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Este trabalho objetiva verificar os potenciais das plantas Trichilia pallida e Sesamum indicum na prospecção de acaricidas botânicos, para serem utilizados como nova alternativa para controle do ixodídeo Rhipicephalus sanguineus. O extrato hexânico (e.h.) de folhas de T. pallida e o óleo essencial de sementes de S. indicum foram obtidos em laboratório, a partir de amostras coletadas, respectivamente, em uma área de Mata Atlântica e em fazendas de cultivo no Brasil. Larvas de R. sanguineus foram obtidas a partir de fêmeas ingurgitadas, coletadas em ambientes urbanos naturalmente infestados. Os bioensaios foram realizados em quadruplicata, a 27 ± 1oC, RH ? 80% e fotoperíodo de 12 horas. Cerca de 50 larvas, de 14 a 21 dias de idade, foram acondicionadas em envelopes de papel-filtro, impregnados com diferentes concentrações das substâncias vegetais, obtidas a partir da diluição de soluções-padrão. Em cada bioensaio, foram utilizados quatro envelopes impregnados com cada concentração testada. O grupo controle usou a mesma quantidade de larvas, submetidas a: 1. Envelopes sem nenhum tratamento; 2. Envelopes tratados com água destilada e, 3. Envelopes com solventes utilizados na preparação de soluções vegetais. Pela ação do e.h. de folhas de T. pallida e do óleo de S. indicum, após 24 horas de exposição, obtiveram-se, respectivamente, CL50 de 4.660 ppm e 107.729 ppm e CL99 de 14.217 ppm e 279.912 ppm. Após 48h, obtiveram-se, respectivamente, CL50 de 1.555 ppm e 78.880 ppm e CL99 de 3.431 ppm e 221.255 ppm. Mortalidade larval significativa não foi observada no grupo controle (P < 0,05). This paper aims at verifying the potentials of Trichilia pallida and Sesamum indicum in the prospection of botanical acaricide, to be used as a new alternative to R. sanguineus control. Hexanic extract (h.e.) of T. pallida leaves and essential oil from seeds of S. indicum were obtained in laboratory, from samples collected, respectively, in an area of Atlantic forest and in agricultural farms, in Brazil. R. sanguineus larvae were obtained from engorged females collected in naturally infested urban environs. Bioassays were carried out in quadruplicate, at 27 ± 1oC, RH ? 80% and photoperiod of 12 hours. About 50 larvae, from 14 to 21 days of age, were conditioned in filter paper envelopes, impregnated with different concentrations of vegetable substances, obtained from dilution of stock solutions. In each bioassay, four envelopes impregnated with each tested concentration were used. The control group used the same amount of larvae, submitted to: 1. envelopes with no treatment; 2. envelopes with distilled water and, 3. envelopes having solvents used in the preparation of vegetable solutions. For the action of h.e. leaves of T. pallida and S. indicum oil, after 24h of exposure, it was obtained, respectively, LC50 of 4,660 ppm and 107,729 ppm and LC99 of 14,217 ppm and 279,912 ppm. After 48h, it was obtained, respectively, LC50 of 1,555 ppm and 78,880 ppm and LC99 of 3,431 ppm and 221,255 ppm. There was no significant mortality rate within the control group (P < 0.05). Made available in DSpace on 2019-11-21T18:08:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 26907.pdf: 229077 bytes, checksum: 7a95db95b8292ea0f42eea7f00e9bd3b (MD5) Previous issue date: 2019

O carrapato bovino Rhipicephalus microplus é um ectoparasita que transmite patógenos causadores de doenças, como babesiose (Babesia bovis e B. bigemina) e anaplasmose (Anaplasma marginale). Como as vacinas comerciais atualmente disponíveis oferecem apenas uma proteção parcial contra R. microplus, a necessidade de se buscar vacinas mais eficientes é uma tarefa contínua. Proteínas recombinantes foram avaliados usando diferentes estratégias de imunização e elas representam uma grande promessa de potenciais vacinais. Este trabalho teve como objetivo principal, selecionar antígenos candidatos à vacina contra carrapatos Rhipicephalus microplus e posteriormente caracterizar, por métodos moleculares, desenvolvendo uma vacina baseada na proteína recombinante rRmLTI-rBmCG-LTB contra o ectoparasita. Outro objetivo deste trabalho, foi avaliar por métodos in silico, a possibilidade de criar uma vacina global baseada em epítopos conservados da proteína Bm86, contra carrapatos Rhipicephalus microplus. Os antígenos selecionados são partes das proteínas RmLTI e Bm86-CG, fusionados a um antígeno de Escherichia coli (subunidade B). Nesta mesma bactéria, em cepas distintas, foi possível clonar e expressar a proteína recombinate rRmLTI- rBmCG-LTB e caracterizá-la por Western blotting. A proteína recombinante foi avaliada como potencial imunógeno em teste de estábulo com modelos bovinos. A proteína recombinante homogeneizada em adjuvante Montanide? ISA 61 (Seppic), obteve 55,6% de eficiência vacinal. A análise dos soros dos bovinos em teste ELISA possibilitou verificar que a proteína recombinante rRmLTI- rBmCG-LTB, aumentou a imunidade humoral adquirida contra este antígeno. Conclui-se que, foi possível selecionar os antígenos contra o carrapato Rhipicephalus microplus, além de caracterizar e desenvolver uma proteína recombinante com os antígenos selecionados. Apesar da eficiência encontrada para os antígenos serem razoáveis, pesquisas para melhorar esta ferramenta de controle serão indispensáveis. Com relação à possiblidade de se fazer uma vacina global, distintas análises in silico possibilitaram obter três epítopos conservados para a proteína Bm86, que podem ser reconhecidos por células B e MHC, tornando-se potenciais imunogênicos tanto para populações de Rhipicephalus microplus de regiões geograficamente distintas como para a espécies irmã como R. australis, além de outras espécies como R. annulatus, R. decoloratus, devido ao carater conservado de seus peptídeos. Made available in DSpace on 2019-07-05T00:53:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Selecaodeantigenoscandidatosavacina.pdf: 5616456 bytes, checksum: c8cdb8be5d3aa5efc146f987a5d1e84b (MD5) Previous issue date: 2019 Orientação: Pesquisador da Embrapa Gado de Corte Renato Andreotti, matrícula: 239802 Coorientador Dr. Rodrigo Casquero Cunha.

Currently, the Rhipicephalus microplus infestation causes great losses to cattle production in Brazil. The control of R. microplus is carried out almost exclusively using chemical products. In this way, the availability of products with acaricidal activity is limited and the development of new drugs is a slow and gradual process. It is known that the epidemiological conditions are more favorable to the maintenance of the tick in the environment as well as to the infestation of the animals. As a result, the animals have been treated more frequently, together with the excessive use of these acaricides, often without technical criteria or evaluation of the effectiveness of the treatments, culminating in the appearance of parasitic resistance by the tick. In this context, the present work aims to determine the acaricidal activity in vitro and in vivo of organo-modified siloxanes associated or not with Piperonyl Butotoxide (PBO). For this, R. microplus teleogines were collected from different properties in the state of Rio Grande do Sul, submitted to the immersion test of teleogines described by Drummond et al. (1973), also outlining a comparative efficacy with a commercially available combination of organophosphates and pyrethroids. After observing the in vitro results, in vivo tests were started at four properties in the Santa Maria - RS region. A medium concentration of the associated organo-modified siloxanes was applied by spraying bath and the efficacy evaluation was perfomed according to the proposed by Roulston et al. (1968). The results revealed high acaricidal activity (100%) in vitro in the concentration of 5% on non-associated form, and in combinations of concentrations of 0.6; 1.0; 2.5% with PBO. The in vivo results also increased with the association of PBO, being that the efficacy significantly improved. This work allowed to conclude that the organo-modified siloxanes demonstrated acaricide activity, in addition to the synergistic effect of PBO association. Evidencing its importance, in face of the current multiresistance scenario of the R. microplus tick to the different commercially available compounds. Atualmente, a infestação por Rhipicephalus microplus acarreta grandes prejuízos à bovinocultura no Brasil. O controle do R. microplus é realizado quase que exclusivamente através da utilização de produtos químicos. Desse modo, a disponibilidade de produtos com atividade acaricida é limitada e o desenvolvimento de novas drogas é um processo lento e gradual. Sabe-se que as condições epidemiológicas estão mais favoráveis a manutenção do carrapato no ambiente bem como para a infestação dos animais. Em decorrência disto, animais tem sido tratados com maior frequência, acaricidas utilizados excessivamente sem critério técnico ou avaliação de eficácia dos tratamentos, culminando no aparecimento de resistência parasitária pelo carrapato. Neste contexto, o presente trabalho visa determinar a atividade acaricida in vitro e in vivo de siloxanos organo-modificados associados ou não ao Butóxido de Piperonila (BPO). Para isso, foram coletadas teleóginas de R. microplus oriundas de diferentes propriedades do estado do Rio Grande do Sul, submetidas ao teste de imersão de teleóginas descrito por Drummond et al. (1973) traçando também um comparativo de eficácia com uma associação de organofosforado e piretróide disponível comercialmente. Após observação dos resultados in vitro, foram iniciados testes in vivo em quatro propriedades da região de Santa Maria - RS. Foi aplicado uma concentração média dos siloxanos organo-modificados associados ou não, por meio de banho de aspersão e avaliação da eficácia segundo o proposto por Roulston et al. (1968). Os resultados revelaram alta atividade acaricida (100%) in vitro na concentração de 5% na forma não associada, e nas concentrações de 0,6; 1,0; 2,5% combinadas com BPO. Os resultados in vivo também apresentaram melhoria com a associação de BPO, sendo que a eficácia aumentou significativamente. Este trabalho permitiu concluir que os siloxanos organo-modificados demonstraram atividade acaricida, além do efeito sinérgico da associação de BPO. Evidenciando sua importância, frente ao atual cenário de multirresistência do carrapato R. microplus aos diferentes compostos comercialmente disponíveis.

Os carrapatos são ectoparasitos hematófagos que acarretam grandes prejuízos à produção animal. Também causam danos na saúde humana e animal pela transmissão de agentes causadores de doenças. O principal método de controle desses parasitos é baseado no uso de acaricidas. O controle imunológico surge como um método alternativo promissor. Para o sucesso desse controle, moléculas fundamentais na fisiologia do carrapato devem ser identificadas. Carrapatos da família Ixodidae podem se alimentar sobre os hospedeiros por períodos de mais de duas semanas, ativando, assim, a imunidade inata e adaptativa, como também respostas hemostáticas desses animais parasitados. Contudo, durante o curso da infestação, os carrapatos são hábeis em evadir essas defesas naturais dos hospedeiros. A saliva dos carrapatos possui um efeito inibitório sobre a ativação do sistema complemento, a inflamação e a coagulação sanguínea. Porém, são relativamente recentes os estudos na caracterização de componentes da saliva dos carrapatos com funções anticomplemento e anticoagulantes. Nos últimos anos, diversas proteínas vêm sendo descritas com essas atividades na saliva dos carrapatos, revelando um papel fundamental dessas moléculas na sobrevivência desses parasitos. Essas proteínas constituem um alvo potencial para o combate aos carrapatos. Parasitism by ticks, and infection by tick-borne pathogens, are significant medical and veterinary problems. In this moment, the main method of control is based on the acaricides. However, the use of vaccines has been studied as a promising control method. The key to the success in this strategy is the characterization of tick molecules that can be useful as antigens. Ixodid tick species feed on a host for long periods of two weeks or more, so the host can produce protection against the tick, which include haemostatic responses and activation of innate and adaptive immunity. However, ticks are able to evade the immune response during the normal course of an infestation. Inhibitory effects of saliva in the complement activation, inflammation and blood coagulation are observed in many tick species. Recently, novel salivary molecules involved in the host-parasite interaction and in tick evasion mechanism have been described and these molecules can be useful in studies geared to develop methods to control tick infestation.

Submitted by Sandra Pereira (srpereira@ufrrj.br) on 2021-03-23T00:57:17Z No. of bitstreams: 1 2018 - Barbara Rauta de Avelar.pdf: 1281811 bytes, checksum: f5f6969a06dcf5a2db1fddf307810084 (MD5) Made available in DSpace on 2021-03-23T00:57:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2018 - Barbara Rauta de Avelar.pdf: 1281811 bytes, checksum: f5f6969a06dcf5a2db1fddf307810084 (MD5) Previous issue date: 2018-04-03 Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior, CAPES, Brasil. In order to evaluate the in vitro efficacy, on the engorged females of Rhipicephalus microplus, of the growth regulators fluazuron, piriproxifen and diflubenzuron in three tests carried out with different solubility methodologies and immersion time. Assays in vitro were performed with ticks from the Porto Alegre strain. The solubility methodologies used for the three tests were as follows: in the first test, fluazuron 10% emulsifiable concentrate was used, and for the pyriproxyfen and diflubenzuron, solubilized feedstock was used in Triton-X 100 10% and xylol, a dilution also in distilled water. In this assay the following concentrations were analyzed for the three growth regulators 7.000, 6.000, 5.000, 4.000, 3.000, 2.000, 1.000, 500, 250 and 125 ppm. In the second assay fluazuron and pyriproxyfen solubilized in Triton-X 100 and N-methylpyrrolidone and diflubenzuron 1% emulsifiable concentrate were also used, also with the serial dilution in distilled water. In this, different concentrations were used for the growth regulators; for fluazuron the concentrations were 4.000, 3.750, 3.500, 3.000, 2.750, 2.500, 2.000, 2.250, 2.000, 1.750, 1.500, 1.250, 1.000, 750, 500, 250, 100 and 50 ppm, for piriproxifen 13.000, 12.000, 11.000, 10.000, 9.000, 8.000, 7.000, 6.000, 5.000, 4.000, 3.000, 2.000, 1.000, 500, 250, 100 e 50 ppm and for diflubenzuron 10.000; 9.000; 8.000; 7.000; 6.000; 5.000; 4.000; 3.000; 2.000; 1.000; 500; 250; 125 and 62,5 ppm. In the third and final assay, fluazuron, piriproxifen and diflubenzuron diluted in Triton-X 100, N- methylpyrrolidone and acetone with the serial dilution performed with the diluent. The concentrations in ppm in the third assay were the same for the three growth regulators, 4,000; 3,000; 2,000; 1,000; 500; 100; 50; 25; 1; 0.5; 0.1; 0.05 and 0.01 ppm. To perform the in vitro assay the engorged females were immersed at different concentrations for different times, in the first study for five minutes and in the two following for one minute, after drying and weighing were individually packed in petri dish for 21 days for weighing of the respective postures. Afterwards they were stored for another 21 days to read the percentage of hatching. As result, fluazuron showed 100% efficacy in all three trials, especially at the highest concentrations. Pyriproxyfen had the highest efficacy in the last trial, with 89% at 3,000 ppm, however, in the other trials, it showed approximately 70% efficacy at the highest concentrations in all three trials it was observed that pyriproxyfen reduced the weight of the postures. And diflubenzuron was more effective in the first study, however, the solubility of this drug was not adequate. In the second and third trials the efficacy was found to be less than 40%. Thus it is possible to conclude that the different results on the weights of the postures from the engorged females, such as the different hatching percentages, the reproductive efficiency indices and the efficacies for the growth regulators used were due to the methodologies of solubilization of the raw material. Com o objetivo de avaliar a efic?cia in vitro, sobre f?meas ingurgitadas de Rhipicephalus microplus, dos reguladores de crescimento fluazuron, piriproxifen e diflubenzuron em tr?s ensaios realizados com metodologias de solubiliza??o e tempo imers?o distintos. Os ensaios in vitro foram realizados com carrapatos oriundos da cepa Porto Alegre. As metodologias de solubiliza??o empregadas para os tr?s ensaios foram as seguintes: no primeiro ensaio utilizou-se concentrado emulsion?vel de fluazuron a 10%, e para o piriproxifen e diflubenzuron foi utilizado mat?ria prima solubilizada em Triton-X 100 a 10% e xilol, a dilui??o seriada tamb?m em ?gua destilada. Neste ensaio foram analisadas as seguintes concentra??es para os tr?s reguladores de crescimento 7.000, 6.000, 5.000, 4.000, 3.000, 2.000, 1.000, 500, 250 e 125 ppm. No segundo ensaio utilizou-se mat?ria prima de fluazuron e piriproxifen solubilizada em Triton-X 100 e N-metilpirrolidona e concentrado emulsion?vel de diflubenzuron a 1%, tamb?m com a realiza??o da dilui??o seriada em ?gua destilada. Neste foram utilizadas concentra??es distintas paras os reguladores de crescimento, para o fluazuron as concentra??es foram 4.000, 3.750, 3.500, 3.000, 2.750, 2.500, 2.000, 2.250, 2.000, 1.750, 1.500, 1.250, 1.000, 750, 500, 250, 100 e 50 ppm, para o piriproxifen 13.000, 12.000, 11.000, 10.000, 9.000, 8.000, 7.000, 6.000, 5.000, 4.000, 3.000, 2.000, 1.000, 500, 250, 100 e 50 ppm e para o diflubenzuron 10.000; 9.000; 8.000; 7.000; 6.000; 5.000; 4.000; 3.000; 2.000; 1.000; 500; 250; 125 e 62,5 ppm. No terceiro e ultimo ensaio foi utilizado mat?ria prima de fluazuron, piriproxifen e diflubenzuron dilu?da em Triton-X 100, N-metilpirrolidona e acetona, com a dilui??o seriada realizada com o diluente. As concentra??es em ppm no terceiro ensaio foram as mesmas para os tr?s reguladores de crescimento, sendo 4.000; 3.000; 2.000; 1.000; 500; 100; 50; 25; 1; 0,5; 0,1; 0,05 e 0,01 ppm. Para a realiza??o do ensaio in vitro as f?meas ingurgitadas foram imersas nas diferentes concentra??es por tempos distintos, no primeiro estudo por cinco minutos e nos dois seguintes por um minuto, depois de secas e pesadas foram acondicionadas individualmente em placa de petri por 21 dias para pesagem das respectivas posturas. Posteriormente foram acondicionadas por mais 21 dias para a leitura do percentual de eclos?o. Como resultado, o fluazuron apresentou efic?cia de 100% nos tr?s ensaios, principalmente nas concentra??es mais altas. O piriproxifen apresentou efic?cia mais alta no ultimo ensaio, com 89% de efic?cia na concentra??o de 3.000 ppm, no entanto nos outros ensaios apresentou efic?cia de aproximadamente 70% nas maiores concentra??es, em todos os tr?s ensaios foi observado que o pririproxifen reduziu o peso das posturas. E o diflubenzuron apresentou maior efic?cia no primeiro estudo, no entanto a solubiza??o deste n?o foi adequada, no segundo e terceiro ensaios a efic?cia encontrada para este regulador do crescimento foi inferior a 40%. Assim ? poss?vel concluir que os diferentes resultados sobre os pesos das posturas oriundas das f?meas ingurgitadas, como as diferentes porcentagens de eclos?o, os indicies de efici?ncia reprodutiva e as efic?cias para os reguladores dos crescimentos utilizados foram decorrente das metodologias de solubiliza??o da mat?ria prima.

