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Submitted by ROBERTO PAULO CORREIA DE ARAÚJO (ppgorgsistem@ufba.br) on 2017-06-19T17:52:23Z No. of bitstreams: 1 16_v.12_3.pdf: 358836 bytes, checksum: c9572f97d8a7d66dde5c01948f760bd0 (MD5) Made available in DSpace on 2017-06-19T17:52:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 16_v.12_3.pdf: 358836 bytes, checksum: c9572f97d8a7d66dde5c01948f760bd0 (MD5) Previous issue date: 2013-09 Lesões traumáticas ou degenerativas do tecido cartilaginoso, na maioria das vezes, acarretam na perda tecidual com comprometimento funcional e, às vezes, estético. Tendo em vista que este tecido apresenta baixa capacidade regenerativa, sua reparação é finalizada com formação de tecido conjuntivo fibroso. Na tentativa de superar estes problemas, os pesquisadores da área da bioengenharia tecidual têm desenvolvido e aperfeiçoado diferentes técnicas regenerativas e biomateriais com a finalidade de regenerar este tecido e, desta forma, reabilitar os indivíduos acometidos. Assim sendo, os polímeros têm sido amplamente utilizados, pois apresentam vantagens como biocompatibilidade, flexibilidade, processabilidade, biodegradação, e baixo custo de fabricação em relação aos demais biomateriais. Ainda, podem ser fabricados em uma variedade de formatos e formas de apresentação como arcabouços, filmes, fibras, blendas, géis, dentre outros. Por isto, estes biomateriais têm sido avaliados em diferentes experimentos in vitro e in vivo e demonstrado resultados promissores para a aplicação clínica. Neste contexto, o presente trabalho tem como objetivo apresentar os principais resultados das pesquisas com a utilização dos polímeros como biomateriais para a regeneração do tecido cartilaginoso. Salvador

Made available in DSpace on 2015-06-17T19:34:04Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-28. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:47:30Z : No. of bitstreams: 1 000829257.pdf: 896180 bytes, checksum: 6b53f81e5fc9d348c920f0f5cbeffc57 (MD5) O objetivo deste estudo foi avaliar a resposta tecidual ao implante de tubos de polietileno preenchidos com pasta triantibiótica (PTA) composta de ciprofloxacina, minociclina e metronidazol, veiculada com propilenoglicol e polietilenoglicol (macrogol), em tecido subcutâneo de ratos e, caracterizar, histologicamente, os tecidos neoformados pós-procedimento endodôntico regenerativo, empregando o coágulo ou o coágulo suplementado com plasma rico em plaquetas (PRP), aspirado de medula óssea (AMO), ou a mistura PRP/BMA, pós-desinfecção com PTA. Estudo para avaliar a biocompatibilidade da pasta: Trinta ratos receberam 2 implantes individuais de tubos de polietileno preenchidos com PTA ou pasta de hidróxido de cálcio (PHC) e um outro tubo vazio como controle. Trinta ratos adicionais receberam tubos de polietileno contendo os veículos da pasta propilenoglicol e macrogol e um procedimento somente de incisão, sem implante de tubo (Sham). Após 7, 15, 30, 60, e 90 dias, 12 animais foram sacrificados, e os tubos foram removidos e processados histologicamente pela técnica do glicolmetacrilato e corados com hematoxilina e eosina. Os scores variaram de 0 a 3, dependendo do teor de células inflamatórias, a cápsula fibrosa foi considerada fina ou espessa, e a necrose e a calcificação foram registradas como presentes ou ausentes. Os resultados foram analisados pelo teste de Kruskal-Wallis. Ambos os materiais induziram reações moderadas aos 7 e 15 dias sendo similares ao grupo controle (p>0.05) e reduziram para grau leve a partir de 30 dias (p>0.05). Os veículos não interferiram na resposta da pasta. A pasta triantibiótica assim com seus respectivos veículos foram biocompatíveis em todos os períodos experimentais. Estudo para análise histológica dos tecidos neoformados com diferentes estratégias de engenharia tecidual: 20 dentes... This study aimed to evaluate the tissue response to the implantation of polyethylene tubes filled with a triantibiotic paste (TAP) composed of ciprofloxacin, metronidazole and minocycline conveyed with propylene glycol and polyethylene glycol (macrogol) in subcutaneous tissue of rats and characterize histologically the newly formed tissues post regenerative endodontic procedure employing the blood clot (BC) or BC supplemented with platelet-rich plasma (PRP), bone marrow aspirate (BMA) or a mixture of PRP/ BMA, post-disinfection with TAP. Study to evaluate TAP biocompatibility: Thirty rats received two individual implants of polyethylene tubes filled with TAP or calcium hydroxide paste (CHP) and another empty tube as a control. Thirty other rats received additional polyethylene tubes implants containing the paste vehicles (propylene glycol and macrogol) and an incision procedure (Sham group). After 7, 15, 30, 60, and 90 days, 12 animals were killed, and the tubes were removed and processed for histological examination. The scores ranged from 0 to 3 depending on content of inflammatory cells, the fibrous capsule was considered thin or thick, and necrosis and calcification were recorded as present or absent. The results were analyzed using the Kruskal-Wallis test. Both materials induced moderate reactions at 7 and 15 days which was similar to the control group (p> 0.05) and reduced to mild after 30 days (p> 0.05). The vehicles did not affect the tissue response to the paste. The TAP and their respective vehicles were biocompatible in all experimental periods. Study to histologically evaluate newly formed tissues after regenerative treatment: 20 teeth (40 roots), from 2 Beagle dogs, had their root canals exposed to the oral environment for 90 days to induce apical periodontitis. The canals were prepared until the apical barrier with Protaper...

Orientadores: Cecília Amélia de Carvalho Zavaglia, Antonio Celso Fonseca de Arruda Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Mecânica Resumo: A variedade de sítios anatômicos e diferentes propriedades mecânicas são essenciais para o êxito em cirurgias de reconstrução óssea, com isso tratamentos envolvendo fraturas complexas, perda óssea e próteses são beneficiadas com o uso dos biomateriais. Com o presente estudo, buscou-se uma proposta original no uso de um biomaterial compósito para implantes na região da mandíbula, a singularidade deste dispositivo é a estrutura física do material, que é composto por um núcleo denso em uma matriz porosa. As influências das estruturas e dos materiais utilizados foram analisadas por caracterizações físicas, químicas e as atividades celulares em ensaios in vitro, analisando o comportamento dessas em condições similares ao ambiente de implantação o que permitiu qualificar este biomaterial. Para tanto, foram sintetizados reagentes primários para a síntese de fosfato tricálcico (?-TCP), que ao ser hidrolisado resultou em whiskers de hidroxiapatita. As cerâmicas foram caracterizadas pelas análises de difração de raios X (DRX), fluorescência de raios X (FRX), microscopia eletrônica de varredura (MEV) e ensaio de citotoxicidade. As diversas composições poliméricas e compósitas foram analisadas utilizando os resultados obtidos pelos ensaios de ângulo de contato, calorimetria exploratória diferencial (DSC), microscópio de força atômica (MFA), microscopia óptica com luz polarizada (MO), ensaio mecânico de tração e ensaios in vitro com células U20S. Os suportes tridimensionais passaram por análises como de: ensaio mecânico de compressão e ensaios in vitro com células tronco mesenquimais. Os estudos foram realizados para a verificação do potencial de aplicação clínica desse material na engenharia tecidual óssea. As amostras que se apresentaram mais promissoras foram as de composições poli (?-caprolactona) / ácido oléico/ hidroxiapatita e poli caprolactona/ ácido oléico. Resistência mecânica, hidrofilicidade, rugosidade, cristalinidade, espraiamento celular e osteoindução foram os critérios utilizados neste trabalho. Os resultados obtidos demostraram-se promissores e irão incentivar pesquisas futuras envolvendo estes materiais Abstract: The variety of anatomical sites and different mechanical properties are essential to the success of surgery bone reconstruction. Treatments involving this complex fractures, bone loss and prosthetics are benefited with the use of biomaterials. In the present study, we sought to an original use of a composite biomaterial for implants in the jaw area; the uniqueness of this device is the physical structure of the material, which is composed of a dense core in a porous matrix. The influences of structures and materials were analyzed by characterizing the physical, chemical and cellular activities in in vitro assays, analyzing the behavior of those in similar conditions to the deployment environment which would allow qualifying this biomaterial. Therefore, primers were synthesized reagents for the synthesis of tricalcium phosphate (?-TCP), which when hydrolyzed resulted in hydroxyapatite whiskers. The ceramics were characterized by analysis of X-ray diffraction (XRD), X-ray fluorescence (XRF), scanning electron microscopy (SEM) and cytotoxicity assay. The various compositions were analyzed using the results obtained by contact angle tests, differential scanning calorimetry (DSC), atomic force microscope (AFM); optical microscopy with polarized light (OM), mechanical tests and in vitro assays with cells U20S. The scaffolds have undergone analyzes as: mechanical compression test and in vitro assays with mesenchymal stem cells. Studies were conducted to verify the potential clinical application of this material in bone tissue engineering. Because the analysis of the results of the characterizations, the samples which were the most promising compositions of poly (?-caprolactone) / oleic acid and poly(?- caprolactone)/ oleic acid/ hydroxyapatite. Mechanical strength, hydrophilicity, roughness, crystallinity, cell spreading and osteoinduction were the criteria used in this work. The results showed to be promising and will encourage future research involving these materials Doutorado Materiais e Processos de Fabricação Doutora em Engenharia Mecânica

As interações célula-célula e célula-material são identificadas como fatoreschave para o controle da diferenciação celular e produção da matriz extracelular (MEC). As células-tronco, tanto in vivo como in vitro, respondem aos sinais biológicos que estas recebem do microambiente circundante. Em resposta a estes estímulos, as células podem secretar diversos fatores para modular o microambiente e ativar células progenitoras. Esta indução leva ao aumento da expressão de proteínas da MEC que estão associadas com a adesão e proliferação celular, bem como com a mineralização da matriz. A partir da hipótese de que nanoestruturas influenciam na sinalização das células-tronco, buscou-se a fabricação de um arcabouço de poli(hidroxibutirato) com incorporação de hidroxiapatita (HAp) para mimetizar a matriz extracelular óssea. Usando a técnica de eletrofiação, foi possível a fabricação de arcabouços micro e nanoestruturados. A caracterização estrutural destes arcabouços e a avaliação de viabilidade, adesão e proliferação celular demostraram que os arcabouços apresentam biocompatibilidade. Os resultados indicaram que os arcabouços contendo HAp produziram uma matriz mineralizada, indicativo de diferenciação das células-tronco mesenquimais em linhagem osteogênica. Assim sendo, os arcabouços demonstram ter uma aplicabilidade na regeneração óssea em locais que não são sujeitos a tensões excessivas. The cell-cell and material-cell interactions are identified as key factors to cellular differentiation control and extracellular matrix production (ECM). The stem cells, in vivo and in vitro, respond to biological signals recived by microenvironment surrounding. Through this stimulation cells can secrete many factors to modulate the microenvironment and activate progenitor cells. This induction enhance the ECM proteins expression that are associated to cellular adhesion and proliferation as well as matrix mineralization. Based on hypothesis that nanostructures influence on stem cell signalization, was sought the scaffold fabrication of poly(hydroxybutirate) with hydroxyapatite (HAp) incorporation to mimic a bone extracellular matrix. Through eletrospinning technique was possible fabricate micro and nanostructured scaffolds. The structural scaffolds characterization and viability, adhesion and cellular proliferation evaluation, demonstrated that scaffolds exihibit biocompatibility. Results showed that scaffold containing HAp produced a mineralized matrix indicating a potential mesenquimal stem cells differentiation in osteogenic lineage. In this pathway, scaffolds demonstrated have bone regeneration applicability in sites wich do not receive excessive loads.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e do Desenvolvimento, Florianópolis, 2013. As células tronco mesenquimais (CTM) exibem ampla plasticidade e rápida expansão in vitro, podendo ser isoladas e manipuladas de modo reprodutível e com poucos problemas éticos. Dentre os diversos tipos de CTM encontram-se as CTM da derme (CTMd), as quais demonstram capacidade para agir na regeneração de tecidos lesionados. Atualmente, estudos visando o desenvolvimento de estratégias para o reparo de grandes lesões de pele vêm sendo realizados. Nesse sentido a Engenharia de Tecidos apresenta matrizes de regeneração dérmica (MRD), utilizadas na clínica cirúrgica, como a MRD Integra®. Além disto, estudos envolvendo fatores de crescimento (FC) vêm apresentando resultados satisfatórios na manutenção e diferenciação celular, neste contexto, o plasma rico em plaquetas (PRP) se mostra uma interessante fonte de FC a ser aplicada com biomateriais. O presente trabalho teve como objetivo avaliar o uso do PRP sobre as CTMd humana em ambientes de cultivo bidimensional e tridimensional, associados à MRD Integra®. Para isto, as CTMd foram cultivadas sob dois modelos: (1) bidimensional: CTMd associado ao PRP sobre o plástico; (2) CTMd associado ao PRP sobre o Integra®. Em cultivo bidimensional, os resultados mostraram que o PRP promove diminuição da viabilidade e número de células. Este resultado é coerente com o estímulo do PRP na diferenciação celular, aumentando a proporção de células com o fenótipo muscular liso/miofibroblástico (positiva para a-SMA). Concomitantemente a estes resultados, observou-se que as culturas tratadas com PRP apresentaram células grandes com morfologia alongada, diferentemente das culturas controle, que apresentavam células menores com morfologia arredondada. Além disso, as CTMd tratadas com PRP apresentaram maior depósito de colágeno tipo I. Em modelo tridimensional, o PRP promoveu diminuição da viabilidade celular, assim como estimulou a diferenciação para células positivas para a-SMA. As análises de MEV demonstraram que as células cultivadas com PRP apresentam maior adesão e adquiriram características fenotípicas semelhantes ao muscular liso/miofibroblástico. Em conclusão, estes resultados demonstram que a associação da MRD Integra® com as CTMd e o PRP constituem um microambiente efetivo para o crescimento, a viabilidade, a migração, a adesão e a diferenciação das CTMd, apresentando grande potencial para a Engenharia de Tecidos. Abstract : Mesenchymal stem cells (MSC) exhibit broad differentiation potential and high expansion capacity in vitro. They can be isolated and manipulated in a reproducible fashion and their use raises no ethical issues. The dermis is a remarkable source of MSCs (namely dermis derived MSC or dMSC), which are able to act in the regeneration of injured tissues. Currently, several efforts to develop strategies for the repair of large skin lesions have been made. In this scenario, the Tissue Engineering area aims to develop biomaterials that can be used in surgical procedures as dermal regeneration templates (DRT), such as Integra ®. Furthermore, studies involving growth factors (GF) have shown satisfactory results in cell differentiation and maintenance. The platelet-rich plasma (PRP) comprises an interesting source of GF to be applied in association with biomaterials. This study aimed to evaluate the use of PRP on human dMSC cultured on dimensional and three-dimensional environments. Human dMSC were grown under two models: (1) two-dimensional: cells grown on plastic in association with PRP and (2) associated with PRP on the DRT Integra ®. Under the two-dimensional culture system, there was PRP promoted a decrease in cell viability and the total cell number. This result is consistent with the stimulation of PRP on cell differentiation, increasing the proportion of cells with the phenotype smooth muscle / myofibroblastic (a-SMA-positive). Concurrently to these results, cells treated with PRP showed elongated morphology with large size. Contrariwise, cells in the control condition were smaller and with rounded morphology. Moreover, dMSC treated with PRP showed greater deposition of collagen type I. In the three-dimensional model, PRP caused a decrease in cell viability, and also stimulated the differentiation of dMSC into a-SMA positive. Scanning electronic microscopy analyzes demonstrated that cells cultured with PRP acquired greater adhesion and phenotypic characteristics similar to smooth muscle / myofibroblastic. In conclusion, these results demonstrate that the association of DRT Integra® with dMSC and PRP provides an effective microenvironment that supports growth, viability, migration, adhesion and differentiation of dMSC. This shows, therefore, show great potential for fure application in Tissue Engineering.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e do Desenvolvimento, Florianópolis, 2013. Novas estratégias para a regeneração da pele são necessárias a fim de proporcionar um tratamento eficaz para feridas cutâneas e doenças. Dentre estas possíveis estratégias estão o desenvolvimento de novos biomateriais, a realização de terapia celular e a identificação e aplicação de fatores envolvidos no reparo de tecidos. Avanços na área de engenharia tecidual têm possibilitado o desenvolvimento de biomateriais que se assemelham a arquitetura tecidual da pele, como os substitutos dérmicos, que permitem o recobrimento da lesão e facilitam a recolonização celular, auxiliando assim a regeneração do tecido dérmico. Além disso, as células-tronco mesenquimais (CTMs) têm sido descritas como uma fonte atrativa de células para a engenharia de tecidos, em razão da sua multipotencialidade e capacidade de liberação de moléculas ativas importantes para o reparo tecidual. Tendo em vista estes aspectos, o presente trabalho busca estabelecer e avaliar um novo método de tratamento de lesões de pele, tendo como base a associação das CTMs derivadas da pele humana com substitutos dérmicos comerciais, utilizados atualmente em abordagens clínicas. Para isso, primeiramente, CTMs da derme humana (dCTMs) foram isoladas e sua potencialidade e características morfológicas, fenotípicas e migratórias analisadas. Os resultados obtidos mostram que as dCTMs possuem características semelhantes às CTMs derivadas da medula óssea, como: morfologia fibroblastóide, alta capacidade proliferativa, perfil de expressão de marcadores de superfície e potencial de diferenciação para fenótipos mesodermais. Além disso, as células expressam marcadores de pluripotencialidade e de linhagens neurais e mesenquimais, sem indução específica, e possuem potencial de diferenciação para a linhagem epidermal. Ademais, as dCTMs mostram alta capacidade migratória in vitro. Após esta caracterização das dCTMs, foi avaliado o crescimento e a manutenção destas células em um sistema de cultura tridimensional com os substitutos dérmicos Integra® e Pelnac®. Os resultados mostram que ambos os substitutos dérmicos suportam igualmente a adesão, proliferação e migração das dCTMs, mantendo suas características fenotípicas, tais como o perfil de expressão de marcadores de superfície, de pluripotencialidade e de linhagens neurais e mesenquimais. Tendo em vista que a associação das dCTMs com os substitutos dérmicos mostrou-se eficiente, foi avaliado a seguir o potencial terapêutico destas células associadas ao substituto dérmico (SD) Integra® no reparo de lesões de pele em camundongos. Para isso, foi avaliada a inflamação, vascularização, depósito de matriz extracelular e a re-epitelização em lesões tratadas com dCTMs associadas ao SD e em lesões mantidas apenas com o SD (controle). Os resultados demonstram que o tratamento com dCTMs + SDs aumenta o tecido de granulação, o recrutamento de células inflamatórias (neutrófilos e macrófagos), a vascularização, o depósito de colágeno e a re-epitelização, acelerando assim o reparo tecidual. Além disso, o tratamento com dCTMs + SDs modula a expressão de diferentes genes relacionados com o reparo tecidual na área da lesão. Em conclusão, o presente estudo isolou uma população de CTMs da pele humana, denominada de CTMs dermais (dCTM), e mostrou uma eficiente associação destas células com os SDs, representando assim uma nova ferramenta terapêutica para a engenharia tecidual. Esta associação, quando avaliada no tratamento de lesões cutâneas de camundongos, mostrou-se promissora, resultando em um reparo tecidual mais eficiente. Abstract : New strategies for skin regeneration are needed in order to provide effective treatment for cutaneous wounds and diseases. Among these possible strategies are the development of new biomaterials, cell therapy and the identification and application of factors involved in tissue repair. Advances in tissue engineering have provided the development of biomaterials similar to the skin such as dermal substitute (DS), for covering the lesion and to facilitate cell recolonization thereby supporting dermal regeneration. In addition, mesenchymal stem cells (MSCs) have been suggested as an attractive source of cells for tissue engineering because of their multipotentiality and ability to release active molecules for tissue repair. Therefore, the present study established and evaluated a new method for treatment of skin lesions, based on the association of MSCs derived from human skin with commercial dermal substitutes currently used in clinical procedures. Thus, MSCs from human dermis (dCTMs) were isolated and their morphologic, phenotypic migratory characteristics and potentiality analyzed. The results showed that dCTMs have characteristics similar to MSCs derived from bone marrow, such as: fibroblast-like morphology, high proliferative capacity, profile of surface markers and differentiation potential for mesodermal phenotypes. In addition, these cells express pluripotent and mesenchymal and neural lineages markers, without specific induction. Moreover, the dMSCs display the potential for epidermal lineage and show high migratory capacity in vitro. It was also evaluated the growth and maintenance of these cells in three-dimensional (3D) culture system with the dermal substitutes Pelnac® and Integra® . The results showed that both dermal substitutes equally support the adhesion, spread and growth of human dMSCs in 3D-culture, maintaining MSC phenotype, expression of the pluripotent and neural and mesnchymal lineages markers. In view of these results, the therapeutic potential of these cells associated with the Integra DS in the repair of skin lesions in mice was evaluated in vivo. Inflammation, vascularization, deposition of matrix extracellular molecules and reepithelialization in skin lesions were analyzed. The results demonstrated that the treatment with dCTMs + DSs increases the granulation tissue, recruitment of inflammatory cells (neutrophils and macrophages), vascularization, collagen deposition and reepithelization, thus accelerating tissue repair. In addition, the treatment with dCTMs + DSs modulates the expression of different genes related to tissue repair. In conclusion, the present study isolated a population of MSCs from human skin, named dermal MSCs (dMSCs), and showed an efficient association of these cells with DSs, representing a new therapeutic tool for tissue engineering. This combination, when evaluated in the treatment of cutaneous lesions in mice, has shown to be promising, resulting in a more efficient tissue repair.

