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Peach palm is a domesticated palm commercially important for the production of fruits and hearts of palm. Somatic embryogenesis, an effective technique for mass propagation, was successfully established for this species. Furthermore, a temporary immersion system improved plant regeneration. However, production can be further improved by understanding the peach palm's growth dynamic and modifications of culture media. The aims of this study were to evaluate the growth of plantlets cultured in different culture media in a temporary immersion system and to correlate the results with nutrient uptake during the growth period. Somatic embryo-derived young plantlets approximately 1 cm in length were cultivated for 12 weeks in a twin flask system containing MS, Y3 or N6 salts, Morel and Wetmore vitamins and 3% sucrose, with a monthly medium refreshment. Growth was measured and mineral analysis of the plantlets was carried out after 12 weeks of culture. The Y3 and MS salts were the most appropriate for the plant growth. Number of roots was 52.52% higher and the root size was 40.42% between the N6 and MS medium and the root number in Y3 medium was 37.74% greater than in MS medium, which is important for post acclimatization survival. K and Na are important elements for peach palm. N is not required at such a high concentration as in Murashige and Skoog formulation. The Chu (N6) medium did not generate high quality plantlets, possibly due to the absence of some micronutrients, like Mo, Cu and Co. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

The aim of the present study was to induce the formation of somatic embryos in protocorms from Phalaenopsis Classic Spotted Pink hybrids at two physiological maturation stages, namely: 80 and 120 days after seed inoculation (DASI). Protocorms were inoculated in ½ MS medium supplemented with 0.1 mg L-1 ANA and 3 mg L-1 TDZ. Protocorms were inoculated 120 days after sowing were more developed at the 15th cultivation day due to the formation of pro-embryogenic structures. It was possible seeing the formation of globular- and torpedo-stage somatic embryos at the 30th day of cultivation in somatic embryogenesis (SE) induction medium. The protocorms inoculated at the 80th DASI did not formed somatic embryos; they oxidized 20 days after cultivation in SE-induction medium. The formation of somatic embryos happened directly on the explant, thus characterizing a direct somatic embryogenesis. The embryos converted into plants when the somatic embryos were transferred to the nutrient medium containing no growth regulator. Therefore, it was concluded that the somatic embryos induction from protocorms 120 days after sowing was positive, since the embryos were able to become plants and presented vegetative organs with morphological traits similar to those of the matrix plant. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

The aim of this study was to establish a protocol for induction of somatic embryogenesis and regeneration of somatic embryos of sugarcane (cultivar RB925345). Best results was obtained using concentration of 13.5 µM of 2,4-dichlorophenoxyacetic acid, 45 days of incubation on induction medium, one subculture and 15 days of incubation on regeneration medium, providing 47.5% of embryogenic calli and 38.9% of plants regenerated. Adjustments are necessary to this protocol to improve the embryogenic calli production rate and regeneration of somatic embryos. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

ABSTRACT The objective of the present study was to test the effects of explant type, auxin concentrations, culture media, and auxin concentrations on the induction and proliferation of somatic embryos of Eucalyptus grandis x E. urophylla. Seeds and cotyledons were used as explants and inoculated in culture media containing 1.13, 2.26, 3.39 and 4.52 µM dicamba or 4.14, 10.35, 20.71 and 31.06 µM picloram. Embryogenic calli induced in the picloram treatments were used as explants and inoculated in semisolid or liquid media containing 4.14, 10.35, 20.71 and 31.06 µM picloram and keeping the origin of the embryogenic callus (seeds or cotyledons) and the concentration of picloram in those who were in the induction phase. Statistical, descriptive and anatomical analyses were performed. Induction of somatic pro-embryos into the juvenile plant material of Eucalyptus grandis x E. urophylla was performed using seeds or cotyledons as the source of explants, with the addition of dicamba and picloram as growth regulators. The use of cotyledons as a source of explants and the concentration of 4.1 µM picloram added to the culture media resulted in a higher induction of somatic pro-embryos. Proliferation of secondary somatic embryos was achieved using liquid medium added with picloram.

O uso da biobalística na transformação genética de plantas requer a otimização de diversos parâmetros, entre eles, o desenvolvimento de protocolos para regeneração de plantas a partir de células transformadas. Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiência de regeneração de plantas de milho a partir de calos embriogênicos e de explantes sementes divididas, submetidos à transformação por biobalística, utilizando o gene bar como marcador de seleção. Foram submetidos 2000 agrupamentos de calos embriogênicos de milho e 2000 explantes sementes divididas à transformação por biobalística. A seleção dos eventos de transformação foi realizada em meios de cultivo suplementados com glifosinato de amônio. As plântulas selecionadas foram aclimatadas e transplantadas para vasos em casa de vegetação. Com a utilização de embriogênese somática, a eficiência de regeneração foi de 0,2%, enquanto que, com a utilização de sementes divididas, a eficiência de regeneração foi de 1,3%. Embora ambos os protocolos possibilitem a regeneração de plantas de milho submetidas à transformação por biobalística, há a necessidade de aumentar sua eficiência.