RESUMO: Este estudo avaliou a incidência de infecções naturais pelos agentes da tristeza parasitária bovina (TPB), Anaplasma marginale, Babesia bovis e Babesia bigemina, em bezerros nascidos em cinco fazendas do semiárido paraibano. Em cada fazenda, foram coletadas amostras de sangue de 6 a 14 bezerros a cada 14 dias durante os primeiros 12 meses de vida de cada animal. As amostras de sangue foram processadas por microhematócrito e testadas por PCR para detecção de DNA de A. marginale, B. bovis e B. bigemina. Em paralelo, foram quantificadas as infestações por carrapatos nos bovinos nas cinco fazendas, assim como as populações de tabanídeos em três fazendas. De 41 bezerros monitorados durante o primeiro ano de vida, 25 (61,0%) apresentaram PCR positivo para A. marginale, 7 (17,1%) para B. bigemina e 3 (7,3%) para B. bovis. Os valores de incidência da infecção por A. marginale variaram de 83,3% a 100% em quatro fazendas. A infecção por B. bigemina ocorreu em bezerros de apenas duas fazendas (incidências de 12,5% e 85,7%) e a por B. bovis em apenas uma (incidência de 42,8%). Em uma fazenda os 14 bezerros permaneceram negativos para A. marginale, B. bigemina e B. bovis durante os 12 meses de acompanhamento. Os resultados de PCR foram confirmados por sequenciamento de DNA de produtos amplificados. A presença de carrapatos Rhipicephalus (Boophilus) microplus foi verificada somente em duas propriedades, nas quais houve infecção por A. marginale, B. bigemina e B. bovis (este último agente em apenas uma delas). Foram capturados 930 tabanídeos no estudo, a maioria durante os períodos de chuvas na região; 70,7% dos tabanídeos corresponderam a Tabanus claripennis. Houve associação significativa entre PCR positivo para A. marginale ou B. bigemina e menores valores de hematócrito. Este estudo demonstra que, mesmo avaliando apenas cinco propriedades rurais, a incidência dos agentes da TPB ocorreu de forma heterogênea na região, corroborando o status de área de instabilidade enzoótica para TPB previamente relatado para o semiárido paraibano. ABSTRACT: This study evaluated the incidence of natural infection by agents of cattle tick fever (CTF), Anaplasma marginale, Babesia bovis and Babesia bigemina in calves born in five farms within the semiarid region of Paraíba state, Brazil. In each farm, blood samples were collected from 6 to 14 calves every 14 days during the first 12 months of life of each animal. Blood samples were processed by microhematocrit and tested by PCR for detection of DNA of A. marginale, B. bovis and B. bigemina. In parallel, the tick infestations on animals were quantified in the five farms, as well as populations in horseflies in three farms. From a total of 41 calves monitored during the first year of life, 25 (61.0%) had positive PCR for A. marginale, 7 (17.1%) for B. bigemina and 3 (7.3%) to B. bovis. Incidence values for A. marginale infection ranged from 83.3% to 100% in four farms. Infection with B. bigemina in calves was detected at only two farms (incidence of 12.5% and 85.7%) and by B. bovis in just one (42.8% incidence). On one farm 14 calves remained negative for A. marginale, B. bigemina and B. bovis during the 12 month follow-up. PCR results were confirmed by DNA sequencing of amplified products. The presence of Rhipicephalus (Boophilus) microplus was found only in two farms in which there was infection by A. marginale, B. bigemina and B. bovis (the latter agent in only one of them). A total of 930 horseflies were captured in the study, most during periods of rain in the region; 70.7% of horseflies corresponded to Tabanus claripennis. There was significant association between a positive PCR for A. marginale and B. bigemina and lower hematocrit values. This study demonstrates that even evaluating only five rural properties, the incidence of CTF occurred heterogeneously in the region, confirming the status of enzootic instability area for CTF, previously reported for the semiarid region of Paraiba.

Ticks have been recognized as harmful parasite since ancient times. At present immunological protection of host against ticks is the most practical and sustainable tick control method, which is more suitable to natural environment compared to the current use of acaricides. Recently, focuses on the development of anti-tick vaccine are the identification, molecular cloning and in vitro production of recombinant protein, responsible for executing key roles in regulating physiology, modulation of host immune response and pathogen transmission via ticks. Among several works, serine protease inhibitors have been thought as one of the most interest vaccine candidates, because serine protease inhibitors are mainly involved in the maintenance of homeostasis. In the current review, we would like to introduce selected examples covering aspects of tick vaccine antigen identification and analyses, because advances in vector molecular biology open new possibilities for vaccine development. In dealing with this subject, contents were mainly divided into tick salivary gland associated molecules (exposed antigens) injected into the host during tick feeding and no salivary gland molecules (concealed antigens). While emerging the fact that serine protease inhibitors belong to either exposed or concealed antigens, the utility of serine protease inhibitors for the candidate vaccine have been discussed separately because of the importance of serine protease inhibitors in the physiology of several organisms including ticks. Advances in tick vaccine development and related subjects are regularly reviewed and in this paper, referred citations of excellence are suggested as additional reading.

This study aimed to determine the dynamics of natural infection in the transmission of Babesia spp. to cattle in an enzootic instability area in Northeastern Brazil. Blood samples were collected from 30 calves located on two dairy farms to determine the packed cell volume (PCV) and the timing of the primo-infection using polymerase chain reaction (PCR) and their association with climatic factors and management practices. On Farm A, the determination of primo-infection was observed on average at 249.4 (±24.42) days of age for B. bigemina and at 252.6 (±17.07) days of age for B. bovis; there was no significant difference between the times of infection (P> 0.05). The infection coincided with a period of high rainfall in the region. On Farm B, primo-infection infection was not observed. There was no infection by Babesia spp. on Farm B due to the intensive use of acaricides that led to an absence of ticks. There was no significant difference between the average PCV of animals from Farms A and B (P> 0.05). The management practices on the properties, in addition to the weather conditions influenced the exposure of the animals to disease vectors and may have contributed to the maintenance of this enzootic area in Northeastern Brazil. Resumo Este estudo teve como objetivo determinar a dinâmica da infecção natural na transmissão de Babesia spp. em bovinos de uma área de instabilidade enzoótica no Nordeste do Brasil. Foram coletadas amostras de sangue de 30 bezerras, proveniente de duas propriedades leiteiras para determinação do volume globular e da primo-infecção por meio da reação em cadeia da polimerase associando aos fatores climáticos e medidas de manejo. Na fazenda A, o período médio da primo-infecção para B. bigemina, determinado por meio da PCR, foi de 249,4 (±24,42) dias de idade, enquanto que para B. bovis foi aos 252,6 (±17,07) dias de idade, não existindo diferença estatística. A infecção coincidiu com o período de alta precipitação pluviométrica na região. Não houve infecção por Babesia spp. na fazenda B, na qual o uso intensivo de acaricidas determinou ausência de carrapatos. Não houve diferença significativa entre médias de VG dos animais das fazendas A e B. O manejo adotado nas fazendas estudadas, associado às condições climáticas, interferem na exposição dos animais aos vetores, podendo favorecer a manutenção de uma área de instabilidade enzoótica no Nordeste do Brasil.

O conhecimento da dinâmica populacional nos permite estudar as variações na abundância das populações de seres vivos. O conhecimento da abundância de carrapatos que parasitam os bovinos em lactação em uma determinada região é importante quando se considera os danos diretos que estes ectoparasitos causam e suas capacidades de transmitir agentes patogênicos para os animais. Assim, o objetivo do presente estudo foi caracterizar a dinâmica populacional de Rhipicephalus microplus em bovinos leiteiros mestiços naturalmente infestados, mantidos em sistema de pastejo rotacionado, durante 12 meses, em uma propriedade com climatologia regional tropical semiúmido no estado de Goiás. Para isso, semanalmente os bovinos selecionados tiveram os carrapatos fêmeas contado (4,5 a 8,0 mm). Também foi realizado quinzenalmente a técnica de arraste com flanela na pastagem para captura e posterior contagem das larvas de R. microplus. Os dados meteorológicos foram coletados durante o estudo para serem utilizados em análises de regressões e variância. Com base no delineamento experimental utilizado, foi possível observar o aumento no número de gerações do carrapato durante o experimento, para cinco gerações durante o ano. Observou-se, ainda, que as variáveis climáticas como umidade, temperatura e pluviometria teve relação direta com a quantidade de larvas presentes na pastagem (P>0,05). O número de larvas presente nas pastagens apresentou correlação negativa significativa (P≤0,05) com a precipitação pluviométrica (P=0,0001), temperatura ambiente (P=0,0005) e umidade relativa do ar (P=0,0120). Por outro lado, as contagens médias de partenógenas presentes no corpo dos animais, não apresentaram correlação significativa (P>0,05) com os parâmetros climatológicos. Em síntese, foi possível constatar a presença de cinco gerações/ano de R. microplus na região tropical semiúmido, além de influência das variáveis climáticas sobre a fase não parasitária do carrapato bovino. Tais resultados relacionam-se com os aspectos biológicos, ecológicos, populacionais e comportamentais de R. microplus, permitindo nos auxiliar a traçar um perfil epidemiológico na região e definir estratégias futuras de manejo e controle deste ectoparasito de bovinos. The knowledge of population dynamics allows us to study the variations in the abundance of populations of living beings. Knowledge of the abundance of ticks that parasitize lactating cattle in a given region is important when considering the direct damage that these ectoparasites cause and their ability to transmit pathogens to animals. The aim of the present study was to characterize the population dynamics of Rhipicephalus microplus in naturally infested mestizo dairy cattle maintained in a rotational grazing system for 12 months in a semi - humid tropical region in the state of Goiás. the selected cattle had the female ticks counted (4.5 to 8.0 mm). A flannel-dragging technique was also carried out in the pasture for the capture and subsequent counting of R. microplus larvae. The meteorological data were collected during the study to be used in regression and variance analyzes. Based on the experimental design used, it was possible to observe the increase in the number of tick generations during the experiment, for five generations during the year. It was also observed that the climatic variables such as humidity, temperature and rainfall had a direct relation with the amount of larvae present in the pasture (P> 0.05). The number of larvae present in pastures presented significant negative correlation (P≤0.05) with rainfall (P = 0.0001), ambient temperature (P = 0.0005) and relative humidity (P = 0.0120). On the other hand, the average parthenogenic counts in the animals' body did not show a significant correlation (P> 0.05) with the climatological parameters. In summary, it was possible to verify the presence of five generations / year of R. microplus in the tropical semi-humid region, besides the influence of the climatic variables on the non-parasitic phase of the bovine tick. These results are related to the biological, ecological, population and behavioral aspects of R. microplus, allowing us to help map an epidemiological profile in the region and to define future strategies for the management and control of this ectoparasite of cattle. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior FAPEMIG - Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais O rio Paranaíba está localizado predominantemente no bioma Cerrado, com algumas manchas de Mata Atlântica. Os pequenos mamíferos são modelos aplicáveis no estudo de carrapatos e circulação de patógenos, inclusive em ambientes com diferentes graus de degradação. O presente estudo descreve as diferentes espécies de pequenos mamíferos não voadores no vale do rio Paranaíba, e a identificação destes como portadores renais de leptospiras patogênicas; investiga o papel de pequenos mamíferos não voadores silvestres e sinantrópicos na ecologia da leptospirose em uma propriedade rural na região sudeste do estado de Goiás e avalia o papel desses animais como hospedeiros para carrapatos em áreas de Cerrado no vale do rio Paranaíba. Foram capturados 72 pequenos mamíferos não voadores de três espécies de marsupiais (36,1%, 38 espécimes) e oito espécies de roedores (63,9%, 46 espécimes). Do total, 24 (33,33%) estavam positivos à PCR do gene lipL32 e apenas um espécime de marsupial, Gracilinanus agilis, foi reagente à técnica de aglutinação microscópica (MAT) para o sorovar Australis na diluição de 1/100. Frente a PCR, 10 roedores (34,48%) e 14 marsupiais (32,56%) foram positivos. Bovinos de propriedade na região sudeste do estado de Goiás reagiram principalmente para estirpes pertencentes ao sorogrupo Icterohaemorrhagiae, adaptados às espécies de pequenos mamíferos. Do total de pequenos mamíferos capturados, apenas 14 espécimes, correspondentes aos gêneros Nectomys, Cerradomys, Oecomys, Necromys e Gracilinanus estavam infestados por carrapatos. A riqueza de carrapatos foi de pelo menos 04 espécies no Alto Paranaíba (Ixodes sp., Ornithodoros sp., Amblyomma dubitatum, Amblyomma sculptum), além de larvas de Amblyomma sp.; 02 no Médio Paranaíba (Ornithodoros sp. e Amblyomma dubitatum) e larvas de Amblyomma sp.; e apenas 01 no Baixo Paranaíba (Ornithodoros sp.). Pequenos mamíferos não voadores cumprem o papel de veiculadores de leptospiras patogênicas no vale do rio Paranaíba. Este é o primeiro relato de identificação, via PCR, de Gracilinanus agilis, Calomys sp., Hylaeamys megacephalus e Oecomys bicolor como portadores renais e veiculadores de leptospiras patogênicas. Pequenos mamíferos desempenham relevante papel na ecologia da leptospirose em propriedade rural produtora de leite, favorecendo a infecção de bovinos. Carrapatos do gênero Ornithodoros sp. foram encontrados parasitando apenas o didelfídeo Gracilinanus agilis. O carrapato da espécie Amblyomma dubitatum foi o de maior ocorrência em pequenos mamíferos do vale do rio Paranaíba e este parece ser o primeiro registro desta espécie em Nectomys sp. no bioma Cerrado. Como também o primeiro registo de Ixodes loricatus parasitando Cerradomys sp. e Ixodes loricatus em Rhipidomys sp. no Brasil. The Paranaiba’s river is located predominantly without Cerrado biome, with some spots of Atlantic Forest. Small mammals are models and no study of ticks and circulation of pathogens, even in environments with different degrees of degradation. The present study describes the different species of small non-flying mammals in the Paranaíba River valley, and their identification as renal carriers of pathogenic leptospiras. Investigates the role of small non-flying wild and synanthropic mammals in the ecology of leptospirosis in a rural property in the southeastern region of the state of Goiás. In addition, evaluates the role of these animals as hosts for ticks in Cerrado areas, in the Paranaíba river valley. Seventy-two small non-flying mammals were captured from three species of marsupials and eight rodent species. Of these 72, 24 (33.33%) were positive for lipL32 gene PCR and only one specimen, Gracilinanus agilis, was MAT reagent for serovar Australis. Among the marsupials, 14 (32.56%) were PCR positive, and 10 rodent specimens (34.48%) were diagnosed as renal carriers by the same technique. Cattle owned in the southeastern region of the state of Goiás reacted mainly to strains belonging to the serogroup Icterohaemorrhagiae, maintained by small mammals. Of the total of small mammals captured, ticks infested only 14 animals, corresponding to the genera Nectomys, Cerradomys, Oecomys, Necromys and Gracilinanus. The tick richness was at least 04 species in the Alto Paranaíba (Ixodes sp., Ornithodoros sp., Amblyomma dubitatum, Amblyomma sculptum) in addition to Amblyomma sp. 02 in the Middle Paranaíba (Ornithodoros sp. and Amblyomma dubitatum), and Amblyomma sp. and only 01 in the Low Paranaíba (Ornithodoros sp.). Small non-flying mammals play a role of pathogenic leptospires carriers in the Paranaíba river valley. This is the first report of PCR identification of Gracilinanus agilis, Calomys sp., Hylaeamys megacephala and Oecomys bicolor as renal carriers of pathogenic leptospires. Small mammals play a relevant role in the ecology of leptospirosis in rural dairy farms, favoring the infection of cattle. Ticks of the genus Ornithodoros sp. were found parasitizing only the didelid Gracilinanus sp. The Ambliomma dubitatum tick was the most frequent occurrence in small mammals in the Paranaíba river valley, and this seems to be the first record of this species in Nectomys sp. in the Cerrado biome. As well as the first, record of Ixodes loricatus parasitizing Cerradomys sp., and the first record of Ixodes loricatus in Rhipidomys sp. in Brazil. Tese (Doutorado)

Este estudo avaliou a incidência de infecções naturais pelos agentes da tristeza parasitária bovina (TPB), Anaplasma marginale, Babesia bovis e Babesia bigemina, em bezerros nascidos em cinco fazendas do semiárido paraibano. Em cada fazenda, foram coletadas amostras de sangue de 6 a 14 bezerros a cada 14 dias durante os primeiros 12 meses de vida de cada animal. As amostras de sangue foram processadas por microhematócrito e testadas por PCR para detecção de DNA de A. marginale, B. bovis e B. bigemina. Em paralelo, foram quantificadas as infestações por carrapatos nos bovinos nas cinco fazendas, assim como as populações de tabanídeos em três fazendas. De 41 bezerros monitorados durante o primeiro ano de vida, 25 (61,0%) apresentaram PCR positivo para A. marginale, 7 (17,1%) para B. bigemina e 3 (7,3%) para B. bovis. Os valores de incidência da infecção por A. marginale variaram de 83,3% a 100% em quatro fazendas. A infecção por B. bigemina ocorreu em bezerros de apenas duas fazendas (incidências de 12,5% e 85,7%) e a por B. bovis em apenas uma (incidência de 42,8%). Em uma fazenda os 14 bezerros permaneceram negativos para A. marginale, B. bigemina e B. bovis durante os 12 meses de acompanhamento. Os resultados de PCR foram confirmados por sequenciamento de DNA de produtos amplificados. A presença de carrapatos Rhipicephalus (Boophilus) microplus foi verificada somente em duas propriedades, nas quais houve infecção por A. marginale, B. bigemina e B. bovis (este último agente em apenas uma delas). Foram capturados 930 tabanídeos no estudo, a maioria durante os períodos de chuvas na região; 70,7% dos tabanídeos corresponderam a Tabanus claripennis. Houve associação significativa entre PCR positivo para A. marginale ou B. bigemina e menores valores de hematócrito. Este estudo demonstra que, mesmo avaliando apenas cinco propriedades rurais, a incidência dos agentes da TPB ocorreu de forma heterogênea na região, corroborando o status de área de instabilidade enzoótica para TPB previamente relatado para o semiárido paraibano. Made available in DSpace on 2018-12-18T23:38:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 IncidenciadeAnaplasmamarginale.pdf: 1563979 bytes, checksum: 038028b15daf0d97143c6c2eb13f8d5d (MD5) Previous issue date: 2018-12-17 Título em inglês: Incidence of Anaplasma marginale, Babesia bigemina and Babesia bovis among calves in the semiarid region of Paraiba, Brazil.

