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[ES] Debido a la importancia de las semillas como base de la alimentación, conocer los mecanismos moleculares que determinan su producción y el tamaño de las mismas es de especial interés para conseguir una mejora en el rendimiento de los cultivos. Es sabido que para que se produzca un desarrollo óptimo de la semilla es necesario, entre otros procesos, que se active correctamente la diferenciación celular en el óvulo. Sin embargo, a pesar de la importancia de este proceso en la formación de las complejas estructuras que constituyen los óvulos, se sabe muy poco sobre los mecanismos moleculares que subyacen a la activación de la diferenciación celular. En los últimos años, se ha descrito el papel que el interruptor binario compuesto por los genes MINIYO (IYO)/RIMA ejerce en la iniciación de la diferenciación celular. Dicho interruptor actúa sobre los meristemos apicales del tallo y de la raíz, así como en los primordios florales; sin embargo, se desconoce su implicación en el desarrollo de los óvulos. Curiosamente, los alelos mutantes de pérdida de función iyo-2 e iyo-3 presentan un alto porcentaje de semillas abortadas, lo que sugiere la importancia de IYO en el desarrollo del embrión. Además, el estudio de distintos alelos mutantes de IYO reveló su papel esencial en el desarrollo del endospermo, tejido necesario para la ampliación del óvulo y la progresión del embrión. Estos datos sugieren que IYO, y posiblemente RIMA, puedan participar en la diferenciación y el desarrollo del óvulo y, por consecuencia, tener un efecto en la formación de las semillas. Por tanto, el objetivo del presente Trabajo Fin de Grado será determinar el posible papel de IYO y RIMA durante el desarrollo del óvulo en la planta modelo Arabidopsis thaliana. Para ello, se ha caracterizado el desarrollo de los óvulos y el tamaño de las semillas haciendo uso de los alelos hipomórficos iyo-1 y rima-2. Además, se ha estudiado el posible efecto de la pérdida de función del gen IYO en el proceso de fecundación, usando para ello la línea reportadora pLAT52:GUS. Finalmente, se han caracterizado líneas de sobreexpresión del IYO para demostrar si es posible complementar el fenotipo de embrio-letalidad observado en los alelos de pérdida de función de IYO. Los resultados de este estudio indican que los alelos mutantes iyo-1 y rima-2 presentan un alto porcentaje de óvulos con el saco embrionario reducido, así como un menor número de semillas por fruto. Se ha demostrado que los óvulos mutantes son capaces de atraer correctamente los tubos polínicos a lo largo del estigma, lo que sugiere que posiblemente la reducción en el número de semillas no sea debida a una deficiencia en la señalización ejercida por los óvulos, sino a problemas en la supervivencia de los embriones. En resumen, estos resultados indican que MINIYO y RIMA desempeñan un papel fundamental en el desarrollo reproductivo., [EN] Due to the importance of seeds as the basis of animal and human nutrition, understanding the molecular mechanisms that determine their production and size is of crucial importance to improve crop yield. For optimal seed development, it is necessary, among other processes, to properly activate ovule cell differentiation. Activation of cell differentiation is an essential and critical point for the development of the complex structures that constitute ovules. However, despite its importance, very little is known about the molecular mechanisms underlying the activation of cell differentiation. Recent evidence unravels the role that the binary switch, composed of the genes MINIYO (IYO) and RIMA, plays in the initiation of cell differentiation. This molecular switch acts at the root and shoot apical meristems, and at the flower primordia; however, its role in ovule development is unknown. Interestingly, iyo-2 and iyo-3 loss-of-function mutants present a high percentage of aborted seeds, suggesting the importance of IYO in embryo development. In addition, characterization of different IYO mutant alleles revealed their essential role in endosperm development, a tissue necessary for ovule enlargement and embryo progression. Taken together, these data suggest that IYO, and possibly RIMA, may participate in activation of ovule cell differentiation and/or development, and, as a consequence, affect seed formation. Therefore, the objective of this Final Degree Project will be to determine the possible role of IYO and RIMA during ovule development in the model plant Arabidopsis thaliana. To accomplish that, ovule development and seed size have been characterized using the hypomorphic alleles iyo-1 and rima-2. In addition, the possible effect of IYO loss of function in pollen fecundation has been studied, using the reporter line pLAT52:GUS. Finally, IYO overexpression lines have been characterized to demonstrate whether it is possible to complement the embryo-lethality phenotype observed in iyo loss-of-function alleles. Our results indicate that iyo-1 and rima-2 mutant alleles present a higher percentage of ovules with reduced embryo sac, as well as fewer seeds per fruit. Ovules have been shown to properly attract pollen tubes along the stigma, suggesting that possibly the reduction in seed number may not be due to a deficiency in the signaling exerted by ovules, but to problems in embryo survival. In summary, these results suggest that MINIYO and RIMA play a critical role in the reproductive development.

