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Alterações funcionais pulmonares e sintomas pulmonares têm sido descrito em pacientes infectados por helmintos com ciclo pulmonar. Previamente foi demonstrado que a infecção com nematódeo Strongyloides venezuelensis induz um significante aumento na hiperreatividade brônquica em ratos infectados. O objetivo do presente estudo foi testar a hipótese que a broncodilatação durante a fase de migração da larva pelo pulmão favorece o ciclo parasitário e o numerode vermes que alcança o intestino. Para este propósito, ratos infectados com S. venezuelensis foram tratados com salbutamol durante as primeiras 48 horas após a infecção. A dose de salbutamol utilizada (0.25 mg/mL por 10 min a cada 4 horas) preveniu mudanças na função pulmonar durante a migração parasitária. Isto foi acompanhado por um aumento de parasitos nos pulmões e intestino. Em seguida investigamos os mecanismos da hiperreatividade brônquica e observamos que IL-13 não é essencial para essa alteraçãofuncional pulmonar, mas é importante para produção de ovos no intestino. Por outro lado, as fibras nervosas sensoriais sensíveis a capsaicina mostram relevante papel na hiperreatividade brônquica independente da inflamação pulmonar. Alterations in lung function and pulmonary symptoms have been described in patients infected with helminthes with a lung cycle. We have previously shown that infection with the nematode Strongyloides venezuelensis induced a significant increase in airway hyperreactivity in infected rats. The aim of the present study was to test the hypothesis that bronchodilation during the lung phase of parasite migration would favor completion of the life cycle and infection indices. For this purpose, Strongyloides venezuelensis infected rats were treated with salbutamol during the first 48 h after the nematode infection. At the dose used (0.25 mg/mL for 10 min every 4 h), treatment with salbutamol preventedchanges in lung function during the parasite migration. This was accompanied by a significant increase in parasite burden, as assessed in the lung and the small intestine. We also investigated the mechanisms of airway hyperresponsiveness and observed that IL-13 does not have effect on this lung alteration. On the other hand, sensory C fibers have an important role in the airway hyperresponsiveness independent of lung inflammation

Biotérios são locais onde animais de laboratório são criados e mantidos para serem utilizados em experimentos científicos. Essas instalações animais precisam ser adequadamente gerenciadas, com foco no bem-estar dos animais e reprodutibilidade dos resultados experimentais. Quando lidamos com modelos animais, são diversos os fatores que podem influenciar o resultado experimental. A saúde física e mental dos animais de laboratório está entre os fatores determinantes para a qualidade das pesquisas. O Triple Aim é uma estratégia centrada em três dimensões: melhorar a experiência do animal no biotério; melhorar a saúde das populações; e reduzir o custo com o cuidado. Para isso, o objetivo deste estudo foi definir indicadores que sejam acessíveis, coerentes e de fácil execução para serem utilizados como sistema de medição em diferentes instalações de animais. Este estudo analisou a efetividade, semelhanças e divergências de dois indicadores em dois biotérios distintos, que podem ser facilmente avaliados em camundongos de laboratório: escore de construção do ninho na gaiola e predominância bacteriana na microbiota intestinal, especificamente a taxa de Firmicutes/Bacteroidetes (F/B). O indicador de escore de ninho foi avaliado em uma escala de Likert de 1 a 5 em relação a variáveis macro e microambientais, diferentes linhagens, sexos e idades de camundongos. Os resultados mostram predominância do escore 3 nos camundongos, com variações para escores mais altos dependentes da temperatura, idade dos filhotes nascidos na gaiola, idade das fêmeas e tipo de material de enriquecimento fornecido na gaiola; e escores mais baixos dependentes da umidade, posicionamento do ninho na gaiola, background da linhagem e tempo que o animal foi exposto ao material de nidificação. A microbiota intestinal foi analisada em camundongos C57BL/6J a fim de verificar similaridades nos biotérios e comparar com literatura prévia, verificando a importância de conhecer o padrão da microbiota intestinal desses animais e assim poder utilizar por exemplo da taxa F/B como um indicador de saúde dos camundongos. Com isso, concluímos que esses indicadores podem ser uma ferramenta importante na avaliação do bem-estar físico e mental dos camundongos de laboratório, podendo servir tanto como um marcador de avaliação individual como populacional dos biotérios, tornando mais ágeis ações de melhoria nos cuidados de camundongos de laboratório, e prevenindo riscos de vieses importantes em resultados experimentais. An animal facility is a place where laboratory animals are bred and kept for use in scientific experiments. These facilities must be properly managed with emphasis on animal welfare and reproducibility of experimental results. When handling animal models, several factors can affect experimental results. The physical and psychological health of the experimental animals is one of the critical factors in the quality of the studies. Triple Aim is a strategy that focuses on three dimensions: improving the experience of animals in the facility, improving the health of animal populations, and reducing the cost of care. Therefore, the objective of this study was to define indicators that are accessible, coherent, and easy to execute, and that can be used as a measurement system in different animal facilities. This study analyzed the efficacy, similarities, and differences of two indicators in two different animal facilities that are easy to assess in laboratory mice: the nest-building score and bacterial dominance in the gut microbiome, specifically the Firmicutes/Bacteroidetes ratio (F/B ratio). The nest- building indicator was scored on a Likert scale from 1 to 5 depending on macro- and microenvironmental variables, different strains, sex and age of the mice. In mice, nest- building score 3 predominated, with higher scores depending on temperature, age of young born in the cage, age of females, and type of enrichment material provided in the cage, and lower scores depending on humidity, placement of the nest in the cage, strain, and time the animal was exposed to the nesting material. The gut microbiome was analyzed in C57BL/6J mice to verify similarities in animal facilities and to compare with previous literature. This confirms the importance of knowing the pattern of the gut microbiome in these animals and thus being able to use, for example, the F/B rate as an indicator of mouse health. We therefore conclude that these indicators can be an important tool for assessing the physical and mental well-being of laboratory mice. They can serve as markers for both individual and population assessment of animal facilities, allowing measures to improve the care of mice to be taken more quickly and avoiding the risk of significant bias in experimental results.

