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Introduzione. Come noto, uno dei maggiori problemi collegati al trattamento delle ferite è l’elevata probabilità di sviluppare infezioni. Fino ad oggi molti studi sono stati sviluppati per modificare delle garze fabbricate con idrogel per mantenere la ferita umida conferendole contestualmente proprietà antimicrobiche. Tuttavia, gli articoli pubblicati fino ad oggi sono stati sviluppati su garze modificate con l'aggiunta di antibiotici, composti chimici con azione antimicrobica o al massimo l’aggiunta oli essenziali come quello di Melaleuca alternifolia. Scopo. Lo scopo del nostro studio è stato quello di indagare l'azione antimicrobica di un idrogel, come il gel di gellano, quando modificato con l'aggiunta di idrolati (ID), prodotti naturali di scarto del metodo di produzione degli oli essenziali. Materiali e metodi. È stato studiato, mediante test di micro-brodo diluizione, l'effetto in vitro di 1 ID commerciale (Citrus aurantium var amara - CA) e 4 ID prodotti presso il dip. DISTAL (Monarda citriodora, M. didyma, M. fistulosa, Lavandula vera), su 7 ceppi fungini (4 ceppi clinici e 3 ATCC) e 11 ceppi di GRAM+ sensibili e resistenti agli antibiotici (6 clinici e 5 ATCC). Lo stesso test è stato effettuato per valutare l’azione antimicrobica dei conservanti previsti per legge in ID commerciali. È stato sviluppato un prototipo rudimentale di garza impregnata di idrogel modificato con 50% v/v di idrolato di CA e ne è stata valutata l’efficacia citocida, mediante idonei esperimenti microbiologici, sui ceppi microbici in studio. Modelli preliminari di infezioni sottocutanee di Staphyloccoccus aureus sono stati sviluppati in ratti per valutarne l’efficacia in vivo. Risultati. I test hanno permesso di individuare, tra tutti gli ID indagati, l’ID di CA come il più efficace (MIC90 ≤ 3,125% v/v). Le indagini microbiologiche condotte sui soli conservanti non hanno mostrato alcuna azione citocida (MIC > 50% v/v); mentre, quando associati all’ID, mostrano un’azione sinergica rispetto all’idrolato da solo (MIC90 = 12,5% v/v). Il prototipo di garza ha mostrato un’analoga azione citocida su tutti i ceppi testati ad eccezione del ceppo clinico di Enterococcus faecalis e di quello ATCC di S. aureus MSSA che, comunque, risultano profondamente inibiti. I dati preliminari in vivo mostrano una riduzione del 70% del volume dell’ascesso sottocutaneo indotto nei ratti infettati con S. aureus. Conclusioni. I nostri dati mostrano come l’aggiunta di ID di CA al gel di gellano abbia effetti citocidi. I dati, oltre a mostrare risultati molto interessanti per quanto riguarda l'azione antimicrobica del gel di gellano modificato, prospettano una buona applicazione sull'uomo se si considerano i risultati in vivo e la sicurezza d'uso dei componenti della garza.