Altos custos de produção geralmente limitam o uso comercial da micropropagação. O uso de meios de cultura líquidos é considerado uma solução para a automação e redução de custos. Entretanto, dependendo da cultivar de bananeira, esse processo pode mostrar diferentes níveis de dificuldade, e adaptações nos protocolos são necessárias. Neste estudo, experimentos de diferenciação celular e regeneração de plantas foram desenvolvidos em células em suspensão de banana pela avaliação da densidade inicial de células, meios de cultura e sistemas de imersão temporária. Para tanto, uma sequência de três experimentos foi realizada: o primeiro avaliou os efeitos da densidade celular (0,5; 1 e 2 mL), meios de cultura (M1: 1/2MS, 0,1 g.L-1 de ácido ascórbico, 0,1 g.L-1 de L-prolina, 30 g.L-1 de sacarose e 10 µM de 2iP; M2: MS, 30 g.L-1 de sacarose, 2,2 µM de BAP e 11,4 µM de AIA) e períodos de diferenciação celular (40 e 130 dias); o segundo experimento analisou o efeito do tamanho dos propágulos diferenciados em meio líquido (aprox. 2,5; 5 e 10 mm em diâmetro) na formação de embriões somáticos ou na regeneração de plantas; finalmente, um terceiro experimento avaliou o efeito de sistemas de cultivo com papel-filtro cobrindo o meio de cultura semissólido e sistemas de imersão temporários na diferenciação dos propágulos e na regeneração de plantas. Não foram observadas diferenças significativas entre os meios de diferenciação, porém as melhores diluições de células para a diferenciação foram de 1 e 2 mL/30mL de meio de cultura, enquanto diluições de 0,5 mL/30 mL de meio aumentaram a oxidação celular. A extensão do período de diferenciação de 40 para 130 dias foi importante para produzir maior número de calos/propágulos uniformes e com pelo menos de 10 mm de diâmetro, que puderam ser usados em sistemas de imersão temporária (biorreatores) para a diferenciação de embriões somáticos e regeneração de plantas. Considerando todos os sistemas de regeneração, verificou-se que o uso de meios de regeneração de consistência semissólida com papel-filtro na superfície do meio é o mais responsivo para a diferenciação de embriões somáticos e regeneração de plantas.

The first step in plant transformation using somatic embryogenesis ororganogenesis for plant regeneration in vitro has been the identification of genotypes with the best totipotency. Thus, the objective of this experiment was to evaluate the totipotency of ten cultivars and one soybean line from the Coodetec Gene Bank. The somatic embryos developed from immature cotyledons measuring from 4 to 6 mm in length, and the organogenesis was evaluated from mature soybean seeds. The cultivars CD 201, CD 216 and CD 220 were the most promising genotypes to produce somatic embryos, whereas the cultivar CD 217 had the highest quantity of differentiated explants, which represents the best regeneration efficiency for participating in organogenic systems. In the experiment with somatic embryogenesis, time to plant regeneration was ten months, but the plants were regenerated after only four months in the experiment with organogenesis.A identificação de genótipos que possuam maior totipotência quandosubmetidos à embriogênese somática e organogênese é a primeira etapa para a condução de um programa de transformação genética. Este trabalho teve como objetivo avaliar o potencial de embriogênese somática e organogênese em nove cultivares de soja e uma linhagem, do banco de germoplasma da Coodetec. Cotilédones imaturos de soja com 4 a 6 mm de comprimento foram utilizados para produção de embriões somáticos, induzidos com 2,4-D, e sementes maduras de soja foram usadas para avaliação do potencial organogênico. As cultivares CD 201, CD 216 e CD 220 mostram-se promissoras para produção de embriões somáticos, enquanto que para o sistema organogênico a cultivar CD 217 apresentou a maior quantidade de explantes diferenciados e manteve a maior eficiência de regeneração. Para obtenção de uma planta via embriogênese somática foram necessários 10 meses, em virtude do período necessário para obtenção dos explantes. O sistema organogênico se mostrou mais rápido, e plantas completas de soja foram obtidas em quatro meses de cultivo in vitro.

The objective of this study was to establish cell suspension culture and plant regeneration via somatic embryogenesis of a Brazilian plantain, cultivar Terra Maranhão, AAB. Immature male flowers were used as explant source for generating highly embryogenic cultures 45 days after inoculation, which were used for establishment of cell suspension culture and multiplication of secondary somatic embryos. Five semisolid culture media were tested for differentiation, maturation, somatic embryos germination and for plant regeneration. An average of 558 plants per one milliliter of 5% SCV (settled cell volume) were regenerated in the MS medium, with 11.4 µM indolacetic acid and 2.2 µM 6-benzylaminopurine. Regenerated plants showed a normal development, and no visible somaclonal variation was observed in vitro. It is possible to regenerate plants from cell suspensions of plantain banana cultivar Terra using MS medium supplemented with 11.4 µM of IAA and 2.2 µM of BAP.O objetivo deste trabalho foi estabelecer a cultura de células em suspensão e a regeneração de plantas via embriogênese somática de bananeira cultivar Terra Maranhão, AAB. Flores imaturas masculinas foram utilizadas como fonte de explante para obtenção de culturas altamente embriogênicas 45 dias após a inoculação, as quais foram utilizadas para o estabelecimento de suspensões celulares e multiplicação de embriões somáticos secundários. Cinco meios de cultura semi-sólidos foram testados para a diferenciação, maturação, germinação dos embriões somáticos e para a regeneração de plantas. A média de 558 plantas por mililitro de 5% SCV (volume de células sedimentadas) foi regenerada, em meio MS com 11,4 µM de ácido indolacético e 2,2 µM de 6-benzilaminopurina. As plantas regeneradas apresentaram desenvolvimento normal, e não foi observada a ocorrência de variação somaclonal in vitro. É possível a regeneração de plantas a partir de células em suspensão de bananeira 'Terra' utilizando meio MS suplementado com 11,4 µM de AIA e 2,2 µM de BAP.

