Search

Giriş ve Amaç: Günümüzde kanser tedavisinde destekleyici ve alternatif tedavilere yönelim söz konusudur. Bu nedenle, çalışmada kurkuminin hücre canlılığı ve hücre göçü üzerine etkisi MCF-7 meme kanseri ve L929 fibroblast hücrelerinde GSK-3beta ve VEGF molekülleri aracılığı ile araştırılması amaçlandı.Gereç ve Yöntemler: Deneyde, sitotoksisite düzeyini MTT yöntemi ile belirlemek amacıyla, MCF-7 meme kanseri ve L929 fibroblast hücrelerine kurkumin beş farklı konsantrasyonda (5, 10, 20, 40 ve 80 µM) 24 ve 48 saat süre ile uygulandı. İmmunositokimya boyaması için, hücreler 5µM, 20µM ve 80µM kurkumin ile 48 saat muamele edildi. GSK-3beta ve VEGF ekspresyonları immunositokimyasal olarak belirlendi. İmmunositokimya boyanma sonuçları H-skor yöntemi ile değerlendirildi. Hücre göçü için, çizik yara modeli üç konsantrasyonda 48 saat süre ile muamele edilerek gerçekleştirildi, ve yara kapanma yüzdesi hesaplandı. Tüm sonuçlar istatistiksel olarak analiz edildi.Bulgular: MTT analizi sonrasında, kurkuminin L929 hücreleri ile karşılaştırıldığında, MCF-7 kanser hücreleri üzerinde doza bağlı toksik etkiye sahip olduğu gözlendi. GSK-3beta ve VEGF’nin immunositokimyasal dağılımları, MCF-7 hücrelerinde kurkumin uygulanması ile belirgin bir şekilde azaldı. Bununla birlikte, kurkumin, kontrol grubu MCF-7 hücreleri ve L929 hücreleri ile karşılaştırıldığında hücre göçü üzerinde belirgin bir inhibitör etki gösterdi. Sonuç: Kurkuminin moleküler etki mekanizmalarının bilinmesi, kanser tedavisinde kullanımı açısından güvenilirliğini destekleyen bir faktördür. Etki mekanizmasının tamamen ortaya konulabilmesi için in vivo çalışmalara ve gelişmiş tekniklere ihtiyaç vardır., Objective: Nowadays, there is a tendency towards supportive and alternative therapies in cancer treatment. So, the aim was to search the effect of curcumin on the cell viability and migration via GSK-3beta and VEGF in MCF-7 breast cancer cells and L929 fibroblast cells.Materials and Methods: In the experiment, MCF-7 breast cancer cells and L929 fibroblast cells were treated with curcumin at five concentrations (5, 10, 20, 40 and 80µM) for 24 and 48 hours, and MTT assay was used to detect the cytotoxicity level of curcumin. For immunocytochemical staining, both cells were exposed with 5µM, 20µM and 80µM of curcumin for 48 hours. The immunocytochemistry method was performed to evaluate the expressions of GSK-3beta and VEGF. The immunocytochemical results were evaluated using H-score. For cell migration, the scratch wound assay was done at three concentrations for 48 hours, and the percentage of wound closure was calculated. All data were analyzed statistically.Results: After MTT assay, it was observed that curcumin had a dose-dependent toxic effect on MCF-7 cancer cells compared to L929 cells. The immunocytochemical distributions of GSK-3beta and VEGF were significantly decreased with the curcumin treatment in MCF-7 cells. However, curcumin showed a marked inhibitory effect on the cell migration in comparison with the non-treated MCF-7 cells and L929 cells.Conclusion: Knowing the molecular effect mechanisms of curcumin used in cancer treatment is a factor that supports their reliability in terms of use. In vivo studies and advanced techniques are needed to fully reveal the mechanism of action.

