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SARS-CoV-2, which causes Covid-19, was first identified in Wuhan, Hubei Province, China, and is now spreading on a global scale. Diagnosis is performed by real-time reverse transcription polymerase chain reaction (RT-qPCR) by nasopharyngeal swab collection (NFS). Due to high testing demand and low supplies of collection materials, the need for alternative methods to facilitate accurate universal Covid-19 screening and pandemic control is highlighted. Thus, this study aimed to evaluate the molecular efficiency of saliva as a means of detecting SARS-CoV-2 in health professionals and patients in the surgical circuit of Hospital Universitário Lauro Wanderley. For this, 365 collections of SNF and saliva samples were performed, which were extracted and quantified in concentration. Identification was performed by RT-qPCR. The results showed that of the 365 samples analyzed, 45 (12.3%) had detection in at least one type of sample and the majority were 27 (60%) asymptomatic. 21 (46.7%) samples were positive for SNF and saliva, while 14 (31.1%) were positive for SNF samples only and 10 (22.2%) were positive for saliva samples only. The concentration of saliva samples was 28.6 and 30.4 ± SD for 7.6 and 8.38 ± SD of SNF. Purity ranged from 1.81 and 0.3 ± SD in saliva to 1.82 and 0.25 ± SD in SNF. Using SNF samples as the gold standard of reference, the sensitivity and specificity of saliva were 60% 97%, while positive and negative predictive values were 68% and 96%, respectively. The accuracy was 93.0% and the Kappa coefficient was 0.596. In conclusion, the results obtained in the self-collection of pure saliva are similar compared to SNF samples, being viable to be used in the detection of SARS-CoV-2. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES O SARS-CoV-2, causador da Covid-19 foi identificado pela primeira vez em Wuhan, província de Hubei, China, e agora se propaga em escala global. O diagnóstico é realizado através da reação em cadeia da polimerase em tempo real de transcrição reversa (RT-qPCR) por coleta Swab nasofarínge (SNF). Devido à alta demanda exames e os baixos suprimentos de materiais de coleta destacam a necessidade de métodos alternativos para facilitar a triagem universal precisa da Covid-19 e controle da pandemia. Desta forma, este estudo teve como objetivo avaliar a eficiência molecular da saliva como meio de detecção do SARS-CoV-2 em profissionais de saúde e pacientes do circuito cirurgico do Hospital Universitário Lauro Wanderley. Para isso, foram realizadas 365 coletas de amostras SNF e saliva que foram extraídas e quantificadas em concentração. A identificação foi realizada através da RT-qPCR. Os resultados mostraram que das 365 amostras analisadas, 45 (12,3%) tiveram detecção em pelo menos um tipo de amostra e a maioria era 27 (60%) assintomáticos. Em SNF e saliva foram postivos em 21 (46,7%) amostras, enquanto 14 (31,1%) foram positivos apenas para amostras SNF e 10 (22,2%) positivo apenas em amostras de saliva. A concentração das amostras de saliva foi de 28,6 e 30,4 ± DP para 7,6 e 8,38 ± DP de SNF. A pureza foi de 1,81 e 0,3 ± DP em saliva para 1,82 e 0,25 ± DP em SNF. Usando amostras SNF como padrão ouro de referência a sensibilidade e especificidade da saliva foram de 60% 97%, equanto os valores preditivos positivos e negativos foram de 68% e 96%, respectivamente. A acurácia foi de 93,0% e o coeficiente Kappa foi de 0,596. Em conclusão, os resultados obtidos na auto coletada da saliva pura é semelhante em comparação com amostras SNF, sendo viável para ser usado na detecção do SARS-CoV-2.

The prevalence of snakebites is a public health problem that causes significant impact economically and socially. In South America, Brazil has the highest recorded rate of snakebites, with approximately 29,000 cases per year. Of the components that play a central role in the symptomatology of snakebites, phospholipases A2 (PLA2s) acts on substrates by hydrolyzing biomembranes phospholipids. Coagulation occurs by the activation of clotting factors together with calcium and platelets, and these factors are possible targets for PLA2s to act. In the present study, the pharmacological effects of PLA2s from Bothrops and Crotalus snake venom on secondary hemostasis were evaluated and a probable mechanism of the anticoagulant action of these proteins was proposed. In vitro, Prothrombin Time (PT) and Partial Thromboplastin Time (PTT) of citrated human plasma samples were evaluated in the presence of different quantities of the five anticoagulant drugs or the PLA2s. None of the evaluated PLA2s caused significant PT prolongation, while the aPTT demonstrated significant changes caused for all PLA2s. Asp49-PLA2s basic (bothropic) were classified as strong anticoagulant; Asp49-PLA2s acidic (bothropic) and basic (crotalic) were weak anticoagulant; while all Lys49-PLA2s were moderate anticoagulant. In silico studies, multiple alignment, phylogeny and interaction between PLA2s and Factors IXa and Xa were performed. In conclusion, PLA2s can interfere in the coagulation cascade by three independent mechanisms, or a combination of them: i) inhibition of the tenase complex formation observed in Asp49-PLA2s basic (bothropic) and Lys49-PLA2s. These PLA2s interact with the B subunit of factors IXa or Xa, which may cause a steric hindrance; ii) allosteric modulation of Factors IXa and Xa induced by the interaction of Lys49-PLA2s through the C-terminal region, iii) phospholipids hydrolysis and/or competition of catalytically active PLA2s with the clotting factors for the lipid surface. Nenhuma A prevalência de acidentes ofídicos é um problema de saúde pública que causa significativo impacto econômico e social. O Brasil é o país da América do Sul com maior índice de empeçonhamento registrado, com aproximadamente 29 mil casos anuais. Dentre os componentes que exercem papel central na sintomatologia do empeçonhamento, as Fosfolipases A2 (PLA2s) atuam sobre substratos hidrolisando fosfolipídios de biomembranas. A coagulação sanguínea ocorre pela ativação de fatores de coagulação, juntamente com cálcio e plaquetas, e esses fatores são possíveis alvos para a atuação das PLA2s. No presente estudo foram avaliados os efeitos farmacológicos de PLA2s ofídicas, dos gêneros Bothrops e Crotalus, na hemostasia secundária e proposto um mecanismo provável de ação anticoagulante dessas proteínas. Foram avaliados, in vitro, o Tempo de Protrombina (TP) e o Tempo de Tromboplastina Parcial ativada (TTPa) de amostras de plasma humano citratado na presença de quantidades distintas de cinco fármacos anticoagulantes ou das PLA2s. Nenhuma das PLA2s avaliadas causou significativo prolongamento do TP, enquanto o TTPa apresentou alterações significativas para todas as PLA2s. As Asp49-PLA2s básicas botrópicas foram classificadas como fortemente anticoagulantes; as Asp49-PLA2s ácida botrópica e básica crotálica foram fracamente anticoagulantes, enquanto todas as Lys49-PLA2s foram moderadamente anticoagulantes. Foram realizados estudos, in sílico, alinhamento múltiplo, filogenia e interação entre as PLA2s e os Fatores IXa e Xa. Em conclusão, as PLA2s podem interferir na cascata de coagulação por três mecanismos independentes ou pela combinação deles: i) inibição da formação do complexo tenase observado nas Asp49-PLA2s e Lys49-PLA2s básicas botrópicas que interagiram com a subunidade B dos fatores IXa ou Xa, podendo causar um impedimento estérico; ii) modulação alostérica dos Fatores IXa e Xa induzida pela interação das Lys49-PLA2s através da região de C-terminal, iii) hidrólise de fosfolipídios e/ou competição das PLA2s cataliticamente ativas com os fatores de coagulação pela superfície lipídica.

A celulose bacteriana possui em comparação com a celulose vegetal elevado grau de pureza, resistência mecânica, cristalinidade, biocompatibilidade e alta absorção de água apresentando potencial de aplicação em diversas áreas. Pode ser produzida por diversas fontes microbianas, como a bactéria Gluconacetobacter xylinus, com alto nível de pureza. Outra fonte de produção de celulose bacterianaé o SCOBY, symbiotic colony of bacteria and yeasts bebida Kombucha, que consiste em uma comunidade microbiana constituída por leveduras e bactérias. No entanto, o elevado custo de produção de celulose bacteriana compromete a sua produção em escala industrial. Meios de cultura que utilizem fontes alternativas de carbono apresentam potencial para produção promovendo a diminuição de custo do produto final. O objetivo do presente trabalho consistiu em avaliar a produção de celulose bacteriana em cultivo estático utilizando o SCOBY de kombucha e G. xylinus em meio contendo glicerol como fonte de carbono. A produção de CB utilizando SCOBY e o microrganismo isolado G. xylinusfoi realizada em 400 mL de meio HSG a 26 °C por 7 dias, por 5 semanas consecutivas. Após a produção, as membranas foram purificadas através de tratamento com NaOH e ácido acético e posteriormente foram secas por 24 horas a 45 °C, para determinação da massa seca. Em seguida foram realizados os métodos comumente empregados para caracterização de celulose bacteriana: rendimento, controle microbiológico por meio do teste de esterilidade, resistência à tração, absorção de água e resistência a soluções básicas e ácidas. A produção utilizando o microrganismo G. xylinus obteve rendimento semelhante ao obtido utilizando o SCOBY na quinta semana de cultivo, de 1,64 g/L e 1,48 g/L, respectivamente. O teste de esterilidade, mostrou que a etapa de purificação foi capaz de remover as células viáveis, assim como o processo de autoclavagem, uma vez que não foi observado turvação do meio em nenhuma das amostras. Dentre os parâmetros avaliados, não foi verificado diferença estatística, considerando intervalo de 95% de confiança, nas membranas produzidas por G. xylinus e SCOBY para o teste de resistência mecânica e resistência a ácidos. No entanto para o teste de resistência a soluções básicas e para o teste de absorção de água foi verificado que a membrana proveniente de G. xylinus foi capaz de absorver mais água e houve uma perda maior de massa no teste em solução básica. Os resultados deste trabalho demonstram que o SCOBY de kombucha apresenta-se como uma potencial fonte de celulose bacteriana tanto no que se refere ao rendimento de produção como características da membrana obtida. Novos estudos deverão ser realizados buscando investigar o uso de fontes de carbono alternativas para sua produção. Bacterial cellulose has compared to plant cellulose a high degree of purity, mechanical resistance, crystallinity, biocompatibility and high-water absorption, presenting potential application in several areas. It can be produced by several microbial sources, such as the Gluconacetobacter xylinus bacteria, with a high level consists of a microbial community made up of yeasts and bacteria. However, thehigh cost of producing bacterial cellulose compromises its production on an industrial scale. Culture media that use alternative carbon sources have potential for production, reducing the cost of the final product. The objective of the present work was to evaluate the production of bacterial cellulose in static culture using SCOBY from kombucha and G. xylinus in a medium containing glycerol as a carbon source. BC production using SCOBY and the isolated microorganism G. xylinus was performed in 400 mL of HSG medium at 26 °C for 7 days, for 5 consecutive weeks. After production, the membranes were purified by treatment with NaOH and acetic acid and subsequently dried for 24 hours at 45 °C, to determine the dry mass. Then, the methods commonly used for characterization of bacterial cellulose were carried out: yield, microbiological control through the sterility test, tensile strength, water absorption and resistance to basic and acidic solutions. The production using the microorganism G. xylinus obtained a yield like that obtained using SCOBY in the fifth week of cultivation, of 1,64 g/L and 1,48 g/L, respectively. The sterility test showed that the purification step was able to remove viable cells, as well as the autoclaving process, since no medium turbidity was observed in any of the samples. Among the parameters evaluated, there was no statistical difference, considering a 95% confidence interval, in the membranes produced by G. xylinus and SCOBY for the mechanical resistance and acid resistance tests. However, for the resistance test to basic solutions and for the water absorption test, it was verified that the membrane from G. xylinus was able to absorb more water and there was a greater loss of mass in the basic solution test. The results of this work demonstrate that SCOBY from kombucha presents itself as a potential source of bacterial cellulose both in terms of production yield and characteristics of the membrane obtained. New studies should be carried out seeking to investigate the use of alternative carbon sources for its production.

Psoriasis (PsO) is an immune-mediated chronic inflammatory disease characterized by proliferation of keratinocytes and formation of skin plaques. In the clinical context, this dermatosis can have different classifications due to the types of skin lesions, with the vulgaris and guttate types being the most frequent. Most studies described in the literature demonstrate different studies of the demographic profile, histological and immunological aspects of PsO, however, there is a great lack of data in non-Caucasian individuals, particularly in the Northeast region of Brazil. This study aimed to evaluate the clinical, histological and immunohistochemical profile of non Caucasian patients with psoriatic disease treated at the reference service for diagnosis and treatment of psoriasis at the Department of Dermatology, University Hospital Lauro Wanderley, Federal University of Paraíba, João Pessoa. In this study, the sociodemographic characteristics were described based on the patients' medical records and the analysis of 31 samples of skin tissue obtained through the biopsy blocks of individuals with psoriasis or healthy individuals of both genders. For histological analysis, different staining systems such as H&E, Masson's Trichrome and Toluidine Blue were used. While for the immunohistochemical analysis for macrophages M1 and M2 antibodies to Calprotectin and CD163 were used, respectively. The results showed that the psoriatic samples showed disorganization in the extracellular matrix, with greater collagen deposition, greater acanthosis with a discrete presence of mast cells in PsO vulgaris and a greater number of blood vessels in PsO guttate. The number of M1 macrophages was significantly higher in psoriatic tissues, while M2 macrophages was observed in the control group, processed by samples from healthy individuals. The data obtained in this study corroborates the current literature, however, additional studies are needed to better elucidate the contribution of different macrophage populations in the pathophysiology of psoriasis and their possible contribution to improving the diagnosis and therapy of the different clinical manifestations of psoriasis. Nenhuma A psoríase (PsO) é uma doença inflamatória crônica imunomediada caracterizada por proliferação de queratinócitos e formação de placas cutâneas. No contexto clínico, esta dermatose pode ter diferentes classificações em decorrência dos tipos de lesões na pele, sendo o tipo vulgar e gutata os mais frequentes. A maioria dos estudos descritos na literatura demonstram diferentes análises sobre o perfil demográfico, aspectos histológicos e imunológicos acerca da PsO, entretanto, há uma grande escassez de dados em indivíduos não caucasianos, particularmente na região Nordeste do Brasil. Este estudo objetivou avaliar o perfil clínico, histológico e imuno histoquímico de pacientes não caucasianos portadores de doença psoriática atendidos no serviço de referência de diagnóstico e tratamento de psoríase no Departamento de Dermatologia do Hospital Universitário Lauro Wanderley da Universidade Federal da Paraíba, João Pessoa. Nesse estudo, foram descritas as características sociodemográficas a partir dos prontuários dos pacientes e da análise de 31 amostras de tecido de pele obtidos através dos blocos de biópsia de indivíduos portadores de psoríase ou saudáveis de ambos os sexos. Para as análises histológicas foram utilizados diferentes sistemas de coloração tais como H&E, Tricrômico de Masson e Azul de Toluidina. Enquanto para as análises imuno histoquímicas para macrófagos M1 e M2 foram utilizados anticorpos para Calprotectina e CD163, respectivamente. Os resultados obtidos demonstraram que as amostras psoriáticas apresentaram desorganização na matriz extracelular, apresentando uma maior deposição de colágeno, maior acantose com discreta presença de mastócitos para PsO vulgar e maior número de vasos sanguíneos na PsO gutata. O número de macrófagos M1 foi consideravelmente maior nos tecidos psoriáticos, enquanto para os macrófagos M2 foi observada maior densidade no grupo controle, caracterizado por amostras de indivíduos saudáveis. Os dados obtidos neste estudo corroboram com a literatura vigente, entretanto se faz necessário estudos adicionais para melhor elucidar a contribuição das diferentes populações de macrófagos na fisiopatologia da psoríase e sua possível contribuição para a melhoria do diagnóstico e terapia das diferentes manifestações clínicas da psoríase.

CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior O diabetes mellitus (DM) é uma doença crônica de grande interesse médico e tem sido considerada um grave problema de saúde pública em todo o mundo. A utilização de produtos naturais para o tratamento de doenças é uma prática milenar e pode ser considerada uma alternativa conveniente para o controle do diabetes e suas complicações. Anacardium humile é uma planta típica do Cerrado brasileiro utilizada na medicina popular em razão de suas propriedades antidiarreica, expectorante, antidiabética e anti-inflamatória. No entanto, são escassos os estudos que abordam as propriedades biológicas desta espécie. Este estudo teve como objetivo analisar in vitro e ex vivo a capacidade antioxidante e antiglicante do extrato etanólico de A. humile, suas frações orgânicas e três moléculas (catequina, quercetina e ácido gálico – CQA), seus potenciais para inibir as enzimas α-amilase e α-glicosidase, como também seus efeitos citotóxicos em macrófagos RAW 264,7. A metodologia adotada consistiu na obtenção do extrato etanólico de A. humile e suas frações orgânicas que foram testadas, juntamente a CQA, quanto suas atividades antioxidante, antiglicante e inibitória de enzimas envolvidas da digestão de carboidratos. Além disso, CQA e as três frações de A. humile que demonstraram os melhores resultados frente aos testes supracitados, foram testadas quanto suas capacidades de inibir a oxidação em tecido hepático. Ainda, os compostos bioativos presentes nas frações das folhas de A. humile foram elucidados por análise em HPLC-ESI-MS/MS. As análises mostraram notável atividade antioxidante nas frações DCM (1264,85 ± 76,90 μmol ET/g ORAC; 216,71 ± 1,04 μmol ET/g FRAP e IC50 3,03 ± 0,08 µg/mL DPPH) e AcOEt (1300,11 ± 33,04 μmol ET/g ORAC; 236,21 ± 23,86 μmol ET/g FRAP e IC50 3,03 ± 0,14 µg/mL DPPH), e em CQA, principalmente no ácido gálico (1291,19 ± 8,41 μmol ET/g ORAC; 1103,52 ± 31,48 μmol ET/g FRAP e IC50 0,78 ± 0,11 µg/mL DPPH). Quanto à atividade antiglicante, as amostras à concentração de 40 μg/mL inibiram mais de 88% da glicação no método BSA/FRU. Nos métodos BSA/MGO e ARG/MGO, catequina e as frações Hex, DCM e AcOEt obtiveram os melhores resultados. Somente CQA apresentaram resultados significativos no modelo LYS/MGO. Todas as frações, exceto Hex, inibiram significativamente a enzima α-amilase (IC50 DCM 0,56 ± 0,10; AcOEt 0,84 ± 0,01; ButOH 0,74 ± 0,03 e H2O 0,79 ± 0,06 µg/mL). A inibição da enzima α-glicosidase só foi observada na fração AcOEt (IC50 275,40 ± 12,31 µg/mL). Testes com tecido hepático revelaram notório potencial de CQA e das frações DCM, AcOEt e ButOH para inibir a produção de EROs e a peroxidação lipídica, além de preservar grupos tióis. Moléculas de grande potencial antioxidante como catequina, quercetina, ácido gálico, kaempferol, luteolina e β-criptoxantina, foram identificadas nas frações. Dessa forma, concluise que as frações do extrato etanólico de A. humile apresentam atividades antioxidante e antigligante promissoras, além de proeminente capacidade para inibir a enzima α-amilase. Assim, este estudo apresenta novas informações e estimula futuras pesquisas que possam elucidar as propriedades biológicas de A. humile e seu potencial para controlar DM e suas complicações. Diabetes mellitus (DM) is a chronic disease of great medical interest and it has been considered a serious public health problem worldwide. The use of natural products to treat diseases is an ancient practice and can be considered a convenient alternative for controlling diabetes and its complications. Anacardium humile is a typical plant from the Brazilian savanna used in folk medicine due to its anti-diarrheal, expectorant, anti-diabetic and anti-inflammatory properties. However, few studies address the biological properties of this species. This study aimed to analyze in vitro and ex vivo the antioxidant and antiglycant capacity of the ethanolic extract of A. humile, its organic fractions and three molecules (catechin, quercetin and gallic acid - CQA), their potential to inhibit the enzymes α-amylase and α-glucosidase, as well as their cytotoxic effects on RAW 264.7 macrophages. The adopted methodology consisted of obtaining the ethanolic extract of A. humile and its organic fractions, which were tested, together with CQA, for their antioxidant, antiglycant and glycolytic enzyme inhibitory activities. In addition, CQA and the three A. humile fractions that showed the best results in the abovementioned assays were tested for their ability to inhibit oxidation in liver tissue. Furthermore, the bioactive compounds present in the fractions of A. humile leaves were elucidated by HPLC-ESI-MS/MS analysis. The analyses showed remarkable antioxidant activity in DCM (1264.85 ± 76.90 μmol ET/g ORAC; 216.71 ± 1.04 μmol ET/g FRAP and IC50 3.03 ± 0.08 µg/mL DPPH) and AcOEt (1300.11 ± 33.04 μmol ET/g ORAC; 236.21 ± 23.86 μmol ET/g FRAP and IC50 3.03 ± 0.14 µg/mL DPPH) fractions, and in CQA, mainly in gallic acid (1291.19 ± 8.41 μmol ET/g ORAC; 1103.52 ± 31.48 μmol ET/g FRAP and IC50 0.78 ± 0.11 µg/mL DPPH). As for the antiglycant activity, the samples at the concentration of 40 μg/mL inhibited more than 88% of the glycation in the BSA/FRU method. In the BSA/MGO and ARG/MGO methods, catechin and the Hex, DCM and AcOEt fractions obtained the best results. Only CQA showed significant results in the LYS/MGO model. All fractions, except Hex, significantly inhibited the α-amylase enzyme (IC50 DCM 0.56 ± 0.10; AcOEt 0.84 ± 0.01; ButOH 0.74 ± 0.03 and H2O 0.79 ± 0.06 µg/mL). Inhibition of the α-glucosidase enzyme was only observed in the AcOEt fraction (IC50 275.40 ± 12.31 µg/mL). Tests with liver tissue revealed a notorious potential of the DCM, AcOEt and ButOH fractions, as well as CQA, to inhibit the production of ROS and lipid peroxidation, in addition to preserving thiol groups. Molecules with great antioxidant potential such as catechin, quercetin, gallic acid, kaempferol, luteolin and β-cryptoxanthin were identified in the fractions. In conclusion, the ethanolic extract fractions of A. humile present promising antioxidant and antiglycant activities, in addition to a prominent capacity to inhibit the α-amylase enzyme.Thus, this study presents new information and encourages further research to elucidate the biological properties of A. humile and its potential to control DM and its complications. Dissertação (Mestrado)

The 2.4 dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) was one of the first synthetic herbicides to be introduced on the market and is currently the main ingredient of over 1500 commercially available products. Although 2,4-D is extensively used worldwide, several studies report that exposure to this chemical can induce toxic effects in non-target organisms. The liver is considered one of the targets of several toxicants because it performs a range of vital functions and directly participates in the metabolism of xenobiotics. Therefore, the present work aimed to understand the hepatotoxic potential of 2,4-D in zebrafish larvae (Danio rerio), as a contribution to the knowledge about the toxicity mechanisms of this chemical in a vertebrate model system. For this purpose, its acute toxicity to zebrafish embryos was assessed according to the OECD protocol No. 236 (2013), as well as its sub- lethal effects (

The present work aimed to evaluate the effect of harmful microalgae Prorocentrum lima and Ostreopsis cf. ovata in the immune responses of the oyster Crassostrea gasar. For this purpose, hemocytes were exposed (in vitro) to P. lima and O. cf. ovata and oysters were exposed (in vivo) to O. cf. ovata, histopathological analysis and diagnosis of Perkinsus spp.. Cytograms, mortality, total (THC) and differential (DHC) hemocyte count, phagocytic activity, production of reactive oxygen species (ROS) and activity of ABC hemocyte transporters were determined by flow cytometry. Histological sections were prepared. The detection of Perkinsus spp. and its intensity was determined in the demibranchs. The results of this study showed that O. cf. ovata is potentially more toxic to hemocytes than P. lima. In the in vitro exposure, O. cf. ovata increased the mortality of hemocytes in the highest concentrations, 81.2 ± 1.51% (Fórmula) and 86.9 ± 1.50% (Fórmula), reduced the rate of phagocytosis to O. cf. ovata (up to 2x) and the production of ROS was not affected, as well as the activity of ABC transporters. In in vivo exposure, THC, the percentage of hemocyte subpopulations, the rate of phagocytosis and the activity of ABC transporters did not change. However, hemocyte mortality doubled in the treated group and ROS production decreased in the treated oysters hemocytes, blast cells (3.8x) and hyalinocytes (3.4x) showed a similar reduction, and greater than granulocytes (2.3x). Histopathological analysis revealed that the digestive gland is the organ affected by O. cf. ovata. Perkinsus spp. proliferation was observed in the tissues of treated oysters favored by O. cf. ovata. Although animal mortality has not been observed, impaired hemocytes suggest an immunosuppression that can lead to opportunistic infections or increase the damage caused by pathogens already present. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES O presente trabalho objetivou avaliar o efeito das microalgas nocivas Prorocentrum lima e Ostreopsis cf. ovata sobre as repostas imunológicas da ostra Crassostrea gasar. Para tanto, foram realizadas exposições in vitro à P. lima e O. cf. ovata e in vivo à O. cf. ovata, análise histopatológica e diagnóstico de Perkinsus spp.. Os citogramas, mortalidade, contagem total (THC) e diferencial (DHC), atividade fagocítica, produção de espécies reativas de oxigênio (EROs) e atividade dos transportadores ABC dos hemócitos foram determinadas por citometria de fluxo. Cortes histológicos foram preparados. A detecção de Perkinsus spp. e sua intensidade foram determinadas nas demibrânquias. Os resultados deste estudo evidenciaram que a microalga O. cf. ovata é potencialmente mais tóxico para os hemócitos do que P. lima. Na exposição in vitro, a O. cf. ovata aumentou a mortalidade de hemócitos nas maiores concentrações, 81,2 ± 1,51% (Fórmula) e 86,9 ± 1,50% (Fórmula), reduziu a taxa de fagocitose à O. cf. ovata (em até 2x) e a produção de EROs não foi afetada, assim como a atividade dos transportadores ABC. Na exposição in vivo, THC, porcentagem de subpopulações de hemócitos, taxa de fagocitose e atividade dos transportadores ABC não se alteraram. No entanto, a mortalidade dos hemócitos dobrou no grupo tratado, e a produção de EROs diminuiu nos hemócitos das ostras tratadas, células do tipo-blásticas (3,8x) e hialinócitos (3,4x) apresentaram redução semelhante, e maior que granulócitos (2,3x). A análise histopatológica revelou que a glândula digestiva é o órgão afetado por O. cf. ovata. Foi observado a proliferação de Perkinsus spp. nos tecidos das ostras favorecidos pela O. cf. ovata. Apesar de não ter sido observada mortalidade de animais, o comprometimento dos hemócitos sugere uma imunossupressão que pode levar a infecções oportunistas ou aumentar os danos causados por patógenos já presentes.

