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235 p. Con este trabajo se pretende contribuir a mejorar el conocimiento sobre la presencia del polen y de los alérgenos en la atmósfera.. Al mismo tiempo podrá ser de gran utilidad para que las personas afectadas de polinosis puedan controlar mejor sus síntomas a partir de una información más precisa sobre periodos de aparición de ciertos tipos polínicos en el aire y a los profesionales sanitarios para concretar más los diagnósticos y el tipo de inmunoterapia que se debe aplicar a cada paciente. Además, podrá contribuir a que las autoridades sanitarias elaboren programas preventivos sobre alergias respiratorias. Entre las conclusiones presentadas destacan, en primer lugar, que el polen de Platanus es el que alcanza las concentraciones más elevadas en la atmósfera de la ciudad; en segundo lugar, que atendiendo a los grupos y categorías establecidos por la Red Española de Aerobiología, anualmente se registran pocos días con niveles moderados y altos., considerándose periodos de riesgo para la salud humana, los 20 primeros días de abril para Platanus y los últimos días de mayo y primera semana de junio para Poaceae. Y, finalmente, que un rango de humedad relativa entre el 50% y el 60% favorece las mayores concentraciones de alérgenos de Platanus, Poaceae y Urticaceae La vigilancia aerobiológica debe estar integrada entre las Estrategias de Salud Pública (planes, programas, etc…). Para ello, las administraciones e instituciones públicas deberían fomentar la investigación, con el fin de poder desarrollar sistemas de información específicos, para que la población de riesgo y los profesionales sanitarios puedan aplicar las oportunas medidas preventivas en relación a las alergias respiratorias, tal y como se ha hecho con las alergias a alimentos

277 La presente tesis doctoral estudia la eficacia y modo de acción de nuevos derivados de la podofilotoxina y quinoas en la lucha de la leishmaniosis, conjunto de enfermedades zoonosicas producidas por protozoos del género Leishmania. Mediante la generación de parásitos modificados genéticamente capaces de emitir fluorescencia infrarroja, se ha evaluado la actividad leishmanicida e índice selectivo de los compuestos lignáticos y quinóticos (usados por primera vez) frente a la célula hospedadora. Con los resultados se pretende avanzar en el desarrollo de nuevos fármacos que eviten los inconvenientes de los actuales en cuanto a la aparición de resistencias, la larga duración de los tratamientos, la gravedad de los efectos secundarios y el elevado coste.

700 p. La tesis tiene como objetivo analizar la flora y vegetación de las lagunas y humedales del sector castellano-duriene en la provincia de León. Para ello, see estudiaron 291 humedales de pequeño tamaño y profundidad (charcas, lagunas y medios artificiales), tanto temporales como de aguas permanentes, en la zona SE de la provincia de León. Se elaboró un catálogo florístico que comprende 558 táxones englobados en 270 géneros y 61 familias, pertenecientes tanto a algas carófitas, como a plantas vasculares (teridófitos y espermatófitos). Se realizó un análisis corológico, un análisis taxonómico, una lista de flora amenazada y protegida, y una lista de la flora alóctona. Dentro de este catálogo se delimitó un subcatálogo de flora acuática en el que se incluyen 280 táxones. Se estudió con mayor interés la presencia de 187 de estos táxones en el área de trabajo, así como en el resto de la provincia, lo que permitió elaborar una lista de flora de interés. Se aportan datos sobre la conservación a nivel autónomico de varias plantas protegidas. En cuanto a la vegetación, siguiendo el método fitosociológico, se identificaron 69 unidades (asociaciones, subasociaciones y comunidades) pertenecientes a 14 clases. El 53.6% de las unidades consideradas corresponden a hábitats de interés comunitario, dentro las cuales, un 14.4% lo son de hábitats priorizados. Se realizó una cartografía digital detallada (escala 1:1000 o menor) de la vegetación de 277 humedales. Se consideraron 68 unidades fitosociológicas y otras 4 de naturaleza antrópica. Se elaboró una representación analógica para 50 humedales. Se concluye que los medios estudiados albergan una notable riqueza de flora, y representan lugares con un alto interés de conservación

273 Los microorganismos del género Streptomyces son actinomicetos, bacterias Gram-positivas, aerobias estrictas y se caracterizan por su capacidad de producir gran cantidad de metabolitos secundarios. Streptomyces clavuligerus produce Inhibidores de beta-lactamasas como el ácido clavulánico, antibióticos beta-lactámicos como la cefamicina C y las clavamas y antibióticos no beta-lactámicos como la holomicina. La genética y la producción de antibióticos en Streptomyces clavuligerus han sido extensamente investigadas debido a su importancia comercial. Los objetivos generales de este trabajo han sido el estudio de la función reguladora de la proteína CcaR sobre las regiones promotoras de las agrupaciones génicas de biosíntesis de ácido clavulánico y cefamicna C; la caracterización de la función reguladora de la proteína atrA de S. clavuligerus en la biosíntesis de ácido clavulánico y cefamicina C y la caracterización del gen que codifica la proteína con actividad tiosulfato sulfurotransferasa de S. clavuligerus y de su función en la producción de holomicina. La síntesis de ácido clavulánico y cefamicina C en Streptomyces clavuligerus es activada por la proteína CcaR, codificada por el gen regulador ccaR de la agrupación de biosíntesis de cefamicina C. CcaR es un regulador específico de la biosíntesis de antibióticos de la familia SARP, como ActII-ORF4 en Streptomyces coelicolor y StrR en Streptomyces griseus. El estudio de la unión de CcaR a diferentes regiones promotoras de las agrupaciones génicas de ácido clavulánico y cefamicina C mediante ensayos de retraso en gel (EMSA), ensayos de protección frente a DNAsa I (“footprinting”) y análisis bioinformáticos han permitido analizar y caracterizar el efecto del regulador CcaR sobre la biosíntesis de estos metabolitos secundarios. La transcripción de reguladores específicos de las rutas de biosíntesis de antibióticos en el género Streptomyces, como ActII-ORF4 en Streptomyces coelicolor y StrR en Streptomyces griseus, es activada por una proteína de la familia TetR denominada AtrA. El gen atrA-cl de S. clavuligerus codifica la proteína reguladora AtrA, ortóloga a los factores transcripcionales AveI de S. avermitilis, AtrA-g de S. griseus y AtrA-c de S. coelicolor. El gen rhlA (rhodanese like protein) de S. clavuligerus, homólogo al gen cysA de Saccharopolispora erythraea, codifica una proteína de la familia de las tiosulfato sulfuro transferasas. La proteína RhlA está sobreexpresada en el mutante S. clavuligerus oppA2::aph respecto a la cepa silvestre S. clavuligerus ATCC 27064, esta observación probablemente implique diferencias en la expresión del gen.

180 p. En este trabajo se han desarrollado técnicas biotecnológicas para combatir el problema del cork taint. El cork taint, o contaminación del vino por corcho, consiste en la aparición en el tapón de una serie de metabolitos microbianos que al pasar al vino le confieren unos olores y/o sabores desagradables que arruinan sus propiedades organolépticas naturales e impiden su comercialización. En este trabajo se ha purificado por primera vez un enzima clorofenol O-metiltransferasa (CPOMT) responsable de esta metilación en el hongo filamentoso aislado del corcho Trichoderma longibrachiatum. Posteriormente se procedió a la secuenciación de péptidos internos por MALDI-TOF/TOF y ESI-IT y, a partir de la secuencia de estos péptidos, al diseño de cebadores con los que se logró clonar el gen cpomt de 1637 pb con la presencia de 4 intrones y que codificaba una proteína de 468 aminoácidos. Este gen fue silenciado mediante ARN cortos de interferencia dando lugar a una cepa que presentaba un decrecimiento del 40% en la actividad CPOMT con respecto a la cepa silvestre y una disminución en la formación de 2,4,6-TCP en medio líquido de un 53%. Así pues se confirmaba que este gen es responsable directo de la aparición de 2,4,6-TCA en el corcho y que por tanto su atenuación daba lugar a un descenso drástico en la producción de 2,4,6-TCA por el hongo. Por otra parte se abordó la expresión heteróloga del gen pel3 de Pleurotus eryngii en T. longibrachiatum. Dicho gen codifica un enzima lacasa capaz de oxidar numerosos compuestos aromáticos provenientes de la degradación de la lignina. La expresión de este gen en T. longibrachiatum (aunque lograda de manera poco eficiente) dio lugar a una cepa que al crecer sobre corcho granulado contaminado con 2,4,6-TCP producía un descenso en las concentraciones de 2,4,6-TCA y 2,4,6-TCP de entorno al 20% con respecto a los encontrados en los cultivos de la cepa silvestre. Estos valores indican que unos mayores niveles de la expresión de la actividad lacasa en T. longibrachiatum podrían dar lugar a un descenso considerable en la cantidad de 2,4,6-TCA presente en el corcho. Por tanto estas dos técnicas se presentan como la base de una prometedora estrategia biotecnológica a desarrollar en el futuro frente al cork taint y que podría conseguir paliar las pérdidas económicas para bodegueros y fabricantes de tapones de corcho afectados por este problema

