Search

[ESP] Los métodos de detección de toxinas marinas basados en el estudio del efecto tóxico en cultivos celulares aportan información relevante respecto a la actividad tóxica de las toxinas y eventualmente contribuyen a describir su mecanismo de acción. Al igual que todas las metodologías de detección de toxinas, los ensayos de citotoxicidad necesitan de validaciones para convertirse en métodos de uso convencional. En éste trabajo abordamos la respuesta de células Neuro-2a (ATCC, CCL131) frente a diferentes estándares de toxinas marinas utilizando un método dependiente de ouabaina y veratridina (O/V). Este modelo celular, rico en canales de sodio, es un modelo habitualmente empleado para estudios de toxinas que actúan sobre estos canales. Con el fin de estudiar su aplicabilidad a otras toxinas, hemos realizado un estudio multi-toxínico. En las condiciones utilizadas en presencia de O/V se obtuvieron EC50s de 8,6 nM para la saxitoxina (bloqueadora de canales de sodio), 8,2 nM para la brevetoxina-3 y 36,9 nM para la brevetoxina-2 (activadoras de canales de sodio). Entre las toxinas que no actúan sobre canales de sodio, se produjo mortalidad en las células Neuro-2a sin tratamiento previo con O/V de forma dosis- dependiente, obteniéndose las siguientes EC50s: palitoxina 0,1nM, pectenotoxina-2 28,3 nM, ácido okadaico 21,9 nM y dinophysistoxina-1 20,6 nM. El ácido domoico no produjo mortalidad en las células Neuro-2a con o sin O/V. El modelo Neuro-2a se configura como una estrategia potente para el estudio de un amplio espectro de toxinas marinas. Al equipo de R.W. Dickey en el Gulf Coast Seafood Laboratory del FDA (Alabama, U.S.A).

7 pages, 1 table, 2 figures, Durante el invierno de 2007 se ha registrado un importante episodio de presencia de yesotoxina (YTX) en mejillones de la bahía de Alfacs, Tarragona. Durante este episodio, se detectó YTX en muestras de mejillón repartidas por los diferentes puntos del polígono de producción coincidiendo con una proliferación de Protoceratium reticulatum que alcanzó un máximo de 2.000 células L -1. Considerando las evidencias previas de presencia de YTX en la zona, y con el fin de mejorar la evaluación de toxinas lipofílicas en bivalvos, se ha procedido a implementar el bioensayo ratón específico para discriminar YTXs de otras t oxinas lipofílicas y se han analizado muestras por cromatografía de líquido acoplada a espectrometría de masas. Si bien se habían identificado con anerioridad YTXs en mejillón en esta zona y proliferaciones de P. reticulatum incluso a densidades más altas que las registradas en el evento descrito, este episodio constituye la primera evidencia en Catalunya de presencia de YTX con implicaciones claras en el programa de vigilancia de toxinas diarreicas en bivalvos, Este trabajo ha sido financiado por la Generalitat de Catalunya y por el INIA (Proyectos ACU-02-005 y RTA2006-00103-00-00)

[ESP] En este trabajo presentamos la caracterización de la toxicidad de una cepa de Gambierdiscus sp. procedente de las Islas Canarias mediante la utilización de cultivos celulares de neuroblastomas Neuro-2a. Los resultados obtenidos dan una toxicidad muy elevada del extracto bruto. La utilización de un activador específico del canal de sodio (Veratridina) y de un inhibidor de la bomba de sodio potasio (Ouabaina) aplicados conjuntamente con el extracto, permite aumentar la sensibilidad de la respuesta tóxica de las células Neuro-2a ante la presencia de toxinas neurotóxicas que actúan sobre canales de sodio (como las ciguatoxinas). La diferencia de respuesta tóxica obtenida con el extracto de Gambierdiscus sp. procedente de las Islas Canarias sin presencia de Ouabaina/Veratridina (IC50= 3,84 células mL-1 RPMI) o con presencia de Ouabaina/Veratridina (IC50= 2,04 células mL-1 RPMI) no es estadísticamente significativa (p > 0,05) pero la respuesta no descarta la posible presencia de neurotoxinas de tipo activadoras del canal de sodio. A Javier Fernández, de la Universidad de la Laguna, y a J. Franco del CSIC por su colaboración. Este trabajo ha sido financiado parcialmente con una beca predoctoral INIA (Ministerio Español de Educación y Ciencia).