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Human primordial germ cells (hPGCs), the precursors of sperm and eggs, originate during weeks 2–3 of early post-implantation development$^{1}$. Using $\textit{in vitro}$ models of hPGC induction$^{2, 3, 4}$, recent studies have suggested that there are marked mechanistic differences in the specification of human and mouse PGCs$^{5}$. This may be due in part to the divergence in their pluripotency networks and early post-implantation development$^{6, 7, 8}$. As early human embryos are not accessible for direct study, we considered alternatives including porcine embryos that, as in humans, develop as bilaminar embryonic discs. Here we show that porcine PGCs originate from the posterior pre-primitive-streak competent epiblast by sequential upregulation of SOX17 and BLIMP1 in response to WNT and BMP signalling. We use this model together with human and monkey $\textit{in vitro}$ models simulating peri-gastrulation development to show the conserved principles of epiblast development for competency for primordial germ cell fate. This process is followed by initiation of the epigenetic program$^{9, 10, 11}$ and regulated by a balanced $\textit{SOX17–BLIMP1}$ gene dosage. Our combinatorial approach using human, porcine and monkey $\textit{in vivo}$ and $\textit{in vitro}$ models provides synthetic insights into early human development.

We have already shown that seminal collection method affects seminal plasma composition and sperm quality in Corriedale rams. In this study, we evaluated the effect of seminal plasma collected by electroejaculation or artificial vagina on sperm resistance to cryodamage. Seminal plasma of five rams of the Corriedale breed collected by artificial vagina or electroejaculation was added before freezing to sperm cells collected by the two methods, and post-thaw quality parameters were evaluated. We found that seminal plasma has no effect on sperm resistance to cryodamage. However, we observed significantly higher percentages of sperm with intact and functional plasma membrane, intact acrosome and greater fertilizing potential after thawing in samples obtained by electroejaculation. This study demonstrates that sperm collected by electroejaculation are more resistant to damage caused by cryopreservation than those collected by artificial vagina. Fil: Ledesma, Alba. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina Fil: Manes, J.. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro Reg.buenos Aires. Estacion Exptal.agrop.balcarce. Laboratorio de Biotecnologia de la Reproduccion; Argentina Fil: Rios, Glenda Laura. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro Reg.buenos Aires. Estacion Exptal.agrop.balcarce. Laboratorio de Biotecnologia de la Reproduccion; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina Fil: Aller, J.. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro Reg.buenos Aires. Estacion Exptal.agrop.balcarce. Laboratorio de Biotecnologia de la Reproduccion; Argentina Fil: Cesari, Andreina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Mar del Plata. Instituto de Investigaciones Biológicas; Argentina. Universidad Nacional de Mar del Plata; Argentina Fil: Alberio, R.. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro Reg.buenos Aires. Estacion Exptal.agrop.balcarce. Laboratorio de Biotecnologia de la Reproduccion; Argentina Fil: Hozbor, F.. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro Reg.buenos Aires. Estacion Exptal.agrop.balcarce. Laboratorio de Biotecnologia de la Reproduccion; Argentina

Five Argentine Pampinta (dairy breed) and six Corriedale (dual-purpose breed) adult rams were used to study the effect of season on sexual behavior, plasma testosterone (T) and semen characteristics for a period of 1 year. Scrotal circumference (SC) and T concentrations were determined at 2-week intervals. Each ram was exposed monthly to three ovariectomized ewes in one 20-min test and the total number of mounts and successful matings were recorded. Semen collection was attempted from each ram twice weekly for six consecutive weeks during each season. In both breeds, SC varied seasonally showing the lowest mean values during winter and spring and in the Corriedale rams (32.8 ± 0.3 cm) was smaller (p0.05) was recorded in T concentration between breeds and both breeds reached a peak in summer and autumn. Number of matings showed the maximal values in autumn in both breeds. Season had no significant effect on mass motility, sperm concentration and percentage of live sperm. Semen volume, percentage of progressive motility and total sperm per ejaculate were higher during summer and autumn than in other seasons of the year. Pampinta rams had thehighest values (p, Cinco carneros adultos Pampinta Argentina (raza lechera) y seis Corriedale (raza doble propósito) fueron utilizados para estudiar el efecto de la estación del año sobre el comportamiento sexual, testosterona plasmática (T) y características seminales. La circunferencia escrotal (CE) y las concentraciones de T fueron determinadas cada dos semanas. Mensualmente, cada carnero fue expuesto a tres ovejas ovariectomizadas en una prueba de 20 min y se registró el número total de montas y apareamientos. La colección del semen fue intentada dos veces por semana por seis semanas consecutivas durante cada estación. En ambas razas los menores valores de CE fueron observados en invierno y primavera (Corriedale = 32,8 ± 0,3 cm; Pampinta = 34,4 ± 0,4 cm; p0,05) sobre la motilidad masal, la concentración espermática y el porcentaje de espermatozoides vivos. El volumen del eyaculado, el porcentaje de motilidad progresiva y el número total de espermatozoides fueron mayores en el verano y otoño. La raza del carnero tuvo un efecto (p