176 p. El objetivo de este trabajo es estudiar el comportamiento de la presión arterial en la enfermedad. Se incluyen consecutivamente 76 pacientes con ictus isquémico, en las primeras 24 horas del inicio de la clínica ictal. Los ictus se clasifican atendiendo a, su mecanisme de producción, circulación afectada, localización, e inclusión del córtex insular. A todos los pacientes se les practica monitorización ambulatoria de presión arterial en la fase aguda del ictus (primeros 7 días) y en la fase crónica (ai mes del evento isquémico). Los factores de riesgo de ictus en la muestra incluyeron un 42,1% de HTA; 17,1% diabetes mellitus; cardiopatía 27,6% ; 43,2% dislipemia; 23,6% hábito tabáquico; 18,4% episodio isquémico cerebral previo. La media de PA sístólica diurna fue mayor en fase aguda que en la fase crónica (140+2,2 mmHg; 127,6±1,5 mmHg respectivamente) con un descenso de PA de 12,4±1,7 mmHg entre ambas fases (p

317 Con la realización de este estudio nos propusimos alcanzar los siguientes objetivos: 1. Establecer, mediante estudios de microscopía óptica y microscopía electrónica de barrido, los efectos que sobre la mucosa del duodeno provoca la administración de una dosis oral de 10 mg/kg de ácido acetilsalicílico durante 14 y 28 días a conejos. 2. Determinar si las cutículas de Plantago ovata administradas por vía oral a la dosis de 100 mg/kg junto con el ácido acetilsalicílico, también durante 14 y 28 días, ejercen un efecto protector y contribuyen a disminuir las lesiones intestinales producidas por éste. 3. Realizar un estudio farmacocinético del ácido acetilsalicílico, estableciendo el modelo farmacocinético seguido por este compuesto tras su administración intravenosa y oral a conejos a la misma dosis (10 mg/kg), y determinando los parámetros farmacocinéticos compartimentales y no compartimentales más representativos de éste a partir de las curvas de nivel plasmático-tiempo: el área bajo la curva (AUC), las constantes de distribución y eliminación, el tiempo de residencia medio (MRT), el aclaramiento (Cl), el volumen de distribución, la constante de absorción, o la biodisponibilidad. 4. Estudiar cómo modifican las cutículas de Plantago ovata los parámetros farmacocinéticos más representativos del ácido acetilsalicílico tras administrarlas a la dosis de 100 mg/kg por vía oral junto con este compuesto

424 p. Esta tesis doctoral analiza los ecosistemas del Valle de Mena con el objetivo de alcanzar una relación más respetuosa y fructífera del hombre con su entorno. Se ha utilizado un modelo de estudio dinámico para adaptarse a la complejidad de los ecosistemas que dependen de las condiciones de partida y que son difícilmente predecibles. En el estudio, los sistemas de información geográfica se han manifestado como magníficas herramientas para el desarrollo del análisis dinámico, tanto en la planificación como en su seguimiento. La gestión forestal eficiente debe pasar por la comprensión de los aspectos básicos de la dinámica de los ecosistemas afectados. El principal instrumento de actuación en los montes debe ser el aprovechamiento forestal: la gestión forestal debe anticipar acciones suficientemente extensas, mantenidas en el tiempo, y necesariamente autofinanciadas. Además, los ingresos a los propietarios de los terrenos suponen una garantía de arraigo, y la mejor prevención de riesgos a largo plazo

108 p. En este estudio doctoral se analiza el impacto que la intensificación de la agricultura y la transformación de sistemas de secano en regadío ha tenido en la pérdida de la biodiversidad y en la reducción del hábitat natural de las comunidades de mariposas. Para ello se han estudiado 40 transectos de 1 kilómetro cada uno, colindantes a los terrenos agrícolas, de un área del sureste de la provincia de León durante los años 2008 y 2009, entre los meses de mayo y agosto. Con el fin de mejorar el hábitat de las mariposas en las estepas cerealistas se debería mejorar cualitativa y cuantitativamente los linderos/cunetas. Como medidas eficaces se proponen las siguientes: dejar sin cultivar pequeñas bandas entre parcelas de cultivo, ensanchar los márgenes de los caminos o abrir pequeñas zanjas en los límites del cultivo, incrementar el número de arbustos en estos linderos/cunetas e incrementar el tiempo en el que las parcelas de cultivo permanecen en barbecho. Sería aconsejable aplicar y evaluar algunas medidas agroambientales en el área de estudio y que están dando resultados positivos en otros países europeos para la conservación de la entomofauna y que contribuirían a minimizar la fragmentación de los ecosistemas agrícolas y facilitarían la dispersión de las especies.

234 p. Los polihidroxialcanoatos (PHAs) son polímeros biodegradables, con propiedades similares a las de los plásticos de origen petroquímico, producidos como acúmulos intracelulares por distintas especies bacterianas. Estos biopolímeros pueden ser utilizados como alternativa a los plásticos convencionales, cuya utilización presenta dos grandes problemas: por un lado proceden de reservas fósiles finitas, por lo que su producción no podrá llevarse a cabo de forma permanente tal y como se hace hoy en día; y por otro, son compuestos no biodegradables cuyos desechos contaminan la biosfera, generando importantes problemas ambientales. La presente tesis doctoral recoge los trabajos realizados sobre la producción de PHAs en distintas cepas de Pseudomonas putida. Se secuenciaron los loci pha (que codifican las proteínas responsables de generar estos acúmulos) de P. putida N y de P. putida DOC21, y se compararon con los de otros pseudomonádidos depositados previamente en las bases de datos. La elevada similitud entre ellos indica que desempeñan las mismas funciones en todas las cepas comparadas. A continuación, se comparó la capacidad para producir este polímero en P. putida N y P. putida U, y se concluyó que P. putida N produce una mayor cantidad de PHAs. Partiendo de esta cepa, se diseñaron distintas estrategias para la obtención de mutantes superproductores de PHAs. Los mutantes P. putida N pMCphaF y P. putida N pK18pha no mejoraron la capacidad biosintética de PHAs con respecto a la cepa silvestre. Sin embargo, el mutante superproductor P. putida N ΔfadBA es capaz de producir más cantidad de PHAs que la cepa silvestre en cualquiera de los medios utilizados, destacando los resultados obtenidos cuando se utilizaron como precursores ácidos fenilalcanoicos. En estos casos la producción de PHAs llegó a ser del 61,26% respecto del peso seco de bacterias. Por otro lado, se obtuvo una cepa de P. putida N capaz de producir R-3-hidroxiácidos, que pueden ser utilizados como sintonas de otras moléculas complejas, tales como vitaminas, antibióticos o antimicrobianos. Para obtener esta cepa se expresó en trans la despolimerasa PhaZ. También se realizaron estudios para determinar la conexión existente entre el sistema de producción de polímeros de reserva, la morfología celular y la resistencia a antibióticos. La cepa P. putida N muestra una morfología filamentosa cuando se cultiva a concentraciones subinhibitorias de ampicilina, como consecuencia de la interacción de ese antibiótico con el proceso de división celular. Sin embargo, cuando se expresa en trans el gen phaF de P. putida U, este mutante presenta una morfología bacilar, probablemente debido a que la resistencia de esta cepa al antibiótico ampicilina se incrementa en dos órdenes de magnitud. Finalmente, se llevó a cabo un análisis de la estabilidad genética de cepas superproductoras de PHAs en P. putida. El cultivo reiterado del mutante superproductor P. putida U ΔfadBA en medios que contienen exclusivamente octanoato como fuente de carbono, conduce a una pérdida de la capacidad para sintetizar PHAs. El análisis genético reveló que en tales condiciones, y probablemente debido al estrés metabólico que supone la acumulación de PHAs, la población bacteriana acumula y selecciona mutaciones que conducen a la pérdida de función de la polimerasa I. Se han identificado un total de 22 errores diferentes en estos mutantes adaptativos que inactivan la polimerasa PhaC1 y que contribuyen a una mayor tasa de crecimiento. Teniendo en cuenta que estas mutaciones inactivan PhaC1, que no se halló ninguna mutación en PhaC2, y que aquellas bacterias que contenían una copia de PhaC1 mutada y otra de PhaC2 nativa no sintetizaban PHAs, se ha propuesto un modelo según el cual la activación de las polimerasas estaría mediada por la formación de dímeros PhaC1-PhaC2. Estos dímeros heteroproteicos prevalecen funcionalmente sobre aquellos otros constituidos por dos copias de la misma proteína (PhaC1-PhaC1 y PhaC2-PhaC2). En definitiva, se ha tratado de integrar estudios genéticos, fisiológicos y morfológicos en unas cepas con gran interés para la producción de bioplástico y cuyo conocimiento es imprescindible para abordar con éxito la producción de estas moléculas a escala industrial.