Studies have shown that the human microbiome plays an important role in physiology, from food digestion to mental diseases. Since the gut microbiota composes the greatest amount of microbial cells and genes outnumbering even our own cell and gene counts, it is expected that the gut microbiome would affect many biological functions, thus becoming key to maintaining homeostasis in the various biological processes. The structure of the gut microbiota is shaped by many factors, including the environment and host genetics. Understanding how these factors determine the gut microbiome during its development and establishment at the early stages of human life is crucial to infer commensal and pathological microbiome composition. The purpose of this study is to investigate how much host genetics and the environment influence the development and establishment of the gut microbiota profiles. For this purpose, five sets of dichorionic triplet babies (two monozygotic twins and one dizygotic twin) are followed during their first 3 years of life. By using Next-Generation Sequencing data (NGS) and Bioinformatic tools, such as specific pipelines for 16S amplicons, we will compare the triplets gut microbiomes regarding presence and absence and relative abundances. We will also try to identify structure patterns, compare results with the literature and integrate the information on the genera associated or not with host genetics. All samples presented enough reads to identify all taxa up to the genus level. Phylogenetic alpha diversity increased in samples at later time points indicating time as a determinant factor. Monozygotic twins were significant more similar in beta diversity when compared to their dizygotic co-twins (DZs). Consistent with the literature, Firmicutes, Bacteroidetes, Proteobacteria, Actinobacteria and Verrucomicrobia were the dominant phyla in all sets. Analysis of relative abundance of Amplicon Sequence Variants (ASVs) by Correspondence Analysis (CA) showed that monozygotic twins (MZs) are more similar at time points 9, 11 and 13 months. Heritability test and CA results, as well as shared ASVs, revealed that ASVs of the genera Veillonella and Bacteroides are more similar in MZs. Alguns estudos têm demonstrado a importância do microbioma humano em processos fisiológicos envolvendo desde digestão até doenças mentais. Devido ao grande número de e genes bacterianos no intestino superando até mesmo o número de células e genes humanos, é plausível que o microbioma intestinal afete muitas funções biológicas, tornando-se assim essencial para manutenção da homeostase. A estrutura da microbiota intestinal é modelada por vários fatores, inclusive o ambiente e a genética do hospedeiro. Entender como esses fatores determinam o microbioma durante o desenvolvimento e estabelecimento do mesmo nos primeiros anos da vida humana é crucial para se inferir a composição microbioma relacionada às patologias ou ao bem-estar. O objetivo deste estudo é investigar quanto da genética do hospedeiro e quanto do ambiente influencia o desenvolvimento e estabelecimento do perfil da microbiota intestinal. Para essa finalidade, cinco conjuntos de bebês trigêmeos dicoriônicos ( dois monozigóticos e um dizigótico) foram acompanhados durante seus três primeiros anos de vida. Utilizando a tecnologia de Next-Generation Sequencing (NGS) e ferramentas da bioinformática, tais como pipeline específicos para tratamento e análise de amplicons de 16S, iremos comparar os microbiomas dos bebês verificando ausência e presença de bactérias e também suas respectivas abundâncias relativas. Esforços também serão dedicados para identificar padrões estruturais, comparar os resultados com dados da literatura e integrar as informações de bactérias associadas ou não à genética do hospedeiro. Todas as amostras apresentaram quantidade suficiente de reads para identificar todas as taxa até ao nível de gênero. A diversidade filogenética aumentou nas amostras nos pontos no tempo mais avançados, indicando que o tempo é um fator determinante. Os gêmeos monozigóticos (MZs) foram significantemente mais similares em beta diversidade quando comparados com seus gêmeos dizigóticos. Consistente com a literatura, Firmicutes, Bacteroidetes, Proteobacteria, Actinobacteria e Verrucomicrobia foram os filos dominantes em todos os sets. As avaliações de abundância relativa das Amplicon Sequence Variants (ASVs), por Análise de Correspondência (CA), mostraram que os MZs são mais similares nos pontos de tempo 9, 11 e 13 meses. Os resultados do teste de herdabilidade, da Análise de Correspondência, bem como das ASVs compartilhadas, revelaram que os gêneros Veillonella e Bacteroides são mais semelhantes nos MZs

Introdução: A prevalência de asma tem aumentado nas comunidades que adotam um estilo de vida ocidental e se tornam mais urbanizadas. A teoria da higiene sugere que a exposição a infecções na infância pode proteger contra o desenvolvimento de asma e outras doenças alérgicas. A Saccharomyces cerevisiae UFMG A-905 reduziu a hiper-responsividade brônquica e a inflamação das vias aéreas e pulmonares e restaurou os níveis de IL-10 e interferon-gama em um modelo animal de asma. Porém, os mecanismos envolvidos não foram elucidados. Objetivos: Avaliar os mecanismos de ação envolvidos na prevenção da asma pela administração de S. cerevisiae UFMG A-905 vivas. Material e métodos: Camundongos Balb/c, C57BL/6 wild e nocaute para IL-17A foram utilizados no estudo. S. cerevisiae UFMG A-905 vivas foram administradas aos camundongos por gavagem 10 dias antes da primeira sensibilização e durante todo período de sensibilização e desafios. Os camundongos dos grupos controles receberam apenas PBS, nos mesmos dias. Foram avaliados a população fenotípica das células dendríticas (CD11c+MHCII+CD11b+CD103+) e