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Objetivos: Relatar um caso de tromboses arterial e venosa em paciente com Doença de Kawasaki (DK), evidenciando a importância do acompanhamento de pacientes com tal condição para prevenção de eventos trombóticos. Materiais e métodos: Relato de caso. Resultados: M.C.C.O, sexo feminino, evoluindo com febre por 6 dias, descamação em mãos e pés, hiperemia ocular, erupções cutâneas em áreas de fralda e abdômen, além de leucocitose e plaquetose ao hemograma, diagnosticada com Síndrome de Kawasaki aos 3 meses. Realizado ecocardiograma, com evidência de aneurismas importantes de coronárias direita (15,4 mm) e esquerda (tronco: 7,3 mm, circunflexa: 2,8 mm e descendente anterior: 7,1 mm). Realizada infusão de imunoglobulina em 2 dias, pulsoterapia com metilprednisolona e iniciado Ácido Acetilsalicílico (AAS) em dose de 50 mg/kg/dia. Após novo ecocardiograma e piora de aneurisma, optado por anticoagulação com enoxaparina 1 mg/kg de 12/12h, além de nova antiagregação com clopidogrel 0,2 mg/kg/dia. Recebeu alta hospitalar com anticoagulação, dupla antiagregação, prednisolona 2 mg/kg, porém, após 3 meses, paciente evoluiu com trombose de coronária direita. Mesmo com uso de tais medicações, em doses otimizadas, paciente evoluiu, ainda, aos 8 meses com trombose venosa de veia axilar direita, com resolução após 6 meses, mantendo aneurisma de veia axilar. Discussão: A DK é uma vasculite sistêmica aguda que afeta principalmente crianças menores de cinco anos. Ela é caracterizada por febre persistente, exantema, linfadenopatia cervical, alterações nas extremidades, conjuntivite bilateral não purulenta e alterações orais, como lábios rachados e língua de framboesa. Embora a causa exata da DK permaneça desconhecida, acredita-se que uma combinação de fatores genéticos e ambientais esteja envolvida. A inflamação intensa das artérias de médio calibre, característica da DK, pode predispor os pacientes ao desenvolvimento de trombose. As artérias coronárias são frequentemente afetadas, podendo levar à formação de aneurismas e, consequentemente, a eventos trombóticos coronarianos, o que pode resultar em infarto do miocárdio. Além das complicações arteriais, há relatos de eventos trombóticos venosos em pacientes com DK. A hipercoagulabilidade associada à inflamação sistêmica e às alterações endoteliais pode aumentar o risco de trombose venosa. Casos de Trombose Venosa Profunda (TVP) e embolia pulmonar foram documentados, embora sejam menos comuns do que as complicações arteriais. O manejo da DK geralmente inclui Imunoglobulina Intravenosa (IVIG) e aspirina em altas doses durante a fase aguda para reduzir a inflamação e prevenir a formação de aneurismas coronarianos. No entanto, o uso prolongado de aspirina em doses menores também visa prevenir eventos trombóticos, tanto arteriais quanto venosos. A dupla antiagregação associada à anticoagulação é utilizada em casos de aneurismas gigantes associados à trombose. Conclusão: A Doença de Kawasaki está associada a um risco aumentado de trombose arterial e venosa devido à inflamação intensa e à hipercoagulabilidade. A identificação precoce e o manejo adequado da DK são essenciais para minimizar essas complicações e melhorar os desfechos a longo prazo para os pacientes.

Introdução: A doença linfoproliferativa pós transplante (PTLD) consiste na ocorrência precoce ou tardia de linfoma em pacientes imunossuprimidos após o transplante de órgãos sólidos ou medula óssea. Com o aumento do número de transplantes, maior sobrevida dos transplantados e novas medicações imunossupressoras, a doença tem aumentado sua prevalência, tendo muitas vezes desfechos desfavoráveis. Relato do caso: Trata-se de paciente de 14 anos, com transplante renal prévio há 09 anos e em uso de imunossupressão com Tacrolimus e Azatioprina. Evoluiu com comprometimento visual e massas abdominais. Em avaliação complementar com PET SCAN localizados nódulos hepático, subcutâneo torácico, abdominal e pulmonar, além de captações hipermetabólicas em linfonodos cervicais e tonsilas faríngeas. Exame oftalmológico mostrou infiltrado Anatomapatológico de linfonodo abdominal confirmatório e IHQ: doença linfoproliferativa polimórfica originando-se em desregulação/deficiência imune; cd20, pax5, cd30,bcl-2, ebv-lmp. ki67 20,0%. Investigada infecção concomitante pelo Epstein- Barr vírus (EBV), paciente com PCR positivo ao diagnóstico. Inicialmente conduzido pela nefrologia com suspensão da Azatioprina e redução de 50% da dose do Tacrolimus, posteriormente trocado por Sirolimus. Diante de ausência de resposta terapêutica paciente foi encaminhada ao serviço de Hematologia Pediátrica. Conduzida com monoterapia com 4 ciclos semanais de Rituximab, seguido de consolidação com 4 doses de Rituximab com intervalo de 3 semanas entre elas. Mantido Sirolimus em dose mínima durante todo o tratamento, em acompanhamento conjunto com a nefrologia. Obteve resposta completa, Petscan realizado 1 mês após término de consolidação com Rituximab, com resolução também completa de lesões oculares apresentadas ao diagnóstico, em seguimento e sem recaída há 8 meses. Discussão: A PTLD pode ocorrer de maneira precoce ou tardia após transplante de medula óssea ou de órgãos sólidos, destacando- se transplantes hepáticos, cardíacos e pulmonares. Além disso é observada estreita relação com infecção ou reativação de Epstein-Barr vírus (EBV), que em momento de imunossupressão e ineficaz ação dos linfócitos T, gera um microambiente favorável para multiplicação desordenada de Linfócitos B. O tratamento ainda não é claramente estabelecido, encontrando- se na literatura a medida inicial de redução ou retirada dos imunossupressores, pesando o risco de perda do transplante. Na ausência de resposta à redução/suspensão de imunossupressão, é proposto tratamento em monoterapia com Rituximab ou sua associação com quimioterapia sistêmica (RCHOP ou REPOCH). A avaliação da eficácia da associação de antiretrovirais ainda está em estudo para pacientes com PCR para EBV positivo ao diagnóstico. A resposta ao Rituximab é relacionada à expressão de CD20 nas células tumorais. A ressecção cirúrgica está reservada para casos específicos com risco de perfuração ou obstruções. Conclusão: PTLD é uma grave complicação em pacientes pós-transplante que estão em uso de imunossupressores. Com o aumento do número de casos torna-se extremamente relevante o estudo e o conhecimento da doença e de seus tratamentos.

