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Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq Obesity is an ever-increasing health concern of global importance. Despite that, treatment options remain limited leading to a constant search for therapies well tolerated and efficacious. Based on several biological actions described for diorganoyl diselenides, the objective of this thesis was to investigate the anorexigenic potential of diphenyl diselenide [(PhSe)2] and p-chloro-diphenyl diselenide [(p-ClPhSe)2] in rats. The results of the first protocol showed that the intraperitoneal administration of diselenides to rats produced an anorexigenic action and body weight reduction. The anorexigenic action induced by diselenides resulted in reduction of the frequency, mean duration and mean size of meals and was accompanied by a classic behavioral satiety sequence (BSS) profile with an earlier-than-normal onset of satiety. The findings suggest that diselenides caused a satiating action which was related to the hypothalamic serotonin uptake inhibition. Besides, the results of the second protocol revealed that dietary supplementation with (PhSe)2 and (p-ClPhSe)2 also reduced the food intake and body weight of rats. Anorexigenic action observed in rats exposed to diets supplemented with (p-ClPhSe)2 was dependent on the concentration used and previous experience. The first contact with a diet containing (p-ClPhSe)2 caused a satiating action characterized by an advance in the resting onset and preservation of the temporal components of BSS as well as reduction of the frequency, mean duration and mean size of meals. However, the second exposure to a diet containing (p-ClPhSe)2 caused pronounced changes in the meal pattern and BSS disruption, suggesting that it produces aversive effects. This hypothesis was confirmed trough a standard conditioned taste aversion test. Furthermore, preference by the control diet in a choice experiment suggests that (p-ClPhSe)2 can alter the food palatability. Thus, in addition to a satiating action, the anorexigenic action of (p-ClPhSe)2 seems to be related to the appearance of malaise and atypical taste. Lastly, findings of the third protocol demonstrated that acute anorexigenic action of (p-ClPhSe)2 can be related with reduction of hypothalamic expression of neuronal nitric oxide synthase and two orexigenic neuropeptides, melanin-concentrating hormone and orexin. A reduction of orexin levels was also found for repeated treatment with (p-ClPhSe)2. However, the repeated treatment with (p-ClPhSe)2 induced endoplasmic reticulum stress and apoptosis in hypothalamus and liver revealing its cytotoxic effect. Associated with these processes, alterations of protein content related with cell stress and survival/death events were found. In accordance with the results, (p-ClPhSe)2 caused a hypophagic action by exerting therapeutic actions but also by triggering toxic effects. In conclusion, data set of the present thesis demonstrates the anorexigenic and body weight reducing potential of (PhSe)2 and (p-ClPhSe)2 in rats. Moreover, the results suggest that (p-ClPhSe)2 reduces food consumption through multiple mechanisms including satiety induction, changes in the food palatability and appearance of malaise/toxicity. A obesidade é um crescente problema de saúde de importância global. Apesar disso, as opções de tratamento permanecem limitadas levando à constante busca por terapias bem toleradas e eficazes. Com base nas diversas ações biológicas descritas para os disselenetos de diorganoila, o objetivo desta tese foi investigar o potencial anorexígeno do disseleneto de difenila [(PhSe)2] e do 4,4’-dicloro-difenil disseleneto [(p-ClPhSe)2] em ratos. Os resultados do primeiro protocolo mostraram que a administração intraperitoneal dos disselenetos produziu uma ação anorexígena e redução do peso corporal. A ação anorexígena induzida pelos disselenetos resultou em redução da frequência, da duração média e do tamanho médio das refeições e foi acompanhada por um perfil clássico da sequência de saciedade comportamental (BSS) com um início mais precoce da saciedade. Os resultados sugerem que os disselenetos causaram uma ação saciante, a qual foi relacionada à inibição hipotalâmica da captação de serotonina. Além disso, os resultados do segundo protocolo revelaram que a suplementação dietética com o (PhSe)2 e o (p-ClPhSe)2 também reduziu o consumo de comida e o peso corporal dos ratos. A ação anorexígena observada em ratos expostos a dietas suplementadas com (p-ClPhSe)2 foi dependente da concentração usada e da experiência prévia. O primeiro contato com uma dieta contendo (p-ClPhSe)2 causou uma ação