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Background Anti-neutrophil cytoplasmic antibody (ANCA) kinetic in ANCA-associated vasculitis with glomerulonephritis (AAV-GN) has been suggested to be associated with AAV relapse. Few studies have focused on its association with renal prognosis. Thus we aimed to investigate the relationship between ANCA specificity and the evolutive profile and renal outcomes. Methods This multicentric retrospective study included patients diagnosed with ANCA-GN since 1 January 2000. Patients without ANCA at diagnosis and with fewer than three ANCA determinations during follow-up were excluded. We analysed estimated glomerular filtration rate (eGFR) variation, renal-free survival and relapse-free survival according to three ANCA profiles (negative, recurrent and persistent) and to ANCA specificity [myeloperoxidase (MPO) or proteinase 3 (PR3)]. Results Over a follow-up of 56 months [interquartile range (IQR) 34–101], a median of 19 (IQR 13–25) ANCA determinations were performed for the 134 included patients. Patients with a recurrent/persistent ANCA profile had a lower relapse-free survival (P = .019) and tended to have a lower renal survival (P = .053) compared with those with a negative ANCA profile. Patients with a recurrent/persistent MPO-ANCA profile had the shortest renal survival (P = .015) and those with a recurrent/persistent PR3-ANCA profile had the worst relapse-free survival (P = .013) compared with other profiles. The negative ANCA profile was associated with a greater eGFR recovery. In multivariate regression analysis, it was an independent predictor of a 2-fold increase in eGFR at 2 years [odds ratio 6.79 (95% confidence interval 1.78–31.4), P = .008]). Conclusion ANCA kinetic after an ANCA-GN diagnosis is associated with outcomes. MPO-ANCA recurrence/persistence identifies patients with a lower potential of renal recovery and a higher risk of kidney failure, while PR3-ANCA recurrence/persistence identifies patients with a greater relapse risk. Thus ANCA kinetics may help identify patients with a smouldering disease.

In established tumors, tumor-associated macrophages (TAM) orchestrate nonresolving cancer-related inflammation and produce mediators favoring tumor growth, metastasis, and angiogenesis. However, the factors conferring inflammatory and protumor properties on human macrophages remain largely unknown. Most solid tumors have high lactate content. We therefore analyzed the impact of lactate on human monocyte differentiation. We report that prolonged lactic acidosis induces the differentiation of monocytes into macrophages with a phenotype including protumor and inflammatory characteristics. These cells produce tumor growth factors, inflammatory cytokines, and chemokines as well as low amounts of IL10. These effects of lactate require its metabolism and are associated with hypoxia-inducible factor-1α stabilization. The expression of some lactate-induced genes is dependent on autocrine M-CSF consumption. Finally, TAMs with protumor and inflammatory characteristics (VEGFhigh CXCL8+ IL1β+) are found in solid ovarian tumors. These results show that tumor-derived lactate links the protumor features of TAMs with their inflammatory properties. Treatments that reduce tumor glycolysis or tumor-associated acidosis may help combat cancer.

Figure S2

Table S1

International audience; Epidemiological studies established an association between chronic inflammation and higher risk of cancer. Inhibition of proteolytic enzymes represents a potential treatment strategy for cancer and prevention of cancer metastasis. Cathepsin C (CatC) is a highly conserved lysosomal cysteine dipeptidyl aminopeptidase required for the activation of pro-inflammatory neutrophil serine proteases (NSPs, elastase, proteinase 3, cathepsin G and NSP-4). NSPs are locally released by activated neutrophils in response to pathogens and non-infectious danger signals. Activated neutrophils also release neutrophil extracellular traps (NETs) that are decorated with several neutrophil proteins, including NSPs. NSPs are not only NETs constituents but also play a role in NET formation and release. Although immune cells harbor large amounts of CatC, additional cell sources for this protease exists. Upregulation of CatC expression was observed in different tissues during carcinogenesis and correlated with metastasis and poor patient survival. Recent mechanistic studies indicated an important interaction of tumor-associated CatC, NSPs, and NETs in cancer development and metastasis and suggested CatC as a therapeutic target in a several cancer types. Cancer cell-derived CatC promotes neutrophil recruitment in the inflammatory tumor microenvironment. Because the clinical consequences of genetic CatC deficiency in humans resulting in the elimination of NSPs are mild, small molecule inhibitors of CatC are assumed as safe drugs to reduce the NSP burden. Brensocatib, a nitrile CatC inhibitor is currently tested in a phase 3 clinical trial as a novel anti-inflammatory therapy for patients with bronchiectasis. However, recently developed CatC inhibitors possibly have protective effects beyond inflammation. In this review, we describe the pathophysiological function of CatC and discuss molecular mechanisms substantiating pharmacological CatC inhibition as a potential strategy for cancer treatment.

