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Conflict of interest: No Introduction and Objectives: Aminoglycosides are a group of broad-spectrum antibiotics, which have action especially against gram-negative bacteria. It is associated with nephrotoxicity in 10-20% of cases, a figure that increases in patients with liver cirrhosis. Amikacin is frequently used in sepsis, with little information about the risk of nephrotoxicity in cirrhosis. The aim was to determine the association between amikacin use and renal function deterioration in patients with liver cirrhosis and sepsis. Patients / Materials and Methods: Retrospective, observational, analytical study in patients with liver cirrhosis of any etiology, who required hospitalization for sepsis between 2017 and 2023, and who received antibiotic therapy. An increase in serum creatinine ≥ 0.3 mg/dl in the first 7 days of hospitalization was used as a marker of renal function deterioration. Clinical variables, renal failure and mortality were compared between patients who received amikacin and those who did not. Stata 13.0 was used for data analysis with a statistical significance of 0.05. Results and Discussion: In this study 228 patients were included, median age 65 years (54-70), 100 (44%) women, 70 received amikacin (31%). Renal function deterioration was present in 25 (36%) patients with amikacin and 33 (21%) without amikacin. In patients with initial serum creatinine > 2.0 mg/dl and in those with Child-Pugh C cirrhosis, the probability of developing renal function deterioration was higher in those who received Amikacin (OR 7.5; 95% CI 1.1 – 48.0, p= 0.031 and OR 2.51; 95% CI 1.06 – 5.97, p = 0.036, respectively). A comparative table of different subgroups is attached. Conclusions: The use of amikacin was associated with renal function deterioration in patients with liver cirrhosis and sepsis, mainly in Child-Pugh C cirrhosis and with initial serum creatinine > 2.0 mg/dl.

Conflict of interest: No Introduction and Objectives: Patients with cirrhosis and septic shock face a high mortality rate, reaching up to 40%. There is limited literature from Latin America on this condition and associated mortality variables. The aim was to describe mortality in patients with liver cirrhosis and septic shock and analyze the associated variables. Patients / Materials and Methods: A retrospective, observational, analytical study was conducted on patients with liver cirrhosis, who were diagnosed with septic shock, according to Sepsis-3 criteria, during their hospitalization in Hospital Clínico Universidad de Chile, between 2017 and 2023. A confidence level was set at 95% with a statistical significance of p = 0.05. Results and Discussion: A total of 68 patients with septic shock were included, with a mean age of 61 years; the majority were male (57%). The primary etiologies of cirrhosis were alcohol-related (31%) and metabolic-associated (27%). Most patients had a Child-Pugh score of B or C (95%). The 28-day mortality rate was 38%, and the one-year mortality rate was 54%. These patients experienced 74 episodes of septic shock. Of these, 61% were associated with healthcare-related infections, and in 47% a Gram-negative microorganism was identified. Significant variables associated with 28-day mortality included a history of hepatic encephalopathy, low platelet count at admission, elevated total bilirubin, and higher severity scores (SOFA, Meld-Na, CLIF-SOFA). One-year survival was significantly higher among patients who received a liver transplant (HR 0.11, 95% CI 0.01 – 0.86, p = 0.036) (Figure 1). Conclusions: Mortality among cirrhotic patients with septic shock in Chile is high and comparable to international cohorts. Liver transplantation reduces mortality in this patient group. Higher SOFA, Meld-Na, and CLIF-SOFA scores at admission are associated with increased mortality.

Background: An epizootic of highly pathogenic avian influenza A (H5N1) has spread worldwide since 2022. Even though this virus has been extensively studied for many decades, little is known about its evolution in South America. Methods: Here, we describe the sequencing and characterization of 13 H5N1 genomes collected from wild birds, poultry, and wild mammals in Peru during the genomic surveillance of this outbreak. Results: The samples belonged to the highly pathogenic avian influenza (H5N1) 2.3.4.4b clade. Chilean and Peruvian samples clustered in the same group and therefore share a common ancestor. An analysis of the hemagglutinin and neuraminidase genes detected new mutations, some dependent upon the host type. Conclusions: The genomic surveillance of highly pathogenic avian influenza is necessary to promote the One Health policy and to overcome the new problems entailed by climate change, which may alter the habitats of resident and migratory birds.

