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Made available in DSpace on 2016-01-28T16:56:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014. Added 1 bitstream(s) on 2016-01-28T17:02:48Z : No. of bitstreams: 1 ISSN2317-7705-2014-02-02-39-50.pdf: 280251 bytes, checksum: 270e44b4d20f54e42b3d76fc41c547e4 (MD5) Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Fundação para o Desenvolvimento da UNESP (FUNDUNESP) Mulheres grávidas são indivíduos com características próprias, padrões metabólicos, endocrinológicos e imunológicos transitórios e requerem cuidados especiais. Estimar a prevalência de parasitas intestinais em mulheres grávidas e uso de plantas medicinais por automedicação, é de extrema importância, pois podem levar ao aborto, morte ou malformação fetal. O presente trabalho teve como objetivos a realização de exames parasitógicos de fezes em 5.300 mulheres grávidas e entrevista sobre o uso de plantas medicinais. 1.165 mulheres apresentaram resultados parasitológicos positivos, com predominância de Entamoeba coli. A planta mais citada, foi hortelã (Mentha sp.). Para diminuir riscos de saúde desconhecidos para gestante e seu feto, medidas profiláticas contra parasitoses e uso racional de plantas medicinais na gravidez, são urgentes. Pregnant women are individuals own characteristics, metabolic, endocrinological and immunological transient patterns and require special care. To estimate the prevalence of intestinal parasites in pregnant women and use of medicinal plants for self-medication, it is extremely important, because they can lead to miscarriage, fetal death or evil training. The present study aims to conduct parasitological stool examinations in 5.300 pregnant women and interview about the use of medicinal plants. 1.165 women had positive parasitological results, with a predominance of Entamoeba coli. The most cited medicinal plant was “hortelã” (Mentha sp.). To reduce health risks unknown to pregnant woman and her fetus, prophylactic measures against parasites and rational use of medicinal plants in pregnancy, are urgent. Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho (UNESP), Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Araraquara (FCFAR), Departamento de Princípios Ativos Naturais e Toxicologia, Rodovia Araraquara Jaú, km 1, CEP 14801-902, Araraquara, SP, Brasil Universidade de Coimbra, Faculdade de Farmácia, Portugal Universidade de Sevilla, Faculdade de Farmácia, Espanha Universidade de Coimbra, Centro de Neurociências e Biologia Celular (CNC), Portugal Universidade Estadual de Ponta Grossa (UEPG), Departamento de Análises Clínicas e Toxicológicas, Laboratório de Parasitologia Clínica, Setor de Ciências Biológicas e da Saúde, Ponta Grossa, PR, Brasil Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho (UNESP), Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Araraquara (FCFAR), Departamento de Princípios Ativos Naturais e Toxicologia, Rodovia Araraquara Jaú, km 1, CEP 14801-902, Araraquara, SP, Brasil

Mestrado em Biologia Aplicada Parasite diversity has been poorly studied due to several factors, like the size of some species, location within the host, and the focus on groups with strong anthropogenic interests or with significant economic impact. Apicomplexa is a vast and diverse group of unicellular parasites with wide distribution and the most successful pathogen known to man. Within the group some genus have received little attention, like the case of Hepatozoon. They are poorly studied organisms requiring more sampling. Molecular screening techniques like PCR are quick and easy to use, and allow efficient detection of these parasites. It also allows sequencing which produce data for phylogenetic analyses. Nonetheless more data is necessary to correctly establish taxonomy and phylogenetic relations of the group. The aim of this work was to assess the diversity of parasites trough screening of tissue and blood samples from different amphibian species using specific parasite primers and reconstruct the phylogenetic relationships of the sequences produced. Several species of amphibians from Iberian Peninsula, Mediterranean Islands, Macaronesia region and Morocco were analyzed using specific parasite primers and blood smears were observed. Parasites were observed in several slides, with at least two Hepatozoon being identified, however primers fail to detect them. Only two parasites were amplified, a protozoan parasite, Ichthyopthirius multifiliis, identified in a Bufo calamita sample from Portugal, and a Apicomplexa parasite, Dactylosoma ranarum, in Pelophylax saharicus from Morocco. The primers used seem not to be useful with amphibians and new primers need to be developed to correctly assess the identity of the parasites observed In the smears. A diversidade de parasitas tem sido pouco estudada devido a vários fatores, como o tamanho de algumas espécies, a localização dentro do hospedeiro, e o foco em grupos com fortes interesses antropogénicos ou com impacto econômico significativo. Apicomplexa é um grupo grande e diverso de parasitas unicelulares e com uma ampla distribuição e é o agente patogénico com mais sucesso conhecido pelo homem. Dentro do grupo alguns gêneros têm recebido pouca atenção, como caso de Hepatozoon. Estes são organismos pouco estudados que requerem mais amostragem. Técnicas de rastreio molecular, como PCR, são rápidas e fáceis de usar, e permitem a deteção eficiente desses parasitas. Elas também permitem a sequenciação produzindo dados para análises filogenéticas. Contudo mais dados são necessários para determinar corretamente a taxonomia e as relações filogenéticas do grupo. O objetivo deste trabalho foi detetar a diversidade de parasitas através de screening de amostras de tecido e sangue de diferentes espécies de anfíbios, utilizando primers específicos e reconstruir as relações filogenéticas das sequências produzidas. Várias espécies de anfíbios da Península Ibérica, Ilhas do Mediterrâneo, região Macaronésia e Marrocos foram analisadas usando primers específicos para parasitas e esfregaços de sangue foram observados. Parasitas foram encontrados em vários slides, sendo possível a identificação de pelo menos dois Hepatozoon, no entanto os primers não foram capazes de detetar as infeções. Apenas dois parasitas foram amplificados atráves de primers Hep, um parasita protozoário, Ichthyopthirius multifiliis, identificado numa amostra de Bufo calamita de Portugal, e um parasita Apicomplexa, Dactylosoma ranarum, em Pelophylax saharicus de Marrocos. Os primers utilizados não parecem ser úteis com anfíbios e novos primers precisam ser desenvolvidos para corretamente identificar a identidade dos parasitas observados nos slides.

O ascorbil polifosfato (AP) foi utilizado como fonte de vitamina C em dietas artificiais para alevinos de pintado, Pseudoplatystoma corruscans (Siluriformes, Pimelodidae) durante três meses. Em uma dieta basal (0 mg de AP/kg de ração), foram adicionados 500, 1000, 1500, 2000 e 2500 mg de AP/kg. Não foram observadas diferenças entre os tratamentos (P > 0,01), quanto às variáveis de desempenho (ganho de peso, comprimento total, taxa de crescimento específico e conversão alimentar) e hematológicas. Entretanto, o grupo que recebeu a dieta isenta de vitamina obteve os piores resultados (P < 0,01) nas variáveis de infestação parasitária e ocorrência de deformidades. Dentro dos níveis de inclusão de AP, não foram encontrados efeitos de regressão polinomial para as variáveis estudadas, a não ser para os resultados de consumo de ração. Assim, pelos resultados obtidos, o nível de 500 mg de AP/kg foi suficiente para prevenir a ocorrência de deformidades e infestações parasitárias, possibilitando o melhor desenvolvimento dos alevinos.During three months Ascorbil polyphosphate (AP) was used as source of vitamin C in diets of the pintado, Pseudoplatystoma corsuscans (Siluriformes, Pimelodidae) fingerlings. 500, 1000, 1500, 2000 and 2500 mg of AP/kg diet were added to basic diet (0 mg AP/kg diet). No difference in weight gain, total length, specific growth ratio, feed conversion ratio and hematological analyses were reported. Occurrence of deformities and parasite infestation in fishes fed on diet without vitamin C were worse than those on other diets. No polynomial regression effects were observed in diets above 500 mg/kg, albeit results of food intake showed linear regression (P < 0,01). Thus 500 mg AP/kg diet was sufficient to prevent the occurrence of deformities and parasite infestation. Satisfactory development of the pintado fingerlings was ensued.

Submitted by Guilherme Lemeszenski (guilherme@nead.unesp.br) on 2013-08-22T18:45:01Z No. of bitstreams: 1 S1984-29612010000400016.pdf: 1324754 bytes, checksum: 3f6b8f9c661f3b5ff97f396bbbb6b406 (MD5) Made available in DSpace on 2013-08-22T18:45:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 S1984-29612010000400016.pdf: 1324754 bytes, checksum: 3f6b8f9c661f3b5ff97f396bbbb6b406 (MD5) Previous issue date: 2010-12-01 Made available in DSpace on 2013-09-30T19:33:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S1984-29612010000400016.pdf: 1324754 bytes, checksum: 3f6b8f9c661f3b5ff97f396bbbb6b406 (MD5) S1984-29612010000400016.pdf.txt: 13804 bytes, checksum: bde72f5d5bcf0549b8dab5adfc51ee4d (MD5) Previous issue date: 2010-12-01 Submitted by Vitor Silverio Rodrigues (vitorsrodrigues@reitoria.unesp.br) on 2014-05-20T13:39:01Z No. of bitstreams: 2 S1984-29612010000400016.pdf: 1324754 bytes, checksum: 3f6b8f9c661f3b5ff97f396bbbb6b406 (MD5) S1984-29612010000400016.pdf.txt: 13804 bytes, checksum: bde72f5d5bcf0549b8dab5adfc51ee4d (MD5) Made available in DSpace on 2014-05-20T13:39:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S1984-29612010000400016.pdf: 1324754 bytes, checksum: 3f6b8f9c661f3b5ff97f396bbbb6b406 (MD5) S1984-29612010000400016.pdf.txt: 13804 bytes, checksum: bde72f5d5bcf0549b8dab5adfc51ee4d (MD5) Previous issue date: 2010-12-01 Este trabalho relata o primeiro caso de cenurose no Estado de Mato Grosso do Sul, Brasil. Essa doença é causada por estágios larvais de Taenia multiceps (Leske, 1780). O animal no qual foi diagnosticado, tinha cerca de 18 meses de idade, oriundo de uma área endêmica no Sul do Brasil, integrante de um grupo de 30 ovinos importados para o Estado de Mato Grosso do Sul. O quadro clínico-patológico apresentado é aquele comumente descrito para herbívoros, infectados com o agente, especialmente ovinos. Os sinais clínicos relatados foram: apatia, nistagmo, cegueira intermitente, andar em círculos e pressão da cabeça contra obstáculos. Na necropsia foi observada uma lesão, no subcórtex do hemisfério cerebral direito, caracterizada por um cisto em forma de vesícula, medindo 4 cm de diâmetro, e seu interior preenchido por líquido translúcido com grande número de pequenas esferas brancas, identificadas como protoscolices. Os protoscolices foram identificados como Coenurus cerebralis, e os tecidos do cérebro submetidos complementarmente a exames histopatológicos para descrição da lesão. This paper reports the first case of coenurosis in the State of Mato Grosso do Sul, Brazil. This disease is caused by the larval stage of the tapeworm Taenia multiceps (Leske, 1780). The animal in which the disease was diagnosed was an 18-month-old ewe from an endemic area of Southern Brazil as an imported animal among a group of 30 sheep. The clinic-pathological condition was that commonly found in herbivores affected by the disease, especially sheep. Apathy, nystagmus, intermittent blindness, circling and pressing head against obstacles were the neurological signs reported. The necropsy showed that a brain lesion in the subcortex of the right hemisphere was a bladder-like cyst measuring 4 cm in diameter filled with a translucent fluid with a large number of white spherules (protoscolices) floating. In addition to the identification of the Coenurus cerebralis protoscolices, the brain tissue lesion was histopathologically described. Universidade Federal de Lavras (UFLA) Departamento de Cirurgia de Grandes Animais Universidade Estadual Paulista Departamento de Cirurgia Veterinária Universidade Federal de Pelotas Departamento de Clínica Médica de Grandes Animais Universidade Federal de Lavras (UFLA) Universidade Anhanguera Departamento de Anatomia Patológica Universidade Federal de Mato Grosso do Sul Centro de Ciências Biológicas e da Saúde Departamento de Patologia Universidade Estadual Paulista Departamento de Cirurgia Veterinária

O presente relato descreve os valores médios da relação esplenossomática (RES), hepatossomática (RHS) e o fator de condição alométrico (Ka) em tilápia-do-nilo (Oreochromis niloticus Trewavas, 1983), pacu (Piaractus mesopotamicus Holmberg, 1887), piauçú (Leporinus macrocephalus Garavello & Britski, 1988) e no híbrido tambacu (macho P. mesopotamicus x fêmea Colossoma macropomum Cuvier, 1818) naturalmente parasitados. Os espécimes de O. niloticus apresentaram-se parasitados por Trichodina sp.; L. macrocephalus por helmintos monogenóides; P. mesopotamicus por Anacanthorus penilabiatus (Monogenea) e Piscinoodinium pillulare e o tambacu por helmintos monogenóides, Lernaea cyprinacea e P. pillulare. Os resultados sugerem que o parasitismo seja responsável pela redução do fator de condição em O. niloticus, L. macrocephalus e P. mesopotamicus, assim como da relação esplenossomática em Piaractus mesopotamicus, sem afetar a relação hepatossomática dos peixes examinadosThe present paper describes the mean values of the splenosomatic (SSR) and hepatosomatic relation (HSR) and alometric condition factor (Ka) in the Nile tilapia (Oreochromis niloticus Trewavas, 1983), pacu (Piaractus mesopotamicus Holmberg, 1887), piauçu (Leporinus macrocephalus Garavello & Britski, 1988) and in the tambacu hybrid (P. mesopotamicus male x Colossoma macropomum Cuvier, 1818 female) naturally infected with parasites. Specimens of O. niloticus were parasitized with Trichodina sp.; L. macrocephalus with monogenean helminths; P. mesopotamicus with Anacanthorus penilabiatus (Monogenea) and Piscinoodinium pillulare (Dinoflagellida); tambacu hybrid with monogenean, Lernaea cyprinacea and P. pillulare. Results suggested that the parasitism was responsible for the reduction in the condition factor of O. niloticus, L. macrocephalus and P. mesopotamicus, and the SSR of parasitized P. mesopotamicus. Nevertheless, parasitism did not change (P > 0.05) the HSR of parasitized O. niloticus, L. macrocephalus, tambacu and P. mesopotamicus

Espécimes de Leporinus macrocephalus (piauçu) e de Piaractus mesopotamicus (pacu) foram colhidos em piscicultura do município de Franca (SP) para avaliação dos efeitos da infecção parasitária sobre a taxa de hemoglobina e de hematócrito, a concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM), o fator relativo de condição (Kn) e a distribuição percentual de células sangüíneas de defesa orgânica (leucócitos e trombócitos). Ambas as espécies apresentavam-se parasitadas por monogenea ou por monogenea e outros parasitas: monogenea e Trichodina sp; monogenea e Lernaea cyprinacea; monogenea e Piscinoodinium pillulare; monogenea e Ichthyophthirius multifiliis; monogenea, I. multifiliis e Trichodina sp. Os resultados demonstraram que os parâmetros estudados em L. macrocephalus e em P. mesopotamicus não foram significativamente (p > 0,05) alterados pelo parasitismo. A análise de regressão linear mostrou correlação negativa (p > 0,05) entre linfócitos e trombócitos em L. macrocephalus e correlação positiva (p > 0,01) da taxa de hemoglobina com o peso e com o comprimento total em P. mesopotamicus.Specimens of cultivated Leporinus macrocephalus (piauçu) and Piaractus mesopotamicus (pacu) were collected in a fishfarm at Franca, SP. Effects of parasite infection upon hemoglobin, hematocrit, mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC), condition factor (Kn) and differential count of defense cells (leucocyte and thrombocyte) were evaluated. Both fish species were parasitized by monogenean; monogenean and Trichodina sp; monogenean and Lernaea cyprinacea; monogenean and Piscinoodinium pillulare; monogenean and Ichthyophthirius miltifiliis; monogenean, I. multifiliis and Trichodina sp. Parasitism did not influence (p > 0.05) the studied haematological characteristics in L. macrocephalus and P. mesopotamicus. Linnear regression showed negative correlation (p > 0.05) between lymphocytes and thrombocytes in L. macrocephalus and positive correlation (p > 0.01) of the hemoglobin rate with fish weight and fish length in P. mesopotamicus.