Objetivos: Relatar o caso de criança com sintomas iniciais inespecíficos diagnosticada com Early T-cell precursor Leucemia Linfoblástica Aguda (ETP-LLA) de evolução rápida para insuficiência hepática e renal. Material e métodos: Relato de caso. Resultados: Criança de 12 anos com febre, dor abdominal de início em 05/05/24. Exames 07/05: Hg 12,7 Htc 38,7 LT 10590 (S 67,2% L22%) Plq 377000 Cr 0,43 GGT21 TGO 26 TGP21,1 Lipase23,3 Amilase58 BT0,13 BD0,09. Ultrassom e TC de abdome: linfadenite mesentérica. Internada em 14/05 por piora da dor, vômitos, distensão abdominal, adinamia, hiporexia e febre sem foco definido. Sorologias negativas. Ressonância de abdome (23/05/24): alterações típicas sugestivas de esquistossomose, ascite e derrame pleural. Com epidemiologia positiva recebeu Praziquantel e prednisona 40 mg. Evoluiu com colestase, aumento de transaminases, gânglios cervicais e leucocitose (30/5/24) Hg 10,5 Htc 30,8 LT 53 000(S61% L33%La2%) FBN363 Cr0,6 BT 10,4 BD 8,3. Admitido no Hospital Vila da Serra Oncoclinicas (BH) em 01/06, após resultado de imunofenotipagem de sangue perifeirco com 19% blastos LLA T. A dose da prednisona foi aumentada para 60mg/m²/dia em 02/06. Exames de medula óssea (03/06/24): 46 XY [17]. Imunofenotipagem: Linfoblastos T: CD2++—+++, cyCD3-—+ (40,0%), CD4+ (fraco), CD7++, CD13++ (71,3%), CD33-—+ (21,0%), CD38-—+ (37,8%), CD45+—++eHLA-DR+—++(77,2%). Marcadores negativos: CD1a, CD3, CD5, CD8, CD10, CD16, CD19, CD20, CD22, CD34, CD45RA, CD56, cyCD79a, CD99, CD117. IMPRESSÃO: 15,6% de Linfoblastos T com CD4 fraco, CD13, CD33 e HLA-DR e ausência de CD5 e CD8. Em insuficiência hepática, renal e aumento progressivo dos leucócitos, paciente foi a óbito em 06/06 antes de receber a primeira dose de quimioterapia sistêmica. Discussão: A ETP-LLA é um subtipo distinto da LLA T com um imunofenótipo e perfil genético únicos: CD1a e CD8 negativos, expressão ausente ou fraca de CD5 e presença de um ou mais marcadores mieloide. As mutações somáticas são semelhantes às envolvidas na leucemia mieloide aguda como mutações em DNMT3A e FLT3. O curso clínico é agressivo e o tratamento de pacientes com ETP-ALL é desafiador. Dados pré-clínicos demonstraram que a ETP-LLA é intrinsecamente mais resistente a glicocorticoides do que a LLA-T o que corrobora a ausência de resposta inicial à prednisona no paciente deste relato. Acredita-se que a dexametasona durante a terapia de indução possa ser elevante para a ETP-LLA. Com base na compreensão da patogênese molecular, venetoclax e ruxolitinibe foram revelados como tratamentos eficazes para ETP-LLA em modelos pré-clínicos. As terapia que incorporam daratumumabe, venetoclax, bortezomibe ou de alvo molecular devem ser consideradas. Conclusão: Pacientes com ETP-LLA necessitam precisão no diagnóstico e tratamentos inovadores com imunoterapias e medicamentos de alvo molecular para alcançar resultados satisfatórios.

Objetivos: Relatar um caso de anemia hemolítica em lactente. Materiais e métodos: Relato de caso. Descrição do caso: M.E.D.S, 4 meses, sexo feminino, com quadro de síndrome gripal. Evoluiu com anemia importante (Hb 4,0, sem outras alterações nos exames coletados), sendo internada em Unidade de Terapia Intensiva (UTI) para investigação. Acompanhada pela hematologia pediátrica, realizou prova cruzada para transfusão de hemácias, sendo constatada intensa hemólise em amostra coletada. Paciente permaneceu estável hemodinamicamente durante toda internação, não necessitando de hemotransfusão, sendo optado por tratamento com corticóide, após coleta de outros exames laboratoriais e de imagens para diagnóstico diferencial. Paciente apresentou melhora da anemia, recebendo alta com Hb 8, em condições de continuidade de acompanhamento ambulatorial com hematologista pediátrico. Foi iniciada investigação ambulatorial para possíveis causas do quadro, sendo constatada deficiência de vitamina B12 nos exames e teste positivo para Epstein-Barr Virus (EBV). Discussão: A anemia é definida pela redução dos níveis séricos de hemoglobina (Hb) abaixo da quantidade mínima necessária para atender as necessidades fisiológicas para a idade, sexo e altitude. Dentre suas causas, destaca-se a anemia hemolítica autoimune (AHAI), que reduz a sobrevida dos glóbulos vermelhos à medida que aumenta sua destruição. A AHAI é definida como a presença de autoanticorpos contra antígenos das células precursoras dos glóbulos vermelhos, provocando aumento de hemólise. Seu diagnóstico é feito através da dosagem de produtos metabólicos da hemólise no sangue e, clinicamente, cursa com sintomas como icterícia, esplenomegalia e palidez cutânea. O tratamento depende da gravidade de apresentação do quadro, podendo variar de suporte clínico até transfusão sanguínea. No caso em questão, foi possível observar a presença de autoanticorpos na amostra de sangue coletada e, considerando a ausência de repercussão hemodinâmica na paciente em questão, foi optado pelo uso de corticóide, com objetivo de reduzir a resposta orgânica contra as hemácias e evitar sua destruição. Conclusão: Anemia é queixa frequente no consultório. Apesar de não ser a causa mais frequente, a AHAI deve ser considerada como hipótese diagnóstica devido ao seu potencial de gravidade nessa faixa etária. Dentre as causas da AHAI, destaca-se as infecções virais, como aquelas causadas pelo EBV, que podem iniciar apenas com sinais de anemia, sendo os sintomas infecciosos de início tardio, demandando acompanhamento adequado de cada caso para terapêutica específica. Nos casos com queda significativa de Hb (abaixo de 7,0 mg/dL), é importante a monitorização hemodinâmica do paciente, com extensão propedêutica e avaliação contínua de necessidade de hemotransfusão.

Objetivos: Relatar um caso de trombose venosa profunda em paciente com atrofia medular espinhal, ressaltando a importância do acompanhamento criterioso destes pacientes, objetivando a prevenção de intercorrências. Materiais e métodos: Relato de caso. Descrição do caso: Paciente de 13 anos, 37kg, cadeirante, portadora de Atrofia Medular Espinhal (AME) tipo 2 e escoliose grave, foi admitida em hospital com queixa de edema em membro inferior esquerdo por três dias. Ao exame físico, a panturrilha encontrava-se edemaciada, dolorosa à palpação, sem empastamento e com pulsos distais preservados. Durante a internação foi confirmada a suspeita de TVP extensa em MIE, em segmentos femoro/poplíteos, por meio do exame duplex scan venoso. A paciente não utilizava anticoncepcional oral e não apresentava fatores de risco adicionais associados ao evento. O tratamento escolhido foi a Enoxaparina 40 mg de 12/12 horas, por ser uma droga segura para adolescentes de baixo peso. Após alta hospitalar, a paciente manteve uso da medicação por 6 meses contínuos, com realização de dupplex venoso de controle, com resolução de trombose venosa profunda. Optado por manter anticoagução profilática devido ao risco aumentado de eventos trombóticos. Discussão: A atrofia muscular espinhal (AME) é uma doença neurodegenerativa de origem genética caracterizada por fraqueza e atrofia muscular simétrica e progressiva. Essa condição está correlacionada a maior risco de trombose venosa profunda (TVP) devido ao aumento da estase sanguínea, pela redução da mobilidade. Conforme explicitado pela tríade de Virchow a trombose venosa é resultado de um dos seguintes fatores: alterações do fluxo sanguíneo (estase), dos constituintes do sangue e lesão endotelial. O paciente que vive com AME tipo 2 apresenta funções motoras gravemente comprometidas, não desenvolve as habilidades de ficar em pé e andar e, com a evolução da doença, há perda da capacidade de se sentar de forma independente. Assim, a imobilização prolongada favorece a estase venosa e constitui um importante fator de risco para TVP. Conclusão: Devido ao maior risco de desenvolvimento de eventos trombóticos e tendo em vista suas possíveis complicações, como embolização para coração, pulmão e Sistema Nervoso Central, torna-se imprescindível que pacientes diagnosticados com AME realizem acompanhamento precoce com hematologista.

