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Aims Rheumatoid arthritis (RA) is a long term autoimmune inflammatory disease characterized by high autoantibody production and cytokine release, especially IL-6 and TNF-α. Some clinical studies have shown the effect of RA on CYP metabolism. However, the effect of RA on the drug transporter OATP1B1 remains a gap. Methods Patients with RA under pharmacological treatment (n = 10) and healthy volunteers (n = 15) treated for seven consecutive days with racemic fluvastatin (20, 40, or 80 mg/24 h) were investigated. Serial blood samples were collected during the last dose interval. All participants were assessed for cytokine profile and CYP2C9 genotype. Results Patients with RA showed increased plasma concentrations of IFN-γ and TNF-α up to two and four times, respectively, when compared to healthy volunteers, whereas CYP2C9 activity based on genotype was considered normal or slightly reduced for both investigated groups. When compared to healthy volunteers, patients with RA presented higher values (median and 25th–75th percentiles) of normalized AUC for 20 mg dose (250 [114–405] vs. 96.7 [78.1–131] ng h mL−1 for (−)-3S,5R-fluvastatin and 163 [96.9–325] vs. 83.1 [61.7–107] ng⋅h⋅mL−1 for (+)-3R,5S-fluvastatin) and lower values of CL/F (40.9 [24.5–89.1] vs. 103 [75.9–128] L⋅h−1 for (−)-3S,5R-fluvastatin and 61.4 [30.6–103] vs. 120 [93.0–162] L⋅h−1 for (+)-3R,5S-fluvastatin) and V/F (73.0 [28.5–117] vs. 143 [108–221] L for (−)-3S,5R-fluvastatin and 93.9 [32.7–116] vs. 153 [122–234] L for (+)-3R,5S-fluvastatin) for both enantiomers. Conclusion The lower values of CL/F and V/F for both fluvastatin enantiomers in RA patients suggest that the inflammatory disease downregulates the sinusoidal drug transporter OATP1B1, the rate-determining step in the hepatic clearance of fluvastatin.

Objective: This study is aimed at evaluating the long-term results of proximal scaphoid hemiarthroplasty for post-traumatic avascular necrosis at this institution. Methods: Twelve patients who underwent this procedure were identified, and the mean follow-up time was 6.5 years (range: 5-8 years). All patients were male, with a mean age of 39 years (range: 28-55 years). In eight patients, the non-dominant limb was affected. The procedure was carried out through a dorsal approach and all patients underwent the same rehabilitation protocol. Cases were evaluated regarding complications, pain, range of motion, functional status (Mayo Wrist Score), and disability (QuickDASH Score). Results: No immediate post-operative complications, such as infection or dislocation of the implant, were observed. All patients presented with peri-implant osteolysis at follow-up, on a radiograph study. None of the patients was forced to abandon their previous professional activity, although about 50% required some type of adaptation at their workplace. The mean functional capacity was, according to the Mayo Wrist Score, of 67.5 points (range: 50-80), corresponding to a satisfactory degree of function. The QuickDASH disability score presented a mean of 25 (range: 3-47.7). Conclusion: The results of this series are in line with previously published studies about this technique. Hemiarthroplasty with a pyrocarbon implant is a safe technique for the treatment of post-fracture avascular necrosis of the scaphoid proximal pole. This technique allowed for satisfactory functional results at a mean follow-up of 6.5 years. RESUMO Objetivo: Avaliar os resultados em longo prazo da hemiartroplastia do escafoide proximal no tratamento da osteonecrose avascular pós-traumática na instituição. Métodos: Foram identificados 12 pacientes submetidos a esse procedimento. O tempo médio de seguimento foi de 6,5 anos (entre cinco e oito). Todos os pacientes eram do sexo masculino, com média de 39 anos (entre 28 e 55). Em oito pacientes o membro afetado foi o não dominante. O procedimento foi feito por meio de uma abordagem dorsal e todos os pacientes foram submetidos ao mesmo protocolo de reabilitação. Todos os casos foram avaliados quanto à ocorrência de complicações, dor, amplitude de movimento, capacidade funcional (Mayo Wrist Score) e incapacidade (QuickDASH Score). Resultados: Não foram observadas complicações no período pós-operatório imediato, como infeção ou luxação do implante. No fim do período de seguimento, todos os casos apresentavam osteólise peri-implante no estudo radiográfico. Nenhum dos pacientes abandonou a sua atividade profissional prévia à cirurgia, embora em cerca de 50% dos casos tenha sido necessário algum tipo de adaptação no local de trabalho. A capacidade funcional média foi, de acordo com o Mayo Wrist Score, de 67,5 pontos (entre 50 e 80), correspondeu a um nível de função satisfatório. O escore de incapacidade QuickDASH apresentou uma pontuação média de 25 (entre 3 e 47,7). Conclusão: Os resultados desta série encontram-se em linha com os estudos publicados sobre essa técnica. A hemiartroplastia do escafoide com implante de pirocarbono é uma técnica segura para o tratamento da necrose avascular do polo proximal do escafoide após fratura. Essa técnica permitiu obter um resultado funcional satisfatório após uma média de 6,5 anos de seguimento.

Purpose: To evaluate the incidence, potential correlation with transcleral fine needle aspiration biopsy, and treatment of scleral necrosis in patients with posterior uveal melanomas treated by 125I plaque radiotherapy and assessed by transcleral fine needle aspiration biopsy. Methods: We performed a retrospective review of posterior uveal melanoma treated by 125I plaque radiotherapy at a single academic institution between July 2006 and July 2013. Consecutive patients diagnosed with a posterior uveal melanoma during the study period that had an anterior margin at or anterior to the equator who were evaluated by transcleral fine needle aspiration biopsy prior to 125I plaque radiotherapy were included. The main outcome measure was development of scleral necrosis, and the secondary outcome was treatment of this complication. Statistical analysis included computation of conventional descriptive statistics, cross-tabulation and chi-square tests of potential factors related to the development of scleral necrosis, and summarizing of treatment approaches and results. The incidence of treatment of scleral necrosis was calculated using the Kaplan-Meier method. Results: During the 7-year study period, 87 posterior uveal melanomas were evaluated by transcleral fine needle aspiration biopsy and treated by 125I plaque radiotherapy. The median largest basal diameter of the tumor was 13.3 mm, and the median thickness was 6.8 mm. Eight patients (9.2%) developed scleral necrosis during follow-up. Thicker tumors (> 6.5 mm) were more likely to develop scleral necrosis (n=7) than thinner tumors (p=0.05). The median interval between 125I plaque radiotherapy and detection of scleral necrosis was 19.1 months. The overall cumulative probability of scleral necrosis was 6.2% at 6 months and 14.3% at 24 months, subsequently remaining stable. For thicker tumors, the probability of scleral necrosis was 23.5% at 45.4 months. Five patients were treated by scleral patch graft (62.5%) and three by observation (37.5%). One patient underwent enucleation after two failed scleral patch attempts and recurrent scleral necrosis. The mean follow-up period for patients with scleral necrosis was 34.5 months. Conclusions: Thicker posterior uveal melanomas are more likely to develop scleral necrosis after 125I plaque radiotherapy and transcleral fine needle aspiration biopsy. While observation is sufficient for managing limited scleral necrosis, scleral patch graft is a viable alternative for eye preservation in extensive scleral necrosis. RESUMO Objetivo: Avaliar incidência, possível correlação da biópsia aspirativa com agulha fina trans-escleral e manejo da necrose escleral em pacientes com melanoma da úvea posterior tratados com placa de Iodo-125 (PLACA) avaliados pela biópsia aspirativa com agulha fina trans-escleral. Métodos: Revisão retrospectiva de melanoma da úvea posterior tratados com placa de Iodo-125 entre 07/2006 e 07/2013 em uma única instituição acadêmica. Pacientes diagnosticados consecutivamente com melanoma da úvea posterior durante o intervalo desse estudo cuja margem anterior está no equador ou anterior ao mesmo e foram avaliados pela biópsia aspirativa com agulha fina trans-escleral antes do tratamento com PLACA foram incluídos. O principal desfecho avaliado foi desenvolvimento de necrose escleral e o desfecho secundário foi o manejo dessa complicação. Análise estatística incluiu computação de variáveis descritivas convencionais; tabulação e teste do Chi-quadrado de fatores potencialmente relacionados com o desenvolvimento de necrose escleral e sumarização do manejo dessa complicação. A incidência de necrose escleral foi calculada usando o método de Kaplan-Meier. Resultados: Durante o período de 7 anos desse estudo, 87 melanomas da úvea posterior foram avaliados pela biópsia aspirativa com agulha fina trans-escleral e tratados com placa. A mediana do maior diâmetro basal tumoral foi 13,3 mm e a mediana da espessura foi 6,8 mm. Oito pacientes (9,2%) desenvolveram necrose escleral durante o período de acompanhamento. Tumores mais espessos (> 6,5 mm) foram mais propensos a desenvolver necrose escleral (n=7) que tumores mais finos (p=0,05). O intervalo mediano entre PLACA e a detecção da necrose escleral foi 19,1 meses. Probabilidade cumulativa de desenvolvimento de necrose escleral foi 6,2% em 6 meses e 14,3% em 24 meses permanecendo estável subsequentemente. Em tumores espessos, a probabilidade de necrose escleral foi 23,5% em 45,4 meses. Cinco pacientes foram manejados com enxerto escleral (62,5%), 3 foram observados (37,5%). Um paciente foi enucleado após 2 enxertos esclerais com necrose escleral recidivada. Tempo de seguimento médio dos pacientes com necrose escleral foi 34,5 meses. Conclusões: Tumores espessos pareceram mais propensos a desenvolver necrose escleral após PLACA e biópsia aspirativa com agulha fina trans-escleral para melanoma da úvea posterior. Apesar de observação para necrose escleral limitada ser suficiente, enxerto de esclera é uma alternativa viável para preservação ocular em necrose escleral extensa.

Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2022-07-21T19:32:32Z No. of bitstreams: 1 Viviane Almeida Gouveia.pdf: 2295666 bytes, checksum: 3f1065693ee4138e68ad850e856b5f8b (MD5) Made available in DSpace on 2022-07-21T19:32:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Viviane Almeida Gouveia.pdf: 2295666 bytes, checksum: 3f1065693ee4138e68ad850e856b5f8b (MD5) Previous issue date: 2018-06-05 The envenoming caused by snakes of the Bothrops genus is considered a neglected tropical disease and is frequently associated with severe and complex local manifestations; such as edema, intense pain, hemorrhage and myonecrosis. The specific and conventional treatment for this condition is the use of the anti-venom serum, which neutralizes the majority of the circulating venom, thus minimizing its systemic effects. However, its local action is reduced and, therefore, the patient may present permanent tissue damage and, in some cases, even amputation of the affected member. Thus, therapies are sought that can complement the action of the serum and minimize the local effects of the venom. Previous studies in our group have demonstrated that the low level laser (LLL) increases the viability of C2C12 muscle cells incubated with the venom of Bothrops jararacussu and further promotes the differentiation of these cells. Thus, the objective of this work was to evaluate the effect of LLL on C2C12 muscle cells submitted to B. jararaca, B. jararacussu and B. moojeni venoms for their mechanism of cell death (necrosis and apoptosis). To do so, the cells were incubated with the respective venoms and immediately irradiated with LLL at the wavelength of 660 nm, energy density of 2.5 J/cm2, potency of 10 mW, area of 0.045 cm2 and time of application of 20 seconds. The cells were incubated for 2 hours and then flow cytometry was performed for analysis of cell death. Cell viability was also evaluated along with the dosage of inflammatory mediators such as interleukins IL-1 β, IL-6, IL-10 and Tumor Necrosis Factor α (TNF-α). Our results showed that the application of LLL decreases cell death in the different venoms by necrosis and apoptosis; increases cell viability; decreases the release of IL-6 to all venoms and IL-1 β for the venoms of B. jararaca and B. moojeni, but does not influence the release of IL-10 and TNF-α. Thus, the LLL protects the muscle cells against the action of the venoms studied; increasing cell viability by decreasing cell death (necrosis and apoptosis) and minimizing the inflammatory process. O envenenamento causado por serpentes do gênero Bothrops é considerado uma doença tropical negligenciada e frequentemente está associado com manifestações locais graves e complexas; como edema, dor intensa, hemorragia e mionecrose. O tratamento convencional específico para esse agravo é a utilização do soro antibotrópico, o qual neutraliza grande parte do veneno circulante, minimizando assim seus efeitos sistêmicos. Porém, sua ação local é reduzida e, com isso, o paciente pode apresentar lesão permanente de tecidos e, em alguns casos, até mesmo a amputação do membro afetado. Assim, buscam-se terapias que possam complementar a ação do soro e minimizar os efeitos locais do veneno. Estudos anteriores do nosso grupo demonstraram que o laser de baixa intensidade (LBI) aumenta a viabilidade de células musculares C2C12 incubadas com o veneno de Bothrops jararacussu e ainda promove a diferenciação dessas células. Dessa maneira, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do LBI em células musculares C2C12 submetidas à ação dos venenos de B. jararaca, B. jararacussu e B. moojeni quanto ao seu mecanismo de morte celular (necrose e apoptose). Para tanto, as células foram incubadas com os respectivos venenos e imediatamente irradiadas com LBI no comprimento de onda de 660 nm, densidade de energia de 2,5 J/cm2, potência de 10 mW, área de 0,045 cm2 e tempo de aplicação de 20 segundos. As células foram incubadas por 2 horas e, posteriormente, foi realizada a citometria de fluxo para análise da morte celular. Também foi avaliada a viabilidade celular juntamente com a dosagem de mediadores inflamatórios como as interleucinas IL-1 β, IL-6, IL-10 e Fator de Necrose Tumoral α (TNF-α). Nossos resultados mostraram que a aplicação do LBI diminui a morte celular nos diferentes venenos por necrose e apoptose; aumenta a viabilidade celular; diminui a liberação de IL-6 para todos os venenos e de IL-1 β para os venenos de B. jararaca e B. moojeni, mas não influencia na liberação de IL-10 e TNF-α. Assim, o LBI protege as células musculares contra a ação dos venenos estudados; aumentando a viabilidade celular pela diminuição da morte celular (necrose e apoptose) e minimizando o processo inflamatório.

Bufadienolides show a wide variety of biological activities, including antineoplastic activities. The present study evaluated the cytotoxic potential and mechanisms of action of two bufadienolides: bufalin (BUF-05) and 3-acetate bufalin (BUF-06). Cytotoxic potential was evaluated using seven human tumor cell lines, three normal murine cell lines and human peripheral blood mononuclear cells (PBMC). Both bufadienolides were shown to be quite cytotoxic to all tumor cell lines (IC50 from 3 to 32 nM), with BUF06 being slightly more potent than BUF05. In PBMCs, bufadienolides showed IC50 values of about 25nM. The compounds showed no cytotoxicity towards normal murine. The PC-3 prostate cell line was chosen to elucidate the mechanism of action of the bufadienolides. Impedance based real-time growth assay analysis showed that both bufadienolides have a similar profile, increasing impedance in the first few hours, then reducing below the control curves, and finally reaching plateau shortly thereafter. Light scanning photomicrographs showed an increase in cell size for both bufadienolides. Cell viability by flow cytometry indicated a reduction in the number of cells and mebrane integrity at 24 and 48 hours. Morphological analysis by flow cytometry revealed that both compounds increased the number of apoptotic cells. Moreover, morphological analysis using differential staining showed the emergence of apoptotic and necrotic cells. In order to confirm the apoptotic profile, phosphatidylserine externalization detection was performed, which showed an increase of initial apoptosis after 24 hours and late apoptosis after 48 hours incubation for both bufadienolides. The compounds also showed mitochondrial depolarization for both incubation times. Western blot analysis revealed a discrete cleavage of PARP and caspase 8. However, effector caspases 3 and 7 were not activated. Low expression of antiapoptotic components Bcl-2 and Bcl-xL, as well as decrease of proapoptotic Bax suggest non-induction of apoptotic cell death. Evaluation of nuclear DNA content showed that both bufadienolides provoked cell arrest in the G2/M phase after 24 and 48 hours incubation. When analyzing cyclin expression involved in the cell cycle, the absence of cyclin A2 and accumulation of cyclin B1 was observed for both compounds, possibly indicating arrest in M phase. DNA damage was accessed by comet assay and phosphorylated H2AX labeling, which showed that the compounds were not able to produce DNA damage. Evaluation of the involvement of DNA repair pathways using DT40 knockout cells suggested that PARP may be involved in the cell death caused by both bufadienolides tested. PARP hyperactivation is a hallmark of parthanatos, a regulated type of necrotic cell death. Furthermore, topoisomerase-mediated DNA cleavage assays showed the inhibition of topoisomerase II by both BUF-06 and BUF-05. In silico molecular docking assays revealed strong affinity of both bufadienolides for the ATPase portion of topoisomerase IIα, indicating possible catalytic inhibition. Overall, these results indicate that 3-acetate bufalin has a cytotoxic profile similar to bufalin. Os bufadienolídeos possuem uma grande variedade de atividades biológicas, incluindo atividade antineoplásica. O presente estudo avaliou o potencial citotóxico bem como o mecanismo de ação de dois bufadienolídeos: a bufalina (BUF-05) e seu análogo 3-acetato de bufalina (BUF-06). O potencial citotóxico foi avaliado em sete linhagens tumorais humanas, três linhagens murinas normais e em células mononucleadas do sangue periférico (CMSP) humano. Ambos os bufadienolídeos se mostraram bastante citotóxicos (IC50 3 a 32 nM), onde 3-acetato de bufalina se mostrou mais potente que bufalina. Em relação a CMSP, os bufadienolídeos também se mostraram citotóxicos (IC50 25 nM). Os bufadienolídeos não se mostraram citotóxicos para as linhagens murinas. A linhagem celular de próstata PC-3 foi escolhida para determinação dos mecanismos de ação dos bufadienolídeos. A análise do crescimento celular em tempo real por impedância mostrou que tanto BUF-06 como BUF-05 possuem perfil similar com aumento da impedância logo nas primeiras horas, reduzindo após 24 horas para abaixo da curva do controle negativo e atingindo platô em seguida. A viabilidade das células por citometria de fluxo indicou a redução do número de células e integridade de membrana em 24 e 48 horas. A análise morfológica por citometria de fluxo revelou aumento do número de células em padrão apoptótico. Já a análise morfológica por coloração diferencial, mostrou o surgimento de células tanto com padrão apoptótico quanto necrótico. No intuito de confirmar o perfil apoptótico, foi realizado a determinação da externalização de fosfatidilserina, a qual mostrou aumento significativo de apoptose inicial em 24 horas e apoptose tardia para 48 horas em ambos os bufadienolídeos. Os bufadienolídeos apresentaram, ainda, despolarização mitocondrial em ambos os tempos de incubação. As análises por western blot revelaram que houve clivagem discreta de PARP e caspase 8. No entanto, as caspases efetoras 3 e 7 não se mostraram ativadas. A diminuição da expressão dos componentes antiapoptóticos Bcl-2 e Bcl-xL, bem como dimuição do componente pró-apoptótico Bax sugere a não indução de morte por apoptose. A avaliação da quantidade de DNA nuclear revelou que ambos os bufadienolídeos causaram acúmulo de células na fase G2/M após 24 e 48 horas de incubação. Ao se analisar a expressão de ciclinas envolvidas no ciclo celular, foi observada ausência da ciclina A2 e acúmulo de B1 para ambos os compostos, podendo indicar acúmulo de células na fase M. As avaliações por meio do ensaio do cometa e marcação de H2AX fosforilado, os quais revelaram que os compostos não foram capazes de causar dano ao DNA. A avaliação do envolvimento das vias de reparo de DNA utilizando células DT40 knockout, mostrou que PARP pode estar envolvido no processo de morte promovido pelos bufadienolídeos. Além disso, os ensaios de clivagem de DNA mediados por topoisomerase mostraram a inibição de topoisomerase II tanto por BUF-06 como por BUF-05. Ensaios in silico por docking molecular revelaram forte afinidade para a porção ATPásica de topoisomerase IIα, indicando uma possível inibição catalítica. Desse modo, os resultados apontam que 3-acetato de bufalina possui perfil citotóxico semelhante a bufalina.

