Search

Our recent work showed that short-term treatment (1-2 days) with high sodium salt had no effect on the morphology of human vascular smooth muscle cells (hVSMCs). However, chronic (long-term treatment, 6-16 days) high sodium salt (CHSS) induced hypertrophy and decreased the relative density of the glycocalyx in hVSMCs. Whether this CHSS effect is reversible at both the morphological and the intracellular calcium and sodium levels is unknown. In the present study, we tested the hypothesis that the effect of CHSS on the morphological and functional levels of hVSMCs is reversible. However, it induced an irreversible increase in the sensitivity of the cells following short-term treatment with high extracellular [Na.sup.+]. We tested the effects of the removal of CHSS treatment on the morphology and intracellular sodium and calcium of hVSMCs. Our results showed that restoring average sodium concentration (145 mM) modeled back the relative density of the glycocalyx, the intracellular resting calcium and sodium levels, and the whole cell and nuclear volumes of hVSMCs. In addition, it induced a permanent remodeling of hVSMCs' response to a short-term increase in the extracellular level of sodium salt by developing spontaneous cytosolic and nuclear calcium waves. Our results showed that CHSS is reversible at both the morphological and basal intracellular ionic levels. However, it maintained a high sensitivity to short-term elevation of extracellular sodium. These results suggest that even if chronic high salt is corrected, it induces a high sodium salt-like sensitive memory. Key words: sodium, calcium, glycocalyx, vascular disease, hypertension, hypertrophy, diet and nutrition, pathophysiology, high salt-induced hypertension, high sodium salt memory, Ghassan Bkaily^orcid.org/0000-0002-1295-4309 Introduction Our knowledge of essential hypertension is vast, and its treatment is well known. However, not all hypertensives are salt-sensitive. Even normotensive individuals are at high cardiovascular risk [...]

In this study, we wanted to verify whether the effect of insulin on calcium homeostasis depends on the heart's development stage. Using a quantitative 3D confocal microscopy, we tested the effect of a high insulin concentration (100 [micro]U) in freshly cultured ventricular cardiomyocytes from newborn and adult rats. Our results showed that the cytosolic basal level of calcium was higher in newborn cardiomyocytes with no change in the nuclear basal calcium level compared with the adult cardiomyocytes; in addition, insulin induced a slow increase of cytosolic and nuclear calcium in newborn ventricular cardiomyocytes, followed by two phases. However, the first phase of slow cytosolic and nuclear calcium increase was absent in adult rat ventricular cardiomyocytes. Furthermore, the time to the onset of increase of cytosolic and nuclear calcium was longer in newborn cardiomyocytes compared with adults. Moreover, the time to peak of the calcium transient was shorter in newborns than in adult cardiomyocytes. These results demonstrate that insulin differently regulates calcium homeostasis in newborns than in adult cardiomyocytes. Thus, newborn rat cardiomyocytes, commonly used in research as a model for adult cardiomyocytes, should be used with caution when dealing with insulin in normal and disease conditions. Key words: insulin, calcium homeostasis, quantitative 3D confocal microscopy, newborn rat cardiomyocytes, adult rat cardiomyocytes Dans cette etude, nous desirions verifier que l'effet de l'insuline sur l'homeostasie du calcium depend du stade de developpement du coeur. A l'aide de la microscopie confocale quantitative en 3D, nous avons evalue l'effet d'une concentration elevee d'insuline (100 [micro]U) sur des cardiomyocytes de rats nouveau-nes et adultes fraichement cultives. Nos resultats ont montre que le taux cytosolique basal de calcium etait plus eleve dans les cardiomyocytes de nouveau-nes que chez les adultes sans variation du taux nucleaire basal; de plus, l'insuline a entraine une lente hausse du calcium cytosolique et nucleaire dans les cardiomyocytes ventriculaires de nouveau-nes, suivie de deux phases. Cependant, la premiere phase de lente hausse du calcium cytosolique et nucleaire etait absente dans les cardiomyocytes ventriculaires des rats adultes. De plus, le temps ecoule avant la hausse du calcium cytosolique et nucleaire etait plus long dans les cardiomyocytes de nouveau-nes que chez les adultes. En outre, le temps ecoule avant le pic de flux calcique transitoire etait plus court chez les nouveau-nes que dans les cardiomyocytes adultes. Ces resultats montrent que l'insuline entraine une regulation differentielle de l'homeostasie du calcium entre les cardiomyocytes adultes et de nouveau-nes. Par consequent, les cardiomyocytes de rats nouveau-nes comme modele de cardiomyocytes adultes que l'on voit frequemment en recherche devraient etre utilises avec circonspection quant a l'evaluation des effets de l'insuline dans le normal et le pathologique. [Traduit par la Redaction] Mots-cles : insuline, homeostasie du calcium, microscopie confocale quantitative en 3D, cardiomyocytes de rats nouveau- nes, cardiomyocytes de rats adultes, Introduction Insulin has been reported to induce a sustained increase in intracellular [Ca.sup.2+] in vascular smooth muscle cells (VSMCs) (Bkaily et al. 1998) and heart cells (Jazzar et al. 2021). [...]

In blood vessels, vascular smooth muscle cells (VSMCs) generally exist in two major phenotypes: contractile and non-contractile (synthetic). The contractile phenotype is predominant and includes quiescent or differentiated VSMCs, which function as the regulators of blood vessel diameter and blood flow. According to some literature in the field, contractile VSMCs do not switch to the non-contractile phenotype due to the activation of specific transcription factors that are considered as guardians of the contractile phenotype. However, a vast amount of the literature uses the terms remodeling and phenotype switching of contractile VSMCs interchangeably based mainly on studies dealing with atherosclerosis. The use of the terms remodeling and switching to describe changes in phenotype based on morphological criteria can be confusing. The term remodeling was first used to describe morphological changes in the heart and was soon used to describe phenotype changes of contractile VSMCs based on morphological criteria. The latter were introduced in early studies, and new molecular criteria were later added, including changes in gene expression, which could be irreversible. In this review, we will discuss the different views concerning remodeling and possible switching of contractile VSMCs to a non-contractile phenotype. We conclude that only remodeling of contractile VSMCs may take place upon vascular injury and disease. Key words: vascular smooth muscle cells, remodeling, contractile phenotype, synthetic phenotype, aging. Dans les vaisseaux sanguins, les cellules musculaires lisses vasculaires (CMLV) se presentent generalement selon deux principaux phenotypes: contractile et non contractile (synthetique). Le phenotype contractile est predominant et comprend des CMLV quiescentes ou differentiees, qui fonctionnent comme des regulateurs du diametre des vaisseaux et du flux sanguin. Selon certains articles dans le domaine, les CMLV contractiles ne passent pas au phenotype non contractile a la suite de l'activation de facteurs de transcription specifiques, qui sont consideres comme etant des gardiens du phenotype contractile. Cependant, tout un pan de la litterature utilise les termes remodelage et commutation phenotypique des CMLV contractiles de maniere interchangeable, avant tout sur la base d'etudes traitant de l'atherosclerose. L'utilisation des termes remodelage et commutation phenotypique pour decrire les variations du phenotype fondees sur des criteres morphologiques peut porter a confusion. Le terme remodelage a tout d'abord ete utilise pour decrire les variations morphologiques dans le creur et a tres tot ete utilise pour decrire les variations des CMLV contractiles sur la base de criteres morphologiques. Ces derniers ont ete introduits dans le cadre d'etudes precoces, et de nouveaux criteres moleculaires ont plus tard ete ajoutes, y compris des variations de l'expression genique, qui peuvent etre irreversibles. Dans cet article de synthese, nous discuterons de differents points de vue sur le remodelage et la commutation eventuelle des CMLV contractiles vers un phenotype non contractile. Nous en concluons qu'uniquement le remodelage des CMLV contractiles peut se produire dans le cadre de lesions et de maladies vasculaires. [Traduit par la Redaction] Mots-cles: cellules musculaires lisses vasculaires, remodelage, phenotype contractile, phenotype synthetique, vieillissement., Introduction The literature dealing with contractile and non-contractile VSMCs in health and disease makes it difficult to distinguish between fact and assumption concerning whether contractile VSMCs remodel or switch phenotype. [...]

