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【目的】栄養と運動が情動行動の攻撃行動に関与していることは示唆されている。本研究では,動物性または植物性たんぱく質とn-9系・n-6系・n-3系脂肪酸との組合せがラットの攻撃行動に及ぼす影響について,運動を負荷したラットで比較検討を行った。【方法】4週齢のSprague-Dawley系雌ラットを6食餌群に無作為に分け,実験飼料で13週間飼育した。実験飼料:動物性たんぱく質としてカゼイン,植物性たんぱく質として大豆たんぱく質,脂質はn-9系オリーブ油,n-6系紅花油,n-3系エゴマ油を使用した。ほかの成分は全ての食餌群とも同じであった。攻撃行動実験:ラットの胴体のサイズと同じ大きさの筒を使用して対戦させ,先に筒から出た方を負けとして行った。運動:ラット用トレッドミルを使用して行った。【結果】たんぱく質と脂質が同じ食餌群の運動負荷の有無によるラットの攻撃行動では,オリーブ油群のカゼインでは運動の効果は見られなかったが,大豆たんぱく質では運動負荷の攻撃行動が著しく増加した。紅花油群はカゼインでは運動負荷で攻撃行動は増加,大豆たんぱく質で著しく低下した。エゴマ油群の攻撃行動は,運動負荷によりカゼインと大豆たんぱく質ともにコントロールより顕著な減少が認められた。カゼインの方が大豆たんぱく質よりも攻撃行動はどの脂肪酸でも高い傾向であった。さらに,カゼインの攻撃行動は,運動負荷に関わらずエゴマ油群と紅花油群がオリーブ油群よりも上昇した。大豆たんぱく質の攻撃行動は,オリーブ油群で運動負荷によりコントロールより顕著に増加したのが認められた。【結論・考察】攻撃行動は,動物性たんぱく質のカゼインの方が大豆たんぱく質よりも運動の有無に関わらず上昇した。更に,脂肪酸の質により運動の効果は異なった。本研究での運動は,週2回のトレッドミル5分間という軽い負荷であったので,もっと強度の運動と栄養と攻撃行動の関係については今後の課題である。(著者抄録)

【目的】筋肉から分泌されるたんぱく質はマイオカインと呼ばれ,20種類以上のたんぱく質が知られており,その中の一つがマイオネクチンである。マイオネクチンは栄養との関連があるとされ,骨格筋から血液中に分泌されている。本研究では,たんぱく質と脂質の質の相互作用と運動負荷に対するマイオネクチン産生との関連性について比較検討を行った。【方法】実験動物:Sprague-Dawley系雌ラットの4週齢を無作為に動物性たんぱく質食群と植物性たんぱく質食群に分け,それぞれの群の中をn-9系,n-6系,n-3系脂肪酸摂取群に分けた。更に,各食餌群は運動を負荷する群と負荷しない群とに分け,実験飼料で13週間飼育を行った。実験飼料:動物性たんぱく質として,カゼイン,植物性たんぱく質として大豆たんぱく質を使用した。たんぱく質と脂質以外の成分は全ての食餌群で同じであった。実験飼料は全ての食餌群のカロリー量を同一にして毎日投与した。生化学的測定は測定キットを使用し,会社のプロトコールに従って行った。尚,動物実験は鹿児島純心女子大学動物実験指針に従って行われた。【結果】実験食で飼育中の体重増加量は,動物性たんぱく質摂取のラットの方がn-9系オリーブ油群,n-6系紅花油群,n-3系エゴマ群において大豆たんぱく質摂取のラットに比べて有意に高かった。血液中のマイオネクチンは,動物性たんぱく質群の方が,大豆たんぱく質群に比べて有意に高いのが認められた。血液中のトリアシルグリセロール(TG)は,動物性たんぱく質の方が大豆たんぱく質より有意に高く,マイオネクチンのパターンと同じ傾向を示した。血液中の総コレステロール(T-Cho)は,動物性たんぱく質と植物性たんぱく質において,n-3系エゴマ油群がn-9系オリーブ油群やn-6系紅花油群より有意に低下した。肝臓のTGでは,n-9系オリーブ油群とn-6系紅花油群が他の食餌群に比べて有意に高く,肝臓のT-Choでは,オリーブ油群が他の食餌群に比べて有意に高かった。血液中のグルコースでは,動物性たんぱく質群と植物性たんぱく質群は同じ傾向であった。一方,血液と肝臓のグルコースでは,運動による影響は認められなかった。【結論】血液中に分泌されるマイオネクチンは,動物性たんぱく質であるカゼイン摂取群のほうが大豆たんぱく質群よりも有意に増加し,それは運動の影響よりも著しいのが示された。更に,カゼイン摂取群の中では,n-3系エゴマ油群がオリーブ油群や紅花油群に比べて有意に低く,それは血液や肝臓におけるTGと同じ傾向であった。(著者抄録)