Orientação: Profa. Dra. Denise Pontes Raldi Dissertação (mestrado) - Universidade de Taubaté, Programa de Pós-graduação em Odontologia, Taubaté, 2013. Made available in DSpace on 2019-08-28T16:44:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ednaldo de Jesus Filho-.pdf: 2258960 bytes, checksum: 7e7a6d8aa397edfefba6c23e5ac8a2a8 (MD5) Previous issue date: 2013 Resumo: Hipótese do estudo: acredita-se que a presença de células tronco, matriz protéica e fatores de crescimento em um canal descontaminado pode estimular a continuidade da formação radicular em dentes com rizogênese incompleta que sofreram necrose por trauma ou pelo avanço de lesão de cárie. Objetivos: o objetivo deste estudo foi realizar uma revisão de literatura e avaliar a continuidade da rizogênese e regressão da lesão periapical em raízes de dentes necrosados, submetidos ao tratamento de revitalização pulpar. Método: foram tratadas cinco raízes de dentes permanentes com rizogênese incompleta e tecido pulpar necrosado. O canal radicular foi desinfectado por meio de irrigação com 20 ml hipoclorito de sódio a 2,5% e soro fisiológico, sem instrumentação das paredes dos canais. Estes foram preenchidos com pasta de hidróxido de cálcio associada ao paramonoclorofenol canforado e selados temporariamente. Na ausência de sintomatologia, os canais foram novamente acessados após três semanas. Os pacientes foram anestesiados com solução de cloridrato de mepivacaína 3% sem vasoconstrictor e, em seguida, uma lima endodôntica foi levada 2 mm além do comprimento de trabalho com o objetivo de se promover o sangramento nos tecidos periapicais. Uma camada de MTA branco foi colocada sobre o coágulo e o dente foi restaurado por definitivo. Resultados: ainda que não tenha ocorrido o fechamento radicular completo em nenhum dos casos avaliados, diferentes respostas foram encontradas nas raízes submetidas aos procedimentos de revitalização, desde a regressão da lesão periapical ocorrida em 04 das 05 raízes tratadas, até um aumento na espessura das paredes dentinárias radiculares e redução do espaço pulpar. Conclusão: considerando-se o tempo de controle realizado no presente estudo, concluiu-se que o protocolo de revitalização empregado foi eficaz com relação à remissão da sintomatologia, reparo periapical, aumento da espessura das paredes dentinárias e crescimento vertical das raízes com tecido pulpar necrosado e rizogênese incompleta. Abstract: Hypothesis of the study: it is assumed that the presence of stem cells, a suitable scaffold and growth factors in a disinfected root canal can stimulate the continuation of root formation in immature permanent teeth with pulp necrosis as result of caries or trauma. Objectives: the aim of this study was to conduct a literature review and evaluate the continuity of root formation and regression of apical periodontitis on immature permanent teeth with infected necrotic pulp tissue, undergoing to revitalization. Methods: five roots of permanent teeth with incomplete root formation and necrotic pulp tissue were treated. All canals were gently irrigated with copious amounts of 2,5% sodium hypochlorite solution. Mechanical instrumentation was minimal. The canals were filled with calcium hydroxide paste associated to paramonochlorophenol camphor. The access cavity was closed with a sterile cotton pellet and intermediate restorative material. After resolution of clinical signs and/or symptoms, under local anaesthesia, the tooth was isolated and access cavity was re-entered. Bleeding was induced into the canal space by irritating the periapical tissues using sterile stainless steel endodontic hand K-files. The coronal canal space of all teeth was carefully sealed with a thick mixture of mineral trioxide aggregate (MTA). The access cavity was sealed with a light-cured composite resin. Results: although there has been no complete root closure in all studied cases, different responses were found in roots subjected to revitalization procedures, since periapical lesion regression occurred in all treated cases, to an increased thickness of the root dentin and pulp space reduction observed in 04 of 05 treated roots. Conclusion: considering the time control used in this study, it was concluded that the protocol of revitalization was effective with respect to remission of symptoms, periapical repair, increased dentin thickness and vertical growth of the roots with necrotic pulp tissue and incomplete root formation.

PURPOSE: To evaluate the capacity of natural latex membrane to accelerate and improve the regeneration quality of the of rat sciatic nerves. METHODS: Forty male adult Wistar rats were used, anesthetized and operated to cut the sciatic nerve and receive an autograft or a conduit made with a membrane derived from natural latex (Hevea brasiliensis). Four or eight weeks after surgery, to investigate motor nerve recovery, we analyzed the neurological function by walking pattern (footprints analysis and computerized treadmill), electrophysiological evaluation and histological analysis of regenerated nerve (autologous nerve graft or tissue cables between the nerve stumps), and anterior tibial and gastrocnemius muscles. RESULTS: All functional and morphological analysis showed that the rats transplanted with latex conduit had a better neurological recovery than those operated with autologous nerve: quality of footprints, performance on treadmill (p

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Odontologia, Florianópolis, 2010 Cirurgias para reconstrução de tecido mole que utilizam material autógeno aumentam a morbidade e o riscos de complicações com a segunda área cirúrgica. Como alternativa para eliminar esses inconvenientes, a engenharia tecidual busca encontrar um arcabouço ideal para carrear células e fatores de crescimento responsáveis pela criação de tecidos em ambiente in vitro. Dessa forma o objetivo deste estudo é analisar quatro membranas absorvíveis como potencial arcabouço para a engenharia de tecidos. Foram utilizados fibroblastos humanos gengivais provenientes de cultura primária. Quatro membranas foram utilizadas: Osseoguard®, Genderm®, ácido poli(ácido lactico-co-glicólico) (PLGA) e ácido poli(ácido lactico-co-glicólico) associado com hidroxiapatita (PLGA+HA). Testes de proliferação, análise da degradação através da microscopia eletrônica de varredura (MEV), teste de viabilidade celular (MTT) e análise do pH do meio de cultura foram os métodos utilizados para avaliar as membranas. Os índices de proliferação não foram estatisticamente significativos entre grupos, contudo todas as membranas possibilitaram a proliferação celular. A análise do MEV mostrou que as membranas com base polimérica (PLGA e PLGA + HA) apresentam características mais apropriadas a arcabouços para engenharia tecidual. Os níveis de viabilidade celular diminuíram e os níveis de pH foram similares para todos os grupos exceto o PLGA que se apresentou ácido. A membrana de PLGA + HA é a que apresenta melhores características biológicas e estruturais para funcionar como arcabouço para a engenharia de tecidos. Soft tissue reconstruction using autogenous material increases morbidity and risk of complications with the second surgical area, the donor site. As an alternative to eliminate these drawbacks, tissue engineering seeks to find an ideal scaffolds to wash cells and growth factors that are responsible for a tissue environment fabrication in vitro. Thus the aim of this study is to analyze four absorbable membranes as a potential scaffold for tissue engineering. Human gingival fibroblasts (HGF) from primary cell culture were used. Four types of bioabsorbable membranes were used as cell carrier: OsseoGuard®, Genderm®, poly (lactic-co-glycolic) acid (PLGA) and poly (lactic-co-glycolic) acid associated with hydroxyapatite (PLGA+HA). Proliferation assays, degradation analysis by scanning electron microscopy (SEM) cell viability assay (MTT) and pH analysis of the culture mediums were used to evaluate the membranes. The proliferation index was not statistically significant between groups, yet all the membranes allowed cell proliferation. The SEM analysis showed that the membranes based on polymers (PLGA and PLGA HA) have more appropriate scaffolds characteristics for tissue engineering. The level of cell viability decreased and the pH levels were similar for all groups except that PLGA. The PLGA+HA membrane has the best biological and structural functions as a scaffold for tissue engineering.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Odontologia, Florianópolis, 2010 O objetivo deste estudo foi avaliar histologicamente a influência de: dois enxertos ósseos bovinos, Orthogen (Baumer) e Bio-Oss®; dois polímeros compositos, PLGA (Boehringer Ingelheim) e PLGA+HA, (HA Genius-Baumer), osso autógeno e controle negativo de coágulo, relacionando-os a presença de tecido inflamatório, materiais de enxerto, osso neoformatado, tecidos conjuntivos e adiposos. Materiais e métodos: 21 coelhos da raça Nova Zelândia foram utilizados neste trabalho. Cada animal recebeu 6 enxertos sendo dois grupos de controle colocados no fêmur direito e esquerdo. Os coelhos sofreram eutanásia em 3 etapas nos 15, 30 e 60 dias pós-opreratórios. As amostras retiradas dos animais foram processadas para microscopia óptica e coradas pela técnica da hematoxilina e eosina (HE). A análise quantitativa foi feita em cortes nas lâminas seguindo o procedimento para análises estererológicas segundo os parâmetros estipulados por Mandarin-de-Lacerda (2003). Os resultados obtidos pela metodologia empregada indicaram que a regeneração óssea dos enxertos empregados foram superiores quando comparados ao coágulo. Conclusão: Todos os substitutos ósseos tiveram melhor resultado em relação ao controle negativo.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:30:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_marcus_cristian_muniz_conde.pdf: 3350332 bytes, checksum: a91e9eb1b05eba094cafdfee07a22a72 (MD5) Previous issue date: 2012-09-25 Physicochemical properties and biological applicability of materials to be used in Tissue Engineering (TE) have great interest in the development of innovations in biotechnology. In dentistry research incomes every day and clarify the possibility to implement therapies for regeneration of dental pulp in clinical practice in a short time period. Such translation will require the ability to build a pulp tissue that completely fills the root canal dentin and produce appropriate vascularization to perform the metabolic exchanges needed for human tissues. To do it, we need achieve some advances; standardization of techniques and materials, which produce completely safe results, is essential to do the translation from the lab assays to RCT in humans. Based on that, the aim of this study was to perform a systematic review of the literature to analyze the knowledge regarding the importance of the interface between stem cells and scaffolds. Thereafter, we identify some gaps of knowledge in this field, as well as the techniques that have been employed today with potential to establish the transition from laboratory research to clinical. Among the obtained results, we have detected that the scaffold s physical properties, although imperative in determining cellular behavior were, little exploited since the advent of pulp stem cells. So, we carried out a study to evaluate the influence of the pore size on the proliferation and differentiation of Dental Pulp Stem Cells (DPSCs) in vitro. In order to obtain two different pore sizes (150-250μm and 251-450μm), sodium chloride was sieved and used as the porogen-inducer. Tooth slices (1-mm thickness) were obtained from recently extracted third molars and after pulp tissue removal, scaffolds with both porogen inducer sizes were prepared using PLLA (Poly-L-lactic acid) inside the pulp chamber. DPSCs (1 x 105 cells) were seeded in the scaffolds with different porosities, in 24-well plates with specific medium. The cell proliferation was evaluated using the WST1 assay at 3, 7, 14 and 21 days intervals. Also, after 21 days of culture, the RNA of seeded cells was extracted using Trizol and RT-PCR technique was used to assess the differentiation of the DPSCs in odontoblasts, using putative odontoblast markers (DSPP, DMP1 and MEPE). RNA from fresh odontoblasts was used as a control. Cell proliferation rate was similar in both scaffolds except for the 14 days period, when the cells seeded in the scaffolds with larger porosities showed higher proliferation (p