Orientadora: Profª. Drª. Maria Eliane Merlin Rocha Coorientadores: Profª. Dra. Sheila M. B. Winnischofer, Dr. Paul Keneth Witting - University of Sydney Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências - Bioquímica. Defesa : Curitiba, 27/06/2018 Inclui referências Resumo: O neuroblastoma é um câncer infantil com alta mortalidade. As hidroxichalconas têm recebido atenção considerável devido às suas atividades citotóxicas em células tumorais. Deste modo, o objetivo do presente estudo foi caracterizar a citotoxicidade das hidroxichalconas, 4'-hidroxichalcona e isoliquiritigenina (4,2',4'-trihidroxi-chalcona; ISL) em neuroblastoma utilizando um modelo in vitro de células SH-SY5Y. A incubação das células SHSY5Y cultivadas com 4HC (10-60 ?M) por 24 h diminuiu a confluência, a atividade metabólica e os níveis de ATP intracelulares em relação ao controle. Com base nos resultados, a toxicidade celular induzida por 4HC provavelmente está relacionado com as disfunções mitocondriais, como: inibição da respiração mitocondrial, despolarização do potencial de membrana mitocondrial e alterações morfológicas. Além disso, a perda de viabilidade celular foi acompanhada principalmente pelo aumento da exposição de fosfatidilserina na superfície das células, sugerindo que a 4HC poderia induzir a via intrínseca da apoptose em células SH-SY5Y. Além disso, o tratamento com 4HC inibiu a migração/proliferação celular de SH-SY5Y e induziu mudanças significativas na progressão do ciclo celular. A incubação das células SH-SY5Y com 10-100 ?M de ISL (24 h) diminuiu a confluência e os níveis de ATP intracelular em relação ao controle; o inibidor da necroptose necrostatina-1 restaurou os níveis de ATP. A citotoxicidade mediada por ISL não envolveu ativação das caspases 3/7 ou aumento da exposição de fosfatidilserina na superfície das células, indicando que a morte celular foi independente da via clássica da apoptose. O tratamento com ISL inibiu a proliferação/migração celular e modificou a progressão do ciclo celular SH-SY5Y. Nossos resultados mostram que ambas as hidroxichalconas, 4HC e ISL, têm efeitos citotóxicos contra a linhagem celular de neuroblastoma humano SH-SY5Y apresentando valores de EC50 de 21,5 ± 3,4 ?M para 4HC e 25,4 ± 1,4 ?M para ISL. No entanto, os efeitos do 4HC nas células do neuroblastoma estão associados com a disfunção mitocondrial e sugerem morte celular por apoptose enquanto que a atividade de ISL em células de neuroblastoma envolve a morte celular possivelmente por necroptose. Palavras-chave: hidroxichalcona; neuroblastoma; SH-SY5Y; necroptose; apoptose; disfunção mitocondrial. Neuroblastoma is a childhood cancer with high mortality. Abstract: Hydroxychalcones have received considerable attention because of their cytotoxic activities on cancer cells. Thus, the aim of the present study was to characterize the cytotoxicity of the hydroxychalcones, 4'-hydroxychalcone and isoliquiritigenin (4,2',4'-trihydroxychalcone; ISL) to neuroblastoma using an in vitro model of SH-SY5Y cells. Incubation of cultured SHSY5Y cells with 4HC (10-60 ?M) for 24 h decreased cell confluency, cellular metabolic activity and depleted intracellular ATP relative to the vehicle-treated control. The mechanism of 4HC-induced cell toxicity likely involves mitochondria dysfunctional as judged by inhibition of mitochondrial respiration, depolarization of mitochondria membrane potential and morphological alterations. Furthermore, loss of cell viability was accompanied mainly by increase of phosphatidylserine exposure on the surface of cells, suggesting that the 4HC may induce the intrinsic pathway of apoptosis in SH-SY5Y cells. In addition, 4HC treatment inhibited SH-SY5Y cell migration/proliferation in a scratch assay and induced significant changes in the cell cycle progression. Incubation of SH-SY5Y cells with 10-100 ?M ISL (24 h) decreased confluency and intracellular ATP relative to control; the necroptosis inhibitor necrostatin-1 restored ATP levels. ISL-mediated cytoxicity did not involve caspase 3/7 activation or increase of phosphatidylserine exposure on the surface of cells, indicating that cell death was apoptosis independent. ISL treatment inhibited cell proliferation/migration and arrested SH-SY5Y cell cycle transition. Our results showed that both of hydroxychalcones, 4HC and ISL, have cytotoxic effects against human neuroblastoma cell line SH-SY5Y with EC50 values of 21.5 ± 3,4 ?M for 4HC and 25.4 ± 1,4 ?M for ISL. However, 4HC effects on neuroblastoma cells are associated with mitochondrial dysfunctional and it suggest cell death by apoptosis. Whilst, activity of ISL on neuroblastoma cells involves cell death possibly via a necroptotic pathwayx. Keywords: hydroxychalcona; neuroblastoma; SH-SY5Y; necroptosis; apoptosis; mitochondrial dysfunction.