Amaç: Çalışmamızda, deneysel kafa travması modeli oluşturulan sıçanlara üç farklı dozda verilen Pioglitazon'un beyinde koruyucu (nöroprotektif) etkisinin araştırılması amaçlandı.Gereç ve Yöntem: Deneyde erkek sıçanlarda ağırlık düşürme yöntemi ile travma oluşturuldu. Denekler; kontrol, travma, travma+serum fizyolojik su (SF), travma+1 mg/kg PG, travma+10 mg/kg PGve travma+30 mg/kg PG olmak üzere altı gruba ayrıldı. İlk ilaç uygulaması kafa travmasıdan 30 dak önce yapıldı. PG, 100µl serum fizyolojik suda hazırlanarak 1mg/kg, 10mg/kg ve 30mg/kg dozlarında intraperitoneal olarak 5 gün süreyle günde tek doz olarak verildi. İlaç uygulamaları sonrası 7. ve 28.günlerde genel anestezi altında hayvanlardan beyin örnekleri çıkarılarak %10'luk formalinde tespit edildi. Doku örneklerinden kesitler alınıp histopatolojik incelemeler yapıldı.Bulgular: Beyin dokusu örnekleri histolojik açıdan incelendiğinde, travma ve travma+SF gruplarında belirgin doku hasarının meydana geldiği, nöronlarda piknozis ve sitoplazmada vakuollerin varlığı görüldü. PG uygulaması sonrası, hasarın 28.gün örneklerinde 7.gün örneklerine göre belirgin şekilde azaldığı izlendi. Yüksek dozdaki PG uygulamasının, diğer dozlara oranla daha etkin olduğu saptandı.Sonuçlar: PG uygulamasının, kafa travması modelinde hayvanlarda doku hasarına karşı koruyuculuğu gösterildi. Bu nöroprotektif etkinin moleküller mekanizmalarının araştırılması, tedavi etkinliğinin ve hasta yaşam kalitesinin arttırılmasında yeni bir yaklaşım oluşmasını sağlayacaktır. Aim: In our study, we aimed to investigate the protective (neuroprotective) effect of Pioglitazone (PG) in three different doses to rats with experimental common brain injury.Materials and Method: In the experiment, male rats were traumatized by weight throw method. Rats were divided into six groups; control, trauma, trauma+saline, trauma+1 mg/kg PG, trauma+10 mg/kg PG and, trauma+30 mg/kg PG. The first drug administration was performed 30 minutes before brain trauma. PG was prepared in 100µl saline and was given as a single dose daily for 5 days at doses of 1 mg/kg, 10 mg/kg and 30 mg/kg intraperitoneally. On the 7th and 28th days after drug administration, brain samples were taken from animals under general anesthesia and fixed in 10% formalin. Sections were taken from tissue samples and histopathological examinations were performed by histochemical, immunohistochemical (eNOS, iNOS, NeuN) and TUNEL staining methods. The stained samples were observed under light microscope. Results were determined using One-Way ANOVA test statistically.Results: Histological examination of brain tissues showed significant tissue damage in trauma and trauma+saline groups, picnosis in neurons and vacuoles in cytoplasm. After PG application, it was observed that the damage decreased significantly in 28th day samples compared to the 7th day samples. The high dose (30 mg/kg) of PG was found to be more effective than other doses.Conclusion: PG was shown to be protective against tissue damage in animals in the head trauma model. Investigation of the molecular mechanisms of this neuroprotective effect will lead to a new approach in improving treatment efficiency and patient quality of life. 93