Danos a nervos perif?ricos s?o formas comuns de les?es que podem causar perda de mobilidade e diminuir a qualidade de vida. Apesar dos avan?os no campo biom?dico, existem poucos casos em que h? recupera??o funcional completa de um nervo danificado. A aplica??o de pol?meros biodegrad?veis tais como PLGA, apresenta uma alternativa vi?vel no tratamento de les?es de nervos perif?ricos por possuir resist?ncia mec?nica, biocompatibilidade e degrada??o controlada. Uma matriz de PLGA deve apresentar poros na ordem de micr?metros e nan?metros, oferecendo a possibilidade de inclus?o de fatores de crescimento e possivelmente promovendo uma liberta??o constante destas estruturas biol?gicas. O objetivo desta pesquisa ? produzir matrizes porosas de PLGA. Isto foi realizado atrav?s da dissolu??o do pol?mero em clorof?rmio, seguida da adi??o de um composto porog?nico. Uma haste de tit?nio com 2mm de di?metro foi imersa na suspens?o obtida e quando retirada, foi seca em capela, obtendo uma camada de PLGA/agente porog?nico na superf?cie da haste. Na sequ?ncia, a haste foi imersa em uma solu??o de PLGA com clorof?rmio. Ap?s seca durante 2h em capela, as hastes de tit?nio foram submersas em ?gua deionizada durante 48h, durante as quais, a ?gua foi trocada a cada 8h, para remo??o do agente porog?nico. Ap?s este processo, as estruturas tubulares formadas s?o facilmente removidas das hastes. Finalmente, os tubos confeccionados foram divididos em grupos, e tratados com diferentes concentra??es de hidr?xido de s?dio, para cria??o de poros na ordem de nan?metros, sendo, subsequentemente, secos em forno a v?cuo durante 48h. As estruturas obtidas foram caracterizadas por XRD, FTIR, MEV e a degrada??o in vitro foi acompanhada por GPC. Peripheral nerve injury accident is a common type of lesion that can cause loss of mobility and decrease the quality of life. Despite advances in the biomedical area, there are few cases where there is complete functional recovery of a damaged nerve. The application of biodegradable polymers such as poly(lactide-co-glycolide) (PLGA), shows a viable alternative of treatment in peripheral nerves injuries for presenting mechanical strength, biocompatibility and controlled degradation, being also an excellent material for drug delivery. A PLGA scaffold should be porous with pore sizes on the order of micro-and nanometer, which offers the possibility to insert growth factors, promoting a constant release of these biological structures. The aim of this research is to produce porous scaffolds of PLGA. This was achieved by dissolving the polymer in chloroform, adding a porogenic compound. A titanium rod with 2mm in diameter was deeped in the suspension obtained and dried in a hood, obtaining a layer of PLGA / porogen agent on the surface of the rod. In sequence, the rod was immersed in a solution of PLGA with chloroform. After dried for 2 hours in a hood, the titanium rods were submerged in deionized water for 48 hours, during which the water was changed every 8 hours in order to remove the porogenic agent. After this process, the tubular structures formed were easily removed from the rods. Finally, the prepared tubes were divided into groups and treated with different concentrations of sodium hydroxide, to create pores in the order of nanometers, and subsequently vacuum dried for 48 hours. The structures obtained were characterized by XRD, FTIR, SEM and the in vitro degradation was monitored by GPC.

CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior A reconstrução de grandes segmentos ósseos continua a ser um problema clínico importante. Os impactos clínicos e econômicos de tratamentos de defeito ósseo são surpreendentes. As abordagens terapêuticas atuais incluem transplante de enxertos ou implantes de diferentes biomateriais sintéticos, mas nenhum deles revelou-se plenamente satisfatória. A Engenharia de Tecidos fornece uma alternativa promissora para a reparação de lesões no tecido ósseo provocada por traumas ou associadas ao envelhecimento, como a osteoporose. A proposta desta nova área da medicina regenerativa consiste em combinar células, matriz suporte e agentes bioativos para a regeneração de um novo tecido funcional. As estruturas porosas 3D são usadas como modelos para a semeadura celular temporária, migração, proliferação e diferenciação antes da regeneração do tecido biologicamente funcional ou da matriz extracelular natural. No campo da ortopedia, o uso de implantes bioabsorvíveis está se tornando mais frequente. Essas matrizes devem ser porosas, se assemelhar à MEC do tecido nativo, além de serem biocompatíveis e biodegradáveis. A quitosana, em associação à gelatina e condrotina, atende às necessidades básicas para a escolha do polímero constituinte da matriz. A decisão do tipo celular é particularmente importante no desenvolvimento da Engenharia de Tecidos. Células-tronco derivadas do tecido adiposo (ADSC) surgem como candidata ideal a essa técnica, uma vez que apresenta potencial de autorenovação e multilinhagem. Partindo desse princípio, o presente trabalho visou desenvolver e caracterizar matrizes 3D de quitosana, gelatina e condroitina e avaliar resposta in vitro e in vivo de osteogênese de ADSC nesses biomateriais. A matriz 3D neste estudo se apresentou altamente porosa, possuindo poros interconectados. Quando induzidas à osteogênese, tanto em cultivo 2D quando 3D, as ADSC passaram a expressar marcadores específicos de células osteogênicas. Em cultivo em matriz 3D, ADSC foram capazes de aderência e interconectividade celular, além de terem sua proliferação, viabilidade e osteogênese aumentadas, como demonstram os resultados dos ensaios de MTT, FA, dosagem de colágeno e colorações de estruturas mineralizadas. Através de análises dos implantes em sítio ectópico e em lesões de calvária de ratos in vivo foi possível demonstrar que a matriz 3D não induziu uma resposta inflamatória intensa e não afetou a função dos tecidos adjacentes ao implante. A matriz se mostrou biocompatível e biodegradável, além de permitir a angiogênese do implante. Quando colonizadas por ADSC, os implantes apresentaram uma angiogênse precoce, e uma osteogênese mais madura. Além disso, ADSC-EGFP foram visualizadas inseridas na MEC neoformada. Assim, matrizes 3D desenvolvidas no presente estudo se mostraram promissoras para engenharia de tecidos ósseo, sendo biocompatíveis, biodegradáveis e provendo um bom ambiente para a adesão e proliferação, angiogênese e osteogênese celular. A união dos dados obtidos por este trabalho nos permite vislumbrar a possibilidade de utilização da matriz 3D de quitosana, gelatina e condoitina como um potencial carreador para células-tronco mesenquimais na Engenharia de Tecido ósseo. Assim, nosso estudo abre uma perspectiva para sua aplicação clínica e para futuros estudos destinados à reconstrução tecidual The reconstruction of major bone segments remains a significant clinical problem. The clinical and economic impacts of the bone defect treatments are amazing. The currently available therapeutic approaches include transplant grafts or different synthetic biomaterials implants, but none has proved to be entirely satisfactory. Tissue Engineering provides a promising alternative for the repair of lesions in the bone tissue caused by trauma or associated with aging such as osteoporosis. The purpose of this new field of regenerative medicine is to combine cell, scaffold and bioactive agents for the regeneration of a new functional tissue. The 3D porous structures are used as models for the temporary cell seeding, migration, proliferation and differentiation of the tissue prior to regeneration or biologically functional natural extracellular matrix. In the field of orthopedics, the use of bioabsorbable implants is becoming more common. These arrays must be porous extracellular matrix (ECM), resemble the native tissue, and be biocompatible and biodegradable. Chitosan, in combination with gelatin and chondroitin, meets the basic needs for the choice of the constituent polymer matrix. The decision of the cell type is particularly important in the development of tissue engineering. Stem cells derived from adipose tissue (ADSC) appear to be an ideal candidate for this technique, since it presents the potential for self and multilinhage. Based on this principle, this study aimed to develop and characterize 3D matrices of chitosan, gelatin and chondroitin, and assessing response in vitro and in vivo of ADSC osteogenesis in these scaffolds. The 3D matrix of this study was highly porous, having interconnected pores. When osteogenesis is induced, in 2D and 3D culture, the ADSC began to express specific markers of osteogenic cells. In cultivation in 3D matrix, ADSC were capable of cell adhesion and interconnectivity, as well as having their proliferation, viability and increased osteogenesis, as demonstrated by the results of MTT assay, FA, measurement of collagen and staining of mineralized structures. Through analysis of the ectopic site implants and implants in rat calvarias lesions in vivo, it was possible to show that the 3D matrix did not induce a strong inflammatory response and did not affect the function of the implanted tissue. The matrix was shown to be biocompatible and biodegradable, and allows the implant angiogenesis. When colonized by ADSC, the implants had an early angiogenesis and a mature osteogenesis. Furthermore, ADSC-EGFP were inserted into the newly formed ECM and visualized. Thus, 3D matrices developed in this study showed promise for bone tissue engineering and it is biocompatible, biodegradable and provides a good environment for the cell attachment and proliferation, angiogenesis and osteogenesis. The union of the data obtained for this work allows us to glimpse the possibility of using the 3D matrix of chitosan, gelatin and chondroitin as a potential carrier for mesenchymal stem cells in bone tissue engineering. Thus, our study opens a perspective for clinical application and for future studies for the reconstruction of tissues.

PURPOSE: To evaluate the implant of human adipose derived stem cells (ADSC) delivered in hyaluronic acid gel (HA), injected in the subcutaneous of athymic mice. METHODS: Control implants -HA plus culture media was injected in the subcutaneous of the left sub scapular area of 12 athymic mice. ADSC implants: HA plus ADSC suspended in culture media was injected in the subcutaneous, at the contra lateral area, of the same animals. With eight weeks, animals were sacrificed and the recovered implants were processed for extraction of genomic DNA, and histological study by hematoxilin-eosin staining and immunufluorescence using anti human vimentin and anti von Willebrand factor antibodies. RESULTS: Controls: Not visualized at the injection site. An amorphous substance was observed in hematoxilin-eosin stained sections. Human vimentin and anti von Willebrand factor were not detected. No human DNA was detected. ADSC implants - A plug was visible at the site of injection. Fusiform cells were observed in sections stained by hematoxilin- eosin and both human vimentin and anti von Willebrand factor were detected by immunofluorescence. The presence of human DNA was confirmed. CONCLUSION: The delivery of human adipose derived stem cells in preparations of hyaluronic acid assured cells engraftment at the site of injection. OBJETIVO: Avaliar o implante de células tronco do tecido adiposo humano (CTTAH) em gel de ácido hialurônico (AH), injetados no tecido subcutâneo de camundongos atímicos. MÉTODOS: Implantes controle - HA com meio de cultura foram injetados no tecido subcutâneo da região infraescapular esquerda de 12 camundongos atímicos. Implantes de CTTAH: HA com CTTAH suspensas em meio de cultura foi injetado no subcutâneo da região contra lateral, dos mesmos animais. Com oito semanas, os animais foram sacrificados e os implantes recuperados foram processados para extração de DNA genômico, estudo histológico por coloração por hematoxilina eosina e imnuoflurescência utilizando anticorpos anti vimentina humana e anti fator de von Willebrand. RESULTADOS: Controles - implantes não visualizados no local da injeção. Uma substância amorfa foi observada nos cortes corados por hematoxilina eosina. Vimentina humana e fator anti von Willebrand não foram identificados. DNA humano não foi detectado. Implantes de CTTAH - Uma massa era visível no local da injeção. Células fusiformes foram observadas nos corte corados com hematoxilina eosina. Tanto vimentina humana quanto fator de von Willebrand foram identificados pela imunofluorescência. A presença de DNA humano foi confirmada. CONCLUSÃO: O implante de células tronco do tecido adiposo humano em veículo de ácido hialurônico gel assegurou a manutenção das células no local do implante.

OBJETIVO: Avaliar a descelularização com SDS como tratamento anticalcificante em pericárdio bovino fixado em glutaraldeído. MÉTODOS: Peças de 0,5 cm² foram implantadas em modelo subcutâneo de 18 ratos por até 90 dias. Foram formados quatro grupos: grupo GDA: pericárdio fixado em glutaraldeído 0,5% (GDA), grupo GDA-GL: pericárdio fixado em GDA + ácido glutâmico (GL) 0,2%, grupo D-GDA: pericárdio descelularizado (D) com SDS 0,1% e fixado em GDA e grupo D-GDA-GL: pericárdio descelularizado + GDA + ácido glutâmico 0,2%. Cada animal recebeu enxertos dos quatro grupos. Os explantes foram realizados com 45 e 90 dias. As avaliações foram: análise histológica com as colorações hematoxilina-eosina e alizarina-red, análise morfométrica e quantificação de cálcio por espectrometria de absorção atômica. RESULTADOS: O padrão de infiltrado inflamatório foi o mesmo nos quatro grupos, sendo mais intenso nos grupos GDA e GDA-GL aos 45 dias, ficando mais evidente aos 90 dias. O conteúdo de cálcio aos 45 dias foi de 32,52 ± 3,19 µg/ mg no grupo GDA; 22,12 ± 3,87 µg/mg no grupo GDA-GL; 1,06 ± 0,38 µg/mg no grupo D-GDA e 3,99 ± 5,78 µg/mg no grupo D-GDA-GL (P< 0,001). Aos 90 dias, foi de 65,91 ± 24,67 µg/mg no grupo GDA; 38,37 ± 13,79 µg/mg no grupo GDA-GL; 1,24 ± 0,99 µg/mg no grupo D-GDA e 30,54 ± 8,21 µg/mg no grupo D-GDA-GL (P< 0,001). O grupo D-GDA foi o único que não apresentou progressão da calcificação de 45 para 90 dias (P=0,314). CONCLUSÃO: A descelularização com SDS reduziu o processo inflamatório e inibiu a calcificação em pericárdio bovino implantado em modelo subcutâneo de ratos até 90 dias.