a população de linfócitos T reguladores (CD4+CD25+FOXP3+) no pulmão por citometria de fluxo; expressão gênica de receptores do tipo Toll (TLR-9), do tipo NLR (NLRP3), e do tipo lectina C (CLRs: Dectina-1and Mincle) no parênquima pulmonar por PCR em tempo real; produção de ácidos graxos de cadeia curta, média e longa nas fezes por cromatografia gasosa; produção de citocinas no intestino por ELISA. Resultados: A administração de S. cerevisiae UFMG A-905 aumentou significativamente o número de células dendríticas de fenótipo CD11c+MHCII+CD11b+CD103- e de linfócitos T reguladores, e a expressão de NLRP3 no tecido pulmonar; e a porcentagem do ácido graxo dihomo-gama-linolênico nas fezes de camundongos. Adicionalmente, os efeitos S. cerevisiae UFMG A-905 foram parcialmente dependentes de IL-17A. Conclusão: A administração do probiótico S. cerevisiae UFMG A-905 diminuiu as principais características da asma e desviou a resposta imune para um padrão Th17 via mecanismos parcialmente dependente de IL-17A. Nossos achados reforçam a importância do eixo-intestino-pulmão nas doenças alérgicas. Background: The prevalence of asthma has increased in children and communities that adopt a Western lifestyle and become more urbanized. The hygiene hypothesis suggests that exposure to infections early in life can reduce the risk of asthma and other allergic diseases. The Saccharomyces cerevisiae UFMG A-905 reduced bronchial hyperresponsiveness, airways and lung inflammation, and restored the levels of IL-10 and IFN-gama in a mouse model of asthma. However, the mechanisms involved were not fully elucidated. Objective: To evaluate the mechanisms involved in the prevention of asthma with the administration of S. cerevisiae UFMG A-905. Materials and Methods: Balb/c, C57BL/6 wild and IL-17A knockout mice were used in study. Mice were treated daily with live S. cerevisiae UFMG A-905 via gavage ten days before OVA sensitization and during sensitization and challenge protocol. Control mice received saline and PBS on the same days. Flow cytometer was performed in lung to measure dendritic cells (CD11c+MHCII+CD11b+CD103+) and regulatory T lymphocytes (CD4+CD25+FOXP3+). The evaluation of the following gene expression was done in lung with qPCR: Toll-like receptor (TLR-9), NLR receptor (NLRP3), and lectina C receptor (CLRs: Dectina- 1 and Mincle). Short, medium, and long chain fatty acids were quantified in feces with gas chromatography. Cytokine levels were measured in gut with ELISA. Results: The administration of S. cerevisiae UFMG A-905 increase the number of dendritic cells (CD11c+MHCII+CD11b+CD103-), regulatory T lymphocytes, and NLRP3 gene expression in lung; and percentage of dihomo-gamma-linolenic in feces. Additionally, the effects of S. cerevisiae UFMG A-905 were partially dependent of IL-17A. Conclusion: The administration of S. cerevisiae UFMG A-905 decreased main features of asthma and shifted the immune response to a Th17 pattern, via mechanisms partially dependent on IL-17A. Ours findings reinforce the importance of the intestine-lung axis in allergic diseases.

A castanha-do-brasil é um alimento de alta complexidade nutricional, devido ao alto teor de selênio, micronutriente com ação antioxidante e anti-inflamatória, e de outros importantes componentes, como fibras, ácidos graxos insaturados, compostos fenólicos e diversos minerais, como zinco, cobre e magnésio. Essa noz é amplamente consumida pela população brasileira e mundial e seus efeitos à saúde devem ser compreendidos em todas as vertentes. Até o momento, não eram conhecidos os efeitos da ingestão dessa castanha na constituição de bactérias intestinais, cuja relevância vem sendo exponencialmente comprovada na literatura nacional e mundial devido sua participação em importantes processos no contexto saúde e doença. Nesse sentido, o objetivo deste trabalho foi avaliar a composição da microbiota intestinal e o perfil de minerais (metaloma) no organismo após a ingestão de castanha-do-brasil (Bertholletia excelsa H.B.K.). Este estudo prospectivo foi composto por 97 indivíduos sem doenças crônicas não transmissíveis, de ambos os gêneros, com idade média de 28,7 ± 8,5 anos. Os participantes foram avaliados antes e após a suplementação de uma unidade de castanha-do-brasil (~370 µg de selênio) por dia, durante 60 dias, quanto ao status de minerais (plasma, eritrócitos e fezes), atividade da enzima glutationa peroxidase (GPX), concentração de selenoproteína P (SEPP), avaliação da ingestão alimentar (recordatório alimentar de 24 horas) e caracterização do microbioma intestinal. Os dados brutos do microbioma foram analisados por meio do software Quantitative Insight into Microbial Ecology (v1.9.0) e a estatística foi realizada utilizando o pacote R (v1.1.463). Nossos resultados indicaram que a castanha-do-brasil melhorou significativamente o status de selênio da população, de acordo com o aumento expressivo das concentrações no organismo (plasma, eritrócitos e fezes) e de seus marcadores funcionais (selenoproteína P e atividade da GPX) (p

