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The increasing pollution of surface waters, caused groundwater to be further explored becoming a new source of supply worldwide. Manganese is naturally present in groundwater and even at low concentrations can cause a number of problems in water quality, making its removal essential. The presence of manganese in water is a concern for both population and industry, quality water is a prerequisite of great importance for any safe food production. The incidence of manganese in water is directly linked to oxidation and corrosion of pipes, as well as being primarily responsible for adding odor, metallic taste and blackened coloring to water in distribution and supply systems. Manganese (Mn) is an essential microelement, involved in bones and cartilage mineralization, particularly in children in the growth phase. However, high concentrations are toxic to humans and animals, may cause neurotoxic effects, thus, its removal before consumption is essential. In this context, this work objective was to find alternative methods for removing manganese of consumption and food production water. Initially, the moringa pods were collected in the city of Aracajú- SE. They were then washed for removing dirt, and dried in an oven at 60ºC for 24 hours. After drying, the material was subjected to particle size patterning of 0,32 mm and this material then received the name of non-treated pods (VAI). The agent treatment NaOH 0,1mmol (Synth, 97% purity) was evaluated as a basic agent and HCl 0,1 mmol L-1 (Nuclear 36,5% purity) as an acid agent for its ability to improve the Mn sorption by biomass. The pretreatment was carried out following the methodology described by Kumar and Gaur (2011), where 50 mg of untreated biosorbent was added to 50 mL of treating agent and stirred at 80 rpm for 30 min at 25°C. Subsequently the biomass was centrifuged (300 rpm, 15 min), the supernatant discarded and the pellet washed with Milli-Q water until neutral pH, then treated biomass was dried in an oven at 60 °C to constant weight. After drying the material was subjected to particle size standardization process, to obtain particles with a size of 0,32 mm. The pretreated acid pod was named VTA pod, the basic pre-treated pod was named VTB, all were evaluated for their manganese removal ability from tested water. The biosorbents were characterized by EDS, SEM and FTIR. The experimental data was kinetically analyzed and it was found that the biosorption by nine different adsorbents followed pseudo-second order kinetics, with a residence time of 30 min for all the pods. The equilibrium data was analyzed using the Langmuir and Freundlich isotherm model, and the more appropriate model for all adsorbents was Freundlich, confirming the heterogeneous nature of the biosorbents. The thermodynamic properties were also evaluated and confirmed the spontaneous nature of reaction, as the biosorption process by pods viability. This study revealed that the basic treatment promoted an improvement in Mn (II) removal capacity for all the adsorbents. The best removal results were obtained using a pH 6,0, 0,50 g of adsorbent in a contact time of 60 minutes. The most efficient biosorbent for the manganese removal was the basic treated pod, obtaining 94% removal, followed by the integral pod (VAI) with 82% and last, the acid pod (VTA) with 61% of removal. The usage of Moringa oleífera as adsorbent is an attractive option for the treatment of Mn polluted water, since beyond being a natural product of easy obtainment it is a renewable and biodegradable material. The biosorption can be adopted as a pre-treatment for groundwater with industrial purpose, helping not only with health maintenance but also with the improvement of equipment lifespan. A crescente poluição das águas de superfície, fez com que as águas subterrâneas fossem mais exploradas se tornando uma nova fonte de abastecimento em todo o mundo. O manganês está naturalmente presente em águas subterrâneas e mesmo em baixas concentrações pode ocasionar uma série de problemas na qualidade da água, tornando sua remoção essencial. A presença de manganês na água é uma preocupação tanto para a população como para a indústria, água de qualidade é um pré-requisito de grande importância para a produção de qualquer gênero alimentício seguro. A incidência de manganês na água está diretamente ligada a oxidação e corrosão de tubulações, além de ser a principal responsável por conferir, odor, sabor metálico e coloração enegrecida para água em sistemas de distribuição e abastecimento. O manganês (Mn) é um importante microelemento essencial, está envolvido na mineralização dos ossos e cartilagens, especialmente nas crianças em fase de crescimento. Contudo, altas concentrações são toxicas para os seres humanos e animais, podendo causar efeitos neurotóxicos, sendo assim, essencial sua remoção antes do consumo. Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi encontrar métodos alternativos para a remoção de manganês de água destinada ao consumo e produção de alimentos. Inicialmente, as vagens de moringa foram coletadas na cidade de Aracajú- SE . Em seguida, foram lavadas para remoção de sujidades e secas em estuda a 60ºC por 24 horas. Após a secagem, o material foi submetido a padronização granulométrica de 0,32 mm e este material então recebeu o nome de vagens sem tratamento (VAI). Foram avaliados os agentes de tratamentos NaOH 0,1mmol (Synth, 97% de pureza) como agente básico e HCl 0,1 mmol L-1 (Nuclear 36,5% de pureza) como agente ácido, por sua capacidade em melhorar a sorção de Mn pela biomassa. O pré-tratamento foi realizado seguindo a metodologia descrita por Kumar e Gaur (2011), onde 50 mg do biossorvente sem tratamento foi adicionado em 50 mL de agente de tratamento e agitado a 80 rpm durante 30 min a 25 °C. Posteriormente a biomassa foi centrifugada (300 rpm, 15 min), o sobrenadante descartado e o pellet lavado com água Milli-Q até a neutralização do pH, em seguida, a biomassa tratada foi seca em estufa a 60 °C até peso constante. Após a secagem o material foi submetido ao processo de padronização granulométrica, a fim de se obter partículas com um tamanho de 0,32 mm. A vagem pré-tratada ácida recebeu o nome de vagem de VTA, a vagem pré-tratada básica recebeu o nome de VTB, onde todos foram avaliados quanto a sua capacidade para remoção de manganês da água testada. Os biossorventes foram caracterizados por EDS, MEV e FTIR. Os dados experimentais foram analisados cineticamente e descobriu-se que a biossorção pelos nove diferentes adsorventes seguiu a cinética de pseudo-segunda ordem, com tempo de contato de 30 min para todas as vagens. Os dados de equilíbrio foram analisados usando os modelos isotérmicos de Langmuir e Freundlich, onde o modelo foi mais adequado para todos os adsorventes foi o de Freundlich, confirmando a natureza heterogênea dos biossorventes. As propriedades termodinâmicas também foram avaliadas e confirmaram a natureza espontânea da reação assim como a viabilidade do processo de biossorção a partir das vagens. O presente estudo relevou que o tratamento básico promoveu uma melhora na capacidade de remoção de Mn (II) para todos os adsorventes. As melhores remoções foram obtidas utilizando-se pH 6,0, 0,50 g de adsorvente e em tempo de contato de 60 minutos. O biossorvente mais eficiente para a remoção de manganês foi a vagem tratada básica com 94% de remoção, seguida da vagem integral (VAI) com 82% e por fim da vagem ácida (VTA) com remoção de 61%. A utilização da Moringa oleifera como adsorvente é uma opção atraente para o tratamento de águas contaminadas com Mn, já que além de ser um produto natural de fácil obtenção ela é um material renovável e biodegradável. A biossorção pode ser adotada como um pré-tratamento das águas subterrâneas destinadas a indústria, colaborando não apenas com a manutenção da saúde dos consumidores, mas também com o aumento da vida útil dos equipamentos. [36 f.]