Taurine is a nonessential amino acid that has received much attention. Two organs, the heart and the brain, are known to produce their own taurine, but in very limited quantities. It is for this reason that supplementation with this amino acid is necessary. Today, taurine is present in almost all energy drinks. A very vast literature reported beneficial effects of taurine in hepatic dysfunction, gastrointestinal injury, kidney diseases, diabetes, and cardiovascular diseases. Most of its effects were attributed to its modulation of [Ca.sup.2+] homeostasis as well as to its antioxidant properties. In this review, we will focus on the current status of taurine modulation of the cardiovascular system and discuss future avenues for its use as a supplement therapy in a specific cardiovascular disease, namely hypertrophy, and heart failure. Key words: taurine, hypertrophy, heart failure, hypertension, calcium, sodium. La taurine est un acide amine non essentiel qui a recu beaucoup d'attention. Deux organes, le coeur et le cerveau, sont connus pour produire leur propre taurine, mais en quantites tres limitees. C'est la raison pour laquelle il est necessaire de fournir une supplementation pour cet acide amine. Aujourd'hui, la taurine est presente dans presque toutes les boissons energetiques. Un tres grand ensemble de publications a rapporte les bienfaits de la taurine dans le dysfonctionnement hepatique, les lesions gastro-intestinales, l'insuffisance renale, le diabete et les maladies cardiovasculaires. La plupart de ses effets ont ete attribues a sa modulation de l'homeostasie du [Ca.sup.2+], ainsi qu'a ses proprietes antioxydantes. Dans cet article de synthese, nous nous pencherons en particulier sur l'etat actuel de la modulation du systeme cardiovasculaire par la taurine, et nous discuterons des avenues futures pour son utilisation en tant que traitement de supplementation dans une maladie cardiovasculaire specifique : l'hypertrophie et l'insuffisance cardiaque. [Traduit par la Redaction] Mots-cles : taurine, hypertrophie, insuffisance cardiaque, hypertension, calcium, sodium., Introduction Taurine is a nonessential amino acid that has received much attention (Azuma et al. 1992). Two organs, the heart and the brain, are known to produce their own taurine, [...]

During the development of heart failure in humans and animal models, an increase in reactive oxygen species (ROS) levels was observed. However, there is no information whether this increase of ROS is associated with an increase in the density of specific isoforms of NADPH oxidases (NOXs) 1-5. The objective of this study was to verify whether the densities of NOXs 1-5 change during the development of heart failure. Using the well-known model of cardiomyopathic hamsters, the UM-X 7.1 line, a model that strongly resembles the pathology observed in humans from a morphological and functional point of view, our studies showed that, as in humans, NOXs 1-5 are present in both normal and UM-X7.1 hamster hearts. Even though the densities of NOXs 2 and 5 were unchanged, the levels of both NOXs 1 and 4 significantly decreased in UM-X7.1 hamster hearts during heart failure. These changes were accompanied with a significant increase in NOX3 level. These results suggest that, during heart failure, NOX3 plays a vital role in compensating the decrease of NOXs 1 and 4. This increase in NOX3 may also be responsible, at least in part, for the reported increase in ROS levels in heart failure. Key words: NOX, free radicals, hereditary cardiomyopathy, heart failure, ROS. On a observe une hausse des derives reactifs de l'oxygene (ROS pour << reactive oxygen species >>) pendant l'evolution de l'insuffisance cardiaque chez l'homme et dans des modeles animaux. Cependant, il n'existe aucune donnee quant a une association eventuelle entre cette hausse des ROS et une augmentation de la densite d'une isoforme specifique quelconque (NOX 1-5) des NADPH oxydases. Cette etude avait pour but d'evaluer si les densites des NOX 1-5 varient pendant l'evolution de l'insuffisance cardiaque. A l'aide de la lignee UM-X 7.1 de hamster cardiomyopathique, un modele bien connu et qui mime tres fidelement la pathologie observee chez l'humain tant sur le plan morphologique que fonctionnel, nos etudes ont montre que, tout comme chez l'humain, les NOX 1-5 sont presents dans le coeur du hamster normal comme UM-X 7.1. Meme si les densites de NOX 2 et 5 demeuraient inchangees, les taux des NOX 1 et 4 diminuaient nettement dans le coeur du hamster UM-X7.1 pendant l'insuffisance cardiaque. Ces variations s'accompagnaient d'une augmentation notable des taux de NOX3. Ces resultats laissent entendre que, pendant l'insuffisance cardiaque, NOX3 jouerait un role vital dans la compensation de l'abaissement des NOX 1 et 4. Cette hausse de NOX3 pourrait aussi etre au moins en partie responsable de l'augmentation des taux de ROS rapportee dans l'insuffisance cardiaque. [Traduit par la Redaction] Mots-cles : NOX, radicaux libres, cardiomyopathie hereditaire, insuffisance cardiaque, derives reactifs de l'oxygene., Introduction In the heart, reactive oxygen species (ROS) can be generated endogenously by numerous mechanisms including oxidative phosphorylation in the mitochondria, xanthine oxidase, cytochrome P450, catecholamines autooxidation, nitric oxide synthase [...]