【目的】工業的水素添加された高オレイン酸植物油がオリーブ油と同等な機能を持つのかは未だ明らかではない。本研究では,高オレイン酸植物油の中で一般に普及している高オレイン酸カノーラ菜種油と高オレイン酸ひまわり油について,乳酸菌との同時摂取がラットの不安行動に及ぼす影響について明らかにすることを目的とした。【方法】Sprague-Dawley系ラットの4週齢を無作為に乳酸菌食と標準食に分け,実験飼料で13週間飼育を行った。乳酸菌食と標準食は,脂質として市販されている高オレイン酸ひまわり油と高オレイン酸カノーラ油,n-9系オリーブ油,n-6系ひまわり油,在来型菜種油を使用した。乳酸菌はLactococcus Lactis subsp. Cremoris FC, Acetobacter orientalis FAを用い,ヨーグルトにして与えた。その他の成分は全て同じで行った。実験飼料は全ての食餌群のカロリー量を同一にして投与した。不安行動実験は高架式十字迷路試験と高所滞在試験で行った。尚,本研究における動物実験は鹿児島純心女子大学動物実験指針に従って行われた。【結果】不安行動では,高オレイン酸ひまわり油はオリーブ油と同じく乳酸菌食の方が標準食に比べて不安感の減少がみられた。一方,高オレイン酸カノーラ油の不安行動には乳酸菌食の影響はみられなかった。ひまわり油と菜種油の高オレイン酸型と在来型の不安行動では,ひまわり油の方が菜種油に比べて標準食および乳酸菌食とも不安感が低いのが顕著であった。【考察】高オレイン酸ひまわり油がオリーブ油よりも不安感が低く、高オレイン酸カノーラ油の不安感が高いのが,標準食および乳酸菌食で明らかとなった。著者らの先行研究で高オレイン酸紅花油と同じく高オレイン酸のひまわり油とカノーラ油もオリーブ油とは異なる不安行動への影響が認められた。【結論】高オレイン酸カノーラ油と高オレイン酸ひまわり油が不安行動に及ぼす影響は異なっていた。(著者抄録)