Objetivos: Relatar um caso de hemoglobinopatia C em associação à beta talassemia. Materiais e métodos: Relato de caso. Descrição do caso: F.B.M.R, 11 anos e 7 meses, sexo feminino. Compareceu à consulta com Hematologista Pediátrica para avaliação de anemia microcítica e hipocrômica detectada em hemograma de rotina. Paciente sabidamente portadora de Hemoglobinopatia C, diagnosticada no teste do pezinho, ainda recém-nascida. Foi realizada Cinética do Ferro, inicialmente, que apresentou resultados dentro dos valores de referência. Para seguimento da propedêutica foi solicitada eletroforese de hemoglobina, que constatou 88,7% de Hb C, 6,1% de Hb A2 e 5,2% de Hb fetal, o que caracteriza Beta talassemia, em associação à Hemoglobinopatia C. O traço de hemoglobinopatia C é de origem paterna e o traço de β talassemia é de origem materna, identificados através de eletroforese de hemoglobina pelo método Cromatografia Líquida de Alta Performane (HPLC). Discussão: A beta-talassemia é uma doença genética caracterizada pela deficiência quantitativa de cadeias polipeptídicas beta e consequente prevalência da hemoglobina A2. Tal deficiência pode ser absoluta (β°) ou parcial (β+). Com isso, ao hemograma, o paciente costuma apresentar VCM e HCM diminuídos, mas a Hb pode estar normal ou levemente diminuída. Já a Hemoglobinopatia C é uma alteração qualitativa da hemoglobina, resultante de uma alteração genética. A afinidade da hemoglobina C pelo oxigênio está levemente reduzida e os índices de hemólise estão levemente aumentados devido à redução do VCM. Consequentemente, as principais manifestações clínicas são anemia hemolítica leve a moderada, esplenomegalia. Em caso de herança de um traço de talassemia simultaneamente ao de hemoglobinopatia C dos pais, tem-se a hemoglobinopatia C em interação com a talassemia beta (C/β°), uma alteração de epidemiologia pouco conhecida, porém, mais prevalente entre afrodescendentes. Clinicamente, os pacientes apresentam poucas repercussões, de forma similar a Hemoglobinopatia C isolada, como esplenomegalia, episódios de crises dolorosas, icterícia. Laboratorialmente, é comum encontrar microcitose, hipocromia, poiquilocitose e anemia discreta. O diagnóstico é realizado através da eletroforese de hemoglobina, que pode revelar níveis variados de HbC, HbA, HbA2 e HbF. O tratamento depende da gravidade dos sintomas e da anemia. Casos leves podem ser acompanhados com apenas suplementação de ácido fólico, enquanto casos graves podem necessitar de transfusão de concentrado de hemácias. Conclusão: A associação de hemoglobinopatia C e beta-talassemia resulta em uma condição genética que pode variar em gravidade. O diagnóstico precoce e o manejo adequado são essenciais para reduzir as complicações e melhorar a qualidade de vida dos pacientes.

Objetivo: Descrever caso de acidente vascular cerebral isquêmico (AVCi) arterial neonatal associado a deficiência de proteína S. Materiais e métodos: Relato de caso. Resultados: Recém nascido, sexo masculino, nascido termo por parto cesáreo eletivo, pré natal sem intercorrências, apresentou em sala de parto desconforto respiratório e evoluiu com crise convulsiva com um dia de vida. Tomografia de crânio já com sinais de lesão isquêmica.Dosada proteínas S livre e proteína C com 15 dias de vida, indicando baixa dosagem de ambas. Angiorressonância magnética (angio-RM) de crânio realizada com 22 dias de vida evidenciou hemiatrofia cerebral esquerda secundária a extensa lesão isquêmica antiga em território de irrigação de artéria cerebral média associada a presença de trombo na mesma artéria. Iniciado heparina de baixo peso molecular (HBPM) na dose de 2 mg/kg/dia. Paciente recebeu alta hospitalar com 1 mês de vida. Aos 3 meses optado por suspensão de HBPM e iniciado Ácido Acetilsalicílico (AAS) 3 mg/kg/dia. Com um ano de idade foi realizada pesquisa de trombofilias que indicou normalização do nível de proteína C e confirmou baixa concentração de proteína S livre no paciente e na mãe. Paciente não apresentou recorrência de eventos trombóticos, angio-RM de crânio sem sinais de trombose aguda. Discussão: A patogênese do AVCi arterial perinatal é complexa e multifatorial e os eventos ocorridos devido a condições primárias pró-trombóticas são responsáveis por cerca de apenas 4% dos casos. Em pacientes selecionados, com histórico familiar de doença trombótica e naqueles que apresentam uma grande área isquêmica ou múltiplas áreas de trombose, os testes de coagulação devem ser realizados. As concentrações de proteína S, proteína C e antitrombina no recém-nascido são aproximadamente 30% das concentrações encontradas em adultos, por isso os testes só devem ser realizados no momento agudo em casos de risco de recorrência do evento trombótico (área extensa de lesão ou múltiplos focos de trombose) e devem ser feitos novamente após os 4 meses de vida para confirmação diagnóstica. Nesses pacientes selecionados, ambos os pais devem ser testados para deficiências de proteína S e proteína C já que uma história familiar de trombose ou consanguinidade torna estes diagnósticos mais prováveis. A maioria dos AVC tromboembólicos em bebês não recorre nem progride, no entanto, para neonatos que têm ou podem estar em risco de AVCi arterial recorrente devido a fatores de risco sistêmicos ou com grande área de isquemia é indicado tratamento com terapia antitrombótica usando AAS, HBPM ou heparina não fracionada. Conclusão: As deficiências de proteína C e seu cofator S são possíveis fatores de risco para AVCi arterial neonatal, em casos selecionados, a pesquisa dessas causas pode levar ao diagnóstico e consequente prevenção de novos possíveis eventos trombóticos. Ressalta-se que a dosagem de proteínas C e S no momento agudo do evento trombótico neonatal apresenta pouco valor, visto que seus valores são fisiologicamente menores em recém nascidos, devendo portanto, serem confirmados em momento oportuno.

Objetivo: Realizar uma revisão da literatura a respeito do tema de forma a abordar os principais tópicos de relevância para o Pediatra. Materiais e métodos: Revisão integrativa da literatura nas bases de dados PubMed e Scielo, com os seguintes descritores: ”Deficiência de G6PD”; “G6PD”; “Deficiência de Glucose Fosfato Desidrogenase”. Para a análise do tema foram selecionados 17artigos, com corte temporal de 2010 a 2024, para leitura completa. Resultados: A Glucose Fosfato Desidrogenase, G6PD, é uma enzima citoplasmática responsável por proteger as hemácias de danos oxidativos, reduzindo sua suscetibilidade à hemólise. Sua deficiência é a desordem enzimática mais prevalente, afetando cerca de 400 a 500 milhões de pessoas mundialmente. O diagnóstico dessa condição se tornou mais comum a partir da incorporação da dosagem de G6PD no teste do pezinho ampliado, fato que não foi acompanhado pela maior abordagem do tema, fazendo com que a condição ainda seja desconhecida por muitos pediatras e geradora de muita angústia para as famílias. Discussão: O diagnóstico da deficiência de G6PD pode ocorrer a partir da determinação semi-quantitativa de fluorescência, atividade enzimática da G6PD ou detecção de mutações. Sabe-se que os pacientes deficientes para a enzima são, em sua maioria, assintomáticos, podendo desenvolver crises quando expostos a fatores causadores de estresse oxidativo, principalmente, medicações específicas. Os principais sintomas clínicos das crises de hemólise são icterícia neonatal, esplenomegalia e palidez cutânea. O melhor tratamento para a deficiência de G6PD é a prevenção, porém as orientações de cunho preventivo dadas às famílias ainda são falhas e demandam uma abordagem multiprofissional para redução das repercussões clínicas da enzimopatia. Conclusão: Por ser uma condição muito prevalente, pediatras têm a responsabilidade de orientação adequada às famílias para que possam evitar componentes geradores de estresse oxidativo nos pacientes, além de poderem as tranquilizarem a respeito do quadro e das suas repercussões clínicas.