Basidiomycetes and Ascomycetes play a crucial role in the balance of ecosystems. They are the major decomposers of lignocellulosic material in several ecosystems and play an essential role in the cycling of carbon and other nutrients. There are about 10,000 species of white rot fungi, with varying capacities to degrade lignin, cellulose and hemicellulose. However, only a few dozen have been properly studied. Most commonly studied species of white rot fungi are subdivided into six families: Phanerochaetaceae (Phanerochaete chrysosporium), Poliporaceae (Trametes versicolor and Pycnoporus sanguineus), Marasmiaceae (Lentinula edodes), Pleurotaceae (oyster mushrooms such as Pleurotus ostreatus and Pleurotus pulmonarius) Hymenochaetaceae (Inonotus hispidus and Phellinus igniarius) Ganodermataceae (Ganoderma lucidum and Ganoderma applanatum) and Meruliaceae (Bjerkandera adusta, Irpex iacteus and Phlebia radiate). The objective of the first article was to purify and characterize the enzyme manganese peroxidase (MnP) of Pleurotus pulmonarius and evaluate its capability to decolorize synthetic dyes. P. pulmonarius was cultured for 14 days under solid state conditions using pineapple wastes as substrate. Under this condition, MnP was the main ligninolytic enzyme found in the culture filtrates. The enzyme was purified to apparent electrophoretic homogeneity through acetone precipitation and gel filtration using Sephadex G-100 column. The main results were: MnP was purified 12.1-folds with a yield of 28.4% and a specific activity of 135.52 U/mg proteins. The 42 KDa-monomeric proteins were active over a large range of pH (4.0 - 6.0) and at a temperature of 50°C. The enzyme was stable at temperatures up to 40°C. At -20°C the enzyme was stable for at least 6 months. The KM values for Mn+2 and H2O2 at pH 4.5 and 40°C were 19.2 and 16,8 µM, respectively. The enzyme was strictly dependent of Mn+2 for oxidizing phenolic and non-phenolic compounds. It showed high activity and stability in the presence of organic solvents such as acetone, ethanol, acetonitrile and isopropanol, and was able to decolorize the anthraquinonic dye Remazol Brilliant Blue R and the azo dye Congo red in the presence of 1M Na2SO4 and NaCl. The properties presented by P. pulmonarius manganese peroxidase certainly make this enzyme a good agent for textile dye effluents treatment. The objectives of the second article was to evaluate the antimicrobial activities of mycelial extracts of Pleurotus pulmonarius obtained in submerged cultures using glucose, starch and cassava bagasse as carbon source. The highest antimicrobial activities were obtained after 6 days of cultivation using glucose and starch as carbon source. Despite the efforts, it was not possible to identify how molecules are responsible for antimicrobial activity of P. pulmonarius mycelia extracts. Basidiomicetos e Ascomicetos desempenham importante papéis no equilíbrio ambiental. Eles são os maiores decompositores do material lignocelulósico em vários ecossistemas e têm grande importância no ciclo do carbono e outros nutrientes. Existem mais de 10.000 espécies de fungos da podridão branca de madeira, com variadas capacidades em degradar a lignina, celulose e hemicelulose. Entretanto somente algumas dezenas são mais propriamente estudados. Os fungos da podridão branca mais estudados pertencem a seis famílias: Phanerochaetaceae (Phanerochaete chrysosporium), Poliporaceae (Trametes versicolor e Pycnoporus sanguineus), Marasmiaceae (Lentinula edodes), Pleurotaceae (cogumelos ostra tais como Pleurotus ostreatus e Pleurotus pulmonarius), Hymenochaetaceae (Inonotus hispidus e Phellinus igniarius), Ganodermataceae (Ganoderma lucidum e Ganoderma applanatum) e Meruliaceae (Bjerkandera adusta, Irpex iacteus e Phlebia radiate). O objetivo do primeiro artigo foi a purificação e a caracterização da enzima peroxidase dependente de manganês (MnP) de Pleurotus pulmonarius bem como a avaliação da sua capacidade em descolorir corantes sintéticos. P. pulmonarius foi cultivado por 14 dias sob condições em estado sólido utilizando resíduos de abacaxi como substrato. Nestas condições, MnP foi a principal enzima ligninolítica produzida pelo fungo. A enzima foi purificada até aparente homogeneidade eletroforética através de precipitação com acetona e gel filtração utilizando coluna de Sephadex G-100. Os principais resultados foram: a MnP foi purificada 12,1 vezes, com um rendimento de 28,4% e uma atividade específica de 135,52 U/mg proteína. A proteína monomérica de 42KDa apresentou maior atividade em pH de 4,0 a 6,0 e temperatura de 50°C. A enzima foi estável a temperatura de até 40°C. A -20°C a enzima foi estável por pelo menos 6 meses. Os valores de KM para Mn+2 e H2O2 a pH 4,5 e 40°C foram A enzima foi totalmente dependente de Mn+2 para oxidar compostos fenólicos e não fenólicos. A enzima mostrou alta atividade e estabilidade na presença de solventes orgânicos tais como acetona, etanol, isopropanol e acetonitrila e foi capaz de descolorir o corante antraquinonico Remazol Brilliant Blue R e o corante azo Vermelho do Congo na presença de 1M Na2SO4 e NaCl. As propriedades apresentadas pela MnP de P. pulmonarius tornam esta enzima um bom agente para o tratamento de efluentes têxteis. Os objetivos do segundo trabalho foi avaliar a atividade antimicrobiana de extratos miceliais de Pleurotus pulmonarius obtidos em cultivos submersos utilizando glicose, amido e bagaço de mandioca como substratos. As maiores atividades antimicrobianas foram obtidas nos extratos miceliais de 6 dias de cultivo utilizando glicose e amido como substrato. Apesar dos esforços, não foi possível identificar quais moléculas são responsáveis pela atividade antimicrobiana nos extratos miceliais de P. pulmonarius. 33 f

Homeopathy is a complementary and alternative medicine system and has user-friendly applications and extensive clinical literature. Homeopathic products are manufactured by dynamization, which consists of sequential dilutions by stirrings in small volumes and has applications to both human and animal diets. Homeopatila 100® is a homeopathic complex designed to decrease stress in production and guarantee the well-being of Nile tilapia (Oreochromis niloticus). Tilapia is the second group of fish most produced worldwide and marketing grows an average grow 10% per year. The world aquiculture production forecast for 2030 ranges among 79 and 110 million tons of fish, including significant growth in the production of Nile tilapia. Hence, it is desirable to develop products that enable the use of processing waste for human consumption. The filleting residue has 60-70% of the total weight of tilapia. The use of mechanically separated meat (MSM) enables the use of 14% of the fish total weight. The nuggets are restructured, breaded and prepared from the flesh disintegration by mechanical methods. The manufacture of these products with MSM uses the processing residues, avoids health and environmental problems and adds commercial value to the final product. This study aimed to evaluate the physical and chemical characteristics and microbiological quality of fillets, nuggets and MSM and to analyse sensory the fillets and nuggets of tilapia that consumed Homeopatila 100®. With the Nile tilapia we evaluated two diets: one control with 40 mL of a hydro-alcohol solution 30% v/v per kg of diet and the other Homeopatila 100® with 40 mL / kg of the homeopathic product. The tilapia had average weight of 101.12 g (±17.73) and 99.73 g (±19.85) and total average length of 18.52 cm (± 6.00) and 18.05 cm (±1.11), respectively, 160 fish were distributed in 8 water tanks, totaling 20 animals in each of the boxes with individual capacity for 600L of water. Physical and chemical parameters of water and the performance of the fish were evaluated (they were killed after 84 days of treatment). At the end of the experiment, all fish were caught by nets, sensitized and killed by breaking the spine and obtained the fillets. The fillets were immediately vacuum-conditioned in smooth transparent nylon bags and frozen at -18 °C until nugget preparation. The MSM was retrieved and stored in polyethylene bags, separately each of the treatments, frozen at -86 °C and stored at -18 °C. During the experiment the physical and chemical parameters of the water and the fish performance were evaluated. Were realized physical, chemical and microbiological