近年,食用油の市場では従来のn-6系脂肪酸/リノール酸を高含量含む油を,工業的水素添加による高オレイン酸植物油として並んでいる。本研究では高オレイン酸に変換された菜種油・ひまわり油と乳酸菌摂取の相互作用について,ラットの血液と肝臓の性状に及ぼす影響についてオリーブ油との比較検討を行った。【方法】実験動物:Sprague-Dawley系雌ラットの4週齢を無作為に標準食と乳酸菌食に分け,実験飼料で13週間飼育を行った。実験飼料:乳酸菌食と標準食は,脂質としてn-9系脂肪酸であるオレイン酸含量の多いオリーブ油と市販されているオレイン酸含量の多いカノーラ菜種油とひまわり油を使用した。乳酸菌はLactococcus lactis subsp. Cremoris FC, Acetobacter orientalis FAを用い,ヨーグルトを調製して使用した。その他の成分は全ての食餌群で同じであった。実験飼料は全ての食餌群のカロリー量を同一にして毎日投与した。生化学的測定:測定キットを使用し,会社のプロトコールに従って行った。尚,動物実験は鹿児島純心女子大学動物実験指針に従って行われた。【結果】オリーブ油と高オレイン酸カノーラ油とひまわり油摂取における血液の場合,Gla型オステオカルシン(活性型オステオカルシン)は,標準食で高オレイン酸ひまわり油がオリーブ油に比べて有意に高かった。乳酸菌食では,カノーラ油と高オレイン酸ひまわり油はオリーブ油と同じ傾向であった。また,高オレイン酸カノーラ油とひまわり油は在来型と同じ傾向を示し,乳酸菌食の影響は認められなかった。血液のGLP-1は,乳酸菌食でオリーブ油と高オレイン酸ひまわり油は標準食より上昇し,オリーブ油は高オレイン酸ひまわり油より有意に高いのが認められた。菜種油とひまわり油において,高オレイン酸型と在来型は標準食と乳酸菌食で同じ傾向を示した。グルコースは全ての食餌群間で乳酸菌食の方が標準食より高い傾向であった。血液と肝臓のトリアシルグリセロール(TG)では,乳酸菌食のオリーブ油が,菜種油やひまわり油の高オレイン酸型や在来型に比べて有意に高くなった。【結論】1)血液のGla型オステオカルシンは,乳酸菌食において高オレイン酸ひまわり油(n-9)がオリーブ油に比べて有意に高かった。2)GLP-1では,高オレイン酸植物油の標準食はオリーブ油と似た傾向であったが,乳酸菌食では,オリーブ油と在来型のひまわり油(n-6)でGLP-1が有意に増加した。3)血液と肝臓のTGでは,乳酸菌食のオリーブ油が高オレイン酸植物油よりも有意に増加した。4)高オレイン酸植物油の血液と肝臓の性状は,オリーブ油よりもオリジナルの在来型とよく似た傾向が認められた。(著者抄録)

関節リウマチの診断において抗CCP抗体は、特異度が高く、早期診断、治療方針を決定する上で、重要な自己抗体とされている。本研究では、抗CCP抗体が血中濃度依存的に唾液中へ分泌されるか関節炎誘発モデル/マウスを用いて検討した。結果、血液中と唾液中抗CCP抗体には相関が認められ、両者に有意差を認めた。これらのことから、唾液中から検出された抗CCP抗体は血液由来であることが示唆された。(著者抄録)

再現性が高い口腔カンジダ症マウスモデルについて検討した。高齢者の口腔内から分離したC.albicans OH-1株を使用した。マウスの舌にC.albicansを接種して3日後のC.albicansの舌組織中の菌数を調べた。塩酸クロルテトラサイクリン含有水道水を飲用させ、プレドニゾロンを投与した場合にのみ多数のC.albicansが舌組織中から検出した。マウス口腔カンジダ症の発現には、塩酸クロルテトラサイクリン含有水道水を飲用させることと、プレドニゾロンを投与することが必要であることが示された。感染マウスの舌表面には、ヒト口腔カンジダ症で認めるものと極めて類似した白苔が形成された。MIP-1αは非感染マウスと比較して有意に高い産生を認めた。IL-1αは非感染マウスと比較して有意に高い産生を認めた。