Tumor necrosis factor alpha (TNF[alpha]) and its type 1 receptor (TNFR1) are implicated in several autoimmune diseases, including rheumatoid arthritis, and are associated with complications at the cardiovascular level. Using human cardiomyocytes, vascular smooth muscle, vascular endothelial, and endocardial endothelial cells coupled to indirect immunofluorescence, our results showed the presence of TNFR1 at the levels of the plasma membrane (including the cytosol) and mostly at the level of the nuclear membranes (including the nucleoplasm). The distribution of the receptor is different between cell types; however, the density is significantly higher at the nuclear level in all 4 cell types. The density of the receptor was the highest in contractile cells including the cardiomyocytes and vascular smooth muscle cells, compared with endothelial cells including endocardial endothelial and vascular endothelial cells. Using the [Ca.sup.2+] probe Fluo-3 coupled to quantitative confocal microscopy, our results showed that the cytokine induced a sustained [Ca.sup.2+] increase in both the cytosol and nucleoplasm of all 4 cell types. This increase was more significant at the nuclear level, mainly in endothelial cells. Our results demonstrated the presence of TNFR1 at both the cell and nuclear membranes of cardiovascular cells, and that its activation modulated both cytosolic and nuclear [Ca.sup.2+]. Key words: TNF[alpha], TNFR1, cytosolic calcium, nuclear calcium, vascular smooth muscle cells, vascular endothelial cells, endocardial endothelial cells, cardiomyocytes. Le facteur de necrose tumorale alpha (TNF[alpha]) et son recepteur de type 1 (TNFR1) jouent un role dans plusieurs maladies auto-immunes, y compris la polyarthrite rhumatoide, et ils sont associes a des complications sur le plan cardiovasculaire. A l'aide de cardiomyocytes, et de cellules musculaires lisses vasculaires, ainsi que de cellules endotheliales vasculaires et endocardiques couples a l'immunofluorescence indirecte, nos resultats ont montre la presence de TNFR1 au niveau de la membrane plasmatique (y compris le cytosol) et principalement au niveau des membranes nucleaires (y compris le nucleoplasme). La distribution du recepteur est differente d'un type cellulaire a l'autre; cependant, la densite est nettement plus elevee au niveau nucleaire dans les 4 types cellulaires. La densite du recepteur etait la plus elevee dans les cellules contractiles, y compris les cardiomyocytes et les cellules musculaires lisses vasculaires, comparativement aux cellules endotheliales, y compris les cellules endotheliales endocardiques et vasculaires. A l'aide de la sonde calcique, le Fluo-3, couplee a la microscopie confocale quantitative, nos resultats ont montre que cette cytokine induisait une augmentation soutenue d'ions [Ca.sup.2+] dans le cytosol comme dans le nucleoplasme des 4 types cellulaires. Cette augmentation etait plus marquee au niveau nucleaire, principalement dans les cellules endotheliales. En conclusion, nos resultats ont montre la presence de TNFR1 dans les membranes cellulaires comme nucleaires de cellules cardiovasculaires, et que son activation participait a la modulation des ions [Ca.sup.2+] dans le cytosol comme dans le noyau. [Traduit par la Redaction] Mots-cles : TNF[alpha], TNFR1, calcium cytosolique, calcium nucleaire, cellules musculaires lisses vasculaires, cellules endotheliales vasculaires, cellules endotheliales endocardiques, cardiomyocytes., Introduction Tumor necrosis factor alpha (TNF[alpha]) is a pleiotropic proinflammatory cytokine that exerts its effects on diverse cell types and is a principal mediator in the pathogenesis of chronic inflammatory [...]

Endocardial endothelial cells (EECs) form a monolayer lining the ventricular cavities. Studies from our laboratory and the literature have shown differences between EECs isolated from the right and left ventricles (EECRs and EECLs, respectively). Angiotensin II (Ang II) was shown to induce apoptosis of different cell types mainly via AT receptor activation. In this study, we verified whether Ang II induces apoptosis of human EECRs and EECLs (hEECRs and hEECLs, respectively) and via which type of receptor. Using the annexinV labeling and in situTUNEL assays, our results showed that Ang II induced apoptosis of both hEECRs and hEECLs in a concentration-dependent manner. Our results using specific [AT.sub.1] and [AT.sub.2] receptor antagonists showed that the Ang-II-induced apoptosis in both hEECRs and hEECLs is mediated mainly via the [AT.sub.2] receptor. However, [AT.sub.1] receptor blockade partially prevented Ang-II-induced apoptosis, particularly in hEECRs. Hence, our results suggest that mainly [AT.sub.2] receptors mediate Ang-II-induced apoptosis of hEECRs and hEECLs. The damage of EECs would affect their function as a physical barrier between the blood and cardiomyocytes, thus affecting cardiomyocyte functions. Key words: human endocardial endothelial cells, apoptosis, angiotensin II, [AT.sub.1] receptor, [AT.sub.2] receptor, angiotensin II receptor antagonists. Les cellules endotheliales endocardiques (CEE) forment une couche monocellulaire tapissant la cavite des ventricules. Des etudes issues de nos laboratoires et de la litterature ont montre la presence de differences entre les CEE isolees des ventricules droit et gauche (CEED et CEEG, respectivement). Il est decrit que l'angiotensine II (Ang II) entraine de l'apoptose dans differents types cellulaires, principalement par l'intermediaire de l'activation des recepteurs AT Dans cette etude, nous avons verifie que l'Ang II induit l'apoptose dans les CEED et les CEEG humaines (CEEDh et CEEGh, respectivement), ainsi que le type de recepteur y contribuant. A partir du marquage par l'annexine V et des etudes de TUNEL in situ, nos resultats ont montre que l'Ang II induit l'apoptose dans les CEEDh comme dans les CEEGh, et ce, de maniere dependant de la concentration. Nos etudes a l'aide d'antagonistes des recepteurs AT et [AT.sub.2] ont montre que l'apoptose induite par l'Ang II dans les CEEDh comme dans les CEEGh est principalement mediee par l'intermediaire des recepteurs [AT.sub.2]. Cependant, l'inhibition des recepteurs AT permettait de prevenir partiellement l'apoptose induite par l'Ang II, en particulier dans les CEEDh. Par consequent, nos resultats laissent entendre que dans les CEEDh et CEEGh, l'apoptose provoquee par l'Ang II serait surtout mediee par les recepteurs [AT.sub.2]. Les dommages aux CEE pourraient affecter leur fonctionnement en tant que barriere physique entre le sang et les cardiomyocytes, et donc celui des cardiomyocytes. [Traduit par la Redaction] Mots-cles: cellules endotheliales endocardiques humaines, apoptose, angiotensine II, recepteur AT, recepteur [AT.sub.2], antagonistes des recepteurs de l'angiotensine II., Introduction The heart cavities, including the trabeculae and papillary muscles, are lined with a thin monolayer of endothelial cells about 0.5 pm thick, called the endocardial endothelium (Brutsaert et al. [...]