The cattle tick Rhipicephalus microplus causes significant economic losses in agribusiness. Control of this tick is achieved mainly through the application of chemical acaricides, often resulting in contamination of animal food products and of the environment. Another major concern associated with acaricide use is the increasing reports of resistance of this tick vector against the active ingredients of many commercial products. An alternative control method is vaccination. However, the commercially available vaccine based on a protein homologous to Bm86 exhibits variations in efficacy relative to the different geographical locations. This study aimed to identify antigenic determinants of the sequences of proteins homologous to Bm86. Phylogenetic analyses were performed to determine the extent of divergence between different populations of R. microplus to identify the sequence that could be used as a universal vaccine against the multiple geographically distinct populations of R. microplus and related tick species. Considering the extensive sequence and functional polymorphism observed among strains of R. microplus from different geographical regions, we can conclude that it may be possible to achieve effective vaccination against these cattle ticks using a single universal Bm86-based antigen. Made available in DSpace on 2018-12-19T23:44:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AnalysisofBm86conserved.pdf: 6146570 bytes, checksum: a50fdfc6aeace43d510f27da3a103aa7 (MD5) Previous issue date: 2018-12-18 Título em português: Análise de epítopos conservados da Bm86: é possível uma vacina global contra Carrapato-do-Boi Rhipicephalus microplus?

This experiment was carried out to study the bioacaricidal activity of Amburana cearensis against engorged females of Rhipicephalus (Boophilus) microplus. The crude ethanolic extract from the leaves of A. cearensis was submitted to partition with organic solvents (hexane, chloroform and ethyl acetate) in order of increasing polarity; and evaluated using three treatments at concentrations of 5, 10 and 25mg ml-1. To evaluate the acaricidal activity, engorged females were submitted to the adult immersion test. Parameters analyzed were the weight of females; weight of egg mass; percentage of hatch; reproductive efficiency; expected rate of reproduction; and efficacy. For each extract and concentrating fraction, tests were performed in triplicate. Among all fractions, the hexane (2.5%) achieved the best results in all parameters analyzed: 52.7% of inhibition of oviposition; 39% of hatching rate; 3,271 index of reproductive efficiency; and 67.0% effectiveness. The extract obtained gradual dose response with increasing concentration; and could be used as an aid in the control of R. (B.) microplus therapy. RESUMO: O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade acaricida in vitro de Amburana cearensis contra fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus (Boophilus) microplus. O extrato etanólico bruto das folhas de A. cearensis foi submetido à partição com solventes orgânicos (hexano, clorofórmio e acetato de etila) em ordem crescente de polaridade. Foram realizadas três diluições, nas concentrações de 5, 10 e 25mg ml-1. Para avaliar a atividade carrapaticida, fêmeas teleóginas foram submetidas ao teste de imersão de fêmeas ingurgitadas. Os parâmetros analisados foram peso das fêmeas, peso da massa de ovos, porcentagem de eclosão, eficiência reprodutiva, índice de reprodução esperada e eficácia. Para cada extrato, fração e concentração, os testes foram realizados em triplicata. Dentre as frações, a hexânica (2,5%) apresentou os melhores resultados para todos os parâmetros analisados, alcançando 52,7% de inibição da oviposição; 39,0% de porcentagem de eclosão; 3.271 de índice de eficiência reprodutiva; e 67% de eficácia. O extrato obteve uma dose resposta gradual com o aumento da concentração; podendo ser utilizado como terapia auxiliar no controle do R. (B.) microplus.

O Rhipicephalus microplus destaca-se entre os ectoparasitas de maior importância econômica na bovinocultura. O controle do carrapato bovino tem sido dificultado pela resistência de populações aos acaricidas sintéticos. Dessa forma, o objetivo do trabalho foi avaliar a eficiência carrapaticida de extratos, frações e metabólitos secundários de Lecythis lurida no combate ao R. microplus. Esse é o primeiro relato de estudo químico e biológico da espécie L. lurida, conhecida no cerrado leste do Maranhão, onde foi coletada, como sapucarana. Destaca-se pela sua densidade populacional e também pela exuberância de sua floração, muito visitada por várias espécies de abelhas. A investigação química revelou que os compostos obtidos da espécie L. lurida se agrupam na classe dos triterpenos, entre eles o friedelanol e a friedelina, esse último, como composto majoritário, além de misturas de triterpenos e esteroides. A avaliação da atividade carrapaticida sobre larvas e fêmeas ingurgitadas de carrapatos da espécie R. microplus revelou que apenas alguns extratos e frações apresentaram atividade moderada, considerando como parâmetros as concentrações testadas dos extratos e frações obtidos a frio e a quente de folhas e cascas de L. lurida.

Submitted by Boris Flegr (boris@uerj.br) on 2020-11-08T19:05:56Z No. of bitstreams: 2 ThamiresBenicio_PPGEE_parcial.pdf: 1161801 bytes, checksum: b54c2d74285279223bf5da0164f09a7c (MD5) ThamiresBenicio_PPGEE_completa.pdf: 2376648 bytes, checksum: 6fc4f08c6e7fa9d82eee83a22249ff57 (MD5) Made available in DSpace on 2020-11-08T19:05:56Z (GMT). No. of bitstreams: 2 ThamiresBenicio_PPGEE_parcial.pdf: 1161801 bytes, checksum: b54c2d74285279223bf5da0164f09a7c (MD5) ThamiresBenicio_PPGEE_completa.pdf: 2376648 bytes, checksum: 6fc4f08c6e7fa9d82eee83a22249ff57 (MD5) Previous issue date: 2017-08-30 Tropidurus catalanensis (Gudynas & Skuk, 1983) is a saxicolous and heliophilous species and its geographic distribution includes the northwest of Uruguay, the northeast of Argentina, the south of Paraguay and the southwest of Brazil, extending to the extreme southwest of the São Paulo State and the southeast of the Mato Grosso do Sul State. The objective of the present study was to analyze the composition and structure of community component of ectoparasites associated to a population of T. catalanensis located in Alegrete city, Rio Grande do Sul State, Brazil, aiming to evaluate the effects of this infestation on some aspects of the population. We analyze 315 lizards from Zoological Collection of Federal University of Santa Maria, collected between September/2007 and August/2008. The lizards were examined under a stereomicroscope and the prevalences and intensities of ectoparasites were quantified. Three species of ectoparasites were recorded: one tick, Ornithodoros fonsecai (Ixodidae) and two mites, Eutrombicula alfreddugesi and Microtrombicula sp. (Trombiculidae). Only mites were considered in analyzes. The total prevalence was 61.3% and a mean total intensity was 21.8 ± 37.5. Eutrombicula alfreddugesi had higher prevalence and Microtrombicula sp. a higher infestation intensity. Microtrombicula sp. used T. catalanensis dorsum, mostly, whereas E. alfreddugesi used its mite pockets in gular regions and armpits as the most common microhabitats. The prevalences and infestation intensities were significantly highest in hot season. The body size influenced the intensity of infestation in the lizards, with larger individuals having higher rates. The body condition differed among juveniles infested and non-infested by Microtrombicula sp., but was not related to the infestation rate. Males and females did not differ in infestation rates, but ontogenetic variation was observed with adults having higher prevalence and intensity of mite infestation. The infestation intensity did not differed between lizards with and without caudal autotomy. Pregnant females were more infested than non-pregnant ones, a result opposite to the expected, but the intensity did not affect the size and clutch mass. Factors such as saxicolous mode of life, age, body size, and the use of habitat in T. catalanensis, associated to some ecological and physiological characteristics of mite species, as well as climatic conditions of Pampa biome, with very low temperatures in cold season, can explain the results found in present study. The infestation patterns were significantly different from those already registered for Tropidurus, with the registration of two new ectoparasite species, so that long-term and under-sampled studies are essential for understanding the parasitic ecology of these lizards Tropidurus catalanensis (Gudynas & Skuk 1983) é uma espécie saxícola e heliófila e sua distribuição geográfica inclui o noroeste do Uruguai, o nordeste da Argentina, o sul do Paraguai e o sul do Brasil, se estendendo até o extremo sudoeste do estado de São Paulo e o sudeste do estado de Mato Grosso do Sul. O objetivo do presente estudo foi analisar a composição e a estrutura da comunidade componente de ectoparasitas associados a uma população de T. catalanensis situada no município de Alegrete, RS, buscando avaliar os efeitos dessa infestação sobre alguns aspectos ecológicos da população. Foram utilizados 315 lagartos provenientes da Coleção Zoológica da Universidade Federal de Santa Maria coletados entre setembro de 2007 e agosto de 2008. Os lagartos foram examinados em microscópio estereoscópico e as prevalências e intensidades dos ectoparasitas encontrados foram quantificadas. Foram registradas três espécies de ectoparasitas associados aos lagartos: o carrapato Ornithodoros fonsecai (Ixodidae) e os ácaros Eutrombicula alfreddugesi e Microtrombicula sp. (Trombiculidae). Apenas os ácaros foram considerados nas análises. A prevalência total foi de 61,3% e a intensidade média total foi de 21,8 ± 37,5. Eutrombicula alfreddugesi teve maior prevalência, mas a intensidade foi maior para Microtrombicula sp.. Os microhabitats mais utilizados foram o dorso para Microtrombicula sp. e as bolsas de ácaros nas regiões gulares e nas axilas para E. alfreddugesi. Houve diferença sazonal nas taxas de infestação, com as maiores prevalências e intensidades registradas na estação quente para ambas as espécies. O tamanho corporal influenciou a intensidade de infestação dos lagartos, com indivíduos maiores possuindo maiores taxas. A condição corporal diferiu entre os jovens infestados e não infestados por Microtrombicula sp., mas não esteve relacionada com a intensidade de infestação. Machos e fêmeas não diferiram quanto às taxas de infestação, mas foi registrada variação ontogenética, com adultos possuindo maiores prevalência e intensidade de infestação pelos ácaros. Não foi registrada diferença na intensidade de infestação entre lagartos com e sem autotomia caudal. Fêmeas grávidas foram mais infestadas do que fêmeas não grávidas, resultado oposto ao esperado, mas a intensidade não afetou o tamanho e a massa da ninhada. Fatores como o hábito de vida saxícola, idade, tamanho corpóreo e uso do habitat em T. catalanensis, associados a algumas características ecológicas e fisiológicas das espécies de ácaros, bem como as condições climáticas do bioma Pampa, com temperaturas muito baixas na estação fria, podem explicar os resultados encontrados no presente estudo. Os padrões de infestação foram significativamente diferentes do já registrado para Tropidurus, com o registro de duas novas espécies ectoparasitas, assim a realização de estudos de longo prazo e em ambiente ainda sub-amostrados são essenciais para a compreensão da ecologia parasitária nestes lagartos

Submitted by Celso Magalhaes (celsomagalhaes@ufrrj.br) on 2021-05-18T13:58:48Z No. of bitstreams: 1 2017 - Roberta Caroline Alvarenga Tolomelli.pdf: 1156139 bytes, checksum: f473634631348eb53ff79188b874b6be (MD5) Made available in DSpace on 2021-05-18T13:58:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017 - Roberta Caroline Alvarenga Tolomelli.pdf: 1156139 bytes, checksum: f473634631348eb53ff79188b874b6be (MD5) Previous issue date: 2017-08-16 Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES Canine babesiosis and ehrlichiosis are transmitted by the brown dog tick, Rhipicephalus sanguineus sensu lato (s.l.). These hemoparasites are well distributed in Brazil and the canine ehrlichiosis is more frequent than babesiosis. The aim of this study was to assess the frequency of Ehrlichia canis and Babesia vogeli in unfed ticks from two counties of Itagua? microregion, Rio de Janeiro. 369 R. sanguineus s.l. ticks were analyzed in peridomiciliary environment, including adults (194), nymphs (92) and larvae (83). The DNA samples were extracted through a HotSHOT modified method. The molecular detection of E. canis was made by a PCR that amplifies a 409 bp fragment of Disulfide oxidoreductase (dsb) gene of Ehrlichia spp. For B. vogeli detection, the samples were tested by a PCR that amplifies a 523 bp fragment of heat shock protein 70kDa (hsp70) gene. We obtained 41 (11.11%) positive samples for E. canis, 11 (5,67%) adults, 8 (8,69%) nymphs ans 22 (26,5%) larvae (p

A total of 277 rufous-collared sparrows, Zonotrichia capensis Müller, 1776 (Emberizidae), were examined for external parasites. The birds were captured using mist nets in seven locations in northern and central Chile. Additionally, seven carcasses from central Chile (the Biobío region) were necropsied to evaluate the presence of endoparasite infection. Ectoparasites were found on 35.8% (99/277) of the examined birds and they were represented by the following arthropods: feather mites Amerodectes zonotrichiae Mironov and González-Acuña, 2014 (Analgoidea: Proctophyllodidae), Proctophyllodes polyxenus Atyeo and Braasch, 1966 (Analgoidea: Proctophyllodidae), and Trouessartia capensis Berla, 1959 (Analgoidea: Trouessartiidae); a louse Philopterus sp. (Phthiraptera: Ischnocera); and ticks Amblyomma tigrinum Koch, 1844 (Acari: Ixodidae) and Ixodes auritulus Neumann, 1904 (Acari: Ixodidae). Two of the seven necropsied carcasses were infected with the acanthocephalan Mediorhynchus papillosus Van Cleave, 1916 (Gigantorhynchida: Gigantorhynchidae). To our knowledge, this study reports P. polyxenus, Philopterus sp., A. tigrinum, and M. papillosus for the first time for Z. capensis and expands the distributional range for T. capensis to Chile. Um total de 277 tico-tico Zonotrichia capensis Müller, 1776 (Emberizidae) foram examinados em busca de ectoparasitos. As aves foram capturadas com redes em sete localidades do norte e centro do Chile. Além disso, sete carcaças do centro Chile (Região de Biobío) foram examinadas para avaliar a infecção por endoparasitos. Ectoparasitos foram encontrados em 35,8% (99/277) das aves examinadas com a identificação dos ácaros Amerodectes zonotrichiae Mironov and González-Acuña, 2014 (Analgoidea: Proctophyllodidae), Proctophyllodes polyxenus Atyeo and Braasch, 1966 (Analgoidea: Proctophyllodidae) e Trouessartia capensis Berla, 1959 (Analgoidea: Trouessartiidae), piolho Philopterus sp. (Phthiraptera: Ischnocera) e carrapatos Amblyomma tigrinum Koch, 1844 (Acari: Ixodidea) e Ixodes auritulus Neumann, 1904 (Acari: Ixodidea). Duas das sete carcaças examinadas foram infectadas com o Acantocephala Mediorhynchus papillosus Van Cleave, 1916 (Gigantorhynchida: Gigantorhynchidae). Para o nosso conhecimento, este é o primeiro estudo para descrever P. polyxenus, Philopterus sp., A. tigrinum e M. papillosus em Z. capensis e expande a distribuição de T. capensis ao Chile. Fil: Llanos Soto, Sebastián. Universidad de Concepción; Chile Fil: Muñoz, Braulio. Universidad de Concepción; Chile Fil: Moreno, Lucila. Universidad de Concepción; Chile Fil: Landaeta Aqueveque, Carlos. Universidad de Concepción; Chile Fil: Kinsella, John Mike. Helmwest Laboratory; Fil: Mironov, Sergey. Russian Academy Of Sciences; Fil: Cicchino, Armando Conrado. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Biodiversidad y Biotecnología. Grupo de Entomología Edáfica Bonaerense Suboriental - GENEBSO; Argentina Fil: Barrientos, Carlos. Universidad Santo Tomas; Colombia Fil: Torres Fuentes, Gonzalo. Universidad de Concepción; Chile Fil: González Acuña, Daniel. Universidad de Concepción; Chile

