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La resistencia antimicrobiana (RAM) comenzó a ser detectada poco después de que el uso de antimicrobianos (AM) se difundiera para el tratamiento de infecciones en seres humanos y animales. Sin embargo, durante los últimos 15 años se observó una aceleración de su emergencia y diseminación en microorganismos, especialmente en bacterias que afectan a personas y, sobre todo, asociada al abuso o mal uso de dichos fármacos. Las consecuencias de las infecciones por organismos resistentes incluyen desde una mayor duración de las infecciones hasta un incremento de la mortalidad causada por bacterias multirresistentes, que se estima actualmente en unos 700.000 casos por año a nivel mundial. EEA Rafaela Fil: Calvinho, Luis Fernando. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; Argentina

There is scarce information about the frequency and epidemiological and clinical features associated with the presence of Mycoplasma spp. in Argentine dairy herds. The objectives of this study were to develop a multiplex PCR for identifying M. bovis and M. canadense and to describe the frequency of Mycoplasma spp. isolated from clinical samples submitted to a diagnostic laboratory. Of a total of 1548 samples from intramammary infections, bulk tank milk and biological fluids, 38 Mycoplasma isolates were obtained. M. bovis, M. canadense, M. californicum and M. leachii were detected by using two multiplex PCRs, confirming their presence in clinical conditions in dairy cattle. The techniques used in the present study can be useful to broaden the knowledge about Mycoplasma infections in cattle, since the search for these organisms is not usually included in routine diagnoses. Existe poca información sobre la frecuencia, así como las características epidemiológicas y clínicas asociadas con la presencia de Mycoplasma en los rodeos lecheros argentinos. Los objetivos de este estudio fueron desarrollar una PCR multiplex para identificar M. bovis y M. canadense y describir la frecuencia de especies de Mycoplasma aisladas de muestras clínicas enviadas a un laboratorio de diagnóstico. De un total de 1.548 muestras de infecciones intramamarias, leche de tanque de frío y fluidos biológicos, se obtuvieron 38 aislamientos de Mycoplasma. Mediante 2 PCR multiplex se detectaron M. bovis, M. canadense, M. californicum y M. leachii, confirmando su presencia en síndromes clínicos en ganado lechero. Las técnicas utilizadas en el presente estudio pueden ser útiles para ampliar el conocimiento sobre las infecciones por Mycoplasma en bovinos, ya que la búsqueda de estos organismos no suele incluirse en los diagnósticos de rutina. EEA Rafaela Fil: Neder, Veronica Elizabeth. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; Argentina Fil: Neder, Veronica Elizabeth. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina Fil: Amadio, Ariel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; Argentina Fil: Amadio, Ariel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina Fil: Calvinho, Luis Fernando. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; Argentina Fil: Calvinho, Luis Fernando. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina Fil: Calvinho, Luis Fernando. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina

Staphylococcus aureus is one of the most prevalent major mastitis pathogens in dairy herds worldwide. Antimicrobial therapy is one of the bases of S. aureus mastitis control programmes, both for subclinical cases at drying off and clinical cases during lactation EEA Rafaela Fil: Molineri, Ana Ines. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; Argentina Fil: Neder, Veronica Elizabeth. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; Argentina Fil: Calvinho, Luis Fernando. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; Argentina

The development of novel vaccines requires the design of new adjuvants able to give long lasting immune responses. Our aim was to obtain cationic liposomes as adjuvants by an industry-suitable method, and evaluate them using bovine serum albumin (BSA) as immunogen and CpG oligonucleotides with phosphodiesther bonds, as immunostimulants. Liposomes (Lip) were prepared with dipalmitoylphosphatidylcholine, cholesterol and stearylamine by Ethanol Injection method. Immune response was assessed by immunization of Balb/c mice with: Lip+BSA, Lip+BSA+CpG, CpG+BSA or aluminium hydroxide (Al(OH)3+BSA). Liposomal formulations were able to induce high antibody levels. Lip+BSA+CpG led to higher IgG levels than Lip+BSA (p

Se evaluaron los efectos de tres rutinas de preparación de las ubres previo al ordeño, mediante el recuento bacteriano en leche en cabras del tambo del INTA-Salta. El muestreo comprendió un período seco (PS) y un período de lluvias (PL). Se formaron 3 grupos de 9 cabras para evaluar diferentes rutinas preordeño: GSL, sin lavado preordeñe; GCL, lavado con agua preordeñe y secado con toallas descartables; GPD, predipping y secado con toallas descartables. Se realizó recuento de microorganismos coliformes (RC) y recuento de mesófilos (RM). Entre grupos, solo se observaron diferencias en el PL entre los RC (p

La mastitis bovina causa cuantiosas pérdidas económicas al productor lechero y la industria láctea a nivel mundial. Staphylococcus aureus es uno de los principales patógenos mayores causantes de infecciones intramamarias, siendo la terapia antibiótica uno de los pilares para el control de esta enfermedad. El objetivo de este estudio fue evaluar la susceptibilidad de 96 cepas de Staphylococcus aureus frente a antimicrobianos utilizados frecuentemente en la terapia de mastitis bovina. Los aislamientos provinieron de 40 establecimientos lecheros de la cuenca central de la Argentina. Se utilizó el método de difusión en agar, evaluándose los siguientes antimicrobianos: penicilina G, eritromicina, amoxicilina + ac clavulánico, ceftiofur, cefalexina + kanamicina, cefquinoma, cefalexina, framicetina + penicilina G. Se encontraron los mayores niveles de resistencia frente a penicilina (28%), cefalexina + kanamicina (14%) y framicetina + penicilina (18%). El 7% de las cepas presentaron resistencia a más de un antibiótico; el 3% a eritromicina y penicilina y el 2% a amoxicilina+ ac clavulánico y penicilina. No se observaron cepas resistentes a oxacilina y la mayoría de los aislados fueron sensibles a las cefalosporinas evaluadas: cefalexina, ceftiofur y cefquinoma. Este estudio brinda información de utilidad para la selección de antibióticos y el monitoreo de la evolución de la resistencia a este organismo patógeno Bovine mastitis causes great economic loses both to dairy farmers and industry worldwide. Staphylococcus aureus is one of the most prevalent major mastitis pathogens; being antibiotic therapy one of the basis of mastitis control. Susceptibility of 96 Staphylococcus aureus against frequently used for treating bovine mastitis was evaluated. The isolates were obtained from 40 dairy farms located in the central dairy area of Argentina. The disk diffusion method was used and the following antibiotics were tested: penicillin G, erythromycin, amoxicilin + clavulanic acid, ceftiofur, cephalexin + kanamycin, cefquinome, cephalexin, framycetin + penicillin G. The highest levels of resistance were observed against penicillin (28%), cephalexin+kanamycin (14%) and framycetin+penicillin (18%). Seven percent of isolates showed resistance to more than one antibiotic; 3% to erythromycin and penicillin and 2% to amoxicillin + clavulanic acid and penicillin. No isolates resistant to oxacillin were detected and most isolates were susceptible against cephalosporins tested: cephalexin, ceftiofur and cefquinome. This study provides information both to aid in antibiotic selection and for monitoring evolution of resistance patterns against this pathogen. EEA Rafaela Fil: Neder, Veronica Elizabeth. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; Argentina Fil: Araujo, L. Universidad del Salvador. Facultad de Veterinaria; Argentina Fil: Gianre, Vilma Rita. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; Argentina. Fil: Calvinho, Luis Fernando. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; Argentina

