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Two genera of the Fabaceae family showed phytoplasmas symptoms in different locations in Europe i.e. Germany and Italy. Spartium junceum L. (Spanish broom) is a deciduous shrub with dark green, round stems and alternate leaves; inflorescences are terminal clusters of several bright yellow somewhat fragrant flowers. This ornamental shrub is frequently spontaneously growing especially in southern Italy where it is affected by spartium witches’ broom (SpaWB) disease, characterized by proliferation of axillary buds and stem fasciation. Two different phytoplasmas have been associated to SpaWB: ‘Candidatus Phytoplasma spartii’ (group 16SrX-D) and a phytoplasma belonging to elm yellows group (16SrV-C). Both were reported associated with SpaWB in Italy while only ‘Ca. P. spartii’ was reported in Spain. In the spring of 2011, typical SpaWB symptoms were observed in a plant up to 2 m tall growing in the city of Ercolano (Campania region, Italy). A similar symptomatology was observed in a group of shrubs of Cytisus scoparius (L) syn. Sarothamnus scoparius, better known as common broom or scotch broom growing in Dahlem botanical garden in Berlin (Germany). This is a perennial shrub native to western and central Europe, but it is considered invasive plant in areas such as North America and New Zealand. Symptomatic and asymptomatic samples were collected in both cases: five samples of C. scoparius and two of S. junceum were analysed for phytoplasma presence by nested-PCR assays employing primer pairs P1A/P7A followed by F1/B6 and R16F2n/R2, phytoplasma identification was achieved by RFLP analyses with Tru1I on the two latter amplicons. Further confirmation of phytoplasma identity was achieved by nested-PCR assays with primers specific for phytoplasma groups 16SrI, 16SrV and 16SrX. All symptomatic samples produced amplicons of the expected lengths and no product was amplified from asymptomatic plants and using 16SrV specific primers. Identification and classification of phytoplasmas allow to detect ‘Ca. P. spartii’ subgroup 16SrX-D and ‘Ca. P. asteris’ subgroup 16SrI-B in both genera. In some of the samples of C. scoparius also stolbur phytoplasmas were identified. Further phytoplasma characterization was carried out on tuf gene using a cocktail primers mix that was able to amplify phytoplasmas identified as ‘Ca. P. asteris’ in S. junceum and phytoplasmas showing two different Tru1I profiles in C. scoparius from Germany that are not present in any published RFLP profile on this gene. Direct amplicon sequencing is in progress in order to verify possible affiliation to ‘Ca. P. spartii’ group since the only available sequences of this gene on phytoplasmas are deposited in Qbank since they were obtained from the Qbol EU project.

La tracciabilità dei trattamenti fitosanitari, così come per i processi di trasformazione e conservazione degli alimenti, può trovare un utile supporto nell'Information Technology (IT). In ambito alimentare si stanno diffondendo strumenti basati su tecnologia a radiofrequenze (Radio Frequency Indetification Devices, RFID) in grado di registrare ad intervalli prestabiliti la temperatura di conservazione dei prodotti durante il loro trasporto. Riutilizzabili e relativamente economici, sono stati impiegati per il monitoraggio di trattamenti termoterapici della vite, al fine di verificare le potenzialità di impiego quali strumenti di certificazione dei trattamenti medesimi. Il trattamento è stato condotto mediante immersione del materiale di propagazione (marze e talee portinnesto) in acqua calda (50 °C per 45 minuti) allo scopo di ridurre il rischio di trasmissione di fitoplasmosi. La gabbia di contenimento delle barbatelle è stata idealmente suddivisa in tre strati longitudinali, posizionando tre sensori termici all'altezza mediana di ogni strato. Il sistema proposto ha mostrato una affidabilità del 100%, permettendo l'esportazione diretta dei dati raccolti in formati compatibili con personal computer per la gestione del trattamento da ufficio. Considerando i tempi di carico e scarico della gabbia, l'89 % dei sensori è stato in grado di registrare tre cicli di trattamento in continuum. I dati termici, più capillarmente raccolti dal volume di carico rispetto ai sensori in dotazione della macchina termoterapica, hanno permesso una valutazione dettagliata della distribuzione della temperatura all'interno della gabbia, consentendo un monitoraggio del trattamento di alta affidabilità.

Iberis showing symptoms of stunting, yellows and witches'broom was found for the first time infected by phytoplasma belonging to 16Srx group.

Il nome “iberis” svela immediatamente l’origine di questa pianta: la penisola iberica, dove le specie del genere Iberis sono alquanto diffuse allo stato spontaneo, anche se alcune di esse crescono in tutta l’Europa meridionale ed anche in’Italia. La specie “sempervirens”, ad esempio, la si incontra facilmente nei luoghi rupestri di Sicilia, Campania, Abruzzo, Molise e Veneto, ove forma dei cuscini rotondi, alti 30/40 cm, costituiti da foglie spatolate e carnose che circondano ampi mazzetti di candidi fiorellini a quattro petali. Dato che la famiglia botanica di appartenenza è quella delle Brassicaceae, una volta nota come Cruciferae, i fiori sono tipicamente disposti a croce e riuniti in infiorescenze appiattite larghe 3-5 cm. Nel linguaggio comune l’iberis prende vari nomi: “porcellana”, “bouquet della sposa”, “fiocco di neve” o più semplicemente “nevina” dato che la fioritura, che va da ottobre a maggio, avviene nel periodo più freddo dell’anno. Ma le “cose” in giardino non vanno sempre come si desidera ed anche l’iberis può non soddisfare le nostre aspettative. La stessa esposizione influisce moltissimo sulla fioritura: una posizione soleggiata, tale da assicurare alcune ore di luce solare diretta, ne garantisce una buona e prolungata, mentre in piena ombra si ha sovrabbondanza di vegetazione e meno boccioli fiorali. A volte, però, se la pianta non fiorisce il problema è un altro e ben più grave. Può capitare che l’iberis non si sviluppi armoniosamente, oppure lo faccia in maniera asimmetrica; alcune foglie sono normali, altre sono piccole, di un verde pallido, giallastre o con sfumature rossastre. Quel che è peggio è che i fiori ben formati sono rari: gli altri o sono deformi ed incompleti, o rimangono piccoli, addossati a formare piccole rosette. Non sembra neanche di essere di fronte ad una “nevina” se non fosse per quel “tocco” di bianco che spunta qua e là fra l’ammasso informe di vegetazione. Cosa è successo? La pianta è purtroppo infetta da quei patogeni, chiamati fitoplasmi, che abbiamo già conosciuto in passato quando ci siamo soffermati sui fiori verdi di ortensia, echinacea, margherita e di altre piante ancora. Le iberis infette da fitoplasmi rappresentano una novità assoluta per il mercato delle ornamentali. Infatti, i primi casi di infezione sono stati riscontrati di recente, nel 2013 e nel 2014 in Olanda ed in Italia. Un motivo in più, quindi, nel porre la massima attenzione alle piante che acquistiamo per tappezzare, ad esempio, un piccolo giardino roccioso.