Três experimentos foram conduzidos com o objetivo de avaliar o potencial de formação de calos embriogênicos de três tipos de explantes de aveia branca (Avena sativa L.) (embrião imaturo, embrião maturo e segmentos de coleóptilo). Cada experimento foi conduzido com um dos explantes, cinco cultivares ("UPF15", "UPF16", "UPF18", "UPFA20" e "OR3") e dois meios de indução de calos (M1 = MS + 2mg L-1 de 2,4-D e M2 = MS + 2mg L-1 2,4-D + 1mg L-1 BAP), sendo avaliadas as freqüências de calos embriogênicos aos 60 dias de cultivo, massa fresca (mg) aos 90 e 120 dias e taxa de crescimento dos mesmos durante um período de 30 dias. Foi observada a influência do genótipo sobre as freqüências de calos somente quando utilizado o explante embrião imaturo. O fator meio não teve influência sobre a freqüência de calos em nenhum dos explantes testados. O embrião maturo não se mostrou adequado para indução de embriogênese somática em aveia. Os explantes coleóptilo e embrião imaturo apresentaram uma capacidade embriogênica similar, produzindo 24 e 29% de calos embriogênicos, respectivamente. No entanto, o coleóptilo pode ser considerado o explante ideal devido à independência genotípica, à alta taxa de crescimento de calos (328% em 30 dias), à fácil disponibilidade e à rapidez de obtenção.Three experiments were carried out to evaluate the embryogenic callus formation potential of three types of explants in oat (Avena sativa L.) (immature embryo, mature embryo and coleptile segments). Each experiment was conduced with one explant, five cultivars (UPF15, UPF16, UPF18, UPFA20 and OR3) and two induction callus medium (M1 = MS + 2 4-D and M2 = MS + 2 4-D + BAP), being analyzed the frequency of embryogenic calli at 60 days of cultivation, callus fresh weight (mg) at 90 and 120 days and callus growth rate during 30 days period. The influence of genotype on the embryogenic callus frequency was detected only when using the immature embryo explant. The culture medium did not influence the frequency of callus in any of the three tested explants. The mature embryo was not suitable for the induction of oat somatic embryogenesis. The coleoptile and immature embryo explants present a similar embryogenic capacity, producing 24 and 29% of embryogenic calli, respectively. However, the coleoptile can be considered the ideal explant due to its genotypic independence, high embryogenic callus growth rate (328% in 30 days), as well as easy and quick availability.

Um importante método de multiplicação in vitro de plantas de Coffea é a embriogênese somática, que consiste no desenvolvimento de embrióides a partir de células haplóides ou somáticas possibilitando a micropropagação acelerada de clones superiores e a manutenção de híbridos interespecíficos. Entretanto, há poucos relatos da obtenção de embriogênese direta na espécie Coffea arabica. Objetivou-se com este trabalho estabelecer protocolo para desenvolvimento in vitro de embriões somáticos e produção de mudas de C. arabica cultivar Acaiá Cerrado. Avaliaram-se a influência de sacarose (0; 30; 60; 90 e 120 g L-1) x BAP (0; 2; 4 e 8 mg L-1) em embriões somáticos. No desenvolvimento das plântulas, testaram-se ANA (0; 0,25; 0,5 e 1mg L-1) x GA3 (0; 2,5; 5,0; 10 e 20 mg L-1) em brotações, com tamanho médio de 1 a 1,5 cm, oriundas de embriões somáticos in vitro. Durante a etapa de indução de embriões, o experimento foi conduzido em sala de crescimento em condições de escuro e, na etapa de desenvolvimento dos embriões e plântulas, os explantes foram submetidos à irradiância em torno de 32 µM m-2 s-1 e fotoperíodo de 16 horas, à temperatura de 25 ± 1 ºC. Na aclimatização, avaliou-se o efeito da presença e ausência de raízes em plântulas de cafeeiro oriundas de embriogênese somática direta. A adição de 90 g L-1 de sacarose e 2 mg L-1 de BAP ao meio de cultura proporciona melhor crescimento in vitro de embriões de cafeeiro. Utilizando-se 0,5 mg L-1 de ANA e 14,2 mg L-1 de GA3 obtém-se maior comprimento da parte aérea de brotações de C. arabica L. cv. Acaiá Cerrado. Conclui-se que é possível a obtenção de plântulas micropropagadas de C. arabica L. cultivar Acaiá Cerrado pela embriogênese somática direta. O enraizamento de brotações de cafeeiro cultivar Acaiá Cerrado ocorre simultaneamente ao processo de aclimatização.

A embriogênese somática pode ser uma alternativa para o melhoramento de espécies vegetais, quando associada à transformação genética. A regeneração de plântulas a partir de embriões somáticos é dependente de vários fatores, entre eles, a qualidade do embrião somático. Neste trabalho embriões somáticos com diferentes características morfológicas são descritos. Embriogênese somática de bananeira, cv. Grand Nain e Nanicão Jangada foi induzida a partir de inflorescências funcionalmente masculinas, em meio de indução (MI) seguido de subcultivo em meio de germinação (MG), em ausência de luz. A presença de luz na indução, não favoreceu a resposta embriogênica. Em ausência de luz, os explantes da cv. Nanicão Jangada, durante os seis meses de cultivo, sofreram diversas alterações, como a formação de calos embriogênicos e não embriogênicos, formação de embriões somáticos, continuidade no desenvolvimento do botão floral ou oxidação do explante. A freqüência de resposta embriogênica foi baixa, com apenas 6% dos explantes formando embriões somáticos e 23% com formação de calos embriogênicos. O acompanhamento histológico e morfológico das alterações ocorridas nos explantes permitiu a identificação de embriões somáticos com características morfológicas distintas: com maior freqüência observou-se um tipo de embrião com morfologia semelhante ao embrião zigótico de Musa acuminata; em menor freqüência desenvolveram-se embriões somáticos semelhantes a embriões zigóticos de outras monocotiledôneas, indicando que em um único protocolo de embriogênese somática, é possível ocorrer a formação de diferentes padrões morfológicos de embriões somáticos.

