Search

Acetaminophen is a drug widely used in the world and easily accessible due to its antipyretic, analgesics characteristics, among others (1); however, exposure to toxic doses causes organic damage and even death. We present the case of an 18-year-old female patient who ingested 40 grams of acetaminophen and developed severe liver dysfunction, being treated with N-acetylcysteine (NAC) antidotal therapy according to the simplified scheme: Scottish and Newcastle Anti-emetic Pretreatment Paracetamol Poisoning Study Regimen (SNAP), presenting improvement in the clinical course and decrease in liver profiles, coagulation disorder, INR and resolution of the condition. RESUMEN El acetaminofén es un fármaco ampliamente usado en el mundo y de fácil acceso por sus características antipiréticas, analgésicas, entre otras (1); sin embargo la exposición a dosis tóxicas produce daños a nivel orgánico e incluso la muerte. Presentamos el caso de una paciente mujer de 18 años que ingirió 40 gramos de acetaminofén y desarrolló injuria hepática severa, siendo tratada con terapia antidotal de N-acetilcisteína (NAC) según el esquema simplificado: Scottish and Newcastle Anti-Emetic Pretreatment Paracetamol Poisoning Study Regimen (SNAP), presentando mejoría del curso clínico y disminución de los perfiles hepáticos, trastorno de coagulación, INR y resolución del cuadro.

N-Acetyl-l-cysteine (NAC) acts as a precursor of the tripeptide glutathione (GSH), one of the principal cell mechanisms for reactive oxygen species (ROS) detoxification. Chronic obstructive pulmonary disease (COPD) is associated with enhanced inflammatory response and oxidative stress and NAC has been used to suppress various pathogenic processes in this disease. Studies show that the effects of NAC are dose-dependent, and it appears that the efficient doses in vitro are usually higher than the achieved in vivo plasma concentrations. However, to date, the inconsistencies between the in vitro NAC antioxidant and anti-inflammatory in vitro effects, by reproducing the in vivo NAC plasma concentrations as well as high NAC concentrations. To do so, A549 were transfected with polyinosinic-polycytidylic acid (Poly (I:C)) and treated with NAC at different treatment periods. Oxidative stress, release of proinflammatory mediators and NFkB activation were analyzed. Results suggest that NAC at low doses in chronic administration has sustained antioxidant and anti-inflammatory effects, while acute treatment with high dose NAC exerts a strong antioxidant and anti-inflammatory response. Ministerio de Ciencia, Innovación y Universidades (PID2020-114871RB-I00) Conselleria de Cultura, Educación y Ciencia (Prometeo 2017/023/UV) Instituto de Salud Carlos III (PI20/01363) CIBERES (CB06/06/0027) 3.776 Q2 JCR 2021 0.550 Q1 SJR 2021 No data IDR 2021 UEV

Introdução: A nimesulida é um potente anti-inflamatório com efeitos rápidos e duradouros, mas também com alto risco de hepatotoxicidade. Objetivo: Este trabalho teve como objetivo prevenir a hepatotoxicidade induzida pela nimesulida por meio da associação de nimesulida a um hepatoprotetor. Materiais e Métodos: Primeiro, testamos três possíveis hepatoprotetores: N-acetilcisteína, L-carnitina e extrato de Gingko biloba em um modelo de células hepáticas in vitro. N-acetilcisteína e G. biloba apresentaram bom potencial hepatoprotetor. Selecionamos a N-acetilcisteína para continuar os estudos em um modelo animal. O estudo in vivo foi realizado com ratos Wistar machos divididos em 4 grupos: controle, nimesulida (100 mg/kg/dia), nimesulida (100 mg/kg/dia) + N-acetilcisteína (100 mg/kg/dia) e N-acetilcisteína isolada (100 mg/kg/dia). Os tratamentos foram realizados por gavagem, diariamente, por 15 dias. Resultados: Os animais que receberam nimesulida isoladamente apresentaram menor ganho de peso corporal em comparação ao controle. O ganho de peso corporal no grupo nimesulida + N-acetilcisteína foi maior que o nimesulida isolado, evidenciando menor toxicidade. No entanto, o ganho de peso corporal do grupo nimesulida + N-acetilcisteína ainda era menor do que os animais controle. Os animais tratados com nimesulida isoladamente apresentaram aumento da massa relativa do coração, fígado e baço e dano hepático significativo observado na microscopia quando comparados a outros grupos. A N-acetilcisteína co-administrada com nimesulida impediu o aumento da massa cardíaca, mas tal fato não ocorreu com o fígado e o baço. Conclusões: Este trabalho evidencia proteção parcial provocada pela associação de N-acetilcisteína e nimesulida contra hepatotoxicidade induzida por nimesulida. Introduction: Nimesulide is a potent anti-inflammatory with rapid and long-lasting effects, but also with a high risk of hepatotoxicity. Objective: This work aimed to prevent nimesulide-induced hepatotoxicity through the association of nimesulide with a hepatoprotective agent. Materials and Methods: First, we tested three hepatoprotective agents: N-acetylcysteine, L-carnitine, and Gingko biloba extract in an in vitro hepatic cell model. Both N-acetylcysteine and G. biloba showed promisor results. We selected N-acetylcysteine to continue the studies in an animal model. In vivo study was performed using male Wistar rats divided in 4 groups: control, nimesulide (100mg/kg/day), nimesulide (100mg/kg/day) + N-acetylcysteine (100mg/kg/day) and N-acetylcysteine alone (100mg/kg/day). Treatments were given by gavage, daily, for 15 days. Results: Animals receiving nimesulide alone showed lower body weight gain compared to control. Body weight gain in the nimesulide + N-acetylcysteine group was higher than nimesulide alone, evidencing lower toxicity. However, the body weight gain of the nimesulide + N-acetylcysteine group was still lower than the control animals. Animals treated with nimesulide alone presented an increased relative mass of heart, liver, and spleen and significant hepatic damage seen in microscopy when compared to other groups. N-acetylcysteine co-administered with nimesulide prevented the increased heart mass, but the same was not true with liver and spleen. Conclusions: This work evidence partial protection elicited by the association of N-acetylcysteine and nimesulide against nimesulide-induced hepatotoxicity. Introducción: La nimesulida es un potente antiinflamatorio con efectos rápidos y duraderos, pero también con un alto riesgo de hepatotoxicidad. Objetivo: Este estudio tuvo como objetivo prevenir la hepatotoxicidad inducida por nimesulida combinando nimesulida con un medicamento hepatoprotector. Materiales y métodos: Primero, probamos tres candidatos: N-acetilcisteína, L-carnitina y extracto de Gingko biloba en un modelo de células hepáticas in vitro. N-acetilcisteína y G. biloba mostraron buen potencial. A continuación, seleccionamos N-acetilcisteína para continuar los estudios en un modelo animal. El estudio in vivo se realizó con ratas Wistar machos divididas en 4 grupos: control,nimesulida (100 mg/kg/día), nimesulida (100 mg/kg/día) + N-acetilcisteína (100 mg/kg/día) y N-acetilcisteína aislada (100 mg/kg/día). Los tratamientos se realizaron por sonda, diariamente, durante 15 días. Resultados: Los animales que recibieron nimesulida sola mostraron menos aumento de peso corporal en comparación con el control. El aumento de peso corporal en el grupo de nimesulida + N-acetilcisteína fue mayor que el de nimesulida sola, mostrando menos toxicidad. Sin embargo, el aumento de peso corporal del grupo nimesulida + N-acetilcisteína fue aún menor que el de los animales de control. Los animales tratados con nimesulida sola mostraron un aumento en la masa relativa del corazón, el hígado y el bazo y un daño hepático significativo observado al microscopio en comparación con otros grupos. La N-acetilcisteína administrada conjuntamente con nimesulida evitó el aumento de la masa cardíaca, pero no sucedió lo mismo con el hígado y el bazo. Conclusiones: Este trabajo muestra una protección parcial causada por la asociación de N-acetilcisteína y nimesulida contra la hepatotoxicidad inducida por la nimesulida.