176 p. La tesis trata diversos aspectos relacionados con la migración posnupcial del carricerín cejudo o “Acrocephalus paludícola” dentro de la península ibérica, región clave para las rutas migratorias de muchas aves europeas hacia África. Nos encontramos ante la especie de paseriforme más amenazada de Europa occidental (clasificada como Vulnerable a nivel global) que no utiliza la península para su reproducción sino que habita en los humedales ibéricos durante unas pocas semanas al año durante sus viajes migratorios. El estudio se centra en los humedales de la meseta norte, no presente en estudios anteriores, con registros procedentes en su mayoría de prospecciones específicas y campañas de anillamiento y donde se abordan aspectos como la fenología, parámetros biométricos parámetros de sedimentación, fidelidad interanual al humedal e índice Acrola, así como un aspecto poco estudiado como la existencia de una migración diferencial por clases de edad en la península ibérica. Los resultados obtenidos permiten conocer su estrategia migratoria, poniendo de manifiesto la importancia de la ruta que atraviesa en centro de la Península, y sus lugares y patrones de sedimentación en la meseta Norte, y pueden ser muy útiles para llevar a cabo medidas de conservación y gestión eficaces para esta especie y los hábitats que emplean durante sus movimientos migratorios.

237 p. La presente tesis doctoral estudia el efecto en la cromatina paterna sobre el desarrollo embrionario en la trucha. El primer capítulo, que está constituido por dos trabajos, aborda el estudio de los efecto del daño genotóxico en muestras seminales de trucha (O. mykiss) sobre el desarrollo de la progenie. Se lleva a cabo un análisis masivo de la expresión de genes en larvas obtenidas con semen portador de diferente nivel de daño en su cromatina debido al uso de protocolos de criopreservación no óptimos. Además, la mitad de las progenies fueron incubadas en condiciones estándar, y la otra mitad fueron sometidas a la inhibición de la reparación durante la primera división zigótica. Los resultados revelaron un gran número de genes diferencialmente expresados (DEGs) en las larvas procedentes de embriones cuya reparación zigótica fue inhibida. Estos DEGs estaban fundamentalmente relacionados con las rutas de reparación del ADN, el control del ciclo celular y la apoptosis, revelando un patrón diferente de respuesta al daño en el ADN que las larvas control. Los transcritos implicados en actividad apoptótica mostraban una función antagonista, ya que genes pro-apoptóticos estaban reprimidos y los anti-apoptóticos estaban sobre- expresados a pesar de la inestabilidad genómica provocada en el embrión. Dichos resultados sugerían que las larvas supervivientes eran las que habían adquirido una respuesta de tolerancia al daño genotóxico, provocado a partir de la primera división del embrión. Además, se ha constatado que es esencial un control exhaustivo de la integridad del ADN espermático tras procesos de congelación/descongelación. Así, lesiones en la cromatina espermática causadas por la criopreservación, provocaron diferencias significativas en el perfil transcriptómico de las larvas obtenidas con semen fresco y criopreservado, que afectaban a procesos metabólicos que pueden ser clave para su futuro crecimiento y desarrollo. En el segundo capítulo quisimos determinar si los factores de manejo de reproductores que se aplican en piscifactorías, en concreto la manipulación del periodo natural de puesta, pueden afectar a la maquinaria de reparación del ADN de los ovocitos, y tener un impacto negativo en el desarrollo de la progenie, especialmente cuando el genoma paterno está dañado. Para ello evaluamos el efecto del cambio de fotoperiodo, y por tanto del régimen térmico en el que ocurre la gametogénesis, en la calidad de los gametos de trucha arcoiris (O. mykiss). Mediante una técnica de PCR a tiempo real (qPCR) pudimos confirmar las lesiones promovidas en el semen, así como la disminuida capacidad reparadora de los ovocitos obtenidos en regímenes térmicos inapropiados. Demostramos que, en estadios tempranos de desarrollo, los embriones obtenidos fuera del periodo natural de puesta poseen una intensa capacidad reparadora, pero una reducida capacidad para detener el desarrollo y reparar el daño en el ADN, perfil similar al de los ovocitos de los que proceden. La actividad apoptótica en estas mismas progenies se vio reducida durante la organogénesis, momento clave en el desarrollo normal de los órganos. La tolerancia al daño observada suprimió la inducción de la apoptosis, permitiendo progresar con el desarrollo en condiciones ambientales de estrés, que finalmente promovió una alta tasa de larvas malformadas que llegaron a la eclosión, pero no fueron capaces de sobrevivir a largo plazo

320 p. En el presente trabajo se han abordado las complejas relaciones filogenéticas entre las especies que conforman la tribu Bromeae Dumort. Algunos de estos taxa no han sido, hasta el momento, objeto de otros estudios moleculares y persisten numerosas incógnitas sobre su origen y el tratamiento taxonómico adecuado. El posible origen híbrido de alguno de los linajes más importantes en Bromus, hace que las relaciones entre los taxa sean complejas. Se reconstruyeron los estados ancestrales de 30 caracteres morfológicos, entre ellos los habitualmente empleados en la taxonomía de la tribu (ejem. hábito de las plantas, compresión de las espiguillas, número de nervios de la gluma inferior, etc.), además de la longitud del ETS y el nivel de ploidía. Los análisis bayesianos, de máxima probabilidad y de parsimonia, sugirieron un ancestro común perenne; de espiguillas no comprimidas; un nervio en la gluma inferior; margen del lema plano y el ápice no lacerado; apéndice del ovario truncado; diploide; y sin repeticiones en la región ETS. Por último, se abordó un estudio detallado en la sección Triniusa (Bromus subg. Bromus) mediante el diseño de cebadores y ensayo de la transferibilidad de 14 marcadores a otras especies de la sección. Se estudió la variabilidad molecular en las seis especies que integran la sección. Los métodos de secuenciación de nueva generación y la plataforma MiSeq de la tecnología Illumina fueron utilizados para la secuenciación de los nuevos. Nuestros resultados sugieren un extenso flujo de genes entre los diferentes grupos del Mediterráneo occidental de Bromus lanceolatus, con la excepción de las poblaciones de la Macaronesia, infiriendo que deben segregarse en la especie previamente descrita B. canariensis

402 p. La cuenca carbonífera El Bierzo es una zona importante de minería donde esta actividad y su legado dejado durante décadas, han alterado los ecosistemas acuáticos de la comarca. El río Boeza, principal cauce fluvial de estudio que acaba desembocando en el río Miño, recibe aguas contaminadas de su tributario el río Tremor. En el presente trabajo se ha estudiado tanto la calidad del agua como del sedimento, a través de su análisis físico-químico y del contenido metálico. Los resultados muestran que las zonas cercanas a los focos de contaminación tienen una concentración mayor de metales que el tramo fluvial tomado como control o punto limpio. Paralelamente se ha medido la concentración de metales en las comunidades de macroinvertebrados y de trucha común (Salmo trutta). Por último, la zona ofrece un escenario especial para estudiar la recolonización por parte de la fauna macroinvertebrada de un cauce fluvial, del arroyo Rodrigatos, en cuya cuenca se han llevado a cabo varias labores de restauración, entre las que destaca la construcción de un tratamiento pasivo para decantar los metales de un drenaje de mina que vertía en el arroyo. Con el paso del tiempo, en que la presión minera ha ido disminuyendo, el arroyo Rodrigatos ha sido capaz de recuperar parte de la fauna macrobentónica más tolerante a la polución metálica. Además, el sistema de tratamiento pasivo ha sido satisfactorio en la retención de varios metales importantes como el Al y el Fe

263 p. La presente tesis doctoral se centra en el estudio de las nanopartículas, estructuras cuyas propiedades se encuentran en la frontera entre las exhibidas por los átomos y los materiales a mayor escala. En este trabajo se empleó un método de síntesis de cuatro tipos de nanoestructuras (MeO2, As-MeO2, Cys-MeO2 y As-Cys-MeO2), mediante la precipitación de ThO2 y ZrO2, empleando precursores inorgánicos. Se modificaron las condiciones de preparación para tratar de obtener nanopartículas de tamaños pequeños y homogéneos. Una vez sintetizadas y caracterizadas las nanoestructuras, se les dio una aplicación, utilizándolas como adsorbentes de arsénico. Se eligieron las que más arsénico retuvieron, se optimizaron los parámetros clave del proceso de retención, se modelizó teóricamente el sistema de retención y, por último, se validó este sistema mediante muestras certificadas

252 p. La tesis doctoral se centra en el estudio de distintas características que afectan a la lenteja cultivada (Lens culinaris) por su importancia en la alimentación humana al ser una de las primeras leguminosas domesticada y estar implantada en amplias zonas del subcontinente de la India y en ciertas regiones del Mediterráneo. Los distintos estudios que la forman se centran en analizar los aspectos que afectan negativamente al desarrollo de la planta y en cómo favorecer la obtención de un alto rendimiento y semilla de calidad, especialmente con un contenido proteico alto y equilibrado en su composición de aminoácidos. Para el desarrollo de la presente tesis, como material vegetal de trabajo se utilizaron distintas variedades de lenteja cultivada (Lens culinaris culinaris ) y su antecesor silvestre (L. culinaris orientalis) que se caracterizarán para su resitencia a sequía y al hongo Ascochyta lentis. También se utilizaron poblaciones segregantes formadas por un conjunto de líneas consanguíneas recombinantes obtenidas en el laboratorio de Genética de la Universidad de León