Objetivos: Analisar e quantificar os pacientes com deficiência de G6PD acompanhados em serviço, sua sintomatologia, diagnóstico e complicações. Material e métodos: Realizada busca em prontuário eletrônico dos pacientes atendidos em um consultório particular de abril de 2022 a junho de 2023 com diagnóstico de deficiência de G6PD e feita análise clínica dos dados. Resultados: Foram encontrados 30 pacientes com deficiência de G6PD no período relatado. Dentre eles, 29 pacientes do sexo masculino e 1 paciente do sexo feminino. 28 dos 30 pacientes procuraram atendimento com Hematologia Pediátrica devido à alteração em teste do pezinho ampliado, realizados em rede privada. Os outros 2 realizaram o teste de dosagem enzimática devido à presença de icterícia prolongada. A única sintomatologia relatada foi icterícia com necessidade de fototerapia no período neonatal, apresentada em 40% dos pacientes. Nenhum paciente apresentou anemia hemolítica no período neonatal e posteriormente. 86% dos pacientes realizaram o teste fluorimétrico, evidenciando a deficiência de G6PD. Apenas 2 pacientes realizaram análise molecular – 1 pelo teste da bochechinha (Mutação C2926A) e outro por análise genética (Mutação G202A + G376G). Discussão: A G6PD é uma enzima que, no glóbulo vermelho, é a única via para a produção de Nicotinamida Adenina Dinucleotídeo Fosfato Reduzida (NADPH), necessária para manter a glutationa no estado reduzido. Nos eritrocitos deficientes de G6PD, a redução da conversão do NADP em NADPH leva a um baixo potencial redutor, podendo gerar crises hemoliticas de intensidade variável. A deficiência de G6PD afeta cerca de 400 milhões de pessoas, em todos os grupos raciais. O gene que codifica a G6PD está localizado no cromossomo X, de modo que a deficiência é mais comum no sexo masculino, assim como encontrado na revisão dos casos. A maioria dos indivíduos com deficiência de G6PD não apresenta sintomas e a condição permanece não detectada até que sejam expostos a um gatilho hemolítico exógeno, como infecções bacterianas, virais, ingestão de favas ou drogas. Uma das complicações mais significativas da deficiência de G6PD é a icterícia neonatal, com pico 2 a 3 dias após o nascimento. Dentro dos pacientes analisados, o único sinal da deficiência de G6PD apresentado foi a icterícia neonatal, presente em 40% dos pacientes, sendo precoce (< 24h) em apenas um caso e prolongada em apenas 2 pacientes, os quais tiveram diagnóstico da deficiência por investigação clínica após essa sintomatologia. A maioria dos pacientes realizou prova de detecção pelo método de fluorescência, mas apenas dois pacientes realizaram prova confirmatória genética. Nenhum paciente teve anemia hemolítica, o que é compatível com a prevalência da classe III, variante mais comum, em que a deficiência é moderada e a hemólise é causada apenas em situações de risco. Conclusão: A triagem neonatal universal para deficiência de G6PD ainda não é recomendada no Brasil, mas o teste do pezinho ampliado em rede privada tem sido cada vez mais adotado, com aumento dos casos detectados desta deficiência. Os pacientes analisados apresentaram pouca ou nenhuma sintomatologia durante o seguimento clínico, sendo questionado, portanto, a importância clínica deste diagnóstico na triagem neonatal, uma vez que gera, muitas vezes, apreensão familiar e restrições desnecessárias.

Objetivos: Ressaltar a raridade da condição e a ocorrência de mielodisplasia cútis em crianças. Materiais e métodos: Relato de caso. Resultados: Paciente masculino, 13 anos, em acompanhamento com hematologia devido à plaquetopenia crônica. Realizado mielograma e imunofenotipagem indicando distúrbio de maturação das séries granulocítica, monocítica e eritrocítica em > 10% das células e presença de 0,6% de blastos. Cariótipo alterado em cromossomos 3, 11 e 21. Realizado diagnóstico de SMD com cariótipo complexo sem infiltração medular. Indicado tratamento com Transplante de Medula Óssea (TMO). Em consulta pré-TMO, indicada internação devido hemorragia conjuntival e febre associadas a lesões de pele pápulo-nodulares de coloração vermelho-violáceo em membros superiores, inferiores e dorso de início há um mês, sem melhora com anti-histamínico e corticoide tópico. Em biópsia de pele, foram indicadas alterações compatíveis com Síndrome Sweet/ mielodisplasia cútis (MPO+/CD68+/CD34-/CD117-); leucemização descartada após nova avaliação de medula óssea. Durante internação, iniciado ciclo de Azacitidina, com boa resposta ao tratamento resultando na melhora das lesões. Hoje paciente em programação para realização de TMO. Discussão: A SMD é uma desordem das células hematopoiéticas, caracterizada por citopenias, hematopoiese ineficaz e risco de transformação leucêmica. Em crianças, é uma condição rara com incidência aproximada de 1 para um milhão por ano e representa cerca de 4% das doenças malignas hematológicas. Para diagnóstico são necessários pelo menos dois dos três critérios: citopenia inexplicada refratária (neutropenia, trombocitopenia ou anemia); mielodisplasia em duas ou mais linhagens celulares ou superior a 10% em linhagem única; anormalidade clonal hematopoiética/genética; elevação do número de blastos acima de 5% na medula óssea ou 2% no sangue periférico. A classificação pediátrica divide-se em três categorias principais: Citopenia Refratária das Crianças – RCC (< 2% de blastos no sangue periférico e < 5% na medula óssea); anemia refratária com excesso de blastos-AREB (2%‒19% de blastos no sangue periférico ou 5%‒19% de blastos na medula óssea); e AREB em transformação ‒ AREB-t (≥ 20%‒29% de blastos no sangue periférico ou medula óssea). O achado citogenético mais comum na população pediátrica é a monossomia 7. Cariótipo complexo (≥ 3 alterações cromossômicas, incluindo pelo menos uma aberração estrutural) é raro e é o fator prognóstico independente mais importante para pior evolução. Considerando-se que as crianças portadoras de SMD têm alta mortalidade devido aos efeitos da citopenia ou da evolução clonal para Leucemia Mieloide Aguda (LMA), o TMO alogênico é indicado como tratamento curativo. Na sua impossibilidade, o agente hipometilante Azacitidina tem mostrado algum benefício. A manifestação cutânea é incomum e consiste na infiltração da pele por células granulocíticas. Clinicamente, observam-se massas tumorais ou múltiplas lesões disseminadas, pápulo-nodulares, de crescimento rápido, firmes e vermelho-violáceas. Lesões desenvolvem-se geralmente em ossos, periósteo, tecidos moles, linfonodos e pele. A histologia com imunohistoquímica e a imunoperoxidase são fundamentais para o diagnóstico de infiltração secundária. Conclusão: Devido a raridade da SMD infantil, principalmente com apresentação cutânea, a documentação desse caso se torna importante para contribuição diagnóstica e de elucidação fisiopatológica e terapêutica.

Objetivos: Relatar o caso clínico de paciente com linfoma da zona cinzenta com características intermediárias entre Linfoma de Hodgkin Clássico esclerose nodular (LHC) e Linfoma Difuso de Grandes Células B (LDGC). Material e métodos: Relato de caso. Resultados: K.V.M. feminino, 14 anos, procedente do Pará, iniciou com febre, cefaleia, náuseas, sudorese noturna, hiporexia em agosto de 2021, dor torácica e perda de 6 kg em 2 meses. Tomografia computadorizada evidenciou massa mediastinal que foi biopsiada. Resultado Imunohistoquímico (CD30+ CD15+ PAX+ CD3- CD20-): Linfoma de Hodgkin clássico, subtipo esclerose nodular. Na primeira linha de tratamento utilizou o protocolo (OEPA-2×) + (COPDAC-4×). Alcançou remissão parcial confirmada por PET-CT quando administrada a segunda linha com Brentuximabe + Bendamustina. Em resposta parcial, após o quinto ciclo, foi encaminhada para o serviço de transplante de medula óssea do Hosp.Oncobio/Oncoclinicas ‒ Belo Horizonte. Após condicionamento com esquema BEAM, a infusão de células tronco periférica autólogo ocorreu em 05/12/2022. Em janeiro/23 apresentou nodulação na mama direita. Repetiu o PET-CT que evidenciou reativação da doença. Evoluiu com febre, derrame pleural. Transferida para o CTI em ventilação mecânica e realizada nova biópsia. Diante da gravidade do quadro e baseada na hipótese de refratariedade do linfoma de Hodgkin, fez uma dose de Pembrolizumabe antes da liberação do resultado da biopsia, cuja resposta clínica e radiológica foi satisfatória. Modificado esquema terapêutico para R-ICE após o resultado da biopsia mediastinal liberado em 14/02/2023 (CD20+CD30+ EBV+ PAX5- CD3- CKAE1/AE3- ALC-OCT3/4-): Linfoma da Zona Cinzenta (LZC) com características intermediárias entre linfoma de Hodgkin clássico esclerose nodular e linfoma difuso de grandes células B. Realizou novo PET CT após o segundo ciclo de R-ICE, cujo resultado foi satisfatório com poucas áreas de hipercaptação evidenciando resposta parcial. Paciente encontra-se clinicamente bem, aguardando a realização de novo PET-CT após o quarto ciclo de R-ICE. A continuidade do tratamento será com radioterapia e transplante de medula óssea alogênico. Discussão: LZC foi apresentado em 1998 e incorporado na classificação WHO2008 como linfoma B não classificado com características intermediarias entre LDGC e LHC. Tanto o diagnóstico quanto a terapêutica são desafiadores até os dias atuais. Afeta mais comumente adultos jovens, mas pode também ser diagnosticado em crianças. O mediastino anterior é o sítio mais comum e ocasionalmente pode ser sistêmica sem acometimento mediastinal. Pacientes com LZC tem alta taxa de recaída. O tratamento de primeira linha pode ser com R-CHOP ou EPOCH-R. Na doença refratária ou em recaída está indicado o transplante de medula óssea, radioterapia, brentuximabe, imunoterapias e terapias celulares. Conclusão: Este relato ilustra a dificuldade diagnóstica e da decisão terapêutica descrita na literatura e reafirma o quanto é necessária a integração entre a equipe clínica e laboratorial para o diagnóstico de certeza.