saciante caracterizada por um avanço no início do descanso e da preservação dos componentes temporais da BSS bem como por redução da frequência, da duração média e do tamanho médio das refeições. Entretanto, a segunda exposição à dieta contendo (p-ClPhSe)2 causou pronunciadas mudanças no padrão alimentar e desorganização da BSS, sugerindo que o composto produz efeitos aversivos. Esta hipótese foi confirmada através de um teste clássico de aversão condicionada ao gosto. Além disso, a preferência pela dieta controle em um experimento de escolha sugere que o (p-ClPhSe)2 pode alterar a palatabilidade da comida. Portanto, além de uma ação saciante, a ação anorexígena do (p-ClPhSe)2 parece estar relacionada ao aparecimento de mal-estar e gosto atípico. Por fim, os achados do terceiro protocolo demonstraram que a ação anorexígena aguda do (p-ClPhSe)2 pode estar relacionada à redução da expressão hipotalâmica da óxido nítrico sintase e de dois neuropeptídeos orexígenos, o hormônio concentrador de melanina e a orexina. Uma redução dos níveis de orexina também foi encontrada para o tratamento repetido com (p-ClPhSe)2. Entretanto, o tratamento repetido com (p-ClPhSe)2 induziu estresse de retículo endoplasmático e apoptose no hipotálamo e fígado dos ratos revelando o efeito citotóxico deste composto. Associado a estes processos, encontrou-se alterações no conteúdo de proteínas ligadas aos eventos de estresse e sobrevivência/morte celular. De acordo com os resultados, o (p-ClPhSe)2 causou uma ação hipofágica por exercer ações terapêuticas, mas também por gerar efeitos tóxicos. Em conclusão, o conjunto de dados da presente tese demonstra que o (PhSe)2 e o (p-ClPhSe)2 foram efetivos em causar ação anorexígena e redução do peso corporal em ratos. Além disso, os resultados sugerem que o (p-ClPhSe)2 reduziu o consumo de comida através de mecanismos múltiplos incluindo a indução de saciedade, mudanças na palatabilidade da comida e o aparecimento de mal-estar/toxicidade.

Oxidative stress has been implicated in the pathophysiology of several neurological diseases since the brain is an organ highly susceptible to oxidative damage. Temporal lobe epilepsy (TLE) has been widely studied due to the high prevalence rate and refractoriness to drug treatment. In addition, the ELT can be associated with psychiatric comorbidities, such as depression. Since many organoselenium compounds have antioxidant and neuroprotective properties, this study investigated the effects of 2,2'-dithienyl diselenide (DTDS) on seizures induced by kainic acid (KA), an experimental model of TLE, as well as its antioxidant potential in vitro and antidepressant-like activity in rats. The results showed that DTDS (100 mg/kg, per oral) reduced seizures induced by KA administration (10 mg/kg, intraperitoneal), which were demonstrated by behavioral tests and electroencephalographic analysis. The increase in the hippocampal content of reactive species and protein carbonylation as well as the stimulation of Na+ K+ ATPase activity caused by KA were reduced by DTDS (50 and 100 mg/kg). In addition, DTDS (100 mg/kg) protected against hippocampal degeneration resulting from exposure of rats to KA. DTDS, at low concentrations (μM range), reduced the content of reactive species, protein carbonylation and lipid peroxidation in rat brain homogenate in vitro and presented mimetic properties to dehydroascorbate (DHA) reductase and glutathione Stransferase (GST), important enzymes for antioxidant function. The results also revealed that DTDS was effective in inhibiting the activity of monoamine oxidase (MAO) A and B in rat brain homogenate in vitro (25-100 μM) and in causing a reduction on immobility time of rats in the forced swimming test (FST) (50 and 100 mg/kg, per oral). These findings suggest that DTDS produced an anticonvulsant action in the KA model and attenuated the subsequent oxidative damage and neuronal loss in hippocampus. Furthermore, the data showed that DTDS had antioxidant and MAO non-selective inhibitor effects in rat brain in vitro and antidepressant-like action in rats. Therefore, DTDS may be useful as a therapy for the treatment of comorbidity ELT/depression. O estresse oxidativo tem sido implicado na patofisiologia de diversas doenças neurológicas uma vez que o cérebro é um órgão altamente susceptível ao dano oxidativo. A epilepsia do lobo temporal (ELT) tem sido amplamente estudada devido à alta taxa de prevalência e refratariedade ao tratamento medicamentoso. Além disso, a ELT pode estar associada com comorbidades psiquiátricas, tais como a depressão. Tendo em vista que muitos compostos orgânicos de selênio apresentam propriedades antioxidantes e