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Orientador: Angelo Pires do Prado Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: Métodos para controlar e monitorar a susceptibilidade de insetos vetores tem sido estudado. Órgãos governamentais como World Health Organization (WHO) e Center of Disease Control (CDC) tem preconizado metodologias de bioensaios para avaliação em laboratório de resistência de mosquitos. O objetivo para se realizar testes de susceptibilidade é detectar a presença de indivíduos resistentes em uma população de inseto para que se possa, tão logo quanto possível, iniciar planos de controle alternativo, evitando-se assim os custos adicionais e problemas na redução da população do vetor. No entanto, alguns aspectos de tais metodologias são questionáveis e podem comprometer a metodologia como eficaz para revelar se uma população está resistente a um determinado inseticida. Por exemplo: 1) o Método do Papel Impregnado (WHO) possui algumas desvantagens como alto custo do material, falhas no contado do mosquito com a superfície tratada e possibilidade de perda de indivíduos durante o manuseio dos equipamentos; 2) O Método de Atividade Intrínseca do Inseticida (WHO) propõe a utilização de CO2 e baixa temperatura para anestesiar os mosquitos e acetona como diluente e aplicação do inseticida com um micro-capilar que proporciona gotas de 0,1 ?L. No entanto, os meios de anestesia levam ao estresse fisiológico, a baixa temperatura retarda a evaporação da acetona e o micro-capilar não libera o volume correto de solução e; 3) o Método da Garrafa Impregnada (CDC) permite que os mosquitos recebam o inseticida apenas pelo contato tarsal e dessa forma a quantidade de inseticida recebida pelo inseto pode não ser letal. O presente trabalho teve como objetivo desenvolver uma metodologia que eliminasse tais desvantagens. Foi possível demonstrar que a exposição de machos e fêmeas de Aedes aegypti ao CO2, baixa temperatura ou ambos, leva a uma mortalidade significativa. Um método de imobilização por meio de sucção foi desenvolvido, utilizando-se um aspirador de pó portátil. Esse método permitiu a imobilização de mosquitos e moscas (Chloropidae), havendo uma baixa mortalidade de mosquitos apenas após 60 min. de permanente imobilização, concluindo-se que o método de imobilização por sucção pode substituir os métodos de anestesia. Um método de aplicação líquida foi proposto, utilizando-se dispersores utilizados para aplicação de perfume, sendo que um dos parâmetros avaliados foi o tamanho de gotas. Os resultados demonstraram que é possível a utilização desses dispersores para aplicação de inseticida, pois há homogeneidade no tamanho das gotas. Utilizando esse método de aplicação, avaliou-se a possibilidade de utilização de acetona ou álcool etílico como diluente de inseticidas, sendo que a acetona causou alta mortalidade em fêmeas e machos de Ae. aegypti e dessa forma foi proposto à utilização de álcool etílico. A metodologia aqui proposta foi utilizada para análise de susceptibilidade do mosquito Aedes aegypti (Culicidae) e mosca Liohippelates nigrifons (Chloropidae) aos inseticidas malation e deltametrina. Foi possível estabelecer a linha base de susceptibilidade, a CL50 e a concentração diagnóstico. Além disso, foi possível detectar a resistência de uma população de Ae. aegypti advinda do campo. Conclui-se que a metodologia de imobilização associada ao método de aplicação líquida pode ser utilizada para detecção de resistência de mosquitos Abstract: Methods to control and monitor the susceptibility of vectors has been studied. Government agencies like World Health Organization (WHO) and Centers for Disease Control (CDC) has recommended methodologies bioassays for evaluating resistance in mosquitoes in the laboratory. The goal is to perform susceptibility testing is to detect the presence of resistant individuals in a population of insects so that we can, as soon as possible, initiate alternative control plans, thus avoiding additional costs and problems in reducing the vector population. However, some aspects of these methodologies are questionable and may denigrate as effective methodology to find out if a population is resistant to a particular insecticide. For example: 1) Method of Impregnated Paper (WHO) has some disadvantages such as high cost of material failures counted mosquito with the treated surface and the possibility of loss of individuals during handling equipment, 2) The Method of Intrinsic Activity of Insecticide (WHO) proposes the use of CO2 and low temperature to anesthetize mosquitoes and acetone as diluents and insecticide application with a micro-capillary that provides drops of 0.1 ?l. However, the means of anesthesia leading to physiological stress, low temperature retards the evaporation of acetone and the micro-capillary will not release the correct volume of solution, and 3) the method of Impregnated bottle (CDC) enables receiving mosquito insecticide only by tarsal contact and thus the amount of insecticide received by the insect cannot be sufficiently lethal. This study aimed to develop a methodology that would eliminate such disadvantages. It was possible to demonstrate that exposure of male and female Aedes aegypti CO2, low temperature, or both leads to a significant mortality. A method of immobilization by suction was developed using a portable vacuum cleaner. This method allowed for the immobilization of mosquitoes and flies (Chloropidae), having a low mosquito mortality after only 60 min. permanent immobilization, concluding that the immobilization method by suction can override the methods of anesthesia. A liquid application method was proposed, using disperser's perfume, and one of the parameters evaluated droplet size. The results demonstrated that it is possible to use the dispersers for insecticide application, as there uniformity in droplet size. Using this application method, we evaluated the possibility to use acetone or ethanol as diluents insecticides, and acetone caused high mortality in female and male Ae. aegypti and thus it was proposed to use alcohol. The methodology proposed here was used to analyze the susceptibility of the mosquito Aedes aegypti (Culicidae) and fly Liohippelates nigrifons (Chloropidae) to insecticides Malathion and Deltamethrin. It was possible to establish baseline susceptibility, and the LC50 concentration diagnosis. Moreover, it was possible to detect the resistance of an Ae. aegypti originating from the field. It is concluded that the method of immobilization associated liquid application method can be used to detect resistance of mosquitoes Doutorado Parasitologia Doutor em Parasitologia