炭酸ガスレーザー照射後ラット歯肉の組織変化について検討した。照射後1日においては、レーザー創でのHsp47発現細胞の消失、ならびにレーザー創に隣接する歯周靱帯、粘膜固有層および骨膜でのHsp47発現細胞の増加を観察した。3日目以降、時間の経過とともにHsp47発現線維芽細胞は数を増してレーザー創全域に拡がり、14日にHsp47陽性細胞の分布密度は極大に達して、28日にはその分布密度は減少した。テネイシンC発現欠如部位においてHsp47陽性細胞の増加に伴ってテネイシンCの発現を認め、3日以降、Hsp47陽性細胞のレーザー創内進入拡大と一致してテネイシンC発現範囲が拡大した。レーザー照射28日後には、歯肉固有層におけるテネイシンCの消失を観察した。フィブロネクチンの発現は、レーザー創内に増殖進入する肉芽組織では低下あるいは消失し、再生過程が進行して線維形成が進むとその部で再び増強した。

Ectodinがラット象牙芽細胞様細胞の分化に及ぼす影響について検討した。培養20日後の対照群の細胞はAP染色で中等度陽性であり、von Kossa染色陽性の石灰化結節が多数形成された。LiCl群では対照群と比較して石灰化結節の数が少なく、ALP染色も弱陽性であった。培養5日目におけるLiCl群のALPのmRNA発現量は対照群の約50%となった。対照群のectodinのmRNA発現は、培養5日目から10日にかけて上昇し、その後経時的に発現が減少した。Ectodinをknock downした細胞でのectodin発現はknock downしていない細胞と比較して約15%に抑制され、β-cateninのmRNAは非knock down細胞に比較して有意に増加した。ectodinをknock downした20日後の細胞は非knock down細胞に比較して石灰化結節の個数が減少した。

齧歯類の臼歯によるすりつぶし運動には、食性とは無関係な前方型、内側型、斜前方型という3つのパターンが存在する(Offermans and De Vree,1990)。しかし、顎運動のパターンと咀嚼筋形態との関連性については十分に明らかにされていない。そこで本研究では、内側型の咀嚼運動がみられるタイワンリス、Callosciurus erythraeus、の咬筋表層・深層・内側層の内部構造および走行について詳細な観察をおこない、これまでに報告されているネズミ科キヌゲネズミ亜科(内側型)およびネズミ亜科(前方型)との比較をもとに顎運動パターンと咬筋の解剖学的特徴との関係について考察した。ともに内側型の咀嚼をおこなうタイワンリスとネズミ科キヌゲネズミ亜科の咬筋では、表層における下顎骨内側面に停止する部位の欠如、深層前部の単純な構造、深層のいくつかの区画における強く前傾した走行という共通の特徴が認められた。これらの特徴は、前方型の運動がみられるネズミ科ネズミ亜科では認められない(Satoh and Iwaku、2004、2008)。ネズミ科キヌゲネズミ亜科とネズミ亜科の食性が類似していることから、これら2亜科間で異なり、キヌゲネズミ亜科とタイワンリスとの間に共通する咬筋の特徴は、食性への適応ではなく咀嚼運動の違いを反映したものと考えられる。本研究で得られた結果の機能的意義を説明するためには、さらなる力学的解析が必要である。

マウスを用いて、歯周組織に歯科矯正学的メカニカルストレスを負荷することによって生じる牽引側および圧迫側歯根膜組織の変化について、熱ショックタンパクHSP70およびp-HSP70の発現を免疫組織化学的に検討した。HSP70は時間の経過と共に陽性反応が増強した。p-HSP70は、HSP70の発現より遅れて陽性反応の増強を示した。HSP70がホメオスタシスの維持や傷害を受けた細胞の修復、またそのリン酸化したp-HSP70として、牽引側歯根膜組織における骨芽細胞活性化による同部への骨添加傾向へのシフトが正常に行われるよう分子シャペロンとして働き、タンパク質のフォールディングなどの立体構造形成を助けていることが示唆された。