The interaction between vascular endothelial cells (VECs) and vascular smooth muscle cells (VSMCs) plays an important role in the modulation of vascular tone. There is, however, no information on whether direct physical communication regulates the intracellular calcium levels of human VECs (hVECs) and (or) human VSMCs (hVSMCs). Thus, the objective of the study is to verify whether co-culture of hVECs and hVSMCs modulates cytosolic ([[[Ca.sup.2+]].sub.c]) and nuclear calcium ([[[Ca.sup.2+]].sub.n]) levels via physical contact and (or) factors released by both cell types. Quantitative 3D confocal microscopy for [[[[Ca.sup.2+]].sub.c] and [[[[Ca.sup.2+]].sub.n] measurement was performed in cultured hVECs or hVSMCs or in co-culture of hVECs-hVSMCs. Our results show that: (1) physical contact between hVECs-hVECs or hVSMCs-hVSMCs does not affect [[[[Ca.sup.2+]].sub.c] and [[[[Ca.sup.2+]].sub.n] in these 2 cell types; (2) physical contact between hVECs and hVSMCs induces a significant increase only of [[[[Ca.sup.2+]].sub.n] of hVECs without affecting the level of [[[[Ca.sup.2+]].sub.c] and [[[Ca.sup.2+]].sub.n] of hVSMCs; and (3) preconditioned culture medium of hVECs or hVSMCs does not affect [[[[Ca.sup.2+]].sub.c] and [[[[Ca.sup.2+]].sub.n] of both types of cells. We concluded that physical contact between hVECs and hVSMCs only modulates [[[[Ca.sup.2+]].sub.n] in hVECs. The increase of [[[[Ca.sup.2+]].sub.n] in hVECs may modulate nuclear functions that are calcium dependent. Key words: vascular endothelial cells, vascular smooth muscle cells, co-culture, nuclear calcium, calcium release. L'interaction entre les cellules endotheliales vasculaires (CEV) et les cellules musculaires lisses vasculaires (CMLV) joue un role important dans la modulation du tonus vasculaire. Il n'existe cependant aucune information quant aux effets de leur communication physique directe sur la regulation des concentrations intracellulaires de calcium dans les CEV humaines (CEVh) ou les CMLV humaines (CMLVh). Par consequent, l'etude avait pour but de verifier si la co-culture de CEVh avec des CMLVh entraine une modulation des concentrations de calcium cytosolique ([[[[Ca.sup.2+]].sub.c]) et nucleaire ([[[[Ca.sup.2+]].sub.n]) par l'intermediaire d'un contact physique et (ou) de facteurs liberes par les deux types de cellules. A l'aide de la microscopie confocale quantitative en 3D, nous avons mesure les [[[[Ca.sup.2+]].sub.c] et les [[[[Ca.sup.2+]].sub.n] dans les CEVh et les CMLVh en culture ou en co-culture les unes avec les autres (CEVh-CMLVh). Nos resultats montrent les choses suivantes: (1) Le contact physique entre CEVh-CEVh ou CMLVh-CMLVh n'a pas d'effet sur les [[[[Ca.sup.2+]].sub.c] ni sur les [[[[Ca.sup.2+]].sub.n] dans ces deux types cellulaires; (2) Le contact physique entre CEVh-CMLVh entraine une augmentation marquee uniquement des [[[[Ca.sup.2+]].sub.n] dans les CEVh, sans affecter les [[[[Ca.sup.2+]].sub.c] ni les [[[[Ca.sup.2+]].sub.n] dans les CMLVh; et (3) Le milieu de culture preconditionne des CEVh ou des CMLVh n'a aucun effet sur les [[[[Ca.sup.2+]].sub.c] ni les [[[[Ca.sup.2+]].sub.n] pour les deux types de cellules. Nous en sommes arrives a la conclusion que le contact physique entre les CEVh et les CMLVh entraine une modulation uniquement des [[[[Ca.sup.2+]].sub.n] dans les CEVh. Cette augmentation des [[[[Ca.sup.2+]].sub.n] dans les CEVh pourrait entrainer une modulation de fonctions nucleaires qui dependent du calcium. [Traduit par la Redaction] Mots-cles: cellules endotheliales vasculaires, cellules musculaires lisses vasculaires, co-culture, calcium nucleaire, liberation de calcium., Introduction Physical contact between the same type of cells involves different types of junctions such as tight junctions (Alberts 1994), adherence junctions (Alberts 1994), platelet-endothelial cell adhesion molecule (DeLisser et [...]

Previous studies focused on the right ventricular endocardial endothelial cells (EECRs) and showed that angiotensin II (Ang II) induced increase in cytosolic and nuclear calcium via [AT.sub.1] receptor activation. In the present study, we verified whether the response of left EECs (EECLs) to Ang II is different than that of EECRs. Our results showed that the [EC.sub.50] of the Ang II-induced increase of cytosolic and nuclear calcium in EECLs was 10x higher (around 2 x [10.sup.-13] mol/L) than in EECRs (around 8 x [10.sup.-12] mol/L). The densities of both [AT.sub.1] and [AT.sub.2] receptors were also higher in EECLs than those previously reported in EECRs. The effect of Ang II was mediated in both cell types via the activation of [AT.sub.1] receptors. Treatment with Ang II induced a significant increase of cytosolic and nuclear [AT.sub.1] receptors in EECRs, whereas the opposite was found in EECLs. In both cell types, there was a transient increase of cytosolic and nuclear [AT.sub.2] receptors following the Ang II treatment. In conclusion, our results showed that both [AT.sub.1] and [AT.sub.2] receptors densities are higher in both EECLs compared to what was reported in EECRs. The higher density of [AT.sub.1] receptors in EECLs compared to REECs may explain, in part, the higher sensitivity of EECLs to Ang II. Key words: angiotensin II, [AT.sub.1] receptor, [AT.sub.2] receptor, endocardial endothelial cells, calcium. Des etudes anterieures portant sur les cellules endotheliales de l'endocarde du ventricule droit (CEED) ont montre que l'angiotensine II (Ang II) provoquait une augmentation du calcium cytosolique et nucleaire par l'intermediaire de l'activation des recepteurs [AT.sub.1]. Dans la presente etude, nous avons verifie si l'effet des CEE gauches (CEEG) a l'Ang II est differente de celle des CEED. Nos resultats ont montre que l'[EC.sub.50] de l'augmentation du calcium cytosolique et nucleaire par l'Ang II etait dix fois plus elevee dans les CEEG (environ 2 x [10.sup.-13] mol/L) que dans les CEED (environ 8 x [10.sup.-12] mol/L). Les densites des recepteurs [AT.sub.1] comme [AT.sub.2] etaient elles aussi plus elevees dans les CEEG que celles rapportees anterieurement dans les CEED. L'effet de l'Ang II etait medie par l'activation des recepteurs [AT.sub.1] dans les deux types de cellules. L'exposition a l'Ang II provoquait une augmentation notable des recepteurs [AT.sub.1]cytosoliques etnucleaires dans les CEED, mais l'inverse dans les CEEG. Dans les deux types cellulaires, nous avons observe une augmentation transitoire des recepteurs [AT.sub.2] cytosoliques et nucleaires apres l'exposition a l'Ang II. En conclusion, nos resultats ont montre que les densites des recepteurs [AT.sub.1] et [AT.sub.2] sont toutes deux plus elevees dans les CEEG que ce qui avait ete rapporte dans les CEED. La plus haute densite de recepteurs [AT.sub.1] dans les CEEG que dans les CEED pourrait expliquer en partie la plus haute sensibilite des CEEG a l'Ang II. [Traduit par la Redaction] Mots-cles: angiotensine II, recepteur [AT.sub.1], recepteur [AT.sub.2], cellules endotheliales endocardiques, calcium., Introduction Angiotensin II (Ang II) is an octapeptide that is the principal mediator of the renin-angiotensin system, which plays a major role in the regulation of the cardiovascular and renal [...]