Alterações estruturais e/ou mecânicas das artérias de resistência (AR), denominadas remodelamento vascular, são estudadas em pacientes e modelos de hipertensão arterial (HA), como os ratos espontaneamente hipertensos (SHR). No entanto, a literatura não apresenta consenso sobre o tipo de remodelamento ou os fenômenos biológicos envolvidos. Adicionalmente, a disbiose intestinal (DI) - caracterizada como um estado de desequilíbrio no qual a microbiota intestinal endógena gera danos ao seu hospedeiro, desencadeando mudanças no ambiente intestinal - foi adicionada ao panorama da HA. Assim, o objetivo do presente trabalho foi comparar as alterações na estrutura e mecânica, além da expressão gênica dos receptores de ácidos graxos de cadeia curta (AGCC), presentes nas artérias mesentéricas de resistência (AMRs) dos SHR em uma fase da vida sem DI (6 semanas, jovens), com a fase pós-DI (6 meses, adultos), de forma a correlacionar as mudanças no ambiente intestinal e a expressão gênica dos receptores com as alterações vasculares e a HA. Ratos Wistar e SHR, jovens e adultos, foram submetidos a pletismografia de cauda - para avaliação da pressão arterial caudal (PAC); as AMRs foram montadas no miógrafo de pressão para avaliação do remodelamento estrutural e mecânico e a expressão dos receptores foi caracterizada por PCR; já as alterações intestinais foram estudadas indiretamente, tanto pela concentração de zonulina no soro (biomarcador de permeabilidade intestinal), quanto pela concentração de AGCC (acetato, propionato e butirato) no conteúdo intestinal desses animais. Na fase jovem, os SHR apresentam elevação da PAC (7%) quando comparado aos Wistar, porém ainda são considerados normotensos. A concentração de zonulina e de AGCC não estava alterada nos ratos jovens. Por sua vez, as AMRs dos SHR apresentam remodelamento eutrófico para dentro, com elevada razão parede/lúmen (P/L, 39% em 120 mmHg), rigidez arterial e expressão gênica dos receptores para AGCC semelhante a encontrada nos Wistar. No entanto, os SHR adultos, hipertensos (184±2,40 mmHg), apresentam remodelamento mais severo das AMRs quando comparado aos Wistar de mesma idade, classificando-o como hipertrófico para dentro, com aumento adicional da razão P/L (58% em 120 mmHg), rigidez arterial, acompanhado de redução significativa na expressão gênica dos receptores para AGCC (GPR41: 83%, GPR43: 85% e GPR109a: 93%). Os SHR adultos apresentam altas concentrações plasmáticas de zonulina, que se correlacionam positivamente com os valores de PA e com a razão P/L das AMRs demonstrando pela primeira vez que a permeabilidade intestinal estaria relacionada ao remodelamento estrutural das AR na HA. Adicionalmente, esses animais apresentam redução significativa na concentração de butirato (32%) no conteúdo luminal, a qual somente se correlaciona negativamente aos valores de PA. Em conclusão, este trabalho demonstra que mudanças no ambiente intestinal estão envolvidas com a HA. Porém, enquanto a permeabilidade intestinal se correlaciona tanto com o remodelamento estrutural das AMRs, como com os valores de PA; a redução na concentração de butirato no conteúdo intestinal se correlaciona apenas a PA. Junto a isso, a menor expressão dos receptores de AGCC observada nas AMRs dos SHR adultos, possivelmente, favorece o remodelamento hipertrófico observado. Structural and/or mechanical changes in the resistance arteries (RA), known as vascular remodeling, are assessed in hypertensive patients and animal models of hypertension, as spontaneously hypertensive rats (SHR). However, there hasn\'t been established in the literature neither the type of remodeling found nor the biological process involved in this vascular change. Additionally, intestinal dysbiosis (ID) an imbalance state in which the gut microbiota promotes damage to the host, compromising the intestinal environment has also been described in hypertension. Therefore, the aim of this study was to evaluate and compare the structural and mechanical changes, as well as the gene expression of short chain fatty acids (SCFAs) receptors, found in mesenteric resistance arteries (MRA) from SHR, in absence of ID (6 weeks of age, young) and after the ID establishment (6 months of age, adult), in an attempt to correlate the intestinal environment changes and the receptors gene expression with the vascular changes and the hypertension. Male, SHR and Wistar rats, young and adult, were evaluated by tail cuff plethysmography for measurement of blood pressure (BP); the MRA were mounted in a pressure myography to determine the structural and mechanical remodeling and the SCFAs receptors expression was assessed by PCR. The intestinal changes were evaluated indirectly, by plasmatic zonulin quantification (a gut epithelial permeability biomarker), and by SCFAs levels in stool (acetate, propionate and butyrate), collected from the cecum of all groups of animals. At 6 weeks of age, SHR had 7% of increase in BP values when compared to Wistar, but they were still considered normotensive. The zonulin plasma levels and SCFAs availability were unchanged in young rats. However, the MRAs of SHR showed eutrophic inward remodeling, increased wall/lumen ratio (W/L, 39% evaluated in 120 mmHg), stiffness and similar SCFAs receptor gene expression as compared to Wistar. Nevertheless, 6 months old SHR, with high BP (184±2.40 mmHg), showed a more severe remodeling in MRAs, described as hypertrophic inward remodeling. This structural alteration was associated with bigger W/L ratio (58% evaluated in 120 mmH), stiffness and reduced SCFA receptor gene expression (GPR41: 83%, GPR43: 85% and GPR109a: 93%) when compared with their respective control. Those adult SHR also presented higher zonulin plasma levels, which was positively correlated with BP values and with the W/L ratio found in MRAs - showing for the first time that gut epithelial permeability is positively correlated with the structural remodeling in RA during hypertension. Additionally, reduced availability of butyrate was found in stool (32%) of SHR, showing a negative correlation with BP values. In conclusion, this study demonstrates that intestinal environment changes are related with hypertension. However, the gut epithelial permeability is correlated to the structural remodeling in MRAs, as much as to the BP values; while the reduced butyrate concentration in SHR stool is only correlated with BP values. Moreover, the smaller SCFA receptor gene expression found in MRA from adult SHR, possibly, support the hypertrophic inward remodeling described.