We explored the relationship between the level of bovine leukemia virus antibodies and provirus load during natural infection. For that purpose, a set of 50 blood and milk paired samples were analyzed for the presence of bovine leukemia virus provirus and antibodies. Additionally, provirus load and antibody titers were measured and the relationship between these variables was investigated. Bovine leukemia provirus was detected in 59% of milk samples and a negative correlation was observed between the level of milk provirus load and milk antibody titers. By the consumption of raw milk, calves might be exposed to bovine leukemia virus favoring the perinatal transmission of this disease. Fil: Jaworski, Juan Pablo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina Fil: Porta, Natalia Gabriela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina Fil: Gutiérrez, Gerónimo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina Fil: Politzki, Romina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; Argentina Fil: Alvarez, Irene. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina Fil: Galarza, Roxana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; Argentina Fil: Abdala, Alejandro Ariel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; Argentina Fil: Calvinho, Luis Fernando. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; Argentina Fil: Trono, Karina Gabriela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina

This study aimed to determine the clonal relationship among 137 Streptococcus uberis isolates from bovine milk with subclinical or clinical mastitis in Argentina and to assess the prevalence and conservation of pauA and sua genes. This information is critical for the rational design of a vaccine for the prevention of bovine mastitis caused by S. uberis. The isolates were typed by random amplified polymorphic DNA (RAPD) analysis and by pulsed-field gel electrophoresis (PFGE). The 137 isolates exhibited 61 different PFGE types and 25 distinct RAPD profiles. Simpson's diversity index was calculated both for PFGE (0.983) and for RAPD (0.941), showing a high discriminatory power in both techniques. The analysis of the relationship between pairs of isolates showed 92.6 % concordance between both techniques indicating that any given pair of isolates distinguished by one method tended to be distinguished by the other. The prevalence of the sua and pauA genes was 97.8 % (134/137) and 94.9 % (130/137), respectively. Nucleotide and amino acid sequences of the sua and pauA genes from 20 S. uberis selected isolates, based on their PFGE and RAPD types and geographical origin, showed an identity between 95 % and 100 % with respect to all reference sequences registered in GenBank. These results demonstrate that, in spite of S. uberis clonal diversity, the sua and pauA genes are prevalent and highly conserved, showing their importance to be included in future vaccine studies to prevent S. uberis bovine mastitis. Este estudio pretendió determinar la relación clonal entre 137 aislamientos de S. uberis obtenidos de leche de bovinos con mastitis clínica o subclínica en la Argentina, como así también la prevalencia y la conservación de los genes sua y PauA entre dichos aislamientos. Esta información es crítica para el diseño racional de una vacuna que prevenga la mastitis bovina por S. uberis. Los aislamientos se tipificaron molecularmente por amplificación al azar del ADN polimórfico (RAPD) y mediante electroforesis de campos pulsados (PFGE). Los 137 aislamientos mostraron 61 pulsotipos mediante PFGE y 25 tipos de RAPD diferentes. Los índices de Simpson calculados fueron 0,983 por PFGE y 0,941 por RAPD; esto evidencia el elevado poder discriminatorio de ambas técnicas. El análisis de la relación entre pares de aislamientos mostró un 92,6 % de concordancia entre ambas técnicas, lo que indica que cualquier par de aislamientos que fue distinguido por un método tendió a ser distinguido por el otro. La prevalencia de los genes sua y puaA fue del 97,8 % (134/137) y 94,9 % (130/137), respectivamente. Las secuencias de nucleótidos y de aminoácidos codificados por los genes sua y pauA de los 20 aislamientos de S. uberis seleccionados sobre la base de su tipo de PFGE y RAPD y origen geográfico tuvieron un porcentaje de identidad de entre 95 % y 100 % con respecto a todas las secuencias de referencia registradas en GenBank. Estos resultados demuestran que, a pesar de la diversidad clonal de S. uberis, los genes sua y pauA son prevalentes y están altamente conservados y deberían ser incluidos en futuros estudios de vacunas para prevenir mastitis bovina causada por S. uberis. EEA Rafaela Fil: Perrig, Melina Soledad. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas. Laboratorio de Tecnología Inmunológica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina Fil: Ambroggio, Maria Belen. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas. Laboratorio de Tecnología Inmunológica; Argentina Fil: Buzzola, Fernanda R. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica; Argentina Fil: Marcipar, Ivan Sergio. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas. Laboratorio de Tecnología Inmunológica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina Fil: Calvinho, Luis Fernando. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina Fil: Veaute, Carolina Melania Isabel. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas. Laboratorio de Tecnología Inmunológica; Argentina Fil: Barbagelata, Maria Sol. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas. Laboratorio de Tecnología Inmunológica; Argentina