Our previous work showed the presence of endothelin-1 (ET-1) receptors, [ET.sub.A] and [ET.sub.B], in human vascular endothelial cells (hVECs). In this study, we wanted to verify whether ET-1 plays a role in the survival of hVECs via the activation of its receptors [ET.sub.A] and (or) [ET.sub.B] ([ET.sub.A]R and [ET.sub.B]R, respectively). Our results showed that treatment of hVECs with ET-1 prevented apoptosis induced by genistein, an effect that was mimicked by treatment with [ET.sub.B]R- specific agonist IRL1620. Furthermore, blockade of [ET.sub.B]R with the selective [ET.sub.B]R antagonist A-192621 prevented the anti-apoptotic effect of ET-1 in hVECs. However, activation of [ET.sub.A] receptor alone did not seem to contribute to the anti-apoptotic effect of ET-1. In addition, the anti-apoptotic effect of [ET.sub.B]R was found to be associated with caspase 3 inhibition and does not depend on the density of this type of receptor. In conclusion, our results showed that ET-1 possesses an anti-apoptotic effect in hVECs and that this effect is mediated, to a great extent, via the activation of [ET.sub.B]R. This study revealed a new role for [ET.sub.B]R in the survival of hVECs. Key words: endothelin-1, human vascular endothelial cells, [ET.sub.A] receptor, [ET.sub.B] receptor, apoptosis. Nos travaux anterieurs ont montre la presence des recepteurs [ET.sub.A] et [ET.sub.B] de l'endotheline-1 (ET-1) dans les cellules endotheliales vasculaires humaines (CEVh). Dans la presente etude, nous souhaitions verifier si l'ET-1 joue un role dans la survie des CEVh par l'intermediaire de l'activation de ses recepteurs [ET.sub.A] et (ou) [ET.sub.B] ([ET.sub.A]R et [ET.sub.B]R, respectivement). Nos resultats ont montre que l'exposition des CEVh a l'ET-1 permettait de prevenir l'apoptose provoquee par la genisteine, effet mime par l'exposition a l'IRL1620, un agoniste specifique des [ET.sub.B]R. En outre, l'inhibition des [ET.sub.B]R avec l'A-192621, un antagoniste selectif des [ET.sub.B]R, permettait de prevenir l'effet anti-apoptotique de l'ET-1 dans les CEVh. Cependant, l'activation des recepteurs [ET.sub.A] seulement ne semblait pas contribuer a l'effet anti-apoptotique de l'ET-1. De plus, nous avons observe que l'effet anti-apoptotique des [ET.sub.B]R est associe a l'inhibition de la caspase 3 et qu'il ne depend pas de la densite de ce type de recepteur. En conclusion, nos resultats ont montre que l'ET-1 est dotee de proprietes anti-apoptotiques dans les CEVh, et que cet effet est medie dans une grande mesure par l'intermediaire de l'activation des [ET.sub.B]R. Cette etude a revele un nouveau role des [ET.sub.B]R dans la survie des CEVh. [Traduit par la Redaction] Mots-cles: endotheline-1, cellules endotheliales vasculaires humaines, recepteur [ET.sub.A], recepteur [ET.sub.B], apoptose., Introduction The vascular endothelium forms a continuous monolayer of cells lining the inner vascular wall (Mudrovcic et al. 2017). This type of cell presents a large surface area for molecule [...]

Angiotensin II (AngII) plays an important role in the regulation of vascular smooth muscle function. However, little is known about AngII and its receptors [AT.sub.1] ([AT.sub.1]R) and [AT.sub.2] ([AT.sub.2]R) and their modulation of intracellular calcium in vascular endothelial cells (VECs) in general and more particularly of human origin. Using western blots, our results showed that [AT.sub.1]Rs and [AT.sub.2]Rs are present in human VECs (hVECs). Using quantitative 3D confocal imaging, our results showed that AngII is present at the cytoplasmic and nucleoplasmic levels and its relative density is lower in the nucleoplasm. However, both AngII receptors [AT.sub.1] and [AT.sub.2] are present at both the plasma and the nuclear envelope membranes (NEMs). AngII ([10.sup.-10] mol/L) induces a transient decrease of the relative density of cytosolic and nuclear [AT.sub.1]Rs. Blockade of [AT.sub.1]Rs with losartan or blocking protein synthesis with cycloheximide does not prevent internalization and nuclear translocation of [AT.sub.1]Rs but prevents de novo [AT.sub.1]R synthesis. In addition, AngII induces cytosolic and nuclear increases ([EC.sub.50] near 5 x [10.sup.-14] mol/L) of calcium via the activation of [AT.sub.1]Rs. These results demonstrate that both [AT.sub.1] and [AT.sub.2] receptors are present in hVECs, and that only [AT.sub.1]Rs seem to undergo transcellular trafficking and modulate cytosolic and nuclear calcium homeostasis. Key words: angiotensin II, human vascular endothelial cells, [AT.sub.1] receptor, [AT.sub.2] receptor, calcium. L'angiotensine II (AngII) joue un role important dans la regulation du fonctionnement du muscle lisse vasculaire. Cependant, on sait peu de choses du role de l'AngII et de ses recepteurs [AT.sub.1] ([AT.sub.1]R) et [AT.sub.2] ([AT.sub.2]R) dans leur modulation du calcium intracellulaire dans les cellules endotheliales vasculaires (CEV) en general, et plus particulierement d'origine humaine. A l'aide de l'immunobuvardage de western, nous avons montre que les [AT.sub.1]R et les [AT.sub.2]R sont presents dans les CEV humaines (CEVh). A l'aide de l'imagerie confocale quantitative en 3D, nous avons observe que l'AngII est presente au niveau du cytoplasme et du noyau et que sa densite relative est plus faible dans le noyau. Cependant, tant l'AngII que les recepteurs [AT.sub.1] et [AT.sub.2] sont presents dans les membranes plasmiques et l'enveloppe nucleaire (NEMs). L'AngII ([10.sup.-10] mol/L) provoque une diminution transitoire de la densite relative des [AT.sub.1]R cytosoliques et nucleaires. L'inhibition des [AT.sub.1]R avec du losartan ou de la synthese proteique avec du cycloheximide ne previent pas l'internalisation et la translocation nucleaire des [AT.sub.1]R, mais elle previent la synthese de novo de [AT.sub.1]R. De plus, l'AngII provoque une augmentation du calcium dans le cytosol et le noyau ([EC.sub.50] proche de 5 x [10.sup.-14] mol/L) par l'intermediaire de l'activation des [AT.sub.1]R. Ces resultats montrent que les [AT.sub.1]R comme les [AT.sub.2]R sont presents dans les CEVh, et que seuls les [AT.sub.1]R semblent se preter a la circulation transcellulaire et moduler l'homeostasie du calcium dans le cytosol et le noyau. [Traduit par la Redaction] Mots-cles: angiotensine II, cellules endotheliales vasculaires humaines, recepteur [AT.sub.1], recepteur [AT.sub.2], calcium., Introduction Angiotensin II (AngII) is an octapeptide known to affect the cardiovascular system by increasing blood pressure. Although its effect was largely studied at the vascular smooth muscle and renal [...]

Endocardial endothelial cells (EECs) constitute an important component of the heart. These cells form a monolayer that covers the cavities of the right (EECRs) and left (EECLs) ventricles. They play an important role in cardiac excitation-contraction coupling via their secretion of cardioactive factors such as neuropeptide Y (NPY). They also contribute to cardiac pathology such as arrhythmia, hypertrophy, and heart failure. Differences between EECRs and EECLs contribute to tuning of circulating factors at the entry and exit of the ventricles. NPY, via activation of its receptors, modulates the excitation-secretion coupling of EECs, thus, indirectly modulating cardiac function and remodeling. Key words: NPY, NPY receptors, endocardial endothelial cells, ET-1, calcium. Les cellules endotheliales endocardiques (CEE) constituent une composante importante du creur. Ces cellules forment une monocouche qui tapisse les cavites des ventricules droit (CEED) et gauche (CEEG). Elles jouent un role important dans le couplage excitation-contraction du creur par l'intermediaire de la secretion de facteurs cardioactifs comme le neuropeptide Y (NPY). Elles contribuent aussi a des pathologies cardiaques comme les arythmies ainsi que l'hypertrophie et l'insuffisance cardiaques. Les differences entre les CEED et les CEEG contribuent a l'ajustement de facteurs circulants a l'entree et a la sortie des ventricules. Le NPY, par l'intermediaire de l'activation de ses recepteurs, assure la modulation du couplage excitationsecretion des CEE, et par consequent la modulation de la fonction cardiaque et du remodelage du creur. [Traduit par la Redaction] Mots-cles: NPY, recepteurs du NPY, cellules endotheliales endocardiques, ET-1, calcium., Introduction Our knowledge about cardiac function has evolved greatly over the years, so now the heart is recognized as a pluricellular, multifunctional organ in which the endothelium, and more particularly [...]