Os hormônios tireoidianos (HTs) são potentes reguladores do metabolismo dos nutrientes e, consequentemente, do balanço energético. O intestino delgado é o local de acesso dos nutrientes ao organismo, processo mediado por transportadores presentes na membrana apical dos enterócitos. O intestino possui receptores para os HTs e é sabido que os HTs estimulam a captação intestinal de glicose, porém o mecanismo responsável por essa captação ainda não está claro. Similarmente, ainda há poucas informações sobre o efeito dos HTs na captação dos peptídeos e dos lipídios da dieta. Sendo assim, o objetivo do presente estudo foi investigar o efeito do hipo e do hipertireoidismo na parede do intestino e na expressão dos transportadores de carboidratos, lipídios e proteínas no epitélio intestinal. Foram utilizados camundongos C57BL/6, machos, adultos, distribuídos em três grupos experimentais: controle, hipotireoideo (PTU) e hipertireoideo (T3). Os animais foram submetidos à eutanásia, após indução do hipo e hipertireoidismo, o jejuno foi removido e o epitélio intestinal separado da mucosa para análise do conteúdo proteico dos transportadores de carboidratos (SGLT1, GLUT2 e GLUT5), peptídeos (PEPT1), lipídios (CD36/SR-B2, FATP4, NPC1L1), MTTP, L-FABP e NHE3 por Western blotting, PCR em tempo real para as proteínas alteradas pela condição tireoidiana, histologia para análise do compartimento funcional (vilos) e proliferativo (criptas) por coloração por hematoxilina e eosina (HE) e dosagem dos triacilglicerois (TAG) e do colesterol na circulação. O NHE3 é importante para a captação dos peptídeos, por isso, ele foi avaliado. A MTTP e L-FABP são importantes no processamento intracelular dos lipídios e na secreção de TAG e colesterol reesterificados. Em relação aos resultados obtidos, observamos que o T3 aumentou o conteúdo proteico do GLUT2 e do CD36/SR-B2, mas não afetou as demais proteínas. O PTU não modificou o conteúdo das proteínas avaliadas. Considerando que o T3 aumentou o conteúdo do GLUT2 e do CD36/SR-B2, avaliamos o conteúdo do mRNA dessas duas proteínas e observamos que o T3 diminuiu a expressão do mRNA do Cd36 (CD36/SR-B2), mas não afetou o conteúdo do mRNA do Slc2a2 (GLUT2). Considerando que o CD36/SR-B2 participa da captação dos lipídios e que o seu conteúdo aumentou após o tratamento com T3, avaliamos o TAG e colesterol na circulação, mas não observamos alteração no TAG, enquanto que o colesterol sérico reduziu após o tratamento com T3, descartando um possível aumento da captação dos lipídios secundário ao aumento do CD36/SR-B2. O hipo ou hipertireoidismo não afetaram a altura dos vilos ou profundidade das criptas. Concluímos que o T3 aumenta o conteúdo do GLUT2 e do CD36/SR-B2 e que, aparentemente, esse efeito não tem relação com a regulação da expressão dos seus mRNAs ou com a altura dos vilos ou profundidade das criptas. Em relação ao GLUT2, é possível que esse efeito favoreça uma maior captação de glicose, pois há relatos de que o T3 estimula esse processo, condição que aumenta o aporte de substratos energéticos para o organismo, o que é relevante no hipertireoidismo, condição caracterizada por alta demanda metabólica. Thyroid hormones (THs) are great regulators of the energy metabolism and, consequently, energy balance. The small intestine is the place where nutrients may access the organism and THs could regulate this process, since small and large intestines express THs receptors and THs is known to stimulate intestinal glucose uptake, however, the mechanism underlying that action remains unclear. Besides, THs may also regulate peptide and lipid uptake, but those issue require investigation. Thus, the present study aimed to investigate the impact of hypo and hyperthyroidism on the intestinal wall and carbohydrate, lipid and protein transporters content. For this, adult mice (C57BL/6) were distributed in three experimental groups: control (vehicle/saline), hypothyroid (propylthiouracil/PTU) and hyperthyroid (triiodothyronine/T3), which were submitted to euthanasia, intestine was removed (jejunum) and the epithelium was isolated from intestinal mucosa to analyze: a) protein content of carbohydrate transporters (SGLT1, GLUT2 and GLUT5), peptides (PEPT1), lipids (CD36/SR-B2, FATP4, NPC1L1), MTTP, L-FABP and NHE3 by Western blotting, b) real-time PCR for the treatment-altered proteins (T3 or PTU), c) histology for villi height and crypts depth by hematoxylin and eosin (HE) staining and d) serum triacylglycerol (TAG) and cholesterol dosage. NHE3 was evaluated, since it is an important for sodium and peptides absorption. MTTP and L-FABP are important in the intracellular lipid processing and re-esterified TAG and cholesterol secretion. Our results showed that T3 increased the protein content of GLUT2 and CD36/SR-B2, but did not affect the content of the other proteins. PTU did not modify the content of the evaluated proteins. Since T3 increased GLUT2 and CD36/SR-B2 content, we evaluated the mRNA expression of these two proteins by real-time PCR, and we observed that T3 decreased Cd36 mRNA (CD36/SR-B2) expression, but did not affect the content of Slc2a2 mRNA (GLUT2). Considering that the enhancement of CD36/SR-B2 may lead to increase in serum TAG and cholesterol, we evaluated this subject, but we did not observe any change in circulating TAG, whereas serum cholesterol decreased after T3 treatment, effects that lead us to exclude a possible increasing of lipids absorption induced by T3. PTU or T3 did not modify villi height nor crypts depth. We conclude that T3 increases the content of GLUT2 and CD36/SR-B2, actions that has no relation to their mRNAs regulation or with villi height and crypts depth. Regarding the GLUT2, it is possible that this effect underlie the greater glucose uptake, since T3 stimulates this process as mentioned. That condition increase the supply of energetic substrates to the organism, which is important in hyperthyroidism, a condition characterized by high metabolic demand.

