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Orientador: Jose Angelo Camilli Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: Defeitos com perda de massa óssea são frequentemente tratados com enxertos ósseos autógenos. Implantes subperiostais de biomateriais, como hidroxiapatita (HA), também têm sido utilizados com a mesma finalidade, substituindo os enxertos ósseos. Contudo, o consumo excessivo de álcool pode prejudicar a osteointegraçâo da HA devido aos seus efeitos deletérios sobre o tecido ósseo. No presente trabalho, foram implantados, subperiostalmente, blocos de hidroxiapatita no fêmur e parietal de 20 ratos não alcoolizados e 20 alcoolizados. Os animais foram sacrificados 2, 4, 8 e 16 semanas pós-cirúrgicas e as áreas receptoras examinadas histologicamente. Os animais alcoolizados não ficaram desnutridos frente ao alcoolismo experimental uma vez que não perderam peso ao longo do tratamento e mantiveram um consumo de ração e líquido dentro do padrão estabelecido para uma dieta normal. Com duas semanas pós-cirúrgicas, ocorreu formação óssea junto a hidroxiapatita implantada no fêmur de todos animais, porém, em menor volume nos alcoolizados. No parietal, além do menor volume, observou-se atraso no processo de neoformação óssea nos animais alcoolizados, uma vez que apenas 1 dos 5 animais sacrificados com duas semanas pós-cirúrgicas apresentou formação de osso. Na quarta semana pós-cirúrgica, 1 animal alcoolizado não apresentou osso neoformado na área implantada no fêmur, enquanto outros 2 não tiverem formação de osso no parietal. Nos períodos de 8 e 16 semanas pós-cirúrgicas, houve formação de osso tanto no fêmur como no parietal de todos animais, porém sempre em menor quantidade nos alcoolizados. Com estes resultados, concluiu-se que o alcoolismo experimental diminuiu a capacidade osteogênica das células periostais do fêmur e do parietal. Quanto a osteointegração da HA nos dois grupos estudados, não ocorreu a interposição de tecido fibroso entre a cerâmica e o osso neoformado Abstract: Defects with bone mass lost are normally treated with bone autografts. Subperiosteal implants of biomaterials like hydroxyapatite (HA) have also been utilized for the same goal, substituting the bone grafts. Nevertheless, the excessive alcohol consumption can impair the HA osteointegration due to its deleterious effects on the bone tissue. At the present work, hydroxyapatite blocks have been subperiosteally implanted at the femur and parietal bone of 20 non-alcoholic rats and 20 alcoholic ones. The animais were sacrificed at 2, 4, 8 and 16 weeks postoperatively and the receptor areas histological evaluated. The alcoholic animais did not present malnutrition, once they did not loose weight through the treatment and they kept a standard consumption of ration and liquids for a common diet. At 2 weeks postoperatively, there was bone formation in the implanted hydroxyapatite at the femur of ali animais, although in less volume at the alcoholic ones. At the parietal, besides its less volume, we observed a delay in the bone new formation process at the alcoholic animais, once one out of five 2 weeks postoperatively sacrificed animais presented bone formation. At the fourth week post operation, 1 alcoholic animal did not present new-formed bone at the femur implant site, while 2 others did not show bone formation at the parietal bone. At the 8 and 16 weeks post operation period, there was bone formation not only at the femur but also at the parietal of ali animais, although always in less quantity at the alcoholic ones. With these results, we concluded that the experimental alcoholism decreased the osteogenic capacity of periosteum cells at the femur and parietal. Conceming the HA osteointegration in both groups studied, there were no fibrous tissue interposition between the ceramic and the new formed bone Mestrado Anatomia Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientadores: Selma Candelaria Genari, Arnaldo Rodrigues dos Santos Junior Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: Recentemente, existe um interesse no desenvolvimento de biomateriais que possam ser utilizados na substituição do tecido ósseo ou que atuem como indutores na reparação em caso de fraturas ou defeitos ósseos. Os biomateriais constituídos de elementos de matriz extracelular tridimensionais (MECa) compostas de colágeno/elastina apresentam a vantagem de poder sofrer alterações nas suas propriedades por modificações químicas do colágeno, resultando em matrizes carregadas positivo ou negativamente. Tais modificações