Dissertação de mestrado em Biologia Molecular, Biotecnologia e Bioempreendedorismo em Plantas, Propolis is a natural mixture produced by honey bees (particularly Apis mellifera L.) from various plant sources. Characterized by a plethora of chemicals, propolis is generally rich in flavonoids, phenolic acids and derivatives and terpenes, associated to it’s antimicrobial, antioxidant and cytotoxic activities, among others. In a previous investigation, an ethanol extract of propolis from the Portuguese region of Beira Alta (Côa) was reported to exhibit unique dual genotoxic and antigenotoxic effects, but no mechanism of action (MOA) was identified. Despite the growing demand for propolis-based products by several industries, the national supply is limited and unstandardized, still not perceived as profitable by the beekeepers, so with the import of products being inevitable. For the present work, two ethanol extracts of propolis samples from Pereiro (P), collected in 2010 (P10) and 2017 (P17), were prepared to investigate the mechanisms of cytotoxicity, genotoxicity and phytotoxicity, using S. cerevisiae and Linum usitatissimum L. as models. While P17.EE did not show any toxic effect at the range of concentrations tested, yeast cells exposed to other Pereiro propolis extracts showed decreased viability along time. As the mutant yap1, deleted in an essential gene for oxidative stress response, was not affected or slightly more resistant than the wild type, the cytotoxic effect was not mediated by oxidative stress. With both extracts inducing the loss of plasma membrane integrity, the genotoxicity of propolis extracts was analyzed by the nucleus-to-cytosol translocation of Nhp6A protein, a necrotic marker, by fluorescence microscopy. Only P10.EE induced this translocation, suggesting that its cytotoxicity was mediated by necrosis. With the plant model it was observed that both propolis extracts induced a strong concentration-dependent inhibition in root and epicotyl growth, but less impact on hypocotyls, being P10 more inhibitory than P17. Also, effects on cell cycle of these cells/organs assessed by flow cytometry showed that P10, but not P17 at the same concentration (750 μg mL-1), have increased the population of root nuclei in G0/G1. Photosynthetic activity, assessed by 2D Pulse Amplitude Modulated fluorometry in flax cotyledons, was not affected by propolis extracts under growth light conditions, but P17 improved the rETR1000 and Fv/Fm recovery after a high-light challenge, suggesting a possible role in the mitigation of photooxidation. To our knowledge, here we present the first evidences that high concentrations of Pereiro propolis have necrotic-mediated cytotoxicity in yeast cells and cause impairments in the cell cycle on in vitro grown flax root cells, contributing to the elucidation of its MOA., Própolis é uma resina natural produzida por abelhas (particularmente Apis mellifera L.) a partir de várias fontes vegetais. Constituído por dezenas de compostos, o própolis é geralmente rico em flavonóides, ácidos fenólicos e derivativos e terpenos, associados às suas atividades antimicrobianas, antioxidantes e citotóxicas, entre outras. Num estudo anterior observou-se que um extrato etanólico de própolis da região da Beira Alta (Côa, Portugal) exibiu efeitos genotóxicos e antigenotóxicos, mas o mecanismo de ação (MOA) não foi identificado. Apesar da crescente procura, por diversas indústrias, de produtos à base de própolis, a oferta nacional é limitada e não padronizada, não sendo a sua rentabilidade reconhecida pelos apicultores, sendo assim inevitável a importação destes produtos. Para o presente trabalho, dois extratos etanólicos de amostras de própolis de Pereiro (P), recolhidas em 2010 (P10) e 2017 (P17), foram preparados para investigar os mecanismos de citotoxicidade, genotoxicidade e fitotoxicidade, usando S. cerevisiae e Linum usitatissimum L. como modelos. Enquanto que o P17 não apresentou efeito tóxico na gama de concentrações testadas, as células de levedura expostas a outros extratos de própolis do Pereiro mostraram menor viabilidade ao longo do tempo. O mutante yap1, com supressão de um gene essencial para a resposta ao stresse oxidativo, não foi afetado ou foi ligeiramente mais resistente que a estirpe selvagem, concluindo-se que a citotoxicidade não foi mediada por stresse oxidativo. Com ambos os extratos de própolis a induzirem perda da integridade da membrana plasmática, a genotoxicidade foi analisada pela translocação nucleo-citosólica da proteína Nhp6A, um marcador necrótico, por microscopia de fluorescência. Apenas P10 induziu esta translocação, sugerindo que a sua citotoxicidade foi mediada por necrose. Com o modelo da planta observou-se que os ambos os extratos de própolis induziram uma forte inibição, dependente da concentração, do crescimento de raízes e epicótilos, sendo P10 mais inibitório que P17. Efeitos no ciclo celular destas células/orgãos avaliados por citometria de fluxo demonstraram que P10, mas não o P17 (ambos a 750 μg mL-1), aumentou a população de núcleos em G0/G1 da raiz. A atividade fotossintética, avaliada por fluorometria de Pulso de Amplitude Modulada em cotilédones de linho, não foi afetada pelos extratos sob condições de luz de crescimento, mas P17 melhorou a rETR1000 e a recuperação de Fv/Fm após tratamento a luz intensa, sugerindo um possível papel na mitigação da fotoxidação. Do nosso conhecimento, apresentamos aqui as primeiras observações de que elevadas concentrações de própolis do Pereiro apresentam citotoxicidade mediada por necrose em células de levedura e causam danos no ciclo celular em células de raiz de linho cultivadas in vitro, contribuindo para a elucidação do seu MOA.

CONTEXTE ET OBJECTIF DE L'ÉTUDE. La radiothérapie stéréotaxique (RTS) est recommandée dans le traitement des oligo-métastases cérébrales chez des patients avec une maladie extra-cérébrale contrôlée offrant un bon contrôle local. Lorsque la lésion ciblée augmente de volume sur l'imagerie du suivi standard, il apparaît difficile de différencier progression (P) et radionécrose (RN). En dehors de la confirmation histologique, la prise de décision peut alors apparaître inappropriée et retardée. Les paramètres d'imagerie quantitative extraits des examens de routine pourraient être intéressants. Nous proposons d'explorer la valeur ajoutée de la méthode radiomics dans la démarche diagnostique différentielle de ces deux entités. MATÉRIEL ET MÉTHODES. 20 patients ayant reçu une RTS pour métastases cérébrales, tous primitifs confondus, ont été inclus rétrospectivement (8 RN documentées, 12 P documentées). A l'aide du logiciel IBEX, 1766 paramètres radiomics ont été extraits de la première IRM T1- gadolinium post-RTS présentant une modification du volume lésionnel. Une sélection de variables et un apprentissage sur les 1, 5 et 10 meilleures variables par famille sectionnée ont été conduits selon la méthodologie de Aerts et al. (Nature Comm., 2014). 7 méthodes de sélection de variables et 12 méthodes d'apprentissage ont été évaluées. La performance de classification a été mesurée à l'aide du Kappa de Cohen, calculé après une validation interne par leave-one-out-cross-validation. Toutes les analyses ont été réalisées sur R. RÉSULTATS. La meilleure classification a été obtenue par la combinaison du score de sélection de variables Chi square score et d'un algorithme Bagging pour l'apprentissage (AUC = 0,83). La performance de prédiction de RN était de 75% (6 cas sur 8 prédits) et de 91% pour les P (11 cas sur 12 prédits). La prédiction du statut du patient est en accord fort avec le statut réel (histologique) du patient avec un Kappa de Cohen à 0,68. CONCLUSION. La méthode radiomics semble capable de discriminer de manière probante, précoce et non invasive RN et P après RTS de métastases cérébrales. Cette étude aux résultats prometteurs est une preuve de concept. Ces données sont à étendre à une plus large cohorte afin de définir un modèle robuste pour aider à la prise de décision dans cette situation clinique délicate.

RESUMO Objetivo: relatar a experiência da Divisão de Cirurgia Plástica do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo no tratamento de lesões cutâneas por extravasamento acidental de drogas. Métodos: foram incluídos os pacientes com lesões por extravasamento de drogas num período de 18 meses. Os seguintes parâmetros foram avaliados retrospectivamente: idade, diagnósticos durante internação e comorbidades, níveis séricos de albumina e hemoglobina, local de internação, droga envolvida, segmento anatômico acometido, conduta terapêutica e óbito durante internação. Resultados: foram acompanhados 14 pacientes. A principal droga envolvida foi a noradrenalina (21%). Todos os pacientes foram submetidos a desbridamento da necrose tecidual. Três pacientes foram submetidos a retalhos após preparo do leito com terapia por pressão negativa, com bons resultados. Sete pacientes não tiveram tratamento definitivo de suas lesões por falta de condições clínicas. Conclusão: o tratamento definitivo por meio de retalhos se mostrou adequado para os casos de feridas por extravasamento de drogas em tecido subcutâneo, quando há exposição de estruturas nobres, em pacientes com condições clínicas favoráveis.

A cicatrização adequada das feridas cirúrgicas é influenciada pela técnica operatória, pela presença de intercorrências pós-cirúrgicas e pelos hábitos de vida do paciente. Relatamos caso de paciente submetido a exérese de carcinoma basocelular por cirurgia micrográfica de Mohs e reconstrução com enxertia cutânea palpebral. No pós-operatório houve necrose do enxerto devido má perfusão do leito cirúrgico imputada ao tabagismo. O tabagismo interfere na embebição plasmática e neovascularização do enxerto, além de promover estresse oxidativo e disfunção endotelial. O cirurgião deve orientar a suspensão do tabagismo por pelo menos quatro semanas antes do procedimento, a fim de evitar maiores riscos de complicações.