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior O carrapato Amblyomma sculptum pertence ao complexo Amblyomma cajennnense, taxon mais importante na transmissão e como hospedeiro da bactéria Rickettsia rickettsii, principal agente etiológico da Febre Maculosa Brasileira e da Febre Maculosa das Montanhas Rochosas nos EUA. Como membro deste complexo de espécies, o carrapato A. sculptum é atualmente muito importante sob o aspecto médico veterinário atuando como vetor deste agente zoonótico no Brasil. Seu papel no ciclo biológico da riquétsia, bem como a relação Rickettsia-carrapato, precisam ser bem compreendidos pois estudos recentes encontraram esta espécie de bactéria no carrapato A. sculptum. Como parte desta relação, as funções de RNAs não codificantes de cadeias longas (lncRNA) são desconhecidas e precisam ser descobertas. Os lncRNAs estão envolvidos em uma infinidade de atividades celulares tais como transcrição, silenciamento gênico e abertura cromossômica, por exemplo. Dessa forma, apresentamos aqui uma abordagem in silico da modulação de lncRNAs pela Rickettsia amblyommii em carrapatos da espécie A. sculptum. Tomando como dados trabalhos publicados anteriormente nós identificamos e avaliamos possíveis lncRNAs para expressão diferencial em intestinos e ovários desta espécie de carrapato. Dois montadores de sequencias foram testados, Trinity e CLC Genomics, para construção de contigs e um filtro a partir de um pipeline caseiro para selecionar apenas sequências com características de lncRNA. Um total de 31.888 e 23.733 contigs foram montados pelo Trinity e CLC Genomics, respectivamente. Nós anotamos mais de 500 sequências possíveis de lncRNA contra os bancos de dados RefSeq RNA, RNA Central e NONCODE. Nossos resultados sugerem que a R. amblyommii está induzindo expressão diferencial de lncRNAs nos tecidos dos intestinos e ovários. Nosso trabalho contribui para o aumento do banco de dados de lncRNA de carrapatos bem como fornecer idéias iniciais de quais sequências de lncRNA estão envolvidas na relação Rickettsia- carrapato The Amblyomma sculptum tick belongs to Amblyomma cajennnense complex, the most important taxon in transmission and host for Rickettsia rickettsii bacteria, the main etiologic agent of Brazilian Spotted Fever in Brazil and Rocky Mountain Spotted Fever in USA. As a member of this species complex, A. sculptum tick is actually very important under human and veterinary subject acting as vector for this zoonotic agent in Brazil. Its role in biological cycle of rickettsia strains, as well Rickettsia-tick interactions, still need to be better understood since recent studies found these strains infecting A. sculptum ticks. As putative modulators of these pathogen-host interaction, the roles of long non-coding RNAs (lncRNA) of ticks are unknown and need to be discovered and characterized. The lncRNAs are involving in modulation of a plethora of cell activities as transcription, gene silencing and chromosome opening, for example. Thus, herein we present an in silico approach for analyze the modulation of lncRNAs by R. amblyommii in A. sculptum tick. Using previously published data sets of A. sculptum transcriptomes, we identified putative lncRNAs and evaluated for differential expression in midgut and ovaries in this tick specie. Two assemblers were tested, Trinity and CLC Genomics, to construct the contigs and a pipeline to select the sequences with lncRNA characteristics. We obtained 31,888 and 23,733 contigs of putative lncRNAs using Trinity and CLC Genomics, respectively. We further identified more than 500 sequences of putative lncRNA that significantly aligned to sequences of RefSeq RNA, RNA Central and NONCODE databases. The transcriptome analysis further suggests that R. amblyommii is inducing differential expression of putative lncRNAs in midgut and ovary tissues. The work herein contributes for tick lncRNA database increasing and the initials insights of which lncRNA sequences are involving in Rickettsia-tick relationship

Plants respond to wounding caused by mechanical stress or herbivory by synthesizing defense proteins. There are no studies reporting the action of induced plant proteins against ticks. The aim of this study was to investigate the effect of mechanically wounded Leucaena leucocephala leaves against Rhipicephalus (Boophilus) microplus. Initially, we carried out time course experiments to evaluate the impact of mechanical wounding on the protein content and the peroxidase, catalase and protease inhibitor activities in L. leucocephala. We then evaluated the acaricidal activity on R. (B.) microplus from protein extract collected from L. leucocephala after mechanical wounding. L. leucocephala leaves were artificially wounded, and after 6, 12, 24 and 48h, the leaves were collected for protein extraction. Quantitative and qualitative analyses of the proteins were performed. The protein content and peroxidase and protease activities increased 12h after wounding, and the acaricidal activity of this protein extract was evaluated using engorged R. (B.) microplus females. The protein extract obtained after wounding reduced egg production (8.5%) compared to those without wounding. Furthermore, the extract reduced egg hatching by 47.7% and showed an overall efficacy of 56.3% at 0.1 mgP/mL of the protein. We demonstrated that L. leucocephala defensive proteins could be effective against R. (B.) microplus. Resumo As plantas respondem a injúria causada por estresse mecânico ou por ataque de herbívoros através da síntese de proteínas de defesa. Não há estudos de proteínas induzidas de plantas contra carrapatos. O objetivo deste estudo foi verificar a atividade acaricida de extratos protéicos de folhas Leucaena leucocephala após injúria mecânica, sobre Rhipicephalus (Boophilus) microplus. Inicialmente foram conduzidos experimentos em diferentes intervalos de tempo para avaliar o impacto da injúria mecânica no conteúdo de proteína, atividade de peroxidase, catalase e inibidor de protease de L. leucocephala. Em seguida foi avaliada a atividade acaricida sobre R. (B.) microplus de um extrato protéico após injúria mecânica. Folhas de L. leucocephala foram artificialmente feridas e após 6, 12, 24 e 48h, as folhas foram coletadas para extração de proteínas. Análises quantitativas e qualitativas das proteínas foram realizadas. A quantidade de proteína e atividades de peroxidase e protease aumentaram 12h após a injúria. O extrato proteico obtido após injúria (12h) reduziu a produção de ovos (8,5%) em comparação com extratos de plantas sem injúria. O extrato reduziu 47,7% a eclosão de ovos e apresentou eficácia geral de 56,3% a 0,1 miligrama de proteína por mL (mgP/mL). Apresentamos que proteínas de defesa de L. leucocephala podem ter atividade sobre R. (B.) microplus.

Submitted by Celso Magalhaes (celsomagalhaes@ufrrj.br) on 2019-04-16T15:15:37Z No. of bitstreams: 1 2017 - Carolina Marotta Ribeiro.pdf: 4205553 bytes, checksum: 8753f0ae2604f18405966c1736882ddf (MD5) Made available in DSpace on 2019-04-16T15:15:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017 - Carolina Marotta Ribeiro.pdf: 4205553 bytes, checksum: 8753f0ae2604f18405966c1736882ddf (MD5) Previous issue date: 2017-03-08 Funda??o Carlos Chagas Filho de Amparo ? pesquisa Esatadual do RJ - FAPERJ Parasites of the genus Trypanosoma are unicellular and flagellated microorganisms from the Trypanosomatidae family. This study describes for the first time the encounter of two isolates of the Trypanosoma genus naturally infecting Rhipicephalus microplus and Amblyomma brasiliense characterized through molecular, morphological and biological analyzes. Trypanosoma cultures were obtained by isolation in IDE8 cell lines and maintained in L15B culture environment, incubated at 30?C. The isolates obtained had a good yield spread in an L15B environment at temperatures of 30oC, 32?C and 34?C. The culture remained stable over 14 spread passages in axenic culture in L15B environment at a temperature of 30?C. Cryopreservation of the isolated culture presented viability after thawing due to liquid nitrogen storage. The curve of growth and analysis of the evolutionary forms of the isolates in the axenic environment and the cell lines IDE8 and DH82 were performed. The analysis of nucleotide sequences obtained with goals directed at the region 18S rDNA and 24S? rDNA confirmed the authenticity of this new species. The nucleotide sequences described were deposited to Genbank. Scanning electron microscopy and morphometric analysis revealed a wide morphological diversity of the two described species. Flow cytometry associated with fluorescence microscopy confirmed the internalization of both Trypanosomatid isolates in cells from the IDE8 and DH82 lines even with the inhibition of cellular phagocytosis. Pathogenicity-related aspects, involvement in vertebrate hosts, epidemiology, evolutionary cycle and transmission mechanisms are still unknown. Therefore, more studies will be necessary for the knowledge of life cycle aspects of Trypanosoma rhipicephalis sp. nov. and Trypanosoma amblyommi sp. nov. Parasitos do g?nero Trypanosoma s?o microrganismos unicelulares e flagelados que pertencem ? fam?lia Trypanosomatidae. O presente estudo descreve pela primeira vez o encontro de dois isolados do g?nero Trypanosoma, um infectando naturalmente o carrapato Rhipicephalus microplus e o outro infectando naturalmente o carrapato Amblyomma brasiliense. Ambos isolados foram caracterizados atrav?s de an?lises moleculares, morfom?tricas e biol?gicas. As culturas de Trypanosoma foram obtidas atrav?s do isolamento em linhagens celulares de IDE8 e mantidas meio de cultivo L15B, incubadas em estufas bacteriol?gicas a 30?C. Os isolados obtiveram um bom rendimento de propaga??o em meio L15B nas temperaturas de 300C, 320C e 340C. A cultura permaneceu est?vel com mais de 14 passagens de propaga??o em cultura ax?nica com meio L15B ? temperatura de 30?C. A criopreserva??o da cultura do isolado apresentou viabilidade ap?s descongelamento pelo armazenamento em nitrog?nio l?quido. Foi realizada a curva de crescimento e an?lise das formas evolutivas dos isolados em meio ax?nico e nas linhagens celulares IDE8 e DH82. A an?lise das sequ?ncias nucleot?dicas obtidas com alvos dirigidos para a regi?o 18S rDNA e 24S? rDNA comprovaram a autenticidade dessas novas esp?cies. As sequ?ncias nucleot?dicas descritas foram depositadas no Genbank. A microscopia eletr?nica de varredura e an?lise morfom?trica revelaram ampla diversidade morfol?gica das duas esp?cies denominadas Trypanosoma rhipicephalis sp. nov. cepa P1RJ e Trypanosoma amblyommi sp. nov. cepa C1RJ. A citometria de fluxo associada ? microscopia de fluoresc?ncia comprovou a internaliza??o de ambos os isolados de Tripanosomat?deos em c?lulas das linhagens IDE8 e DH82 mesmo com a inibi??o da fagocitose celular. Aspectos relacionados ? patogenicidade, envolvimento com hospedeiros vertebrados, epidemiologia, ciclo evolutivo e mecanismos de transmiss?o ainda s?o desconhecidos. Portanto, ser?o necess?rios mais estudos para o conhecimento de aspectos do ciclo biol?gico de Trypanosoma rhipicephalis sp. nov. e Trypanosoma amblyommi sp. nov.

CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico No Brasil, a maioria das viroses transmitidas por artrópodes (arboviroses) pertence ao gênero Flavivirus, no entanto, aqueles transmitidos por carrapatos são menos estudados do que os transmitidos por insetos. Além dos vírus, outros microrganismos possuem grande relevância em saúde pública. Riquétsias são os principais agentes de zoonoses transmitidas por carrapatos no Brasil, especialmente as do Grupo da Febre Maculosa (GFM), que inclui diversas espécies patogênicas e que são transmitidas por carrapatos. Dentre os diversos biomas, dois foram particularmente degradados no Brasil, a Mata Atlântica e o Cerrado. Diante destes motivos, esta tese compõe-se de três capítulos, que tiveram como objetivo identificar carrapatos vetores em áreas do Cerrado e Mata Atlântica adjacentes a áreas com atividade humana, pesquisando por patógenos causadores de zoonoses, Rickettsia spp. e Flavivirus. No primeiro capítulo, a presença de riquétsias foi averiguada em carrapatos de cães e carnívoros da região de Cumari-GO. Pesquisou-se por esse microrganismo em oito espécies de carnívoros silvestres e em cães domésticos. Duas amostras amplificaram fragmentos do gene ompB, presente em riquétsias do GFM, e ao mesmo tempo amplificaram fragmentos específicos para Rickettsia bellii, que não pertence a esse grupo. Isso demonstra uma possível infecção cruzada, podendo o carrapato manter concomitantemente estas duas espécies divergentes. O segundo capítulo, dados de carrapatos de tamanduás (Myrmecophaga tridactyla e Tamandua tetradactyla) referentes a um período de 18 anos foram analisados, 169 amostras foram avaliadas quanto à presença de riquétsias. Quatro destas amostras exibiram sequência de ompA com 100% de identidade com outras sequências de carrapato Amblyomma nodosum, indicando que Rickettsia spp. do grupo da febre maculosa (SFG) em Amblyomma nodosum estava circulando no entorno da cidade de Uberlândia e estado de São Paulo, podendo outros carrapatos, tais como A. sculptum serem infectados, gerando risco para animais domésticos e seres humanos. No último capítulo, carrapatos de seis áreas, uma pertencente à Mata Atlântica e as outras do bioma Cerrado, foram avaliados quanto à presença de Flavivirus. Nestes locais foram pesquisados carrapatos de doze espécies diferentes, sendo onze da família Ixodidae e um da família Argasidae, estes pertenciam às espécies: Amblyomma sculptum, Rhipicephalus sanguineus, Rhipicephalus microplus, Dermacentor nitens, Amblyomma ovale, Amblyomma dubitatum, Amblyomma parvum, Amblyomma rotundatum, Amblyomma incisum, Amblyomma brasiliense, Amblyomma naponense e Ornithodoros sp. Detectou-se a presença de um flavivírus em carrapatos R. microplus coletados na região de Uberlândia. Estas amostras exibiram aproximadamente 98% de identidade com o Vírus do Carrapato Mogiana (MGTV). Todos os carrapatos que exibiram resultados positivos para flavivírus ou riquétsias, foram coletados em áreas antropizadas, confirmando a importância do estudo de vetores hematófagos na epidemiologia de agentes virais e bacterianos de animais domésticos e selvagens. In Brazil, most arthropod-transmitted viruses (arboviruses) belong to Flavivirus genus, being tick-transmitted less studied than insect-transmitted ones. Other microorganisms have great public health relevance, such as Rickettsia, the main agent of tick-borne diseases in Brazil, specially the Macular Fever (MF) group, which includes several pathogenic species that are transmitted by ticks. Within different biomes, both the Atlantic Forest and the Cerrado were severely degraded in Brazil. This thesis consisted of three chapters, aiming to identify ticks in areas of Cerrado and Atlantic Forest with surrounding human activity, looking for both Rickettsia and Flavivirus infected ticks. In the first chapter, the presence of Rickettsia was investigated in ticks from dogs and other carnivores, being eight wild carnivores species and domestic dogs in Cumari, Goiás state, Brazil. Two samples were positive for ompB gene, common in the MF group, being also positive for specific genes found in Rickettsia bellii, which does not belong to the MF group. This result shows a possible cross-infection, being tick able to maintain these two different species simultaneously. The second chapter, an 18- year-study-data from anteater ticks (Myrmecophaga tridactyla and Tamandua tetradactyla) was analyzed, accounting 169 samples evaluated for the presence of Rickettsia. Four samples were positive for ompA gene, being 100% identical to other tick sequences present in Amblyomma nodosum, indicating that Rickettsia from the MF group in A. nodosum was circulating around the city of Uberlândia and state of São Paulo. Other ticks, such as A. sculptum, could become infected by the Rickettsia presence, generating risk for domestic animals and humans. In the last chapter, ticks from six areas, being one from the Atlantic Forest and the others from the Cerrado biome, were evaluated for the presence of Flavivirus. 12 different species were accounted, in which eleven were from the Ixodidae family and one was from the Argasidae family, having the following species identified: Amblyomma sculptum, Rhipicephalus sanguineus, Rhipicephalus microplus, Dermacentor nitens, Amblyomma ovale, Amblyomma dubitatum, Amblyomma parvum, Amblyomma rotundatum, Amblyomma incisum, Amblyomma brasiliense, Amblyomma naponense and Ornithodoros sp. The presence of a Flavivirus in R. microplus ticks collected in the Uberlândia region was detected. These samples exhibited approximately 98% identity with the Mogiana Tick Virus (MGTV). All ticks that were positive for Flavivirus or Rickettsia were collected in areas with human activities, stating the importance of studies on hematophagous vectors in the epidemiology of both viral and bacterial agents in domestic and wild animals. Tese (Doutorado)