[ES] La determinación del número de óvulos en las plantas es un proceso de desarrollo complejo en el que participan varias redes génicas y las fitohormonas auxinas, brasinoesteroides y citoquininas (CKs). Por un lado, resultados obtenidos en el laboratorio indican que las giberelinas (GAs), junto con sus reguladores negativos de señalización, las proteínas DELLA, están también implicadas en la iniciación de los óvulos determinando tanto el número como su forma. Por otro lado, en Arabidiopsis thaliana el factor de transcripción SPTAULA (SPT) se encuentra implicado en el desarrollo del gineceo ya que su mutante nulo spt-2 presenta una reducción en la cantidad de óvulos. Además, se ha descrito como SPT posibilita la señalización de las CKs en el dominio medio del gineceo. El objetivo de este Trabajo de Fin de Máster es estudiar la interacción entre SPT y las rutas metabólicas de GAs en la determinación del número de óvulos. Para ello, se estudiaron los niveles de GAs en los pistilos de spt y se describió el efecto de las alteraciones en la ruta de señalización de las GAs en los mutantes spt. Asimismo, se caracterizó el número y morfología de los óvulos y semillas de spt. Finalmente, se estudió la interacción entre SPT, CKs y GAs en la determinación del número de óvulos. En base a los estudios realizados en el presente trabajo, y la falta de futuros ensayos, se propone un mecanismo molecular por el cual SPT, a través de la represión de la biosíntesis de GAs en los pistilos, regula la cantidad de GAs y la estabilidad de las proteínas DELLA, participando de esta forma en el mecanismo molecular por el cual se determina el número de óvulos.

Universidad Nacional Agraria La Molina. Escuela de Posgrado. Doctorado en Ciencia Animal La hormona antimülleriana (AMH) es secretada en las células de la granulosa de folículos pre antrales y antrales pequeños, se ha propuesto como marcador hormonal para estimar la reserva folicular ovárica. Con el fin de determinar la relación del nivel de AMH sobre la dinámica folicular, la respuesta superovulatoria y porcentaje de embriones viables. Se utilizó un diseño experimental completamente aleatorizado con arreglo factorial, el factor A correspondió a la categoría del animal vaquillas entre 24 y 30 meses (n=30), y vacas con más de 3 años de edad (n=30) y el factor B correspondió a los niveles de la hormona antimülleriana 300 ρg/ml. El análisis de regresión entre los niveles AMH con el número de folículos pequeños, grandes y total de folículos (p

Xenopus laevis oocytes are transcriptionally silent cells that require hormone stimulation for maturing into fecundation-competent eggs. Meiosis resumption underlying oocyte maturation is governed by sequential waves of protein synthesis, which in these cells is promoted by cytoplasmic polyadenylation, a mechanism that has been mostly studied for the CPEBs. CPEBs are a family of RNA binding proteins that can both promote translational repression in quiescent cells and translational activation in maturing oo- cytes. This dual activity has been shown to be regulated by post-translational modifica- tions that impact on their interactome, stability and aggregation properties. Several studies have addressed the composition of the CPEB complexes in stage VI oo- cytes and their remodeling upon hormone stimulation. However, these studies show inconsistent and mutually exclusive results. In this regard, we have tailored an adapta- tion of the BioID methodology to identify the in vivo interactors of the CPEBs in both contexts. With this approach we have established novel links between the CPEBs and machineries associated to miRNA translational control, adenosine methylation and the CCR4-NOT complex. In addition, we show that all four CPEBs have a similar inter- actomic landscape in stage VI oocytes, though they have also interesting specificities. To add another layer of complexity, we have characterized the phase separation proper- ties of the four CPEBs, a principle that is becoming increasingly relevant in all the pro- cesses regulating gene expression. We have found that CPEBl has clearly different LLPS properties compared to CPEB2-4, even though these three paralogs have also different material properties that need to be further addressed. We propose that these differences explain why there are four CPEBs with non-redundant functions in higher organisms. Our findings pave the way for more specific research focused on the potential links between the CPEBs and other master translational regulators, both in repression and activation, as well as provide a starting point for a deeper understanding on how the composition and material properties of a condensate impact translational control.