Objetivo. Evaluar la respuesta serológica de anticuerpos de una llama (Lama glama) a la inmunización del virus SARS-CoV-2 (linaje B.1.1) y la capacidad neutralizante del suero de llama hiperinmune frente al virus SARS-CoV-2 (linaje B.1.1) en células Vero. Materiales y métodos. Se inmunizó una llama con el virus SARSCoV-2 inactivado (Linaje B.1.1) y se analizaron muestras de suero para evaluar el nivel de anticuerpos mediante ELISA, así como la reactividad a antígenos de SARS-CoV-2 mediante Western Blot. Además, se evaluó la neutralización viral en cultivos celulares por la Prueba de Neutralización por Reducción de Placas (PRNT, por sus siglas en inglés). Resultados. Se observó un aumento en la serorreactividad en la llama inmunizada desde la semana 4 en adelante. Los títulos de anticuerpos fueron más elevados en el séptimo refuerzo de inmunización. Los resultados de Western Blot confirmaron los hallazgos positivos del ELISA, y los anticuerpos del suero inmune reconocieron varias proteínas virales. El ensayo de neutralización (PRNT) mostró una neutralización viral visible, concordante con los resultados de ELISA y Western Blot. Conclusiones. Los hallazgos sugieren que el suero hiperinmune de llama podría constituir una fuente de anticuerpos terapéuticos contra las infecciones por el virus SARS-CoV-2 (linaje B.1.1) y que deberá ser evaluado en estudios posteriores.

Objetivo. Evaluar in silico y a nivel serológico el potencial antigénico del dominio extracelular recombinante de la proteína de ensamblaje de lipopolisacáridos - D (LptD) de Bartonella bacilliformis (dexr_LptD). Materiales y métodos. Mediante el análisis in silico se realizó la selección de una proteína de B. bacilliformis con potencial antigénico e inmunogénico. El gen de la proteína seleccionada se clonó en Escherichia coli TOP10 y se expresó en Escherichia coli BL21 (DE3) pLysS. La proteína recombinante fue expresada usando isopropil-β-D-1-tiogalactopiranósido (IPTG) y se optimizaron las condiciones de inducción. Por último, se purificó con resina Ni-IDA (His60 Ni Superflow) y se realizó un ensayo de Western Blot. Resultados: In silico, la proteína seleccionada fue LptD por estar localizada en la membrana externa y ser antigénica e inmunogénica. Las condiciones optimizadas para la inducción del dexr_LptD fueron 0,5 mM IPTG, 16 h, medio TB (Terrific Broth), etanol al 3% (v/v), 28 ºC, OD600: 1-1,5 y 200 r.p.m. La purificación se realizó en condiciones denaturantes a pequeña escala y se obtuvo 2,6 μg/mL de dexr_LptD parcialmente purificada. El ensayo de Western Blot mostró una reacción positiva entre los sueros provenientes de pacientes con la enfermedad de Carrión y dexr_LptD, ello evidencia la antigenicidad del dexr_LptD. Conclusiones. El dexr_LptD muestra antigenicidad in silico y a nivel serológico, estos resultados son base para posteriores estudios sobre candidatos vacunales contra la enfermedad de Carrión.

We used nanopore sequencing and phylogenetic analyses to identify a cosmopolitan genotype of dengue virus serotype 2 that was isolated from a 56-year-old male patient from the state of Goiás in Brazil. The emergence of a cosmopolitan genotype in Brazil will require risk assessment and surveillance to reduce epidemic potential.

This study analyzes the economic structure and whether the changes it experiences are linked to and affect poverty in Mexico and the states that comprise it. Therefore, the GDP and employment sectoral participation, the intersectoral effect (EI), and the reassignment effect (ER) of employment towards high productivity sectors in the States that make up the country are estimated, and Coneval poverty indices are also used in the analysis. The evidence confirms that the sectoral participation with respect to GDP and employment tends to increase in the services sector and that in the country, the increase in productivity is mainly attributed to RE; however, the activities to which employment is relocated in the states are primarily non-industrial activities. Finally, it was found that the poverty reduction is explained by economic growth, the participation of the secondary and tertiary sectors of the economy, but not by the reallocation effect, which denotes the non-existence of a structural change in the Mexican economy.

The present work validated and evaluated a duplex real-time RT-PCR using specific primers and probes for genes RdRp from SARS-CoV-2 and GAPDH from humans; the latter was used as an endogenous control in all reactions. We evaluated the specificity, the sensitivity, the robustness, the reproducibility, the repeatability, the comparability, and the limit of detection. The predictive positive and negative values (PPV and PNV, respectively) and all the parameters evaluated using our duplex real-time RT-PCR was 100%. The detection limit was 100 copies/μL according to the acceptance criteria established for the validation of this protocol. Our duplex real-time RT-PCR demonstrated to be a good alternative for the diagnosis of COVID-19; in addition, this PCR was used adequately in suspicion of COVID-19, allowing it to control the number of false-negatives.