骨移植を利用し骨細胞の役割を解析する目的で、熱により骨細胞を死滅させた状態の骨組織と骨細胞が生存している骨組織を移植し、骨代謝に対してどのような影響が生じるのかを酵素および免疫組織化学的に解析した。100℃の沸騰水中で20分間処理した骨片と、処理を施していない骨片を用意し、ラット脛骨に移植した。両群において骨の連続性が観察されたが、煮沸群では移植骨の吸収が早期に生じ、一部新生骨と置換された。煮沸群ではTRAP陽性を示す破骨細胞およびその前駆細胞が移植骨内部で増加し、Osteopontin陽性の骨細胞を新生骨に認めた。SclerostinとLEF-1の発現はほとんど認めなかった。煮沸群の移植骨周囲で破骨細胞による骨改造が活発に行われ、新生骨ではSclerostinがあまり強く発現しないことにより、骨芽細胞の骨形成が活発に行われていることを示した。

骨再生療法に用いられているβ-リン酸三カルシウム(β-TCP)を用い、炭酸ガスレーザーと併用することで骨形成作用に対してどのような影響を与えるかを調べた。雌性SDラット左右脛骨を観血的に露出させ、歯科用ラウンドバーにて直径2.5mmの骨欠損を作製した。欠損部に5mgのβ-TCPを埋入し縫合した。その後、皮膚上から炭酸ガスレーザーを照射した(レーザー照射群)。軟エックス線写真の結果からβ-TCP移植後5日目での対照群とレーザー照射群の骨形成量には変化を認めなかったが、10日目には、レーザー照射群の方が対照群と比較して骨の形成が促進された。移植後5日目のβ-TCP顆粒は、対照群もレーザー照射群も未だ骨へ置換されていないが、10日目になると、レーザー照射群のβ-TCP顆粒が骨基質に置換されている所見がみられた。炭酸ガスレーザー照射の刺激によって骨形成が促進していることが示唆された。

唾液腺炎が加齢とともに自然発症するMRL/lprマウス用い、正常状態でのClaudin 1〜5およびOccludinの局在を観察し、炎症の進行過程でのこれらの発現変化について比較検討した。claudin-1は腺房細胞の細胞間および細胞質の一部に局在がみられ、導管上皮には陽性反応が認めず、claudin-3は、腺房細胞の細胞間および導管上皮の内腔側に陽性反応がみられた。occludinは腺房から導管に移行する付近の上皮、すなわち線条部〜介在部導管付近で細胞間および細胞質の一部に陽性反応が認められた。Claudin-2、-4、-5の局在は今回の免疫染色では確認しなかった。claudin-3は、コントロールに比べて、14、16週齢で有意な発現低下を観察した。また、occludinでは、10、12、14、16週齢でコントロールに比べて有意な発現低下を認めた。

炭酸ガスレーザー凝固モード照射後のラット口蓋動脈の組織変化について検討した。レーザー照射後1日では、照射を受けた粘膜上皮が長さ約1.5mmにわたり凝固壊死に陥っていた。レーザー創と周囲正常組織との境界部では、ほとんどの内皮細胞が消失し、筋層では細胞核は凝縮し、筋層内では空胞変性が見られた。レーザー照射3日後では、レーザー創内部の動脈の壊死筋層外側で紡錘形細胞が粗に配列していた。筋層内では新生細胞の核と思われる泡状核が少数見られた。照射後7日では、レーザー創内動脈の内腔面はほぼ全体が内皮細胞で覆われ、壊死層の厚さが照射5日後と比べ減少し、壊死層周囲では紡錘形細胞が数を増した。周囲組織との境界部では、筋層内において生細胞の核が増加した。