neuroprotetoras, este trabalho investigou os efeitos do 2,2 -disseleneto de ditienila (DSDT) sobre as convulsões induzidas por ácido caínico (KA), um modelo experimental de ELT, bem como seu potencial antioxidante in vitro e atividade do tipo antidepressiva em ratos. Os resultados mostraram que o DSDT (100 mg/kg, via oral) reduziu as convulsões induzidas pela administração de KA (10 mg/kg, intraperitoneal), as quais foram demonstradas a partir de testes comportamentais e análise eletroencefalográfica. O aumento do conteúdo hipocampal de espécies reativas e de carbonilação de proteínas bem como a estimulação da atividade da Na+ K+ ATPase causados pelo KA foram reduzidos por DSDT (50 e 100 mg/kg). Além disso, o DSDT (100 mg/kg) protegeu contra a degeneração hipocampal resultante da exposição de ratos ao KA. O DSDT em baixas concentrações (na faixa de μM) reduziu o conteúdo de espécies reativas, carbonilação de proteínas e peroxidação lipídica em homogenato de cérebro de ratos in vitro e apresentou propriedades miméticas à deidroascorbato (DHA) redutase e à glutationa Stransferase (GST), enzimas importantes para a função antioxidante. Os resultados também revelaram que o DSDT foi efetivo em inibir a atividade da monoamino oxidase (MAO) A e B em homogenato de cérebro de ratos in vitro (25-100 μM) e em causar uma redução no tempo de imobilidade de ratos no teste do nado forçado (TNF) (50 e 100 mg/kg, via oral). Estes achados sugerem que o DSDT produziu uma ação anticonvulsivante no modelo do KA e atenuou o subseqüente dano oxidativo e a perda neuronal em hipocampo. Além disso, os dados mostraram que o DSDT teve efeito antioxidante e inibidor não-seletivo da MAO em cérebro de ratos in vitro bem como ação do tipo antidepressiva em ratos. Portanto, o DSDT pode ser útil como uma terapia para o tratamento da comorbidade ELT/depressão.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Tamoxifen, a selective estrogen receptor modulator, the gold standard for adjuvant therapy of breast cancer, has dichotomous effects on memory, anxious- and depressive-like phenotypes described in the literature. Studies with intact female rats are necessary to understand Tamoxifen’s per se effects on a protocol that mimics humans’ therapy, 20 mg per day for 5 years. This dissertation evaluated Tamoxifen’s chronic effects on memory, anxious- and depressive-like phenotypes in intact female Wistar rats. In addition, to evaluate Tamoxifen’s effects on hippocampal mechanisms. Intact female Wistar rats (60 days) were treated with Tamoxifen (0.25 and 2.5 mg/kg) by the intragastric route for 59 days. After treatment, animals were subjected to behavioral tests, divided into two experimental sets. Subsequently, the animals were euthanized and samples of hippocampus, uterus, and plasma were collected. The results of manuscript I demonstrate that Tamoxifen at a dose of 0.25 mg/kg decreased animals’ performance in the object location test and in the short-term memory of the object recognition test. The decrease in the hippocampal levels of pro and mature brain-derived neurotrophic factor (BDNF) and the ratio of phosphorylated CAMP response element-binding (CREB) protein/total were found in rats treated with 0.25 mg. Tamoxifen at a dose of 2.5 mg/kg decreased animals’ performance in the object location test and in the object recognition test (short- and long-term memory), decreasing the hippocampal levels of BDNF, CREB, and the ratios of phosphorylated serine/threonine-protein kinase (ERK)/total and phosphorylated extracellular signal-regulated kinase (Akt)/total. Furthermore, levels of tropomyosin receptor kinase B (TRKB) were not altered by both Tamoxifen doses. The estrous cycle phases distribution was different only in the post-natal day 122 and the locomotor activity was not altered. The results of manuscript II reveal that the lowest Tamoxifen dose induced anxious-/depressive-like and apathy behaviors, and modulated hippocampal apoptosis, with increasing of Bcl-2 associated protein X (BAX) and p75 neurotrophin receptor p75NTR (pro-apoptotic proteins) and decreasing of B-cell lymphoma protein 2 (Bcl2) (anti-apoptotic proteins). The highest dose of Tamoxifen induced depressive-like, anhedonia, and apathy behaviors in female rats. This dose increased the levels of plasma corticosterone, hippocampal glucocorticoid receptor (GR), inhibitory protein kappa B alfa (IKKB), IKB kinase protein alpha (IKB), nuclear factor kappa B (NF-kB), cyclooxygenase2 (COX2), interleukin-1β (IL-1β), and inflammasome NLRP3). The levels of interleukin-10 (IL-10) were increased, but those of tumor necrosis factor alpha (TNFα) were not altered by both Tamoxifen doses. Tamoxifen at