CASZ1 is a conserved transcription factor involved in neural development, blood vessel assembly and heart morphogenesis. CASZ1 has been implicated in cancer, either suppressing or promoting tumor development depending on the tissue. However, the impact of CASZ1 on hematological tumors remains unknown. Here, we show that the T-cell oncogenic transcription factor TAL1 is a direct positive regulator of CASZ1, that T-cell acute lymphoblastic leukemia (T-ALL) samples at diagnosis overexpress CASZ1b isoform, and that CASZ1b expression in patient samples correlates with PI3K-AKT-mTOR signaling pathway activation. In agreement, overexpression of CASZ1b in both Ba/F3 and T-ALL cells leads to the activation of PI3K signaling pathway, which is required for CASZ1b-mediated transformation of Ba/F3 cells in vitro and malignant expansion in vivo. We further demonstrate that CASZ1b cooperates with activated NOTCH1 to promote T-ALL development in zebrafish, and that CASZ1b protects human T-ALL cells from serum deprivation and treatment with chemotherapeutic drugs. Taken together, our studies indicate that CASZ1b is a TAL1-regulated gene that promotes T-ALL development and resistance to chemotherapy.

Advancements in comprehending myelodysplastic neoplasms (MDS) have unfolded significantly in recent years, elucidating a myriad of cellular and molecular underpinnings integral to disease progression. While molecular inclusions into prognostic models have substantively advanced risk stratification, recent revelations have emphasized the pivotal role of immune dysregulation within the bone marrow milieu during MDS evolution. Nonetheless, immunotherapy for MDS has not experienced breakthroughs seen in other malignancies, partly attributable to the absence of an immune classification that could stratify patients toward optimally targeted immunotherapeutic approaches. A pivotal obstacle to establishing "immune classes" among MDS patients is the absence of validated accepted immune panels suitable for routine application in clinical laboratories. In response, we formed International Integrative Innovative Immunology for MDS (i4MDS), a consortium of multidisciplinary experts, and created the following recommendations for standardized methodologies to monitor immune responses in MDS. A central goal of i4MDS is the development of an immune score that could be incorporated into current clinical risk stratification models. This position paper first consolidates current knowledge on MDS immunology. Subsequently, in collaboration with clinical and laboratory specialists, we introduce flow cytometry panels and cytokine assays, meticulously devised for clinical laboratories, aiming to monitor the immune status of MDS patients, evaluating both immune fitness and identifying potential immune "risk factors." By amalgamating this immunological characterization data and molecular data, we aim to enhance patient stratification, identify predictive markers for treatment responsiveness, and accelerate the development of systems immunology tools and innovative immunotherapies., Competing Interests: Shahram Kordasti: Novartis: Advisory Board, Speakers bureau, Alexion: Speakers bureau, Beckman Coulter: Speakers bureau, MorphoSys: Research Support (none is related to this publication). Wolfgang Kern declares part‐ownership of MLL Munich Leukemia Laboratory. Austin Kulasekararaj: Research support (to institution): Celgene/BMS and Novartis. Speaker's fees: Alexion/AstraZeneca, Akari, Apellis, Celgene/BMS, Novartis, Pfizer, Ra Pharma/UCB, Roche, SOBI. Scientific advisory board: Alexion/Astra Zeneca, Apellis, Amgen, Agios, Biocryst, Celgene/BMS, Novartis, Pfizer, Regeneron, Roche, SOBI, Janssen, Samsung and Novo Nordisk (none is related to this publication)., (© 2024 The Authors. HemaSphere published by John Wiley & Sons Ltd on behalf of European Hematology Association.)

β-fructofuranosidases (FFases) are enzymes involved in sucrose hydrolysis and can be used in the production of invert sugar and fructo-oligosaccharides (FOS). This last is an important prebiotic extensively used in the food industry. In the present study, the FFase production by Aspergillus tamarii Kita UCP 1279 was assessed by solid-state fermentation using a mixture of wheat and soy brans as substrate. The FFase presents optimum pH and temperature at 5.0-7.0 and 60 °C, respectively. According to the kinetic/thermodynamic study, the FFase was relatively stable at 50 °C, a temperature frequently used in industrial FOS synthesis, using sucrose as substrate, evidenced by the parameters half-life (115.52 min) and D -value (383.76 min) and confirmed by thermodynamic parameters evaluated. The influence of static magnetic field with a 1450 G magnetic flux density presented a positive impact on FFase kinetic parameters evidenced by an increase of affinity of enzyme by substrate after exposition, observed by a decrease of 149.70 to 81.73 mM on K m . The results obtained indicate that FFases present suitable characteristics for further use in food industry applications. Moreover, the positive influence of a magnetic field is an indicator for further developments of bioprocesses with the presence of a magnetic field.

Cnidarians are equipped with nematocysts, which are specialized organelles used to inoculate venom during prey capturing and defense. Their venoms are rich in toxins and a potential source of bioactive compounds, however, poorly explored so far. In this work, the activity of the methanolic extracts from the hydromedusa Olindias sambaquiensis and the cubozoan jellyfish Chiropsalmus quadrumanus were studied in sympathetic neurotransmission. For that, bisected rat vas deferens - a classic model of sympathetic neurotransmission - were incubated with the extracts for further myographic and histopathological analysis. The O. sambaquiensis extract, at 0.1 μg/mL, facilitated the neurogenic contractions of the noradrenergic-rich epididymal portion, while reducing the noradrenaline (NA) potency, which suggests an interaction with postsynaptic α 1 -adrenoceptors. On the other hand, a higher concentration (1 μg/mL) leads to time- and frequency-dependent blockade of nerve-evoked contractions without significantly changing the response to exogenous NA. In turn, the C. quadrumanus extract at 0.1 μg/mL induced blockade of nerve-evoked noradrenergic contractions while reducing the potency to exogenous NA. Both extracts did not affect the purinergic neurotransmission or induce muscle damages. Our results demonstrate that O. sambaquiensis and C. quadrumanus extracts significantly interfere with the noradrenergic neurotransmission without altering purinergic response or smooth muscle structure on rat vas deferens. Such results bring to light the pharmacological potential of O. sambaquiensis and C. quadrumanus molecules for therapeutics focusing on noradrenergic neurotransmission., (Copyright © 2021 Elsevier Ltd. All rights reserved.)

The human body requires a constant delivery of fresh blood cells that are needed to maintain body homeostasis. Hematopoiesis is the process that drives the formation of new blood cells from a single stem cell. This is a complex, orchestrated and tightly regulated process that occurs within the bone marrow. When such process is faulty or deregulated, leukemia arises, develops and thrives by subverting normal hematopoiesis and availing the supplies of this rich milieu.In this book chapter we will describe and characterize the bone marrow microenvironment and its key importance for leukemia expansion. The several components of the bone marrow niche, their interaction with the leukemic cells and the cellular pathways activated within the malignant cells will be emphasized. Finally, novel therapeutic strategies to target this sibling interaction will also be discussed.