OBJETIVO: Avaliar a descelularização com SDS como tratamento anticalcificante em pericárdio bovino fixado em glutaraldeído. MÉTODOS: Peças de 0,5 cm² foram implantadas em modelo subcutâneo de 18 ratos por até 90 dias. Foram formados quatro grupos: grupo GDA: pericárdio fixado em glutaraldeído 0,5% (GDA), grupo GDA-GL: pericárdio fixado em GDA + ácido glutâmico (GL) 0,2%, grupo D-GDA: pericárdio descelularizado (D) com SDS 0,1% e fixado em GDA e grupo D-GDA-GL: pericárdio descelularizado + GDA + ácido glutâmico 0,2%. Cada animal recebeu enxertos dos quatro grupos. Os explantes foram realizados com 45 e 90 dias. As avaliações foram: análise histológica com as colorações hematoxilina-eosina e alizarina-red, análise morfométrica e quantificação de cálcio por espectrometria de absorção atômica. RESULTADOS: O padrão de infiltrado inflamatório foi o mesmo nos quatro grupos, sendo mais intenso nos grupos GDA e GDA-GL aos 45 dias, ficando mais evidente aos 90 dias. O conteúdo de cálcio aos 45 dias foi de 32,52 ± 3,19 µg/ mg no grupo GDA; 22,12 ± 3,87 µg/mg no grupo GDA-GL; 1,06 ± 0,38 µg/mg no grupo D-GDA e 3,99 ± 5,78 µg/mg no grupo D-GDA-GL (P< 0,001). Aos 90 dias, foi de 65,91 ± 24,67 µg/mg no grupo GDA; 38,37 ± 13,79 µg/mg no grupo GDA-GL; 1,24 ± 0,99 µg/mg no grupo D-GDA e 30,54 ± 8,21 µg/mg no grupo D-GDA-GL (P< 0,001). O grupo D-GDA foi o único que não apresentou progressão da calcificação de 45 para 90 dias (P=0,314). CONCLUSÃO: A descelularização com SDS reduziu o processo inflamatório e inibiu a calcificação em pericárdio bovino implantado em modelo subcutâneo de ratos até 90 dias. OBJECTIVE: The aim of study was to investigate the SDS-based decellularization process as an anticalcification method in glutaraldehyde-preserved bovine pericardium in subcutaneous rat model. METHODS: Pericardium samples with 0.5 cm² area were divide in four groups: group GDA: 0.5% glutaraldehydepreserved pericardium (GDA); group GDA-GL: GDA + 0.2% glutamic acid (GL); group D-GDA: decellularized (D) pericardium with 0.1% SDS + GDA and group D-GDA-GL: decellularized pericardium + GDA + 0.2% glutamic acid. After this samples were implanted in 18 rats in subcutaneous position till 90 days. Each animal received samples of the four groups. The explants were performed at 45 and 90 days. The explants were subjected to histology in glass slides stained with hematoxilin-eosin and alizarin red, morphometry evaluation and the calcium content was measured by flame atomic absorption spectrometry. RESULTS: The inflammatory infiltrate was the same in all groups, however more intense in GDA and GDA-GL groups in 45 days, increasing at 90 days. The calcium contents for 45 days were: 32.52 ± 3.19 µg/mg in GDA group; 22.12 ± 3.87 µg/ mg in GDA-GL group; 1.06 ± 0.38 µg/mg in D-GDA group and 3.99 ± 5.78 µg/mg in D-GDA-GL (P< 0.001). For 90 days were 65.91 ± 24.67 µg/mg in GDA group; 38.37 ± 13.79 µg/mg in GDA-GL group; 1.24 ± 0.99 µg/mg in D-GDA group and 30.54 ± 8.21 µg/mg in D-GDA-GL (P< 0.001). Only D-GDA did not show increase rates of calcium at 45 to 90 days (P=0.314). CONCLUSION: SDS-based decellularization process reduced the inflammatory intensity and calcification in bovine pericardium in subcutaneous rat model for 90 days.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico, Programa de Pós-Graduação em Engenharia Química, Florianópolis, 2012 A celulose bacteriana (CB) secretada por bactérias como a Gluconacetobacter hansenii é composta por uma rede de nanofibras de celulose que apresenta como principais características a moldabilidade e a biocompatibilidade. Apesar das excelentes características deste biomaterial, pode-se ainda alterar tanto suas propriedades físico-químicas como sua forma de estruturação, para se obter um material diferenciado. As modificações estruturais da CB podem ser realizadas por meio da combinação da CB com outros compostos in situ e as modificações morfológicas podem ser realizadas pela fermentação da CB em diferentes recipientes com diferentes metodologias, estendendo assim sua área de aplicação. Esta dissertação está dividida em duas partes, na primeira foram produzidas e caracterizadas membranas de CB modificadas in situ com a adição de glicose ou dextrina ao meio de cultura contendo manitol, em cultura estática (CBGl e CBDe, respectivamente). As imagens de MEV mostraram que houve modificações na rede de fibras das membranas. Ambas as modificações diminuíram a área superficial específica, a capacidade de retenção de água (CRA) e a taxa de reidratação (TR). Já os resultados da espectroscopia no infravermelho (FTIR-ATR) revelaram que não houve nenhuma alteração na estrutura química da CB. A modificação com a adição de glicose no meio de cultura (CBGl) influenciou positivamente o comportamento dos fibroblastos, aumentando a adesão e a proliferação celular quando comparado com o controle (CBC). Na segunda parte foi desenvolvida uma plataforma 3D multicompartimentalizada de CB (CM3D). Por meio da semeadura de fibroblastos no interior da matriz compartimentalizada e de um modelo matemático da difusão do corante fucsina básica neste dispositivo, demonstrou-se as aplicações potenciais como um dispositivo com capacidade de separação e/ou compartimentalização de ambientes diversos tanto para seu uso como scaffold nas aplicações de engenharia tecidual como para dispositivo de liberação. Abstract : Bacterial cellulose (BC) is secreted by bacteria such as Gluconacetobacter hansenii and consist on a network of cellulose nanofibers that provides the main characteristics of biocompatibility and moldability. Despite the excellent characteristics of the biomaterial, one can further alter both their physicochemical properties and their structure form to obtain a differentiated material. The BC structural changes can be made by combining the BC with other compounds in situ and morphological changes can be made by the fermentation of BC in different containers with different methods, thereby extending their application area. This work is divided into two parts, the first membranes BC modified were produced and characterized by adding in situ glucose or dextrin to the culture medium containing mannitol in static culture (BCGl and BCDe, respectively). The SEM images showed that there were changes in the network fiber membranes. Both modifications have decreased the specific surface area, the water holding capacity, and the rehydration rate. The results of infrared spectroscopy showed that there was no change in chemical structure of BC. The modification with by addition of glucose on culture medium (BCGl) influenced positively the behavior of fibroblasts, enhancing the adhesion and cell proliferation compared with the control (BCC). In the second part we developed a multicompartmentalized BC 3D platform (CM3D). By seeding fibroblasts into the matrix compartment and a mathematical model of the basic fuchsin dye diffusion on this device, it was demonstrated the potential for applications as a device capable of separate and/or compartmentalization of different environments for both their use as scaffold in tissue engineering applications and as release device. Keywords: bacterial cellulose

5th International Conference on Surfaces, Coatings and Nanostructured Materials (NANOSMAT), Reims, FRANCE, OCT 19-21, 2010; International audience; Loaded microspheres with a silicon (IV) phthalocyanine derivative (NzPC) acting as a photosensitizer were prepared from polyhydroxybutyrate-co-valerate (PHBHV) and poly(ecaprolactone) (PCL) polymers using the emulsification solvent evaporation method (EE). The aim of our study was to prepare two systems of these biodegradable PHBHV/PCL microspheres. The first one containing only photosensitizer previously incorporated in the PHBHV and poly(ecaprolactone) (PCL) microspheres and the second one with the post magnetization of the DDS with magnetic nanoparticles. Magnetic fluid is successfully used for controlled incorporation of nanosized magnetic particles within the micron-sized template. This is the first time that we could get a successful pos incorporation of nanosized magnetic particles in a previously-prepared polymeric template. This procedure opens a great number of possibilities of post-functionalization of polymeric micro or nanoparticles with different bioactive materials. The NzPC release profile of the systems is ideal for PDT, the zeta potential and the size particle are stable upon aging in time. In vitro studies were evaluated using gingival fibroblastic cell line. The dark citotoxicity, the phototoxicity and the AC magnetic field assays of the as-prepared nanomagnetic composite were evaluated and the cellular viability analyzed by the classical test of MU.

Submitted by Barroso Patrícia (barroso.p2010@gmail.com) on 2013-03-21T21:06:08Z No. of bitstreams: 1 Tese final isabela.pdf: 19026738 bytes, checksum: 2fd44c6a0db527266480ebdc1ac7ea15 (MD5) Made available in DSpace on 2013-03-21T21:06:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese final isabela.pdf: 19026738 bytes, checksum: 2fd44c6a0db527266480ebdc1ac7ea15 (MD5) Previous issue date: 2011 A medicina regenerativa busca o reparo de tecidos lesionados, por meio do controle e ampliação da capacidade natural de regeneração dos tecidos. A bioengenharia tecidual óssea insere-se neste contexto e visa à utilização de biomateriais que atuem como arcabouços capazes de regenerar defeitos ósseos de dimensões críticas com a finalidade de restabelecer a função e/ou estética do indivíduo acometido. Com o intuito de se alcançar um incremento do reparo ósseo, produzido localmente pelos biomateriais, quando implantados em defeitos críticos, pode-se instituir uma estratégia de atuação no metabolismo ósseo com o medicamento ranelato de estrôncio, com a associação do efeito local e sistêmico. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar, por meio de análise histomorfométrica, o potencial osteogênico do ranelato de estrôncio associado a microesferas de hidroxiapatita, juntamente com selante de fibrina, para regeneração em defeito ósseo crítico. Foram utilizados 64 rattus norvegicus da linhagem wistar, albinos, machos, adultos, que receberam via oral diariamente 900 mg/ Kg de ranelato de estrôncio, nos quais se realizou defeito ósseo crítico transfixado de 8,5 mm de diâmetro na região da calvária. Estes animais foram distribuídos aleatoriamente em quatro grupos - grupo controle com administração do ranelato de estrôncio (GCRS) - defeito ósseo sem implantação de biomaterial, apenas com a presença do coágulo sanguíneo; grupo hidroxiapatita com administração de ranelato de estrôncio (GHARS) - defeito ósseo com implantação de microesferas de HA; grupo fibrina com administração de ranelato de estrôncio (GFRS) - defeito ósseo com implantação de fibrina; e grupo hidroxiapatita associado à fibrina (GHAFRS) - defeito ósseo com implantação de microesferas de HA e fibrina; os grupos citados foram comparados com grupos controle-negativo (GC, GHA, GF, GHAF), cujo modelo animal foi similar, porém os animais não receberam o medicamento ranelato de estrôncio. Os animais foram sacrificados aos 15, 45 e 120 dias de pós-operatório e analisados por meio de microscopia óptica e, ainda, os grupos GC e GCRS foram avaliados, no ponto biológico de 120 dias, por microscopia eletrônica de varredura, microscopia eletrônica de transmissão e por espectrometria de energia dispersiva de raios-X. A administração do ranelato de estrôncio promoveu a regeneração parcial do defeito ósseo, sem o restabelecimento do volume ósseo original, com maior percentual de neoformação óssea quando utilizado sem associação com biomateriais; o elemento estrôncio foi incorporado à estrutura do tecido ósseo quando houve a administração do ranelato de estrôncio; as microesferas de HA foram biocompatíveis, atuaram, fundamentalmente, como biomaterial para preenchimento do defeito ósseo, e o seu potencial osteogênico restringiu-se à osteocondutividade; o selante de fibrina mostrou-se eficaz como agente aglutinante e acelerou a maturação óssea quando associado exclusivamente com o ranelato de estrôncio. Universidade Federal da Bahia, Instituto de Ciências da Saúde

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:30:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_Bianca_Palma_Santana.pdf: 5946140 bytes, checksum: fbcbf4959ad9ccac3ca669ef232ffb3b (MD5) Previous issue date: 2011-12-06 The development of scaffolds for tissue engineering should be biocompatible, where the degradation products should not be cytotoxic, tumorigenic, nephrotoxic or cause any toxic effects to the body. Despite the widespread use in tissue engineering, there is an effort to improve the functionality of this material for future applications. Important parameters should be observed in connection with properties that could influence the behavior of cells: pore size, pore shape, and surface treatment, for example. Among the materials used for the production of scaffolds, natural polymers have been the most widely used, given its high design flexibility and degradability. Scaffolds using nano-materials allow a greater similarity to natural extracellular matrix and these systems could be combined with biological inducers (eglectins) to address specific biological responses. The aim of our research is to obtain an alginate hydrogel functionalized nano/micro fiber based hydroxyapatite and titanium dioxide as well as bioactive substances (lectins), to the application in vitro for later use in the pulp tissue regeneration O desenvolvimento de scaffolds para aplicação na engenharia tecidual deve ser biocompatível, onde os produtos de degradação não devam ser citotóxicos, tumorigênicos, nefrotóxicos ou causar qualquer outro efeito tóxico ao organismo. Apesar do largo uso em engenharia tecidual, existe um esforço para melhorar a funcionalidade deste material para futuras aplicações. Parâmetros importantes deveriam ser observados em relação às propriedades que poderiam influenciar o comportamento celular: tamanho dos poros, formato dos poros, e tratamento da superfície, por exemplo. Dentre os materiais utilizados pela produção de scaffolds, os polímeros naturais têm sido os mais empregados, dada a sua grande flexibilidade de desenho e degradabilidade. Scaffolds utilizando nano-materiais permitem uma similaridade maior com a matriz extracelular natural e estes sistemas poderiam ser combinados com indutores biológicos (por exemplolectinas) para direcionar respostas biológicas específicas. O objetivo geral de nossa pesquisa é obter um hidrogel de alginato funcionalizado com nano/micro fibras a base de hidroxiapatita e dióxido de titânio, bem como substâncias bioativas (lectinas), visando à aplicação in vitro para futura utilização em regeneração do tecido pulpar

Feridas complexas podem resultar na perda completa do revestimento cutâneo. A solução consagrada pela cirurgia plástica é a enxertia de pele autógena, porém há casos em que ocorre escassez de área doadora cutânea, um problema ainda não totalmente solucionado. Assim, atualmente há muito interesse por materiais sintéticos ou biológicos que possam ser utilizados como substitutos cutâneos. O objetivo deste estudo foi introduzir uma forma mais didática de agrupar diferentes tipos de substitutos cutâneos. Acreditamos que esses produtos podem ser classificados de forma mais abrangente se forem divididos segundo três critérios: camada substituída da pele, subdivididos em epidérmicos (E), dérmicos (D) e compostos dermoepidérmicos (C); duração no leito da ferida, subdivididos em temporários (T) e permanentes (P); e origem do material constituinte, subdivididos em biológicos (b), biossintéticos (bs) e sintéticos (s). Complex wounds are characterized by complete loss of cutaneous cover. The most common plastic surgery technique is the autogenous skin graft; however, the amount of material available from donor areas is often limited. The development of synthetic or biological products as skin substitutes is therefore an area of interest. The present study aimed to classify the different types of skin substitutes available based on three criteria: the skin layer to be replaced, which can be categorized into epidermal (E), dermal (D), and dermal-epidermal composites (C); the durability in the wound bed, which can be temporary (T) or permanent (P); and the origin of the material, subdivided into biological (b), biosynthetic (bs), and synthetic (s).