Le recenti scoperte sulla biodiversità microbica del microbiota intestinale umano ed animale hanno permesso di approfondire le conoscenze sulla composizione delle comunità di probiotici (bifidobatteri, lattobacilli, funghi e nuovi probiotici) in questo complesso ecosistema e di rivelare le intricate interrelazioni con l’ospite e con altri gruppi microbici. Le caratteristiche metaboliche sono infatti importanti nella colonizzazione dell’habitat intestinale e nell’interazione con i tessuti dell’ospite. Un’altra importante caratteristica dei probiotici è la capacità di inibire la crescita di microrganismi patogeni come Escherichia coli O157:H7, Salmonella enterica serovar typhimurium e Clostridium difficile. Inoltre, i probiotici possono svolgere attività antivirali. Tutte queste conoscenze sono fondamentali per lo sviluppo di nuove strategie terapeutiche basate sul principio di mantenere o ristabilire l’equilibrio intestinale. In questo complesso scenario gli oli essenziali (OE) possono svolgere un importante ruolo. Si ipotizza, infatti, una loro azione selettiva: ossia, gli OE, potrebbero svolgere un’attività di modulazione delle comunità microbiche intestinali con vantaggio per i microrganismi benefici e riduzione di quelli patobionti. Questo argomento di così grande interesse non è ancora stato studiato in modo approfondito. Scopo: il presente lavoro ha avuto lo scopo di confrontare l’attività antimicrobica di OE (singoli o in miscele) testati sia verso ceppi di bifidobatteri isolati da suini e da potamoceri. e sia verso patogeni intestinali. Materiali e metodi: sono stati isolati ceppi di bifidobatteri da feci di potamocero mediante MRS addizionato di cisteina, acido acetico e mupirocina; sono stati saggiati gli OE di Corydothimus capitatus, Lavandula intermedia, Monarda didyma (“Scarlett”) e la miscela commerciale GR-OLI verso i probiotici del genere Bifidobacterium: B. bifidum, B. longum subsp. longum, B. breve, B. longum subsp. suis, B. thermacidophilum subsp. porcinum (isolato da potamocero), poi Lactobacillus paracasei, Saccharomyces boulardi, S. cerevisiae, e Enterococcus faecium (ceppo probiotico commerciale per suinetti) e verso i patobionti/patogeni E. coli, Salmonella enterica serovar typhimurium, Candida albicans e Staphylococcus aureus. La Minima Concentrazione Inibente (MIC) e Minima Concentrazione Letale (MLC) sono state determinate secondo linee guida EUCAST mediante il metodo delle micro-brodo diluizioni. Risultati: i risultati ottenuti hanno mostrato una diversa attività antimicrobica degli OE saggiati. E’ stata messa in evidenza la maggiore efficacia dell’OE di C. capitatus e di M. didyma (MIC = 0.5% v/v) e GR-OLI (MIC = 0.25% v/v) verso i patobionti/patogeni rispetto all’attività antimicrobica verso i probiotici [C. capitatus e di M. didyma (MIC = 2%) e GR-OLI (MIC = 1% v/v)]. L. intermedia ha mostrato una bassa attività antimicrobica con MIC ≥ 2% verso tutti i ceppi saggiati. La miscela GR-OLI ha mostrato una attività antimicrobica più elevata dei singoli OE. Conclusioni: l’utilizzo di OE e di miscele di OE può essere una strategia per contrastare la carica batterica potenzialmente patogena nel microbiota intestinale di animali e per rinforzare l’eubiosi in favore di microrganismi benefici intestinali. Questo approccio potrebbe essere particolarmente importante in condizioni di stress durante specifici periodi di vita degli animali, come nel caso dello svezzamento nei suinetti, nel quale il microbiota è fisiologicamente soggetto a importanti cambiamenti qualitativi e quantitativi.

Thanks to their cytocidal action on microbial agents, essential oils and their waste products (hydrolates) are object of interest in bioconservation fields. Our research analyses the actions of hydrolates when used, with different methodologies, in order to preserve paper artworks and human health. This work will describe the results obtained with GELYD (GELlan + hYDrolat) made to give the gellan hydrogel both microbial resistance and cytocidal action against biodeteriogens using hydrolates. Furthermore, the preliminary results obtained to evaluate the effectiveness of GELYD when used to control the fungal growth in closed environments, will be showed Micro-broth dilution assays were performed to identify the fungicidal action of 16 hydrolates vs 3 fungal strains. The study concerned the Minimal Fungicidal Concentration, ATP test and pH, colour and ultra-structural variations on paper samples placed in contact with GELYD. The in vitro and in situ tests showed that only two hydrolates (from Monarda fistulosa and Citrus aurantium subsp amara) have fungicidal action when used in GELYD directly in contact with paper. However, the only to be effective in closed environments is the GELYD made with C. aurantium. If confirmed, our data indicate a new and eco-innovative use of hydrolates.