International audience; La vaccination a pour but d'induire une réponse immunitaire mémoire capable de protéger l'hôte contre la survenue d'une maladie liée à un agent infectieux. Au-delà de cette protection individuelle, les vaccins confèrent une protection collective en limitant le risque de transmission aux sujets qui ne peuvent être vaccinés ou ne répondent pas aux vaccins. La protection vaccinale repose sur les anticorps, qui neutralisent les toxines ou agents pathogènes ou favorisent la phago-cytose, mais également sur les cellules T helper nécessaires à la génération de lymphocytes B mémoires et de lymphocytes T cytotoxiques qui peuvent détruire les cellules infectées. Les principaux types de vaccins sont les vaccins vivants atténués, les vaccins inactivés à germes entiers et les vaccins inertes peptidiques. Les vaccins vivants atténués sont intrinsèquement immunogènes mais, du fait de leur potentiel réplicatif, sont contre-indiqués en cas d'immunosuppression. Les vaccins inactivés à germes entiers ne présentent plus ce risque mais nécessitent des rappels vaccinaux en raison d'une moindre immunogénicité. Les vaccins inertes peptidiques ne présentent plus de signaux de danger mais seulement les épitopes antigéniques et requièrent donc l'ajout d'adjuvants. Les effets secondaires avérés des vaccins correspondent à la réaction inflammatoire induite initialement et qui participe à la génération d'une réponse immunitaire mémoire cellulaire efficiente. La détermination d'un lien de causalité entre un effet indésirable et un vaccin repose sur la consistance, la force de l'association, la spécificité de l'évènement indésirable, de la relation temporelle et de la vraisemblance biologique entre l'injection vaccinale et l'évènement indésirable. Les effets secondaires sévères des vaccins restent exceptionnels.

International audience; Accreditation of an in vitro diagnostic assay according to the NHENI/ISO 15189 standard requires to analyze its technical performance before implementation for routine use, and annually when reviewing effectiveness of quality controls. Performance is evaluated through repeatability, intermediate fidelity, accuracy and uncertainty of measurement. The coefficients of variation (CV) of the infra-assay and inter-assay precision tests must be compared with those of ``peers'' (results from laboratories employing the same method) and also with those obtained with ``all methods'', i.e., results from all laboratories performing the same assay, irrespective of the method. To our best knowledge, there is currently no French or international recommendation on what the acceptable limits of performance for specific IgE and tryptase assays should be. Therefore, the AllergoBioNet network of hospital allergy laboratories set out to characterize the performance of their current methods as a basis for the development of recommendations. The results provided by 24 centers were analyzed and led to consensus recommendations for specific IgE, total and tryptase assays.

In established tumors, tumor-associated macrophages (TAM) orchestrate nonresolving cancer-related inflammation and produce mediators favoring tumor growth, metastasis, and angiogenesis. However, the factors conferring inflammatory and protumor properties on human macrophages remain largely unknown. Most solid tumors have high lactate content. We therefore analyzed the impact of lactate on human monocyte differentiation. We report that prolonged lactic acidosis induces the differentiation of monocytes into macrophages with a phenotype including protumor and inflammatory characteristics. These cells produce tumor growth factors, inflammatory cytokines, and chemokines as well as low amounts of IL10. These effects of lactate require its metabolism and are associated with hypoxia-inducible factor-1α stabilization. The expression of some lactate-induced genes is dependent on autocrine M-CSF consumption. Finally, TAMs with protumor and inflammatory characteristics (VEGFhigh CXCL8+ IL1β+) are found in solid ovarian tumors. These results show that tumor-derived lactate links the protumor features of TAMs with their inflammatory properties. Treatments that reduce tumor glycolysis or tumor-associated acidosis may help combat cancer.

Resume La glomerulonephrite extra-membraneuse idiopathique peut desormais etre qualifiee de maladie autoimmune glomerulaire. Un certain nombre d’autoanticorps a ete decrit contre des composants glomerulaires ou contre des proteines alimentaires usuelles. Certains de ces autoanticorps, tel que les anticorps anti-PLA2R et les anticorps anti-THSD7A sont utiles pour suivre l’activite de la maladie et la reponse au traitement. Il existe certainement une susceptibilite genetique pour l’apparition de la maladie. La meilleure connaissance de la physiopathologie est le support rationnel a de nouvelles approches therapeutiques en cours d’evaluation.

International audience; Vespula and Polistes spp venom extracts (VEs) for ImmunoCAP (Thermo Fisher Scientific, Uppsala, Sweden) platforms have beenspiked, that is, enriched, with group 5 allergens since 2012. Limited information was available from the manufacturer, but small cohortshave reported altered performance for in vitro diagnostics.1,2 Herein we present the results of a French multicenter study onantigen 5–spiked Vespula and Polistes VEs compared with nonspiked VEs