364 p. Streptomyces tsukubaensis es el principal productor del inmunosupresor tacrolimus (FK506), policétido macrólido de 23 átomos de carbono que se utiliza en el tratamiento de pacientes con trasplante de órgano y en el tratamiento de enfermedades de la piel como la dermatitis; además, presenta propiedades neuroprotectoras y neuroregenerativas y un potencial uso en cáncer. En esta tesis doctoral se ha abordado la regulación por carbono de la producción de tacrolimus. En presencia de fuentes de carbono fácilmente asimilables se reprimen las funciones para la utilización de fuentes de carbono alternativas. Este fenómeno se denomina represión por catabolito de carbono y también afecta a la producción de antibióticos en el género Streptomyces. Esta tesis doctoral ha permitido profundizar en el conocimiento de la regulación por carbono y por fosfato en S. tsukubaensis. La realización de estudios transcriptómicos ha evidenciado varios genes candidatos para la realización de nuevos experimentos en los campos de la regulación nutricional y de la mejora de la producción de tacrolimus. Además, ha ampliado el conocimiento sobre la regulación molecular de la agrupación de biosíntesis de tacrolimus y sobre la multiplicidad de genes pfkA en el género Streptomyces

335 p. En las últimas décadas, el descubrimiento de nuevas moléculas bioactivas ha disminuido de un modo preocupante, y este hecho unido a la mala praxis que se viene realizando de las mismas ha dado lugar a una falta de arsenal efectivo ante la cada vez mayor aparición de patógenos multirresistentes. Por esta razón, durante este siglo se están multiplicando los esfuerzos en buscar nuevos fármacos usando diferentes tipos de estrategias entre las que destaca la minería genómica. La aplicación de esta técnica unida al abaratamiento y los avances en técnicas de secuenciación de genomas ha permitido encontrar nuevas potencialidades a microorganismos que antaño se creían agotados. Así, mientras antes se consideraba que una cepa concreta podía producir una media de 3-4 compuestos con actividad biológica, ahora se sabe que esa misma cepa tiene información en su genoma para la producción de más de 20-30 compuestos bioactivos. La mayoría de las agrupaciones génicas de metabolitos secundarios están silentes en estas bacterias (no se expresan o lo hacen poco), y mediante su activación se puede lograr la producción de nuevas moléculas. Streptomyces es un género de bacterias cuya principal característica es la capacidad que posee para producir un amplio abanico de metabolitos secundarios. Dentro de este género, se encuentra una especie llamada S. natalensis capaz de producir un macrólido polieno llamado pimaricina que se caracteriza por poseer una actividad antifúngica relevante que ha sido aprovechada por diferentes industrias como la alimentaria, la agrícola o la farmacéutica. El avance en el estudio de los macrólidos polienos ha permitido descubrir que uno de los genes reguladores situados en la agrupación biosintética de la pimaricina, pimM, codifica un regulador PAS-LuxR que actúa como un activador transcripcional de la biosíntesis de este antifúngico, pero algo mucho más trascendental es que este tipo de reguladores no actúan solo como reguladores de sus respectivas agrupaciones génicas, sino que intervienen en multitud de procesos biológicos entre los que destaca la regulación de la biosíntesis de otros metabolitos secundarios. Teniendo en cuenta esta situación previa, se realizó un estudio sobre la activación de agrupaciones génicas durmientes por parte del regulador transcripcional PimM en diferentes cepas del género Streptomyces mediante la expresión heteróloga del vector pCPpimM. De 35 cepas ensayadas, se logró activar la producción de algún metabolito secundario con actividad antibacteriana o antifúngica en diez (S. albus J1074, S. ambofaciens DSM 40053, S. diastatochromogenes DSM 40449, S. durhamensis DSM 40539, S. griseofuscus DSM 40191, S. laurentii DSM 41684, S. leeuwenhoekii DSM 42122, S. longwoodensis DSM 41677, S. tsukubaensis NRRL 18488 y Streptomyces sp. FR-008) lo que supuso un éxito de casi el 29% de las cepas utilizadas. Cuando se procedió a caracterizar estas activaciones, los principales antifúngicos para los que se ha logrado activar su producción han sido antimicinas, candicidina y filipina, mientras que a nivel antibacteriano, se ha localizado una activación de un compuesto bioactivo contra S. aureus subsp. aureus CECT 5190, cepa hospitalaria habitual que presenta resistencia a meticilina. Por otra parte, se obtuvieron mutantes de pimM mediante PCR propensa a errores. De los 20 mutantes obtenidos, siete de ellos consiguieron mejorar las producciones de PimM originales siendo el mejor mutante el que denominamos 321, con producciones específicas de pimaricina 3,3 veces superiores a las obtenidas por el control demostrando que la evolución forzada de reguladores PAS-LuxR es un buen método para mejorar la producción de macrólidos polienos. Además, la realización de estos experimentos ha permitido realizar un estudio funcional de la proteína PimM demostrando que ciertas modificaciones en el dominio PAS son susceptibles de mejorar la producción del antifúngico dado que una de las funciones del dominio PAS es modular la afinidad del dominio HTH por sus dianas en el ADN, mientras que el dominio de unión a ADN LuxR es menos susceptible de ser modificado pues los cambios en el mismo tienen una alta probabilidad de llevar a la proteína a una pérdida de su funcionalidad.

P. 167-173 Selecting the optimal sperm population is essential for success with reproductive techniques. Porcicoll (formerly Androcoll-P) is a colloid formulation for selection of high-quality boar spermatozoa by single layer centrifugation (SLC). To date, most studies have been carried out with fresh semen and large volumes. We carried out 2 experiments to test the use of Porcicoll for thawed boar semen in small volumes. In Experiment 1, cryopreserved semen doses were thawed, split in 200-μL aliquots and layered on 1 mL of Porcicoll 70%, 80% or 90%, or buffer without colloid. We assessed sperm recovery (the proportion of the loading dose that appeared in the pellet, %), and the physiology of the selected spermatozoa (flow cytometry: Viability, apoptotic changes, capacitation, mitochondrial activity, intracellular reactive oxygen species). The most suitable proportion was Porcicoll 80%, allowing acceptable sperm recovery (16.9 ± 4.2%, compared to 70% (35.4% ± 3.0, p

8 p. This study evaluates the effects of electro-oxidation as a means for enhancing sludge stabilisation. Boron-doped diamond electrodes were used to treat waste activated sludge and digestate under different operating parameters (current density, conductivity, pH, and time). Electro-oxidation runs affected the solubilisation of organic matter, which seemed to improve anaerobic digestion and dewaterability characteristics. Among the tested parameters, pre-treating sludge via electro-oxidation under alkaline conditions (Treatment T5) resulted in the highest increase in soluble organic material compared to that in the control, with total organic carbon (TOC) and soluble chemical oxygen demand (COD) values of 2753 and 7819 mg L−1, respectively (control TOC and COD values were 385 and 1073 mg L−1). This pretreatment also achieved a high hydrolysis rate (higher concentration in volatile fatty acids) with a concomitant increase in methane yield (approximately 18%). On the other hand, the application of electro-oxidation as a post-treatment for improving digestate dewaterability resulted in noticeable changes in the release of water during drying due to protein and aliphatic matrix modification of the sample. SI

P. 183–188 The aim of this study was to assess the relationship of the evolution of the corpus luteum (CL) volume that was determined ultrasonographically with the pregnancy status in lactating dairy cows during early pregnancy. Ultrasound examinations were carried out on 76 cows following artificial insemination (AI). Plasma concentrations of progesterone were determined from blood samples collected at each ultrasound examination. Conception was confirmed by ultrasonography on day 30 after AI. Around day 14 post-insemination (p.i.), the CL volume tended to decrease in pregnant and non-pregnant cows, and, after day 19 p.i., both groups differed significantly, indicating the luteal regression in non-pregnant cows. Reaching signification on day 20. The diminution in CL volume was also reflected in the plasma progesterone concentration. However, the patterns of CL volume, estimated by ultrasonography, differed more evidently and earlier between both groups (around 1 week p.i., at day 9 p.i. P < 0.05, whereas progesterone started to differ around 2 weeks p.i., at day 14 p.i, P < 0.05). These results indicate that the estimation of the CL volume by ultrasonography could be useful for assessing the presence of a functional CL. SI

The goal of this study was to propose scientific and objective indices capable of measuring the changes that occur in the conservation status of the vegetation of a particular area over a period of time. To this end, phytosociologically-based vegetation cartography at a detailed scale was used, carried out at two different times, and the distance from the climax stage of the territory was calculated for each time. Three temporal indices of landscape change are proposed: Conservation Status Variation Index (ConSVI), Conservation Status Variation Velocity Index (ConSVVe) and Change Ratio (ChanRat). These enable the intensity, velocity, and percentage of change to be measured, and to determine whether this change is progressive or regressive&mdash, in other words, whether it is approaching or receding from the climax. To test the proposal, it was applied to a territory in Northwest Spain. The proposed indices are universally applicable to any territory and are the first of their kind to operate at a detailed scale with a phytosociological basis. They also enable an objective measurement to be made of the landscape change that has occurred, meaning that they have immense practical utility in studies of managing and planning territorial resources.