O estudo avaliou a contaminação microbiológica e parasitológica de 88 hortas produtoras de verduras, das quais 47 haviam sido investigadas anteriormente. A taxa de contaminação foi de 38,3% nas hortas previamente investigadas e de 43,9% nas novas hortas. A segurança alimentar requer um contínuo e eficiente sistema de vigilância sanitária das hortas. This study evaluated the microbiological and parasitological contamination of 88 market gardens producing green vegetables, of which 47 had been investigated previously. The contamination rate was 38.3% in the market gardens previously evaluated and 43.9% in the new market gardens. Food safety requires a continuous and efficient sanitary surveillance system for market gardens.

Com o objetivo de avaliar o risco cumulativo de contaminação de hortaliças, investigou-se 45 cadeias produtoras. Foi detectada a presença de coliformes a 45ºC, Salmonella e/ou parasitas em 69% delas, em todas as etapas de produção. Ressalta-se a necessidade de se intensificar o controle de qualidade ao longo da cadeia produtiva. With the aim of assessing the cumulative risk of lettuce contamination, 45 production chains were investigated. The presence of thermotolerant coliforms, Salmonella and/or parasites was detected in 69% of these, in all steps of the production chain. Quality control in all steps of the lettuce production process should be intensified.

Fil: Guillade, Andrea Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Fil: Guillade, Andrea Cecilia. Universidad Nacional de Quilmes; Argentina. Guillade, A. C. (2017). Control biológico de hormigas cortadoras de hoja (FORMICIDAE: ATTINI) mediante parasitoides (DIPTERA: PHORIDAE). (Tesis de doctorado). Universidad Nacional de Quilmes, Bernal, Argentina. Las hormigas cortadoras de hojas de los géneros Atta y Acromyrmex son consideradas unas de las principales plagas en el Neotrópico, debido a que, para suministrar sustrato al hongo mutualista del cual se alimentan, cosechan grandes cantidades de material vegetal de un amplio número de plantas. Aunque su impacto sobre distintos cultivos se ha inferido en numerosas ocasiones, muchas de estas estimaciones sufren de imprecisiones, principalmente debido a la falta de datos tomados a campo a largo plazo, por lo que resultan poco confiables. Aún así, las hormigas son objeto de todo tipo de mecanismos de control, entre los cuales se destaca el control químico por medio de plaguicidas inespecíficos, tales como clorpirifós y fipronil, los más ampliamente utilizados en Argentina. Estos agroquímicos no han sido probados en ensayos de campo a largo plazo, por lo que no se conoce su efectividad real, particularmente teniendo en cuenta que las colonias de hormigas cortadoras son sumamente longevas y cuentan con miles a millones de obreras. Por otra parte, no se ha evaluado el impacto que el uso de estos plaguicidas tiene sobre los enemigos naturales de las hormigas, las moscas parasitoides de la familia Phoridae, de particular interés en esta tesis. El primer capítulo de esta tesis se aboca a responder dos cuestiones centrales al problema de las hormigas cortadoras como plagas agrícolas: estimar el consumo de Atta vollenweideri, considerada plaga ganadera, en pastizales utilizados para pastoreo vacuno, y el impacto de dicho consumo sobre la producción ganadera. Para ésto, realicé experimentos de exclusión en un pastizal natural de la provincia de Santa Fe, calculando producción primaria y consumo por parte de hormigas solas, y en situación de competencia con vacas. Encontré evidencias de competencia entre hormigas y ganado, aunque en situaciones de escasa producción el ganado resultó mejor competidor que las hormigas; además, establecí un nivel de daño económico (NDE) de 0,25 nidos por hectárea para A. vollenweideri, el primer NDE calculado para una especie de hormiga cortadora. En el segundo capítulo de la tesis exploré la efectividad de los dos plaguicidas más comúnmente utilizados en el control de hormigas cortadoras, así como su impacto sobre los parasitoides específicos de éstas. Para ello realicé ensayos en tres niveles: a campo durante un año sobre colonias de A. vollenweideri, en laboratorio sobre hormigas obreras colectadas a campo de caminos de forrajeo, y en laboratorio sobre pupas de fóridos. En los ensayos de campo, el clorpirifós resultó inefectivo a largo plazo, mientras que el fipronil produjo mortalidad casi completa de todas las colonias tras un único tratamiento. El ensayo sobre hormigas en laboratorio demostró una mayor efectividad inmediata del clorpirifós, mientras que el fipronil fue efectivo al cabo de un número mayor de días, lo cual explicaría su mayor efectividad sobre la colonia completa ya que, al permitir que las hormigas expuestas al plaguicida vivan más tiempo, ésto daría oportunidad de que ocurra transferencia horizontal del plaguicida entre congéneres de la colonia. El ensayo sobre pupas reveló un fuerte impacto negativo sobre los fóridos, produciendo una gran mortalidad pupal y reduciendo significativamente la longevidad de los adultos que consiguieron eclosionar. Como mencioné más arriba, varias especies de moscas de la familia Phoridae son parasitoides obligados de hormigas cortadoras, cumpliendo parte de su ciclo vital dentro del cuerpo de éstas. Investigaciones recientes describieron una gran cantidad de especies nuevas de fóridos de cortadoras en nuestro país. Por lo tanto, otro objetivo de mi tesis fue conocer en detalle el ciclo de vida de las especies de fóridos más abundantes sobre Atta vollenweideri y Acromyrmex lundii como especies hospedadoras modelo, las mejores condiciones para criarlas en laboratorio, y finalmente, evaluar su capacidad para afectar el funcionamiento de colonias completas en el campo. El tercer capítulo de la tesis contiene la descripción de los ciclos de vida. Para tal fin, colecté obreras de caminos de forrajeo de A. vollenweideri y de A. lundii, y las mantuve en el laboratorio a 25° ± 1°C y 80 ± 5% HR, separando las hormigas parasitadas y obteniendo los tiempos de desarrollo larval, pupal y total, la longevidad de los adultos, la supervivencia pupal, la tasa de parasitismo natural, la relación macho: hembra y el tamaño de los parasitoides para Apocephalus setitarsus, Eibesfeldtphora trilobata, Myrmosicarius brandaoi, Myrmosicarius gonzalezae (parasitoides de A. vollenweideri), Apocephalus neivai y Myrmosicarius catharinensis (parasitoides de A. lundii), así como el tamaño de hospedador preferido por todas las especies menos las del género Apocephalus, quienes presentan pupas libres. En el cuarto capítulo, exploré las mejores condiciones para criar fóridos en el laboratorio, colectando hormigas de los dos hospedadores modelo, y manteniéndolas bajo cinco diferentes combinaciones de temperatura y humedad relativa. Exploré por primera vez la posibilidad de criar fóridos a bajas humedades, ya que muchos de estos parasitoides se encuentran en zonas fitogeográficas áridas. Encontré que la mejor combinación para todas las especies estudiadas fue la de 24°C y 80% HR, ya que fue la que permitió obtener la mayor cantidad de pupas, así como la mayor supervivencia pupal, combinando estos dos factores en un Índice de Eficiencia de Cría. Encontré también que la longevidad de los adultos se prolonga significativamente a 20°C y 80% HR, lo cual resulta de interés práctico para conservar fóridos adultos con el propósito de sincronizar liberaciones en el campo. Finalmente, en el quinto capítulo me ocupé de evaluar el efecto que una de las especies de fóridos, Eibesfeldtphora trilobata, a diferentes densidades, ejerce sobre la tasa de consumo de material vegetal de colonias completas de Atta vollenweideri en el campo. Con tal fin, aislé caminos de forrajeo de nidos de esta hormiga en el campo, utilizando túneles construidos para este fin, y liberando en ellos 1 ó 4 fóridos, mientras que caminos aislados y sin fóridos actuaron como control. Tomé muestras de las hormigas que regresaban cargadas al nido antes de comenzar el experimento, cada 30 minutos durante la siguiente hora y media, y finalmente 30 minutos después de retirar los fóridos. Encontré que, a ambas densidades, la presencia de fóridos disminuyó significativamente el tráfico de hormigas en los caminos, el transporte de material vegetal, y el tamaño promedio de las obreras, de modo que las obreras de tamaño adecuado para ser parasitadas por E. trilobata se volvieron más escasas en presencia de este parasitoide. Si bien no hallé diferencias significativas entre los resultados obtenidos a una densidad de 1 y 4 fóridos, sí registré un efecto más prolongado sobre los caminos con 4 fóridos. En conclusión, los datos obtenidos a partir de esta tesis doctoral aportan información vital para poder diagramar programas de control biológico para hormigas cortadoras, tales como un nivel de daño económico, numerosas características de los ciclos vitales de las especies más abundantes en dos zonas fitogeográficas de gran importancia para la producción agrícola del país (Pampeana y Chaco seco), y las condiciones más apropiadas que optimizarían una cría masiva. Por otro lado, presenté evidencias acerca de la incompatibilidad de los plaguicidas más utilizados para programas de manejo integrado que incluyan dípteros parasitoides, y demostré la eficacia de Eibesfeldtphora trilobata como disruptora de la tasa de forrajeo de Atta vollenweideri. El efecto negativo en el ingreso de material vegetal, obtenido con un solo fórido por sendero, pone en evidencia resultados prometedores respecto de la introducción aumentativa de estos parasitoides en sitios donde estas hormigas revisten carácter de plagas. Leafcutter ants in the genera Atta and Acromyrmex are regarded amongst the main pests in the Neotropics because, in order to grow the mutualist fungus on which they feed, they harvest great amounts of plant material from a wide variety of plants. Although their impact on different crops has been inferred on numerous occasions, many of these estimations are riddled with imprecisions, mainly due to a lack of long term field data, thus being rather unreliable. Nonetheless, ants are subjected to all kinds of control mechanisms, among which the most popular is chemical control through inespecific agrochemicals such as chlorpyrifos and fipronil, the most widely used in Argentina. These agrochemicals have not been tested in long term field assays, and thus we do not know their true efficacy, particularly considering that leafcutter ant colonies are very long lived and include thousands to millions of workers. On the other hand, there are no evaluations of the impact that these substances have on natural enemies of ants, specifically the parasitoid flies in the Phoridae family, the main focus of this thesis. The first chapter in this dissertation focuses on answering two central questions about the issue of leafcutter ants as pests: to estimate the consumption of Atta vollenweideri, regarded as a pest to cattle rearing, in pastures used for grazing by cows, and the impact that this consumption has on cattle production. For this purpose, I conducted exclusion experiments in a natural pasture in Santa Fe province, calculating primary productivity and consumption by ants alone and in a situation of competition with cattle. I found evidence of competition between ants and cattle, although in situations of low productivity cattle seemed to win the competition. I established an economic injury level (EIL) of 0.25 nests per hectare for Atta vollenweideri, the first EIL to ever be calculated for a leafcutter ant species. In the second chapter of the dissertation I explored the effectiveness of the two pesticides most commonly used against leafcutter ants, as well as their impact on their specific parasitoids. For this purpose I carried out assays in three levels: in the field for a year on A. vollenweideri whole colonies, in the laboratory on A. vollenweideri worker ants collected from foraging trails, and in the laboratory on phorid pupae. In the field assays, chlorpyrifos was ineffective in the long term, whereas fipronil produced almost complete mortality of all colonies after only one application. The assay on ants in the laboratory showed that chlorpyrifos produced almost immediate mortality to all treated ants, whereas fipronil was effective after more days, which would explain its greatest effectiveness on whole colonies since, by allowing exposed ants to live longer, they would be able to come in contact with unexposed nestmates, allowing the horizontal transfer of the pesticide between them. The assay on pupae revealed that both pesticides have a great deleterious effect on phorids, producing high pupal mortality and significantly reducing the longevity of those adults who were able to emerge. As I mentioned above, several species of flies in the family Phoridae are obligatory parasitoids of leafcutter ants, completing part of their life cycle within the body of their hosts. Recent research has described a great amount of new species of leafcutter phorids in our country. Therefore, another objective of my thesis was to obtain detailed knowledge of the life cycle of the most abundant phorid species on Atta vollenweideri and Acromyrmex lundii as model host species, as well as the best conditions to rear them in the laboratory, and finally, to assess their ability to affect the performance of whole ant colonies in the field. The third chapter in the dissertation describes the life cycles of several phorid species. For this end, I collected workers from foraging trails of A. vollenweideri and A. lundii, and then kept them in the laboratory at 25° ± 1°C and 80 ± 5% RH, separating the parasitized ants and calculating the larval, pupal and total developmental times of the parasitoids, the longevity of the adults, the pupal survivorship, the natural parasitism rates, the male:female ratio and the size of Apocephalus setitarsus, Eibesfeldtphora trilobata, Myrmosicarius brandaoi, M. gonzalezae (parasitoids of A. vollenweideri), Apocephalus neivai and Myrmosicarius catharinensis (parasitoides de A. lundii), as well as the preferred host size for all the species with the exception of those in the genus Apocephalus, which have free-living pupae. In the fourth chapter I assessed the most adequate conditions to rear phorids in the laboratory, collecting ants from both model host species, and keeping them under five different combinations of temperature and relative humidity. I explored for the first time the possibility of rearing phorids at low humidity, since many of these species are native of arid phytogeographic regions. I found that the best combination of rearing conditions for all the species tested was 24°C and 80% RH, since that was the regime that allowed me to obtain the greatest number of pupae, as well as the highest pupal survivorship, two traits that I combined to calculate a rearing efficiency index (REI). I also found that adult longevity is significantly lengthened at 20°C and 80% RH, which is of great practical significance to conserve adult phorids with the purpose of synchronizing field releases. Finally, in the fifth chapter I assessed the effect of one phorid species, Eibesfeldtphora trilobata, at different densities, on the plant material consumption rate of whole Atta vollenweideri colonies in the field. For that end, I isolated foraging trails of this ant in the field, using tunnels built for this purpose, and releasing within them either 1 or 4 phorids, whereas other isolated trails without phorids acted as controls. I took samples of the ants returning to the nest before the beginning of the experiment, every 30 minutes after releasing the phorids for the next hour and a half, and finally a last sample 30 minutes after removing the phorids from the tunnels. I found that, at both densities, the presence of phorids significantly decreased ant traffic on the trails, transport of plant material and the average size of workers, so that those ants in the range of sizes preferred by E. trilobata for parasitism became scarcer when this phorid was present. Although I did not find significant differences between the results obtained at both phorid densities (1 and 4 per trail), I did record a more extended lag effect on the trails with 4 phorids. In conclusion, the data obtained in this thesis provide vital information to design biological control programs for leafcutter ants, such as the tools to calculate economic injury levels, numerous characteristics of the life cycles of the most abundant phorid species in two phytogeographic regions of great significance for the agricultural production of the country (Pampeana and Dry Chaco), and the most appropriate conditions to optimize a massive rearing of these parasitoids. On the other hand, I found strong evidence for the incompatibility of the most widely used synthetic pesticides with integrated pest management programs including dipteran parasitoids, and I proved the effectiveness of Eibesfeldtphora trilobata as a disruptor of the foraging rate in Atta vollenweideri. The negative effect on the transport of plant material, obtained with one phorid per trail, is highly promising for the augmentative introduction of these parasitoids to sites where these ants are actually pests.