A regeneração de plantas in vitro é uma limitação encontrada na maioria dos cereais. Uma forma de minimizar essa dificuldade tem sido a busca de fontes alternativas de tecidos com habilidade para esse fim. O objetivo deste trabalho foi investigar o potencial e o período necessário para regeneração de plantas in vitro de genótipos brasileiros de aveia (Avena sativa L.) a partir de segmentos da base da folha. Segmentos de 1-2mm retirados do coleóptilo de genótipos de aveia foram cultivados por 21 dias em meio MS (MURASHIGE & SKOOG, 1962) suplementado com 2,0mg L-1 de 2,4-D (ácido 2,4-diclorofenoxiacético) e, posteriormente, transferidos para meio de regeneração de plantas. Não foi encontrada variabilidade entre os genótipos quanto à capacidade de induzir calos embriogênicos e regenerar plantas a partir de segmentos da base da folha, tendo sido possível regenerar genótipos de aveia antes considerados sem habilidade para o cultivo in vitro. O uso desse explante possibilitou reduzir o tempo de regeneração de plantas de aveia para cinco meses e a não correlação entre a percentagem de embriogênese somática e regeneração de plantas indica que a embriogênese não é o único caminho de regeneração a partir desse explante.The ability for in vitro plant regeneration is limited in most of the cereal crops. One way to minimize this problem has been to search for alternative sources of tissues with the ability for in vitro cultivation. This report aims at the investigation of the potential and the amount of time necessary for in vitro plant regeneration of Brazilian oat (Avena sativa L.) genotypes from leaf base segments. One to two millimeter coleoptile segments of oat genotypes were cultivated for 21 days on MS medium (MURASHIGE & SKOOG, 1962) plus 2,0mg L-1 de 2,4-D (2,4-dichlorophenoxyacetic acid), and transferred to plant regeneration media. Variability among genotypes for somatic embryogenesis and plant regeneration from leaf base segments was not found, but it was possible to regenerate oat genotypes previously considered recalcitrants for in vitro regeneration. Besides that, it was possible to reduce to 5 months the plant regeneration period with this explant. The non-significant correlation between the percentage of somatic embryogenesis and plant regeneration indicates that the embryogenesis is not the only way for plant regeneration from this explant.

A salinidade do solo é um problema muito importante em áreas irrigadas do semi-árido brasileiro, onde o milho é uma cultura de subsistência. Este trabalho teve como objetivo estudar o efeito de concentrações de NaCl sobre calos embriogênicos, da cultivar Jatinã C3 Anão, uma importante cultivar de milho no Nordeste do Brasil. A indução dos calos foi feita a partir de embriões imaturos assepticamente retirados das sementes e inoculados em meio de cultura N6 suplementado com 2 mg L-1 de 2,4-D. Os calos embriogênicos foram submetidos a diferentes concentrações de cloreto de sódio (0; 50; 100; 150 e 200 mmol L-1 de NaCl), com três repetições durante 60 dias. Os calos submetidos a 100 mmol L-1 de NaCl apresentaram aumento no conteúdo de prolina na ordem de 37% quando comparado com o nível de 50 mmol L-1 de NaCl, sugerindo um efeito positivo da acumulação deste aminoácido em resposta ao estresse salino. Por outro lado, em elevadas concentrações salinas (150 e 200 mmol L-1) observou-se decréscimo no crescimento dos calos, bem como redução nos teores de prolina, provavelmente em função de um aumento da fração não embriogênica dos calos.Soil salinity is a very important problem in irrigated areas of the brazilian semi-arid area, where maize is a subsistence crop. To study the effect of NaCl concentrations in embryogenic calli of Jatinã C3 Anão, an important maize cultivar of the Northest of Brazil, calli were induced using immature embryos aseptically removed from the seeds and grown on N6 medium supplemented with 2 mg L-1 of 2,4-D. To study the effect of salinity in vitro, embryogenic calli were subjected to different concentrations of sodium chloride (0; 50; 100; 150 and 200 mmol L-1 of NaCl), in three replicates, during 60 days. Calli subjected up to100 mmol L-1 NaCl showed proline concentration 37% higher than callus treated with 50 mmol L-1 NaCl. This result suggests a positive effect of proline accumulation at salt stress conditions. However, at the highest concentration tested (150-200 mmol L-1 NaCl) as lower growth and also a lower proline accumulation was observed, probably due to an increase of the non embryogenic fraction of calli.

Este trabalho teve por objetivo estabelecer um protocolo para a indução e desenvolvimento de calos e embriões somáticos em mamoeiro (Carica papaya L. cv. Tainung n.1). Foram utilizados quatro tipos de explantes (hipocótilo com folhas cotiledonares, hipocótilo, folhas cotiledonares e epicótilo) e duas condições de cultivo (escuro e 16 horas de luz). A indução e o desenvolvimento de calos foram avaliados nos meios de cultura ½MS2, ½MS10 e HMH e a indução e o desenvolvimento de embriões somáticos nos meios ½MS e HMH1. O cultivo de explantes de hipocótilo com folhas cotiledonares em meio de cultura ½MS10, por 20 dias, sob condições de escuro, foi o mais adequado para a indução (100%) e o crescimento de calos friáveis embriogênicos. O cultivo desses calos em meio ½MS, por duas subculturas de 30 dias, sob condições de escuro, foi o mais adequado para a indução (60%) e o desenvolvimento de embriões somáticos. O tipo de explante, meios de cultura e condições de cultivo foram definidos para a embriogênese somática em mamoeiro.