Andalusia is a Spanish region that is home to numerous minority varieties due to its diversity and territorial extension, offering the local viticulture the possibility of diversifying its wine production. The genotypic characterization of 98 specimens from six areas with a winemaking tradition in Andalusia was carried out between the years 2020 and 2022, by means of thirteen microsatellite markers, including the nine recommended by the OIV. A total of 33 different genotypes were obtained, 20 of which corresponded to profiles of already described varieties (11 of them are of 6 minority cultivars in Andalusia: ‘Rojal Tinto’, ‘Beba’, ‘Zurieles’, ‘Rome’, ‘Hebén’, ‘Mollar Cano’, ‘Listán Prieto’, ‘Listán del Condado’, ‘Jarrosuelto’, ‘Negra Dorada’, and ‘Mantúo de Pilas’), while the other 12 profiles did not match with previously identified varieties. These profiles were registered in the database of the IFAPA “Rancho de la Merced” Germplasm Bank. The eco-geographical groups of the new identified genotypes were determined through an analysis of genetic diversity. The presence of grapevine fanleaf virus, grapevine fleck virus, and grapevine leafroll-associated viruses was also determined due to the requirement of healthy clones of the new varieties for their potential interest to be authorized for cultivation in Spain.

Background and Objectives: Haplopappus multifolius Phil. Ex Reiche and Haplopappus taeda Reiche are medicinal shrubs native to Chile and are popularly known as "Bailahuén". Regularly, this plant is used for liver, digestive and renal affections, as well as colds and the cleaning of infected wounds. The aim of the study was to identify the responsible compounds for the antimicrobial activity of H. multifolius and H. taeda. Materials and Methods: Infusions and ethanolic extracts of H. taeda and H. multifolius were analysed by thin-layer chromatography bioautography (TLC-B) to determine the compounds responsible for the antimicrobial activity against Gram-positive and Gram-negative bacterial strains and yeasts of Bailahuén. Finally, the minimum inhibitory concentration (MIC) of pure compounds isolated was determinate. Results: Extract of Bailahuén had activity only against Gram-positive bacterial strains and this activity was associated with aesculetin, 18-acetoxy-cis-cleroda-3,13E-dien-15-oic acid and aromadendrin-7-methyl ether compounds. Conclusion: H. multifolius and H. taeda have antibacterial capacity on different species of Gram-positive bacteria pathogenic for humans.

Objectives: To evaluate the capacity of the hyperimmune llama serum (Lama glama) to neutralize the lethal activity of Bothrops atrox venom in laboratory mice. Materials and methods: Mean lethal dose (LD50) was calculated from a Bothrops atrox venom sample pool from Peru. The antibody titers were measured by ELISA assay; and the immune serum neutralization potency was measured by calculating the mean effective dose (ED50) during the immunization period. Results: The venom’s LD50 was 3.96 μg/g; similar to what was found in other studies about Bothrops atrox carried out in Peru. The titers of antibodies against the venom increased rapidly in the llama, demonstrating a fast immune response; however, the neutralization capacity increased slowly and required several doses and immunization reinforcements, obtaining a ED50 of 3.30 μL/g mouse and a neutralization potency of 3.6 mg/mL after 15 immunizations. Conclusions: The hyperimmune llama serum is able to neutralize the lethality of the Bothrops atrox venom from Peru in laboratory mice.

In adulthood, the ability to digest lactose, the main sugar present in milk of mammals, is a phenotype (lactase persistence) observed in historically herder populations, mainly Northern Europeans, Eastern Africans, and Middle Eastern nomads. As the –13910∗T allele in the MCM6 gene is the most well-characterized allele responsible for the lactase persistence phenotype, the –13910C > T (rs4988235) polymorphism is commonly evaluated in lactase persistence studies. Lactase non-persistent adults may develop symptoms of lactose intolerance when consuming dairy products. In the Americas, there is no evidence of the consumption of these products until the arrival of Europeans. However, several American countries’ dietary guidelines recommend consuming dairy for adequate human nutrition and health promotion. Considering the extensive use of dairy and the complex ancestry of Pan-American admixed populations, we studied the distribution of –13910C > T lactase persistence genotypes and its flanking haplotypes of European origin in 7,428 individuals from several Pan-American admixed populations. We found that the –13910∗T allele frequency in Pan-American admixed populations is directly correlated with allele frequency of the European sources. Moreover, we did not observe any overrepresentation of European haplotypes in the –13910C > T flanking region, suggesting no selective pressure after admixture in the Americas. Finally, considering the dominant effect of the –13910∗T allele, our results indicate that Pan-American admixed populations are likely to have higher frequency of lactose intolerance, suggesting that general dietary guidelines deserve further evaluation across the continent.