Niemann-Pick tipo C (NP-C) é uma doença lisossômica de depósito, causada por disfunção nas proteínas NPC1 ou NPC2, responsáveis pelo tráfego de lipídeos intracelular. Alterações genéticas em uma dessas proteínas resulta em acúmulo de colesterol não-esterificado e de glicoesfingolipídeos dentro do compartimento endossomal/lisossomal das células de pacientes afetados. Alguns estudos na literatura vêm relacionando o estresse oxidativo e a inflamação à fisiopatologia dessa doença, entretanto, por se tratar de uma doença genética rara, poucos estudos investigam como funcionam esses mecanismos deletérios em pacientes. Além disso, pouco se sabe sobre o efeito do tratamento com miglustate (N-butil-desoxinojirimicina) sobre o estresse oxidativo e inflamação, além da correlação com a melhora no dano neurológico observado nesses pacientes. Considerando que os marcadores de estresse oxidativo e inflamação tem se mostrado alvos importantes em doenças de acúmulo lisossomal e considerando que a NP-C não possui cura e nem tratamento satisfatório, objetivamos analisar esses parâmetros em pacientes durante o tratamento com miglustate com o intuito de melhor compreender a fisiopatologia da doença e futuros alvos terapêuticos. Foram avaliados parâmetros de dano ao DNA, produção de citocinas, estresse oxidativo, assim como marcadores plasmáticos de dano neurológico. Além disso, também foram investigados os efeitos in vitro da β-ciclodextrina nanoparticulada (NS β-CD) e dos antioxidantes N-Acetilcisteína (NAC) e Coenzima Q10 (CoQ10), em células de pacientes, no acúmulo de colesterol, nos parâmetros de estresse oxidativo, dano mitocondrial e na produção de citocinas. No primeiro capítulo desta tese encontramos um aumento na produção de citocinas pró e anti-inflamatórias em pacientes NP-C no momento do diagnóstico, bem como um efeito benéfico do miglustat ao diminuir as citocinas IL-1β, IL-6, IL-10 e TNF-α, nos pacientes NP-C tratados. Já no segundo capítulo mostramos que o estresse oxidativo e nitrativo pode estar a contribuir para a fisiopatologia da NP-C, pois os níveis de lipoperoxidação e os níveis de nitrito e nitrato estavam aumentados nesses pacientes quando comparados a indivíduos saudáveis, assim como o dano ao DNA. As nanopartículas contendo β-CD reduziram o colesterol acumulado nos fibroblastos NP-C. Este resultado foi potencializado pelo uso concomitante das nanopartículas com os antioxidantes NAC e CoQ10 em comparação com fibroblastos de indivíduos saudáveis. Além disso, tratamentos combinando nanopartículas de β-CD e antioxidantes podem reduzir o estresse oxidativo mitocondrial, demonstrando vantagens em relação ao β-CD livre. No terceiro capítulo verificamos uma redução dos níveis de dois dos marcadores plasmáticos de neurodegeneração avaliados (PAI-1 e PDGF-AA) em pacientes NP-C, além da normalização dos níveis de BDNF, NCAM, PFGF-AB/BB e Catepsina D. Com a análise molecular dos pacientes estudados no capítulo cinco, identificamos quatro variantes patogênicas previamente descritas, bem como um mesmo padrão de SNPs para os 2 pacientes que possuem a mesma variante. Isso nos leva a crer que essa mutação pode ter uma origem comum, visto que esses indivíduos não relacionados apresentam os mesmos polimorfismos. Nos ensaios in vitro realizados no quarto capítulo, encontramos um benefício no tratamento com NAC e CoQ10, através da redução do acúmulo de colesterol e da mitigação do dano ao DNA em fibroblastos de pacientes NP-C tratados com estes antioxidantes em comparação aos fibroblastos não tratados. Estas moléculas podem atuar reduzindo ou prevenindo a formação de espécies reativas, protegendo os ácidos nucléicos dos danos oxidativos. Os ensaios in vitro demostraram que há um efeito positivo do tratamento com antioxidantes, apesar dos mecanismos ainda não estarem claros. Os resultados obtidos nos permitem concluir que há envolvimento do dano oxidativo, da inflamação e da neurodegeneração na fisiopatologia da NP-C, e que, tanto o miglustate quanto a NSβ-CD, NAC e CoQ10, possuem efeitos protetores nestes processos. Niemann-Pick type C (NP-C) is a lysosomal storage disease caused by dysfunction in NPC1 or NPC2 proteins, responsible for intracellular lipid traffic. Genetic alterations in one of these proteins result in the accumulation of unesterified cholesterol and glycosphingolipids within the endosomal/lysosomal compartment of the cells of affected patients. Some studies in the literature have linked oxidative stress and inflammation to the pathophysiology of this disease, however, as it is a rare genetic disease, few studies investigate how these deleterious mechanisms work in patients. In addition, little is known about the effect of miglustat (N-butyl-deoxynojirimycin) treatment on oxidative stress and inflammation, in addition to the correlation with the improvement in neurological damage observed in these patients. Considering that markers of oxidative stress and inflammation have been shown to be important targets in lysosomal accumulation diseases and considering that NP-C has no cure or satisfactory treatment, we aimed to analyze these parameters in patients during treatment with miglustat in order to better understand the disease pathophysiology and future therapeutic targets. DNA damage parameters, cytokine production, oxidative stress, as well as plasma markers of neurological damage were evaluated. In addition, in vitro effects of β-cyclodextrin nanoparticulated and antioxidants N-Acetylcysteine (NAC) and Coenzyme Q10 (CoQ10) in patient cells, on cholesterol accumulation, on oxidative stress parameters, mitochondrial damage and cytokine production were also investigated. In the first chapter of this thesis, we found an increase in the production of pro and anti-inflammatory cytokines in NP-C patients at the time of diagnosis, as well as a beneficial effect of miglustat by decreasing the cytokines IL-1β, IL-6, IL-10 and TNF-α, in treated NP-C patients. In the second chapter, we showed that oxidative and nitrative stress may be contributing to the pathophysiology of NP-C, since the levels of lipid peroxidation and nitrite and nitrate were increased in these patients when compared to healthy individuals, as well as high damage to the DNA. The nanoparticles containing β-CD reduced the cholesterol accumulated in the NP-C fibroblasts. This result was potentiated by the concomitant use of nanoparticles with the antioxidants NAC and CoQ10 in comparison with fibroblasts from healthy individuals. Furthermore, treatments combining β-CD nanoparticles and antioxidants can reduce mitochondrial oxidative stress, demonstrating advantages over free β-CD. In the third chapter, we verified a reduction in the levels of two of the neurodegeneration plasma markers evaluated (PAI-1 and PDGF-AA) in NP-C patients, in addition to the normalization of BDNF, NCAM, PFGF-AB/BB and Cathepsin D levels. With the molecular analysis of the patients studied in chapter five, we identified four previously described pathogenic variants, as well as the same pattern of SNPs for the 2 patients who have the same variant. This leads us to believe that this mutation may have a common origin, since these unrelated individuals have the same polymorphisms. In the in vitro assays carried out in the fourth chapter, we found a benefit in the treatment with NAC and CoQ10, through the reduction of cholesterol accumulation and the mitigation of DNA damage in fibroblasts from NP-C patients treated with these antioxidants compared to untreated fibroblasts. These molecules can act by reducing or preventing the formation of reactive species, protecting nucleic acids from oxidative damage. In vitro assays have shown that there is a positive effect of treatment with antioxidants, although the mechanisms are still unclear. The results obtained allow us to conclude that oxidative damage, inflammation, and neurodegeneration are involved in the pathophysiology of NP-C, and that miglustat or the in vitro treatments with NS β-CD, NAC and CoQ10 have protective effects on these processes.