A regeneração de plantas in vitro é uma limitação encontrada na maioria dos cereais. Uma forma de minimizar essa dificuldade tem sido a busca de fontes alternativas de tecidos com habilidade para esse fim. O objetivo deste trabalho foi investigar o potencial e o período necessário para regeneração de plantas in vitro de genótipos brasileiros de aveia (Avena sativa L.) a partir de segmentos da base da folha. Segmentos de 1-2mm retirados do coleóptilo de genótipos de aveia foram cultivados por 21 dias em meio MS (MURASHIGE & SKOOG, 1962) suplementado com 2,0mg L-1 de 2,4-D (ácido 2,4-diclorofenoxiacético) e, posteriormente, transferidos para meio de regeneração de plantas. Não foi encontrada variabilidade entre os genótipos quanto à capacidade de induzir calos embriogênicos e regenerar plantas a partir de segmentos da base da folha, tendo sido possível regenerar genótipos de aveia antes considerados sem habilidade para o cultivo in vitro. O uso desse explante possibilitou reduzir o tempo de regeneração de plantas de aveia para cinco meses e a não correlação entre a percentagem de embriogênese somática e regeneração de plantas indica que a embriogênese não é o único caminho de regeneração a partir desse explante.

Como parte de um programa que visa a seleção de linhagens adaptadas a regiões tropicais, com a capacidade para regenerar plantas a partir de calos embriogênicos de curta duração, foram investigadas três linhagens obtidas a partir de uma variedade de milho tipo flint, e seus respectivos híbridos. As culturas foram obtidas a partir de embriões imaturos inoculados em meio N6 suplementado com 1,5 mg L-1 de 2,4-D e prolina 12 mM. A frequência de calos embriogênicos 45 dias após o início da cultura foi semelhante aos melhores genótipos descritos na literatura (83-99%), refletindo a alta qualidade dos genótipos testados para o estabelecimento de culturas de curta duração. O número médio de plantas férteis regeneradas em culturas com 2-3 meses de idade variou de 2 a 8,15 por calo, destacando-se os híbridos 13342/5 x 13342/2 e 132331/1 x 13342/5. Os resultados mostram que estes genótipos são promissores para utilização em programas envolvendo transformação de plantas e propagação de genótipos.

The objective of this study was to evaluate best concentrations of phytohormones benzylaminopurine and naphthalene acetic acid in various concentrations in leaf explants of gerbera for obtaining somatic embryogenesis and the use of superoxide dismutases (SOD) as a biochemical marker for the evaluation selection of calluses Gerbera jamesonii cv. Cherry. Fully expanded leaves of plants Gerbera jamesonii cv. Cherry were submitted to the disinfection, cut in fragments (1cm²) and inoculated in MS media in a factorial growth phytoregulators combination (5x5): benzilaminopurine- BAP (0; 0.5; 1.0; 2.0 and 4.0 mg.L-1) and naphthaleneacetic acid-ANA (0; 0.25; 0.50; 1.0 and 2.0 mg.L-1). The calluses were evaluated in two periods at 30 and 60 days observing the growth and coloration. The best combination of growth phytoregulators to obtain friable calluses were 1.0 / 1.0 mg.L-1BAP / NAA, 1.0 / 2.0 mg.L-1 BAP / NAA, 0.5 / 0.5 mg.L-1BAP / NAA respectively. There was an increase in the enzymatic activity of superoxide dismutase (SOD) when used combination of phytohormones 2,0 / 2,0 and 4,0 / 1,0 mg.L-1BAP / NAA and consequently lower growth of calluses. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

The use of biolistic on genetic transformation of plants requires an optimization of several parameters, including the protocol development for plant regeneration from transformed cells. The objective of this research was to evaluate the regeneration efficiency of maize plants from embryogenic callus and explants from split seeds submitted to transformation by biolistic using the gene bar as a selectable marker. It was submitted 2000 clusters of embryogenic callus and 2000 divided maize seeds to transformation by biolistic. The selection of transformation events was in culture medium supplemented with ammonium glifosinate. Selected seedlings were acclimatized and transplanted to pots in a greenhouse. Using somatic embryogenesis, the regeneration efficiency was 0.2%, while using split seeds explants the regeneration efficiency was 1.3%. Although both protocols allow the maize plant regeneration after transformation by biolistic, there is a need to increase its efficiency. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

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O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de reguladores de crescimento na indução de calos e pró-embrióides em anteras de C. arabica cv Catuaí Vermelho LCH-2077-2-5-44. Testou-se primeiramente a inoculação das anteras em meio MS suplementado 2,4-D (2, 4, 6 e 8mgL-1), TDZ (0 e 0,5mgL-1) juntamente com época de avaliação (30, 60 e 90 dias). O delineamento experimental foi de blocos casualizados, em esquema fatorial de 4x2x3 com quatro repetições. Avaliou-se oxidação, intumescimento e calosidade. A utilização somente de 2mgL-1 2,4-D foi eficiente na indução de calos. Concentrações altas de 2,4-D inibiram a formação dos calos e quanto maior o período de avaliação, maior era a oxidação nas anteras. Posteriormente testou-se os seguintes tratamentos: 2mgL-1 2,4-D + 2mgL-1 BAP; 8mgL-1 Cinetina + 1mgL-1 AIB; 2mgL-1 Cinetina + 1mgL-1 2,4-D; 2mgL-1 Cinetina + 20mgL-1 GA3; 2mgL-1 2,4-D + 0,5mgL-1 TDZ; 2mgL-1 ANA e 2mgL-1 2,4D. O experimento foi em delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial 7x2 (composição dos reguladores x épocas de cultivo in vitro). Após 30 e 60 dias de cultivo in vitro avaliou-se contaminação, oxidação, intumescimento, formação de calos e com presença ou não de pró-embrióides. As combinações de reguladores 2mgL-1 2,4-D + 2mgL -1 BAP, 2mgL-1 Cinetina + 1mgL-1 2,4-D, 2mgL-1 2,4-D + 0,5mgL-1 TDZ e 2mgL-1 2,4-D proporcionaram a formação de calos. A calosidade foi favorecida aos 60 dias de cultivo in vitro. As combinações 2mgL-1 2,4-D + 2mgL-1 BAP, 2mgL-1 Cinetina + 1mgL-1 2,4-D, 2mgL-1 2,4-D + 0,5mgL-1 TDZ proporcionaram a indução de pró-embrióides.