[spa] Como consecuencia del estilo de vida y de factores no fácilmente cuantificables, cada vez se retrasan más la paternidad y la maternidad, lo que deriva con frecuencia en problemas de fertilidad. Con objeto de evitar el denominado Permanent Involuntary Childlessness y sus efectos colaterales, como la estigmatización social o la frustración personal, quienes desean tener descendencia a pesar de las dificultadas citadas recurren a las Técnicas de Reproducción Humana Asistida. La infertilidad y/o los nuevos modelos de familia conllevan que a veces se recurra a la donación de gametos, lo que genera una casuística enorme. En efecto, estas donaciones, efectuadas en un marco jurídico no siempre explícito e incluso a veces oscilante, arrastran tras de sí numerosas implicaciones sociales y éticas, extendiendo la relación de los usuarios de estas TRHA a terceros, esto es, a los donantes y a los menores que nacen con las técnicas que comentamos. De hecho, conciliar el anonimato con el derecho a conocer los orígenes es uno de los grandes retos por resolver. Pues bien, con esta tesis nos planteamos conocer la realidad bioética, social y legal del proceso de donación. Para ello, contrastaremos las opiniones de los estudiantes universitarios de la Facultat de Dret, Economia i Turisme, y la Facultat d’Infermeria i Fisioteràpia de la Universitat de Lleida, con un grupo de investigadoras de diversos campos del conocimiento. Dada la dificultad inherente a analizar dichos conocimientos y actitudes, y ante la ausencia de instrumentos adecuados para hacerlo, hemos decidido diseñar, elaborar y validar un cuestionario al que denominamos Cuestionario LSP2016. Nuestro enfoque es tanto cualitativo como cuantitativo. Hemos iniciado nuestro trabajo con una revisión de la bibliografía para el desarrollo argumental y una scoping review sobre los instrumentos que existen; a continuación, hemos realizado una revisión sistemática de las páginas webs de las clínicas con programas de donación de Barcelona, así como un estudio etnográfico. Para la validación del cuestionario, hemos empleado la técnica Delphi, una discusión con expertas, una prueba piloto y un test-retest con una muestra heterogénea para que el cuestionario quede validado para la población general. Al desarrollo cualitativo de estas metodologías le acompañan diferentes pruebas estadísticas para la validación de contenido, constructo y criterio, y para evaluar su confiabilidad. Finalmente, hemos realizado el trabajo de campo con la propuesta final del Cuestionario LSP2016, así como las pruebas estadísticas pertinentes para la obtención de resultados. Por último, hemos procedido a la discusión de todos los apartados por separado, finalizando con las conclusiones pertinentes. Sin perjuicio de la lectura de las mismas, podemos destacar la enorme diferencia existente, en cuanto al enfoque, entre las expertas y los resultados del trabajo de campo realizado con los estudiantes., [cat] Com a conseqüència de l’estil de vida i de factors que no són fàcilment quantificables, cada vegada es retarda més la paternitat i maternitat, la qual cosa deriva amb freqüència en problemes de fertilitat. Per tal d’evitar el denominat Permanent Involuntary Childlessness i els seus efectes col·laterals, com són l’estigmatització social o la frustració personal, aquelles persones que desitgen tenir descendència malgrat les dificultats nombrades, recorren a les Tècniques de Reproducció Humana Assistida. La infertilitat i/o els nous models de família comporten que, de vegades, es recorri a la donació de gàmetes, el que genera una gran casuística. En efecte, aquestes donacions, efectuades en un marc jurídic no sempre explícit i inclús, de vegades oscil·lant, comporten nombroses implicacions socials i ètiques, duent la relació dels usuaris d’aquestes TRHA a terceres persones, és a dir, als donants i als menors que neixen mitjançant aquestes tècniques que comentem. De fet, conciliar l’anonimat amb el dret a conèixer els orígens és un dels grans repte per resoldre. Per tant, amb aquesta tesi ens plantegem conèixer la realitat bioètica, social i legal del procés de donació. Per fer-ho, contrarestarem les opinions dels estudiants universitaris de la Facultat de Dret, Economia i Turisme, i la Facultat d’Infermeria i Fisioteràpia de la Universitat de Lleida, amb un grup d’investigadors de diferents camps de coneixement. Donada la dificultat inherent d’analitzar aquests coneixements i actituds, i davant l’absència d’instruments idonis per dur-ho a terme, hem decidit dissenyar, elaborar i validar al que denominem Cuestionario LSP2016. El nostre enfocament és tant qualitatiu com quantitatiu. Hem iniciat el nostre treball amb una revisió de la bibliografia per redactar el desenvolupament argumental i una scoping review sobre els instruments que existeixen; a continuació, hem realitzat una revisió sistemàtica de les pàgines webs de les clíniques amb programes de donació de Barcelona, així com un estudi etnogràfic. Per dur a terme la validació del qüestionari, hem realitzat la tècnica Delphi, una discussió amb expertes, una prova pilot i un test-retest amb una mostra heterogènia per tal de que el qüestionari estigui validat per a la població general. Al desenvolupament qualitatiu d’aquestes metodologies l’acompanyen diferents proves estadístiques per la validació del contingut, constructe, criteri, i per avaluar la confiabilitat. Finalment, hem realitzat el treball de camp amb la proposta final del Cuestionario LSP2016, així com les proves estadístiques pertinents per l’obtenció de resultats. Per últim, hem dut a terme la discussió de tots els apartats per separat, finalitzant amb les conclusions pertinents. Sense prejudicis de la lectura de les mateixes, podem destacar la gran diferència existent, entre les expertes i els resultats del treball de camp realitzat amb els estudiants., [eng] The paternity and maternity are increasingly retarded year on year as a consequence of the lifestyle and non-easily quantifiable factors. This fact often leads to fertility issues. All aimed to avoid the Permanent Involuntary Childlessness and its collateral effects, such as the social stigmatization or the personal frustration, the ones who desire having offspring they turn to Assisted Reproductive Technology despite the mentioned difficulties. Infertility and new family types usually lead to the donation of gametes, which creates a huge casuistry. In effect, these donations generate debates over legal, social and bioethical dilemmas by the community experts around the world. Nowadays, one of the major challenges to resolve is, in fact, the reconciliation of the anonymity by getting to know their origins. This thesis aims at knowing the bioethical, social and legal reality of the donation process. In order to achieve it we will be contrasting the students’ opinions of the Facultat de Dret, Economia i Turisme and Facultat d’Infermeria i Fisioteràpia of Universitat de Lleida with a group of researches in the various fields of knowledge. Nevertheless, given the inherent difficulty with analysing knowledge and attitudes, and the lack of appropriate instruments to carry it out, we have designed, elaborated and validated a questionnaire entitled as Cuestionario LSP2016. During the process, we have combined qualitative and quantitative approaches. Firstly, we have looked over literature, which facilitate us the development of arguments and a scoping review about the available instruments. Secondly, we systematically reviewed Barcelona fertility clinics, which are involved in the recruitment of egg donors by analysing their websites, as well as an ethnographic study. Delphi technique has been used for the questionnaire validation, apart from an experts’ discussion, a pilot study and a test-retest including a heterogeneous group in order to get the questionnaire validated for the general population. The qualitative development of these methods is formed by different statistical analysis, which are going to be used for the content, construct and criterion-related validity and reliability. Lastly, we have done a research work considering the final proposal of the Cuestionario LSP2016 and the corresponding statistical analysis in order to obtain the results. Finally, we proceed with a discussion for each section and the appropriate conclusions. Without prejudice of the lecture, we highlight the enormous difference, in terms of approaches, between the experts and the students’ research work.