Gli oli essenziali, così come gli idrolati, sono considerati composti bioattivi di origine vegetale e quindi “naturali”. Questo spiega il sempre maggiore interesse verso le potenzialità in svariati ambiti compreso quello della conservazione del patrimonio culturale. Uno dei problemi più annosi da risolvere nel campo della conservazione dei documenti grafici è il trattamento preliminare al restauro per mettere in sicurezza l’opera dal punto di vista microbiologico. Questo problema è stato affrontato dal nostro gruppo di ricerca sviluppando uno studio volto a valutare l’efficacia degli idrolati quando integrati nel gel di gellano (GELYD) per conferirgli un’azione citocida verso i biodeteriogeni della carta. La fase successiva al nostro studio è stata quella di indagare l’azione del GELYD quando posto in ambienti confinati non a diretto contatto con l’opera al fine di valutarne l’azione preventiva vs l’attacco di biodeteriogeni al patrimonio cartaceo. Dati preliminari di laboratorio sono stati ottenuti utilizzando contenitori di diverso volume (piccoli, medi e grandi) sul fondo dei quali sono stati posti tasselli di carta Whatman assieme a piastre Petri contenenti 15 ml di solo gellano o di GELYD ottenuto con idrolati di Monarda citriodora o Citrus aurantium. Sono stati condotti due tipologie di esperimenti. Nel primo caso i tasselli di carta sono stati seminati con 50 l di una sospensione caratterizzata da ceppi fungini isolati da opere cartacee (Aspergillus sydowii, Penicillium chrysogenum e Cladosporium spherospermum) e, settimanalmente, è stato valutato il segnale dell’ATP presente sui tasselli trattati e di controllo. Nel secondo caso i campioni di carta Whatman sono stati lasciati a temperatura ambiente per 7-14 e 21 gg per poi essere analizzati al settimo e al quattordicesimo giorno mediante analisi dei composti volatili eseguita con gascromatografia abbinata a spettrometria di massa (GC-MS). Mentre tutti e tre i tempi sono stati analizzati per la qualità dell’aria negli ambienti confinati mediante campionamento dei composti volatili con tecnica di preconcentrazione denominata microestrazione in fase solida (Solid Phase Microextraction-SPME). I risultati delle analisi microbiologiche mostrano come il GELYD sia in grado di abbattere la carica fungina quando posto in ambienti confinati. Mentre, i dati ottenuti dall’analisi relativa alla qualità dell’aria e ai residui sulla carta, indicano che le componenti volatili terpeniche degli idrolati sono rilevabili sin dai primi giorni di esposizione del GELYD nell’ambiente confinato; le stesse componenti non sono rilevabili sulla carta sin tanto che, per deposizione, non raggiungono una concentrazione superiore alla soglia di sensibilità dello strumento che, nel nostro caso, è raggiunto solo dopo i primi 14 giorni di esposizione. I nostri dati preliminari individuano un nuovo potenziale uso del GELYD nella prevenzione della contaminazione da biodeteriogeni del patrimonio cartaceo posto in ambienti confinati, anche se ulteriori indagini volte a valutarne la sicurezza d’uso sull’opera sono necessarie e in fase di sviluppo.

Nel VII secolo, sulla scia della teoria dei segni secondo cui “il simile cura o colpisce il simile”, si sosteneva che il frutto del noce (Juglans regia) potesse curare i disturbi del cervello perché ne era la riproduzione vegetale: l’involucro esterno verde carnoso rappresentava il cuoio capelluto, il guscio il cranio, la pellicola interna le meningi e la pia mater, mentre la parte commestibile, convoluta e divisa in due, simboleggiava gli emisferi del cervello. A parte questa affascinante evocazione medievale, il noce, albero amato ed apprezzato per la sua imponenza, è purtroppo soggetto a gravi malattie. Un serio “nemico” Fra quelle di origine fungina, la più pericolosa è l'“antracnosi", che provoca, oltre alla cascola dei frutti, una rapida defogliazione. Descritta in Italia per la prima volta nel 1921, è causata da Gnomonia leptostyla, fungo di cui viene data notizia nel nostro Paese già nel 1882. Il nome deriva dall’unione delle due parole greche “ἄνϑραξ –ακος” che significa “carbone” e “νόσος” che vuol dire “malattia”. Molto colpite sono le porzioni verdi come foglie (rachide e picciolo compresi), germogli e frutti; ma, occasionalmente anche rami, branche e tronco. Sulle foglie compaiono macchie tondeggianti bruno-nerastre, sparse o confluenti (e lacerate); sui frutti si hanno necrosi del mallo e atrofizzazione del seme; sugli organi legnosi tacche necrotiche depresse che degenerano in cancri centralmente fessurati, la cui profondità ed estensione dipende dalla precocità di attacco. Cosa fare? Il patogeno sverna sulle foglie cadute a terra sopravvivendo per lunghi periodi anche durante l’inverno: si propaga tramite le spore che aggrediscono la pianta nel periodo primaverile, mentre i rami più grossi possono essere colpiti in qualsiasi periodo dell’anno, grazie alle ferite prodotte da gelo, grandine e vento. L'antracnosi è favorita da un andamento climatico caldo-umido e da scarso arieggiamento, come si può verificare con l'eccessivo lussureggiamento della chioma, la vicinanza di boschi o di fasce frangivento fortemente ombreggianti. Alla comparsa dei primi sintomi occorre agire tempestivamente provvedendo a: - eliminare le foglie colpite (disinfettare le forbici tra un taglio e l’altro per evitare ulteriori contaminazioni); - potare durante le stagioni più fredde i rami malati (trattare con un prodotto a base di rame o zolfo); - bruciare i residui vegetali colpiti (trattare le piante con ossicloruro di rame o zolfo per evitare che le spore possano superare l’inverno).