Resumen Objetivo: Optimización de una fórmula magistral tópica de N-acetilcisteína y urea para el tratamiento tópico de la ictiosis. Método: Se revisó la estructura química de la molécula de N-acetilcisteína y sus procesos metabólicos. Se realizó una búsqueda de posibles moléculas alternativas con una estructura química similar a la N-acetilcisteína que pudiesen mejorar sus propiedades organolépticas. Bases de datos: PubChem., Botplus., Centro de Información de Medicamentos de la Agencia Española de Medicamentos y Productos Sanitarios. Criterios de selección de la molécula: similitud estructural, mismo grupo terapéutico, mismo mecanismo de acción, misma indicación autorizada, ausencia de olor desagradable y estar comercializada como materia prima en España. Para el desarrollo galénico y validación de la fórmula se realizaron varios ensayos y controles siguiendo el procedimiento de elaboración de emulsiones del Formulario Nacional. Para establecer el periodo de validez se siguieron las recomendaciones de la “Guía de buenas prácticas de preparación de medicamentos en los servicios de farmacia hospitalaria”. Resultados: La N-acetilcisteína presenta grupo sulfhidrilo libre, responsable del olor, sufre desacetilación y sus principales metabolitos son cistina y cisteamina. Las moléculas evaluadas fueron: cistina, cisteamina, carbocisteína, cisteína y metionina. Se seleccionó la carbocisteína por cumplir todos los criterios de selección. La carbocisteína es prácticamente insoluble en agua y soluble en disoluciones de ácidos minerales e hidróxidos alcalinos. A diferencia de la N-acetilcisteína, carece de olor fétido. Presenta su máxima estabilidad a pH 5,5-7,5. La composición de la fórmula magistral (100 g): carbocisteína (10 g), urea (5 g), glicerina (15 g), agua (44 ml), hidróxido sódico (1 g) y Neo PCL. Oil/Water (O/W) (25 g). Periodo de caducidad: 30 días. Los caracteres organolépticos, signo de la emulsión y pH permanecieron estables durante el periodo de caducidad establecido. La fórmula magistral de carbocisteína elaborada se ha incorporado al arsenal de tratamientos tópicos disponibles para los pacientes con ictiosis de nuestro centro. Conclusiones: La molécula de carbocisteína resultó ser una buena alternativa terapéutica que subsana el olor desagradable de la N-acetilcisteína. La fórmula magistral de carbocisteína desarrollada fue incluida como tratamiento tópico de la ictiosis gracias a su tolerabilidad, aceptabilidad y efectividad en el tratamiento de pacientes afectos de esta genodermatosis.

Inflammasome activation is one of the first steps in initiating innate immune responses. In this work, we studied the activation of inflammasomes in the airways of critically ill COVID19 patients and the effects of N-acetylcysteine (NAC) on inflammasomes. Tracheal biopsies were obtained from critically ill patients without COVID-19 and no respiratory disease (control, n = 32), SARS-CoV-2 B.1 variant (n = 31), and B.1.1.7 VOC alpha variant (n = 20) patients. Gene expression and protein expression were measured by RT-qPCR and immunohistochemistry. Macrophages and bronchial epithelial cells were stimulated with different S, E, M, and N SARS-CoV-2 recombinant proteins in the presence or absence of NAC. NLRP3 inflammasome complex was over-expressed and activated in the COVID-19 B.1.1.7 VOC variant and associated with systemic inflammation and 28-day mortality. TLR2/MyD88 and redox NOX4/Nrf2 ratio were also over-expressed in the COVID19 B.1.1.7 VOC variant. The combination of S-E-M SARS-CoV-2 recombinant proteins increased cytokine release in macrophages and bronchial epithelial cells through the activation of TLR2. NAC inhibited SARS-CoV-2 mosaic (S-E-M)-induced cytokine release and inflammasome activation. In summary, inflammasome is over-activated in severe COVID-19 and increased in B.1.1.7 VOC variant. In addition, NAC can reduce inflammasome activation induced by SARS-CoV-2 in vitro, which may be of potential translational value in COVID-19 patients. Fondo Europeo de Desarrollo Regional (FEDER) (PID2020-114871RB-I00) Instituto de salud Carlos III (FIS PI20/01363) Spanish Government, CIBERES Group 13 (CB06/06/0027) Generalitat Valenciana, Prometeo (2017/023/UV) 6.208 Q1 JCR 2021 1.176 Q1 SJR 2021 No data IDR 2021 UEV

Objective: Anxiety disorders are highly prevalent and the efficacy of the available anxiolytic drugs is less than desired. Adverse effects also compromise patient quality of life and adherence to treatment. Accumulating evidence shows that the pathophysiology of anxiety and related disorders is multifactorial, involving oxidative stress, neuroinflammation, and glutamatergic dysfunction. The aim of this review was to evaluate data from animal studies and clinical trials showing the anxiolytic effects of agents whose mechanisms of action target these multiple domains. Methods: The PubMed database was searched for multitarget agents that had been evaluated in animal models of anxiety, as well as randomized double-blind placebo-controlled clinical trials of anxiety and/or anxiety related disorders. Results: The main multitarget agents that have shown consistent anxiolytic effects in various animal models of anxiety, as well in clinical trials, are agomelatine, N-acetylcysteine (NAC), and omega-3 fatty acids. Data from clinical trials are preliminary at best, but reveal good safety profiles and tolerance to adverse effects. Conclusion: Agomelatine, NAC and omega-3 fatty acids show beneficial effects in clinical conditions where mainstream treatments are ineffective. These three multitarget agents are considered promising candidates for innovative, effective, and better-tolerated anxiolytics.