both doses altered locomotor activity of rats. The estrous cycle phases distribution was altered and uterus’ relative weight was decreased. In conclusion, Tamoxifen, in a dose-dependent manner, affected memory, anxious- and depressive-like phenotypes and hippocampal proteins. O Tamoxifeno, modulador seletivo do receptor de estrogênio padrão ouro para o tratamento adjuvante do câncer de mama, possui ações dicotômicas na memória, bem como nos fenótipos do tipo ansioso e depressivo descritos na literatura. Estudos com ratas intactas são necessários para compreender os efeitos do Tamoxifeno per se em um tratamento que mimetize a terapia utilizada em pacientes de 20 mg diários por 5 anos. Nesse sentido, o objetivo desta dissertação foi avaliar os efeitos crônicos do Tamoxifeno na memória, bem como nos fenótipos do tipo ansioso e depressivo em ratas jovens intactas. Ademais, objetivou-se elucidar mecanismos hipocampais relacionados aos efeitos do Tamoxifeno. Ratas Wistar intactas (60 dias) foram submetidas a um tratamento por 59 dias com Tamoxifeno (0,25 e 2,5 mg/kg) pela via intragástrica. Após o tratamento, os animais foram divididos em dois sets para realização dos testes comportamentais. Posteriormente, os animais foram eutanasiados, e amostras de hipocampo, útero e plasma sanguíneo foram coletadas. Os resultados do manuscrito I demonstram que a dose de 0,25 mg/kg diminuiu a performance dos animais no teste de localização do objeto e na memória de curta duração do teste de reconhecimento do objeto, bem como diminuiu os níveis hipocampais do fator neurotrófico derivado do encéfalo (BDNF) pró e maduro, e da razão da proteína de ligação ao elemento de resposta ao cAMP (CREB) fosforilada sobre a total. Quanto aos efeitos da dose de 2,5 mg/kg, destaca-se a diminuição da performance tanto no teste de localização como de reconhecimento do objeto (memória de curta e longa duração), além de diminuir BDNF, CREB e as razões da quinase regulada por sinal extracelular fosforilada (ERK) e da proteína quinase B fosforilada (Akt). Os níveis de receptor do tirosina-quinase B (TRKB) não foram alterados. A distribuição nas fases do ciclo estral mostrou-se diferente, apenas no dia pós-natal 122, e a atividade locomotora não foi alterada. Ademais, os resultados do manuscrito II mostraram que a dose menor induziu um comportamento do tipo ansioso e depressivo, bem como apatia, além de modular a apoptose hipocampal, com aumento da proteína x associada a Bcl2 (BAX) e o receptor de neurotrofina p75NTR (pró-apoptóticas), e a diminuição do conteúdo de proteína 2 do linfoma de células B (Bcl2) (anti-apoptótica). Entretanto, a dose maior induziu os fenótipos do tipo depressivo, anedonia e apatia, além de aumentar os níveis de corticosterona plasmáticos, dos receptores de glicocorticoide (GR) e de diversas proteínas da via inflamatória: Proteína Inibitória kappa B alfa (IKB), Proteína quinase alfa de IkB (IKKB), fator nuclear kappa B (NF-kB), Ciclooxigenase2 (COX2), Interleucina-1β (IL-1β) e inflamossoma NLRP3). Os níveis hipocampais de Interleucina-10 (IL-10) foram aumentados e os níveis do fator de necrose tumoral (TNFα) não foram afetados. O Tamoxifeno em ambas as doses alterou a atividade locomotora. A distribuição das fases do ciclo estral mostrou-se diferente, e o peso uterino relativo diminuído. Conclui-se que o Tamoxifeno afetou, de maneira dependente da dose, a memória e os fenótipos do tipo ansioso e depressivo, bem como proteínas hipocampais em ratas jovens intactas.

Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio Grande do Sul - FAPERGS Fatty acids (FA) are important constituents of neural phospholipid membranes playing essential roles in normal functions maintenance of the central nervous system (CNS). Therefore, qualitative and/or quantitative modifications of dietary FA may be responsible for triggering different diseases. In the last decades, changes in the heating habits favored the processed foods consumption, rich in trans FA (TFA). The TFA consumption have been related to several healthy problems, including cardiovascular diseases, anxiety and depression. Thereby, the interesterified fat (IF) is replacing the trans fat in foods, since this fat does not contain TFA. However, studies from our research group have shown that IF chronic consumption can cause damages to the CNS of rodents. Furthermore, literature data have also indicated the maternal diet influence on offspring health, suggesting that nutrition may be able to modify epigenetic information. The current study aimed to evaluate the influence of IF chronic consumption (gestation, lactation and until adulthood offspring) along with, throughout maternal