Le piante officinali sono spesso infette da fitoplasmi, responsabili di malattie contraddistinte da giallumi, virescenza e fillodia la cui diffusione è in aumento. Per la prima volta, sono stati eseguiti studi analitico-comparativi che hanno evidenziato l’influenza di questi patogeni sui metaboliti primari e sencondari della pianta

La virescenza dell’ortensia è una malattia comune nei parchi e nei giardini, nota, in Italia, fin dal 1973. Il sintomo appare evidente al momento della fioritura inoltrata: a questo stadio, infatti, le infiorescenze rimangono più piccole del normale e presentano viraggi di colore che tendono al verde. Può anche capitare che, su di una stessa pianta, alcune infiorescenze siano costituite da fiorellini totalmente verdi, rosa o azzurri (a seconda della varietà), ed altri siano trasformati in un ammasso di foglioline stranamente carnose e con nervature bene evidenti. Ma non basta, nei casi più gravi è tutta la pianta ad essere compromessa: la taglia è ridotta ed il portamento poco elegante, con rami che si accrescono confusamente, presentando nodi ravvicinati e rosettamento delle foglie. A volte capita che il pigmento antocianico vada a localizzarsi proprio nelle foglie, per cui la pianta produce fiori verdi, mentre l’apparato fogliare assume una colorazione rossastra. I ruoli sembrano essersi inverti e nulla è come dovrebbe essere. I responsabili della malattia sono dei microrganismi che vivono e si moltiplicano all’interno del floema e che hanno la capacità di alterare sensibilmente la concentrazione delle sostanze ormonali influendo sullo sviluppo fisiologico dell’intero organismo. Le conseguenze Un danno solo estetico? Certamente No. I produttori di ortensie sono ben consapevoli della pericolosità dei fitoplasmi e quando effettuano la moltiplicazione agamica prestano la massima attenzione a prelevare le talee da piante-madri sane per evitare di ottenere individui già infetti. Per loro, la virescenza rappresenta una subdola insidia, soprattutto perché i fitoplasmi possono infettare una pianta visivamente normale che solo al momento della fioritura mostrerà i sintomi della malattia. Se nel nostro giardino un’ortensia a dimora da molti anni improvvisamente produce fiori verdi, quasi certamente è stata visitata da qualche cicalina che ha provveduto ad inoculare nelle foglie, con la saliva, i fitoplasmi, e non c’è più alcun rimedio: la pianta deve essere subito eliminata per evitare ulteriori contagi.

Nonostante negli ultimi anni la fl avescenza dorata sia tornata a manifestarsi in alcuni areali, la situazione nella zona del Conegliano Valdobbiadene docg resta sotto controllo non provocando rilevanti perdite di produzione

Da anni l'Area di patologia vegetale sostiene le cooperative liguri specializzate nella produzione di piante ornamentali, orticole ed officinali per quanto riguarda la difesa dalle malattie dovute a fitoplasmi

Le malattie dovute alla presenza di procarioti (batteri e fitoplasmi) in pomodoro sono fra le più economicamente importanti e sono all’origine di perdite di produzione che possono raggiungere il 100% in caso di epidemie gravi.

Disporre di colture pure di fitoplasmi potrà permettere di migliorare le tecniche diagnostiche e di verificare l’efficacia di specifici prodotti fitosanitari

L’aspetto sanitario occupa un posto di rilevante importanza nell’economicità della coltivazione di piante officinali; ciò nonostante, in Italia, gli studi di tipo patologico specifici di questo settore sono stati condotti fino ad oggi in maniera non continuativa. Solamente agli inizi degli anni ’90, presso il DiPSA dell’Università di Bologna, hanno avuto inizio indagini specifiche per il settore erboristico con lo scopo di individuare ed identificare i virus ed i fitoplasmi maggiormente diffusi e pericolosi nelle aree di produzione italiane, definirne le principali caratteristiche epidemiologiche, valutare le sintomatologie sulle piante, suggerire la profilassi da adottare ed, inoltre, verificare se questi patogeni, oltre a diminuire la resa delle produzioni, potessero influire sulla sintesi dei principi attivi e, in particolare, sulla quantità e qualità degli oli essenziali. Dal 1990 ad oggi sono state esaminate oltre 150 specie officinali riscontrando malattie anche gravi dal punto di vista economico associate ad infezioni da virus e fitoplasmi singole o miste. Le sintomatologie più gravi interessavano il fiore e l’apparato fogliare. Sono stati individuati numerosi ospiti naturali sia di virus che di fitoplasmi e, in molti casi, si è trattato di nuove segnalazioni: Digitalis lutea L., D. lanata L., Galega officinalis L. Hypericum perforatum L., Hyssopus officinalis L., Parietaria officinalis L., P. judaica Auct. An. (L.), Echinacea purpurea L. Le ricerche comparative sugli oli essenziali estratti da piante sane ed infette da virus e/o fitoplasmi sono state eseguite in collaborazione con Colleghi delle Università di Bologna, Parma, Modena e Reggio Emilia, Chieti, Perugia. E’ emerso che virus e fitoplasmi possono influire non solo sulla produttività degli impianti, ma anche sulla resa e composizione degli oli essenziali, determinandone in genere dei decrementi e delle variazioni nei principali componenti (ad es., in lavanda, issopo anisato, iperico, timo, ecc.).

Viene trattato il fenomeno del Recovery ossia di remissione spontanea dei sintomi in piante affette da malattia, particolarmente frequente in malattie indotte da parassiti obbligati quali virus e fitoplasmi. Esso è regolato da condizioni ambientali, interazioni pianta patogeno, stato fisiologico e vegetativo delle piante. Nel caso di infezioni virali è connesso al PTGS (Silenziamento genico) mentre nel caso di fitoplasmosi si ritiene indotto da SAR (resistenza sistemica acquisita). Come esempio si riportano studi su ESFY su albicocco.

Nel biennio 2010-2011 sono state eseguite specifiche ricerche riguardanti le infezioni da fitoplasmi su ortensia, sia in coltivazione presso aziende floricole della Liguria, sia su esemplari a dimora in aree urbane del Lazio, e precisamente a Bolsena (Viterbo). Da queste ricerche è emerso che negli ultimi anni il “quadro” sanitario è sensibilmente mutato, sia per quanto riguarda i fitoplasmi coinvolti, sia per quanto concerne importanti aspetti sintomatologici (alterazioni morfologiche e cromatiche sulle infiorescenze) ed epidemiologici (trasmissione in natura tramite vettori animati). Alla luce dei risultati e considerata la pericolosità di questi microrganismi patogeni, ci sembra opportuno effettuare un aggiornamento sulle conoscenze delle fitoplasmosi dell’ortensia in modo da contribuire al miglioramento degli interventi di difesa e profilassi a disposizione sia dei vivaisti e produttori di piante in vaso, sia di degli operatori e manutentori del “verde” pubblico.