analyses of fillet and MSM and sensory analyses of fillet were performed. The nuggets were performed on three formulations with 25, 50 and 75% of MSM for each of the treatments. The stability of formulations were evaluated through analysis of Thiobarbituric Acid Reactive Substances (TBARS) (on days 0, 30, 60, 90 and 120). Microbiological analyzes were conducted to coliforms were evaluated at 45 °C, Escherichia coli, Staphylococcus coagulase, Bacillus cereus, counting viable aerobic mesophilic and psychrotrophic and Salmonella sp., and acceptance of attributes color, aroma, tenderness, taste and overall impression were evaluated, using 9-point hedonic scale and also Buying Intention, test the 5-point ranging. There was no significant difference (p>0,05) between the physical and chemical characteristics of water. Fish fed diet containing the homeopathic product enhanced tilapia production Greater weight gain (207.16 g), fillets with softer tissue (6.08 N ± 0.04), higher Aw (0.990 ± 0.001), less total amounts of psychotropic aerobic bacteria (2.12 ± 0.01 Log10 UFC/g) and low component value of color L* (luminosity) (65.78 ± 0.37) and b* (yellow/blue) (1.50 ± 0.01) for MSM and of high value of a* (red/green) for MSM (13.54 ± 0.11) and fillets (4.93 ± 0.03). The sensory acceptability of the filet was 80.11% indicating that it exposed for sale have good acceptance by the market. The nuggets with 75% MSM revealed a higher pH (5.89 ± 0.02), the tissue was softer (1.29N ± 0.04), and they had a higher lipid value (15.96% ± 0.05). With 50% and 75%, the color (L*) was darker (60.76% ± 0.91 and 60.03% ± 0.78), and there were lower protein amounts (15.54% ± 0.31 and 13.55% ± 0.35). Nuggets had an acceptable value of lipid oxidation (0.672 ± 0.007 mg MDA/kg). The results of fillet, MSN and nugget for the microbiological analyses demonstrated that the product met the requirements of legislation. The results of the colors of fillet and MSM these relate to the results fish stressed prior to slaughter. The results indicated that the use of Homeopatila 100® in the diet of the Nile tilapia did not change the muscle quality, ensuring consumer acceptability. Nuggets with 25% and 50% MSM were deemed acceptable. There was no difference (p>0.05) between the control treatment group and the Homeopatila 100® group for the analysis undertaken with the Nugget. Therefore, the results indicated that the use of Homeopatila 100® in the diet of the Nile tilapia did not change the physical, chemical, microbiological and sensory quality characteristics of the nuggets Homeopatia é um sistema de medicina complementar e alternativa que tem aplicações de fácil utilização e extensa literatura clínica. Os produtos homeopáticos são fabricados por dinamização, que consiste em diluições sequenciais por agitação em pequenos volumes e tem aplicações nas dietas humanas e animais. A Homeopatila 100® é um produto homeopático elaborado com o propósito de diminuir o estresse na produção e garantir o bem estar de tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus). A tilápia é o segundo grupo de peixes mais produzido em todo o mundo e sua comercialização cresce, em média, 10% ao ano. A previsão de produção na aquicultura mundial para 2030 situa-se entre 79 e 110 milhões de toneladas de peixe, incluindo um crescimento significativo na produção de tilápia do Nilo. Com isso, é desejável desenvolver produtos que permitam a utilização de resíduos de processamento para consumo humano. O resíduo da filetagem tem 60-70% do peso total de tilápia. A utilização de carne mecanicamente separada (CMS) permite o aproveitamento de 14% do peso total dos peixes. Os nuggets são reestruturados, preparados à milanesa a partir da desintegração da carne por métodos mecânicos. A fabricação destes produtos com CMS utiliza os resíduos de processamento, evita problemas ambientais e agrega valor comercial ao produto final. O objetivo deste estudo foi avaliar as características físicas, químicas e qualidade microbiológica dos filés, nuggets e CMS e analisar sensorialmente os filés e nuggets produzidos a partir de tilápia tratadas com Homeopatila 100®. Com as tilápias do Nilo foram avaliadas duas dietas: uma controle com 40 mL de uma solução hidro-álcool (álcool 30% v/v) por kg de ração e outra Homeopatila 100® com 40 mL/kg do produto homeopático. As tilápias tinham peso médio inicial de 101,12 g (± 17,73) e 99,73 g (± 19,85) e comprimento total médio de 18,52 centímetros (± 6,00) e 18,05 centímetros (± 1,11), respectivamente. Foram distribuídos 160 peixes em oito tanques de água, totalizando 20 animais em cada uma das caixas com capacidade individual de 600L de água. Avaliou-se os parâmetros físicos e químicos da água e do desempenho dos peixes (eutanasiados após 84 dias de tratamento). No final do experimento, todos os peixes foram capturados por redes, sensibilizados e mortos por rompimento da coluna vertebral e filetados. Os filés foram imediatamente acondicionados em sacos de nylon, lisos, transparentes e congelados a -18 °C, até a preparação do nugget. A CMS de cada um dos tratamentos foi elaborada e preparada separadamente, acondicionada em sacos de polietileno, congelada a -86 °C e armazenada a -18 °C. Durante o experimento, foram avaliados os parâmetros físicos e químicos da água e do desempenho dos peixes. Foram realizadas análises física, química, e microbiológicas de filé e CMS e análises sensoriais de filé. Foram preparadas três formulações com 25, 50 e 75% de CMS para cada um dos tratamentos. As formulações foram avaliadas quanto à estabilidade através da análise de Thiobarbituric Acid Reactive Substances (TBARS) (nos 0, 30, 60, 90 e 120 dias). Foram conduzidas análises microbiológicas para coliformes a 45 °C, Escherichia coli, Staphylococcus coagulase positiva, Bacillus cereus, contagem de aeróbios mesófilos viáveis e psicrotróficos e Salmonella sp. A aceitação dos atributos cor, aroma, maciez, sabor e impressão global, foi avaliada utilizando-se a escala hedônica de 9 pontos e a intenção de compra, em escala de 5 pontos. Não houve diferença significativa (p>0,05) entre as características físicas e químicas da água. Os peixes alimentados com dietas contendo o produto homeopático apresentaram maior ganho de peso (207,16 g), filés mais macios (6,08 N ± 0,04), menor Aw (0,990 ± 0,001), menor contagem de bactérias aeróbias psicrotróficas (2,12 ± 0,01 Log10 UFC/g) e menor componente de luminosidade L* (65,78 ± 0,37) e b* (amarelo / azul) (1,50 ± 0,01) para CMS e maior valor de a* (vermelho/verde) para CMS (13,54 ± 0,11) e filés (4,93 ± 0,03). A aceitabilidade sensorial dos filés foi de 80,11% indicando que se expostos à venda teriam boa aceitabilidade pelo mercado consumidor. Os nuggets com 75% CMS apresentaram um pH mais elevado (5,89 ± 0,02), menor textura (1,29N ± 0,04), e valor mais elevado de lipídios (15,96% ± 0,05). Com 50% e 75%, observou-se a coloração (L*) mais escura (60,76% ± 0,91 e 60,03 ± 0,78%), e quantidade de proteína mais baixa (15,54% ± 0,31 e 13,55 ± 0,35%). Os nuggets apresentaram um valor aceitável de oxidação lipídica (0,672 ± 0,007 mg MDA/kg). Os resultados das análises microbiológicas do filé, CMS e nuggets demonstraram que o produto atendeu às exigências da legislação. Os resultados das cores de filé e CMS relacionam-se com os resultados de peixes estressados antes do abate. Os resultados indicaram que a utilização de Homeopatila 100® na dieta da tilápia não alterou a qualidade muscular, garantindo a aceitabilidade do consumidor. Nuggets com 25% e 50% de CMS foram satisfatoriamente aceitos. Não houve diferença (p>0,05) entre o controle e o tratamento Homeopatila 100® para as análises realizadas com o nugget. Portanto, indicaram que o uso de Homeopatila 100® na dieta da tilápia do Nilo não alterou as características de qualidade físicas, químicas, microbiológicas e sensoriais dos filés e CMS. 58 f

Hydro-ethanol extracts of the leaves of Moringa oleifera were evaluated for antioxidant capacity so that their most efficient use as a natural preservative could be detected. The extracts of Moringa oleifera leaves were evaluated by quantification methods of total phenolic compounds and evaluation of EC50 by the scavenging capacity of DPPH radical. Analyses and results were outlined and optimized by the statistical program Design Expert 7.1. The extract with the highest antioxidant activity rate (EC50 = 12.43%) was applied to chicken mortadella formulations with 0.25%, 0.50% and 1.00% extract concentrations; control consisted of a sample with 0.25% sodium erythorbate. The different mortadella formulations were evaluated by centesimal, microbiological, sensory and lipid oxidation analyses for 120 days. There was a lower lipid oxidation rate in the formulation with 0.25% extract. Results showed that the extract could inhibit lipid oxidation. 46 f