A evolução morfogenética dos embriões, durante a embriogênese em plantas, é acompanhada por uma intensa síntese de proteínas LEAs (proteínas da embriogênese tardia) e proteínas de reserva que possuem papel fundamental durante a fase de maturação. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do ABA e dos agentes osmóticos, polietilenoglicol (PEG) e maltose, na expressão diferencial de proteínas durante a maturação de culturas embriogênicas de A. angustifolia. Culturas embriogênicas de A. angustifolia foram submetidas a cinco tratamentos de maturação: 1) Controle, meio de cultura BM; 2) ABA, meio BM suplementado com ABA (200 µM); 3) PEG, meio BM suplementado com PEG (9%); 4) Maltose, meio BM suplementado com maltose (9%) e; 5) APM, meio BM suplementado com ABA (200 µM), PEG (9%) e maltose (9%). Após 60 dias de cultivo as proteínas totais foram extraídas com tampão uréia:tiouréia (7M:2M), seguido de precipitação em 10% ácido tricloroacético (TCA)/acetona. Alíquotas de 120 µg de proteínas foram isofocalizadas em tiras de gel IPG (gradiente imobilizado de pH) de 11 cm e faixa de pH 4-7, sendo posteriormente submetidas à separação eletroforética em gel de poliacrilamida SDSPAGE 12%. As proteínas foram visualizadas pela coloração com prata e os géis analisados através do programa Image Master 2-D Platinum®. O tratamento PEG resultou na expressão de maior número de proteínas (420 polipeptídeos), enquanto a adição de ABA apresentou 164 polipeptídeos. Os demais tratamentos: Controle, Maltose e APM apresentaram, respectivamente, 347, 322 e 273 polipeptídeos. Todos os tratamentos apresentaram predominância de proteínas com peso molecular entre 30 kDa e 60 kDa. O tratamento suplementado com Maltose apresentou maior porcentagem de polipeptídeos de alto peso molecular (31,4%) quando comparado com os demais tratamentos. A identificação das proteínas expressas diferencialmente pode contribuir para a compreensão do desenvolvimento embrionário, além de auxiliar na otimização dos protocolos de maturação das culturas embriogênicas em A. angustifolia. (FAPESP, CNPq)

Carica papaya L., família Caricaceae, é uma espécie agronomicamente importante por ser fonte das vitaminas A e C e da enzima papaína. Em virtude dos problemas inerentes à propagação via sementes, vários protocolos têm sido propostos para propagação in vitro dessa espécie. Processos morfogênicos in vitro geralmente estão associados à ocorrência de variação somaclonal, que pode prejudicar etapas importantes da cultura in vitro e/ou gerar variabilidade genética útil para o melhoramento de plantas. Entretanto, há poucos relatos acerca da ocorrência desse fenômeno na cultura de tecidos de C. papaya. O objetivo do presente trabalho foi verificar a ocorrência de variação somaclonal em plantas de C. papaya obtidas via embriogênese somática. O nível de ploidia de plantas de C. papaya, derivadas de embriogênse somática a partir de embriões zigóticos imaturos, foi analisado via citômetro de fluxo Partec® PAS II/III. Plantas de C. papaya germinadas in vitro e cultivadas em casa de vegetação foram utilizadas como padrão citométrico, e foi empregado o protocolo recomendado pela Partec® para obtenção da suspensão nuclear. Os histogramas gerados pela análise citométrica evidenciaram a ocorrência de plantas com nível de ploidia idêntico ao dos padrões (2C = 2X), mixoplóides (2C = 2X e 2C = 4X), triplóides (2C = 3X) e tetraplóides (2C = 4X). Duas análises citométricas subseqüentes mostraram que não houve alteração no nível de ploidia ao longo dos subcultivos em todas as plantas. Os resultados indicam que as condições in vitro necessárias para a indução de embriogênese somática em C. papaya promoveram a ocorrência de variação somaclonal, e que a citometria de fluxo foi um método direto, rápido, prático e confiável para identificação e seleção de variantes somaclonais.

A embriogênese somática indireta é realizada por meio da indução de calos, constituindo uma técnica importante em programas de melhoramento de plantas. O calo corresponde a uma massa de células desorganizadas e parcialmente indiferenciadas, que variam quanto ao tipo, tamanho, conteúdo celular e espessura da parede celular, e que apresenta alta variabilidade genética. O presente trabalho teve como objetivo induzir a embriogênese somática indireta, bem como respostas morfogenéticas in vitro, em algodão herbáceo (Gossypium hirsutum L.), variedade CNPA 8H. Sementes da variedade CNPA 8H foram esterilizadas em álcool a 70% (por cinco minutos) e hipoclorito de sódio a 2% (por vinte minutos), e lavadas em água destilada e estéril. Posteriormente, foram depositadas em frascos contendo 30 mL de água destilada e estéril e papel filtro, para a germinação das mesmas. Após dois dias da germinação, segmentos de hipocótilo medindo 01cm de comprimento foram retirados das plântulas germinadas in vitro e inoculados em meio MS suplementado com 30g/L de sacarose, 0,1g/L de mio-inositol, 1,5g/L de gelrite e os hormônios KIN e NAA, cada um na concentração de 1,5 mg/L, para a indução de calogênese; cada unidade experimental recebeu um segmento. Foram utilizadas vinte unidades experimentais com 04 repetições. Os calos foram analisados quanto à taxa de indução de calogênese e taxa de diferenciação morfogenética. A taxa de germinação foi de 91,67% e a altura média das plântulas foi 4,96cm; os resultados obtidos mostraram uma taxa de indução de calogênese de 100%; e uma taxa de diferenciação morfogenética de 54%. Conclui-se que o meio de cultura utilizado foi altamente eficaz para a embriogênese somática e indução de respostas morfogenéticas in vitro.

