MAO-A y MAO-B), ligandos de receptores de adenosina, antioxidantes, antiparasitarios y antibacterianos.

Las bebidas alcohólicas son el producto biotecnológico de mayor producción dentro de las empresas biotecnológicas. La fermentación alcohólica es probablemente el proceso biotecnológico más antiguo desarrollado por el hombre, existen evidencias arqueológicas de más de 7000 años (García Garibay & López-Mungía Canales, 2004). Las bebidas alcohólicas han sido mejoradas por el hombre buscando características organolépticas adecuadas al gusto de los consumidores. Tradicionalmente, la búsqueda de mejores características organolépticas en las bebidas alcohólicas ha provocado la selección indirecta de las levaduras responsables de la fermentación. Actualmente el proceso de fermentación es totalmente controlado y la tendencia actual es a la mejora genética de las levaduras de manera directa mediante la aplicación de técnicas del ADN recombinante (Pretorius, 2000). Tanto en vinos espumosos como en la cerveza la espuma es una de las características sensoriales más importantes ya que es percibida por el consumidor desde el momento en que se sirve y posteriormente cuando se bebe (Evans & Bamforth, 2009; Martínez- Rodríguez & Pueyo, 2009). Las bebidas alcohólicas son sistemas multicomponentes que además de proteínas y alcohol contienen otras macromoléculas, muchas de ellas con actividad superficial por sí mismas o bien por interacción con otras. Por este motivo se han realizado estudios para determinar cuáles son los compuestos con mayor capacidad espumante en bebidas espumosas y se ha observado que en el caso de los vinos espumosos las macromoléculas con mayor capacidad espumogénica son las glicoproteínas (Senée et al, 1999; Moreno-Arribas et al, 2000; Douglas et al, 2005). Las glicoproteínas han sido identificadas como las macromoléculas dominantes en la espuma de los vinos espumosos, esto es debido a la naturaleza hidrófoba de las glicoproteínas, que favorece la unión de estas a las burbujas de gas, así, los glucanos hidrófilos de estas se localizarán en la capa acuosa entre la

Este trabajo tiene por objetivo el estudio de la Facultad de Farmacia de Santiago de Compostela durante los más de setenta años del siglo XX que ocupó las instalaciones del Colegio de Fonseca. De esta memoria de tesis se podrán extraer una serie de conclusiones que contribuirán al mayor y mejor conocimiento de la institución docente e investigadora que en la actualidad esta Facultad. Las nuevas políticas estatales de fomento de la investigación científica, sumadas al relevo generacional que entre el profesorado se produjo durante el primer tercio del siglo XX, transformaron de manera significativa el viejo centro docente decimonónico en el germen de una escuela investigadora que comenzó a dar sus frutos en forma de publicaciones en revistas especializadas de la época. Asimismo, resultó interesante la incorporación de las mujeres a las aulas de Farmacia, a partir de 1914, comenzando con una matrícula femenina casi anecdótica y convirtiéndose en una de las carreras con mayor presencia de mujeres justo antes de la guerra civil. El período de la guerra civil es quizá el más complejo y diferenciador de la historia de la Facultad de Farmacia de Santiago en el siglo XX. Tres años en los que se transformó el centro docente en un laboratorio de Farmacia militar en el que la plantilla de profesores, algunos alumnos y jóvenes voluntarias realizaron tareas de fabricación de medicamentos para el Ejército del Norte del bando franquista. Ya durante la posguerra, la ruptura con el primer periodo fue total, de manera que, al igual que el país entero, la Universidad de Santiago y la Facultad de Farmacia se vieron dentro de un contexto socio-político completamente diferente al anterior. La influencia de la Iglesia católica y de las nuevas clases dirigentes de ideología nacional-sindicalista condicionó la vuelta a la normalidad tras la guerra civil. Una normalidad que trató de recuperar parte de lo perdido en el naufragio, pero que se dio de bruces contra el muro del pensamiento reacci

Actualmente, a materia Microbioloxía II impártese no segundo cuadrimestre do segundo curso do Grao en Farmacia da Universidade de Santiago de Compostela. Está, polo tanto, dirixida ao alumnado de 2º Curso que xa posúe coñecementos previos acadados na Microbioloxía I, que é impartida no primeiro cuadrimestre, e que trata dos aspectos básicos morfolóxicos, fisiolóxicos e xenéticos dos microorganismos. Todos os estudantes de ciencias da saúde deben comprender os fundamentos da enfermidade infecciosa. As infeccións non se poden comprender sen certos coñecementos de Microbioloxía, e a infección é un dos principais mecanismos de produción de enfermidades, que pode afectar a calquera tecido ou órgano do corpo humano. No Grao de Farmacia, este obxectivo trátase de acadar na Microbioloxía II, cuxo programa está claramente dividido en once Unidades Didácticas nas que o profesorado tentará aproximar ao alumno, mediante un enfoque teórico e práctico, as causas e manifestacións das principais enfermidades de orixe infecciosa, as vías de transmisión de patóxenos así como os métodos de prevención e control de enfermidades. Deste modo preténdese simultanear a adquisición de coñecementos teóricos e a adquisición de destrezas na manipulación de microorganismos, así como o traballo en condicións asépticas. A Unidade Didáctica 11 ten como finalidade reforzar e poñer en práctica os coñecementos adquiridos nas unidades precedentes. Pareceunos de especial interese para o alumno dispor dun manual práctico de laboratorio que recolla os obxectivos, fundamentos e procedementos de cada unha das clases prácticas que os alumnos van facer. Na presente Unidade Didáctica, concibida como dito manual, os alumnos poderán anotar as súas observacións e resultados. Deste xeito, o alumnado de Microbioloxía II desenvolverá unha maior e mellor conciencia microbiolóxica, que difire de calquera outro tipo de traballo experimental nun laboratorio, e que é o que lle imprime un carácter diferencial a esta discip

A materia “Análise biolóxica e diagnóstico de laboratorio II” está vinculada a dúas áreas de coñecemento, Microbioloxía e Parasitoloxía, ten carácter troncal e impártese durante o segundo cuadrimestre no cuarto curso da Licenciatura en Farmacia. Está por tanto dirixida a alumnos que xa teñen coñecementos básicos de Microbioloxía, Parasitoloxía, Fisioloxía, Anatomía, Citoloxía, Histoloxía, Inmunoloxía e Bioquímica. A presente unidade didáctica é a primeira do programa da materia impartida pola área de Microbioloxía. Nesta unidade didáctica abórdanse temas cuxo coñecemento é básico para o bo funcionamento do laboratorio de microbioloxía e para garantir a protección do seu persoal, da comunidade e do medio. O coñecemento da estrutura xeral dun laboratorio de microbioloxía clínica e a correcta aplicación das normas de calidade e seguridade permitirán que o laboratorio de microbioloxía sexa un lugar seguro, eficiente e cómodo