A Necrose Gorda do Recém-nascido (NGRN) é uma paniculite rara, autolimitada, que surge em recém-nascidos de termo, nas primeiras semanas de vida. A sua patogénese permanece desconhecida mas parece estar relacionada com situações de stress, que levam à hipoperfusão e cristalização do tecido adiposo, causando necrose e inflamação granulomatosa. O caso clínico descrito representa uma NGRN apenas com envolvimento cutâneo. O provável factor precipitante associado foi o parto por cesariana. Subcutaneous fat necrosis of the newborn (SCFN) is an uncommon disorder characterized by panniculitis, that usually runs a self-limited course and occurs in healthy and full-term newborn. The exact pathogenesis of subcutaneous fat necrosis of the newborn in not known, but it is postulated that cold or stress-induced injury to immature fat results in the development of solidification and necrosis; a granulomatous infiltrate forms subsequently. The present case report represents a SCFN limited to cutaneous involvement. The probable causal factor was delivery by cesarean. info:eu-repo/semantics/publishedVersion

Background Childhood-onset systemic lupus erythematosus (c-SLE) is a chronic autoimmune disease which increases cardiovascular risk factors (CRF) such as elevated homocysteine, TNF-α, and hs-C reactive protein. Methods We evaluated BMI, waist circumference (WC), 24-h recalls, SLEDAI-2 K, SLICC/ACR-DI, serum levels of homocysteine, folate, TNF-α, hs-C reactive protein, lipid profile, proteomic data, and duration of corticosteroid therapy in 19 c-SLE and 38 healthy volunteers. Physiological and anthropometric variables of c-SLE and healthy controls were compared by ANCOVA. k-cluster was used to separate c-SLE into two different groups with the best and the worst metabolic profile according to previous analysis showing some metabolites that were statistically different from controls, such as homocysteine, TNF-α, hs-CRP and folate levels. These two clusters were again compared with the control group regarding nutritional parameters, lipid profile and also proteomic data. Results Individuals with c-SLE presented higher BMI, WC, homocysteine, triglycerides, TNF-α, hs-CRP and lower folate levels when compared to controls. We found 10 proteins whose relative abundances were statistically different between control group and lupus clusters with the best (LCBMP) and the worst metabolic profile (LCWMP). A significant positive correlation was found between TNF-α and triglycerides and between hs-CRP and duration of corticosteroid therapy. Conclusion Cardiovascular disease (CVD) risk parameters were worse in c-SLE. A less protective CVD proteomic profile was found in LCWMP.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Tecnologia, Departamento de Engenharia Mecânica, 2017. O procedimento de Ablação por Radiofrequência ( ARF ) é uma alternativa minimamente invasiva para tumores situados no coração, pulmão, ossos ou, em particular, no fígado. A ARF proporciona o aquecimento do tecido cancerígeno por meio da aplicação de uma corrente alternada aplicada ao tumor. O uso de ARF é recomendada apenas para tumores menores de 3 cm devido ao aumento da taxa de recorrência do tumor e da taxa de progressão local as quais estão associadas ao diâmetro do tumor. A obtenção de volumes de necrose maiores do que 3 cm é de difícil obtenção por causa, principalmente, da perfusão sanguínea que atua como elemento dissipativo e do Roll off que é o súbito aumento da impedância do tecido ocasionada ao se atingir a carbonização celular. Ao se atingir o Roll off, a energia entregue ao tumor é interrompida provocando volumes de necrose menores. Dessa forma, pesquisas visando o aumento do volume mediante a utilização de diferentes geometrias de eletrodos ou a associação de injeção de soluções químicas tem sido propostas. Entretanto, tornam o processo mais invasivo e diminui a vantagem da ARF como procedimento minimamente invasivo. Este trabalho traz uma abordagem para a expansão do volume de necrose por meio do deslocamento temporal de ocorrência do Roll off mediante a infusão refrigerada de solução salina e água deionizada a 5∘C e 23∘C para avaliar a influência da temperatura dos líquidos durante a ARF em peças de fígado bovino ex vivo. Os resultados obtidos foram utilizados para se propor um modelo matemático da ocorrência do Roll off por meio de identificação de sistemas. Os resultados mostram que a terapia combinada de ARF e solução salina à baixa temperatura (5∘C) favorece a ampliação do tempo de ocorrência do Roll off e consequentemente a obtenção de volumes maiores de necrose em experimentos ex vivo. Um modelo Box-Jenkins e um modelo no espaço de estados de predição de ocorrência do Roll off foram obtidos podendo ser incorporados em equipamentos de ARF como estratégia de controle. The radiofrequency ablation procedure is a minimally invasive alternative for tumors located in the heart, lungs, bones, or in particular, the liver. The RFA heats the cancerous tissue through the application of an alternating current applied to the tumor. The RFA is recommended solely for tumors less than 3 cm of diameter in size, due to the tumor’s recurrence rate and the local progression rate which are associated with the tumor’s diameter. Obtaining necrosis volumes greater than 3 cm is rather difficult, mainly due to blood perfusion that acts as a dissipative element and due to the Roll off, which is the sudden increase of the tissue’s impedance after reaching cellular carbonization. By reaching the Roll off, the energy given to the tumor ceases, leading to smaller necrosis volumes. Accordingly, research aiming to increase this volume through different electrode geometries or association of chemical saline solutions have been proposed. However, they make the process more invasive and thus lower the advantage of the RFA as a minimally invasive process over other procedures. The present work brings an approach for the expansion of the necrosis volume by the temporal displacement of the Roll off through the refrigerated infusion of saline solution and deionized water at 5∘C and 23∘C, to evaluate the temperature influence of the liquids during the RFA in ex vivo bovine liver pieces. The collected results were used to propose a mathematical model of the Roll off occurence, through system identification. The results show that the combined therapy of RFA and saline solution at low temperature (5∘C) favors the broadening of the Roll off occurence time period and consequently the obtention of greater necrosis volumes in ex vivo experiments as well. A Box-Jenkins model and a model in the Roll off prediction space states were obtained, allowing their incorporation to RFA equipments as a control strategy.

Purpose: to assess the interobserver agreement of categorizing pancreatic and peripancreatic collections using the revised Atlanta classification (RAC) in the first month of acute pancreatitis (AP), and to correlate the type of collection with outcome. Material and methods: among 131 consecutive patients hospitalized for 139 episods of AP, 195 CTs performed within the first month, and presenting peripancreatic anomalies, were analysed. Each episod of AP was classified into three degrees of severity adaptated and according to the RAC: mild, moderately severe and severe. Two radiologists blinded to the clinical data retrospectively categorized the collections as acute peripancreatic fluid collections (APFC) or acute necrotic collections (ANC), using the RAC criteria. Interobserver agreement was assessed by using ? statistics, and compared according to the timing of the CTs. Results: interobserver agreement to categorize peripancreatic collections was moderate (κ=0.45). This agreement did not increase with the timing of the CTs: κ was 0.51 before day 3, 0.36 between day 3 and day 7 and 0.53 after day 7. For the detection of parenchymal necrosis, the interobserver agreement was also moderate (κ=0.42). There was a tendency for less severity among patients with APFC compared with patients with ANC (p=0.06). Conclusion: the RAC shows a moderate interobserver agreement to categorize both peri and intra pancreatic collections. The type of collection occuring during the first month of an AP is associated with the severity of the pancreatitis.; Objectif : évaluer la reproductibilité inter-observateur de la classification révisée d’Atlanta de 2012 pour catégoriser les collections pancréatiques et péri-pancréatiques survenant lors du 1er mois d’une pancréatite aiguë et corréler le type de collection à la sévérité clinique. Matériel et méthodes : chez 131 patients consécutifs pris en charge pour 139 poussées de pancréatite aiguë, 195 scanners réalisés lors du premier mois d’évolution et présentant des anomalies péripancréatiques, ont été analysés. Les pancréatites aiguës ont été classées en trois degrés de sévérité clinique adaptés de la classification révisée d’Atlanta : peu grave, modérément grave, grave. Deux radiologues ont, rétrospectivement et en aveugle des données cliniques, classé les collections en collection liquidienne aiguë péri-pancréatique (CLAP) ou collection aiguë nécrotique (CAN) en utilisant la classification révisée d’Atlanta. La concordance inter-observateur a été évaluée en utilisant le coefficient κ, et a été comparée en fonction du délai de réalisation des scanners. Résultats : un total de 139 épisodes de pancréatite aiguë ont été analysés chez 131 patients (50 femmes et 81 hommes) âgés de 20 à 94 ans (âge moyen de 58,7 ± 18,0 ans). Une reproductibilité inter-observateur moyenne était retrouvée pour déterminer le type de collection (κ=0,45). Cette reproductibilité n’était pas améliorée avec l’allongement du délai entre le début des symptômes et la réalisation du scanner : le kappa était de 0,51 entre J0 et J2, de 0,36 entre J3 et J7 et de 0,53 après J7. Une reproductibilité inter-observateur moyenne (κ=0,42) était également retrouvée pour la mise en évidence d’une nécrose intraparenchymateuse. La sévérité clinique de la pancréatite avait tendance à être plus faible chez les patients présentant une CLAP que chez les patients présentant une CAN (p=0,06). Conclusion : la classification révisée d’Atlanta ne présente qu’une reproductibilité inter-observateur moyenne pour classer les collections pancréatiques et péri-pancréatiques lors du 1er mois d’une pancréatite aiguë. Le type de collection est associé à la sévérité clinique de la pancréatite aiguë.