P. 529–542 Land abandonment and the loss of traditional farming practices are thought to control land cover dynamics, and hence the ecosystem service supply in traditionally managed mountain landscapes. We evaluate the impact of land cover changes in Cantabrian Mountains (NW Spain), over 1990–2012, on the potential supply capacity of ecosystem services (regulating, provisioning, and cultural) at both regional and local scales. We also analyze trends in the use of ecosystem services at the local scale. Land cover changes were estimated from CORINE Land Cover database. Patterns of potential ecosystem service supply were assessed by applying an ecosystem service supply capacity matrix and trends in their actual use by using field data. Main trajectories of land cover change encompassed woody vegetation spread in semi-natural open systems and agricultural expansion in the most suitable areas. The capacity of landscape to provide ecosystem services improved during 1990–2012 at both scales. We detected trade-offs between the potential supply of ecosystem services associated to natural systems and those linked to traditional land uses, at both regional and local scales. Changes in the potential supply of ecosystem services matched trends in ecosystem service use. This study could help develop future scenarios to address upcoming challenges in ecosystem service supply SI

P. 1-8 Prescribed burns are being considered as a management tool for the prevention of forest fires in many countries that have important firefighting problems. Knowledge of fire intensity and eliminated vegetation fuel are of great interest to evaluate their effectiveness. Both parameters are directly related to burn severity, so their evaluation is fundamental to predict the post-fire evolution of burned area. In this study we evaluated two prescribed burnings carried out in North of Spain during October 2017 by using multispectral data from an Unmanned Aerial Vehicle (UAV). In particular, four surface reflectance images were obtained in green (550 nm), red (660 nm), red-edge (735 nm) and near infrared (790 nm) at very high spatial resolution (GSD 20 cm) from which different spectral indexes were computed. Additionally, vegetation and soil burn severity was measured in 153 field plots and an analysis of variance (ANOVA) between each spectral index and burn severity (both in vegetation and soil) was performed. A Fisher’s least significant difference test determined that three vegetation burn severity levels and two soil burn severity levels could be statistically distinguished. The identification of such burn severity levels is sufficient and useful to forest managers. We conclude that multispectral data from UAVs may be considered as a valuable indicator of burn severity for prescribed burnings. SI

P. 133-136 The objective of this work is to analyze talc samples from the archaeological site of Peña del Castro (La Ercina, León), with a chronology of the Iron Age (ss. VIIVI b.C) to assign the origin of these materials using spectroscopic analysis. For this purpose, a total of 30 samples of minerals defined as talc have been analyzed, from different geological outcrops in the north of the peninsula and the archaeological site. Based on the results obtained, the origin of the talcs used in La Ercina seems to respond to a regional supply (

We describe a collaborative activity between the High School "Los Sauces" and the Faculty of Biology of the University of León in Spain. We apply the "seminar" activity in several courses of the Biology Degree at the University, not only to consolidate specific skills but also because it allows working on transversal skills such as teamwork, information search, scientific writing, presentation, discussion, and critical thinking. We split this activity into several tasks, so the students (organized in small groups) work on a topic, fetch relevant scientific information, discuss it with the teacher, produce a report, present it to the class and defend it. These tasks are interleaved with formative assessment such as producing individual and collective summaries, tests, polls, self-evaluations, and a final survey. Given the good results for eliciting work on transversal skills, we carried out a joint project with the Biology Department of "Los Sauces" (Benavente). In the first phase, we adapted the activity for the pre-university course, Secondary Education level. In the second phase, the High School teachers carried out the activity following a similar timeframe, with support from the University teachers (being present at presentations and dissertation). We assessed the attitudes of the students by observation through the experience, analyzing evaluations and scores and especially by the final survey. The data showed that the "seminar" activity was a challenge for the students in both degrees, precisely because of their lack of experience on many of the transversal skills they needed to use. Despite adapting the activity to the High School level, these students found it a bigger challenge, realizing a difference in skill development and adaptation between educative levels noticed by other authors. However, evaluation results and attitudes were similar between levels. When inquired, most students found the activity and the different tasks as positive for attaining the educational objectives, being slightly more critical at the University level (4 vs. 3.7, in a 0–5 score). There was a large dispersion on the preferences about the different tasks, reflecting a great between-subject variability, possibly due to personal preferences and goals. Written comments provided a wealth of comparative data, both because of content and style. University students produced more elaborate and critical comments, reflecting experience, which might have helped to a better understanding of the activity and to apprehend better the skills involved. Notably, we noticed that teamwork was a challenging skill for students at both levels, but also an important one for them to achieve. The students at the High School level found working in groups more problematic, mainly on communicating and coordinating effectively. Students at the University level used their previous experience to solve minor problems as they presented, and getting more output from the teamwork. In conclusion, we could perceive cognitive and emotional differences between these two educative levels when students were challenged to develop transversal skills, especially teamwork. The adaptation of the "seminar" activity from the University to the High School level was very promising. The information we have learned about the students in this pre-university level will allow us to adjust the activity to their educational needs better.

P. 257-271 In the Mediterranean Basin, wildland fires are major drivers of forest ecosystem dynamics. In the current context of global change, these fires are becoming more severe and recurrent because of climatic conditions, land use changes and invasive species. In areas affected by mega-fires (burned area > 10,000 ha), the patterns of regeneration may be heterogeneous due to local variations in fire regime, community composition and environmental features. The goal of this study was to analyze the post-fire structure of both Pinus pinaster Aiton. seedlings population and understory community in a Mediterranean fire-prone ecosystem at short-term by means of high spatial resolution satellite imagery within the perimeter of a full stand replacing mega-fire that burned around 12,000 ha of a Pinus pinaster forest in NW Spain. We established 234 field plots of 2 × 2 meters to cover four recurrence-severity scenarios. In each plot, we sampled 15 vegetation structural variables at both pine seedlings population and understory community levels. From the WorldView-2 satellite imagery, we obtained three sets of spectral variables (reflectance, spectral indices and image textures) that were used as predictors of vegetation recovery in generalized linear models. At population level, the number and cover of pine seedlings were successfully modeled with spectral indices and textural information (normalized root mean square error of 16% and 17%, respectively). At understory community level, woody species cover was correlated with first order textures (normalized root mean square error of 9%). Other understory structure variables (height and richness of woody species, percentage of bare soil, necromass and leaves) were predicted with an error lower than 20%. The predictive capacity of the models was similar for all recurrence-severity scenarios. Our results highlight the usefulness of spectral indices and textural data at high spatial resolution in the analysis of post-fire recovery in large and heterogeneous burnt areas. Given the accuracy and predictive capacity of the models obtained in this study, high spatial resolution satellite imagery together with field data provide useful information in post-fire decision making in fire prone ecosystems. SI

P. 38-44 This study was designed to compare the effects on goat spermatozoa cryosurvival of nano-lecithin-based (NL), lecithin-based (L) and egg yolk-based (EY) extenders. Ejaculates were collected from four fertile goats using artificial vagina and diluted with nine extenders. NL and L were tested at concentrations 1%, 2%, 3% and 4% (w/v), versus 15% (v/v) egg yolk-based extender. Overall, sperm quality (higher motility, viability and HOST, and lower apoptosis) was higher for NL than for L treatments (P

P. 1-8 En el Geolodía León 2019 queremos enriquecer nuestra imagen interior de La Candamia, añadiéndole una perspectiva geológica, con el fin de entender el origen y evolución de este paisaje desde sus raíces: el río, las rocas y su vínculo con la montaña. A partir de este sustrato, leeremos sus escarpes, sus lomas y su relación con los distintos pueblos que han habitado la zona a lo largo de la historia.