International audience; There is now a consensus that efficient peptide vaccination against cancer requires that peptides should (i) be exclusively presented by professional APC and (ii) stimulate both CD4 and CD8-specific T cell responses. To this aim, in recent trials, patients were vaccinated with pools of synthetic long peptides (SLP) (15-30 aa long) composed of a potential class I epitope(s) elongated at both ends with native antigen sequences to also provide a potential class II epitope(s). Using MELOE-1 as a model antigen, we present an alternative strategy consisting in linking selected class I and class II epitopes with an artificial cathepsin-sensitive linker to improve epitope processing and presentation by DC. We provide evidence that some linker sequences used in our artificial SLPs (aSLPs) could increase up to 100-fold the cross-presentation of class I epitopes to CD8-specific T cell clones when compared to cross-presentation of the corresponding native long peptide. Presentation of class II epitopes were only slightly increased. We confirmed this increased cross-presentation after in vitro stimulation of PBMC from healthy donors with aSLP and assessment of CD8-specific responses and also in vivo following aSLP vaccination of HLA*A0201/HLA-DRB0101 transgenic mice. Finally, we provide some evidence that vaccination with aSLP could inhibit the growth of transplanted tumors in mice. Our data thus support the use of such aSLPs in future cancer vaccination trials to improve anti-tumor CD8 T cell responses and therapeutic efficacy. ARTICLE HISTORY

International audience; Les pentraxines (PTXs) sont des récepteurs solubles innés classés dans les « pattern recognition receptors » (PRRs). Elles sont composées de deux sous-familles définies sur une base structurelle : les PTXs courtes et les PTXs longues. Les PTXs courtes sont représentées par la protéine C réactive (CRP) et le composant P amyloïde (SAP). La famille des PTXs longues est représentée principalement par la PTX3. Les PTXs sont impliquées dans de nombreux processus biologiques. En plus de leur fonction d'opsonine antimicrobienne, les PTXs sont aussi impliquées dans la clairance des débris cellulaires et des cellules mortes (efferocytose). Une rupture de tolérance vis-à-vis des PTXs a été mise en évidence au cours de différentes maladies auto-immunes, notamment le lupus systémique et les vascularites à ANCA. Dans cette revue de la littérature sont présentées, dans une première partie, les principales caractéristiques et fonctions biologiques des molécules de la famille des PTXs. La seconde partie comporte une synthèse des connaissances concernant les auto-anticorps dirigés contre les PTXs et leur relation avec les aspects cliniques des principales maladies auto-immunes au cours desquelles ils ont été identifiés. Les Ac anti-PTX3 font l'objet d'une présentation approfondie.

International audience; Le diagnostic précoce des déficits immuni-taires primitifs (DIP) est un élément clé pour une prise en charge adéquate des patients, afin de limiter la survenue de complications. Les manifestations cliniques et biologiques des DIP sont variées, incluant les infections récurrentes, mais aussi des manifestations oncologiques ou auto immunes. Des exa-mens biologiques simples, tels que l'hémo-gramme, le dosage pondéral des immuno-globulines et les sérologies post-vaccinales, peuvent permettre d'orienter le diagnostic étiologique. Des analyses plus spécialisées, comme le phénotypage lymphocytaire ou le dosage des sous classes d'IgG peuvent être réalisées en seconde intention. L'ensemble de ces examens nécessitent une interpré-tation rigoureuse en tenant notamment compte de l'âge du patient et du spectre infectieux.

Introduction L’exposition chronique a la silice peut entrainer une silicose pulmonaire associee ou non a des maladies auto-immunes (polyarthrite rhumatoide, sclerodermie, vascularites a ANCA). La physiopathologie des maladies auto-immunes induites par la silice n’est pas bien determinee. Methodes Nous avons mene une etude prospective pour analyser l’impact de l’exposition a la silice sur la production d’auto-anticorps et sur le phenotype des lymphocytes T circulants chez des sujets exposes a la silice sans silicose pulmonaire reconnue. Dans des entreprises produisant des revetements pour le bâtiment, nous avons recrute des sujets âges de trente a soixante ans avec une exposition moderee a elevee a la silice. Le phenotype des lymphocytes T a ete analyse par cytometrie et les auto-anticorps (anti-nucleaires et ANCA) ont ete recherches par methodes classiques. Resultats obtenus ou attendus Parmi les 55 sujets recrutes, 10 furent exposes moins de 5 ans, 18 entre 5 et 10 ans et 27 plus de 10 ans ; 42 prelevements de donneurs sains non exposes furent inclus comme temoins. Nous montrons : – une augmentation significative de l’expression du marqueur d’activation HLA-DR sur les lymphocytes T (CD3+, CD4+ ou CD8 + ) des sujets exposes a la silice comparativement aux sujets non exposes ; l’augmentation est d’autant plus importante que la duree d’exposition est longue ; – une diminution significative de la frequence des lymphocytes T regulateurs (CD4 + CD25 + CD127-FoxP3 + ). Parmi les sujets exposes plus de 10 ans, 44 % presentaient des ANA et 22 % des ANCA, comparativement a 5 % et 2,5 % respectivement dans le groupe temoin. Conclusion Nous montrons que l’exposition a la silice est associee a une rupture de la tolerance immunitaire avec diminution des lymphocytes T regulateurs et augmentation de l’activation lymphocytaire T. Ces resultats mettent en evidence des alterations du compartiment lymphocytaire T associees a une signature humorale anormale chez les sujets exposes a la silice.