Submitted by AMANDA FIGUEIREDO null (ffigueiredo.amanda@gmail.com) on 2017-04-10T14:46:21Z No. of bitstreams: 1 AMANDA FIGUEIREDO_DissertaçãoMestrado1004.pdf: 2196239 bytes, checksum: 95b634a045041887f91f2979d0896cb5 (MD5) Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-04-17T17:30:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 figueiredo_a_me_jabo.pdf: 2196239 bytes, checksum: 95b634a045041887f91f2979d0896cb5 (MD5) Made available in DSpace on 2017-04-17T17:30:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 figueiredo_a_me_jabo.pdf: 2196239 bytes, checksum: 95b634a045041887f91f2979d0896cb5 (MD5) Previous issue date: 2017-02-24 Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) O parasitismo por Rhipicephalus (Boophilus) microplus ocasiona grandes perdas econômicas nos rebanhos bovinos, e seu controle por meio de carrapaticidas sintéticos enfrenta problemas de resistência, além do risco de resíduos nos alimentos e ambiente. Com o objetivo de contribuir com informações relevantes para o controle desse parasita, o presente estudo teve três objetivos: 1) avaliar in vitro o efeito do óleo essencial de Ocotea elegans “canela-sassafrás” sobre larvas e fêmeas ingurgitadas de R. (B.) microplus; 2) avaliar medicamento homeopático no controle de infestações naturais; 3) comparar as técnicas de estimativa visual e de quantificação por amostragem de larvas eclodidas no teste de imersão de fêmeas adultas, visto a importância dessas no levantamento de substâncias com ação carrapaticida. No primeiro experimento “Efeito acaricida e repelente in vitro do óleo essencial de Ocotea elegans (canela-sassafrás) sobre Rhipicephalus (Boophilus) microplus”, foram adotados os testes: contato de larvas em papel impregnado (LPI), teste de repelência larvar (TR) e imersão de fêmeas adultas (AIT). A fim de verificar a eficácia, O. elegans foi avaliada nas concentrações de 0,78 mg/mL a 100 mg/mL. No AIT, a partir da concentração de 25 mg/mL, a eficácia foi superior a 90%. Os LPI (48h) a 100 mg/mL resultaram em taxas de mortalidade acima de 70%. Já o TR obteve repelência superior a 80% a partir da menor concentração avaliada. Em relação às concentrações letais (CL), a menor CL50 obtida no LPI foi de 25,59 mg/mL 48h pós tratamento. As CL50 e CL90 no AIT foram de 4,96 e 17,37 mg/mL e no TR de 0,04 e 1,24 mg/mL, respectivamente. Foi possível concluir que O. elegans demonstrou efeito significativo sobre fêmeas ingurgitadas e de repelência das larvas, e possivelmente pode ser um adjuvante no controle do carrapato bovino, devendo-se priorizar testes in vivo. No segundo experimento, “Estudo da homeopatia no controle de infestações naturais por R. (B.) microplus em bovinos de leite”, 24 fêmeas da raça Holandesa e Jersey x Holandesa foram divididas nos grupos controle (placebo) (n=12) e tratado (bioterápico 30 CH + Sulphur 30 CH) (n=12), administrado no concentrado (2kg/animal/dia) por 12 meses. De cada grupo coletou-se fêmeas ingurgitadas, a fim de comparar os parâmetros reprodutivos, e semi-ingurgitadas para avaliações morfo-histológicas dos ovários. Mensurou-se o peso vivo (PV), volume globular (VG) e realizou-se contagens de fêmeas ingurgitadas no corpo dos animais. Os resultados médios de PV, VG e n° de carrapatos não foram diferentes estatisticamente para os grupos controle e homeopatia: 616,5 kg e 618,6 kg, 27,9% e 27,3%, 12,19 e 13,58 carrapatos, respectivamente. Nas análises in vitro, as médias do peso das fêmeas (0,18 e 0,17 g), peso dos ovos (0,07 e 0,06 g), % de eclosão de larvas (70,1 e 76,6%) e índice de eficiência reprodutiva (54,3 e 60,6%), para os grupos controle e homeopatia, respectivamente, também não tiveram diferença estatística. Além disso, nenhuma alteração nos ovários foi observada nos estudos em foto-microscopia. Portanto, o medicamento homeopático avaliado não foi eficaz no controle de R. (B.) microplus e não interferiu nos parâmetros reprodutivos das fêmeas ingurgitadas. Finalmente, no estudo “Alternative methods for egg hatch evaluation of Rhipicephalus (Boophilus) microplus” em que comparou-se duas técnicas de estimativa de eclosão de ovos, fêmeas ingurgitadas coletadas de bovinos foram submetidas ao AIT com extratos vegetais e mantidas em incubadora para realizar a oviposição. Os ovos foram transferidos para seringas e incubados por 15 dias. A eclosão dos ovos foi avaliada em 210 seringas por estimativa visual (%) e também contadas até 100, em três repetições. Foram encontradas diferenças significativas entre os dois testes. Na estimativa visual (56,8%) a porcentagem de eclosão média foi maior do que na quantificação por amostragem (48,0%). Na quantificação por amostragem, não foram observadas diferenças estatísticas nas contagens das três amostras (48,1, 47,8 e 48,1%) e a correlação entre as repetições foi de 0,96, sugerindo que a contagem de uma amostra é suficiente e o resultado independente do avaliador. O presente estudo contribuiu com informações inéditas sobre o potencial acaricida e repelente de O. elegans. Discutiu-se que apesar do medicamento homeopático não ter tido efeito, tal conclusão não pode ser estendida a outras formulações homeopáticas, vias de aplicação e condições de manejo adversas às do presente estudo. Por fim, os resultados do estudo comparativo contribuem para o aperfeiçoamento do AIT e podem estimular os pesquisadores a optar por técnicas mais confiáveis na avaliação da eclosão de ovos. The parasitism by Rhipicephalus (Boophilus) microplus causes large economic loss in cattle herds and its control through chemical acaricides faces problems of resistance and residues in food and in the environment. Aiming to contribute with relevant information for the control of this parasite, the present study had three objectives: 1) evaluate the effect in vitro of Ocotea elegans essential oil on larvae and engorged females of R. (B.) microplus, 2) evaluate homeopathic medicine to control R. (B.) microplus natural infestations, and 3) compare visual estimation and quantification by sampling techniques of larvae hatching in the engorged females immersion test, due to the importance of this technique in the screening of substances with antiparasitic action. In the first experiment, "In vitro acaricidal and repellent effect of Ocotea elegans essential oil on R. (B.) microplus", were adopted the tests: larval packet test (LPT), the larval repellency test (RT) and the adult immersion test (AIT). In order to verify efficacy, O. elegans was evaluated at concentrations of 0.78 mg/mL to 100 mg/mL. In the AIT, from the concentration of 25 mg/ml, the efficacies were higher than 90%. LPT (48h) at 100 mg/mL resulted in mortality rates higher than 70%. The RT obtained repellency higher than 80% sice the lowest concentration evaluated. In relation to the lethal concentrations, the lowest LC50 obtained in the LPT was 25.59 mg/mL, 48 hours post treatment. The LC50 and LC90 in the AIT were 4.96 and 17.37 mg/mL and in TR were 0.04 and 1.24 mg/mL, respectively. It was possible to conclude that O. elegans had significant effect in engorged females and larvae repellency and may be in the future an adjuvant for tick control, prioritizing in vivo tests. In the second experiment, “Study of homeopathy in the control of natural infestation of R. (B.) microplus in dairy cattle”, 24 females of the Dutch and Jersey x Dutch breed were divided in the control group (placebo) and treated (biotherapic 30 CH + Sulphur 30 CH) (n=12), administered in the concentrate at 2 kg/animal/day for 12 months. It was collected in each group engorged females to compare the reproductive parameters, and semi-engorged females for the ovaries histologic evaluation. The live weight (LW), packed cell volume (PCV) and counts of engorged females in the animals’ body were held. The average results of LW, PCV and ticks were not statistically different in the control and homeopathic groups: 616.5 kg and 618.6 kg, 27.9% and 27.3%, 12.19 and 13.58 ticks, respectively. In the in vitro analyzes, the average weight of females (0.18 and 0.17 g), egg weight (0.07 and 0.06 g), larvae hatching % (70.1 and 76.6%) and reproductive efficiency index (54.3 and 60.6%), to control and homeopatic groups, respectively, had no statistical difference as well. In addition, no changes in the ovaries were observed in microscopy. Therefore, the homeopathic medicine assessed didn’t present efficacy in the R. (B.) microplus control, and didn’t interfere in the reproductive parameters of engorged females. Finally, in the study "Alternative methods for egg hatch evaluation of Rhipicephalus (Boophilus) microplus" in which two techniques of egg hatching estimation were compared, engorged females collected from cattle were subject to the AIT with plant extracts and kept in an incubator to perform oviposition. Eggs were transferred to syringes and incubated for 15 days. Egg hatching was evaluated in 210 syringes by visual estimation (%) and also counted until 100 in three repetitions. Significant differences were found between the two tests. In the visual estimation (56.8%) the hatching percentage average was higher than in the quantification by sampling (48.0%). In quantification by sampling, no statistical differences were observed in the pairwise counts between the three samples (48.1, 47.8 and 48.1%) and, the correlation of repetitions was 0.96, suggesting that the count of one sample is sufficient and the result should not differ much, regardless of the evaluator. The present study contributed with unreleased information about the acaricide and repellent effect of O. elegans. It was discussed that despite the homeopathic medicine had not effect, such conclusion cannot be extended to other homeopathic formulations, process of application and management conditions adverse to the present study. Finally, the results of the comparative study contribute for the improvement of the AIT and may encourage researchers to choose more reliable techniques in the assessment of the egg hatching. CNPq: 134124/2015-4

CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior A Febre Maculosa é uma doença infecciosa aguda, causada por bactérias do gênero Rickettsia e transmitida pela picada de carrapatos infectados. Não transmitida de pessoa a pessoa, sendo humanos hospedeiros acidentais dentro da cadeia ecoepidemiológica. A evolução da doença pode ocorrer de forma assintomática, sintomatologia discreta até formas graves com elevada taxa de letalidade. O presente trabalho objetiva elucidar a ecoepidemiologia da doença no município de Divinópolis, Minas Gerais, Brasil, que possui ocorrência da doença, inclusive com óbito. Foram analisadas áreas predispostas (presença de humanos, hospedeiros vertebrados e carrapatos positivos) e áreas de transmissão (casos de FM confirmados). Quatro áreas foram escolhidas para coleta, duas de transmissão e duas predispostas, todas pertencentes à mancha de transição entre bioma Cerrado e Mata Atlântica. Foram coletados 5.706 carrapatos com padrão sazonal bem definido, tendo maior incidência de larvas no outono e inverno, ninfas na primavera e adultos no verão. Os espécimes foram identificados através de chaves dicotômicas específicas e através de biologia molecular, sendo todos da espécie Amblyomma sculptum. Alíquotas foram destinadas a ensaios moleculares para detecção de Rickettsia spp. resultando em uma fêmea positiva para Rickettsia rickettsii para os genes gltA (gênero Rickettsia) e ompA (Grupo da Febre Maculosa), fato este demonstrado pela primeira vez no referido município. Reforçando a importância de mais estudos e atenção da vigilância epidemiológica nessas áreas. Spotted Fever is an acute infectious disease caused by bacteria of the genus Rickettsia and transmitted by the bite of infected ticks. Not transmitted from person to person, being accidental human hosts within the ecoepidemiological chain. The evolution of the disease can occur asymptomatically, discrete symptomatology to severe forms with a high lethality rate. The present study aims to elucidate the epidemiology of the disease in the municipality of Divinópolis, Minas Gerais, Brazil, which has an occurrence of the disease, including death. Predisposing areas (presence of humans, vertebrate hosts and positive ticks) and transmission areas (confirmed SF cases) were analyzed. Four areas were selected for collect, two for transmission and two predisposed, all belonging to the transition spot between Cerrado and Atlantic Forest. A total of 5.706 ticks were collected with a well defined seasonal pattern, with a higher incidence of larvae in autumn and winter, nymphs in spring and adults in summer. Specimens were identified through specific dichotomous keys and through molecular biology, all of them being Amblyomma sculptum. Aliquots were assigned to molecular assays for the detection of Rickettsia spp. resulting in a female positive for Rickettsia rickettsii for the genes gltA (genus Rickettsia) and ompA (Spotted Fever Group), a fact that was demonstrated for the first time in said municipality. Reinforcing the importance of further epidemiological surveillance studies and attention in these areas.

Submitted by Celso Magalhaes (celsomagalhaes@ufrrj.br) on 2019-01-03T12:13:17Z No. of bitstreams: 1 2017 - Iwine Joyce Barbosa de S? Hungaro Faria.pdf: 2174955 bytes, checksum: 64f12e25cb69a96e1fa5535fc2570461 (MD5) Made available in DSpace on 2019-01-03T12:13:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017 - Iwine Joyce Barbosa de S? Hungaro Faria.pdf: 2174955 bytes, checksum: 64f12e25cb69a96e1fa5535fc2570461 (MD5) Previous issue date: 2017-02-20 CAPES - Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior Argasidae parasitism in amphibians was recently observed in Brazil, and this register occurred with the description of Ornithodoros faccinii Barros-Battesti, Landulfo & Luz, 2015, parasitizing Thoropa miliaris (Spix, 1824), amphibian of the family Cycloramphidae in the municipality of Itagua? , Rio de Janeiro state. The genus Thoropa is endemic in the Atlantic Forest and has five species besides T. miliaris: T. taophora, T. megatympanum, T. saxatilis, T. lutzi and T. petropolitana. These, within their particularities, have geographical distribution in the southern states of the country to the south of Bahia. After observations that ticks remained in the hosts even after the procedures for depositing them in scientific collections, and the opportunity to examine collection materials in search of these ticks, seven herpetological collections were evaluated in search of more individuals, including the largest number Of specimens representative of the distribution of these species of Thoropa. The objectives of the study were to verify if the distribution of O. faccinii follows the distribution of its host; If other stages of O. faccinii also parasitize this host; If O. faccinii parasites other species of Thoropa; If other species of Ornithodoros parasite Thoropa; If there is preference for parasitism in the body of frogs; If there is preference as to the sex and stage of life of the host and to establish its distribution is normal or aggregate. A total of 1868 specimens of the genus Thoropa were examined, with 1026 (54.93%) specimens of T. miliaris, 549 (29.39%) T. taophora, 207 (11.08%) T. megatympanum, 48 (2.57%) T. saxatilis, 21 (1.12%) T. petropolitana and 17 (0.91%) T. lutzi. Of these, only the first three species were parasitized specimens by ticks. 1026 specimens of T. miliaris were examined, being 97 parasitized by 433 O. faccinii larvae. Of the total of 549 T. taophora examined, 65 (11.83%) specimens were parasitized with 183 Argasidae larvae identified as Ornithodoros sp.(morphotype 1). Of the 207 specimens of T. megatympanum examined, 39 specimens were positive, with 104 larvae of Ornithodoros sp.(morphotype 2). It is concluded that the geographic distribution of the carrpatos seems to be associated to its hosts, T. miliaris is host of the larvae of O. faccinii, and Thirteen municipalities in the state of Rio de Janeiro and other municipalities in the states of Minas Gerais, Esp?rito Santo and Bahia were added to the list of distribution of O. faccinii; Two Ornithodoros morphotypes (1 and 2) are recorded, the first associated with T. taophora and the second with T. megatympanum, both Ornithodoros sp.(morphotype 1) is present in five municipalities in the state of S?o Paulo and morphotype 2 in eight municipalities of Minas Gerais and one in Bahia. No significant differences (p>0.05) in parasitism were found among the categories of subadult, male, and female O parasitismo de Argasidae em anf?bios foi observado recentemente no Brasil, e esse registro ocorreu com a descri??o da esp?cie Ornithodoros faccinii Barros-Battesti, Landulfo & Luz, 2015, parasitando Thoropa miliaris (Spix, 1824), anf?bio da fam?lia Cycloramphidae no munic?pio de Itagua?, estado do Rio de Janeiro. O g?nero Thoropa ? end?mico na Mata Atl?ntica e possui mais cinco esp?cies al?m de T. miliaris: T. taophora, T. megatympanum, T. saxatilis, T. lutzi e T. petropolitana. Essas, dentro de suas particualridades, tem distribui??o geogr?fica nos estados do sul do pa?s at? o sul da Bahia. Ap?s observa??es de que os carrapatos se mantiveram fixados nos hospedeiros mesmo depois dos procedimentos para seu dep?sito em cole??es cient?ficas, e da oportunidade de examinar materiais de cole??es em busca desses carrapatos, sete cole??es herpetol?gicas foram avaliadas em busca de mais indiv?duos, incluindo o maior n?mero de esp?cimes representativos da distribui??o dessas esp?cies de Thoropa. Os objetivos do estudo foram verificar se a distribui??o de O. faccinii acompanha a distribui??o de seu hospedeiro; se outros est?gios de O. faccinii tamb?m parasitam esse hospedeiro; se O. faccinii parasita outras esp?cies de Thoropa; se outras esp?cies de Ornithodoros parasitam Thoropa; se h? prefer?ncia por s?tio de parasitismo no corpo das r?s; se h? prefer?ncia quanto ao sexo e est?gio de vida do hospedeiro e estabelecer sua distribui??o ? normal ou agregada. Ao todo, 1868 esp?cimes do g?nero Thoropa foram examinadas, sendo 1026 (54,93%) exemplares de T. miliaris, 549 (29,39 %) T. taophora, 207 (11,08%) T. megtympanum, 48 (2,57%) T. saxatilis, 21(1,12%) T. petropolitana e 17 (0,91%) T. lutzi. Dessas, apenas as tr?s primeiras esp?cies apresentaram exemplares parasitados por carrapatos. Foram examinados 1026 exemplares de T. miliaris, sendo 97 parasitados por 433 larvas de O. faccinii. Do total de 549 T. taophora examindas, 65 (11,83%) esp?cimes estavam parasitados com 183 larvas de Argasidae identificadas como Ornithodoros sp.(morfotipo 1). Dos 207 exemplares de T. megatympanum examinados, 39 esp?cimes estavam positivas, com 104 larvas de Ornithodoros sp.(morfotipo 2). Conclui-se que a distribui??o geogr?fica dos carrpatos parece estar associada ? seus hospedeiros, T. miliaris ? hospedeiro das larvas de O. faccinii, e treze munic?pios pertencentes ao estado do Rio de Janeiro, nove munic?pios de Minas Gerais, dois do esp?rito Santo e um na Bahia foram inclu?dos ? lista de ocorr?ncia O. faccinii; Dois morfotipos (1 e 2) de Ornithodoros s?o registrados, o primeiro associado a T. taophora e o segundo ? T. megatympanum ambos Ornithodoros sp.morfotipo 1 est? presente em cinco munic?pios do estado de S?o Paulo e o morfotipo 2, em oito munic?pios de Minas Gerais e um na Bahia. N?o houve diferen?a estat?stica (p> 0.05) no parasitismo quanto as categorias de subadulto, machos e f?meas.