podem melhorar as propriedades mecânicas e fisiológicas da MECa. O objetivo deste trabalho foi avaliar a capacidade das MECa de colágeno nativo e polianiônica no processo de reparação de defeitos produzidos no fêmur de ratas ovariectomizadas. Foram realizados defeitos na porção do côndilo femoral de ratas normais e ovariectomizadas. Foi feita a análise das características morfológicas, físicas e mecânicas do osso formado na região. A análise do material demonstrou ausência de alterações patológicas nas áreas implantadas, sugerindo que o material usado é biocompatível. A análise microscópica revelou que a área que recebeu a membrana de colágeno nativa teve menor quantidade de osso neoformado. Nos animais ovariectomizados que receberam membranas polianiônicas, observou-se um atraso no processo da regeneração na falha óssea, principalmente naqueles que não foram submetidos à reposição hormonal. A densidade e percentual mineral foi menor nos animais ovariectomizados e a resistência mecânica foi maior nas áreas que receberam membrana polianiônica 96 (PMC96). Conclui-se que nos casos de osteoporose por deficiência hormonal, a melhor membrana a ser utilizada num reparo ósseo é a polianiônica 96, pois proporciona crescimento ósseo mais rápido e de boa qualidade mecânica Abstract: There has been recent interest in the development of biomaterials that can be used as replacement of bone tissue or that act as inducer of the healing process in the case of bone fractures or defects. Biomaterials consisting of three-dimensional extracellular matrix elements (aECM) composed of collagen/elastin have the advantage that their properties can be altered by introducing chemical modifications to the collagen that result in positively or negatively charged matrices. These modifications may improve the mechanical and physiological properties of aECM. The objective of the present study was to evaluate the effect of aECM consisting of native and polyanionic collagen on the healing process of defects created in the femur of ovariectomized rats. Defects were created in the femoral condyle of intacts and ovariectomized rats and the morphological, physical and mechanical characteristics of the bone formed in the region were analyzed. The results showed the absence of pathological alterations on implanted areas, suggesting that the implants were biocompatible. Microscopic analysis verified that areas that received native membrane had less quantity of neoformed bone. In ovariectomized animals that received anionic membranes, we observed a delay in bone regeneration, mainly in animals that did not receive hormonal replacement. The density and mineral matter percentage was smaller in ovariectomized animals and the a mechanical resistance was greater in the area receiving the 96 polyanionic membrane (PMC96). Thus, we conclude that in cases of osteoporosis due to hormone deficiency, the 96 polyanionic membrane possibly is the best to be used for bone repair since it provides faster bone growth, as well as good mechanical resistance Doutorado Anatomia Doutor em Biologia Celular e Estrutural

INTRODUÇÃO: Defeitos com perdas de massa óssea são freqüentemente tratados com enxertos ósseos autógenos. Implantes de biomateriais, como hidroxiapatita (HA), também têm sido utilizados com a mesma finalidade, substituindo os enxertos autógenos. Contudo, as condições de saúde do tecido ósseo são fundamentais para que haja a osteointegração do implante. Assim, o consumo excessivo de tabaco, de forma ativa ou passiva, pode prejudicar o processo de neoformação óssea frente ao implante de hidroxiapatita, devido a seus efeitos deletérios sobre o tecido ósseo. OBJETIVO: Avaliar as condições nutricionais dos animais e o processo de neoformação óssea quando grânulos de hidroxiapatita porosa são implantados em falhas ósseas no fêmur de ratos submetidos ao tabagismo passivo. MÉTODOS: Foram implantados grânulos de hidroxiapatita porosa em defeitos ósseos produzidos na epífise distal do fêmur esquerdo de ratos sujeitos ao tabagismo passivo prolongado. Os animais foram acompanhados ao longo do tratamento do tabagismo com duração de seis meses avaliando suas condições físicas. Após oito semanas do implante ósseo do biomaterial, os animais foram sacrificados e as amostras da área do implante submetidas aos métodos histológicos de rotina e mantidas em blocos de parafina para análise histológica, morfométrica, e radiológica. RESULTADOS: Identificou-se que a variação de massa do grupo experimental foi mais intensa quando comparada com a do grupo controle. Quanto aos