OBJETIVO: Avaliar o processo de descelularização com dodecil sulfato de sódio (SDS) como método anticalcificante em próteses de pericárdio bovino fixadas em glutaraldeído, em modelo circulatório de ovinos. MÉTODOS: Tubos valvulados de pericárdio bovino foram implantados em posição pulmonar de ovinos por 180 dias. Os animais foram divididos em dois grupos com oito animais: grupo controle, com condutos de pericárdio fixado em glutaraldeído e grupo estudo, com pericárdio descelularizado com SDS 0,1% e posteriormente fixado em GDA. Os explantes foram submetidos à análise macroscópica, histológica com hematoxilina-eosina, alizarina-red e pentacrômico de Russel-Movatz, estudo radiológico e quantificação de cálcio com espectrometria de absorção atômica. RESULTADOS: Não houve mortalidade imediata, porém dois animais de cada grupo faleceram na evolução tardia. Os enxertos do grupo controle apresentavam intensa calcificação das cúspides e em algumas regiões dos condutos, enquanto que os enxertos descelularizados apresentavam-se preservados, sem calcificações macroscópicas evidentes. Esses resultados foram comprovados por análise histológica e radiográfica. Histologicamente, os enxertos descelularizados tiveram sua matriz melhor preservada e com diminuição acentuada da calcificação. O conteúdo de cálcio nos condutos foi de 35±42 µg/mg de tecido no grupo controle versus 15 ±10 µg/mg nos descelularizados. Nas cúspides valvares, esses valores foram de 264±126 µg/mg no grupo controle versus 94±27 µg/mg nos descelularizados (P=0,009). CONCLUSÃO: A descelularização com SDS 0,1% foi efetiva como método anticalcificante em condutos de pericárdio bovino implantados em modelo circulatório de ovinos por 180 dias OBJECTIVE: The objective was to analyze the decellularization process with SDS in glutaraldehyde-preserved bovine pericardium as an anticalcification method in a circulatory sheep model. METHODS: The valved tubs were implanted in pulmonary artery position in sheep by 180 days. The animals were divided in two groups of 8 animals: control group glutaraldehyde-preserved bovine pericardium and the study group - decellularized bovine pericardium with 0,1% SDS and glutaraldehyde-preserved. After explantation the tubs were analized by x-ray macroscopy, hematoxilin-eosin, alizarin-red and Russel-Movatz pentacromic histology. The calcium content was measured by flame atomic absorption spectrometry. RESULTS: There was no early mortality, but two animals in each group died during the study. All cusps in the control group were severely calcified and in some points in the conduits, while the decellularized group did not show macroscopic calcification. Data were proved by x-ray and histologycal exams. The matrix was preserved in histologycal analysis in decellularized group, without gross calcification. The wall conduits calcium content was 35,25±42,13 µg/mg in the control group versus 15,75±10,44 µg/mg in the decellularized one: in the cusps was 264,4±126,16 µg/mg in control group versus 94,29±27,05 µg/mg in decellularized group (P=0,009). CONCLUSION: The decellularization with 0.1% SDS was effective as an anticalcification method in bovine pericardial grafts implanted in a sheep circulatory model for 180 days

INTRODUÇÃO: A recente descoberta que tecidos adultos têm células-tronco com capacidade pluripotencial deu início a uma série de pesquisas, pois descarta questões ético-religiosas e imunológicas. A Cirurgia Plástica despertou interesse recentemente para o tema, e participa nas pesquisas de células-tronco a partir do momento que o tecido adiposo e a pele tornaram-se fontes de obtenção e diferenciação de células-tronco, abrindo novas perspectivas de tratamento para deformidades congênitas e adquiridas, com finalidade reparadora ou estética. OBJETIVO: Mostrar o estágio atual das pesquisas publicadas com células-tronco adultas ou somáticas, com ênfase nas derivadas da gordura e da pele, e as perspectivas de terapia celular com células-tronco que mostrem relação com a Cirurgia Plástica. MÉTODO: Utilizamos o sistema Medline, via website da Biblioteca Virtual em Saúde (http://www.bireme.br/php/index.php), pesquisando artigos no período de 1997-2009, o sistema LILACS pelo mesmo endereço eletrônico e no mesmo período e, por último, o programa de busca Google, para o mesmo período (www.google.com.br). RESULTADOS E CONCLUSÕES: Os estudos recentes publicados sobre células-tronco relacionados à Cirurgia Plástica demonstram novas perspectivas para correção de deformidades adquiridas e congênitas, alterações cicatriciais, queimaduras, estrias, manchas hiper e hipocrômicas, bem como participação na obtenção e no preparo de material (gordura e pele) para uso em outras especialidades médicas. Os estudos se multiplicam em todo o mundo, e é importante que a especialidade Cirurgia Plástica esteja envolvida e atenta a esta promissora área de pesquisa e tratamento. INTRODUCTION: The fact that adult tissues have stem cells with pluripotential capacity starts a new wave of research, especially because it dismisses immunologic problems and ethic and religious questions. Plastic Surgery arouses interest recently and participates in stem cell researches since the adipose tissue and skin became sources of stem cells both for acquisition and differentiation. It opens new perspectives for congenital and acquired deformities with esthetic and reconstructive purpose. OBJECTIVE: To show actual stage of adult and somatic stem cell published researches, especially stem cell derived from fat and skin and the perspectives of cellular therapy for Plastic Surgery. METHODS: We use Medline system (http://www.bireme.br/php/index.php), searching articles between 1997 and 2009, LILACS system by the same electronic address and period, at last, the search engine Google (www.google.com.br) for the same period. RESULTS AND CONCLUSIONS: Recent published studies of stem cells related with Plastic Surgery show new perspectives for correction of acquired and congenital deformities, scar alterations, burns, stria, hiper and hipocromic spots and partnership with obtention and prepare of fat and skin to be used in other medical specialties. Studies are multiplying around the world and is very important that Plastic Surgery be engaged and attentive to this promising area of research and treatment.

Orientador: Rubens Maciel Filho Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Química Resumo: Os recentes avanços em biomateriais, como polímeros biodegradáveis e bioreabsorvíveis, juntamente com o desenvolvimento de novas técnicas de biofabricação, estão permitindo criar dispositivos médicos que auxiliam na recuperação de tecidos e/ou órgãos danificados por traumas ou doenças, proporcionando melhor qualidade de vida e saúde pública. O Poli (ácido láctico) (PLA) é, dentre os biomateriais, um dos mais importantes para a produção destes dispositivos, devido às suas propriedades e por ser produzido a partir do ácido láctico, um ácido orgânico de origem biológica, o qual pode ser sintetizado via fermentativa, utilizando açúcares derivados de cana-de-açúcar, no qual o Brasil tem grande destaque mundial. O PLA pode ser obtido por diferentes rotas, mas independente da rota utilizada, requer um rigoroso controle de processo. As condições de operação deste tipo de síntese influenciam amplamente as características finais do produto. Neste contexto, estudar o comportamento do processo de produção de PLA é necessário para desenvolver estratégias de controle que permitam escolher as condições operacionais para obter um produto com as propriedades desejadas. Neste estudo, foi apresentada a síntese e caracterização de PLA por duas rotas convencionais: condensação direta de ácido láctico e síntese por abertura do anel a partir do lactídeo previamente sintetizado a partir de ácido láctico. Também foi realizada a análise das variáveis operacionais (temperatura e tempo de reação), assim como seus efeitos sobre as características do produto, através dos testes de polimerização realizados e da análise das propriedades dos polímeros obtidos. O projeto foi realizado em três partes: síntese do polímero, caracterização deste e comparação dos resultados obtidos pelos dois métodos. As duas rotas de polimerização do ácido láctico resultaram ser adequadas para a obtenção do PLA a partir de ácido láctico nas condições estudadas Abstract: Recent advances in biomaterials as biodegradable and bioabsorbable polymers, along with the development of new biomanufacturing techniques, are allowing to create medical devices that assist in tissue and/or organs repair damaged by trauma or disease, providing a better quality of life and public health. The Poly (Lactic Acid) (PLA) is, among the biomaterials, one of the most important for the production of these devices due to its properties and because it is produced from lactic acid, an organic acid of biological origin, which can be synthesized through fermentation using sugars derived from sugar cane, in which Brazil has great global leadership. The PLA can be obtained by different routes, but independent from that used, it requires a rigorous process control. The operating conditions of this kind of synthesis largely influence the final characteristics of the product. In this context, studying the behavior of the production process of PLA is required to develop control strategies that allow choosing the operating conditions for a product with the desired properties. In this study is presented the synthesis and characterization of PLA by two conventional routes: direct condensation of lactic acid and ring opening synthesis of lactide previously synthesized from lactic acid. Also carried out analysis of the operating variables (temperature and reaction time), as well as its effects on the characteristics of the product through of the polymerization tests performed and the analysis of the properties of polymers. The project was undertaken in three parts: polymer synthesis, characterization and comparison of the results obtained by two methods. The two routes of lactic acid polymerization were adequate for obtaining the PLA from lactic acid under the conditions studied Mestrado Desenvolvimento de Processos Químicos Mestre em Engenharia Química

Orientador: Cecília Amélia de Carvalho Zavaglia Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Mecânica Resumo: À medida que há uma melhoria na tecnologia aplicada à saúde humana, a expectativa de vida vem aumentando, mas nem todas as partes do corpo podem manter suas funções com o processo de envelhecimento. É preciso que os ossos e a cartilagem apóiem o envelhecimento do corpo, embora as células que os produzem se tornem menos ativas com o tempo. Outros órgãos, tais como os rins, o coração e o fígado devem ser operados para ter um tempo de vida maior. A engenharia tecidual foi desenvolvida para substituir, reparar ou reconstruir tecidos ou órgãos perdidos ou danificados por acidentes ou doenças graves através da utilização e desenvolvimento de novos materiais, que sejam biocompatíveis, bioabsorvíveis, porosos, entre outras características. Os scaffolds são arcabouços tridimensionais porosos e são utilizados na regeneração de tecidos para seu estado natural e suas funções, que é fundamental para a engenharia tecidual. Eles podem ser classificados em arcabouços que induzem a migração e o crescimento celular e em arcabouços carreadores de células osteogênicas autógenas, que foram colonizadas em biorreatores e subsequentemente reimplantadas no paciente. Tais scaffolds podem ser naturais ou sintéticos. O objetivo deste trabalho é avaliar o compósito poroso de hidroxiapatita - titânia (HATiO2), em três composições diferentes (50% HA - 50% TiO2, 60% HA - 40% TiO2, 70% HA - 30% TiO2) para obter scaffolds utilizados para engenharia tecidual óssea. Os corpos de prova foram produzidos pelo método da esponja polimérica, utilizando bicarbonato de sódio como ligante e floculante. A sinterização foi realizada em três temperaturas: a 1250ºC; 1300ºC e 1350ºC. As propriedades analisadas foram: resistência à compressão e dureza através das normas da ASTM, porosidade aparente, densidade aparente, retração linear de queima e absorção de água, pelo método de Souza Santos para argilas. Os resultados obtidos mostraram-se bastante satisfatórios, onde foi mostrado que os corpos cerâmicos porosos obtiveram valores de resistência à compressão e dureza coerentes com os da literatura e superiores aos da hidroxiapatita pura. Realizou-se também uma caracterização estrutural das amostras via difração de raios - x (DRX), microscopia eletrônica de varredura (MEV) e espectroscopia por infravermelho com transformada de Fourier (FT-IR). Com base nos resultados mecânicos e de caracterização estrutural, foi escolhida a amostra com composição de 50% HA - 50% TiO2 sinterizada a 1350ºC para realização de ensaios in vitro, onde foram avaliadas citotoxicidade e crescimento celular de osteoblastos e fibroblastos de camundongos. Os resultados indicaram que o compósito é biocompatível e que as células cresceram nos scaffolds. De forma geral, pode-se concluir que todas as amostras são indicadas para a utilização como matéria prima para aplicação em engenharia tecidual óssea. A amostra com 50% HA - 50% TiO2 apresentou melhores características para a realização dos ensaios in vitro realizados neste trabalho e pode-se indicar esta para a realização de ensaios in vivo, onde devem ser avaliadas as características de citotoxicidade e crescimento de células ósseas em animais, por um período de 15 e 30 dias, conforme normas da área de saúde Abstract: As we witness an improvement in the technology applied to human health, life expectancy increases, even though not every part of the body can maintain their functions with the aging process. It is necessary that bones and cartilage support the body's aging, even if the cells that produce them become less active with time. Other organs, such as kidneys, heart and liver must be operated to have a higher lifetime. Tissue engineering has been developed in order to replace, repair or rebuild tissues or organs lost or damaged due to accidents or serious diseases through the use and development of new materials that are biocompatible, bioabsorbable, with porosity among other characteristics. Scaffolds are a kind of porous tridimensional net and they are used on tissues regeneration to their natural state and functions, which is fundamental for tissue engineering. They can be classified as scaffolds that induce migration and cell growth and as carrier scaffolds for autogenous ostheogenic cells, which were colonized inside bioreactors and then redeployed on the patient. Those scaffolds can be natural or synthetic. This research aimed to evaluate hydroxyapatite-titanium oxide (HA-TiO2) with three different compositions (50% HA - 50% TiO2, 60% HA - 40% TiO2, 70% HA - 30% TiO2) to obtain scaffolds used for bone tissue engineering. Samples were made by the polymeric sponge method, using sodium bicarbonate as a binder and flocculating agent. Sintering was carried out at 1250ºC; 1300ºC e 1350ºC. It was analyzed compressive strength and Vickers hardness using ASTM Standards, apparent porosity, apparent density, burning linear retraction and water absorption by Souza Santos method used for clays. Results proved satisfactory showing that ceramic bodies obtained compressive strength and Vickers hardness according to literature and higher than those for pure hydroxyapatite. Samples structural characterization was done by x-ray diffraction (XRD), scanning electronic microscopy (SEM) and Fourier transformed infrared (FT-IR). It was chosen 50% HA - 50% TiO2 sintered at 1350ºC based on its mechanical properties and structural characterization and in vitro essays were done to evaluate citotoxicity and mouse osteoblasts and fibroblasts cell growth. Results have shown that the composite is biocompatible and the cell growth above scaffolds surface. In general, samples can be recommended for use as raw material for bone tissue engineering application. The sample with 50% HA - 50% TiO2 showed better characteristics for in vitro essays done and it can be recommended for in vivo essays where citotoxicity and bone cell growth in animals during 15 and 30 days, according to health standards Doutorado Materiais e Processos de Fabricação Doutor em Engenharia Mecânica