Ticks, triatomines, mosquitoes and sand flies comprise a large number of haematophagous arthropods considered vectors of human infectious diseases. While consuming blood to obtain the nutrients necessary to carry on life functions, these insects can transmit pathogenic microorganisms to the vertebrate host. Among the molecules related to the blood-feeding habit, proteases play an essential role. In this review, we provide a panorama of proteases from arthropod vectors involved in haematophagy, in digestion, in egg development and in immunity. As these molecules act in central biological processes, proteases from haematophagous vectors of infectious diseases may influence vector competence to transmit pathogens to their prey, and thus could be valuable targets for vectorial control. Electronic supplementary material The online version of this article (doi:10.1186/s13071-017-2005-z) contains supplementary material, which is available to authorized users.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Os carrapatos são artrópodes parasitas que se alimentam obrigatoriamente de sangue, sendo capazes de parasitar diversos hospedeiros vertebrados. O intestino dos carrapatos machos e fêmeas possui diferenças morfológicas, tendo como principal função a digestão intracelular dos componentes do sangue obtidos durante a alimentação. Este órgão possui várias proteínas relacionadas com o desenvolvimento, metabolismo e mecanismo de digestão da hemoglobina. Neste trabalho, as proteínas do intestino de carrapatos Amblyomma sculptum, machos e fêmeas foram analisadas com o auxílio da cromatografia líquida acoplada com a espectrometria de massas. O algoritmo PEAKS identificou um maior número de proteínas do intestino nas estratégias fracionadas e não fracionadas em relação aos algoritmos MASCOT e SCAFFOLD, tanto para o banco de dados Chelicerata quanto para o banco de dados Oryctolagus, utilizando os analisadores Ion Trap e QTOF. Pelo KOG, as classes das proteínas analisadas no intestino dos carrapatos machos e fêmeas que se destacaram estão envolvidas na dinâmica e estrutura da cromatina, tradução, biogênese e estrutura ribossomal, modificação pós-traducional, turnover proteico, chaperonas, citoesqueleto, conversão e produção de energia, metabolismo e transporte de carboidratos, lipídeos e íons inorgânicos. Na identificação das proteínas do hospedeiro, a hemoglobina, componente de maior volume no sangue, foi encontrada em ambos os sexos. As informações obtidas neste trabalho podem fornecer uma base sobre a fisiologia do intestino de machos e fêmeas A. sculptum e auxiliar na escolha de proteínas como alvos moleculares potenciais, visando avanço nas estratégias de controle aplicadas para estes artrópodes. Ticks are parasitic arthropods that feed necessarily of blood, being able of parasitizing various vertebrate hosts. The midgut of males and females ticks has morphological differences, having as main function the intracellular digestion of blood components obtained during feeding. This organ has several proteins related to the development, metabolism, and mechanism of hemoglobin digestion. In this work, the midgut proteins of Amblyomma sculptum ticks, males and females were analyzed with aid of liquid chromatography coupled with mass spectrometry. The PEAKS algorithm identified a larger number of proteins in fractional and non-fractionated strategies in relation to algorithms MASCOT and SCAFFOLD for both Chelicerata and Oryctolagus databases, using Ion Trap and QTOF analyzers. By KOG, the classes of proteins analyzed in the midgut of the males and females ticks are involved in the chromatin structure and dynamics, translation, ribosomal structure and biogenesis, post- translational modification, protein turnover and chaperones, cytoskeleton, energy production and conversion, metabolism and transport of carbohydrates, lipids and inorganic ions. In the identification of the host proteins, the hemoglobin, greater blood volume component, was found in both genders. The informations obtained in this work can provide a basis about the midgut phisiology of males and females A. sculptum and assist in the selection of proteins as potencial molecular targets, aiming advance in the control strategies applied to these arthropods.

Orientadora : Profª. Drª. Rosângela Locatelli Dittrich Coorientadores : Prof. Dr. Marlos Gonçalves Sousa ; Profª. Drª. Simone Tostes de Oliveira Stedile Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias. Defesa: Curitiba, 16/02/2017 Inclui referências ao final de cada capítulo Resumo: Os carrapatos são ectoparasitas que podem transmitir diversos agentes patogênicos aos animais e seres humanos. A distribuição desses vetores varia de acordo com as características ambientais e a disponibilidade de hospedeiros de cada região. No Brasil, existem várias espécies parasitando cães. Dessa forma, o conhecimento das espécies de carrapatos que ocorrem em uma região é importante para determinar e precaver as possíveis doenças transmitidas por esses vetores e o risco de suas ocorrências. Nos cães com hemoparasitoses transmitidas por carrapatos, os sinais clínicos são semelhantes e inespecíficos. O diagnóstico baseado na identificação dos agentes infecto-parasitários é importante para avaliar o potencial zoonótico e o melhor tratamento. No Paraná existem poucos estudos que identificaram os carrapatos em cães e os agentes transmitidos por esses vetores. O presente trabalho foi dividido em dois capítulos. O primeiro capítulo objetivou identificar as espécies de carrapatos que parasitam os cães nas mesorregiões geográficas: Metropolitana de Curitiba (MC), Centro Oriental (COP) e Centro Sul Paranaense (CSP), e determinar a ocorrência de cada espécie por mesorregião. Foram coletadas amostras de carrapatos de 26 cães provenientes da mesorregião MC, 29 da COP e um da CSP. Os carrapatos foram retirados da pele dos cães com a utilização de pinça e acondicionados em tubos com álcool isopropílico. Dos 56 cães foram coletados 253 carrapatos que foram caracterizados morfologicamente de acordo com a espécie. Do total de carrapatos, 69,6% foram identificados como pertencentes à espécie Rhipicephalus sanguineus sensu lato (s. l.), 28,1% como Amblyomma aureolatum e 2,4% como A. ovale. Dos 26 cães da mesorregião MC, 57,7% estavam parasitados por R. sanguineus s. l., 38,5% por A. aureolatum e 3,8% por A. ovale. Na mesorregião COP dos 29 cães parasitados, 72,4% eram por A. aureolatum e 27,6% por R. sanguineus s. l.. Na CSP foi obtida uma amostra, identificada como A. aureolatum. O segundo capítulo objetivou descrever as alterações clínicas e hematológicas observadas nos cães com carrapato; determinar a soroocorrência para piroplasmas nos cães das mesorregiões estudadas; investigar a presença de Babesia sp., Ehrlichia sp. e outros agentes da família Anaplasmataceae nos cães; e descrever os resultados hematológicos e bioquímicos dos cães infectados com Rangelia vitalii, E. canis e agentes da família Anaplasmataceae. Cinquenta e seis cães com carrapato foram avaliados por meio da história clínica, exames físicos e hematológicos, ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA) e reação em cadeia da polimerase (PCR). Foi realizado o sequenciamento genético das amostras positivas na PCR para Ehrlichia sp. e Babesia sp. Amostras de sangue dos 56 cães foram obtidas por punção da veia cefálica ou jugular, acondicionadas em tubos estéreis: com anticoagulante ácido etilenodiaminotetracético (EDTA) para realização do hemograma, exame de camada leucocitária e PCR; e em tubos sem anticoagulante para a obtenção do soro para a sorologia. Os principais sinais clínicos observados nos cães com carrapato foram: depressão, anorexia, desidratação e febre. As principais alterações hematológicas nos cães com carrapato foram: anemia, leucocitose, neutrofilia e eosinofilia. A taxa de soropositividade no ELISA para piroplasmas foi de 76% na MC e 64,3% na COP. O cão da CSP foi soronegativo. Um cão procedente da mesorregião MC foi positivo na PCR para Babesia sp., contudo, o produto da PCR foi sequenciado e gerou sequências de DNA que foram 100% idênticas às amostras de R. vitalii; um cão da COP foi positivo na PCR para Ehrlichia sp., e no sequenciamento genético a amostra revelou 100% de identidade com E. canis; e um cão da MC foi positivo para a família Anaplasmataceae. As principais alterações nos exames do cão infectado por R. vitalii foram anemia, leucocitose, neutrofilia e trombocitopenia; hipoalbuminemia e aumento nos valores de uréia, AST, GGT, bilirrubina direta e total. No cão infectado por E. canis verificou-se anemia, leucocitose, neutrofilia e linfocitose; hipoalbuminemia e aumento da proteína total, bilirrubina direta, globulinas e ALT. No cão positivo para a família Anaplasmataceae verificou-se eosinofilia e hipoalbuminemia. Os resultados desse estudo indicam um risco potencial para a exposição dos cães para carrapatos das espécies R. sanguineus s. l., A. aureolatum e A. ovale, assim como para agentes transmitidos por eles, como a R. vitalii, E. canis, B. canis e agentes a família Anaplasmataceae, nas mesorregiões estudadas; possibilitaram a obtenção de dados de soroocorrência para piroplasmas, ainda não descrita no estado, consiste na detecção molecular e sequenciamento genético de R. vitalii e o primeiro sequenciamento genético de E. canis do Paraná. Palavras-chave: Amblyomma aureolatum, Amblyomma ovale, Ehrlichia canis, piroplasma, Rangelia vitalii, Rhipicephalus sanguineus sensu lato. Abstract: Ticks are ectoparasites that can transmit various pathogenic agents to animals and humans. The distribution of these vectors varies according to the environmental characteristics and host availability of each region. In Brazil there are several species parasitizing dogs. Thus, knowledge of the tick species that occur in a region is important to determine and preclude the possible diseases transmitted by these vectors and the risk of occurrence. Dogs with tick-borne hemoparasitosis show non-specific and similar clinical signs. The diagnosis based on the identification of the infectious-parasitic agents is important to evaluate the zoonotic potential and the best treatment. In Paraná there are few studies that identified the ticks in dogs and the agents transmitted by these vectors. The present work was divided in two chapters. The first chapter aimed to identify the species of ticks that parasitize dogs in the geographic midland regions: Metropolitana de Curitiba (MC), Centro Oriental (COP) e Centro Sul Paranaense (CSP), and determine the occurrence of each species by midland region. Samples of ticks were collected from 26 dogs from the MC midland region, 29 from the COP and one from the CSP. The ticks were removed from the dogs???????????? using tweezers and packed in tubes with isopropyl alcohol. Of the 56 dogs were collected 253 ticks that were characterized morphologically according to the species. Of the total number of ticks, 69.6% were identified as belonging to the species Rhipicephalus sanguineus sensu lato (s. l.), 28.1% as Amblyomma aureolatum and 2.4% as A. ovale. Of the 26 dogs of the MC midland region, 57.7% were parasitized by R. sanguineus s. l., 38.5% by A. aureolatum and 3.8% by A. ovale. In the COP midland region of the 29 parasitized dogs, 72.4% were by A. aureolatum and 27.6% by R. sanguineus s. l.. In CSP, a sample, identified as A. aureolatum, was obtained. The second chapter aimed to describe the clinical and hematological changes observed in dogs with ticks; to determine the serooccurrence for piroplasms in dogs of the midland regions studied; to investigate the presence of Babesia sp., Ehrlichia sp. and other agents of the Anaplasmataceae family in dogs; and to describe the hematological and biochemical results of dogs infected with Rangelia vitalii, E. canis and agents of the Anaplasmataceae family. Fifty-six dogs with ticks were evaluated through clinical history, physical and hematological exams, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and polymerase chain reaction (PCR). Was performed the gene sequencing of PCR positive samples for Ehrlichia sp. and Babesia sp. Blood samples from the 56 dogs were obtained by puncture of the cephalic or jugular vein, placed in sterile tubes: with anticoagulant ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) to perform the blood count, buffy coat and PCR; and in tubes without anticoagulant to obtain serum for serology. The main clinical signs observed in dogs with ticks were: depression, anorexia, dehydration and fever. The main hematological changes in dogs with ticks were: anemia, leukocytosis, neutrophilia and eosinophilia. The seropositivity rate in ELISA for piroplasms was 76% in MC and 64.3% in COP. The CSP dog was seronegative. A dog from the MC mesoregion was positive in the PCR for Babesia sp., nevertheless the PCR product was sequenced and generated DNA sequences that were 100% identical to the R. vitalii samples; one COP dog was positive in PCR for Ehrlichia sp., and in the gene sequencing of 100% identity sample with E. canis; and one MC dog was positive for the Anaplasmataceae family. The main alterations in the examinations of the dog infected by R. vitalii were anemia, leukocytosis, neutrophilia and thrombocytopenia; hypoalbuminemia and increased urea, AST, GGT, and total bilirubin levels. In the dog infected with E. canis the anemia, leukocytosis, neutrophilia, lymphocytosis, hypoalbuminemia and total protein increase, direct bilirubin, globulins and ALT, were observed. In the dog positive for the Anaplasmataceae family, eosinophilia and hypoalbuminemia were observed. The results of this study indicate a potential risk for the exposure of dogs to ticks of the species R. sanguineus s. l., A. aureolatum and A. ovale, as well as to agents transmitted by them, such as R. vitalii, E. canis, B. canis and agents of the Anaplasmatacea family, in the midland regions studied; made it possible to obtain serooccurrence data for piroplasms, not yet described in the state, consists of the molecular detection and gene sequencing of R. vitalii and the first gene sequencing of E. canis from Paraná. Keywords: Amblyomma aureolatum, Amblyomma ovale, Ehrlichia canis, piroplasm, Rangelia vitalii, Rhipicephalus sanguineus sensu lato.

This is a commented list of tick?s species collected on various wild and domestic animals, including the reports on scientifi c literature for the studied region. Most of animals were small or medium mammals. Carnivores were the main taxa group examined. Although, the pampas deer (Ozotocerus bezoarticus) and giant anteater (Mymercophaga tridactyla) also has a good representation on study. Among domestic animals, dogs, horses and cattle were examined. Summing up, 18 tick species were listed for the region. Sixteen were hard ticks (Ixodidae) and two soft ticks (Argasidae). Amblyomma sculptum was the most common and abundant hard tick. Ornithodoros rostratus (Argasidae) was very abundant, being the more important Argasidae tick on the study region. The following species were colleted or reported on scientifi c literature: Argas miniatus Koch, 1844; Ornithodoros rostratus Aragão, 1911; Dermacentor nitens Newmann, 1897; Rhipicephalus (Boophilus) microplus Canestrini, 1887; Amblyomma tigrinum Koch, 1844; A.dissimile Koch, 1844; A. ovale Koch, 1844; A. pauvum Aragão, 1908; A. sculptum Berlese, 1888; A. calcaratum Neumann, 1899; A. coelebs Neumann, 1899; A. dubittatum Newmann, 1899; A. scalpturatum Newmann, 1906; A. naponense Packard, 1869; A. nodosum Newmann, 1899; A. pseudoconcolor Aragão, 1908; A. rotundatum Koch, 1844; A. triste Koch, 1844. Made available in DSpace on 2018-02-06T23:40:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Currentstatusofticksandtickhostrelationshipindomesticandwild.pdf: 838474 bytes, checksum: 8853a6bd0c65cb79fa654d4879493f1e (MD5) Previous issue date: 2018-02-06 Título em português: Estado atual dos carrapatos em relação a seus animais-hospedeiros domésticos e selvagens do Pantanal no Estado do Mato Grosso do Sul, Brasil.

Understanding the molecular basis of how ticks adapt to feed on different animal hosts is central to understanding tick and tick-borne disease (TBD) epidemiology. There is evidence that ticks differentially express specific sets of genes when stimulated to start feeding. This study was initiated to investigate if ticks such as Ixodes scapularis and Amblyomma americanum that are adapted to feed on multiple hosts utilized the same sets of proteins to prepare for feeding. We exposed I. scapularis and A. americanum to feeding stimuli of different hosts (rabbit, human, and dog) by keeping unfed adult ticks enclosed in a perforated microfuge in close contact with host skin, but not allowing ticks to attach on host. Our data suggest that ticks of the same species differentially express tick saliva proteins (TSPs) when stimulated to start feeding on different hosts. SDS-PAGE and silver staining analysis revealed unique electrophoretic profiles in saliva of I. scapularis and A. americanum that were stimulated to feed on different hosts: rabbit, human, and dog. LC-MS/MS sequencing and pairwise analysis demonstrated that I. scapularis and A. americanum ticks expressed unique protein profiles in their saliva when stimulated to start feeding on different hosts: rabbit, dog, or human. Specifically, our data revealed TSPs that were unique to each treatment and those that were shared between treatments. Overall, we identified a total of 276 and 340 non-redundant I. scapularis and A. americanum TSPs, which we have classified into 28 functional classes including: secreted conserved proteins (unknown functions), proteinase inhibitors, lipocalins, extracellularmatrix/cell adhesion, heme/ironmetabolism, signal transduction and immunity-related proteins being the most predominant in saliva of unfed ticks. With exception of research on vaccines against Rhipicephalus microplus, which its natural host, cattle, research on vaccine against other ticks relies feeding ticks on laboratory animals. Data here suggest that relying on lab animal tick feeding data to select target antigens could result in prioritizing irrelevant anti-tick vaccine targets that are expressed when ticks feed on laboratory animals. This study provides the platform that could be utilized to identify relevant target anti-tick vaccine antigens, and will facilitate early stage tick feeding research.

Human parasitism by the brown dog tick Rhipicephalus sanguineus sensu lato (s. l.), an important parasite in medical and veterinary sciences, is only rarely reported in the American continent. The present investigation reports a R. sanguineus s. l. male tick parasitizing a human in the city of Campo Grande, State of Mato Grosso do Sul, west-central Brazil. This observation is of public health relevance, since R. sanguineus s. l. ticks are known as vectors of spotted fever group rickettsiae to dogs and humans. O parasitismo humano pelo carrapato marrom do cão, Rhipicephalus sanguineus sensu lato (s. l.), um importante parasita para a saúde pública e veterinária, é raramente relatado no continente americano. Este trabalho relata o registro de um macho de R. sanguineus s. l. parasitando um humano na cidade de Campo Grande, estado do Mato Grosso do Sul, no Centro-Oeste do Brasil. Essa observação é relevante para a saúde pública, uma vez que os carrapatos desse complexo são conhecidos como vetores de riquétsias do grupo da febre maculosa para cães e humanos.

