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Summary Background: an optimal formulation for vitrifying in vitro-produced (IVP) bovine embryos is currently unavailable. Objective: to estimate whether differences in composition of vitrification solutions may affect the viability of IVP embryos as compared to that of embryos cryopreserved by a conventional slow-freezing method. Methods: bovine IVP embryos were cryopreserved by two methods: 1) a slow controlled-rate (1.5 M ethylene glycol (EG)), or 2) vitrification by using two different vitrification and thawing/warming solutions: (1) Protocol V1: commercial vitrification Kit, and (2) Protocol V2: defined vitrification (20% EG; 20% dimethyl sulfoxide (DMSO); 20% fetal bovine serum (FBS)) and warming (20% FBS; 0.2 M sucrose) solutions. Embryo viability was recorded at 24, 48, and 72 h after thawing/warming by evaluating the number of embryos that re-expanded and developed to the hatching blastocyst stage. Results: embryo survival rate was affected by the method of cryopreservation, where the frequency of embryos that re-expanded at 24 h after thawing/warming was higher for embryos vitrified with protocols V1 and V2 (89.0%, 86.2%, respectively) compared to those cryopreserved by the slow-controlled rate method (73.6%, p<0.05). Similarly, higher percentage of embryos cryopreserved by vitrification hatched at 72 h, where protocol V2 resulted in higher percentage of hatched embryos (84.3%) compared to protocol V1 (64,0%, p<0.05), and both were higher compared to the slowcontrolled rate method (55.2%, p<0.05). Conclusions: the method of cryopreservation and composition of the vitrification solution have a direct effect on the viability of bovine IVP embryos., Resumo Antecedentes: não existe um meio criopreservante com uma composição perfeita para a vitrificação de embriões bovinos in vitro (PIV). Objetivo: avaliar se a composição de diferentes soluções de vitrificação afeta a viabilidade de embriões bovinos PIV, em comparação com embriões criopreservados pelo método convencional de congelação lenta. Métodos: embriões bovinos PIV foram criopreservados por dois métodos: 1) congelação lenta controlada (1,5 M etilenoglicol (EG)), 2) vitrificação com duas soluções diferentes: (1) Protocolo V1: Kit comercial de vitrificação, (2) Protocolo 2: soluções definidas de vitrificação (20% EG; 20% dimetilsulfóxido (DMSO); 20% soro fetal de bovino (FBS)) e aquecimento (20% FBS; 0,2 M sacarose). A viabilidade do embrião foi avaliada pelo número de embriões re-expandidos e desenvolvidos até o estágio de blastocisto expandido após 24, 48 e 72 h descongelamento/aquecimento. Resultados: a taxa de sobrevivência dos embriões afetou-se pelo método de criopreservação: a frequência dos embriões re-expandidos após 24 h de aquecimento/descongelamento foi maior nos embriões vitrificados com os protocolos V1 e V2 (89% e 86,2%; respectivamente), quando foi comparada com a frequência dos embriões criopreservados pelo método de congelação lenta (73,6%, p<0,05). Uma maior porcentagem de embriões criopreservados por vitrificação eclodiu após 72 h. O protocolo V2 apresentou maior porcentagem de embriões eclodidos (84,3%) quando comparado com o protocolo V1 (64%, p<0,05), ambos apresentaram maior porcentagem de eclosão quando comparados ao método de congelação lenta (55,2%; p<0,05). Conclusões: o método de criopreservação e composição da solução de vitrificação têm um impacto direto na viabilidade dos embriões bovinos PIV., Resumen Antecedentes: no existe una formula específica ideal para la congelación de embriones bovinos producidos in vitro (IVP). Objetivo: estimar si la composición de diferentes soluciones de vitrificación afecta la viabilidad de embriones bovinos IVP en comparación con embriones criopreservados mediante el método convencional de congelación lenta. Métodos: los embriones bovinos producidos in vitro se congelaron a través de los siguientes métodos: 1) congelación lenta (1,5 M de etilenglicol (EG)), 2) por vitrificación utilizando dos soluciones vitrificantes: (1) Protocolo V1: solución vitrificante comercial, (2) Protocolo V2: solución vitrificante (20% EG, 20% dimetil sulfóxido (DMSO), 20% suero fetal bovino (FBS)) y de calentamiento (20% FBS, 0,2 M sucrosa). La viabilidad embrionaria se evaluó a las 24, 48 y 72 h post-descongelación, a través de la medición del porcentaje de embriones que se expandieron y llegaron al estadio de eclosión. Resultados: el porcentaje de expansión embrionaria a 24 h fue más alto en los embriones que fueron vitrificados con los protocolos V1 y V2 (89,0%, 86,2%, respectivamente), que aquellos que fueron criopreservados con el método de congelación lenta (73,6%, p<0,05). Igualmente, un porcentaje mayor de embriones criopreservados por el método de vitrificación eclosionó a las 72 h, resultando en un mayor porcentaje en los embriones vitrificados con el protocolo V2 (84,3%), en comparación con el protocolo V1 (64,0%, p<0,05), y ambos porcentajes fueron más altos que los obtenidos con la congelación lenta (55,2%, p<0,05). Conclusiones: el método de congelación y la composición de la solución de vitrificación afectan la viabilidad post-congelación de los embriones bovinos IVP.