Staphylococcus aureus es el principal agente causante de mastitis bovina en Argentina y en el mundo. Esta bacteria ocasiona infecciones crónicas que generan importantes pérdidas a los productores y la industria lechera. El objetivo de este artículo es caracterizar los mecanismos que intervienen en la infección causada por S. aureus en la glándula mamaria bovina, evaluando dos aspectos diferentes del proceso infeccioso: por un lado, lo vinculado con la respuesta inmune innata por parte del hospedador, y por otro, la capacidad de la bacteria para evadir el sistema inmune e interactuar con diferentes tipos celulares. La exploración de la interacción de S. aureus con el sistema inmune de la glándula mamaria bovina permitirá identificar blancos para delinear nuevas alternativas preventivas o curativas, que contribuyan a evitar o eliminar las infecciones causadas por este organismo. Staphylococcus aureus is the pathogen most frequently isolated from bovine mastitis worldwide, causing chronic intramammary infections that limit profitable dairying. The objective of this article is to characterize the mechanisms involved in S. aureus mammary gland infections considering two different aspects of the infectious process; on the one hand, the aspects involved in the host innate immune response and on the other hand, the capacity of this organism to evade the immune system and interact with different cell types. The exploration of S. aureus interactions with the immune response of bovine mammary gland will help identify targets to outline new preventive or curative alternatives for intramammary infections caused by this organism. Fil: Pereyra, Elizabet Amanda Lorena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Laboratorio de Biología Celular y Molecular Aplicada; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina Fil: Dallard, Bibiana Elisabet. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Laboratorio de Biología Celular y Molecular Aplicada; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina Fil: Calvinho, Luis Fernando. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Clínicas; Argentina

The objective of this study was to assess association between clinical, subclinical mastitis, body condition score and the reproductive performance of cows under seasonally calving conditions in a pasture-based management system. Data from 182 cows calved during 2008 were analyzed. Chi-square and logistic regression were performed considering pregnancy at the end of breeding season and number of services as dependent variables, whereas clinical and subclinical mastitis and other variables related to the animal that could have an effect on the dependent variables (e.g. parity, BCS, concurrent diseases) were considered as independent variables. Lactation number, calving difficulty, interval from calving to the beginning of breeding season and body condition score had a significant effect on pregnancy at the end of breeding season. Cows with one or two lactations (P = 0.031), those with no difficulty at calving (P = 0.003), those with more days from calving to the beginning of breeding season (P = 0.001), and those with body condition score > 2.5 (P = 0.007) were most likely to become pregnant. Subclinical mastitis affected reproductive performance increasing the number of services (P = 0.03). Also, breeding season influenced number of services, since summer-calving cows needed more services to become pregnant (P = 0.046). Clinical mastitis was not associated with pregnancy as a final measure of reproductive performance (P = 0.863). Although subclinical mastitis influenced reproductive performance, several parameters related to reproductive and nutritional management, significantly affected the outcome variables under experimental conditions of this study. This information can be valuable to improve reproductive performance in similar management systems. El objetivo de este trabajo fue determinar asociación entre mastitis clínicas, subclínicas y condición corporal con la performance reproductiva de vacas en un sistema de partos estacional bajo condiciones de pastoreo. Se analizó información de 182 vacas paridas durante 2008. Se realizó Chi cuadrado y regresión logística con preñez al final de la temporada de servicios y número de servicios como variables dependientes. Las mastitis clínicas, subclínicas y la condición corporal, así como otras posibles variables asociadas fueron analizadas como variables independientes. Número de lactancia, tipo de parto, intervalo entre parto a inicio de temporada de servicio y condición corporal estuvieron asociadas con preñez. Las vacas con una o dos lactancias (P = 0,031), aquellas sin problemas en el parto (P = 0,003) y las que tuvieron mayor cantidad de días entre el parto y el inicio de la temporada de servicios (P = 0.001) y las que tuvieron una condición corporal > 2.5 (P = 0.007) tuvieron más probabilidad de quedar preñadas. Las mastitis subclínicas afectaron la performance reproductiva aumentando el número de servicios (P = 0.03). Además la temporada de servicios influyó sobre el número de servicios recibidos por vaca, ya que aquellas paridas en verano necesitaron más servicios para quedar preñadas (P = 0.046). Las mastitis clínicas no estuvieron asociadas con preñez (P = 0.863). La información obtenida puede ser utilizada para mejorar la performance reproductiva de rodeos bajo condiciones pastoriles y sistemas de servicios estacionados. EEA Rafaela Fil: Gómez-Cifuentes, C.I. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina Fil: Molineri, Ana Ines. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; Argentina Fil: Signorini, Marcelo. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina Fil: Scandolo Lucini, Daniel Edgardo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; Argentina Fil: Calvinho, Luis Fernando. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina

Staphylococcus aureus es el microorganismo causante de mastitis bovina más prevalente en Argentina y en el mundo. La falta de efectividad frente a este organismo de los métodos tradicionales de control, basados en la higiene y la terapia antibiótica, ha conducido a la búsqueda de alternativas para prevenir la enfermedad. Una de ellas es la manipulación de los mecanismos defensivos del huésped mediante vacunación. La identificación de los factores de virulencia que estimulan las defensas del huésped es fundamental para el desarrollo racional de inmunógenos. S. aureus posee múltiples factores de virulencia que interactúan con el huésped en distintas etapas de la infección mamaria; algunos de ellos han mostrado capacidad de generar una respuesta inmune benéfica para el huésped. El objetivo de este artículo es revisar conceptos de estructura, función y utilización como inmunógenos de los factores de virulencia de S. aureus considerados como más relevantes en las principales etapas de la infección intramamaria. Staphylococcus aureus is the most prevalent mastitis pathogen in Argentina and worldwide. Lack of effectiveness of traditional control measures based on milking hygiene and antibiotic therapy against this organism has led to the development of alternatives directed to prevent the disease. Among them, the manipulation of host immune mechanisms through vaccination has been explored. The identification of virulence factors able to stimulate host immune defenses is key to developing a rational vaccine. S. aureus has multiple virulence factors that interact with the host at different stages of an intramammary infection. The use of some of these factors as immunogens has been shown to elicit protective responses in the host. The structure, function, and use as immunogens of S. aureus virulence factors considered to be relevant at different stages of intrammamary infections caused by this organism are reviewed in this article. EEA Rafaela Fil: Camussone, Cecilia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Fil: Calvinho, Luis Fernando. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; Argentina