Snake envenoming is a globally neglected public health problem. Antivenoms produced using animal hyperimmune plasma remain the standard therapy for snakebites. Although effective against systemic effects, conventional antivenoms have limited efficacy against local tissue damage. In addition, potential hypersensitivity reactions, high costs for animal maintenance, and difficulties in obtaining batch-to-batch homogeneity are some of the factors that have motivated the search for innovative and improved therapeutic products against such envenoming. In this study, we have developed a set of nanobodies (recombinant single-domain antigen-binding fragments from camelid heavy chain-only antibodies) against Bothrops atrox snake venom hemorrhagic and myotoxic components. An immune library was constructed after immunizing a Lama glama with whole venom of B. atrox, from which nanobodies were selected by phage display using partially purified hemorrhagic and myotoxic proteins. Biopanning selections retrieved 18 and eight different nanobodies against the hemorrhagic and the myotoxic proteins, respectively. In vivo assays in mice showed that five nanobodies inhibited the hemorrhagic activity of the proteins; three neutralized the hemorrhagic activity of whole B. atrox venom, while four nanobodies inhibited the myotoxic protein. A mixture of the anti-hemorrhagic and anti-myotoxic nanobodies neutralized the local tissue hemorrhage and myonecrosis induced by the whole venom, although the nanobody mixture failed to prevent the venom lethality. Nevertheless, our results demonstrate the efficacy and usefulness of these nanobodies to neutralize important pathologies of the venom, highlighting their potential as innovative therapeutic agents against envenoming by B. atrox, a viperid species causing many casualties in South America.

The presence of ochratoxin A (OTA) in wines is a problem mainly due to the health damage it can cause to frequent drinkers. A method for removing these toxic substances from wine is the use of lactic acid bacteria with mycotoxin-adsorption capacities; however, their use is limited since a matrix in which they can be immobilized, to remove them after use, is needed. In this study, L. plantarum (LP) was encapsulated in a polymeric matrix composed of polyvinyl alcohol (PVA) and alginate, forming alginate–PVA–LP (APLP) complexes. Then, these complexes were characterized, and assays of OTA and phenol removal from wines were performed. As a result, it was observed that the APLP complexes at a concentration of 0.5 g mL−1 removed over 50% of the OTA without substantially affecting the concentration of total phenols. In addition, it was determined that the presence of L. plantarum directly affected the ability to adsorb OTA from wines and did not decrease the total phenols. In conclusion, an alginate–PVA matrix allows immobilizing LP, and the complexes formed are an alternative for removing ochratoxin from contaminated wines.

A strain of Shigella flexneri producing bacteriocin was isolated from a patient with diarrhea. The main objective of this study was to isolate and partially characterize the bacteriocin. The producing microorganism was identified using biochemical, serological, and molecular methods. The lethal activity of the S. flexneri strain was studied using the drop method. This bacterial strain showed activity against different strains of E. coli and B. fragilis. Using immunological techniques, it was determined that S. flexneri belongs to serotype 2a, and by PCR, the presence of the ipaH plasmid was determined. By chromatographic techniques, it was determined that the bacteriocin is a peptide of high purity with a molecular weight of 66294.094 Da. The amino acid composition and sequence were determined by the Edman reaction, and a sequence of 619 amino acid residues was obtained. Only in five positions of this sequence, the amino acid glutamine changed to glutamic acid with respect to colicin U produced by S. boydii. From an ecological point of view, it could be assumed that SF1 bacteriocin contributes to eliminate some members of the normal microbiota of the human intestine, facilitating colonization and then producing the invasion process that characterizes the pathogenicity of Shigella.

The objective was to analyse the antibacterial ability of members of the intestinal microbiota of Oncorhynchus mykiss specimens on several bacterial target strains that contaminate food and cause disease in humans. Bacterial colonies from an intestinal portion of the 20 specimens of O. mykiss were obtained in different culture media. Several of the colonies showed antibacterial action on different target strains. The bacterial species with the highest antagonistic capacity were Hafnia alvei and Lactococcus lactis and the more susceptible target strains were Aeromonas hydrophila, Listeria monocytogenes and Escherichia coli. Moreover, it was shown that all the antibacterial substances were susceptible to the action of various proteolytic enzymes. The detection of substances of a proteinaceous nature, possibly bacteriocins produced by bacteria of the intestinal microbiota of O. mykiss, allows further study of these products to establish biotechnological developments in the area of health protection and food biopreservation.

