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Copyright © 2022 Sociedade Portuguesa de Cardiologia. Publicado por Elsevier España, S.L.U. All rights reserved. INTRODUCTION: Coronary artery disease (CAD), characterized by an atherogenic process in the coronary arteries, is one of the leading causes of death in Madeira. The GENEMACOR (GENEs in MAdeira and CORonary Disease) study sought to investigate the main risk factors - environmental and genetic - and estimate whether a genetic risk score (GRS) improves CAD prediction, discrimination and reclassification. METHODS: Traditional risk factors and 33 CAD genetic variants were considered in a case-control study with 3139 individuals (1723 patients and 1416 controls). The multivariate analysis assessed the likelihood of CAD. A multiplicative GRS (mGRS) was created, and two models (with and without mGRS) were prepared. Two areas under receiver operating characteristic curve (area under curve (AUC)) were analyzed and compared to discriminate CAD likelihood. Net reclassification improvement (NRI) and integrated discrimination index (IDI) were used to reclassify the population. RESULTS: All traditional risk factors were strong and independent predictors of CAD, with smoking being the most significant (OR 3.25; p

Copyright © 2022. Publicado por Elsevier España, S.L.U. The Publisher regrets that this article is an accidental duplication of an article that has already been published, 10.1016/j.repc.2022.10.005. The duplicate article has therefore been withdrawn. The full Elsevier Policy on Article Withdrawal can be found at https://www.elsevier.com/about/our-business/policies/article-withdrawal. proof epub_ahead_of_print

Peripheral blood is the most practical biospecimen to obtain information for clinical and research purposes, as a source of cells and metabolites. It is widely known that different blood collection conditions, including anticoagulants and the time between blood collection and processing, influence leukocyte phenotype and function. Buffy coats are commonly used in immunological research as a source of leukocytes. They are residual products of healthy donor whole blood units processing. The preservative solution present in buffy coats is Citrate- Phosphate-Dextrose (CPD), in which citrate is the anticoagulant. There is a lack of information on the possible difference in the functionality of leukocytes isolated from buffy coats compared to leukocytes isolated from blood collection tubes with anticoagulants. This project aimed to study the influence of the blood collection condition, namely the anticoagulants, on peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) function, phenotype, and viability. Monocytes (CD14+ cells) and T lymphocytes were the PBMCs studied. The blood collection conditions tested were buffy coats, which are generated from a blood bag collected approximately 20 h before the experiments, ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA), CPD supplemented with adenine (CPDA), and sodium citrate-containing tubes. Monocyte function was investigated by the capacity to present antigens and the lysosomal activity since this organelle is important for antigen presentation. The lysosomal function was analyzed by the b-glucosidase activity and the general lysosomal activity. The monocyte capacity to present antigens was analyzed through lipid antigen presentation to invariant Natural Killer T (iNKT) cells. iNKT cells are activated by lipids bound to CD1d, a non-polymorphic MHC-class I-like molecule, present on the surface of antigen-presenting cells. The fact that these cells are restricted to a non-polymorphic molecule makes them more practical to use in assays with different donors than conventional T lymphocytes. This work was conducted using two different approaches, initially with blood collected from different donors, that had high inter-donor variability, therefore in the consecutive experiments blood was collected from the same donor. This implied that there was a 20 h wait after blood collection, before cell isolation, with a fixed time for the buffy coat and the collection of blood from tubes. The results showed that monocytes isolated from EDTA blood tubes have a lower capacity to present lipid antigens to iNKT cells than monocytes isolated from buffy coats. No differences were found between monocytes isolated from sodium citrate or CPDA and the ones isolated from buffy coats. This was accompanied by a decrease in the viability and in the efficiency of isolation of CD14+ cells of the EDTA-isolated monocytes. Flow cytometry analysis of the expression of the surface markers CD1d and CD86 showed a higher expression of these markers for monocytes isolated from EDTA than those isolated from buffy coats. In contrast, no difference in cytokine production upon T lymphocyte activation was observed with PMA/ionomycin stimulation, in cells isolated from buffy coats, EDTA, and sodium citrate-containing tubes. In conclusion, EDTA-containing blood tubes are not the ideal choice of anticoagulant for monocyte antigen presentation assays. T lymphocyte functional assays seem to be less sensitive to the alterations in