Se c’è una pianta che negli ultimi anni è diventata una vera e propria “star” a livello mondiale, soprattutto nel settore dell’alimentazione, quella è la stevia (Stevia rebaudiana), originaria di una zona a cavallo del confine tra Paraguay e Brasile. Eppure, a vederla, non si direbbe di avere a che fare con una specie così importante dal punto di vista economico; si presenta come una delicata erbacea perenne, dalle foglie verdi di forma oblunga con il bordo leggermente seghettato e fiori molto piccoli di colore bianco. Chi è la stevia? Per quei pochi che ancora non la conoscono, diciamo solo che è una pianta “dietetica” e, per questo, oggi molto utilizzata dalle multinazionali coinvolte nel settore dell’alimentazione ed anche della salute umana in senso lato. E’ infatti ricchissima di zucchero, ma a basso “valore calorico”, per cui è adatto ai bambini, ai diabetici e a tutti coloro che hanno problemi di sovrappeso. Se nell’antichità alcune tribù d'Indiani del Sud America la utilizzavano per zuccherare cibi e bevande, oggi con la stevia si dolcificano caramelle, gomme da masticare, alimenti secchi e cereali, yogurt e gelati, marmellate, tè e sidro, dentifrici e collutori, preparati per dolci e torte salate (contribuisce ad attenuare il gusto sapido tipico della cultura agrodolce della cucina orientale); senza considerare che viene utilizzata per dolcificare molte bevande al posto dei comuni edulcoranti di sintesi (saccarina, aspartame, ecc.), perfino la Diet Coke. Ognuno di noi, più o meno consapevolmente, ha ingerito o ingerisce quotidianamente della stevia. Una stevia in giardino Una piantina così famosa non poteva non entrare a far parte della vasta e variegata offerta di “officinali”. Chi non vuole una star in giardino? I nostri produttori, ad esempio quelli liguri, la propongono perciò come esemplare in vaso, da mettere in un’aiuola o sul balcone, affiancandola alle comuni aromatiche (salvia, origano, basilico, timo, coriandolo, menta, ecc.), dato che con le sue foglioline fresche si possono preparare sorbetti e bevande molto gradevoli e “light”. Ma attenzione ai problemi infettivi, iniziando dalle malattie fungine, ad esempio la “muffa grigia” (o botrite) per poi passare a quelle virali. Se ad esempio, acquistando qualche esemplare di stevia, vi accorgete che sulle foglie sono presenti delle maculature gialle e/o biancastre, desistete. Quelle alterazioni cromatiche indicano che la pianta è infetta e che nel giro di pochi giorni disseccherà e morirà.