Universidad Nacional Agraria La Molina. Escuela de Posgrado. Maestría en Producción Animal El objetivo del presente estudio fue relacionar altos y bajos niveles de la hormona antimülleriana (AMH) plasmática con la cantidad y tamaño de folículos y calidad de ovocitos, y describir su comportamiento a lo largo de la onda folicular en alpacas suri. El estudio fue realizado entre los meses de enero y marzo del 2016 y noviembre a marzo del 2017 en el Centro de Investigación y Producción Chuquibambilla de la Universidad Nacional del Altiplano (Umachiri, Puno). Se trabajó con 54 alpacas hembra vacías en edad reproductiva, separándolas por cuartiles según los niveles hormonales y se comparó los grupos extremos. El grupo de alta concentración de AMH presentó mayor cantidad de folículos a diferencia del grupo de baja concentración (20.51 ± 2.76 vs. 11.58 ± 2.55, respectivamente). No hubo diferencias estadísticas significativas entre los grupos de AMH y el tamaño de los folículos. Además, en el grupo de alta concentración se encontró dependencia entre la cantidad y calidad de los ovocitos (p = 0.02). En la onda folicular, la AMH presentó asociación positiva con el crecimiento del folículo dominante (r2 = 0.52). Los resultados nos revelan que la AMH plasmática puede utilizarse como biomarcador para seleccionar a las mejores donantes para los protocolos de superovulación en alpacas suri. The aim of this study was to evaluate the relationship between high and low levels of plasma anti-Müllerian hormone (AMH) on number and size of follicles, oocyte quality, and its behavior on the follicular wave in Suri alpacas. The study was carried out at the Research and Production Center Chuquibambilla of Altiplano’s National University (Umachiri, Puno) between January and March 2016; and November to March, 2017. 54 female alpacas in reproductive age were used, separating them by quartiles according to the hormonal levels and comparing the extreme groups. The high concentration group of AMH had a greater number of follicles than the low concentration group (20.51 ± 2.76 vs. 11.58 ± 2.55, respectively). No significant statistical differences between the AMH groups and the size of the follicles were found. In addition, there was dependence in the high AMH concentration group with quantity and quality of the oocytes (p = 0.02). In the follicular wave, the AMH is positive associated with the growth of the dominant follicle (r2 = 0.52). Results reveal that plasma AMH can be used as a biomarker to select the best donors for superovulation protocols in Suri alpacas. Tesis

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior O bovine herpesvirus 1 (BoHV-1) é de fácil disseminação, difícil controle e está amplamente disseminado nos rebanhos bovinos no mundo. Essa infecção viral é responsável por prejuízos à pecuária principalmente quanto aos aspectos reprodutivos. Estudos prévios envolvendo infecção experimental com o BoHV-1 em um sistema de produção in vitro de embriões reportou que a presença do vírus afetou o desenvolvimento embrionário. Neste trabalho, foi avaliada a interferência do BoHV-1 sobre a maturação in vitro de complexos cumulus-ovócito (COCs) e ovócitos desnudados com células do cumulus em suspensão (DOs). Foram coletados sangue e os ovários de fêmeas bovinas sabidamente não vacinadas contra o BoHV-1. Após o teste de soroneutralização, os animais soropositivos foram classificados de acordo com a sua titulação de anticorpos. Os ovócitos recuperados após aspiração folicular foram divididos em COCs e DOs e avaliados através da sua capacidade de maturação nuclear associado a detecção viral pela microscopia confocal de varredura a laser. Dois experimentos foram realizados: (I) maturação após infecção in vitro de COCs e DOs de animais soronegativos; (II) maturação in vitro de COCs e DOs de animais soropositivos. No experimento I, diferença (P

