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Meloidogyne javanica causing root-knot nematode in soybean is an important problem in soybean areas, leading to several yield losses. Some accessions have been identified carrying resistance loci to this nematode specie. In this study, a set of 317 soybean accessions were characterized for resistance to M. javanica. Genome-wide association study (GWAS) was performed using SNPs from genotyping-by-sequencing (GBS), and a region of 29.2 Kbp on chromosome 13 was identified. The haplotype analysis showed that SNPs were able to discriminate susceptible and resistant accessions, leading to 25 accessions sharing the resistance locus. Furthermore, 5 accessions may be new M. javanica resistance sources. The screening of the SNPs in the USDA soybean germplasm showed that several accessions previous reported as resistance to other nematodes also showed the resistance haplotype on chromosome 13. High levels of concordance among the phenotypes of Brazilian cultivars and the SNPs in chromosome 13 were observed. A in silico analysis of the mapped region on soybean genome revealed a presence of 5 genes with structural similarity with major resistance genes. The expression levels of the candidate genes in the interval demonstrated a potential pseudogene, and other two model genes up-regulated in the resistance source after pathogen infection. The SNPs associated to the region conferring resistance is a important tool for introgression of the resistance by marker-assisted selection in soybean breeding programs.

Com o objetivo de selecionar linhagens resistentes à raça 3 de Heterodera glycines, desenvolvidas pelo Programa de Melhoramento de Soja da Universidade Federal de Viçosa, conduziram-se seis experimentos. em casa de vegetação, delineados inteiramente ao acaso, com quatro metições, em que cada parcela (planta) foi inoculada com 2.500 ovos do patógeno. Decorridos 28 dias, avaliou-se o número de fêmeas por sistema radicular, e a seleção das linhagens foi realizada com base no índice de- fêmeas, sendo as suscetíveis descartadas e as resistentes recuperadas pelo método do reenraizamento. Do número total de experimentos, dois foram conduzidos na geração F 5: um para testar 30 linhagens provenientes do cruzamentoºHartwig' x “Dolce-RC” e o outro, 35 linhagens “Coker 6727” x “FT-Cristalina”, das quais se encontraram ll e 7 linhagens resistentes, respectivamente. Elas foram recuperadas e conduzidas até o final do ciclo, obtendo-se, assim, sementes Fá. Paralelamente, retirou-se uma semente de cada planta selecionada, que foi semeada em vaso, obtendo-se plantas FG, que produziram sementes F7. Dois experimentos foram conduzidos para testar as progênies das linhagens “Hartwig" x “Dako-RCE" nas gerações F5 e F7, respectivamente, e constatou-se que a maioria das linhagens selecionadas em F 5 apresentou resistência nessas duas últimas gerações. Já nos outros dois ensaios com as linhagens "Coker 6727 ” x “FT- Cristalina", verificou-se que mais de 90% das linhagens selecionadas em F5 comportam-se como suscetíveis em F6 e F7, Avaliou-se um total de 116 linhagens de cruzamento "Hartwig" x "Doko-RC" e 85 de "Coker 6727" x “FT-Cristalina”, das quais 93 e 10, respectivamente, foram selecionadas como resistentes. Under the UFV Soybean Breeding Prom six greenhouse experiments were undertaken to select resistant soybean lines to Heterodera glycines race 3. A completely randomized experimental design with four replicates was used. Twenty eight days after inoculation (2,500 eggs/plant), the number of nematode females by root system was evaluated for each line. The susceptible lines were discarded. A rerooting method was used to rescue plants of the resistant lines. Of all the six experiments,two were carried em in the F, generation, one to test 30 lines from the 'Hartwig' x 'Doko-RC' cross, and the other, 35 lines from the 'Coker 6727' x 'FT- Cristalina' cross, of which eleven and 7 resistant lines, respectively, were found. The resistant plants were rescued as indicated and respectively, were found. The resistant plants were rescued as indicated and taken up to the end of cycle to yield FG seeds. Also, one seed was taken from each of these 18 resistant plants and sown, thus resulting in F6 plants which yielded the F7 seeds. In two other experiments carried out to test the 'Hartwig' x 'Doko-RC' progeny, most lines were found resistant to H. glycines race 3 in the f7 and F8 generations. In the two remaining experiments ('Coker 6727' x 'FT- Cristalina' progeny), - the most resistant lines Selected in F5 led to susceptible lines in F6 and F7. Overall, 93 resistant lines emerged from the 116 'Hartwig' x 'Doko-RC' progeny testing, and 10 resistant lines from the 85 'Coker 6727' x 'FT- Cristalina', tested lines.