Fundamento: la diabetes mellitus es una enfermedad de primera importancia en el mundo. Es un problema común de salud en la tercera edad y un factor de riesgo de ateroesclerosis. Objetivo: describir el comportamiento de algunos factores de riesgo de ateroesclerosis y enfermedades consecuentes en pacientes diabéticos de la tercera edad. Métodos: estudio de serie de casos, realizado durante el período de julio a noviembre del 2012 en 47 pacientes de la tercera edad con diabetes mellitus, pertenecientes al policlínico Rubén Batista Rubio de la provincia de Holguín. Las variables incluidas fueron: sexo, edad, factores de riesgo de ateroesclerosis y enfermedades consecuentes. Resultados: predominó el sexo femenino con un 72,30 %. El 57,44 % de la población estuvo en el grupo de 60 a 65 años. Los factores aterogénicos más frecuentes fueron: la hipertensión arterial con un 87,23 % y los altos niveles de colesterol con 74,47 %. La cardiopatía isquémica con 48,94 %, la enfermedad arterial periférica y la retinopatía, ambas con un 27, 66 %, fueron las enfermedades consecuentes a la ateroesclerosis más encontradas. Conclusiones: dentro los gerontes diabéticos predominaron las féminas y los que tenían entre 60 y 65 años, hipertensos y con altos niveles de colesterol. La cardiopatía isquémica, la enfermedad arterial periférica y la retinopatía emergieron como enfermedades consecuentes de la diabetes mellitus y la ateroesclerosis.

Taenia solium es un helminto aplanado responsable de la teniosis y de la cisticercosis humana, siendo esta última producida por el consumo de huevos infectivos. Los cisticercos pueden desarrollarse en diferentes tejidos del hombre, frecuentemente en el sistema nervioso central causando la neurocisticercosis (NCC). Para el diagnóstico de la NCC se requiere de una adecuada interpretación de datos clínicos, resultados de neuroimagen y pruebas serológicas. Sin embargo, las pruebas serológicas podrían mejorarse con el desarrollo de antígenos candidatos capaces de incrementar su sensibilidad y especificidad. En los últimos años se han descrito una serie de proteínas de superficie y de secreción de T. solium esenciales para la interacción parásito-hospedero. Una de estas familias son las cisteínoproteasas catepsinas L, las cuales cumplen un rol preponderante para el desarrollo y supervivencia del parásito, participando en la invasión tisular, la evasión de la respuesta inmune, el desenquistamiento y enquistamiento del cisticerco. Son consideradas como antígenos potenciales para el inmunodiagnóstico de la neurocisticercosis.

In Europe, many autochthonous grapevines (Vitis vinifera L.) are only cultivated at local scale, but play a very important economic role due to their strict relation with terroir and wine tipicity. In this study, it was pursued to evaluate the influence of several factors on performance of Moll, the main autochthonous white variety of Majorca, by means of the database coming from a clonal preselection. The effects of multiple virus infections, vintage and vineyard components were studied by univariate linear models and principal component analysis, starting from measurement of production and must quality parameters of several vines located in 14 vineyards belonging to two appellations during four consecutive years (2001-2004). Absence of multiple virus infections, double cordon system, high clay content and Useful Water Reserve in soils have enhanced vine production without inducing considerable alterations in sugar accumulation in berries and acidity. Moll variety presented great viticultural and oenological potentials. Fertile and deep soils should be preferred in order to maximize production. Also, the use of certified propagation material is strongly recommended. However, further investigations are required to optimize must quality by opportune managements. This study does not provide only essential information to improve Moll cultivation in Majorca, but it also represents a useful example to analyze grapevine varieties that are endemically infected by viruses. In fact, in such situations, it may be supposed an insidious interference by viruses on terroir and wine tipicity.

Introducción: en la actualidad la obesidad y el sobrepeso son un importante problema de salud para los niños y adolescentes cubanos. Objetivo: determinar algunos factores de riesgo asociados con malnutrición por exceso en adolescentes del policlínico Julio Grave de Peralta de la provincia Holguín durante el periodo de agosto del 2011 a febrero del 2012. Métodos: se realizó un estudio analítico y transversal. Se estudiaron 37 adolescentes entre 15-19 años. Las variables analizadas en el estudio fueron: sexo, evaluación nutricional, presión arterial, colesterol total y triglicéridos. Para el análisis comparativo se empleó el test de Chi cuadrado. En todos los casos, se trabajó con un nivel de significación de p < 0,05. Resultados: se encontró obesidad en el 24,32 % de los adolescentes y fue más frecuente en el sexo femenino. En el grupo de pacientes con malnutrición por exceso 12 presentaron antecedentes patológicos familiares de obesidad (80 %), X2 = 13,87. Los adolescentes con malnutrición por exceso tuvieron altos niveles de colesterol y triglicéridos. El 20 % de los adolescentes con malnutrición por exceso presentó hipertensión grado I. Se encontró asociación significativa entre la malnutrición por exceso y los niveles elevados de colesterol y triglicéridos. Conclusiones: los antecedentes patológicos familiares de obesidad, los niveles altos de colesterol y triglicéridos y las cifras tensionales elevadas, resultaron factores de riesgo asociados a la malnutrición por exceso en los adolescentes.