International audience; Certaines pathologies, relevant d'un dysfonctionnement de la réponse immunitaire, peuvent rapidement compromettre le pronostic fonctionnel de certains organes, voire le pronostic vital, car le plus souvent ce sont des maladies systémiques, de diagnostic difficile au début quand elles sont pauci-symptomatiques alors qu'elles peuvent flamber subitement. C'est pourquoi le laboratoire d'immunologie, aux techniques encore non automatisées pour certaines, et qui travaille majoritairement en série, se doit de bousculer son organisation pour répondre à la demande argumentée d'un clinicien confronté à une urgence diagnostique. Il s'agit de la recherche d'auto-anticorps dans le cadre des glomérulonéphrites rapidement progressives et des syndromes pneumo-rénaux, du dosage des médiateurs de l'allergie dans le contexte des chocs anaphylactiques, du diagnostic de l'infection tuberculeuse latente en pédiatrie, de la recherche des lymphocytes T activés en cas de syndrome d'activation macrophagique et enfin de l'analyse qualitative et quantitative des immunoglobulines, notamment devant une suspicion de syndrome d'hyper-viscosité ou d'insuffisance rénale aiguë d'origine myélomateuse.

International audience; Pentraxins are soluble pattern recognition molecules implicated not only in the opsonization and removal of microorganisms but also in the clearance of modified self (i.e., dying cells). Pentraxins can be classified into short pentraxins (C-reactive protein and serum amyloid-P component) and long pentraxins with pentraxin-3 (PTX3), the prototypic one of the latter. Pentraxins are involved in various physiological or pathophysiological processes such as inflammation and autoimmunity. A breakdown in immune tolerance to pentraxins has been reported in various autoimmune diseases. In the present review,we analyzed the current knowledge concerning anti-pentraxin antibodies,with a special focus on anti-PTX3 autoantibodies.

Resume Suite a une infection microbienne, les polynucleaires neutrophiles sont les premieres cellules de l’immunite a etre recrutees au site inflammatoire. Un des mecanismes d’action de lutte du polynucleaire neutrophile contre les microbes est la formation de NETs pour neutrophil extracellular traps, conduisant a la netose (netosis en anglais) qui correspond a un mecanisme de mort different de la necrose et de l’apoptose. Les principaux composants des NETs, ADN et proteines issues des granules, ont des proprietes antimicrobiennes, aboutissant a l’elimination des pathogenes par des mecanismes oxydatifs et non-oxydatifs. En dehors des pathogenes (diverses bacteries et champignons), differents stimuli induisent la formation de NETs par les polynucleaires neutrophiles tels que le contact avec des plaquettes activees ou encore divers stimuli inflammatoires. Une netose importante ainsi qu’une clairance alteree des NETs sont impliquees dans la physiopathologie des dommages tissulaires observes dans diverses maladies autoimmunes telles que le lupus erythemateux systemique (LES) ou les vascularites des petits vaisseaux. De plus, les NETs representent egalement une source importante d’autoantigenes modifies. Ainsi, les complexes ADN-proteines de granules et autres proteines, relargues par les polynucleaires neutrophiles durant la netose, peuvent etre la cible d’autoanticorps retrouves dans le LES et les vascularites des petits vaisseaux.