blood collection conditions. We advise that the blood collection condition and the time between biospecimen collection and analysis should be carefully considered when designing experimental procedures. O sangue periférico é a amostra biológica mais prática de obter informações para fins clínicos e de investigação, servindo como fonte de células e de metabolitos. Sabe-se que diferentes fatores na colheita de sangue, como anticoagulantes e o tempo entre colheita e processamento, influenciam o fenótipo e a função dos leucócitos. Os buffy coats são produtos residuais do processamento de unidades de sangue-total de dadores saudáveis, comumente usados em investigação na área da Imunologia como fonte de leucócitos. A solução preservante presente nos buffy coats é o Citrato-Fosfato-Dextrose (CPD), em que o citrato atua como composto anticoagulante. Não existe conhecimento sobre a possível diferença na funcionalidade de leucócitos isolados de buffy coats quando comparados com leucócitos isolados de tubos de colheita de sangue com anticoagulantes. Este projeto teve como objetivo estudar a influência do tipo de colheita de sangue, nomeadamente, os anticoagulantes, na função, fenótipo e viabilidade das células mononucleares do sangue periférico (PBMCs). Os monócitos (células CD14+) e linfócitos T foram as PBMCs estudadas. As condições de colheita de sangue testadas foram buffy coats, que são gerados a partir de um saco de sangue colhido aproximadamente 20 h antes das experiências, e tubos contendo ácido etilenodiamino tetra-acético (EDTA), CPD suplementado com adenina (CPDA) ou citrato de sódio. A função dos monócitos foi investigada pela sua capacidade de apresentar antigénios e pela sua atividade lisossomal, uma vez que a ação deste organelo é importante na apresentação de antigénios externos. A função lisossomal foi analisada pela atividade da β-glicosidase e pela atividade lisossomal geral. A capacidade de apresentação dos monócitos foi analisada através da apresentação de antigénios lipídicos a células Natural Killer T invariantes (iNKT). Estas células são ativadas por lípidos ligados ao CD1d, uma molécula tipo complexo principal de histocompatibilidade (MHC) classe I não polimórfica, presente na superfície de células apresentadoras de antigénios. O facto destas células serem restritas para uma molécula não polimórfica torna-as mais práticas para ensaios com dadores diferentes do que outros tipos celulares, como linfócitos T convencionais. Este projeto usou duas abordagens diferentes, pois inicialmente o sangue foi colhido de dadores diferentes, que apresentavam elevada variabilidade inter-dador, logo, nas experiências seguintes, o sangue foi colhido do mesmo dador. Isto implicou um tempo de espera de 20 h entre a colheita e o isolamento das células, com tempo fixo para os buffy coats e os tubos de colheita de sangue. Os resultados mostraram que monócitos isolados de tubos de colheita de sangue com EDTA como anticoagulante têm menor capacidade de apresentar antigénios lipídicos às células iNKT do que monócitos isolados de buffy coats. Não foram encontradas diferenças na capacidade de apresentação entre monócitos isolados de citrato de sódio ou CPDA e os monócitos isolados de buffy coats. Isto foi acompanhado por uma diminuição na viabilidade e na eficiência de isolamento de células CD14+ colhidas com EDTA como anticoagulante. A análise por citometria de fluxo dos marcadores de superfície CD1d e CD86 revelou uma maior expressão destes marcadores em monócitos isolados com EDTA do que em células isoladas de buffy coats. Em contraste, não foram observadas diferenças na ativação de linfócitos T pela produção de citocinas após estimulação com PMA/ionomicina em células isoladas de buffy coats, e tubos de sangue com EDTA e citrato de sódio. Com estes resultados, pode-se concluir que tubos de sangue contendo EDTA não são a melhor escolha como anticoagulante para ensaios de apresentação de antigénios por monócitos. Os ensaios funcionais com linfócitos T parecem ser menos sensíveis às alterações nas condições de colheita. É aconselhável que as condições de colheita e o tempo entre a colheita e a análise da amostra biológica sejam cuidadosamente escolhidas ao definir desenhos experimentais no futuro. Mestrado em Biomedicina Molecular

Publisher Copyright: © The Author(s) 2021. Evidence points epicardial adipose tissue (EAT) as an emerging cardiovascular risk marker. Whether genetic polymorphisms linked with atherosclerosis are associated with higher EAT is still unknown. We aim to assess the role of genetic burden of atherosclerosis and its association to EAT in a cohort of asymptomatic individuals without coronary disease. A total of 996 participants were prospectively enrolled in a single Portuguese center. EAT volume was measured by Cardiac Computed Tomography and participants were distributed into 2 groups, above and below median EAT. SNPs were genotyped and linked to their respective pathophysiological axes. A multiplicative genetic risk score (mGRS) was constructed, representing the genetic burden of the studied SNPs. To evaluate the association between genetics and EAT, we compared both groups by global