life before mating, on the locomotor parameters and memory of the offspring. This study is based on the hypothesis that IF consumption at different stages of life could modify the FA incorporation in neural phospholipids membranes and alter the dopaminergic targets expression in the striatum, related to motor control and the hippocampus neurotrophins, related to memory. In experiment I, pregnant rats received IF during gestation and lactation and male offspring were maintained with the same maternal supplementation until adulthood. It was observed that IF consumption impair the pup’s motor control, whose damage remained until adulthood. Adult offspring showed increased SFA, palmitic acid and n-6/n-3 PUFA ratio incorporation, in addition to reduced DHA and MUFA incorporation in the striatum. The IF chronic consumption also reduced the DAT, D2R, VMAT-2 and GDNF immunoreactivity in the striatum. In experiment II, when only mothers were supplemented with IF before conception, it was observed that this fat consumption impaired exploratory and memory parameters, decreasing the palmitoleic acid incorporation and the proBDNF and BDNF immunoreactivity in the hippocampus of adult offspring. From this last experimental protocol, it is possible to propose that the maternal IF consumption before conception could induce epigenetic adaptions modifying the hippocampal gene expression which could be transmitted to the offspring resulting in the observed behavioral impairments and molecular alterations observed here. As a conclusion, it can be inferred that processed food consumption, rich in IF, during different periods, can favor the development of locomotor and memory impairments in the offspring. Based on these outcomes it is possible to propose that the type and/or quality of the FA consumed in diet is an important environmental risk factor that can alter the fluidity and plasticity of neural phospholipid membranes predisposing the offspring to neurological diseases. More studies are needed to evaluate other possible consequences of IF consumption on the CNS. Os ácidos graxos (AG) são importantes constituintes das membranas fosfolipídicas neurais desempenhando funções essenciais na manutenção do funcionamento normal do sistema nervoso central (SNC). Assim, modificações qualitativas e/ou quantitativas dos AG dietéticos podem ser responsáveis por desencadear diferentes doenças. Nas últimas décadas, mudanças nos hábitos alimentares favoreceram o consumo de alimentos industrializados, ricos em AG trans (AGT). O consumo de AGT tem sido relacionado ao desenvolvimento de problemas de saúde incluindo doenças cardiovasculares, ansiedade e depressão. Nesse sentido, a gordura interesterificada (GI) vem substituindo a gordura trans nos alimentos, já que ela não contém AGT. Porém, estudos do nosso grupo de pesquisa têm mostrado que o consumo crônico de GI pode causar danos ao SNC de roedores. Além disso, dados da literatura também têm indicado influências da dieta materna sobre a saúde dos descendentes, sugerindo que a nutrição pode ser capaz de modificar informações epigenéticas. O presente estudo teve como objetivo avaliar a influência do consumo crônico de GI (gestação e lactação até a idade adulta da prole), como também, ao longo da vida materna antes do acasalamento, sobre parâmetros de locomoção e memória da prole. Esse estudo baseia-se na hipótese de que o consumo de GI em diferentes etapas da vida poderia modificar a incorporação dos AG nas membranas fosfolipídicas cerebrais e alterar a expressão de alvos dopaminérgicos no estriado, relacionados ao controle motor e de neurotrofinas no hipocampo, relacionadas à memória. No experimento I, ratas prenhes receberam GI durante a gestação e lactação e os filhotes machos foram mantidos com a mesma suplementação materna até a idade adulta. Observou-se que o consumo de GI prejudicou o controle motor dos filhotes, cujos danos permaneceram até a idade adulta. Os filhotes adultos mostraram incorporação aumentada de AGS, ácido palmítico e da razão n-6/n-3 dos AGPI, além de redução na incorporação de DHA e dos AGMI no estriado. O consumo crônico de GI também reduziu a imunoreatividade do DAT, D2R, VMAT-2 e GDNF no estriado. No experimento II, quando somente as mães foram suplementadas com GI durante o período anterior à concepção, observou-se que o consumo dessa gordura prejudicou parâmetros exploratórios e de memória, diminuindo a incorporação do ácido palmitoleico e a imunoreatividade do pró-BDNF e BDNF no hipocampo da prole adulta. A partir desse último protocolo experimental, é possível propor que o consumo materno de GI antes da concepção poderia induzir adaptações epigenéticas modificando