La formación de óvulos y semillas es un proceso esencial para las plantas, ya que asegura su correcta reproducción, y para el ser humano, pues tiene una gran importancia económica al repercutir directamente en el rendimiento de muchos cultivos. La formación de óvulos se trata, además, de un proceso de desarrollo complejo en el que participan varias redes génicas y hormonales. Actualmente se conocen algunos de los genes clave implicados en el control de la iniciación y desarrollo de los óvulos en Arabidopsis thaliana. Entre los componentes genéticos más relevantes se encuentran AINTEGUMENTA (ANT) y CUP-SHAPE COTYLEDON1 y 2 (CUC1 y 2), así como algunos de los componentes de las vías de señalización de auxinas, brasinoesteroides y citoquininas. Curiosamente, a pesar de estar involucradas en multitud de procesos del desarrollo de las plantas, hasta ahora no ha habido evidencias que involucrasen a las giberelinas (GAs) y sus reguladores negativos de señalización, las proteínas DELLA, en el desarrollo de los óvulos. No obstante, recientemente se han aportado evidencias que apuntan a que estas hormonas no solo podrían estar involucradas en el desarrollo de los óvulos, sino también en la determinación de su número en Arabidopsis, posiblemente a través de CUC2. Este Trabajo Final de Máster tiene como objetivo general profundizar en el mecanismo molecular por el cual las GAs y las proteínas DELLA determinan la formación de los óvulos. Para ello se caracterizó la interacción genética entre las proteínas DELLA y CUC en la determinación del número de óvulos. Asimismo, también se realizaron estudios para identificar el posible cross-talk de las GAs con las auxinas y los brasinoesteroides en la iniciación de los óvulos. Finalmente, se proporcionan evidencias que apuntan a que las GAs, a través de las DELLA, podrían actuar como reguladores del número de óvulos no sólo en Arabidopsis, sino también en colza (Brassica napus), una planta de interés agronómico., The ovule and seed formation are essential processes for plants since they ensure their correct reproduction; and for the human being, since they have a great economic importance as they directly affect many crops production. Ovule formation is also a complex development process that involves several gene and hormonal networks. Currently, some of the key genes involved in the control of the ovule initiation and development in Arabidopsis thaliana are known. The most relevant genetic components are AINTEGUMENTA (ANT) and CUP-SHAPE COTYLEDON1 and 2 (CUC1 and 2), as well as some of the auxins, brassinosteroids, and cytokinins signaling pathways components. Interestingly, despite being involved in many processes of plant development, until now there has been no evidence that involved the gibberellins (GAs) and their negative signaling regulators, the DELLA proteins, in the development of the ovules. However, it has been recently provided evidence that suggests that these hormones could not only be involved in the development of the ovules but also in the determination of their number in Arabidopsis, possibly through CUC2. This Master's Final Project aims to deepen the molecular mechanism by which GAs and DELLA proteins determine the ovule formation. To this end, the genetic interaction between the DELLA and CUC proteins in the determination of the ovule number was characterized. Likewise, studies were also carried out to identify the possible cross-talk of the GAs with auxins and brassinosteroids in the ovule initiation. Finally, it is provided evidence that the GAs, through the DELLA proteins, could act as regulators of ovule number not only in Arabidopsis but also in rapeseed (Brassica napus), a plant of agronomic interest.

Las giberelinas (GAs) son hormonas vegetales que regulan multitud de procesos fisiológicos tales como germinación, elongación del tallo, fotomorfogénesis, crecimiento de la hoja y de la raíz, floración, desarrollo del polen y fructificación. Resultados preliminares obtenidos en nuestro laboratorio sugieren que las GAs también están implicadas en la iniciación de los óvulos determinando tanto el número como la forma de éstos. En las últimas décadas, se han identificado numerosos genes implicados en la determinación de la identidad de los óvulos y en su desarrollo. Sin embargo, se conoce muy poco sobre qué genes determinan el número de óvulos. Desde un punto de vista económico y agronómico, es importante determinar cuáles son estos factores ya que el número de óvulos determina en gran medida el número de semillas y por tanto afecta al rendimiento de los cultivos. Nuestro objetivo es comprender cómo las GAs regulan la iniciación y desarrollo de los óvulos de Arabidopsis, y cómo la vía de señalización de GAs interactúa con las vías de señalización de auxinas, citoquininas y brasinoesteroides que también participan en este proceso de desarrollo. El proyecto que se propone conlleva: a) la caracterización morfológica y molecular de los óvulos que se generan en mutantes de la ruta de señalización de GAs; b) la localización de la expresión de los componentes de la ruta (enzimas de biosíntesis, receptores GIDs y proteínas DELLA) en la placenta y los primordios de óvulo; c) el estudio de la interacción de la ruta de señalización de GAs con otras rutas hormonales y d) la identificación de proteínas dianas de los genes DELLA en los óvulos.