メカニカルフォースとしての炭酸ガスレーザーによる骨再生のメカニズムについて検討した。雌性SDラットを用いた。左右脛骨を露出させ、左側には炭酸ガスレーザーを照射した。対照群として右側には、直径1mm、深さ約0.5mmの骨欠損を作製した。レーザー照射後、5日目には照射部位の骨髄側に類骨様の新生骨の形成を認めた。対照群の骨髄側にosteopontin陽性の細胞散在性が観察され、レーザー照射群では形成された新生骨の基質周囲に存在する細胞にosteopontinの発現が観察された。対照群と比較し、レーザー照射群では、osteopontinのmRNA発現量が約1.8倍と、有意に促進した。炭酸ガスレーザーによるメカニカルフォースによって、骨基質中の骨細胞が活性化され、その他のメカニカルフォースと同様骨細胞がそれを認識し、Wnt/β-catenin経路を刺激することで、骨形成に関与することが示唆された。

ラットを用いた片側性の臼歯喪失が下顎頭軟骨に及ぼす影響を細胞レベルで検討した。実験的な片側臼歯抜歯を行い、軟骨細胞の増殖及び分化マーカーを用いた免疫組織化学染色により下顎頭軟骨を形態学的に検索した。抜歯側ではIhh、PTHrP、およびSox9の発現が減少した結果、細胞の分化、増殖が抑制され、これと関連して軟骨基質であるアグリカン、type II collagen、およびtype X collagenが減少した。非抜歯側では、Ihh、PTHrP、およびSox9の発現が増加した結果、細胞の分化、増殖が促進し、これと関連して軟骨基質であるアグリカン、type II collagen、およびtype X collagenが増加した。片側臼歯の抜歯によって引き起こされた機械的負荷の変化はIhh、PTHrP、Sox9といった成長因子が関与し、顎関節の軟骨代謝に影響を及ぼす可能性が示唆された。

骨吸収抑制剤として広く臨床応用がなされているビスホスフォネートを用い、歯が形成される時期のラットにおいて、実験的に破骨細胞の機能を阻害した場合、どの時期に、どの場所で、どのような変化が生じ萠出遅延に至るか検討した。雌雄Wistar系ラットを交配させて得た仔ラット40頭を用いた。ビスホスフォネートとしてインカドロネートを用いた。歯が形成される時期のラットにインカドロネートを投与し、無処置対照群に比べ臼歯の萠出が著しく遅延した。実験群では、咬合面を覆う骨組織の残存、根部における骨梁による歯胚、特にヘルトヴィッヒ上皮鞘の圧迫、破壊とそれに起因する歯根および髄床底、歯周靱帯さらには根間中隔の形成障害を観察した。これらの異常が複合的に影響し合って萠出遅延が生じたものと考えられた。

P(論文), To evaluate the skeletal efficacy of raloxifene on the osteoporosis in ovariectomized mice model, the sixth lumbar vertebrae was scanned by X-ray micro-CT, and these resulting 8-bit gray-scale images were analyzed by using commercial three-dimen. sional (3-D) reconstruction software (VoxBlast^ Mac, VayTek, Inc., USA). In this paper, it is described how to use VoxBlast software practically for processing sequential datasets from CT scanners. Furthermore, we demonstrate in 3-D visualization that new trabecular bones buik compact bridge constructions in the lumbar vertebrae after the treatment with raloxi fene.

金沢大学大学院医学系研究科がん医科学専攻機能再建学, 大腿四頭筋の遠心性運動と求心性運動が膝蓋腱の微細構造に与える影響を組織学的に比較検討した.手術によって膝蓋腱の内外側1/4ずつを切除して腱幅を半分にし,腱にかかる張力を2倍にした12週齢の過負荷モデルラットを作製し,これに対して走行負荷を行った.続いて両運動が腱の成熟過程に及ぼす影響を明らかにするために,7週齢の幼若ラットに対して速度15m/分,傾斜15度,30分間の下り坂定と上り坂走を毎日負荷し,膝蓋腱に上じた変化を電子顕微鏡で検討した.遠心性運動は求心性運動に比較して腱の損傷を来たし易い一方で,腱炎の修復過程に必要不可欠な腱の修復強度を増加させる作用を持ち,腱炎の再発率を低下させる有効な運動療法であることが示唆された, 原著論文