Amaç: Çalışmamızda kemik iliği kaynaklı mezenkimal kök hücrelerin, sıçan endometriyumuna uygulanmasından sonra blastosistin implantasyonunda rol oynayan moleküller üzerine etkilerinin incelenmesi amaçlandı.Gereç ve Yöntem: Çalışmamızda, dişi sıçanlar serum fizyolojik grubu (SFG, n:7), besiyeri grubu (BYG, n:7), besiyeri ve kök hücre (BY+KHU, n:7) olmak üzere üç gruba ayrıldı. Vajinal sitoloji yöntemi ile östrus siklusunda oldukları belirlenen deneklere serum fizyolojik (200 μL), besiyeri (200 μL) ve 200 μL BY içinde 1x106 kemik iliği kaynaklı farklılaşmamış mezenkimal kök hücreler uterus ve periton içine uygulandı ve çiftleşmeye bırakıldı. Gebeliğin yedinci gününde alınan uterus örnekleri histokimyasal olarak hematoksilen-eozin ile, immunohistokimyasal olarak anti-Stro-1, anti-c-kit, anti-Laminin, anti-Fibronektin, anti-L-Selektin, anti-TGFbeta- 1, anti-IGFR1, anti-VEGF, anti-PCNA, anti-İntegrin, anti-eNOS, anti-iNOS ve TUNEL yöntemleri ile boyanarak ışık mikroskop altında incelendi. Sonuçlar One- Way ANOVA istatistik analizi kullanılarak değerlendirildi.Bulgular: Değerlendirme sonucunda gebeliğin yedinci gününde uterusta Stro-1, c- kit, Laminin, Fibronektin, L-Selektin, TGFbeta-1, IGFR1, VEGF, PCNA ve İntegrin varlığı görüldü. Besiyeri ile birlikte verilen kök hücrenin bu parametrelerde artış sağladığı, oksidatif stres belirteçleri eNOS ve iNOS'ta ise azalmaya neden olduğu belirlendi. Apoptotik hücre varlığının da kök hücre uygulaması ile azaldığı izlendi. Sonuçlar: Bu çalışmada, implantasyon süreçlerinde rol oynayan moleküllerin, kök hücre uygulaması ile meydana gelen farklı dağılımları ortaya konmuştur. Kök hücre uygulamalarının, infertiliteye neden olan mekanizmaların içerisinde yer alan bu moleküllerin tedavisine klinikte katkı sağlayabileceği düşünülmüştür.Anahtar Sözcükler: Mezenkimal Kök Hücre, İmplantasyon, Endometriyum, Histoloji. Aim: In our study, it was aimed to investigate molecules play a role in blastocyst implantation after bone marrow derived mesenchymal stem cell application into the rat endometriyum.Materials and Method: Female rats were divided into three groups which were saline (SFG, n:7), media (BYG, n:7), stem cell in media (BY+KHU, n:7). After vaginal smear technique, female rats in estrous cylcle were injected into the uterine and periton 200 μL saline, 200 μL culture media and 1x106 cell/200 μL culture media. The pregnant female rats on the 7. day were sacrificed and uterine samples removed and were stained with heamatoxylin-eosin histochemically and anti-Stro-1, anti-c-kit, anti-Laminin, anti-Fibronektin, anti-L-Selektin, anti-TGFbeta-1, anti- IGFR1, anti-VEGF, anti-PCNA, anti-İntegrin, anti-eNOS, anti-iNOS and TUNEL immunohistochemically and obseved under light microscope. Results were determined using One-Way ANOVA test statistically.Results: Stro-1, c-kit, Laminin, Fibronektin, L-Selektin, TGFbeta-1, IGFR1, VEGF, PCNA and İntegrin immunoreactivities were determined into the uterine from the pregnant female rats on the 7. day. It was indicated that, administration of stem cells with media, was increased these parameters and reduced the oxidative stress markers eNOS and iNOS. Also number of apoptotic cells were decreased due to application of stem cells.Conclusion: In this study, it was revealed that distribution of molecules play role in implantation were changed due to stem cell application. It is supposed that stem cell treatments can be cured the molecules caused infertility.Key Words: Mesenchymal stem cell, Implantation, Endometriyum, Histology. 235