In Brazil, the hand hygiene of health professionals is considered adequate when the hands are rubbed in all their faces, spaces between the fingers, joints, nails, tips of the fingers and wrists, performing the technique in seven steps. One controversial aspect is whether the friction of the wrists (i.e., step seven) is effective and necessary, since in many countries the recommended technique for hand hygiene is based on the Ayliffe's six-steps classic technique, which does not include the hygiene of wrists. To investigate the efficacy of hand hygiene technique performed in seven steps, for the removal of transient microbiota from wrists. The study was conducted using three 6x6 Latin squares utilizing the following test microorganisms: Escherichia coli, Staphylococcus aureus and Candida albicans. The treatments with the products (ethyl alcohol 70%, alcohol gel, povidone-iodine, chlorhexidine and plain liquid soap) and their respective controls (pre-treatment) were made into three 6x5 blocks (i.e., 6 volunteers versus 5 products, using a block for each test microorganism). The wrists were contaminated with 0.02 mL of the test microorganism and after drying, hand hygiene was performed using 3 mL of each product. The test microorganism was recovered from the wrists by rubbing the skin with the aid of a glass rod and saline solution containing neutralizers. The removal rate was determined by the logarithmic reduction factor (i.e., the mean log10 of the pre-treatment values minus the mean log10 of the post-treatment values). The possibility of contamination of the fingers with the microbiota of the wrists during hand hygiene (step seven) was investigated by the streak technique of the fingers on the surface of nutrient agar. The results were estimated by analysis of variance. A value of P < 0.05 was considered significant. A comparison of the efficacy of hand antisepsis with 3 mL and 5 mL of ethyl alcohol 70% (w/w) for removing Staphylococcus aureus from artificially contaminated wrists was also included in the study, performing 20 tests. The average removal rates were compared using the Student's t test. A value of P < 0.05 was considered significant. . On average, 6.45 (E. coli), 6.44 (S. aureus) and 5.89 (C. albicans) log10 colony forming units were recovered from control volunteers' wrists. Povidone-iodine and alcoholic preparations showed greater efficacy than plain soap and chlorhexidine for removing the test microorganisms from wrists. Contamination of the fingers of 3 volunteers treated with alcoholic preparations and antiseptic agents was observed during the assays of S. aureus block. The average removal rate of S. aureus from wrists for volunteers treated with 3 mL and 5 mL, expressed by the logarithmic reduction factor, was 4.85 ± 0.94 and 5.51 ± 0.84, respectively, and these differences were significant (P = 0.02344). The contamination of the fingers occurred in 65% (13/20) of the subjects treated with 3 mL of 70% ethyl alcohol and in none of those treated with 5 mL. The results suggest that the efficacy of rubbing the wrists (i.e., step seven) in the hand hygiene technique depends on the product used and the type of transient microbiota present in wrists. The data also suggest a limited efficacy of hand antisepsis with 3 mL of 70% ethyl alcohol (w/w) for removing S. aureus from artificially contaminated wrists. A higher volume of alcohol (e.g., 5 mL) should be considered in hand antisepsis with alcoholic preparations using the seven-steps technique. No Brasil, a higienização das mãos dos profissionais da saúde é considerada adequada quando as mãos são friccionadas em todas as suas faces, espaços interdigitais, articulações, unhas, extremidades dos dedos e punhos, realizando-se a técnica em sete passos. Um aspecto controvertido é se a fricção dos punhos (i.e., o passo sete) é efetiva e necessária, pois em vários países a técnica preconizada para a higiene das mãos é baseada na clássica técnica dos seis passos de Ayliffe, que não inclui a higienização dos punhos. Investigar a eficácia da técnica de higiene das mãos, realizada em sete passos, na remoção da microbiota transitória dos punhos. O estudo foi realizado utilizando-se três quadrados Latinos 6x6 empregando-se os seguintes microrganismos testes: Escherichia coli, Staphylococcus aureus e Candida albicans. Os tratamentos com os produtos (álcool etílico 70%, álcool gel, povidona-iodo, clorexidina e sabão comum) e os respectivos controles (pré-tratamento) foram efetuados em três blocos 6x5 (i.e., 6 voluntários versus 5 produtos, utilizando-se um bloco para cada microrganismo teste). Os punhos foram contaminados com 0,02 mL do microrganismo teste e após a secagem as mãos foram higienizadas com 3 mL de cada produto. O microrganismo teste foi recuperado dos punhos friccionando-se a pele com auxílio de bastão de vidro e solução salina contendo neutralizantes. A taxa de remoção foi determinada pelo fator de redução logarítmica (i.e., a média do log10 das contagens pré-tratamento menos a média do log10 das contagens pós-tratamento). A possibilidade de contaminação dos dedos pela microbiota dos punhos, durante a higiene das mãos (passo sete), foi investigada pela técnica de deslizamento dos dedos na superfície de agar nutriente. Os resultados foram estimados por análise de variância, tendo como variável resposta o log10 do fator de redução logarítmica. Um valor de P < 0,05 foi considerado significativo. A comparação da eficácia da anti-sepsia das mãos com 3 mL e 5 mL de álcool etílico 70% (p/p) na remoção de Staphylococcus aureus dos punhos artificialmente contaminados foi também incluída no estudo, realizando-se 20 testes. As médias das taxas de remoção foram comparadas usando o teste t de Student. Um valor de P < 0,05 foi considerado significativo. Nos punhos dos voluntários controles foram recuperadas, em média, 6,45 (E. coli), 6,44 (S. aureus) e 5,89 (C. albicans) log10 unidades formadoras de colônias. Povidona-iodo e as preparações alcoólicas apresentaram maior eficácia do que o sabão comum e clorexidina na remoção dos microrganismos testes dos punhos (P < 0,05). No bloco com S. aureus observou-se a contaminação dos dedos de 3 voluntários tratados com as preparações alcoólicas e com os antissépticos degermantes. No estudo comparativo da eficácia da anti-sepsia das mãos com álcool etílico 70% (p/p) a taxa média de remoção de S. aureus dos punhos, expressa pelo fator de redução logarítmica, foi de 4,85±0,94 e de 5,51±0,84, respectivamente, para os voluntários tratados com 3 mL e 5 mL, sendo estas diferenças significativas (P=0,02344). A contaminação dos dedos ocorreu em 65% (13/20) dos voluntários tratados com 3 mL do álcool etílico 70% e em nenhum daqueles tratados com 5 mL. Os resultados sugerem que a eficácia da fricção dos punhos (i.e., o passo sete) na técnica de higiene das mãos depende do produto utilizado e da microbiota transitória presente nos punhos. Os dados também sugerem uma limitada eficácia da antissepsia das mãos com 3 mL de álcool etílico 70% (p/p) na remoção de S. aureus dos punhos artificialmente contaminados. Um maior volume de álcool (e.g., 5 mL) deve ser considerado na antissepsia das mãos com preparações alcoólicas utilizando a técnica dos sete passos. 61 f

