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Targeting non-apoptotic modalities might be therapeutically promising in diffuse large B cell lymphoma (DLBCL) patients with compromised apoptotic pathways. Thymoquinone (TQ) has been reported to promote apoptosis in cancer cells, but little is known about its effect on non-apop-totic pathways. This work investigates TQ selectivity against DLBCL cell lines and the cell death mechanisms. TQ reduces cell viability and kills cell lines with minimal toxicity on normal hematological cells. Mechanistically, TQ promotes the mitochondrial caspase pathway and increases genotoxicity. However, insensitivity of most cell lines to caspase inhibition by z-VAD-fmk (ben-zyloxycarbonyl-Val-Ala-Asp-fluoromethyl ketone) pointed to a critical role of non-apoptotic signaling. In cells dying through non-apoptotic death, TQ increases endoplasmic reticulum (ER) stress markers and substantially increases cytosolic calcium ([Ca2+]c) through ER calcium depletion and activation of store-operated calcium entry (SOCE). Chelation of [Ca2+]c, but not SOCE inhibitors, reduces TQ-induced non-apoptotic cell death, highlighting the critical role of calcium in a non-apoptotic effect of TQ. Investigations showed that TQ-induced [Ca2+]c signaling is primarily initiated by necroptosis upstream to SOCE, and inhibition necroptosis by necrostatin-1 alone or with z-VAD-fmk blocks the cell death. Finally, TQ exhibits an improved selectivity profile over standard chemotherapy agents, suggesting a therapeutic relevance of the pro-necroptotic effect of TQ as a fail-safe mechanism for DLBCL therapies targeting apoptosis., SCOPUS: ar.j, info:eu-repo/semantics/published

Regulatory T cells (Tregs) are central for maintaining immune balance and their dysfunction drives the expansion of critical immunologic disorders. During the past decade, microRNAs (miRNAs) have emerged as potent regulators of gene expression among which immune-related genes and their immunomodulatory properties have been associated with different immune-based diseases. The miRNA signature of human peripheral blood (PB) CD8+ CD25 + CD127 low Tregs has not been described yet. We thus identified, using TaqMan low-density array (TLDA) technique followed by individual quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR) confirmation, 14 miRNAs, among which 12 were downregulated whereas two were upregulated in CD8 + CD25 + CD127 low Tregs in comparison to CD8 + CD25 - T cells. In the next step, microRNA Data Integration Portal (mirDIP) was used to identify potential miRNA target sites in the 3'-untranslated region (3'-UTR) of key Treg cell-immunomodulatory genes with a special focus on interleukin 10 (IL-10) and transforming growth factor β (TGF-β). Having identified potential miR target sites in the 3'-UTR of IL-10 (miR-27b-3p and miR-340-5p) and TGF-β (miR-330-3p), we showed through transfection and transduction assays that the overexpression of two underexpressed miRNAs, miR-27b-3p and miR-340-5p, downregulated IL-10 expression upon targeting its 3'-UTR. Similarly, overexpression of miR-330-3p negatively regulated TGF-β expression. These results highlighted an important impact of the CD8 + Treg mirnome on the expression of genes with significant implication on immunosuppression. These observations could help in better understanding the mechanism(s) orchestrating Treg immunosuppressive function toward unraveling new targets for treating autoimmune pathologies and cancer., SCOPUS: ar.j, info:eu-repo/semantics/published

info:eu-repo/semantics/published

Une meilleure compréhension des mécanismes moléculaires impliqués dans la malignité des lymphome B diffus à grande cellules (LBDGC) et dans leur résistance aux traitements devraient permettre de développer de nouvelles opportunités thérapeutiques innovantes et d’envisager dans un futur proche de nouveaux agents de thérapie ciblée. Jusqu’à ce jour, le traitement standard se solde encore par un échec chez un nombre significatif de patients. Les rechutes post traitement et les cas réfractaires restent le défi majeur pour améliorer le taux de survie global. Plusieurs méchanismes ont été décrits comme responsables de ces échecs, dont, pour une grande part, le dysfonctionnement de la machinerie apoptotique. Dès lors, des stratégies thérapeutiques activant des voies non-apoptotiques plus sélectivement dans les cellules malignes sont absolument nécessaires. La Thymoquinone (TQ), un principe actif isolé de la plante médicinale Nigell a Sativa, a démontré des propiétés anticancéreuses in vitro ainsi que dans des modèles animaux, en agissant via plusieurs mécanismes incluant principalement des effets antiprolifératifs et pro-apoptotiques. Malgré les nombreuses investigations, les mécanismes de destruction cellulaire sous-jacents à l’effet anti-cancéreux de la TQ restent ambigus et peu élucidés, notament sur les voies de mort cellulaire non-apoptotiques. L’objectif de notre travail vise l’évaluation de la sélectivité de la TQ vis-à-vis des lignées cellulaires de lymphomes B diffus à grandes cellules (LBDGC), et l’élucidation des méchanismes critiques responsables de la destruction cellulaire. Dans une première partie, nous avons démontré la capacité de la TQ à produire un effet cytotoxique plus prononcé dans des lignées cellulaires lymphomateuses (LBDGC) par rapport aux cellules normales provenant de donneurs sains. Le profil de sélectivité de la TQ s’est avéré intéressant par rapport aux agents de chimiothérapie conventionnelle dans le LBDGC. A l’échelle moléculaire, on a mis, Doctorat en Sciences biomédicales et pharmaceutiques (Médecine), info:eu-repo/semantics/nonPublished