Bioprospecting of microbes allows the use of their metabolites, such as biodegradable molecules in substitution of not eco-friendly compounds, for example of pigments as good natural substitutes for synthetic dyes. This work aimed to produce, to extract and to characterize pyocyanin from two wild isolates of Pseudomonas aeruginosa, TGC02 and TGC04, and to apply the pigment as dyeing agent in two fibers. King A broth added with 2% (w/v) of malt bagasse were used to produce about 30 ml of pyocyanin (585 μg/ml) with a high degree of purity. Kinetic parameters of maximum cell production, maximum pigment production and yield coefficient were determined. In addition, cell concentration and growth rate were determined. The dyeing of 50 and 100 μg/mL of pyocyanin in cotton and polyester/elastane fibers was done using the exhaustion method, using sodium bicarbonate as mordant. Both isolates were similar in terms of microbial parameters. The cell population was increased up to 9.5 times from the inoculum, producing a maximum concentration of pyocyanin about 1.0 μg/mL.h-1, and increased significantly after 36 h and seemed to modulate the microbial growth. The yield coefficient was up to 240 μg/mL.UA-1. Pyocyanin was more functional to the cotton fiber and produced two shades of blue, without undergoing significant changes after washing and drying. Additionally, the highest percentages of pigment absorption and the lowest percentages of exhaustion were recorded. The opposite was found in the polyester/elastane fiber. The adsorption of the pigment was low, influencing the color resulted, whose perception in white light was a very pale lilac-bluish color. Additionally, the shades poorly varied as a function of the concentration of pyocyanin applied. In conclusion, pyocyanin may be used as alternative biocolorant on cotton fibers. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES A bioprospecção de microrganismos permite a utilização de produtos do metabolismo para o benefício da sociedade, empregando por exemplo, moléculas biodegradáveis em substituição a substâncias não ecologicamente corretas, tais como pigmentos bacterianos como substitutos naturais para corantes sintéticos empregados no tingimento de fibras. Este trabalho teve por objetivo produzir, extrair e caracterizar piocianina de dois isolados selvagens de Pseudomonas aeruginosa, TGC02 e TGC04, e empregar o pigmento em duas fibras têxteis. Caldo King A suplementado com bagaço de malte 2% (m/v) foi utilizado para a produção do pigmento e produziu-se cerca de 30 mL de solução de piocianina (585 μg/mL), com alto grau de pureza. Foram determinados parâmetros cinéticos de produção máxima de células, produção máxima de pigmento e coeficiente de rendimento. Além disso determinou-se a concentração celular e taxa de crescimento. O tingimento com 50 e 100 μg/mL de piocianina nas fibras de algodão e poliéster/elastano ocorreu pelo método da exaustão, utilizando bicarbonato de sódio como mordente. O desempenho de TGC02 e TGC04 foi similar. Houve incremento da população em até 9,5 vezes a partir do inóculo, produzindo uma concentração máxima de piocianina cerca de 1,0 μg/mL.h-1, aumentando significativamente a partir de 36h de bioprocesso, permanecendo crescente e parecendo modular a população celular. O coeficiente de rendimento foi de até 240 μg/mL.UA-1. A piocianina foi mais funcional ao algodão, produzindo duas tonalidades de azul, sem sofrer alterações significativas após lavagem e secagem. Adicionalmente, foram registrados os maiores percentuais de absorção do pigmento e os menores percentuais de exaustão. O oposto foi verificado na fibra de poliéster/elastano. A adsorção do pigmento foi baixa, influenciando na cor obtida, cuja percepção à luz branca foi de um lilás-azulado muito pálido. Os tons variaram em função da concentração aplicada. Concluiu-se que a piocianina pode ser uma alternativa de agente de coloração para a fibra de algodão.

Leishmaniasis is a major public health problem, affecting thousands of people annually. The treatment of this neglected disease has several limitations, the drugs used for the treatment of patients have high toxicity, severe adverse effects, difficult administration, and high cost. Being the therapy of this pathology mainly based on the administration of pentavalent antimonials, which have been used since 1945. All these problems result in discontinuation of treatment by patients and, consequently, the emergence of resistant strains. Because of all these treatment difficulties and the absence of vaccines, there is urgency in the search for new therapeutic drugs that are effective against parasites and do not present harm to the patient. Therefore, in this work, we evaluated the anti-Leishmania activity of derivatives acridine-thiosemicarbazone and the reference drug amphotericin B against promastigote and amastigote forms of Leishmania infantum and its cytotoxicity against human erythrocytes. The results showed that the acridine-thiosemicarbazone derivatives (GLDL 03 and GLDL 06) and the reference drug showed activity against promastigotes of L. infantum, with CI50 of 3.512μg/mL, 5.279 μg/mL and 0.955 μg/mL, respectively. The compounds GLDL 03 and GLDL 06 and the amphotericin B were also active against the axênic amastigote forms of L. infantum, with values of CE50 6.201 μg/mL, 7.550μg/mL, 0.476 μg/mL, in this sequence. It was noted these compounds have shown promise in vitro, it is necessary to conduct more detailed studies that identify their mechanisms of action and they can be used in the treatment of leishmaniasis. Owing to these compounds have shown promise in vitro, it is necessary to conduct more detailed studies that identify their mechanisms of action and they can be used in the treatment of leishmaniasis. Thus, the continuity of tests that elucidate such paths is extremely important in the research of a disease so neglected. Nenhuma A leishmaniose é um importante problema de saúde pública, afetando milhares de pessoas anualmente. O tratamento dessa doença negligenciada apresenta várias limitações, as drogas utilizadas para tratamento dos pacientes possuem alta toxicidade, efeitos adversos graves, difícil administração, e custo elevado. Sendo a terapêutica dessa patologia baseada principalmente na administração de antimoniais pentavalentes, que são utilizados desde 1945. Todos esses problemas resultam na descontinuação do tratamento pelos pacientes e, consequentemente surgimento de cepas resistentes. Devido a todas essas dificuldades de tratamento e a ausência de vacinas, há urgência na busca de novas drogas terapêuticas, que sejam eficazes contra os parasitos e que não apresentem malefícios para o paciente. Nesse contexto, este trabalho avaliou a atividade anti-Leishmania de derivados tiossemicarbazônicos-acridínicos e do fármaco de referência, anfotericina B, contra formas promastigotas e amastigotas axênicas de Leishmania infantum e a sua citotoxicidade frente a eritrócitos humanos. Os resultados demonstraram que os derivados tiossemicarbazônicos-acridínicos (GLDL 03 e GLDL 06) e o fármaco de referência, anfotericina B, apresentaram atividade contra formas promastigotas de L. infantum, com CI50 de 3,512μg/mL, 5,279 μg/mL e 0,955 μg/mL, respectivamente. Os compostos GLDL 03 e GLDL 06 e a anfotericina B, também se mostraram ativos contra as formas amastigotas axênicas de L. infantum, com valores de CE50 6,201 μg/mL, 7,550μg/mL, 0,476 μg/mL, nesta sequência. Foi observado que os derivados tiossemicarbazônicos-acridínicos possuem atividade biológica anti-Leishmania relevante contra as formas celulares do parasita e não apresentaram toxicidade para as células sanguíneas humanas. Visto que esses compostos se apresentaram promissores in vitro, cabe a realização de estudos mais detalhados que identifiquem os seus mecanismos de ação e eles possam vir a serem utilizados no tratamento da leishmaniose. Dessa forma, a continuidade de testes que elucidem tais caminhos é de extrema importância na pesquisa de uma doença tão negligenciada.

A oleosidade de pele é uma das disfunções que mais acometem mulheres aqui no Brasil, devido ao clima predominante do país e ao tipo de pele da maioria da população. É possível observar, que os sinais decorrentes desta disfunção, proporcionam incomodo aos pacientes, assim como problemas futuros e persistentes, como acne, marcas e manchas. Essa dissertação tem como objetivo analisar quais os tratamentos estéticos disponíveis hoje, assim como testar a efetividade e durabilidade da toxina botulínica juntamente com a vitamina B3 na oleosidade de pele. Os tratamentos encontrados que mais são utilizados hoje são distribuídos em três categorias, sendo elas: ativos tópicos de uso domiciliar, ácidos de uso domiciliar ou em consultório e procedimentos estéticos realizados em consultório com equipamento como a luz pulsada, ou procedimentos minimamente invasivos, como toxina botulínica e microagulhamento. Analisando a eficácia da toxina botulínica e da vitamina B3 frente a oleosidade de pele através dos artigos já relatados, foi sugerido um protocolo de tratamento utilizando a toxina botulínica juntamente com a vitamina B3. A partir disso, foi realizado uma pesquisa experimental, onde foi testado a eficácia de um protocolo de tratamento utilizando esses dois compostos e comparado com o protocolo já existente que é o ácido salicílico e também comparado com a toxina botulínica sem a vitamina B3. O objetivo, foi analisar se esse protocolo de tratamento tem uma boa efetividade e durabilidade. O protocolo consiste na toxina botulínica diluída com 4ml de solução fisiológica estéril e acrescentado mais 2ml de vitamina B3. Este protocolo apresentou resultados significativos, com durabilidade superior a toxina botulínica sem vitamina B3 e resultados superiores ao protocolo já existente com ácido salicílico. Skin oiliness is one of the disorders that most affect women here in Brazil, due to the country's predominant climate and the skin type of the majority of the population. It is possible to observe that the signs resulting from this dysfunction, cause discomfort to patients, as well as future and persistent problems, such as acne, acne marks and spots. This dissertation will aim to analyze what aesthetic treatments are available today, as well as to test the effectiveness and durability of botulinum toxin together with vitamin B3 in skin oils. The treatments found that are most used today are divided into three categories, namely: topical active ingredients for home use, acids for home use or in the office and aesthetic procedures performed in the office with equipment such as pulsed light, or minimally invasive procedures, such as toxin botulinum and microneedling. Analyzing the effectiveness of botulinum toxin together with vitamin B3 against skin oils. An experimental research will be carried out, where the effectiveness of a treatment protocol using these two compounds will be tested and compared with the existing protocol, which is salicylic acid and also compared with botulinum toxin without vitamin B3. The objective is to analyze whether this treatment protocol has a good effectiveness and durability. The protocol will consist of botulinum toxin diluted with 4ml of sterile saline and added 2ml of vitamin B3. It is expected that this protocol will present significant results, with durability greater than or equal to botulinum toxin without vitamin B3 and that it will have results superior to the already existing protocol with salicylic acid.

A contaminação por petróleo em solos e ambientes aquáticos è problemática principalmente pela presença de poluentes orgânicos persistentes e tóxicos que podem impactar o meio ambiente por décadas. Mesmo com a ação de tratamentos biológicos, como a biorremediação, são encontradas algumas limitações para remediar totalmente tais meios contaminados, como o tempo de adaptação dos microrganismos biorremediadores e a retenção profunda de compostos como hidrocarbonetos aromáticos policiclicos. Esses fatores indicam a necessidade de novas metodologias que aprimorem a eficiência da biorremediação, tal como nanobiorremediação, técnica inovadora que une fundamentos da nanotecnologia, com a aplicação de nanoparticulas (NPs) ao processo de biorremediação. Esta dissertação aborda estes temas em dois capitulos. O capitulo 1 discorre acerca das duas áreas, biorremediação e nanobiorremediação, e sobre o potencial de aplicação no tratamento ambiental usando nanofabricas, microrganismos vivos capazes de produzir nanoparticulas. O artigo possui como principal conclusão de que a produção de nanoparticulas com nanofábricas è vantajosa à nanobiorremediação em detrimento às alternativas quimicas, porém há necessidade de se elucidar o mecanismo celular adotado pelo microrganismo na produção de nanoparticulas em larga escala e sua utilização como nanofabrica na biorremediação. O capitulo 2 apresenta um artigo experimental com o principal objetivo de avaliar metodologias para o acompanhamento da nanobioremediação de petróleo por bactéria Bacillus subtilis e nanoparticulas metálicas de ferro (Oxido de ferro III) e zinco (Oxido de Zinco). A metodologia proposta neste capitulo se dividiu em: proposta de delineamento experimental, para definição das principais variáveis a serem otimizadas; padronização da metodologia de inoculação, através da determinação da linearidade da densidade óptica (DO); e avaliação da metodologia de análise gravimétrica aplicada à determinação da remoção do petróleo em nanobiorremediação, A nanobiorremediação proposta neste trabalho fez uso das nanoparticulas de FeO, e ZnO em pó adquiridas comercialmente com a ação biorremediadora da bactéria Bacillus subtilis, sem técnicas de imobilização em meio mineral contaminado com petróleo cru. Os resultados obtidos indicam que o método gravimétrico para avaliação da quantidade mássica de petróleo residual ao longo do tempo de degradação não foi bem-sucedido, devido a presença de água em determinadas amostras pós extração ou a interação da amostra com os sais utilizados como dissecantes: Reitera-se como diferencial de hipótese trazida pela presente pesquisa a importancia de dissertar sobre a otimização da nanobioremediação na degradação do poluente petróleo, uma vez que a nanobioremediação é uma estratégia de tratamento nova, e as metodologias de análise aplicadas para a biorremediação não necessariamente são aplicáveis a técnica devido ao impacto das NPs, tendo a necessidade de serem reavaliadas. Oil contamination in soils and aquatic environments is a world-wide problem when extracting and manipulating petrol origins mainly due to the presence of persistent and toxic organic pollutants that can impact the environment for decades. Even with the action of biological treatments, such as bioremediation, some limitations are found to fully remediate such contaminated areas, such as the adaptation time of bioremediation microorganisms and the deep retention of compounds like the Polycyclic Aromatic Hydrocarbons (PAHs). These factors indicate the need for new methodologies that improve the efficiencies of bioremediation. Nanobioremediation, an innovative technique that combines fundamentals of nanotechnology. with the application of nanoparticles (NPS), to the bioremediation process, is one strategy for filling the gaps of bioremediation This dissertation addresses these issues in two chapters Chapter I discusses bioremediation and nanobioremediation, and the potential application in environmental treatment using nanofactories, living microorganisms capable of producing nanoparticles. The main conclusion of the article is that the production of nanoparticles with nanofactories is advantageous to nanobioremediation over chemical alternatives, but there is a need to elucidate the cellular mechanism adopted by the microorganism in the production of nanoparticles, especially if said production can be on a larger scale and the use of nanofactories in bioremediation. Chapter 2 presents an experimental article with the main objective of evaluating methodologies for monitoring the nanobioremediation of petroleum by Bacillus subtilis bacteria and metallic iron and zinc nanoparticles. The methodology proposed in this chapter was divided into the experimental design, to define the main variables to be optimized. standardization of inoculation methodology, through the determination of optical density (OD) linearity; and evaluation of the gravimetric analysis methodology applied to the determination of oil removal in nanobioremediation. The nanobioremediation evaluated in this work made use of FeO and ZnO nanoparticles in powder purchased commercially with the bioremediation action of the bacteria Bacilles subtilis, without immobilization techniques in mineral medium contaminated with crude oil. The results obtained indicate that the gravimetric method to evaluate the mass amount of residual oil over the degradation time was not successful, due to the presence of water in certain samples after extraction or the interaction of the sample with the salts used as desiccants. As a differential hypothesis brought by the present research, the importance of discussing the optimization of nanobioremediation in the degradation of petroleum pollutants is reiterated, since nanobioremediation is a new treatment strategy, and the analysis methodologies applied to bioremediation are not necessarily applicable to the technique due to the impact of the NPs, having the need to be reassessed.

A rosácea é considerada uma lesão do tecido cutâneo com a presença de infiltrado inflamatório e dependendo do grau apresentado também apresenta um infiltrado bacteriano, onde é possível observar pústulas nas regiões afetadas. Apesar de acometer ambos os sexos, a rosácea é predominante no sexo feminino, geralmente em mulheres de fototipos mais baixos e com relação a idade a prevalência é maior após os 35 anos. A maioria das pessoas afetadas sofrem com os sinais que a alteração apresenta pois ainda não há cura para tal disfunção apenas controle e que muitas vezes podem gerar transtornos maiores devido a agressividade ao organismo. Os tratamentos encontrados que mais são utilizados hoje são divididos basicamente em duas classes de medicamentos - os antibióticos e corticoides, ambos promovem efeitos colaterais altos e em alguns casos o uso concomitante pode desencadear resistência como é o caso do antibiótico. A toxina botulínica também já é utilizada de forma isoladapara tentar controlar os sintomas da rosácea, porém existe a necessidade de novos protocolos que sejam mais efetivos e duradouros no que se diz respeito aos sinais que a rosácea apresenta. O objetivo principal dessa pesquisa, é desenvolver um protocolo para controle dos sintomas da rosácea com a utilização da toxina botulínica A em associação ao anti-inflamatório, a luteolina. O protocolo consiste em hiperdiluir a toxina botulínica A, com 4 ml e adicionar 2 ml durante a diluição da luteolina, tendo ao fim uma solução (soro + toxina botulínica A + Luteolina) de 6 ml, a aplicação será realizada de forma intradérmica em todas as regiões afetadas, cada ponto será infiltrado de 1 a 2 unidades da solução. Os resultados, foram significativos ao controle dos sinais e sintomas da rosácea e a média da durabilidade foi de 90 dias, sendo então superior ao protocolo já existente que é apenas a aplicação de toxina botulínica do tipo A. Rosacea is considered a lesion of the skin tissue with the presence of inflammatory infiltrate and depending on the degree presented it also presents a bacterial infiltrate, where it is possible to observe pustules in the affected regions. Despite affecting both sexes, rosacea is predominant in females, generally in women of lower phototypes and with respect to age, the prevalence is higher after 35 years of age. Most of the affected people suffer from the signs that the alteration presents because there is still no cure for such dysfunction, only control and which can often generate major disorders due to aggression to the organism. The treatments found that are most used today are basically divided into 2 classes of drugs - antibiotics and corticosteroids, both promote high side effects and, in some cases, concomitant use can trigger resistance as is the case with the antibiotic. Botulinum toxin is also used in isolation to try to control rosacea symptoms, but there is a need for new protocols that are more effective and longlasting with regard to the signs that rosacea presents. The main objective of this dissertation is to develop a protocol for the control of rosacea symptoms with the use of botulinum toxin A in association with anti-inflammatory drugs, in this case, luteolin. The protocol consists of hyperdiluting the botulinum toxin A, with 4 ml and adding 2 ml during the dilution of luteolin, having at the end a solution (serum + botulinum toxin A + Luteolin) of 6 ml, the application will be performed intradermally in all the affected regions, each point will be infiltrated from 1 to 2 units of the solution. The results were significant in controlling the signs and symptoms of rosacea and the average durability was 90 days, being then superior to the existing protocol, which is only the application of type A botulinum toxin.

As plantas medicinais vêm sendo utilizadas há muitos anos para tratar e diminuir os sintomas de doenças, portanto é importante que novas pesquisas com plantas sejam realizadas, visando avaliar seus efeitos medicinais e possibilitando a produção de um fitoterápico. A avaliação de plantas medicinais, seus compostos e efeitos medicinais que são popularmente conhecidos é essencial, porém, a avaliação de seus possíveis efeitos imunomoduladores como estimulação da produção de citocinas pró-inflamatórias e aumento da atividade de certas células do nosso sistema imune tem extrema relevância. A Ocotea puberula, conhecida popularmente como canela-guaicá, canela-parda, canela-sebo ou como guaicá, faz parte da família Lauraceae e é utilizada para disenterias, diarreias e pode ser indicada para uso em casos de eczema, dermatoses, efeitos anti-inflamatórios, analgésicos, antioxidantes e estimulantes. Este trabalho tem como objetivo avaliar o potencial imunomodulador do extrato bruto da Ocotea puberula. Foi realizada a extração hidroalcoólica à quente para preservar os alcaloides do extrato. A parte experimental consiste em um total de 160 camundongos Swiss machos de aproximadamente 20g que serão divididos em 2 grupos de experimentos, sendo eles Fase 1 e Fase 2, contendo 40 e 120 camundongos em cada grupo, respectivamente. A Fase 1 consistirá na avaliação da produção e determinação do óxido nítrico. A fase 2 consiste na avaliação de biomarcadores hematológicos e imunológicos in vivo. Os dados obtidos das análises foram avaliados através da análise de variância ANOVA seguido pelo teste de Bonferroni. O nível de significância adotado será de 5%. No experimento de Fase 1 para a determinação de óxido nítrico in vitro, a concentração de 50 ng/mL se destacou e foi utilizada como base para a fase 2 deste estudo. Na análise de biomarcadores hematológicos da fase 2, foi possível observar alterações em todos os grupos expostos. A principal alteração foi um aumento significativo de neutrófilos quando comparado com o grupo controle. A concentração de óxido nítrico no experimento in vivo apresentou resultado superior em todos os grupos expostos e a concentração apresentou aumento conforme o tempo de exposição ao extrato. Estes resultados indicam que o extrato bruto da Ocotea puberula possui potencial imunomodulador. Medicinal plants have been used for many years to treat and reduce the symptoms of diseases, so it is important that new research with plants be carried out, aiming to evaluate their medicinal effects, and enabling the production of a phytotherapics. The evaluation of medicinal plants, their compounds and medicinal effects that are popularly known is essential, however, the evaluation of their possible immunomodulatory effects such as stimulation of the production of proinflammatory cytokines and increased activity of certain cells of our immune system is extremely relevant. Ocotea puberula, popularly known as cinnamon-guaicá, cinnamon-parda, cinnamonsebo or as guaicá, is part of the Lauraceae family and is used for dysentery, diarrhea and can be indicated for use in cases of eczema, dermatoses, anti-inflammatory effects, inflammatory, analgesic, antioxidant, and stimulant. This work aims to evaluate the immunomodulatory potential of the crude extract of Ocotea puberula. Hot hydroalcoholic extraction was performed to preserve the alkaloids in the extract. The experimental part consists of a total of 160 male Swiss mice weighing approximately 20g that will be divided into 2 experimental groups, Phase 1 and Phase 2, containing 40 and 120 mice in each group, respectively. Phase 1 will consist of evaluating the production and determination of nitric oxide. Phase 2 consists of the evaluation of hematological and immunological biomarkers in vivo. The data obtained from the analyzes were evaluated through analysis of variance ANOVA followed by the Bonferroni test. The oxide determination, the concentration of 50 ng/mL stood out and was used as the basis for phase 2 of this study. In the analysis of phase 2 hematological biomarkers, it was possible to observe changes in all exposed groups. The main change was a significant increase in neutrophils when compared to the control group. The concentration of nitric oxide in the in vivo experiment showed superior results in all exposed groups and the concentration increased with the time of exposure to the extract. These results indicate that the crude extract of Ocotea puberula has immunomodulatory potential.