La continua evoluzione della resistenza agli antibiotici dei batteri patogeni umani, ha reso necessaria la ricerca di nuovi prodotti antimicrobici come gli oli essenziali ottenuti da piante note nella medicina popolare. In questo studio è stata saggiata e confrontata la capacità antitossigenica degli oli essenziali di Monarda fistulosa ottenuti da piante sane e infette dai fitoplasmi, nei confronti di Escherichia coli e Campylobacter jejuni. In particolare, in E. coli normalizzando con gene endogeno FTsZ sono stati saggiati: il gene CdtIVB codificante l’unità attiva B della olotossina CDT-IV, il gene LuxS codificante l’auto-induttore 2 del sistema Quorum Sensing promotore della CDT ed il gene DksA codificante una DNA kinasi, proteina soppressore-repressore della CDT. Invece, in C. jejuni normalizzando con gene endogeno LpxA coinvolto nella biosintesi del lipide A sono stati saggiati: il gene CdtB codificante l’unità attiva B dell’olotossina CDT, il gene LuxS ed il gene Hns codificante per il regolatore trascrizionale H-NS. E' stata valutata la capacità degli oli essenziali (S) ed (I) di M. fistulosa di modulare l’espressione genica in E. coli ed in C. jejuni dei geni codificanti CDT, le proteine auto-induttori codificate da LuxS del sistema quorum sensing (promotore della CDT) ed i fattori trascrizionali Hns e DNA kinasi DksA (repressori della CDT). I risultati ottenuti sono promettenti e la "bioattività" dell’olio essenziale di M. fistulosa si è dimostrata in vitro anche più potente degli antibiotici specifici, nei confronti sia di E. coli sia di C. jejuni. In particolare, utilizzando le dosi sub-inibenti la crescita batterica, si è osservato che l’espressione della CDT batterica era sotto regolata rispetto al controllo negativo fino ad un massimo di circa 40 volte in E. coli e di circa 20 volte in C. jejuni, in modo dipendente sia dalla concentrazione dell’olio essenziale sia dal tempo di esposizione. Lo stato sanitario della pianta invece sembra non influenzare l'attività antimicrobica non essendosi osservate variazioni significative degli oli (S) ed (I). L’espressione genica dei geni LuxS codificanti gli induttori del sistema quorum sensing, che sta alla base della regolazione della virulenza batterica, risultava sotto-regolata in E. coli fino ad un massimo di circa 30 volte, ed in C. jejuni di 15 volte dopo 6 h. La sovraespressione genica dei geni H-NS, fino ad un massimo di 12 volte e DksA, di 9 volte, codificanti per i regolatori trascrizionali negativi leganti il DNA che sopprimono i fattori di virulenza, supporta l'osservazione che gli oli essenziali di M. fistulosa sono in grado di regolare la virulenza dei batteri patogeni esaminati. I risultati ottenuti sono promettenti per una futura applicazione degli oli di M. fistulosa come agenti inibenti la virulenza di E. coli e C. jejuni nella catena alimentare.

Nel maggio 2012 in una coltivazione in vaso di lupino ornamentale (Lupinus polyphyllus Lindt.; famiglia Fabaceae) della zona di Albenga (Savona) sono state notate numerose piante caratterizzate da una grave sintomatologia sulle foglie tipicamente riferibile all’infezione da Tospovirus: anulature concentriche clorotiche, rosso-arancio e/o nerastre; i fiori apparivano leggermente screziati. Alcuni degli esemplari con sintomi fogliari erano inoltre di taglia ridotta, gli steli fiorali erano vistosamente ripiegati “a gomito” e le foglie più giovani rimanevano piccole e raggomitolate. Dalle analisi sierologiche eseguite applicando la tecnica LFT è risultato che in tutte le piante con anulature concentriche sulle foglie era presente il virus dell’avvizzimento maculato del pomodoro (TSWV) che è stato trasmesso con inoculazione meccanica su specie erbacee fra cui basilico, fava e peperone (sintomi locali e sistemici di necrosi ed avvizzimento) e fagiolino dall’occhio (anulature locali). L'identità del virus è stata confermata anche mediante RT-PCR, impiegando per lo scopo “primers” specifici per il gene NSM di TSWV. Tali “primers”, infatti, hanno prodotto, solo nei campioni provenienti dalle piante con anulature clorotiche, un amplicone della lunghezza attesa (670 bp). Due degli ampliconi ottenuti, da provenienti da due piante sintomatiche distinte, sono stati clonati e sequenziati alla MWG (Germania). Le sequenze ottenute sono risultate 100% identiche fra loro, mentre confrontandole con le sequenze di TSWV presenti in GeneBank sono risultate per il 99,25% identiche a due isolati di TSWV (35-2 e 43-2). Inoltre, nelle piante infette da TSWV e caratterizzate anche da nanismo e ripiegamento dello stelo fiorale, è stata verificata la presenza di fitoplasmi appartenenti al gruppo ribosomico 16SrXII-A noto anche come “stolbur”. Infezione da TSWV in lupino in Italia, e precisamente ad Albenga, era già stata descritta nel 2007, ma il virus non era stato caratterizzato dal punto di vista molecolare (Bellardi et al., 2008). Dai dati ottenuti l’isolato TSWV-L. polyphyllus si inserisce nella tipologia “A” cui afferiscono anche gli isolati di TSWV detti RB (“Resistant Breaking”) in quanto capaci di superare la resistenza a TSWV in pomodoro. Per quanto riguarda l’infezione da fitoplasmi “stolbur”, si tratta del primo caso di infezione naturale in L. polyphyllus. Dal punto di vista epidemiologico di particolare rilievo risulta l’associazione di questi due patogeni, conseguenza di contemporanee infestazioni nella coltivazione di lupino ornamentale oggetto di studio di tripidi e cicadellidi, vettori di Tospovirus e fitoplasmi rispettivamente.

Viene descritta una malattia da fitoplasmi della ginestra individuata in Campania e consistente in scopazzi della vegetazione. vengono dati consigli di tipo preventivo