Objective: To investigate the association between scrotal circumference size and sperm characteristics in 194 males of Guzerat breed. Methods: The bulls were divided by age groups from 12 to 36 months of age. The length and width of the testicle and scrotal circumference were measured. Semen was collected from the animals that showed a circumference ≥ 19 cm through transrectal electrostimulation in order to induce ejaculation. The characteristics assessed in the semen were motility, speed, sperm concentration and presence of rounded cells. Results: the correlation between the scrotal circumference with the sperm motility by group of age was positive (r = 0.94; p < 0.005). The present study showed that the presence of proximal cytoplasmic droplet, the rounded cells in the semen and the defects on the head of the spermatozoids are objective evaluation features, which can be used for early selection of sperm production in Guzerat males. Conclusions: The production of sperm with normal rates in the Guzerat breed is achieved when males reach the age of 28 months and a scrotal circumference close to 30 cm., Objetivo: Investigar a associação entre o tamanho da circunferência escrotal e as características espermáticas em 194 machos da raça Guzerá. Métodos: os toros se dividiram por grupos de idades desde os 12 até os 36 meses de idade. Realizaram-se medições do comprimento e da largura do testículo e da circunferência escrotal. Aos animais que apresentaram uma circunferência ≥ 19 cm foi-lhes coletado sêmen mediante eletroestimulação transretal para induzir a ejaculação. As características avaliadas no sêmen foram motilidade, vigor, concentração espermática e presença de células redondeadas. Resultados: a correlação entre a circunferência escrotal com a motilidade espermática por grupo de idade foi positiva (r = 0,94; p < 0,005). O presente estudo demostrou que a presença de gota citoplasmática proximal, as células redondeadas no sêmen ejaculado e os defeitos na cabeça dos espermatozoides são características de avaliação objetiva, as quais podem ser utilizadas para selecionar precocemente a produção de espermatozoides nestes machos Guzerá. Conclusões: a produção de espermatozoides com parâmetros normais na raça Guzerá se conseguem quando os machos chegam à idade de 28 meses e uma circunferência escrotal próxima aos 30 cm., Objetivo: investigar la asociación entre el tamaño de la circunferencia escrotal y las características espermáticas en 194 machos de la raza Guzerat. Métodos: los toros se dividieron por grupos de edades desde los 12 hasta los 36 meses de edad. Se realizaron mediciones del largo y ancho del testículo y de la circunferencia escrotal. A los animales que presentaron una circunferencia ≥ 19 cm se les colectó semen mediante electroestimulación transrectal para inducir la eyaculación. Las características evaluadas en el semen fueron motilidad, vigor, concentración espermática y presencia de células redondeadas. Resultados: la correlación entre la circunferencia escrotal con la motilidad espermática por grupo de edad fue positiva (r = 0,94; p < 0,005). El presente estudio demostró que la presencia de gota citoplasmática proximal, las células redondeadas en el eyaculado y los defectos en la cabeza de los espermatozoides son características de evaluación objetiva, las cuales pueden ser utilizadas para seleccionar precozmente la producción de espermatozoides en estos machos Guzerat. Conclusiones: la producción de espermatozoides con parámetros normales en la raza Guzerat se logran cuando los machos llegan a la edad de 28 meses y una circunferencia escrotal cercana a los 30 cm.