Hepatocyte nuclear factor 1β (HNF1β) is mostly expressed in the liver, but is also expressed in other organs, like kidney, pancreas and genitourinary tract. In fact, HNF1β, a member of the superfamily of homeodomain-containing transcription factors, has been described as a hallmark in clear cell carcinomas. However, its role as an oncogene or as tumor suppressor gene remains controversial. Here, we disclose a mechanism of HNF1β stabilization and degradation, using human HNF1β-expressing cell lines of ovarian clear cell carcinoma (ES2), hepatocellular carcinoma (HEPG2), and normal immortalized kidney tubular cells (HK2). We show that increased levels of HNF1β is concomitant with an increase in the acetylation load and protein stabilization by interfering with the ubiquitin-proteasome degradation system. This study reinforces that acetylation, besides their role in regulating chromatin conformation and gene expression, could also act in the action, turnover and stability of proteins essential for the survival and progression of certain cancer types., (© 2018 Wiley Periodicals, Inc.)

BCR-ABL-negative myeloproliferative neoplasms (MPNs) are driven by JAK-STAT pathway activation, but epigenetic alterations also play an important pathophysiological role. These can be pharmacologically manipulated with histone deacetylase inhibitors (HDACIs), which have proven to be clinically effective in the treatment of MPNs but exhibit dose-limiting toxicity. The treatment of primary MPN cells with vorinostat modulates the expression of genes associated with apoptosis, cell cycle, inflammation, and signaling. The induction of this transcriptional program results in decreased cellular viability, paralleled by a decrease in levels of reactive oxygen species (ROS). In vitro manipulation of ROS levels revealed that the reduction of ROS levels promoted apoptosis. When vorinostat was combined with antioxidant agents, the apoptosis of MPN cells increased in a synergistic manner. The results described here suggest a novel and promising therapeutic strategy combining HDACIs with ROS-reducing agents to treat MPNs., (Copyright © 2019. Published by Elsevier Inc.)

T-cell acute lymphoblastic leukemia (T-ALL) constitutes an aggressive subset of ALL, the most frequent childhood malignancy. Whereas interleukin-7 (IL-7) is essential for normal T-cell development, it can also accelerate T-ALL development in vivo and leukemia cell survival and proliferation by activating phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B/mechanistic target of rapamycin signaling. Here, we investigated whether STAT5 could also mediate IL-7 T-ALL-promoting effects. We show that IL-7 induces STAT pathway activation in T-ALL cells and that STAT5 inactivation prevents IL-7-mediated T-ALL cell viability, growth, and proliferation. At the molecular level, STAT5 is required for IL-7-induced downregulation of p27 kip1 and upregulation of the transferrin receptor, CD71. Surprisingly, STAT5 inhibition does not significantly affect IL-7-mediated Bcl-2 upregulation, suggesting that, contrary to normal T-cells, STAT5 promotes leukemia cell survival through a Bcl-2-independent mechanism. STAT5 chromatin immunoprecipitation sequencing and RNA sequencing reveal a diverse IL-7-driven STAT5-dependent transcriptional program in T-ALL cells, which includes BCL6 inactivation by alternative transcription and upregulation of the oncogenic serine/threonine kinase PIM1 Pharmacological inhibition of PIM1 abrogates IL-7-mediated proliferation on T-ALL cells, indicating that strategies involving the use of PIM kinase small-molecule inhibitors may have therapeutic potential against a majority of leukemias that rely on IL-7 receptor (IL-7R) signaling. Overall, our results demonstrate that STAT5, in part by upregulating PIM1 activity, plays a major role in mediating the leukemia-promoting effects of IL-7/IL-7R., (© 2018 by The American Society of Hematology.)

T-cell acute lymphoblastic leukemia (T-ALL) is an aggressive hematological cancer that arises from clonal expansion of transformed T-cell precursors. In this review we summarize the current knowledge on the external stimuli and cell-intrinsic lesions that drive aberrant activation of pivotal, pro-tumoral intracellular signaling pathways in T-cell precursors, driving transformation, leukemia expansion, spread or resistance to therapy. In addition to their pathophysiological relevance, receptors and kinases involved in signal transduction are often attractive candidates for targeted drug development. As such, we discuss also the potential of T-ALL signaling players as targets for therapeutic intervention., (Copyright © 2017 The Authors. Published by Elsevier Inc. All rights reserved.)

We carried out a cross-sectional study from January to December 2015 on 1,425 inhabitants from a floating population in the Brazilian Amazon (Murinin district, Pará State) to describe the population-based prevalence of tuberculosis (TB) from 2011 to 2014, recent TB contacts (rCts) latently infected with Mycobacterium tuberculosis (LTBI) , the coverage of the local health network, socio-environmental factors, and frequency of intestinal parasitic infection (IPI). We found that the sanitary structure was inadequate, with latrines being shared with other rooms within the same accommodation; well water was the main source of water, and 48% of families had low incomes. The average rate of TB was 105/100, 000 inhabitants per year; one third of TB patients had been household contacts of infected individuals in the past, and 23% of rCts were LTBI. More than half (65%) of 44% of the stools examined (representing 76% of the housing) had IPIs; the highest prevalence was of fecal-oral transmitted protozoa (40%, Giardia intestinalis ), followed by soil-transmitted helminths (23%). TB transmission may be related to insufficient disease control of rCts, frequent relocation, and underreporting. Education, adopting hygienic habits, improving sanitation, provision of a treated water supply and efficient sewage system, further comprehensive epidemiological surveillance of those who enter and leave the community and resources for basic treatment of IPIs are crucial in combating the transmission of these neglected diseases.

Overexpression of tumor-associated RAC1b has been recently highlighted as one of the most promising targets for therapeutic intervention in colon, breast, lung and pancreatic cancer. RAC1b is a hyperactive variant of the small GTPase RAC1 and has been recently shown to be overexpressed in a subset of papillary thyroid carcinomas associated with unfavorable outcome. Using the K1 PTC derived cell line as an in vitro model, we observed that both RAC1 and RAC1b were able to induce a significant increase on NF-kB and cyclin D1 reporter activity. A clear p65 nuclear localization was found in cells transfected with RAC1b-WT, confirming NF-kB canonical pathway activation. Consistently, we observed a RAC1b-mediated decrease in IκBα (NF-kB inhibitor) protein levels. Moreover, we show that RAC1b overexpression stimulates G1/S progression and protects thyroid cells against induced apoptosis, the latter through a process involving the NF-kB pathway. Present data support previous findings suggesting an important role for RAC1b in the development of follicular cell-derived thyroid malignancies and point out NF-kB activation as one of the molecular mechanisms associated with the pro-tumorigenic advantage of RAC1b overexpression in thyroid carcinomas.

Interleukin-7 and interleukin-7 receptor are essential for normal T-cell development and homeostasis, whereas excessive interleukin-7/interleukin-7 receptor-mediated signaling promotes leukemogenesis. The protein kinase, casein kinase 2, is overexpressed and hyperactivated in cancer, including T-cell acute lymphoblastic leukemia. Herein, we show that while interleukin-7 had a minor but significant positive effect on casein kinase 2 activity in leukemia T-cells, casein kinase 2 activity was mandatory for optimal interleukin-7/interleukin-7 receptor-mediated signaling. Casein kinase 2 pharmacological inhibition impaired signal transducer and activator of transcription 5 and phosphoinositide 3-kinase/v-Akt murine thymoma viral oncogene homolog 1 pathway activation triggered by interleukin-7 or by mutational activation of interleukin-7 receptor. By contrast, forced expression of casein kinase 2 augmented interleukin-7 signaling in human embryonic kidney 293T cells reconstituted with the interleukin-7 receptor machinery. Casein kinase 2 inactivation prevented interleukin-7-induced B-cell lymphoma 2 upregulation, maintenance of mitochondrial homeostasis and viability of T-cell acute lymphoblastic leukemia cell lines and primary leukemia cells collected from patients at diagnosis. Casein kinase 2 inhibition further abrogated interleukin-7-mediated cell growth and upregulation of the transferrin receptor, and blocked cyclin A and E upregulation and cell cycle progression. Notably, casein kinase 2 was also required for the viability of mutant interleukin-7 receptor expressing leukemia T-cells. Overall, our study identifies casein kinase 2 as a major player in the effects of interleukin-7 and interleukin-7 receptor in T-cell acute lymphoblastic leukemia. This further highlights the potential relevance of targeting casein kinase 2 in this malignancy., (Copyright© Ferrata Storti Foundation.)