achados radiológicos, observou-se aparente imagem mais radiolúcida e organizada no grupo controle. Na análise morfológica, houve melhor fechamento do defeito ósseo bem como a osteointegração da hidroxiapatita no grupo controle. Ao comparar o volume de osso formado na área receptora do fêmur, entre o grupo controle e experimental, notou-se que os valores encontrados para os animais submetidos ao tabagismo passivo foram significativamente menores quando comparados com os do grupo controle. CONCLUSÃO: A neoformação óssea em defeitos do esqueleto pode ocorrer naturalmente em animais submetidos ao tabagismo passivo, no entanto, de forma mais lenta e em menor proporção. INTRODUCTION: Defects with bone mass loss are frequently treated with bone autografts. Endografts of bones using biomaterials, such as hydroxyapatite (HA) also have been used for the same purpose, replacing autografts. However, bone tissue health conditions are basic for osteointegration of the implant. Thus, excessive tobacco consumption, either as an active or as a passive smoker, may harm the process of bone neoformation with a hydroxyapatite implant due to its deleterious effects to bone tissue. OBJECTIVE: To evaluate the nutritional status of the animals and the process of bone neoformation when porous hydroxyapatite granules are implanted in bone defects of the femur of rats submitted to passive tobacco exposure. METHOD: Porous hydroxyapatite granules were implanted in bone defects produced in the left distal femoral epiphysis of rats subjected to prolonged passive tobacco exposure. The animals were followed along the treatment of tobacco exposure during six months, to evaluate their physical conditions. After eight weeks of the bone implant with the biomaterial, the animals were sacrificed and the specimens of the implant region were submitted to routine histological testing, and maintained in paraffin blocks for morphometric histological and radiological analysis. RESULTS: The mass variation of the experimental group was found to be more intense than that of the control group. As to radiological findings, the control group had an apparent more radio lucent and organized image. In the morphological analysis, there was a better closing of the bone defect and osteointegration of hydroxyapatite in the control group. Upon comparing the volume of bone formed in the receiving area of the femur between the control and the experimental group, the values found for the animals submitted to passive tobacco exposure was lower than that found for the control group. CONCLUSION: Bone neoformation in skeletal defects can occur naturally in animals submitted to passive tobacco exposure, but in a slower manner and in lower proportion.

Orientador: Maria Julia Marques Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: A Distrofia Muscular de Duchenne (DMD) é uma doença muscular progressiva que causa falência respiratória e cardíaca resultando em morte por volta da terceira década de vida. A ausência da distrofina na DMD e no camundongo mdx, modelo experimental da doença, leva a instabilidade do sarcolema e aumento do influxo de cálcio seguido de mionecrose e fibrose. Receptores purinérgicos estão envolvidos na patogênese das distrofinopatias. A ativação destes receptores por ATP deflagra vias de sinalização secundárias que promovem a entrada de cálcio e ativam a formação de fibrose. No presente estudo, verificamos se a suramina, droga anti-fibrótica e antagonista de receptores purinérgicos, modifica o cálcio e proteínas a ele relacionadas, bem como afeta metaloproteinases e seus inibidores teciduais, no coração e no músculo diafragma de camundongos mdx, na fase mais tardia da doença (11 meses de idade). Análise de Western blotting revelou níveis elevados do receptor purinérgico P2Y2 em ambos os músculos estudados. A terapia com suramina diminui o nível deste receptor significativamente. Concomitantemente, observamos redução dos níveis do canal de cálcio ativado por estiramento (TRPC1) e do cálcio total, o que no músculo cardíaco pode explicar a redução da mionecrose (diminuição da creatina quinase cardíaca no plasma e da troponina I no miocárdio). A atividade e o nível da metaloproteinase-9 (MMP-9), principal envolvida na remodelação da matriz extracelular e formação de fibrose, estavam elevados no coração distrófico em relação ao coração normal. A suramina promoveu aumento adicional da atividade da MMP-9 e dos níveis do seu inibidor tecidual, a TIMP-1. A suramina preveniu a redução da beta-distroglicana, componente do complexo distrofina-proteínas