La producción de embriones in vitro (PIV) es una biotecnología reproductiva que impacta los sistemas ganaderos favoreciendo el mejoramiento genético y que también se ha utilizado como modelo de investigación del desarrollo embrionario en otras especies. Para el desarrollo de ésta técnica, se colectan oocitos in vivo por medio de laparoscopia y aspiración folicular guiada por ultrasonografía ó a través de ovarios recolectados en plantas de sacrificio. Los oocitos son sometidos a procesos de maduración in vitro, utilizando diversos medios, adición de gonadotropinas y factores de crecimiento. Los espermatozoides son sometidos a tratamientos de capacitación espermática in vitro, donde adquieren capacidad fertilizante y se separan los espermatozoides vivos de los componentes seminales y crio-protectores. Para la fertilización in vitro se realiza un cocultivo de espermatozoides y oocitos en un medio que favorece la actividad espermática y penetración de la zona pelúcida. Posteriormente, los embriones obtenidos son sometidos a cultivo en medios que contengan fuentes de energía, aminoácidos y factores de crecimiento, con el fin de mantener su sobrevivencia y desarrollo. En la actualidad la técnica de PIV en bovinos se ha masificado y se trabaja en los procesos de estandarización en otras especies. A partir de la PIV se dio el desarrollo de nuevas biotecnologías como la clonación y transgénesis. El objetivo de esta revisión es describir las fases de la PIV y su relación con los eventos fisiológicos de la fertilización y desarrollo embrionario temprano.

The hypothalamus is considered as a key point of reproductive control; this organ produces the GnRH hormone, a decapeptide that is released into the hypothalamic-pituitary portal system to stimulate the synthesis and release of gonadotropins. Gonadotropins are responsible for ovarian follicular dynamics, estrogen production, ovulation and luteinization of the corpus luteum, as well as other hormones and substances such as the insulin-like growth factor (IGF-1), and the Pregnancy-associated plasma protein A (PAPPA), which control the main signs of estrus behavior and the events that determine ovulation. Some of the most significant ovulation processes include the release of the follicular prostaglandin that starts the lysis of the follicle wall; this lysis is associated to the increase of the endothelial nitric oxide synthase (eNOS), which increases ovarian blood flow by activating the vasoactive peptide angiotensin II (Ang II), endothelin-1 (ET-1) and atrial natriuretic peptide (ANP). This review aims to increase awareness of the events related to the estrous cycle, follicular dynamics and the ovulation process so as to apply them properly to the management of reproduction in mares., O hipotálamo é considerado um ponto chave do controle reprodutivo; este órgão produz o hormônio GnRH, um decapéptideo que é liberado no sistema portal hipotalâmicohipofisário para estimular a síntese e liberação das gonadotrofinas. As gonadotrofinas são responsáveis pela dinâmica folicular dos ovários, a produção de estrógenos, a ovulação e luteinização do corpo lúteo, em conjunto com outros hormônios e substâncias como o fator de crescimento parecido à insulina (IGF-1), e a proteína plasmática associada à prenha (PPAP-A), que controlam os principais sinais de comportamento do estro e os eventos que determinam a ovulação. Dentro dos processos de ovulação destacam-se a liberação da prostaglandina folicular que inicia a lise da parede do folículo; esta lise se associa com o aumento na enzima óxido nítrico sintetase endotelial (NOSe) que aumenta o fluxo sanguíneo do ovário ativando os péptideos vasoativos angiotensina II (Ang II), endotelina-1 (ET-1) e o péptideo natriurético atrial (ANP). Esta revisão tem como objetivo ampliar o conhecimento dos acontecimentos que se relacionam com o ciclo estral, a dinâmica folicular e o processo da ovulação, para aplicá-los adequadamente ao manejo reprodutivo das éguas., El hipotálamo se considera un punto clave del control reproductivo; este órgano produce la hormona GnRH, un decapéptido que se libera en el sistema portal hipotalámico-hipofisiario para estimular la síntesis y liberación de las gonadotropinas. Las gonadotropinas son responsables de la dinámica folicular ovárica, la producción de estrógenos, la ovulación y luteinización del cuerpo lúteo, en conjunto con otras hormonas y sustancias como el factor de crecimiento parecido a la insulina (IGF-1), y la proteína plasmática asociada a preñez (PPAP-A), las cuales controlan los principales signos de comportamiento del estro y los eventos que determinan la ovulación. Dentro de los procesos de la ovulación se destacan la liberación de la prostaglandina folicular que inicia la lisis de la pared del folículo; esta lisis se asocia con el aumento en la enzima óxido nítrico sintetasa endotelial (NOSe) que aumenta el flujo sanguíneo ováricoactivando los péptidos vasoactivos angiotensina II (Ang II), endotelina-1 (ET-1) y el péptido natriurético atrial (ANP). Esta revisión tiene como objetivo ampliar el conocimiento de los acontecimientos que se relacionan con el ciclo estral, la dinámica folicular y el proceso de la ovulación, para aplicarlos adecuadamente al manejo reproductivo en las yeguas.