Dove sistemare una pianta in casa nei mesi più freddi? Quali fattori fra luce, umidità, calore e correnti d’aria, ne condizionano maggiormente la crescita? Rispondere adeguatamente non è facile, dato che ogni pianta ha proprie specifiche esigenze, per cui è più semplice dire cosa assolutamente non fare per evitare quelle spiacevoli sindromi dette “fisiopatie”. La regola fondamentale che vale per ogni stagione è questa: Nel disporre le piante d’appartamento nelle varie stanze, occorre tenere conto della loro adattabilità al luogo in cui si desidera sistemarle. Cosa non semplice, soprattutto se si tiene conto che la maggior parte di esse proviene da zone tropicali, quindi da climi molto umidi. Luce - Poiché le piante da interno nella stagione fredda sono ricoverate al chiuso, la luce deve essere quella sufficiente. L’ideale sarebbe disporle lontano da porte e finestre, magari al centro della stanza (cosa difficile da realizzare!) e dalle possibili correnti d’aria. Se proprio dobbiamo collocare un Ficus elastica vicino ad ampie vetrate, è bene che queste siano provviste di doppi vetri o di tendaggi che attenuino le radiazioni solari, altrimenti si rischia la formazione sulle foglie di antiestetiche ustioni marginali. Calore - Spesso, proprio sotto alle finestre sono collocate le principali fonti di calore: i termosifoni. Porre un F. benjamina accanto ad una finestra e un termosifone, vuol dire rendergli la vita impossibile: le foglie inizieranno inesorabilmente ad ingiallire e a cadere e, a distanza di poco tempo, la pianta sarà un arbusto semispoglio. In generale, tutti i Ficus si collocano in posizione illuminata, ma lontano sia dalla luce diretta, sia dalle fonti di calore, ricordando che alcune specie (F. diversifolia, F. pumila e F. radicans) possono crescere anche in luoghi molto ombreggiati. Anche le Calathea amano l’ombra e possono sopravvivere alla temperatura (T) di soli 10°C (ideale 13-16°C), ma hanno bisogno di una buona umidità atmosferica. Pure le Dieffenbachia possono vivere a T che non superano i 16°C (se inferiori, tendono a perdere le foglie più basse) e si annaffiano moderatamente in quanto i fusti principali sono soggetti a marciume. Se parliamo invece di Hibiscus perenni (H. militaris, H. mutabilis, H. roseus, ecc.) dobbiamo ricordare che queste piante mantengono le foglie nei mesi invernali se la T non scende sotto ai 16°C. Se superiore, alcune foglie certamente cadranno, ma tutto si risolverà in primavera, quando la pianta riprenderà la crescita, sollecitata da una mirata potatura dei rami. Piccoli inconvenienti, ma per fortuna rimediabili.

I virus Herpes simplex (HSV) 1 e 2, comunemente noti come herpes labiale e genitale, sono molto diffusi nella popolazione umana e la loro sieroprevalenza può arrivare fino al 90% in popolazioni sfavorite dal punto di vista socioeconomico. Le infezioni da HSV possono decorrere asintomatiche o essere gravissime, per esempio in ambito perinatale, nel soggetto immunodepresso, o quando coinvolgono l’encefalo. Più comunemente provocano lesioni dolorose e ricorrenti con un forte impatto negativo sulla vita di relazione dei pazienti. Non si dispone di un vaccino contro HSV, mentre i farmaci disponibili possono controllare le fasi acute dell’infezione ma non portano all’eradicazione dei virus. Inoltre il loro ampio uso favorisce l’insorgenza di ceppi resistenti, in particolare in pazienti immunocompromessi. E’ dunque importante individuare nuovi approcci di profilassi e/o terapia con l’intento di affiancare alle molecole in uso composti con meccanismi d’azione alternativi. Scopo. Valutare la capacità degli olii essenziali (OE) estratti da Monarda spp. di contrastare il ciclo vitale dei virus HSV-1 e HSV-2. Materiali e metodi. Cellule: abbiamo utilizzato la linea cellulare di astrocitoma U-373 MG per tutti gli esperimenti di infettività, mentre le line Vero (per HSV-1) e BHK (per HSV-2) sono state impiegate per la titolazione dei virus. I virus utilizzati sono stati un isolato clinico di HSV-1, il mutante replicazione competente K26GFP, che esprime la proteina fluorescente GFP e il ceppo di laboratorio HSV-2 (G). Infine sono stati impiegati OE di Monarda fistulosa, M. didyma e Melaleuca alternifolia. Saggi di attività antivirale sono stati effettuati nelle seguenti condizioni: (a) preincubazione virus/OE, (b) preincubazione monostrati cellulari con /OE, (c) aggiunta degli OE successiva all’adsorbimento virale su cellule preincubate con gli olii, (d) aggiunta degli OE dopo adsorbimento con virus preincubato con gli olii, (e) aggiunta degli OE subito dopo l’adsorbimento di virus. Le cellule venivano fissate ai tempi 3, 6, 9, 12, 18, 24 e 48 ore post infectionem. Il grado di replicazione virale veniva giudicato in confronto a cellule non trattate infettate con virus non trattato, osservando la comparsa di proteine virus specifiche o contando le placche da effetto citopatico. Risultati. Abbiamo osservato un forte effetto virucida degli OE delle due specie di Monarda su HSV-1 e 2, più potente di quello noto per M. alternifolia. Gli OE non sono invece in grado di contrastare la replicazione virale una volta che i virus siano penetrati nelle cellule. Conclusioni. Il potere virucida di questi OE si pone come un promettente presidio per prevenire l’infezione e contenere la diffusione del virus. La disponibilità di molecole in grado di agire su fasi distinte del ciclo replicativo virale offre la possibilità di ridurre le dosi dei farmaci utilizzati di concerto e la durata del trattamento, minimizzando i rischi d’insorgenza di virus resistenti e di effetti indesiderati.