T-cell acute lymphoblastic leukemia (T-ALL) frequently involves aberrant expression of TAL1 (T-cell acute lymphocytic leukemia 1) and LMO2, oncogenic members of the TAL1 transcriptional complex. Transcriptional activity of the TAL1-complex is thought to have a pivotal role in the transformation of thymocytes and is associated with a differentiation block and self-renewal. The transcription factor Forkhead Box P3 (FOXP3) was recently described to be expressed in a variety of malignancies including T-ALL. Here we show that increased FOXP3 levels negatively correlate with expression of genes regulated by the oncogenic TAL1-complex in human T-ALL patient samples as well as a T-ALL cell line ectopically expressing FOXP3. In these cells, FOXP3 expression results in altered regulation of cell cycle progression and reduced cell viability. Finally, we demonstrate that FOXP3 binds LMO2 in vitro, resulting in decreased interaction between LMO2 and TAL1, providing a molecular mechanism for FOXP3-mediated transcriptional modulation in T-ALL. Collectively, our findings provide initial evidence for a novel role of FOXP3 as a tumor suppressor in T-ALL through modulation of TAL1 transcriptional activity.

AL amyloidosis is a clonal plasma cell proliferative disorder characterised by extracellular tissue deposits of insoluble fibrils derived from κ or λ immunoglobulin light chains. The most common organs affected by AL amyloidosis are the kidney, presenting with nephrotic syndrome and/or progressive renal dysfunction, and the heart, with restrictive cardiomyopathy. Hepatic deposition of fibrils occurs in half the cases but the liver is rarely the predominantly affected organ. The most common presentation of hepatic amyloidosis is hepatomegaly with elevated alkaline phosphatase. Acute liver failure with cholestasis and jaundice is a rare complication, with a prevalence of approximately 5%, and is usually associated with a worse prognosis. We report a case of a 39-year-old man admitted to our nephrology department with an unusual presentation of primary amyloidosis with nephrotic syndrome and acute liver failure, complicated by obstructive cholestasis resulting in death 2 months after diagnosis., (2016 BMJ Publishing Group Ltd.)

The classical BCR-ABL-negative Myeloproliferative Neoplasms (MPN) are a group of heterogeneous haematological diseases characterized by constitutive JAK-STAT pathway activation. Targeted therapy with Ruxolitinib, a JAK1/2-specific inhibitor, achieves symptomatic improvement but does not eliminate the neoplastic clone. Similar effects are seen with histone deacetylase inhibitors (HDACi), albeit with poorer tolerance. Here, we show that bone marrow (BM) stromal cells (HS-5) protected MPN-derived cell lines (SET-2; HEL and UKE-1) and MPN patient-derived BM cells from the cytotoxic effects of Ruxolitinib and the HDACi Vorinostat. This protective effect was mediated, at least in part, by the secretion of soluble factors from the BM stroma. In addition, it correlated with the activation of signalling pathways important for cellular homeostasis, such as JAK-STAT, PI3K, JNK, MEK-ERK and NF-κB. Importantly, the pharmacological inhibition of JNK and PI3K pathways completely abrogated the BM protective effect on MPN cell lines and MPN patient samples. Our findings shed light on mechanisms of tumour survival and may indicate novel therapeutic approaches for the treatment of MPN.

Fanconi anaemia (FA) is an inherited disorder characterized by chromosomal instability. The phenotype is variable, which raises the possibility that it may be affected by other factors, such as epigenetic modifications. These play an important role in oncogenesis and may be pharmacologically manipulated. Our aim was to explore whether the epigenetic profiles in FA differ from non-FA individuals and whether these could be manipulated to alter the disease phenotype. We compared expression of epigenetic genes and DNA methylation profile of tumour suppressor genes between FA and normal samples. FA samples exhibited decreased expression levels of genes involved in epigenetic regulation and hypomethylation in the promoter regions of tumour suppressor genes. Treatment of FA cells with histone deacetylase inhibitor Vorinostat increased the expression of DNM3Tβ and reduced the levels of CIITA and HDAC9, PAK1, USP16, all involved in different aspects of epigenetic and immune regulation. Given the ability of Vorinostat to modulate epigenetic genes in FA patients, we investigated its functional effects on the FA phenotype. This was assessed by incubating FA cells with Vorinostat and quantifying chromosomal breaks induced by DNA cross-linking agents. Treatment of FA cells with Vorinostat resulted in a significant reduction of aberrant cells (81% on average). Our results suggest that epigenetic mechanisms may play a role in oncogenesis in FA. Epigenetic agents may be helpful in improving the phenotype of FA patients, potentially reducing tumour incidence in this population.

The PI3K pathway is frequently hyperactivated in primary T-cell acute lymphoblastic leukemia (T-ALL) cells. Activation of the PI3K pathway has been suggested as one mechanism of glucocorticoid resistance in T-ALL, and patients harboring mutations in the PI3K negative regulator PTEN may be at increased risk of induction failure and relapse. By gene expression microarray analysis of T-ALL cells treated with the PI3K inhibitor AS605240, we identified Myc as a prominent downstream target of the PI3K pathway. A significant association was found between the AS605240 gene expression signature and that of glucocorticoid resistance and relapse in T-ALL. AS605240 showed anti-leukemic activity and strong synergism with glucocorticoids both in vitro and in a NOD/SCID xenograft model of T-ALL. In contrast, PI3K inhibition showed antagonism with methotrexate and daunorubicin, drugs that preferentially target dividing cells. This antagonistic interaction, however, could be circumvented by the use of correct drug scheduling schemes. Our data indicate the potential benefits and difficulties for the incorporation of PI3K inhibitors in T-ALL therapy.

Background: Aberrant epigenetic patterns are central in the pathogenesis of haematopoietic diseases such as myelodysplastic syndromes (MDS) and acute myeloid leukaemia (AML). Vorinostat is a HDACi which has produced responses in these disorders. The purpose of this study was to address the functional effects of vorinostat in leukemic cell lines and primary AML and MDS myeloid cells and to dissect the genetic and molecular mechanisms by which it exerts its action., Methodology/principal Findings: Functional assays showed vorinostat promoted cell cycle arrest, inhibited growth, and induced apoptosis and differentiation of K562, HL60 and THP-1 and of CD33(+) cells from AML and MDS patients. To explore the genetic mechanism for these effects, we quantified gene expression modulation by vorinostat in these cells. Vorinostat increased expression of genes down-regulated in MDS and/or AML (cFOS, COX2, IER3, p15, RAI3) and suppressed expression of genes over-expressed in these malignancies (AXL, c-MYC, Cyclin D1) and modulated cell cycle and apoptosis genes in a manner which would favor cell cycle arrest, differentiation, and apoptosis of neoplastic cells, consistent with the functional assays. Reporter assays showed transcriptional effect of vorinostat on some of these genes was mediated by proximal promoter elements in GC-rich regions. Vorinostat-modulated expression of some genes was potentiated by mithramycin A, a compound that interferes with SP1 binding to GC-rich DNA sequences, and siRNA-mediated SP1 reduction. ChIP assays revealed vorinostat inhibited DNA binding of SP1 to the proximal promoter regions of these genes. These results suggest vorinostat transcriptional action in some genes is regulated by proximal promoter GC-rich DNA sequences and by SP1., Conclusion: This study sheds light on the effects of vorinostat in AML and MDS and supports the implementation of clinical trials to explore the use of vorinostat in the treatment of these diseases.

The transcription factor T-cell acute lymphocytic leukemia (TAL)-1 is a major T-cell oncogene associated with poor prognosis in T-cell acute lymphoblastic leukemia (T-ALL). TAL1 binds histone deacetylase 1 and incubation with histone deacetylase inhibitors (HDACis) promotes apoptosis of leukemia cells obtained from TAL1 transgenic mice. Here, we show for the first time that TAL1 protein expression is strikingly downregulated upon histone deacetylase inhibition in T-ALL cells. This is due to decreased TAL1 gene transcription in cells with native TAL1 promoter, and due to impaired TAL1 mRNA translation in cells that harbor the TAL1(d) microdeletion and consequently express TAL1 under the control of the SCL/TAL1 interrupting locus (SIL) promoter. Notably, HDACi-triggered apoptosis of T-ALL cells is significantly reversed by TAL1 forced overexpression. Our results indicate that the HDACi-mediated apoptotic program in T-ALL cells is partially dependent on their capacity to downregulate TAL1 and provide support for the therapeutic use of HDACi in T-ALL.