mGRS, mGRS by functional axes, and SNPs individually. Individuals above-median EAT were older, had a higher body mass index (BMI) and higher prevalence of hypertension, metabolic syndrome, diabetes, and dyslipidemia. They presented higher GRS, that remained an independent predictor of higher EAT volumes. The group with more EAT consistently presented higher polymorphic burden across numerous pathways. After adjustment, age, BMI, and mGRS of each functional axis emerged as independently related to higher EAT volumes. Amongst the 33 SNPs, MTHFR677 polymorphism emerged as the only significant and independent predictor of higher EAT volumes. Patients with higher polymorphism burden for atherosclerosis present higher EAT volumes. We present the first study in a Portuguese population, evaluating the genetic profile of EAT through GWAS and GRS, casting further insight into this complicated matter. publishersversion published

Dissertação de Mestrado Integrado em Arquitetura, com a especialização em Arquitetura apresentada na Faculdade de Arquitetura da Universidade de Lisboa para obtenção do grau de Mestre. Submitted by Inês Monteiro (inesmonteiro@fa.ulisboa.pt) on 2019-06-17T09:55:14Z No. of bitstreams: 1 SofiaBorges_PFM_o-envelhecimento-ativo-como-matriz-para-a-arquitetura.pdf: 9219252 bytes, checksum: 66f601b7696c0a26f7402e39278f4753 (MD5) Made available in DSpace on 2019-06-17T09:55:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 SofiaBorges_PFM_o-envelhecimento-ativo-como-matriz-para-a-arquitetura.pdf: 9219252 bytes, checksum: 66f601b7696c0a26f7402e39278f4753 (MD5) Previous issue date: 2018-12-12 N/A

Dissertação de Mestrado Integrado em Arquitetura, com a especialização em Arquitetura apresentada na Faculdade de Arquitetura da Universidade de Lisboa para obtenção do grau de Mestre. O Trabalho Final de Mestrado incide sobre as problemáticas com que nos deparamos quando chegados à velhice. Com o aumento da esperança média de vida, a nossa sociedade procura cada vez mais alternativas de cariz habitacional para os seus idosos, onde os cuidados são garantidos, mas a privacidade e independência do individuo são as palavras-chave. Deste modo, o acompanhar da evolução dos tempos obriga à procura de novos modos de habitar, criando-se um desafio à arquitetura com o aparecimento de novos programas. Surge assim este projeto, que tem por base uma reflexão acerca das ligações entre o espaço arquitetónico e a cura, e de que forma o ambiente pode influenciar o bem-estar individual e o atraso do processo de envelhecimento. A investigação procurou sempre basear-se em terapias não farmacológicas de forma a incentivar o Envelhecimento Ativo, meta dada pela Organização Mundial de Saúde como sendo o principal objetivo da sociedade envelhecida atual. Desde o programa funcional da quinta Molha-Pão aos pormenores dos quartos individuais, a reflexão acerca do quotidiano do idoso-residente foi uma constante, assim como uma condição de projeto. A concretização destes objetivos é realizada através de um projeto de traço contemporâneo, mas com fundações nas linhas existentes da quinta, respeitando a memória do lugar e revitalizando assim a quinta Molha-Pão, em Belas, Sintra, dando resposta a uma lacuna da sociedade, nomeadamente a escassez deste género de equipamentos. ABSTRACT: The Master’s Final Project here presented focuses on the problems we face when reaching an elderly age. With the increase of average life expectancy, our society is looking for housing alternatives for its’ older generations, where care is guaranteed, but at the same time privacy and independence of the individuals are the main ideas. Thus, keeping up with the evolution of times forces the need for investigation of new ways of dwelling, creating a challenge to architecture, with the emergence of new architectural programs, such as a Senior Residence. This project is based on a contemplation on the links between architectural space and healing, and how the environment can influence individual well-being and the delay of the aging process. The research was based on non-pharmacological therapies in order to encourage Active Aging, an objective given by the World Health Organization as one of the main goals to be achieved by the current society. From the functional program of the quinta Molha-Pão, to the details of the individual’s bedrooms, we can see a deep reflection on the resident’s daily life, as both a constant and a condition of architectural design. These objectives are embodied in a project with contemporary signature, but also with foundations in the existing lines of the farm, in order to respect the memory of the place. With this we are able to revitalize quinta Molha-Pão, in Belas, Sintra, with the added benefit of solving a need of the society, namely the scarcity of this kind of programs. N/A