Adesion and biofilm formation on polypropylene surfaces can be source of cross-contamination in food processing plants, leading major threat to public health and food quality. Several strategies to control bacterial adhesion to surfaces have been proposed, including the use of natural compounds. In this study Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Bactericidal Concentration (MBC) of Thymus vulgaris L. (Thyme) and Satureja hortensis L. (Savory) essential oils (EOs) and its predominant compounds against Salmonella spp. was evaluated and the combination of the active compounds of carvacrol and thymol . It was also evaluated the effect of carvacrol and thymol against Salmonella spp. biofilms on polypropylene. The EOs were obtained by hydrodistillation apparatus and the chemical composition was analyzed by mass spectrometry gas chromatography and nuclear magnetic resonance. MIC and MBC were determined using a broth microdilution method and the synergistic effect was assessed by the checkerboard method. The effect of carvacrol and thymol on Salmonella spp. biofilms on polypropylene was evaluated using different concentrations of the compounds by Colony Forming Units (CFU) counting assay and by scanning electron microscopy. It was observed that essential oils and their compounds showed anti-Salmonella spp. activity and the combination of the compounds showed synergism (0,141 FIC). Carvacrol and thymol also reduced the number of bacterial cells on polypropylene the surface at all concentrations tested. Peracetic acid, a standard sanitizer, was used as control, showed MIC and MBC of 100 ppm and drastically reduced bacterial counts on polypropylene. We conclude that carvacrol and thymol were effective against Salmonella spp. established biofilms and during its formation on polypropylene; however the effectiveness of control sanitizing was superior. Thus, natural compounds tested appear to be an alternative to control Salmonella biofilms on surfaces with low contamination. Adesão e formação de biofilme bacteriano em superfícies de polipropileno podem ser fontes de contaminação cruzada em instalações de processamento de alimentos, uma ameaça constante para a saúde pública e a qualidade dos alimentos. Várias estratégias para controlar a aderência bacteriana em superfícies têm sido propostas, incluindo o uso de compostos naturais. Neste estudo foi avaliada a Concentração Inibitória Mínima (MIC) e Concentração Bactericida Mínima (MBC) dos óleos essenciais (OEs) de Thymus vulgaris L. (Tomilho) e Satureja hortensis L. (Segurelha) e seus compostos majoritários contra Salmonella spp., bem como a avaliação da combinação dos compostos mais ativos carvacrol e timol. Também foi investigado o efeito do carvacrol e do timol contra biofilmes de Salmonella spp. formados e em formação em superfície de polipropileno. Os OEs foram obtidos por hidrodestilação e analisado por Cromatografia Gasosa acoplada à Espectrometria de Massas e ressonância magnética. A CIM e CBM foram avaliadas pelo método de microdiluição em caldo e o efeito sinérgico foi avaliado pelo método checkerboard. A ação do carvacrol e do timol em biofilmes de Salmonella spp. em polipropileno foi avaliada utilizando diferentes concentrações dos compostos pela contagem de Unidades Formadoras de Colônias e por microscopia eletrônica de varredura. Foi observado que os óleos essenciais e seus compostos apresentaram efeito anti-Salmonella spp. e a combinação dos compostos demonstrou sinergismo (FIC 0,141). Carvacrol e timol também reduziram o número de células na superfície do polipropileno em todas as concentrações testadas. O ácido peracético foi utilizado foi como sanitizante padrão e apresentou CIM e CBM de 100 ppm e reduziu drasticamente e números de bactérias em polipropileno. Concluímos que o carvacrol e timol foram efetivos contra biofilmes de Salmonella spp. já formados e durante a formação em polipropileno, entretanto a efetividade do sanitizante controle foi superior. Assim, os compostos naturais avaliados aparecem como uma alternativa no controle de biofilmes de Salmonella spp. em superfícies com pouca contaminação. 67 f

Differences in bacterial community might be related to many factors such as nutrients contends and interaction with other microorganisms. Differences in how the bacterial community is distributed among sites might impact the nutrient cycle to the ecosystems. The aim of this study was to analyze the distribution of bacterial community in different sites of the Upper Paraná River floodplain about the existence of differences in bacterial community structure among sites and its correlation with dissimilarities of abiotical conditions. And then, investigate how bacterial community structure changes in a hydrological cycle. The samples were performed in 36 sites of Paraná River floodplain, classified as connected and unconnected lakes and channels, distributed among three main rivers that compound this floodplain. Bacterial community structure was analyzed considering bacterial total density and relative abundances of the main domains Bacteria and Archaea, and subdivisions of the phyla Proteobacteria (Alpha-proteobacteria, Beta-proteobacteria, Gamma-proteobacteria) and Cytophaga-Flavobacterium group; that were estimated by fluorescent in situ hybridization. The structure of bacterial community differed according to the river´s characteristics in which the ambient are connected to. Differences in chlorophyll-a, total and ammoniacal nitrogen and orthophosphate were the mainly limnological variables that determines de bacterial community structure among the sites. The influence of the flood pulse in the bacterial community was analyzed in every three months samples (from December/2010 to September/2011), in twelve sites in upper Paraná River floodplain. We concluded that the flood pulse changes more significantly the bacterial community structure than the limnological differences among the rivers that compose the floodplain. Furthermore, in despite to what is observed to other planktonic communities the flood pulse decreases bacterial diversity during high water period. These results observed in a study with large bacterial groups suggest that a greater taxonomic refinement, the results could enlighten even more about how bacterial structure is influencing nutrient cycles in floodplain systems. As diferenças da comunidade bacteriana nos ambientes podem estar relacionadas a diversos fatores como a concentração de nutrientes e a relação com outros micro-organismos. A distribuição da comunidade bacteriana entre os ambientes podem influenciar na ciclagem de nutrientes do ecossistema. Nessa perspectiva, foi analisada a distribuição da comunidade bacteriana em diferentes ambientes da planície de inundação do alto rio Paraná quanto à existência de diferenças na estrutura da comunidade bacteriana entre os ambientes estudados e a sua correlação com as dissimilaridades das condições ambientais. Posteriormente, foi investigado como a comunidade de bactérias planctônicas se altera durante um ciclo hidrológico. Foram realizadas amostragens em 36 ambientes da planície de inundação do alto rio Paraná, distribuídos entre os três principais rios que compõem essa planície e classificados como lagoas com e sem conexão direta com o canal do rio principal, canais e rios. A estrutura da comunidade bacteriana foi analisada considerando a densidade total de bactérias e as abundâncias relativas dos dois domínios Bacteria e Archaea¸ das subdivisões do filo Proteobacteria (Alpha-proteobacteria, Beta-proteobacteria, Gamma-proteobacteria) e do grupo Cytophaga-Flavobacterium; estimadas através da metodologia de hibridização fluorescente in situ. A comunidade bacteriana diferiu, sobretudo de acordo com as características dos rios aos quais os ambientes são conectados. Diferenças nas concentrações de clorofila-a, nitrogênio total e amoniacal e ortofosfato foram as principais variáveis limnológicas que determinaram a estrutura da comunidade entre os ambientes. A influência do pulso de inundação sobre a comunidade bacteriana foi analisada em amostragens trimestrais (dezembro/2010 a setembro/2011), em doze ambientes da planície de inundação. Constatou-se que o pulso de inundação altera mais significativamente a estrutura da comunidade bacteriana que as diferenças limnológicas entre os rios que compõem a planície. Além disso, ao contrário do que se observa para outras comunidades planctônicas o pulso de inundação reduz a diversidade de bactérias durante o período de águas altas. Essas diferenças observadas quando se analisa grandes grupos bacterianos, sugere que com um maior refinamento taxonômico, os resultados podem fornecer uma maior compreensão sobre como a estrutura da comunidade bacteriana está influenciando a ciclagem de nutrientes nesses ambientes. 72 f