Cardiomyopathy is found in patients with Duchenne (DMD) and Becker (BMD) muscular dystrophies, which are linked muscle diseases caused by mutations in the dystrophin gene. Dystrophin defects are not limited to DMD but are also present in mild BMD. The hereditary cardiomyopathic hamster of the UM-X7.1 strain is a particular experimental model of heart failure (HF) leading to early death in muscular dystrophy (dystrophin deficiency and sarcoglycan mutation) and heart disease ([delta]-sarcoglycan deficiency and dystrophin mutation) in human DMD. Using this model, our previous work showed a defect in intracellular sodium homeostasis before the appearance of any apparent biochemical and histological defects. This was attributed to the continual presence of the fetal slow sodium channel, which was also found to be active in human DMD. Due to muscular intracellular acidosis, the intracellular sodium overload in DMD and BMD was also due to sodium influx through the sodium-hydrogen exchanger NHE-1. Lifetime treatment with an NHE-1 inhibitor prevented intracellular [Na.sup.+] overload and early death due to HF. Our previous work also showed that another proton transporter, the voltage-gated proton channel (Hv1), exists in many cell types including heart cells and skeletal muscle fibers. The Hv1 could be indirectly implicated in the beneficial effect of blocking NHE-1. Key words: Becker muscular dystrophy, Duchenne muscular dystrophy, heart failure, NHE-1, proton channel. On peut observer une cardiomyopathie chez des patients atteints de dystrophie musculaire de Duchenne (DMD) ou de Becker (DMB). Cette atteinte est liee a des maladies musculaires causees par des mutations dans le gene de la dystrophine. Les defauts dans la dystrophine sont presents dans la DMD, mais dans la DMB legere aussi. Le hamster de la souche UM-X7.1, atteint de cardiomyopathie hereditaire, constitue un modele experimental particulier d'insuffisance cardiaque (IC) menant a une mort precoce en cas de dystrophie musculaire (carence en dystrophine et mutation dans le gene de la sarcoglycane) et de maladie cardiaque (carence en [delta]-sarcoglycane et mutation dans le gene de la dystrophine) chez des humains atteints de DMD. A l'aide de ce modele, nos travaux precedents ont montre un defaut dans l'homeostasie du sodium intracellulaire avant l'apparition de tout defaut biochimique ou histologique apparent. Nous avons attribue ce phenomene a la presence continuelle de canaux sodiques lents fetaux, que l'on a aussi retrouves sous une forme active dans la DMD chez l'humain. En raison de l'acidose intracellulaire musculaire, la surcharge intracellulaire de sodium dans la DMD et la DMB etait aussi causee par le passage de sodium par l'echangeur sodium-hydrogene NHE-1. Le traitement a vie avec un inhibiteur du NHE-1 permettait de prevenir la surcharge intracellulaire de [Na.sup.+] et le deces precoce cause par l'IC. Nos travaux precedents ont aussi montre que le Hv1 (canal a protons dependant du voltage), un autre transporteur de protons, existe dans de nombreux types cellulaires, y compris les cellules cardiaques et les fibres de muscle squelettique. Le Hv1 pourrait jouer un role indirect dans les effets avantageux de l'inhibition du NHE-1. [Traduit par la Redaction] Mots-cles: dystrophie musculaire de Becker, dystrophie musculaire de Duchenne, insuffisance cardiaque, NHE-1, canal a protons., Introduction Early death from heart failure (HF) is a major growing health problem in North America (Blair et al. 2013; Danielsen et al. 2017). There were nearly 5.7 million US [...]

Using the UM-X7.1 hereditary cardiomyopathic and muscular dystrophy hamsters (HCMH), we tested the effects of lifelong preventive or curative treatments during the heart failure phase with the NHE-1 inhibitor EMD 87580 (EMD) or with the angiotensin-converting enzyme inhibitor cilazapril on the intracellular [Na.sup.+] and [Ca.sup.2+] overloads, elevated level of NHE-1, necrosis, hypertrophy, heart failure, and early death. Our results showed that 310-day pretreatment of 30-day-old HCMHs with EMD significantly prevented cardiac necrosis, cardiomyocyte hypertrophy, and reduced the heart to body mass ratio. This treatment significantly prevented [Na.sup.+] and [Ca.sup.2+] overloads and the increase in NHE-1 protein level observed in HCMHs. Importantly, this lifelong preventive treatment significantly decreased the levels of creatine kinase and prevented early death of HCMHs. Curative 0treatment of hypertrophic 275-day-old HCMHs for 85 days with EMD significantly prevented hypertrophy and early death of HCMHs. However, treatments with cilazapril did not have any significant effects on the cardiac parameters studied or on early death of HCMHs. Our results suggest that the increase in the NHE-1 level and the consequent [Na.sup.+] and [Ca.sup.2+] overloads are implicated in the pathological process leading to heart failure and early death in HCMHs, and treatment with the NHE-1 inhibitor is promising for preventing early death in hereditary cardiomyopathy. Key words: cardiomyopathy, early death, heart failure, NHE-1, NHE-1 inhibitor EMD 87580, ACE inhibitor. A l'aide d'un modele de hamster atteint de cardiomyopathie et de dystrophie musculaire hereditaires (souche UM-X7.1), nous avons etudie les effets de traitements preventifs a vie et de traitements curatifs pendant la phase d'insuffisance cardiaque par l'administration de l'EMD 87580, un inhibiteur de la NHE-1 (isoforme 1 de la proteine echangeuse d'ions sodium-proton), ou de cilazapril, un IECA (inhibiteur de l'enzyme de conversion de l'angiotensine), sur l'etablissement de surcharges intracellulaires en [Na.sup.+] et en [Ca.sup.2+], l'augmentation des taux de NHE-1, la necrose, l'hypertrophie, l'insuffisance cardiaque et la mort prematuree. Nos resultats ont montre qu'un pretraitement des hamsters UM-X7.1 par l'EMD 87580 pendant 310 jours permettait manifestement de prevenir la necrose cardiaque, l'hypertrophie des cardiomyocytes et l'augmentation du rapport entre le poids du creur et le poids corporel total. Ce traitement permettait de prevenir l'etablissement de surcharges en [Na.sup.+] et en [Ca.sup.2+] et d'augmenter les taux de proteine NHE-1 observes dans ce modele. Mais avant tout, administre a vie de maniere preventive, ce traitement permettait de diminuer les taux de creatine kinase et de prevenir la mort prematuree de maniere importante chez les hamsters UM-X7.1. Un traitement curatif par l'EMD 87580 pendant 85 jours administre a des hamsters UM-X7.1ages de 275 jours permettait de prevenir l'hypertrophie et la mort prematuree dans ce modele. Cependant, les traitements par le cilazapril n'avaient aucun effet notable sur les parametres cardiaques etudies ni sur la mort prematuree chez les hamsters UM-X7.1. Nos resultats indiquent que l'augmentation des taux de NHE-1 et les surcharges en [Na.sup.+] et en [Ca.sup.2+] qui en decoulent joueraient un role dans les processus pathologiques entrainant l'insuffisance cardiaque et la mort prematuree chez les hamsters UM-X7.1. En fait, l'administration d'inhibiteurs de la NHE-1 pourrait etre une avenue therapeutique prometteuse pour la prevention de la mort prematuree en cas de cardiomyopathie hereditaire. [Traduit par la Redaction] Mots-cles: cardiomyopathie, mort prematuree, insuffisance cardiaque, NHE-1, inhibiteur de la NHE-1 EMD 87580, IECA., Introduction An important characteristic of several types of hypertrophy and congestive heart failure (HF) is a disturbed intracellular calcium ([[[Ca.sup.2+]].sub.i]) handling in heart muscles (Jasmin and Proschek 1984, 1994; Bkaily [...]