Crotalicidin (Ctn), a 34-residue cathelicidin from a South American rattlesnake, and its fragment (Ctn[15–34]) have shown anti-infective and cytotoxic activities against Gramnegative bacteria and certain tumor lines, respectively. The extent of such effects has been related to physicochemical characteristics such as helicity and hydrophobicity. We now report the anti-fungal activity of Ctn and its fragments (Ctn[1–14]) and (Ctn[15–34]) And characterize the possible mechanisms of action of peptides against Candida albicans.MIC determination and luminescent cell viability assays were used to evaluate the anti-infective activity of Ctn and its fragments (Ctn[1–14]) and (Ctn[15–34]) as anti-fungal agents against opportunistic yeast and dermatophytes. Cytotoxicity towards healthy eukaryotic cells was assessed in vitro with healthy human kidney-2 (HK-2) cells and erythrocytes. Fragments Ctn[1–14] and Ctn[15–34] lost activity against dermatophytes, but became more active against pathogenic yeasts, including several Candida species and Cryptococcus laurentii, with MICs as low as 5 μM. Interestingly, the two peptide fragments were less cytotoxic to healthy HK-2 cells and less hemolytic to human erythrocytes than the standard-of-care amphotericin B (AMB).The checkerboard technique was performed to estimate the effects of combining either one of the peptides with AMB against C. albicans strains, and it was the synergy between Ctn peptides and AMB, with consequent reduction in MICs of both drug and peptides. In general, the Ctn[15-34] presented the smallest MICs against the different Candida species, and low cytotoxicity against eukaryotic cells. To characterize the anti- Candida activity of Ctn[15-34] were performed the phospholipase activity assay, time killing assay, and flow cytometry techniques.The plasmatic membrane damage was roughly estimated based on the amount of product generated by phospholipase activity after treatment of 4N3OBA lipid (substrate) with Ctn[15-34]; At 10 μM a big increase in phospholipase activity could be noticed compared to non-treated and treated lipids at 5μM. Analysis of the time killing assays of cells treated with Ctn [15-34] and AMB, showed that they did not reduce the number of CFUs in the same fashion, which suggested that Ctn[15-34] and AMB could have different mechanisms of action against C.albicans. Ctn[15-34] alone promoted cell membrane disruption, like other AMPs, in yeasts. Moreover, the C. albicans cell death pathway detected after the peptide treatment was necrosis, which further confirmed cell membrane damage capacity by Ctn[15-34].Together, Ctn and its fragments are promising for the treatment of fungal diseases, and the Ctn [15-34] is a most valuable candidate for further 12 development as an antifungal therapeutic peptide lead, particularly against yeast infections where it could be usedfully applied either alone or in combination with a standard antibiotic such as AMB. A crotalicidina (Ctn), uma catelicidina de 34-resíduos isolada de cascavel da América do Sul, e o seu fragmento (Ctn[15-34]) demonstraram previamente atividades antimicrobiana contra bactérias Gram negativas e citotóxica contra células tumorais. A extensão de tais efeitos tem sido relacionada com suas características físico-químicas, como a forma helicoidal e hidrofobicidade. O presente trabalho teve o objetivo geral de avaliar a atividade antifúngica do Ctn e seus fragmentos (Ctn[1-14] e Ctn[15-34]) e caracterizar os possíveis mecanismos de ação dos peptídeos contra Candida albicans. Determinação de Concentração inibitória mínima (CIM) e ensaios de viabilidade celular por ensaios de luminescência foram utilizados para avaliar a ação do Ctn e seus fragmentos (Ctn[1-14] e Ctn[15-34]) como agentes antifúngicos contra cepas clínicas de leveduras oportunistas e dermatófitos. A citotoxicidade em relação a células eucarióticas foi avaliada in vitro com células renais da linhagem HK-2 e eritrócitos. Ctn foi o peptídeo mais ativo contra dermatófitos e também o mais tóxico para células eucarióticas saudáveis. Os fragmentos Ctn[1-14] e Ctn [15-34] não demonstraram atividade contra dermatófitos, mas foram ativos contra leveduras patogênicas, incluindo várias espécies de Candida sp. e Cryptococcus laurentii, com CIMs de até 5μm. É interessante notar que os dois fragmentos peptídicos foram menos citotóxicos para as células HK-2 e menos hemolíticos para os eritrócitos humanos do que a Anfotericina B (ANF). A técnica checkerboard foi realizada para estimar os efeitos da combinação dos peptídeos com ANF frente a cepas de C. albicans. Foi observado o efeito sinérgico entre as crotalicidinas e a ANF, com a consequente redução nas CIM de ambos, fármaco e peptídeos. De modo geral, o fragmento Ctn[15-34] apresentou as menores CIMs contra as diferentes espécies de Candida, e baixa citotoxicidade contra células eucariotas. Para caracterizar a atividade anti-Candida do Ctn[15-34] foram realizados ensaios para determinar atividade fosfolipásica, a curva do tempo de morte, e técnicas de citometria de fluxo. O dano à membrana plasmática foi estimado com base na quantidade de produto gerada pela atividade fosfolipásica após tratamento do lípido 4N3OBA (substrato) com Ctn[15-34]; a 10 μM pode ser observado um grande aumento na atividade fosfolipásica em comparação com os lipídeos não tratados, e tratados com 5 μM. A análise das curvas de tempo de morte das células tratadas com Ctn[15-34] e AMB, mostrou que eles não reduziram o número de UFCs da mesma forma, sugerindo que Ctn[15-34] e AMB poderiam ter diferentes mecanismos de ação contra C .albicans. Ctn[15-34] promoveu rompimento da membrana celular, assim como outros peptídeos 10 antimicrobianos (PAMs), em leveduras. Além disso, a via de morte celular da C. albicans detectada por citometria após o tratamento com peptídeo foi a necrose, o que confirmou ainda mais a capacidade de dano da membrana celular por Ctn[15-34]. Juntos, Ctn e seus fragmentos são promissores para o tratamento de doenças fúngicas, e o Ctn[15-34] é um candidato muito valioso para o futuro desenvolvimento de um peptídeo antifúngico, que pode ser aplicado sozinho ou em combinação com um antibiótico padrão como a AMB

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2017. A Análise proteômica de diferentes condições clínicas da polpa dentária humana pode fornecer informações globais sobre mecanismos de patogenicidade e interações multifatoriais existentes entre microrganismos e o tecido pulpar humano. Assim, o objetivo do estudo foi analisar de forma qualitativa proteínas presentes no tecido pulpar em condições clínicas de polpa normal, pulpite irreversível e necrose com lesão periapical visível radiograficamente. Para isso, três réplicas biológicas, contendo pool de 5 dentes, para cada condição clínica foram avaliadas. A extração proteica foi realizada utilizando solução de lise e sonicação, para quantificação foi realizado o método de Bradford. A identificação proteica foi realizada utilizando nanoUPLC-MS/MSE, os dados obtidos foram processados e comparados a um banco de dados com auxílio do software ProteinLynx Global Server (PLGS). A partir dessa análise, um total de 508 proteínas foram identificadas. Entre essas, 75 foram avaliadas de forma exclusiva em polpa normal, 59 no diagnóstico de pulpite e 120 em necrose.Observou-se a presença de proteínas comuns aos diferentes diagnósticos clínicos, sendo 72 destas identificadas nos quadros de polpa normal e de pulpite irreversível, 36 nos quadros de pulpite e necrose, 37 nos quadros de polpa normal e necrose e 109 proteínas foram encontradas de forma semelhante em todos os grupos. No quadro de pulpite foram identificadas predominância das proteínas com função relacionada ao metabolismo e vias de energia, apoptose e maior diversidade de proteínas relacionadas a resposta imune em relação ao quadro clínico de polpa normal. No diagnóstico de necrose com lesão periapical foram identificadas predominância de proteínas relacionadas as funções de crescimento celular, metabolismo de proteínas, transporte, resposta imune, assim como proteínas envolvidas na comunicação, sinal de transdução e adesão celular, em relação ao diagnóstico clínico de pulpite irreversível. Desta forma, o presente estudo conclui que uma mudança no perfil de proteínas relacionadas ao processo imune pode ocorrer, conforme ocorre o agravamento da doença. Além disso, a identificação de proteínas de cada diagnóstico clínico pode contribuir para evolução de estudos relacionado ao processo patogênico pulpar e estudos regenerativos. The proteomic analysis of different clinical conditions of the human dental pulp can provide global information on mechanisms of pathogenicity and multifactor interactions between microorganisms and human pulp tissue. The objective of this study was to qualitatively analyze the proteins present in pulp tissue under clinical conditions of normal pulp, irreversible pulpitis and necrosis with periapical lesion visible radiographically. For this, three biological replicates of pool containing 5 teeth for each clinical condition was evaluated. Protein extraction was performed using lysis solution (20 mM Tris-HCl pH 8.3, 1.5 mM KCl, 10 mM DTT, 1 mM PMSF 0.1%) and sonication for one minute with alternating cycles. Afterwards, quantification was performed using the Bradford method. The protein identification was performed using nanoUPLC-MS / MSE, the obtained data were processed and compared to a database with the aid of ProteinLynx Global Server (PLGS) software. From this analysis, a total of 508 proteins were identified. Among these, 75 were evaluated exclusively in normal pulp, 59 in the diagnosis of pulpitis and 120 in necrosis. It observed the presence of proteins found similarly between groups, of which 72 were identified between the normal pulp and irreversible pulpitis, 36 in the pulp and necrosis groups, 37 in the normal group and necrosis, and 109 proteins were found in a similar way in All groups. It was observed that from the normal pulp-to-pulpitis table a greater identification of proteins with function related to metabolism and energy pathways, apoptosis and greater diversity of proteins related to immune response was found. From the diagnosis of irreversible pulpitis to periapical lesion necrosis observed an increase in the diversity of proteins involved in cell growth processes, protein metabolism, transport, immune response, as well as proteins involved in communication, transduction signal and cell adhesion. In this way, this work offers complementary and innovative data regarding pulp proteins, since it can lead to advances in the area of tissue regeneration, as well as knowledge of pulp pathogenesis.