A acne é uma inflamação cutânea crônica que acomete jovens e adultos de diferentes faixas etárias. Sua etiologia é multifatorial e desencadeia desde lesões leves até lesões comedogênicas que podem causar cicatrizes por vezes inestéticas. Vários fármacos têm sido empregados no tratamento da acne, entretando, as terapias convencionais apresentam, em grande parte, efeitos colaterais suficientes para limitar os tratamentos aos pacientes acometidos. Dentre os tratamentos tradicionais, o uso de terapias com antibióticos é prevalente, desencadeando a resisitência do Cutibacterium acnes frente a esses agentes. Partindo do exposto, há o interesse de desenvolver novos tratamentos para a acne, onde inclui-se a medicina complementar alternativa (CAM). A CAM utiliza, dentre outras terapias, as que empregam fitoterápicos, considerando a presença de compostos potencialmente efetivos, os quais já demonstraram efeitos antiinflamatórios e antibacterianos nesta condição. A demanda aumentada na procura da população por tratamentos que utilizem fitoterápicos na sua composição alavancou os investimentos da indústria cosmética em tratamentos com esses atributos. Desta forma, explorar o uso de fitoterápicos que apresentem potencial no seu uso para tratamentos alternativos se faz necessário e devem ser aprofundados. Este estudo teve como objetivo desenvolver uma formulação a base dos fitoterápicos Malva sylvestris L. e Arctium lappa L. com finalidade antiacne. Para tanto, fórmulas farmacêuticas de uso tópico (sérum) préviamente elaboradas contendo os extratos de forma individual e associados foram submetidas aos testes. No teste de estabilidade acelerada, as formulações foram submetidas à diferentes condições de temperatura e tempos, as quais foram posteriormente avaliadas acerca das características organolépticas e físico-químicas como pH e densidade. Para a investigação da capacidade antibacteriana dos extratos fitoterápicos da M. sylvestris e A. lappa, formulações contendo os extratos de forma associada e isolada nas concentrações de 0,25; 0,50; 0,75; 1,00; 5,00; 10,00, 25,00 e 50,00 (g/L) foram submetidas ao teste de disco e difusão e da concentração inibitória mínima (CIM). Em ambos os testes a avaliação foi realizada em aerobiose e microaerofilia. Os resultados do teste de estabilidade acelerada demonstraram que as fórmulas contendo os extratos permaceram estáveis nas condições de temperatura ambiente e expostas a luz solar, considerando os parâmetros avaliados durante o tempo que perdurou o ensaio. Nos ensaios da CIM e no teste de disco e difusão, os extratos utilizados neste estudo não apresentaram capacidade de inibir o crescimento das bactérias que foram submetidas ao teste (Cutibacterium acnes, Staphylococcus aureus e Staphylococcus epidermidis). Com as pesquisas realizadas em artigos científicos acerca das plantas medicinais para suporte deste estudo, foi possível o desenvolvimento e publicação do artigo “Medicina alternativa à base de plantas medicinais no tratamento na acne” na revista Research, Development and Society. Acne is a chronic skin inflammation that affects young people and adults of different age groups. Its etiology is multifactorial and triggers from mild injuries to comedogenic injuries that can cause scars that are sometimes unsightly. Several drugs have been used to treat acne, however, conventional therapies have, for the most part, enough side effects to limit treatments to affected patients. Among traditional treatments, the use of antibiotic therapies is prevalent, triggering Cutibacterium acnes resistance to these agents. Based on the above, there is an interest in developing new treatments for acne, including alternative complementary medicine (CAM). CAM uses, among other therapies, those that employ herbal medicines, considering the presence of potentially effective compounds, which have already shown anti-inflammatory and antibacterial effects in this condition. The increased demand in the population's demand for treatments that use herbal medicines in their composition leveraged the cosmetic industry's investments in treatments with these attributes. Thus, exploring the use of herbal medicines that have potential for their use for alternative treatments is necessary and should be deepened. This study aimed to develop a formulation based on the herbal medicines Malva sylvestris L. and Arctium lappa L. with anti-acne purpose. For this purpose, pharmaceutical formulas for topical use (serum) previously elaborated containing individual and associated extracts were submitted to the tests. In the accelerated stability test, the formulations were subjected to different conditions of temperature and times, which were later evaluated on organoleptic and chemical physical characteristics such as pH and density. For the investigation of the antibacterial capacity of herbal extracts of M. sylvestris and A. lappa, formulations containing the extracts in an associated and isolated form at concentrations of 0.25; 0.50; 0.75; 1.00; 5.00; 10.00, 25.00 and 50.00 (g/L) were submitted to the disk and diffusion test and the minimum inhibitory concentration (MIC). In both tests the evaluation was carried out in aerobiosis and microaerophilia. The results of the accelerated stability test showed that the formulas containing the extracts remained stable at room temperature and exposed to sunlight, considering the parameters evaluated during the time that the test lasted. In the CIM tests and in the disk and diffusion test, the extracts used in this study did not show the capacity to inhibit the growth of the bacteria that were submitted to the test (Cutibacterium acnes, Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis). With the research carried out in scientific articles about medicinal plants to support this study, it was possible to develop and publish the article “Alternative medicine based on medicinal plants in the treatment of acne” in the journal Research, Development and Society.

Crohn's disease is an inflammatory bowel disease characterized by exacerbated chronic inflammation that results in severe damage to the intestine. The treatment of this disease aims to reduce inflammation and promote healing of the mucosa. IL-1β is a pro-inflammatory cytokine that triggers intestinal inflammation and participates in the pathogenesis of the disease, becoming a candidate for a therapeutic approach. However, the lack of success of IL-1β inhibitors in the treatment of this disease may be associated with the intravenous administration route that causes systemic inhibition of this cytokine and side effects. To overcome these limitations, the local release of biopharmaceuticals can change the current scenario, restricting therapy at the inflammatory site. The development of Lactococcus lactis strains capable of providing a eukaryotic expression vector that encodes a single-chain variable fragment (scFv) of the antibody represent a promising strategy for the development of an effective therapy, capable of guaranteeing the expression of the antibody directly in the mucosa tract inflamed intestinal tract. Thus, the objective of this work was to evaluate the anti-inflammatory effects of L. lactis (FnBPA) carrying the pValac plasmid that encoding anti-IL-1β scFv in an experimental model of chemically TNBS induced Crohn's disease by. For that, female BALB/c mice were submitted to experimental colitis induced by TNBS for four weeks. The L. lactis culture was administered orally in the last 5 days of the experimental protocol. The day after the last treatment day, the animals were euthanized and the macroscopic, histopathological and histochemical parameters were evaluated. An improvement in the macroscopic parameters of the disease was observed in the group treated with L. lactis FnBPA + (pValac::anti-IL-1β) in relation to the other groups submitted to induced colitis. In the histopathological analysis, the beneficial effect of the treatment was better in the proximal region of the colon, with a reduction in the score of histological damage, due to the reduction of the inflammatory infiltrate and maintenance of the mucous layer. However, treatment with L. lactis FnBPA + (pValac::anti-IL-1β) reduced mucin-producing cells, indicating a detrimental effect of IL-β inhibition in the model. In summary, the results suggest the benefits of L. lactis FnBPA + (pValac::anti-IL-1β) in reducing some colitis parameters, but the side effects on mucins production reinforce the pleiotropic action of IL-1β in the experimental model of disease of Cronh. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES A doença de Crohn é uma doença inflamatória intestinal caracterizada por inflamação crônica exacerbada que resulta em dano grave no intestino. O tratamento dessa doença objetiva reduzir a inflamação e promover cicatrização da mucosa. A interleucina-1β (IL-1β) é uma citocina pró-inflamatória que desencadeia a inflamação intestinal e participa da patogênese da doença, tornando-se candidata para abordagem terapêutica. Contudo, a falta de sucesso de inibidores de IL-1β no tratamento dessa doença pode estar associado à via de administração intravenosa que causa inibição sistêmica dessa citocina e efeitos colaterais. Para contornar estas limitações, a entrega local de biofármacos poderia mudar o cenário atual, restringindo a terapia no sítio inflamatório. O desenvolvimento de linhagens de Lactococcus lactis capazes de entregar um vetor de expressão eucariótica que codifique um fragmento variável de cadeia única (scFv) de anticorpo representa uma estratégia promissora para a elaboração de uma terapia efetiva, capaz de garantir uma expressão do anticorpo diretamente na mucosa intestinal inflamada. Assim, o objetivo deste trabalho foi efeitos avaliar os efeitos anti-inflamatórios de L. lactis (FnBPA) carreadora do plasmídeo pValac codificador do scFv anti-IL-1β em um modelo experimental de doença de Crohn induzido quimicamente por TNBS. Para tanto, camundongos BALB/c fêmeas foram submetidos à colite experimental induzida por TNBS por quatro semanas. A cultura de L. lactis foi administrada oralmente nos 5 últimos dias do protocolo experimental. No dia seguinte ao último dia de tratamento, os animais foram eutanasiados e os parâmetros macroscópicos, histopatológicos e histoquímicos avaliados. Observou-se uma melhora nos parâmetros macroscópicos da doença no grupo tratado com L. lactis FnBPA+ (pValac::anti-IL-1β) em relação aos demais grupos submetidos à colite induzida. Na análise histopatológica, o efeito benéfico do tratamento mostrou-se melhor na região proximal do cólon, com redução do escore de dano histológico, devido a redução do infiltrado inflamatório e manutenção da camada da mucosa. Contudo, o tratamento com L. lactis FnBPA+ (pValac::anti-IL-1β) promoveu redução de células produtoras de mucinas, indicando um efeito prejudicial da inibição de IL-β no modelo. Em suma, os resultados sugerem benefícios de L. lactis FnBPA+ (pValac::anti-IL-1β) na redução de alguns parâmetros da colite, mas efeitos colaterais na produção de mucinas reforçam a ação pleiotrópica de IL-1β no modelo experimental de doença de Cronh.

In Brazil, drugs used in cattle have great pollution potential, as the total number of animals exceeds the number of inhabitants. Among these drugs, antiparasitics stand out because they are routinely and prophylactically used in pest control management strategies. In this context, macrocyclic lactones appear as the most important class of antiparasitics worldwide, encompassing two subgroups: avermectins and milbemycins. Although the environmental effects of several avermectins have attracted the attention of researchers, studies on the effects of the main milbemycin (moxidectin) remain scarce. Thus, the present study aimed to elucidate the potential effects of moxidectin in zebrafish embryos (Danio rerio) to provide information on its ecotoxicological profile. For this purpose, we studied the effects of moxidectin through apical endpoints, as well as through enzymatic biomarkers for oxidative stress, xenobiotic processing, anaerobic metabolism, and cholinergic neurotransmission. Moreover, the spatial distribution of moxidectin was determined by means of MALDI-MS imaging, in addition chemical analysis of the embryos and respective exposure solutions. Moxidectin toxicity to zebrafish embryos manifested mainly as a decrease in hatching rates at 96 hpf (EC50 = 18.98 μg/L). It also increased the enzymatic activity of all selected biomarkers and accumulated in the embryos, appearing in concentrations ranging from 0.003-0.03 μM in exposure solutions and from 50-200 μM in embryos. MALDI-MS imaging revealed pockets of the drug mainly in the head and eyes of the embryos (72 and 96 hpf). Thus, our results show that moxidectin causes oxidative stress and a clear pattern of neurotoxicity in early life stages of zebrafish, demonstrating the need to prioritize this compound for environmental studies. Nenhuma No Brasil, as drogas utilizadas em rebanhos bovinos têm grande potencial contaminante, uma vez que o número de animais no rebanho brasileiro supera o número de habitantes. Dentre estas drogas, os antiparasitários se destacam por serem utilizados de forma contínua e profilática em planos de manejo de pragas. Neste contexto, as lactonas macrocíclicas aparecem como a classe de antiparasitários mais importante no cenário global, abrangendo dois subgrupos: avermectinas e milbemicinas. Embora os efeitos ambientais de várias avermectinas tenha atraído atenção de pesquisadores, estudos sobre os efeitos ambientais da principal milbemicina, a moxidectina, continuam escassos. Portanto, o presente trabalho visou elucidar os potenciais efeitos da moxidectina em embriões de peixe-zebra (Danio rerio), numa perspectiva de fornecer informações sobre seu perfil ecotoxicológico. Para isso, foram estudados os seus efeitos apicais, bem como marcadores enzimáticos de neurotransmissão colinérgica, processamento de xenobióticos, estresse oxidative e metabolismo anaeróbico. Também foi estudada a distribuição espacial e a captação do químico pelos embriões de zebrafish por meio de imagens de MALDI-MS e espectrometria de massas, respectivamente. A toxicidade aguda da moxidectina para os embriões de peixe-zebra manifestou-se principalmente como uma diminuição nas taxas de eclosão até 96 hpf (EC50 = 18,98 μg/L). Também foi verificado um aumento na atividade enzimática de todos os biomarcadores enzimáticos, além de um acúmulo da droga nos embriões, que apareceu em concentrações de 0,003 a 0,03 μM nas soluções de exposição, contra 50 a 200 μM nos embriões. As imagens de MALDI-MS revelaram acumulação do fármaco principalmente na cabeça e nos olhos dos embriões (72 e 96 hpf). Assim, nossos resultados mostraram que a moxidectina causa estresse oxidativo e um claro padrão de neurotoxicidade aos estágios iniciais da vida do peixe-zebra, demonstrando o potencial risco ambiental da moxidectina para os ecossistemas aquáticos.

Snakes of the Bothrops genus are of great scientific, medical and social interest in Brazil, because they are responsible for the largest number of snakebites that occurrences in the country. Toxins isolated from snake venoms have several biological activities and are classified in different classes, one being phospholipases A2 (PLA2), which can cause a variety of physiological changes when inoculated in organisms. This study aimed to isolate, characterize and evaluate the biological functions of a PLA2 (BaltAc-PLA2) from the crude venom of the snake Bothrops alternatus, popularly known as urutu-cruzeiro. The purification of this toxin was performed using two chromatography steps (anion exchange and reverse phase). With the intention to verify the purity of the samples obtained in the liquid chromatography experiments, polyacrylamide gels (SDS PAGE) at 12% (w/v) were performed. Mass spectrometry, Circular Dichroism Spectroscopy and Dynamic Light Scattering tests were performed to physico-chemical characterization the isolated toxin. The catalytic action of the toxin was evaluated spectrophotometrically using the substrate Diheptanoyl Thio-PC and indirectly, with erythrocytes and egg yolk. In addition, three potential inhibitors were evaluated: varespladib, suramine and rosmarinic acid. The potential oxidizing effect of BaltAc-PLA2 on hemoglobin solutions (SolHb) was performed using microplate reader (Multiskan GO) in wavelengths of 540 and 630 nm. To assess the coagulant activity, readings were made using the Coagmaster 2.0 (Wama) equipment. BaltAc-PLA2 is an acidic character and catalytically active protein, with an approximate molecular mass of 14 kDa estimated by SDS PAGE. The analysis of ion fragments by MS / MS showed an amino acid sequence from the catalytic site CCFVHDCCYGK, presenting homology with several PLA2 of acid character present in venoms of snakes of the genus Bothrops. Structural studies using this PLA2 can assist in the development of new therapeutic agents, for possessing high scientific and technological potential. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Serpentes do gênero Bothrops são de grande interesse científico, médico e social no Brasil, pois são responsáveis pelo maior número dos acidentes ofídicos que ocorrem no país. As toxinas isoladas de peçonhas ofídicas apresentam diversas atividades biológicas e são classificadas em diferentes classes, sendo uma delas as fosfolipases A2 (PLA2), que podem causar uma variedade de alterações fisiológicas ao serem inoculadas em organismos. Este estudo objetivou isolar, caracterizar e avaliar as funções biológicas de uma PLA2 (BaltAc-PLA2) da peçonha bruta da serpente Bothrops alternatus, conhecida popularmente como urutu-cruzeiro. A purificação dessa toxina foi realizada usando dois passos de cromatografia líquida (troca iônica e fase reversa). Com o intuito de verificar a pureza das amostras obtidas nos experimentos de cromatografia líquida, géis de poliacrilamida (SDS-PAGE) à 12% (m/v) foram realizados. Ensaios de Espectrometria de Massas, Espectroscopia do Dicroísmo Circular e Espalhamento de Luz Dinâmico foram realizados para a caracterização físico-química da toxina isolada. A ação catalítica da toxina foi avaliada espectrofotometricamente utilizando o substrato Diheptanoil Tio-PC e de modo indireto, com eritrócitos e gema de ovo. Além disso, foram avaliados três potenciais inibidores: varespladib, suramina e ácido rosmarínico. O potencial efeito oxidante da BaltAc-PLA2 sobre soluções de hemoglobinas (SolHb) foi realizado utilizando leitor de microplacas (Multiskan GO), nos comprimentos de ondas de 540 e 630 nm. Para avaliar a atividade coagulante, leituras foram feitas com a utilização do equipamento Coagmaster 2.0 (Wama). BaltAc-PLA2 é uma proteína de caráter ácido e cataliticamente ativa, com uma massa molecular aproximada de 14 kDa estimada por SDS-PAGE. As análises dos fragmentos de íons por MS/MS mostraram uma sequência de aminoácidos do sítio catalítico CCFVHDCCYGK, apresentando homologia com várias PLA2 de caráter ácido presentes nas peçonhas de serpentes do gênero Bothrops. Estudos estruturais utilizando esta PLA2 podem auxiliar no desenvolvimento de novos agentes terapêuticos, por possuir potencial científico e tecnológico elevado.

CBMM - Companhia Brasileira de Metalurgia e Mineração Trypanosoma cruzi (T. cruzi) é o agente etiológico da doença de Chagas, pertencente ao grupo Kinetoplastida. Possui três principais formas evolutivas: tripomastigotas (formas infectivas), amastigotas e epimastigotas (formas replicativas no hospedeiro definitivo e no inseto vetor, respectivamente). Miosinas são proteínas motoras presentes nas células de mamíferos e também em T. cruzi. Nas células possuem diversas funções como fagocitose, citocinese, transdução de sinal e tráfego de organelas e partículas, e no músculo esquelético está diretamente relacionada com a contração muscular. Em kinetoplastidas, participa de processos de tráfego de vesículas intraparasitária e da montagem flagelar. Pentacloropseudilina (PCLP) é um inibidor da miosina do tipo 1, pertencente tanto em células quanto no parasita. T. cruzi utiliza-se de receptores, como CXCR4 e bradicinina para obter sucesso em seus mecanismos de invasão. Dectina-1 é um receptor lectínico e tem se mostrado importante em doenças relevantes como micoses, colites, obesidade, hepatite alcoólica, alergias e oncogenes. Além da sua capacidade de se ligar a β-glucanos, também se ligam a troponina, Mycobacterium, Leishmania, galectina e imunoglobulinas galactosiladas. O objetivo desse trabalho foi investigar o papel da miosina-1 de T. cruzi e de mioblastos murinos (C2C12) e do receptor Dectina-1 em macrófagos durante o processo de infecção por T. cruzi. No primeiro capítulo, avaliamos a motilidade, capacidade de aderência em C2C12, capacidade de multiplicação de amastigotas intracelulares, capacidade de liberar proteínas secretadas e a capacidade de invasão celular de T. cruzi após o bloqueio com PCLP. Para avaliar a miosina celular, além do bloqueio e avaliação do processo de invasão celular por T. cruzi, foi avaliado o tráfego intracelular de lisossomos e o papel de CHMP4B, envolvido na formação de corpos multivesiculares (MVBs). Vimos inicialmente que o PCLP não foi tóxico nem para T. cruzi, nem para C2C12, porém a inibição da miosina-1 do parasita alterou a sua motilidade e a distância percorrida por ele, sua capacidade de adesão à célula hospedeira ficou comprometida assim como sua capacidade de invadi-las. Ao biodisponibilizar rP21 para T. cruzi com a miosina-1 bloqueada no momento da invasão, esse processo é retomado, sugerindo a possibilidade dessa proteína não estar sendo secretada como deveria. Além disso, a capacidade de multiplicação intracelular desse parasita fica comprometida após 72 horas. Quando a miosina-1 de C2C12 é inibida, o processo de invasão por T. cruzi também fica comprometido devido ao tráfego intracelular estar prejudicado, principalmente de lisossomos. CHMP4B também interfere no processo de invasão do parasita e é potencializado quando bloqueamos a miosina-1 de células que superexpressam essa molécula. Portanto, miosina-1 tanto do parasita quanto da célula têm um papel fundamental na progressão de infecção por T. cruzi. No segundo capítulo, realizamos ensaios de invasão, multiplicação e investigamos a relação de rP21 com Dectina-1. Vimos que o receptor é importante para o sucesso da infecção por T. cruzi, pois na sua ausência os processos de invasão e multiplicação ficam defasados, além disso vimos que ao biodisponibilizar rP21 para os parasitos durante o processo de invasão, o índice é retomado ao nível de células WT, ao investigarmos mais a fundo, vimos que isso foi possível devido à alta expressão de CXCR4 em células knockout , sugerindo um mecanismo compensatório na ausência de Dectina-1. Ainda são necessários estudos complementares para entender o mecanismo celular como um todo, mas de modo geral conseguimos ver que Dectina-1 está participando diretamente do processo de invasão celular e multiplicação por T. cruzi. Trypanosoma cruzi (T. cruzi) is the etiologic agent of Chagas disease, belonging to Kinetoplastida group. It has three main evolutionary forms: trypomastigotes (infectious forms), amastigotes and epimastigotes (replicative forms in definitive host and vector insect, respectively). Myosins are motor proteins present in mammal cells and also in T. cruzi. In cells, they have several functions: phagocytosis, cytokinesis, signal transduction and organelles and particles traffic, and skeletal muscle is directly related to muscle contraction. In kinetoplastids, it participates in intraparasitic vesicle trafficking and flagellar assembly processes. Pentachloropseudilin (PCLP) is an inhibitor of type 1 myosin, belonging to both cells and the parasite. T. cruzi uses receptors, such as CXCR4 and bradykinin to obtain success in its invasion mechanisms. Dectin-1 is a lectin receptor and has been shown to be important in relevant diseases such as mycoses, colitis, obesity, alcoholic hepatitis, allergies and oncogenes. In addition to their ability to bind β-glucans, they also bind to troponin, Mycobacterium, Leishmania, galectin and galactosylated immunoglobulins. The aim of this work was investigate the role of T. cruzi and murine myoblasts (C2C12) myosin-1 and Dectin-1 receptor in macrophages during invasion process by T. cruzi. In the first chapter, we evaluated motility, ability to adhere to C2C12, ability to intracellular amastigotes multiply, ability to release secreted proteins, and capacity for T. cruzi after blocking with PCLP of cellular invasion. To assess cellular myosin, in addition to blocking and assessing the processes of cellular invasion by T. cruzi, intracellular lysosome traffic and CHMP4B role, involved in the formation of multivesicular bodies (MVBs), were evaluated. We initially observe that PCLP was not toxic to either T. cruzi or C2C12, but parasite myosin-1 inhibition altered its motility and the distance traveled by it, its ability to adhere to host cell, as well as its ability to invade them. By making rP21 available for T. cruzi with myosin-1 blocked at the time of invasion, this process is resumed, suggesting the possibility that this protein is not being secreted as it should. In addition, parasite intracellular multiplication capacity is compromised after 72 hours. When C2C12 myosin-1 is inhibited, invasion process by T. cruzi is also compromised due to impaired intracellular traffic, mainly of lysosomes. CHMP4B also interferes with parasite invasion process and is potentiated when we block myosin-1 from cells overexpressing this molecule. Therefore, myosin-1 from both parasite and cell has a fundamental role in infection progression by T. cruzi. In the second chapter, we performed invasion, multiplication assay and investigated rP21 relationship with Dectin-1. We observe that this receptor is important for T. cruzi infection success, because in its absence invasion and multiplication processes are outdated, in addition we saw that when make rP21 avaiable for parasites during invasion process, the index is resumed to WT cells level, upon further investigation, we observe that this was possible due to high expression of CXCR4 in knockout cells, suggesting a compensatory mechanism in absence of Dectin-1. Complementary studies are still needed to understand cellular mechanisms, but in general we can conclude that Dectin-1 is directly participating in cell invasion and multiplication process by T. cruzi. Tese (Doutorado)

Several genes have already been associated with breast cancer development and about 60% of cases cannot be explained by mutations in BRCA1 and BRCA2. For this reason, further studies have been developed indicating that polymorphic changes in mismatch repair mechanism genes, especially in MLH1 and MSH2 genes, constitute a risk factor for the development of sporadic tumors. Based on this information, the study aimed to genotype the SNH rs560246973 (T> C), rs2303425 (-118 T> C) SNH gene rs565410865 (G> T) in paraffin tissue samples from patients diagnosed with breast cancer. . One hundred paraffin tissue samples from patients from Paraíba State with histopathological diagnosis of breast cancer were analyzed. After DNA extraction as proposed by Shang Rong-Shi et al., And primer design by in silico validation, the results were obtained by applying the Dideoxy Single Allele-Specific PCR method and analyzed using Chi-square and exact tests. Fisher's, with a significance level of 5%. The analyzes suggest that the rs565410865 and rs560246973 SNPs, located in the intronic region of the MLH1 and MSH2 genes, respectively, were statistically associated with breast cancer in the analyzed samples (X² 100/100 and P-value 0.0001). In contrast, genotyping the SNP rs2303425, located in the promoter region of the MSH2 gene, showed no statistical significance, indicating its non-association with breast cancer (X² 0.7561 and P-value 0.3845). In this sense, rs565410865 and rs560246973 SNPs are potential molecular markers for increased susceptibility to breast cancer development. Nenhuma Diversos genes já foram associados ao desenvolvimento do câncer de mama e cerca de 60% dos casos não podem ser explicados por mutações em BRCA1 e BRCA2. Por este motivo, mais estudos foram desenvolvidos, indicando que alterações polimórficas em genes do mecanismo de reparo por mal pareamento, em especial nos genes MLH1 e MSH2, constituem um fator de risco para o desenvolvimento de tumores esporádicos. Partindo dessas informações, o estudo objetivou genotipar os SNPs rs560246973 (T>C), rs2303425 (-118 T>C) do gene MSH2 e rs565410865 (G>T) do gene MLH1 em amostras de tecido parafinado de pacientes diagnosticadas com câncer de mama. Foram analisadas 100 amostras de tecido em parafina de pacientes do Estado da Paraíba com diagnóstico histopatológico de câncer de mama. Após extração do DNA conforme proposto por Shang Rong-Shi e colaboradores, e desenho dos iniciadores por validação in silico, os resultados foram obtidos a partir da aplicação do método Dideoxy Single Allele-Specific PCR e analisados por meio dos testes Quiquadrado e exato de Fisher, com nível de significância em 5%. As análises sugerem que os SNPs rs565410865 e rs560246973, localizados em região intrônica dos genes MLH1 e MSH2, respectivamente, foram estatisticamente associados ao câncer de mama nas amostras analisadas (X² 100/ 100 e P-valor 0,0001). Em contraposição, ao genotipar o SNP rs2303425, localizado na região promotora do gene MSH2 observouse que não obteve significância estatística, indicando sua não associação ao câncer de mama (X² 0,7561 e P-valor 0,3845). Nesse sentido, os SNPs rs565410865 e rs560246973 são potenciais marcadores moleculares para o aumento da susceptibilidade ao desenvolvimento do câncer de mama.

CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior O presente trabalho de conclusão de mestrado insere-se nos estudos sobre a educação de adolescentes e jovens. Aborda a educação sexual no ensino de Biologia, considerando a pluralidade das formas de ser jovem e adolescente. Baseia-se em uma investigação que buscou analisar a maneira como estudantes do segundo ano do Ensino Médio de uma escola do município de Manhumirim - MG avaliam a contribuição do ensino de Biologia para a prevenção da gravidez na adolescência. As conclusões da pesquisa fundamentaram a elaboração de um ebook destinado a professores e professoras de Biologia. A escolha da temática justifica-se pela preocupação com o elevado número de casos de gravidez na adolescência, presente em documentos de órgãos governamentais e não governamentais, nacionais e internacionais. O referencial teórico adotado para fundamentar a discussão do tema apoia-se em estudos das áreas da sociologia da juventude, educação dialógica, sexualidade e gênero. A pesquisa foi de tipo qualitativo, e a coleta de dados por meio do Grupo Focal. Os dados coletados apontam para a necessidade de uma educação sexual desenvolvida de forma abrangente, pautada no diálogo e na construção positiva da sexualidade, que permita aos jovens, independente do gênero, fazer escolhas críticas e conscientes sobre seu futuro e o pleno desenvolvimento de sua sexualidade. O e-book, intitulado Educação sexual: possível? apresenta os caminhos metodológicos percorridos durante a pesquisa, as reflexões geradas a partir da análise de resultados e sugestões didáticas sobre educação sexual. The present master's dissertation is part of studies on the education of adolescents and young people. It approaches sex education in the teaching of Biology, considering the plurality of ways of being young and adolescent. It is based on an investigation that sought to analyze the way in the second year of high school students from a school in the municipality of Manhumirim - MG, evaluate the contribution of Biology teaching to the prevention of teenage pregnancy. The research findings supported the development of an e-book for Biology teachers and professors. The choice of the theme is justified by the concern with the high number of teenage pregnancy cases, present in documents from governmental and nongovernmental bodies, national and international. The theoretical framework adopted to support the discussion of the theme is supported by studies in the areas of youth sociology, dialogical education, sexuality and gender. The research was of a qualitative type, and data collection through the Focus Group. The data collected point to the need for comprehensive sexuality education, based on dialogue and the positive construction of sexuality, which allows young people, regardless of gender, to make critical and conscious choices about their future and the full development of their sexuality. The e-book, entitled Sex education: possible? presents the methodological paths taken during the research, the reflections generated from the analysis of results and didactic suggestions about sex education.

Espécies de bromélia tanque-dependente geralmente apresentam sistema radicular reduzido e assim, além da atividade fotossintética, as folhas absorvem água e nutrientes que se acumulam no tanque. Espera-se que variações estruturais nos tecidos foliares, em decorrência de diferentes posições na roseta, estejam relacionadas à capacidade de absorver e armazenar água, e auxiliem na caracterização fisiológica de Aechmea distichantha Lem., espécie de estudo deste trabalho. Análises anatômicas foram realizadas em amostras do ápice e da base de folhas ocupando diferentes posições ao longo da roseta de A. distichantha. A análise de plasticidade fenotípica para avaliar a amplitude das variações estruturais foi feita usando dados de histometria. A estrutura da parede celular foi avaliada através de testes de imunocitoquímica usando anticorpos monoclonais. A partir das análises realizadas foi possível constatar que as folhas de A. distichantha apresentam variações estruturais da parede celular e plasticidade fenotípica de acordo com a região foliar analisada e com a posição da folha na roseta, sendo o parênquima aquífero o tecido mais plástico. A região basal das folhas, principalmente das internas, apresenta maior quantidade de parênquima aquífero e pectina com alta metil-esterificação da parede que facilita a absorção de água nos estágios iniciais de desenvolvimento. A região apical das folhas externas na roseta é mais especializada para a atividade fotossintética, e apresenta menor quantidade de parênquima aquífero e paredes celulares mais rígidas. Assim, a partir deste trabalho, nota-se que A. distichantha apresenta gradiente estrutural e funcional tanto nas diferentes regiões da folha, como em folhas ocupando diferentes posições na roseta. Species of tank-dependent bromeliad usually have a reduced root system and thus, in addition to the photosynthetic activity, the leaves absorb water and nutrients that accumulate in the tank. It is expected that structural variations in the foliar tissues, due to different positions in the rosette, are related to the capacity to absorb and store water, and help in the physiological characterization of Aechmea distichantha Lem. Anatomical analyzes were performed on apex and leaf base samples occupying different positions along the rosette of A. distichantha. The analysis of phenotypic plasticity to evaluate the amplitude of the structural variations was done using histometry data. The cell wall structure was evaluated by immunocytochemistry assays using monoclonal antibodies. From the analyzes carried out, it was possible to verify that the leaves of A. distichantha present structural variations of the cell wall and phenotypic plasticity according to the analyzed leaf region and the position of the leaf in the rosette, the aquifer parenchyma being the most plastic tissue. The basal region of the leaves, mainly of the internal ones, presents / displays greater amount of parenchyma aquifer and pectin with high methyl esterification of the wall that facilitates the absorption of water in the initial stages of development. The apical region of the outer leaves in the rosette is more specialized for the photosynthetic activity, and presents less amount of aquifer parenchyma and more rigid cellular walls. Thus, from this work, it is noted that A. distichantha presents a structural and functional gradient both in the different regions of the leaf, and in leaves occupying different positions in the rosette. Dissertação (Mestrado)

Submitted by Simone Maisonave (simonemaisonave@hotmail.com) on 2020-11-23T12:17:59Z No. of bitstreams: 3 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_Marina_Crespo_Correa.pdf: 1344382 bytes, checksum: 22878efb2cce28ae86ddb9bdd3db6698 (MD5) Produto_Educacional_Marina_Crespo_Correa.pdf: 1099118 bytes, checksum: 810424be97a42ce3f4488aa0ee4f566a (MD5) Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2020-11-26T13:50:29Z (GMT) No. of bitstreams: 3 Dissertacao_Marina_Crespo_Correa.pdf: 1344382 bytes, checksum: 22878efb2cce28ae86ddb9bdd3db6698 (MD5) Produto_Educacional_Marina_Crespo_Correa.pdf: 1099118 bytes, checksum: 810424be97a42ce3f4488aa0ee4f566a (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Made available in DSpace on 2020-11-26T13:50:39Z (GMT). No. of bitstreams: 3 Dissertacao_Marina_Crespo_Correa.pdf: 1344382 bytes, checksum: 22878efb2cce28ae86ddb9bdd3db6698 (MD5) Produto_Educacional_Marina_Crespo_Correa.pdf: 1099118 bytes, checksum: 810424be97a42ce3f4488aa0ee4f566a (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2020-09-11 Sem bolsa Esta pesquisa tem por objetivo analisar como os professores das Escolas Municipais e Estaduais do Município de Cristal-RS têm trabalhado a educação em saúde no ensino fundamental e médio, qual a importância desse tema educação em saúde na sala de aula e como os professores consideram sua atuação na Escola, levando em consideração sua formação, seja ela inicial ou continuada. A amostra foi constituída por 5 professores, sendo 3 docentes de ciências (ensino fundamental), estando 1 ligado a rede Municipal e 2 a rede Estadual. Na área de biologia (ensino médio), são 2 docentes, ambos ligados ao Estado. Como coleta de dados, foi aplicado um questionário aos 5 professores, incluiundo questões objetivas e abertas. Os dados foram avaliados de forma qualitativa por meio da análise descritiva com base nos autores que corroboram o estudo. Em suas respostas, os professores demonstraram ter conhecimento sobre a temática apesar da pouca formação para trabalhar temas de Educação em Saúde em sala de aula, porém consideram esse tema muito importante, relacionando a melhora da qualidade de vida, a ações que desenvolvem em sala de aula, que a educação em saúde garante aos alunos fazer escolhas mais saudáveis em suas vidas, que o desenvolvimento de ações conjuntas unindo a escola, família, comunidade e professores dão bons resultados e também buscam relacionar conteúdos com o dia-a-dia dos alunos. Mesmo com a falta de formação, pouco apoio da escola, ausência de muito tempo, eles desenvolvem a educação em saúde, salientando o papel do professor na mudança de hábitos e atitudes saudáveis e a necessidade de sempre rever suas práticas pedagógicas. As análises indicam que a discussão sobre o papel do professor Ciências e Biologia como educador em saúde na Escola é necessária e urgente, e que é essencial debater tal aspecto na formação e atuação desses profissionais. This research aims to analise how Municipal and State schools teachers of the Cristal-RS Municipality have been working on health education in elementary and high school, what is the importance of this topic health education in classroom and how teachers consider its atuation in Schools, taking into account their performance, whether initial or continuing. The sample consisted of 5 teachers, 3 of which were science teachers (elementary school), with 1 connected to the Municipal network and 2 to the State network. In the biology area (high school), there are 2 teachers, both connected to the State. Questionnaire was applied including closed-ended and open-ended questions. Data were evaluated qualitatively through descriptive analysis based on the authors who corroborate the study. Teachers demonstrated knowledge about the theme despite little training to work on Health Education themes in the classroom, but they consider this theme very important, relating the improvement of quality of life, to actions they develop in the classroom class. Health education guarantees students to make healthier choices in their lives. Development of joint actions uniting the school, family, community and teachers gives good results and also seeks to relate content to the students' daily lives. Even with the lack of training, little support from the school, absence of much time, they develop health education, highlighting the role of the teacher in changing healthy habits and attitudes and the need to always review their pedagogical practices. The analyzes indicate that the discussion about the role of the Science and Biology teacher as a health educator in the School is necessary and urgent, and that it is essential to debate this aspect in the training and performance of these professionals.

Este trabalho descreve a variabilidade fenotípica em caracteres foliares e na altura de oito espécies vegetais lenhosas do Cerrado, em três áreas do Triângulo Mineiro (MG, Brasil). As espécies analisadas foram: Acosmium dasycarpum (Vog.) Yak. (Leguminosae-Papilionoideae), Byrsonima crassa Nied. (Malpighiaceae), Caryocar brasiliense Camb. (Caryocaraceae), Davilla elliptica St. Hill. (Dilleniaceae), Matayba guianensis Aubl. (Sapindaceae), Miconia fallax DC. (Melastomataceae), Oualea parviflora Mart. (Vochysiaceae) e Roupala montana Aubl. (Proteaceae). Os locais de coleta compreenderam um cerrado sobre latossolo vermelho distrófico (área 1); um cerradão sobre neossolo litólico eutrófíco (área 2), ambos em Araguari; e um cerradão em latossolo vermelho distrófico, em Uberlândia (área 3). Para M. guianensis e M. fallax foram também descritas variações em estruturas reprodutivas (sementes e frutos) de plantas que se desenvolveram nas áreas 1 e 3. Ecótipos foram reconhecidos por diferenças no comprimento do pecíolo, índice foliar (que caracteriza o alongamento da folha), área foliar e altura da planta. No ambiente de cerradão (área 3), a maioria dos indivíduos analisados apresentou maior porte, folhas mais alongadas, maiores e com pecíolos mais longos. Correlações positivas significativas foram detectadas entre a área foliar e o comprimento do pecíolo em todas as espécies, o que sugere a existência de um mecanismo de regulação genética determinando a expressão fenotípica desses caracteres de maneira integrada. Sugere-se que a plasticidade morfológica observada nos caracteres foliares contribuiu para a estabilidade funcional da planta, maximizando a captação de luz, podendo ser, portanto, considerada adaptativa. Apenas três espécies diferiram significativamente entre os ambientes quanto aos índices de assimetria flutuante (AF), considerada um dos melhores meios de se quantificar a instabilidade do desenvolvimento sob condições de estresse genético ou ambiental. O padrão de variação da AF detectado para essas espécies não foi similar nas áreas estudadas, não havendo, deste modo, comprovação da hipótese testada, que prevê níveis de AF do limbo foliar menores em plantas que se desenvolvem em solos mais férteis. Não foram encontradas correlações simples entre níveis de AF com a área foliar, índice foliar e altura, sugerindo ser a AF uma característica linearmente independente desses caracteres. Supõe-se que o grande potencial plástico na determinação do tamanho e forma das folhas esteja tamponando as condições adversas do meio, minimizando a ocorrência de instabilidade no desenvolvimento. A AF em folhas parece não ser um bom índice de monitoramento de estresse nutricional edáfico, considerando a habilidade de plantas para controlar o desenvolvimento sob condições adversas. M. fallax e M. guianensis apresentaram diferentes padrões de variação das estruturas reprodutivas nas áreas estudadas, possivelmente relacionadas à dispersão de sementes e aumento da aptidão. This work describes the phenotypic variation in leaf morphologies and height for eight woody species of the "Cerrado" vegetation in three areas of the Triângulo Mineiro, (MG, Brazil). The analyzed species were: Acosmium dasycarpum (Vog.) Yak. (Leguminosae-Papilionoideae), Byrsonima crassa Nied. (Malpighiaceae), Caryocar brasiliense Camb. (Caryocaraceae), Davilla elliptica St. Hill. (Dilleniaceae), Matayba guianensis Aubl. (Sapindaceae), Miconia fallax DC. (Melastomataceae), Qualea parviflora Mart. (Vochysiaceae) and Roupala montana Aubl. (Proteaceae). The three collection sites possess different edaphic and vegetation physiognomic patterns: a cerrado strictu senso on a red dystrophic latosoil (area 1); a cerradão on lytolic eutrophic neosoil (area 2), both near Araguari; and a cerradão on a red dystrophic latosoil near Uberlândia (area 3). For M. guianensis and M. fallax variations in reproductive structures (seeds and fruits) of plants that grew in the areas 1 and 3 were also described. Ecotypes were recognized by differences in the length of the petiole, size and shape of the leaf, and plant height. In the cerradão (area 3) most of the analyzed individuals presented larger and more elongated leaves, with a longer petiole. Significant positive correlations were detected between leaf area and petiole length for all analyzed species, indicating an integrated genetic regulation mechanism determining phenotypic expression of those characters. It is suggested that the morphologic plasticity observed in the leaf characters maximizes the light reception, and therefore, could also be considered adaptive. Only three species differed significantly between the studied areas in their indices of fluctuating asymmetry (FA), which is considered one of the best means of quantifying the instability of the development under conditions of genetic or environmental stress. The patterns of FA variation found for these three species were dissimilar in the studied areas, contrary to the tested hypothesis that predicts lower foliar FA values in plants that grow in more fertile soils. No significant correlations between FA and leaf size, leaf elongation or plant height were found, suggesting lack of a linear pattern of variation for these characters. It is argued that the great plastic potential for adjustments in leaf size and shape as well in other plant traits is buffering the adverse conditions and minimizing the developmental instability. FA in leaves does not seem to be appropriate for monitoring nutritional edaphic stress of "Cerrado" vegetation, considering the great ability of the plants to control their development under adverse conditions. M. fallax and M. guianensis presented different patterns of variation of the reproductive structures in the studied areas, possibly related to dispersion of seeds and to increase fitness. Dissertação (Mestrado)

CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Galhas são uma relação extremamente íntima entre plantas e um outro organismo, o galhador. Esse organismo é capaz de fazer diversas alterações morfológicas no órgão induzido. O galhador pode prejudicar a planta da forma mais comum que é realocando substâncias para seu próprio benefício ou pode também impactar a reprodução da planta. Para afetar diretamente a reprodução da planta hospedeira é necessário que a galha ocorra em um órgão reprodutivo e acabe evitando ou reduzindo a dispersão de sementes. Nosso principal objetivo foi avaliar se o galhador Allorhogas uberlandiensis afeta negativamente as taxas reprodutivas em botões florais galhados na planta Miconia chamissois. Os novos tecidos formados na galha também foram observados e comparados com seus tecidos originais, além de verificar quais compostos foram acumulados neles. O volume do “fruit like gall” (toda a estrutura induzida pelo galhador) é em média 5,4 vezes maior que os frutos maduros (sendo a maior estrutura reprodutiva da planta hospedeira) e galhas são em média 20 vezes maiores que os óvulos. Na galha são formados um tecido nutritivo típico e um tecido reserva. Ocorre o acúmulo de substâncias como lipídeos, proteínas e pectinas. Com a análise anatômica é possível observar que a indução da galha acaba criando uma barreira física que impede que as estruturas reprodutivas se conectem ao exterior, o que é essencial para a fertilização. Assim, é possível inferir que 100% dos óvulos presentes em um botão floral galhado se tornam inviáveis. Como o galhador tem um impacto significativo nos botões florais, reduzindo a taxa de reprodução da planta hospedeira, nesse sistema o galhador pode ser considerado uma praga ou um agente de controle biológico, de acordo com o status da Miconia chamissois no local (como planta nativa ou invasora). Galls are an extremely close relationship between plants and some other organism, the galler. This organism is capable of induced a lot of morphological changes in the induced organ. The galler can bring harm to the plant in the common way that is to relocating substances of the plant for their benefit or may impact the reproduction of the plant too. For to directly affect the reproduction of the host plant it is necessary for the gall to occur in a reproductive organ and end up preventing or reducing the seed dispersal. Our main objective was to evaluate if the galler Allorhogas uberlandiensis negatively affects reproductive rate in a floral bud galled in the plant Miconia chamissois. The news tissues formed by gall induction were also observed in comparison with their original tissues, in addition to the compounds accumulated in them. The “fruit-like gall” (whole structure induced by galler) volume is on average 5.4 times larger than mature fruits (these being the largest reproductive structure of the host plant) and galls are on average 20 times larger than the ovules. In the gall a typical nutritive tissue and a reserve tissue are formed. Occurs the accumulation of lipids, proteins and pectins. With the anatomical analysis it is possible to observe that the induction of gall ends up creating a physical barrier that obstructs the reproductive structures from connecting to the outside, which is essential for fertilization to occur. Thus, it is possible to infer that 100% of the ovule present in a galled floral bud become unviable. As the galler has a significant impact on floral buds reducing the reproduction rate of the host plant, in this system the galler can be considered a pest or a biological control agent according with the status of Miconia chamissois in the location (as a native or invasive plant). Dissertação (Mestrado) 2022-02-20

Breast cancer (BC) is a worldwide public health problem, both due to the number of cases already diagnosed and due to the increasing incidence. It is the most prevalent type of cancer and the one with the highest mortality in the female population worldwide. However, coverage of services capable of early diagnosis of the disease has not reached adequate levels in developing countries, such as Brazil. In this context, the study of single nucleotide polymorphisms (SNPs) is relevant for the understanding of this morbidity and for the development of screening strategies. We highlight the polymorphisms that occur in genes related to the mismatch repair mechanism (MMR), especially in the MSH2 and MSH6 genes, which encode the proteins that make up the MutSα complex. This work is a product of the analysis of the association of SNPs rs63751445 (A>G) of the MSH2 gene and rs863224614 (T>G) of the MSH6 gene to susceptibility to CM in 100 samples obtained by histopathological examination of patients in the State of Paraíba – Brazil. In addition, the potential association of the occurrence of these SNPs with the variables age of diagnosis and anatomical location of the CM was tested. The methodology used was the Didesoxy Single Allele Specific PCR (DSASP) method. Statistical analysis was performed by comparison with the control population (population in Hardy-Weinberg equilibrium) using Pearson's Chi- square and Fischer's exact tests. The results suggest that there is no association between the SNPs in question and the variables age of diagnosis and anatomical location. However, both studied polymorphisms seem to be associated with susceptibility to BC in the population of the State of Paraíba – Brazil. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES O câncer de mama (CM) é um problema mundial de saúde pública, tanto devido à quantidade de casos já diagnosticados, quanto devido à incidência crescente. É o tipo de câncer mais prevalente e o de maior mortalidade na população feminina no mundo inteiro. No entanto, a cobertura de serviços capazes de diagnosticar precocemente a doença não atingiu níveis adequados em países em desenvolvimento, como o Brasil. Neste contexto, o estudo dos polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs) mostra-se relevante para o entendimento desta morbidade e para o desenvolvimento de estratégias de rastreamento. Destacam-se os polimorfismos que ocorrem nos genes relacionados ao mecanismo de reparo de mal pareamento (MMR), especialmente nos genes MSH2 e MSH6, que codificam as proteínas componentes do complexo MutSα. Este trabalho é produto da análise da associação dos SNPs rs63751445 (A>G) do gene MSH2 e rs863224614 (T>G) do gene MSH6 à susceptibilidade ao CM em 100 amostras obtidas por exame histopatológico de pacientes do Estado da Paraíba – Brasil. Além disso, testou-se a associação potencial da ocorrência destes SNPs com as variáveis idade de diagnóstico e localização anatômica do CM. A metodologia empregada foi o método Didesóxi Único Alelo Específico PCR (DSASP). A análise estatística foi feita pela comparação com a população controle (população em equilíbrio de Hardy-Weinberg) através dos testes Qui-quadrado de Pearson e exato de Fischer. Os resultados sugerem não existir associação entre os SNPs em questão e as variáveis idade de diagnóstico e localização anatômica. No entanto, ambos os polimorfismos estudados parecem estar associados à susceptibilidade ao CM na população do Estado da Paraíba – Brasil.