Il genere Erysimum (sinonimo Cheiranthus) (Brassicaceae, prima Cruciferae) comprende circa cento specie di piante annuali, biennali e perenni, alquanto rustiche. Il loro aspetto è simile a quello della violacciocca (Matthiola incana). Si tratta di una brassicacea perenne che raggiunge un’altezza di 30-40 cm, dalle foglie lanceolate verde-argentee e spighe fiorali costituite da fiori delicati e profumati malva o porpora. In Liguria la coltivazione è in vaso (14 cm di diametro); la produzione annua è di circa 50.000 esemplari. Per quanto riguarda le infezioni virali, fin dal 1972 è nota l’infezione in molte specie di Erysimum da un tymovirus indicato come Erysimum latent virus (virus latente dell’erysimum: ELV). Non si registrano particolari sintomatologie indotte da questo patogeno che, infatti, è spesso latente o, in rari casi, risulta associato ad un leggero mosaico fogliare. Per quanto riguarda i fitoplasmi, non si hanno segnalazioni relative ad infezioni in E. linifolium. Quello che presentiamo, è un duplice caso di infezione (da fitoplasmi e da un potyvirus) che, per la prima volta, ha visto coinvolto E. linifolium. Le sintomatologie manifestate dalle piante infette sono state due e ben distinte: la prima ha interessato tutto l’apparto fogliare, la seconda unicamente i fiori. Con un attento monitoraggio fin dalle prime fasi di crescita, riteniamo che entrambe possano essere individuate dagli stessi coltivatori; trattandosi di malattie notoriamente non curabili, l’aspetto sintomatologico costituisce un elemento di diagnosi “visiva” utile per l’eliminazione tempestiva delle piante infette. Sintomatologie Le piante sintomatiche oggetto di studio provenivano da una sola azienda di Albenga. Inizialmente, sono stati notati pochi esemplari caratterizzati da una forte riduzione di crescita (nanismo) e produzione di foglie contorte, arricciate ed ammassate tanto da costituire delle piccole “rosette” conseguenti al raccorciamento degli internodi. In alcuni casi, il nanismo e l’arricciamento fogliare coinvolgevano solo una parte dell’apparato fogliare. Andando avanti con le fasi di crescita, le piante contraddistinte da questa prima sintomatologia sono aumentate numericamente senza produrre fiori, per cui si è ritenuto opportuno valutarne lo stato sanitario. Indagini per fitoplasmi e virus Le analisi di laboratorio eseguite applicando le tecniche PCR e RFLP hanno consentito di verificare nelle piante con nanismo e rosettamento la presenza di fitoplasmi appartenenti al gruppo del “giallume dell’astro” (‘Candidatus Phytoplasma Asteris’: AY), sottogruppo 16SrI-B. Nelle piante di controllo, con e senza screziature sui petali, non è stata rilevata infezione da fitoplasmi. Parallelamente, sono stati effettuati da tutti gli E. linifolium inoculazioni meccaniche su piante indicatrici, utilizzando specie erbacee suscettibili al tymovirus ELV (fra cui cucurbitacee, solanacee e lamiacee). Esiti positivi si sono registrati a seguito dell’utilizzo, per l’inoculo, dei fiori screziati prodotti dalle piante inviate come controllo, e precisamente: lesioni cloro-necrotiche su alcune chenopodiacee (Chenopodium murale e C. amaranticolor), bandature verde cupo lungo le nervature sulle foglie della rucola, aree giallo-oro o internervali su quelle del broccolo. Le analisi immunoenzimatiche PAS-ELISA sono risultate positive per il virus del mosaico della rapa (Turnip mosaic virus: TuMV), potyvirus ubiquitario nelle brassicacee. Considerazioni Nell’impianto di E. linifolium in vaso sono state quindi osservate due differenti e distinte sintomatologie associate a due tipologie di patogeni infettivi. Per quanto riguarda la fitoplasmosi, certamente si tratta della malattia più grave dal punto di vista produttivo in quanto le piante affette sono risultate gravemente compromesse nella crescita. AY è un fitoplasma molto comune e diffuso in tutto il mondo, ed anche in Liguria, dove infetta molte specie ornamentali e da fiore, come il ranuncolo e l’or...

Le malattie causate da fitoplasmi sono una fonte di preoccupazione sia per l’agricoltura sia per l’ambiente. Non è un caso che molte di queste fitopatie siano considerate malattie di pertinenza di legislazione ad hoc, in genere regolate da decreti di lotta obbligatoria, e che i patogeni ad esse associati vengano spesso indicati come patogeni da quarantena. Le misure di controllo nei confronti di queste malattie si basano essenzialmente sull’estirpo delle piante infette ed il controllo del(i) vettore(i) mediante trattamenti insetticidi. Ad eccezione di alcuni antibiotici, il cui uso fitoiatrico, peraltro, non è ammesso in Italia , non si conoscono finora sostanze in grado di agire direttamente sul patogeno. Negli ultimi anni sono state sviluppate nuove strategie per il controllo delle fitoplasmosi delle specie di interesse agronomico, basate sul potenziamento delle difese della pianta alcune di queste si basano sull’utilizzo di sostanze di origine biotica od abiotica (elicitori), in grado di attivare reazioni di difesa nella pianta; altre, si basano sull’utilizzo di microrganismi endofiti potenziali agenti di biocontrollo o induttori di resistenza(Romanazzi et al., 2009b). Gli endofiti sono funghi, batteri e attinomiceti che espletano parte o tutto il loro ciclo vitale all’interno dei tessuti delle piante. Le ricerche finora condotte si sono rivolte soprattutto alle relazioni in cui il microrganismo endofita contribuisce al miglioramento della fitness della pianta producendo metaboliti secondari, rendendola più resistente a stress abiotici e proteggendola da attacchi di nematodi, insetti predatori, funghi e batteri fitopatogeni (Lugtenberg and Kamilova, 2009). In particolare, gli endofiti sono in grado di ridurre e prevenire i danni provocati dai patogeni attraverso diversi meccanismi(van Loon, 2007): a) competizione per una nicchia ecologica o per un substrato; b) produzione di inibitori allelochimici (antibiotici, enzimi litici, batteriocine);c) induzione di resistenza sistemica (ISR-‘Induced Systemic Resistance’). Le indagini, finora volte a chiarire il fenomeno del recovery, sono state condottesu albicocco, melo e vite (Musetti et al., 2005; Bulgari et al., 2011; Musetti et al.,2007) suggerendo, un possibile coinvolgimento degli endofiti nel risanamento spontaneo. A questo proposito, recentemente è stato dimostrato che Epicoccum nigrum Link è in grado di influenzare lo sviluppo dell’infezione del fitoplasma dello scopazzo del melo in Catharanthus roseus (Musetti et al., 2011). Risultato analogo è stato, inoltre, riscontrato nel Chrysanthemum carinatum infetto da fitoplasmi trattato con Pseudomonas putida (Gamalero et al., 2010). Nel caso della vite, lo studio della comunità endofita ha evidenziato la presenza di Pantoea ag2 glomerans come batterio dominante (Bulgari et al., 2009). Alcuni ceppi di questo batterio sono impiegati come agenti di biocontrollo contro altre fitopatie, come il colpo di fuoco batterico. P. agglomerans, infatti, è in grado di produrre sostanze ad attività anti-microbica, quali Pantocina A e B (Jin et al., 2003), attive nei confronti di Erwinia amylovora. Inoltre, tale batterio viene impiegato nel controllo postraccolta di Monilinia laxa e Rhizopus stolonifer, funghi che danneggiano albicocche e nettarine (Bonaterra et al., 2003). L’effetto di miglioramento della qualità dei frutti e della produttività delle piante, può essere il risultato non solo dell’attività dei batteri endofiti, ma anche dell’utilizzo di sostanze di origine biotica od abiotica in grado di attivare reazioni di difesa nella pianta (elicitori). Numerose ricerche dimostrerebbero inoltre che questi composti posseggono interessanti caratteristiche dal punto di vista tossicologico ed ambientale, in quanto si degradano rapidamente dopo la loro applicazione. Tali considerazioni suggeriscono che questi induttori di resistenza potrebbero avere un interessante utilizzo nel controllo delle malattie da fitoplasmi che colpiscono...

Lotta alle fitoplasmosi delle piante arboree da frutto - Sono descritte le caratteristiche infettive ed epidemiologiche delle principali malattie da fitoplasmi di queste piante e quindi discussi tutti i possibili mezzi di lotta e contenimento delle infezioni (resistenza, pratiche agronomiche, controllo sanitario del materiali da impianto, lotta agli insetti vettori, recovery).