Na região da represa de Guarapiranga localizada na área metropolitana de São Paulo, têm sido relatados casos humanos de Febre Maculosa Brasileira (FMB), uma doença transmitida por carrapatos causada pela bactéria Rickettsia rickettsii. Nesta área de estudo, R. rickettsii é conhecida por ser transmitida aos seres humanos pelo Amblyomma aureolatum, um carrapato de cão que não está associado a cavalos. Em outras áreas endêmicas da FMB, a transmissão de R. rickettsii está associada ao Amblyomma sculptum, uma espécie de carrapato que normalmente infesta capivaras e cavalos. A represa de Guarapiranga possui populações abundantes de capivaras e cavalos; no entanto, como nada se sabe sobre um possível ciclo de transmissão de R. rickettsii por A. sculptum nessa área, este estudo avaliou essa transmissão realizando um levantamento sorológico em cavalos que vivem na região da represa de Guarapiranga. Um total de 206 equídeos que vivem nas margens da represa de Guarapiranga foram testados sorologicamente para cinco espécies de Rickettsia, sendo quatro do grupo da FMB (R. rickettsii, R. parkeri, R. amblyommatis, R. rhipicephali) e um do grupo basal (R. bellii). No geral, 171 (83%) equídeos reagiram positivamente a pelo menos uma espécie de Rickettsia. Um total de 160 (78%), 123 (60%), 80 (39%), 72 (35%) e 71 (34%), reagiram a R. bellii, R. rickettsii, R. parkeri, R. rhipicephali e R. amblyommatis, respectivamente, com títulos finais variando de 64 a 1024 para R. bellii e 64 a 512 para as quatro espécies restantes de Rickettsia. Os títulos finais para R. bellii (mediana: 256) foram significativamente maiores (P

Os extratos acetato de etila, etanólico e aquoso de raízes de Lonchocarpus floribundus foram utilizados, a fim de avaliar a atividade biológica sobre carrapato bovino. Carrapatos adultos foram coletados em bovinos infestados artificialmente, separados em grupos de dez indivíduos, pesados e imersos, separadamente, nos extratos de raízes de L. Floribundus, nas concentrações de 5, 25, 50, 75 e 100 mg mL-1. Para a avaliação em larvas, foram utilizados indivíduos de 14 a 21 dias, os quais foram imersos nos extratos nas concentrações de 1, 5, 10, 15 e 20 mg mL-1. Após o tratamento, cada grupo foi colocado em placa de Petri e incubado a 27 ± 1 ºC e umidade relativa de 80 ± 5%. Os extratos avaliados não foram eficazes para induzir, acima de 50%, a mortalidade de fêmeas ingurgitadas. Os extratos acetato de etila e etanólico induziram 100% de mortalidade de larvas. Entretanto, quanto aos valores de concentração letal mediana (CL50), o extrato etanólico (CL50 = 2,1 mg mL-1) foi mais tóxico que o extrato acetato de etila (CL50 = 4,1 mg mL-1). O extrato etanólico estimou concentração inibitória mediana (CI50) de 3,0 mg mL-1 e foi mais tóxico que os demais extratos quanto a este parâmetro de avaliação. Entre os três extratos avaliados, os extratos acetato de etila e etanólico apresentaram os melhores resultados quanto ao controle de reprodução de R. (B.) microplus, atingindo 100% na concentração de 5 mg mL-1. Os extratos de raízes de L. Floribundus apresentaram atividade biológica sobre carrapato bovino. Ethylic acetate, ethanolic and aqueous roots extracts of Lonchocarpus floribundus were used to evaluate their biological activity on cattle tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus. Adult ticks were collected in artificially infested cattle, separated into groups of ten individuals, weighed and immersed separately in the extracts of L. Floribundus roots at concentrations of 5, 25, 50, 75 and 100 mg mL-1. For biological evaluation 14-21-day-old larvae were used, which were immersed in the extracts at concentrations of 1, 5, 10, 15 and 20 mg mL-1. After treatment, each group was placed in a Petri dish and maintained at 27 ± 1 ºC and 80 ± 5% relative humidity. The extracts evaluated were not effective to induce mortality of over 50%-engorged female. The ethylic acetate and ethanolic extracts induced 100% mortality of larvae. The ethanolic extract was more toxic (median lethal concentration, LC50, of 2.1 mg mL-1) than the ethylic acetate extract (LC50 = 4.1 mg mL-1). For the ethanolic extract it was estimated a median inhibitory concentration (IC50) of 3.0 mg mL-1 and it was more toxic than the other extracts on this parameter. Among the three extracts evaluated, the ethylic acetate and ethanolic extracts showed the highest potential for the control of reproduction of R. (B.) microplus, reaching 100% at concentration of 5 mg mL-1. The L. Floribundus root extracts showed biological activity on cattle tick.

This study aimed to identify the species of fleas and ticks of Cerdocyon thous from the state of Pernambuco. Animals (n = 20) were examined, with 30% (6/20) ectoparasitized. Fleas (n = 16) and ticks (n = 17) parasitizing free-living crab-eating fox and captive in state of Pernambuco were collected. The fleas were identified as: Pulex irritans and Ctenocephalides felis; and the ticks were: Rhipicephalus sanguineus sensu lato and Amblyomma ovale. The presence of ectoparasites of domestic animals parasitizing C. thous, suggests a close contact of this species to the peridomicile. Furthermore, this is the first report of the occurrence of A. ovale in C. thous in northeastern Brazil. Objetivou-se identificar as espécies de pulgas e carrapatos de Cerdocyon thous provenientes do estado Pernambuco. Foram examinados 20 animais, estando 30% (6/20) ectoparasitados. Foram coletadas 16 pulgas e 17 carrapatos em cachorros-do-mato de vida livre e de cativeiro no estado de Pernambuco. As pulgas foram identificadas como: Pulex irritans e Ctenocephalides felis; e os carrapatos foram: Rhipicephalus sanguineus sensu lato e Amblyomma ovale. A presença de ectoparasitos de animais domésticos parasitando C. thous, sugere a aproximação de indivíduos desta espécie ao peridomicílio. Além disso, este é o primeiro relato da ocorrência de A. ovale em C. thous no nordeste brasileiro.

Abel I., Cunha N.C., Rangel C.P., Corrêa F.N. & Fonseca A.H. Artificial feeding of partially engorged Amblyomma sculptum females through capillaries. [Alimentação artificial de fêmeas parcialmente ingurgitadas de Amblyomma sculptum, por meio de tubos capilares]. Revista Brasileira de Medicina Veterinária, 38(supl. 3): 211-217, 2016. Departamento de Epidemiologia e Saúde Pública, Instituto de Veterinária, Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, BR 465, km 7, Campus Seropédica 23897-970, Seropédica, RJ, Brazil. E-mail: isisabel@ufpa.br This study presents the standardization of an artificial feeding technique using capillaries and discusses its effects on biological parameters of partially engorged Amblyomma sculptum females. Partially engorged females were sorted for mean baseline weight (71.94 mg, group I; 167.58 mg, group II). Females were detached from rabbits after 7 days of feeding and then exposed to capillary tubes containing citrated bovine blood for 6, 12, and 24 h. Biological parameters were analyzed for each weight group, after each period. All ticks fed on this system took blood meal. Weights before and after artificial feeding were compared, and significant difference was observed. Mean weight gain for group I females artificially fed for 6, 12, and 24 h was 56.05, 86.75 and 192.89 mg, respectively. Weight gain in group II females fed for 6, 12 and 24 h was 133.73, 182.09 and 368.77 mg. Results indicate that capillary feeding may be used routinely in studies on pathogen transmission by A. sculptum females. The ideal initial weight range is discussed in terms of the kind of study design., Este estudo apresenta a padronização de uma técnica de alimentação artificial de carrapatos, por meio de capilares e discute seus efeitos nos parâmetros biológicos de fêmeas de Amblyomma sculptum. As fêmeas parcialmente ingurgitadas foram classificadas para o peso médio inicial (71,94 mg, grupo I e 167,58 mg, grupo II). As fêmeas foram coletadas dos coelhos após 7 dias de alimentação e depois expostas a tubos capilares contendo sangue bovino citratado durante o período de 6, 12 ou 24 h. Os parâmetros biológicos foram analisados para cada grupo de pesos, após cada período. Todos os carrapatos alimentados com este sistema ingeriram sangue. Os pesos antes e após a alimentação artificial foram comparados. O ganho de peso médio para fêmeas do grupo I alimentadas artificialmente por6, 12 e 24 h foi 56.05, 86.75 e 192.89 mg, respectivamente. O ganho de peso em fêmeas do grupo II alimentadas por 6, 12 e 24 horas foi 133,73, 182,09 e 368,77 mg. Os resultados indicam que a alimentação capilar pode ser utilizada rotineiramente em estudos sobre a transmissão de patógenos por A. sculptum fêmeas. O intervalo ideal de peso inicial é discutido em termos do tipo de desenho do estudo.&nbsp

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Dentro da família Ixodidae, relatos recentes descreveram que o cruzamento de carrapatos de populações do táxon Amblyomma cajennense provenientes de diferentes regiões geográficas, apresentavam desempenho reprodutivo com taxa de fertilidade reduzida, podendo este táxon englobar um complexo de espécies diferentes, com subtipos determinados pela distribuição biogeográfica. Por estudos morfológicos, filogenéticos e de biogeografia, concluiu-se que este carrapato deveria ser diferenciado em seis clados definidos por regiões geográficas, todos pertencentes ao Complexo A. cajennense. Considerando este contexto, buscou-se neste estudo ampliar a base de conhecimentos acerca do genoma mitocondrial completo do carrapato Amblyomma sculptum, e diferenciá-lo do Amblyomma cajennense, ambos subtipos e pertencentes ao Complexo A. cajennense. Dentre os achados, destacam-se o gene ND5 e as regiões controle 1 e 2 com características que os credenciam a atuarem como marcadores moleculares evolutivos para a diferenciação destes dois subtipos de carrapatos. Análises comparativas futuras fazem-se necessárias com sequências mitogenômicas dos demais membros do Complexo A. cajennense. Na família Argasidae existem indivíduos que são morfologicamente de difícil identificação. Esta dificuldade ocorre tanto com espécimes adultos, quanto em estádios imaturos, constituindo assim, um importante obstáculo para o estabelecimento de arranjos taxonômicos mais precisos para esta família de carrapatos, sendo um ponto negativo para estudos filogenéticos e epidemiológicos. Desta forma, para o estudo referente à família Argasidae, realizou-se análises comparativa e filogenética do mitogenoma de Nothoaspis amazoniensis para com outros membros desta família, com o objetivo de promover uma melhor compreensão das inter- relações evolutivas entre os carrapatos argasídeos. Como conclusão, evidenciou-se que a abordagem filogenômica posicionou o mitogenoma de N. amazoniensis em um clado monofilético característico do arranjo taxonômico Cladísta, englobado por representantes das regiões Afrotropical e Neotropical, com parasitismo específico em morcegos, o que pode ser um indicativo de um processo evolutivo de coevolução entre vetor e seu hospedeiro. Paralelamente, também se investigou para o N. amazoniensis, a interação parasita-hospedeiro baseando-se na presença de material genético proveniente da ação hematófaga realizado por este argasídeo em seus hospedeiros. O mitogenoma completo referente ao hospedeiro de N. amazoniensis foi sequenciado, montado e anotado, caracterizando-o como oriundo de animal membro da ordem Chiroptera. Por análise filogenética comparando esta sequência contra outras de representantes da Ordem Chiroptera, depositadas em bancos de dados biológicos, obteve-se a identificação desta em nível de gênero, denominando-a como Pteronotus sp. PV-RO-BRA. Considerando os dados referentes à coleta do argasídeo N. amazoniensis, e aos resultados apresentados para este morcego, neste estudo, conclui-se que o N. amazoniensis apresenta uma dependência evolutiva, não somente ao seu provável hospedeiro do gênero Pteronotus, mas de uma forma geral, ao conjunto de condições específicas ecológicas bióticas e abióticas encontradas em seu ecossistema. No atual estudo, a abordagem filogenômica e o estabelecimento de genomas mitocondriais completos, como estratégias moleculares, foram de fundamental importância na inferência filogenética de carrapatos pertencentes às famílias Ixodidae e Argasidae, como também, no estudo sobre a associação evolutiva entre o N. amazoniensis, seu hospedeiro e o ecossistema habitado. Within the Ixodidae family, recent reports have described that the crossing of populations of ticks Amblyomma cajennense taxon from different geographical regions, had reproductive performance with reduced fertility rate, which taxon may comprise a complex of different species, with subtypes determined by biogeographical distribution. Per morphologic, phylogenetic and biogeography studies have concluded that this tick should be differentiated into six clades defined by geographic regions, all belonging to the compound A. cajennense. In this context, this study targeted to expand the knowledge base about the complete mitochondrial genome of the tick Amblyomma sculptum, and differentiate it from Amblyomma cajennense, both subtypes and belonging to Complex A. cajennense. Among the findings, we can highlight the ND5 gene and control regions 1 and 2 which characteristics qualify them to act as evolutionary molecular markers for differentiation of these two subtypes of ticks. In the future is necessary more comparative analyzes with mitogenomics sequences of other members of the complex A. cajennense. In Argasidae family there are individuals who are morphologically difficult to identify. This difficulty occur in both, adult specimens and immature stages, then creating a major obstacle to the establishment of more precise taxonomic arrangements for this family of ticks, with a negative point for phylogenetic and epidemiological studies. Therefore, in the study relating to Argasidae family, it was carried comparative and phylogenetic analyzes of mitogenome of Nothoaspis amazoniensis to other members of this family, targeting a better understanding of the evolutionary interrelationships between ticks argasids. In conclusion, it was shown that the phylogenomic approach placed the mitogenome N. amazoniensis in a monophyletic clade typical of a taxonomic arrangement Cladist comprised by representatives of Afrotropical and Neotropical regions, with specific parasitism in bats, which may indicate an evolutionary process of coevolution between vector and its host. At the same time, it was also investigated for N. amazoniensis, the parasite-host interaction taking in account the presence of genetic material from hematophagous action performed by this argasid in their hosts. The complete mitogenome referring to the host of N. amazoniensis was sequenced, assembled and annotated, characterizing it as originated from an animal member of the order Chiroptera. Through phylogenetic analysis, comparing this sequence against other sequences of representatives of Chiroptera order, placed in biological databases, it was obtained an identification of this sequence in the genus level, terming it as Pteronotus sp. PV-RO-BRA. Considering the data regarding the collection of argasid N. amazoniensis, and the results presented for this bat in this study it was concluded that N. amazoniensis presents an evolutionary dependence, not only to the probable host Pteronotus gender, but in general, to the set of ecological specific conditions, biotic and abiotic, found in its ecosystem. In the current study, the phylogenomic approach and the establishment of complete mitochondrial genomes, as molecular strategies, have been of fundamental importance in the phylogenetic inference of ticks belonging to the Ixodidae and Argasidae families, as well as in the study of the evolutionary association between N. amazoniensis, its host and the ecosystem inhabited.

Dairy cattle farming is of great economic and social importance in all Brazilian’s regions. Parasites can reduce milk productivity, especially the tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus. This study consisted of a questionnaire answered by 40 milk producers in the northwestern region of the State of São Paulo. The aim was to ascertain how these producers controlled ticks and other parasites. Very many of them knew nothing about the biological cycle of the cattle tick or about strategic control or acaricide efficacy tests. The majority (87.5%) controlled ticks at a high frequency, without technical criteria and care to apply the acaricide. Spraying was the most used mode of acaricide application (95%) and endectocides were used by 45%. Cattle tick fever was the harm most associated with ticks (87.5%) followed closely by screwworm (77.5%). However, 65% were satisfied with their tick control. About the control of others parasites, all dewormed at least twice a year their animals; 65% were controlling horn fly; 40% had problems with screwworm. The interviewers had in general good level of education and the farms generally exhibited a high degree of technology for milk production on pasture because half of them received technical assistance frequently. Resumo A bovinocultura leiteira é de extrema importância econômica e social em todas as regiões brasileiras. Os parasitas podem reduzir a produção leiteira, especialmente o carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus. Este trabalho consistiu em um questionário respondido por 40 produtores de leite da região noroeste do Estado de São Paulo, com o objetivo de saber como os produtores controlam carrapatos e outros parasitas. Grande parte deles não conhecia o ciclo biológico do carrapato do boi nem o controle estragégico e o teste de eficácia de carrapaticidas. A maioria (87,5%) controlava o carrapato com alta frequência, sem critérios técnicos e cuidados na aplicação do carrapaticida. A aspersão foi o modo de aplicação mais usado (95%) e endectocidas eram utilizados por 45%. Tristeza parasitária bovina foi o prejuízo mais associado ao carrapato (87,5%), seguido de perto pela bicheira (77,5%). No entanto, 65% estavam satisfeitos com o controle do carrapato. A maioria (82,5%) criava gado mestiço. Em relação ao controle de outros parasitas, todos vermifugavam seus animais pelo menos duas vezes por ano; 65% deles controlava a mosca-do-chifre; 40% têm problemas com bicheira. Os entrevistados, de forma geral, tinham bom nível educacional, e as fazendas geralmente exibiam alto grau de tecnologia em produção de leite a pasto, porque metade delas recebia assistência técnica constante de um programa estatal que incentiva a produção leiteira sustentável.

INTRODUCTION: Otoacariasis, the attachment of ticks and mites within the ear canal is a common phenomenon especially in rural areas. OBJECTIVE: To determine the clinical and demographic features of cases with detected ticks in the ear canal, which is a common health problem, and identify tick species. METHODS: Data of patients who had otoacariasis were collected. We also investigated all ticks at the Veterinary Department of Kafkas University. RESULTS: We present the data of patients with otoacariasis. All ticks were identified as otobius. Otobius ticks were found not related with any complications. CONCLUSION: It is very important to detect ticks in the ear canal as they act as vector of some diseases. Identifying species of ticks may help clinicians to prevent further complications associated with vector-borne diseases. Resumo Introdução: A otoacaríase, fixação de carrapatos duros e moles no interior do conduto auditivo, é fenômeno comum, especialmente em áreas rurais. Objetivo: Determinar as características clínicas e demográficas de casos de carrapatos detectados no conduto auditivo externo, um problema de saúde frequente, e identificar as espécies do ácaro. Método: Coletaram-se dados dos pacientes com otoacaríase, e todos os carrapatos foram investigados no Departamento de Veterinária da Universidade Kafkas. Resultados: Os dados de pacientes com otoacaríase são apresentados. Todos os carrapatos foram identificados como pertencentes ao gênero Otobius e constatou-se não haver relação entre os carrapatos e qualquer tipo de complicação. Conclusão: É muito importante detectar carrapatos no conduto auditivo externo, pois esses ácaros funcionam como vetores para algumas doenças. A identificação da espécie do ácaro pode ajudar o clínico a prevenir complicações associadas às doenças transmitidas por esse vetor.