que encontra-se reduzido no coração distrófico. De maneira geral, a suramina promoveu efeitos semelhantes no diafragma distrófico, no que se refere ao cálcio total, TRPC1, MMP-9 e TIMP-1. Estes dados sugerem que, tanto no coração quanto no diafragma distróficos, o receptor purinérgico P2Y2 desempenha papel importante em vias de sinalização relacionadas ao cálcio (através do TRPC1) e da modulação da matriz extracelular (através da MMP-9 e TIMP-1). A suramina, por ser utilizada em outras doenças humanas, com doses e efeitos colaterais já estabelecidos em humanos, tem potencial para a terapia da cardiomiopatia na DMD, merecendo atenção em estudos clínicos desta doença Abstract: Duchenne muscular dystrophy (DMD) is a progressive muscle-wasting disease that causes respiratory and cardiac failure and results in death at about 30 years of age. The lack of dystrophin in mdx mice, the experimental model of DMD, causes sarcolemmal breakdown and increased calcium influx followed by myonecrosis and fibrosis. Purinergic receptors are involved in the pathogenesis of dystrophinopathies. Activation of these receptors by ATP triggers secondary signaling pathways that promote calcium entry and activates the formation of fibrosis. In the present study, we investigated if suramin, an anti-fibrotic drug and an antagonist of purinergic receptors, modifies total calcium and calcium related-proteins and affects metalloproteinases and their tissue inhibitors in the heart and diaphragm muscle of dystrophic mice, in the later stage of the disease (11 months of age). Western blotting analysis indicated increased levels of P2Y2 purinergic receptor in the both muscles studied, which were significantly decreased by suramin. Concomitantly, suramin lead to a reduction in total calcium and in the levels of the stretch-activated calcium channel TRPC1, which may explain the reduction of cardiac necrosis (decreases heart creatine kinase in plasma and troponin I in the myocardium). The activity and level of metalloproteinase-9 (MMP-9), the main involved in remodeling of the extracellular matrix and formation of fibrosis, were elevated in the dystrophic heart compared to normal heart. Suramin promoted further increase in MMP-9 activity and in the levels of MMP-9 inhibitor TIMP-1. Suramin prevented the reduction of beta-dystroglycan, one of the main components of the dystrophin-protein complex usually reduced in dystrophic heart. In general, suramin promoted similar effects in the dystrophic diaphragm, with respect to total calcium, TRPC1, MMP-9 and TIMP-1. These data suggest that P2Y2 purinergic receptor plays an important role in signaling pathways involved in calcium regulation (via TRPC1) and modulation of extracellular matrix (via MMP-9 and TIMP-1), in cardiac and respiratory dystrophic muscles. Suramin may be a potential alternative to treat dystrophic cardiomyopathy deserving attention in clinical trials Doutorado Anatomia Doutora em Biologia Celular e Estrutural CAPES FAPESP 2012/03498-7

Orientador: Evanisi Teresa Palomari Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: A Disfunção temporomandibular (DTM) é uma expressão coletiva que engloba vários sinais e sintomas clínicos relacionados aos músculos da mastigação, articulações temporomandibulares (ATMs) e estruturas associadas. As principais queixas relatadas são ruídos e dor na região da ATM, com maior prevalência em adultos jovens, especialmente mulheres. A inflamação intra-articular é considerada uma das mais importantes fontes de dor nesta disfunção. O processo inflamatório pode se localizar na membrana sinovial, cápsula articular ou tecidos retrodiscais, e na presença de alterações degenerativas articulares recebe o nome de artrite. Assim, o laser de baixa potência (LBP) e o hialuronato de sódio de alto peso molecular (HSAPM) tem sido utilizados para o tratamento de distúrbios inflamatórios da ATM e, resultados clínicos promissores têm sido descritos. Estudos experimentais, sob a óptica da biologia celular e molecular, fazem-se necessários para melhor compreensão de seus respectivos efeitos biológicos e elaboração de protocolos clínicos seguros. Desta forma, o objetivo do presente estudo foi caracterizar a ação morfológica e bioquímica da terapia com LBP e HSAPM sobre a artrite induzida na ATM. Utilizou-se 48 ratos machos, Wistar, divididos nos grupos: GA, animais com artrite induzida por meio de injeção intra-articular de adjuvante completo de Freund (CFA); GL, animais com artrite e tratados com LBP; GH, animais com artrite e tratados com HSAPM e; GHL, animais com