No Brasil, as técnicas de multiplicação do nematoide de cistos (Heterodera glycines, lchinohe), em condições de casa de vegetação, ainda não estão bem esclarecidas. Possivelmente um dos fatores a ajustar seja o tipo e a capacidade dos vasos. Este trabalho, constituído de dois experimentos, objetivou comparar a multiplicação desse nematoide em vasos de cerâmica e de plástico, com diferentes capacidades. Logo após a emergência, uma plântula de soja, “FT-Cristalina”, foi transplantada para o centro de cada vaso e, simultaneamente, cerca de 4.000 ovos do patógeno foram depositados em dois Erros com diâmetro aproximado de um lápis, em posições diametralmente opostas ao colo da planta. Em um dos vasos de cada tipo e capacidade introduziu-se um termômetro de solo, que foi monitorado diariamente às 13h, anotando-se a temperatura durante todo o período do experimento. Em um dos experimentos, manteve-se a umidade do solo em tomo de 90% da capacidade de campo e no outro não houve um controle efetivo dessa umidade. Aos 28 dias após a inoculação, determinou-se o número de fêmeas por sistema radicular e, independentemente do controle de umidade do solo, encontrou-se maior número de fêmeas e menor temperatura do solo nos tratamentos em que foram utilizados vasos de cerâmica. No experimento em que se estudou a influência da capacidade dos vasos no número de fêmeas, verificou-se, dentro do mesmo tipo de material, não haver diferença entre as mesmas. Conclui-se que, em condições de casa de vegetação, os experimentos com Heterodera glycines devem ser conduzidos em vasos de cerâmica independentemente de sua capacidade, mas na impossibilidade de conseguir este tipo de vaso o pesquisador poderá optar pelo uso de vaso de plástico, desde que monitore e controle a umidade do solo. The methodology for the cultivation of the soybean cyst nematode, Heterodera glycz'nes, Ichinohe, under greenhouse conditions in Brazil hes not been well established yet. Pot type and size are two factors that need to be adjusted. This work aimed to compare this nematode's reproduction in clay pots versus in plastic pots, both of different sizes. One plantlet of soybean cv. “FT-Cristalina“ was transplanted just after emergence to the soil of each pot and 4000 eggs of Heterodera glycines were added per pot around the plantlet. One therrnometer was introduced into soil of one pot in each treatment and temperature was recorded on a daily basis, at 1:00 PM, until the end of the experiments. Soil moisture was kept at 90% Held capacity in one experiment but not in the other. Regardless of moisture control, a greater number of female and lower temperatures Were observed in the clay pot treatment. No difference in number of females was observed when pots of diferent sizes of the same type were compared. In conclusion, greenhouse biºssays whith H. glycines in soybean should be canied out using clay pots rather than plastic pots, regardless of size. Overwatering must be avoided. Extra care must be taken to avoid overwatering if plastic pots are used.