En el mundo existen más de 350 millones de portadores crónicos con hepatitis viral B, en el Perú la prevalencia de este virus es variada. Existen áreas hiperendémicas en la región Amazónica y en algunos valles de la vertiente oriental de los Andes tales como Abancay y Ayacucho. El objetivo de este estudio fue determinar preliminarmente los genotipos del virus de la hepatitis B (HBV) presentes en muestras serológicas de Ancash, Ayacucho, Lima, Loreto y Ucayali. El análisis de la secuencia de ADN parcial de la región S del genoma viral del HBV fue realizado a partir de doce sueros con antígeno e (HBeAg) positivos. El resultado de este análisis indica la presencia del genotipo F (subtipo adw4) en todas las muestras analizadas.

Objetivo: Determinar la presencia de Escheríchia coli en fluidos vaginales de mujeres con infección vaginal y analizar la susceptibilidad antimicrobiana. Método: Se estudiaron 425 muestras de mujeres con diagnóstico clínico de infección vaginal (casos) y 100 mujeres sanas (controles). Las muestras vaginales fueron estudiadas mediante los criterios de Amsel y Nugent. Se utilizaron diferentes metodologías para identificar: Trichomonas vaginalis, Candida albicans, Gardnerella vaginalis, Chlamydia trachomatis, Myco-plasma hominis, Urea plasma urealyticum, Neisseria gonorrhoeae, Mobiluncus sp., Streptococcus agalactiae, Enterococcus faecalis, enterobacterias, bacilos Gram negativo anaerobios estrictos, Lactobacillus sp. y Staphylococcus coagulasa negativo. Resultados: Se observaron 160 casos de vaginitis y 265 de vagi-nosis. En los primeros predominó C. albicans y T. vaginalis, aislándose 27 cepas de E. coli en los casos de vaginosis, G. vaginalis y E.E. coli fueron los más comunes. La mayor asociación se observó entre G. vaginalis y E. coli . En 47 casos se aisló únicamente E. coli , y en los controles se observaron 6 cepas de E. coli . El estudio caso-control demostró un OR: 4,7 (95% IC: 1,91-12,27). Sobre el 90% de las cepas aisladas de E. coli demostró sensibilidad a cefotaxima, ciprofloxacino y amikacina. Conclusión: E. coli de aislados monomicrobianos podría tener un rol potencial en la patogenia de la infección vaginalObjective: To determine the presence of Escheríchia E. coli vaginal fluids of women with vaginal infection and to study its antimicrobial susceptibility. Methods: 425 samples of women with clinical diagnosis of vaginal infection (cases) and 100 healthy women were studied (controls). The vaginal samples were studied by means of the criteria of Amsel and Nugent. Different methodologies were used to identify: Trichomonas vaginalis, Candida albicans, Gardnerella vaginalis, Chlamydia trachomatis, Mycoplasma hominis, Ureaplas-ma urealyticum, Neisseria gonorrhoeae, Mobiluncus sp., Streptococcus agalactiae, Enterococcus faecalis, enterobacterias, strict anaerobic Gram negative bacilli, Lactobacillus sp. and coagulase negative Staphylococcus. Results: 160 cases of vaginitis and 265 of vaginosis were observed. In vaginitis predominated C. albicans and T vaginalis, and were isolated 27 E.E. coli strains. In the bacterial vaginosis, G. vaginalis and E. coli were the most common. The greater association was observed between G. vaginalis and E. coli . In 47 cases singleE. coli was isolated. In the controls 6E. coli strains were observed. The study of case-control demonstrated a OR: 4.7 (95% Cl: 1.91-12.27). Isolated E. coli demonstrated sensitivity over 90% to cefotaxime, ciprofloxacin and amikacin. Conclusion: SingleE. coli isolated could have a potential role in the pathogenia of the vaginal infection

Objetivo: La lipoproteína de 43-kDa de Bartonella bacilliformis fue obtenida en su forma recombinante (rBbLppB) y purificada para evaluar su serorreactividad mediante ELISA. Materiales y métodos: Los niveles de anticuerpos IgG e IgM humanos en los sueros de pacientes con Bartonelosis confirmada y sueros de otras enfermedades (salmonelosis, Brucelosis y leptospirosis) frente a rBbLppB fueron evaluados por ELISA, se utilizó sueros de personas sanas como controles. Resultados: La sensibilidad y la especificidad del ELISA IgG fueron 70,4% y 90% respectivamente. Asimismo, la sensibilidad y especificidad de ELISA IgM fueron 85,2% y 90% respectivamente. Conclusiones: Estos resultados demuestran que el ELISA usando rBbLppB tiene una buena sensibilidad y especificidad y puede ser considerada como un buen antígeno para el diagnóstico de Bartonelosis causada por B. bacilliformis.