Assim como ocorre em outros gêneros da família Bromeliaceae, as espécies do gênero Neoregelia vêm sendo alvo de um intenso extrativismo em diversos ecossistemas brasileiros, refletindo na perda da biodiversidade e causando erosão genética. Apesar da maioria das bromélias se reproduzir normalmente via sementes, sua propagação pode ser feita também por mudas e, mais recentemente, mediante técnicas de cultura de tecidos, que podem contribuir mais rapidamente para a multiplicação e preservação da diversidade genética de suas diversas espécies. Dentro deste último enfoque, o objetivo do trabalho consistiu em identificar um meio de cultura mais apropriado para a indução de calos em explantes de Neoregelia sp., e assim facilitar o desenvolvimento de estratégias alternativas para sua propagação. Os meios de cultura empregados foram o B5, CEF, EME, MS e WPM, com algumas modificações, nos quais foram inoculados explantes das partes apical e basal de folhas maduras, folhas novas completas e segmentos transversais do caule, com aproximadamente 0,5 a 1,0 cm de tamanho, extraídos de propágulos previamente cultivadas in vitro. Todos os materiais foram cultivados em ausência de luz e sob temperatura de 27±1°C, durante 35 dias. Após esse período, foram avaliadas as seguintes variáveis: porcentagens de explantes com crescimento, com calos compactos e com calos friáveis. Verificou-se que houve uma forte influência do meio no cultivo in vitro da Neoregelia sp., destacando-se o CEF e o WPM em relação aos explantes que apresentaram crescimento. Dos explantes com crescimento, apenas nos segmentos de caule observou-se a formação de calos compactos, no meio CEF. Já calos friáveis foram observados nos demais tipos de explantes, quando cultivados nos meios CEF e o WPM. Pôde-se concluir que os meios de cultura CEF e o WPM foram os mais adequados para a indução de calos compactos e friáveis em explantes de Neoregelia sp, recomendando-se a execução de outros estudos com vistas a induzir a formação de calos embriogênicos e posterior produção de embriões somáticos.

A pupunha é uma Arecaceae que apresenta aptidão para a produção de frutos e palmito. A composição dos frutos faz desta uma excelente fonte alimentícia essencialmente energética, com boas quantidades de lipídios e caroteno (provitamina A) (Mora-Urpí et al, 1997). A pupunha tem sido o objeto de pesquisas intensivas e desenvolvimento em várias partes da América tropical (Clement, 1995), devido principalmente as suas características de precocidade, rusticidade, elevada produtividade e perfilhamento. Sua reprodução é assexuada pela formação de perfilho. No entanto, a formação de mudas para plantios comerciais é feita normalmente por meio de sementes. Por ser uma planta alógama a produção de mudas por sementes pode provocar alta variabilidade genética nesses plantios. A cultura de tecidos é uma excelente técnica na micropropagação de plantas, manipulação genética, conservação (George, 1993). A cultura de tecidos permite aumentar a velocidade e a eficiência de muitos programas de melhoramento, criando novas fontes de variabilidade genética. Entre as principais contribuições dessa tecnologia na agricultura, destacam-se: a micropropagação, cultura de embriões, seleção in vitro, produção de plantas duplohaplóides, hibridização somática, variação somaclonal e transformação genética (Karp,1995). Dentre as técnicas, podemos mencionar a embriogênese somática. Essa rota morfogênica constitui-se numa fonte eficaz para a multiplicação clonal em plantas lenhosas. Segundo Ammirato (1983), a embriogênese somática é um processo análogo à embriogênese zigótica em que uma única célula, ou um grupo de células somáticas são precursoras dos embriões somáticos. Este sistema é utilizado para a propagação massal de plantas elites, apresentando grande potencial, pois possibilita elevadas taxas de multiplicação (Gupta et al. 1993). Na embriogênese somática, ocorre a formação de embriões somáticos, com fases similares às de formação do embrião zigótico, sem fecundação (Segura, 1993). O sucesso na iniciação e estabelecimento de culturas embriogênicas depende basicamente do tipo e estádio fisiológico dos explantes (Pereira et al., 2006). Potencialmente muitos tecidos vegetais têm capacidade para originar calos in vitro, contudo poucos explantes têm habilidade para produzir calos embriogênicos (De Jong et al., 1993). Explantes embrionários possuem maior competência morfogênica (Guedes et al., 2006), podendo suas células apresentar receptores específicos e de maior sensibilidade aos hormônios vegetais (Guerra et al., 1998). Este trabalho teve por objetivo induzir a embriogênese somática em pupunheira a partir de embriões zigóticos imaturos.