a expressão gênica do hipocampo, podendo ser transmitidas para a prole resultando nas alterações comportamentais e moleculares aqui observadas. Como conclusão, pode-se inferir que o consumo crônico de alimentos processados, ricos em GI, durante diferentes períodos pode favorecer o desenvolvimento de prejuízos locomotores e de memória na prole. Baseado nesses resultados é possível propor que o tipo e/ou qualidade do AG consumido na dieta é um importante fator de risco ambiental que pode alterar a fluidez e plasticidade das membranas fosfolipídicas neurais predispondo a prole a doenças neurológicas. Mais estudos são necessários a fim de avaliar outras possíveis consequências do consumo de GI sobre o SNC.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Addiction, which is characterized by the desire and the search for the drug, despite negative consequences, is a serious health problem, causing impairments to the individual, your family, and society. Thus, the developing of strategies to better understand neurobiological mechanisms related to this disorder are extremely relevant. Studies revealed that adverse experiences during the adolescence period could lead to neural circuit impairments facilitating neuropsychiatric disorders development, which could be manifested throughout life and even into adulthood. In this perspective, the inadequate use of licit prescribed psychostimulant drugs during adolescence has become a social concern nowadays. The objective of the current study was to evaluate the influence of modafinil (MOD) administration, a prescription drug, during adolescence on the conditioned place preference (CPP) for amphetamine (AMPH) in rats. The study is based on the hypothesis that prolonged MOD exposure during adolescence could modify the expression of molecular biomarkers related to memory (pro-BDNF, BDNF, Trk-B e GDNF) and targets of the mesolimbic dopaminergic pathway (D1R, D2R, DAT, TH e VMAT-2), affecting the cerebral oxidative status leading to behavioral alterations. From the pilot study (experimental protocol I), when we evaluate the MOD (64mg/kg p.o.) exposure influence on adolescent rats for 14 days, MOD improves short-term memory without causes changes in locomotor or anxiety parameters in the animals. Concerning the oxidative status, the MOD increased the catalase (CAT) activity decreasing oxidative damage markers in the prefrontal cortex, striatum and ventral tegmental área (VTA), as one exception the hippocampus, which MOD did not exert significative influence on the parameters evaluated. From the experimental protocol II, adolescent animals were exposed to MOD and consecutively conditioned with AMPH in the CPP paradigm in adulthood, when we observed that MOD reduced the preference for the drug, preventing locomotor alterations, anxiety-like symptoms, and memory impairments during withdrawal. MOD also showed antioxidant activity and beneficial influences on biomarkers related to memory (pro-BDNF, BDNF, and Trk-B), acting as a modulator of the hippocampal dopaminergic system (DAT, D1R, and D2R). The experimental protocol III was aimed to evaluate whether the same MOD beneficial influences would be repeated when these animals were AMPH-exposed still during adolescence. Again, MOD exposure reduced AMPH-CPP reducing the anxiety-like symptoms during withdrawal. Oxidative and molecular alterations in the dopaminergic system were observed in the VTA and striatum of this animals when MOD exerted an upregulation of striatal dopaminergic targets (TH, DAT, D1R, and D2R) after AMPH exposure, possibly preventing the decrease of dopamine levels during withdrawal and this could be reflected in the behaviors presented. From the experimental protocol IV, the MOD exposure occurred after AMPH-CPP was established, it was proposed as a treatment in the relapse. Such approach showed that MOD treatment prevented the AMPH relapse acting beneficially on memory. At the molecular level, the MOD caused beneficial changes in the dopaminergic system as well in neurotrophins related to the maintenance of this pathway upon AMPH exposure in the ventral striatum. In conclusion of these studies, it is possible to infer that MOD exerted beneficial behavioral effects on the preference and relapse for AMPH when administered during adolescence. Those behaviors occurred together with positive responses on oxidative status and molecular in brain areas related to addiction. So far, until this moment it is possible to propose that MOD could be acting as a modulator of the dopaminergic system against the damage caused by AMPH in rats. A adição, a qual é caracterizada pelo desejo e busca pela droga apesar das consequências