Orientador: Eliana Aparecida de Rezende Duek Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Mecânica Resumo: Polímeros a base de ácido láctico são largamente investigados como materiais para a engenharia tecidual. A capacidade de sofrer degradação hidrolítica, de ser reabsorvido pelo organismo e sua biocompatibilidade inerente, tornam-nos uma excelente escolha para tal aplicação. Entretanto, características como baixa flexibilidade e pequena capacidade de alongamento antes da fratura, tendem a limitar esses dispositivos em determinadas aplicações, o que pode ser melhorado com a adição de compostos que agem como plastificantes, como é o caso do trimetileno carbonato (TMC), quando presente na cadeia polimérica do copolímero de ácido láctico (PLDLA). O objetivo deste trabalho foi sintetizar e caracterizar o terpolímero de L-ácido láctico, D,L-ácido láctico e TMC, e obtenção de arcabouços para avaliação da viabilidade celular e atividade de células osteoblásticas (SaOS-2), em 1, 3, 7, 14 e 21 dias de cultivo, visando aplicação na engenharia tecidual óssea. Dessa forma, sintetizou-se o terpolímero a partir de 20 e 30% de TMC, através da polimerização em massa dos monômeros, como confirmado por RMN de 1H e 13C, utilizando como catalisador o Sn(Oct)2. A análise de GPC mostrou que os terpolímeros sintetizados apresentaram massa molar média (Mw) na ordem de 105 g/mol, característica importante que permite a obtenção de propriedades mecânicas mínimas para uma aplicação estrutural. A investigação térmica do PLDLA-TMC demonstrou uma discreta diminuição da Tg em relação ao PLDLA. Além disso, a degradação do terpolímero em etapa única iniciou-se em torno dos 290 ºC, como visto pelo TGA. O ensaio de MTT mostrou que o arcabouço de PLDLA-TMC permitiu um aumento na viabilidade celular, atingindo valores máximos em 7 dias, e mantendo-se estável até 14 dias de cultivo. Similarmente, a atividade de fosfatase alcalina foi crescente até 7 dias de cultivo, importante indicador da atividade osteoblástica. Esses resultados mostram que é possível produzir com sucesso o terpolímero PLDLA-TMC. Além disso, os arcabouços produzidos apresentaram características importantes considerando a aplicação para engenharia tecidual óssea Abstract: Lactic acid based polymers are widely investigated as materials for tissue engineering. The ability to allow hydrolytic degradation, to be reabsorbed by the body and its inherent biocompatibility, make them an excellent choice for this application. However, characteristics such as low flexibility and low elongation ability before the fracture tend to limit these devices in particular applications, which can be enhanced with the addition of compounds that act as plasticizers, as the trimethylene carbonate (TMC) when present in the polymer chain of the copolymer of lactic acid (PLDLA). The objective of this work was to synthesize and characterize the terpolymer of L-lactic acid, D,L-lactic acid and TMC, obtain evaluation of scaffolds for cell viability and alkaline phosphatase activity of osteoblastic cells (SaOS-2) in 1, 3, 7, 14 and 21 days of culture, aiming its application in bone tissue engineering. Thus, the terpolymer is synthesized from 20 and 30% of TMC, by bulk polymerization of monomers, confirmed by 1H and 13C RMN. The GPC analysis showed that the copolymers synthesized showed average molar mass (Mw) in the order of 105 g/mol, an important feature that allows the attainment of minimum mechanical properties necessary for structural applications. The thermal investigation of thermal PLDLA-TMC showed a slight decrease of Tg comparing to PLDLA. Furthermore, the one step terpolymer degradation was initiated around 290 ºC, as shown by TGA. The MTT assay showed that the PLDLA-TMC scaffolds enabled an increase in cell viability, reaching a peak in 7 days, and remained stable until 14 days of cultivation. Similarly, the alkaline phosphatase activity was increased up to 7 days of culture, an important indicator of osteoblastic activity. These results show that it was possible to successfully produce a terpolymer from L-lactic acid, D,L-lactic acid and trimethylene carbonate. In addition, the scaffolds exhibited important characteristics considering the application for bone tissue engineering Mestrado Materiais e Processos de Fabricação Mestre em Engenharia Mecânica

Orientador: Rubens Maciel Filho Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Química Resumo: Os avanços na medicina moderna, odontologia e engenharia aliados ao aumento da expectativa de vida, permitiram o desenvolvimento de técnicas de biomanufatura e biomateriais que geram uma melhor qualidade de vida. Essas técnicas devem permitir a imitação de estruturas vivas, tanto em forma como em função, tornando possível substituir tecidos defeituosos ou faltantes. Nesse contexto, o estudo e aplicação de poliésteres bioreabsorvíveis como suporte de crescimento celular (ou scaffolds) na engenharia tecidual tem se mostrado uma área muito promissora de pesquisa. Dentre os poliésteres bioreabsorvíveis comumente utilizados, o poli(ácido láctico) (PLA) ocupa posição de destaque devido a sua excelente biocompatibilidade e propriedades mecânicas. O PLA é um termoplástico de alta resistência e é degradado no corpo por simples hidrólise do éster em uma taxa que pode ser controlada. A forma mais comum de se obter PLA de alta massa molecular é via polimerização por abertura de anel do dímero cíclico do ácido láctico, também conhecido como lactide, e o catalisador mais utilizado atualmente é o octoato de estanho ou Sn(Oct)2. Porém, a fim de possibilitar a síntese de um material isento de metais, a utilização de enzimas como catalisadores tem despertado o interesse de estudiosos. Além de serem consideradas atóxicas, as enzimas viabilizam a polimerização sob condições brandas em relação à pressão, temperatura e pH. O objetivo desse trabalho foi fazer um estudo prospectivo sobre as técnicas existentes para a síntese do PLA e sintetizálo a partir de uma rota química, utilizando Sn(Oct)2 como catalisador, e outra enzimática utilizando o biocatalisador Lipase B para futuramente obter biodispositivos para utilização na engenharia tecidual. A massa molecular do polímero foi obtida por GPC e sua estrutura química foi confirmada por FTIR. As propriedades térmicas foram estudadas por DSC e TGA. O PLA obtido a partir da rota química atingiu massa molecular equivalente a 8353 g/mol após 7h de reação a 160°C com 0,1% de Sn(Oct)2. Para a rota enzimática, foi constatado que a policondensação foi mais eficaz em relação à técnica de abertura de anel do lactide e um polímero com massa molecular igual a 1719 g/mol foi obtido depois de 77h de reação a 70°C com 0,5% de Lipase B. Em um comparativo de custos de fabricação, a rota química se mostrou mais atrativa em um primeiro momento, porém foi comprovado que com a reutilização da Lipase B, a polimerização enzimática pode ser viabilizada economicamente Abstract: The advances in modern medicine, dentistry and engineering, combined with the increase of life expectancy, have allowed the development of techniques for biomanufacturing and biomaterials that create a better life quality. These techniques should enable the mimicking of living structures, both in form and function, making it possible to replace defective or missing tissues. In this context the study and application of bioresorbable polyesters as scaffolds in tissue engineering has shown a very promising area of research. Poly(lactic acid), PLA, stands out among the commonly used bioresorbable polyesters due to its excellent biocompatibility and mechanical properties. PLA is a thermoplastic, high strength and is degraded in the body by simple hydrolysis of the ester at a rate that can be controlled. The most common way to obtain high molecular mass PLA is by ring-opening polymerization of the lactic acid cyclic dymer, lactide, and currently the widely used catalyst for biomedical purposes is Stannous Octoate or Sn(Oct)2. However, in order to enable the synthesis of a metal-free material, the use of enzymes as catalysts has attracted the interest of researchers. In addition to being considered non-toxic, the enzyme enables the polymerization under mild conditions with regard to pressure, temperature and pH. The aim of this work was to make a prospective study on the existing techniques for the synthesis of PLA and synthesize it from a chemical route, using Sn(Oct)2 as catalyst, and from a enzymatic route using the biocatalyst Lipase B for future development of biodevices to be used in tissue engineering. The polymer molecular mass was obtained by GPC and its chemical structure was confirmed by FTIR. Thermal properties were studied by DSC and TGA. PLA obtained from the chemical route reached molecular mass equivalent to 8353g.mol-1 after 7 hours of reaction at 160°C with 0,1% Sn(Oct)2. For the enzymatic route, it was found that the polycondensation was more effective compared to the technique of ring opening of lactide and polymer with a molecular mass of 1719g.mol-1 was obtained after 77 hours reaction time at 70°C with 0,5% of Lipase B. Comparing manufacturing costs, chemical route were more attractive at first, but it was proven that with Lipase reuse enzymatic polymerization can be economically viable Mestrado Desenvolvimento de Processos Químicos Mestre em Engenharia Química

Orientadores: Marcos Akira d'Ávila, Cecília Amélia de Carvalho Zavaglia Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Mecânica Resumo: O uso e pesquisa do polímero Policaprolactona (PCL) como biomaterial vem sendo amplamente difundido nas últimas décadas. Sua capacidade de interagir com o organismo, propriedades mecânicas e capacidade de reabsorção são as principais características que levaram a escolha deste material para o desenvolvimento de uma estrutura que aja como suporte celular para uso em Engenharia Tecidual. Neste trabalho, o objetivo foi produzir e caracterizar membranas de PCL obtidas pelo processo de eletrofiação ou "electrospinning". Este processo, que utiliza uma diferença de potencial para extrair "fios" a partir de uma solução polimérica eletricamente carregada, é relativamente novo e versátil, sendo capaz de produzir redes macrométricas a partir de um emaranhado de "fios" que variam de diâmetros nano até micrométricos. As amostras foram devidamente analisadas e caracterizadas utilizando Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV), Calorimetria Diferencial de Varredura (DSC), Termogravimetria (TG), Infravermelho por Transformada de Fourrier (FTIR), Análise Dinâmico Mecânica (DMA) e ensaio in vitro com células tronco mesenquimais de tecido adiposo (MSCs). As membranas exibiram propriedade de biocompatibilidade, o que levou à crer que a porção de solvente utilizada para fabricação dos fios foi eliminada, possibilitando adesão, penetração e proliferação celular através da estrutura Abstract: The Policaprolactone polymer has been widely investigated as cellular support for tissue engineering purposes. Its biocompatibility, adequate mechanical properties and resorption capability are the main aspects that has led to the choice of this material for a possible use as tissue engineering scaffolds. In this work, the objective was to prepare and characterize PCL non-woven fibrous networks obtained through the electrospinning process. This process, which uses electrical potential in order to extract fibers from a electrically charged polymer solution is relatively new and versatile, being capable to produce a macroscopic structure composed of non-woven networks of fibers varying from the nanoscale to the microscale range. The samples were characterized using Scanning Electron Microscopy (SEM), Scanning Differential Calorimetry (DSC), Thermogravimetry (TG), Infrared Fourrier Transform (FTIR), Dynamic Mechanical Analysis (DMA) and in vitro tests with Mesenquimal Stem Cells (MSCs). The membranes were considered biocompatible, which led to believe that the solvent portion was eliminated during the process, enabling adhesion, penetration and cellular proliferation within the structure Mestrado Materiais e Processos de Fabricação Mestre em Engenharia Mecânica

Orientadores: Rubens Maciel Filho, Jorge Vicente Lopes da Silva Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Química Resumo: Em decorrência da grande demanda de transplantes de órgãos e tecidos no Brasil, ha estímulos para criação de terapias alternativas como o desenvolvimento de substitutos biológicos temporários, isto e, scaffolds, através da Bioengenharia e Engenharia Tecidual, descartando a necessidade de doadores. Neste trabalho, foi utilizado o polímero policaprolactona (PCL) para estruturar scaffolds 3D por meio da plataforma experimental de manufatura aditiva Fab@CTI, a qual apresenta um cabeçote de extrusão intercambiável construído para entrada de material em forma de filamento. Uma nova proposta de orientação de raster foi criada para o design dos scaffolds. Foram estruturados scaffolds com raster regular e randômico com poros de 0.25, 0.5 e 1 mm. Analises de Difração de raios-x (DRX), Calorimetria exploratória diferencial (DSC) e Espectroscopia de absorção no infravermelho com transformada em Fourier (FTIR) foram realizadas para verificar possíveis mudanças nas propriedades térmicas do material durante o processamento. Microscopia eletrônica de varredura (MEV) foi feita para checar a morfologia dos scaffolds e medir o diâmetro dos filamentos extrudados na Fab@CTI alem do espaçamento entre eles. Também foram realizadas analises de citotoxicidade e viabilidade celular com células tronco mesenquimais de tecido adiposo. Ainda, utilizando o software modeFRONTIER, foi feita uma simulação de valores de modulo de compressão do PCL possíveis de serem obtidos. Os resultados de DRX e FTIR não mostraram degradação do PCL e o DSC revelou algumas alterações no ponto de fusão e diminuição da cristalinidade. Os scaffolds não se mostraram tóxicos e os modelos com poros de 0.25 mm e raster regular e randômico foram os que apresentaram viabilidade celular Abstract: Due to the demand for organs and tissues transplants in Brazil, is indeed the creation of new therapies as the development of temporary biological substitutes, ie, scaffolds, through Bioengineering and Tissue Engineering, discarding the require for donors. In this work, we used the polymer polycaprolactone (PCL) to structure 3D scaffolds by the additive manufacturing experimental platform, Fab@CTI, which presents an interchangeable extrusion head build to filaments materials input. A new proposal for random raster was presented to design the scaffolds. Were structured scaffolds with regular and random raster and pores of 0.25, 0.5 and 1 mm. Analysis of X-Ray Diffraction (XRD), Differential Scanning Calorimetry (DSC) and Fourier Transform Spectroscopy (FTIR) were conducted to check for possible changes in thermal properties of the material during the processing. Scanning Electron Microscopy (SEM) was done to check the morphology of scaffolds and measure the diameter of filaments extruded at Fab@CTI beyond the distance between them. Analyses of cytotoxicity and cell viability with mesenchymal stem cells from adipose tissue were also performed. In addition, using the software modeFRONTIER, a simulation of compressive modulus of PCL was done with values possible to obtain. The result of the XRD and FTIR showed no degradation of PCL and DSC revealed some changes in melting point and decrease of crystallinity. The scaffolds were not toxic and models of 0.25 mm pores and both regular and random raster showed cell viability Mestrado Desenvolvimento de Processos Químicos Mestre em Engenharia Química

Submitted by Barroso Patrícia (barroso.p2010@gmail.com) on 2013-08-12T17:55:59Z No. of bitstreams: 1 MarionFinal.pdf: 12836554 bytes, checksum: 66dc4e3adc66f1b0b4ea173078da5e72 (MD5) Made available in DSpace on 2013-08-12T17:55:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MarionFinal.pdf: 12836554 bytes, checksum: 66dc4e3adc66f1b0b4ea173078da5e72 (MD5) Previous issue date: 2010 FAPESB No processo fisiológico de regeneração óssea, o estrôncio, em concentrações plasmáticas adequadas, compartilha e substitui o cálcio, e pode favorecer um melhor remodelamento tecidual. Este trabalho teve como finalidade mensurar os níveis de estrôncio e de cálcio no plasma sanguíneo, durante o reparo de defeito crítico em calvária de rato. Foram utilizados 75 Rattus norvegicus da linhagem Wistar, albinos, machos e adultos, distribuídos em cinco grupos (GI, GII, GIII, GIV e GV). Os defeitos críticos foram preenchidos por coágulo sanguíneo (GI e GII), por selante de fibrina (GIII e GV) e por microesferas de hidroxiapatita (GIV e GV). Os animais foram avaliados nos tempos biológicos de 15, 45 e 120 dias. Aqueles pertencentes ao GI receberam dieta convencional, enquanto os dos demais grupos receberam, por via enteral, dieta pastosa com 900mg/Kg.dia do fármaco ranelato de estrôncio. Após a coleta sanguínea, os animais foram eutanasiados. O estrôncio e o cálcio foram mensurados por espectrometria de absorção atômica com forno de grafite (GFAAS) e espectrometria de absorção atômica com chama (FAAS), respectivamente. Observou-se que as concentrações plasmáticas de estrôncio e de cálcio, em 15 dias, foram, respectivamente: GI – 0,0005/2,5mmol/L; GII – 0,2/2,2mmol/L; GIII – 0,26/2,1mmol/L; GIV – 0,13/2,4mmol/L; GV – 0,24/2,1mmol/L. No período de 45 dias as concentrações obtidas foram: GI – 0,0006/2,5mmol/L; GII – 0,1/2,3mmol/L; GIII – 0,2/2,3mmol/L; GIV – 0,013/2,5mmol/L; GV – 0,1/2,3mmol/L e em 120 dias GI foi de 0,00047/2,4mmol/L; GII – 0,04/2,3mmol/L; GIII – 0,03/2,3mmol/L; GIV – 0,03/2,2mmol/L; GV – 0,03/2,3mmol/L. O grupo que fez uso apenas da hidroxiapatita apresentou menor valor de concentrações de estrôncio estatisticamente significantes (p