The genetic variation and evolution of Cucumber mosaic virus (CMV) (1) infecting aromatic, medicinal and ornamental plants in Northern Italy were studied by sequence analysis of the movement protein gene and comparison with equivalent sequences of isolates from other countries. Comparison of nonsynonymous and synonymous substitutions at each codon suggested that 30% of amino acid sites were under negative selection and only one was under positive selection. Phylogenetic inference, nucleotide diversity estimation, neutrality tests and genetic differentiation analysis revealed a high nucleotide diversity of CMV in Northern Italy with respect to areas of other countries [1,2] and suggested that long distance migration plays a main role in the evolution and determination of the different genetic structures of this virus. 1. García-Arenal et al., 2000. Virus Res 71:1. 2. Lin H.X. et al., 2004. J Virol 78:6666.

Inula viscosa L. (Asteraceae) is a well-known perennial medicinal herb that grows wild in the Mediterranean area. Both folk and traditional medicines ascribe several uses to this plant, such as antipyretic, antiseptic, etc. In Spring 2007, almost 40% of I. viscosa plants cultivated at the Herb Garden “Augusto Rinaldi Ceroni “ of Casola Valsenio (Emilia Romagna, Italy) showed chlorotic mosaic on leaves. Symptomatic samples were collected and analysed. No spherical or elongated virus-like particles were observed by transmission electron microscopy in leaf extracts using a leaf dip method. By applying PAS-ELISA technique, Cucumber mosaic virus alone was detected in all symptomatic plants (more than 20) tested, using a polyclonal antiserum (PVAS 30, American Type Culture Collection, Manassas, VA, USA). CMV from I. viscosa leaves was mechanically transmitted to Nicotiana tabacum L. “Samsun”, which developed systemic mosaic symptoms. To confirm the association of CMV with the diseased plants, total RNA was extracted from the same samples (RNeasy Plant Mini Kit; Qiagen, Hilden, Germany) and analyzed by RT-PCR using CMV-specific primers MP+ and MP- (Lin et al., 2004). The expected 842 bp fragment was amplified only from samples of symptomatic tissue while no amplification product was observed when water or healthy plants were used as a template. RT-PCR products were cloned and sequenced. The sequence obtained (GenBank Accession No. EU432181) had 99% identity with CMV-TN (GenBank Accession No. AB176847) which induces tomato necrosis disease, and several other isolates of subgroup II. To our knowledge, this is the first report of CMV infecting I. viscosa and it adds a new host to the list of more than 1,000 species infected by this virus.

In April 2007, a severe disease occurred in Sicily (Italy) in a glasshouse cultivation of tenweeks stock belonging to the cultivar White-Beach. Plants were stunted and rosetted, and the flowers were of small size and characterized by virescence symptoms. Phytoplasma presence and identity was detected by applying PCR/RFLP techniques and sequencing of 16S ribosomal gene. Phytoplasmas were identified as belonging to ribosomal subgroup 16SrII-A, never reported before in Italy and showed 99% of homology with ‘Candidatus Phytoplasma aurantifolia’ and related phytoplasmas. This is the first report of a phytoplasma disease of tenweeks stock. Considering that this Brassicaceae ornamental species is widely grown in Italy, it could play an important role in spreading these phytoplasmas, new for Italy.