Introducción. Según la Organización Mundial de la Salud, en instituciones de países en desarrollo las infecciones nosocomiales podrían superar el 25%; en Colombia, en 2012 estas representaban el 4.7% de las causas de muerte según Secretaría de Salud de Bogotá. El Ministerio de Salud señaló a Antioquia como el departamento con la tasa más alta en Infecciones Asociadas a la Atención en Salud (IAAS). Objetivo. Evaluar el nivel de conocimientos, actitudes y aptitudes en IAAS por parte del personal asistencial de un hospital de baja y uno de alta complejidad, en Antioquia. Metodología. Estudio descriptivo transversal, 66 participantes entre médicos, auxiliares de enfermería y enfermeros de urgencias y hospitalización. Intervalo de confianza del 90%. Criterios de inclusión: llevar mínimo tres meses trabajando en el hospital, en todos los tipos de contratación. Exclusión: no aceptar participación y personal asistencial con funciones administrativas. Se aplicó un instrumento con preguntas cerradas sobre los conocimientos, actitudes y aptitudes en IAAS. Resultados. Enfermería tuvo mayor nivel en conocimientos, auxiliares de enfermería en prácticas y los médicos tuvieron menor puntaje con un 24%. En actitud, el personal de ambos hospitales percibía las actividades asociadas a la atención en salud como importantes, pero rutinarias. Discusión. El componente de conocimientos representa el mayor problema para la población, más específicamente la temática sobre lavado de manos, los médicos presentaron mayor número de puntajes por debajo del 60%. Conclusiones. El estudio sugiere que los profesionales de ambos hospitales, independientemente de su profesión, poseen mejores bases prácticas que teóricas, la actitud no parece tener relación con las otras variables. Introduction. According to the World Health Organization, nosocomial infection rate in institutions from developing countries could exceed 25%; in Colombia, in 2012 these represented 4.7% of the causes of death according to the Health Secretariat of Bogotá The Ministry of Health has identified Antioquia as the department with the highest rate of Healthcare-Associated Infections (HAI). Objective. To assess the level of knowledge, attitudes and skills in HAIs by the healthcare staff of a low and a high complexity hospital in Antioquia. Methodology. Cross-sectional descriptive study, 66 participants thereof including physicians, nursing assistants and emergency and hospitalization nurses. 90% confidence interval. Inclusion criteria: at least three months working in the hospital, under all types of contracts. Exclusion: staff not accepting participation and assistance staff with administrative functions. An instrument with closed questions on knowledge, attitudes and skills in HAIs was applied. Results. Nursing staff had the highest level in knowledge, nursing assistants in practice and physicians had the lowest score with 24%. As for attitudes, staff at both hospitals identified the activities associated with health care as important, but routinary. Discussion. The knowledge component stands as the greatest issue for this population, more specifically the hand washing topic, with physicians recording the greater number of scores below 60%. Conclusions. The study suggests that practitioners in both hospitals, regardless of their professional duties, have a better practical than theoretical basis; attitude does not seem to be related to the other variables. Introdução. Segundo a Organização Mundial da Saúde, em instituições de países em desenvolvimento, as infecções nosocomiais podem ultrapassar 25%; na Colômbia, em 2012, representavam 4.7% das causas de morte, segundo o Ministério da Saúde de Bogotá. O Ministério da Saúde indicou Antioquia como o departamento com maior índice de Infecções Associadas à Atenção à Saúde (IAAS). Objetivo. Avaliar o nível de conhecimento, atitudes e aptidões em IAAS da equipe assistencial de um hospital de baixa complexidade e um hospital de alta complexidade, em Antioquia. Metodologia. Estudo descritivo transversal, com 66 participantes entre médicos, auxiliares de enfermagem e enfermeiros de emergência e internação. Intervalo de confiança de 90%. Critérios de inclusão: trabalhar no hospital há, no mínimo, três meses, em todos os tipos de vínculos. Exclusão: não aceitar participação e pessoal de saúde com funções administrativas. Foi aplicado um instrumento com questões fechadas sobre conhecimentos, atitudes e aptidões em IAAS. Resultados. A enfermagem apresentou maior nível de conhecimento, os auxiliares de enfermagem e os médicos obtiveram menor pontuação com 24%. Na atitude, os funcionários de ambos os hospitais perceberam as atividades associadas aos cuidados de saúde como importantes, mas rotineiras. Discussão. O componente conhecimento representa o maior problema para a população, mais especificamente a questão da lavagem das mãos, os médicos apresentaram o maior número de pontuações abaixo dos 60%. Conclusões. O estudo sugere que os profissionais de ambos os hospitais, independentemente da profissão, possuem melhores bases práticas do que teóricas; a atitude não parece estar relacionada com as demais variáveis.