A medicina regenerativa é um campo fascinante e tem chamado a atenção, nos últimos anos, pelo crescente esforço multidisciplinar em busca de metodologias adequadas para a reposição de tecidos danificados no corpo humano. Entre as técnicas utilizadas para desenvolver matrizes para o uso em engenharia tecidual está o electrospinning. Essa técnica que permite a produção de nanofibras através do uso de forças electrostáticas e tem sido empregado para a produção de matrizes fibrosas. As células-tronco mesenquimais (CTM) são células-tronco adultas com alta plasticidade e por isto alvo de muitos estudos terapêuticos. O presente trabalho foi dividido em dois capítulos sendo que cada um tratou de um objetivo, como segue: (1) cultivar e diferenciar células-tronco mesenquimais em matrizes de nanofibras de poli(ácido lático-co-glicólico) (PLGA) produzidas através da técnica de electrospinning e investigar o envolvimento de receptores integrina- 1 no processo de adesão em matrizes de PLGA; (2) avaliar a viabilidade celular de células-tronco mesenquimais ou células mononucleares (CMNs) misturadas a uma solução de poli(álcool vinílico) (PVA) e submetidas a produção de fibras por electrospinning. No capítulo I, as CTM foram isoladas de camundongos da linhagem C57BL/6, cultivadas e submetidas a diferenciação condrogênica em matrizes de nanofibras de PLGA produzidas por electrospinning. Análises realizadas 24 horas após a semeadura demonstraram que as CTM eram responsívas e apresentavam morfologia semelhante a de fibroblastos com a presença de fibras de estresse de actina. O bloqueio dos receptores integrina- 1 reduziu (em cerca de 20%) a adesão celular e as observações demonstraram a perda das fibras de estresse de actina. Estes resultados demonstraram a habilidade das nanofibras de PLGA em ativar respostas celulares mediadas por adesão via integrina. No capítulo II foi avaliada a viabilidade de CTM e CMNs após terem sido processadas pelo electrospinning. As CTM foram extraídas da parede de cordão umbilical e as CMNs do sangue de cordão umbilical. Ambas as células foram misturadas a uma solução de PVA 10% e esta suspensão foi utilizada para produzir fibras pelo processo de electrospinning durante 30 minutos utilizando-se uma voltagem de 21 kV. Após o procedimento a viabilidade celular foi mensurada através de contagem celular com exclusão de células mortas por coloração com Trypan Blue. As CTM tiveram a viabilidade reduzida para 19.6%, e as CMNs para 8.38%. Os dados coletados sugerem a necessidade de mais estudos na busca de estratégias de proteção celular durante o electrospinning, uma vez que a elevada perda da viabilidade celular pode estar relacionada à alta viscosidade da solução polimérica, levando a redução do acesso ao meio nutritivo, associada aos efeitos do estresse mecânico e elétrico inerentes do procedimento. Os resultados gerais destes capítulos (1) demonstraram a habilidade das matrizes de nanofibras de PLGA em ativar respostas celulares via receptores integrinas- 1; (2) sugerem que a incorporação de células em matrizes fibrosas durante a produção de fibras através da técnica de electrospinning é um procedimento viável e pode ser utilizado como estratégia para a melhor distribuição celular na matriz formada. Juntamente, estes dados contribuem para o entendimento do comportamento das CTM em matrizes biodegradáveis e biocompatíveis produzidas por electrospinning, as quais podem ser utilizadas como material carreador em tratamentos clínicos envolvendo transplante celular. Regenerative medicine is an amazing field that has called attention, in the last years, due to the multidisciplinary efforts to find suitable methodologies to regenerate damage tissues. Electrospinning is an important technique used to produce nanofibers and is employed to develop fibrous scaffolds. Mesenchymal stem cells (MSC) are adult stem cells with high plasticity and, for this reason, are widely studied in therapeutic approaches. The present study is composed by two chapters, with different aims, as follow: (1) culture MSC on poly(D, Llactide- co-glycolide) (PLGA) nanofiber scaffolds and induce them to condrogenic differentiation and, analyze the influence of the integrin- 1 receptor in the adhesion of MSC on PLGA scaffolds; (2) analyze the viability of MSC and mononuclear cells (MNCs) mixed to a PVA solution after electrospinning. In the Chapter I, MSCs were isolated from C57BL/6 mice, cultured on PLGA scaffold produced by electrospinning technique and differentiated into chondrogenic lineage. After seeding, MSCs were responsive and become flattened with fibroblast-like morphology demonstrated by the presence of actin stress fibers. Integrin- 1 receptor blockage reduced (about 20%) cell adhesion with loss of actin stress fibers, demonstrating the ability of PLGA nanofiber to trigger integrin receptor-mediated cell adhesion. In the Chapter II, the viability of MSC and MNC after electrospinning were analyzed. MSC were extracted from the wall of the umbilical cord, and MNC from the umbilical cord blood. Cells were resuspended in a solution of poly(vinil alcohol) (PVA) 10% and subjected to electrospinning during 30 minutes under a voltage of 21kV. Cell viability was assessed before and after the procedure by exclusion of dead cells by Trypan Blue staining. After electrospinning the MSC viability reduced to 19.6%, and the MNCs viability to 8.38%. These data suggest the need for more investigations looking for strategies to protect cell from the damages caused by electrospinning, as the loss of viability can be related to the high viscosity of the polymeric solution which reduced the access to nutrients associated to the electric and mechanical stress during electrospinning. The results of both chapters (1) demonstrated the ability of PLGA nanofiber to trigger integrin receptor-mediated cell adhesion; (2) suggested that the cellular incorporation into fibrous scaffolds produced by electrospinning is a viable process and can be used to improve the cellular distribution into scaffolds. The present data contribute to the understanding of MSCs´ behavior on these biodegradable and biocompatible scaffolds that can be used as carriers in treatments involving cell transplantation.

p. 37-44 Submitted by RI Repositorio (repositorio@ufba.br) on 2011-06-18T11:37:20Z No. of bitstreams: 1 3503.pdf: 179749 bytes, checksum: c0250f0ff19c646e1728d88cba1cae67 (MD5) Made available in DSpace on 2011-06-18T11:37:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 3503.pdf: 179749 bytes, checksum: c0250f0ff19c646e1728d88cba1cae67 (MD5) Previous issue date: 2010 A bioengenharia tecidual visa criar e aprimorar novas terapias e/ou desenvolver novos biomateriais que restaurem, melhorem ou impeçam o agravamento da função tecidual comprometida. Essa especialidade possui diversas aplicações, como, por exemplo, em situações com grande perda de integridade tecidual resultante de traumas, deformidades do desenvolvimento e doenças. Na perda ou comprometimento do tecido ósseo, vários biomateriais naturais ou sintéticos, como polímeros, cerâmicas e metais ou seus compósitos tem sido investigados e utilizados de diferentes maneiras, como uma alternativa aos enxertos ósseos. Para comprovar a eficácia destes biomateriais, testes in vivo podem ser realizados, e uma forma adequada de se avaliar os componentes celulares envolvidos na regeneração tecidual é a análise de biópsias através da microscopia eletrônica. O objetivo deste trabalho é, portanto, realizar uma revisão de literatura sobre os principais biomateriais utilizados na regeneração óssea, a contribuição da microscopia eletrônica e perspectivas futuras. Salvador

Orientadores: Enilson Antônio Sallum, Karina Gonzales Silvério Ruiz Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba Resumo: O objetivo do presente estudo foi avaliar histometricamente o efeito dotransplante autógeno de células do ligamento periodontal (PDLCs), associado à regeneração tecidual guiada (RTG), no tratamento de defeitos de furca grau III criados cirurgicamente em cães. Inicialmente, as PDLCs foram obtidas das raízes do 2º pré-molar e do 1º molar inferior extraídos, bilateralmente, de sete cães da raça beagle. Em seguida, as células foram cultivadas in vitro e caracterizadas fenotipicamente. Lesões de furca grau III foram criadas nos 3os e 4os pré-molares inferiores e os defeitos foram aleatoriamente escolhidos para receber os seguintes tratamentos: Grupo Controle - instrumentação da superfície radicular com auxílio de curetas e posicionamento coronário dos retalhos (7); Grupo RTG - regeneração tecidual guiada (7); Grupo Esponja - RTG + esponja de colágeno (7); Grupo Células - RTG + células do ligamento periodontal embebidas na esponja de colágeno, na ausência de soro fetal bovino (7). Após três meses, os animais foram sacrificados e os blocos contendo os espécimes foram processados para análise histológica. Os parâmetros histométricos avaliados foram: extensão total do defeito (ETD), extensão não preenchida do defeito (ENP), novo cemento (NC), regeneração periodontal (RP), extensão de epitélio/conjuntivo (EEC), anquilose (ANQ), área total do defeito (ATD), área não preenchida (ANP), área preenchida (AP), área de novo osso (NO), área de epitélio/tecido conjuntivo (AEC). Resultados: A caracterização fenotípica, in vitro, demonstrou que as PDLCs foram capazes de promover a formação de nódulos minerais, bem como de expressar sialoproteína óssea (BSP), colágeno do tipo I (COL I) e a fosfatase alcalina (ALP). Histometricamente, a análise de dados demonstrou que o grupo tratado com células apresentou uma maior extensão de novo cemento (1,70 ± 0,60 mm; 2,87 ± 0,74 mm; 3,66 ± 0,95 mm e 4,82 ± 0,61mm, para os grupos controle, RTG, esponja e células, respectivamente; p

Orientação: Prof. Dr. José Luiz Lage-Marques Dissertação (Mestrado) - Universidade de Taubaté, Programa de Pós-graduação em Odontologia, Taubaté, 2008. Made available in DSpace on 2019-05-20T19:24:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carla Christina Rodrigues Costa.pdf: 862839 bytes, checksum: 583f770537e80c94acc3f5325cbe7cf1 (MD5) Previous issue date: 2008 Resumo: A odontologia, atualmente, conta com uma nova abordagem terapêutica no campo da regeneração tecidual. Essa abordagem baseia-se no uso de moléculas bioativas, mais especificamente as BMPs (Bone Morphogenetic Proteins). A presente revisão propõe-se a apresentar alguns relatos, existentes na literatura, do uso das BMPs como medicamento, dando embasamento para realização de novos experimentos que possam sugerir abordagens terapêuticas inovadoras na área da regeneração tecidual. As BMPs são proteínas pleiotrópicas, que estão envolvidas no desenvolvimento de vários órgãos do corpo humano, e, também, estão presentes nas várias fases da morfogênese dentária, controlando e modulando as atividades celulares. As BMPs têm o potencial de serem usadas, tanto para a regeneração do complexo dentina-polpa quanto para a regeneração do periodonto (osso, cemento, ligamento, gengiva), podem ser empregadas em cirurgias craniofacial para correção de anomalias adquiridas ou herdadas, correção de seqüelas de trauma craniano, seqüelas de câncer, defeitos ósseos e reparo da cartilagem têmporomandibular. Deste trabalho pode-se concluir que a BMP: (1) tem importância na regeneração tecidual como elemento chave na engenharia de tecido; (2) oferece a vantagem de ser uma abordagem mais biológica, gerando um tecido idêntico ao perdido; (3) tem sido bem estudada em vários experimentos clínicos, com muito sucesso, inclusive em humanos; e (4) poderá estar disponível como uma alternativa de terapia a ser empregada no consultório odontológico. Abstract: Nowadays, odontology counts on a new therapeutic approach in the field of tissue regeneration. This approach is based in the use of bioactive molecules, specifically the BMPs (Bone Morphogenetic Proteins). The present revision has in view to know the BMPs and its applications as medicines, offering support to the accomplishment of experiments that could suggest new proposes of treatment in the field of tissue regeneration. The BMPs are pleiotropic proteins that are involved in the development of many organs of the human body and they are also present in the several phases of dental morphogenesis, controlling and modulating the cellular activities. The BMPs have the potential to be used to the regeneration of the dentin-pulp complex as much as to the regeneration of the periodontium (bone, cementum, ligament and gingiva), and can be used in facial and cranial surgeries to the correction of acquired or inherited anomalies, correction of cranial trauma consequences, bone defects and repair of the temporal- mandible cartilage. From this review, we can conclude some topics about the BMP: (1) it has importance in the tissue regeneration as a key element in tissue engineering; (2) the BMP offers the advantage of being a more biologic approach, generating a new tissue that is identic to the lost one; (3) it has been studied in several clinic experiments, with great success, even including humans; (4) it probably will be available as an alternative of therapy, that may be used in odontologic rooms in the future. Mestre em Odontologia

Made available in DSpace on 2021-07-14T10:29:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007. Added 1 bitstream(s) on 2021-07-14T11:31:25Z : No. of bitstreams: 1 S1517-70762007000200016.pdf: 584082 bytes, checksum: a78c1cb39987cfea48bfde2bb3d7639d (MD5) Prototipagem rápida (PR) é uma expressão que designa um conjunto de tecnologias que tem em comum a construção de protótipos físicos a partir de seus análogos virtuais. A construção camada a camada permite a obtenção de formas de alta complexidade, não possíveis de serem obtidas por técnicas convencionais de usinagem, baseadas em subtração de material. Um resumo sobre PR e suas aplicações na área da saúde é apresentado. Menção especial é dedicada ao PROMED (Prototipagem Rápida na Medicina) - um projeto de cunho social que realiza pesquisa e desenvolvimento envolvendo aplicações de PR na área médica e que difunde no Brasil e no exterior os benefícios trazidos pela PR no planejamento e ensaio cirúrgico e, também, na construção de implantes de alto desempenho anatômico. Também é feita uma revisão bibiográfica acerca da aplicação de SLS - Selective Laser Sintering - em scaffolds para engenharia tecidual e das mais recentes tecnologias de prototipagem direta em metal para construção de implantes personalizados. Finalmente são apresentados resultados preliminares de experimentos para construção de scaffods com o biomaterial PHB - poli (hidroxi butirato) e nylon usando um equipamento SLS. Rapid Prototyping (RP) is an expression that is used for defining a set of technologies that have as a common characteristic the building of 3D physical prototypes, layer-by-layer, from their analogue virtual prototypes. The layer-by-layer building approach allows obtaining high complex shapes which cannot be obtained by the current most usual technologies based on material subtraction. A brief review about RP and its applications in the health domain is presented. A special mention is dedicated to the PROMED (PR in Medicine) - a non-profit research, development and knowledge diffusion project - focused on RP applied to medicine. Also it is reviewed the application of SLS - Selective Laser Sintering - for tissue engineering scaffolds and the most recent technologies for direct metal prototyping for building metal customized implants. Finally it is shown preliminary results of experiments to build scaffolds with PHB poly (hidroxy butirate) and nylon utilizing a SLS machine. Universidade Estadual Paulista, Unidade Diferenciada Sorocaba/Iperó Pontifícia Universidade Católica de São Paulo, Centro de Ciências Médicas e Biológicas Centro de Pesquisas Renato Archer, Divisão para Desenvolvimento de Produtos Universidade Estadual Paulista, Unidade Diferenciada Sorocaba/Iperó

Prototipagem rápida (PR) é uma expressão que designa um conjunto de tecnologias que tem em comum a construção de protótipos físicos a partir de seus análogos virtuais. A construção camada a camada permite a obtenção de formas de alta complexidade, não possíveis de serem obtidas por técnicas convencionais de usinagem, baseadas em subtração de material. Um resumo sobre PR e suas aplicações na área da saúde é apresentado. Menção especial é dedicada ao PROMED (Prototipagem Rápida na Medicina) - um projeto de cunho social que realiza pesquisa e desenvolvimento envolvendo aplicações de PR na área médica e que difunde no Brasil e no exterior os benefícios trazidos pela PR no planejamento e ensaio cirúrgico e, também, na construção de implantes de alto desempenho anatômico. Também é feita uma revisão bibiográfica acerca da aplicação de SLS - Selective Laser Sintering - em scaffolds para engenharia tecidual e das mais recentes tecnologias de prototipagem direta em metal para construção de implantes personalizados. Finalmente são apresentados resultados preliminares de experimentos para construção de scaffods com o biomaterial PHB - poli (hidroxi butirato) e nylon usando um equipamento SLS. Rapid Prototyping (RP) is an expression that is used for defining a set of technologies that have as a common characteristic the building of 3D physical prototypes, layer-by-layer, from their analogue virtual prototypes. The layer-by-layer building approach allows obtaining high complex shapes which cannot be obtained by the current most usual technologies based on material subtraction. A brief review about RP and its applications in the health domain is presented. A special mention is dedicated to the PROMED (PR in Medicine) - a non-profit research, development and knowledge diffusion project - focused on RP applied to medicine. Also it is reviewed the application of SLS - Selective Laser Sintering - for tissue engineering scaffolds and the most recent technologies for direct metal prototyping for building metal customized implants. Finally it is shown preliminary results of experiments to build scaffolds with PHB poly (hidroxy butirate) and nylon utilizing a SLS machine.