Il trattamento termoterapico con acqua calda viene applicato al materiale di moltiplicazione viticolo per prevenire la diffusione delle fitoplasmosi. Per valutare l'influenza della termoterapia sul contenuto in glucidi solubili ed in amido delle barbatelle (parametri che potrebbero condizionare la resa in vivaio), talee legnose di Nebbiolo e Barbera sono state termotrattate in febbraio e successivamente frigoconservate fino ad aprile (termoterapia precoce), oppure frigonconservate e termotrattate in aprile (termoterapia tardiva). In linea generale si è osservata una diminuzione dei glucidi solubili a seguito della conservazione in frigorifero, ed una loro riduzione nel materiale termotrattato. L'effetto del trattamento termico sulla percentuale di amido invece non è risultato univoco. Le variazioni osservate non paiono avere influenza sulla resa vivaistica del materiale trattato, che non è risultata diversa da quella dei controlli.

This study was focused on the effects of virus and phytoplasma infections on the production of Echinacea purpurea (L.) Moench secondary metabolites, such as caffeic acid derivatives, alkamides, and essential oil. The identification of caffeic acid derivatives and alkamides was carried out by means of high-performance liquid chromatography-diode array detection (HPLC-DAD), HPLC-electrospray ionization-mass spectrometry (ESI-MS), and MS(2). Quantitative analysis of these compounds was carried out using HPLC-DAD. The results indicated that the presence of the two pathogens significantly decreases (P0.05) the content of cichoric acid, the main caffeic acid derivative. Regarding the main alkamide, dodeca-2E,4E,8Z,10E/Z-tetraenoic acid isobutylamide, a significant decrease (P0.05) in the content of this secondary metabolite was observed in virus-infected plants in comparison with healthy plants, while in the phytoplasma-infected sample the variation of this secondary metabolite was not appreciable. The % relative area of the E/Z isomers of this alkamide was also found to change in infected samples. The gas chromatography (GC) and GC-MS analysis of E. purpurea essential oil enabled the identification of 30 compounds. The main significant differences (P0.05) in the semiquantitative composition were observed for three components: limonene, cis-verbenol, and verbenone. The results indicate that the presence of virus and phytoplasma has an appreciable influence on the content of E. purpurea secondary metabolites, which is an important issue in defining the commercial quality, market value, and therapeutic efficacy of this herbal drug.

Monarda fistulosa L. (“wild bergamot”) is an annual or perennial medicinal plant known for the strong thera-peutic effects: its essential oil is characterized by high antibacterial, antimycotic, and anti-inflammatory activi-ties and, for this reason, has been recently proposed for the treatment of seborrhoea (Zhilyakova et al., 2009). During a survey carried out in 2009 in Italy, wild ber-gamot showing yellows, stunting, virescence and flower bud proliferation was found for the first time infected by a phytoplasma belonging to ribosomal subgroup 16SrXII-A “stolbur” (Bellardi et al., 2011). In 2010, a study to verify the correlations between phytoplasma presence and symptom expression, and the effects of these prokaryotes on essential oil composition was car-ried out. During Summer 2010, molecular tests to confirm phy-toplasma presence were carried out in M. fistulosa plants belonging to the same crop surveyed in 2009, (Herb Garden, Casola Valsenio, Italy). Starting from July, increasing percentages of plants showing phyto-plasma symptoms (more than 80%) were observed. Symptomless (=SLP) and symptomatic plants (=SP) (Fig. 1) were labelled by visual inspection of their aerial parts and tested at blooming stage to verify phytoplasma presence and to determine their identity. After a chloro-form/phenol extraction (Prince et al., 1993), plants were tested by direct PCR with primers P1/P7 followed by nested PCR with primers R16F2/R2 . RFLP analyses were performed with TruI and Tsp509I for 16 hours at 65°C and with HhaI for 16 hours at 37°C and analysed on 5% polyacrilamide gels after ethidium bromide staining. About 900 gr fresh aerial part material of SP and about 120 gr of SLP were collected in August at the end of flowering, and hydrodistilled; the two oils were separated from water and kept in tightly closed amber vials before analyses. Identification of the compounds was made by combined gas chromatography mass spec-trometry (GC/MS) and by comparing retention times of M. fistulosa components with those of a control oil from plants grown in Trentino Region (Northern Italy) While in 2009, only 50% of the plants showed phyto-plasma symptoms and was found to be infected only by stolbur, in 2010, amplifications resulted from both symptomless and symptomatic plants (any phyto-plasma-free plant was detected). Both, direct and nested PCR, as well as RFLP analyses on 16Sr DNA gene, confirmed that in all wild bergamot plants, stolbur phy-toplasma was present in single infection in SLP sam-ples, and in mixed infection with phytoplasma belong-ing to ribosomal subgroup 16SrI-B (Aster yellows, ‘Candidatus Phytoplasma asteris’: AY) in SP samples. Considering that every single plant, with or without symptoms, was phytoplasma-infected, no phytoplasma-free material has been collected to obtain control oil from healthy plants. The increasing of phytoplasma in-fection (100%) inside the Herb Garden occurred as a consequence of the presence of leafhoppers, weeds and other medicinal phytoplasma-infected plants, such as Echinacea purpurea Moench, Digitalis lutea L., D. lanata Ehrh., Grindelia robusta L., recently reported as “new natural host” of AY and/or stolbur phytoplasmas (Bellardi et al., 2007). Differences in compositions between the oils from SP and SLP were observed. As shown in table 1, in which the percentage presence of 18 components is listed ac-cording to their elution order, the oil from SP showed an increase in the quantity of some monoterpenes like -thujene, - and -pinene, and -phellandrene as well as in the content of -caryophyllene and a marked de-crease in the content of thymol. On the other hand, oil from SLP yielded only a significant increase in thymol concentration as only relevant modification and a marked decrease in monoterpene compounds. Composition of the oils obtained by distillation varies significantly among different M. fistulosa hybrids (Mazza and Marshall, 1992); thy...

During the period 2008-2010 two vineyards, one of cv Barbera and the other of cv Nebbiolo, were inspected for Flavescence Dorée (FD) presence and incidence. During the surveys, leaf samples were taken at the end of May, July and September from vines with phytoplasma symptoms, and further analysed by PCR. FD was by far the most important phytoplasma associated to the disease (only few vines were double-infected with Bois Noirphytoplasma). Fifty-one vines in 2008 and 130 in 2010 (out of 8000) were infected in the Barbera vineyard. Twenty-six in 2008 and 30 in 2010 (out of 1250) were infected by FD in the Nebbiolo vineyard. More than half of the 51 FD-Barbera vines in 2008 stably recovered in the following two years, while only one third of the 26 FD-Nebbiolo vines recovered in the same time frame. When the FD titer was measured by quantitative real Time PCR in both varieties over the season, a higher titer of FD was estimated in Barbera compared to Nebbiolo. Consistently, the symptoms associated to the disease were more serious on Barbera, especially at the beginning of the growing season when Barbera displayed a dramatic dwarfing of the shoots. We conclude that Barbera is more susceptible compared to Nebbiolo, but it shows a higher attitude to recover from the disease

In campioni di actinidia prelevati in aree con epidemie conclamate di cancro batterico sono stati individuati fi toplasmi afferibili ai giallumi dell’astro e dell’olmo e allo stolbur