Objetivos. Clonar el gen de la flagelina A (flaA) de Bartonella bacilliformis, expresar y evaluar preliminarmente la seroreactividad de la proteína recombinante a sueros de pacientes con Bartonelosis por B. bacilliformis. Materiales y Métodos. Se diseñó una pareja de oligonucleótidos iniciadores -BbFlaA1 y BbFlaA2- para la amplificación del gen completo de la flagelina flaA de B. bacilliformis. El producto de amplificación obtenido se clonó en pGEM y luego se subclonó en el vector de expresión pGEX4T-1. Se indujo la expresión de la proteína de fusión rBbFlaA-GST con isopropil tio-β -D-galactosido (IPTG). La proteνna de fusiσn producida fue digerida con trombina para liberarla de GST. Finalmente, una prueba de ELISA fue estandarizada para detectar los anticuerpos IgG contra la proteína de fusión rBbFlaA-GST y rBbflaA libre de GST. Se evaluaron sueros de pacientes con diagnóstico de Bartonelosis por B. Bacilliformis (n= 30), sueros de individuos sanos (n= 20) y sueros de pacientes con otras enfermedades de posible reactividad cruzada; entre ellas, Brucelosis (n= 3), leptospirosis (n= 3) y salmonelosis (n=7). Resultados. Se determinó que para la expresión óptima en E. coli BL21 de la proteína de fusión rBbFlaA se requiere que el cultivo crezca en caldo LB/ampicilina a 30 °C suplementado con 2% de glucosa a partir de un preinóculo de 100 µL (crecido por toda la noche), hasta que alcance una densidad óptica de 1 OD600 y se induzca por dos horas con 2,5 mM de IPTG. Finalmente, el 57,6 % (17 de 30) sueros de pacientes con diagnóstico confirmado de bartonelosis reaccionaron con la proteína recombinante BbFlaA en el formato de ELISA. Conclusiones. Se logró expresar exitosamente en E. coli la proteína recombinante BbFlaA de B. bacilliformis, determinándose un protocolo de expresión y de purificación de rBbFlaA para la producción de esta proteína. Así también, el antígeno rBbFlaA es reconocido por anticuerpos de sueros de pacientes con Bartonelosis causada por B. bacilliformis.

Objetivos: Genotipificar los aislamientos de Bartonella bacilliformis a través de la amplificación de elementos repetitivos mediante el uso de ERIC-PCR y REP-PCR, y determinar si existe variabilidad genética entre aislamientos de varias zonas endémicas. Materiales y Métodos: Se evaluaron mediante el uso del ERIC-PCR y REP-PCR 17 aislamientos de B. bacilliformis de Lima, Cusco y Ancash. Los aislamientos fueron realizados durante los años 1998 y 1999. Para el análisis de los patrones de bandas se usó el software GelCompar 4,0. Resultados: Fueron identificados en los 17 aislamientos 10 genotipos. Los genotipos D, E y H fueron detectados en Cusco; mientras que los genotipos B, C, G, J e I en Lima; y el genotipo F en Ancash. Conclusiones: Nuestros resultados sugieren que REP-PCR y ERIC-PCR son métodos útiles para genotipificar aislamientos de B. bacilliformis. La variabilidad genética debe ser tomada en cuenta en estudios epidemiológicos y clínicos de Bartonelosis; así como el desarrollo de nuevas técnicas diagnósticas y de vacunas.

Introducción: El diagnóstico serológico de la leishmaniasis usando proteínas totales presenta reacciones cruzadas. La caracterización de nuevos antígenos de Leishmania mejorará el uso de herramientas serológicas en el diagnóstico de esta enfermedad. Objetivo: Caracterizar un nuevo antígeno de Leishmania. Materiales y métodos: Se seleccionó el bacteriófago T166-U19 de una biblioteca de cADN de L. (V.) braziliensis el cual es reactivo a mezclas de sueros de leishmaniasis cutánea y mucocutánea. El cADN del clon T166-U19 fue subclonado en el plásmido pGEX, luego secuenciado y la proteína recombinante fue expresada. La reactividad de esta proteína recombinante se evaluó por ELISA. Resultados: El cADN del clon T166- U19 presentó un marco de lectura abierto de 318 pb que traduce una proteína de 105 aminoácidos con 81,1%, 82,9% y 60,7% de identidad total con la proteína acídica ribosomal LiP de L. (L.) infantum, P2 de L. (L.) donovani, y P2 de T. cruzi, respectivamente. Además, la proteína recombinante presentó baja reactividad (50%) con sueros de pacientes con leishmaniosis, mientras que presentó reactividad cruzada con sueros de pacientes chagásicos. Conclusiones: Se caracterizó por primera vez la proteína acídica ribosomal P2B de L. (V.) braziliensis, y presentando baja reactividad con sueros de pacientes con leishmaniasis.