238 p. El hígado es un órgano vital para la destoxificación de sustancias perjudiciales presentes en el organismo. Las agresiones producidas a este órgano por agentes químicos, víricos o quirúrgicos, desencadenan un proceso fisiopatológico complejo que incluye desde una simple esteatosis hepática, pasando por una fibrosis hepática, cirrosis y finalmente pudiendo desarrollar finalmente, en algunos casos, hepatocarcinoma. En la actualidad, millones de personas sufren daño hepático inducido por alcohol, productos químicos e infecciones. Así, enfermedades hepáticas agudas y crónicas siguen siendo uno de los problemas graves de salud a nivel mundial. Las enfermedades inflamatorias crónicas del hígado son factores de riesgo que predisponen al desarrollo de hepatocarcinoma, ya que cualquier agente que dañe de forma crónica y progresiva a los hepatocitos e induzca mitosis, hace al ADN celular más susceptible a alteraciones genéticas. Entre ellas, se pueden citar la esteatohepatitis, la cirrosis alcohólica o la cirrosis inducida por el virus de la hepatitis B o C. Mientras que la esteatosis puede considerarse un proceso benigno, las demás patologías tienen el potencial de causar inflamación hepática crónica y desarrollo de fibrosis, lo que acabaría provocado la insuficiencia del órgano. La fibrosis hepática se considera una respuesta a agresiones externas que tiene como objetivo limitar el daño como medida protectora y reversible del tejido hepático. La destrucción de la arquitectura hepática normal se debe a la aparición de cicatrices fibrosas y a la pérdida de hepatocitos, lo que provoca que el hígado pierda alguna de sus funciones fisiológicas y se pueda producir finalmente insuficiencia hepática. En los últimos años se ha podido comprobar que este estado patológico de acumulación de proteínas de la matriz extracelular, conocido como fibrosis hepática, es un proceso reversible cuando se elimina el estímulo dañino y se aplica un tratamiento terapéutico adecuado. La inflamación, el estrés del retículo endoplasmático y otras vías de señalización relacionadas, como la autofagia, la apoptosis, la vía de los esfingolípidos o incluso los ritmos circadianos, se encuentran entre los mecanismos clave en la regulación de estas alteraciones. Es importante tener en cuenta que, en la mayoría de los casos, las terapias existentes para el tratamiento de enfermedades que cursan con fibrosis hepática son ineficaces. Debido a la gravedad que muchas de estas enfermedades crónicas alcanzan, el trasplante de hígado se considera como única terapia eficaz para muchos pacientes cuando están en etapas avanzadas de la enfermedad y presentan una función hepática descompensada. Mejorar el conocimiento de los mecanismos implicados en la fibrogénesis hepática es crucial para identificar las posibles dianas terapéuticas, así como para establecer terapias alternativas y eficaces que mejoren los tratamientos convencionales aumentando la esperanza de vida de los pacientes. Por todo ello, y basándonos en los numerosos estudios que han indicado que la melatonina tiene un papel hepatoprotector tanto en modelos animales de daño hepático como en modelos celulares, el principal objetivo de esta tesis fue determinar el efecto de la melatonina en un modelo murino de fibrosis hepática inducida por tetracloruro de carbono (CCl4). Por ello, se analizaron las principales vías de señalización implicadas en su desarrollo y, además, se evaluó su efecto en las células estrelladas hepáticas humanas de la línea LX2 con el objetivo de demostrar si los resultados obtenidos podrían ser extrapolables a humanos. La administración de CCl4 indujo daño hepático, así como el desarrollo de fibrosis hepática, demostrado a través del aumento de los marcadores séricos de daño, junto con una expresión aumentada de los principales marcadores de fibrosis. De igual modo, la administración del tóxico provocó un aumento del proceso autofágico y el estrés del retículo endoplasmático, así como una desregulación de la vía de los esfingolípidos y los ritmos circadianos, mecanismos moleculares implicados en la progresión de la fibrogénesis. El tratamiento con melatonina, hormona con probada acción antioxidante, logró regular los efectos provocados por el CCl4, lo que contribuyó a reducir los marcadores de daño y fibrosis, a través de la modulación de las vías moleculares implicadas. Además, se demostró el efecto protector del indol en las células estrelladas hepáticas humanas de la línea LX2, células clave en la progresión de la fibrosis. En resumen, con este estudio se ha pretendido profundizar en el conocimiento de los mecanismos implicados en la fibrogénesis hepática para que, junto con otros estudios similares, se pueda contribuir a la búsqueda de nuevas posibilidades terapéuticas y con ello mejorar la esperanza de vida de los pacientes con enfermedades crónicas hepáticas.

179 p. El principal objetivo de esta tesis es estudiar el escalado de los sistemas bioelectroquímicos para reducir la materia orgánica y recuperar el nitrógeno contenido en corrientes de aguas residuales de alta carga de una manera energéticamente eficiente.

P. 272-278 Antibiotics are added to semen extenders when preparing commercial semen doses for artificial insemination according to national and international guidelines. However, this addition of antibiotics represents non-therapeutic usage and could be contributing to the development of antibiotic resistance. Colloid centrifugation was shown to reduce the load of bacteria present in boar semen and was capable of removing all bacteria if performed directly after semen collection, albeit with some loss of spermatozoa. The present experiment was conducted with a low density colloid to investigate whether it was possible to separate all of the spermatozoa from seminal plasma i.e. without selection for robust spermatozoa, or whether this would have a detrimental effect on sperm quality. Ejaculates from nine boars were extended in Beltsville Thawing Solution without antibiotics and were transported to the laboratory for Single Layer Centrifugation (SLC) on modified Porcicoll i.e. at a low density (S). A further modification was that a sterile inner tube was included inside some of the 50 mL centrifuge tubes to facilitate harvesting of the sperm pellet (M). Aliquots of all samples (control, S and M) were cultured for bacterial quantification and identification using standard microbiological methods. Sperm quality was evaluated daily. Three of the C and M samples and five of the S samples did not contain any bacteria. Mean bacterial counts for the remaining samples (colony forming units/mL) were as follows: C 259 ± 216; S 30 ± 22; M 33 ± 15 (P

P. 1-15 Knowledge on the relationships between species functional traits and environmental filters is key to understanding the mechanisms underlying the current patterns of biodiversity loss from a multi-taxa perspective. The aim of this study was to identify the main environmental factors driving the functional structure of a terrestrial vertebrate community (mammals, breeding birds, reptiles and amphibians) in a temperate mountain system (the Cantabrian Mountains; NW Spain). Based on the Spanish Inventory of Terrestrial Vertebrate Species, we selected three functional traits (feeding guild, habitat use type and daily activity) and defined, for each trait, a set of functional groups considering vertebrate species with common functional characteristics. The community functional structure was evaluated by means of two functional indexes indicative of functional redundancy (species richness within each functional group) and functional diversity. Ordinary least squares regression and conditional autoregressive models were applied to determine the response of community functional structure to environmental filters (climate, topography, land cover, physiological state of vegetation, landscape heterogeneity and human influence). The results revealed that both functional redundancy and diversity of terrestrial vertebrates were non-randomly distributed across space; rather, they were driven by environmental filters. Climate, topography and human influence were the best predictors of community functional structure. The influence of land cover, physiological state of vegetation and landscape heterogeneity varied among functional groups. The results of this study are useful to identify the general assembly rules of species functional traits and to illustrate the importance of environmental filters in determining functional structure of terrestrial vertebrate communities in mountain systems. SI

There have been a number of studies that described a serial of type of teratology occurring in different diatom taxa and that highlight the relation between metal concentration and diatom deformities, but this subject still remain not deeply understood. The present study refers to the effect of metal pollution on the diatom Achnanthidium minutissimum s.l. by describing a new form of teratology. The samples were collected in a mine area, Rosia Montana, from Romania. We observed that, exposed to environmental stress, the frustule of diatom cells appeared altered in several ways, with abnormal forms occurring in different diatom species that presented deformed valve outlines, modifications of the raphe canal system, irregular striation or mixed teratologies. In a particular sampling location where A. minutissimum s.l. was identified as the dominant species, 20.53% of the individuals presented an unreported type of deformity. This kind of teratology affects the cingulum, the valvocopula more exactly, by becoming markedly undulate.

9 paginas, 3 figuras y 3 tablas., The effects of habitat loss and fragmentation on the genetic structure and variability of wild populations have received wide empirical support and theoretical formalization. By contrast, the effects of habitat quality seem largely underinvestigated, partly due to technical difficulties in properly assessing habitat quality. In this study, we combine geographic information system (GIS)- based habitat-quality modelling with a landscape genetics approach based on mitochondrial DNA markers to evaluate the possible influence of habitat quality on the levels and distribution of genetic diversity in a range of natural populations (n=15) of Otis tarda throughout Spain. Ninety-three percent of the population represented by our countrywide sample lives in good-quality habitats, while 4.5% and 2.5% occur respectively in intermediate and poor habitats. Habitat quality was highly correlated with patch size, population size and population density, indicating the reliability and predictive power of the habitat suitability model. Genetic diversity was significantly correlated with habitat quality, size and density of the population, but not with patch size. Three of a total of 20 existing matrilineages from the species’ current genetic pool are restricted to poorquality habitats. This study therefore highlights the importance of considering both population genetics and habitat quality in a species of high conservation priority., The study was financed by the Dirección General de investigación (projects PB94-0068, PB97-1252, BOS2002-01543 and CGL2008-02567).

Este trabajo tiene por objeto servir como guía para la visita a la Reserva de la Biosfera del Alto Bernesga (León), que se enmarca en el conjunto de jornadas de campo realizadas con motivo de la IX Reunión de la Comisión Nacional de Patrimonio Geológico de la Sociedad Geológica de España. El objetivo de esta jornada de campo es realizar un acercamiento al patrimonio geológico del citado espacio natural, caracterizado por una importante geodiversidad y por la implicación de un notable sector de la población local en la conservación del patrimonio natural y cultural.