Introduction L’IL–26 possede grâce a ses proprietes pharmaco-chimiques et a sa conformation en multimere, une activite bactericide en formant des pores a la surface des cellules bacteriennes. L’IL–26 peut se lier a l’ADN bacterien et former un complexe permettant de proteger l’ADN lie a des DNases presentes dans le milieu extracellulaire et lui confere une immunogenicite apres contact avec les cellules dendritiques. Chez l’homme, la formation de complexe ADN humain avec l’IL–26 a egalement ete confirmee apres mise en contact in-vitro de cellules apoptotiques et d’IL–26, qui en presence de cellules dendritiques aboutit a la production de cytokines pro-inflammatoires. L’IL-26 apparait comme une cytokine pouvant etre impliquee dans la physiopathogenese du LES, du fait de son mode d’action, notamment, sa liaison a l’ADN et de sa possible co-responsabilite dans la genese des anticorps anti-DNA ; de son appartenance a la famille des IL–10, dont la concentration serique semble augmentee et correlee a l’activite du lupus ; de sa secretion principalement par les lymphocytes Th17. Ainsi, nous avons realise une etude multicentrique afin d’evaluer si le taux d’IL26 est surexprime chez les patients avec un LES par rapport aux temoins. Les objectifs secondaires consistaient, dans la recherche, des correlations entre le taux de IL26 et des differents parametres clinico-biologiques des patients lupiques. Patients et methodes Dans le cadre de l’etude, nous avons recueilli des serums provenant de l’etude Plaquenil Lupus systemique (PLUS). Nous avons etudie 110 serums, dont 55 des patients SAPL + et 55 patients SAPL. Quatre-vingt-huit serums ont ete recueillis aupres de l’EFS du CHU d’Angers sur des temoins sains apparies sur l’âge et sexe. L’âge, le sexe, l’annee du diagnostic du lupus, les criteres de SAPL, les criteres ACR du lupus, la creatininemie, la proteinurie, la presence d’anticorps anti-nucleaires, le titre d’anticorps anti-nucleaires et le score d’activite SLEDAI a la visite, ont ete recueillis pour les 110 patients de l’etude PLUS. Les patients inclus dans l’etude beneficiaient du dosage de la concentration serique en IL–26. La concentration d’IL-26 serique a ete mesuree au laboratoire d’immunologie du CHU d’Angers par methode ELISA comme decrit precedemment. L’analyse statistique a ete realisee avec l’aide des logiciels Excel® version 2010 de Microsoft® et du logiciel IBM® SPSS® statistics version 23. Pour l’analyse comparative des groupes, le test t de Student a ete utilise pour les variables quantitatives apres avoir prealablement verifie l’egalite des variances pour les parametres etudies et le test du Chi2 pour les variables qualitatives nominales. La recherche de correlation utilisait le calcul du coefficient rho de Spearman du fait de l’effectif faible de patients, du caractere non parametrique et de la distribution non normale des donnees. Il etait admis un risque d’erreur alpha de 5 % avec une significativite pour p Resultats La concentration serique en IL–26 etait significativement plus elevee chez les patients lupiques versus les temoins sains. La concentration serique d’IL–26 etait correlee de facon significative au SLEDAI avec un coefficient de correlation rho de Spearman a 0,697 ; p Conclusion Nous avons pu observer dans notre etude que les patients lupiques ont une concentration serique en IL-26 plus importante que les temoins sains. IL26 etait coorele avec des parametres d’activite du LES dont en principalleSLEDAI, le titre d’anticorps ANA, la proteinurie. L’etude met en evidence un possible nouveau biomarqueur dans le lupus et de nouvelles perspectives de recherche dans l’etude de la physiopathologie du lupus.

Buruli ulcer, a debilitating disease, is caused by Mycobacterium ulcerans. The incidence of this neglected tropical disease is steadily increasing. As a rule, without treatment, skin ulcers occur and a lengthy healing process may be observed associated with severe functional disabilities. Mouse models are already available to study establishment of lesions or evaluation of therapy but a lack of a suitable animal model, mimicking all clinical stages, in particular the healing process, remains an obstacle to understand the pathophysiology of M. ulcerans infection. M. ulcerans was s.c. inoculated in three consanguine mouse strains, that is, BALB/c and C57BL/6, classically used to study mycobacterial infection, and FVB/N. Strikingly, FVB/N mice, although as sensitive as all other mouse strains with respect to M. ulcerans infection, presented a spontaneous healing after the ulcerative phase despite stable bacterial load, and mycolactone toxin was not detected in the healed tissues. The spontaneous healing process was accompanied by an activation of the innate immune system. The adaptive response initiated by FVB/N mice was not involved in the healing process and did not confer protection against M. ulcerans. Our work highlights the importance of innate immune responses to control M. ulcerans infection. This in vivo model of M. ulcerans infection now paves the way for new avenues of research toward the elucidation of critical stages of this disease, such as the characterization of the regulation of mycolactone production, a better understanding of the pathophysiology of M. ulcerans infection, and the development of new therapeutic strategies.

Resume S’interesser au monde des microbiotes suppose d’abord d’essayer de discerner les limites et difficultes des methodes en permettant l’etude. Au niveau pulmonaire, le microbiote semble etre chez le sujet sain une expansion essentiellement bronchique de celui de l’oropharynx, cantonnee par l’epuration muco-ciliaire et la pauvrete des ressources disponibles localement. Les circonstances pathologiques agiront en favorisant une expansion plus ou moins globale et/ou une modification de sa repartition pouvant aller jusqu’a une perte de sa diversite. La pauvrete naturelle de ce microbiote nous incite, d’une part, a reconsiderer l’organisation de nos societes, inadaptee par sa concentration des individus ; et d’autre part, pour l’immunologiste, l’incite a reconsiderer l’amenagement des interfaces de notre organisme avec son environnement et a repenser le systeme immunitaire, et l’enseignement de la discipline, en ouvrant peut-etre ainsi une nouvelle periode dans l’histoire de la discipline.