The objective of this work was to verify whether, as in the case of the plasma membrane of human vascular smooth muscle cells (hVSMCs), cytosolic ET-1-induced increase of nuclear calcium is mediated via the activation of calcium influx through the steady-state R-type calcium channel. Pharmacological tools to identify the R-type calcium channels, as well as real 3-D confocal microscopy imaging techniques coupled to calcium fluorescent probes, were used to study the effect of cytosolic ET-1 on nuclear calcium in isolated nuclei of human hepatocytes and plasma membrane perforated hVSMCs. Our results showed that pre-treatment with pertussis toxin (PTX) or cholera toxin (CTX) prevented cytosolic ET-1 ([10.sup.-9] mol/L) from inducing a sustained increase in nuclear calcium. Furthermore, the L-type calcium channel blocker nifedipine did not prevent cytosolic ET-1 from inducing an increase in nuclear calcium, as opposed to the dual L- and R-type calcium channel blocker isradipine (PN200-110) (in the presence of nifedipine). In conclusion, the preventative effect with PTX and CTX, and the absence of an effect with nifedipine, as well as the blockade by isradipine on cytosolic ET-1-induced increase in nuclear calcium, suggest that this nuclear calcium influx in hVSMCs is due to activation of the steady-state R-type calcium channel. The sarcolemmal and nuclear membrane R-type calcium channels in hVSMCs are involved in ET-1 modulation of vascular tone in physiology and pathology. Key words: nucleus, calcium transport, nuclear membrane GPCR, nifedipine, isradipine, PTX, CTX. Resume : L'objectif de ce travail est de verifier si, comme c'est le cas de la membrane plasmique des cellules vasculaires musculaires lisses (CVML) chez l'humain, l'augmentation du calcium nucleaire induit par l'ET-1 cytosolique passe par l'activation de l'influx de calcium a travers les canaux calciques de type R a l'equilibre. Des outils pharmacologiques permettant d'identifier les canaux calciques de type R, de meme que des techniques d'imagerie par microscopie confocale en 3-D en temps reel couplees a des sondes fluorescentes de calcium, ont ete utilises afin d'etudier l'effet de l'ET-1 cytosolique sur le calcium nucleaire dans des noyaux isoles d'hepatocytes humains et des CVML dont la membrane plasmique est perforee. Les resultats des auteurs ont montre qu'un pretraitement avec l'anatoxine coquelucheuse (toxine pertussique, PTX) ou la toxine cholerique (CTX) prevenait l'induction d'une augmentation soutenue du calcium nucleaire par l'ET-1 cytosolique ([10.sup.-9] mol/L). De plus, la nifedipine, un bloqueur des canaux calciques de type L, n'empechait pas l'ET-1 d'induire une augmentation de calcium nucleaire, contrairement a l'isradipine (PN200-110), un double bloqueur des canaux calciques de type L et R (en presence de nifedipine). En conclusion, la prevention par la PTX et la CTX et l'absence d'effet de la nifedipine, de meme que le blocage par l'isradipine de l'augmentation du calcium nucleaire induite par l'ET-1 cytosolique, suggerent que cet influx de calcium nucleaire chez les CVML est cause par l'activation des canaux calciques de type R a l'equilibre. Les canaux calciques de type R de la membrane du sarcolemme et du noyau chez les CVML sont impliques dans la modulation physiologique ou pathologique du tonus vasculaire par l'ET-1. [Traduit par la Redaction] Mots-cles : noyau, transport de calcium, RCPG de la membrane nucleaire, nifedipine, isradipine, PTX, CTX., Introduction ET-1 has been reported to induce a sustained increase in intracellular [Ca.sup.2+] in vascular smooth muscle cells (VSMCs) (Danthuluri and Brock 1990; Bkaily et al. 1992, 1997, 2011, 2012; [...]

The results of our study show that whole-cell and nuclear levels of NADPH oxidase-1 (NOX1) are similar in human vascular endothelial cells (hVECs) and smooth muscle cells (hVSMCs), but lower in human endocardial endothelial cells (hEECs). NOX2 levels were higher in hVECs and lower in hVSMCs. NOX3 levels were the same in hVECs and hVSMCs, but lower in hEECs. NOX4 levels were similar in all of the cell types. NOX4 levels were higher in hVECs than in hVSMCs. NOX5 was also present throughout the 3 cell types, including their nuclei, in the following order: hEECs > hVSMCs > hVECs. The level of basal reactive oxygen species (ROS) was highest in hVECs and lowest in hVSMCs. However, the [Ca.sup.2+] level was highest in hVSMCs and lowest in hVECs. These findings suggest that all types of NOXs exist in hEECs, hVECs, and hVSMCs, although their density and distribution are cell-type dependent. The density of the different NOXs correlated with the ROS level, but not with the [Ca.sup.2+] level. In conclusion, NOXs, including NOX3, exist in cardiovascular cells and their nuclei. The nucleus is a major source of ROS generation. The nuclear NOXs may contribute to ROS and [Ca.sup.2+] homeostasis, which may affect cell remodeling, including the formation of nuclear T-tubules in vascular diseases and aging. Key words: NOX, [Ca.sup.2+], ROS, human endocardial endothelial cells, human vascular endothelial cells, human vascular smooth muscle cells, nuclear GPCR, nuclear [Ca.sup.2+], confocal microscopy, free radicals. Nos resultats ont montre que les niveaux de NADPH oxydase-1 (NOX1) dans la cellule entiere par rapport au noyau sont similaires chez les cellules endotheliales vasculaires (hCEV) et les cellules de muscle lisse vasculaires (hCMLV) humaines, mais plus faibles chez les cellules endotheliales endocardiques (hCEE) humaines. Le niveau de NOX2 etait plus eleve chez les hCEV et plus faible chez les hCMLV. Le niveau de NOX3 etait plus eleve chez les hCEV et plus faible chez les hCEE. Les niveaux de NOX4 etaient similaires chez tous les types de cellules. Ces niveaux etaient plus eleves chez les hCEV que chez les hCMLV. NOX5 etait aussi presente dans les trois types cellulaires incluant dans leur noyau selon l'ordre suivant : hCEE > hCMLV > hCEV. Le niveau basal d'ERO le plus eleve se trouvait chez les hCEVet le plus faible chez les hCMLV. Cependant, le niveau de [Ca.sup.2+] le plus eleve se trouvait chez les hCMLV et le plus faible chez les hCEV. Ces donnees suggerent que tous les types de NOX existent chez les hCEE, les hCEV et les hCMLV, toutefois, leur densite et leur distribution dependent du type cellulaire. La densite des differentes NOX correlait avec le niveau d'ERO mais pas avec le niveau de [Ca.sup.2+]. En conclusion, les NOX, incluant NOX3 existent chez les cellules cardiovasculaires et dans leurs noyaux. Le noyau est la principale source d'ERO. Les NOX nucleaires peuvent contribuer a l'homeostasie des ERO et du [Ca.sup.2+], ce qui peut affecter le remodelage cellulaire incluant la formation des tubules T nucleaires dans les maladies vasculaires et lors du vieillissement. [Traduit par la Redaction] Mots-cles : NOX, [Ca.sup.2+], ERO, cellules endotheliales endocardiques humaines, cellules endotheliales vasculaires humaines, cellules de muscle lisse vasculaires humaines, GPCR nucleaire, [Ca.sup.2+] nucleaire, microscopie confocale, radicaux libres., Introduction In the vasculature, superoxide and other reactive oxygen species (ROS) can be derived from several sources (Lassegue and Clempus 2003; Bedard and Krause 2007; Williams and Griendling 2007; Petry [...]