Introduction: To assess the cost-effectiveness of adalimumab versus supportive care in the treatment of adults with active moderate to severe hidradenitis suppurativa who have had an inadequate response to or are intolerant of conventional systemic therapy in Portugal. Methods: A Markov model with 5 health states (high response, response, partial response, non-response, or death) and 4-week cycles was developed to estimate long-term effectiveness and cost of treating patients with adalimumab versus supportive care. Data from head-to-head clinical trials (PIONEER I and II) were used to estimate transition probabilities and utilities. Resource use was characterized by Portuguese experts’ panel. Unitary costs were extracted from national official sources and expressed in 2015 euros. Incremental cost per quality adjusted life years gained was estimated for a lifetime horizon in the societal perspective, assuming a 3.5% annual discount rate for costs and consequences. Deterministic and probabilistic sensitivity analyses were performed. Results: From the societal perspective, for a lifetime horizon, the model predicted a cost of €241,957 for adalimumab and €223,903 for supportive care, resulting in 12.32 and 11.55 quality adjusted life years (QALY), respectively. Thus, the incremental cost-effectiveness ratio is estimated to be €23,332/QALY gained (or €35,225/QALY from the Portuguese National Health System perspective). Patients receiving adalimumab incurred more treatment costs (+€39,243), partially offset by less direct medical costs (-€13,130) and indirect costs (-€7,877) than patients receiving supportive care. In deterministic sensitivity analyses, incremental cost-effectiveness ratios ranged between €1,347 (0% discount) and €42,465 (utilities’ assumption). The probability of adalimumab’s cost-effectiveness was 61.2% for a willingness-to-pay threshold of €30,000 and 78% for €50,000. Conclusion: Adalimumab is the first and only drug approved by the European Medicines Agency for Hidradenitis Suppurativa and its cost-effectiveness in Portugal is demonstrated in this economic analysis., Revista Portuguesa de Farmacoterapia / Portuguese Journal of Pharmacotherapy, v. 10 n. 1 (2018): Janeiro

Background: Genetic risk score can quantify individual’s predisposition to coronary artery disease; however, its usefulness as an independent risk predictor remains inconclusive. Objective: To evaluate the incremental predictive value of a genetic risk score to traditional risk factors associated with coronary disease. Methods: Thirty-three genetic variants previously associated with coronary disease were analyzed in a case-control population with 2,888 individuals. A multiplicative genetic risk score was calculated and then divided into quartiles, with the 1st quartile as the reference class. Coronary risk was determined by logistic regression analysis. Then, a second logistic regression was performed with traditional risk factors and the last quartile of the genetic risk score. Based on this model, two ROC curves were constructed with and without the genetic score and compared by the Delong test. Statistical significance was considered when p values were less than 0.05. Results: The last quartile of the multiplicative genetic risk score revealed a significant increase in coronary artery disease risk (OR = 2.588; 95% CI: 2.090-3.204; p < 0.0001). The ROC curve based on traditional risk factors estimated an AUC of 0.72, which increased to 0.74 when the genetic risk score was added, revealing a better fit of the model (p < 0.0001). Conclusions: In conclusion, a multilocus genetic risk score was associated with an increased risk for coronary disease in our population. The usual model of traditional risk factors can be improved by incorporating genetic data. Resumo Fundamento: O escore de risco genético pode quantificar a predisposição do indivíduo em desenvolver doença arterial coronariana; no entanto, sua utilidade como preditor de risco independente permanece inconclusiva. Objetivo: Avaliar o incremento no valor preditivo de um escore de risco genético aos fatores de risco tradicionais associados à doença arterial coronariana. Métodos: Trinta e três variantes genéticas previamente associadas à doença arterial coronariana foram analisadas em uma população caso-controle com 2888 indivíduos. Um escore de risco genético multiplicativo foi calculado e dividido em quartis, com o 1º quartil como a classe de referência. O risco coronário foi determinado por análise de regressão logística. Uma segunda regressão logística foi realizada com fatores de risco tradicionais e o último quartil do escore de risco genético. Com base nesse modelo, duas curvas ROC foram construídas com e sem o escore de risco e comparadas pelo teste de DeLong. A significância estatística foi considerada quando os valores de p eram inferiores a 0,05. Resultados: O último quartil do score de risco genético multiplicativo revelou um aumento significativo no risco de doença arterial coronariana (OR = 2,588; IC 95%: 2,090-3,204; p < 0,0001). A curva ROC baseada nos fatores de risco tradicionais estimou uma AUC de 0,72, que aumentou para 0,74 quando o score de risco genético foi adicionado, revelando um ajuste melhor do modelo (p < 0,0001). Conclusões: Em conclusão, um escore de risco genético com múltiplos loci foi associado a um risco aumentado de doença coronariana na nossa população. O modelo usual de fatores de risco tradicionais pode ser melhorado pela incorporação de dados genéticos.