O presente estudo comparou conídios e blastosporos de Metarhizium anisopliae s.l. (IP 363), Metarhizium robertsii (IP 146) e Beauveria bassiana s.l. (IP 361 e CG 307) quanto a virulência para Rhipicephalus microplus, e quanto a tolerância ao calor e a radiação UV-B; foi avaliado ainda o desenvolvimento de conídios e blastosporos dos isolados IP 146 e IP 361 na cutícula de carrapatos por meio da microscopia eletrônica de varredura (MEV). Larvas e fêmeas ingurgitadas de R. microplus foram tratadas (larvas: 106, 107 ou 108 propágulos/mL; fêmeas: 107 propágulos/mL) por imersão, com conídios e blastosporos dos isolados avaliados. Maior percentual de mortalidade foi obtido nos grupos de larvas tratadas com conídios de IP 361, o qual obteve menor CL50. No bioensaio com fêmeas, blastosporos de IP 146 e IP 361 proporcionaram percentual de controle superior a 90%, enquanto que conídios dos mesmos isolados promoveram mortalidade de 70,97% e 63,29%, respectivamente. Para análise do desenvolvimento dos propágulos na cutícula de fêmeas ingurgitadas, essas foram tratadas topicamente com 50 µL de suspensão fúngica (107 propágulos/mL), incubadas em diferentes tempos de 0 a 96 horas; após cada tempo de incubação as fêmeas foram processadas e analisadas por MEV. Blastosporos de ambos isolados iniciaram seu desenvolvimento já após 4 horas de tratamento, demonstrando rápido desenvolvimento e sugerindo penetração por aberturas naturais do carrapato; com 4 horas de incubação foi possível ver a penetração de blastosporos de IP 361 através da cutícula, situação não evidenciada pelo isolado IP 146 em nenhum tempo avaliado. Nos testes de tolerância ao calor, o isolado de Metarhizium acridum (ARSEF 324) foi inserido como isolado padrão, por ser conhecida a sua tolerância. Suspensões fúngicas (103 propágulos/mL) foram expostas ao calor (45°C) por diferentes tempos, em seguida inoculadas em placas de Petri com meio BDAY acrescido de cloranfenicol (0,055% v/v) e incubadas por 7 dias a 27°C, e UR ≥ 80%. Conídios de ARSEF 324 (79,1%) demonstraram ser mais tolerantes ao calor do que conídios de IP 363 (55,5%), IP 146 (1,5%), CG 307 (0%) e IP 361 (0%) no tempo de 2 horas de exposição, assim como blastosporos no tempo de 60 minutos, demonstrando percentual relativo médio de 100%, 12,3%, 30,7%, 55% e 0%, respectivamente. Nos testes de exposição à UV-B, suspensões fúngicas (103 propágulos/mL) foram inoculadas em placas de Petri contendo BDAY e expostas a diferentes doses de radiação; após tratamento, as placas foram incubadas por 7 dias a 27°C, e UR ≥ 80%. Não houve diferença do percentual relativo médio de conídios e blastosporos expostos a mesma dose de radiação. Adjuvantes adequados que visem proteger os propágulos fúngicos contra fatores abióticos estressantes são requeridos para formulações de conídios e blastosporos; no entanto, a seleção de isolados naturalmente mais tolerantes ao calor e a radiação UV-B podem favorecer o desenvolvimento de bioprodutos. Nesse sentido, acredita-se que blastosporos sejam promissores para o biocontrole de carrapatos, já que estes se demonstraram virulentos para R. microplus, além de apresentarem rápido desenvolvimento sobre a cutícula desse artrópode, o que pode indicar menor tempo de exposição desses propágulos a fatores abióticos limitantes no ambiente. The current study compared the virulence of conidia and blastospores of Metarhizium anisopliae s.l. (IP 363), Metarhizium robertsii (IP 146) and Beauveria bassiana s.l. (IP 361 and GC 307) against Rhipicephalus microplus, and the tolerance to heat and UV-B radiation; in addition, it evaluated the development of conidia and blastospores of the isolates IP 146 and IP 361 on the tick cuticle by scanning electron microscopy (SEM). Larvae and engorged females of R. microplus were treated (larvae: 106, 107 or 108 propagules/mL, females: 107 propagules/mL) by immersion in conidia or blastospores suspensions of tested isolates. The higher percentage of larval mortality was obtained in the group treated with conidia of IP 361, which had lower LC50. In bioassays with engorged females, IP 146 and IP 361 blastospores, provided tick percent control superior to 90%, while conidia of the same isolates, promoted 70.97% and 63.29% of tick control, respectively. Ticks were treated topically with 50 μL of fungal suspension (107 propagules/mL) and incubated at different times from 0 to 96 hours to analyze its development on the engorged females cuticle; after each incubation time, the females were fixed and analyzed by SEM. Blastospores of both isolates have started development 4 hours after treatment, demonstrating rapid development and suggesting penetration by the tick natural openings; at 4 hours incubation, indicative of penetration of IP 361 blastospores through the cuticle was observed, but no signs of penetration was observed with IP 146 blastospores at any time evaluated. Furthermore, fungal suspensions (103 propagules/mL) were exposed to heat (45 °C) for several time periods, then inoculated in Petri plates with BDAY medium plus chloramphenicol (0.055% v/v), and incubated for 7 days at 27 °C and RH ≥ 80%. ARSEF 324 conidia (79.1%) were more tolerant to heat than conidia of IP 363 (55.5%), IP 146 (1.5%), GC 307 (0%), and IP 361 (0% ) at 2 hours exposure, as well as blastospores after 60 minutes exposure, demonstrating mean percent CFU of 100%, 12.3%, 30.7%, 55% and 0%, respectively. Fungal suspensions (103 propagules/mL) were also inoculated on BDAY in Petri plates, and exposed to UV-B radiation; after treatment, plates were incubated for 7 days at 27 °C and RH ≥ 80%. No difference in mean relative percent CFU between conidia and blastospores was observed. Suitable adjuvants which aim at protecting fungal propagules against stressful abiotic factors are required for conidia and blastospores; however, the selection of isolates with marked natural tolerance to heat and UV-B radiation may increase performance of bioproducts. Accordingly, it is suggested that blastospores are promising fungal propagules for biological control of ticks, since they were virulent against R. microplus; in addition, the rapid development of blastospores on the tick cuticle indicates they may be exposed shortly to harmful environmental abiotic factors. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

The aim of this study was to assess the activity of aqueous (AE) and ethanolic extracts (EE) and pilocarpine hydrochloride, which were extracted and isolated from Pilocarpus microphyllus (Jaborandi), respectively, on Rhipicephalus (Boophilus) microplus. High performance liquid chromatography (HPLC) was performed to quantify these compounds. Larval packet and adult immersion tests were conducted with different concentrations. Five AE and EE concentrations, ranging from 6.2 to 100.0 mg mL–1, and six concentrations of pilocarpine hydrochloride, ranging from 0.7 to 24.0 mg mL–1, were tested. The lethal concentration (LC50) of each extract for larvae and engorged females was calculated through Probit analysis. The concentration of pilocarpine hydrochloride obtained from the EE and the AE was 1.3 and 0.3% (m/m), respectively. Pilocarpine hydrochloride presented the highest acaricidal activity on larvae (LC50 2.6 mg mL–1) and engorged females (LC50 11.8 mg mL–1) of R.(B.) microplus, followed by the EE which presented LC50 of 56.4 and 15.9 mg mL–1, for larvae and engorged females, respectively. Such results indicate that pilocarpine hydrochloride has acaricidal activity, and may be the primary compound responsible for this activity by P. microphyllus EE. Resumo O objetivo desse estudo foi avaliar a atividade dos extratos aquoso (AE) e etanólico (EE) e do cloridrato de pilocarpina, que foram, respectivamente, extraídos e isolado de Pilocarpus microphyllus (Jaborandi), sobre Rhipicephalus (Boophilus) microplus. Cromatografia líquida de alta eficiência foi realizada para quantificação dos compostos. Testes de pacote de larvas e de imersão de adultos foram realizados com diferentes concentrações. Cinco concentrações do AE e EE variando de 6,2 a 100,0 mg mL–1 e seis concentrações do cloridrato de pilocarpina variando de 0,7 a 24,0 mg mL–1 foram testadas. A concentração letal (CL50) de cada extrato para larvas e fêmeas ingurgitadas foi estimada por meio da análise Probit. A concentração de cloridrato de pilocarpina obtida do EE e AE foi de 1,3 e 0,3% (m/m), respectivamente. O cloridrato de pilocarpina apresentou a maior atividade carrapaticida sobre larvas (CL50 2,6 mg mL–1) e fêmeas ingurgitadas (CL50 11,8 mg mL–1) de R. (B.) microplus, seguido do EE que apresentou CL50 de 56,4 e 15,9 mg mL–1, para larvas e fêmeas ingurgitadas, respectivamente. Tais resultados indicam que o cloridrato de pilocarpina apresenta atividade carrapaticida e pode ser o principal responsável pela atividade acaricida do EE de P. microphyllus.

Fêmeas ingurgitadas de Rhipicephalus microplus procuram áreas sombreadas e úmidas no solo para realizar oviposição. Estes locais apresentam um microclima favorável para viabilizar o controle deste artrópode com fungos entomopatogênicos. O objetivo deste estudo foi produzir péletes à base de microescleródios (ME) de Metarhizium spp. (CG 47, CG 632, IP 46, IP 119, ARSEF 1883 e ARSEF 2575) e avaliar sua virulência sobre fêmeas ingurgitadas de R. microplus em condições de laboratório. Os péletes foram obtidos a partir de microescleródios produzidos em meio líquido específico e processados para peletização. A produção de conídios e a viabilidade de cada formulado de Metarhizium spp. foram observadas distribuindo-se 0, 03g de péletes em meio ágar-água 2%, e incubando-os a 27 ºC ou 32 ºC por 15 dias, resultados mostram que a produção de conídios pelo péletes dos isolados foi similar para a temperatura de 27 ºC, sendo a viabilidade dos conídios esporulados superior a 90% em e 32 ºC. Dois bioensaios para triagem da virulência dos isolados contra R. microplus foram conduzidos: o primeiro com 0,007 g de péletes de cada um dos isolados de Metarhizium spp. estudados; e o segundo com quantidades diferentes de péletes (0.002 a0,006 g) do isolado IP 119. Péletes foram distribuídos sobre a superfície de 5 g de latossolo vermelho estéril, em Placas de Petri, umedecido com 2 mL de água destilada estéril. Foram preparadas dez réplicas para cada isolado fúngico. As placas foram incubadas por 15 dias a 27°C e UR> 90% para induzir a produção de conídios a partir dos grânulos. Placas do grupo controle não foram acrescidas de péletes. Após este período, foi adicionada uma fêmea em cada placa e avaliou- se diretamente o início da conidiogênese sobre os carrapatos por 15 dias, e após este período a massa de ovos foi retirada das placas e acondicionada individualmente em tubos de vidro para posterior quantificação das larvas eclodidas. Em ambos os bioensaios, os tratamentos fungicos reduziram o período de oviposição das fêmeas, assim comoo número de larvas eclodidas. Resultado semelhante observado paradiferentes concentrações de péletes do isolado IP 119. Bioensaio similar à metodologia descrita foi conduzido somente com IP 119 e CG 47 em duas temperatura:s 27 ºC ou 32 ºC. Os resultados mostraram que a 27 ºC péletes formulados com ME de CG 47 iniciaram a conidiogênese em fêmeas de R. microplus em tempo médio de 5 dias, e IP 119 em 9 dias. Já os ensaios conduzidos a 32 ºC mostraram que a conidiogênese sobre as fêmeas de R. microplus iniciaram entre o 5° e 6° dia. Para ambos isolados o número médio de larvas eclodidas reduziram.(X 2 = 43.53; df = 2; P 90% to induce conidial production; plates from control groups did not receive pellets. A female was placed in each plate and monitored daily for 15 days for fungal conidiogenesis on ticks. At day 15, the egg mass was removed from each plate and transferred to a glass vial and incubated at 27 ± 1ºC to quantify the number of hatching larvae hatched. In both bioassays the fungal treatment reduced the oviposition period of females, as well as the number of hatching larvae. A bioassay was conducted with IP 47 and IP 119 at two different temperatures: 27 °C or 32 °C. CG 47 pellets incubated at 27 °C incited conidiogenesis on R. microplus females by day 5, whereas IP 119 iniciated conidiogenesis by day 9. Trials conducted at 32 C revealed conidiogenesis on R. microplus females between day 5 and 6 for both fungi. The number of larvae from females exposed to pellets of CG 47 and IP 119 was reduced.. Tests with pellets of ME produced with the different inert materials showed that pellets with vermiculite presented higher conidial production compared with the pellets prepared with cellulose. Therefore, these results together indicate that the pelletized formulation of ME of Metarhizium spp. was effective in controlling R. microplus under laboratory conditions by reducing the number of offspring. This formulation is a potential mycoacaricide, since the temperature and humidity conditions required for production of infective conidia are conducive to those required by this tick to lay eggsand hatching larva in the environment. Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais Os diversos tipos de criação de suínos, intensivo e extensivo, os expõem a parasitos característicos dos suínos e do ambiente em que se inserem. Neste trabalho avaliou-se a exposição de suínos criados em granjas tecnificadas, SISCAL e não tecnificadas (fundo de quintal) a lepstospiras, a carrapatos e riquetsias. Soros sanguíneos foram analisados para determinar títulos de anticorpos anti-Leptospira pela técnica de SAM e anticorpos anti-rickettsia por RIFI. Os suínos foram inspecionados para presença de carrapatos e, em seus ambientes de criação e áreas adjacentes (pastagem e mata ciliar) foram coletados carrapatos pela técnica de arraste de flanela. Nas granjas 10,4% dos suínos apresentaram anticorpos anti-leptospira, seguida do SISCAL (8%) e da criação fundo de quintal (2,5%) e os sorovares envolvidos foram Bratislava, Pomona, Hardjo, Canicola e Icterohaemorrhagiae. Suínos criados ao ar livre (SISCAL) apresentaram uma porcentagem maior de propriedades com infestação de carrapatos (50%). Nas propriedades com suinos criados em fundo de quintal apenas em uma propriedade apresentou suínos parasitados (6,7%), enquanto nenhumadas granjas comerciais tinha suíno seu ambiente parasitado. Tanto no SISCAL como nas criações fundo de quintal detectou-se infestação ambiental do local da criação em propriedade. Já em áreas adjacentes ao da criação dos animais encontraram-se carrapatos nas três categorias de criação. Parasitando suínos foram encontrados os estágios de ninfas e adultos do carrapato Amblyomma scultpum, e apenas um exemplar adulto de Amblyomma parvum. Quanto às titulações sorológicas para cinco espécies de riquetsias, 55,2% dos suínos das granjas reagiram para pelo menos uma delas, nas criações de fundo de quintal, e esse número chegou a 89,7% e no SISCAL, a 100%. Em coletas consecutivas (junho de 2014 a fevereiro de 2016) no SISCAL FAZU no município de Uberaba, foi observado o estabelecimento de uma população de carrapatos A. sculptum mantida por suínos domésticos. Esta observação demonstra a capacidade de suínos em manter populações de A. sculptum quando em ambiente favorável e pode indicar uma nova tendência nas infestações ambientais por esta espécie de carrapato. A detecção de anticorpos contra leptospiras e riquetsias demonstra o potencial dos suínos a exposição e transmissão de doenças importantes na saúde pública. The various types of pig farming, intensive and extensive, expose them to pig parasites but also to those from the environment of the breeding site. In this work was evaluated the exposure of bigs bred in technified farms, SISCAL (intensive breeding system in pens) and not technified (backyard) to leptospira, ticks and rickettsiae. Blood sera were analyzed to determine titers of antibodies anti-Leptospira by SAM technique and antibodies anti-rickettsial by IFA, pigs were inspected for ticks and in their breeding environment and surrounding areas (pastures and riparian vegetation), ticks were collected by the flannel dragging technique. In the farms of pigs 10.4% had anti-Leptospira antibodies, followed by SISCAL (8%) and backyard animals (2.5%). The serovars found were Bratislava, Pomona, serovar, Canicola and Icterohaemorrhagiae. Higher percentage of properties with pigs raised outdoors (SISCAL) had tick infested animals (20%) than those raised in backyard (6.7%), while commercial farms had no infested pigs nor infested breeding place. In both SISCAL and backyard pig breeding properties ticks were observed at the breeding site environment. Tick infestations were detected in areas surrounding pig breeding site in all three husbandry suystems. Ticks found were all Amblyomma scultpum nymphs or adults with the exception of one of Amblyomma parvum adult. In relation to anti-rickettsia serology to five Rickettsia species, 55.2% of pigs from commercial farms reacted to al least one species, backyard pigs reacted to 89.7% and all pigs of SISCAL showed anti-rickettsia titers. Consecutive tick sampling (June 2014 to February 2016) in SISCAL FAZU in Uberaba, showed the establishment A. sculptum ticks maintained by domestic pigs. These observations demonstrate the ability the pigs to maintain populations of A. sculptum at a favorable environment and may indicate a new trend in environmental infestations by this species of tick. Exposure to Leptospira and Rickettsia demonstrated the potential pigs exposure and transmission of important diseases in public health. Tese (Doutorado)