Interleukin 7 (IL-7) and its receptor, formed by IL-7Rα (encoded by IL7R) and γc, are essential for normal T-cell development and homeostasis. Here we show that IL7R is an oncogene mutated in T-cell acute lymphoblastic leukemia (T-ALL). We find that 9% of individuals with T-ALL have somatic gain-of-function IL7R exon 6 mutations. In most cases, these IL7R mutations introduce an unpaired cysteine in the extracellular juxtamembrane-transmembrane region and promote de novo formation of intermolecular disulfide bonds between mutant IL-7Rα subunits, thereby driving constitutive signaling via JAK1 and independently of IL-7, γc or JAK3. IL7R mutations induce a gene expression profile partially resembling that provoked by IL-7 and are enriched in the T-ALL subgroup comprising TLX3 rearranged and HOXA deregulated cases. Notably, IL7R mutations promote cell transformation and tumor formation. Overall, our findings indicate that IL7R mutational activation is involved in human T-cell leukemogenesis, paving the way for therapeutic targeting of IL-7R-mediated signaling in T-ALL.

The importance of microenvironmental factors for driving progression in leukemia has been debated. Previous evidence has pointed to interleukin-7 (IL-7), a fundamental cytokine to normal T-cell development and homeostasis, as an important determinant of the viability and proliferation of T-cell acute lymphoblastic leukemia (T-ALL) cells in vitro. In this study, we report that IL-7 is also a critical determinant of T-ALL progression. T-ALL cell lines and primary T-ALL samples initiated leukemia more slowly when engrafted to immunocompromised Rag2(-/-)IL2rg(-/-) mice lacking IL-7. This effect was not related to reduced engraftment or homing of transplanted cells to the bone marrow. Instead, IL-7 deficiency diminished expansion of leukemia cells in the bone marrow and delayed leukemia-associated death of transplanted mice. Moreover, infiltration of different organs by T-ALL cells, which characterizes patients with advanced disease, was more heterogeneous and generally less efficient in IL-7-deficient mice. Leukemia progression was associated with increased Bcl-2 expression and cell viability, reduced p27(Kip1) expression, and decreased cell-cycle progression. Clinical measurements of IL-7 plasma levels and IL-7 receptor (IL-7R) expression in T-ALL patients versus healthy controls confirmed that IL-7 stimulates human leukemia cells. Our results establish that IL-7 contributes to the progression of human T-cell leukemia, and they offer preclinical validation of the concept that targeting IL-7/IL-7R signaling in the tumor microenvironment could elicit therapeutic effects in T-ALL., (©2011 AACR.)

Background: The unique responsiveness of Vgamma9Vdelta2 T-cells, the major gammadelta subset of human peripheral blood, to non-peptidic prenyl pyrophosphate antigens constitutes the basis of current gammadelta T-cell-based cancer immunotherapy strategies. However, the molecular mechanisms responsible for phosphoantigen-mediated activation of human gammadelta T-cells remain unclear. In particular, previous reports have described a very slow kinetics of activation of T-cell receptor (TCR)-associated signal transduction pathways by isopentenyl pyrophosphate and bromohydrin pyrophosphate, seemingly incompatible with direct binding of these antigens to the Vgamma9Vdelta2 TCR. Here we have studied the most potent natural phosphoantigen yet identified, (E)-4-hydroxy-3-methyl-but-2-enyl pyrophosphate (HMB-PP), produced by Eubacteria and Protozoa, and examined its gammadelta T-cell activation and anti-tumor properties., Methodology/principal Findings: We have performed a comparative study between HMB-PP and the anti-CD3epsilon monoclonal antibody OKT3, used as a reference inducer of bona fide TCR signaling, and followed multiple cellular and molecular gammadelta T-cell activation events. We show that HMB-PP activates MEK/Erk and PI-3K/Akt pathways as rapidly as OKT3, and induces an almost identical transcriptional profile in Vgamma9(+) T-cells. Moreover, MEK/Erk and PI-3K/Akt activities are indispensable for the cellular effects of HMB-PP, including gammadelta T-cell activation, proliferation and anti-tumor cytotoxicity, which are also abolished upon antibody blockade of the Vgamma9(+) TCR Surprisingly, HMB-PP treatment does not induce down-modulation of surface TCR levels, and thereby sustains gammadelta T-cell activation upon re-stimulation. This ultimately translates in potent human gammadelta T-cell anti-tumor function both in vitro and in vivo upon transplantation of human leukemia cells into lymphopenic mice,, Conclusions/significance: The development of efficient cancer immunotherapy strategies critically depends on our capacity to maximize anti-tumor effector T-cell responses. By characterizing the intracellular mechanisms of HMB-PP-mediated activation of the highly cytotoxic Vgamma9(+) T-cell subset, our data strongly support the usage of this microbial antigen in novel cancer clinical trials.

Mutations in the phosphatase and tensin homolog (PTEN) gene leading to PTEN protein deletion and subsequent activation of the PI3K/Akt signaling pathway are common in cancer. Here we show that PTEN inactivation in human T cell acute lymphoblastic leukemia (T-ALL) cells is not always synonymous with PTEN gene lesions and diminished protein expression. Samples taken from patients with T-ALL at the time of diagnosis very frequently showed constitutive hyperactivation of the PI3K/Akt pathway. In contrast to immortalized cell lines, most primary T-ALL cells did not harbor PTEN gene alterations, displayed normal PTEN mRNA levels, and expressed higher PTEN protein levels than normal T cell precursors. However, PTEN overexpression was associated with decreased PTEN lipid phosphatase activity, resulting from casein kinase 2 (CK2) overexpression and hyperactivation. In addition, T-ALL cells had constitutively high levels of ROS, which can also downmodulate PTEN activity. Accordingly, both CK2 inhibitors and ROS scavengers restored PTEN activity and impaired PI3K/Akt signaling in T-ALL cells. Strikingly, inhibition of PI3K and/or CK2 promoted T-ALL cell death without affecting normal T cell precursors. Overall, our data indicate that T-ALL cells inactivate PTEN mostly in a nondeletional, posttranslational manner. Pharmacological manipulation of these mechanisms may open new avenues for T-ALL treatment.

T-cell acute lymphoblastic leukemia (T-ALL) is a biologically heterogeneous disease with respect to phenotype, gene expression profile and activation of particular intracellular signaling pathways. Despite very significant improvements, current therapeutic regimens still fail to cure a portion of the patients and frequently implicate the use of aggressive protocols with long-term side effects. In this review, we focused on how deregulation of critical signaling pathways, in particular Notch, PI3K/Akt, MAPK, Jak/STAT and TGF-beta, may contribute to T-ALL. Identifying the alterations that affect intracellular pathways that regulate cell cycle and apoptosis is essential to understanding the biology of this malignancy, to define more effective markers for the correct stratification of patients into appropriate therapeutic regimens and to identify novel targets for the development of specific, less detrimental therapies for T-ALL.

The authors describe a family (mother, son and two daughters) with mitochondrial myopathy. The mother was asymptomatic. Two daughters had lactic acidosis and myoclonic epilepsy, mild dementia, ataxia, weakness and sensory neuropathy. The son suffered one acute hemiplegic episode due to an ischemic infarct in the right temporal region. All the patients studied had hypertension. EEG disclosed photomyoclonic response in the proband patient. Muscle biopsy disclosed ragged-red fibers and abnormal mitochondria by electron microscopy. Biochemical analysis showed a defect of cytochrome C oxidase in mitochondria isolated from skeletal muscle. Several clinical and genetic aspects of the mitochondrial encephalomyopathies are discussed.

Kinetic studies of T4 and T3 metabolism were performed on 5 healthy volunteers from Rio de Janeiro to obtain normal values for thyroid hormone metabolism. 125I-T4 and 131I-T3 were administered in bolus and blood samples taken during 7 days. Circulating tracers were isolated by Sephadex G-25 chromatography. The kinetic parameters of T4 and T3 metabolism were calculated by noncompartmental methods. Metabolic clearance rates were 1.04 l/day for T4 and 20.7 l/day for T3. The daily production rate was estimated at 94 micrograms/day for T4 and 23 micrograms/day for T3 and their exchangeable pools at 914 micrograms and 25.5 micrograms, respectively. These values are well within the range of those reported by North American or European authors for normal subjects.