International audience; La plus grande sensibilité aux infections, aux tumeurs, aux maladies auto-immunes et la moins bonne réponse vaccinale sont les caractéristiques de la réponse immunitaire du sujet âgé. Cette tranche de population en pleine expansion jusqu'en 2014 dans les sociétés industrielles, présente une plus grande fréquence de comorbidités, qui sont autant de facteurs aggravants de la déficience de la réponse immunitaire identifiée sous le vocable d'immunosénescence. Pour en rendre compte, il faut envisager la dialectique de la participation du système immunitaire au processus de vieillissement physiologique et les conséquences de ce dernier sur la réponse immunitaire dans ses branches innée et adaptative, avec des facteurs génétiques, épigénétiques et environnementaux intriqués. L'étude de nombreux paramètres immunitaires a permis d'identifier comme facteurs prédictifs de vieillissement du système immunitaire une plus grande fréquence de lymphocytes T CD8+CD28-, une faible réponse proliférative, un rapport CD4/CD8 bas (< 1), un nombre de lymphocytes B2 diminué et une séropositivité pour le CMV. Réponse immunitaire-télomère-vieillissement.

Resume Une immunoglobuline monoclonale se caracterise par l’augmentation selective d’une seule espece moleculaire d’immunoglobuline serique, causee par la proliferation incontrolee d’un clone unique de lymphocytes B, constituee soit d’une seule classe de chaine lourde et d’un seul type de chaine legere, soit de chaines legeres isolees d’un seul type, soit beaucoup plus rarement de fragments de chaines lourdes d’une seule classe. Sa presence n’est pas systematiquement synonyme de malignite. Le diagnostic biologique d’une immunoglobuline monoclonale repose sur la realisation d’une analyse conjointe du serum et des urines qui vise a affirmer son homogeneite de charge et d’isotypie. Le diagnostic biologique de gammapathie monoclonale ne se limite pas a un seul dosage, mais depend d’une strategie raisonnee, utilisant les differents outils diagnostiques que sont l’electrophorese, qu’elle soit sur gel ou capillaire, l’immunoelectrophorese ou immunofixation, l’immunoselection, les dosages d’immunoglobulines et de leurs chaines legeres libres, et enfin la recherche de cryoglobuline. L’interpretation des resultats menant au diagnostic d’immunoglobuline monoclonale reste encore source de difficultes, car certaines situations cliniques (myelome a chaines legeres, cryoglobulinemie, …) necessitent de combiner de maniere judicieuse l’ensemble des techniques mises a disposition. Une grande expertise technique et biologique est donc requise pour, au vu des renseignements cliniques indispensables, choisir au mieux la sequence des examens, et ainsi assurer la qualite et l’efficacite de la strategie mise en œuvre.

Increasing evidence suggests that neutrophils may participate in the regulation of adaptive immune responses, and can reach draining lymph nodes and cross-prime naive T cells. The aim of this study was to identify the mechanism(s) involved in the migration of neutrophils to the draining lymph nodes. We demonstrate that a subpopulation of human and mouse neutrophils express CCR7. CCR7 is rapidly expressed at the membrane upon stimulation. In vitro, stimulated human neutrophils migrate in response to the CCR7 ligands CCL19 and CCL21. In vivo, injection of complete Freund adjuvant induces a rapid recruitment of neutrophils to the lymph nodes in wild-type mice but not in Ccr7−/− mice. Moreover, intradermally injected interleukin-17–and granulocyte-macrophage colony-stimulating factor–stimulated neutrophils from wild-type mice, but not from Ccr7−/− mice, migrate to the draining lymph nodes. These results identify CCR7 as a chemokine receptor involved in the migration of neutrophils to the lymph nodes.

Resume Depuis maintenant deux decennies, les lymphocytes T CD4+ sont classes en differents sous-types en fonction des cytokines qu’ils secretent et de leurs fonctions dans la reponse immunitaire. Cette classification, longtemps cantonnee a deux sous-types de lymphocytes T auxiliaires ou « helper » appeles Th1 et Th2, a recemment ete incrementee de nouvelles sous-populations, notamment les lymphocytes T regulateurs, naturels ou induits, et les lymphocytes proinflammatoires Th17. La decouverte de ces nouvelles populations a permis de mieux comprendre la physiopathologie de nombreuses pathologies, incluant des maladies inflammatoires chroniques dont des maladies auto-immunes, des cancers ainsi que des infections chroniques. Dans cette revue, la generation des lymphocytes T regulateurs et Th17 ainsi que les mecanismes d’action de ces cellules dans le maintien de l’equilibre physiologique entre les reponses inflammatoires et immunosuppressives et leurs implications dans differentes pathologies seront discutes.