As células dendriticas (DC) da lamina própria constituem um grupo heterogêneo de células essenciais na homeostase do intestino. Nos últimos anos, estudos vem mostrando participação do complexo mTORC2 na regulação de células da imunidade inata. Desta forma, usando animais deficientes em mTORC2 nas DCs nos investigamos o papel deste complexo sob a funcoes das DCs num modelo de colite ulcerativa. Observamos que a ausência de mTORC2 nas DCs diminui a inflamação intestinal e prejudica a migração dessas células para os linfonodos. Consequentemente, estes animais também apresentam redução no numero de linfócitos Th17, Treg e T CD8&#43IFNg&#43. Estes resultados parecem ser independentes da composição da microbiota intestinal. In vitro, células dendriticas derivadas da medula ossea (BMDCs) deficientes em mTORC2 não mostraram deficiência na regulação positiva de CD80 e MHC-II quando estimuladas, mas mostraram menor produção de TNF-a e IL-6. Estas células também apresentaram menor capacidade na diferenciação de Th17. Nossos resultados indicam que mTORC2 participa na regulação das funções das DCs, especialmente na migração e produção de citocinas pos estímulos lnflamatorios. Dendritic cells from lamina propria encompass a heterogeneous group of cells which play a key role in intestinal homeostasis. In the past few years, it has been shown the participation of mTORC2 in regulating innate immune cells. In our study, we used mTORC- deficient DCs to investigate the role of this complex in DCs functions in ulcerative colitis model. Absence of mTORC2 in DCs reduces the intestinal inflammation, impairs DCs migration which in turn decreases the number of Th17, Tregs and CD8&#43IFNg&#43 T cells. These results seem to be independent of gut microbiota composition. Our in vitro results showed that bone marrow-derived DCs (BMDCs) deficient in mTORC2 can upregulate CD80 and MHC-II after stimulus but present decreased production of TNF-a and IL-6. Those cells also showed deficiency in Th17 differentiation. Our results suggest that mTORC2 play pivotal role in DCs functions highlighting migration and cytokine production.

O diabetes mellitus tipo 2 está intimamente ligado a formação de espécies reativas de oxigênio, as quais aumentam os produtos de glicação avançada e consequentemente a inflamação e o desenvolvimento das complicações associadas a doença. Nesse contexto, destaca-se o papel do microbioma intestinal, visto que esta pode ser capaz de modificar fatores ligados ao sistema imune e sua modulação pode ser uma boa alternativa para melhora do quadro inflamatório e complicações da doença. A castanha-do-brasil, fonte de selênio, além de outros nutrientes, poderia atuar no sistema de defesa antioxidante e anti-inflamatório, além de influenciar a microbiota intestinal, resultando benefícios aos pacientes. Portanto, este estudo teve como objetivo avaliar estes efeitos da suplementação de indivíduos com diabetes mellitus tipo 2, com uma nóz de castanha-do-brasil (Bertholletia excelsa H.B.K.) por dia, durante 60 dias. Para tanto, foi delineado um ensaio clínico, longitudinal, com 29 pacientes voluntários com diabetes mellitus tipo 2, atendidos no Ambulatório de Endocrinologia do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo. Os participantes foram avaliados antes e após a intervenção, e realizaram uma coleta de fezes (caracterização da microbiota intestinal e concentração de selênio) e uma coleta de sangue (análises de status de selênio, marcadores inflamatórios, glicêmicos e lipídicos, e da permeabilidade intestinal), a avaliação da ingestão alimentar foi por meio de Registro Alimentar de 3 dias Inicialmente, determinou-se a composição centesimal e a concentração de selênio da castanha-do-brasil utilizada. A análise bioinformática foi conduzida usando o Quantitative Insight into Microbial Ecology (QIIME, versão 1.9.0). A análise estatística foi realizada com os softwares Statistical Package for the Social Sciences, versão 23.0, e R versão 1.1.463. A concentração de selênio na castanha in natura foi de 79,8µg/g. A idade média dos participantes foi 54,9±3,6 anos. A ingestão de castanha-do-brasil foi capaz de melhorar significativamente os parâmetros: concentrações de selênio no plasma (Δ 95,82, p

A microbiota intestinal (MI) é formada por milhões de microrganismos presentes no trato gastrointestinal, especialmente no cólon. Recentemente, estudos tem sugerido que o treinamento físico aeróbio pode modificar a composição desta MI, por exemplo, aumentando a abundância de bactérias comensais, as quais positivamente influenciam o organismo do hospedeiro. Entretanto, algumas lacunas existem: estudos foram realizados majoritariamente em animais e estes apresentaram associação com outros modelos de dietas e doenças; em humanos, estudos observacionais não apontaram causalidade do treinamento físico e os poucos estudos com intervenção possuíam influência de outras variáveis, as quais estiveram associadas com tais mudanças. Assim, dificulta isolar e compreender o efeito do treinamento físico sobre a MI humana. Portanto, a partir de um delineamento controlado, o objetivo desse estudo foi investigar o efeito do treinamento físico aeróbio realizado em intensidade moderada sobre a composição da microbiota intestinal em humanos. Para isso, foram recrutados homens sedentários, entre 18 a 40 anos, universitários, com padrões alimentares semelhantes, não obesos e com ausência de quaisquer doenças, os quais foram randomizados em grupo controle (GC) e grupo treino (GT). Todos passaram pelas seguintes coletas: aplicação de questionários, coleta de sangue e fezes, avaliação da composição corporal e teste de esforço progressivo máximo, no pré- e pós-intervenção. Os voluntários do GT foram treinados em bicicletas ergométricas por 10 semanas (3x/semana; 50 minutos/dia; 60-65% VO2pico). A análise dos dados referentes à microbiota intestinal foram processados pelo software QIIME 2.0, as análises estatísticas foram realizadas pelo QIIME 2.0 e visualizadas no site do QIIME (https://view.qiime2.org/). Outras análises estatísticas foram realizadas no programa SPSS versão 25 por meio de análise de variância com medidas repetidas, utilizando \"grupo\" e \"tempo\" como fatores ou pelo teste Kruskal-Wallis. O nível de significância foi p