[Resumo] As patoloxías xeradas no aparello glenosesamoideo provocan importantes limitacións e dor no antepé. Debido á diversidade de patoloxías nesta área, os tratamentos dependerán do factor causal, da etioloxía da lesión, e da sintomatoloxía que mostre o paciente. Cada unha destas patoloxías sóese asociar con variables posturais ou estruturais que precipitan á sintomatoloxía e a incapacidade xeral do paciente. O obxectivo desta proposta é a de recoñecer a prevalencia das diferentes patoloxías que se presentan no aparello glenosesamoideo, as variables de comorbilidade coas que se soen relacionar, e determinar como todos estes factores afectan tanto á actividade diaria dos pacientes como a súa calidade de vida, centrándonos na poboación adulta [Resumen] Las patologías generadas en el aparato glenosesamoideo provocan importantes limitaciones y dolor en el antepie. Debido a la diversidad de patologías de esta zona, los tratamientos dependerán del factor causal, de la etiología de la lesión, y de la sintomatología que presente el paciente. Cada una de estas patologías se suele asociar con las variables posturales o estructurales que precipitan la sintomatología y la incapacidad general del paciente. El objetivo de esta propuesta es la de reconocer la prevalencia de las diferentes patologías que se presentan en el aparato glenosesamoideo, las variables de comorbilidad con las que se suelen relacionar, y determinar como todos éstos factores afectan tanto a la actividad diaria de los pacientes como a su calidad de vida, centrándonos en la población adulta. [Abstract] The pathologies produced in the glenosesamoid apparatus cause important limitations and pain in the forefoot. The diversity of pathologies in this area and therefore of treatments will depend on the causal factor, the etiology of the lesion and the symptomatology presented by the patient. Each of these pathologies is usually associated with postural or structural variables that precipitate the symptomatology and the general incapacity of the patient. The objective of this proposal is to recognize the prevalence of the different pathologies that arise in the glenosesamoid apparatus, the variables of comorbidity with which they are usually related, and to detemined how all these factors affect both the daily activity of the patients as to their quality of life, focusing on the adult population. Traballo fin de grao (UDC.FEP). Podoloxía. Curso 2016/2017

Tese de mestrado em Biologia Humana e Ambiente, apresentada à Universidade de Lisboa, através da Faculdade de Ciências, 2017 Submitted by Cristina Manessiez (camanessiez@fc.ul.pt) on 2018-01-18T16:21:59Z No. of bitstreams: 1 ulfc120825_tm_Claudia_Cavacas.pdf: 3094493 bytes, checksum: 72a0384ebafc066cf51078d56ef87d62 (MD5) Made available in DSpace on 2018-01-18T16:22:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ulfc120825_tm_Claudia_Cavacas.pdf: 3094493 bytes, checksum: 72a0384ebafc066cf51078d56ef87d62 (MD5) Previous issue date: 2017

Chagas disease is a neglected disease caused by the parasite Trypanosoma c ruzi and is a public health problem world wide . Current treatment is restricted by the frequent side effects and limited efficacy of benznidazole . Betulinic acid (BA) and oleanolic acid (OA) are triterpenes found in several medicinal plants and exhibit a wi de variety of biological and pharmacological activities, including an effect on trypanosomatids. The objective of the present study was to evaluate the trypanocidal effect and mechanism of action of betulinic and oleanolic acids on Trypanosoma cruzi strain Y in vitro . Antiproliferative activity of BA and OA (1.56 200  M) were evaluated during 24, 48 and 72 hours on epimastigote, trypomastigote and amastigote forms of T. cruzi . Viability of LLCMK2 cell s , treated with BA and OA (200 1600  M), was evaluated for 24 h using the MTT assay. The mechanism of action assays were performed on the epimastigote form s treated with IC50 of BA and OA, incubated for 24 h, then labeled with annexin V/7AAD, Rho123, H2DCFDA, Acridine Orange and MDC according to the manufacturer's instructions and analyzed by flow cytometry and confocal mic roscopy. Data were analyzed using ANOVA with Bonferroni post test or Student ’s t test, * p 0.05. BA inhibited the growth of epimastigotes after 24h (I C 50 = 73.43  M; BZ = 21 8  M), 48h (I C 50 = 119.8  M; BZ = 61  M) and 72h (I C 50 = 212 2  M; BZ = 16.5  M) of incubation and i nhibited the viability of trypomastig otes (I C 50 = 51 88  M; BZ = 257  M) after 24 h. OA inhibited the growth of epimastigote s after 24 h (IC50 = 11.66  M, BZ = 218  M), 48 h (IC50 = 43.15  M, BZ = 61  M), and 72 h IC50 = 43.05  M; BZ = 16.5  M ) of incubation and i n hibited the viability of trypomastigotes (IC50 = 13.97 μ M; BZ = 257  M) after 24 h. BA and OA decreased the percentage of infected cells and reduced the number of amastigotes per cell 24h and 48h after treatments, respectively. Both terpenes showed no toxicity on LLCMK2 cells at the concentrations used in trypanocidal tests. The analysis of cell death mechanism of the BA treated parasite s showed alterations in mitochondrial membrane potential, changes in cell membrane integrity, increased formation of reactive oxygen species and detection of acidic compartments. The treatment with OA demonstrated the detection of acidic compartments and autophagic vacuoles. Our results demonstrate that BA and OA have a trypanocidal effect on all evolutionary forms of T. cruzi Y strain, suggesting that the BA mechanism of cell death occurs through necrosis and that of the OA through autophagy in epimastigote forms. A doença de Chagas é uma doença negligenciada causada pelo parasito Trypanosoma cruzi e constitui um problema de saúde pública em todo o mundo. O tratamento a tual é restrito pelos efeitos colaterias frequentes e pela eficácia limitada do benzonidazol. O ácido betulínico (A B e ácido oleanólico (AO) AO), são triterpenos, exist ntes em diversas plantas medicinais e exibem uma grande variedade de atividades biológicas e farmacológicas , incluindo efeito em tripanossomatídeos. O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito tripanocida e mecanismo de ação dos ácidos betulínico e oleanólico em cepa Y de Trypanosoma cruzi in vitro . O efeito tripanocida do AB e AO (1,56 200 μM) foram avaliadas durante 24, 48 e 72 horas, sob formas epimastigotas, tripomastigotas e amastigotas de T. cruzi. A viabilidade da célula LLCMK2, tratada com AB e AO (200 1600 μM) fo i avaliada durante 24h através do teste MTT. Os ensaios de mecanismo de ação foram realizados nas formas ep imastigotas tratadas com CI50 do AB e AO durante 24 h , e marcadas com ane xina V/7AAD, Rho123, H2DCFDA, Laranja de Acridina e MDC de acordo com as instruções do fabricante e analisadas por citometria de fluxo e microscopia confocal . Os dados foram analisados utilizando ANOVA com pós teste de Bonferroni ou teste t Student , * p≤0,05. O AB inibiu o crescimento de formas epimastigotas em 24h (CI50 = 73,43 BZ = 2 18 μM), 48h (CI50 = 119,8 μM; BZ = 61 μ M ) e 72h (CI50 = 212,2 μM; BZ = 16,5 μ M ) de incubação; inibiu a viabilidade de t ripomastigotas (CI50 = 51,88 μ M; BZ = 257 μ M ) em 24h. O AO inibiu o crescimento de epimastigotas em 24h (CI50 = 11,66 μM; BZ = 218 μM ), 48h (CI50 = 43,15 μM; BZ = 61 μ M ) e 72h (CI50 = 43,05 μM; BZ = 16,5 μ M ) de incubação; inibiu a viabilidade de tripomastigotas (IC50 = 13,97 μM; BZ = 257 μ M ) em 24h. O AB e AO diminuiram o percentual de células infectadas e reduziram o número de amastigotas por células nos tratamentos com 24h e 48 h, respectivamente. Ambos terpenos não apresentaram toxicidade sobre as células LLCMK2 n as concentrações utili zadas . A análise do mecani smo de morte celular do parasito tratado com AB mostrou alterações no potencial da membrana mitocondrial, alterações na integridade da membrana celular, aumento da formação de espécies reativas de oxigênio e detecção de compartime ntos acídico s . O tratamento com AO demonstrou detecção de compartimentos acídico s e de vacuólos autofágicos Nossos resultados demonstram que o AB e AO apresentam efeito tripanocida sobre todas as formas evolutivas de cepa Y de T. cruzi , sugerindo que o me canismo de morte celular do AB é via necrose e do AO via autofagi c a nas formas epimastigotas.

The Dixon-Tyree stem hygrometer has hitherto been used primarily indoors in controlled conditions. We used it, and the leaf pressure chamber, to measure water potentials in plantation rubber trees outside in the Cote d’Ivoire (May and September 2004). Measurements of stem and root xylem water potentials were considered to be reliable, provided they complied with technical constraints that we specify. The stem hygrometer is non-destructive if the sensor is well installed, and provides measurements for two to three weeks without intervention, although the initial measurements are sometimes erroneous.