Work from our group and other laboratories showed that the nucleus could be considered as a cell within a cell. This is based on growing evidence of the presence and role of nuclear membrane G-protein coupled receptors and ionic transporters in the nuclear membranes of many cell types, including vascular endothelial cells, endocardial endothelial cells, vascular smooth muscle cells, cardiomyocytes, and hepatocytes. The nuclear membrane receptors were found to modulate the functioning of ionic transporters at the nuclear level, and thus contribute to regulation of nuclear ionic homeostasis. Nuclear membranes of the mentioned types of cells possess the same ionic transporters; however, the type of receptors is cell-type dependent. Regulation of cytosolic and nuclear ionic homeostasis was found to be dependent upon a tight crosstalk between receptors and ionic transporters of the plasma membranes and those of the nuclear membrane. This crosstalk seems to be the basis for excitation-contraction coupling, excitation-secretion coupling, and excitation--gene expression coupling. Further advancement in this field will certainly shed light on the role of nuclear membrane receptors and transporters in health and disease. This will in turn enable the successful design of a new class of drugs that specifically target such highly vital nuclear receptors and ionic transporters. Key words: nuclear membrane, GPCR, ET-1, Ang II, NPY. Des travaux realises par notre groupe et d'autres laboratoires ont montre que le noyau peut etre considere comme une cellule a l'interieur d'une cellule. Cette affirmation est basee sur une accumulation de preuves de la presence et du role des recepteurs couples aux proteines G et des transporteurs ioniques des membranes nucleaires chez plusieurs types de cellules, y compris les cellules vasculaires endotheliales, les cellules endotheliales endocardiques, les cellules vasculaires du muscle lisse, les cardiomyocytes et les hepatocytes. Les recepteurs de la membrane nucleaire modulent le fonctionnement des transporteurs ioniques au niveau nucleaire et contribuent ainsi a la regulation de l'homeostasie ionique nucleaire. Les membranes nucleaires des types cellulaires mentionnes precedemment possedent les memes transporteurs ioniques; cependant, le type de recepteurs est dependant du type cellulaire. La regulation de l'homeostasie ionique cytosolique et nucleaire s'est averee dependante d'une intercommunication etroite entre les recepteurs et les transporteurs ioniques de la membrane plasmique et ceux des membranes nucleaires. Cette intercommunication semble etre la base du couplage excitation- contraction, du couplage excitation-secretion et du couplage excitation-expression genique. D'autres avancees dans ce domaine feront certainement la lumiere sur le role des recepteurs et des transporteurs des membranes nucleaires dans la sante et la maladie. Par la suite, ceci permettra de concevoir une nouvelle classe de medicaments qui cibleront specifiquement ces recepteurs et ces transporteurs nucleaires si hautement essentiels. Mots-cles : membrane nucleaire, GPCR, ET-1, Ang II, NPY. [Traduit par la Redaction], Introduction Classically, drug development intended for the control of the cardiovascular system in general was limited to targeting the trans-sarcolemmal influx of ions and their pharmacological modulation through receptor stimulation. [...]

Using immunofluorescence and real 3-D confocal microscopy, our results showed the presence of ET-1, [ET.sub.A], and [ET.sub.B] receptors in isolated human aortic vascular endothelial cells (hVECs). The level of the peptide and its receptors was significantly higher in the nucleus (including the nuclear envelope membranes) than in the cytosol (including the cell membrane). Furthermore, using the Western blot technique we demonstrated the presence of both [ET.sub.A] and [ET.sub.B] receptors. Using intact and isolated human hVECs and the Fura-2 calcium ([Ca.sup.2+]) measurement technique, we showed that ET-1 induced a dose-dependent increase of total intracellular free [Ca.sup.2+], with an [EC.sub.50] of 1.3 x [10.sup.-10] mol/L. The specific [ET.sub.A] receptor antagonist ABT-627 ([10.sup.-7] mol/L), but not the [ET.sub.B] receptor antagonist A-192621 ([10.sup.-7] mol/L), prevented the ET-1 ([10.sup.-9] mol/L) induced increase of total intracellular [Ca.sup.2+]. In conclusion, these results clearly show that similar to [ET.sub.B] receptors, [ET.sub.A] receptors are also present in human aortic vascular endothelial cells and their levels are higher than [ET.sub.B] in the nucleus when compared with the cytosol. Furthermore, we suggest that [ET.sub.A], but not [ET.sub.B], receptors mediate the effect of ET-1 on total intracellular [Ca.sup.2+] of human aortic vascular endothelial cells. Key words: ET-1 receptors, ET-1 receptor antagonists, [ET.sub.A] receptor, human vascular endothelial cells, calcium, 3-D confocal microscopy. Dans la presente etude, nous avons montre la presence de l'ET-1 et des recepteurs [ET.sub.A] et [ET.sub.B] dans les cellules endotheliales vasculaires aortiques humaines (CEVh) en utilisant l'immunofluorescence et la microscopie confocale 3-D en temps reel. Les taux du peptide et de ses recepteurs ont ete significativement plus eleves dans le noyau (les membranes de l'enveloppe nucleaire comprises) que dans le cytosol (la membrane cellulaire comprise). Nous avons demontre la presence des recepteurs [ET.sub.A] et [ET.sub.B] en utilisant le transfert western. Dans les CEVh humaines intactes et isolees, la mesure du calcium au fura-2 a permis de montrer que l'ET-1 a induit une augmentation dose-dependante du [Ca.sup.2+] libre intracellulaire, avec une [CE.sub.50] de 1,3 x10-10 mol/L. L'antagoniste specifique du recepteur [ET.sub.A] , ABT-627 ([10.sup.-7] mol/L) a prevenu cette augmentation induite par l'ET-1 ([10.sup.-9] mol/L), ce que n'a pu faire l'antagoniste du recepteur [ET.sub.B] , A-192621 ([10.sup.-7] mol/L). Ces resultats montrent clairement la presence des recepteurs [ET.sub.A] et [ET.sub.B] sur les cellules endotheliales vasculaires aortiques humaines, et que le taux des recepteurs [ET.sub.A] est plus eleve que celui des recepteurs [ET.sub.B] dans le noyau que dans le cytosol. Ces resultats donnent aussi a penser que seuls les recepteurs [ET.sub.A] vehiculent l'effet de l'ET-1 sur le [Ca.sup.2+] intracellulaire total des cellules endotheliales vasculaires aortiques humaines. Mots-cles: recepteurs de l'ET-1, antagonistes de recepteur de l'ET-1, recepteur [ET.sub.A] , cellules endotheliales vasculaires humaines, calcium, microscopie confocale 3-D. [Traduit par la Redaction], Introduction Several studies have demonstrated that the [ET.sub.B] receptor for ET-1 is expressed in vascular endothelial cells (VECs) (Takayanagi et al. 1991; Fujitani et al. 1992; Ghoneim et al. 1993; [...]