Threats to the sustainability in natural resource use are mainly caused by conflicts between resource management and resource users, which need a proper conflict management. Thus, is necessary to understand the conflict, the degree of threat caused by the conflict and in the sustainability, but mostly, the reasoning behind the conflict in resource use. In this way, we can find the better management strategies. The aim of this thesis is to understand how the socio-economic context affects the environmental health and the attitudes regarding governance in sustainable use Marine Protected Areas (MPAs). In the first chapter, we analysed data reporting environmental threats in a national scale associated to municipal socio-economic indicators (Gross domestic product, Gini index, human development index, extreme poverty index, Illiteracy). A high association among extreme poverty and environmental threats was found, especially natural resource use and urbanization threats. For the second and the chapter, we analysed data in local scale regarding governance attitudes among local users from different stakeholder groups in a MPA along with their socio-economic characteristics. In the second we used this data to analyse the differences in evaluation capacity among the different stakeholder groups, and as a result we found that the higher the level of social organization of a stakeholder group, the higher is their consensus within group and their evaluation capacity. In the third chapter we used this information to model the individual governance attitudes predicting that socio-economic context would influence their attitudes. We found that education, income, socio-political engagement, and environmental interest are strongly associated to positive governance attitudes. For both regional and local scale, we found that there is a strong association between low socio-economic indicators and high prevalence of environmental threats and bad governance attitudes among stakeholders. We also found that these negative attitudes are worse among vulnerable groups. It highlights the need for a strong socio-environmental agenda in the MPA management focusing in community education and empowerment of vulnerable groups, for the promotion of an inclusive and fair management which seeks for appropriate conflict management. CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Ameaças à sustentabilidade dos recursos naturais são majoritariamente causados por conflitos entre a gestão e os usuários destes recursos, necessitando assim de uma efetiva gestão de conflitos por parte da gestão. Para isso é necessário entender o conflito, o grau de ameaça que o conflito implica na sustentabilidade do uso dos recursos, e principalmente, os motivos por trás da existência do conflito para assim, traçar estratégias melhor direcionadas. O objetivo desta tese visa entender como o contexto social, econômico e político de populações locais afetam a qualidade ambiental e as relações de governança em Área Marinha Protegida (AMP) de uso sustentável. No primeiro capítulo foram analisados dados reportando ameaças ambientais em escala nacional em conjunto com indicadores socioeconômicos (índice de Gini, produto interno bruto, analfabetismo, índice de pobreza extrema, índice de desenvolvimento humano) a nível municipal, para dimensionar o impacto de tais indicadores na presença de ameaças ambientais. Foi encontrada uma forte associação entre índices de pobreza extrema com ameaças, principalmente as relacionadas a expansão urbana e uso dos recursos naturais. No segundo e terceiro capítulos, foram analisados dados em escala local sobre as atitudes dos atores locais sobre a governança em conjunto com sua caracterização socioeconômica (nível educacional, renda anual, engajamento sociopolítico, interesse ambiental). No segundo capítulo, foram analisadas as capacidades de avaliação da governança entre diversos grupos de atore sociais de uma AMP, sendo encontrado que quão maior o nível de organização social de um grupo, maior é sua capacidade de avaliação. No terceiro capítulo, foi testada a influência do contexto socioeconômico nas atitudes relacionadas à governança a nível individual, sendo visto que tanto o nível educacional, quanto a renda, engajamento sociopolítico quanto o interesse ambiental contribuem para uma atitude mais positiva da governança por parte dos indivíduos. Tanto em escala regional, quanto em escala local, podemos encontrar uma forte associação entre baixos indicadores socioeconômicos e um maior nível de ameaças ambientais, assim como piores atitudes relacionadas à governança da AMP. Focando nos grupos de usuários, também podemos ver que grupos vulneráveis têm apresentam os piores valores de atitudes relacionadas aos princípios da governança. Com isso, fica clara a forte necessidade de uma gestão socioambiental focada na educação e no empoderamento de comunidades locais focando esforços nos grupos vulneráveis para uma gestão inclusiva, justa, e que visa uma adequada gestão de conflitos.

Although often beneficial, the inflammatory process is closely involved in the pathophysiology of several diseases. The use of anti-inflammatory drugs available on the market is still a problem for patients, as the prolonged use is associated with severe side effects. Therefore, is relevant to identify new molecules with therapeutic potential for the treatment of inflammatory disorders. Cyclic peptides have attracted interest from the pharmaceutical industry for drug development that more than 40 cyclic peptide-based drugs have been approved by the FDA for clinical use in the past decade. In addition to neuroprotective effects, the cyclic dipeptide cyclo (Glycine-Proline, CGP), has been described by our research group as having analgesic and anti-inflammatory effects by inhibiting hypernociception and the accumulation of leukocytes in inflamed tissue. From these results, our main objective was to identify cellular and molecular targets that could account for the anti-inflammatory action of CGP. Initially, we found that GCP does not present cytotoxicity in all tested concentrations (10-300 μM). Our results also showed that CGP significantly inhibited the adhesion of neutrophils to endothelial cells at all concentrations tested (10-50 μM). We verified that CGP did not affect the expression of ICAM-1 and E-selectin. Similarly, CGP also did not significantly affect the production of IL-6, IL-8, IL-12p70 and reactive oxygen species (ROS) by endothelial cells stimulated with TNF-α. When assessing the motility the endothelium, our results show that CGP did not affect cell migration. However, CGP induced a significant increase in calcium influx in endothelial cells stimulated with histamine, a phenomenon that was not observed when cells were stimulated with CGP alone. In this regard, evaluating the competition of CGP for binding to receptors coupled to protein G was evaluated by the NanoBRET technique, we found that CGP promoted an increase in the interaction between H1 and β2 receptors and their respective natural ligands, a phenomenon that was not observed for other receivers, such as A1, A2A, A2B, A3, VEGFR2, CXCR4 and CXCR7. Taken together, we demonstrated, for the first time, that CGP may interact with H1 and β2 receptors and their ligands in which it may be associated with the effects of this dipeptide on the endothelium. CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior O processo inflamatório, embora benéfico, está intimamente envolvido na fisiopatologia de várias doenças. O uso dos fármacos anti-inflamatórios disponíveis no mercado ainda constitui um problema para os pacientes, pois o uso prologando está associado a efeitos colaterais severos. Logo, identificar novas moléculas com potencial terapêutico para o tratamento de desordens inflamatórias é relevante. Os peptídeos cíclicos têm despertado interesse da indústria farmacêutica para o desenvolvimento de fármacos, tanto que mais de 40 medicamentos à base de peptídeos cíclicos foram aprovados pela agência reguladora de fármacos norte-americana FDA para uso clínico na última década. O dipeptídeo cíclico ciclo(Glicina-Prolina, CGP) além do efeitos neuroprotetores, tem sido descrito, pelo nosso grupo de pesquisa, como possuidor de efeitos analgésicas e anti-inflamatórias por inibir a hipernocicepção e o acúmulo de leucócitos no tecido inflamado. A partir destes resultados, buscamos identificar alvos celulares e moleculares que poderiam responder pela ação anti-inflamatória do CGP. Incialmente, constatamos a ausência de citotoxicidade do GCP, em todas as concentrações testadas (10-300 μM), o que garantiu segurança para interpretar os resultados obtidos. Em seguida, verificamos que a adesão de neutrófilos às células endoteliais tratadas com CGP foi inibida de forma significativa em todas as concentrações testadas (10-50 μM). Ao avaliar o conteúdo de moléculas de adesão nas células endoteliais verificamos que o CGP não afetou a expressão de ICAM-1 e E-selectina. De forma semelhante, o CGP também não afetou de forma significativa a produção de IL-6, IL-8, IL-12p70 e espécies reativas de oxigênio (ROS) por células endoteliais estimuladas com TNF-α. Ao avaliar a motilidade das células endoteliais verificamos que o CGP não afetou a migração celular. Entretanto, o CGP induziu um aumento significativo no influxo de cálcio em células endoteliais estimuladas com histamina, fenômeno que não foi observado quando as células foram estimuladas apenas com CGP. A este respeito, avaliando a competição do CGP pela ligação em receptores acoplados à proteína G foi avaliada pela técnica de NanoBRET, constatamos que o CGP promoveu um aumento na interação entre os receptores H1 e β2 e seus respectivos ligantes naturais, fenômeno que não foi observado para outros receptores, como A1, A2A, A2B, A3, VEGFR2, CXCR4 e CXCR7. Tomados em conjunto, demonstramos, pela primeira vez, que o CGP pode interagir com os receptores H1 e β2 e seus ligantes, de forma que tal interação pode estar associada aos efeitos deste dipeptideo sobre o endotélio.

Submitted by Alison Souza (alisonsouza@ufgd.edu.br) on 2020-06-12T12:23:34Z No. of bitstreams: 1 CleideBrachtvogel.pdf: 2449868 bytes, checksum: 7072a70160b8abebf2a341f4a9822a3d (MD5) Made available in DSpace on 2020-06-12T12:23:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CleideBrachtvogel.pdf: 2449868 bytes, checksum: 7072a70160b8abebf2a341f4a9822a3d (MD5) Previous issue date: 2020-03-31 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) A composição e a distribuição da flora das Florestas Estacionais Deciduais são heterogêneas. Compreender sua dinâmica em áreas de transições florísticas entre biomas, são lacunas do conhecimento a ser preenchidas. O objetivo deste estudo foi determinar como as diferentes variáveis topográficas (declividade e solo) e ambientais (temperatura e precipitação) influenciam nos padrões de dispersão espacial espécies nativas em uma área do Parque Nacional da Serra da Bodoquena (PNSB), MS, sob o potencial dos mecanismos de regeneração natural, por meio da composição florística da chuva de sementes e dinâmica da serapilheira. No capítulo 1 foi avaliado a composição da chuva de sementes em um trecho do PNSB com variáveis altimétricas distintas (base, encosta e topo) onde foram instalados 15 coletores (1x1m) por cota altimétrica. Asamostras foram coletadas a cada 30 dias, durante 18 meses. Os padrões avaliados da chuva de sementes foram: densidade, forma de vida, síndrome de dispersão, classes de tamanho da semente; e variáveis ambientais. O Escalonamento Multidimensional Não Métrico (NMDS) foi utilizado para realizar ordenações entre os padrões da chuva de sementes e as variáveis ambientais e topográficas. No capítulo 2, foi estimado a produtividade mensal e anual da serapilheira em cada cota altimétrica, correlacionadas com as variáveis ambientais; também utilizou-se um gabarito quadrangular vazado (1 m2) para coletar a serapilheira nas cotas altimétricas onde foi avaliado: massa seca remanescente, taxas de decomposição (k) e o tempo de meia-vida (t 1⁄2) aos 30, 60, 90, 120, 150 e 180dias após a instalação. Foi realizado também analises químicas da serapilheira e do solo. Estatisticamente, a dinâmica da serapilheira foi representada pela análise dos componentes principais (PCA). No capítulo 1 foi identificado o total de 20.217 propágulos, pertencentes a 65 espécies e 30 famílias nas três cotas altimétricas, representando 449,26 sementes/m2. Sendo a base detentora da maioria dos propágulos (13.820 sementes). Das 65 espécies encontradas na chuva de sementes, 71% são de hábito arbóreo, constituindo-se de espécies zoocóricas (78%). Sementes muito pequenas foram predominantes e corresponderam a 53%. Nossos resultados indicam que há heterogeneidade na composição florística da chuva de sementes entre os sítios amostrais na topossequência, corroborando com a hipótese de que os atributos funcionais da chuva de sementes são influenciados pelo gradiente topográfico no PNSB. No capítulo 2, a estimativa de produção total de serapilheira foi de 1.4711,28, t/ha-1. Já para o acúmulo de serapilheira os resultados obtidos foram de 12.091 t/ha-1 (estação chuvosa). Já para a estação seca os resultados foram 12.980 t/ha-1, tanto na estação chuvosa, quanto na seca, a base foi a detentora da maior quantidade de serapilheira. A constante de decomposição (k) da serapilheira no período de 180 dias na base foi de 51,92%, encosta 54,20% e topo 53,06%. Já o tempo médio para decompor 50% do material foi de 190,86 dias para a base, 204,04 na encosta e 253,27 dias no topo. Corroborando com a hipótese inicial, os resultados possibilitaram inferir que a sazonalidade climática, assim como o gradiente topográfico exerce forte influência na dinâmica da serapilheira. Essa interação reflete nas características das Florestas Deciduais, as quais são ecossistemas heterogêneos. The composition and distribution of flora in Seasonal Decid- uous Forests are heterogeneous. Understanding its dynamics in areas of floristic transi- tions between biomes are gaps in the knowledge to be filled. The aim of this study was to determine how the different topographic (slope and soil) and environmental (temperature and precipitation) variables influence the spatial dispersion patterns of native species in an area of the Serra da Bodoquena National Park (PNSB), MS, under the potential the mechanisms of natural regeneration, through the floristic composition of the seed rain and dynamics of the litter. In chapter 1, the composition of the seed rain was evaluated in a section of the PNSB with different altimetric variables (base, slope and top) where 15 col- lectors (1x1m) were installed per elevation level. Samples were collected every 30 days for 18 months. The evaluated patterns of seed rain were: density, life form, dispersion syndrome, seed size classes; and environmental variables. The Non-Metric Multidimen- sional Scaling (NMDS) was used to perform sorting between seed rain patterns and envi- ronmental and topographic variables. In chapter 2, it was estimated the monthly and an- nual litter productivity in each elevation, correlated with the environmental variables; a hollow square template (1 m2) was also used to collect the litter in the altimetric dimen- sions where it was evaluated: remaining dry mass, decomposition rates (k) and the half- life (t 1⁄2) at 30, 60, 90 , 120, 150 and 180 days after installation. Chemical analyzes of lit- ter and soil were also carried out. Statistically, the litter dynamics was represented by the analysis of the main components (PCA). In chapter 1, a total of 20,217 propagules were identified, belonging to 65 species and 30 families in the three altimetric levels, represent- ing 449.26 seeds / m2. Being the base holding most propagules (13,820 seeds). Of the 65 species found in the seed rain, 71% are arboreal, constituting zoochoric species (78%). Very small seeds were predominant and accounted for 53%. Our results indicate that there is heterogeneity in the floristic composition of the seed rain between the sampling sites in the toposequence, corroborating the hypothesis that the functional attributes of the seed rain are influenced by the topographic gradient in the PNSB. In chapter 2, the total litter production estimate was 1,447.28, t / ha-1. As for litter accumulation, the results obtained were 12,091 t / ha-1 (rainy season). For the dry season, the resultswere 12,980 t / ha-1, both in the rainy season and in the dry season, the base was the holder of the largest amount of litter. The decomposition constant (k) of litter in the period of 180 days at the base was 51.92%, slope 54.20% and top 53.06%. The average time to decompose 50% of the material was 190.86 days for the base, 204.04 for the slope and 253.27 days for the top. Corroborating the initial hypothesis, the results made it possible to infer that climatic seasonality, as well as the topographic gradient, has a strong influence on the dynamics of litter. This interaction is reflected in the characteristics of Deciduous Forests, which are heterogeneous ecosystems.

Submitted by Alison Souza (alisonsouza@ufgd.edu.br) on 2020-06-29T13:24:47Z No. of bitstreams: 1 SidneyMarianodosSantos.pdf: 2026624 bytes, checksum: 3fd7ed7855032a9ba1f566fef4af8b09 (MD5) Made available in DSpace on 2020-06-29T13:24:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 SidneyMarianodosSantos.pdf: 2026624 bytes, checksum: 3fd7ed7855032a9ba1f566fef4af8b09 (MD5) Previous issue date: 2020-03-05 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) O Cerrado brasileiro é considerado a savana mais biodiversa do mundo e o segundo maior bioma da América do Sul. Sendo responsável por abrigar uma ampla gama de espécies vegetais, incluindo diversas plantas medicinais. A documentação científica da diversidade presente no cerrado é crucial para a conservação e o uso sustentável dos recursos vegetais existentes neste bioma. Considerando ainda que as plantas medicinais vêm sendo utilizadas há milênios para o tratamento de uma pletora de sintomas e doenças, o estudo das espécies de forma a caracterizá-las quanto a sua importância medicinal também pode contribuir para a preservação e descoberta de potenciais fontes terapêuticas. Neste estudo foi feito o levantamento e a identificação das espécies vegetais presentes em uma área de Cerrado stricto sensu na reserva do assentamento 17 de Abril, no município de Nova Andradina, MS, Brasil. Foram identificadas 89 espécies, de 39 famílias diferentes, de espécies vegetais, sendo a Fabaceae (n=13), Myrtaceae (n=7), Rubiaceae (n=7) e Bignoniaceae (n=5), aquelas com a maior quantidade de espécies identificadas. Analisando os estudos químicos e farmacológicos descritos na literatura, apenas treze espécies não tiveram sua composição química investigada e quinze não possuem estudos farmacológicos publicados; e dentre as espécies estudadas, a classe predominante de metabólitos secundários identificadas nestas espécies foram os terpenos, seguidos de compostos fenólicos e alcaloides. Uma das espécies encontradas neste levantamento foi Allophylus edulis (Sapindaceae), já estudada por nosso grupo de pesquisa. No presente estudo, investigamos a composição química e atividade anti-inflamatória do óleo essencial das folhas de A. edulis. A coleta foi realizada em duas cidades do estado do MS no mês de julho de 2018; uma área nativa de Cerrado na cidade de Dourados/MS e no Parque Nacional da Serra da Bodoquena, no município de Bonito/MS, A análise da composição do óleo de A. edulis coletados em duas cidades distintas foi realizada com o propósito de investigar se as mudanças na composição do solo, temperatura e fatores ambientais seriam responsáveis por modular a composição dos óleos. Os resultados encontrados evidenciaram a predominância de sesquiterpenos nas amostras obtidas nos dois municípios, variando entre oxigenados (Dourados) e não oxigenados (Bonito). O potencial farmacológico avaliado, por meio da inflamação local induzida por carragenina e CFA (Adjuvante Completo de Freund), evidenciaram o efeito anti-inflamatório do óleo essencial de A. edulis. The Brazilian Cerrado is considered the most biodiverse savanna in the world and the second-largest biome in South America. It is responsible for housing a wide range of plant species, including several medicinal plants. The scientific documentation of the diversity present in the cerrado is crucial for the conservation and sustainable use of plant resources in this biome. Considering that medicinal plants have been used for millennia to treat a plethora of symptoms and diseases, the study of species to characterize them as to their medicinal importance can also contribute to the preservation and discovery of potential therapeutic sources. In this study, the survey and identification of plant species present in an area of Cerrado stricto sensu in the reserve of the 17 de Abril settlement, in the municipality of Nova Andradina, MS, Brazil, was carried out. All 89 species were identified, from 39 different families, of plant species, being Fabaceae (n = 13), Myrtaceae (n = 7), Rubiaceae (n = 7), and Bignoniaceae (n = 5), those with the highest amount of identified species. Analyzing the chemical and pharmacological studies described in the literature, only thirteen species have not had their chemical composition investigated and fifteen do not have published pharmacological studies; and among the species studied, the predominant class of secondary metabolites identified in these species was terpenes, followed by phenolic compounds and alkaloids. One of the species found in this survey was Allophylus edulis (Sapindaceae), already studied by our research group. In the present study, we investigated the chemical composition and anti-inflammatory activity of the essential oil of A. edulis leaves. The collection was carried out in two cities in the state of MS in July 2018; a native area of Cerrado in the of Dourados / MS city and the Serra da Bodoquena National Park, in the municipality of Bonito / MS. The analysis of the composition of A. edulis oil collected in two different cities implemented to investigate whether changes in soil composition, temperature, and environmental factors would be responsible for modulating the oil compositions. The results found showed the predominance of sesquiterpenes in the samples obtained in the two municipalities. Varying between oxygenated (Dourados) and non-oxygenated (Bonito). The pharmacological potential assessed, through local inflammation induced by carrageenan and CFA (Freund's Complete Adjuvant), showed the anti-inflammatory effect of the essential oil of A. edulis. El Cerrado brasileño, considerado la sabana con mayor biodiversidad del mundo y el segundo bioma más grande de América del Sur, es responsable de albergar una amplia gama de especies de plantas, incluidas varias plantas medicinales. La documentación científica de la diversidad presente en el cerrado es crucial para la conservación y el uso sostenible de los recursos vegetales en este bioma. Teniendo en cuenta que las plantas medicinales se han utilizado durante milenios para tratar una gran cantidad de síntomas y enfermedades, el estudio de las especies para caracterizarlas en cuanto a su importancia medicinal también puede contribuir a la preservación y el descubrimiento de posibles fuentes terapéuticas. En este estudio, se realizó el estudio e identificación de especies de plantas presentes en un área de Cerrado stricto sensu en la reserva de asentamiento 17 de Abril, en el municipio de Nova Andradina, MS, Brasil. Se identificaron 89 especies, de 39 familias diferentes, de especies de plantas, siendo Fabaceae (n = 13), Myrtaceae (n = 7), Rubiaceae (n = 7) y Bignoniaceae (n = 5), aquellas con la mayor cantidad de especies identificadas Analizando los estudios químicos y farmacológicos descritos en la literatura, solo trece especies no han investigado su composición química y quince no han publicado estudios farmacológicos; y entre las especies estudiadas, la clase predominante de metabolitos secundarios identificados en estas especies fueron los terpenos, seguidos de compuestos fenólicos y alcaloides. Una de las especies encontradas en esta encuesta fue Allophylus edulis (Sapindaceae), ya estudiada por nuestro grupo de investigación. En el presente estudio, investigamos la composición química y la actividad antiinflamatoria del aceite esencial en las hojas de A. edulis. La recolección se realizó en dos ciudades del estado de MS en julio de 2018; un área nativa de Cerrado en la ciudad de Dourados / MS y en el Parque Nacional Serra da Bodoquena, en el municipio de Bonito / MS. El análisis de la composición del aceite de A. edulis recolectado en dos ciudades diferentes se llevó a cabo con el fin de investigar si Los cambios en la composición del suelo, la temperatura y los factores ambientales serían responsables de modular la composición de los aceites. Los resultados encontrados mostraron el predominio de sesquiterpenos en las muestras obtenidas en los dos municipios, variando entre oxigenado (Dourados) y no oxigenado (Bonito). El potencial farmacológico evaluado, a través de la inflamación local inducida por carragenano y CFA (adyuvante completo de Freund), mostró el efecto antiinflamatorio del aceite esencial de A. edulis.

Certain ocular resident or pathogenic microbes may remain viable in the presence of multipurpose disinfectant solutions (MPDS), subsequently developing biofilms inside contact lens storage cases (CLSC) which pose a risk of infection to wearers. This study evaluated the formation of ocular microbiota biofilms exposed to three top selling MPDS. To this, crystal violet assay was carried out for the verification of biofilm formation. The in vitro assays evaluated Pseudomonas aeruginosa UFPEDA 416 and Staphylococcus aureus UFPEDA 02 exposure of 48h to MPDS, as well as the use of 40 KHz ultrasound at the beginning and with 24h immersion in the MPDS. Subsequently, in vivo assays evaluated the formation of microbial biofilms on the CLSC walls containing silicone-hydrogel contact lenses immersed in MPDS from 15 healthy volunteer patients, who had been wearing the lenses for 7 days. Tests for clinical evaluation of function and tear production were also performed in all volunteers. Biofilms were inhibited by 26-98% in the in vitro assays, with a statistically significant difference only for P. aeruginosa UFPEDA 416 exposed to diluted MPDS. Most inhibitions occurred moderately and weakly. Additionally, adherent cells were detected in more than 90% of the tests. Biofilm was not inhibited in more than one third of the results, nor was it disturbed, especially with the ultrasound treatments. The average of obtained optical densities at 590 nm were between 0.6-0.8 in the in vivo assays. Results were similar between the CLSC right and left wells. There was a correlation between microbial biofilm formation and the type of MPDS tested, with statistical difference between the three treatments. The evaluation of function and tear production showed no changes and there was no relationship with the formation of biofilms. MPDS promoted a partial inhibition of microbial biofilm formation but only one MPDS proved to be more effective in vitro and in vivo. This study, however, could not distinguish the effect of possible errors in the good hygiene practices of the users. Nenhuma Alguns microrganismos da superfície ocular, residentes ou patógenos, podem permanecer viáveis na presença das soluções multiuso usadas para desinfecção de lentes de contato, desenvolvendo, posteriormente, biofilmes nos estojos de armazenamento das lentes e representando risco de infecções para os usuários. Este estudo avaliou a ação biocida de três marcas comerciais de soluções multiuso (SM) utilizadas no Nordeste do Brasil e a formação de biofilmes em estojos de armazenamento de lentes de contato gelatinosas. Para a verificação da formação do biofilme utilizou-se o teste do cristal violeta. Os ensaios in vitro, para análise do efeito biocida das soluções multiuso, avaliaram a exposição por 48h de Pseudomonas aeruginosa UFPEDA 416 e Staphylococcus aureus UFPEDA 02 às três SM, como também a ação de ultrassom a 40 KHz no início e após 24h de imersão nas SM. Posteriormente, ensaios in vivo avaliaram a formação de biofilmes microbianos nas paredes dos estojos de armazenamento, contendo lentes de contato gelatinosas (LCG) de silicone-hidrogel imersas em soluções multiuso, de 15 pacientes voluntários sadios que as usaram LCG durante sete dias. Também foram realizados exames para avaliação clínica da função e produção lacrimal em todos os voluntários. Em mais de um terço dos ensaios o biofilme não foi inibido, tão pouco perturbado, especialmente nos tratamentos com ultrassom. Nos testes in vivo, as médias obtidas das densidades ópticas a 590nm foram entre 0.6-0.8. Os resultados foram similares entre os poços direito e esquerdo dos estojos de armazenamento das LCG. Houve correlação entre a formação de biofilme microbiano e o tipo de SM testada, com diferença estatística entre os três tratamentos. Nos ensaios in vitro os biofilmes foram inibidos entre 26-98%, com diferença estatisticamente significativa apenas com P. aeruginosa UFPEDA 416 quando exposta às SM diluídas. Adicionalmente, células aderentes foram detectadas em mais de 90% dos testes. A avaliação da função e produção lagrimal não demonstrou alterações significativas. Embora as SM tenham promovido uma inibição parcial da formação dos biofilmes microbianos nos ensaios in vitro e in vivo.