Made available in DSpace on 2021-07-14T10:53:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013. Added 1 bitstream(s) on 2021-07-14T11:40:48Z : No. of bitstreams: 1 S1984-29612013000400539.pdf: 947216 bytes, checksum: 059608bfe1a744c1f0be5dc3aafd5df8 (MD5) O objetivo desde estudo foi avaliar a helmintofauna deSteindachnerina insculpta no rio Taquari, um tributário doreservatório de Jurumirim, estado de São Paulo, e verificar se algumaespécie pode agir como bioindicadora de impacto ambiental. A amostragem depeixes foi composta de 60 espécimes, com 30 indivíduos amostrados notrecho lótico e 30 no trecho lêntico. Foram encontrados osmonogenóides: Anacanthoroides mizelli, Diaphorocleidus kabatai,Urocleidoides sp. e Euryhaliotrema chaoi; odigenético Sphincterodiplostomum musculosum e metacercárias nãoidentificadas, o nematoide Travnema travnema e larvas nãoidentificadas; e o acantocéfalo Gorytocephalus plecostomorum. Aprevalência total de monogenóides (z = 3,14; p =0,002) e A. mizelli (z = 3,879; p ≤0,001) e também a abundância média de monogenóides total(U = 642,0; p ≤ 0,001) e A. mizelli (U= 623,5; p ≤ 0,001) foram maiores no trecho lêntico.Steindachnerina insculpta e seus monogenóidescompõem um grupo em potencial que pode ser usado para investigar impactosambientais, como mostrado neste estudo. The purpose of this study was to evaluate the helminth fauna ofSteindachnerina insculpta in the Taquari River, a tributaryof the Jurumirim reservoir in the state of São Paulo, and to investigate whethersome helminth species may act as a bioindicator of environmental impact. Thehost fish sample was composed of 60 specimens, with 30 individuals sampled in alotic stretch and 30 in a lentic stretch. The following were found: themonogeneans Anacanthoroides mizelli, Diaphorocleidus kabatai,Urocleidoides sp. and Euryhaliotrema chaoi; thedigenean Sphincterodiplostomum musculosum and unidentifiedmetacercariae; the nematode Travnema travnema and unidentifiedlarvae; and the acanthocephalan Gorytocephalus plecostomorum.The total prevalence of monogeneans (z = 3.14; p =0.002) and A. mizelli (z = 3.879; p ≤0.001), as well as the mean abundance of total monogeneans (U =642.0; p ≤ 0.001) and A. mizelli (U =623.5; p ≤ 0.001), were higher in the lentic stretch.Steindachnerina insculpta and its monogeneans comprise apotential group that could be used to investigate environmental impact, asdemonstrated in this study. Univ Estadual Paulista – UNESP, Instituto de Biociências Univ Estadual Paulista – UNESP, Instituto de Biociências

A mansonelose é uma doença cujo agente etiológico é a filária Mansonella ozzardi e é transmitida por algumas espécies de ceratopogonídeos e simulídeos, sendo apenas estes incriminados como vetores no Brasil, onde a doença é mais expressiva em comunidades ribeirinhas amazônicas. Isso confere a Rondônia um risco real de ocorrência desta filariose. Este trabalho investigou da ocorrência natural de M. ozzardi nas espécies antropófilas de simulídeos coletadas e os fatores epidemiológicos de risco para mansonelose na Comunidade Remanescente Quilombola de Pedras Negras, no Vale do Guaporé, Estado de Rondônia. Foram realizadas coletas de quatro dias mensais entre novembro de 2011 e outubro de 2012, de 6:00 às 18:30, com 30 minutos de intervalo durante os quais foi analisada a paridade das fêmeas capturadas. Duas espécies foram coletadas picando: Cerqueirellum pydanieli e Coscaroniellum quadrifidum. Houve maior abundância de fêmeas paríparas. Foram encontradas larvas de M. ozzardi em todos os estádios de desenvolvimento. A maior amostragem de simulídeos ocorreu no período das chuvas, ao qual ficaram restritas as coletas de C. quadrifidum. A atividade hematofágica foi maior no período vespertino para ambas as espécies de simulídeos. Os fatores climáticos temperatura e umidade foram considerados influentes na atividade da espécie C. pydanieli. Não houve correlações significativas com as demais variáveis e nem entre essas e C. quadrifidum. As taxas de infecção parasitária foram consideradas baixas o e o potencial de transmissão anual foi considerado alto em comparação a outros estudos. Até o presente, não houve registro de caso de mansonelose em Rondônia, no entanto, tanto C. pydanieli quanto C. quadrifidum apresentaram positividade para infecção por M. ozzardi, com exemplares contendo larvas metacíclicas, indicando que ambas as espécies são prováveis transmissoras de filária na região do Vale do Guaporé, Estado de Rondônia, Brasil. Mansonelliasis is a tropical filarial disease caused by M. ozzardi transmitted by black flies and midges. Only the black flies are vectors for this filariasis in Brazil, where the disease is more expressive in Amazonian riverside communities. This gives to Rondônia State a real risk of occurrence of this filariasis. This study investigated the natural occurrence of M. ozzardi in anthropophilic blackflies species collected and the epidemiological risk factors for mansonelliasis at the Remaining Community of Quilombo Pedras Negras, in the Guapore Valley, Rondônia State. Collections of four days per month between November 2011 and October 2012 were held from 6:00 to 18:30, with 30 minutes interval during which we analyzed the parity of females captured. A two species were collected biting: Cerqueirellum pydanieli and Coscaroniellum quadrifidum. There was a higher abundance of parous females. The M. ozzardi larvae were found in all stages of development. A larger sample of black flies occurred during the rainy season, which were restricted collections of C. quadrifidum. The biting activity was higher in the afternoon for both species of black flies. The climatic parameters temperature and humidity were considered influential in the C. pydanieli activity. There were no significant correlations with the other variables, nor between these and C. quadrifidum. The parasitic infection rates were considered low and the potential annual transmission was considered high compared to other studies. Until now, no case records of mansonelliasis in Rondônia, however, both C. pydanieli as C. quadrifidum were positive for infection by M. ozzardi with specimens containing metacyclic larvae, indicating that both species are probable carries of this filaria in the Guapore Valley, Rondônia State, Brazil.

This research evaluated the in vitro acaricidal activity of extracts from 21 plant species from the Pantanal of Mato Grosso do Sul. During stage I, a larval immersion test was performed using three extract concentrations (5%, 20%, and 40%). During stage II, we used only plants that showed over 95% efficiency at the 40% concentration in stage I in an amount sufficient for the adult immersion test. Aeschynomene denticulata, Angelonia hirta, Aspilia latissima, Caperonia castaneifolia, Centratherum punctatum, Crotalaria micans, Diodia kuntzei, Echinodorus paniculatus, Hyptis mutabilis, Lantana canescens, Melanthera latifolia, Ocotea diospyrifolia, Richardia grandiflora, Sebastiana hispida, Tocoyena formosa, Zanthoxylum rigidum, and Sesbania virgata (fruit extract) showed acaricidal activity against the larval stage ofRhipicephalus (Boophilus)microplus higher than 95% at a 40% (w/v) concentration, while Hippocratea volubilis and Randia armatashowed moderate efficacy and Croton glandulosus andSenna obtusifolia had no effect. The M. latifolia, A. hirta, R. grandiflora, and A. latissima raw extracts were evaluated for their activity against adults, and only A. hirta showed an efficacy close to 90%. Eighteen extracts had an efficacy of up to 95% against larvae at a 40% concentration, seven extracts were effective at 20%, and only one (Sebastiana hispida) was effective at a 5% concentration. Este trabalho avaliou a atividade acaricida in vitrode extratos de 21 espécies de plantas do Pantanal de Mato Grosso do Sul. Na etapa I, foi realizado um teste de imersão larval utilizando três concentrações de extrato (5%, 20% e 40%). Na etapa II, utilizou-se apenas as plantas que apresentaram eficácia superior a 95%, na concentração de 40% na etapa I e que apresentasse quantidade suficiente para o teste de imersão de adulto. Aeschynomene denticulata, Angelonia hirta, Aspilia latissima, Caperonia castaneifolia, Centratherum punctatum, Crotalaria micans, Diodia kuntzei, Echinodorus paniculatus, Hyptis mutabilis, Lantana canescens, Melanthera latifolia, Ocotea diospyrifolia, Richardia grandiflora, Sebastiana hispida, Tocoyena formosa, Zanthoxylum rigidum e Sesbania virgata (extrato do fruto) apresentaram atividade acaricida sobre larvas de Rhipicephalus (Boophilus)microplus superior a 95% na concentração de 40% (w/v), enquanto Hippocratea volubilis e Randia armataapresentaram eficácia moderada e Croton glandulosus eSenna obtusifolia não apresentaram efeito acaricida. Os extratos brutos de M. latifolia, A. hirta, R. grandiflora e A. latissima foram avaliados sobre adultos e A. hirta apresentou eficácia próxima de 90%. Dezoito extratos apresentaram eficácia de até 95%, contra larvas, na concentração de 40%, sete extratos foram eficazes a 20% e apenas um (Sebastiana hispida) foi eficaz na concentração de 5%.

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária De Novembro de 2011 a Abril de 2012, o principal objectivo foi conhecer a parasitofauna dos suínos da raça ibérica e javalis, zoonóticos e não zoonóticos, pertencentes às Comunidades Autónomas da Extremadura e Castilla y León (Espanha). O estudo parasitológico do porco Ibérico com base em amostras de fezes recolhidas antemortem e analisadas por métodos coprológicos qualitativos, quantitativo, coprocultura e Método de Baermann, em lotes de produção de 55 explorações pecuárias revelou que todas elas estavam infectadas pelo menos por um parasita, destacando a alta prevalência de Balantidium coli (94,5%), Subordem Strongylida (65,5%) e Família Eimeriidae (56,4%) e uma moderada presença de Metastrongylus spp. (23,6%), Trichuris suis (18,2%) e Ascaris suum (12,7%). Identificámos, em cinco de seis explorações estudadas, larvas L3 de Oesophagostomum spp. (83,3%). Os factores de risco obtidos a partir da análise dos inquéritos efectuados nas suiniculturas e que mais influenciam a presença de parasitas nessas explorações, são os relativos às medidas de biossegurança e às características das pocilgas (OR>1). O estudo da parasitofauna do porco Ibérico procedente de amostras biológicas recolhidas postmortem em matadouros, revelou que todos eles estavam infectados pelo menos por um parasita, destacando a alta prevalência de protozoários, Sarcocystis spp. (90,0%), B. coli (89,0%) e Família Eimeriidae (68,0%), uma moderada presença de Metastrongylus spp. (53,0% nos pulmões e 25,0% nas fezes), Toxoplasma gondii (25,9% mediante iELISA e 33,9% mediante nPCR) e T. suis (24,0%) e uma baixa prevalência de A. suum (8,0%), Subordem Strongylida (8,0%) e Echinococcus granulosus (3,0%) e a ausência de Trichinella spp. Os animais do sexo feminino foram mais susceptíveis à infecção por T. suis, os jovens a T. suis e Subordem Strongylida. Os procedentes dos municípios de Cáceres e Salorino, parecem mais susceptíveis a Metastrongylus spp., Família Eimeriidae, Subordem Strongylida e T. suis, os procedentes dos municípios de Brozas e Salorino a Sarcocystis spp. Os animais de raça 75% ibérica são mais susceptíveis a B. coli, Família Eimeriidae, Metastrongylus spp., Subordem Strongylida e T. suis e os criados em sistemas semiextensivos são mais susceptíveis a T. suis e Subordem Strongylida (p1). The study of the individual parasitofauna of Iberian pigs, through the examination of biological samples collected postmortem in slaughterhouses, showed that all specimens were infected by at least one parasitic species, with highlight to the high prevalence of protozoa, such as Sarcocystis spp. (90,0%), B. coli (89,0%) and members of Family Eimeriidae (68,0%), moderate presence of Metastrongylus spp. (53,0% in lungs and 25% in faeces), Toxoplasma gondii (25,9% with ELISA and 33,9% with nPCR) and T. suis (24,0%), low prevalence of A. suum (8,0%), Suborder Strongylida (8,0%) and Echinococcus granulosus (3,0%) and an absence of Trichinella spp. Female animals were more prone to T. suis infections, as well as the young ones, which are also more susceptible to parasitic agents of Suborder Strongylida. Animals from Cáceres and Salorino seem more vulnerable to Metastrongylus spp., Family Eimeriidae, Suborder Strongylida and T. suis, and those from Brozas and Salorino to Sarcocystis spp. Pigs 75% Iberian are more prone to B. coli, Family Eimeriidae, Metastrongylus spp., Suborder Strongylida and T. suis, and those raised under semi-extensive production systems are more susceptible to T. suis and Suborder Strongylida (p

RESUMO O estágio curricular decorreu na Escola Superior Agrária de Coimbra, integrado num projecto QREN, em subcontratação com uma empresa. O objectivo do projecto em curso foi o desenvolvimento de novas técnicas de diagnóstico de fasciolose. Este trabalho, especificamente fez a aplicação à técnica ELISA de proteínas recombinantes homólogas do antigénio de E/S. Realizou-se um ensaio de infecção experimental em ovinos fêmeas, de raça Merino, com 10 meses de idade. A avaliação imunológica fez-se por ELISA para pesquisa de anticorpos anti-Fasciola hepatica utilizando as seguintes proteínas: E/S, Cat L, Fh8-cys, Fh22 e Prx. Procedeu-se simultaneamente à avaliação parasitológica e de alguns parâmetros hematológicos. As proteínas de maior qualidade para o diagnóstico foram a Cat L e a E/S, as quais para a colheita à 5ª semana p.i mostraram sensibilidade de 67,5% e especificidade de 100% e, a E/S 87,5% e 100% respectivamente. À 11ª semana p.i., mostraram respectivamente uma sensibilidade e especificidade de 85,7% e 100% para a primeira e, 100% de sensibilidade e especificidade para a segunda. A eliminação de ovos nas fezes iniciou-se entre a 9ª e a 11ª semana p.i., sendo que outros parasitas estavam presentes, tais como Eimeria sp e estrongilídeos gastro-intestinais os quais não interferiram na qualidade do diagnóstico serológico. Palavras-chave: ELISA, anticorpos, proteínas, parasitas, especificidade, sensibilidade. TÍTULO DO RELATÓRIO: Fasciolosis diagnostic. ABSTRACT The traineeship was held in Coimbra School of Agriculture, part of a project QREN with an enterprise. The aim of the current project was the development of new diagnostic techniques for fasciolosis. This work had the aim to evaluate recombinant proteins homologous of the antigen E/S of Fasciola hepatica for the diagnostic of this parasitosis. An assay was carried out where femal sheep Merino, of 10 months old were infected with 120 metacercarae of F. hepatica. The immunological evaluation was done by ELISA for detection of antibodies anti- Fasciola hepatica using the following antigens: E/S, Cat L Fh8-cys, Fh22 and Prx. Simultaneously, the evaluation of some parasitological and haematological parameters were accomplished. Cat L and E/S showed to have a better performance. At the 5th week p.i., the sensitivity was of 67.5% and specificity of 100%, and for E/S, 87.5% and 100 % respectively. At 11th weeks p.i., the sensitivity and specificity were of 85.7% and 100% for the first and 100% sensitivity and specificity for the second. The elimination of eggs in the feaces started between the 9th and 11th week p.i., and others parasites were present, such as Eimeria sp and gastro-intestinal strongyles which did not affect the quality of serological diagnosis. Keywords: ELISA, antibodies, proteins, parasites, specificity, sensitivity.