International audience; RésuméLes gammapathies monoclonales sont d'occurrence non négligeable (3,2 %) chez les sujets de plus de 50 ans. Pour environ la moitié d'entre elles, elles correspondent, lors de leur découverte, à une gammapathie monoclonale de signification indéterminée (ou MGUS en anglais pour monoclonal gammopathy of undetermined significance). Un peu plus du tiers sont des hémopathies lymphoïdes B avérées (myélome multiple, maladie de Waldenström, amylose) qui représentent le stade ultime de progression des MGUS avec une incidence annuelle de 1 %. L'exploration biologique immunologique validée à ce jour repose sur une analyse conjointe du sérum et des urines par immunoélectrophorèse/immunofixation qui vise à typer l'immunoglobuline monoclonale. Depuis 2001, un nouveau dosage est proposé pour la prise en charge diagnostique de ces patients : la détermination néphélémétrique ou turbidimétrique des chaînes légères libres (CLL) d'immunoglobulines kappa et lambda à l'aide d'anti-sérums spécifiques avec détermination du rapport κ/λ dont le déséquilibre peut être indicateur d'un excès de production monoclonale. Cela reste cependant un dosage quantitatif qui ne peut faire la preuve d'une anomalie qualitative (monoclonalité). L'apport pour le diagnostic et pour le suivi de ce dosage doit tenir compte des propriétés de la réaction antigène/anticorps en milieu liquide (phénomène de zone), du métabolisme rénal des chaînes légères avec ses conséquences en cas d'insuffisance rénale et des interférences possibles avec les chaînes légères liées des immunoglobulines intactes. L'apport diagnostique du dosage des CLL est patent dans les situations cliniques où l'absence de marqueur monoclonal peut être un handicap : myélome à chaîne légère, myélome apparemment non sécrétant, amylose et maladie de dépôt des chaînes d'immunoglobulines. Dans les autres situations (myélome à immunoglobuline intacte, MGUS), l'apport du dosage des CLL comme marqueur diagnostique ou comme indicateur de pronostic ou de suivi thérapeutique n'est pas encore prouvé. Son évaluation nécessitera des études prospectives particulièrement rigoureuses.

Some observations have suggested that cells from the central nervous system (CNS) could present exogenous antigens on major histocompatibility complex (MHC) class I molecules to CD8(+) T cells (a process called cross-presentation). Microglia are the major myeloid immunocompetent cells of the CNS. When activated, following the injury of the nervous parenchyma, they become fully competent antigen-presenting cells (APC) that prime CD4(+) T lymphocytes. We therefore tested the cross-presentation capacity of murine microglia. We report that a microglial cell line (C8-B4), neonatal microglia, and interestingly adult microglia cross-present soluble exogenous antigen (ovalbumin) to a OVA-specific CD8(+) T-cell hybridoma and cross-prime OVA-specific naive OT-1 CD8(+) T cells. In both these cases, C8-B4 and neonatal microglia cross-present OVA as well as peritoneal macrophages. Although cross-presentation by adult microglia is less efficient, it is increased by GM-CSF and CpG oligodeoxynucleotide (ODN) stimulation. Using microglial cells either exposed to an inhibitor of proteasome, lactacystin, or purified from TAP(-/-) mice, we demonstrate that the microglia cross-present antigen in proteasome- and TAP-dependant pathways, respectively. Last, microglia purified from adult mice injected intracerebrally with OVA efficiently stimulate OVA-specific CD8(+) T cells, thereby showing that microglia take up and process exogenous antigen into MHC class I in vivo. This first demonstration of the cross-presentation property of microglia offers novel therapeutic approaches to modulate CD8 T-cell responses in the brain.

International audience; Histamine (HA) is one of the main immediate mediators involved in allergic reactions. HA plasma concentration is well correlated with the severity of vascular and respiratory signs of anaphylaxis. Consequently, plasma quantification of HA is useful to comfort the diagnosis of anaphylaxis. Currently, radioimmunoassay (RIA) is the gold standard method to quantify HA due to its high sensitivity, but it is time consuming, implicates specific formations and cautions for technicians, and produces hazardous radioactive wastes. The aim of this study was to compare two enzymatic immunoassays (EIA) and one in-house liquid chromatography high-resolution mass spectrometry method (LC-HRMS) with the gold standard method for HA quantification in plasma samples of patients suspected of anaphylaxis reactions. Ninety-two plasma samples were tested with the 4 methods (RIA, 2 EIA and LC-HRMS) for HA quantification. Fifty-eight samples displayed HA concentrations above the positive cut-off of 10 nM evaluated by RIA, including 18 highly positive samples (>100 nM). Our results showed that Immunotech® EIA and LC-HRMS concentrations were highly correlated with RIA values, in particular for samples with a HA concentration around the positive cut-off. In our hands, plasma concentrations obtained with the Demeditec Diagnostics® EIA correlated less with results obtained by RIA, and an underestimation of plasma HA levels led to a lack of sensitivity. In conclusion, this study demonstrates that Immunotech® EIA and LC-HRMS method could be used instead of RIA to assess plasma HA in human diagnostic use.