Bu çalışmanın amacı, yaşayan Türkiye'li sanatçıların yurt dışındaki bienal ve fuar katılımlarını analiz etmek ve bu sanat etkinliklerine en çok katılım gösteren sanatçıları tespit etmektir. En çok katılım gösteren sanatçıların başarılı olmalarında yurt dışı bağlantılarının etkisine bakılmıştır. Sanatçıların yurt dışı bağlantıları; eğitim, yaşanılan ülke, yurt dışı sergileri, ödül ve misafir sanatçı programları üzerinden değerlendirilmiştir. Günümüze kadarki yurt dışı bienal ve fuar katılımlarının analiz edildiği çalışmada, yıllara oranla katılım sıklığı değerlendirilmiştir. Sanatçı katılımlarının coğrafi açıdan küresel dağılımı incelenmiştir. Yapılan çalışmada Türk galerilerinin de yurt dışı fuar aktivitelerine bakılmıştır. Çalışma da nicel araştırma metotu kullanılmıştır.Anahtar Kelimeler: Çağdaş Türkiye'li sanatçılar, sanat fuarları, bienaller, sanat galerileri In this research, the participation of Turkish artists in internationally acknowledged fairs and biennales have been analyzed and determined Turkish artists who outshined others in these events. By collecting information about outshined Turkish artists' attendance in these fairs and biennales, a study have been researched on the effects of international networks. With respect to this criteria, the characteristics of those artists who presented the most attendance in these featured events have been analyzed in accordance with their educational background, residential status, awards/grants, and artist residency attendance. Art fairs and biennials were elaborated with the attendance frequency of year by year. Global distribution were examined in terms of geographical spreading. In this research, the role of Turkish art galleries' in the market was also demonstrated regarding to attendance of art fairs. In this study quantitive research methods was used.Key Words: Contemporary Turkish artists, art fairs, biennials, art galleries 112

Nöral tüp defektleri (NTD) erken embriyonik dönemde nöral tüp (NT) kapanmasındakibaşarısızlığa bağlı oluşan ve insan doğumsal malformasyonlarının en sık nedeni olan bir grupgelişim bozukluğudur. NTD diğer birçok merkezi sinir sistemi (MSS) bozuklukları ile de ilişkilidir.Hücreler arası maddede yaygın olarak bulunan proteoglikanlar (PG) merkezi bir protein ve bunabağlı karbonhidrat zincirlerinden oluşur, karbonhidrat kısımları glikozaminoglikan (GAG) olarakadlandırılır. GAG oluşumu NT gelişiminde önemlidir. Doğum öncesi dönemde deneyhayvanlarına alkol uygulaması NTD ve gelişme geriliği yapmaktadır. Alkol, folat yetmezliği veoksidatif stres oluşturmaktadır. Bu ilişkiler nedeniyle, erken gelişim sırasında ılımlı alkoluygulamasının NT oluşumu üzerine etkileri, GAG' ları koruyan ve gözlemini sağlayan bir yöntemolan kritik elektrolit konsantrasyonu (KEK) ile araştırıldı.Bu çalışmada Manisa Tavuk Hastalıkları Araştırma ve Aşı Üretim Merkezi (VeterinerKontrol ve Araştırma Enstitüsü Müdürlüğü)' den temin edilen Spesifik Patojen Free (SPF) tavukyumurtaları kullanıldı. Yumurtalar; kontrol ve uygulama olmak üzere iki gruba ayrılarak inkübeedildi. İnkübasyonun 33. saatinde (Hamburger ve Hamilton (HH)-evre-9-10) uygulama grubuyumurtalara 100 µL % 10, 15 ve 20' lik etanol enjekte edildi. Kontrol grubuna ise hiçbir işlemyapılmadı. Uygulama grubu yumurtalar, uygulamadan 24 saat sonra açılarak embriyolar Saint-Marie's tespit solüsyonunda fikse edildi. Kontrol grubuna ait örnekler de uygulama grubu ile aynıanda açılarak tespit edildi. Embriyoların bir kısmı, kontrol ve uygulama grubu arasındaki farkıbelirlemek