Seeking for cleaner energy sources Brazil established in 2005 in the law n° 11097 that stipulates the addition of biodiesel to diesel sold at gas stations, making the biofuel production increase exponentially. In addition to the biodiesel production is generated de amount of 10% glycerol during the process, which is already becoming problematic for manufacturers and can become an environmental liability. Biotechnology can be used to transform glycerol into biomolecules with higher value remedying the problem and to increase the profitability of production of biodiesel. This paper aims to isolate a microorganism, observe and quantify the degradation of glycerol and the products of their metabolism. Using the bovine rumen as a source of microorganisms, it was possible to isolated and identify using techniques of biochemical tests, the glycerol degrading bacteria, Klebsiella pneumoniae. The bacteria was grown in culture media containing glycerol as the sole carbon source, one containing glycerol P.A. added sodium thioglycollate, another containing glycerin from the biodiesel production added sodium thioglycollate and a third with only glycerin without the addition of sodium thioglycollate. The fermentation were conducted in erlenmeyers for 120 h at 37 °C where samples were taken, aseptically, every 24 hours and they were filtered, centrifuged and analyzed with the method of high performance liquid chromatography. In the media where there P.A. glycerin was added at the end of the process the production of 12,53 g/L of 1,3-propanediol (20.76 % conversion) and 1,50 g/L of ethanol (2 % conversion), the media containing glycerin and sodium thioglycollate production was 22.53 g/L of 1,3-propanodiol (27,44 % conversion), 1,42 g/L of ethanol (1,73 % conversion) and 1,13 g/L of 2, 3-butanediol (1,37 % conversion), in the media containing glycerin without the addition of sodium thioglycolate was 29,41 g/L of 1,3-propanediol (30,06 % conversion), 1.03 g/L of ethanol (1,31 % conversion) and 2,32 g/L of 2,3-butanediol (2,76% conversion). The Bacteria isolated and identified was Klebsiella pneumoniae. The media containing only glycerin was the most efficient in the conversion of glycerol to 1,3-propanediol and 2,3-butanediol and the glycerin P.A. with media containing sodium thioglycollate was more efficient in conversion of glycerol to ethanol. Buscando fontes energéticas menos poluentes foi criada em 2005 no Brasil a lei n° 11097 que estipula a adição de biodiesel ao diesel vendido nos postos de combustíveis, fazendo com que a produção do biocombustível aumentasse exponencialmente. Com a produção do biodiesel existe a geração de 10% de glicerol durante o processo, que já esta se tornando problemático para os produtores e podendo se tornar um passivo ambiental. Utilizando da biotecnologia pode-se utilizar micro-organismos para transformar o glicerol em biomoléculas de maior valor agregado sanando o problema e até aumentando a rentabilidade da produção do biodiesel. O presente trabalho teve como objetivo isolar um micro-organismo, observar e quantificar a degradação do glicerol e os produtos de seu metabolismo. Utilizando o rúmen bovino como fonte de micro-organismos foi possível isolar e identificada, com técnicas de provas bioquímicas, a bactéria, degradadora de glicerol, Klebsiella pneumoniae. A bactéria foi cultivada em meios contendo glicerol como única fonte de carbono, um deles contendo glicerol P.A. e adicionado de tioglicolato de sódio, outro contendo glicerina proveniente da produção de biodiesel e adicionada de tioglicolato de sódio e um terceiro com o mesmo glicerina só que sem a adição de tioglicolato de sódio. Os experimentemos de fermentação foram conduzidos em erlenmeyer de 250 mL por 120 horas à 37 ºC, foram retiradas a cada 24 horas, de forma asséptica, alíquotas que foram filtradas, centrifugadas e analisadas com o método de cromatografia líquida de alta eficiência. No meio com glicerol P.A., após 120 horas, houve a produção de 12,53 g/L de 1,3-propanodiol (20,76% de conversão) e 1,50 g/L de etanol (2% de conversão); no meio contendo a glicerina e o tioglicolato de sódio houve a produção de 22,53 g/L de 1,3-propanodiol (27,44% de conversão), 1,42 g/L de etanol (1,73% de conversão) e 1,13 g/L de 2,3-butanodiol (1,37 % de conversão); no meio contendo glicerina do processo sem a adição do tioglicolato de sódio houve a produção de 29,41 g/L de 1,3-propanodiol (30,06% de conversão), 1,03 g/L de etanol (1,31% de conversão) e 2,32 g/L de 2,3-butanodiol (2,76% de conversão). Ao final do trabalho Foi possível isolar e identificar a bactéria Klebsiella pneumoniae. O meio contendo apenas a glicerina foi o mais eficiente na conversão do glicerol em 1,3-propanodiol e em 2,3-butanodiol e o meio contendo glicerina P.A. com tioglicolato de sódio foi mais eficiente na transformação do glicerol em etanol. 40 f

This study aimed to evaluate the post-treatment of a Reactor Anaerobic Sludge Mantle Flow and Ascendant (RALF) through a Submerged Aerated Filter Biological (FBAS) with emphasis on the process of studying the behavior of nitrification nitrifying population through hybridization technique Probes Fluorescent in situ hybridization (FISH), under different operating conditions. This study was conducted in an experimental unit consists of a FBAS (0.605 m³), filled with PET lids (252 m². m-3) followed by a secondary clarifier (1.56 m³) in three distinct stages of operation. The unit was installed shortly after RALF, which is part of the system of Sewage Treatment Station (STS)-administered by Southern Sanitation Company of the State of Paraná (SANEPAR), located in the city of Maringá- PR. The operation steps 1, 2 and 3 had a run time of 45, 60 and 45 days, respectively, with feed flow rate of 0.5 m³.h-1 in the first stage and 0.2 m³.h-1 second and third stage. We adopted the sludge recirculation rates of the secondary clarifier of 0.1 m³.h-1 for stage 1 and 0.2 m³.h-1 to stage 2 and 3. We sought to evaluate the nitrifying population dynamics in the upper part of the reactor detecting ammonia-oxidizing bacteria (AOB) and nitrite-oxidizing (NOB) using oligonucleotide probes by FISH method. According to the results, application of organic loading decreasing rate (OLR) organic loading rate along the stages proposals resulted in better performance in the nitrification process where Step 3 showed an efficiency of 78% NH3-N removal, subjected to an OLR of 0.83 KgDBO.m-3.dia-1. The nitrifying community checked at the top of the reactor under different OLR was found to be different behaviors, where the Step 3 with the application of a OLR of 0.19 KgDBO.m- 3.dia-1, showed a larger cell number total labeled with DAPI in relation to the other steps of 35% Nitrosomona (NSM 156), 9% Nitrobacter (NIT 3) and 25% Nitrospira (NTSPA 662). Este trabalho teve como objetivo avaliar o pós-tratamento de um Reator Anaeróbio de Manto de Lodo e Fluxo Ascendente (RALF) através de um Filtro Biológico Aerado Submerso (FBAS) com ênfase no processo de nitrificação estudando o comportamento da população nitrificante através da técnica Hibridação in situ com Sondas Fluorescentes (FISH), submetido a diferentes condições operacionais. O presente trabalho foi desenvolvido em uma unidade experimental constituída por um FBAS (0,605 m³), preenchido com tampas PET (252 m².m-3) seguido de um decantador secundário (1,56 m³) em três etapas distintas de operação. A unidade foi instalada logo após o RALF, a qual faz parte do sistema da Estação de Tratamento de Esgoto (ETE)-Sul administrada pela Companhia de Saneamento do Estado do Paraná (SANEPAR), localizada na cidade de Maringá-PR. As etapas de operação 1, 2 e 3 tiveram um tempo de operação de 45, 60 e 45 dias, respectivamente, com vazões de alimentação de 0,5 m³.h-1 na primeira etapa e 0,2 m³.h-1 na segunda e terceira etapa. Adotou-se taxas de recirculação do lodo do decantador secundário de 0,1 m³.h-1 para a etapa 1 e 0,2 m³.h-1 para as etapas 2 e 3. Buscou-se avaliar a dinâmica da população nitrificante na parte superior do reator detectando as bactérias oxidadoras de amônia (AOB) e oxidadoras de nitrito (NOB), utilizando sondas de oligonucleotídeos através do método FISH. De acordo com os resultados obtidos, a aplicação de decrescentes Cargas orgânicas volumétricas (COV) ao longo das etapas propostas resultaram em melhores desempenhos no processo de nitrificação onde a Etapa 3 apresentou uma eficiência de 78% na remoção de N-NH3, submetidos a uma COV de 0,83 KgDBO.m-3.dia-1. A comunidade nitrificante verificada na parte superior do reator submetida a diferentes COV?s mostrou-se diferentes comportamentos, onde a Etapa 3 com a aplicação de uma COV de 0,19 KgDBO.m-3.dia-1, apresentou um número maior número de células totais marcadas com DAPI em relação as outras etapas de 35% de Nitrosomona (NSM 156), 9% Nitrobacter (NIT 3) e 25% de Nitrospira (NTSPA 662 ). xv, 99 f