Submitted by Alison Souza (alisonsouza@ufgd.edu.br) on 2019-07-31T19:17:40Z No. of bitstreams: 1 MaithonMarecoRocha.pdf: 2085764 bytes, checksum: 8afceac7ca1179a1147c7e7b261fe1e3 (MD5) Made available in DSpace on 2019-07-31T19:17:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MaithonMarecoRocha.pdf: 2085764 bytes, checksum: 8afceac7ca1179a1147c7e7b261fe1e3 (MD5) Previous issue date: 2017-03-31 A febre amarela, dengue, chikungunya e zika são doenças virais com risco crescente de agravo a saúde pública. Estas doenças são transmitidas por mosquitos Aedes aegypti. O controle de ovos (banco de ovos dos criadourados), larvas e insetos adultos (alados) é crucial para contenção e/ou prevenção de surtos dessas doenças, principalmente nos períodos quentes e úmidos. A descoberta de novos larvicidas pode tornar o controle populacional mais eficiente e com menor impacto ambiental, principalmente se for utilizado abordagens que considerem o comportamento e a ecologia do inseto vetor. As porfirinas e suas estruturas conjugadas são classes de moléculas que absorvem luz e podem gerar espécies reativas de oxigênio que, se excitadas pela luz ultravioleta e/ou visível podem induzir danos celulares contínuos por oxidação e morte celular a partir do sistema digestório do inseto. O presente trabalho avalia a atividade citotóxica fotoinduzida por radiação solar e/ou luz artificial para o controle de larvas de A. aegypti, além de avaliar a toxicidade, citotoxicidade, genotoxicidade e mutagenicidade em células meristemáticas de raízes de Allium cepa. A clorofilina cúprica de sódio foi utilizada como fotossensibilizador. Os resultados experimentais mostraram mortalidade em larvas de A. aegypti de 3o e 4o estádios larvais em concentrações de 15 a 35 mg L-1 em exposição a irradiação solar direta durante cinco horas com intensidade de luz solar entre 52,27 W m-2 a 128,7 W m-2. A clorofilina cúprica de sódio na concentração entre 50 e 200 mg L-1 não apresentou toxicidade, citotoxicidade, genotoxicidade, mutagenicidade, além de potencializar a divisão celular em todas as concentrações avaliadas. O estudo abre perspectivas para o desenvolvimento de novas estratégias e moléculas mais sensíveis para intensidades de radiação mais baixas do que valores típicos e obtidos de luz solar. A produção de espécies de radicais livres e/ou oxidantes podem matar os insetos por danos aos tecidos do sistema digestório e intestinal, além de adsorver em material orgânico dos criadouros, realizar o controle do inseto via cadeia alimentar e/ou ainda manter a atividade por alguns ciclos de reprodução. Os resultados mostraram que a clorofilina cúprica de sódio é fotossensibilizante e um promissor agente para controle fotodinâmico para larvas e insetos adultos do mosquito da dengue e, possivelmente, para outros insetos vetores de ciclo reprodutivo similar. Yellow fever, dengue, chikungunya and zika are viral diseases with an increased risk of public health damage. These diseases are transmitted by Aedes aegypti mosquitoes. Control of eggs (egg bank of broodstock), larvae and adult insects (winged) is crucial for containment and/or prevention of outbreaks of these diseases, especially in hot and humid periods. The discovery of new larvicides can make population control more efficient and with less environmental impact, especially if we use approaches that consider the behavior and ecology of the insect vector. Porphyrins and their conjugated structures are classes of molecules that absorb light and can generate reactive oxygen species which, if excited by ultraviolet and / or visible light, can induce continuous cellular damage by oxidation and cell death from the insect digestive system. The present work evaluates the cytotoxic activity induced by solar radiation and/or artificial light for the control of A. aegypti larvae, besides evaluating the toxicity, cytotoxicity, genotoxicity and mutagenicity in meristematic cells of Allium cepa roots. The sodium cupric chlorophyllin was used as a photosensitizer. The experimental results showed mortality in larvae of A. aegypti of 3rd and 4th larval stages at concentrations of 15 to 35 mg L-1 on exposure to direct solar irradiation during five hours with sunlight intensity ranging from 52.27 W m -2 to 128.7 W m-2. The sodium cuprous chlorophyll in the concentration between 50 and 200 mg L-1 showed no toxicity, cytotoxicity, genotoxicity, mutagenicity, and potentiated the cell division in all evaluated concentrations. The study opens perspectives for the development of new strategies and more sensitive molecules for radiation intensities lower than typical values and obtained from sunlight. The production of free radical and / or oxidant species can kill insects due to damage to the tissues of the digestive and intestinal system, as well as adsorb in organic material from the breeding sites, control the insect via the food chain and/or maintain activity Playback cycles. The results showed that sodium cuprous chlorophyllin is photosensitizing and a promising agent for photodynamic control for adult larvae and insects of the dengue mosquito, and possibly for other insects of similar reproductive cycle.