Acetaminophen is an over-the-counter drug and one of the most widely used painkillers today. The lack of knowledge of the population about its toxic effects has caused an increase in poisoning cases. This study aimed to describe the clinical and biochemical signs of acetaminophen poisoning, tools used to assess the need for the antidote and the reversal of the toxic scenario. In addition, to describe statistical data on drug poisoning, especially acetaminophen in Rio Grande do Sul, recorded by the state's Toxicological Information Center (2008 to 2017). Acetaminophen has been shown to be safe at the correct doses, but poisoning can lead to severe liver damage. As for diagnosis and treatment, the Rumack-Matthew Nomogram and the antidote proved to be great tools to prevent more severe cases. Regarding statistical data, drugs accounted for 30,85% of total poisonings in the period, with an increase in poisoning associated with acetaminophen (5,901 cases), the main responsible for poisoning in its class (analgesics/antipyretics), with 67,2% of cases. The most prevalent profile of poisoning was in adults because of intentional cause. It is concluded that the indiscriminate use of acetaminophen and consequent intoxication represent a major concern for public health. O paracetamol é um fármaco de venda livre e um dos analgésicos mais utilizados na atualidade. A falta de conhecimento da população sobre seus efeitos tóxicos tem provocado aumento nos casos de intoxicações. Objetivou-se descrever os sinais clínicos e bioquímicos das intoxicações por paracetamol, ferramentas utilizadas para avaliar a necessidade do antídoto e reversão do quadro tóxico. Além disso, descrever dados estatísticos de intoxicações por medicamentos em especial por paracetamol no Rio Grande do Sul, registrados pelo Centro de Informação Toxicológica do estado (2008 a 2017). O paracetamol mostrou-se seguro em doses corretas, mas as intoxicações podem gerar lesão hepática grave. Quanto ao diagnóstico e tratamento, o Nomograma de Rumack-Matthew e o antídoto se mostraram ótimas ferramentas para evitar casos mais graves. Sobre dados estatísticos, os medicamentos somaram 30,85% das intoxicações totais no período, havendo um aumento das intoxicações associadas ao paracetamol (5.901 casos), o principal responsável por intoxicações na sua classe (analgésicos/antipiréticos), com 67,2% dos casos. O perfil mais prevalente de intoxicações foi em adultos por causa intencional. Conclui-se que o uso indiscriminado do paracetamol e consequente intoxicação representam uma grande preocupação para saúde pública.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico, Programa de Pós-Graduação em Engenharia Química, Florianópolis, 2020. Um dos grandes desafios da indústria farmacêutica é a baixa biodisponibilidade dos novos ingredientes farmacêuticos ativos, sendo que até 90% dos novos medicamentos recebem a classificação BCS II. Neste contexto encontra-se a curcumina, que é um polimorfo hidrofóbico bioativo, e tem sido estudada pelo seu potencial antinociceptivo e anti- inflamatório, entre outros. Para melhorar a solubilidade e, consequentemente, a biodisponibilidade de substâncias, várias metodologias podem ser aplicadas. Entre elas, vem recendo destaque, nos últimos anos, a utilização de metodologias utilizando fluido supercrítico. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi produzir um cocristal de curcumina, utilizando n-acetilcisteína como coformador, através da metodologia de gás antissolvente, empregando dióxido de carbono supercrítico como antissolvente, e avaliar a solubilidade do cocristal, assim como seu potencial antinociceptivo e anti-inflamatório. Para comprovar a formação da forma cristalina, os seguintes testes de caracterização foram realizados: calorimetria exploratória diferencial, difratometria de raios-X de pó e microscopia eletrônica de varredura. A análise de solubilidade e de atividade anti-quimiotáxica também foram realizadas. A partir da comprovação da melhoria na solubilidade e da potencialização da atividade anti-quimiotáxica do cocristal em relação à curcumina pura, testes in vivo foram realizados para avaliar a atividade antinociceptiva e anti-inflamatória: ensaio de contorções abdominais induzidas por ácido acético e edema de pata induzido por carragenina em camundongos Swiss machos. Os testes de open field e rota-rod foram realizados no intuito de verificar possíveis efeitos indesejados do cocristal na integridade da coordenação motora e performance locomotora e exploratória. Os resultados de caracterização demonstram a formação de uma nova estrutura cristalina, comprovando que a formação do cocristal ocorreu com sucesso. Os resultados do teste de solubilidade demonstram um aumento significativo na solubilidade do cocristal, em comparação a curcumina pura. No ensaio de quimiotaxia, o cocristal inibiu a migração de neutrófilos em todas as concentrações testadas, diferentemente da curcumina e do coformador quando testados isoladamente. Os testes in vivo demonstraram que o cocristal teve uma potencialização da atividade antinociceptiva e anti-inflamatória quando comparado à curcumina pura, visto que a dose efetiva do cocristal foi 166,67 vezes menor que a dose efetiva de curcumina pura. O cocristal não demonstrou efeitos negativos na coordenação motora e performance locomotora e exploratória. Possivelmente, devido ao aumento da solubilidade do cocristal em água e diferentes pHs, houve favorecimento da absorção da curcumina no trato gastrointestinal e, assim, aumento de sua biodisponibilidade e potência farmacológica. Abstract: One of the major challenges faced by the pharmaceutical industry is the low bioavailability of new active pharmaceutical ingredients. It is known that up to 90% of new drugs are included in the BCS II classification. In this context, curcumin, which is a bioactive hydrophobic polymorph, belongs to BCS class II. Curcumin has been studied on its antinociceptive and anti-inflammatory potential, among others. To improve the solubility and, consequently, the bioavailability of substances, several methodologies can be applied. Among them, the use of methodologies using supercritical fluid has been highlighted in recent years. Thus, the aim of this work was to produce a curcumin cocrystal, using n-acetylcysteine as coformer, by the anti-solvent gas methodology, using supercritical carbon dioxide as an anti-solvent, and to evaluate the cocrystal solubility, as well as its antinociceptive and anti-inflammatory activities. To attest the formation of the crystalline form, the following characterization tests were carried out: differential scanning calorimetry, powder X-ray diffraction and scanning electron microscopy. The analysis of solubility and anti-chemotactic activity were also performed. Based on the evidence of the improvement in solubility and the potentiation of the anti-chemotactic activity of cocrystal in relation to pure curcumin, in vivo tests were carried out to evaluate the anti-nociceptive and anti-inflammatory activities of the cocrystal: acetic acid-induced writhing test and carrageenan-induced paw oedema in male Swiss mice. The open field and rota-rod tests were carried out in order to verify possible undesired effects of the cocrystal on the integrity of motor coordination and locomotor and exploratory performance of the animals. The characterization results demonstrate the formation of a new crystalline structure, proving that the formation of the cocrystal successfully occurred. The results of the solubility test demonstrate a significant increase in the solubility of the cocrystal, compared to pure curcumin. In the chemotaxis assay, the cocrystal inhibited the migration of neutrophils at all concentrations tested, unlike pure curcumin and the coformer, when tested isolated. In vivo tests demonstrated that the cocrystal presented increased potency in the antinociceptive and anti-inflammatory activity when compared to pure curcumin, since the effective dose of cocrystal was 166.67 times lower than the effective dose of pure curcumin. The cocrystal did not impair the motor coordination and locomotor and exploratory activities of mice. Possibly, due to the increased solubility of the cocrystal in water and different pHs, the absorption of curcumin in the gastrointestinal tract was favored and, thus, its bioavailability and pharmacological potency were improved by the cocrystallization.

BACKGROUND: Nowadays, pharmacological treatment of non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) is still limited and it is based on the treatment of conditions associated comorbities. Oxidative stress and insulin resistance are the mechanisms that seem to be mostly involved in its pathogenesis. OBJECTIVE: To evaluate the efficacy of N-acetylcysteine (NAC) in combination with metformin (MTF) and/or ursodeoxycholic acid (UDCA) for treatment of non-alcoholic steatohepatitis (NASH). METHODS: Open-label multicenter randomized trial was conducted for 48 weeks. It included patients with biopsy-proven NASH. The patients were randomized into three groups: NAC (1.2 g) + UDCA (15 mg/kg) + MTF (850-1500 mg/day) (n=26); UDCA (20 mg/kg) + MTF (850-1500 mg/day) (n=13); NAC (1.2g) + MTF (850-1500 mg/day) (n=14) for 48 weeks. Clinical, laboratory and the second liver biopsies were performed after 48 weeks. RESULTS: A total of 53 patients were evaluated; 17 (32.1%) were males; median age ±54 (IQR=15, 21-71) years. In the baseline, no difference was seen between groups according clinical and histological parameters. The groups differed only in cholesterol, LDL and triglycerides. No significant differences in biochemical and histologic parameters were found between these the three groups after 48 weeks of treatment. In the intragroup analysis (intention-to-treat) comparing histological and biochemical features, there were significant improvements in the steatosis degree (P=0.014), ballooning (0.027) and, consequently, in the NAFLD Activity Score (NAS) (P=0.005), and in the ALT levels at the end of the treatment only in the NAC + MTF group. No significant evidence of modification in the liver fibrosis could be observed in any of the groups. CONCLUSION: This multicenter study suggests that the association of NAC + MTF could reduce the liver disease activity in patients with NASH. These data stimulate further controlled studies with this therapy for these patients. RESUMO CONTEXTO: Atualmente, o tratamento farmacológico da doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA) ainda é limitado e baseia-se no tratamento de condições associadas às comorbidades. O estresse oxidativo e a resistência à insulina são os mecanismos que parecem estar mais envolvidos em sua patogênese. OBJETIVO: Avaliar a eficácia da N-acetilcisteína (NAC) em associação à metformina (MTF) e/ou ácido ursodesoxicólico (UDCA) no tratamento da EHNA. MÉTODOS: Estudo randomizado, multicêntrico e aberto, conduzido por 48 semanas. Incluiu pacientes com esteato-hepatite não alcoólica (EHNA) comprovada por biópsia. Os pacientes foram distribuídos aleatoriamente em três grupos: NAC (1,2 g) + UDCA (15 mg/kg) + MTF (850-1500 mg/dia) (n=26); UDCA (20 mg/kg) + MTF (850-1500 mg/dia) (n=13); NAC (1,2 g) + MTF (850-1500 mg/dia) (n=14) durante 48 semanas. Os dados clínicos, laboratoriais e as segundas biópsias hepáticas foram realizados após 48 semanas. RESULTADOS - Um total de 53 pacientes foram avaliados; 17 (32,1%) eram do sexo masculino; idade mediana de ±54 (IQR=15, 21-71) anos. No baseline, nenhuma diferença foi observada entre os grupos de acordo com parâmetros clínicos e histológicos. Os grupos diferiram apenas em colesterol, LDL e triglicerídeos. Não foram encontradas diferenças significativas nos parâmetros bioquímicos e histológicos entre os três grupos após 48 semanas de tratamento. Contudo, na análise intragrupos (intenção de tratar) comparando características histológicas e bioquímicas, houve melhora significativa no grau de esteatose (P=0,014), balonização (P=0,027) e, consequentemente, no NAFLD Activity Score (NAS) (P=0,005), e nos níveis de ALT no final do tratamento apenas no grupo NAC+MTF. Nenhuma evidência significativa de modificaçãona fibrose hepática pôde ser observada em nenhum dos grupos. CONCLUSÃO: - Este estudo multicêntrico sugere que a associação de NAC+MTF poderia reduzir a atividade da doença hepática em pacientes com EHNA. Esses dados estimulam estudos adicionais controlados com essa terapia para esses pacientes.