negativas, é um grave problema de saúde pública causando prejuízos para o indivíduo, sua famíllia e para a sociedade. Dessa forma, o desenvolvimento de estratégias para o entendimento dos mecanismos neurobiológicos relacionados a esse transtorno são de extrema relevância. Estudos revelam que experiências adversas durante a adolescência, podem causar prejuízos aos circuitos neurais do indivíduo, facilitando o desenvolvimento de transtornos neuropsiquiátricos, que podem se manifestar ao longo da vida e até na idade adulta. Em vista disso, o uso inadequado de fármacos psicoestimulantes de uso lícito com prescrição médica durante a adolescência têm se tornado um assunto preocupante na sociedade atual. O presente estudo teve por objetivo avaliar a influência da administração de modafinil (MOD), um psicoestimulante de prescrição, durante a adolescência sobre a preferência de lugar condicionada (PLC) e sobre a recaída por anfetamina (ANF) em ratos. Tal estudo baseia-se na hipótese de que a exposição prolongada ao MOD durante a adolescência poderia modificar a expressão de biomarcadores relacionados à plasticidade sináptica (pro-BDNF, BDNF, Trk-B, GDNF), assim como, alvos da via mesolímbica dopaminérgica (D1R, D2R, DAT, TH, VMAT-2), afetando o status oxidativo cerebral em áreas mesocorticolímbicas, relacionadas com a recompensa e adição, resultando em alterações comportamentais. A partir de um estudo piloto (protocolo experimental I), Destinado a avaliar a influência da exposição de ratos adolescentes ao MOD (64mg/kg, per oral, p.o.) durante 14 dias, observou-se que o MOD melhorou a memória recente sem alterar parâmetros locomotores ou de ansiedade dos animais. Em relação ao status oxidativo, o MOD aumentou a atividade da catalase, e diminuiu marcadores de dano oxidativo no córtex préfrontal, estriado e área tegmental ventral (ATV), exceto no hipocampo, onde o MOD não exerceu influência significativa sobre os parâmetros avaliados. No protocolo experimental II, animais adolescentes foram expostos ao MOD e, posteriormente, condicionados com ANF no paradigma de PLC na idade adulta, quando observou-se que o MOD reduziu a preferência pela droga, prevenindo alterações locomotoras, sinais de ansiedade e prejuízos de memória recente no período de abstinência da droga. O MOD também mostrou atividade antioxidante e efeitos benéficos sobre os biomarcadores relacionados à memória (pro-BDNF, BDNF, Trk-B) agindo como um modulador do sistema dopaminérgico hipocampal (DAT, D1R e D2R). O protocolo experimental III foi realizado com o objetivo de verificar se as mesmas influências benéficas do MOD seriam observadas quando os animais fossem expostos à ANF ainda na adolescência. Novamente, a exposição ao MOD reduziu a PLC por ANF, reduzindo comportamentos de ansiedade durante a abstinência da droga. Alterações do status oxidativo e moleculares no sistema dopaminérgico foram observadas na ATV e estriado desses animais, quando o MOD exerceu uma suprarregulação de alvos estriatais dopaminérgicos (TH, DAT, D1R e D2R) após a exposição à ANF, possivelmente prevenindo a redução nos níveis de dopamina durante a retirada da droga, o que pode ter sido refletido sobre os comportamentos apresentados. No protocolo experimental IV, a exposição ao MOD ocorreu após a PLC por ANF já estar estabelecida, assim o MOD foi proposto como um tratamento à recaída. Tal abordagem mostrou que o MOD preveniu a recaída pela ANF agindo beneficamente sobre a memória. Em nível molecular, o MOD causou alterações benéficas tanto no sistema dopaminérgico como em neurotrofinas relacionadas a manutenção dessa via, no estriado ventral, após a exposição à ANF. Como conclusão desses estudos, é possível inferir que o MOD exerceu efeitos comportamentais benéficos frente à preferência e à recaída por ANF quando administrado durante a adolescência, os quais ocorreram juntamente a respostas positivas sobre o status oxidativo e molecular em áreas cerebrais relacionadas à adição. Até o presente momento é possível propor que o MOD poderia estar agindo como um modulador do sistema dopaminérgico frente ao dano causado pela ANF em ratos.