Over the past few decades there has been a growing at fish consumption, mainly due to the population growth as well as higher demand for healthy food. This growth brings challenges about the management of waste generated in the processing of this fish. Solid residues such as scales, fins and viscera are generally discarded in natura causing an environmental damage. One of the most captured fish species in Brazilian Northeastern coast is the Caranx hippos, popularly known as crevale jack. In this way, this work aimed to evaluate the potential use of the C. hippos stomach as a source of aspartic proteases for industrial and biotechnological applications. For this, a homogenate was obtained from the stomach. The homogenate was submitted to an acidification and "salting-out" process, and a protein fraction (F60) was collected. Using F60, tests were performed for specific acid proteolytic activity, physical-chemical characterization, zymogram and chemical agents effects. From the stomach it was possible to obtain an enzymatic fraction with a purification rate of 1.6 folds and a 49.4% of yield. The F60 specific proteolytic activity observed was 1,404.6 ± 3.09 U/mg. The optimum temperature for proteolytic activity was 50 ºC and the thermal stability was observed between 25 ºC and 50 ºC. For F60 proteolytic activity were observed an optimal pH and pH stability rages between pH 1.5 to 3.5 and pH 1.5 to 7.0, respectively. Were observed a total inhibition of enzymatic activity in the presence of pepstatin A, and a low inhibition in the presence of heavy metals. Through the zymogram it was possible to observe the presence of two proteolytic bands. F60 maintained more than 50% of its proteolytic activity in the presence of NaCl 15%. Through the obtained data it is possible to reach that the stomach of the fish C. hippos is a promising alternative source of aspartic proteases with interesting characteristics for industrial and biotechnological applications. Nenhuma Nas últimas décadas, se constatou um crescimento constante no consumo de pescado, principalmente em função do aumento da população e demanda de alimentos mais saudáveis. Este crescimento também traz desafios sobre o gerenciamento dos resíduos gerados no processamento desse pescado. Os resíduos sólidos, como escamas, nadadeiras e vísceras são geralmente descartados in natura causando ônus ambiental. Uma das espécies mais pescadas no litoral nordestino é o Caranx hippos, popularmente conhecido como xaréu ou xaréu-cabeçudo. Desta forma, este trabalho objetivou avaliar o potencial uso do estômago do xaréu (Caranx hippos) como fonte de proteases aspárticas de interesse industrial e biotecnológico. Para isso, foi preparado um homogenato a partir do estômago. O homogenato foi submetido a um processo de acidificação e “salting-out”, e uma fração proteica (F60) foi coletada. Utilizando F60 foram realizados ensaios de atividade proteolítica ácida específica, caracterização físico-química, zimograma e efeito de agentes químicos. A partir do estômago foi possível obter uma fração enzimática com purificação de 1,6 vezes e um rendimento de 49,4%. A atividade proteolítica específica da fração obtida foi de 1.404,6 ± 3,09 U/mg. A temperatura ótima para a atividade proteolítica foi de 50ºC e a estabilidade térmica foi observada entre 25ºC e 50ºC. Uma faixa de pH ótimo entre o pH 1,5 até 3,5 e uma faixa de estabilidade ao pH de 1,5 a 7,0 foram observadas para a atividade proteolítica de F60%. Foi observada a inibição total da atividade enzimática na presença de pepstatina A, e uma baixa inibição na presença de metais pesados. Através do zimograma foi possível observar a presença de duas bandas proteolíticas. F60 manteve mais de 50% de sua atividade proteolítica na presença de 15% de NaCl. Através dos dados obtidos pode-se concluir que o estômago do peixe C. hippos é uma promissora fonte alternativa de proteases aspárticas com características de interesse industrial e biotecnológico.

Breast cancer is a major public health problem worldwide. Several endogenous and exogenous factors are related to breast cancer. Several studies have shown the involvement of Human papillomavirus (HPV) in the cancerous breast, although this relationship is still controversial. Thus, the aims of this study were: 1) detect HPV DNA in paraffinized breast cancer samples Luminal A, Luminal B, HER-2- positive and triple negative (TBNC), from patients in the State of Paraíba, Brazil ; 2) detect HPV16 DNA in TNBC of patients from Paraíba State, Brazil; 3) To perform a an association study between the positive and negative TNBC that were positive to HPV. For this, the detection of viral DNA was performed by real time PCR, using GP5 and GP6 primers set. For genotyping, HPV16 E6 primers were used. In total, 60% (60/100) of tumors were positive to HPV DNA. HPV16 was observed in 100% (60/60) of the tumors positive to HPV. Among TNBC, 67% (10/15) were positive to HPV16. There was no association between HPV and TNBC. The results of this study suggest that viruses are active in tumoral breast cells and play a cancerous role in the breast. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES O câncer de mama é um dos maiores problemas de saúde pública no mundo. Diversos fatores endógenos e exógenos estão relacionados com o câncer de mama. Muitos estudos mostram o possível envolvimento do Papilomavírus humano (HPV) na carcinogênese mamária, porém essa relação ainda é controversa. Assim, os objetivos do presente estudo foram: 1) detectar o DNA do HPV em amostras parafinadas de câncer mama Luminal A, Luminal B, HER-2- positivo e triplo negativo (TBNC), oriundos de pacientes do Estado da Paraíba, Brasil; 2) Detectar o DNA do HPV16 em amostras TNBC de pacientes oriundos do Estado da Paraíba, Brasil; 3) Realizar um estudo de associação entre as amostras TNBC-positivo para o HPV16 e amostras TNBC-negativo para o HPV. Para tanto, a detecção do DNA viral foi realizada através da real time PCR, utilizando os primers GP5 e GP6. Para a genotipagem, foi utilizado os primers da região consenso E6 do HPV16. Em um total de 60% (60/100) das amostras de carcinoma mamário invasivo sem outra especificação (SOE) foi detectado o DNA do HPV. Deste total, foi observado o DNA do HPV16 em 100% (60/60) das amostras. Dentre as 15 amostras TNBC estudadas, 67% (10/15) apresentaram o DNA do HPV16. Não foi observado associação entre HPV e TNBC. Os resultados deste estudo sugerem que o vírus esteja em atividade nas células mamárias tumorais e provavelmente desempenhem papel na carcinogênese mamária.

Sickle cell hemoglobin (HbS) results of a single nucleotide change (GAG  GTC) β-globin gene, where valine replaces glutamic acid. The severity of the disease’s symptoms is mainly affected by variation in fetal hemoglobin levels; simultaneous presence of α-thalassemia and/or G6PD deficiency and by βS-globin haplotype. This is a cross-section analisys with children and adolescents aged 1 to 18 years diagnosed with SCA and monitored by the Hospital Infantil Arlinda Marques in João Pessoa from March/2019 to August/2019, respecting the ethical and methodological aspects recommended by Resolution 466/2012, CNS/MS, with certification by the Comite de Ética e Pesquisa do Hospital Universitário Lauro Wanderley, CEP/HULW, UFPB, protocol n° 95846318.4.0000.5183. Thirty three patients participated in the study. The βS-globin haplotype were studied in 24 patient (48 βS chromosomes) determined by PCR-RFLP. Hematological exams and quantification of G6PD enzyme activity in patients were carried out in partnership with Laboratório Hemato. The haplotypes βS found were: 15 (62%) CAR/CAR; 05 (21%) CAR/Atp and 04 (17%) Atp/Atp. There were no statistically significant differences (P < 0,05) in the mean values of the hematological parameters analyzed among the groups, the same was observed in the different types of hemoglobin. There was no coexistence of G6PD deficiency and sickle cell anemia in the patients who participated in the study Nenhuma A hemoglobina S resulta na troca de um único nucleotídeo (GAG  GTC) no gene da β-globina, onde o aminoácido valina é expresso no lugar do ácido glutâmico causando a anemia falciforme. A gravidade dos sintomas da doença é afetada, principalmente, por variações nos níveis de hemoglobina fetal; presença simultânea de α-talassemia e/ou deficiência da enzima G6PD e pelos haplótipos βS. Esse trabalho trata-se de um estudo transversal com coleta de dados retrospectivos de crianças e adolescentes com idades de 1 a 18 anos diagnosticadas com anemia falciforme e acompanhadas pelo Hospital Infantil Arlinda Marques em João Pessoa – PB, no período de Março/2019 a Agosto/2019, respeitando os aspectos éticos e metodológicos recomendados pela Resolução 466/2012, CNS/MS, com certificação do Comitê de Ética em Pesquisa Hospital Universitário Lauro Wanderley CEP/HULW, UFPB, protocolo Nº 95846318.4.0000.5183. Participaram do estudo 33 pacientes. Os haplótipos βS foram estudados em 24 pacientes, determinados pela técnica PCR-RFLP. Os exames hematológicos e quantificação da atividade da enzima G6PD nos pacientes foram realizados em parceria com o Laboratório Hemato. A combinação dos haplotipos βS foram: 15 (62%) apresentam o genótipo CAR/CAR; 05 (21%) CAR/Atp e 04 (17%) Atp/Atp. Não foram observadas diferenças estatísticas significativas (P < 0,05) nos valores médios dos parâmetros hematológicos analisados entre os grupos de haplótipos βS encontrados, o mesmo foi observado para os diferentes tipos de hemoglobina. Não foi diagnosticado coexistência de deficiência da G6PD e anemia falciforme nos pacientes examinados

Social and environmental movements in the Vale do Gramame have been taking place since the 1960s with the installation of the Industrial District. The compromise in water quality is posing serious risks to the general population. The Viva Olho no Tempo School emerged as a way to bring eco-education to children, and through raising awareness to seek improvements to the river. Scientific production exemplifying the poor quality of water is extremely important to serve as subsidies for communities to seek their rights and improve it for the public authorities. The present work sought to carry out a social analysis of social movements in favor of Rio Gramame and to know how these actions influence water quality. Water quality assessments of the Gramame River were carried out before and after the accident that occurred with the industrial cardboard waste dumped in the river. Social analyzes were carried out through interviews / questionnaires and participant observation. Water analyzes were made with biweekly, daily / weekly collections (before and after the accident respectively), being evaluated: electrical conductivity, dissolved oxygen, temperature, pH, total dissolved solids and redox potential. Nutrient analyzes were carried out with nitrogen - ammonia, nitrate and nitrite, and phosphates - orthophosphate and total phosphorus. Chronic ecotoxicological tests were also carried out using the draft mill. Social analyzes have shown that actions to improve water quality and well-being in the Gramame Valley contribute significantly to the non-worsening of the pollution situation in which the Rio Gramame is found. And water quality analyzes show that the river on the banks of BR 101 was the point most affected by pollution after the accident, with BR 101 and Ponte dos arcos showing the greatest differences between before and after the accident in relation to variables: pH, OD, STD and ORP. The electrical conductivity showed a difference between before and after only at Ponte dos Arcos. Among the analyzed nutrients, total phosphorus was the only one that showed significant differences between before and after both in BR101 and in Ponte dos Arcos. Regarding ecotoxicological analyzes before the accident, no toxicity was shown, after the accident there was toxicity in BR 101 (on the day of the accident and one day after) and in PB 008 one day after the accident. The analyzes carried out in this research were presented to the leaders of social movements so that they can be presented to the Federal Public Ministry and as soon as effective measures are taken in favor of improving the water quality of the Gramame River. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Movimentos socioambientais no vale do Gramame acontecem desde os anos 60 com a instalação do Distrito Industrial. O comprometimento da qualidade da água está acarretando sérios riscos à população em geral. A Escola Viva Olho no Tempo surgiu como uma forma de levar a ecoeducação às crianças, e por meio da conscientização buscar melhorias ao rio. A Produção cientifica exemplificando a má qualidade da água é de extrema importância para servir como subsídios às comunidades irem em busca de seus direitos e melhoria por ao poder publico. O presente trabalho buscou realizar uma análise social de com os movimentos sociais em prol do Rio Gramame e saber como essas ações influenciam na qualidade da água. Foram realizadas avaliação da qualidade de água do Rio Gramame antes e depois do acidente que ocorreu com os resíduos industrial de papelão despejados no rio. As análises sociais foram realizadas por meio de entrevistas/questionários e observação participante. Análises da água foram feitas com coletas quinzenais, diárias/semanais (Antes e depois do acidente respectivamente), sendo avaliados: condutividade elétrica, oxigênio dissolvido, temperatura, pH, sólidos totais dissolvidos e potencial de oxirredução. As análises de nutrientes foram realizadas com os nitrogenados – amônia, nitrato e nitrito, e fosfatados – ortofosfato e fósforo total. Ainda foram feitos ensaios ecotoxicologicos crônicos utilizando a Moina minuta. As análises sociais demonstraram que as ações em prol da melhoria da qualidade de água e bem estar do Vale do Gramame contribuem de forma significativa para o não agravamento da situação de poluição em que se encontra o Rio Gramame. E as análises da qualidade de água apontam que o rio as margens da BR 101 foi o ponto mais afetado pela poluição após o acidente, sendo a BR 101 e a Ponte dos arcos os que apresentaram diferenças significativas entre antes e depois do acidente em relação as variáveis: pH, OD, STD e ORP. A condutividade elétrica apresentou diferença entre o antes e o depois apenas na Ponte dos Arcos. Dentre os nutrientes analisados, o fosforo total foi o único que apresentou diferenças significativas entre antes e depois tanto na BR101 como na Ponte dos Arcos. Com relação as análises ecotoxicologicas antes do acidente não foi apresentado toxicidade, após o acidente houve toxicidade na BR 101 (no dia do acidente e um dia depois) e na PB 008 um dia após o acidente. As análises realizadas nessa pesquisas foram apresentadas aos lideres dos movimentos sociais para que sejam apresentadas no Ministério Publico Federal e assim que medidas efetivas sejam tomadas em prol da melhoria da qualidade de água do Rio Gramame.

Breast cancer is a worldwide public health problem with a high incidence and mortality rate. In addition to the high incidence, breast cancer is the fifth most prevalent cause of mortality of cancers in general among women. In Brazil, 59,700 new cases of breast cancer are expected in 2018-2019, with this type of cancer being more recurrent in the South, Southeast, Midwest and about 26% of cases coming from the Northeast region. The increase in new cases mainly due to the new reproductive habits and current lifestyles of contemporary women, in addition to the high risk of death in late diagnoses, although genetic mutations are the main factor responsible for the development of cancer. Single nucleotide polymorphism (SNP) are genetic variations in DNA sequences, where single nucleotide substitutions occurs, which can be produced due to DNA replication failures or specific chemical modifications. Genome changes are a typical cancers feature and studies have been performed to explore gene variations caused by SNPs and their association with increased susceptibility to cancer development. Thus, the present study aimed to NQO1, PSCA and TP53 genes polymorphisms, in order to discover a possible connection between them and breast cancer development. SNPs rs2976392 in PSCA gene, rs368771578 in TP53 gene and rs1800566 in NQO1 gene were genotyped in 100 paraffin tissue samples from patients diagnosed with breast cancer. The results were obtained by genotyping method, Dideoxy Unique Allele Specific - PCR (DSASP). Chi-square and Fisher's Exact Test with significance level of 5% were applied for statistical analysis. SNPs rs2976392 were not statistically significant. However, SNP rs368771578 and rs1800566, from TP53 and NQO1 genes, respectively, showed a significant statistical association, suggesting they are possibly related to the increased susceptibility of breast cancer development. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES O câncer de mama é um problema de saúde pública mundial com elevada taxa de incidência e mortalidade. Além da alta incidência, o câncer mamário é a quinta causa de mortalidade mais prevalente dentre os cânceres em geral entre as mulheres. No Brasil, prevê-se 59.700 novos casos de câncer de mama em 2018-2019, sendo esse tipo de câncer mais recorrentes nas Regiões Sul, Sudeste, CentroOeste e cerca de 26% dos casos vindos da região Nordeste. O aumento de novos casos principalmente devido aos novos hábitos reprodutivos e estilos de vida atuais das mulheres contemporâneas, além do alto risco de óbito em diagnósticos tardios, embora mutações genéticas sejam o principal fator responsável pelo desenvolvimento do câncer. Polimorfismos de nucleotídeo único (SNP – Single Nucleotide Polymorphism) são variações genéticas em sequências de DNA, onde ocorrem substituições em um único nucleotídeo, que podem ser geradas devido a falhas na replicação do DNA ou por modificações químicas específicas. Alterações no genoma são uma das características típicas dos cânceres e estudos têm sido realizados para explorar variações gênicas ocasionadas por SNPs e sua associação com o aumento da susceptibilidade ao desenvolvimento de cânceres. Deste modo, o presente estudo teve como objetivo analisar polimorfismos (SNPs) nos genes NQO1, PSCA e TP53, de forma a descobrir uma possível relação destes no desenvolvimento do câncer de mama. Foi realizada a genotipagem dos SNPs rs2976392 no gene PSCA, rs368771578 no gene TP53 e rs1800566 no gene NQO1 em 100 amostras de tecido parafinado de pacientes diagnosticadas com câncer de mama. Os resultados foram obtidos pelo método de genotipagem, Dideoxy Unique Allele Specific - PCR (DSASP). Foram aplicados os testes Qui-quadrado e Teste Exato de Fisher com nível de significância de 5% para as análises estatísticas. O SNPs rs2976392 não se mostrou estatisticamente significante. No entanto, os SNP rs368771578 e rs1800566, dos genes TP53 e NQO1, respectivamente apresentaram associação estatística significativa, sugerindo, dessa forma, que estão possivelmente relacionados ao aumento da susceptibilidade do desenvolvimento do câncer de mama.

Psoriasis (PsO) is a chronic immune-mediated inflammatory disease characterized by proliferation of keratinocytes and formation of skin plaques. Th17 lymphocytes and their cytokines IL-17A and IL-17F are widely described as essential in the pathophysiology of the disease. In addition, several single nucleotide polymorphisms (SNPs) have been reported to be responsible for different clinical manifestations of the disease. Due to the few clinical and genetic studies on PsO in the Americas, including Brazil and the Northeast region, the objective of this study was to evaluate the correlation between SNPs in the IL-17A (rs2275913 and rs3819024) and IL-17F (rs763780 and rs2397084) genes with the PsO in patients seen at the Lauro Wanderley Universitary Hospital of the Federal University of Paraíba. Blood samples were collected from 107 patients and 55 controls, from which DNA extraction and subsequent SNPs genotyping were carried out using the real-time PCR technique using the TaqMan probe-based 5 ́-nuclease assays technology. Statistical analysis were performed using R, coin and SNPassoc software, applying two-tailed hypothesis tests with a 5% significance level. The case-control analysis adjusted for sex and age showed that SNPs rs763780 (OR = 14.8; CI = 1.77-123.3; p = 0.0127) and rs3819024 (OR = 4.98; CI = 1.02-24.4; p = 0.0478) were associated with the risk of PsO occurrence while rs2275913 (OR = 0.02; CI = 0.0004-0.93 ; p = 0.0459) was associated with protection against PsO. These results suggest that the study of the patients' genetic profile may be an innovative approach to better elucidate knowledge about PsO pathogenesis and immunotherapy. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES A psoríase (PsO) é uma doença inflamatória crônica imunomediada caracterizada por proliferação de queratinócitos e formação de placas cutâneas. Os linfócitos Th17 e suas citocinas IL-17A e IL-17F são amplamente descritos como essenciais na fisiopatologia da doença. Além disso, vários polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs) têm sido relatados como responsáveis por diferentes manifestações clínicas da doença. Devido aos escassos estudos clínicos e genéticos sobre PsO nas Américas, incluindo Brasil e região Nordeste, o objetivo deste trabalho foi avaliar a correlação entre SNPs nos genes da IL-17A (rs2275913 e rs3819024) e IL-17F (rs763780 e rs2397084) com a PsO em pacientes atendidos no Hospital Universitário Lauro Wanderley da Universidade Federal da Paraíba. Foram coletadas amostras sanguíneas de 107 pacientes e 55 controles, a partir das quais se realizou a extração de DNA e posterior genotipagem dos SNPs através da técnica de PCR em tempo real utilizando a tecnologia de TaqMan probe-based 5 ́-nuclease assays. As análises estatísticas foram realizadas através dos softwares R, coin e SNPassoc, aplicando-se testes de hipótese bicaudais com nível de significância de 5%. A análise caso-controle ajustada pelo sexo e idade mostrou que os SNPs rs763780 (OR=14,8; IC=1,77-123,3; p=0,0127) e rs3819024 (OR=4,98; IC=1,02-24,4; p=0,0478) estiveram associados com o risco de ocorrência de PsO enquanto o rs2275913 (OR=0,02; IC=0,0004-0,93; p=0,0459) esteve associado com proteção contra a PsO. Estes resultados sugerem que o estudo do perfil genético dos pacientes pode ser uma abordagem inovadora para elucidar melhor o conhecimento sobre a patogênese e imunoterapia da PsO.

Snakebites are a neglected tropical disease that affects a significant number of people each year worldwide. The production of antiophidic serum, rapid diagnosis, administration and efficacy are fundamental steps for the good evolution of patients diagnosed with snake envenoming. In Brazil, snake accidents victimize about 20,000 people annually, with botropic accidents being the most common across the country, followed by crotalic accidents. Several species of the genus Bothrops can be found in the Northeast, with B. erythromelas being the most important from a medicalepidemiological point of view. In view of this, this work aimed at a method for the development of a biosensor to detect snakebite poisoning, testing the venoms of the species Bothrops erythromelas and Crotalus durissus terrificus, using an optical surface plasma resonance sensor - SPR. For this, the analyte and the adsorvate were evaluated, the latter, F(ab')2 fragments of IgG from the antivenom, titrated in different concentrations in order to evaluate their interactions. Detection tests were performed on the SPR biosensor following optimization parameters for better adsorption in the gold chip. The results showed that the sensor is able to differentiate the poisons of the two snake species used in this study. It can be concluded that the development of a biosensor to detect the type of snake venom is possible through this sensor. These data are of paramount importance, since there is a great need for differentiation when the poisoned individual is admitted to the hospital for treatment. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Acidentes ofídicos constituem doença tropical negligenciada que acomente uma quantidade significativa de pessoas a cada ano em todo mundo. A produção de soro antiofídico, rápido diagnóstico, administração e eficácia são etapas fundamentais para a boa evolução dos pacientes diagnosticados com envenenamento por serpentes. No Brasil, os acidentes ofídicos vitimam cerca de 20.000 pessoas anualmente, sendo os acidentes botrópicos os mais comuns em todo o território nacional, seguidos dos acidentes crotálicos. Diversas espécies do gênero Bothrops podem ser encontradas no Nordeste, sendo a espécie B. erythromelas a mais importante do ponto de vista médico-epidemiológico. Diante disto, este trabalho objetivou um método para desenvolvimento de um biossensor para detecção de envenenamento ofídico, utilizando-se as peçonhas das espécies Bothrops erythromelas e Crotalus durissus terrificus, a partir de um sensor óptico de ressonância de plasma de superfície – SPR. Para isto, foi avaliado o analito e o adsorvato, este, fragmentos F(ab’)2 de IgG proveniente do antiveneno, titulados em diferentes concentrações a fim de avaliar suas interações. Os testes de detecção foram feitos no biossensor SPR seguindo parâmetros de otimização para melhor adsorção no chipe de ouro. Os resultados mostraram que o sensor é capaz de diferenciar os venenos das duas espécies de serpentes utilizadas neste estudo. Pode-se concluir que o desenvolvimento de um biossensor para detecção do tipo de peçonha ofídica é possível através deste sensor. Estes dados são de suma importância, uma vez que grande é a necessidade da diferenciação no momento em que o indivíduo envenenado é admitido ao hospital para ser tratado.