Las técnicas para producir embriones bovinos, en estadios de preimplantación mediante la maduración de ovocitos y su posterior fertilización in vitro, ofrece la posibilidad de obtener embriones a bajo costo para ser utilizados con fines de estudio (desarrollo embrionario temprano, transgénesis, clonación) o con propósitos comerciales. Las condiciones de cultivo in vitro pueden influenciar significativamente el desarrollo embrionario, determinando cambios responsables de su menor calidad, comparados con los embriones producidos in vivo . En particular, la adición de suero a los medios de cultivo altera tanto la morfología embrionaria como su calidad, y su eliminación posibilitaría producir embriones de buena calidad para ser criopreservados y transferidos. Los objetivos de esta revisión son describir los aspectos generales del cultivo in vitro de embriones y resumir algunas hipótesis referidas a los mecanismos por los cuales el suero podría alterar el desarrollo y la calidad embrionaria. Techniques for producing bovine preimplantation embryos by in vitro maturation and fertilization, offers the potential for a large number of embryos at low cost to be used for basic scientific research (embryo development, transgenesis, cloning) or for commercial purposes. Embryo culture conditions can influence in vitro embryo development significantly, provoking deviations responsible for low quality compared with in vivo counterparts. In particular, serum supplementation alters both embryo morphology and quality and eliminating serum from the media could be beneficial to produce good quality embryos for cryopreservation and embryo transfer. The objectives of this review are to describe the general aspects of in vitro embryo culture and summerize some hypotheses about the way serum could alter embryo development and quality.

The objectives of this work were to evaluate the efficiency ofin vitroproduction (IVP) of embryos from ovariectomized cows and the pregnancy rate of transferred frozen-thawed embryos. One hundred and twenty Argentine-Holland cows were ovariectomized in 6 sessions by using the effeminator by vaginal via. The ovaries were transported at 18-22°C into saline solution supplemented with antibiotics during 6 h and processed whitin of 11 h since the first ovary obtained. Cumulus-oocytes complexes (COCs) were aspirated from small antral follicles (2-8 mm in diameter). The COCs were matured in TCM 199 plus 10% oestrus cow serum for 22 h. Following maturation the oocytes were fertilised with frozen-thawed semen in TALP medium and cultured in CR1aa medium. At Day 7 and 8 after fertilisation, good quality blastocysts and expanded blastocysts were equilibrated in 1.5 M ethylene glycol. Two embryos were loaded into 0.25 ml straws and frozen. The embryos were thawed and directly transferred into the recipients. A total 57 dairy heifer was used as recipients. Pregnancy diagnosis was performed by rectal palpation 55 d after embryo transfer. The efficiency of IVP technology was 9.5 oocytes and 2.7 embryosperovary. The overall pregnancy rate was 31.5%. A higher pregnancy rate (P, Los objetivos de este trabajo fueron evaluar la eficiencia de la producciónin vitro(PIV) de embriones empleando ovocitos de vacas ovariectomizadas y determinar la tasa de preñez después de la transferencia de embriones descongelados. Ciento veinte vacas Holando Argentino de alto valor productivo fueron ovariectomizadas en 6 sesiones de 18-25 vacas, utilizando un ovariótomo por vía vaginal. Los ovarios fueron transportados entre 18-20°C en solución salina con antibióticos durante 6 horas y procesados dentro de las 11 horas de comenzadas las ovariectomías. Los Complejos Cumulus-Ovocitos (CCOs) fueron aspirados de folículos antrales (2-8 mm de diámetro). Los CCOs fueron madurados en TCM 199 suplementado con 10% de suero de vaca en estro durante 22 horas. Luego de la maduración, los ovocitos fueron inseminados con semen descongelado y cultivados en medio CR1aa. A los 7 y 8 días después de la fecundación, los blastocistos y blastocistos expandidos de buena calidad fueron equilibrados en 1,5 M etilenglicol. Se colocaron dos embriones por pajuela de 0,25 ml y posteriormente fueron congelados. Los embriones descongelados fueron transferidos directamente a las receptoras. Un total de 57 vaquillonas lecheras fueron utilizadas como receptoras. El diagnóstico de preñez fue realizado por palpación rectal a los 55 días después de la transferencia. La eficiencia en la PIV fue de 9,5 ovocitos y 2,7 embriones por ovario y la tasa total de preñez fue 31,5%. La tasa de gestación obtenida con embriones de 7 días (35,5%) fue significativamente mayor (P