Dogs are definite hosts for several zoonotic helminthes and protozoan. Rural areas from the Lobos District in the northeast of Buenos Aires province, Argentina, are mainly used for livestock activity, increasing in this way the number of dogs on farms as well as the human risk of parasitic infections. The aims of this research were to evaluate the endoparasitic infections in dogs from farms in the Lobos District and analyze their zoonotic importance as well as several risk practices and habits of the rural population. Forty-two dog fecal samples obtained in 21 farms were analyzed through coproparasitological methods and coproantigen tests, which resulted in an overall parasite prevalence of 69.05% and 80.95% of the parasitized farms. The most frequent parasites were Trichuris vulpis and Eucoleus aerophila (26.19%), Echinococcus granulosus (19.05%), Uncinaria stenocephala and coccids (14.29%). The analysis of epidemiological files showed several habits of the rural population considered as risk factors associated with the presence of fecal samples parasitized and the presence of E. granulosus on the farms. It is clear that people involved with the farms studied were exposed to several helminthes that could cause serious diseases like cystic echinococcosis, which can become an important public health issue and affect the economy worldwide. Os cães são hospedeiros definitivos de vários helmintos e protozoários zoonóticos. As áreas rurais do distrito de Lobos, no nordeste da província de Buenos Aires, Argentina, destinam-se principalmente à atividade pecuária aumentando desta forma o número de cães em fazendas, bem como o risco humano de infecções parasitárias. Os objetivos desta pesquisa foram avaliar as infecções endoparasitas em cães de fazendas do distrito de Lobos e analisar a sua importância zoonótica, bem como as práticas de risco e hábitos da população rural. Quarenta e duas amostras de fezes de cães obtidos em 21 fazendas foram analisadas pelos métodos coproparasitológicos e testes de coproantígenos, resultando numa prevalência de parasitas de 69,05% e 80,95% das propriedades parasitados. Os parasitas mais frequentes foram Trichuris vulpis e Eucoleus aerophila(26,19%), Echinococcus granulosus(19,05%), Uncinaria stenocephala e coccídeos (14,29%). A análise dos arquivos epidemiológicos mostraram vários hábitos da população rural como fatores de risco associados com a presença de amostras fecais parasitadas e a presença de E. granulosus em propriedades rurais. É evidente que as pessoas das fazendas estudadas foram expostas a vários helmintos que podem causar doenças graves como equinococose cística, que constitui importante problema de saúde pública e econômico a nível mundial.

Considered the resistance and predominance of the verminose in the sheep and goats species of the area of Cariri in Ceará and, trying to contribute for the agricultural products produced in this area, exams were accomplished in 1.193 sheeps and 557 goats. Was looked for to quantify the need to find better resources to the small cattle farmer can his guarantee subsistence in the field. Took this work that aimed at to know the infestation levels to contribute with the control of the problem of the sheep and goat verminose. High loads were verified would sponge of the family Strongyloidae, and for the goat species the average was of 2.041,13, that it differed significantly of the sheep species with average of 1.252,36 eggs for gram of feces. Considerando-se a resistência e predominância de verminose nas espécies ovinas e caprinas da região do Cariri Cearense e, tentando contribuir para os produtos agropecuários produzidos na região, foram realizados exames em 1.193 ovinos e 557 caprinos. Buscou-se quantificar a necessidade de se oportunizar melhores recursos para que o pequeno pecuarista possa garantir sua subsistência no campo. Realizou-se este trabalho que objetivou conhecer os níveis de infestação para contribuir com o controle do problema da verminose ovina e caprina. Constatou-se alta carga parasitaria da família Strongyloidae, sendo que para a espécie caprina a média foi de 2.041,13, que diferiu significativamente da espécie ovina com média de 1.252,36 ovos por grama de fezes.

Hematology is an important pathological and diagnostic tool. This paper describes the hematological parameters of 76 specimens of Hoplias malabaricus infested with monogenean parasites, which were collected from two lagoons. The hematological parameters included: erythrocyte count (Er), microhematocrit (Hct), hemoglobin (Hb), mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscular hemoglobin (MCH) and mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC). The blood parameters showed no significant changes associated with the infestation. Water temperature was found to be negatively correlated with MCV and Hct, with values of rs= −0.52, p

Dissertação de mestrado, Ciências da Computação (Processamento de Imagem), Faculdade de Ciência e Tecnologia, Universidade do Algarve, 2013 Leishmaniasis is an epidemic dangerous disease in tropical and sub tropical regions of the world and if it is not treated conveniently, it may cause several health infections and could even lead to the death of patients. Currently, there is no efficient vaccine for the disease and available treatments cause serious side effects such as toxicity and parasite resistance. Therefore, ongoing research in Drug Discovery and other related biological areas concentrate on finding adequate drug candidates for the disease. Drug discovery pipeline for Leishmaniasis disease facilitates so many biological techniques till now to understand level of effectiveness of different drug candidates for treating the disease. The accuracy and reliability of such techniques, however, highly depends on manual process of detecting, extracting, counting and analyzing components of interest such as cells, parasites and cytoplasm regions by expert biologists. Such kind of activities is subjected to so many human-made errors and is often considered to be too time and energy consuming. The existing computational based solutions, which are reduced, also suffer from limited level of analysis and in some cases inaccuracy of the results are evident. For instance, there is no package dedicated to Intracellular Parasites Counting, which is a central operation when researching drug candidates’ effects. The current research aims at addressing the urgent need to find a solution to the problem of investigating Infection Ratio of cells more accurately, which is in fact still lacking. A computational framework which fulfills all those mentioned tasks automatically, in an acceptable time range with maximum possible accuracy of the results is suggested. The proposed solution mainly uses Image Processing approaches to process clinical images and analyze the results. The visual and statistical results then could be used independently or as a complementary tool for laboratories to investigate infection ratio of drug candidates and even at a higher level introduce vaccines for the disease.

A planta parasita Striga asiatica, conhecida por pequeno-feiticeiro, constitui um dos maiores problemas no rendimento e produção do milho, em Angola. A elevada persistência das sementes de S. asiatica no solo implica a utilização de estratégias de gestão que afetem quer a emergência quer a viabilidade do parasitismo. Este estudo teve por objetivos controlar a planta-parasita em campos infestados por recurso a milho de polinização livre e resistentes ao imazapir (IR) cujas cariopses foram revestidas com 30 g ha-1do herbicida. Em 2009/10 e 2010/2011, foram instalados três ensaios, no Planalto Central de Angola, com variedades de milho IR e variedades autóctones, utilizando sementes com revestimento por herbicida (H30) e sem revestimento de herbicida (H0), sendo avaliados a emergência e ocrescimento de S. asiatica, e produtividade do milho. Comparativamente à testemunha, o revestimento das cariopses com imazapir evidenciou um controlo total da parasita. Observaram-se efeitos significativos (P < 0,05) na emergência de S. asiatica nos dois ensaios. Os resultados evidenciaram que o revestimento das cariopses por imazapir inibe (P < 0,001) a emergência da parasita para zero plantas por m-2, 12 semanas após a sementeira. Para além disso, observou-se que a utilização da imidazolinona inibiu a emergência de Striga sem prejuízo na produtividade do milho não resistente. O rendimento do milho, em média, duplicou. Todavia, a produção do milho variou significativamente com a variedade, mesmo na ausência da planta-parasita. As variedades de polinização livre de milho IR ZM521, ZM523 e ZM625, devido ao incremento na produtividade e às possibilidades de controlo da planta-parasita, poderão ser considerados para introdução na região., Revista de Ciências Agrárias, vol. 36 n.º 4 (2013)

As peptidases encontram-se envolvidas em diversas funções biológicas possuindo um papel importante na patogenicidade de várias infecções parasitárias. Em mamíferos, a actividade peptidica é controlada por inibidores endógenos, como as cistatinas e as serpinas. Os genes que codificam para inibidores homólogos às cistatinas e serpinas de mamíferos, encontram-se ausentes do genoma de tripanossomatídeos. A ecotina é uma proteína de Escherichia coli, capaz de inibir uma grande variedade de peptidases serínicas da família S1A, tais como a tripsina. Existem duas proteínas do tipo da ecotina em T. brucei, ISP1 e ISP2. A ausência de peptidases sensíveis à acção dos ISPs no genoma de Trypanosoma brucei, sugere que estes tenham como alvo as peptidases serínicas do hospedeiro. Linhas celulares de T. brucei deficientes em ISP1 (Δisp1), ISP2 (Δisp2) e em ambos os ISPs (Δisp1/2) foram produzidas com sucesso e a ausência dos inibidores comprovada com o uso de anticorpos monoclonais específicos contra o ISP1 e o ISP2, que reconhecem a proteina alvo em extractos de proteína total de parasitas selvagens mas não em extractos de parasitas mutantes. O efeito da ausência dos ISPs nas células foi avaliado in vitro e in vivo, verificando-se que a delecção individual de cada ISP não produz qualquer efeito nos parasitas que revelam um crescimento normal em cultura e padrões de infectividade em murganhos idênticos aos de parasitas selvagens. Em contraste, os parasitas Δisp1/2, embora possuam um crescimento normal in vitro com ausência de alterações morfológicas grosseiras, são caracterizados por um alteração na mobilidade e pela acumulação de micro-vesiculas na região da bolsa flagelar, consistente com um defeito no processo de endocitose/exocitose. Adicionalmente, por imunofluorescência foi possível localizar os ISPs no citoplasma e na perto da bolsa flagelar. Em conjunto, estes dados sugerem uma função intracelular, independente da actividade inibitória dos ISPs e provavelmente associada ao flagelo ou à bolsa flagelar. O papel biológico dos ISPs na interação parasita-hospedeiro foi também avaliada através da infecção de murganhos com os parasitas Δisp1/2.A monitorização da infecção demonstrou que a deleção de ambos os inibidores resulta em sobrevivência prolongada dos murganhos com cargas parasitárias reduzidas, sugerindo que os ISPs possuem um papel importante na sobrevivência do parasita. Em contraste com os resultados obtidos em Leishmania que atribuem diferentes funções a ISP1 e ISP2, este estudo sugere que existe uma redundância funcional dos mesmos em T. brucei, sendo necessária a presença de ambos para que o parasita estabeleça eficientemente a infecção no hospedeiro mamifero. Foram também realizados estudos de imuno-protecção em murganhos de modo a determinar o potencial dos ISPs como alvos terapêuticos. A imunização com ISP recombinante e o tratamento com anticorpos específicos contra ISP1 e ISP2 não produzem qualquer efeito protector ou neutralizante da infecção de murganhos, sugerindo que estes inibidores não constituem bons candidatos para o desenvolvimento de uma vacina ou terapia baseada em anticorpos. Peptidases are involved in several biological functions playing an important role in the pathogenicity of many parasitic infections. In mammals, one way in which the activity of these peptidases is controlledisby interaction with natural inhibitors, such as cystatins and serpins. In trypanosomatids, the genes encoding forendogenousinhibitors homologous to mammalian cystatins and serpins, are absent. Ecotin is an Escherichia coliprotein capable of inhibiting a wide range of serine peptidases from S1A family such as trypsin. Ecotin orthologues can be found in a restricted range of bacterial pathogens and also in trypanosomatid parasitic protozoa.In Trypanosomabruceitwo proteins of 19.7 kDa and 17.8 kDa were identified as ecotin-like inhibitors and given the generic name of Inhibitors of Serine Peptidases (ISP). The absence of peptidases predicted to be sensitive to the action of ISPs in T. bruceisuggests that these inhibitors are targeting the host’s serine peptidases, although their exact biological role was unknown. T. bruceimutant cell linesdeficientin ISP1 (Δisp1),ISP2 (Δisp2) and both ISPs (Δisp1/2) weresuccessfully generatedby targeted gene disruption. This was confirmed using monoclonal antibodies generated specifically against ISP1 and ISP2 that recognize the target protein in wild type and re-expressor cell lysates but not in the respective mutant cell line. Theeffect of ISP deletion in the parasiteswasdeterminedboth in culture andin micein vivo. The deletion of ISPgenes individually was shown to have no effect on the parasites in vitroor in vivo. However, different results were obtained for the simultaneous deletion of ISP1and ISP2. Although Δisp1/2parasites have normal growth and morphology in culture, they exhibit a motility defect and are characterized by the accumulation of small vesicles outside the flagellar pocket consistent with an endocytosis/exocytosis defect. Furthermore, immunofluorescence shows that both ISPs are localized in the cytosol and in small punctuated structures near the flagellar pocket region. These data suggests that ISPs have an intracellular function independent of their inhibitory activityand probably associated with the flagellar pocket.The biological role of ISP1 and ISP2 in the host-parasite interaction was also evaluated by infecting mice with Δisp1/2parasites. Parasitemia monitoring shows that the deletion of both ISPsresults in prolonged host survival with reduced or undetectable parasite loads, suggesting an important role for these inhibitors in the parasite’s survival. In contrast with recent findings of ISPs functionin Leishmania, that assigns different biological roles to ISP1 and ISP2, the present study reveals some functional redundancy of ISPs in T. brucei,with both inhibitors being required for the parasite to infect the mammalian host efficiently. Finally, immuno-protection studies were made, to assess the potential of ISPs as targets for therapy. Immunization with recombinant ISPs and treatment with antibodies specific against ISP1 and ISP2 had no protective or neutralizing effecton T. bruceiinfected mice, revealing that these inhibitors are poor candidates for an anti-disease vaccine or for antibody-based therapy.