Introdução: Os polimorfismos que interferem no balanço de sódio e água a nível do rim têm sido descritos na literatura como associados ao aumento do risco de Hipertensão arterial essencial (HTE), sendo os polimorfismos da alfa aducina (ADD1 G460W) e o do Canal epitelial do sódio (SNN1 A173G) dos mais estudados. No entanto poucos estudos há, que estudem o sinergismo entre eles no risco de HTE.Objectivos: Com o presente trabalho pretendemos avaliar se existe sinergismo de dois polimorfismos que interferem no balanço de sódio e água no risco de aparecimento de hipertensão arterial.Métodos: Com uma amostra de 1614 indivíduos com idade média de 50,6 ± 8,2, foi efectuado um estudo caso/controlo consoante apresentavam ou não HTE. Obtivemos um grupo de 817 hipertensos e outro de 797 controlos. Todos os indivíduos colheram sangue para exames bioquímicos e genéticos tendo sido avaliados em ambos os grupos, os polimorfismos ADD1 (G460W) e SNN1G (A173G). As variáveis contínuas foram apresentadas pela respetiva média ± DP. Calculamos o odds ratio caso/controlo e respectivos intervalos de confiança a 95% de cada uma das variantes individualmente. Associamos a variante genética da ADD1 (W460W) com a do canal epitelial de sódio SNN1G G173G) e foi calculado o odds ratio e intervalos de confiança a 95% desta associação. A análise dos dados foi feita através da utilização do software estatístico SPSS for Windows versão 19.0. Usamos como limiar de significância o valor de p < 0,05.Resultados: O genótipo W460W da alfa aducina foi mais frequente no grupo dos hipertensos em relação aos controlos (odds ratio 2,50 (IC95% 1,19-5,24; p = 0,016). O genótipo G173G do polimorfismo do canal epitelial do sódio não teve significância estatística entre ambos os grupos (odds ratio 0,98 (IC95% 0,75-1,28; p = 0,882). Quando associamos as duas variantes genéticas e calculamos o risco de ter HTE, obtemos significância estatística e com odds ratio de 6,43 (IC95% 1,45-28,57; p = 0,005). Conclusões: Concluímos que o polimorfismo ADD1 (G460W) é factor de risco de aparecimento de HTE, com significância estatística e o SNN1G (A173G) só por si não se associa ao aparecimento de HTE. Mas quando associamos estes dois polimorfismos o risco de HTE aumenta (OR de 6,4). Estes resultados levam-nos a concluir que a HTE não é explicada de forma simples com um único polimorfismo, já que existem efeitos sinérgicos entre os genes que favorecem o desenvolvimento da mesma info:eu-repo/semantics/publishedVersion

Os factores de risco cardiovascular, a idade e a prediposição genética interagem na fisiopatogénese da Doença Coronária (DC) Precoce. Pretende-se avaliar a associação dum Score Genético Multiplicativo (SGM) com DC, e estudar a distribuição dos FRCV e a idade de acordo com a informação genética. MÉTODOS: O estudo populacional GENEMACOR inclui 2888 participantes, com idade média de 53,0±7,9 anos, 77,8% do sexo masculino divididos entre 1566 doentes com Doença Coronária documentada por angiografia e 1322 controlos equiparados por grupo etário e sexo. A genotipagem e determinação da frequência alélica do alelo menor nos participantes foram realizadas para 33 variantes genéticas para DC com recurso a primers específicos e com a técnica TaqMan (Applied Biosystems). Foram calculadas as associações com DC de acordo com os decis do score genético multiplicativo (SGM). Foram determinados os respectivos OR e IC. Fez-se uma análise multivariada do SGM e FRCV. RESULTADOS: A mediana do SRG na população foi de 0,36 (0,04-9,29) (5ºdecil). Não se detectaram diferenças quanto à mediana do SGM entre o sexo masculino (0,41 (0,03 – 7,74)) e feminino (0,43 (0,04 – 9,29)), p=0,725 nem nos diferentes grupos etários (p=0,304). O grupo mais jovem apresentou menos FRCV (1.76) do que o grupo mais idoso (2,20, p>0,0001). Os participantes do 1º decil de SGM estavam geneticamente protegidos para DC (OR 0,62 IC 0,439-0,853, p=0.004). Apartir do 6º decil do SGM encontraram-se OR crescentes para DC. Os doentes no 10º decil do SGM apresentaram OR de 2,472 (1,75-3,48) p

Estima-se que 50% da etiopatogénese da DC possa ser explicada por factores genéticos. A história familiar de Doença Coronária precoce tem sido utilizada como marcador equivalente de predisposição genética para DC. Pretende-se avaliar se a associação da HF de DC precoce, aos FRCV e ao Score de Risco Genético aumenta o poder preditor basal. Métodos: Em 2888 participantes no estudo GENEMACOR foi investigada a HF. Os FRCV foram determinados de acordo com os standards Internacionais. O SGM individual foi determinado pelo produto dos OR das 33 variantes genéticas estudadas associadas com a DC. Foram desenhadas as curvas ROC (Receiver Operating Curves) e calculadas as AUC (Areas Under Curve). A percentagem de doentes reclassificados foi calculada com recurso ao NET RECLASSIFICATION INDEX. A comparação das curvas AUC foi feita com recurso ao teste de DeLong. Resultados: A AUC para a HF foi de 0,556, para os FRCV foi de 0,738 e para o SGM foi de 0,606. A associação do SGM com FRCV demonstrou incremento preditivo com elevação da AUC para 0,758; p

