1. Skin swabbing as a new efficient DNA sampling technique in amphibians, and 14 new microsatellite markers in the alpine newt (Ichthyosaura alpestris)
- Author
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Bernard Kaufmann, Pierre Joly, François Pompanon, Odile Grolet, Damien Picard, Jérôme G. Prunier, Écophysiologie, Comportement, Conservation, Laboratoire d'Ecologie des Hydrosystèmes Naturels et Anthropisés (LEHNA), Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)-Institut National de la Recherche Agronomique (INRA)-Université Claude Bernard Lyon 1 (UCBL), Université de Lyon-Université de Lyon-École Nationale des Travaux Publics de l'État (ENTPE)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)-Institut National de la Recherche Agronomique (INRA)-Université Claude Bernard Lyon 1 (UCBL), Université de Lyon-Université de Lyon-École Nationale des Travaux Publics de l'État (ENTPE), Laboratoire d'Etudes Environnementales des Systèmes Anthropisés, Université d'Angers (UA), Laboratoire d'Ecologie Alpine (LECA), Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)-Université Savoie Mont Blanc (USMB [Université de Savoie] [Université de Chambéry])-Université Joseph Fourier - Grenoble 1 (UJF)-Université Grenoble Alpes (UGA), Université Claude Bernard Lyon 1 (UCBL), Université de Lyon-Université de Lyon-École Nationale des Travaux Publics de l'État (ENTPE)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)-Université Claude Bernard Lyon 1 (UCBL), Université de Lyon-Université de Lyon-École Nationale des Travaux Publics de l'État (ENTPE)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Littoral, Environnement, Télédétection, Géomatique (LETG-Angers), Littoral, Environnement, Télédétection, Géomatique UMR 6554 (LETG), Université de Caen Normandie (UNICAEN), Normandie Université (NU)-Normandie Université (NU)-Université d'Angers (UA)-École pratique des hautes études (EPHE), Université Paris sciences et lettres (PSL)-Université Paris sciences et lettres (PSL)-Université de Brest (UBO)-Université de Rennes 2 (UR2), Université de Rennes (UNIV-RENNES)-Université de Rennes (UNIV-RENNES)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)-Institut de Géographie et d'Aménagement Régional de l'Université de Nantes (IGARUN), Université de Nantes (UN)-Université de Nantes (UN)-Université de Caen Normandie (UNICAEN), Université de Nantes (UN)-Université de Nantes (UN), and Université Joseph Fourier - Grenoble 1 (UJF)-Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)-Université Savoie Mont Blanc (USMB [Université de Savoie] [Université de Chambéry])
- Subjects
0106 biological sciences ,DNAsampling ,Ichthyosauraalpestris ,Buccal swab ,Molecular Sequence Data ,Zoology ,Locus (genetics) ,Hylaarborea ,010603 evolutionary biology ,01 natural sciences ,Specimen Handling ,03 medical and health sciences ,stomatognathic system ,Genotype ,Genetics ,Animals ,Ichthyosaura alpestris ,Ecology, Evolution, Behavior and Systematics ,030304 developmental biology ,Skin ,0303 health sciences ,454sequencing ,biology ,DNA ,Sequence Analysis, DNA ,Hyla arborea ,biology.organism_classification ,Classification ,Salamandridae ,Null allele ,buccalswabs ,skinswabs ,Pyrosequencing ,Microsatellite ,France ,[SDE.BE]Environmental Sciences/Biodiversity and Ecology ,Biotechnology ,Microsatellite Repeats - Abstract
International audience; This study introduces a novel DNA sampling method in amphibians using skin swabs. We assessed the relevancy of skin swabs relevancy for genetic studies by amplifying a set of 17 microsatellite markers in the alpine newt Ichthyosaura alpestris, including 14 new polymorphic loci, and a set of 11 microsatellite markers in Hyla arborea, from DNA collected with buccal swabs (the standard swab method), dorsal skin swabs and ventral skin swabs. We tested for quality and quantity of collected DNA with each method by comparing electrophoresis migration patterns. The consistency between genotypes obtained from skin swabs and buccal swabs was assessed. Dorsal swabs performed better than ventral swabs in both species, possibly due to differences in skin structure. Skin swabbing proved to be a useful alternative to buccal swabbing for small or vulnerable animals: by drastically limiting handling, this method may improve the trade-off between the scientific value of collected data, individual welfare and species conservation. In addition, the 14 new polymorphic microsatellites for the alpine newt will increase the power of genetic studies in this species. In four populations from France (n = 19-25), the number of alleles per locus varied from 2 to 16 and expected heterozygosities ranged from 0.04 to 0.91. Presence of null alleles was detected in two markers and two pairs displayed gametic disequilibrium. No locus appeared to be sex-linked.
- Published
- 2012
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