Staphylococcus aureus (n=157) isolated from intramammary infections in Argentine dairy areas were evaluated for presence of cap5 and cap8 loci. Isolates carrying cap5 and cap8 were serotyped using specific antisera. Sixty four percent of the isolates were genotyped as cap5 or cap8 and 50% of them expressed CP5 or 8. Fil: Camussone, Cecilia María. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria Eea, Rafaela; Argentina Fil: Rejf, Paula Karina. Universidad Nacional del Litoral; Argentina Fil: Pujato, Nazarena. Universidad Nacional del Litoral; Argentina Fil: Schwab, A.. Universidad Nacional del Litoral; Argentina Fil: Marcipar, Iván Sergio. Universidad Nacional del Litoral; Argentina Fil: Calvinho, Luis Fernando. Universidad Nacional del Litoral; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria Eea, Rafaela; Argentina

El objetivo fue caracterizar la calidad bacteriológica de la leche de tanque producida en 27 establecimientos lecheros ubicados en diferentes cuencas lecheras de Argentina y determinar la correlación entre los grupos bacterianos analizados. Se tomaron muestras de leche de tanque a las cuales se les realizó el recuento de mesófilos totales (RMT), coliformes (RCT), termodúricos (ROT), psicrotrofos totales, proteolíticos y lipolíticos, detección de Salmonella spp. y Escherichia coli. La correlación entre el recuento de los microorganismos asociados con fuentes de contaminación fue baja. Una alta proporción de las muestras presentaron RMT (64,4%), RCT (30,3%) y ROT (49,4%) que excedieron los valores para una leche de buena calidad microbiológica. El 1,1% superó los valores de RMT fijados en la actualidad por el CAA. No se aisló Salmonella spp., aunque la mitad de las muestras fueron positivas para E. coli. Dada la diversidad bacteriana contaminante presente en la leche almacenada en tanques de frío, deben examinarse varios grupos bacterianos en conjunto para realizar un diagnóstico y determinar las fuentes potenciales de contaminación y de esta forma realizar las acciones para remediar las desviaciones Fil: Molineri, Ana Inés. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; Argentina Fil: Signorini Porchietto, Marcelo Lisandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina Fil: Cuatrin, Alejandra Lorena. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; Argentina Fil: Canavesio, Vanesa. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; Argentina Fil: Neder, Veronica. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; Argentina Fil: Russi, Norma Beatriz. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina Fil: Bonazza, Julieta. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina Fil: Calvinho, Luis Fernando. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina

CAPÍTULO 1: Conceptos generales de la estructuración del sistema inmune. Transferencia de inmunidad pasiva. Calostro. Especies estudiadas: motivaciones para su análisis. Fallas en la transferencia pasiva de inmunidad. Inmunoglobulinas. Protección al neonato a través de la inmunización materna. -- CAPÍTULO 2: Material y Método. Análisis estadístico. -- CAPÍTULO 3: Transferencia de inmunoglobulina G de madres a potrillos de raza Polo Argentino. -- CAPÍTULO 4: Transferencia de inmunoglobulina G de madres a cabritos de raza Anglo Nubian. -- CAPÍTULO 5: Transferencia de inmunoglobulina G de madres a tekes (Lama glama). -- CAPÍTULO 6: Respuesta de anticuerpos específicos en cabras y transferencia al neonato. Modelo vaccinal propuesto para un antígeno específico. -- CAPÍTULO 7: Transferencia de inmunoglobulina G en equinos, caprinos y llamas. Estudio comparativo entre especies. Relación entre la concentración de IgG en suero y calostro de las madres. Relación entre la concentración de IgG en calostro de las madres y suero de las crías a las 24 hs posparto. Relación entre la concentración de IgG en suero de las madres al momento del parto y suero de las crías a las 24 hs posparto. Cinética de Ig G en potrillos, cabritos y tekes desde las 0 hs de vida hasta los 90 días., Fil: Auad, Jordana. Universidad Católica de Córdoba. Facultad de Ciencias Agropecuarias; Argentina.

Fil: Neder, Verónica Elizabeth. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Los Mycoplasma pertenecen a la clase Mollicutes y son los microorganismos procariotas autoreplicables más pequeños que existen en la naturaleza. Estos organismos carecen de pared celular y tienen una limitada capacidad biosintética, lo cual hace necesario una estricta dependencia del huésped para su nutrición y refugio. Los Mycoplasma son habitantes de las superficies mucosas respiratoria, urogenital, conjuntival, el tracto gatrointestinal y glándula mamaria, pudiendo causar enfermedad respiratoria, otitis, mastitis, artritis, enfermedad reproductiva, meningitis y conjuntivitis en bovinos. Existen más de once especies de Mycoplasma que se han aislado de bovinos, entre ellas, M. bovis se considera la más prevalente en los EE.UU. y en algunos países de Europa. Por lo tanto, la mayoría de la información actual proviene de reportes de casos y trabajos de investigación realizados sobre esta especie. El objetivo general de este trabajo fue determinar las especies de Mycoplasma que producen infecciones en el ganado bovino en Argentina y desarrollar un método de identificación de las especies prevalentes. Para ello, se realizó una búsqueda del agente infeccioso en muestras de leche de tanque, leche de vaca individual y órganos de terneros. Posteriormente se llevó a cabo la puesta a punto de dos técnicas de MULTIPLEX-PCR para la identificación de M. bovis, M. californicum, M. canadense y M. leacchi. Es la primera vez que se reportan el aislamiento de M. leacchi en Argentina. Este desarrollo facilitara la identificación de las especies de Mycoplasma más frecuentemente aisladas de infecciones en ganado lechero. Mycoplasma belong to the class Mollicutes and are the smallest self-replicating prokaryotic microorganisms that exist in nature. These organisms lack the cell wall and have a limited biosynthetic capacity, which determines a strict dependence on the host for their nutrition and shelter. Mycoplasma are inhabitants of the respiratory, urogenital, conjunctival mucosal surfaces, gatrointestinal tract and mammary gland; being able to cause respiratory disease, otitis, mastitis, arthritis, reproductive disease, meningitis and conjunctivitis. There are more than eleven species of Mycoplasma that have been isolated from cattle, among them, M. bovis is considered the most prevalent in the USA and in some European countries. Therefore, most of the current information comes from case reports and research work on this species. The general objective of this work was to determine the species of Mycoplasma that produce infections in dairy cattle in Argentina and to develop a method of identification of the most prevalent species. For this purpose, a search of the infectious agent was carried out on samples of bulk tank milk, individual cow's milk and calf organs. Then, the organisms were identified to species level and two techniques of MULTIPLEX-PCR were developed, through which M. bovis, M. californicum, M. canadense and M. leacchi could be identified in a simple way. This is the first report of isolation of M. leacchi from diseased cattle in Argentina. This development will facilitate the characterization of Mycoplasma species most frequently isolated from infections in dairy cattle. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria

Tesis para obtener el grado de Doctor en el área Ciencias Veterinarias, de la Universidad Nacional del Litoral, en 2016 La mastitis es considerada la patología que produce mayores pérdidas económicas para la industria láctea en general ya que produce una disminución en la producción, afecta la calidad de la leche, la tasa de preñez, posee altos costos de diagnóstico y tratamiento, y reduce la vida útil del animal en producción. La resistencia a mastitis es un rasgo complejo que depende de componentes genéticos, ambientales y fisiológicos. Las limitaciones de las medidas clásicas de control han llevado a la búsqueda de alternativas para reducir al mínimo el uso de antibióticos, siendo una de ellas la selección de animales naturalmente resistentes. El recuento de células somáticas (RCS) en leche está directamente relacionado con el nivel de inflamación en la ubre. En este trabajo de tesis se usaron dos estrategias: 1) identificar polimorfismos en genes candidatos (seleccionados en base a su función biológica, fisiológica, funcional, o evidencia previa de asociación con la enfermedad) y 2) utilizar un panel de más de 50.000 marcadores de tipo SNP distribuidos uniformemente en el genoma, a fin de identificar regiones cromosómicas asociadas a la variación en el score de células somáticas (SCS), en un estudio de asociación de genoma completo (GWAS, Genome Wide Association Study). Los diferentes análisis se identificaron 8 marcadores significativamente asociados con el SCS. Se confirmó también que el SCS está influenciado por múltiples loci distribuidos por todo el genoma. Estos resultados contribuyen a obtener un mejor conocimiento sobre las regiones genómicas que influyen en el SCS en rodeos lecheros argentinos. Mastitis is considered to be the pathology that produces the most economic losses for both, the producer and the dairy industry, causing a decrease in production, affecting the quality of milk, the pregnancy rate, and having high costs for diagnosis and treatment as well as reducing the productive life of the animal. Mastitis control programs based on reducing the number of new infections and limiting the duration of existing infections by hygienic practice and using antibiotics has shown mixed efficacy against different pathogens. These limitations promoted the search for alternatives to minimize the use of antibiotics, by stimulating the animal’s defense systems or by selecting animals showing natural resistance to infections. In this thesis two strategies were used: 1) to identify polymorphisms in candidate genes (based on known biological, physiological, or functional relevance to the disease) and 2) use a panel of more than 50,000 SNP markers evenly distributed throughout the bovine genome in order to identify chromosomal regions associated with variation in somatic cell score (SCS) in a Genome Wide Association Study (GWAS). In the association analysis, eight different markers were found significantly associated with the SCS. This analysis confirmed that the SCS is influenced by multiple loci distributed throughout the genome, each contributing a relatively small effect. These results contributed to a better understanding of the genomic regions influencing the SCS in Argentine dairy herds and together with the use of molecular markers may contribute significantly to the design of better selection programs. EEA Rafaela Fil: Nani, Juan Pablo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; Argentina

Fil: Pujato, Nazarena. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina. La mastitis bovina es una inflamación de las glándulas mamarias que causa grandes pérdidas económicas en el sector lácteo. Staphylococcus aureus (S. aureus) es el principal causante de mastitis en Argentina. Debido a la ineficacia de los programas de control, surge como objetivo de esta tesis desarrollar una vacuna multicomponente contra la mastitis bovina causada por Staphylococcus aureus (S. aureus), principal causante de mastitis en Argentina. Se seleccionaron diferentes moléculas bacterianas involucradas en etapas sucesivas de la infección: las proteínas recombinantes ClfA, FnBPA, IsdH, Btox y los polisacáridos capsulares purificados CP5, CP8. Estas se formularon con el adyuvante de nueva generación ISCOMATRIX, ampliamente descripto por su capacidad de estimular respuestas inmunes robustas en diferentes modelos animales. La inmunización de novillas preñadas generó altos niveles de IgGtotal, IgG1 and IgG2 en sangre y leche durante los primeros meses posteriores al parto, el período de mayor susceptibilidad a las infecciones bacterianas. Estos anticuerpos fueron capaces de neutralizar los antígenos blanco, de reducir significativamente la internalización de S. aureus a células MAC-T y de promover la fagocitosis. Sin embargo, queda por definir la contribución de CP5 y CP8 en la inmunidad generada por la vacuna. Estos resultados sugieren que la inmunización de bovinos contibuiría a inhibir distintas etapas de la infección, impidiendo la invasión de la glándula mamaria, reduciendo el daño al huésped y promoviendo la eliminación de la bacteria. Esta vacuna es un candidato prometedor que merece continuar siendo evaluada para determinar su efectividad contra la mastitis causada por S. aureus. Bovine mastitis is a mammary gland inflammation, causing major economic losses to producers and dairy industry. Shortcomings in control programs have encouraged the development of vaccines against the disease. The aim of this thesis was to develop a multicomponent vaccine against bovine mastitis caused by Staphylococcus aureus (S. aureus), the main causative agent of mastitis in Argentina. This work included the production of each antigen, assessment of their immunogenicity in mice and evaluation of the multicomponent vaccine in heifers. Formulation included different bacterial antigens involved in successive steps of the infection: the recombinant proteins ClfA, FnBPA, IsdH, Btox and the purified capsular polysaccharides CP5, CP8. Since subunit vaccines are poor immunogens, selection of an appropriate adjuvant is crucial. Here, we used a new generation adjuvant, ISCOMATRIX, widely report to trigger robust immune responses in different animal models. Immunization of pregnant heifers generated high levels of IgGtotal, IgG1 and IgG2 in blood and milk during the first months post-calving, the most susceptible period to acquire bacterial infections. Humoral response effectively neutralized each vaccine target, significantly reduced S. aureus internalization into MAC-T cells and promoted phagocytosis. However, the contribution of CP5 and CP8 to vaccine-induced immunity remains to be tested.These results suggest that immunization of heifers might inhibit different stages of bacterial infection, through inhibiting mammary gland invasion, reducing host damage and promoting bacteria elimination. The vaccine is a valuable candidate that merits further experimental challenges to determine its effectiveness against S. aureus infections. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas Fondo Nacional de Ciencia y Técnica