O arquipélago dos Açores apresenta nove ilhas vulcânicas, sendo São Miguel a maior e mais populosa. Nesta região insular portuguesa, a Leptospirose é uma zoonose endémica, que afeta acidentalmente o Homem por contacto direto ou indireto com leptospiras patogénicas. Clinicamente, esta patologia apresenta diversos sintomas que podem ser semelhantes a uma gripe ou evoluir até um quadro fulminante, daí a necessidade de um diagnóstico preciso com confirmação laboratorial. A Fasciolose é outra importante doença zoonótica nos Açores que tem sido descrita como endémica neste arquipélago, causada pelo parasita Fasciola hepatica. A infeção humana pode ocorrer devido ao consumo de vegetais e/ou águas contaminados. O diagnóstico não é fácil, pois a infeção pelo parasita pode apresentar uma larga variedade de quadros clínicos. O objetivo deste estudo é contribuir para a clarificação de uma possível interação imunológica, ao nível da resposta humoral observada em indivíduos com diagnóstico clínico de Leptospirose e/ou Fasciolose, em pacientes da ilha de São Miguel que apresentam um quadro clínico e epidemiológico comum a ambas as patologias, contribuindo para um melhor diagnóstico diferencial. A amostra utilizada no estudo é composta por 280 soros de indivíduos residentes na ilha de São Miguel, que foram analisados entre 2005 e 2010 pela TAM (Técnica de Aglutinação Microscópica), para deteção de aglutininas anti-Leptospira interrogans s.l.. Nas amostras de soro com resultado positivo e inconclusivo pela TAM foi aplicada a técnica de rastreio micro-ELISA para o estudo da Fasciolose. Aplicou-se ainda a técnica de Imunoeletrodifusão (IED), como técnica confirmatória, nos soros com resultado positivo e em alguns inconclusivos (n=118) para a técnica micro-ELISA. Os resultados da TAM, previamente conhecidos, para o total de indivíduos estudados foram os seguintes: 124 (44,3%) negativos, 73 (26,1%) inconclusivos e 83 (29,6%) positivos. Estes soros foram submetidos ao teste micro-ELISA, tendo-se obtido 31,1% (n=87) resultados positivos, 31,4% (n=88) resultados inconclusivos e 37,5% (n=105) com resultado negativo para Fasciolose. Foram analisados os inquéritos clínico-epidemiológicos estabelecido para o estudo da Leptospirose humana em São Miguel para as amostras anteriormente referidas, verificando-se que os homens lavradores em idade ativa são o grupo com mais casos positivos para ambas as patologias. Além disso, os sinais e sintomas mais comuns nos doentes com resultado positivo para as duas doenças são semelhantes aos de uma gripe, e analiticamente foi notório que as transaminases, a FA/γGT (apenas nos doentes com Leptospirose) e a leucocitose tinham níveis elevados. Os resultados revelaram uma provável coinfeção em 36 doentes. A técnica de IED foi positiva em 28 amostras de soro, sendo que cinco tiveram resultado positivo para as três técnicas utilizadas. Estes resultados são promissores, demonstrando uma possível relação entre Leptospirose e Fasciolose, sendo que os respetivos agentes etiológicos partilham nichos ecológicos, o que justifica igualmente algumas semelhanças nos aspetos sociodemográficos e clínico-epidemiológicos na população afetada. The Azores archipelago features nine volcanic islands, São Miguel is the largest and most populous. In this Portuguese region, Leptospirosis is a endemic zoonosis, affecting man accidentally by direct or indirect contact with pathogenic leptospires. Clinically, this disease has many symptoms that can be similar to influenza like or evolved into a fulminant death thereof the need for an accurate diagnosis with laboratory confirmation. The Fascioliasis is another important zoonotic disease in the Azores, which has been described as being endemic to this archipelago caused by the parasite Fasciola hepatica. The human infection can occur due to consumption of contaminated vegetables and/or water. The diagnosis is not easy, since infection by the parasite may have a wide variety of clinical conditions. The objective of this study is to contribute to the clarification of a possible interaction at the immunological humoral response observed in subjects with a clinical diagnosis of Leptospirosis and/or Fasciolosis in patients from São Miguel Island and presenting a clinical and epidemiological condition common to both pathologies, contributing to a better differential diagnosis. The sample used in this study consists of 280 sera from individuals living on São Miguel Island, which were analyzed between 2005 and 2010 by MAT (Microscopic Agglutination Technique) for detection of anti-Leptospira interrogans s.l. agglutinins. The Serum samples which were positive and inconclusive by TAM were applied with the screening technique micro-ELISA for the study of Fascioliasis. Also it was applied the Imunoeletrodifusion technique (IED) as a confirmatory technique in positive and some inconclusive sera (n=118) for micro-ELISA technique. The results of TAM, previously known for the total subjects studied were: 124 (44.3%) negative, 73 (26.1%) inconclusive and 83 (29.6%) positive. These sera were tested by micro-ELISA thereby obtaining 31.1% (n = 87) positive results, 31.4% (n=88) inconclusive results and 37.5% (n=105) with a negative results for Fasciolosis. We analyzed the clinical-epidemiological surveys established for the study of human Leptospirosis in São Miguel Island, for the mentioned samples above, verifying that men, farmers in the active age group have the most positive cases for both diseases. Furthermore, the most common signs and symptoms in patients with positive results for both diseases are similar to the flu and analytically it was notorious that transaminases, FA/γGT (only in patients with Leptospirosis) and leukocytosis had elevated levels. The results revealed a probable co-infection in 36 patients. The technique of IED was positive in 28 serum samples, in which five sera were positive for the three techniques. These results are promising, showing a possible relationship between Leptospirosis and Fasciolosis whereas the respective etiologic agents share ecological niches which justify also some similarities in sociodemographic and clinical-epidemiological aspects in the affected population.

O Amyloodinium ocellatum é um parasita dinoflagelado que aparece em aquaculturas por todo o mundo, infectando as brânquias e o tegumento dos peixes. Esta parasita é particularmente relevante na aquacultura mediterrânica onde os surtos causam perdas consideráveis. Apesar de já terem sido experimentados vários tratamentos, nenhum deles se revelou efectivo na erradicação do parasita e ainda alguns dos químicos utilizados podem ter importantes efeitos nocivos sobre o ambiente. Deste modo, o objectivo deste estudo foi testar novos fármacos para impedir o desenvolvimento e/ou eliminar o parasita em peixes já infectados. Os fármacos utilizados neste estudo foram endoperóxidos, uma recente classe de antimaláricos. Na primeira parte deste estudo realizaram-se ensaios in vitro onde se testaram os efeitos de diferentes concentrações (0,1mM; 1 mM; 2mM e 2,5mM) dos fármacos NAD17, NAD19, LCD93 e LCD67A sobre a divisão dos tomontes. Às 24 e 48 horas de exposição a 0,1mM NAD19 e 1mM LCD93, os tomontes observados não tinham entrado em divisão. Na segunda parte realizou-se um ensaio in vivo no qual os fármacos foram administrados a juvenis de dourada (Sparus aurata) a uma concentração de 10μmol/kg através de tratamento oral. No ensaio in vivo avaliou-se o possível efeito profiláctico dos fármacos na infecção através da análise da abundância e prevalência do parasita, da eficácia dos fármacos e dos efeitos do parasita e do tratamento na fisiologia e no eixo do stress dos animais infectados através de análises enzimáticas e de parâmetros bioquímicos do sangue. As medições realizadas ao plasma sanguíneo e às brânquias de douradas com diferentes níveis de infecção de A. ocellatum revelaram que não existe diferença significativa entre os controlos e os endoperóxidos para a dose testada. Será necessário realizar mais ensaios para obter conclusões sobre o efeito dos endoperóxidos no controlo do parasita de peixes A. ocellatum.

p. 1-91 Submitted by Antonio Geraldo Couto Barreto (ppgms@ufba.br) on 2013-10-02T18:18:39Z No. of bitstreams: 1 TESE FINAL TOTAL 19-09.pdf: 5006094 bytes, checksum: b3c2eaab92221a19848b3eaf975c9789 (MD5) Approved for entry into archive by Patricia Barroso(pbarroso@ufba.br) on 2013-10-08T17:04:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TESE FINAL TOTAL 19-09.pdf: 5006094 bytes, checksum: b3c2eaab92221a19848b3eaf975c9789 (MD5) Made available in DSpace on 2013-10-08T17:04:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TESE FINAL TOTAL 19-09.pdf: 5006094 bytes, checksum: b3c2eaab92221a19848b3eaf975c9789 (MD5) Previous issue date: 2013 OBJETIVO: Estudar a associação entre asma e ascaridíase e sua distribuição espacial em crianças de 2 a 10 anos de idade, no bairro do Pedregal – Campina Grande - PB METODOLOGIA: Estudo transversal, no período de Janeiro e Novembro de 2007. Foram aplicados 1004 questionários padrão International Study of Asthma And Allergy in Childhood (ISAAC), e entregue o recipiente para coleta de material fecal. No exame parasitológico de fezes foi utilizado o método de Ritchie, para o cálculo da carga parasitária foi utilizado o método de Kato-Katz. A posição geográfica das residências foi registrada com um aparelho de GPS GARMIN. Foram utilizados o teste t e teste qui-quadrado (2) de Pearson e de Tendência Linear e Regressão Logística, com Odds Ratio (OR) e Intervalo de Confiança (IC). Para analise espacial o banco de dados e as coordenadas geográficas foram organizados no programa ArcGis 9.3, foi definida uma largura de banda de 50 metros e grade regular composta de 5 x 5 células. RESULTADOS: Associações das cargas parasitárias leve e pesada foram significativas para todos os sintomas da asma (p

RESUMO - Este trabalho avaliou a atividade acaricida in vitro de extratos de 21 espécies de plantas do Pantanal de Mato Grosso do Sul. Na etapa I, foi realizado um teste de imersão larval utilizando três concentrações de extrato (5%, 20% e 40%). Na etapa II, utilizou-se apenas as plantas que apresentaram eficácia superior a 95%, na concentração de 40% na etapa I e que apresentasse quantidade suficiente para o teste de imersão de adulto. Aeschynomene denticulata, Angelonia hirta, Aspilia latissima, Caperonia castaneifolia, Centratherum punctatum, Crotalaria micans, Diodia kuntzei, Echinodorus paniculatus, Hyptis mutabilis, Lantana canescens, Melanthera latifolia, Ocotea diospyrifolia, Richardia grandiflora, Sebastiana hispida, Tocoyena formosa, Zanthoxylum rigidum e Sesbania virgata (extrato do fruto) apresentaram atividade acaricida sobre larvas de Rhipicephalus (Boophilus) microplus superior a 95% na concentração de 40% (w/v), enquanto Hippocratea volubilis e Randia armata apresentaram eficácia moderada e Croton glandulosus e Senna obtusifolia não apresentaram efeito acaricida. Os extratos brutos de M. latifolia, A. hirta, R. grandiflora e A. latissima foram avaliados sobre adultos e A. hirta apresentou eficácia próxima de 90%. Dezoito extratos apresentaram eficácia de até 95%, contra larvas, na concentração de 40%, sete extratos foram eficazes a 20% e apenas um (Sebastiana hispida) foi eficaz na concentração de 5%. ABSTRACT - This research evaluated the in vitro acaricidal activity of extracts from 21 plant species from the Pantanal of Mato Grosso do Sul. During stage I, a larval immersion test was performed using three extract concentrations (5%, 20%, and 40%). During stage II, we used only plants that showed over 95% efficiency at the 40% concentration in stage I in an amount sufficient for the adult immersion test. Aeschynomene denticulata, Angelonia hirta, Aspilia latissima, Caperonia castaneifolia, Centratherum punctatum, Crotalaria micans, Diodia kuntzei, Echinodorus paniculatus, Hyptis mutabilis, Lantana canescens, Melanthera latifolia, Ocotea diospyrifolia, Richardia grandiflora, Sebastiana hispida, Tocoyena formosa, Zanthoxylum rigidum, and Sesbania virgata (fruit extract) showed acaricidal activity against the larval stage of Rhipicephalus (Boophilus) microplus higher than 95% at a 40% (w/v) concentration, while Hippocratea volubilis and Randia armata showed moderate efficacy and Croton glandulosus and Senna obtusifolia had no effect. The M. latifolia, A. hirta, R. grandiflora, and A. latissima raw extracts were evaluated for their activity against adults, and only A. hirta showed an efficacy close to 90%. Eighteen extracts had an efficacy of up to 95% against larvae at a 40% concentration, seven extracts were effective at 20%, and only one (Sebastiana hispida) was effective at a 5% concentration.

Remains of parasites in vertebrates are rare from the Mesozoic and Paleozoic. Once most parasites that live in – or pass through – the gastrointestinal tract of vertebrates, fossil feces (coprolites) or even intestinal contents (enterolites) can eventually preserve their remains. Here we announce the discovery of a spiral shark coprolite from the Paleozoic bearing a cluster of 93 small oval-elliptical smooth-shelled structures, interpreted as eggs of a tapeworm.The eggs were found in a thin section of an elasmobranch coprolite. Most of the eggs are filled by pyrite and some have a special polar swelling (operculum), suggesting they are non-erupted eggs. One of the eggs contains a probable developing larva. The eggs are approximately 145–155 mm in length and 88–100 mm in width and vary little in size within the cluster. The depositional and morphological features of the eggs closely resemble those of cestodes. Not only do the individual eggs have features of extant tapeworms, but their deposition all together in an elongate segment is typical to modern tapeworm eggs deposited in mature segments (proglottids). This is the earliest fossil record of tapeworm parasitism of vertebrates and establishes a timeline for the evolution of cestodes. This discovery shows that the fossil record of vertebrate intestinal parasites is much older than was hitherto known and that the interaction between tapeworms and vertebrates occurred at least since the Middle-Late Permian.