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES The excessive exposure to a range of sunlight corresponding to UVB range (ʎ = 280-320 nm) and UVA (ʎ = 320-400 nm) is the main cause of human skin damage. These changes are attributed to damage to biomolecules such as lipids, proteins and DNA. To date, the use of sunscreens is considered the most effective approach to avoid and attenuate the harmful effects of UV radiation on skin. However, the sunscreen formulations have limitations regarding their photostability, effectiveness and safety by users. In this context, benzofuranoazepine class has chemical characteristics with potential for the absorption of UV radiation. In addition, the application of nanotechnology in sunscreens is promising because it is able in modulate the limitations of formulations. Therefore, the aim of this study was to screen benzofuroazepine compound with a broad-spectrum absorption profile in the UVB and UVA ranges. Aiming at selecting the molecule with the highest photoprotective potential the UV absorption spectrum profile of three compounds (10μg/mL) was assessed. Polymeric nanocapsules containing the selected compound (3mg/mL) were developed and characterized in terms of size, polydispersity index, pH, zeta potential and compound content. In addition, the toxicity of the free or nanoencapsulated compound forms and the influence of nanoencapsulation in UV light absorptive/scatter properties of compound were evaluated. In a subsequent step the hydrogels containing nanocapsule suspensions were proposed using gellan gum as a thickening agent. The in vitro photoprotective potential of the hydrogels was evaluated by the their ability to attenuate the generation of damages to the DNA molecule exposed to UVB and UVA light. The nanocapsule suspensions containing the selected compound had appropriate physicochemical characteristics (nanometric and homogeneous size distribution) and increased the UV light scattering in comparison to free compound. Hydrogels presented slightly acidic pH values, compound content of 3mg/g in the formulation, particle size in the nanometric range and spreadability profiles suitable to cutaneous application. All hydrogels containing the selected compound were effective against DNA damage induced by the UVB and UVA radiation. In conclusion, the present study showed the identification of a compound with potential for UV light absorption and the preparation of a nanotechnological-based hydrogel for cutaneous application. A exposição excessiva a uma faixa de luz solar correspondente a faixa UVB (ʎ = 280-320 nm) e UVA (ʎ = 320-400 nm) é a principal causa dos danos na pele humana. Essas alterações são atribuídas a danos em biomoléculas, como lipídeos, proteínas e ao DNA. Atualmente, o uso de protetores solares é considerado a ferramenta mais eficaz para evitar e atenuar os efeitos nocivos da radiação UV na pele. No entanto, essas formulações possuem limitações quanto à sua estabilidade, eficácia e aceitabilidade pelos usuários. Considerando esses aspectos, são necessárias abordagens inovadoras para melhorar a eficácia dos filtros solares, bem como novas moléculas com propriedades de absorção da luz UV. Neste contexto, a classe das benzofuroazepinos possui características estruturais com potencial para a absorção da radiação UV. Além disso, a aplicação da nanotecnologia em formulações fotoprotetoras é promissora porque é capaz de contornar as limitações descritas para esses agentes. Portanto, essa dissertação buscou explorar o potencial de absorção da luz UV de compostos pertencentes à classe dos benzofuroazepinos e, a partir do espectro de absorção, selecionar um composto com o melhor perfil de absorção entre os comprimentos de correspondentes a faixa UVB e UVA. Com o objetivo de selecionar o composto mais promissior, espectros de absorção na faixa UV de três compostos (10μg/mL) foram realizados. Nanocápsulas poliméricas contendo o composto selecionado (3mg/mL) foram desenvolvidas e caracterizadas em termos de tamanho, índice de polidispersão, pH, potencial zeta e conteúdo de composto. Além disso, foi avaliado a toxicidade do composto na sua forma livre ou nanoencapsulada e a influência da nanoencapsulação nas propriedades de absorção/reflexão da luz UV in vitro. Posteriormente, um hidrogel contendo as nanocápsulas foi formulado utilizando goma gelana como agente espessante. O potencial fotoprotetor in vitro dos hidrogéis foi mensurado pela sua capacidade em atenuar a geração de danos à molécula de DNA exposta a luz UVB e UVA. As suspensões de nanocápsulas contendo o composto selecionado apresentou características físico-químicas apropriadas. Hidrogéis apresentaram valores de pH próximos levemente ácidos, teor de compostos próximo ao valor teórico (3 mg / g), tamanho de partícula na faixa nanométrica e perfil de espalhamento adequado para aplicação cutânea. Todos os hidrogéis contendo o composto selecionado foram eficazes contra a formação de danos a molécula de DNA induzidos pela exposição a fontes de radiação UVB e UVA. Em conclusão, o presente estudo mostrou a identificação de um composto com potencial de absorção da luz UV e a preparação de um hidrogel de base nanotecnológica para a aplicação cutânea.