Objetivo: Diseñar una prueba de PCR para el diagnóstico de la Bartonelosis causada por Bartonella bacilliformis. Materiales y métodos: Se usó la secuencia del locus de invasión ialB para diseñar los oligonucleótidos ialBF y ialBR, además del ADN geonómico purificado de una cepa referencial de B. bacilliformis para estandarizar las condiciones de la prueba. Finalmente, la prueba fue preliminarmente evaluada con 12 cepas de B. bacilliormis aisladas en 3 áreas endémicas y 10 muestras de sangre total de pacientes con Bartonelosis confirmada. Resultados: La prueba detectó el ADN de aislamientos de B. bacilliformis de 3 áreas bartonelósicas endémicas del Perú: Ancash, Cuzco y Lima; mientras que no detectó el ADN de B. hensenlae, ni de B. vinsonii, ni de otras bacterias y parásitos. Además, esta prueba fue positiva para 10 muestras sanguíneas de pacientes con bartonelosis confirmada y negativa para 5 muestras de pacientes con malaria por P. falciparum. Conclusión: Esta prueba de PCR podría ser útil para el diagnóstico de la bartonelosis causada por B. bacilliformis.

Objetivo: Determinar la diversidad genética del gen que codifica la proteína rica en glutamato (GLURP) de Plasmodium falciparum en pacientes con malaria complicada y no complicada circulante en un área del departamento de Loreto, distrito de Maynas. Materiales y métodos: La diversidad genética fue analizada usando reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en 30 muestras sanguíneas de pacientes con malaria no complicada (MNC) y 46 con malaria grave complicada (MGC). Resultados: Ocho genotipos fueron detectados en pacientes con MNC (Genotipo I,II,III, IV,V, VI,VII y VIII ) y cuatro genotipos en los pacientes con MGC (Genotipo V,VI,VII,VIII). Asimismo, en 50% de las muestras con MNC fueron detectadas infecciones múltiples, a diferencia de las muestras de MGC en donde no se detectó infecciones múltiples. Conclusión: Existe una diversidad genética en esta región del gen GLURP de P. falciparum, para esa época (marzo 1998 - abril 1999) y esa área del país. En tal sentido, nuestros resultados podrían servir de base para llevar a cabo estudios epidemiológicos posteriores, ya que permitiría conocer la distribución de las cepas circulantes en nuestro país.

Another additional peculiarity in Leishmania will be discussed about of the amino acid divergence rate of three structural proteins: acidic ribosomal P1 and P2b proteins, and histone H3 by using multiple sequence alignment and dendrograms. These structural proteins present a high rate of divergence regarding to their homologous protein in Trypanosoma cruzi. At this regard, L. (V.) peruviana P1 and T. cruzi P1 showed 57.4% of divergence rate. Likewise, L. (V.) braziliensis histone H3 and acidic ribosomal P2 protein exhibited 31.8% and 41.7% respectively of rate of divergence in comparison with their homologous in T. cruzi.

El potencial diagnóstico de epitopes inmunodominantes seleccionados fue ensayado satisfactoriamente a fin de obtener una prueba serodiagnóstica alternativa para la Leishmaniasis Tegumentaria Americana. Dos proteínas recombinantes prometedoras de L. (v.) peruviana referidas como T-26-U2/T26-U4 fueron reconocidas por sueros individuales de pacientes con Leishmaniasis Tegumentaria Americana usando Western Blot. La sensibilidad de la prueba fue de 86% con sueros permanentes con Leishmaniasis peruana.

Objetivo: Estandarizar una prueba de PCR para la detección de Brucella spp. Materiales y métodos: Se usó oligonucleótidos reportados que amplifican la secuencia de 16S rRNA de Brucella spp. Fueron evaluados dos métodos de extracción de ADN: fenol-cloroformo-alcohol isoamílico y un kit comercial basado en columnas con afinidad. Para determinar la sensibilidad de la prueba se usó 8 cepas peruanas de Brucella y para determinar la especificidad de la prueba se usó otras cepas bacterianas peruanas de E. coli, Shigella, Proteus mirabilis, Salmonella aratyphi, Salmonella typhi, Citrobacter freundii y Vibrio cholerae. Resultados: Los 2 métodos de extracción de ADN evaluados fueron efectivos. La sensibilidad analítica de la prueba es alta, lográndose detectar 80 femtogramos de ADN de Brucella spp. purificado. Todas las cepas peruanas de Brucella spp. fueron detectadas por la prueba. Además, la prueba es negativa para cepas peruanas de otras especies bacterianas. Conclusión: Se ha estandarizado las condiciones de una prueba de PCR para la detección de cepas peruanas de Brucella spp., la cual es muy sensible y específica en el laboratorio.