artrite e tratados com LBP e HSAPM. Todos os experimentos ocorreram na ATM esquerda. As ATMs direitas no GA foram utilizadas como controle (GC). Foram realizadas análises morfológicas por meio de cortes corados em hematoxilina-eosina (HE), azul de toluidina e Picrosirius. Nos discos articulares, também foram realizadas análises histomorfométricas e birrefringência de fibras colágenas (microscopia de polarização). As análises bioquímicas dos tecidos da ATM foram realizadas por meio de dosagens de glicosaminoglicanos sulfatados (GAGs) e zimografia para avaliação das metaloproteinases (MMPs) 2 e 9. Os dados obtidos foram analisados por meio dos testes ANOVA one-way com pós-teste de Tukey e, Kruskal-Wallis seguido do pós-teste de Dunn. O GA exibiu acentuadas alterações morfológicas nos componentes da ATM tais como: elevada espessura do disco articular; hiperplasia da membrana sinovial e formação de pannus; reabsorção óssea da fossa mandibular; aplainamento do côndilo mandibular e presença de intenso infiltrado de células inflamatórias mononucleares no tecido subsinovial. A microscopia de polarização mostrou menor birrefringência das fibras colágenas, indicando alto grau de desorganização das fibras colágenas. Os GL, GH e GHL apresentaram menor espessura do disco articular e maior birrefringência das fibras colágenas em comparação ao GA (p

A presente tese, contextualizada na Sociedade atual, sob a ótica da tecnologia, considera os aspectos educacionais para compreensão dos estilos de aprendizagem no ensino superior. O objetivo da pesquisa foi investigar padrões e frequência de estilos de aprendizagem em alunos e professores de um Centro Universitário do interior paulista, através de questionário eletrônico abrangendo 50 cursos, subdivididos em quatro grandes áreas do conhecimento. A metodologia foi aplicar um questionário à 165 professores e 5.317 alunos baseados nos estudos desenvolvidos por Felder-Soloman (1991) e apresentar gráficos comparativos entre alunos de mesma área do conhecimento, áreas distintas e ainda, comparação entre estilos de aprendizagem de professores e alunos de mesma área. Justifica-se a pesquisa como sendo uma ferramenta de auxílio ao processo de ensino-aprendizagem, pois possibilita ao docente utilizar-se do material apresentado para verificar e adaptar sua metodologia de ensino às turmas específicas, diferenciando seu estilo de aula em áreas diferentes do conhecimento, e por outro lado, os dados da pesquisa podem desenvolver nos alunos melhoria de aprendizagem em relação aos estilos em que possuem mais fragilidade. Conclui-se que o conhecimento dos estilos de aprendizagem de alunos e docentes, possibilita compreender as melhores ferramentas metodológicas de ensino e potencialização dos recursos disponíveis, além de esclarecer problemas de aprendizagem que podem ocorrer em determinada turma ou individualmente por um aluno, podendo ainda fomentar a gestão acadêmica destes e de outros elementos para tomada de decisão. The present thesis, contextualized in the current Society, from the perspective of technology, considers educational aspects to understand the learning styles in higher education. The objective of the research was to investigate patterns and frequency of learning styles in students and teachers of a University Center in the interior of São Paulo, through an electronic questionnaire covering 50 courses, subdivided into four major areas of knowledge. The methodology was to apply a questionnaire to 165 teachers and 5,317 students based on the studies developed by Felder-Soloman (1991) and to present comparative graphs between students of the same area of knowledge, distinct areas and also, comparison between learning styles of teachers and students of same area.The research is justified as a tool to aid the teaching-learning process, since it enables the teacher to use the presented material to verify and adapt his teaching methodology to specific classes, differentiating his / her classroom style in different areas of the classroom. knowledge, and on the other hand, research data can develop in students improved learning in relation to the styles in which they have more fragility. It is concluded that the knowledge of the learning styles of students and teachers, makes it possible to understand the best methodological tools of teaching and potentialization of the available resources, besides clarifying learning problems that can occur in a certain class or individually by a student, and may foster the academic management of these and other elements for decision making.

Orientador: Humberto Santo Neto Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: Neste estudo foram examinados aspectos anatômicos e morfométricos de corações humanos adultos e infantis fixados em solução de formol. O estudo foi dividido em duas partes. Na primeira foram examinados aspectos anatômicos de relevância para as arritmias cardíacas. Neste caso examinou-se a correlação entre o número de lobos da aurícula direita e a espessura da crista terminal em 154 corações adultos e 41 infantis. Baseado nos resultados observou-se que quanto maior o número de lobos da aurícula direita mais espessa a crista terminal. Considerando-se que i) crista terminal espessa favorece o aparecimento e persistência de eventos arritmogênicos e que ii) maior número de lobos auriculares predispõe eventos trombogênicos, nosso achado suporta a hipótese de que riscos de arritmia e trombose intra-atrial coexistem em um mesmo coração na população em geral. Em uma etapa seguinte 152 corações adultos foram classificados em dois grupos de acordo com a disposição dos músculos pectíneos no interior da aurícula direita: 1) músculos pectíneos uniformes (MPU) e 2) músculos pectíneos não uniformes (MPNU). Ambos os grupos tiveram a espessura da crista terminal (CT) e o gradiente de espessura da parede atrial mensurada (espessura da CT ¿ espessura da parede atrial). Observou-se que nos corações com MPNU a crista terminal foi mais espessa (p=0,04) e o gradiente de espessura foi maior quando comparado aos corações com MPU (p=0,007). Considerando-se que crista terminal espessa e gradiente de espessura da parede atrial maior favorecem o surgimento e persistência de eventos arritmogênicos, nossos achados suportam a hipótese de que indivíduos com MPNU estariam mais propensos às arritmias cardíacas originárias do átrio direito. Finalmente, a aurícula direita de 172 corações adultos e 61 infantis foram classificadas com base na morfologia externa e no número de lobos auriculares. Foram impostas as seguintes classificações: bico de papagaio, cabeça de cavalo, bigorna, barco a vela e tipo indefinido. Uma vez que a complexidade morfológica da aurícula está relacionada com a facilitação de eventos tromboembólicos, este estudo estimou os riscos dos mesmos em cada tipo de aurícula. Verificou-se que as aurículas classificadas com padrão morfológico semelhante à bigorna, barco a vela e tipo indefinido apresentavam riscos de eventos tromboembólicos 103, 115 e 126 vezes maior quando comparados ao tipo bico de papagaio. A segunda parte deste estudo referiu-se as pontes de miocárdio (PM), situação em que um ou mais feixes de miocárdio cruzam ou envolvem um segmento de artéria coronária. Inúmeras controvérsias a respeito da prevalência, causa determinante e significado das PM ainda não foram elucidadas. Nosso trabalho ocupou-se em estabelecer um padrão anatômico dos corações adultos e infantis com PM. Adicionalmente testou-se a hipótese de que a massa ventricular maior determinaria a presença de PM em corações infantis. Nossos achados mostram que i) as PM estão associadas com a presença de trifurcação da artéria coronária esquerda e presença de ramo pré-ponte, estabelecendo assim um padrão anatômico dos corações com PM; ii) a presença de massa ventricular maior parece não determinar a presença de PM em corações infantis Abstract: In this study anatomical and morphometric aspects of adult and children human hearts fixed in formalin solution were examined. The study was divided into two parts. In the first, we examined anatomical aspects of relevance for cardiac arrhythmias. In this case the correlation between the number of lobes of the right trial appendage (RAA) and the thickness of the Crista Teminalis (CT) was examined in 154 adult and 41 children hearts. Based on the results, it was observed that the higher the number of RAA lobes, the thicker the Crista Terminalis. Considering that; i) thicker CT favors the appearance and persistence of arrhythmogenic events and ii) higher number of RAA lobes predisposes thrombogenic events, our finding supports the hypothesis that risks of arrhythmia and intra-atrial thrombosis coexist in the same heart in the general population . In a subsequent step 152 adult hearts were classified into two groups according to the arrangement of the pectinate muscles within the RAA: 1) uniform pectinate muscles (UPM) and 2) non-uniform pectinate muscles (NUPM). Both groups had the CT thickness and the atrial wall thickness gradient measured (CT thickness - atrial wall thickness). It was observed that in hearts with NUPM the CT was thicker (p = 0.04) and the thickness gradient was higher in relation to hearts with UPM (p = 0.007). Considering that thicker CT and higher thickness gradient of the atrial wall favor the emergence and persistence of arrhythmogenic events, our findings support the hypothesis that individuals with MPNU would be more prone to cardiac arrhythmias originating from the right atrium. Finally, the RAA of 172 adult and 61 children hearts were classified morphologically based on the shape and number of lobes. The following classifications were imposed: parrot beak, horse head, anvil, sailboat and undefined type. Since the RAA morphology is related to the facilitation of thromboembolic events, this study estimated their risks in each type of RAA. It was verified that RAAs classified with morphological pattern similar to anvil, sailboat and indefinite type presented risks of thromboembolic events 103, 115 and 126 times higher when compared to the parrot beak type. The second part of this study referred to myocardial bridges (MB), situation in which one or more myocardial bundles cross or involve a segment of the coronary artery. Numerous controversies regarding the prevalence, determinant cause and significance of MB have not yet been elucidated. Our research aimed to establish an anatomical pattern of adult and children hearts with MB. In addition, the hypothesis that the ventricular mass greater would determine the presence of MB in children's hearts was tested. Our findings show that MB are associated with the presence of left coronary artery trifurcation and the presence of a pre-bridge branch, thus establishing an anatomical pattern of hearts with MB. The presence of larger ventricular mass does not seem to determine the presence of myocardial bridges in children's hearts Doutorado Anatomia Doutor em Biologia Celular e Estrutural CNPQ 141228/2017-2 CAPES

Orientador: Elaine Minatel Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: Estresse oxidativo e resposta inflamatória exacerbada são fatores que contribuem com a fisiopatogênese da distrofia muscular de Duchenne (DMD). No presente trabalho, avaliamos se a administração de Cilostazol, antes que se iniciem os ciclos degeneração/regeneração, diminui a degeneração muscular em camundongos mdx, modelo experimental da DMD. Nossa hipótese é que o Cilostazol possa apresentar efeito benéfico sobre as fibras musculares distróficas, uma vez que, este apresenta efeitos anti-inflamatório (reduzindo a expressão de citocinas pró-inflamatórias como o TNF-?, IL-1? e IL-6) e antioxidante (diminuindo a atividade de superóxido e eliminando radicais hidroxilas). Para verificar o efeito do cilostazol sobre as fibras musculares distróficas, camundongos mdx, com 14 dias de vida, receberam por gavagem 100 mg/kg de Cilostazol, por 14 dias consecutivos (grupo mdxC). Camundongos mdx não tratados (grupo mdx) e da linhagem C57BL/10 (grupo Ctrl) foram utilizados como controle. A análise de medida de força realizada em todos os animais (antes e após o período de tratamento) demonstrou que os animais do grupo mdxC apresentaram maior força muscular (cerca de 32%) em relação ao grupo mdx. Na análise bioquímica da degeneração muscular (análise de creatina quinase- CK em amostras de sangue), observou-se aumento significativo nos níveis séricos de CK nos camundongos mdx em relação aos animais controle e redução significativa de 63,2% deste aumento nos mdx tratados com Cilostazol. Na análise histológica dos músculos bíceps braquial (BB), diafragma (DIA) e tibial anterior (TA), verificou-se redução de 93,6% de fibras em degeneração (indicadas pela marcação com azul de Evans) no músculo BB, redução de 66,6% e 36,7% de fibras regeneradas (indicadas pela presença de núcleo centralizado) nos músculos TA e DIA, respectivamente e redução de 39,1% na área de inflamação no músculo BB dos animais do grupo mdxC em relação ao grupo mdx. Através da técnica de western blotting, moléculas envolvidas no processo inflamatório como o TNF-? e NF-?B e um dos produtos da peroxidação lipídica, o 4-HNE, foram analisados nos músculos BB, DIA e TA. Nos animais do