Em 1994, foi realizado, na Universidade Federal de Viçosa (UFV), estudo envolvendo o nematóide de cistos da soja (H. glycines Ichinohe, 1952) (NCS), raça 3, e a cultura da soja. Diversas variedades e linhagens, americanas e nacionais, do Banco de Germoplasma do Programa de Melhoramento de Soja da UFV foram testadas contra esse patógeno. Utilizou- se o delineamento inteiramente casualizado, com seis repetições, que se constituíram de uma planta de soja por vaso. Cada vaso continha 300g de um solo 1:1 (solo:areia), tratado com brometo de metila (150 cm^3 por m^3 de solo). As plantas foram inoculadas no mesmo dia do transplantio, aproveitando-se o próprio orifício de inserção das mudas. A inoculação das plantas foi feita com 4000 ovos e a incubação durou cerca de 30 dias. Após esse período, foi realizada a avaliação (contagem do número de fêmeas) para a determinação da resistência ou suscetibilidade, com base numa fórmula proposta por GOLDEN et al. (3). Os resultados dos ensaios permitiram concluir que: l - entre as variedades e linhagens locais testadas, somente a linhagem NC -1ol -P apresentou resistência à H. glycines, raça 3; 2 - as variedades e linhagens norte-americanas: Hartwig, Gordon, Coker 6727, Coker 6738, A-5980 e 0485, resistentes à raça 3 de H. glycines nos EUA, também o são em condições, brasileiras e 3 - todos os demais genótipos testados foram suscetíveis à H. glycines, raça 3. A study involving the soybean cyst nematode (H. glycines Ichinohe, 1952) (SCN), face 3, and soybean culture was carried out at the Federal University of Viçosa. Forty American and domestic varieties and lines were tested against the pathogen. The experiment was arranged in a randomized design, with six replications and one n' _ .er pot. Each pot contained 300 g of soil mixture 1:1 (soil : sand) eated with methyl bromide (150 cm^3 por m^3 of soil). The plants were inoculated on the same day of transplanting, near the root of each seedling. Inoculation was performed with 4,000 eggs _and incubation, carried for 30 days. After this, females were counted, for the determination of resistance or susceptibility, using a formula proposed by GOLDEN et al. (3). The results of the assay allowed the following conclusions: 1. Among the domestic varieties and lines tested, only the NC-101-P line was identified as resistant to race 3 of H. glycine;, 2. the North American varietíes and lines Hartwig, Gordon, Coker 6727, Coker 6738, A-5980 and C-485 were identified as resistant to race 3 of H. glycines, and 3. the other genotypes were identified as susceptíble to H. glycines, race 3.

A nematological survey was carried out in 1992 in the coffee production area of Espírito Santo State, Brazil, to know the different genera of coffee parasitic nematodes in that State. The phytonematodes found and their frequencies (%) in the samples were: 1)Coffea arabica: Helicotylenchus sp. (68.8), Meloidogyne ' exigua (35.5), Aphelenchus sp. (33.3), Criconemellazsp. (20.0), Xiphinema sp. (13.3), Pratylenchussp. (13.3), Ditylenchus sp. (17.7), Aphelenchoides sp. (17.7), Tylenchus sp. (4.4), Meloidogyne sp. (juveniles) (2.0) and Rotylenchulus sp. (2.2). 2)Coffea canephora var. kouillou: Aphelenchus sp. (56.3), Helicotylenchus sp. (25.0), Ditylenchus sp. (21.9), Meloidogyne sp. (iuveniles) (20.3), Pratylenchus sp. (17.2), Tylenchus sp. (15.6), Aphelenchoides sp. (14.0), Cri- conemella sp. ( 10.9), Rotylenchulus Sp. (10.9) and Xiphinema sp. (1.5).