Os biocombustíveis são definidos comumente como um combustível derivado de materiais biológicos, incluindo matéria orgânica morta que não esteja fossilizada, e também proveniente de produtos metabólicos de organismos vivos, como, por exemplo, óleo vegetal para a produção de biodiesel. Dentre as matérias primas utilizadas para produção do biodiesel, encontra-se as microalgas que vem sendo apontada como uma alternativa promissora de matéria prima, em relação as demais. Nesse contexto o presente estudo tem como objetivo otimizar as condições de cultivo das microalgas Chlorella sp e Scenedesmus sp, além de verificar o crescimento dessas espécies, quando cultivas em diferentes concentrações de nitrato, ferro, zinco e biotina. O cultivo e manutenção do inóculo, ocorreu em reatores planos horizontais em acrílico, mantidos em temperatura ambiente DE 25 a 30°C ± 1°C, com controlador de fotoperíodo em 12 horas de luz e 12 horas de escuro, utilizando três lâmpadas fluorescentes brancas de 40w foi utilizado em meio sintético Chu. Diferentes concentrações de nutrientes, adição de biotina ,e espécies distintas de microalgas foram as variáveis otimizadas para o crescimento das algas e rendimento lipídico. Assim para que o tempo e número de experimentos fosse reduzidos utilizou-se planejamento fatorial 23e o planejamento composto central. Após a realização dos testes preliminares e da primeira etapa do modelo experimental adotado, os resultados indicaram que a metodologia experimental para o cultivo de microalga Chlorella sp., apresentou melhores rendimentos no teor lipídico, quando submetidos ao cultivo em meio Chu com redução dos nutrientes nitrato e ferro com adição de biotina. atingindo um valor máximo de 51,54% de teor lipídico, verificou-se ainda que a quantidade de dias (tempo) apresentou tendência de maior acúmulo de lipídeos em 20 dias de cultivo. Sendo necessário dar seguimento aos experimentos em busca de melhorar ainda mais as condições de cultivo empregadas, possibilitando melhores resultados nos ensaios em geral. Biofuels are commonly used as a fuel derived from biological materials, including non fossilized dead organic matter, and also likely from metabolic products from living organisms, such as vegetable oil for biodiesel production. Among the raw materials used for biodiesel production, it is found as microalgae that has been pointed as a promising alternative of raw material, in relation to others. In this context, the present study aims to optimize the cultivation conditions of the microalgae Chlorella sp and Scenedesmus sp, besides verifying the growth of these species when cultivated at different levels of nitrate, iron, zinc and biotin. The cultivation and maintenance of the inoculum, which occurred in the restoration of horizontal acrylic planes, kept at room temperature of 25 a 30° C, with photoperiod driver at 12 hours of light and 12 hours of dark, using three white fluorescent lamps of 40w was used in chu synthetic medium. Different nutrients, biotin addition and distinct microalgae species were selected as optimized for algal growth and lipid yield. Thus, to reduce the time and number of experiments, use factorial design 23e or central composite design. After the preliminary tests and the first stage of the adopted experimental model, the results indicate that the experimental methodology for the cultivation of microalgae Chlorella sp., Shows better results in the lipid content when carried out in the bath with nitrogen reduction. and iron with biotin addition. reaching a maximum value of 51.54% of lipid content, verified even with a number of days (time) showing the tendency of lipid volume increase in 20 days of cultivation. It is necessary to follow up the experiments in search of further improving the cultivation conditions employed, to enable better results in the tests in general. Dissertação (Mestrado)

Achatina fulica, Bowdich, 1822 e Bradybaena similaris (Férussac, 1821) sãoespéciesde moluscos terrestres exóticas que conseguiram se estabelecer emquase todos os Estadosbrasileiros. Estas espécies são citadas na literatura como hospedeiros de parasitos, incluindoespécies de interesse médico-veterinário. Também são citadas como pragas agrícolas, pragasurbanas e causadoras de desequilíbrio da malacofauna nativa. Em áreas de grandes infestaçõesesses moluscos são causadores de grandes prejuízos econômicos. Alémdisso, as conchasvazias desses animais no ambiente representam um local propício para formaçãodecriadouros do mosquito o Aedes aegypti, transmissor da dengue, da febre ChikungunyaedoZika Vírus, acarretando grave problema para saúde pública. Os produtos utilizados paraocontrole desses animais possuem em sua composição química a presença de metaldeído,substância tóxica também para outros animais incluindo seres humanos. Podendoinclusiveser responsável pela contaminação de lençóis freáticos. Substâncias de origemvegetal podemser seletivas, menos tóxicas para o ambiente e biodegradáveis. Diante disso, o objetivodestetrabalho foi avaliar a atividade moluscicida e ovicida do timol e mentol sobre as espéciesA.fulica e B. similaris em condições de laboratório. Os moluscos adultos foramcoletadosemquatro bairros da cidade de Juiz de Fora, aclimatados às condições laboratoriais por 72horas.Nos testes do timol P.A em ovos, jovens e adultos de A. fulica foramutilizadasasconcentrações de 80g/L, 75g/L, 70g/L, 65g/L, 60g/L, 50g/L, 40g/L, 30g/L, 20g/L, 10g/L,9g/L, 8g/L, 7g/L, 6g/L, 5g/L, 4g/L, 3g/L, 2g/L, 1g/L, 0.9g/L, 0.8g/L, 0.7g/L0.6 g/L, 0.5g/L,0.4 g/L, 0.3 g/L, 0.2 g/L, 0.1 g/L, 0.02g/L e 0.01g/L, acrescido de dimetilsulfóxido(DMSO)1%, com água destilada aquecida a 60ºC, que foram aspersas nos terrários. Nos testesdomentol P.A em ovos, jovens e adultos de B. similaris foram testadas as concentrações 0.1g/L,1g/L, 2.5g/L, 3g/L, 5g/L, 10g/L, 20g/L e 50g/L, ambos com seis repetições. Oprimeirocontrole recebeu água destilada acrescida de DMSO a 1% e o segundo apenas água destilada.O timol e mentol apresentaram atividade moluscicida e ovicida para as espécies emqueforamtestados, causando em algumas concentrações 100% de mortalidade e impedindoaeclosãodos jovens de forma eficaz. Essas duas substâncias representam uma forma eficienteemenostóxica para o ambiente. O estabelecimento de um protocolo de utilização emcampodessassubstâncias pode representar uma forma eficaz de controle, em áreas infestadas, por moluscosexóticos Achatina fulica, Bowdich, 1822 and Bradybaena similaris (Férussac, 1821) are speciesofexotic terrestrial snails that have spread to almost all Brazilian states. These species arecitedin the literature as parasite hosts, including species of veterinary interest. Theyarealsomentioned as agricultural pests, urban pests and causes of imbalance of native malacofauna.In areas of large infestations, these snails cause major economic losses. Besides that, theirempty shells are favorable breeding places of the mosquito Aedes aegypti, transmitterofdengue fever, chikungunya fever and zika virus, causing serious public health problems. Theproducts used to control these animals contain metaldehyde, also toxic to other animalsincluding humans, as well as causing groundwater contamination. Substances of plant origincan be selective, less environmentally toxic and biodegradable. Therefore, the objectiveofthis work was to evaluate the molluscicidal and ovicidal activity of thymol and menthol onA.fulica and B. similaris under laboratory conditions. Adult snails were collectedinfourdifferent districts of the city of Juiz de Fora, acclimated to laboratory conditions for 72hours.In the tests of thymol PA on eggs, juveniles and adults of A. fulica, concentrations of 80g/ L,75g / L, 70g / L, 65g / L, 60g / L, 50g / L, 40g / L, 30g / L, 20g / L, 10g / L, 9g / L, 8g/ L, 7g/ L, 6g / L, 5g / L, 4g / L, 3g / L, 2g / L, 1g / L, 0.9g / L 0.8g / L, 0.7g / L 0.6g / L, 0.5g/ L,0.4g / L, 0.3g / L, 0.2g / L, 0.1g / L, 0.02g / L, and 0.01g / L were used, plus 1%dimethylsulfoxide (DMSO) with distilled water heated to 60 ° C, which were sprayedintotheterrarium. In the menthol PA tests on B. similaris eggs, juveniles and adults, theconcentrations tested were 0.1g / L, 1g / L, 2.5g / L, 3g / L, 5g / L, 10g / L, 20g / Land50g/L, both with six repetitions. The first control received distilled water plus 1%DMSOandthesecond only distilled water. Thymol and menthol showed molluscicidal and ovicidal activityon the species for which they were tested. Some concentrations caused 100%mortality,preventing the juveniles from hatching. These two substances are thus efficient andlesstoxicto the environment. The establishment of a protocol for the field use of these substancescanbe an effective way to control exotic snails in infested areas.

A população vem apresentando um aumento de peso muito rápido e frequente, o que está gerando muitos quadros de obesidade. Um dos principais fatores relacionados com essa doença é o aumento dos processos inflamatórios no tecido adiposo. Essa inflamação leva ao aumento das citocina próinflamatória como a IL-6, que promovem ainda mais a inflamação e diminuem a sensibilidade à insulina, e o TNF-α, que causa a resistência à insulina por diminuir a sinalização insulínica. Também ocorre a diminuição das citocinas anti-inflamatórias como a IL-10, que suprime a transdução de sinal para as citocinas pró-inflamatórias. Todos esses fatores gerados na obesidade acabam promovendo outras comorbidades, como é o caso do Diabetes Mellitus do tipo II. Na tentativa de minimizar os efeitos indesejáveis dessa doença, pesquisadores procuram por diversos tratamentos adjuvantes, como é o caso da melatonina, um hormônio secretado pela glândula pineal. Essa substância apresenta efeito indutor do sono e o seu mecanismo de ação está relacionado com o ciclo circadiano, responsável pela liberação de vários hormônios no organismo. Estudos demonstram que a melatonina possui várias ações anti-inflamatórias, diminuindo significativamente a concentração do TNF-α e aumentando a quantidade de IL-10, o que colabora com a diminuição da inflamação. O presente estudo tem por objetivo verificar se a melatonina apresenta ação anti-inflamatória nos quadros de obesidade e diabetes. Para isso foram estudados 16 ratos da linhagem Wistar do sexo masculino que desenvolveram a obesidade e o diabetes mellitus do tipo 2 (DMT2) por dieta hipercalórica. Depois da indução foram criados dois grupos. O grupo Melatonina (GM) foi constituido por 8 ratos e o grupo controle (GC) também foi constituido por 8 ratos. Ambos os grupos seguiram a mesma dieta, a única diferença foi na suplementação de melatonina, pois o GM recebeu a melatonina e o GC recebeu solução fisiológica no mesmo volume, pela mesma via de administração e mesma frequência que a melatonina administradano GM, durante o período de 8 semanas. Os resultados obtidos nesta pesquisa demonstraram a ausência de efeito da melatonina, visto que não houve diferença estatística significativa nas análises da gordura periepididimal (p = 0,6825), gordura subcutânea (p =0,3781), infiltrado de TNF-α (p = 0,3333) e infiltrado de IL-10 (p = 0,3108). Assim, os resultados demonstraram que a melatonina não interferiu em nenhum dos parâmetros avaliados, indicando que na dose utilizada houve a ausência de efeito dessa substância. The population has been showing a very rapid and frequent weight gain, which generates many obesity conditions. One of the main factors related to this disease is the increase in inflammatory processes ofthe adipose tissue. This inflammation leads to an increase in pro-inflammatory cytokines such as IL-6, which further promote inflammation and decrease insulin sensitivity, and TNF-α, which causes insulin resistance by decreasing insulin signaling. There is also a decrease in anti-inflammatory cytokines such as IL-10, which suppresses signal transduction for proinflammatory cytokines. All of these factors generated in obesity lead to promoting other comorbidities, such as type II Diabetes Mellitus. In an attempt to minimize the undesirable effects of this disease, researchers look for various adjuvant treatments, such as melatonin, a hormone secreted by the pineal gland. This substance has a sleep-inducing effect and its mechanism of action is related to the circadian cycle, responsible for the release of a variety of hormones in the body. Studies show that melatonin has several anti-inflammatory actions, significantly decreasing the concentration of TNF-α and increasing the amount of IL-10, thus helping to decrease inflammation. The present study aims to verify whether melatonin has an anti-inflammatory action in obesity and diabetes. For this, 16 male Wistar rats were studied, asthey developed obesity and type 2 diabetes mellitus (DMT2) by means of a high-calorie diet. After induction, two groups were created: the Melatonin group (MG), consisting of 8 rats; and the control group (CG), also consisting of 8 rats. Both groups followed the same diet, and the only difference was melatonin supplementation, as the MG received the melatonin,while the CG received saline in the same volume by the same route of administration and the same frequency as the melatonin administered in the MG, during the 8-week period. The results obtained in this research demonstrated a lack of effect of melatonin, since there was no statistically significant difference in the analysis of periepididimal fat (p = 0.6825), subcutaneous fat (p = 0.3781), infiltrated TNF-α ( p = 0.3333) and IL-10 infiltrate (p = 0.3108). Therefore, the results showed that melatonin did not interfere in any of the parameters evaluated, indicating that in the dose used there was no effect of this substance.

INTRODUÇÃO: O Parto prematuro é uma importante causa de morbimortalidade materna, associado a custos elevados para os sistemas de saúde, tanto público como privado. OBJETIVO: Avaliar a capacidade de um cardiotocógrafo digital móvel de realizar mensurações das variáveis clínicas de forma semelhante ao cardiotocógrafo convencional associada a uma prova de função de um sistema de monitoramento obstétrico remoto. MÉTODOS: O estudo piloto foi divido em duas etapas: (1) estudo de não-inferioridade e (2) prova de função. A primeira etapa uma gestante foi monitorizada por 20 minutos com um cardiotocógrafo convencional e, na sequência, com o cardiotocógrafo digital móvel, pelo mesmo período. Foram observados variáveis de frequência cardíaca fetal e tonometria uterina. Na segunda etapa, três gestantes foram monitorizadas com o cardiotocógrafo móvel digital por 20 minutos, sendo os resultados transmitidos para os dispositivos móveis. RESULTADOS: Foram avaliadas três pacientes com idade gestacional média de 32,5±8,5 anos, peso 75,3±2,6 Kg, altura de 166±2,24 cm e índice de massa corporal 27±3,29 kg/m². A frequência cardíaca fetal e a tonometría uterina mensurada pelo cardiotocógrafo móvel digital não apresentaram diferença estatisticamente significativa em relação ao convencional (p=0,76 e 0,75 respectivamente). Os valores da frequência cardíaca fetal aferidos pelos dispositivos apresentaram uma forte correlação estatística (r=0,98), enquanto a tonometría apresentou correlação moderada (r=0,41) CONCLUSÃO: O Cardiotocógrafo digital móvel demonstrou apresentar médias altamente correlacionadas e sem diferenças estatísticas em relação ao modelo convencional. O sistema de transmissão e monitoramento remoto consegue fornecer informações necessárias para avaliação remota do bem-estar fetal. AIM: Premature birth is an important cause of maternal morbidity and mortality, associated with high costs for health systems, both public and private. OBJECTIVE: o evaluate the ability of a mobile digital cardiotocograph to perform measurements of clinical variables in a similar way to the conventional cardiotocograph associated with a function test of a remote obstetric monitoring system. METHODS: The pilot study was divided into two stages: (1) non-inferiority study and (2) function test. In the first stage, a pregnant woman was monitored for a period of 20 minutes with a conventional cardiotocograph and, subsequently, with a mobile digital cardiotocograph, for the same period. Variables of fetal heart rate and uterine tonometry were observed. In the second stage, three pregnant women were monitored with the digital mobile cardiotocograph for 20 minutes, with the results transmitted to the mobile devices. RESULTS: Three patients with mean gestacional age of 32.5 ± 8.5 years, weight 75.3 ± 2.6 kg, height of 166 ± 2.24 cm and body max index 27 ± 3.29 kg / m² were evaluated. The fetal heart rate and uterine tonometry measured by the digital mobile cardiotocograph showed no statistically significant difference in relation to the conventional one (p = 0.76 and 0.75 respectively). The fetal heart rate values measured by the devices show a strong statistical correlation (r = 0.98), while those of tonometry have a moderate correlation (r = 0.41). CONCLUSIONS: The mobile digital cardiotocograph showed to have highly correlated means and without statistical differences in relation to the conventional model. The remote transmission and monitoring system is able to provide information necessary for the remote assessment of fetal well-being.

A obesidade é um problema de saúde pública mundial. Quando tratamentos clínicos falham no tratamento da obesidade, indicam-se cirurgias bariátricas. Desta forma, objetiva-se neste trabalho realizar uma revisão da literatura sobre cirurgia bariátrica com descrição das principais técnicas, incluindo a Cirurgia de Lazzarotto e realizar uma análise retrospectiva de pacientes submetidos à referida técnica. Para a análise retrospectiva, dados ao longo de um período de 24 meses de 100 pacientes submetidos à Cirurgia de Lazzarotto entre 2006-2018 foram analisados. Os dados foram submetidos aos testes de Shapiro-Wilk, ANOVA e Tukey. A comparação entre as médias do índice de massa corporal (IMC) foi submetida ao teste t. A comparação das frequências foi feita com o teste do qui-quadrado. Também foi usado o Odds ratio para comparar a razão de chance, o teste de correlação de Pearson e a regressão logística linear, sempre com p0,05). O ritmo intestinal foi significativamente maior entre 0 e 6 meses; 0 e 12 meses e 6 e 12 meses (p 0.05). Stool frequency was significantly higher between 0 and 6 months, 0 and 12 months, and 6 and 12 months (p

A possibilidade de crises na extração e venda do petróleo, o monopólio de grandes produtores que definem o domínio comercial do seu produto e um crescente pensamento ambiental a favor do uso de materiais renováveis ou biodegradáveis, faz com que haja a busca de novos insumos que possam ser incorporados ao mercado. O biodiesel pode ser um biocombustível que satisfaz a necessidade das indústrias mecanizadas e automotivas, por atuação semelhante aos derivados do petróleo. Porém esse óleo combustível advindo de óleos vegetais, animais ou residuais, traz em sua linha de produção uma problemática vinculada à manufatura participada de um subproduto de grandes proporções, o glicerol, responsável por um volume de cerca de 10% da produção final das fábricas de biodiesel. Por ser um material de grandes possibilidades de implementação industrial, devido a sua maleabilidade como matéria prima, a incineração não se torna uma alternativa lucrativa, possibilitando a busca por novos processamentos dessa substância, conciliando o rendimento monetário a partir de novos produtos a uma alternativa ecossutentável. Esse trabalho tem como objetivo utilizar glicerol bruto, sem tratamentos prévios, em processos fermentativos para a produção de biomassa de valor agregado, utilizando leveduras que tolerem esse material como substrato sem alto nível de toxicidade. Testes em duas escalas foram utilizados, determinando pH, gravimetria e densidade óptica para avaliar o crescimento microbiológico para a produção de biomassa. Todos os procedimentos foram aplicados em triplicata, para acumular dados, visando cálculos estatísticos das configurações do crescimento celular, utilizando a estratégia de amostragem a cada duas horas para atividades entre 72 e 84 horas para a análise de pH gravimetria e densidade óptica. Empregando a quantidade de 3% de glicerol para a Rhodotoula glutinis e de 5% para a Sporobolomyces ruberrimus, o crescimento de biomassa, resultou em Xmáx de 6,78 g.L-1 e Xmáx de 6,44 g.L-1 respectivamente The possibility of crises in the extraction and sale of oil, the monopoly of large producers that define the commercial domain of their product, and a growing environmental thought in favor of the use of renewable or biodegradable materials, makes it necessary to search for new inputs that can be incorporated into the market. Biodiesel can be a biofuel that meets the needs of mechanized and automotive industries, due to its performance similar to petroleum products. However, this fuel oil, derived from vegetable, animal, or residual oils, brings in its production line a problem linked to the manufacture of a large residue, glycerol, responsible for a volume of about 10% of the final production of the production plants. biodiesel. Because it is a material with great possibilities for industrial implementation, due to its malleability as raw material, incineration does not become a profitable alternative, allowing the search for new processing of this substance, reconciling the monetary yield from new products to an eco-sustainable alternative. . This work aims to use crude glycerol, without previous treatments, in fermentative processes for the production of added value biomass, using yeasts that support this material as a substrate without a high level of toxicity. Fermentation tests in Erlenmeyer flasks were used to make it possible to determine optimal fermentation conditions and to substantiate the work when placed in a bench bioreactor. All procedures were applied in triplicate, to accumulate data, aiming at statistical calculations of cell growth configurations, using the sampling strategy every two hours for activities between 72 and 84 hours. Using 3% glycerol for Rhodotoula glutinis and 5% for Sporobolomyces ruberrimus, the biomass growth, analyzed from gravimetry, resulted in na Xmáx de 6,78 g.L-1 e Xmáx de 6,44 g.L-1 respectively.

A complexidade no tratamento de defeitos ósseos no crânio tem gerado desafios no mundo da neurocirurgia. Cranioplastias se conectam cada vez mais ao desenvolvimento tecnológico e à integração entre diferentes áreas do conhecimento, buscando aprimorar resultados. O objetivo geral deste estudo foi mapear as etapas de desenvolvimento e produção de uma prótese craniana. Este estudo, foi dividido em três capítulos: O capítulo 1 descreve uma abordagem referente aos tópicos de impressão tridimensional, cranioplastia e sobre as empresas healthtechs. O capítulo 2 detalha o processo para captação, tratamento e modelamento de imagem, proveniente dos exames de tomografia computadorizada, foi analisado tópico a tópico com a finalidade de futuramente manufaturar próteses personalizadas por meio do processo de impressão tridimensional. O capítulo 3 apresenta um estudo pré-clínico em porcos com o objetivo de analisar a acurácia da cranioplastia, intermediada pela prototipagem tridimensional. Trata-se de dois estudos descritivos e um estudo préclínico. Nesses estudos são detalhadas as etapas necessárias para o desenvolvimento de um novo processo de aquisição de imagens de tomografia computadorizada, tratamento, modelagem e por fim impressão tridimensional de uma prótese. O estudo foi realizado na cidade de Curitiba, em parceria com o biotério da Universidade Positivo e o Instituto de Neurologia de Curitiba (INC), onde foram realizados os procedimentos pré-clínicos e os exames de tomografia computadorizada. O desenvolvimento do novo método de captação, modelamento e processamento de imagem juntamente com a produção e implantação das próteses, resultaram na elaboração transoperatória do implante de PMMA usando-se o molde prototipado como matriz. Houve encaixe da prótese sem folga e não houve necessidade de ajustes no protótipo. Diante do conhecimento a respeito das técnicas que já foram descritas na literatura e são utilizadas hoje em dia para este procedimento cirúrgico, o estudo buscou demonstrar a sistematização da técnica de reconstrução, via prototipagem rápida. Concluiu-se que as impressoras 3D são apropriadas para a produção de próteses cranianas e devem ser incorporadas a medicina personalizada. The complexity in the treatment of skull defects has raised challenges in the area of neurosurgery. Seeking to improve results, cranioplasty is increasingly connected with technological developments and the integration between different areas of knowledge. The objective of this study was to map the stages of development and production of a cranial prosthesis. The study was divided in three chapters. The first chapter describes an approach regarding 3D printing, cranioplasty and healthtech businesses. The second chapter details the process of capturing, processing and modeling images from computed tomography, with a topic by topic analysis done with the objective of manufacturing personalized, or custom-fit, prosthesis by 3D printing in the future. The third chapter presents a pre-clinical trial on pigs with the goal of analyzing the accuracy of cranioplasty intermediated by 3D prototyping. This project has two descriptive studies and a pre-clinical trial. These studies detail the steps to develop a new process for the acquisition and processing of a computed tomography image, and for the modeling and 3D printing of a prosthesis. The study was performed in the city of Curitiba, in partnership with the Positivo University vivarium and the Curitiba Neurological Institute (INC), where the pre-clinical procedures and the computed tomography exams were performed. The development of a new image acquisition, modeling and processing method, with the production and implementation of the prosthesis, resulted in satisfactory pre-clinical results. The prosthesis fit adequately without clearance, and without need of reworking the prototype. Production costs decreased as well as time of production and surgery. In view of the techniques currently used for this surgical procedure, as described in the literature, this study sought the improvement of the reconstruction technique via fast prototyping. Threedimensional printers are increasingly present in the development of new health technologies, and this study showed that they are appropriate for the production of cranial prostheses, and a reliable tool for personalized medicine.

