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International audience; Formation of trans-acting small interfering RNAs (ta-siRNAs) from the TAS3 precursor is triggered by the AGO7/miR390 complex, which primes TAS3 for conversion into double-stranded RNA by the RNA-dependent RNA polymerase RDR6 and SGS3. These ta-siRNAs control several aspects of plant development. The mechanism routing AGO7-cleaved TAS3 precursor to RDR6/SGS3 and its subcellular organization are unknown. We show that AGO7 accumulates together with SGS3 and RDR6 in cytoplasmic siRNA bodies that are distinct from P-bodies. siRNA bodies colocalize with a membrane-associated viral protein and become positive for stress-granule markers upon stress-induced translational repression, this suggests that siRNA bodies are membrane-associated sites of accumulation of mRNA stalled during translation. AGO7 congregates with miR390 and SGS3 in membranes and its targeting to the nucleus prevents its accumulation in siRNA bodies and ta-siRNA formation. AGO7 is therefore required in the cytoplasm and membranous siRNA bodies for TAS3 processing, revealing a hitherto unknown role for membrane-associated ribonucleoparticles in ta-siRNA biogenesis and AGO action in plants.

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International audience; To examine whether molecular similarities exist between the animal and plant Rho GTPase signaling pathways, we have developed a heterologous two-hybrid screening method. By this technique, we have cloned a cDNA encoding a tobacco Rac-like protein able to interact with a mammalian Rho-GDI. In a second screen this tobacco Rac was used as a bait and a tobacco homologue of Rho-GDI was identified. These results show that some components of the animal and plant Rac signaling pathways are similar enough to allow their interaction in an heterologous approach. Moreover these data suggest a similar regulation of Rho GTPases in animals and plants.

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Le cadmium est un element rare present dans les sols a des concentrations moyennes de 0,15 a 0,2 ppm. Les principales sources de son absorption chez l'homme sont l'alimentation et le tabac. Les doses ingerees sont faibles, mais leurs effets sur la sante humaine sont toutefois mal connus. Dans le but de diminuer la teneur en cadmium des feuilles de tabacs industriels, plusieurs genes codant pour une metallothioneine humaine (hmtii), proteine chelatrice de metaux lourds, absente chez le tabac, ont ete introduits dans cette plante. Dans le but de faire exprimer le gene hmtii dans les racines des plantes, des etudes de specificite d'expression ont ete prealablement realisees en introduisant dans des plantes de tabac le gene rapporteur uida sous le controle de la region promotrice du gene rold d'agrobacterium rhizogenes, du promoteur de l'arn 35s du camv double dans sa region enhancer et du domaine a de ce meme promoteur, specifique des racines. Il apparait qu'un fragment de 426 pb du promoteur rold permet une expression surtout racinaire, qui est plus forte que celle obtenue avec le domaine a du promoteur 35s, mais neanmoins plus faible que celle obtenue avec le promoteur fort, mais non specifique, de l'arn 35s double dans sa region enhancer. De plus, on observe qu'une proteine de fusion hmtii/gus exprimee chez des plantes de tabacs transgeniques est bifonctionnelle in vitro et in vivo. Il apparait de plus que l'expression des genes hmtii et hmtii/gus sous le controle du promoteur du gene rold et du promoteur 35s double dans sa region enhancer, permet de modifier la repartition de ce metal chez les plantes transgeniques, puisqu'a un stade precoce environ 20% du cadmium absorbe par les plantes exprimant ce gene est transloque a la partie aerienne, contre 60% pour les plantes temoins.