[ES]Esta tesis tiene como finalidad estudiar en pancreatitis aguda edematosa y necrotizante los efectos de un tratamiento antioxidante (N-Acetilcisteína), y otro anti-inflamatorio (Dexametasona), sobre la expresión de quimiocinas y moléculas de adhesión en diferentes niveles biológicos (célula acinar, tejido pancreático, plasma, leucocitos circulantes y pulmón) y relacionar los resultados con la efectividad de dichos tratamientos en la evolución de la enfermedad., [EN]This thesis aims to study in acute edematous pancreatitis and necrotizing effects of antioxidant treatment (N-Acetylcysteine) and other anti-inflammatory (dexamethasone) on the expression of chemokines and adhesion molecules in different biological levels (acinar cell, pancreatic tissue, plasma, circulating leukocytes and lung) and relate the results to the effectiveness of such treatments on disease progression.

Submitted by thais soares bezerra santos nunes (thais.soaresbsn@gmail.com) on 2019-05-10T02:18:05Z No. of bitstreams: 1 THAÍS (09-05-19) PDF.pdf: 1944564 bytes, checksum: 5b23426c002008040ed9076019a6ad89 (MD5) Rejected by Ana Cristina Jorge null (anacris@fclar.unesp.br), reason: Por favor faça as seguintes correções: 1) No Sumário a subseção 3.3 Candida albicans p.19 deve ser 3.1 Candida albicans...; 2) Nos agradecimentos da sua dissertação não consta que vocé recebeu financiamento Fapesp, só foi selecionada a agência CAPES, no entanto abaixo você apresenta um número de processo Fapesp; 3) Se realmente houve auxílio da FAPESP verifique no template da sua biblioteca local como deve ser a redação de agradecimentos a Fapesp na sua dissertação. Atenciosamente on 2019-05-10T16:56:03Z (GMT) Submitted by thais soares bezerra santos nunes (thais.soaresbsn@gmail.com) on 2019-05-12T02:16:39Z No. of bitstreams: 1 THAÍS- CORRIGIDA (09-05-19).pdf: 1944948 bytes, checksum: 06feb30560ac455931e7dc3473a4cde6 (MD5) Approved for entry into archive by Ana Cristina Jorge null (anacris@fclar.unesp.br) on 2019-05-13T17:48:59Z (GMT) No. of bitstreams: 1 nunes_tsbs_me_arafo_par.pdf: 603961 bytes, checksum: 995b9a1c17d4b895bd695eae50f1049c (MD5) Made available in DSpace on 2019-05-13T17:48:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 nunes_tsbs_me_arafo_par.pdf: 603961 bytes, checksum: 995b9a1c17d4b895bd695eae50f1049c (MD5) Previous issue date: 2019-03-11 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Candida albicans (Ca) é o principal fungo patógeno humano, responsável por infecções como a candidose orofaríngea e a candidemia. Essas infecções estão fortemente associadas com a formação de biofilmes. O uso abusivo de antifúngicos tem levado ao desenvolvimento de resistência fúngica. As terapias direcionadas aos biofilmes, principalmente contra a matriz extracelular (MEC), são relevantes para o desenvolvimento de novos tratamentos mais eficazes. Um dos agentes que tem demonstrado ação antibiofilme é a N-acetilcisteína (NAC). Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a ação da NAC em biofilmes in vitro de C. albicans susceptível (CaS) e resistente ao fluconazol (CaR). Culturas planctônicas de CaS e CaR foram cultivadas e submetidas ao teste de susceptilidade à NAC. Foram determinadas também a curva de inativação de ambas as cepas sob ação da NAC, seu efeito na formação do biofilme e no biofilme maduro. Por fim, foi avaliada a ação NAC na composição da MEC do biofilme, por meio da quantificação de peso seco total e do precipitado, polissacarídeos solúveis em água (WSP) e álcali (ASP), proteínas do sobrenadante e do precipitado e DNA extracelular (eDNA). Os dados obtidos foram analisados descritivamente e pelos testes ANOVA/Welch e Tukey/Gomes-Howell ou Kruskal-Wallis (=0,05). A concentração inibitória mínima da NAC com redução de 90% (CIM90) foi de 25 mg/mL para ambas as cepas. Apesar de não ter sido encontrado nenhum valor de concentração fungicida mínima (CFM), a NAC reduziu (p≤ 0,001) a viabilidade fúngica em 1,81 a 4,06 log10 em ambas as cepas avaliadas. Na curva de inativação, apenas as concentrações ≥ CIM reduziram o crescimento fúngico durante 24 h, essa ação fungistática foi mais evidente entre 8-10h. Concentrações < CIM aumentaram o crescimento fúngico. Em biofilmes em formação, concentrações > CIM (100 e 50 mg/mL) inibiram a viabilidade (redução de 1,41 a 2,77 log10) e a biomassa (redução de 39 a 88%), e para CaS a NAC 25 e 12,5 mg/mL também reduziu biomassa em 77 e 34%, respectivamente. Esse efeito inibitório também foi observado em diferentes fases da formação do biofilme (24, 12 e 6 h). Já em biofilmes maduros, apenas a NAC 100 mg/mL reduziu a viabilidade (1,12 a 2,30 log10) em ambas as cepas, e em CaR 50 e 25 mg/mL de NAC reduziram 1,26 e 0,64 log10, respectivamente. Na biomassa, a NAC 100 mg/mL reduziu 69-72% para ambas as cepas, e em CaR a NAC 50 e 25 mg/mL também reduziu em 64 e 48%, respectivamente. NAC 12,5 mg/mL também aumentou (p< 0,001) a viabilidade de CaS do biofilme maduro e em formação. Na análise dos componenetes da matriz dos bofilmes, foi observada uma tendência da NAC 100 mg/mL (biofilmes maduros) e 50 mg/mL (biofilmes em formação) em diminuir o peso seco do precipitado, proteínas do sobrenadante, WSP, ASP e eDNA. Assim, a NAC apresentou efeito fungistático contra as CaS e CaR, com um efeito concentração-dependente. O efeito antibiofilme da NAC foi decorrente de sua ação fungistática, uma vez que somente as concentrações que inibiram a viabilidade fúngica reduziram a biomassa. Houve uma tendência da NAC em diminuir os componentes solúveis da matriz. Este foi um estudo experimental in vitro inicial, que visa futuramente a aplicabilidade clínica da NAC como um coadjuvante no controle de biofilme de Ca sobre a superfície de próteses dentárias. Candida albicans is the main fungal pathogen in humans, responsable for local and systemic infections, such as oropharyngeal candidiasis and candidemia. These fungal infections are associated with biofilm formation. The abusive use of antifungals has led to the development of fungal resistance. The therapies towards the biofilms, mainly against the matrix, are relevant for the development of more effective new treatments. One of the agents that have demonstrated antibiofilm action is N-acetylcysteine (NAC). Therefore, the aim of this study was to evaluate the effect in vitro of NAC on biofilms of C. albicans susceptible (CaS) and resistant to fluconazole (CaR). CaS and CaR were submitted to the susceptibility test to NAC. The time-kill curves of NAC and its effect on biofilm formation and mature biofilms were also determined for both strains. Finally, the effect of NAC on the composition of the biofilms matrix was evaluated [total and pellets’s dry weight, water (WSP) and alkali soluble polysaccharides (ASP), supernatant and pellet’s proteins, and extracellular DNA (eDNA)]. The data were descriptively analyzed and submitted to the ANOVA/Welch and Tukey/Gomes-Howell or Kruskal-Wallis tests (= 0.05). The minimum inhibitory concentration of NAC with 90% of reduction (MIC90) was 25 mg/mL. Although no minimum fungicidal concentration (MFC) value was found, NAC reduced (p≤ 0,001) the fungal viability by 1.81 to 4.06 log10 for both strains. In the time-kill curves, only concentrations ≥ MIC reduced the fungal growth for 24 h, this fungistatic action was most evident between 8-10 h. Concentrations < MIC increased the fungal growth. For biofilm formation, concentrations > MIC (100 and 50 mg/mL) inhibited the viability (reduction of 1.41 to 2.77 log10) and the biomass (reduction of 39 to 88%) for both strains, and for CaS NAC at 25 and 12.5 mg/mL reduced the biomass in 77 and 34%, respectively. This inhibitory effect of NAC was also observed in differents stages of biofilm formation (24, 12, and 6h). For mature biofilms, only NAC at 100 mg/mL reduced the viability (1.12 to 2.30 log10) of both strains, and for CaR 50 and 25 mg/mL of NAC reduced 1.26 and 0.64 log10, respectively. NAC 100 mg/mL reduced the biomass in 69-72% for both strains, and for CaR NAC at 50 and 25 mg/mL also reduced the biomass in 64 and 48%, respectively. NAC 12.5 mg/mL also increased (p< 0.001) the CaS viability during biofilm formation and for mature biofilm. For the components of biofilms matrix, NAC at 100 mg/mL (mature biofilms) and 50 mg/mL (biofilm formation) seems to show a tendency in decreasing the pellet’s dry weight, supernatant’s proteins, WSP, ASP, and eDNA. Therefore, NAC showed a fungistatic effect against CaS and CaR, with a concentration-dependent effect. The antibiofilm effect was due to its fungistatic action, since only concentrations that inhibited fungal viability reduced the biofilms biomass. NAC seems to reduce the soluble components of the biofilms matrix. This is an initial in vitro study, which will drive the future clinical application of NAC as a coadjuvant in the control of Ca biofilm on the surface of dental prostheses. FAPESP: 2018/02513-9 CAPES: 001