A cerveja é uma bebida lupulada com diferentes graduações alcoólicas, obtida através da fermentação de malte de cereais por leveduras como Saccharomyces cerevisiae. A produção de cerveja no Brasil foi de 14,1 bilhões de litros em 2017, sendo o terceiro maior produtor mundial. Há uma crescente procura do consumidor e da indústria por cerveja com novos sabores e aromas, que podem ser obtidas através de novas cepas de leveduras a serem utilizadas na fermentação. Uma potencial fonte para isolamento e prospecção de leveduras é a kombucha, que é uma bebida asiática proveniente da fermentação do chá preto ou verde realizada por consórcio de leveduras e bactérias acéticas, havendo uma grande variação nas espécies de microrganismos de acordo com a fonte da kombucha. As cepas envolvidas na fermentação da kombucha contribuem para a qualidade sensorial da bebida, de modo que há possibilidade de introduzir alguns sabores e aromas da kombucha em outras bebidas fermentadas, como a cerveja, se forem utilizados os microrganismos da produção da kombucha. O principal objetivo do presente trabalho foi prospectar leveduras de kombucha para produção de cerveja. Avaliando diferentes métodos de seleção a fim de obter cepas capazes de crescerem em mosto cervejeiro e que possam ser utilizadas para a produção de cerveja, especificamente leveduras que sejam capazes de crescer em mosto cervejeiro em condições similares às do processo de produção de cerveja. Para isso, foi utilizada uma única amostra de chá de kombucha de infusão de chá mate produzida no laboratório da Universidade Positivo. A partir da amostra, foi realizado o isolamento direto de leveduras desta amostra e o método de pré-seleção de leveduras, inoculando alíquotas da amostra em mosto cervejeiro e em meio líquido YPD8E5 (composto de extrato de levedura, peptona, glicose e etanol), a fim de selecionar leveduras adaptadas à composição do mosto e à presença de etanol, respectivamente. Colônias foram obtidas por plaqueamento em meio YPD suplementado com cloranfenicol para inibição de bactérias, totalizando 27 cepas de leveduras isoladas, as quais passaram por testes de caracterização como tolerância ao lúpulo 30 IBU (unidade internacional de amargor), que corresponde a um amargor médio de uma cerveja tipo Ale, e teste de produção de H2S. A cepa com melhor desempenho foi submetida a um teste de tolerância a etanol 3% (v/v). Ao final, foi possível chegar em uma levedura utilizando os testes de tolerância ao lúpulo e etanol, com a técnica de perda de massa a cepa denominada por codificação como M-C-7-BR01 teve maior perda de massa em relação a outras obtidas nos testes. Beer is a hoppy drink with different alcoholic grades, obtained through the fermentation of cereal malt by yeasts like Saccharomyces cerevisiae. Beer production in Brazil was 14.1 billion liters in 2017, making it the third largest producer in the world. There is a growing consumer and industry demand for beer with new flavors and aromas, which can be obtained through new strains of yeast to be used in fermentation. A potential source for isolation and prospecting for yeasts is kombucha, which is an Asian drink from the fermentation of black or green tea made by a consortium of yeasts and acetic bacteria, with a great variation in the species of microorganisms according to the source of the kombucha. The strains involved in the fermentation of the kombucha contribute to the sensory quality of the drink, so that it is possible to introduce some flavors and aromas of the kombucha in other fermented drinks, such as beer, if the microorganisms from the production of the kombucha are used. The main objective of the present work was to prospect kombucha yeasts for beer production. Evaluating different selection methods in order to obtain strains capable of growing in beer must and that can be used for beer production, specifically yeasts that are capable of growing in beer must in conditions similar to those of the beer production process. For this, a single sample of kombucha tea from the infusion of mate tea was used in the laboratory of Universidad Positivo. From the sample, the yeast was directly isolated from this sample and the yeast pre-selection method, inoculating aliquots of the sample in brewing wort and in YPD8E5 liquid medium (composed of yeast extract, peptone, glucose and ethanol), at in order to select yeasts adapted to the wort composition and the presence of ethanol, respectively. Colonies were obtained by plating in YPD medium supplemented with chloramphenicol to inhibit bacteria, totaling 27 isolated yeast strains, which underwent characterization tests for tolerance to hops 30 IBU (international bitterness unit), which corresponds to an average bitterness of hop. an Ale type beer, and H2S production test. The best performing strain was subjected to a 3% (v/v) ethanol tolerance test. At the end, it was possible to obtain a yeast using the tolerance tests for hops and ethanol, with the mass loss technique, the strain coded as MC-7-BR01 had greater loss of mass compared to others obtained in the tests.

Alimentos que passam pelo processo de fermentação apresentam mudanças em suas características, como alterações no sabor, aroma e textura, as quais atraem a atenção de diversos consumidores, além de estarem associadas a benefícios para saúde. O kefir é uma bebida originada da fermentação do leite, a partir de uma mistura complexa de bactérias e leveduras que vivem simbioticamente e formam o grão de kefir. A identificação e caracterização da microbiota presente no grão de kefir pode viabilizar a produção em maior escala, visto que o conhecimento da mesma pode estimular a produção de culturas iniciadoras, que podem contribuir para a obtenção de uma bebida estável, padronizada e segura. Neste contexto, o objetivo deste trabalho consistiu em avaliar a microbiota pertencente aos grãos de kefir bem como identificar e isolar os microrganismos pertencentes à bebida kefir, visando à identificação de possíveis candidatos para a elaboração de cultura iniciadora. O sequenciamento da região V4 do gene 16S rRNA do DNA extraído dos grãos de kefir foi realizado para a caracterização da comunidade bacteriana. Em paralelo, foi realizado o cultivo e isolamento dos microrganismos presentes nos grãos e na bebida kefir, visando à obtenção de isolados representantes dos grupos das bactérias láticas, acéticas e leveduras, seguido pela caracterização morfológica e bioquímica e identificação molecular. A viabilidade celular e identificação dos microrganismos presentes na bebida kefir foram estimadas por plaqueamento e contagem das unidades formadoras de colônia em meios para isolamento de bactérias acéticas, láticas e fungos. Através da análise do sequenciamento dos grãos, o gênero predominantemente encontrado foi o Lactobacillus, seguido por Lactococcus, Acetobacter, Faecalibacterium, Leuconostoc, Bacteroides e Bifidobacterium. Nenhum isolado foi obtido a partir do grão de kefir, no entanto, 26 isolados foram recuperados a partir da bebida. Através da coloração de gram, do total de isolados, 6 apresentaram características de bactérias Gram positivas, 6 de bactérias Gram negativas e 14 de leveduras. Através sequenciamento dos genes 16S rRNA, um isolado foi identificado como Lactococcus lactis e outro como Bacillus thuringiensis. Através do sequenciamento da região ITS, um isolado foi identificado como Candida parapsilosis. As três espécies citadas já foram descritas na literatura como sendo encontradas na bebida kefir, mas ainda assim não representam a diversidade microbiana encontrada no grão de kefir. Neste sentido, técnicas alternativas de isolamento precisam ser avaliadas e testadas, visando ampliar o acesso aos isolados presentes no grão do kefir com o foco na formulação de uma cultura iniciadora. Foods that are present in fermentation process show changes in their characteristics, such as changes in flavor, aroma and texture, which attract the attention of several consumers, in addition to being associated with health benefits. Kefir is a drink originated from the fermentation of milk from a complex mixture of bacteria and yeasts that live symbiotically and form the kefir grain. The identification and characterization of the microbiota present in the kefir grain can enable production on a larger scale, since knowledge of it can stimulate the production of starter cultures, which can contribute to obtaining a stable, standardized and safe drink. In this context, the objective of this work was to evaluate the microbiota belonging to the kefir grains as well as to identify and isolate the microorganisms belonging to the kefir drink, aiming at the identification of possible candidates for the preparation of starter culture. The sequencing of the V4 region of the 16S rRNA gene from the DNA extracted from the kefir grains was carried out to characterize the bacterial community. In parallel, the cultivation and isolation of the microorganisms present in the grains and in the kefir drink was carried out, aiming at obtaining isolated representatives of the groups of lactic bacteria, acetic bacteria and yeasts, followed by the morphological and biochemical characterization and molecular identification. Cell viability and identification of the microorganisms present in the kefir drink were estimated by plating and counting the colony-forming units in media for isolation of acetic bacteria, lactic bacteria and fungi. Through the analysis of grain sequencing, the genus predominantly found was Lactobacillus, followed by Lactococcus, Acetobacter, Faecalibacterium, Leuconostoc, Bacteroides and Bifidobacterium. No isolates were obtained from the kefir grain, however, 26 isolates were recovered from the drink. Through gram staining, of the total isolates, 6 showed characteristics of Gram positive bacteria, 6 of Gram negative bacteria and 14 of yeast. By sequencing the 16S rRNA genes, one isolate was identified as Lactococcus lactis and the other as Bacillus thuringiensis. By sequencing the ITS region, an isolate was identified as Candida parapsilosis. The three species mentioned have already been described in the literature as being found in the kefir drink, but still do not represent the microbial diversity found in the kefir grain. In this sense, alternative isolation techniques need to be evaluated and tested, in order to expand access to the isolates present in the kefir grain with a focus on the formulation of a starter culture.

Modelos in vitro são considerados modelos alternativos aos testes em animais e, portanto, de grande importância para pesquisas aplicadas para avaliação de cosméticos, permitindo mimetizar as condições e processos do tecido in vivo quando submetidos a agentes exógenos, como ativos cosméticos. O bioéster gerado a partir da semente de Chenopodium quinoa é um ativo de origem natural, rico em ácidos graxos essenciais, minerais, aminoácidos e antioxidantes, conferindo propriedades altamente emolientes, hidratantes e restauradoras à pele. Dessa maneira, a presente dissertação contempla um artigo de revisão que tem como objetivo apresentar os tipos de células utilizadas para testes de cosméticos e desenvolvimento de pele artificial, e um artigo experimental no qual foi analisada alterações proteicas da epiderme humana reconstruída (RHE) quando tratadas com Bioéster de Quinoa em comparação com não tratadas. Para isso, as RHE foram expostas ao Bioéster de Quinoa em diferentes tempos (0h, 3h, 6h, 12h, 24h e 48h) e o digesto tríptico foi analisado por nano-cromatografia acoplada a espectrometria de massas. Para a análise de dados foi utilizado o software PatternLab for proteomics, verificando as proteínas diferencialmente abundantes nas condições estudadas. Os resultados demonstraram proteínas com abundância proteica aumentada, em comparação com a cultura de células 3D não tratada, nos mesmos intervalos de tempo quando submetidas ao Bioester de Quinoa, sugerindo a ação benéfica quando aplicado a cultura 3D. As proteínas diferencialmente abundantes nas condições tratadas Glutamine Synthase, Acyl-Coa, Actin-related protein 2/3 subunits 2 and 4, Cellular Retinoic Acid-II and s100-A2 binding protein, estão relacionadas à prevenção do envelhecimento precoce, homeostase, regeneração, proteção contra radiação ultravioleta e dano oxidativo da pele. In vitro models are considered alternative models to animal tests and, therefore, of great importance for applied research for the evaluation of cosmetics, allowing to mimic as tissue conditions and processes in vivo when compared to exogenous agents, such as cosmetic ingredients. The Bioester generated from the Chenopodium quinoa seed is an ingredient of natural origin, rich in essential fatty acids, minerals, amino acids, and antioxidants, conferring highly emollient, moisturizing and restorative properties to the skin. Thus, the present dissertation contemplates a review article that aims to present the types of cells used for cosmetic tests and artificial skin development and an experimental article in which protein alterations of the reconstructed human epidermis (RHE) were analyzed when treated with Quinoa Bioester compared to untreated. For this, the RHE was exposed to the Quinoa Bioester at different times (0h, 3h, 6h, 12h, 24h and 48h) and the triptych digest was analyzed by nanochromatography coupled with mass spectrometry. For data analysis, the software PatternLab for proteomics was used, checking the differentially abundant proteins in the studied conditions. The results demonstrated proteins with increased protein abundance, compared to the culture of untreated 3D cells, in the same time intervals when submitted to the Quinoa Bioester, suggesting the beneficial action when applied to 3D culture. Differentially abundant proteins in the treated conditions Glutamine Synthase, Acyl-Coa, Actin-related protein 2/3 subunits 2 and 4, Cellular Retinoic AcidII and s100-A2 binding protein, are related to the prevention of premature aging, homeostasis, regeneration, protection against ultraviolet radiation and oxidative damage of the skin.

A Homeopatia consiste em terapêutica medicamentosa que usa métodos próprios para interpretar e tratar o doente integralmente. Medicamento de Tropismo é aquele que tem em sua patogenesia características semelhantes ao local ou tecido do doente, devido à sua eletividade. Medicamentos homeopáticos (MH) podem ser investigados quanto ao estímulo sobre células-tronco para fins de terapia celular. Assim, o objetivo deste trabalho foi realizar uma breve revisão da literatura e investigar a influência de MH com tropismo ósseo, no cultivo de células-tronco mesenquimais da polpa de dente decíduo (stem cells from human exfoliated deciduous teeth, SHED). Foram testados os medicamentos homeopáticos Calcarea carbonica (CC), Calcarea phosphorica (CP) e Symphytum officinale (SO), todos na potência 30 CH; administrados diariamente em poços (placa de 96) contendo SHED, devidamente validadas no Protocolo de Dominici e já plaqueadas. No controle negativo (C-) foi usada a água ultrapurificada por osmose reversa em poços contendo SHED, e no controle positivo (C+) com SHED foi usado o meio de cultivo convencional (DMEM). O período dos ensaios foi de 24, 48 e 72 horas. Todos os ensaios foram realizados em duplicata biológica (da mesma amostra, células em subculturas ou passagens distintas, P4 e P5), e em dupla triplicata (n=6) para cada passagem. Os seguintes ensaios celulares foram usados: viabilidade (Vermelho Neutro), proliferação (Cristal Violeta) e citotoxicidade (MTT). A análise estatística foi realizada com α = 0,05. O SO com C+ foram plaqueados em placa de 24 poços para avaliação em Microscopia eletrônica de Varredura (MEV), em triplicata. Em P4, no tempo final de 72 h, os grupos CP e SO apresentaram a maior viabilidade celular; enquanto em P5 não houve diferenças entre os grupos. Quanto à proliferação, em P4 os grupos CC e SO apresentaram as menores médias totais (entre 24, 48 e 72 h); em P5, o C+ apresentou a maior proliferação celular em 72 h, enquanto os outros grupos não apresentaram diferenças entre si. Quanto à citotoxicidade, em P4 o SO apresentou a maior citotoxicidade em 24 h, sendo que em 48 h foi semelhante aos demais, com exceção do C+; em 72 h apresentou maior citotoxicidade, mas semelhante ao C-; em P5 o SO apresentou a citotoxicidade em 72 h. No entanto, à MEV o SO demonstrou aspectos morfológicos e ultraestruturais sugestivos de maior número de células do que o C+, com células aderidas e espraiadas, confluentes e em íntima associação, sem morte celular. Foram sugeridas novas pesquisas, incluindo-se o teste de osteoindução, e de imunofluorescência para detecção de moléculas ósseas específicas, possivelmente secretadas para a matriz extracelular. Pode-se concluir que as concentrações e potência dos MH testados influenciaram o cultivo das células-tronco, sem efeitos negativos importantes, permitindo novos trabalhos a partir das mesmas condições. Homeopathy consists of drug therapy that uses its own methods to fully interpret and treat the patient. Tropism medication is one that has in its pathogenesis characteristics similar to the patient's site or tissue, due to its electivity. The objective of this work was to investigate the influence of homeopathic medicines (MH) with bone tropism, in the culture of stem cells from human exfoliated deciduous teeth (SHED). The homeopathic medicines Calcarea carbonica (CC), Calcarea phosphorica (CP) and Symphytum officinale (SO) were tested, all in potency 30 CH; administered daily in wells containing SHED, cells validated in the Dominici Protocol and already plated. In the negative control (C-) ultrapure water by reverse osmosis was used in the wells containing SHED, while in the positive control (C +) the conventional culture medium (DMEM) was used. The 3 MH were subjected to tests of 24, 48 and 72 hours. All assays were performed in biological duplicate (from the same sample, cells in different subcultures or passages, P4 and P5), and in triplicate (n = 3) for each pass. The following cell assays were used: viability (Neutral Red), cytotoxicity (MTT) and proliferation (Crystal Violet). Statistical analysis was performed with α = 0.05 (SPSS Statistics). In P4, in the 72 h final time, the CP and SO groups showed the highest cell viability; while in P5 there were no differences among groups. In the proliferation assay, in P4, the CC and SO groups had the lowest total averages (among 24, 48 and 72 h); in P5, C+ showed the highest cell proliferation in 72 h, while the other groups showed no differences among them. As for cytotoxicity in P4, the SO presented the highest cytotoxicity in 24 h, in 48 h it was similar to the others with the exception of C +, and in 72 h presented cytotoxicity similar to C-. In P5, SO demonstrated the highest cytotoxicity only at 72 h. At Scanning Electron Microscopy (SEM), the SO showed an aspect of ultramorphology suggestive of a greater number of cells than the C +, with cells adhered and spread, confluent and in close association, without cell death. Further research was suggested, including the osteoinduction test, and the immunofluorescence test to detect specific bone molecules possibly secreted to the extracellular matrix. It can be concluded that the concentrations and potency of the tested MH influenced the cultivation of stem cells, without significant negative effects, suggesting new studies based on the same conditions.

A Doença de Alzheimer (DA) é um distúrbio neurodegenerativo progressivo, sendo a principal causa de demência no final da vida adulta. Histopatologicamente, caracteriza-se por emaranhados neurofibrilares intracelulares e depósitos de proteína beta amilóide extracelular que contribuem para a formação das placas senis. Diversos fatores de risco estão associados à DA, conduzindo à neuroinflamação, aumento do estresse oxidativo e comprometimento cognitivo. Enquanto as características neuropatológicas da doença de Alzheimer são conhecidas, a complexidade dos mecanismos moleculares associados ao seu início e progressão não foi claramente elucidada. O objetivo da presente pesquisa foi avaliar a expressão dos genes TNF (do inglês Tumor Necrosis Factor), CX3CR1 (do inglês Chemokine Receptor 1) e TREM2 (do inglês Triggering Receptor Expressed on Myeloid cells 2) em um modelo de neurodegeneração induzida pela administração intracerebroventricular (icv) de estreptozotocina (STZ). Para isso, foram utilizados 20 ratos machos da linhagem Wistar divididos em quatro grupos experimentais: Grupo 1 (n=5, grupo controle 1), composto por animais que tiveram a administração icv de tampão citrato e eutanasiados após 1 mês da injeção icv; Grupo 2 (n=5, grupo STZ 1), grupo composto por animais que receberam STZ via icv, também eutanasiados após 1 mês da indução da neurodegeneração; Grupo 3 (n=5, grupo controle 2), grupo que recebeu tampão citrato icv e os animais foram eutanasiados após 4 meses da administração icv; Grupo 4 (n=5, grupo STZ 2), grupo que recebeu STZ via icv e os animais foram eutanasiados após 4 meses da administração de STZ. Após a eutanásia, os animais tiveram o hipocampo removido para a extração do RNA. O RNA total extraído foi convertido em cDNA por meio da reação de transcrição reversa. Na sequência, as amostras foram submetidas à reação em cadeia da polimerase quantitativa (qPCR) para análise da expressão dos genes TNF, CX3CR1 e TREM2. A análise de expressão demonstrou aumento da expressão do gene TNF nos animais que foram eutanasiados após 1 mês da indução da neurodegeneração. Também foi encontrado aumento da expressão do gene CX3CR1, entretanto, o aumento da expressão deste gene só foi verificado no grupo de animais eutanasiados após 4 meses da administração icv de STZ. Estes resultados indicam uma participação da neuroinflamação com o desenvolvimento e progressão dos processos neurodegenerativos. Alzheimer's disease (AD) is a progressive neurodegenerative disorder and is the leading cause of dementia in late adulthood. Histopathologically, it is characterized by intracellular neurofibrillary tangles and deposits of extracellular amyloid beta protein that contribute to the formation of senile plaques. Several risk factors are associated with AD, triggering neuroinflammation, oxidative stress and cognitive impairment. While the neuropathological features of Alzheimer's disease are recognized, the complexities of the mechanisms associated with its onset and progression have not been clearly elucidated. The aim of the present research was to evaluate the expression of TNF (Tumor Necrosis Factor), CX3CR1 (Chemokine Receptor 1) and TREM2 (Triggering Receptor Expressed on Myeloid cells 2) genes in a model of streptozotocin (STZ) intracerebroventricular (icv) induced neurodegeneration. For this, 20 male Wistar rats were divided into four experimental groups: Group 1 (n = 5, control group 1), composed of animals with icv citrate buffer injection and euthanized 1 month after citrate buffer administration; Group 2 (n = 5), group composed of animals that received STZ via icv, also euthanized after 1 month of neurodegeneration induction; Group 3 (n = 5, control group 2), group that received icv citrate buffer and were euthanized after 4 months of icv administration; Group 4 (n = 5), group that received STZ via icv and were euthanized after 4 months of STZ administration. After euthanasia, the animals had their hippocampus removed for RNA extraction. Total RNA extracted from these samples was converted to cDNA by reverse transcription reaction. Subsequently, the samples will be subjected to quantitative polymerase chain reaction (qPCR) for analyze of TNF, CX3CR1 and TREM2 gene expression. Expression analysis showed increased expression of the TNF gene in animals that were euthanized after 1 month of neurodegeneration induction. Increased expression of the CX3CR1 gene was also found, however, increased expression of this gene was only seen in the group of euthanized animals after 4 months of the icv administration of STZ. These results indicate an association of neuroinflammation with the development and progression of neurodegenerative processes.

Introdução:. Os tumores gastrointestinais são a segunda causa de morte por câncer no mundo, com cerca de 990.000 novos casos por ano e 738.000 óbitos. Segundo o Instituto Nacional do Câncer (INCA), a incidência de tumores do trato digestório foi de aproximadamente 57.670 casos em 2018, com 21.290 de câncer gástrico. O tratamento dependerá do grau da disseminação. Essa patologia é estudada pela endoscopia terapêutica, que, com suas inovações, possibilita o diagnóstico e tratamento precoce e eficiente. O tratamento consiste na dissecção do tumor por baixo dele, dissecando a submucosa, retirando a primeira camada do trato digestório, porém este procedimento pode ter complicações como sangramento e perfuração, devido à dificuldade de visualização dos vasos e da profundidade da lesão durante a dissecção. Objetivo: Estudar os dispositivos que auxiliem na ressecção endoscópicas do estômago e desenvolver um protótipo com esta função. Metodologia: O primeiro artigo faz revisão dos últimos 20 anos sobre os dispositivos de ressecção endoscópica de tumores gástricos desenvolvidos com a função de ressecções gástricas. O segundo artigo corresponde ao processo de desenvolvimento de um protótipo procurando melhorar as funções dos protótipos desenvolvidos hoje. Resultados e Discussão: O primeiro protótipo se mostrou de tamanho inadequado para a delicadeza que este tipo de ressecção exige, erros que, no segundo protótipo, foram corrigidos, porém outras situações especificas próprias do desenvolvimento do protótipo de pinça médica foram aparecendo como a falta de cabos de aço adequados, tornando os movimentos do protótipo robotizados. Foi projetado um terceiro protótipo que tem potencial para corrigi todas as falhas que foram identificadas nos dois protótipos anteriores. Conclusão: Depois de dois protótipos com falha no desenvolvimento, acreditamos que conseguiremos projetar o terceiro com a solução. Introduction: Gastrointestinal tumors are the second leading cause of cancer death worldwide, with about 990,000 new cases per year and 738,000 deaths. According to the National Cancer Institute (INCA), the incidence of tumors of the digestive tract was approximately 57,670 cases in 2018, 21,290 of which were gastric cancer. In 2017, there were 14,314 cases of gastric cancer. Adenocarcinoma is the histological type responsible for 95% of gastrointestinal cancer cases. Treatment will depend on the degree of spread. This pathology is studied by therapeutic endoscopy, which with its innovations enables early and efficient diagnosis and treatment. The treatment consists of dissecting the tumor under it, dissecting the submucosa, removing the first layer of the digestive tract, however this procedure can have complications such as bleeding and perforation, due to the difficulty in visualizing the vessels and the depth of the lesion during the dissection. Objective: Study the devices that assist in the endoscopic resection of the stomach and develop a prototype with this function. Methods: The first article reviews the past 20 years about endoscopic gastric tumor resection devices developed with the function of gastric resections. The second article corresponds to the process of developing a prototype seeking to improve the functions of the prototypes developed today. Results and discussion :The first proved to be of an inadequate size for the delicacy that this type of resection required, errors that were corrected in the second prototype, but other specific situations specific to the development of the medical clamp prototype appeared as the lack of adequate steel cables, making the movements of the robotic prototype. A third prototype was designed that is believed to correct all the flaws that were identified in the previous two prototypes, however due to many difficulties from projects to raw materials it was not prototyped, however it is believed that this prototype will be the solution for improve the resection of gastric tumors. Conclusion: After two prototypes with countless difficulties, we believe that we were able to design the third with the solution, but it was not possible to prototype it.