amacı ile total olarak görüntülendi ve NT genel yapısını görüntülemek içinHematoksilen-Eosin (HE) ile boyanmış örneklerde çalışıldı. GAG' ların varlığı, dağılımı veçeşitleri KEK ile hazırlanmış Alcian-Blue 8 GX (AB) ve Periodik asid- Schiff (PAS) ilehistokimyasal olarak ışık mikroskobu düzeyinde incelendi.Yapılan total incelemede, kontrol grubu embriyolar, HH kriterlerine göre gelişimin 14. ile15. safhaları arasında bulundu ve organogenez normal seyrinde devam etti. % 10, 15 ve 20' liketanol uygulanmış deney gruplarında ise genel bir gelişim geriliği tespit edildi. Işık mikroskobuile genel yapı incelemesi sonucunda; nöral tüp kapanmasının tamamlandığı, yüzey ektodermiile nöroepitelin iki farklı epiteli oluşturacak şekilde birleştiği ve bu safhaya eşlik eden nöral krestgöçü belirlendi.GAG çeşitlerinin belirlendiği AB ile en koyu boyanan bölgeler bazal tabakalardır. kontrolgrubu NT bazal tabakasında ağırlıklı olarak kondroidin sülfat (Ch-S) ve dermatan sülfat (DS)olmak üzere sülfatlanmış glikozaminoglikanlar (S-GAG)' ların tümü, notokord bazal tabakasındaCh-S, nöral tübün lümene bakan yüzey kısmı ile nöral tüpten göç eden hücrelerin çevresindekialanda ise Ch-S ve DS fazladır. % 10' luk alkol uygulanmış embriyolarda; nöral tüp bazaltabakasında HA, nöral tübün lümene bakan yüzey kısmında ise özellikle GP' in baskın haldedir.% 15' lik alkol uygulanmış embriyolarda; NT bazal tabakasında HA' in azaldığı, DS ile Ch-S' ınbaskın olduğu, NT lümene bakan yüzey kısmında HA' in, nöral tüpten göç eden hücrelerinçevresindeki alanda ise heparin (HP) ve heparan sülfat (HS) bulunmuştur. % 20' lik alkoluygulanmış embriyolarda; notokord bazal tabakasında ise HP ile HS baskındır ve notokordbazal tabakasında Ch-S' ın bariz bir şekilde azalmıştır. Nöral tübün lümene bakan yüzeykısmında ise tüm GAG' lar yok denecek kadar azalmıştır.NT gelişimi sırasında alkole bağlı oluşan GAG değişiklikleri normal beyin ve medullaspinalis gelişimi için önemli rol oynar. NT oluşumu sırasında ılımlı alkol uygulaması, gebedeembriyonun etkilenmesine benzer şekilde, GAG' ların hem dağılımında değişikliklere hem degenel olarak azalmasına neden olmuştur. Bu sonuçların ileri çalışmalarla oluşan etkilerin geçdönem embriyolarında yapacağı bozukluklar araştırılarak NTD mekanizmalarındaki önemianlaşılmalıdır.Anahtar kelimeler: Nöral tüp gelişimi, etanol, glikozaminoglikanlar, piliç.CELAL BAYAR ÜNİVERSİTESİ FEN BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜNORMAL VE ALKOL İLE UYARILMIŞ PİLİÇ EMBRİYOSU NÖRAL TÜP GELİŞİMİNDEGLİKOZAMİNOGLİKANLARIN (GAG) HİSTOKİMYASAL OLARAK BELİRLENMESİYÜKSEK LİSANS TEZİIşıl AYDEMİRAnabilim Dalı : BiyolojiProgramı : Moleküler BiyolojiMANİSA 2006CELAL BAYAR ÜNİVERSİTESİ FEN BİLİMLERİ ENSTİTÜSÜNORMAL VE ALKOL İLE UYARILMIŞ PİLİÇ EMBRİYOSU NÖRAL TÜP GELİŞİMİNDEGLİKOZAMİNOGLİKANLARIN (GAG) HİSTOKİMYASAL OLARAK BELİRLENMESİYÜKSEK LİSANS TEZİIşıl AYDEMİRTezin Enstitüye Verildiği Tarih : 07.09.2006Tezin Savunulduğu Tarih : 15.09.2006Tez Danışmanı : Öğr. Gör. Dr. Beyhan GÜRCÜDiğer Jüri Üyeleri : Yrd. Doç. Dr. Selim UZUNOĞLUYrd. Doç. Dr. M. İbrahim TUĞLUMANİSA 2006 Neural tube defects (NTD) are a group of malformations that result from the failure ofthe neural tube to close early in embryonic development and among the most commoncongenital malformations in humans. NTD are associated with a number of other centralnervous system (CNS) and non-neural malformations. Proteoglycans (PG) that are common