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária, Ciências Veterinárias A retenção placentária é uma das principais causas da ocorrência de problemas reprodutivos e metabólicos numa exploração de bovinos leiteiros, causando dificuldades económicas pela diminuição na fertilidade e produção leiteira. Embora seja uma patologia com etiologia multifatorial, existem várias consideráveis/predisponentes. Com este estudo pretendeu-se analisar a influência de diversos fatores sobre a incidência de retenção placentária (RP) em explorações localizadas na Ilha de São Miguel (Açores). Entre os fatores em análise foram incluídos o tipo de parto, o sexo dos vitelos e o nível produtivo da fêmea, entre outros. As sequelas da retenção placentária sobre a eficiência reprodutiva dos animais foram ainda explorados, tendo em conta as particularidades de maneio usados na região. Podemos observar que nem todos os animais com RP são objeto de acompanhamento veterinário, se bem que quase todos são submetidos a tratamento realizado pelo proprietário ou pelo técnico de inseminação, que inclui tanto a administração de vitaminas e minerais como, por vezes, mesmo a lavagem uterina. Neste trabalho incluímos 82 vacas, primíparas e multíparas, com idades compreendidas entre os 24 meses e 14 anos, sujeitas a exame médico-veterinário a pedido do proprietário a tempos diferentes após a ocorrência do parto (entre as 24 horas e mais de 10 dias). A RP ocorreu tanto após um parto eutócico (n=38) como distócico (n=44). Apesar do aumento numérico do IEP pós-RP, não foram encontradas diferenças significativas entre os IEP registados antes e após a ocorrência de RP, embora não fosse possível comparar este intervalo para todos os animais em estudo. Observou-se também um aumento significativo no intervalo parto/1ª IA, que se traduziu num aumento de até 24 dias, dependendo da classe de produção leiteira. Embora se acompanhasse de um ligeiro acréscimo do intervalo parto/IA fecundante, a diferença não foi significativa, tal como observado para o nº de IA/fecundação, foram necessárias mais 0,7 IA em média para obter uma gestação. Em parte, estes resultados podem estar relacionados com o número de animais primíparos que contribuíram para a análise dos parâmetros reprodutivos pós-RP e ainda o nº de animais multíparos refugados (n=9) ou que morreram (n=9) na sequência da retenção placentária. Dados os encargos económicos que acompanham esta perda de eficiência reprodutiva, torna-se necessário sensibilizar os proprietários para a necessidade de implementação de medidas de prevenção a nível da exploração e à correção precoce do problema. Retained placenta is a major cause for the metabolic and reproductive occurrences in dairy farming, raising economic costs for a decrease in fertility and milk production. Although it is a disease of multifactorial etiology, it presents several predisposing factors. With this study we sought to study the influence of management and biological factors on the incidence of retained placenta (RP) in farms located on the island of Sao Miguel (Azores). Among them, there were included in the analysis the type of delivery, the sex of calves and the level of productive female, among others. Sequelae retained placenta on reproductive performance of animals was still analyzed, taking into account the particularities of management strategies used in this region. We could observe that not all animals with RP were submitted to clinical evaluation by the practitioner, though almost all animals were submitted to some sort of treatment performed either by the owner or the Insemination technician, which included both the administration of vitamins and minerals even the uterine washing. This work included 82 cows undergo a medical examination at the request of the veterinarian-owner, at different times after the occurrence of birth that ranged between 24 hours and 10 days. The group included animals primiparous and multiparous, aged between 24 months and 14 years and in that RP occurred after a normal (n = 38) or dystocic (n = 44) delivery. Despite register you a numerical increase of DBP (days between parturitions) post-RP, no significant differences were found between the recorded before and after the occurrence of RP, although it was not possible to compare this range for all animals under study. There was also a significant increase in birth interval / 1st AI, which resulted in an increase of up to 24 days, depending on the class of variable milk production. Although it accompany a slight increase in the interval calving to fertilizing, the difference was not significant, as observed for the number of AI, despite being required plus 0.7 AI average for a pregnancy. In part, these results may be related to the number of animals primiparous who contributed to the analysis of reproductive parameters post-RP and still no animals multiparous culled (n = 9) or died (n = 9) following the retention placental. Given the economic burdens that accompany this loss of reproductive efficiency, it is necessary to sensitize owners need to implement preventive measures at farm level and to fix the problem early.