A introdução de novas linhagens de camundongos em biotérios deve ser realizada com cautela devido aos riscos de introdução de doenças na colônia, motivo pelo qual alguns biotérios adotam como padrão introduzir novos animais somente após o processo de rederivação, que pode ser realizado por transferência embrionária, histerectomia ou cross-fostering. A rederivação é adotada para diversas espécies de animais de laboratório e constitui uma forma de reduzir o risco de surtos de doenças em um biotério com a consequente interferência na pesquisa e perdas, tanto do status sanitário como do bem-estar dos animais. Dentre esses métodos, a transferência de embriões nos estágios de pré-implantação é considerada mais segura que os outros métodos utilizados para se rederivar linhagens de camundongos por reduzir os riscos da transmissão vertical de patógenos. Essa técnica é adotada em diversos biotérios internacionais, porém não é rotina em biotérios do Brasil. O objetivo desse trabalho foi implantar a técnica de rederivação por transferência de embriões no estágio de duas células, no biotério de camundongos livres de patógenos específicos (SPF) do Departamento de Imunologia do Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade de São Paulo. As transferências embrionárias foram realizadas para introdução de linhagens de camundongos procedentes de diferentes biotérios convencionais sem barreiras. Os embriões foram obtidos pelos métodos naturais, por meio do acasalamento das fêmeas doadoras superovuladas, com machos de genótipo ou fundo genético igual. Os embriões foram coletados por flushing e lavados em meio estéril. Realizou-se a transferência de embriões no estágio de duas células para fêmeas receptoras livres de patógenos específicos (SPF), pseudoprenhas no 0,5 dia pós coito (d.p.c.). Todos os procedimentos cirúrgicos foram realizados em condições assépticas. Total de 881 embriões, destes, 625 foram transferidos para rederivação de 18 linhagens de camundongos. Nasceram 148 filhotes vivos, dos quais 140 foram desmamados. Os seguintes patógenos foram eliminados pela técnica: vírus da hepatite murina, norovírus, Corynebacterium kutscheri, Staphylococcus aureus, Streptococcus beta hemolítico, Bordetella bronchiseptica e protozoários intestinais. Os dados apresentados foram obtidos da rotina do biotério num período de três anos. A implantação da técnica possibilitou a introdução de novas linhagens na criação, em condições sanitárias satisfatórias, com a consequente disponibilização de modelos animais com nível sanitário adequado à experimentação para a comunidade científica. The introduction of new strains of mice should be performed carefully to avoid breaking sanitary barriers of specific pathogen free (SPF) animal facilities. In order to meet this need, animals should be rederived by embryo transfer, hysterectomy or cross-fostering and then maintained under strict biosecurity practices. Rederivation is a technique used in different species of laboratory animals to protect them from infectious agents, minimize risks of disease outbreaks and thus avoid research interference caused by loss of the health status and welfare of the animals. Among these techniques, embryo transfer at two cell stage should rather be implemented because it avoids post implantational vertical transmissions of infections. It is routine to introduce animals by embryo transfer in most animal facilities in the United States of America and Europe, however it is not seen in Brazilians rodents vivariums. The objective was to implement mice embryo transfer technique in the animal facility of the Department of Immunology of the Institute of Biomedical Science of the University of Sao Paulo, Brazil. Embryo transfers were performed to rederive strains of mice received from different sources. Fertilized eggs at two-cell stage were obtained by mating superovulated females with fertile males that had either the same genotype or the same genetic background. Embryos were collected by flushing of the oviducts and washed in sterile medium. Under general anesthesia, embryos were transferred into the oviducts of specific pathogen free (SPF) pseudo pregnant female mice at 0,5 - day post coitus (d.p.c.). All the surgical procedures were performed under asseptic conditions. Total of 881 embryos, out of these, 625 embryos at two-cell stage were transfered to rederive 18 mouse strains. It was born 148 pups, of which 140 were reared. The following mouse pathogens were eliminated by embryo transfer technique: Mouse hepatitis virus, Norovirus, Corynebacterium kutscheri, Staphylococcus aureus, Beta-Haemolytic Streptococci, Bordetella bronchiseptica and intestinal protozoa. Data were collected from routine laboratory in a period of two years. The improvement in the microbiological status of mice allowed their expansion in our SPF facility and the distribution of better models to the scientific community.