Orientador: Prof.ª Dr.ª Jane Martha G. Mikcha Inclui anexos Dissertação (mestrado em Ciências da Saúde) - Universidade Estadual de Maringá, 2012 RESUMO: O objetivo deste estudo foi avaliar a ação do carvacrol sobre biofilmes por Salmonella spp. em aço inoxidável. O efeito do carvacrol em células planctônicas foi avaliado pela determinação da concentração inibitória mínima e da concentração bactericida mínima. A eficiência do carvacrol em biofilmes de Salmonella spp. na superfície de aço inox foi avaliada no biofilme já formado e em formação pela contagem do número de células bacterianas aderidas e pela visualização por microscopia eletrônica de varredura. Os resultados demonstraram forte atividade antimicrobiana do carvacrol em células planctônicas de Salmonella spp. A maior diminuição do número de células aderidas na superfície de aço inox ocorreu no biofilme em formação quando exposto ao carvacrol nas diferentes concentrações sub-inibitórias testadas. O carvacrol reduziu o número de células bacterianas aderidas em superfície de aço, mostrando que este composto pode ser uma alternativa para o controle de Salmonella spp.Significância e Impacto do estudo: Infecção por Salmonella spp. constitui um problema de saúde pública em muitos países e sua capacidade de formar biofilme sem diferentes superfícies torna difícil sua eliminação sendo importante investigar a ação de compostos que sejam eficazes para seu controle ABSTRACT: The aim of this study was to evaluate the effect of carvacrol on Salmonella spp. biofilms on stainless steel surface. The effect of carvacrol on plank tonic cells was evaluated by determining minimum inhibitory concentration and minimal bactericidal concentration. The action of carvacrol on Salmonella spp. biofilms on stainless steel surface was evaluated on mature biofilm and on biofilm formation by enumerating the number of bacterial cells adhered and by scanning electron microscopy. A strong antimicrobial activity of carvacrol in plank tonic cells of Salmonella spp. was observed. The highest inhibitory activity of carvacrol was observed on biofilm formation at different sub inhibitory concentrations tested. The carvacrol reduced the number of bacterial cells adhered to stainless steel surface, which makes it a potential compound for Salmonella spp. control. Significance and Impact Study: Salmonella spp. infection is a public health problem in many countries. Due to difficulty of eliminating Salmonella spp. in biofilms, studies of alternative compounds for its control are essential 28 f. : il., figs., tabs.

Arctium lappa L. the Asteraceae family is a plant introduced from Japan and cultivated in Brazil, and is used in folk medicine around the world in "curing" various diseases. Studies show that the parties studied are the roots and fruits, since they show various biological activities among them anticancer, antioxidant, antiviral, hepatoprotective capacity, among others. But studies of their leaves are scarce. This study aims to collect and identify plant species, as well as evaluation of in vitro antiproliferative crude (CE) and semipurified extracts, and isolated compounds in Caco-2 cells. The plant species was confirmed by comparison with the nomenclatural type as Arctium lappa L. From the dry and comminuted leaves A. lappa, produced to the CE solution with 50% hydro, for turboextraction for 15 min. The test in Caco-2 cells showed activity of CC50 347.6 mg/mL. Then the CE was partitioned with hexane, ethyl acetate and n-butanol. The ethyl acetate fraction (EAF) showed antiproliferative activity of CC50 24.7 g/mL. The EAF was submitted to vacuum liquid chromatography (VLC) containing silicagel, using various solvent systems of increasing polarity, and the ethyl acetate subfraction (EAFS) showed the best result with CC50 21.9 g/mL against the Caco-2. The subfraction EAFS was further chromatographed by chromatography "flash" silicagel, and the compounds isolated was onopordopicrin (1), dehidromelitensin-8- (4'-hidroxy-metacrylate) (2), dehidromelitensin (3), melitensin (4) , dehidrovomifoliol (5) and loliolide (6) weve isolated. The compounds 2, 3, 4 and 5 were first identified in the species. The compound onopordopicrin showed a CC50 of 19.7 g/mL, demonstrating to be a possible drug of choice for further studies in other cell lines. Arctium lappa L. pertencente à família Asteraceae é uma planta introduzida do Japão e aclimatada no Brasil, e é utilizada na medicina popular em todo mundo na cura de diversas doenças. Estudos mostram que as partes estudadas são as raízes e frutos, sendo que estes apresentam diversas atividades biológicas dentre elas antitumoral, antioxidante, antiviral, capacidade hepatoprotetora, entre outras. Porém estudos com suas folhas são escassos. Este trabalho teve por objetivo coletar e identificar a espécie vegetal, assim como a avaliação antiproliferativa in vitro de extratos bruto (EB) e semipurificado, e de substâncias isoladas em células Caco-2. A espécie vegetal foi confirmada por comparação com o tipo nomenclatural como sendo Arctium lappa L. A partir das folhas secas e cominuídas de A. lappa, produziu-se o EB com solução hidroetanólica 50%, por turboextração durante 15 min. O ensaio em células Caco-2 resultou em atividade de CC50 347,6; μg/mL. Em seguida o EB foi particionado com hexano, acetato de etila e n-butanol, sendo que a fração acetato de etila (FAE) apresentou atividade antiproliferativa de CC50 24,7; μg/mL. A FAE foi submetida à cromatografia líquida à vácuo (CLV) contendo gel de sílica, empregando-se diversos sistemas eluente de polaridade crescente, sendo que a subfração acetato de etila apresentou o melhor resultado com CC50 21,9 μg/mL frente às células Caco-2. A subfração foi novamente cromatografada por meio de cromatografia "flash" em gel de sílica, isolando-se as substâncias onopordopicrina (1), dehidromelitensina-8-(4'-hidroximetacrilato) (2), dehidromelitensina (3), melitensina (4), dehidrovomifoliol (5) e loliolida (6). As substâncias 2, 3, 4 e 5 foram identificadas pela primeira vez na espécie. A substância onopordopicrina apresentou CC50 19,7 μg/mL, demonstrando ser uma possível droga de eleição para novos estudos em outras linhagens de células. 55, [32] f

Healthy subjects are colonized by the Staphylococcus aureus since breastfeeding and this microorganism can be found in the nasopharynx, skin and vagina. From these areas this bacteria can be transmitted to susceptible subjects causing them infections. The S. aureus has been associated to hospital and community infections whereas the severity of the disease depends on the expression of virulence factors and the resistance profile towards antimicrobial agents applied in clinical practice. The aim of this study was to assess the phenotypic and genotypic profile and the virulence factor of Staphylococcus aureus samples isolated from symptomatic and asymptomatic carriers. Therefore 147 S. aureus samples stored at the Maringá State University Laboratory were used, where 68 were drawn from infection associated with health care cases and 79 were drawn from asymptomatic carriers. The susceptibility to antimicrobial agents was assessed using the disc diffusion method as recommended by the CLSI, and for the oxacillyn and vancomycin resistance the minimum inhibitory concentration (MIC) determination test was also used. The DNA was extracted with Ctab and the Polymerase Chain Reaction (PCR) technique was applied for the genetic characterization with the RW3A oligonucleotide, identification of the mecA gene, detection of the gene for the production of PVL and detection of the icaA and icaD genes. All S. aureus samples showed a wide range of resistance to the antimicrobial agents often used in clinical practice. The MIC test results showed that from the 68 symptomatic samples, 58 (85%) presented oxacillyn resistance and 55 (95%) of them carried the mecA gene. For the 58 oxacillyn resistant samples identified by the MIC test, 55 (98%) also displayed resistance using the disc diffusion method. Among the 79 asymptomatic carriers samples, seven (9%) were oxacillyn resistant by the MIC test and six (86%) expressed the mecA gene. For the seven oxacillyn resistant