Introdução – Apesar dos avanços conseguidos na prevenção e intervenção do acidente vascular cerebral, este continua a ser a condição mais prevalente e com maior impacto na sociedade, com alterações significativas no estado de saúde dos indivíduos. Os processos de reabilitação continuados têm-se mostrado bastante eficazes na recuperação da independência funcional destes doentes. Assim o objectivo geral deste estudo consiste em avaliar o nível de independência funcional, e os factores determinantes nesses níveis, em doentes sujeitos a programas de reabilitação continuados e doentes sem reabilitação. Métodos – Efetuou-se um estudo do tipo transversal, analítico-correlacional, de natureza quantitativa e de cariz descritivo, no qual participaram 80 doentes, 40 dos quais integrados em processos continuados de reabilitação. A recolha de dados foi efetuada através de um questionário composto por questões de caracterização sociodemográfica, de caracterização clinica, uma escala de APGAR Familiar e uma Escala de Medida de Independência funcional (MIF). Resultados – As evidências encontradas neste estudo, demonstram que o nível de independência funcional é mais elevado na sua generalidade na amostra de indivíduos sujeitos a processos de reabilitação. As variáveis que influenciaram significativamente a independência funcional, foram a idade (no grexp em todas as dimensões, no grcont nos cuidados pessoais, comunicação e comportamento social), estado civil ( em ambos os grupos nas dimensões de cuidados pessoais e controle de esfíncteres, e no grcont ainda na mobilidade, comunicação e comportamento social), habilitações académicas ( grexp em todas as dimensões, no grcont apenas na comunicação),prática de exercício físico( grexp nas dimensões de cuidados pessoais, controle de esfíncteres e comportamento social), a localização do AVC ( grexp na dimensão de mobilidade e comportamento social), a frequência do AVC (grexp. em todas as dimensões excepto controle de esfíncteres). Conclusão – As variáveis clinicas e sociodemográficas exercem uma maior influencia na independência funcional, quando testadas dimensão a dimensão. Face ao supracitado, podemos concluir que o programa de reabilitação, exerce um papel fulcral na independência funcional do doente, pelo que este deve ser iniciado o mais precoce possível e continuado de forma sistemática. Palavras-chave: Acidente Vascular Cerebral, Fatores de risco, determinantes, Reabilitação e Independência Funcional. ABSTRACT Introduction – Despite the numerous advances in prevention and management of the cerebral vascular accidents (stroke), this is still the most prevalent condition with great impact on the Portuguese society, generating significant changes in the health status of these individuals. The aim of this study was to evaluate the level of functional independence, to identify the factors that influence it and its correlation with demographic and clinical variables comparing the difference in the level of functional independence of patients undergoing rehabilitation and patients that did not undergo this process. Methods – We conducted in 80 patients a cross-sectional, analytic, correlational, quantitative and descriptive study. Half of these patients were integrated into a rehabilitation process and the other half was used as control group. Regarding to data collection, we used a questionnaire of sociodemographic characterization, a questionnaire of clinical characterization, APGAR Family scale, Measure of Functional Independence Scale – (MIF). Results – The indications that can be found in this study show that the level of functional independence is, in general, higher in the sample of individuals undergoing a rehabilitation process. The variables that significantly influenced functional independence, were age (in the experimental group (grexp) in all dimensions, in control group (grcont) personal care, communication and social behavior), marital status (in both groups in the dimensions of personal care and sphincter control, and grcont in mobility, communication and social behavior), educational attainment (grexp in all dimensions, in grcont only in communication), physical exercise (grexp in the dimension of personal care, sphincter control and social behavior), location of the stroke (grexp dimension in mobility and social behavior), the frequency of strokes (grexp. in all dimensions except sphincter control). Conclusion – The sociodemographic and clinical variables apply a greater influence on functional independence, when tested in each dimension. Given the information above, we can conclude that rehabilitation plays a central role in the patient's functional independence, and it should be initiated as early as possible and continued vigorously. Keywords: Cerebral Vascular Accident (Stroke), Risk Factors, Functional Independence.

BACKGROUND: The control of malaria, caused by Plasmodium falciparum, is hampered by the relentless evolution of drug resistance. Because artemisinin derivatives are now used in the most effective anti-malarial therapy, resistance to artemisinin would be catastrophic. Indeed, studies suggest that artemisinin resistance has already appeared in natural infections. Understanding the mechanisms of resistance would help to prolong the effective lifetime of these drugs. Genetic markers of resistance are therefore required urgently. Previously, a mutation in a de-ubiquitinating enzyme was shown to confer artemisinin resistance in the rodent malaria parasite Plasmodium chabaudi. METHODS: Here, for a mutant P. chabaudi malaria parasite and its immediate progenitor, the in vivo artemisinin resistance phenotypes and the mutations arising using Illumina whole-genome re-sequencing were compared. RESULTS: An increased artemisinin resistance phenotype is accompanied by one non-synonymous substitution. The mutated gene encodes the μ-chain of the AP2 adaptor complex, a component of the endocytic machinery. Homology models indicate that the mutated residue interacts with a cargo recognition sequence. In natural infections of the human malaria parasite P. falciparum, 12 polymorphisms (nine SNPs and three indels) were identified in the orthologous gene. CONCLUSION: An increased artemisinin-resistant phenotype occurs along with a mutation in a functional element of the AP2 adaptor protein complex. This suggests that endocytosis and trafficking of membrane proteins may be involved, generating new insights into possible mechanisms of resistance. The genotypes of this adaptor protein can be evaluated for its role in artemisinin responses in human infections of P. falciparum.