This study investigated the parasites of three commercially important bivalve species (Crassostrea rhizophorae, Mytella guyanensis and Lucina pectinata) from the southern coast of Bahia, Brazil. A total of 540 specimens were collected in August 2009 and February 2010, at three localities. The bivalve specimens were measured on their longest axis, opened, and macroscopically examined for the presence of parasites or signs of disease. They were then fixed in Davidson' solution and subjected to routine histological processing, with paraffin embedding and H&E staining; next, the specimens were examined under a light microscope. No parasites were observed associated with L. pectinata. Rickettsia-like organisms (RLOs), Sphenophrya sp. (Ciliophora), Nematopsis sp. (Apicomplexa), Urastoma sp. (Turbellaria) and Bucephalus sp. (Digenea) were observed in both C. rhizophorae and M. guyanensis, as well as Ancistrocoma sp. (Ciliophora) and Tylocephalum sp. (Cestoda) in the former. A high prevalence of Nematopsis sp. was seen, but caused no apparent damage to the host. Bucephalus sp. caused the destruction of tissues, with castration, but showed low prevalence. The other parasites occurred in low prevalence and intensity, without causing significant damage. Neste estudo foram investigados os parasitos de três espécies de bivalves de interesse econômico (Crassostrea rhizophorae, Mytella guyanensis e Lucina pectinata) da Bahia. Foram analisados 540 exemplares, obtidos em duas coletas (agosto-2009 e fevereiro-2010), em três localidades. Os bivalves foram medidos quanto ao seu maior eixo, abertos e examinados macroscopicamente quanto à presença de parasitos ou sinais de enfermidades. Depois disso, foram fixados em solução de Davidson e processados por rotina de histologia, com inclusão em parafina e coloração com H&E. O material foi examinado ao microscópio de luz. Nenhum parasito esteve associado a L. pectinata. Bactérias do tipo RLOs (organismos assemelhados a Rickettsia), Sphenophrya sp. (Ciliophora), Nematopsis sp. (Apicomplexa), Urastoma sp. (Turbellaria) e Bucephalus sp. (Digenea) foram observados tanto em C. rhizophorae quanto em M. guyanensis, sendo que a primeira apresentou ainda Ancistrocoma sp. (Ciliophora) e Tylocephalum sp. (Cestoda). Nematopsis sp. ocorreu em alta prevalência, porém, aparentemente, não causou danos aos bivalves. Bucephalus sp. causou destruição de tecidos, com castração, mas foi pouco prevalente. Os demais parasitos ocorreram em baixa prevalência e intensidade de infecção e sem causar danos.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Population of P. geoffroanus of Unidade Unidade de Conservação Estadual Monumento Natural Grota do Angico (MNGA) (37°40 W; 09°39 S) was studied in relation of their diet, morphometry, growth rates and mass gain, structure and dynamic population and parasites (leeches). The sampling of specimens was performed in monthly campaigns over a year (between January and December 2011) through active search between 07:00 and 13:00h, using snorkeling. Regarding diet was recognized 32 categories of food items. The pray with higher index of relative importance were of family Baetidae revealing a weak relationship between abundance of pray in environment and diet of tortoise composition and a high electivity of few catgegories of food items by specie. The indice of electivity (E) varied for different situations studied (e.g. size, sex, seasons). The macroinvertebrate community available in the environment showed subtle fluctuations between sesons (dry and wet). Males and females didn t differ in size, but presented distinct form. As for the mass, males and females did not show significatives differences. The young had higher average growth rate, almost double compared with adults (males and females). Census indicate the presence of at least 77 individuals on population. The overall sex ratio showed a higher shift in favor of males. The population estructure, we could notice the presence of individuals in all size classes, with predominance of adult males. Of the 77 catches of P. geoffroanus performed showed the presence of parasites in 67 (87%). With relation to recaputered animals, of 28 record, 26 (92,8%) presented re-infestation. The parasites observed were leeches of family Glossiphoniidae represente by three morphotypes. There were no differences in the numbers of leeches that parasited juveniles, males and females and neither relationship between body size of turtles and levels of infestation. Regarding the placement of these parasite, leeches were more frequent in the groin, probably because these places presented thinner coat, favorable to the establishment, protection against possible friction during displacement in aquatic environment and against desiccation during periods of assoalhament. Apart from leeches, were observed andoparasites (nematodes) from the samples of stomach contents and also platelminthes (Monogenea; Polystomatidae), which were lodged in oral and pharynx cavity, were fixated across multiple suckers. A população de P. geoffroanus da Unidade de Conservação Estadual Monumento Natural Grota do Angico (MNGA) (37°40 W; 09°39 S) foi estudada com relação a sua dieta, morfometria, taxas de crescimento e ganho de massa, estrutura e dinâmica da população e parasitas (sanguessugas). A amostragem dos espécimes foi realizada em campanhas mensais ao longo de um ano (entre janeiro e dezembro de 2011) por meio de busca ativa entre 07:00 e 13:00 h, utilizando-se mergulho livre. Com relação a dieta foram reconhecidas 32 categorias de itens alimentares. As presas com maior índice de importância relativa (IRI) foram da família Baetidae revelando uma fraca relação entre a abundância de presas no ambiente e a composição da dieta dos cágados e uma alta eletividade de poucas categorias de itens alimentares pela espécie. Os índices de eletividade (E) variaram para as diversas situações estudadas (e.g. tamanhos, sexo, estações). A comunidade de macroinvertebrados disponível no ambiente apresentou flutuações sutis entre as estações (seca e chuvosa). Machos e fêmeas não diferiram em tamanho, porém apresentaram formas distintas. Quanto às massas, machos e fêmeas não apresentarem diferenças significativas. Os jovens apresentaram uma taxa média de crescimento maior, quase o dobro, quando comparada com os adultos (machos e fêmeas). Os censos indicam a presença de pelo menos 77 indivíduos na população. A razão sexual total apresentou maior deslocamento a favor dos machos. Quanto a estrutura da população, pôde-se perceber a presença de indivíduos em todas as classes de tamanho, com a predominância de machos adultos. Das 77 capturas de P. geoffroanus realizadas foi constatada a presença de parasitas em 67 (87,0%). Com relação aos animais recapturados, dos 28 registros, 26 (92,8%) apresentaram reinfestação. Os parasitas observados eram sanguessugas da família Glossiphoniidae representadas por três morfotipos. Não foram verificadas diferenças nos números de sanguessugas que parasitavam jovens, machos e fêmeas e nem relação entre o tamanho do corpo dos quelônios e os níveis de infestação. Com relação ao posicionamento desses parasitos, as sanguessugas foram mais frequentes nas virilhas, provavelmente por estes locais apresentarem tegumento mais delgado, favorável a fixação, à proteção contra possíveis atritos durante os deslocamentos no ambiente aquático e contra a dessecação nos períodos de assoalhamento. Além das sanguessugas, foram observados endoparasitas (nematódeos) provenientes das amostras dos conteúdos estomacais e também de platelmintos (Monogenea; Polystomatidae), que se encontravam alojados na cavidade oral e faríngea, onde se fixavam através de múltiplas ventosas.

Tese de mestrado. Biologia (Biologia Celular e Biotecnologia). Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2012 Submitted by Lurdes Saramago (lurdes.saramago@fc.ul.pt) on 2013-04-26T16:56:24Z No. of bitstreams: 1 ulfc102760_tm_patricia_martins.pdf: 1941008 bytes, checksum: 0265598adc446e6809d3be3be815ef34 (MD5) Made available in DSpace on 2013-04-26T16:56:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ulfc102760_tm_patricia_martins.pdf: 1941008 bytes, checksum: 0265598adc446e6809d3be3be815ef34 (MD5) Previous issue date: 2012

As infeções por vermes parasitas do aparelho digestivo podem ser causa de do- ença nos ovinos e caprinos, afetando potencialmente a produção animal e, assim, o rendimento dos proprietários. Entre as consequências associadas a estas doenças estão a perda de peso, problemas reprodutivos, a diminuição da produção de leite e da qualidade e quantidade da lã. São ainda um fator potenciador de outras doenças (ex. clostridioses) e nos casos de graves infestações podem provocar a morte dos animais, sobretudo dos mais jovens. Todos os ovinos e caprinos albergam parasitas em maior ou menor grau, embora possam existir variações consoante o animal, o tipo de produção (intensiva/exten- siva), o local de pastoreio, as condições climáticas, o maneio da exploração, entre outras. As consequências das doenças parasitárias dependem da ação dos parasitas presentes no animal. Mesmo nas formas subclínicas (animais parasitados mas sem manifestações clínicas evidentes) as perdas económicas e produtivas são de igual modo consideráveis. Assim, sendo o parasitismo um problema difícil de erradicar, o seu controlo nas explorações de pequenos ruminantes é indispensável para a sobrevivência do setor. info:eu-repo/semantics/publishedVersion

A schistosomose é a segunda parasitose com maior impacto na Saúde Pública afectando mais de 200 milhões de pessoas que vivem em países subdesenvolvidos das regiões tropicais e subtropicais, sendo que 85% vivem em África. Trata-se de um complexo de infecções parasitárias crónicas e agudas, causadas por parasitas do género Schistosoma, sendo este grupo de parasitas habitantes dos vasos sanguíneos de mamíferos cuja distribuição geográfica e diversidade é superior a outros parasitas habitantes dos vasos sanguíneos. Os parasitas causadores desta patologia, em particular a espécie Schistosoma mansoni, têm a capacidade de criar mecanismos de escape ao sistema imunológico do hospedeiro, o que leva a variações no seu perfil genético conforme o ambiente a que estejam expostos, implicando variabilidade genética evidenciada através de polimorfismos genéticos. Assim sendo, efectuou-se o presente estudo com o objectivo de efectuar uma análise genética de estirpes de S. mansoni, com diferente susceptibilidade à infecção no hospedeiro definitivo através da técnica molecular RAPD-PCR. Para o efeito foram testados 10 marcadores RAPD, os dos quais apenas os OPI-7, OPI-12 e OPI-18 se mostraram mais eficientes para a análise de polimorfismos. Os vermes foram obtidos de murganhos normais Mus musculus, estirpe CD1, ER e a estirpe C57BL/6J dos quais foram obtidos os transgénicos Jα18−/− e TGFβRIIdn (com deficiência em células iNKT e silenciamento dos receptores para TGF-β respectivamente). Cerca de 40% (4/10) dos primers, demonstraram um perfil genético diferente, tendo sido gerados um total de aproximadamente 437 fragmentos e um padrão de amplificação com fragmentos cujos pesos moleculares variaram entre os 200pb e os 2000pb. Ao comparar os perfis RAPD de vermes obtidos do murganho CD1 com os demais, observou-se que este distinguiu-se dos vermes obtidos de C57BL/6J, Jα18−/− e TGFβRIIdn pela presença de três, um e seis fragmentos diferentes respectivamente. A análise de dendrograma demonstrou a existência de três agrupamentos distintos, o primeiro composto por vermes obtidos do murganho CD1 (apenas o verme fêmea), ambos sexos obtidos de murganhos da estirpe ER, C57BL/6J e Jα18−/−; o segundo composto pela fêmea e macho de vermes de S. mansoni obtidos de murganhos TGFβRIIdn e o terceiro obtidos de murganhos CD1 (apenas o macho). ix A análise dos perfis RAPD, mostrou-se útil como ferramenta para estudo de perfis genéticos de vermes de S. mansoni infectando hospedeiros definitivos com diferente padrão genético. Por outro lado, os perfis polimórficos identificados no presente estudo sugerem que o sistema imune do hospedeiro é capaz de induzir à pressão selectiva do parasita o qual pode ser observado através da análise de polimorfismos. The schistosomiasis is the second largest parasitic disease with impact on public health affecting more than 200 million people living in underdeveloped countries of tropical and subtropical regions, where 85% live in Africa. Is a complex of acute and chronic parasitic infections, caused by parasites of the genus Schistosoma, group of parasites population whose habitat is the blood vascular system of mammals has higher geographical distribution and diversity than other parasite population of blood vascular system. The parasites causing this disease, in particular Schistosoma mansoni, can create escape mechanisms to the host immune system, leading to variations in their DNA profile to the environment as they are exposed, resulting in genetic variability evidenced by genetic polymorphisms. The aim of this study was to assess whether different susceptibility to infection in definitive hosts, can produce genetic polymorphic profiles using a RAPD-PCR. For this purpose 10 primers were used for RAPD-PCR screening, of them, one, OPI-5 was not functional and the OPI-7, OPI-12 and OPI-18 where more efficient for the analysis of polymorphisms. Worms were collected from Mus musculus strain CD1, resistant and non-resistant to Praziquantel (strain BH) and from C57BL/6J, Jα18-/-, TGFβRIIdn mice both infected with S. mansoni (strain BH). Worms were collected and genomic DNA was extracted from each corresponding mice strain. About 40% (4/10) of the RAPD-PCR primers used presented different genetic profiles, generating 437 fragments and pattern amplifications whose molecular weights were between 200pb and 2000pb. For S. mansoni infecting C57BL/6J mice, the RAPD-PCR profile showed three different bands from the S. mansoni infecting CD1 mice profile. For S. mansoni infecting Jα18−/− mice the RAPD-PCR profile showed one different band from the S. mansoni infecting CD1 mice profile. For S. mansoni infecting TGFβRIIdn mice the RAPD-PCR profile showed six different bands from the S. mansoni infecting CD1 mice profile. The genetic similarity analysis, demonstrate the existence of three distinct clusters, one with S. mansoni infecting CD1 (only a female), female and male infecting ER, C57BL/6J and Jα18-/-; second cluster with female and male of S. mansoni infecting a TGFβRIIdn mice and third male infecting a CD1 mice. The RAPD-PCR analyzes, showed to be a very useful toll in genetic profiling S. mansoni infecting hosts with different genetic backgrounds and polymorphic profiles identified in this study suggest that the host immune system induce a selective pressure on the parasite genetic profile.

Tese de mestrado. Biologia (Biologia Celular e Biotecnologia). Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2012 Submitted by Lurdes Saramago (lurdes.saramago@fc.ul.pt) on 2013-04-09T15:03:41Z No. of bitstreams: 1 ulfc102795_tm_audrey_lopes.pdf: 4634885 bytes, checksum: b00cec20ce59a66ef0b6b2c2b381e888 (MD5) Made available in DSpace on 2013-04-09T15:04:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ulfc102795_tm_audrey_lopes.pdf: 4634885 bytes, checksum: b00cec20ce59a66ef0b6b2c2b381e888 (MD5) Previous issue date: 2012

O presente trabalho teve como objetivo avaliar a produção de peixes em dois diferentes sistemas de cultivo, policultivo e aquacultura multi-trófica integrada, tomando como referência o crescimento das espécies, o estudo patológico das brânquias e análise de conteúdo estomacal das espécies envolvidas no ensaio (Sparus aurata, Diplodus cervinus, D. puntazzo, D. sargus e D. vulgaris), e por fim foi feita uma abordagem teórica para identificar os custos envolvidos no sistema. Para realização do ensaio foram usados seis tanques, sendo dois tratamentos, em regime triplicado. Os resultados indicam uma boa adaptação dos peixes em ambos os sistemas. A biomassa inicial foi de 0,12 Kg.mˉ3, sendo formada por: 12% Sparus aurata (119,5g), 33% Diplodus puntazzo (134,7g), 45% D. sargus (90,3g), 3% D. cervinus (37,6g) e 7% D. vulgaris (93,1g) e em três tanques também com 42 Kg de Holoturia tubulosa, pepinos do mar, e 75 Kg de Crassostrea angulata, ostras. D. cervinus, D. vulgaris e D. sargus apresentaram baixa taxa de crescimento, ≤ 0,7g/dia, ambas as espécies, e Diplodus cervinus apresentou baixa taxa de sobrevivência em ambos os sistemas (57,8% poli cultivo e 73,3% IMTA). Diplodus puntazzo foi a espécie que melhor se adaptou ao sistema de policultivo simples. Sparus aurata foi a espécie que apresentou melhor taxa de crescimento e melhor taxa de sobrevivência nos dois sistemas. Os conteúdos alimentares apresentaram semelhança entre Diplodus cervinus, D. vulgaris e Sparus aurata, semelhantes também foram os itens alimentares identificados em D. sargus e D. puntazzo, entretanto a preferência alimentar das últimas espécies citadas são opostas as das três primeiras. S. aurata e D. puntazzo que apresentaram maior peso médio foram preferencialmente infestadas por Lamellodiscus spp.. Nas espécies com pesos médios inferiores, como D. cervinus, D. sargus e D. vulgaris foram maiores as infestações por Microcotyle spp.

