Search

The identification of mutations affecting multiple births in sheep is critical for the efficacy of genetic breeding studies. Before carrying out breeding studies with marker-assisted selection (MAS), it is necessary to identify major or potential novel mutations and determine their effects at the level of the breed. The aim of this study was to investigate the FecXI (Inverdale) mutation in the Awassi sheep breed using the PCR-RFLP technique. The study used blood samples from 50 ewes collected from a pure breeding farm in the Adiyaman province of Turkey. To isolate genomic DNA from blood, a commercial isolation kit was utilized. The 154 base pair area of the BMP15 gene where the mutation was located was amplified by PCR, and the FecX mutation was analyzed in all PCR products using the PCR-RFLP technique. The FecXI mutation was not found in the Awassi sheep tested using PCR-RFLP. It is recommended that the major and recently found novel mutations with multiple births be investigated by different molecular methods in the Awassi sheep breed., Koyunlarda çoklu doğumu etkileyen mutasyonların tanımlanması genetik ıslah çalışmalarının etkinliği açısından oldukça önemlidir. Markör destekli seleksiyon (MAS) ile ıslah çalışmalarının yapılabilmesi için öncelikli olarak majör veya olası yeni mutasyonların tanımlanması ve ırk düzeyinde etkisinin ortaya konması gerekmektedir. Bu çalışmada İvesi koyun ırkında FecXI (Inverdale) mutasyonunun PCR-RFLP yöntemi ile araştırılması amaçlanmıştır. Çalışmanın materyalini, Adıyaman ilinde saf yetiştiriciliği yapılan bir işletmeden alınan 50 baş İvesi koyun ırkına ait kan örnekleri oluşturmuştur. Kandan genomik DNA’nın elde edilmesinde ticari izolasyon kiti kullanılmıştır. Mutasyonun bulunduğu BMP15 geninin 154 baz çiftlik bölgesi PCR ile çoğaltılmış ve sonrasında tüm PCR ürünlerinde FecXI mutasyonu PCR-RFLP yöntemi ile araştırılmıştır. PCR-RFLP sonuçları, incelenen İvesi koyunlarının FecXI mutasyonunu taşımadığını göstermiştir. İvesi koyun ırkında çoklu doğum ile ilişkili majör ve tanımlanan yeni mutasyonların farklı moleküler yöntemler ile araştırılması önerilmektedir.

Dünyada ve Türkiye'de koyun ve koyun ürünleri ekonomik bakımdan büyük değer taşır.Bu nedenle koyun yetiştiriciliğinde hayvan ıslahının temel ilkesi olan hayvan başına verim düzeyinin yükseltilmesi amaçlanır. Damızlığa ayrılan hayvanlar arasında üstün verimli hayvan oranının fazla olması döl veriminin yüksek olması ile mümkündür. Dünya genelinde bulunan koyun populasyonlarında 1980 yılından itibaren dölverimi ile ilişkili major genlerin kalıtım özellikleri ve DNA testleri uygulanarak yapılan çalışmalarda, major genlerin döl verimi performansını önemli ölçüde artırma potansiyeline sahip olduğu görülmüştür.Yapılan çalışmalarda BMPR-IB, BMP-15 ve GDF-9 genlerinde bulunan mutasyonların koyunlarda ovulasyon oranını artırarak döl verimi üzerinde etkili olduğu gösterilmiştir.Özellikle 6. kromozom üzerindeki BMPR-IB geninde bulunan ve Booroola Merinosunda FecB allelinin oluşmasına yol açan mutasyonun belirlenmesi ile ebeveyn kayıtlarına ihtiyaç duyulmadan %100 doğru sonuç veren DNA testinin geliştirilmiş olması bu mutasyonun diğer ırklarda da araştırılmasına olanak sağlamıştır.Çoklu doğum özelliği olan ve Türkiye'de yetiştirilen Sakız koyun BMPR-IB genindeki Fec B allelinin PCR-RFLP yardımıyla aranmasının amaçlandığı bu çalışmada Türkiye'de çeşitli yerlerde (Bandırma, İzmir-Çeşme ve Urla, Çanakkale-Ayvacık ) yetiştirilen 388 adet Sakız ve 18 adet Sakız-Kıvırcık melezi koyundan toplam 406 adet kan örneği EDTA'lı tüplere alınmıştır. Fenol/kloroform yöntemi ile DNA izolasyonu yapılan örneklerden Polimeraz Zincir Reaksiyonu (Polymerase Chain Reaction: PCR) yöntemiyle Test F2 veTest R15 primerleri kullanılarak DNA amplifikasyonları gerçekleştirilmiştir. Agaroz jelelektroforezi kullanılarak görüntülenen PCR ürünlerine daha sonra Ava II restriksiyon enzimiile kesim yapılmıştır. Sonuç olarak incelenen 406 baş koyunda BMPR-IB geninde FecB alleli belirlenememiştir. Both worldwide and in Turkey sheep breeding and sheep products are of great economicvalue. For this reason the main principle in sheep breeding is to increase efficiency rate persheep. An increase in among the sheep breeds for breeding is closely related to the litter size.Research conducted since 1980 in relation to inheritance patterns and DNA testing of majorgenes for prolificacy has shown that major genes have the potential to significantly increasethe reproductive performance of sheep flocks throughout the world. Mutations that increaseovulation rate have been discovered in the BMPR-1B, BMP-15 and GDF-9 genes. Thediscovery of the Fec B allele in BMPR-IB gene on sheep chromosome 6 of the BooroolaMerino enabled a DNA test to be developed that is 100% accurate and requires no parentalinformation. The availability of the new accurate test without the need for parentalinformation has provided to test this mutation in other sheep breeds.In this study, the availability of previously identified Fec B allele in BMPR-IB geneinfluencing prolificacy is investigated in the highly prolific Chios sheep breed in Turkey byPCR-PFLP. A total of 406 sheep blood samples, 388 samples from the different Chios sheeppopulations (Bandırma, İzmir-Çeşme and Urla, Çanakkale-Ayvacık) and 18 samples ofChios X Kivircik sheep from Yenice, were collected in EDTA containing tubes. The DNA swere extracted by standard phenol/chloroform method and amplified by Polymerase ChainReaction (PCR) using the appropriate primers Test F2 and Test R15. The PCR products wereimaged using agarose gel electrophoresis. None of the 406 sheep carried the Fec B allele ofBMPR-IB gene. Ayvacık Tarım İlçe Müdürlüğü