[EN] Gibberellins (GAs) regulate gynoecium patterning in Arabidopsis thaliana, via suppresion of DELLA protein function. Futhermore, GAs/DELLAs balance determinates ovule number in Arabidopsis., [ES] Las giberelinas (GAs) participan en la correcta diferenciación de los tejidos que conforman el gineceo de Arabidopsis thaliana, a través de la degradación de las proteínas DELLA. Además, el balance GAs/DELLAs está impilcado en la determinación del número de óvulos en el gineceo de Arabidopsis.

The aim of this research was to study the in vivo fertilization process of banana cultivars. The diploid hybrid (AA) 091087-01 was the male progenitor. Flower samples were checked for fertilization from the first to the twentieth day after pollination. The size of the diploid ovules increased gradually at the beginning of the seed formation process. On the other hand, in the AAA triploids (Cavendish subgroup), the not fertilized ovules were aborted. In the AAB triploids (Prata subgroup) some ovules were fertilized. The flowers of Grand Naine, Nanicão and 'Pacovan' cultivars presented necrosis in the distal part of the ovary on the first day after pollination. Necrosis can hinder pollen tube growth towards the ovule, which might be related to the low seed yield in 'Pacovan' cultivars and to the absence of seeds in the Cavendish subgroup cultivars. O objetivo do trabalho foi investigar o processo de fertilização in vivo em cultivares de bananeira. Utilizou-se como genitor masculino o híbrido diploide (AA) 091087-01. Do primeiro até o vigésimo dia após a polinização, foram retiradas amostras de flores para comprovação da fertilização. Verificou-se que os óvulos de diploides aumentaram de tamanho gradualmente, iniciando o processo de formação de sementes, enquanto, nos triploides AAA (subgrupo Cavendish), ocorreu o aborto dos óvulos não fertilizados. Nos triploides AAB (subgrupo Prata), alguns óvulos são fertilizados. As flores das cultivares 'Grande Naine', 'Nanicão' e 'Pacovan' apresentaram uma necrose na região distal do ovário, detectada desde o primeiro dia após a polinização, a qual pode se constituir em uma barreira para o crescimento do tubo polínico em direção ao óvulo, o que provavelmente pode estar relacionado à baixa produção de sementes em Pacovan e à ausência de sementes em cultivares do subgrupo Cavendish.

Durante la cópula, el folículo dominante de Vicugna pacos “Alpaca” no siempre es óptimo para la ovulación y fertilización, lo cual incrementa su deficiencia reproductiva. Los objetivos de este trabajo fueron madurar y fertilizar in vitro los ovocitos de alpacas. Los complejos cúmulos-ovocito (COC) colectados por aspiración folicular (n=158) fueron categorizados en Grado 1 (n=68, más de 4 capas de células de granulosa); Grado 2 (n=61, 2 ó 3 capas de células de granulosa); Grado 3 (n=4, capas de células disgregadas), y Grado 4 (n=25, sin células de granulosa y en total degeneración). La maduración in vitro se realizó en TCM-199 suplementado con suero fetal bovino (FCS) al 10%, hormona folículo estimulante (FSH) 0.02 UI/ml, piruvato de sodio (0.2 mM), gentamicina (50 µg/ml), 17β-estradiol (1 µg/ml), y en IVF suplementado con hCG (10 UI/ml) y 17β-estradiol (99 µg/ml). Se analizaron los ovocitos a las 26 horas de cultivo por la expansión de las células del cúmulus y/o la expulsión del primer cuerpo polar. La fertilización in vitro fue realizada en Fert-TALP suplementado con suero albúmina bovina (BSA), con los ovocitos madurados previamente, evaluados a partir de las 48 horas por la segmentación del zigoto. La tasa de maduración no mostró diferencia significativa (p>0.05) entre el número de ovocitos madurados en TCM-199 (61/85 = 71.76%) e IVF (31/44 = 70.45%) en relación a los COC de Grado 1 y 2. La tasa de fertilización no mostró diferencia significativa (p>0.05) en TCM-199 (13/61= 21.31%) e IVF (6/28 = 21.43%). El sistema del cultivo in vitro de ovocitos de alpaca en IVF se puede emplear como herramienta biotecnológica para el manejo reproductivo ya que permite conseguir ovocitos maduros y fertilizados potencialmente viables.