Submitted by Alison Souza (alisonsouza@ufgd.edu.br) on 2019-05-23T18:32:32Z No. of bitstreams: 1 CiceraMariadaSilva.pdf: 1166689 bytes, checksum: 9dddff65ce5b4828d7a7dc4d78c4d6e4 (MD5) Made available in DSpace on 2019-05-23T18:32:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CiceraMariadaSilva.pdf: 1166689 bytes, checksum: 9dddff65ce5b4828d7a7dc4d78c4d6e4 (MD5) Previous issue date: 2014-02-28 Fundação de Apoio ao Desenvolvimento do Ensino, Ciência e Tecnologia do Estado de Mato Grosso do Sul (FUNDECT) A dengue é uma arbovirose de alta incidência nos países tropicais e com notificações crescentes de agravamento nos países (sub)tropicais. O controle do vetor Aedes aegypti transmissor da dengue esta fundamentado no uso de inseticidas químicos convencionais como organofosforados, piretroides, dentre outros disponíveis. A aplicação excessiva e contínua desses inseticidas possibilitou ao inseto vetor o desenvolvimento de resistência, logo o monitoramento e o manejo da resistência são elementos que devem ser considerados, além da proposta de uso de substâncias com modos de ação diferentes dos inseticidas convencionais, por exemplo, os complexos de cobre (metalo-inseticidas). Neste intuito foi avaliada a atividade tóxica dos complexos de cobre com os aminoácidos triptofano, histidina, metionina e taurina em larvas de Aedes aegypti linhagem Rockefeller. Dentre os complexos, apenas o CuII-Taurina apresentou atividade tóxica acentuada para larvas de Aedes aegypti possibilitando 100% de mortalidade em 24 horas na menor concentração testada sendo esta 50 ppm. O complexo de CuII- Histidina não apresentou atividade larvicida nas concentrações de até 1000 ppm. Para os complexos CuII-Triptofano e CuII-Metionina as porcentagens de mortalidade variaram entre 3,16%- 46,55% e 5,46%- 12,42% respectivamente. Considerando a concentração de 1000 ppm para 24 horas de exposição das larvas aos complexos, pode- se propor a seguinte série de toxicidade CuII-Taurina >> CuII-Triptofano > CuII-Metionina >>> CuII-Histidina. Dengue is an arbovirus that has high incidence in tropical countries and recently is of worsening increasing in (sub)tropical countries. The dengue’s transmitter (Aedes agypti) control is mainly based on the use of conventional chemical insecticides such as organophosphates, pyrethroids, among others. Excessive and continuous application of these insecticides enabled resistance insect vector’s development, therefore, monitoring and resistance management are elements that should be considered. In this context, were evaluated the toxic activity of copper complexes with amino acids tryptophan, histidine, methionine and taurine on Aedes aegypti, Rockefeller strain. Among the complexes, only the CuII-Taurine showed strong toxic activity allowing 100% of mortality within 24 hours in the lowest concentration being 50 ppm. The complex CuII-Histidine didn’t show any larvicidal activity at the tested concentrations to 1000 ppm. For CuII-Tryptophan and CuII-Methionine complexes, the percentages of mortality ranged from 3.16% to 46.55% and 5.46% to 12.42% respectively. Considering the concentration of 1000 ppm for 24 hours of exposure to the larvae complexes can be proposed the following of toxicity series. The toxicity series to metal-amino acid is: CuII-Taurine >> CuII-Tryptophan > CuII-Methionine >>> CuII-Histidine.