Durante o inverno de 1994 foi realizado, na Universidade Federal de Viçosa (UFV), em Viçosa (MG), um experimento envolvendo o nematóide de cistos (H. glycines) e a cultura da soja. Naquele período, estudou-se o comportamento do patógeno sob condições de inverno e testou-se uma câmara de controle térmico, com o objetivo de propiciar condições satisfatórias de temperatura para multiplicação do nematóide. Foram testadas duas fontes de inóculo: ovos extraídos de fêmeas e solo naturalmente infestado. Os tratamentos constituíram-se de dois ambientes: dentro e fora da câmara, ou seja, com e sem controle de temperatura. Utilizou-se o delineamento inteiramente casualizado, com quatro repetições para o inóculo constituído de ovos extraídos de fêmeas e 10 repetições para solo naturalmente infestado. Foram. utilizados. vasos com capacidade para 500 ml, contendo 300 ml de uma mistura 1:1 (solo:areia), tratada com brometo de metila, com exceção do solo naturalmente infestado, que era a própria fonte de inóculo. Quando o inóculo era constituído de ovos extraídos de fêmeas, as plantas, uma por vaso, foram inoculadas simultaneamente ao transplantio, aproveitando-se a cavidade para plantio das mudas. Cada planta foi inoculada com aproximadamente 4.000 ovos. Os vasos com solo naturalmente infestado continham, em média, 225 cistos. A avaliação consistiu na contagem do número de fêmeas por sistema radicular e foi realizada um mês após o transplantio. Os resultados do experimento permitiram concluir que, em Viçosa, as baixas temperaturas de inverno são limitantes para a reprodução e o desenvolvimento do nematóide de cistos da soja (H. glycines), prejudicando a eclosão e, ou, a penetração dos juvenis, e que a câmara JALS-TS foi eficiente em promover condições térmicas adequadas ao desenvolvimento do patógeno, permitindo sua multiplicação durante o inverno. An experiment aiming at the multiplication of the soybean cyst nematode was carried out at the Federal University of Viçosa - MG, during the winter of 1994. The potential of a thermal control Chamber to provide a favourable temperature condition for the cyst nematode was evaluated. Two types of inoculum were tested: 1 - eggs taken from females and 2 - naturally infested soil. The treatments took place in two types of environment: inside and outside the Chamber, i.e, with and without temperature control. A completely randomized block design was used with four replications to test inoculum 1 and with ten replications to test inoculurn 2; 500 ml pots were used containing 300 ml a soil:sand mixture (1:1), treated with methyl bromide, except the naturally infested soil, witch was the inoculum source. Each plant was inoculated with 4,000 eggs. The pots containing the naturally infested soil presented an average of 225 cysts. The number of females per root system was determined a month later. The results of the experiment allowed the following conclusions: l - Low winter temperatures were limiting to the multiplication of the soybean cyst nematode. 2 - The Chamber IALS-TS was efficient to promote adequate thermal conditions for the multiplication of the pathogen during. the winter.

Cento e cinquenta amostras de solo procedentes de diferentes regiões do Brasil foram examinadas para se detectar a presença de fungos predadores de nematóides. Obtiveram-se 12 isolados de Arthrobotrys muszjformis, quatro de A. conoides, dois de A. robusta, um de A. thaumasia, um de Monacmsporium gephympagum e um outro isolado de Monacrosporium, que se trata de uma espécie nova. Todos os fungos formam redes adesivas como órgão de captura dos nematóides, exceto a espécie de Monacrosporium ainda não identificada, que o faz por meio de nódulos adesivos. One hundred fifty soil samples from different regions of Brazil were examined to detect the presence of nematode predaceous fungi. The following fungi were detected in the soil samples: 12 isolates of Arthrobotrys musiformis, 4 A. conoides, 2 A. robusta, one A. thaumasia, one M onacrospori um gephyropagum and another Monacrosporium, an undescribed species. All the fungi produced adhesive nets, except Monacrospori um sp., which capture the nematodes through adhesive knobs.