Con la finalidad de determinar la proporción de óvulos y semillas abortadas, y caracterizar las anormalidades morfoanatómicas presentes en esas estructuras de la caraota (Phaseolus vulgaris L.), se sembraron los cultivares Tacarigua y Colombiana en las localidades de Sanare, estado Lara, y Montalbán, estado Carabobo, Venezuela, a salidas de lluvias, entre set 2003 y ene 2004, y en época seca, ene-abr 2004, respectivamente. Se tomaron flores y frutos ubicados entre el cuarto y sexto nudo del tallo principal, de 10 plantas muestreadas al azar. Se fijaron en formaldehido-ácido acético-etanol 70% (FAA) para su procesamiento y obtención de láminas permanentes y semipermanentes. Se evaluó el número de óvulos/flor. En las vainas se cuantificó el número de óvulos abortados, de semillas totales, normales, arrugadas y no desarrolladas (abortadas). Las semillas normales y arrugadas fueron separadas en cubierta seminal y embrión para observaciones bajo el microscopio. Se encontró mayor número de óvulos en cv Tacarigua y localidad Montalbán, mientras que el número de semillas también fue mayor en cv Tacarigua, pero en Sanare. El número de óvulos abortados fue mayor al de semillas no desarrolladas. Estas últimas no presentaron embrión o éste era deforme. En semillas arrugadas las células de Malpighi, de la cubierta seminal, presentaron variación en longitud y las células parenquimáticas adyacentes mostraron colapso y hundimientos en la superficie. La longitud del eje embrionario pareciera ser un carácter genético, pues se mantiene sin diferencias ante las condiciones climáticas de las localidades. In order to establish the proportion of aborted black bean ovules and seeds, and to determine and characterize abnormalities in those structures, cultivars Tacarigua and Colombiana were sowed in the localities of Sanare, Lara state and Montalbán, Carabobo state, Venezuela, at the end of the rainy season (Sep 2003 to Jan 2004) and during the dry season (Jan-Apr 2004), respectively. Flowers and fruits were sampled from nodes 4 to 6 of ten plants at random. They were fixed in formaldehyde-acetic acid-ethanol 70% (FAA) and processed for permanent and semi-permanent slides. The number of ovules/flower was evaluated. In pods, the numbers of total, normal, rough and non-developed seeds (aborted seeds) as well as empty spaces (aborted ovules) were quantified. Normal and rough seeds were separated into seminal cover and embryo for observation under the microscope. The highest number of ovules was found in cv Tacarigua and in the locality of Montalban, but the number of seeds was higher in Sanare than in Montalban. The number of aborted ovules was higher than the number of non-developed seeds, which might be related to prefertilization abortion. Non-developed seeds did not present embryos or the latter were deformed. In the rough seed coat, Malpighi cells presented variations in length and the parenquimatic cells showed collapse that caused sinking of the surface. The length of the embryo axis appears to be a genetic trait as it remains unchanged with the different local climatic conditions. Com a finalidade de determinar a proporção de óvulos e sementes abortadas, e caracterizar as anormalidades morfoanatômicas presentes nessas estruturas do feijão (Phaseolus vulgaris L.), plantaram-se os cultivares Tacarigua e Colombiana nas localidades de Sanare, estado Lara, e Montalbán, estado Carabobo, Venezuela, após a temporada de chuvas, entre set 2003 e janeiro 2004, e em época seca, jan-abr 2004, respectivamente. Tomaram-se flores e frutos localizados entre o quarto e sexto nó do caule principal, de 10 plantas mostradas aleatoriamente. Fixaram-se em formaldehido-ácido acético-etanol 70% (FAA) para seu processamento e obtenção de lâminas permanentes e semi-permanentes. Avaliou-se o número de óvulos/flor. Nas vagens se quantificou o número de óvulos abortados, de sementes totais, normais, enrugadas e não desenvolvidas (abortadas). As sementes normais e enrugadas foram separadas em cobertura seminal e embrião para observações sob o microscópio. Encontrou-se maior número de óvulos em cv Tacarigua e localidade Montalbán, enquanto que o número de sementes também foi maior em cv Tacarigua, mas em Sanare. O número de óvulos abortados foi maior ao de sementes não desenvolvidas. Estas últimas não apresentaram embrião ou este era deforme. Em sementes enrugadas as células de Malpighi, da cobertura seminal, apresentaram variação no comprimento e as células parenquimáticas adjacentes mostraram colapso e afundamentos na superfície. O comprimento do eixo embrionário parecera ser um caráter genético, pois se mantêm sem diferenças ante as condições climáticas das localidades.