Fil: Pereyra, Elizabet Amanda Lorena. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Staphylococcus aureus es el principal agente causante de mastitis bovina en Argentina y en el mundo. Esta bacteria ocasiona infecciones crónicas que generan importantes pérdidas a los productores y la industria lechera. El objetivo general de esta tesis fue investigar aspectos de la interacción patógeno-hospedador y caracterizar la respuesta inmune inducida, durante la infección mamaria experimental en un modelo murino, con cepas de S. aureus seleccionadas según criterios clínicos, epidemiológicos, fenotípicos y genotípicos que permitan establecer diferencias y asociaciones entre las mismas. Se realizaron ensayos in vitro en células epiteliales mamarias bovinas a los fines de estudiar la interacción patógeno-hospedador. Por otra parte, se realizaron ensayos in vivo desarrollando un modelo de mastitis en ratón a los fines de caracterizar aspectos de la respuesta inmune del hospedador frente a la infección con bacterias diferenciadas en base a su comportamiento clínico y a criterios fenotípicos y genotípicos. Los aislados procedentes de infecciones intramamarias (IIM) clínicas y subclínicas se agruparon en diferentes pulsotipos demostrando una elevada diversidad genética. La invasión al epitelio mamario y la expresión de genes de adherencia y formación de biofilm se encontró ligada a cada aislado de S. aureus, sin mostrar asociación con el tipo de infección establecida en la glándula mamaria bovina. Las velocidades de crecimiento en cultivo se asociaron con las características de la IIM. La respuesta inmune del hospedador fue diferente para cada cepa evaluada reflejando el comportamiento clínico observado en bovinos. Los resultados obtenidos aportan nuevos conocimientos sobre la interacción patógeno-hospedador a nivel de la glándula mamaria y pueden ser de utilidad al momento de planificar la formulación de compuestos inmunoprofilácticos contra la mastitis bovina Staphylococcus aureus is the major causative agent of bovine mastitis in Argentina and the world. This microorganism causes chronic infections that generate significant losses to farmers and the dairy industry. The overall objective of this thesis was to investigate aspects of the host-pathogen interaction and characterize the induced immune response during experimental mammary infection in a mouse model, with strains of S. aureus selected based on clinical criteria, epidemiologic, phenotypic and genotypic that establishes differences and associations between them. In vitro assays were performed on bovine mammary epithelial cells in order to study the host-pathogen interaction. Moreover, in vivo studies were conducted to develop a model of mastitis in mouse in order to characterize aspects of the host immune response against infection with bacteria differentiated based on their clinical behavior and genotypic and phenotypic criteria. The isolated from clinical and subclinical intramammary infections (IMI) were grouped into different pulsotypes showing a high genetic diversity. The invasion of mammary epithelium and expression of adhesion and biofilm genes was linked to each isolated of S. aureus, showing no association with the type of infection established in the bovine mammary gland. Rates of growth in culture were associated with the characteristics of the IMI. The host immune response was different for each strain evaluated reflecting the clinical behavior observed in cattle. The findings provide new insights into host-pathogen interactions at the level of the mammary gland and can be helpful when planning the development of immune prophylactics compounds against bovine mastitis. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas

En la actualidad las empresas productoras de alimentos deben cumplir una serie de condiciones higiénicas sanitarias específicas, exigidas y reguladas por los entes gubernamentales y oficiales tanto a nivel local, nacional, regional e internacional; a tal punto que en algunos casos implican trabas pararancelarias o de libre comercialización. Debido a esto se recomienda a las industrias alimentarias implementar un programa específico de autocontrol de Análisis de Peligros y Puntos de Control Crítico (HACCP).Previamente se debe proceder a desarrollar requisitos previos, como son las Buenas Prácticas de Manufactura (BPM) y los Procedimientos Operativos Estandarizados de Saneamiento (POES). El objetivo general que se persiguió en este trabajo fue diseñar e implementar un sistema de gestión integral de inocuidad alimentaria, con procesos controlados de producción, de una planta elaboradora de alimentos balanceados para la nutrición animal. El proyecto de trabajo desarrollado para llegar al Sistema de Gestión de Inocuidad Alimentaria consistió en el diseño e implementación de pre-requisitos de trabajo, auditoría interna, cronograma de actividades, desarrollo de los puntos de control, diseño del plan de análisis de peligros y puntos críticos de control, implementación del citado plan, auditoria final interna y externa por ente de certificación y posterior certificación. Con el diseño a medida o específico, su implementación y posterior certificación del sistema de autocontrol, se logra acrecentar la confianza de todos los que participan en la cadena agroalimentaria (producción primaria, laboratorios, fábricas de alimento balanceados, producciones animales, frigoríficos y empacadores, exportadores, cadenas de supermercados) y en especial al consumidor final., Fil: Gambaudo, Sebastián. Universidad Católica de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina

Fil: Camussone, Cecilia María. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina. Staphylococcus aureus es el patógeno más frecuentemente aislado de casos de mastitis bovina en Argentina y el mundo. Las particulares características de las infecciones intramamarias por S. aureus, han llevado a la búsqueda de alternativas para coadyuvar al control de esta enfermedad, siendo una de ellas la inmunización. El objetivo general de este trabajo fue desarrollar una vacuna prototípica contra mastitis bovinas causadas por S. aureus. Se compararon las respuestas inmunes generadas en bovinos por bacterinas de S. aureus productoras de polisacárido capsular 5 (CP5), formuladas con Al(OH3), o Iscom Matrix. La formulación con Iscom Matrix potenció la producción de anticuerpos específicos en sangre y leche, con elevada capacidad opsónica. Posteriormente, se compararon las respuestas inmunes generadas en bovinos por una bacterina y un lisado de S. aureus CP5 formulados con Iscom Matrix. La formulación con lisado bacteriano mostró un mejor desempeño en cuanto a la producción de anticuerpos específicos y funcionales, y la expresión de citoquinas con potencial importancia en el control de infecciones por S. aureus. Finalmente, se obtuvo un inmunógeno prototípico compuesto por lisado de S. aureus CP5, suplementado con los antígenos recombinantes proteína de unión a fibronectina A (FnBP-A), clumpling factor A (ClfA) y β-toxina, formulado con Iscom Matrix. La inmunización de vaquillonas con el inmunógeno multicomponente potenció la respuesta de anticuerpos en sangre y leche dirigidos hacia los antígenos recombinantes. Los mismos resultaron eficientes en la opsonización del microorganismo y en la neutralización de la actividad de la β-toxina nativa de S. aureus in vitro. Staphylococcus aureus is the most frequently isolated pathogen from bovine mastitis in Argentina and worldwide. The peculiar pathogenic characteristics of S. aureus lead to the development of alternatives measures, like immunization, to control this disease. The aim of this study was to develop a prototype vaccine against S. aureus bovine mastitis. Immune responses induced in heifers by S. aureus bacterins from a capsular polisacharide 5 (CP5) producing strain, formulated either with Al(OH)3 or Iscom Matrix™, were compared. Formulation of experimental immunogen with Iscom MatrixTM strengthened humoral in blood and milk, with an augmented opsonic capacity. In addition, immune responses generated in heifers by either a S. aureus CP5 bacterin or lysate, formulated with Iscom MatrixTM were evaluated. The bacterial lysate formulation showed a better performance regarding production of specific and functional antibodies and induction of cytokines involved in early immune responses to the immunogen. Finally, a prototype immunogen composed by S. aureus CP5 lysate, supplemented with recombinant antigens fibronectin binding protein A (FnBP-A), clumping factor A (ClfA) and β-toxin, adjuvanted with Iscom MatrixTM, was obtained. Heifers’ immunization with the multicomponent immunogen strengthened antibody responses against recombinant antigens in blood and milk. These antibodies were efficient in opsonizing S. aureus and blocking native β-toxin hemolytic activity in vitro. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas Agencia Nacional de Promoción Científica y Tecnológica Asociación Cooperadora INTA Rafaela

Tesis para la obtención del grado académico de Doctora en Ciencias Biológicas, de la Universidad Nacional del Litoral, en 2012 Staphylococcus aureus es el patógeno más frecuentemente aislado de casos de mastitis bovina en Argentina y el mundo. Las particulares características de las infecciones intramamarias por S. aureus, han llevado a la búsqueda de alternativas para coadyuvar al control de esta enfermedad, siendo una de ellas la inmunización. El objetivo general de este trabajo fue desarrollar una vacuna prototípica contra mastitis bovinas causadas por S. aureus. Se compararon las respuestas inmunes generadas en bovinos por bacterinas de S. aureus productoras de polisacárido capsular 5 (CP5), formuladas con Al(OH3), o Iscom Matrix. La formulación con Iscom Matrix potenció la producción de anticuerpos específicos en sangre y leche, con elevada capacidad opsónica. Posteriormente, se compararon las respuestas inmunes generadas en bovinos por una bacterina y un lisado de S. aureus CP5 formulados con Iscom Matrix. La formulación con lisado bacteriano mostró un mejor desempeño en cuanto a la producción de anticuerpos específicos y funcionales, y la expresión de citoquinas con potencial importancia en el control de infecciones por S. aureus. Finalmente, se obtuvo un inmunógeno prototípico compuesto por lisado de S. aureus CP5, suplementado con los antígenos recombinantes proteína de unión a fibronectina A (FnBP-A), clumpling factor A (ClfA) y β-toxina, formulado con Iscom Matrix. La inmunización de vaquillonas con el inmunógeno multicomponente potenció la respuesta de anticuerpos en sangre y leche dirigidos hacia los antígenos recombinantes. Los mismos resultaron eficientes en la opsonización del microorganismo y en la neutralización de la actividad de la β-toxina nativa de S. aureus in vitro. Staphylococcus aureus is the most frequently isolated pathogen from bovine mastitis in Argentina and worldwide. The peculiar pathogenic characteristics of S. aureus lead to the development of alternatives measures, like immunization, to control this disease. The aim of this study was to develop a prototype vaccine against S. aureus bovine mastitis. Immune responses induced in heifers by S. aureus bacterins from a capsular polisacharide 5 (CP5) producing strain, formulated either with Al(OH)3 or Iscom Matrix™, were compared. Formulation of experimental immunogen with Iscom MatrixTM strengthened humoral in blood and milk, with an augmented opsonic capacity. In addition, immune responses generated in heifers by either a S. aureus CP5 bacterin or lysate, formulated with Iscom MatrixTM were evaluated. The bacterial lysate formulation showed a better performance regarding production of specific and functional antibodies and induction of cytokines involved in early immune responses to the immunogen. Finally, a prototype immunogen composed by S. aureus CP5 lysate, supplemented with recombinant antigens fibronectin binding protein A (FnBP-A), clumping factor A (ClfA) and β-toxin, adjuvanted with Iscom MatrixTM, was obtained. Heifers’ immunization with the multicomponent immunogen strengthened antibody responses against recombinant antigens in blood and milk. These antibodies were efficient in opsonizing S. aureus and blocking native β-toxin hemolytic activity in vitro. EEA Rafaela Fil: Camussone, Cecilia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; Argentina

Fil: Rejf, Paula Karina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Staphylococcus aureus es un patógeno contagioso que produce infecciones intramamarias (IIM) en bovinos con tendencia a la cronicidad y refractariedad a la terapia antibiótica, causando elevadas pérdidas económicas. Las dificultades para controlar las IIM producidas por este organismo a partir de los métodos clásicos, ha llevado a desarrollar alternativas de control no antibiótico, incluyendo la inmunización. Este microorganismo produce polisacáridos capsulares (CP) que han sido incluidos tanto en inmunógenos experimentales como comerciales.. En este estudio se elaboró una bacterina con una cepa de referencia, productora de CP5, la que se inoculó en forma subcutánea en la tabla del cuello y área supramamaria en dos grupos de vaquillonas, dejando un grupo control sin inocular. Se evaluó la respuesta inmune humoral en suero y leche por el método de ELISA. Se determinó el promedio de los títulos de IgG total específicos obtenidos en suero de sangre y leche respectivamente, para cada grupo evaluado, observándose que en ambos casos los animales vacunados presentaron niveles de anticuerpos significativamente mayores al de los no vacunados (P