A treatment based on progesterone impregnated vaginal sponges has been used to control breeding in suckled beef cows under grazing conditions. However, fertility has not always been satisfactory. The objective of this trial was to determine whether fertility of treated cows was affected by the following factors: parity and duration of treatment (exp. 1), presence of signs of oestrus at the moment of timed AI and duration of postpartum in anoestrus cows (exp. 2), the time for double timed AI and reduction to a single timed AI (exp. 3). Spring-calved suckled Angus cows 30 to 90 days (d) postpartum, in good body condition, were used. Cows received 10 mg of oestradiol benzoate i.m. and a vaginal sponge containing 2 g of progesterone (ESP treatment). Exp. 1. Parity (primiparous, n=53 vs multiparous, n=83) and duration of ESP (8 d, n=72 vs 11 d, n=71) were evaluated. Timed artificial inseminations were carried out 48 and 72 hs after sponge removal (AI-T). Pregnancy rates at AI-T and accumulated after 30 days of AI (pregnancy rate at day 30 = pregnancy at AI-T and at return to oestrus) were determined. Both factors did not interact (p > 0.05). ESP duration had no effect on pregnancy rate at AI-T and at day 30: 38 vs 42% and 56 vs 61%, 8 vs 11 d respectively (p > 0.05). Multiparous cows tended to present higher pregnancy rates at AI-t and at day 30: 39 vs 23% and 46 vs 28% (p < 0.1) multiparous vs primiparous respectively. Exp. 2. Anoestrus multiparous cows (n=124) were treated with ESP during 11 d. Procedures were similar to those in exp. 1. Oestrous rate was 24% and it appeared between 36 and 48 hours after treatment. Pregnancy rate at AI-t was 53 and 44% in oestrous cows and non oestrous cows (p > 0.05) while pregnancy rate at day 30 was 64 and 60% respectively. In those cows in which exact parturition date was available no different pregnancy rate at AI-t was found when cows were treated between postpartum days 30 to 59 (n=15), 60 to 89 (n=28) or 90 to 145 (n=20): 57, 55.3 and 52.6% respectively (p > 0.05). Exp. 3. Multiparous cows were treated with ESP during 11 d. The time for double AI-T had no effect on pregnancy rate: 38% when inseminated either at 48 and 72 hs (n=42) or 40 and 64 hs (n=47). The amount of AI-T did not affect the pregnancy rate: 22% with AI-T at 48 and 72 hs (n=46) vs 29% with one AI-T at 56 hs (n=48) (p > 0.05). In no case was pregnancy rate at day 30 affected. It is concluded that in ESP-treated postpartum beef cows, fertility tends to be lower in primiparous than multiparous cows. However, fertility is not affected by reduction of treatment duration from 11 to 8 d, presence of signs of oestrus in induced cows at timed AI, duration of postpartum anoestrus, displacement of double timed AI in 8 hours or reduction from double to single timed AI., Vacas Angus con cría, entre 30 y 90 días (d) posparto y con buena condición corporal, recibieron 10 mg de benzoato de estradiol i.m. y 2 g de progesterona mediante esponja vaginal (tratamiento ESP). Se determinó si la fertilidad fue afectada por: la duración del tratamiento y el número de partos (Exp. 1); la presentación de celo inducido al momento de la inseminación artificial sistemática –IAS– y la longitud del posparto, en vacas en anestro (Exp. 2); y la hora o la cantidad de IAS (Exp. 3). Exp.1. Se trató con ESP durante 8 u 11 d a vacas primíparas y multíparas. Se hizo IAS a las 48 y 72 horas de retiradas las esponjas. La IA continuó por 30 d. Se determinaron las tasas de preñez de la IAS y la acumulada en 30 d (preñadas en la IAS + preñadas en el retorno). El ESP aplicado durante 8 d (n=72) y 11 d (n=71) no afectó la preñez de la IAS: 38% y 42% respectivamente, ni la preñez acumulada en 30 d: 56% y 61%, respectivamente (p > 0.05). Las multíparas (n=83) tendieron a una mayor tasa de preñez respecto de las primíparas (n=53) en la IAS: 39% y 23%, y también en la acumulada en 30 d: 46% y 28%, respectivamente (p < 0.1). Exp. 2. Se trataron 124 vacas multíparas en anestro con ESP durante 11 d. Se inseminó como en Exp. 1. La tasa de celo inducido fue del 24% y se manifestó entre las 36 y 48 horas postratamiento. La preñez de la IAS fue del 53% en las vacas que presentaron celo y del 44% en las vacas sin celo, mientras que la preñez acumulada fue del 64% y 60%, respectivamente (p > 0.05). Las vacas en anestro tratadas entre los d posparto 30 a 59 (n=15), 60 a 89 (n=28) y 90 a 145 (n=20) tuvieron similar tasa de preñez en la IAS: 53%, 57% y 55%, respectivamente (p > 0.05). Exp.3. Se trataron vacas multíparas con ESP durante 11 d. En un rodeo se determinó el efecto de la IAS a las 40 y 64 horas (n=47) respecto de la IAS a las 48 y 72 horas (n=42): la tasa de preñez fue del 38% en ambos grupos. En otro rodeo se determinó el efecto de una IAS simple; las vacas se distribuyeron entre la IAS a las 48 y 72 horas (n=46) o las 56 horas (n=48): la tasa de preñez fue del 22 y 29%, respectivamente (p > 0.05), la preñez acumulada al d 30 no fue diferente. Se concluye que la fertilidad de vacas de cría tratadas con ESP tiende a ser menor en primíparas que en multíparas; pero no es afectada por la reducción del tratamiento de 11 a 8 d, la presentación o no de celo inducido al momento de la inseminación sistemática en vacas en anestro, la longitud del anestro posparto, el desplazamiento de la doble inseminación sistemática en 8 horas o la reducción a una inseminación sistemática simple. &nbsp