L’echinacea purpurea [Echinacea purpurea Moench., ] è una pianta ornamentale caratterizzata da ampi capolini fiorali raggiati, simili a quelli della margherita. Nel settore Erboristico è una delle piante officinali più interessanti, impiegata per le dimostrate proprietà immunostimolanti, antivirali, antibatteriche ed antinfiammatorie dovute alla presenza di diversi polifenoli, fra cui l’acido caffeico ed i suoi esteri. Gli agenti patogeni infettivi di cui ci proponiamo di sottolineare la pericolosità per scongiurarne l’ulteriore diffusione nel nostro Paese, sono i fitoplasmi. Il sintomo più grave associato alla presenza di fitoplasmi riguarda il fiore, che risulta profondamente deturpato, sia morfologicamente che cromaticamente; ne viene quindi compromesso il “normale” utilizzo in ambito ornamentale, ma non solo. Se si considera, come accennato poc’anzi, l’impiego terapeutico di E. purpurea si intuisce come un’infezione da fitoplasmi possa influire sulla resa degli impianti in termini di qualità e quantità del prodotto destinato anche all’utilizzo nel settore erboristico. “Virescenza” - I primi sintomi sono stati osservati nel Giardino delle Erbe di Casola Valsenio (Ravenna) su alcune piante che, già a metà di maggio, in anticipo quindi rispetto alla normale epoca di fioritura per questa specie alle nostre latitudini (indicativamente metà di giugno), hanno prodotto fiori piccoli e completamente verdi, sorretti da gambi stranamente ingrossati. Successivamente, altre piante, di taglia normale, erano caratterizzate da capolini fiorali costituiti da petali anch’essi di colore verde (virescenza). In alcuni casi, l’anomalia di colore interessava solo parzialmente il fiore, che si presentava metà verde e metà del tipico colore rosa intenso. Non sono stati notati sintomi a livello dell’apparato fogliare, come ad esempio giallumi, arrossamenti o malformazioni. La “virescenza” comprometteva oltre il 50% delle piante in coltivazione. “Fillodia” - La malattia è apparsa al momento della fioritura (giugno), quando la quasi totalità delle piante coltivate in un piccolo lotto del campo sperimentale della Facoltà di Agraria (Bologna) ha prodotto capolini fiorali costituiti da un ammasso di foglioline, di forma allungata, verdi. Spesso, su di una stessa pianta, si sono notati fiori normali come forma e dimensioni, ed altri caratterizzati da strani ciuffi di foglie, molto addensate l’una sull’altra, tanto da raggiungere un’altezza anche di 10-12 centimetri. Anche in questo caso, le foglie della pianta apparivano normali come forma, dimensione e colore. Per confermare la presenza di fitoplasmi, sono state applicate le tecniche PCR e RFLP, mediante le quali è stata verificata la presenza di due fitoplasmi diversi: 16SrI-B nei campioni che manifestavano virescenza del fiore, e 16SrIX-C nelle piante con fillodia.

Che la Natura sia anche pazza e giocherellona, ormai non è una novità e lo sa bene chi ha a che fare con il mondo vegetale. In passato, ad esempio, ci siamo soffermati sugli strani fiori prodotti da alcune piante quando infette da fitoplasmi: i petali, invece di assumere la normale colorazione rosa, rossa, azzurra, violetto, ecc., come nelle ortensie o nel gladiolo, diventano stranamente verdi, pur mantenendo inalterata la forma e le dimensioni. Dal punto di vista patologico (perché di malattia si tratta), è quel fenomeno ormai alquanto diffuso denominato “virescenza”. Se perciò nel nostro giardino le belle echinacee (Echinacea purpurea) non producono la classica “margherita” di un vivace color porpora, bensì di un bel verde acceso, sappiamo che si tratta di piante infette da particolari microrganismi procarioti detti fitoplasmi. Fillodia Ma le cose possono essere ancora più strane: il fiore di echinacea appare per metà nomale e per metà di colore verde. Siamo ancora nell’ambito della virescenza, seppure parziale. Non basta ancora. Le trasformazioni di un fiore possono essere talmente esasperate da renderlo persino irriconoscibile. Rimanendo nell’aiuola di echinacea, vediamo cosa è successo a queste piante dal fogliame normale, ma dove gli steli sorreggono una corona di petali rosa chiaro che circondano un ammasso informe di foglie strette, simili a quelle di un salice. Che fine ha fatto il vero fiore? Questo sintomo è detto “fillodia” e consiste nella trasformazione di tutte le parti fiorali (stami, pistilli, ecc.) in foglie, ossia nella regressione morfologica e strutturale dei tessuti. Se delle cicaline cariche di fitoplasmi giungono fin nelle nostre aiole, possiamo dire addio ai capolini fiorali raggiati rosso-porpora della “Robert Bloom” o rosa-cremisi della “The King”. Ma quello che per noi è solamente un danno estetico, per coloro che producono invece echinacea per fini erboristici, le fitoplasmosi costituiscono un problema non indifferente, in quanto non solo questi microrganismi influiscono negativamente sulla resa degli impianti, ma inducono cambiamenti nel metabolismo secondario della pianta alterandone così gli effetti terapeutici. Studi specifici hanno infatti dimostrato che le piante infette da fitoplasmi (non solo l’echinacea, ma anche timo, lavanda, issopo anisato, ecc.) produco quantità inferiori di olio essenziale, olio inoltre più “scadente” rispetto a quello estratto da individui sani. Non male per dei parassiti vegetali!

La Monarda od Erba bergamotto (Monarda fistulosa L.) è una specie erbacea appartenente alla grande famiglia delle Lamiaceae, spesso indicata anche come “erba indiana”, sia perchè originaria dell'America settentrionale, sia perchè molto amata dagli indiani pellerossa. Nell'area ora coperta da New York gli indiani Oswego usavano infatti le foglie di M. fistulosa in infusione per curare problemi respiratori; ancora oggi le sue foglie aromatiche vengono usate per conferire sapore al tè “Earl Grey”. Sia M. fistulosa che l’altrettanto comune M. didyma, sono molto amate come piante perenni da giardino: la loro altezza varia dai 70 ai 180 cm circa e producono in piena estate abbondanti fiori (bianchi, violetti, rosa, rossi o violacei) adatti anche ad essere recisi. La fioritura è costituita da un fascio tondo di minuscoli fiori campanulati; sono in realtà le brattee circostanti che conferiscono alla Monarda una peculiare bellezza (i fiori di M. fistulosa sono generalmente di un bel colore lilla o violetto). Mischiando questa specie aromatiche con altre, come achillea, agastache, lavatera, lobelia, nepeta, maggiorana, salvia e veronica, si creano colorate e profumate bordure. Dal punto di vista agronomico e fitopatologico in particolare, è considerata alquanto rustica e di facile coltivazione. L’unica malattia che può comprometterne la crescita a lo sviluppo è il mal bianco (Oidium spp.). Grazie però ad un accurato lavoro di miglioramento genetico, sono state di recente selezionate e commercializzate varietà poco suscettibili o tolleranti, soprattutto di M. didyma. Da diversi anni M. fistulosa è coltivata nel Giardino delle Erbe “Augusto Rinaldi Ceroni” di Casola Valsenio (Ravenna) come pianta mellifera. Nel 2009, durante una delle ispezioni che annualmente sono eseguite dalla Facoltà di Agraria di Bologna (DiSTA-Patologia vegetale) per valutare visivamente la crescita e la sanità delle specie officinali ivi presenti, è stato notato che il 50% delle Monarde ottenute da seme, al primo anno d’impianto, presentava sintomi riferibili a fitoplasmi. Di questi pericolosi agenti patogeni capaci di “trasformare” i fiori di specie officinali coltivate nel Giardino delle Erbe, ci siamo già occupati in precedenti articoli apparsi su questa Rivista, vedi la malattia indicata con il termine di “virescenza” in Grindelia robusta, Digitale lanata e, più di recente in Echinacea purpurea . In tutti questi casi, a seguito dell’applicazione di tecniche di diagnostica molecolare, i fitoplasmi coinvolti sono risultati appartenere al gruppo 16SrI del giallume dell’astro (Aster Yellows: AY, sottogruppo 16SrI-B). Abbiamo quindi voluto verificare se anche la malattia osservata su Monarda fosse associata alla presenza di fitoplasmi e, nel caso di esito positivo, l’appartenenza o meno dei procarioti coinvolti al gruppo ribosomico già individuato su altre specie nel medesimo ambiente. L’individuazione di fitoplasmi in M. fistulosa non costituisce una novità in senso assoluto. Già in passato, infatti, e precisamente nel biennio 1997-’98, erano state descritte alcune gravi sintomatologie associate alla presenza di questi patogeni in coltivazioni del Canada. Questo descritto costituisce quindi il primo ritrovamento di fitoplasmi in Monarda in Italia ed in Europa, ed il primo ritrovamento in questa specie di fitoplasmi “stolbur”.