A malária é um dos problemas mais graves de saúde pública em todo o mundo, afectando anualmente a vida de milhões de pessoas. O uso extensivo de antimaláricos, tais como a cloroquina e mefloquina, levou ao aparecimento de parasitas Plasmodium falciparum resistentes, impactando negativamente os esforços globais para o controlo da doença. Por esta razão, o controlo da malária depende de terapias de combinação baseadas em artemisinina (ACTs) que incluem mefloquina-artesunato, amodiaquina-artesunato e lumefantrina-artemeter. Torna-se assim necessário e urgente adquirir conhecimento sobre os mecanismos envolvidos na resistência aos antimaláricos, de modo a abrandar ou evitar a evolução da resistência, no intuito de prolongar a eficácia dos antimaláricos actualmente usados e desenvolver novas terapias. Neste contexto, foram utilizadas neste trabalho ferramentas de genética e genómica aplicadas ao modelo de malária de roedores Plasmodium chabaudi, no intuito de identificar os determinantes genéticos de resistência aos diferentes componentes de ACTS. Inicialmente, a progenia não clonada obtida de um cruzamento genético previamente efectuado entre o clone resistente à mefloquina, AS-15MF e um clone sensível geneticamente distinto, AJ, foi seleccionada com uma dose de mefloquina aqui optimizada. A progenia resultante foi cruzada novamente com o AJ e o producto obtido foi analisado por Linkage Group Selection (LGS) de modo a investigar as assinaturas de selecção após tratamento com a cloroquina (CQ), mefloquina (MF), lumefantrina (LM) ou artemisinina (ART). Adicionalmente, as alterações genéticas acumuladas no clone AS-15MF foram identificadas por re-sequenciação do genoma inteiro, através da tecnologia Solexa. Os resultados obtidos mostraram que a MF, LM e ART seleccionam parasitas contendo um segmento duplicado no cromossoma 12, que translocou para o cromossoma 4. A análise da leitura de sequências por Solexa revelou uma duplicação da cobertura estendendo-se por >392 kb e contendo cerca de 112 genes, includindo o gene de multi-resistência (mdr1) codificante da P-glicoproteína 1. O fragmento translocado foi mapeado com precisão no cromossoma 4. Adicionalmente, os antimaláricos, MF and ART, geraram também assinaturas de selecção no cromossoma 2, onde está contida uma mutação numa desubiquitinase, codificada pelo gene ubp1. Deste modo, estes dados constituem uma demonstração clara e directa que a resistência aos componentes de ACT, quimicamente distintos, pode ser determinada pelo(s) mesmo(s) gene(s), realçando a possível limitação destas terapias. Adicionalmente, uma única mutação no clone AS-15MF, foi identificada em um gene codificante de uma putativa lisina descarboxilase. Esta mutação não é seleccionada marcadamente pela MF e não segrega com a resposta à MF na progenia clonada do cruzamento genético entre os clones AS-15MF e AJ, indicando que não está directamente associada ao fenótipo de resistência da mefloquina. Malaria is by far one of the most severe public health problems worldwide, devastating the lives of millions of people each year. The extensive use of antimalarial drugs such as chloroquine and mefloquine, has led to the acquisition of drug resistance by Plasmodium falciparum, severely curtailing global efforts to control malaria. For this reason, much hope is now laid on new therapeutic approaches based on the use of artemisinin-based combination therapies (ACTs), which include mefloquine-artesunate, amodiaquine-artesunate and lumefantrine-artemether. A better understanding of the underlying mechanisms of drug resistance is therefore imperative to slow or circumvent the evolution of resistance, to prolong the life span of the current drugs and to develop new drugs. In this context, genetic and genomic tools were applied here to the rodent malaria model Plasmodium chabaudi, to exploit the genetic determinants of resistance to different component drugs of ACTs. First, the uncloned progeny of a genetic cross between a mefloquine-resistant mutant (AS-15MF) and a genetically distinct sensitive clone (AJ) was selected with an optimized dose of mefloquine. The progeny obtained was then backcrossed here with AJ and the resulting product analysed by Linkage Group Selection (LGS) to define the signatures of selection arising after treatment with chloroquine (CQ), mefloquine (MF), lumefantrine (LM) or artemisinin (ART). Additionally, the critical genome-wide changes accumulated in AS-15MF were identified by Solexa whole genome re-sequencing. Results showed that MF, LM and ART selected parasites bearing a duplicated segment on chromosome 12 which has translocated onto chromosome 4. Solexa sequence read-coverage analysis showed that this duplicated fragment extends for >392 kb and contains about 112 genes, including mdr1, the gene encoding the multi-drug resistance P-glycoprotein. The translocated fragment was precisely mapped on chromosome 4. MF and ART also generated selection signatures on chromosome 2, containing a mutation in a deubiquitinating enzyme, encoded by the ubp1 gene. Unambiguous evidence is thus provided for the first time to demonstrate that resistance to chemically distinct components of ACTs share the same underlying genes, highlighting a possible limitation of these therapies. Furthermore, a single mutation, unique to AS-15MF, was identified in a gene encoding a putative lysine decarboxylase. This mutation is not markedly selected by MF and it does not segregate with MF responses in the progeny clones of the genetic cross between AS-15MF and AJ, implying that it is not directly associated with the MF resistance phenotype.