samples from asymptomatic carriers, six (86%) also showed resistance by the disc diffusion method. The samples isolated from asymptomatic carriers had 100% resistance for penicillyn and cefoxitin and 0% to linezolid, telithromycin and teicoplamin. The samples isolated from symptomatic cases had 100% resistance for penicillin, cefoxitin and telithromycin and 0% to teicoplamin. All samples were sensitive for vancomycin by both methods applied. The PVL gene was detected in only one (14%) of the seven oxacyllin resistant samples isolated from asymptomatic carriers. The icaA and icaD genes were both detected in only one (14%) of the seven oxacillyn resistant samples isolated from asymptomatic carriers and in 41 (60%) of 68 samples isolated from symptomatic clinical cases. The genetic characterizations of the 79 samples isolated from asymptomatic cariers showed that 15 of them shared a similarity rate of 100% and 23 showed a similarity rate above 80%. From the 68 symptomatic clinical samples, 19 presented a similarity rate of 100% and three shared a similarity rate above 90%, 23 above 84% and 19 shared a similarity rate around 80%. Indivíduos sadios são colonizados por Staphylococcus aureus desde a amamentação, podendo albergar o micro-organismo na nasofaringe, superfície corporal e na vagina. A partir desses sítios, podem ser veiculados para indivíduos susceptíveis, ocasionando infecções. S. aureus tem sido associado à etiologia das infecções hospitalares e comunitárias e a gravidade da doença depende da expressão de fatores de virulência e do perfil de resistência frente aos antimicrobianos usualmente utilizados na prática clínica. Este estudo teve como objetivo avaliar o perfil fenotípico, genotípico e fatores de virulência de amostras de Staphylococcus aureus isolados de casos clínicos infecção hospitalar e de portadores assintomáticos. Utilizaram-se 147 amostras de S. aureus, estocadas no Laboratório da Universidade Estadual de Maringá, sendo 68 procedentes de casos clínicos de infecção associadas aos cuidados em saúde e 79 de portadores assintomáticos. A susceptibilidade aos antimicrobianos foi avaliada pelo método de disco difusão, conforme recomendações do CLSI, sendo que para oxacilina e vancomicina também se utilizou o teste de determinação da concentração inibitória mínima (CIM). O DNA foi extraído com Ctab e a técnica de Reação em Cadeia da polimerase (PCR) foi empregada para a realização da tipagem genética com o oligonucleotídeo RW3A, identificação do gene mecA, detecção do gene para a produção de PVL e detecção dos genes icaA e icaD. Todas as amostras de S. aureus mostraram um amplo perfil de resistência aos antimicrobianos usualmente empregados na rotina clínica. Através do teste de CIM observou-se que das 68 amostras, clínicas 58 (85%) apresentaram resistência à oxacilina e dessas 55 (95%) carreavam o gene mecA. As 58 amostras de oxacilina resistentes identificadas pelo CIM 55 (98%) também se mostraram resistentes pelo método de disco difusão. Entre as 79 amostras de portadores assintomáticos, 7 (9%) apresentaram resistência à oxacilina pelo método de CIM, e dessas, 6 (86%) expressaram o gene mecA. Para as 7 amostras de portadores resistentes à oxacilina, 6 (86%) apresentaram resistência também pelo método de disco difusão. Entre as amostras isoladas de portadores à resistência, foi de 100% para penicilina e cefoxitina e 0% para linezolida, telitromicina e teicoplamina. Para as amostras clínicas a resistência foi de 100% para penicilina, cefoxitina e telitromicina; e 0% para teicoplamina. Todas as amostras foram sensíveis à vancomicina pelos dois métodos empregados. O gene PVL foi identificado em apenas 1(14%) das 7 amostras oxacilina resistentes isoladas de portadores assintomáticos. O gene icaA e icaD concomitantemente foi detectado em apenas 1 (14%) das 7 amostras oxacilina resistentes procedentes de portadores assintomáticos e em 41(60%) das 68 amostras clínicas. A tipagem genética das 79 amostras de portadores assintomáticos demonstrou que entre 15 delas houve 100% de similaridade e entre 23 o grau de similaridade foi superior a 80%. Para as 68 amostras clínicas, verificou-se que 19 apresentaram 100% de similaridade, 3 tiveram similaridade próxima a 90%, 23 acima de 84% e 19 em torno de 80% de similaridade. 66 f

Staphylococcus aureus (S. aureus) is a pathogen involved in the etiology of hospital and community infections, and is also found in the normal flora of a significant percentage of the general population. Several studies have shown an increase in the isolation of multiple-drug-resistant samples of S. aureus, especially to oxacillin (ORSA). Nursing students may be nasal carriers of multi-resistant strains, which represents a potential risk factor for dissemination. The object of the present study is to identify the prevalence, phenotypic and genotypic profiles of S. aureus samples isolated from the nasal cavities of undergraduate Nursing students. The population consisted of 101 undergraduate Nursing students who had their nasal cavities sampled. Colonies suspected of belonging to S. aureus were subjected to Gram reaction and tube coagulase tests, and then evaluated regarding oxacillin and vancomycin susceptibility through the minimum inhibitory concentration (MIC) test. DNA was extracted through CTAB, and the samples identified as oxacillin-resistant were submitted to a polymerase chain reaction (PCR) to identify the MecA gene, with the ATCC 33591 strain of S. aureus as positive control. Eletrophoresis was performed in agarose gel 1.5% with ethidium bromide. A fragment of 154 base pairs indicates the presence of the MecA gene. The genetic typing of oxacillin-resistant samples was performed using the RW3A primer. Among the 101 assayed students, 91 (90.1%) showed isolates of S. aureus. In eight samples, MIC varied between 4 μg/ml and 256 μg/ml. All samples were sensitive to vancomycin. The presence of the MecA gene was identified in all oxacillin-resistant samples through the MIC method. Of the eight oxicillin-resistant samples, 100% were resistant to penicillin, trimethoprim/sulfamethoxazole and tetracyclin. The genetic typing of all eight oxacillinresistant samples showed greater than 84% similarity for four samples, with two of them being 100%. Staphylococcus aureus é um patógeno envolvido na etiologia de infecções hospitalares e comunitárias, encontrado como flora normal em um percentual importante da população em geral. Atualmente, diversos estudos têm demonstrado um aumento da freqüência de isolamento de amostras de S. aureus resistentes a múltiplas drogas, particularmente a oxacilina (ORSA). Acadêmicos de Enfermagem podem ser carreadores nasais de estirpes multirresistentes, representando um fator de risco potencial na disseminação. O presente estudo tem por objetivo identificar a prevalência e o perfil fenotípico e genotípico de amostras de S. aureus isoladas dos vestíbulos nasais de estudantes de graduação em Enfermagem. A população envolveu 101 alunos do curso de graduação em Enfermagem que foram amostrados nos vestíbulos nasais. As colônias suspeitas de pertencerem à S. aureus foram submetidas à Coloração de Gram, Teste da Coagulase em tubo e a seguir avaliadas quanto à susceptibilidade à oxacilina e à vancomicina através do Teste da Concentração Inibitória Mínima (CIM). O DNA foi extraído com CTAB e as amostras identificadas como resistentes à oxacilina foram submetidas à técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) para identificação dogene MecA, utilizando-se como controle positivo a cepa de S. aureus ATCC 33591. A eletroforese foi realizada em gel de agarose a 1,5% com brometo de etídio. Um fragmento de 154 pares de base indica a presença do gene mecA. A tipagem genética das amostras resistentes à oxacilina foi realizada utilizando o primer RW3A. Dos 101 alunos analisados, 91 (90,1%) proporcionaram o isolamento do S. aureus. Em 8 amostras, a CIM da oxacilina variou entre 4 μg/ml e 256 μg/ml. Todas as amostras foram sensíveis à vancomicina. A presença do gene mecA foi identificada em todas as amostras resistentes à oxacilina pelo método da CIM. Todas as amostras resistentes à oxacilina pela CIM apresentaram resistência à penicilina, trimetropin/sulfametoxazol e à tetraciclina. A tipagem genética das oito amostras resistentes à oxacilina demonstrou uma similaridade superior a 84% para quatro amostras, sendo duas com 100%. 56 f