Os transtornos de ansiedade são uma das principais causas de incapacitação e possuem grande prevalência global. São caracterizados pela presença de medo e/ou ansiedade excessivos e persistentes, estando relacionados ao estresse. O estresse desencadeia respostas adaptativas normais no organismo, porém se persistente pode levar a uma falha nessa adaptação. Fatores como estresse oxidativo, excitotoxicidade e neuroinflamação também estão relacionados à etiologia dos transtornos de ansiedade. A Nacetilcisteína (NAC) possui atividade antioxidante e anti-inflamatória além de ser capaz de modular a transmissão glutamatérgica. Estudos recentes têm demonstrado que esse fármaco possui um potencial uso em diversos transtornos mentais. Contudo, a ausência de melhores resultados é atribuída à baixa biodisponibilidade desse composto. A N-acetilcisteína-amida (AD4 ou NACA) é uma molécula derivada da NAC que apresenta uma modificação na estrutura química visando melhorar essa propriedade. Neste estudo, foi avaliado o efeito da AD4 e NAC sobre parâmetros comportamentais de ansiedade e bioquímicos nos testes de tanque-novo e claro/escuro em peixes-zebra. Além disso, foram avaliados os efeitos desses compostos em um protocolo de estresse agudo de contenção. No teste de tanque novo, nenhum dos compostos mostrou efeitos sobre aspectos locomotores e exploratórios. AD4 e NAC demonstraram efeitos ansiolíticos nos testes de claro/escuro e estresse agudo de contenção, sendo que a AD4 demonstrou maior potência do que a NAC no teste de claro/escuro. Nenhum dos compostos foi capaz de alterar o status oxidativo no encéfalo de peixes-zebra. Os resultados desse estudo contribuem para a caracterização dos efeitos de AD4 em peixes-zebra e de seu potencial uso em transtornos mentais. Anxiety disorders are a major cause of disability and have a high prevalence worldwide. These disorders are characterized by excessive and enduring fear and/or anxiety, being related to stress. Stress triggers normal adaptive responses in the organism but if persistent it can lead to a failure on this adaptation. Factors such as oxidative stress, excitotoxicity, and neuroinflammation are also related to the etiology of anxiety disorders. Nacetylcysteine (NAC) has antioxidant and anti-inflammatory activity, also being able to modulate the glutamatergic transmission. Recent studies shown that this drug has potential use in mental disorders. However, the lack of better results is related to the low bioavailability of this compound. N-acetylcysteine-amide (called AD4 or NACA) is a NAC-derived molecule that exhibits a change in its chemical structure in order to improve this property. In this study, we evaluated the effect of AD4 and NAC on behavioral and biochemical parameters in the novel tank (NTT) and light/dark (LDT) tests in zebrafish. In addition, the effects of AD4 were evaluated in an acute restraint stress (ARS) protocol. Both drugs did not show locomotor and exploratory effects in the NTT. AD4 and NAC demonstrated an anxiolytic effect in the LDT and also in the ARS. AD4 demonstrated greater potency in the light/dark test when compared to NAC. Both compounds did not alter oxidative status in the zebrafish brain. The results of this study contribute to the characterization of the effects of AD4 in zebrafish and its potential use in mental disorders.

Dosificació; N-acetilcisteïna; Intoxicació; Paracetamol Dosificación; N-acetilcisteína; Intoxicación; Paracetamol Dosage; N-acetylcysteine; Intoxication; Paracetamol Article que parla sobre la introducció de la N-acetilcisteïna en el tractament de la intoxicació per paracetamol.

O estresse crônico e o abuso de álcool são fatores que predispõem os indivíduos a desenvolver transtornos mentais, condições que impactam na qualidade de vida do indivíduo e contribuem para a morbidade e a mortalidade global. A farmacoterapêutica disponível para tratar esses pacientes apresenta eficácia limitada e alta incidência de efeitos adversos. O estresse oxidativo, a hiperativação glutamatérgica, a depleção de glutationa e a neuroinflamação fazem parte dos achados observados em estudos pré-clínicos e clínicos nessas condições. A Nacetilcisteína (NAC) é uma molécula promissora para o tratamento de uma variedade de condições psiquiátricas. Esse fármaco atua em diversos alvos relevantes para o tratamento de transtornos mentais, incluindo ansiedade, depressão e abuso de álcool. Na presente tese, investigamos os efeitos da NAC nesses contextos utilizando como organismo modelo o peixezebra. No modelo de estresse crônico imprevisível, os animais apresentaram aumento na ansiedade (aumento no tempo na área inferior e diminuição nas entradas e tempo de permanência na área superior do aquário) no teste de tanque novo, lipoperoxidação, aumento nas espécies reativas de oxigênio e redução nos níveis de glutationa e na atividade das enzimas superóxido dismutase e catalase. A NAC reverteu o comportamento ansiogênico e o dano oxidativo. No modelo de exposição aguda ao etanol os animais apresentaram dano motor (diminuição da distância e número total de cruzamentos entre as diferentes áreas do aquário), comportamento ansiogênico (diminuição nas entradas e tempo de permanência na área superior do aquário), dano lipídico, aumento nas espécies reativas de oxigênio e depleção de glutationa. A NAC preveniu os efeitos comportamentais e bioquímicos induzidos pela exposição aguda ao etanol. Finalmente, avaliamos os efeitos da NAC em animais abstinentes após exposição crônica ao etanol por oito dias. 24 horas após oito dias de exposição intermitente, o comportamento dos peixes foi testado no teste de tanque novo. A abstinência induziu comportamento ansiogênico (aumento no tempo na área inferior e diminuição nas entradas e tempo de permanência na área superior do aquário) e desequilíbrio do status oxidativo, com peroxidação lipídica, diminuição da glutationa e das atividades da superóxido dismutase e catalase. NAC preveniu os danos. Nosso estudo agrega importantes achados que contribuem para o corpo de evidências existentes que apoiam a avaliação e utilização clínica da NAC em transtornos mentais e condições associadas ao abuso de substâncias. Chronic stress and alcohol abuse are factors that predispose individuals to develop mental disorders, conditions that impact on the individual quality of life and contribute to overall morbidity and mortality. Pharmacotherapeutics available to treat these patients have limited efficacy and a high incidence of adverse effects. Oxidative stress, glutamatergic hyperactivation, glutathione depletion, and neuroinflammation are part of the findings observed in preclinical and clinical studies in these conditions. N-acetylcysteine (NAC) is a promising molecule for the treatment of a variety of psychiatric conditions. This drug acts on several relevant targets for the treatment of mental disorders, including anxiety, depression and alcohol abuse. In the present thesis, we investigated the effects of NAC in these contexts using zebrafish as an organism model. In the unpredictable chronic stress, the animals showed an increase in anxiety (increase in the time in the bottom area and decrease in the entries and time in the top area of the tank) in the novel tank test, lipoperoxidation, reactive oxygen species increase and reduction in glutathione levels and activity of the superoxide dismutase and catalase enzymes. NAC reversed anxiogenic behavior and oxidative damage. In the acute exposure to ethanol, the animals presented motor damage (decrease of distance and a total number of crossings between different areas of the tank), anxiogenic behavior (decrease in entries and time in the top area of the tank), lipid damage, reactive oxygen species increase and glutathione depletion. NAC prevented the behavioral and biochemical effects induced by acute exposure to ethanol. Finally, we evaluated the effects of NAC on abstinent animals after chronic exposure to ethanol for eight days. 24 hours after eight days of intermittent exposure, fish behavior was tested in the novel tank test. Abstinence induced anxiogenic behavior (increase in the time in the bottom and decrease in the entries and time in the top area of the tank) and oxidative status imbalance, lipid peroxidation, reduction of glutathione and superoxide dismutase and catalase activities. NAC prevented the damage. Our study aggregates important findings that contribute to the body of evidence supporting the assessment and clinical use of NAC in mental disorders and conditions associated with substance abuse.