Fil: Baravalle, Celina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina. El objetivo de trabajo consistió en describir los efectos inmunomodulatorios de una infusión intramamaria de Panax ginseng como MRB analizando parámetros de la inmunidad innata en glándula mamaria bovina al final de la lactancia. Ocho cuartos mamarios fueron inoculados con 10 ml de extracto de Panax ginseng (EPg), 8 con 10 ml de placebo y 8 fueron mantenidos libres de inoculación. La proliferación celular, expresión de citoquinas (TNF-[alfa], IL-1[alfa], IL-6) y cuantificación de monocitos-macrófagos en tejido mamario fueron evaluadas por Inmunohistoquímica (IHQ). Muestras de leche fueron colectadas a distintos tiempos para la detección de ARNm de citoquinas mediante técnicas de RT-PCR. No se encontraron diferencias significativas en el porcentaje de proliferación de las células epiteliales y estromales mamarias entre los grupos evaluados. El área inmunomarcada para TNF-[alfa] y el número de monocitos-macrófagos fue significativamente mayor en cuartos tratados con el EPg El análisis inmunohistoquímico para IL-1[alfa] e IL-6, no mostró diferencias significativas entre los diferentes tratamientos. Se detectaron ácidos ARNm de IL-1[alfa], IL-1[beta], IL-8 y TNF-[alfa] en leche de cuartos tratados con EPg y placebo, en contraste, no se detectaron los ARNm de IL-2, IL-4, IL-6 e INF-γ. Se observó un incremento significativo en la expresión de ARNm de IL-1[alfa], IL-1[beta] y TNF-[alfa] en cuartos tratados con EPg a las 48 hs PI. Se concluye que Panax ginseng puede ejercer efectos inmunomodulatorios en glándula mamaria bovina y podría jugar un papel importante en la activación de las defensas intramamarias para el control de mastitis al momento del secado. The purpose of the study was to describe the immunomodulatory effects of a single intramammary infusion of Panax ginseng as a MRB, analyzing parameters of innate immunity on bovine mammary glands at the end of lactation Eight mammary quarters were infused with 10 ml of Panax ginseng extract (PgE), eight were treated with 10 mL of placebo and eight were maintained as uninoculated controls. Cellular proliferation, expression of cytokines (TNF-[alpha], IL-1[alpha], IL-6) and quantification of monocytes-macrophages cells in mammary tissue were evaluated by immunohistochemistry (IHC). Milk samples were collected at different times for performing SCC (somatic cell count), detection of specific cytokines mRNA by RT-PCR. No significant differences were found in the proliferation percentage in mammary epithelial and stromal cells among the groups. The immunostaining area for TNF-[alpha] and the number of monocytes-macrophages was significantly higher in PgE quarters. The immunohistochemical analysis for the cytokines IL-1[alpha] and IL-6, showed no significant differences for the different treatments. IL-1[alpha], IL-1[beta], IL-8 and TNF-[alpha] mRNA were detected in milk in PgE and placebo quarters, in contrast IL-2, IL-4, IL-6 and INF-γ mRNA were not found. A significant increase of IL-1[alpha], IL-1[beta] and TNF-[alpha] mRNA expression was observed in PgE-treated quarters at 48 h PI. Concluded that P.ginseng can exert immunomodulating effects in bovine mammary gland and could therefore play a role in mastitis control at drying off enhancing intramammary defenses. Universidad Nacional del Litoral Agencia Nacional de Promoción Científica y Tecnológica

Fil: Dallard, Bibiana Elisabet. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina. Agents that increase natural protective mechanisms have been proposed for prevention and treatment of intramammary infections. Staphylococcus aureus is a major pathogen causing primarily sub clinical chronic mastitis, which responds poorly to antibiotic therapy. The objectives of this study were to describe the effects of a single intramammary infusion of a lipopolysaccharide-based biological response modifier (BRM) on a) cellular proliferation, b) cellular death mechanisms, c) unspecific immune response, d) cellular infiltrating cells quantification and e) growth factors expression, in uninfected and S. aureus-infected bovine mammary glands during involution. In conclusion, BRM treatment in uninfected mammary glands induced macrophages infiltration, increased apoptogenic proteases staining and apoptosis of both epithelial and stromal mammary cells. On the other hand, BRM treatment in S. aureus-infected mammary glands induced an increase of TNF-alfa, infiltrating macrophages, pro-apoptotic proteins (Bax), apoptogenic proteases and apoptosis, neither causing deleterious effects on mammary tissue nor inhibiting mammary cell proliferation. In adition, presence of S. aureus IMI during mammary involution resulted in an increase in VEGF and IGF-I expression that was not affected by BRM treatment. Los agentes que incrementan los mecanismos de protección naturales de la glándula mamaria han sido propuestos para la prevención y tratamiento de las infecciones intramamarias. Staphylococcus aureus es un patógeno mayor de la ubre que causa primariamente mastitis subclínicas crónicas que responden pobremente a la terapia con antibióticos. Los objetivos de este trabajo fueron describir los efectos de una infusión intramamaria de un modificador de la respuesta biológica (MRB) a base de lipopolisacárido (LPS) bacteriano sobre: a) la proliferación celular, b) los mecanismos de muerte celular, c) la respuesta inmune inespecífica, d) la cuantificación de células infiltrantes y e) la expresión de factores de crecimiento, en cuartos mamarios infectados con S. aureus y no infectados durante la involución. Los resultados obtenidos en este estudio permiten elaborar las siguientes conclusiones principales: El tratamiento con BRM en cuartos mamarios no infectados indujo infiltración de macrófagos, incremento en los porcentajes de marcación de proteasas apoptogénicas (Bax) y de los índices de apoptosis en células epiteliales y estromales. Por otra parte, el tratamiento con MRB en cuartos infectados con S. aureus indujo un incremento en la expresión de TNF-alfa, en la infiltración de macrófagos, en la expresión de proteínas proapoptóticas, en la expresión de proteasas apoptogénicas y en los índices de apoptosis; sin causar efectos deletéreos en la glándula mamaria y sin inhibir la proliferación celular. Además, la presencia de infección intramamaria durante la involución resultó en un incremento en la expresión de VEGF e IGF-I que no fue afectada por el tratamiento. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas