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The human equilibrative nucleoside transporters 1 and 2 (hENT1, hENT2) share 50% amino acid identity and exhibit broad selectivities, accepting purine and pyrimidine nucleosides as permeants. The permeant selectivity of hENT2 is less well understood because of the low abundance of the native transporter in cells amenable to functional analysis. Recent studies of hENT2 produced in recombinant form in functional expression systems have shown that it differs from hENT1 in that it transports nucleobases. To further understand the structural requirements for permeant interaction with hENT2, we compared the relative abilities of uridine, cytidine, and their analogues to inhibit transport of [[sup 3] H]uridine by recombinant hENT1 and hENT2 produced in yeast. hENT1 and hENT2 tolerated halogen modification at the 5 position of the base and the 2' and 5' positions of the ribose moieties of uridine whereas removal of the hydroxyl group at the 3' position of the ribose moiety of uridine eliminated interaction with both transporters. hENT2 displayed a lower ability, compared with hENT1, to interact with cytidine and cytidine analogues, suggesting a low tolerance for the presence of the amino group at the 4 position of the base.Key words: hENT2, hENT1, araC, uridine, NBMPR.Les transporteurs de nucléosides équilibrant 1 et 2 humains (hENT1, hENT2) ont 50% de leurs acides aminés identiques et ont une sélectivité étendue envers les nucléosides puriques et pyrimidiques. La sélectivité de hENT2 envers ces perméants est moins bien connue parce que seulement une faible quantité du transporteur natif cellulaire peut être obtenue pour des études fonctionnelles. Des études récentes d'une forme recombinante de hENT2 produite dans des systèmes d'expression fonctionnelle ont montré que hENT2 diffère de hENT1 par le fait qu'il transporte des nucléobases. Afin de mieux connaître les propriétés structurales essentielles pour l'interaction du perméant avec hENT2, nous avons comparé le pouvoir relatif de l'uridine, de la cytidine et de leurs analogues d'inhiber le transport de l'[[sup 3] H]-uridine par les hENT1 et hENT2 recombinants produits chez la levure. hENT1 et hENT2 tolèrent la présence d'un halogène à la position 5 de la base et aux positions 2' ou 5' du groupe ribosyle de l'uridine. Par contre, l'élimination du groupe hydroxyle à la position 3' du groupe ribosyle de l'uridine supprime toute interaction avec les deux transporteurs. hENT2 interagit avec la cytidine et ses analogues avec une plus faible affinité que hENT1, ce qui suggère que hENT2 a peu de tolérance pour la présence du groupe amine à la position 4 de la base.Mots clés : hENT2, hENT1, araC, uridine, NBMPR.[Traduit par la Rédaction] [ABSTRACT FROM AUTHOR]