Grindelia robusta, a perennial herb, contains an essential oil that is employed as an antitussive, sedative, and analgesic agent. During the Spring of 2007, ‘Candidatus Phytoplasma asteris’-related phytoplasmas were identified in plants showing virescence and phyllody symptoms. The qualitative and quantitative composition of volatiles of the oil of healthy and infected plants were compared by Gas Chromatography/Mass Spectrometry analyses. Samples from 6 symptomatic and 5 asymptomatic plants were tested by nested PCR followed by RFLP analyses confirmed the presence of ‘Ca. P. asteris’ in all symptomatic samples. The oils from healthy and infected plants, obtained by steam-distillation, contained 42 components; that of healthy plants contained a higher concentration of monoterpenes, especially limonene and bornyl acetate, which were nearly 50% higher.

Echinacea purpurea Moench (L.), known as purple coneflower, is one of the most important medicinal plants, used worldwide for its immunostimulant, bacteriostatic and anti-inflammatory properties, as natural drug and/or food supplement (as infusion). In a previous study carried out in 2002 in Italy to verify possible influence of viral infectious on the plant oil composition, the oil from plants (grown at the Herb Garden of Casola Valsenio, Emilia Romagna region) infected by Cucumber mosaic virus (CMV) was compared to the one from healthy plant by combined gas chromatography mass spectrometry (GC/MS) analyses. Significant quantitative variations in their compositions were verified; the infected materials afforded a lower content of sesquiterpene hydrocarbons (e.g., the percentage of germacrene D was reduced of 52%) (Hudaib et al., 2002). Considering that in 2009, E. purpurea plants cultivated in the same Herb Garden showing virescence flower symptoms, were found infected by a phytoplasma belonging to ribosomal subgroup 16SrI-B (Aster Yellows, ‘Candidatus Phytoplasma asteris’: AY) (Bellardi et al., 2009), the essential oils from CMV-infected, AY-infected, and healthy E. purpurea plants were investigated to confirm that other factors (in addition to origin, cultivation, environmental conditions), such as pathogen infections, may induce variations in the oil composition and quality. Before collection, each plant showing flower virescence, CMV symptoms (yellow mosaic on the leaves) and other asymptomatic ones (control), was labelled after visual inspection of the aerial parts and analyzed by PAS-ELISA, RT-PCR and SSCP (for CMV presence), PCR and RFLP (for AY presence). These diagnostic tests allowed the separation of three distinct batches of plant material (leaves and flowers): AY(16SrI-B)-infected, CMV(belonging to subgroup IA)-infected and healthy. Steam distillation was used to extract essential oil from dried aerial part using a commercial Clevenger apparatus. Identification of the compounds was made by GC/MS. A total of 30 compounds were identified and qualitative composition resulted comparable to that already reported; however the percentages of all compounds in the three oils were different. The main differences were detected for three components: limonene (2.2 % in healthy, 8.4% in CMV-infected, and 4.4% in AY-infected plants), cis-verbenol (1.8% in healthy, 3.4% in CMV-infected, and 5.6% in AY-infected plants), and its relative ketone verbenone (2.7% in healthy, 7.1% in CMV-infected, and 11.4% in AY-infected plants). Another minor increase was recorded for carvone (0.8 % to 2.5 %) content, but only in plants affected by phytoplasmas. These chemical differences in the oil composition can be useful to characterize the “product” whose pharmacological activity is frequently reported to correlate with its components. Considering the economic importance of E. purpurea as medicinal species, in addition to the routine growth-stage control during the plant life cycle, attention should be also paid to the plant health-status upon its collection, to ensure uniformity of the drug constituents and a better standardization of production procedures. Bibliography Bellardi M.G., Paltrinieri S., Contaldo N., Benni A., Bertaccini A.., Biffi S. Natural 1, 2009, 84, 24-31. Hudaib M., Cavrini V., Bellardi M.G., Rubies-Autonell C., J. Essent. Oil Res., 2002, 14, 427-430. Mazza G., Cotrell T. J. Agric. Food Chem. 1999, 47, 3081-3085 and reference cited herein.

Sono ricordate alcune recenti acquisizioni epidemiologiche su Flavescenza dorata e Legno nero della vite e le relative ricadute sulla conduzione della lotta alla diffusione delle due fitoplasmosi della vite.

Recent Italian reports indicate the presence of different phytoplasmas in medicinal herbs showing stunting, witches’ broom and yellowing: stolbur in Hyssopus officinalis (hyssop) and in Parietaria sp., aster yellows in Digitalis lanata (woolly foxglove) and Grindelia robusta (gumweed), and ash yellows in Hypericum perforatum (St. John's worth). Comparative biochemical analyses by GC-MS, reversed-phase HPLC and other methodologies of healthy and infected plants provide indication about metabolic modifications related to the presence of phytoplasmas. Hyssop oil samples showed content of isopinocamphone and pinocamphone correspondent to 44,7% and 29,1%, and to 6,2% and 3,92% respectively from healthy and infected plants, with a consequent reduction of antimicrobial action for the oil from infected hyssop. In the same oil it was also observed higher levels of bicyclogermacrene, germacrene D and caryophyllene oxide. Parietaria flavonoid quality and quantity reduction was observed: quercetin, canferol and isorhamnetin were detected only in healthy material, while from infected plants rutin (a quercetin glycoside) was detected but 83% less concentrated. Qualitative and quantitative analysis of cardiac glycosides from woolly foxglove demonstrated that the secondary metabolite mainly affected was lanatoside C with a 50% of reduction in infected plants. Among 42 components analysed in oil from infected gumweed, a higher percentage of selected monoterpenes was observed, concentration of limonene and borneol acetate was almost 50% higher, and that of borneol was about 30% higher. Infected St. John's worth plants showed a decreased amount of rutin (1,96 vs. 4,96 mg/g), hyperoside (2.38 vs 3.04 mg/g), isoquercitrin (1.47 vs. 3.50 mg/g), amentoflavone (0.12 vs. 0.39 mg/g), pseudohypericin (1.41 vs. 2.29 mg/g), whereas chlorogenic acid content was doubled (1.56 vs. 0.77 mg/g); essential oil revealed an increased abundance of sesquiterpenes (-caryophyllene, -elemene and germacrene D in particular) and a matching decrease in monoterpene hydrocarbons and aliphatics.