Peroxisome proliferator-activated receptor-alpha (PPARα) is a key modulator of lipid metabolism. Here, we propose that PPARα regulates the maturation and function of bone marrow (BM) progenitor cells. Although PPARα deletion increased the number of BM-resident cells and the differentiation of endothelial progenitor cells (EPCs) and monocytic progenitor cells, it impaired re-endothelialization of injured carotid artery that was associated with reduced circulating EPCs. Also, PPARα deletion diminished the in vivo proangiogenic effect of PPARα agonist without affecting EPC differentiation markers. Macrophage colony-stimulating factor treatment increased the population of monocytic progenitor cells as well as secretome of BM-derived cells in PPARα wild-type but not in knockout mice. In addition, PPARα-null mice displayed reduced lymphocytes and increased monocytes and neutrophils in the blood. Furthermore, PPARα-null mice exhibited increments in the number of total cells (as well as of phenotypically distinct subpopulations of lymph node cells) but also a significant alteration in the number of various subpopulations of splenocytes and thymocytes. Finally, PPARα negatively regulated reactive oxygen species derived by NADPH oxidase in BM-resident progenitor cells. Taken together, our data provide evidence that PPARα is a critical regulator of recruitment, homing, and maturation of BM-derived progenitor cells. Stem Cells 2015;33:1292–1303

Resume Etape de deuxieme intention pour caracteriser la specificite d'anticorpsantinucleaires detectes par immunofluorescence indirecte, la recherche d'anticorps diriges contre les antigenes nucleaires solubles repose sur differentes methodes dont les principes, les avantages et les inconvenients respectifs sont exposes dans cet article. Difficiles a standardiser et automatiser, les techniques d'immunoprecipitation restent cependant celles de reference. Pour rendre un resultat pertinent, le biologiste se doit d'une part de parfaitement connaitre les limites des methodes qu'il emploie, d'autre part de replacer ce resultat dans son contexte clinique en dialoguant avec le prescripteur. La valeur ajoutee d'une telle demarche est seule a meme de conferer un interet diagnostique ou pronostique a ces autoanticorps.

Resume Parmi les nombreux antigenes nucleaires susceptibles d'etre des cibles auto-antigeniques dans les connectivites, la population des antigenes insolubles dans les tampons physiologiques comporte comme antigenes d'interet les nucleosomes, l'acide desoxyribonucleique (ADN) et les histones. Cet article fait le point sur les trois types d'auto-anticorps: anti-ADN natif, anti-histone et anti-nucleosome, et sur les avantages et inconvenients respectifs des differentes methodes utilisees pour les mettre en evidence. Les anticorps anti-ADN natif restent un excellent marqueur du lupus erythemateux systemique, dont la pertinence diagnostique doit cependant etre temperee par la sensibilite de la methode de detection utilisee. Leur interet pronostique pour les atteintes renales et dans le suivi des patients est desormais bien etabli. Compte tenu de leur manque de specificite, la recherche des anticorps anti-histones n'a plus d'interet pour differencier un lupus maladie d'un lupus iatrogene medicamenteux. Les anticorps anti-nucleosome sont des marqueurs sensibles et specifiques du lupus erythemateux systemique, egalement retrouves cependant dans les lupus induits et les hepatites auto-immunes. Leur titre est correle avec l'intensite de l'atteinte renale chez les patients lupiques.

Resume L'observation d'une fluorescence cytoplasmique lors de la recherche d'autoanticorps antinucleaires par immunofluorescence indirecte sur cellules HEp-2 est loin d'etre exceptionnelle. Certains aspects, evocateurs notamment d'autoanticorps diriges contre l'actine, les mitochondries, les ribosomes, les anti-aminoacyl-ARNt synthetases ou, encore la SRP (signal recognition particle), doivent conduire a entreprendre une serie d'analyses complementaires a commencer par l'immunofluorescence indirecte sur coupes d'organes de rat. D'autres se suffisent a eux-meme; c'est le cas des autoanticorps anti-Golgi. Parfois enfin, il arrive que des aspects inhabituels dans la distribution ou la texture de la fluorescence conduisent a la mise en evidence d'une immunoglobuline monoclonale.

Dendritic cells (DCs) play an essential role in the induction of immune responses to pathogen infections. Native DCs are difficult to obtain in large numbers and consequently the vast majority of DCs employed in all experiments are derived from bone marrow progenitors. In an attempt to solve this problem, we have established a novel CD8alpha(+) DC line (H-2(k)) from spleen, which we have named SRDC line, and which is easy to culture in vitro. These cells display similar morphology, phenotype and activity to CD4(-)CD8alpha(+)CD205(+)CD11b(-) DCs purified ex vivo. Toxoplasma gondii antigen was shown to be taken up by these cells and to increase class I and class II major histocompatibility complex (MHC), CD40, CD80 and CD86 surface expression. We report that vaccination with T. gondii antigen-pulsed SRDCs, which synthesize large amounts of interleukin-12, induced protective immune responses against this intracellular pathogen in syngeneic CBA/J mice. This protection was associated with strong cellular and humoral immune responses at systemic and intestinal levels. Spleen and mesenteric lymph node cell proliferations were correlated with a Th1/Th2-type response and a specific SRDC homing to spleen and intestine was observed. The SRDC or CD4(-)CD8alpha(+)CD205(+)CD11b(-) DC line can be expected to be a very useful tool for immunobiology studies of DC.