Rhodococcus equi is a facultative intracellular pathogen that can survive within macrophages of a wide variety of hosts, including immunosuppressed humans. Current antibiotherapy is often ineffective, and novel therapeutic strategies are urgently needed to tackle infections caused by this pathogen. In this study, we identified three mycoredoxin-encoding genes (mrx) in the genome of R. equi, and we investigated their role in virulence. Importantly, the intracellular survival of a triple mrx-null mutant (Δmrx1Δmrx2Δmrx3) in murine macrophages was fully impaired. However, each mycoredoxin alone could restore the intracellular proliferation rate of R. equi Δmrx1Δmrx2Δmrx3 to wild type levels, suggesting that these proteins could have overlapping functions during host cell infection. Experiments with the reduction-oxidation sensitive green fluorescent protein 2 (roGFP2) biosensor confirmed that R. equi was exposed to redox stress during phagocytosis, and mycoredoxins were involved in preserving the redox homeostasis of the pathogen. Thus, we studied the importance of each mycoredoxin for the resistance of R. equi to different oxidative stressors. Interestingly, all mrx genes did have overlapping roles in the resistance to sodium hypochlorite. In contrast, only mrx1 was essential for the survival against high concentrations of nitric oxide, while mrx3 was not required for the resistance to hydrogen peroxide. Our results suggest that all mycoredoxins have important roles in redox homeostasis, contributing to the pathogenesis of R. equi and, therefore, these proteins may be considered interesting targets for the development of new anti-infectives.

p. 91-107 En este trabajo se comentan los principales resultados del proyecto titulado “Estudio y catalogación de los Lugares de Interés Geológico (LIGs) de la provincia de Palencia” financiado por la Junta de Castilla y León, y realizado por un grupo de especialistas de la Universidad de León. Además, se exponen algunos casos concretos de los LIGs inventariados con el fin de profundizar en las diversas problemáticas que conlleva su gestión desde un punto de vista patrimonial y sugerir posibles soluciones a las mismas. SI

P. 515-523 Ene.Museo Nacional de la Energía, ubicado en la ciudad de Ponferrada (León) realiza actividades de divulgación científica desde su Departamento de Didáctica y Educación de la Ciencia a través de una programación didáctica para escolares y una amplia programación cultural. Varias de estas actividades se fundamentan en la divulgación y puesta en valor del patrimonio geológico de la zona, de la energía y los procesos energéticos asociados a elementos geológicos como el carbón. SI

Producción Científica, Our study explores the relationship between land surface albedo (LSA) changes and burn severity, checking whether the LSA is an indicator of burn severity, in a large forest fire (117.75 km2, Spain). The LSA was obtained from Landsat data. In particular, we used an immediately-after-fire scene, a year-after-fire scene and a pre-fire one. The burn severity (three levels) was assessed in 111 field plots by using the Composite Burn Index (CBI). The potentiality of remotely sensed LSA as an indicator for the burn severity was tested by a one-way analysis of variance, correlation analysis and regression models. Specifically, we considered the total shortwave, visible, and near-infrared LSA. Immediately after the fire, we observed a decrease in the LSA for all burn severity levels (up to 0.631). A small increase in the LSA was found (up to 0.0292) a year after the fire. The maximum adjusted coefficient of determination (R2adj) of the linear regression model between the immediately post-fire LSA image and the CBI values was approximately 67%. Fisher’s least significance difference test showed that two burn severity levels could be discriminated by the immediately post-fire LSA image. Our results demonstrate that the magnitude of the changes in the LSA is related to the burn severity with a statistical significance, suggesting the potentiality of immediately-after-fire remotely sensed LSA for estimating the burn severity as an alternative to other satellite-based methods. However, the persistency of these changes in time should be evaluated in future research., Ministerio de Economía, Industria y Competitividad (project 559 AGL2017-86075-C2-1-R), Junta de Castilla y León (project LE001P17)

P. 99-109 Este trabajo está dedicado al estudio de los minerales más abundantes y fácilmente reconocibles que pueden hallarse en dos minas abandonadas (la Profunda y La Providencia) localizadas en el área de Cármenes-Villamanín (Norte de León). Para ello se describen los métodos de reconocimiento más senci­llos y fiables sobre veintisiete minerales. Además, se incluye una localización geográfica y geológica de estas minas así como información sobre su génesis. Por último, se proponen a/gimas ideas sobre el posi­ble empleo docente de este material. SI

156 p. Cerebrovascular accident or stroke is one of the leading causes of mortality, the first cause of permanent disability and the second cause of dementia in developed countries. The lack of effective treatments requires an urgent search for new therapies against this pathology. In this regard, this study aims to gain insight into the mechanisms underlying the transient focal ischemia model related to the response to inflammation. The first chapter of this study focuses on the effect of a novel anti-inflammatory agent, 2-hydroxyarachidonic acid (2OAA) after 24 h of reperfusion. A single dose of 2OAA reduces the infarct volume, the transcription and activity of phospholipase A2, and the lipid peroxidation in the ischemic hemisphere. The decrease in transcriptional activity of anti-oxidant enzymes suggests that the neuroprotective effect of 2OAA relies on preventing oxidative stress rather than promoting anti-oxidant responses. This agent seemed promising in short-term studies, but its weak stability makes it inappropriate for long-term studies. The second and third chapters analyze the effects of the non-steroidal anti- inflammatory agent meloxicam. The second chapter focuses on the neuroprotective effect of meloxicam after 48 h reperfusion measuring both infarct volume and neurological deficit. Neuroprotection obtained with 1 mg/kg of meloxicam was maintained for seven days after reperfusion. Moreover, the chronic but not the acute dose of meloxicam improved the motor deficit. This behavioral improvement encompassed an increase in axonal sprouting after seven days in the damaged area, highlighting the potential of this agent to provide long-term recovery. The third chapter addresses the analysis of both acute and chronic administration of meloxicam on the glial scar after seven days of reperfusion. Glial scars in both the cerebral cortex and striatum were studied as well as the newly migrating neurons. Meloxicam reduced astrocyte activation after stroke in the cerebral cortex but not in the striatum after both acute and chronic treatments, suggesting an early modulation of the glial scar confined to the first 48 hours after reperfusion. This work provides a different view on the use of some anti-inflammatory agents with preferential selectivity for cyclooxygenase-2 and some remaining activity on cyclooxygenase-1 inhibition. The proper control of their dosage could provide effective treatments for the pathology of stroke.

P. 1-11 We analyse the effects of burn severity on individual soil properties and soil quotients in Mediterranean fire-prone pine forests immediately after a wildfire. Burn severity was measured in the field through the substrate stratum of the Composite Burn Index and soil samples were taken 7–9 days after a wildfire occurred in a Pinus pinaster Ait. ecosystem. In each soil sample, we analysed physical (size of soil aggregates), chemical (pH, organic C, total N and available P) and biological (microbial biomass C, b-glucosidase, urease and acid phosphatase activities) properties. Size of aggregates decreased in the areas affected by high burn severity. Additionally, moderate and high severities were associated with increases in pH and available P concentration and with decreases in organic C concentration. Microbial biomass C showed similar patterns to organic C along the burn severity gradient. The enzymatic activities of phosphatase and b-glucosidase showed the highest sensitivity to burn severity, as they strongly decreased from the low-severity scenarios. Among the studied soil quotients, the C : N ratio, microbial quotient and b-glucosidase : microbial biomass C quotient decreased with burn severity. This work provides valuable information on the impact of burn severity on the functioning of sandy siliceous soils in fire-prone pine ecosystems. SI