O dendezeiro (Elaeis guineensis), pertencente à família Arecaceae, é originário do continente Africano. Desenvolve-se em regiões de clima tropical, em vários tipos de solo e ricos em matéria orgânica (Carvalho et al., 2001). As sementes estacam-se pela produção de óleo, o qual tem uso alimentício, medicinal, oleoquímico e industrial. O dendê é a oleaginosa mais produtiva do mundo, chegando a atingir 5 mil kg de óleo/ha. O programa brasileiro de biocombustíveis busca viabilizar a utilização do biodiesel, constituído das misturas de ésteres metílicos ou etílicos de ácidos graxos, obtidos da reação química de transesterificação de diversos óleos, entre eles os do dendê (Miragaya 2005). A propagação do dendezeiro ocorre através de sementes e, mesmo quando se utilizam híbridos selecionados, as plantas podem apresentar alta variabilidade, constituindo-se num dos principais fatores da baixa produtividade em plantios comerciais (Juan & Rodrigues, 1989). Devido à dificuldade de usar a propagação via sementes, a cultura de tecidos surge como uma excelente alternativa para a multiplicação clonal de espécies selecionadas (Scherwinski-Pereira et al., 2006). A cultura de tecidos de plantas, em especial a embriogênese somática, se constitui como uma técnica eficaz para a multiplicação clonal de plantas lenhosas. Segundo Ammirato (1983), a embriogênese somática é um processo análogo à embriogênese zigótica em que, uma única célula ou um grupo de células somáticas são precursoras de embriões somáticos. A embriogênese somática pode ser implementada a partir de explantes de diversas origens, como: embriões zigóticos, inflorescência, ápices caulinares e folhas imaturas (Guerra et al., 1999). Alguns padrões morfogenéticos típicos ocorrem em tecidos vegetais cultivados in vitro tais como a formação de calos, isto é, uma massa de células de proliferação contínua e mais ou menos desordenada (George, 1993). Este trabalho teve como objetivo a indução da embriogênese somática a partir de diferentes estruturas foliares de Elaeis guineensis em meio de cultura contendo diferentes tipos de auxinas.

No presente trabalho avaliou-se o efeito de diferentes fontes e concentrações de auxina como uma das fases para o estabelecimento de um protocolo regenerativo in vitro baseado na embriogenese somática

O presente trabalho teve por objetivos: (1) verificar o potencial morfogenético de embriões para o cultivo in vitro; (2) avaliar a taxa de sobrevivência dos embriões zigóticos durante o cultivo in vitro; (4) desenvolver um protocolo de indução de embriogênese somática em Campomanesia guasumifolia Berg., utilizando diferentes concentrações de auxina e embriões de diferentes estádios de desenvolvimento visando acelerar a produção de mudas através da micropropagação.

Este trabalhou objetivou avaliar a resposta das variedades RB 72 454 e SP 81 3250 ao tratamento com 2,4-D.

O presente estudo visa determinar entre duas variedades de cana-de-açúcar, qual é a mais eficaz em termos de velocidade e de formação de calos, e qual variedade produz uma maior massa de calos.

Objetivou-se, com este trabalho, averiguar o efeito de dois meios de cultura, Murashige e Skoog (1962) e Nitch (1974), na indução de calos embriogênicos e seu desenvolvimento (peso); sob influência dos reguladores de crescimento 2,4-D (ácido 2,4-diclorofenoxiacético) e 2IP (2-isopenteniladenina) em três variedades distintas de algodão.

Este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito da adição de PEG e ABA ao meio de maturação no crescimento e níveis endógenos de AIA, ABA, poliaminas e aminoácidos em embriões somáticos de O. catharinensis.

O objetivo deste trabalho foi estabelecer um protocolo eficiente de indução de calos embriogênicos de cana-de-açúcar.

The first step in plant transformation using somatic embryogenesis or organogenesis for plant regeneration in vitro has been the identification of genotypes with the best totipotency. Thus, the objective of this experiment was to evaluate the totipotency of ten cultivars and one soybean line from the Coodetec Gene Bank. The somatic embryos developed from immature cotyledons measuring from 4 to 6 mm in length, and the organogenesis was evaluated from mature soybean seeds. The cultivars CD 201, CD 216 and CD 220 were the most promising genotypes to produce somatic embryos, whereas the cultivar CD 217 had the highest quantity of differentiated explants, which represents the best regeneration efficiency for participating in organogenic systems. In the experiment with somatic embryogenesis, time to plant regeneration was ten months, but the plants were regenerated after only four months in the experiment with organogenesis. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

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As poliaminas, putrescina (put), espermidina (spd) e espermina (spm) são amplamente distribuídas na natureza, desempenhando importante papel em vários eventos celulares. Considerando que as poliaminas estão envolvidas no processo embriogênico, torna-se importante conhecer as bases para estas alterações no metabolismo. O objetivo do presente trabalho foi observar os teores de poliaminas durante as diferentes fases da embriogênese somátka da cenoura. As análises foram realizadas, através da modificação do método de Flores e Galston a cada 96 horas durante 50 dias da cultura de células em suspensão. As células foram obtidas a partir de calos e inoculadas em meio de Murashige & Skoog (MS), modificado e acrescido de 0,2 mg/l de 2,4-D e 0,1 mg/l de cinetina durante os primeiros 14 dias da cultura, sendo que no restante do período permaneceram em meio MS desprovido de fiorreguladores. Os teores de poliaminas oscilaram durante todo o processo embriogênico, sendo que a putrescina foi a que apresentou maior acúmulo. Estes resultados sugerem que os níveis de espermidina e espermina são reduzidos em relação a putrescina devido a intensa utilização da spd e spm no processo de divisão e diferenciação celular, enquanto que a put parece ter apenas a função de sintetizar as outras duas amidas.The polyamines, putrescine (Put), Spermidine (Spd) and Spermine (Spm) are widely present in nature, performing an important role in various cellular events. Considering that polyamines take part of the embryogenic process, it is important to know the bases for these alterations in the metabolism. The objective of the present study was to observe the contents of polyamines during the different phases of somatic embryogenesis of carrot. Analyses were carried out, according to a modification of the method developed by Flores & Galston every 96 hours during 50 days from the culture of cell suspensions. The cells were provided from callus and inoculated in Murashige & Skoog (MS) medium which had been modified and added with 0.2 mg/l of 2,4-D and 0.1 mg/l of Idnetin during the first 14 days, whereas for the other days, they were kept in MS medium deprived of phytoregulators. The contents of polyamines varied during all the embryogenic process, when putrescine showed the most accumulated. These results suggest that the levels of Spermidine and spermine are reduced in relation to putrescine due to the intense use of Spd and Spm in the process of cell division and differentiation, whereas Put seems to have only the function of synthetizing the other two amines.