Submitted by Michele Mologni (mologni@unoeste.br) on 2019-01-24T16:37:31Z No. of bitstreams: 1 Lorrayne Guimarães Bavaresco.pdf: 1579894 bytes, checksum: be828e9da52619462a559db48496ff9a (MD5) Made available in DSpace on 2019-01-24T16:37:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lorrayne Guimarães Bavaresco.pdf: 1579894 bytes, checksum: be828e9da52619462a559db48496ff9a (MD5) Previous issue date: 2018-08-08 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Among the forms of biological control, the use of rhizobacteria has shown to be promising in the suppression and protection of plants against the attack of phytonematoids. The objective of this work was to evaluate the effect of Bacillus subtilis on the reproduction of Meloidogyne spp., associated to changes in rhizosphere colonization and growth, nutrition and enzymatic activity of tomato cultivars tolerant and susceptible to root-knot nematodes. The methods of application consisted of the inoculation of Bacillus subtilis (AP-3) in pre-planting and post-planting of the tomato. Two experiments were conducted in a plant growth chamber. In the first experiment the tomato plants were cultivated on a sterile substrate, inoculating 5000 eggs of Meloidogyne incognita. In the second, tomato cultivation was carried out in sandy soil naturally infested with root-knot nematodes. The plant growth, nematode reproduction, soil and rhizosphere colonization by bacteria of the genus Bacillus spp., and biochemical changes were evaluated at 40 days after transplanting of the tomato. In both modes of application, the Bacillus subtilis was efficient in increasing root mass and in reducing the reproduction of the root-knot nematode in susceptible tomato cultivated in naturally infested soil. In sterile substrate, inoculation of B. subtilis in post-planting promoted reduction of the number of active forms of the nematode and both applications promoted the decrease of eggs of Meloidogyne incognita in the roots of the tomato. The application of B. subtilis, as a sterile substrate, induced changes in the nutritional uptake of tomato plants, increasing calcium levels and reducing leaf potassium. The application of B. subtilis contributed to the reduction of the peroxidase activity in leaves of the tomato susceptible to root-knot nematodes, in sterile condition. The rhizobacteria, after planting, allowed the increase in the proline content in the leaves of the tomato, cultivated in soil naturally infested with root-knot nematodes. Inoculations with B. subtilis promoted an increase in the number of Bacillus spp. in the sterile substratum and in the rhizosphere of the tomato, being confirmed the persistence of these bacteria at 40 DAP. Dentre as formas de controle biológico, a utilização de rizobactérias tem se mostrado promissora na supressão e proteção de plantas ao ataque de fitonematoides. O presente trabalho teve como objetivo avaliar o efeito da aplicação de Bacillus subtilis na reprodução de Meloidogyne spp., associado as alterações na colonização da rizosfera e no crescimento, nutrição e atividade enzimática de cultivares de tomateiro tolerante e suscetível aos nematoides-das-galhas. Os modos de aplicação estudados consistiram na inoculação do Bacillus subtilis (AP-3) em pré-plantio e pós-plantio do tomateiro. Foram conduzidos dois experimentos em câmara de crescimento de plantas. No primeiro experimento as plantas de tomateiro foram cultivadas em substrato esterilizado, com inoculação de 5000 ovos de Meloidogyne incognita. No segundo, o cultivo do tomateiro foi realizado em solo arenoso naturalmente infestado por nematoides-das-galhas. Aos 40 dias após o transplantio das mudas, foram avaliados o crescimento das plantas, a reprodução do nematoide, a colonização do solo e da rizosfera por bactérias do gênero Bacillus spp. e as alterações bioquímicas do tomateiro. Em ambos os modos de aplicação, o Bacillus subtilis foi eficiente em aumentar a massa radicular e em reduzir a reprodução do nematoide-das-galhas em tomateiro suscetível, cultivado em solo naturalmente infestado. Em substrato estéril, a inoculação de B. subtilis em pós-plantio promoveu redução do número de formas ativas do nematoide e ambas as aplicações promoveram a diminuição de ovos de Meloidogyne incognita nas raízes do tomateiro. A aplicação de B. subtilis, na condição de substrato estéril, induziu mudanças na absorção nutricional do tomateiro, aumentando os teores de cálcio e reduzindo o potássio foliar. A aplicação de B. subtilis contribuiu para redução da atividade peroxidase nas folhas do tomateiro suscetível a nematoides-das-galhas, em condição estéril. A rizobactéria, em pós-plantio, possibilitou o aumento no teor de prolina nas folhas do tomateiro, cultivado em solo naturalmente infestado com nematoides-das-galhas. As inoculações com B. subtilis promoveram aumento do número de Bacillus spp. no substrato estéril e na rizosfera do tomateiro, sendo comprovada a persistência destas bactérias aos 40 DAP.