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En Colombia la industria avícola ha mostrado un crecimiento constante en los últimos años, sin embargo, conforme con este aumento el uso de antibióticos para mantener la salud animal también ha ido en incremento ocasionando la aparición de cepas resistentes tales como Escherichia coli, Salmonella y Campylobacter generando un problema de salud pública. Múltiples estudios han demostrado que el uso de bacterias ácido lácticas (BAL) con capacidad antimicrobiana puede ser empleadas en alimentación animal, disminuyendo el uso de antibióticos. Para el uso industrial de BAL es necesario encontrar medios de cultivos económicos y adecuados para la recuperación y crecimiento de las cepas. Por lo cual, durante el presente estudio se buscará la concentración adecuada de los sustratos leche de soya, suero de leche, azúcar y salvado de trigo que permitan el crecimiento de BAL aisladas de intestino de gallinas para su posterior uso en alimentación animal. Para esto, se realizaron cinéticas de fermentación a 24 h, tomando la viabilidad de las BAL cada 6 h durante 24 h. Se encontró que la mejor concentración de los sustratos donde se alcanzó una viabilidad similar al medio de cultivo comercial fue 15,76 g/L azúcar, 14,24 g/L suero de leche y 10,00 g/L de leche de soya, lo cual muestra que el uso de sustratos alternativos para la elaboración de medios de cultivo puede ser factible en la producción de BAL., In Colombia, the poultry industry has shown a constant growth in recent years, however, in line with this increase, the use of antibiotics to maintain animal health has also been increasing, causing the appearance of resistant strains such as Escherichia coli, Salmonella and Campylobacter, generating a public health problem. Multiple studies have shown that the use of probiotic bacteria (LAB) with antimicrobial capacity can be used in animal feed, reducing the use of antibiotics. For the industrial use of LAB, it is necessary to find economical and adequate culture media for the recovery and growth of the strains. For this reason, during the present study, the adequate concentration of the substrate soy milk, whey, sugar, and wheat bran will be sought to allow the growth of LAB isolated from chicken intestine for their subsequent use in animal feed. For this purpose, 24 h fermentation kinetics were performed, taking the viability of LAB every 6 h during 24 h. It was found that the best substrate concentration where viability like the commercial culture medium was achieved was 15.76 g/L sugar, 14.24 g/L whey and 10.00 g/L soy milk, which shows that the use of alternative substrates for the elaboration of culture media can be feasible in the production of LAB.