Submitted by José Eduardo Guimarães Pereira (dudunest@gmail.com) on 2018-12-31T18:29:05Z No. of bitstreams: 1 José Eduardo Pereira (Tese de Doutorado - NAC).pdf: 9270182 bytes, checksum: bcdfdd4a814345d1d1b79c5569b4c8e4 (MD5) Approved for entry into archive by ROSANGELA APARECIDA LOBO null (rosangelalobo@btu.unesp.br) on 2019-01-03T12:45:29Z (GMT) No. of bitstreams: 1 pereira_jeg_dr_bot.pdf: 9270182 bytes, checksum: bcdfdd4a814345d1d1b79c5569b4c8e4 (MD5) Made available in DSpace on 2019-01-03T12:45:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 pereira_jeg_dr_bot.pdf: 9270182 bytes, checksum: bcdfdd4a814345d1d1b79c5569b4c8e4 (MD5) Previous issue date: 2018-12-07 Cirurgias cardíacas são procedimentos muito eficientes para tratar os sintomas do infarto miocárdico, e para realizar trocas e plastias valvares. Contudo, problemas clínicos ocorrem ao realizar-se tais procedimentos em razão da lesão de isquemia-reperfusão e estresse oxidativo. Ambos, a cirurgia e a circulação extracorpórea (CEC) causam liberação de citocinas inflamatórias (TNF-α, IL-6, IL-10) e ativação de espécies reativas de oxigênio (O2-, H2O2-). Glutationa peroxidase (GPO) é uma enzima antioxidante que exerce papel importante no equilíbrio oxidativo e tem sua atividade limitada pela depleção das reservas de glutationa (GSH). N-acetilcisteína (NAC) é um resíduo acetilado do composto cisteína, e é necessária à ressíntese da glutationa (GSH). Estudos têm demonstrado a ação antioxidante da NAC, e seus efeitos na proteção da função dos pulmões, rins e coração, com resultados conflitantes. Sendo assim, este estudo avaliou o papel da n-acetilcisteína na redução da morbimortalidade de pacientes submetidos a cirurgias cardíacas. Foi realizada uma revisão sistemática e metanálise de ensaios clínicos randomizados (ECRs) e quase-ECRs, sem restrições quanto a línguas. ECRs foram pesquisadas nas seguintes bases de dados: MEDLINE, EMBASE, CENTRAL e LILACS, e a última busca ocorreu em 10 de outubro de 2018. Dois revisores independentes (JEGP, RED) selecionaram e extraíram os dados dos estudos, e a abordagem GRADE foi utilizada para classificar a certeza das evidências para os desfechos avaliados. Vinte e nove ECRs includindo 2.486 participantes mostraram-se elegíveis. Os resultados dessa metanálise demonstraram que a adição de NAC não resultou em uma redução significante da mortalidade (Risco Relativo (RR) 0,71; 95% Intervalo de Confiança (IC) 0,40 a 1,25; n=1.737; p = 0,23), insuficiência renal (RR 0,92; 95% IC 0,79 a 1,09; n = 1.711; p = 0,34), insuficiência cardíaca (RR 0,77; 95% IC 0,44 a 1,38; n = 1.149; p = 0,38), tempo de internação hospitalar (Diferença da Média (DM) -0,21, 95% IC -0,64 a 0,23; n = 1.650; p = 0,35), tempo de internação em CTI (DM -0,04, 95% IC -0,29 a 0,20; n = 1.512; p = 0,73), arritmia (RR 0,79; 95% IC 0,52 a 1,20; n = 886; p=0,27), e infarto agudo do miocárdio (RR 0,84; 95% IC 0,48 a 1,48; n = 1.178; p = 0,55). Após avaliação dos subgrupos, encontrou-se uma redução estatísticamente significante no tempo de internação em CTI (p

BACKGROUND: The TP53 tumor suppressor gene is the most frequently altered gene in tumors and mutant p53 gain-of-function isoforms actively promote cancer malignancy. METHODS: A panel of wild-type and mutant p53 cancer cell lines of different tissues, including pancreas, breast, skin, and lung were used, as well as chronic lymphocytic leukemia (CLL) patients with different TP53 gene status. The effects of mutant p53 were evaluated by confocal microscopy, reactive oxygen species production assay, immunoblotting, and quantitative reverse transcription polymerase chain reaction after cellular transfection. RESULTS: We demonstrate that oncogenic mutant p53 isoforms are able to inhibit SESN1 expression and consequently the amount of SESN1/AMPK complex, resulting in the downregulation of the AMPK/PGC-1 alpha/UCP2 axis and mitochondrial O-2(-)center dot production. We also show a correlation between the decrease of reduced thiols with a poorer clinical outcome of CLL patients bearing mutant TP53 gene. The restoration of the mitochondrial uncoupling protein 2 (UCP2) expression, as well as the addition of the radical scavenger N-acetyl-L-cysteine, reversed the oncogenic effects of mutant p53 as cellular hyper-proliferation, antiapoptotic effect, and resistance to drugs. CONCLUSIONS: The inhibition of the SESN1/AMPK/PGC-1 alpha/UCP2 axis contributes to the pro-oxidant and oncogenic effects of mutant p53, suggesting pro-oxidant drugs as a therapeutic approach for cancer patients bearing mutant TP53 gene., This work was supported by Joint Projects program 2015 from University of Verona to M. Donadelli (no. B12I15002320003), Ministero dell'Istruzione, dell'Universita e della Ricerca (MIUR), Rome, Italy, and by grant from Fondo de Investigaciones Sanitarias of Instituto de Salud Carlos III (PI14/01434) of the Spanish Government confinanced by FEDER-Union Europea (Una manera de hacer Europa). Margalida Torrens-Mas was supported with a fellow by Consorzio Interuniversitario Biotecnologie (CIB) and by Federation of European Biochemical Societies (FEBS). Ilaria Dando is a fellow of Fondazione Umberto Veronesi. Mercedes Nadal-Serrano was supported by a short-term fellowship from European Molecular Biology Organization (EMBO).

BackgroundParkinson’s disease (PD) is the second most common neurodegenerative disorder. In addition to its highly debilitating motor symptoms, non-motor symptoms may precede their motor counterparts by many years, which may characterize a prodromal phase of PD. A potential pharmacological strategy is to introduce neuroprotective agents at an earlier stage in order to prevent further neuronal death.N-acetylcysteine (NAC) has been used against paracetamol overdose hepatotoxicity by restoring hepatic concentrations of glutathione (GSH), and as a mucolytic in chronic obstructive pulmonary disease by reducing disulfide bonds in mucoproteins. It has been shown to be safe for humans at high doses. More recently, several studies have evidenced that NAC has a multifaceted mechanism of action, presenting indirect antioxidant effect by acting as a GSH precursor, besides its anti-inflammatory and neurotrophic effects. Moreover, NAC modulates glutamate release through activation of the cystine-glutamate antiporter in extra-synaptic astrocytes. Its therapeutic benefits have been demonstrated in clinical trials for several neuropsychiatric conditions but has not been tested in PD models yet.MethodsIn this study, we evaluated the potential of NAC to prevent the damage induced by 6-hydroxydopamine (6-OHDA) on motor, optomotor and morphological parameters in a PD model in larval zebrafish.ResultsNAC was able to prevent the motor deficits (total distance, mean speed, maximum acceleration, absolute turn angle and immobility time), optomotor response impairment and morphological alterations (total length and head length) caused by exposure to 6-OHDA, which reinforce and broaden the relevance of its neuroprotective effects.DiscussionNAC acts in different targets relevant to PD pathophysiology. Further studies and clinical trials are needed to assess this agent as a candidate for prevention and adjunctive treatment of PD.