Introdução: A engenharia tecidual óssea com utilização de células-tronco mesenquimais é um campo de pesquisas com potencial para aplicação clínica em cirurgia plástica reparadora. Suas vantagens seriam ampliar as opções de reconstrução e diminuir a morbidade cirúrgica nas zonas doadoras. Não está definida na literatura médica a possibilidade de utilizar o osso liofilizado bovino nãodesmineralizado como estrutura tridimensional e carreadora celular para engenharia tecidual óssea. Objetivo: Avaliar o uso de células da medula óssea, com potencial osteogênico, agregadas a estrutura tridimensional de osso liofilizado bovino nãodesmineralizado para engenharia tecidual óssea, em modelo experimental heterotópico. Materiais e Métodos: Os animais doadores de células da medula óssea, assim como os animais receptores dos construtos ósseos, foram camundongos de linhagem isogênica C57Bl/6. Os construtos ósseos consistiram em osso liofilizado bovino não-desmineralizado (OL) associado a diferentes grupos celulares com potencial osteogênico, e foram implantados no plano subcutâneo no dorso dos animais, em procedimento cirúrgico compatível com a primeira etapa da confecção de retalho osteocutâneo pré-fabricado. Grupos de comparação (n=10 em cada grupo): 1) OL isoladamente (controle); 2) OL + células mononucleares da medula; 3) OL + células-tronco mesenquimais; 4) OL + células-tronco mesenquimais diferenciadas em meio osteoindutor. A aferição foi realizada após 5 semanas, com avaliação histológica e determinação da atividade de fosfatase alcalina. Resultados: A avaliação histológica não mostrou diferença entre os grupos de comparação. Em todas as amostras observou-se processo inflamatório crônico, com nítida reabsorção óssea, e com tecido conjuntivo fibroso circunjacente ao implante estendendo-se por entre as trabéculas ósseas. Não foram visualizados osteoblastos ou osteócitos viáveis, nem neoformação óssea, em nenhum dos cortes histológicos examinados. Os resultados da atividade de fosfatase alcalina também não mostraram diferença entre os grupos de comparação, com análise de variância entre grupos mostrando p=0,867. Discussão: No modelo estudado, a adição de células da medula óssea com potencial osteogênico sobre estrutura de osso liofilizado bovino não-desmineralizado não agregou propriedades osteogênicas ao material. Com isso, não se confirmou a perspectiva inicial de utilizá-lo como estrutura tridimensional e carreadora celular na engenharia tecidual óssea em sítio heterotópico. Para melhor definir o papel deste material, sugerem-se estudos subseqüentes que o avaliem em outros modelos experimentais, comparando com outros materiais de uso já estabelecido, e explorando separadamente cada etapa metodológica que possa influir no sucesso da engenharia tecidual óssea. Introduction: Bone tissue engineering using mesenchymal stem cells is a research area with potential applicability in reconstructive plastic surgery, aiming to broaden surgical choices and decrease morbidity in donor sites. It has not been established in the medical literature whether bovine non-demineralized lyophilized bone can be used as a scaffold and cell carrier for bone tissue engineering. Objective: To assess the use of bone marrow cells with osteogenic potential seeded on a bovine non-demineralized lyophilized bone scaffold for bone tissue engineering in a heterotopic experimental model. Materials and Methods: The donors of bone marrow cells, as well as the receptors of the osseous constructs were isogenic line C57BI/6 mice. The constructs consisted on bovine non-demineralized lyophilized bone (LB) with addition of different cell groups with osteogenic potential, and they were implanted into subcutaneous sites on the backs of the animals in a surgical procedure compatible with an osteocutaneous flap pre-fabrication. Comparison groups (n=10 each group): 1) LB alone (control group); 2) LB + marrow mononuclear cells 3) LB + mesenchymal stem cells; 4) LB + mesenchymal stem cells differentiated in an osteoinductive medium. The constructs were harvested at 5 weeks after implantation for histological analysis and alkaline phosphatase activity test. Results: The histological analysis did not show differences among the comparison groups. In all samples, chronic inflammatory process was observed, with evident osseous resorption, and with adjacent fibrous connective tissue rich in neovessels extending through bone trabeculae. Viable osteoblasts or osteocytes , as well as new bone formation, were not observed. Likewise, results of the alkaline phosphatase activity test have not shown any difference among comparison groups, with analys of variance between groups showing p value=0.867. Discussion: In this experimental model, the addition of bone marrow cells with osteogenic potential to a bovine non-demineralized lyophilized bone scaffold did not add osteogenic properties to the material. Therefore, the initial perspective of using it as a scaffold for bone tissue engineering in heterotopic sites could not be confirmed. In order to better define the role of this material, further studies should be conducted, assessing it in other experimental models, comparing it with other materials currently in use and separately exploring each methodological step that might influence the success of bone tissue engineering.

Art. de revisão (p.70-76) Submitted by ROBERTO PAULO CORREIA DE ARAÚJO (ppgorgsistem@ufba.br) on 2016-09-14T13:06:22Z No. of bitstreams: 1 R. Ci. méd. biol., v.4, n. 1-2005.pdf: 69659 bytes, checksum: 52cb6fabb0d86900f4a81aae8331b731 (MD5) Made available in DSpace on 2016-09-14T13:06:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 R. Ci. méd. biol., v.4, n. 1-2005.pdf: 69659 bytes, checksum: 52cb6fabb0d86900f4a81aae8331b731 (MD5) Previous issue date: 2005-01 A possibilidade de regeneração de tecidos e órgãos com algum tipo de dano biológico tem-se constituído numa preocupação notável ao longo dos séculos. Reconstruções ósseas adequadas dependem da regeneração tecidual desencadeada pela atividade de células-tronco mesenquimais. No entanto, o conhecimento da origem e das características fenotípicas dessas células, como também dos fatores que as governam, durante as etapas de formação e remodelação ósseas, é limitado. Técnicas de investigação sobre a sua replicação ex vivo e posterior implantação in vivo estão, atualmente, sendo implementadas. Por sua vez, recentes avanços na área de biomateriais têm concentrado esforços para a sua apropriada aplicação clínica. Este trabalho tem como objetivo revisar os aspectos mais relevantes acerca do emprego das células-tronco mesenquimais nas estratégias da bioengenharia tecidual óssea. Salvador

p.70 - 76 Submitted by RI Repositorio (repositorio@ufba.br) on 2011-06-14T01:43:44Z No. of bitstreams: 1 4178-10324-1-PB odon.pdf: 73017 bytes, checksum: 82cc65f0df8e8258a7127ef69dd367fb (MD5) Made available in DSpace on 2011-06-14T01:43:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 4178-10324-1-PB odon.pdf: 73017 bytes, checksum: 82cc65f0df8e8258a7127ef69dd367fb (MD5) Previous issue date: 2005 A possibilidade de regeneração de tecidos e órgãos com algum tipo de dano biológico tem-se constituído numa preocupação notável ao longo dos séculos. Reconstruções ósseas adequadas dependem da regeneração tecidual desencadeada pela atividade de células-tronco mesenquimais. No entanto, o conhecimento da origem e das características fenotípicas dessas células, como também dos fatores que as governam, durante as etapas de formação e remodelação ósseas, é limitado. Técnicas de investigação sobre a sua replicação ex vivo e posterior implantação in vivo estão, atualmente, sendo implementadas. Por sua vez, recentes avanços na área de biomateriais têm concentrado esforços para a sua apropriada aplicação clínica. Este trabalho tem como objetivo revisar os aspectos mais relevantes acerca do emprego das células-tronco mesenquimais nas estratégias da bioengenharia tecidual óssea. Salvador

Dissertação (mestrado) - Pontifícia Universidade Católica de Minas Gerais, Programa de Pós-Graduação em Odontologia Resumo: O objetivo desse estudo foi avaliar a localização e a expressão temporal das BMPs do tipo 2 e 4 em feridas alveolares de 17 ratos preenchidas ou não com matriz dentinária humana desmineralizada. Dois ratos foram usados como controle enquanto que os outros 15 tiveram os primeiros molares superiores extraídos sendo o lado esquerdo preenchido com matriz dentinária humana desmineralizada.Após 5, 10 e 21 dias os animais foram sacrificados e avaliados histologica e imunohistoquimicamente. Os resultados obtidas demonstraram uma elevação do número de osteoblastos marcados positivamente para BMP 2 e 4 por volta do décimo dia de experimento, além dos ratos apresentarem resposta imune variada ao implante. Abstract: This study was designed to examine the time-course localization and expression of BMPs 2 and 4 after implantation or not of demineralized human dentin in tooth extraction sockets of 17 rats. Two rats were used as controls and the others 15 had the upper first molars extracted and the left side were filled with thin slices of demineralized human dentin while the right side were left empty. After 5, 10 and 21 postoperative days, the animals were sacrificed and their tissues processed for the histological and immnunohistochemical avaliation. The results indicate an increase in the number of positive osteoblasts to BMP 2 and 4 immnunostainning on day 10 after implantation and a varying immune response in rats.

Made available in DSpace on 2015-08-06T16:12:35Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-06T16:43:55Z : No. of bitstreams: 1 ISSN1807-2577-2011-40-06-332-337.pdf: 130962 bytes, checksum: df285747df06a4aac4d115ad1cd0d6ce (MD5) O objetivo desta revisão de literatura é apresentar a aplicação da engenharia tecidual em cirurgias de elevação de assoalho do seio maxilar, relatando a influência dessas técnicas no aumento da altura e do volume ósseos no seio maxilar, e na osseointegração dos implantes instalados nas áreas enxertadas. A revisão foi realizada nas bases de dados PubMed e Scopus, utilizando-se as palavras-chave “scaffold” OR “tissue engineered” AND “sinus augmention” OR “sinus floor elevation”. Na busca inicial, 463 artigos foram selecionados, dos quais 19 artigos para leituras dos abstracts, chegando ao final a nove artigos, que foram selecionados para avaliação da aplicação da engenharia tecidual em cirurgias de elevação do seio maxilar. Apesar dos resultados positivos da engenharia tecidual em procedimentos de elevação do seio maxilar relatados nos artigos selecionados, existe a necessidade de mais estudos, com melhor padronização de modelos experimentais e dos materiais utilizados, para que se chegue a conclusões convictas acerca do efeito da aplicação da engenharia tecidual na formação óssea em procedimentos de elevação de seio maxilar. The purpose of this literature review is to present the state-of-the-art on the application of tissue engineering techniques in sinus lifts procedures, reporting the influence of these techniques in increasing bone height and volume in the maxillary sinus, and the osseointegration of the implants installed in the grafted areas. PubMed and Scopus databases were searched using the keywords “scaffold” OR “engineered tissue” AND “sinus augmention” OR “sinus floor elevation”. In the initial search 463 articles were selected, of which 19 were selected abstracts reading, with nine papers selected by the end, for evaluation of the application of tissue engineering techniques in sinus lift procedures. Despite the positive results of tissue engineering procedures in sinus floor elevation reported in the selected articles, further studies are still needed, for a better standardization of experimental models and materials used, leading to definitive conclusions about the effects of the application of tissue engineering procedures on bone formation in maxillary sinus lifting procedures. Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho, Departamento de Diagnóstico e Cirurgia, Faculdade de Odontologia de Araraquara, Araraquara, Rua Humaitá nº 1680, Centro, CEP 14801-903, SP, Brasil Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho, Departamento de Diagnóstico e Cirurgia, Faculdade de Odontologia de Araraquara, Araraquara, Rua Humaitá nº 1680, Centro, CEP 14801-903, SP, Brasil

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico, Programa de Pós-Graduação em Engenharia Química, Florianópolis, 2014. A celulose bacteriana (CB) é um polímero produzido por diversas bactérias, entre elas a bactérias do gênero Gluconacetobacter. Este polímero apresenta-se como uma rede de nanofibras com propriedades físico-químicas peculiares, o que o possibilita a ser utilizado como biomaterial em diversas áreas. Este biomaterial pode ter o seu espectro de aplicação ainda mais ampliado quando produzido com a incorporação de frações de extratos naturais. A Aloe vera (Aloe barbadensis Miller) é uma planta que apresenta propriedades terapêuticas e medicinais utilizadas há milhares de anos. Ela possui polissacarídeos em sua composição que atuam fortemente na regeneração e reparo de tecidos lesionados. O objetivo deste trabalho foi avaliar o comportamento das células de fibroblasto e queratinócito quando cultivadas na superfície mais porosa de membranas de CB pura e membranas de CB com incorporação de frações de Aloe vera (CB-Aloe), na perspectiva de se desenvolver futuramente um biomaterial que atue como substituto de pele humana. Por Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) mostrou-se que a incorporação de Aloe vera nas membranas CB não alterou a estrutura da rede nanofibras de CB pura. A análise por espectroscopia de infravermelho por refletância total atenuada (FTIR-ATR) identificou diferenças referentes aos grupos amino existentes nas frações de Aloe vera, bem como a presença de anéis piranosídicos, tais como de ß-D-manose e de ß-D-glicose. Foi possível identificar que células epiteliais quando cultivadas sobre a superfície porosa das membranas de CB com incorporação de duas frações específicas de Aloe vera (CB-G e CB-T) apresentaram atividade metabólica e proliferação celular mais expressiva do que as demais membranas estudadas. A biossíntese de colágeno por fibroblastos foi significantemente aumentada nas membranas de CB-Aloe quando comparada com a CB pura. A análise morfológica por MEV de células cultivadas sobre as membranas modificadas (CB-Aloe) mostraram que células epiteliais aderiram em todas as membranas, mas só foi observada que células cultivadas em CB pura e em CB com a incorporação de uma fração específica de Aloe vera (CB-F), estavam espraiadas indicando um efeito positivo dessa fração de Aloe vera na adesão celular. Abstract : Bacterial cellulose (BC) is a polymer produced by various bacteria, including the bacterium of the Gluconacetobacter genre. It is synthesized as a network of nanofibers with particular physicochemical properties, which make it a suitable biomaterial for the use in a variety of fields. The range of application of this biomaterial can be further expanded by the incorporation of natural extracts with biological activities. Aloe vera (Aloe barbadensis Miller) is a plant with well-documented medicinal and therapeutic properties, particularly active in regeneration and repair of injured tissues, mainly due to its particular polysaccharide composition. The objective of this study was to evaluate the behavior of keratinocyte and fibroblast cells when grown on the porous surface of pure BC membranes or on BC membranes incorporated with Aloe vera fractions (BC-Aloe), in view of the development of a biomaterial that could be used as human skin substitute. Scanning Electron Microscopy (SEM) analysis showed that the incorporation of Aloe vera into the BC nonofibers did not alter the original structure of the fiber network. Attenuated total reflectance Fourier transform infrared spectroscopy (ATR-FTIR) analysis identified differences in amino groups present in the membranes with or without Aloe vera, as well as the presence of pyranoside rings, such as ß-D-mannose and ß-D-glucose specifically in the BC-Aloe membranes. Metabolic activity and cell proliferation were more expressive when epithelial cells were cultured over the porous surface of BC membranes incorporated with two specific Aloe vera fractions (BC-T and BC-G). Biosynthesis of collagen was increased in fibroblasts cultivated on BC-Aloe membranes when compared to those cultivated on pure BC membranes. Morphological SEM analysis of cells cultivated over the modified membranes showed that epithelial cells adhered to all membranes, but spreading was only observed for cells grown on pure BC or BC incorporated with one specific Aloe vera fraction (BC-F), indicating a positive effect of this Aloe vera fraction on the cellular adhesion of the biomaterial.