Dissertação de mestrado em Ecologia, O conhecimento da prevalência de micro-organismos em uma população animal numa determinada região geográfica é importante para compreensão da distribuição das doenças mais comuns da espécie em estudo e sua importância para saúde pública. Com o crescimento demográfico e o processo de urbanização, houve um estreitamento na relação entre a população humana e os animais domésticos e silvestres, resultando na disseminação de agentes infecciosos e parasitários para novos hospedeiros e ambientes. Logo, o estudo ecoepidemiológico de animais silvestres e sua microbiota são de extrema importância para conhecer, intervir e recomendar ações que visem o controle de zoonoses. Considerando a rica biodiversidade do Brasil, principalmente no que diz respeito à fauna de lagartos, este trabalho teve como objetivo avaliar a riqueza, diversidade e frequência da microbiota fúngica e parasitária de Tropidurus hispidus e analisar seu potencial zoonótico, já que a espécie coexiste com seres humanos, animais domésticos e de produção. A investigação das doenças infecciosas e parasitárias ocorreu no contexto etiológico, ecológico e epidemiológico do meio urbano. Foram realizados exames microbiológicos de swabs de cavidade oral, visando a pesquisa de fungos filamentosos e leveduras, exames coproparasitológicos para pesquisa de enteroparasitas e inspeção visual para pesquisa de ácaros. Os 50 animais foram capturados por meio de coletas ativas manuais utilizando laço de Lutz, em área domiciliar e peridomiciliar do bairro de Sítio dos Pintos, localizado na Região Metropolitana do Recife, Pernambuco, Nordeste do Brasil. Os fungos isolados neste estudo foram Candida spp, Geotrichum sp., Paecilomyces sp., Cladosporium spp., Penicillium sp., Fusarium sp., Alternaria sp., Beauveria sp., Aspergillus spp., Coccidioides sp. e Mycelia strerilia. Constatou-se crescimento fúngico em 100% das amostras analisadas, observando-se maior ocorrência de fungos filamentosos (100%) em relação a leveduras (10%). Em 32% (n=16) das amostras, houve associação entre gêneros e/ou espécies de fungos. Na pesquisa de ectoparasitas, 47 lagartos apresentaram-se infestados, correspondendo a uma prevalência de 94%. Destes, 100% estavam exclusivamente infestados pelo ácaro Eutrombicula alfreddugesi e 2,08% estavam co-infestados por larvas do carrapato Rhipicephalus sanguineus. Quanto aos helmintos e protozoários, constatouse uma prevalência de infecção enteroparasitária de 98% (n=49), que incluiu os lagartos infectados com, no mínimo, um parasita. Houve associação entre dois ou mais gêneros de enteroparasitos, em 87,75% (n=43) dos indíviduos. Foram identificados os nematóides: Parapharyngodon sp., Physalopetara sp. e uma espécie de ascarídeo; e protozoários da família Eimeriidae: Eimeria sp. A frequência de ocorrência dos nematóides foi de: 87,75% (n= 43), 53,06% (n=26) e 46,93% (n=23) para Parapharyngodon sp., Physaloptera sp. e uma espécie de ascarídeo, respectivamente. Os protozoários do gênero Eimeria apresentaram frequência de ocorrência de 87,75% (n=43). A partir desses resultados, conclui-se que existe uma gama muito variada de fungos e parasitas em T. hispidus. Sendo assim, por compartilharem o mesmo ambiente com humanos e animais domésticos, essa espécie de lagarto pode apresentar risco à saúde pública, especialmente para indivíduos imunocomprometidos., The knowledge of the prevalence of microorganisms in an animal population within a particular geographic region is important for understanding the distribution of the most common diseases of the studied species and its importance to public health. With population growth and urbanization, there was a narrowing in the relationship between humans and domestic and wild animals, resulting in the spread of infectious and parasite agents to new hosts and environments. Therefore, the ecoepidemiologic study of wild animals and their microbiota are extremely important to understand, intervene and recommend actions that address the control of zoonoses. Considering lizards biodiversity of Brazil, this study aimed to evaluate the richness, diversity and the parasitic and fungal microbiota of Tropidurus hispidus frequency and analyzing the zoonotic potential, since the species coexists with human beings, domestic and production animals. The infectious and parasitic diseases survey was analyzed in the context of etiologic, epidemiological and ecological urbanism. Microbiological swabs of the oral cavity examinations were carried out, and examined for filamentous fungi and yeasts, fecal examinations for parasitic diseases research and visual inspection for mite. The 50 animals used in the research were captured by means of active collections, manuals and tie Lutz, in a domiciliary area of Sítio dos Pintos neighborhood, located in the Metropolitan Region of Recife, Pernambuco, Northeastern Brazil. Fungi isolated in this study were Candida spp, Geotrichum sp., Paecilomyces sp, Cladosporium spp, Penicillium sp, Fusarium sp, Alternaria sp., Beauveria sp., Aspergillus spp., Coccidioides sp. and Mycelia sterilia. Fungal growth was found in 100% of the samples analyzed, with a higher occurrence of filamentous fungi (100%) compared to yeast (10%). There was association between gender and/or species of fungi in 32% (n=16) of the samples. Regarding the survey of ectoparasites, forty-seven lizards were infested, corresponding to a prevalence of 94%. Of these, 100% were exclusively infested by the mite Eutrombicula alfreddugesi and only 2.08% were coinfested by larvae of the tick Rhipicephalus sanguineus. Enteroparasitic infection was found in 98% (n = 49), which included lizards infected with at least one parasite. There was association between two or more gender of helminths and protozoa in 87,75% (n = 46) of individuals. Nematodes have been identified: Parapharyngodon sp., Physalopetara sp. and a kind of ascarid; and protozoans of Eimeriidae family: Eimeria sp. The prevalence rate of nematodes was 87.75% (n = 43), 53,06% (n = 26) and 46,93% (n=23) for Parapharyngodon sp., Physaloptera sp. and a kind of ascarid, respectively. The protozoa of genus showed prevalence rate of 87,75% (n=43). Based on these results, there is a very wide range of fungi and parasites in T. hispidus. Therefore, as they share the same environment with humans and domestic animals, this species of lizard may represent a risk to public health, especially for immunocompromised individuals.

Data on in vitro evaluation of extracts of three species of the Asteraceae family on the development of Trichostrongylidae eggs in sheep are presented. Egg hatchability was tested using herbal extracts prepared in a Soxhlet extractor, and using hydrolate prepared by means of hydrodistillation. The laboratory tests showed that the ethanol extract from flowers of the species Aster lanceolatus presented high activity against Trichostrongylidae eggs development in sheep, inhibiting larva formation by 91% within 48 hours, and maintaining similar rates after 72 hours. Apresentam-se dados da avaliação in vitro de três espécies vegetais da família Asteraceae sobre o desenvolvimento dos ovos de Trichostrongilídeos de ovinos. Realizou-se o teste de eclodibilidade com extratos vegetais preparados por aparelho de Soxhlet e hidrolato preparado por hidrodestilação. Os testes laboratoriais evidenciaram que o extrato etanólico das flores da espécie Aster lanceolatus apresenta alta atividade sobre o desenvolvimento dos ovos de Trichostrongilídeos de ovinos, inibindo em 91% a formação da larva em 48 horas, mantendo-se índices próximos em 72 horas.

Myxosporea parasitize many organs in fresh and saltwater fish. Species of the genus Myxobolus parasitizing the gills and other organs of the tambaqui Colossoma macropomum have been described. In the present study, blood smears were made from juvenile tambaqui and were stained with May Grunwald-Giemsa-Wright in order to identify myxozoan parasites. Out of a total of 36 fish examined, one specimen (2.7%) that was reared in a cage presented spores that were identified as M. colossomatis, whereas fish kept in 250 L tanks showed prevalence of 5.5%. This is the first report of M. colossomatis in the blood of farmed tambaqui in the Amazon region. These results indicate that myxozoan parasites should also be investigated in fish blood smears. Some myxosporean species may cause diseases in fish, and these species need to be identified so that adequate preventive sanitary control can be instituted. Mixosporídeos parasitam diversos órgãos de peixes de água doce e salgada, tendo sido descrita espécie do gênero Myxobolus parasitando brânquias e outros órgãos de tambaqui Colossoma macropomum. No presente trabalho, extensões sanguíneas de juvenis de tambaquis foram confeccionadas e coradas com May Grunwald-Giemsa-Wright para identificação de parasitos myxozoários. Do total de 36 peixes examinados, um espécime (2,7%) cultivado em tanque-rede apresentou esporos identificados como M. colossomatis, enquanto os peixes mantidos em tanques com 250 L apresentaram prevalência de 5,5%. Esse é o primeiro registro de M. colossomatis no sangue de tambaqui cultivado na Amazônia. Esses resultados indicam que parasitos Myxozoa devem ser também investigados em extensões sanguíneas. Algumas espécies de mixosporídeos podem causar doença em peixes, sendo necessária a identificação da espécie para um adequado manejo sanitário preventivo.

Tese de mestrado. Biologia (Biologia Molecular e Genética). Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2011 Submitted by Lurdes Saramago (lurdes.saramago@fc.ul.pt) on 2012-06-04T16:15:39Z No. of bitstreams: 1 ulfc092784_tm_joana_carrelha.pdf: 2217938 bytes, checksum: 07256d36d2eeecd0128b0f605b81c515 (MD5) Made available in DSpace on 2012-06-04T16:15:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ulfc092784_tm_joana_carrelha.pdf: 2217938 bytes, checksum: 07256d36d2eeecd0128b0f605b81c515 (MD5) Previous issue date: 2011

Apresentação em painel O grande interesse manifestado pelos Serviços Veterinários Municipais do Concelho de Óbidos na implementação de medidas preventivas para minimizar os riscos de contaminação ambiental e de Saúde Pública, levou à realização dum estudo, durante o ano de 2009, nos canídeos deste concelho com vista à identificação do parasitismo e determinação dos períodos e áreas de maior risco de contaminação. Nas nove freguesias, recolheu-se um total de 548 amostras de fezes de canídeos (5,00 % do efectivo canino). Realizaram-se análises coprológicas qualitativas (métodos de Willis e sedimentação espontânea) e quantitativas (método de McMaster). Efectuaram-se ainda colheitas de ixodídeos em cerca de 10% da população de cães, durante o período de Vacinação anti-rábica e o seu estudo taxonómico baseou-se em Travassos Dias (1994) e Walker et al. (2000). Das amostras de fezes observadas, 274 (50%00 %) apresentaram formas de eliminação parasitária. Nas amostras positivas identificaram-se ovos de Ancylostomatidae (79,92%), (Ascarididae - Toxocara canis e Toxascaris leonina) (12,04%), Trichuris sp. (40,15%), Strongyloides sp. (18,98%), oocistos de Isospora sp. (2,55%) e Sarcocystis sp. (0,37%) e proglótides grávidos de Dipylidium caninum (0,74%). A prevalência variou consoante a freguesia em estudo (mínimo - 15,63%, em Sobral da Lagoa; máximo – 73,86%, no Vau). Predominarem as infecções simples na maioria das freguesias (55,56%), no entanto, quatro delas (44,44%), apresentaram superioridade de associações mistas (A-dos-Negros, Olho Marinho, Usseira e Vau). O estudo estacional permitiu evidenciar um aumento do número de amostras positivas, ao longo do ano: Inverno - 9,67%; Primavera - 11,86%; Verão - 13,50%; Outono - 14,96%. Com excepção do Inverno, onde se registou maior gravidade das infecções com superioridade de associações (50,94%), nas restantes estações, predominaram as infecções simples. No estudo dos ixodídeos, a carga parasitária média por animal foi de 5 exemplares. Predominaram os exemplares adultos (98,80%) relativamente às formas imaturas (1,21%). Verificou-se uma maior preponderância de machos (90 exemplares, 54,22%), relativamente às fêmeas (74 espécimes, 27,82%). Nos 166 exemplares colhidos identificaram-se duas espécies: Rhipicephalus sanguineus, com 150 exemplares, o que corresponde a 90,36%, e Rhipicephalus pusillus, com um total de 16 espécimes (10 machos e 6 fêmeas), equivalente a 9,64%. The great interest showed by the Veterinary County Offices on the implementation of prophylactic measures to minimize the risks of parasitic environmental contamination by dog faeces and its impact on Public Health, led to a study, to understand the existing parasitism and to assess the period and area of major risk of transmission. A total of 548 dog faeces samples (5% of the local canine population) was collected from public spaces, pavements, gardens and abandoned fields in nine sites. Coprological exams were performed by qualitative (Willis and spontaneous sedimentation methods) and quantitative techniques (McMaster method). Ixodid specimens were also collected from 10% of the local canine population, during the anti-rabic vaccination, and identified based on Travassos Dias (1994) and Walker et al. (2000) criteria. Egg output was registered in a total of 274 (50%) samples. Ancylostomatidae (79,92%), (Ascarididae - Toxocara canis and Toxascaris leonina) (12,04%), Trichuris sp. (40,15%) and Strongyloides sp. (18,98%) eggs, and Isospora sp. (2,55%) and Sarcocystis sp. (0,37%) oocysts were observed. Gravid proglotids of Dipylidium caninum (0,74%) was also evidenced. In the study area the overall prevalence varied from 15,63%, in Sobral da Lagoa to 73,86%, in Vau. Simple infection was predominant in the great majority of the studied areas, although four of them showed higher co-infections (A-dos-Negros, Olho Marinho, Usseira and Vau). Seasonal study enhanced an increase in the number of positive samples along the year (Winter - 9,67%; Spring - 11,86%; Summer - 13,50%; Autumn - 14,96%), excluding the Winter period, when more severe infections related to co-infections were noticed (50,94%), simple infections prevailed. In ixodid studies, the average of parasitic load was 5 specimens for dog. Adults were predominant (98,80%) in relation to immature (1,21%) and the number of males (90 specimens, 54,22%) was higher than females (74, 27,82). In a sample of 166 ixodids two species were identified: Rhipicephalus sanguineus, (150 individuals, 90,36%), and Rhipicephalus pusillus, (16 specimens, 9,64%).