Estresse oxidativo e inflamação são chave nas doenças hepáticas. Hepatite autoimune é uma doença inflamatória crônica e progressiva, que há relatos de falha terapêutica. Nesse contexto, a presença de enzimas antioxidantes no Ascaris suum e o uso associativo de antígenos de helmintos com moléculas antioxidantes, podem modular positivamente a atividade anti-inflamatória e antioxidante nas lesões hepáticas. A associação do extrato solúvel de A. suum (ASC) e N-acetil-L-cisteína (NAC) atenuou a hepatite autoimune experimental (HAE) através do perfil Th2-anti-inflamatório. Entretanto, os efeitos que esta associação causa no balanço redox na HAE não foram esclarecidos. Para esta avaliação, foram formados os seguintes grupos experimentais: Concanavalina A foi administrada por via intravenosa (i.v.) na dose 20 mg/Kg (grupo HAE). Parte deste grupo recebeu ASC (2h após; 40 mg/Kg), por via intraperitoneal (i.p.) (grupo HAE+ASC), e a outra parte recebeu a NAC (30 minutos; 200 mg/Kg), por via oral (v.o.) e 12 h após (grupo HAE+NAC). Parte do grupo HAE+ASC também recebeu NAC (grupo HAE+NAC+ASC). Grupo Controle recebeu apenas PBS (i.p. e i.v.). Vinte e quatro horas após a administração da Concanavalina A, o homogenato do fígado foi preparado. A lipoperoxidação foi estimada através da ligação do ácido tiobarbitúrico ao malondialdeído (MDA). Glutationa reduzida (GSH) e oxidada (GSSG) foram mensuradas através da ligação com o OPT em pH 8,0 e pH 12,0, respectivamente. A atividade da catalase (CAT) e superóxido dismutase (SOD) foi determinada através da decomposição do H2O2 e inibição da autoxidação da epinefrina, respectivamente. Nos grupos HAE tratados com a NAC e NAC+ASC, houve redução dos níveis do MDA, bem como o aumento da atividade da SOD e da razão GSH/GSSG, em comparação ao grupo HAE. No entanto, estes parâmetros no grupo HAE+ASC foram semelhantes ao Controle e HAE. Atividade da CAT não demonstrou diferença entre os grupos de estudo. Em conjunto esses resultados demonstram que o ASC não promoveu alteração nos parâmetros do balanço redox avaliados na HAE, porém a NAC foi capaz de restaurar o aporte antioxidante. Oxidative stress and inflammation are key in liver injuries. Autoimmune hepatitis is a chronic and progressive inflammatory disease, which has reported therapeutic failure. In this context, the presence of antioxidant enzymes in Ascaris suum and the associative use of helminth antigens with antioxidant molecules, can down modulation anti-inflammatory and antioxidant activity in liver injuries. Association A. suum soluble extract (ASC) and N-acetyl-L-cysteine (NAC) attenuated experimental autoimmune hepatitis (EAH) through Th2-anti-inflammatory profile. However, redox balance effects that this association causes in EAH have not been clarified. Experimental groups formation, Concanavalin A (20 mg/Kg) was administered intravenously (i.v.) (EAH group). Part of this group received ASC (2 h after, 40 mg/Kg), intraperitoneally (i.p.) (EAH+ASC group), and the other part received oral NAC (30 minutes after, 200 mg/Kg) and 12 h after (EAH+NAC group). EAH+ASC group part also received NAC (EAH+NAC+ASC group). Control group received only PBS (i.p. and i.v.). Twenty-four hours after Concanavalin A administration, homogenate liver was prepared. Lipoperoxidation was estimated by thiobarbituric acid binding malondialdehyde (MDA). Reduced glutathione (GSH) and oxidized (GSSG) were measured by binding to OPT at pH 8,0 and pH 12,0, respectively. Catalase activity (CAT) and superoxide dismutase (SOD) was determined through H2O2 decomposition and epinephrine autoxidation inhibition, respectively. EAH groups treated with NAC and NAC+ASC there was a reduction of MDA levels, as well as the increase of SOD and GSH/GSSG ratio, compared to HAE group. However, EAH+ASC group parameters were similar EAH and Control groups. CAT activity no showed difference among study groups. Together these results showed that ASC did not promote changes in redox balance parameters evaluated in EAH, however the NAC was able to restore antioxidant reserve.

N-Acetylcysteine (NAC) is a thiol (-SH) with a strong antioxidant activity. This compound has demonstrated positive effects on chronic kidney disease, cancer, pulmonary insufficiency and other diseases. The aim of this work was to investigate the application of the Solution Enhanced Dispersion by Supercritical Fluids (SEDS) technique in the micronization of NAC using a 23 Central Composite Design (CCD) with 3 central points, as well as to assess the influence of active compound concentration, temperature and pressure on the particle size produced. The average size of the drug before SEDS processing was verified to be 709.82 μm while the best result led to a particle size of 2.86 μm, which means a reduction of about 248 fold. It was also observed that a reduction in particle size led to an increase in the dissolution rate with 100% dissolution.

N-acetylcysteine (NAC) is beneficial in psychiatric conditions, including schizophrenia. Patients with schizophrenia exhibit mesolimbic dopamine hyperfunction consequent to an endogenous sensitization process. This sensitization can be modeled in rodents by repeated exposure to psychostimulants, provoking an enduring amplified response at subsequent exposure. The aim of this study was to investigate the effects of NAC on amphetamine sensitization in mice. Methods: D-amphetamine was administered to C57BL/6 mice three times a week for 3 weeks; the dose was increased weekly from 1 to 3 mg/kg. NAC (60 mg/kg) or saline was administered intraperitoneally before saline or amphetamine during the second and third weeks. After a 4-week washout period, latent inhibition (LI) and the locomotor response to amphetamine 2 mg/kg were assessed. Results: Sensitization disrupted LI and amplified the locomotor response; NAC disrupted LI in control mice. In sensitized animals, NAC attenuated the enhanced locomotion but failed to prevent LI disruption. Conclusion: NAC warrants consideration as a candidate for early intervention in ultra-high risk subjects due to its safety profile and the relevance of its mechanism of action. Supplementing this proposition, we report that NAC attenuates sensitization-induced locomotor enhancement in mice. The finding that NAC disrupted LI incites a cautionary note and requires clarification.

En la revisión de sumarios, guías de práctica clínica o evaluaciones de tecnologías sanitarias, no se encontró información en el que se recomienda el uso de acetilcisteína para el tratamiento de las bonquiectasias. De igual manera en la revisión y análisis de la información (meta-análisis, revisiones sistemáticas y ensayos clínicos controlados aleatorizados), para dar respuesta a la pregunta clínica planteada, tampoco se encontró información sobre el uso de acetilcisteína en el tratamiento de las bronquiectasias. En base a la revisión y análisis de la evidencia respecto al medicamento Acetilcisteina gránulos para el tratamiento de la bronquiectasia, el Equipo Técnico acuerda no incluirlo en el Petitorio Nacional Único de Medicamentos Esenciales (PNUME), por no existir hasta el momento de la evaluación la evidencia que sustente la eficacia de este medicamento en la indicación solicitada.

Alcohol hangover refers to unpleasant symptoms experienced as a direct consequence of a binge drinking episode. The effects observed in this condition are related to the increase in alcohol metabolites and imbalance in oxidative status. N-acetylcysteine (NAC) is a mucolytic agent and an antidote for paracetamol overdose. Preclinical and clinical studies have shown that NAC is a multi-target drug acting through neuroprotective, antioxidant and neurotrophic mechanisms as well as a glutamate modulator. The aim of this study was to investigate the effects of NAC in zebrafish acutely exposed to ethanol (EtOH). Animals pretreated or not with NAC (1 mg/L, 10 min) were exposed for 60 min to standard tank water (EtOH−) or to 1% EtOH (EtOH+) to evaluate anxiety-like behavior and locomotion in the novel tank test and oxidative damage in the brain. Zebrafish (Danio rerio) exposed to EtOH displayed a decrease in the distance traveled, crossings, entries and time spent in the top area in the novel tank test. Exposure to EtOH also caused oxidative damage, shown by increased lipid peroxidation, decreased non-protein thiols and increased production of reactive oxygen species (DCF assay). NAC prevented both the behavioral alterations and the oxidative stress observed in EtOH+ animals. Given the effects of NAC in preventing the acute behavioral and biochemical effects of EtOH, additional studies are warranted to further investigate the basis of its anecdotal use to prevent hangover.