Non disponible/Not available, Le stress oxydant traduit soit une production exagérée d'espèces réactives de l'oxygène, soit une défaillance des systèmes de défenses antioxydantes. Ce syndrome est de, plus en plus incriminé dans des pathologies très variées comme les maladies neurodégénératives, cardio-vasculaires et le cancer. La y-glutamyltranspeptidase (GGT) intervient dans ce syndrome d'une manière ambivalente, par ses effets anti et pro-oxydant, les deux étant corrélés à la capacité de cette enzyme de métaboliser le glutathion (GSH). En effet, en initiant le métabolisme du GSH, la GGT fournit les précurseurs nécessaires pour la synthèse intracellulaire du GSH. De ce fait, la GGT est considérée comme faisant partie de la défense antioxydante. D'autre part, à l'extérieur de la cellule, le métabolite cystéinylglycine (CysGly), formé par l'action catalytique de la GGT sur le GSH, peut initier, en présence de fer, une cascade de réaction produisant des espèces radicalaires. L'objectif principal de cette étude est d'étudier le rôle pro-oxydant de cette enzyme et ses conséquences sur les constituants et les fonctions cellulaires. Dans la première partie de ce travail, nous avons démontré par dosagespectrofluorimétrique sur des modèles cellulaires ou en présence de GGT purifiée une production GGT-dépendante d'espèces réactives de l'oxygène (ERO). Ces ERO oxydent leslipides membranaires et les lipoprotéines de basse densité (LDL). Le Trolox C, antioxydant qui piège les radicaux hydroxyles, réduit partiellement l'oxydation GGT -dépendante des LDL. Cependant, dans nos conditions expérimentales, les ERG produites par le système GGT/GSH/Fe3+ n'endommagent pas l'ADN cellulaire. Le rôle pro-oxydant de la GGT -rel, une autre enzyme capable d'initier le catabolisme du GSH, a été également mis en évidence. En effet, en présence de GSH et de fer, la GGT -rel présente dans les membranes de cellules en culture est responsable d'une formation d'ERO et d'une peroxydation lipidique. La seconde partie met en évidence l'implication de la GGT dans l'apoptose. En effet, le système générateur d'ERO, GGT/GSH/Fe3+, induit la mort cellulaire par apoptose dans notre modèle cellulaire comme le montrent le marquage à l'annexine- V, l'analyse du cycle cellulaire et la mesure de l'activité caspase-3. L'intensité de la réponse dépend essentiellement de la concentration de GSH dans le milieu. De plus, nous avons démontré que l'acivicine, inhibiteur largement utilisé de la GGT, possède par lui-même un pouvoir pro-apoptotique en dehors de toute inhibition de la GGT et par conséquent ne peut pas être utilisé dans les études concernant le rôle de la GGT dans le phénomène de mort cellulaire programmée. Enfin, la troisième partie a été consacrée à l'étude du rôle pro-oxydant de la GGT in vivo. Nos résultats ont montré une corrélation entre l'activité GGT et le degré de peroxydation lipidique dans le plasma de patients supposés sains. Le globule rouge (GR) pourrait être une des cibles de cette oxydation GGT -dépendante dans le sang circulant. En effet, le système GGT/GSH/Fe3+ oxyde les membranes de globule rouge. Cette oxydation dépend du niveau d'activité GGT et de la concentration de GSH et de fer. Elle se traduit par une hémolyse et une baisse de la déformabilité érythrocytaire, partiellement inhibées par le Trolox C. De plus, une corrélation existe entre l'activité GGT plasmatique et l'index de déformabilité du GR dans une population de sujets supposés sains. more...