L’articolo puntualizza i primi risultati conseguiti nei tentativi di contenimento delle malattie da fitoplasmi effettuati mediante microrganismi endosimbionti delle piante e le possibilità applicative di sviluppo di questa strategia di lotta innovativa.

In questi ultimi anni nelle regioni nord-est italiane, il legno nero della vite (LN) è in forte e continua espansione ed in molte regioni italiane è la fitoplasmosi della vite maggiormente presente (Borgo et al., 2005; Bondavalli et al., 2005). Oltre che nel suo vettore naturale Hyalesthes obsoletus Signoret, il fitoplasma agente della malattia è stato rinvenuto in altre cicaline appartenenti alla famiglia dei cixiidi, Reptalus quinquecostatus (Dufour) e R. panzeri (Löw) (Trivellone et al., 2006; Jovic et al., 2007), che per la loro potenziale capacità di trasmissione potrebbero essere coinvolte nella epidemiologia di questo giallume (Maixner, 2006). Al fine di rilevare ed identificare la presenza di altri potenziali vettori della fitoplasmosi nell’areale di coltivazione del Lambrusco sono stati condotti monitoraggi in 25 vigneti affetti da LN siti nelle provincie di Modena e Reggio Emilia. Nel triennio 2007-2009, settimanalmente da giugno a settembre, è stata verificata sulle viti e sulle aree circostanti i vigneti la presenza dei cixiidi con strumenti di cattura diretta (retino da sfalcio e ombrello entomologico) e indiretta (trappole cromotropiche). Gli insetti catturati sono stati identificati ed analizzati con indagini molecolari per verificare la presenza del fitoplasma con analisi nested-PCR/RFLP sui geni ribosomici 16S e Tuf. Sono stati catturati ed identificati individui appartenenti ai generi Hyalesthes, Cixius e Reptalus; le specie più abbondanti sono risultate H. obsoletus (99,4% dei 1.234 individui del genere Hyalesthes catturati), Cixius cunicularis (L.) (94,9% dei 275 Cixius sp. catturati) e R. panzeri (65% dei 177 Reptalus sp. catturati). Inoltre, in quantità molto limitate, sono stati identificati individui di H. luteipes Fieber, C. nervosus (L.), e R. quinquecostatus. Lo sfalcio della vegetazione erbacea è risultato il metodo più efficace per il monitoraggio di H. obsoletus e Reptalus spp. (rispettivamente il 97,7% e il 78,0% di tutti gli esemplari catturati), mentre il “frappage” delle viti è risultato un valido strumento per studiare la presenza ed l’ecologia del genere Cixius (62,9% di tutti gli individui catturati). La maggior parte degli insetti (88,7% Hyalesthes sp., 70,8% Reptalus sp. and 66,1% Cixius sp.) sono stati catturati sulla vegetazione spontanea presente sui bordi dei vigneti. Alle analisi molecolari sono risultati positivi al fitoplasma stolbur associato a LN H. obsoletus (52% su 58 campioni analizzati), Cixius spp (13,6% su 66 campioni analizzati ), Reptalus spp (15,6% su 51 campioni analizzati); entrambi i tipi tuf individuati in vite sono stati riscontrati. Interessante notare che il 12,1% dei campioni di Cixius spp analizzati è risultato positivi a fitoplasmi del gruppo 16SrI-B (aster yellows), individuati in percentuali crescenti in alcuni dei vigneti studiati.

Sono presentati i risultati di una sperimentazione triennale sulla termoterapia in acqua per la prevenzione dei fitoplasmi nel materiale di moltiplicazione

Centaurium erythraea Rafn. (sin. Erythraea centaurium Pers.; Gentianaceae), nota anche come centaurea minore, è una pianta officinale annuale o biennale, originaria dell’Europa e dell’Africa settentrionale, che cresce spontanea in tutta Italia. Ha proprietà amaricanti, aperitive, digestive, febbrifughe, depurative ed antinfiammatorie. Per il suo sapore amaro dovuto principalmente alla eritrocentaurina, la centaurea minore viene usata, come pianta intera, nelle industrie di liquori e bevande digestive. Non è una pianta facilmente coltivabile e, per questo motivo, si utilizza esclusivamente quella che cresce allo stato spontaneo, la raccolta avviene in luglio ad inizio fioritura. Per meglio approfondire alcuni aspetti agronomico-colturali della centaurea minore, sono stati allestiti dei campi sperimentali presso un Centro di Ricerca Agronomico del Trentino utilizzando seme. Nel mese di luglio del 2008 in uno di questi impianti è stata osservata una sintomatologia associabile alla presenza di fitoplasmi: i primi sintomi sono comparsi già nel mese di maggio e la problematica è stata riscontrata sempre maggiore frequenza nei mesi successivi, soprattutto durante la fioritura. In alcuni casi, durante la fase vegetativa si sono osservati ingiallimenti fogliari e riduzione di crescita; mentre al momento della fioritura erano visibili virescenza e fillodia, associati a parziale o completo rosettamento e malformazione dei capolini fiorali. Campioni sintomatici ed asintomatici sono stati sottoposti alle analisi di laboratorio per individuare ed identificare i fitoplasmi eventualmente presenti. E’ stata applicata la tecnica PCR utilizzando i primers P1/P7 seguita da ‘nested’ PCR con i primers F1/B6 e 16SF2/R2 (Duduk et al., 2004). Le analisi RFLP eseguite con l’impiego degli enzimi di restrizione TruI e HhaI hanno confermato la presenza nei soli campioni sintomatici di fitoplasmi appartenenti al sottogruppo ribosomico 16SrI-B (giallume dell’astro), ‘Candidatus Phytoplasma asteris’. Questo della centaurea minore costituisce il primo caso di infezione naturale da fitoplasmi in questa specie. Precedentemente in Lazio nel 2001 era stata segnalata la presenza di fitoplasmi appartenenti al gruppo 16SrVI ‘Candidatus Phytoplasma trifolii’ in Centaurea solstitialis, una pianta spontanea appartenente alla famiglia delle Asteraceae (Faggioli et al., 2003). Risalgono al 1995 e 1997, in Tailandia e Giappone rispettivamente, le prime segnalazioni di questi procarioti in specie della famiglia delle Gentianaceae, fra cui Genziana sp., riscontrata infetta da fitoplasmi appartenenti al gruppo 16SrIII-B (Okuda et al., 1997).

La ridotta presenza di piante sintomatiche e di insetti vettori nelle principali aree melicole regionali allo stato attuale non giustificano l’adozione della lotta insetticida mirata al contenimento delle psille