176 p. El ictus o accidente cerebrovascular (ACV) es una de las principales causas de muerte e incapacidad y conlleva grandes gastos tanto sociales como económicos. Los supervivientes de un ictus normalmente presentan incapacidades motoras o cognitivas que reducen gravemente su nivel de vida. Entre los factores de riesgo del ictus la edad es el más importante, dado que la mayor parte de los casos de ACV se dan a partir de los 65 años, y su incidencia aumenta exponencialmente con la edad. El progresivo envejecimiento de la población ha supuesto un aumento en la incidencia de esta patología, lo que incrementa la urgencia en la búsqueda de nuevas terapias para paliar el daño isquémico. A pesar de que el proceso de envejecimiento provoca una serie de alteraciones que pueden llevar a una respuesta diferente frente al ACV, la mayor parte de los estudios entorno a la patología del ictus y la búsqueda de nuevas terapias se realiza en animales jóvenes. Éste trabajo se centra en el proceso neuroinflamatorio, que es en parte responsable de los procesos de muerte celular retrasada asociada a esta patología, en animales jóvenes y viejos. En concreto éste estudio analiza el proceso de necroptosis, una modalidad de muerte celular regulada (MCR) descrita recientemente y estrechamente relacionada con la respuesta inflamatoria. Para la realización de este trabajo se ha utilizado un modelo de isquemia cerebral global inducida mediante la oclusión de las carótidas en un estado hipotenso. Este modelo permite la comparación entre la corteza cerebral (cx) y el área hipocampal CA1, regiones que presentan diferente vulnerabilidad al daño isquémico. En el primer capítulo se analizan, mediante Western blot (WB) y PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR), los principales marcadores de la señalización inducida por el receptor 1 del factor de necrosis tumoral (TNFR1) 48 y 72 horas después del ictus. Además, se analiza la pérdida neuronal 7 días después del ACV mediante inmunomarcado del antígeno neuronal NeuN. Nuestros datos indican que el ictus provoca necroptosis en la Cx, que esta respuesta comienza antes de las 48 horas y se mantiene al menos hasta las 72 horas de reperfusión. Algunos datos obtenidos en CA1, sugieren una respuesta necroptótica en esta región, sin embargo, los resultados obtenidos no permiten asegurarlo. La isquemia causa además estrés de retículo endoplasmático en la Cx, que ocurre simultáneamente a la inducción de la necorptosis, y cuya ejecución es paralela a una respuesta transcripcional mediada por NF-κB. La falta de activación de NF-κB en CA1 sugiere que la activación de NF-κB depende de la ejecución de la necroptosis. Además, dado que el alivio del estrés de retículo mediante la potenciación de la respuesta a las proteínas mal plegadas (UPR) inhibe la necroptosis y reduce la pérdida neuronal en la Cx, sugerimos que la necroptosis observada en esta área es dependiente del estrés de retículo. En el segundo capítulo se analiza el efecto del envejecimiento en la inflamación inducida por el ictus y se compara la respuesta entre la Cx y el CA1. La activación glial por el ictus se caracterizó a las 48 horas de reperfusión mediante análisis morfométricos y densitométricos de la microglía y la astroglía. Además, se caracterizó el fenotipo y la activación de la microglía mediante ensayos de qPCR. Los datos obtenidos en animales jóvenes muestran que, en la Cx, el ACV induce una polarización hacia ambos fenotipos microgliales, M1 y M2, mientras que en el CA1 solo se observa una polarización hacia el fenotipo M1. El envejecimiento altera la polarización de la microglía en el CA1, donde se puede observar cierta polarización hacia el fenotipo M2 asociado a la edad, pero no en la Cx, donde el envejecimiento, aunque altera la respuesta en algunos marcadores fenotípicos, no modifica sustancialmente la polarización. Estos datos sugieren una respuesta dependiente de la estructura asociada al envejecimiento, en la que la microglía del CA1 se ve más afectada que la microglía cortical. El ACV provoca una fuerte activación astroglial en la Cx que no se detecta en el CA1. Estos datos sugieren que la astrogliosis puede tener un papel en la diferente vulnerabilidad al daño isquémico observado entre estas regiones. Esta respuesta astroglial no se observa en los animales viejos, lo cual concuerda con el aumento en el daño isquémico asociado a la edad. Por último, el tercer capítulo se centra en los efectos del envejecimiento en la necroptosis inducida por el ACV. Para analizar el efecto de la edad en este tipo de MCR se midieron los principales marcadores de la ruta de señalización de TNFR1, mediante ensayos de WB y qPCR, tanto en animales jóvenes como en viejos, 48 horas después del ACV. Los resultados obtenidos en este estudio confirman que el ACV provoca necroptosis en la Cx, mientras que en CA1 podrían predominar otros tipos de MCR, como la apoptosis. Además, el envejecimiento acelera al menos 24 horas la progresión de la necroptosis en la Cx. El aceleramiento de la necroptosis parece depender de una menor expresión de las proteínas pro-supervivencia que regulan la señalización por TNFR1. Finalmente, los aumentos de algunos marcadores apoptóticos asociados a la edad en CA1, sugieren que la apoptosis es más relevante que la necroptosis en la muerte celular provocada por el ACV en esta área cerebral.

Las provincias de León y Palencia poseen una importante riqueza paleontológica. Ambas pertenecen a la Comunidad Autónoma de Castilla y León, donde no se ha desarrollado ninguna normativa de gestión y conservación del patrimonio paleontológico. Un reciente inventario de lugares de interés geológico realizado en ambas provincias recoge varios yacimientos paleontológicos relevantes. En este trabajo se resume la situación actual, la problemática y el estado de conservación de este patrimonio.

Revista electrónica on line Usage of high-throughput sequencing approaches allow for the generation and characterization of reference transcriptome datasets that support gene-based marker discovery, which in turn can be used to build genetic maps among other purposes. We have obtained a transcriptome assembly including 49,453 genes for the lentil (Lens culinaris Medik.) cultivar Alpo using RNAseq methodology. This transcriptome was used as reference to obtain 6,306 quality polymorphic markers (SNPs and short indels) analyzing genotype data from a RIL population at F7 generation derived from the interspecific cross between L. culinaris cv. Alpo and L. odemensis accession ILWL235. L. odemensis is a wild species included in the secondary gene pool and can be used as a source for gene introgression in lentil breeding programs. Marker data were used to construct the first genetic interspecific map between these two species. This linkage map has been used to precisely identify regions of the CDCRedberry lentil draft genome in which the candidate genes for some qualitative traits (seed coat spotting pattern, flower color, and stem pigmentation) could be located. The genome regions corresponding to a significant single quantitative trait locus (QTL) controlling “time to flowering” located in chromosome 6 and three QTLs regulating seed size and positioned in chromosomes 1 and 5 (two QTLs) were also identified. Significant QTLs for Ascochyta blight resistance in lentil were mapped to chromosome 6 in the genome region or close to it where QTLs for Ascochyta blight resistance have previously been reported. SI

P. 440–446 Liposomes could improve the delivery of substances to sperm. This study was conducted to investigate the effect of the antioxidant ellagic acid and ellagic acid-loaded liposomes on post-thawed sperm quality in broiler breeder roosters. Semen was diluted in Beltsville extender containing ellagic acid or ellagic acid-loaded liposomes (ellagic acid at 0 (control), 0.5, 1, and 2 mM) and cryopreserved. Sperm quality was evaluated post-thawing: motility characteristics (Computer-Assisted Semen Analysis), membrane functionality (HOS test), abnormal morphology, mitochondrial activity (Rhodamine 123), apoptotic status (Annexin V/Propidium iodide), malondialdehyde, and antioxidant activities (glutathione peroxidase (GPx), superoxide dismutase (SOD), and total antioxidant capacity (TAC)). The results showed that 1 mM ellagic acid-loaded liposomes improved total motility, membrane functionality, and viability comparing to 0.5 and 2 mM ellagic acid, 2 mM ellagic acid-loaded liposomes, and control group. Mitochondrial activity was significantly higher for 1 mM ellagic acid-loaded liposomes compared to the rest of the treatments, except 1 mM ellagic acid. Ellagic acid at 1 mM in both forms significantly increased GPx and TAC after freeze-thawing (no significant variation for SOD), and also yielded the lower proportion of apoptotic and dead cells. In conclusion, ellagic acid improved post-thawed sperm quality in broiler breeder roosters. The use of liposomes could further enhance the effects of ellagic acid. SI

P. 618-619 Mostramos en este trabajo algunos de los resultados del Grupo de Innovación Docente COMBIO, en el que se analiza la situación de las competencias genéricas y transversales del Grado en Ciencias Ambientales (Universidad de León). Otros resultados de este proyecto, para este Grado ya fueron presentados anteriormente (Calvo et al., 2016). En esta ocasión nos hemos fijado en los métodos concretos mediante los que estos alumnos indicaban que se habían trabajado y evaluado estas competencias. Los datos fueron recogidos mediante una encuesta que fue validada por dos expertos en el tema y que se distribuyó entre todos los alumnos del Grado. Se recogieron un total de 281 encuestas válidas. Del estudio se deduce que no existe ninguna competencia genérica que los alumnos consideren no haya sido adquirida en el Grado, aunque son “Manejar aplicaciones informáticas de análisis estadístico para experimentar y simular sobre problemas relacionados con la titulación”, “Diseñar protocolos específicos de la disciplina” y “Liderazgo” las que consideran, en un porcentaje más elevado, que no han sido trabajadas. En su mayoría consideran que un gran número de competencias son evaluadas mediante prácticas de laboratorio, seguidas de las de campo, también como resultado de actividades cuando recopilan información, mediante la participación en clase y mediante prácticas de ordenador. Los análisis llevados a cabo se basan únicamente en la opinión de los alumnos. Hemos recogido también la opinión de los profesores responsables de las asignaturas y la de los egresados, ambas serán puestas en conocimiento de la comunidad científica próximamente

P. 216-218 Lathraea squamaria L. hallazgo de notable interés corológico, constituye novedad para la flora palentina SI

P. 171-176 El patrimonio paleontológico, constituido por los fósiles y los yacimientos donde se encuentran, se caracteriza por presentar rasgos propios que hacen de su gestión un caso particular. Entre ellos se encuentra la multiplicidad legislativa que lo rige, la necesidad de conservar el contexto geológico en el que se encuentran los fósiles, o el hecho de que su atractivo para diversos grupos sociales incrementa su vulnerabilidad (Carcavilla et al., 2007, Henriques y Pena dos Reis, 2015, Vilas Boas et al., 2013). En este trabajo abordamos la problemática generada por la primera de las características citadas: la multiplicidad legislativa, es decir, el hecho de que los fósiles aparezcan legislados en normativas de diferente origen, categoría y objetivos. Para ello se han analizado, desde un punto de vista patrimonial, 186 yacimientos de icnitas de dinosaurios de la parte riojana de la Cuenca de Cameros (García-Ortiz, 2016). La gestión de estos yacimientos está regulada por normativas muy diversas, existiendo varias figuras de gestión y protección solapadas. SI