grupo mdxC, observou-se diminuição significativa no conteúdo de TNF-? nos músculos DIA (48,5%), TA (35,4%) e BB (45,9%) em relação ao controle. O conteúdo de NF-?B apresentou-se reduzido 25,9% no músculo DIA. O conteúdo de 4-HNE reduziu nos músculos analisados do grupos mdxC, porém esta redução não foi significativa. Na reação Dihydroetidio (DHE) para detecção de espécies reativas de oxigênio, o tratamento com Cilostazol demonstrou ser potencialmente eficaz contra o estresse oxidativo, reduzindo a marcação de DHE em 36,8%, 40,4%, e 75,4% nos músculos BB, TA e DIA, respectivamente. Na análise de vascularização, observamos que os animais tratados com Cilostazol apresentaram aumento da densidade de microvasos no tecido muscular (cerca de 42,7% para o músculo BB e 15,3% para o músculo DIA). Em relação à análise da atividade antioxidante no músculo quadríceps (QUA), identificamos aumento na quantidade de GSH (33,1%) e na atividade da GR (89,1%), no grupo mdx em relação ao Ctrl. Em relação ao tratamento, este não apresentou efeito sobre a atividade antioxidante. O conjunto dos resultados nos permite sugerir que o Cilostazol apresenta potencial efeito benéfico sobre as fibras musculares distróficas Abstract: Oxidative stress and exacerbated inflammatory response are factors that contribute to Duchenne muscular dystrophy (DMD) pathogenesis. In this work, we evaluated whether administration of Cilostazol, before beginning the degeneration/regeneration cycles, reduces muscle degeneration in mdx mice, an experimental model of DMD. Our hypothesis is that the Cilostazol may provide beneficial effects on dystrophic muscle fibers, since this has anti-inflammatory effects (reducing the expression of proinflammatory cytokines such as TNF-?, IL-1? and IL-6) and antioxidant (decreasing the activity of superoxide and eliminating hydroxyl radicals). To evaluate the Cilostazol effects on dystrophic muscle fibers, mdx mice, 14 days old, received by gavage 100 mg/kg of Cilostazol for 14 consecutive days (mdxC group). Mdx mice untreated (mdx group) and C57BL/10 mice (group Ctrl) were used as controls. Analysis strength measurement performed in all animals (before and after the treatment period) demonstrated that the animals of the mdxC group higher muscle strength (by 32%) compared to mdx group. In biochemical analysis of muscle degeneration (creatina kinase ¿ CK analysis in blood samples), there was significant increase in CK levels in mdx mice compared to control animals and a significant reduction by 63.2% of this increase in Cilostazol treated mdx. Histological analysis of the biceps brachial (BB), diaphragm (DIA) and tibial anterior (TA), showed a reduction of 93.6% of degenerating fibers (indicated by labeling with Evans blue) in the BB muscle, reduction of 66.6% and 36.7% of regenerated fibers (defined by central nuclei presence) in TA and DIA muscles respectively, and a reduction by 39.1% in inflammation area in BB muscle of mdxC group compared to mdx group. By the western blotting technique, molecules involved in inflammation such as TNF-? and NF-?B and one of the lipid peroxidation product, 4-HNE, were analyzed in the BB, DIA and TA muscles. In animals of mdxC group, we observed a significant decrease in TNF-? content in DIA (48.5%), TA (35.4%) and BB (45.9%) compared to control muscles. The NF-?B content had been reduced by 25.9% in the DIA muscle. The 4-HNE content reduced in the muscles analyzed in mdxC groups, but this reduction was not significant. In Dihydroethidium (DHE) reaction for detecting reactive oxygen species, treatment with Cilostazol shown to be potentially effective against oxidative stress, reducing DHE marking by 36.8%, 40.4% and 75.4% in BB, TA and DIA muscles, respectively. In the vasculature analysis, we observed that cilostazol treated animals showed increased microvessel density in muscle tissue (approximately by 42.7% for the BB muscle and 15.3% for DIA muscle). On the analysis of antioxidant activity in the quadriceps (QUA), we identified an increase in the GSH content (33.1%) and GR activity (89.15) in the mdx group compared to Ctrl group. Regarding treatment, this had no effect on antioxidant activity. The results together suggest that cilostazol has a potential beneficial effect on the dystrophic muscle fibers Mestrado Anatomia Mestre em Biologia Celular e Estrutural