Tese de mestrado. Biologia (Biologia Evolutiva e do Desenvolvimento). Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2011 Submitted by Lurdes Saramago (lurdes.saramago@fc.ul.pt) on 2012-03-19T17:16:15Z No. of bitstreams: 1 ulfc090976_tm_ana_ribeiro.pdf: 1914881 bytes, checksum: 3c15212d33cc28f60a5265e6c5e49330 (MD5) Made available in DSpace on 2012-03-19T17:16:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ulfc090976_tm_ana_ribeiro.pdf: 1914881 bytes, checksum: 3c15212d33cc28f60a5265e6c5e49330 (MD5) Previous issue date: 2011

We report the exploration of some unique metabolic pathways in Perkinsus olseni a marine protist parasite, responsible to significant mortalities in mollusks, especially in bivalves all around the world. In Algarve, south of Portugal carpet shell clam Ruditapes decussatus mortalities can reach up to 70%, causing social and economic losses. The objective of studying those unique pathways, is finding new therapeutic strategies capable of controlling/eliminating P. olseni proliferation in clams. In that sense metabolic pathways, were explored, and drugs affecting these cycles were tested for activity. The first step involved the identification of the genes behind those pathways, the reconstitution of the main steps, and molecular characterization of those genes and later on, the identification of possible targets within the genes studied. Metabolic cycles were screened due to the fact of not being present in host or differ in a critical way, such as the following pathways: shikimate, MEP-­‐ isoprenoids, Leloir cycle for chitin production, purine biosynthesis (unique among protists), the de novo synthesis of folates (absent in metazoa) and some unique genes like, the alternative oxidase (a branch of respiratory chain) and the hypoxia sensor HPH. All those pathways were covered and possible chemical inhibition using therapeutic drugs was tested with positive results. The relation between the common host Ruditapes decussatus and P. olseni was also explored in a dimension not possible some years ago. With the accessibility to second generation sequencers and microarray analysis platforms, genes involved in host defense or parasite virulence and resistance to the host were deciphered, allowing aiming to new targets (mechanisms and pathways), offering new possibilities for the control of Perkinsus in close environments. The thousands of genes, generated by this work, sequenced and analyzed from this commercial valuable clam and for Perkinsus olseni will be an important and value tool for the scientific community, allowing a better understanding of host-­‐parasite interactions, promoting the usage of P. olseni as an emerging model for alveolata parasites. Neste trabalho é descrito a exploração de algumas vias metabólicas únicas em Perkinsus olseni, um protista parasita marinho, responsável por mortalidades significativas em moluscos, especialmente em bivalves por todo o mundo. No algarve, a sul de Portugal as mortalidades da amêijoa boa Ruditapes decussatus podem ultrapassar 70%, sendo responsáveis por grandes prejuízos económico-­‐sociais. O objectivo de estudar estas vias únicas é encontrar novas estratégias terapêuticas para controlar/eliminar a proliferação do P. olseni em amêijoas. Para tal, várias vias metabólicas foram exploradas e drogas que pudessem afectar esses ciclos foram testadas em termos de inibição. O primeiro passo envolveu a identificação dos genes por de trás dessas vias, a reconstrução dos principais passos e a caracterização molecular dos mesmos, seguida da identificação dos possíveis alvos nos genes em estudo. As vias metabólicas foram escolhidas porque ou não estão presentes no hospedeiro ou são crucialmente diferentes como as seguinte vias: shikimate, MEP-­‐ isoprenoides, ciclo de Leloir cycle para a produção de quitina, biossíntese de purinas (única entre parasitas protistas), a biosíntese de folates (ausente em metazoa) e alguns genes únicos como, a oxidase alternativa (um atalho da cadeia respiratória) e um sensor de oxigénio, HPH. Todos estes metabolismos foram abordados e algumas drogas foram testadas com sucesso. A relação entre o hospedeiro mais comum, a R. decussatus, com o P. olseni foi explorada numa dimensão impossível a alguns anos atrás. Com a crescente acessibilidade a sequenciadores de segunda geração e a plataformas de análise de microarrays, os genes envolvidos na resposta do hospedeiro ou na virulência do parasita foram sendo decifrados, revelando novos alvos (mecanismos e vias metabólicas), oferecendo a possibilidade de controlar infestações do P. olseni em ambientes fechados. Neste trabalho, milhares de genes relativos à amêijoa e ao seu parasita foram revelados, tendo sido sequenciados e analisados, tornando-­‐se numa ferramenta importante e de grande valor para a comunidade científica. Tal permite compreender melhor a relação entre hospedeiro e parasita, promovendo a utilização do P. olseni como um modelo emergente para o estudo dos alveolatas.

Tese de mestrado. Biologia (Microbiologia Aplicada). Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências. 2011 Submitted by Lurdes Saramago (lurdes.saramago@fc.ul.pt) on 2012-05-24T15:02:47Z No. of bitstreams: 1 ulfc092809_tm_maria_albuquerque.pdf: 1500383 bytes, checksum: 4a0a6f005fc90735f8e7bd05b652a73d (MD5) Made available in DSpace on 2012-05-24T15:03:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ulfc092809_tm_maria_albuquerque.pdf: 1500383 bytes, checksum: 4a0a6f005fc90735f8e7bd05b652a73d (MD5) Previous issue date: 2011

Myxosporea parasitize many organs in fresh and saltwater fish. Species of the genus Myxobolus parasitizing the gills and other organs of the tambaqui Colossoma macropomum have been described. In the present study, blood smears were made from juvenile tambaqui and were stained with May Grunwald-Giemsa-Wright in order to identify myxozoan parasites. Out of a total of 36 fish examined, one specimen (2.7%) that was reared in a cage presented spores that were identified as M. colossomatis, whereas fish kept in 250 L tanks showed prevalence of 5.5%. This is the first report of M. colossomatis in the blood of farmed tambaqui in the Amazon region. These results indicate that myxozoan parasites should also be investigated in fish blood smears. Some myxosporean species may cause diseases in fish, and these species need to be identified so that adequate preventive sanitary control can be instituted. Made available in DSpace on 2011-11-14T18:48:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maciel.pdf: 179292 bytes, checksum: 2cd4ce167ac73367cf241fbe7face522 (MD5) Previous issue date: 2011-10-19

A presente dissertação tinha como objectivo geral aprofundar o papel desempenhado pelos neutrófilos durante as fases iniciais nainfecção por L. infantum, contribuindo para o esclarecimento dos mecanismos de activação da imunidade inata e adaptativa. O estudo foi programado de acordo com três objectivos específicos, cujo desenho experimental, resultados e respectivas discussões se encontram descritos nos capítulos 2, 3 e 4. No capítulo 1 foi efectuada uma introdução teórica sobre a patogénese da leishmaniose visceral, revendo os trabalhos relacionados com a interacção parasita-hospedeiro e focando o papel dos PMN, durante a infecção com Leishmania. No capítulo 2 foi avaliado o efeito do parasita nos mecanismos imunológicos de neutrófilos, através daanálise da fagocitose, respiração oxidativa, apoptose, quimiotaxia, desgranulação e expressão de citocinas, quimiocinas e receptores toll-like. Por outro lado,foi também analisadaa influência dos neutrófilos na viabilidade e no crescimento do parasita.Verificou-se que o parasita induz a activação de algumasdasvias da imunidade inata dos PMN,nomeadamente mecanismos oxidativos e não oxidativos como a produção de ião superóxido e a exocitose das enzimas proteolíticas, NE e CatG.Porém,os parasitas maisaptos parecem causara inibição da migração dos PMNe de mecanismos que levam à activação de outras subpopulações celulares, incluindo a expressão de quimiocinas (MIP-1α), citocinas (TNF-α, IL-6 e IL-1β) ou do receptor toll-like2, comprometendo o vínculonatural entre a imunidade inata e a adaptativa. No capítulo 3 foi dissecada a interacção M-PMNdurante a infecção in vitropor L. infantum, através da análise da capacidade fagocitária, expressão de citocinas, quimiocinas e receptores toll-likeem macrófagos, e produção de metabolitos do óxido nítrico. Verificou-seque L. infantuminduz a activação da resposta imunológica através da via de estimulação do TLR-4 de Mmodulando a expressão de quimiocinas e citocinas pró (TNF-α e IL-6) e anti-inflamatórias(TGF-β), potenciadapela presença inicial de PMN. Oparasita parece também bloquear a produção de NO,ena fase inicialda infecção e na presença de PMN este bloqueio, associadoa níveis reduzidos da citocina pro-inflamatóriaIL-1β e da quimiocina MCP-1, induz um fenótipo anti-inflamatório, possivelmente para evitar o excesso de resposta inflamatória que advém da colaboração entre PMN e M. Todavia, o decréscimo drástico doparasitismo macrofágicodeverá estar relacionado comoutros factores imunológicos que podem ser potenciados pela cooperação dos Mcom os PMN e/ou interacção prévia dos PMN com o parasita. No capítulo 4 foi avaliadoin vivoo papel dos PMN durante o início da infecção experimental por L. chagasi,através daimunofenotipagem das populações leucocitárias recrutadas para o local da inoculação dos parasitas, da determinação da presença do parasita e da quantificação da expressão de citocinas em órgãos internos após deplecção de PMN. Observou-se que a ausência dePMN, apesar de não influenciar as populações leucocitárias no local de infecção, parece retardar a remoção dos parasitas e afectar a possível migração de leucócitos parasitados para os órgãos internos, nomeadamente para os gânglios cervicais. No entanto,em qualquer das situações há disseminação dos parasitas para os gânglios.A deplecção de PMN parece também influenciaro perfil de citocinas induzidaspeloparasita no início da infecção, conduzindo à expressão de citocinas pró e anti-inflamatórias (IL1-β, TNF-α, TGF-β e IL-17). A produção de granzima B juntamente com a inibição de IFN-γ numa fase posterior da infecção, é ainda um reflexo possível da ausência inicial de PMN. Resumindo, na infecção por L. infantumos PMN, estão envolvidos no controlo inicial de uma parte dos parasitas, enquanto outros, provavelmente os mais virulentos, conseguem subsistir, reinfectar novas células e passar para as células hospedeiras definitivas, os Mque são recrutados ao local de infecção através do estímulo provocado por quimiocinas. Os M, por sua vez, expressam o receptor de reconhecimento toll-like4 e citocinas pró-inflamatórias associadas à inibição da expressão da IL-1β. Numa fase posterior da infecção, a expressão de TLR-4 mantém-se mas a carga parasitária diminui drasticamente. Independentemente da presença de PMN no local de infecção, os parasitas são disseminados para os órgãos linfóides, porém, os PMN influenciam a regulação da complexa sinalização de citocinas nestes órgãos. Este trabalho evidência o papel crucial dos PMN no desencadear da resposta imunológica na infecção por L. infantum, sendo a primeira barreira de controlo contra o parasita através da indução dos mecanismos de imunidade inata, recrutamento e estimulação de outras células, nomeadamente MΦ e linfócitos. The present work aimed to deepen the role of neutrophils during the early stages of L. infantuminfection and to contributeto the elucidation of activation mechanisms of innate and adaptive immunity. The study was plannedin accordance with threespecific objectives described in Chapters 2, 3 and 4.Chapter 1 describes the pathogenesis of visceral leishmaniasis, reviewing the host-parasite interaction,focusing on the role of PMN during Leishmaniainfection.In Chapter 2 the effect of the parasite onneutrophilimmune mechanismsis delineated, through the analysis of phagocytosis, oxidative burst, apoptosis, chemotaxis, degranulation and expression of cytokines, chemokines and toll-likereceptors. The influence of neutrophils onparasite viabilityand growthwas also analyzed. It wasfound that Leishmaniainducedthe activation of some pathways of PMN innate immunity, which includesoxidative and non oxidative mechanisms such as,production of superoxide ion and exocytosis of proteolytic enzymes, NE and CatG. However, the more fitparasites seemedto cause the inhibition of PMN migration and the mechanisms that lead to activation of other leukocytepopulations, including the expression of chemokines (MIP-1α), cytokines (TNF-α, IL-6 and IL-1β)or toll-like 2 receptor, affecting the natural link between the innate and adaptive immunity.Chapter 3 dissectsthe MΦ-PMN interaction during in vitroinfection by L. infantumthrough the analysis of phagocytosis capacity, expression of cytokines, chemokines and toll-likereceptors in MΦ, and the production of metabolites of nitric oxide. It was found that L. infantuminduced the activation ofimmune response through the stimulation of MΦTLR-4,modulating the expression of pro-inflammatory chemokines and cytokines (TNF-αand IL-6) and anti-inflammatory (TGF-β), boosted by the initial presence of PMN. The parasite also blocksthe production of NO in the early phase of infection and in the presence of PMN. This blockade associated to reduced levels of IL-1βand MCP-1,favor an anti-inflammatory macrophage phenotype that may prevent the excessive inflammatory response resulting fromthe cross talk between PMN and MΦ. However, the drastic decrease of macrophage parasitism should be related to other immunological factors that can be enhanced by MΦ-PMN cooperation and/orPMN interaction with the parasite.Chapter 4 accessesin vivothe role of PMN during the early stageof L. chagasiexperimental infection by immunophenotyping leukocyte populations recruited to the site of parasite inoculation, determining the presence of the parasite andquantifying cytokine expression in internal organs after PMN depletion. It was observed that absence of PMN, while not influencing the leukocyte population at the site of infection, appearedto slow the removal of parasites,affecting the possible migration of leukocytes to internal organs (cervical lymph nodes). However, in either situation, there is dissemination of parasites to the lymph nodes. PMN depletion also appearedto influence the cytokine profile induced by the parasite duringtheearly phase of infection, leading to the expression of pro and anti-inflammatory cytokines (IL1-β, TNF-α, TGF-βand IL-17). The production of granzyme B along with the inhibition of IFN-γat a later stage of infection still wasa reflectof the initial PMNdepletion.In short, PMN are involved in the initial control of L. infantuminfection by causing the destruction of some of the parasites. While others, probably the most virulent, cansubsist, reinfect new cells and transferinto the definitive host cells,the MΦthat are recruited to the site of infection through the stimulation caused by chemokines. The MΦ, in turn, express the recognition receptor toll-like4 and pro-inflammatory cytokines associated to inhibition of expression of IL-1β. At a later stage of infection, the expression of TLR-4 remains but the parasite load decreases dramatically.Regardless of the presence of PMN at the site of infection, the parasites are spread to lymphoid organs, however, PMN influence the regulation of the complex cytokine signaling in these organs.This study highlights the crucial role of PMN in triggering the immune response to L. infantuminfection, being the first control barrier against theparasitebyinductinginnate immune mechanisms, recruitment and stimulation of other cells, including lymphocytes and MΦ