inthe extracelular matrix (ECM), are formed a core protein and related to carbohydrate chains,which that is termed glycosaminoglycan (GAG). GAG formation is important for the NTdevelopment. Prenatal ethanol exposure produces NTD and growth retardation in experimentalanimals. Alcohol is known to induce folate deficiency and produce oxidative stress. Therefore,we investigated the effect of moderate alcohol exposure on the GAGs during development NTby critical electrolyte concentration (CEC) principle which allows GAG to be properly preservedand visualized.In this study, SPF chicken eggs that were obtained from Manisa Chicken Diseases andvaccine Production Center (Veterinary Control and Research Institute Administration) wereused. Eggs were divided into two groups, control and expose, and incubated. 33. hours ofincubation (HH-stage-9-10), eggs were injected with 100 µL % 10 ethanol. The control goupwas injected serum physiologic. Ethanol injected eggs were opened after exposition 24 and 48hours later and embryos were fixed in Saint-Marie?s solution. The control group was openedand fixed at the same time with injected embryos. A part of total embryos were photographedto determine difference between control and exposed group. Haematoxylin- Eosine (HE)stained slides were studied to observe general structure of NT. Entity, distribution andalterations of GAGs were examined histochemically by stainig Alcian-Blue 8 GX within CriticalElectrolyte Concentrations and Periodic acid- Schiff (PAS) staining with light microscope.Ectoderm cells in the midline became columnar epithelia by elongation at induction ofnotocord. The nuclei of the cells were located in the basal. After neural plate formation,neuroepithelia formed neural folds by performing elevator-like movement. The NT formed byconjuction of neural folds.Staining of KEK showed that basal layers were densely stained and the dominant GAGalteration was hyaluronic acid (HA). With the progress of development, amount of GAGs inalcohol group were reduced compared to those of control group. In addition, all sulphated GAGs(sGAG) including chondroitin sulphate (Ch-S) and dermatan sulphate (DS) particularly in theneural basal layer, Ch-S in the basal layer of notocord and Ch-S with DS in the lumen face ofNT including migrating cells getting away from NT were increased compared to those of at otherregions. Application of %10 alcohol produced more HA in the basal layer of NT and moreglycoprotein (GP) in the lumen face of NT. Increasing alcohol by application of %15 producedless HA and more DS and Ch-S in the basal layer of NT and more DS and Ch-S in the lumenface of NT, more heparin (HP) and heparan sulphate (HS) in the migrating cells getting awayfrom NT. Application of %20 alcohol produced more HP and HS, and siginificantly less Ch-S inthe basal layer of notochord, more HA in the basal layer of NT and clearly less even none GAGin the lumen face of NT.Alterations of GAG during development of NT play important role for normal productionof brain and medulla spinalis. Moderate exposure of alcohol during NT formation which mimicsthe effect of alcohol on the embryo in pregnant women, caused decrease and topographicalalterations of GAG. These results require further investigation of these effects on the laterstages of embryos which may be of significance in the etiology of NTD.Key words: Neural tube development, ethanol, glycosaminoglycans, chick. 73