A avaliação da mecânica respiratória (AMR) busca descrever o comportamento mecânico do sistema respiratório, para melhor entender a sua fisiologia e a sua patofisiologia. O método quasi-estático é caracterizado pela AMR em condições nas quais a aceleração dos tecidos pode ser considerada desprezível. Esta dissertação de mestrado teve como objetivo avaliar a mecânica respiratória pelo método quasi-estático em roedores, utilizando um insuflador pulmonar para pequenos roedores (IPPR) construído no Laboratório de Engenharia Biomédica (LEB) da Escola Politécnica da Universidade de São Paulo (EPUSP). Uma extensa revisão da literatura sobre fisiologia e técnicas de AMR em humanos e roedores é apresentada. Uma documentação bastante detalhada sobre a implementação e o funcionamento do IPPR é fornecida, com o intuito de permitir que o dispositivo seja reproduzido. Testes de bancada foram executados, para avaliar o funcionamento do IPPR, e um protocolo experimental com modelo animal de doença, em ratos Wistar envenenados por Paraquat, foi realizado. Os resultados dos testes de bancada mostraram que o equipamento ainda carece de alguns ajustes, pois apresenta erros na indicação de volume, da ordem de 5%, mas que podem ser compensados na análise dos dados experimentais obtidos. No futuro, pretende-se sanar essa imprecisão, tornando o IPPR independente de um microcomputador com sistema operacional multitarefa. Os resultados da aplicação do modelo matemático exponencial, nos dados obtidos de curvas pressão-volume no protocolo experimental, trouxeram informações que estão de acordo com as características observadas no modelo animal de envenenamento por Paraquat. The assessment of respiratory mechanics (AMR) aims to describe the mechanical behavior of the respiratory system in order to better understand its physiology and pathophysiology. The quasi-static method is characterized by the AMR under conditions where the tissue\'s acceleration can be considered negligible. The purpose of this master degree dissertation was to assess the respiratory mechanics by quasistatic method in rats using a lung insufflator for small rodents (IPPR) implemented in the Biomedical Engineering Laboratory (LEB) of Escola Politécnica of University of São Paulo (EPUSP). Abroad literature review on AMR techniques and on physiology in humans and rodents was presented. A fairly detailed documentation of the assembly and the operation of the IPPR was provided in order to allow the device to be reproduced. Bench tests were conducted to evaluate the behavior of the IPPR, and an animal disease model by Paraquat poisoning protocol was performed in Wistar rats. The bench tests results showed that the equipment still needs some tweaking, because it presents errors in volume indication of the order of 5%, but these errors can be compensated in the analysis of the experimental data. In the future, there is an intention to correct this inaccuracy turning the IPPR independent of a multitask microcomputer operating system. The results of the mathematical exponential modeling applied on the pressure-volume curves in the experimental protocol are in good agreement with the characteristics observed on Paraquat poisoning animal model.

Modelos matemáticos são utilizados como ferramentas na avaliação da mecânica respiratória para a compreensão da fisiologia e patologias do sistema respiratório. A presente pesquisa visou avaliar, através da aplicação de modelos matemáticos, a mecânica respiratória em camundongos submetidos à metacolina. Deu-se ênfase no modelo linear de compartimento único e suas variantes não lineares. Camundongos C57BL/6 (n = 8) foram traqueostomizados, ventilados mecanicamente (flexiVent, SCIREQ, Canadá) e perturbações em volume foram aplicadas para a modelagem do sistema respiratório. O protocolo experimental foi elaborado de forma a se analisar a variação dos parâmetros respiratórios durante a aplicação do agente broncoativo e também se verificou a divisão do sinal quasi-senoidal em expirações e inspirações durante a técnica de oscilação forçada (FOT) com perturbação de frequência 2,5 Hz. Com base nisso, uma rotina computacional própria foi desenvolvida para a análise dos experimentos realizados no ventilador mecânico e foram pesquisadas as vantagens e desvantagens dos modelos matemáticos aplicados. Os resultados demonstraram um aumento no desvio padrão dos parâmetros do modelo linear unicompartimental e suas variantes não lineares após a aplicação do broncoconstritor. Acredita-se que esta grande variação nos parâmetros esteja relacionada com o enrijecimento do parênquima e da heterogeneidade da ventilação pulmonar após a utilização da droga. Devido à correlação dos parâmetros do modelo com a fisiologia ocorrer somente no modelo linear, acredita-se que este ainda é o mais indicado na avaliação da mecânica respiratória e as variantes não lineares seriam indicadas como opção em casos onde o modelo linear é incapaz de realizar ajustes adequados ou para informações complementares. Mathematical models are used as tools in the assessment of respiratory mechanics for the understanding of the physiology and pathologies of the respiratory system. This study aimed to assess the respiratory mechanics by applying mathematical models in mice subjected to challenges with methacholine. Emphasis was placed on linear single-compartment model and its nonlinear variants. C57BL/6 mice (n = 8) were tracheostomized, mechanically ventilated (flexiVent, SCIREQ, Canada) and disturbances in volume were applied to the modeling of the respiratory system. The experimental protocol was developed in order to analyze the variation of respiratory parameters during the application of the bronchoactive agent. The division of quasisinusoidal signal in expirations and inspirations during the forced oscillation technique (FOT) with frequency perturbation of 2.5 Hz was also observed. Based on that, a proper computational routine was developed in order to analyze the experiments in the mechanical ventilator and the advantages and disadvantages of the applied mathematical models. The results demonstrated an increase in the standard deviation of the linear single-compartment model and its nonlinear variants parameters after the application of bronchoconstrictor. It is believed that this large variation in the parameters relates to the parenchyma stiffening and to the heterogeneity of pulmonary ventilation after the use of the drug. Due to the fact that the correlation between the model parameters and the physiology occurred only in the linear model, it is believed that this is still the most suitable model in the assessment of respiratory mechanics. Nonlinear variations of the single-compartment model would be indicated only as an option, for example, in cases where the linear model is incapable of performing appropriate fits or when additional information about the respiratory system is required.