Hormone acquisition represents high cost, justifying the importance of studies searching for better results on inducing fish reproduction in laboratory conditions. This study analyzed the efficiency of HCG and GnRHa for gonad maturation and gamete production in jundiá, and compare the results to those using pituitary extract. Stage 1 (Males) - Four groups with eight males each received the following treatments: M1: Without hormone; M2: Pituitary extract 0.5 mg/kg; M3: HCG 200 UI/kg; M4: GnRHa+dopamine receptor antagonist 0.1 pellet/kg. Stage 2 (Females) – Thirty six females were separated in 5 groups: F1: Pituitary extract in two applications, 0.5 and 5.0 mg/kg; F2: HCG in two applications, 200 and 400 UI/kg; F3: HCG 400 UI/kg in a single dose; F4: HCG 1000 UI/kg in a single dose; F5: GnRHa+dopamine receptor antagonist 1 pellet/kg. The pituitary extract increased significantly the volume of semen and was more efficient in the final gonad maturation and ovulation, stimulating a higher number of females. The pituitary extract is efficient for the induction of jundia males and females during reproduction procedures, corroborating preview information. HCG does not induce jundiá breeders with doses employed in this study and GnRHa is not suitible to induce jundia breeders under dose recommended by the manufacturer to other tropical species. Este trabalho foi realizado com o objetivo de avaliar parâmetros reprodutivos de machos e fêmeas de jundiá adultos após a aplicação do HCG (gonadotrofina coriônica humana) e do GnRHa (hormônio liberador do hormônio gonadotrópico) e compará-los àqueles obtidos quando usado o extrato hipofisário da carpa comum. Etapa 1 (Machos) - quatro grupos, com oito machos cada, receberam os seguintes tratamentos: M1: sem hormônio; M2: extrato hipofisário 0,5 mg kg-1; M3: HCG 200 UI kg-1; M4: GnRHa+inibidor dopaminergético 0,1 glóbulo(Ovopel®) kg-1. Etapa 2 (fêmeas) – 36 fêmeas foram divididas em cinco grupos: F1: extrato hipofisário em duas aplicações, 0,5 e 5,0 mg kg-1; F2: HCG em duas aplicações, 200 e 400 UI kg-1; F3: HCG 400 UI kg-1 em dose única; F4: HCG 1000 UI kg-1 em dose única; F5: GnRHa+inibidor dopaminergético 1 glóbulo(Ovopel®) kg-1. O uso do extrato hipofisário da carpa comum aumentou significativamente o volume de sêmen liberado e estimulou maior quantidade de fêmeas à liberar óvulos. O HCG e o GnRHa não apresentaram resultados positivos no tocante à reprodução induzida do jundiá, nas doses utilizadas neste estudo.

Este artigo discute as "novas" tecnologias reprodutivas. Através da interrogação dessa adjetivação, são analisadas estratégias e contradições que mantêm como novo esse conjunto de técnicas e experiências médicas iniciadas há mais de duas décadas e que encontraram ampla difusão no mercado de serviço médicos. A presença, na mídia, da temática dos bebês de proveta e, sobretudo, de seus desdobramentos em termos da intervenção sobre células germinativas e sobre embriões humanos, ajuda a conferir o caráter de permanente novidade a tudo o que cerca as tecnologias reprodutivas e as intervenções genéticas por ela possibilitadas. Apesar de, sem dúvida, encontrarmo-nos diante de um processo aberto e em plena inovação, os efeitos sociais e simbólicos no plano da maternidade, paternidade e filiação são ainda pouco sentidos e discutidos. Para ilustrar tais contradições é focalizado o caso da doação de óvulos. Este evidencia a necessidade de serem buscadas novas perspectivas em termos do controle social da difusão das tecnologias reprodutivas entre nós. This article discusses the so-called "new" reproductive technologies. The author analyzes and challenges this adjective, since for over two decades this group of medical techniques and experiments has been widely disseminated in the medical market. The media's coverage of test tube babies, and especially developments in intervention on human germ cells and embryos, help challenge the supposed permanent novelty of everything surrounding reproductive technologies and genetic interventions. Society is doubtless experiencing an open process in full innovation, but the social and symbolic effects on planning maternity, paternity, and filiation are still not well perceived or discussed. To illustrate such contradictions, the article focuses on the case of oocyte donation, highlighting the need for new perspectives in terms of social control over the dissemination of reproductive technologies.

Este artigo discute as "novas" tecnologias reprodutivas. Através da interrogação dessa adjetivação, são analisadas estratégias e contradições que mantêm como novo esse conjunto de técnicas e experiências médicas iniciadas há mais de duas décadas e que encontraram ampla difusão no mercado de serviço médicos. A presença, na mídia, da temática dos bebês de proveta e, sobretudo, de seus desdobramentos em termos da intervenção sobre células germinativas e sobre embriões humanos, ajuda a conferir o caráter de permanente novidade a tudo o que cerca as tecnologias reprodutivas e as intervenções genéticas por ela possibilitadas. Apesar de, sem dúvida, encontrarmo-nos diante de um processo aberto e em plena inovação, os efeitos sociais e simbólicos no plano da maternidade, paternidade e filiação são ainda pouco sentidos e discutidos. Para ilustrar tais contradições é focalizado o caso da doação de óvulos. Este evidencia a necessidade de serem buscadas novas perspectivas em termos do controle social da difusão das tecnologias reprodutivas entre nós.