Submitted by YAHIMA FRIÓN HERRERA null (yahima81@gmail.com) on 2016-11-30T17:36:38Z No. of bitstreams: 1 Tese Doutorado.pdf: 3680300 bytes, checksum: 35b704b38f0344b646be7528712a5444 (MD5) Rejected by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo as orientações abaixo: No campo “Versão a ser disponibilizada online imediatamente” foi informado que seria disponibilizado o texto parcial porém no campo “Data para a disponibilização do texto completo” foi informado que o prazo para disponibilização de texto completo “Não se aplica” por se tratar de texto completo a ser disponibilizado imediatamente. Caso opte pela disponibilização do texto completo selecione no campo “Versão a ser disponibilizada online imediatamente” a opção “Texto completo”. Caso queira disponibilizar imediatamente apenas o texto parcial indique no campo “data para disponibilização do texto completo” o tempo em que apenas a versão parcial estará disponível. Esta opção é utilizada caso você tenha planos de publicar seu trabalho em periódicos científicos ou em formato de livro, desse modo somente as páginas pré-textuais, introdução, considerações e referências sejam disponibilizadas. Por favor, corrija esta informação realizando uma nova submissão. on 2016-12-01T16:49:52Z (GMT) Submitted by YAHIMA FRIÓN HERRERA null (yahima81@gmail.com) on 2016-12-02T10:34:11Z No. of bitstreams: 1 Tese Doutorado.pdf: 3680300 bytes, checksum: 35b704b38f0344b646be7528712a5444 (MD5) Approved for entry into archive by Juliano Benedito Ferreira (julianoferreira@reitoria.unesp.br) on 2016-12-02T11:55:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 frionherrera_y_dr_bot_par.pdf: 424297 bytes, checksum: 2db77844127d8b5e1910a4e2f3f42b78 (MD5) Made available in DSpace on 2016-12-02T11:55:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 frionherrera_y_dr_bot_par.pdf: 424297 bytes, checksum: 2db77844127d8b5e1910a4e2f3f42b78 (MD5) Previous issue date: 2016-11-28 Outra A própolis é um produto elaborado por abelhas a partir da matéria vegetal coletada ao redor da colmeia. Recentes pesquisas têm identificado o potencial terapêutico da própolis, tais como: antimicrobiano, antiviral, anti-inflamatório, antitumoral, cicatrizante, imunoestimulante, hepatoprotetor, entre muitos outros. Atualmente, muitos estudos que envolvem amostras de própolis de diferentes regiões têm focalizado a descoberta de candidatos promissores para o tratamento do câncer. Nesse sentido, o efeito antiproliferativo e citotóxico de amostras de própolis verde do Brasil (PB) e vermelha de Cuba (PC) foi avaliado em linhagens de células tumorais humanas de origem epitelial (A549, Hep-2, MDA-MB-231) e em células não tumorais (Vero) pelo ensaio com brometo de 3- (4,5-dimetil-2-tiazolil)-2, 5-difenil-2H-tetrazólio (MTT) e lactato desidrogenase (LDH). O mecanismo molecular envolvido na morte celular das linhagens tumorais como apoptose/necrose foi determinado por coloração fluorescente com laranja de acridina/brometo de etídio (LA/BE), diamidinofenilindol (DAPI), permeabilização da mitocôndria mediante alteração do potencial de membrana mitocondrial, e pela expressão dos genes pro-apoptóticos (TP53, CASP3, BAX, NOXA, PUMA, P21 e anti-apoptóticos (BCL2, BCL-XL) mediante transcrição reversa e reação em cadeia da polimerase (RTPCR). As células tumorais A549 e HEp-2 apresentaram redução significativa da viabilidade celular pela ação citotóxica de PB (IC50: 69,17 ± 11,28 μg/ml, IC50: 64,1 ± 14,6 μg/ml respectivamente). Esta amostra induziu morte celular por apoptose nas duas linhagens tumorais, evidenciado pela condensação da cromatina, alteração do potencial de membrana mitocondrial, aumento da expressão dos genes pro/apoptóticos e redução da expressão dos genes anti-apoptóticos. Referente à viabilidade da linhagem MDA MB- 231, esta não foi afetada pelo tratamento com PB. Os efeitos citotóxicos induzidos pela amostra PC nas linhagens HEp-2 e MDA MB-231 foram diferentes (IC50: 56,2 ± 9,2 μg/ml, IC50: 67,27 ± 12,8 μg/ml respectivamente). A morte celular por apoptose foi evidenciada na linhagem HEp-2 pela condensação da cromatina, aumento da expressão dos genes proapoptóticos, redução dos genes anti-apoptóticos, geração de espécies reativas do oxigênio e alteração do potencial de membrana mitocondrial. Porém, na linhagem MDA MB-231, foi evidenciada a morte celular por necrose com liberação da enzima LDH, Resumo geração de espécies reativas do oxigênio, afetação do potencial de membrana mitocondrial, interferência na migração celular, e redução da expressão dos genes proapoptóticos sem alteração das vias de sinalização PI3K/Akt ERK1/2. Nossos dados permitiram concluir que o efeito citotóxico e tipo de morte celular induzido pela própolis dependem da composição química, origem geográfica da amostra e fontes vegetais. Ainda são necessários estudos correlacionando a composição química com a atividade biológica, definindo cada tipo de própolis com a sua aplicação terapêutica para o tratamento de câncer.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Titanium dioxide nanoparticles (TiO2-NP) are commonly used in many industrial activities. Consequently, the daily consumption by humans is estimated in 5.4 mg day, with an input in the environment of 4.2 mg day per person, receiving or not appropriated treatment before disposure. The cytotoxicity, genotoxicity and mutagenicity of TiO2-NP were investigated using the established fish cell line derived from zebrafish (Danio rerio) liver (i. e. ZF-L cells). Prior to the evaluation of nanoparticle’s toxic potential, a careful characterization was realized in culture medium in the presence or not of fetal bovine serum (FBS). Regarding to the characterization in terms of size was accessed using a transmission electron microscope (TEM), the agglomeration potential and surface charge were accessed by diameter light scattering (DLS) and zeta potential measurements, respectively, using a spectrophotometer. TiO2-NP in environmentally relevant concentrations were tested for cytotoxicity, genotoxicity and mutagenicity. Cell viability was accessed by four different tests, the trypan blue assay (membrane integrity), MTT reduction assay (mitochondria), neutral red retention assay (lysosomes) and finally, induction of apoptosis and necrosis. Genotoxicity was determined by observing the fragmentation of DNA by the comet assay, while mutagenicity was determined by Cytokinesis-block micronucleus technique. The characterization showed that the FBS was effective in dispersing the nanoparticles and prevent the formation of large agglomerates allowing robust responses on the real toxicity of NP. After 24 hours of treatment, there was cell membranes rupture, decreasing cell viability to 35.33%, at the highest concentration (1.0 μg mL-1). Mitochondrial metabolic activity remained unchanged, but it was possible to detect the proliferation of lysosomes, which was mainly attributed to the NP endocytosis. The induction of apoptosis was 50.4%, and necrosis was 13.9%, both in the concentration 1.0 μg mL-1 TiO2-NP. In the case of necrosis, a result 10 times greater than that presented by the negative control. Added necrosis and apoptosis indicated a decrease in cell viability to 35.7%. The comet test showed the fragmentation of the DNA, it was also possible to observe the formation of micronuclei, bridges and shoots demonstrated by the micronucleus assay. In general, this study demonstrated that TiO2-NP, after 24 hours of exposure, significantly affect cell viability and cause DNA damage, which may become irreversible. In conclusion, this study showed the cytotoxic, genotoxic and mutagenic potential of TiO2-NP for ZF-L cells. Mitochondrial and lysosome responses require further studies on the effect of TiO2-NP on these organelles. Nanopartículas de dióxido de titânio (NP-TiO2) são comumente usadas em muitos produtos industriais. Por conseguinte, seu consumo diário por seres humanos é estimado em 5,4 mg dia-1, o que acarreta em um aporte no ambiente de 4,2 mg dia-1 por pessoa, podendo ou não receber um tratamento apropriado antes do seu despejo. Foram avaliadas a citotoxicidade, genotoxicidade e mutagenicidade de NPTiO2 para a linhagem permanente derivada de fígado de peixe-zebra (Danio rerio) (células ZF-L). Antes da avaliação do potencial tóxico das nanopartículas, foi realizada uma caracterização cuidadosa em meio de cultura com e sem a adição de soro fetal de bovino (SFB). A caracterização em termos do tamanho físico da nanopartícula (NP) foi realizada utilizando um microscópio eletrônico de transmissão (TEM); os tamanhos hidrodinâmicos dos aglomerados e as cargas de superfície foram acessados por medidas de DLS (diameter light scattering) e potencial zeta, respectivamente utilizando um espectrofotômetro. A viabilidade celular foi avaliada por três ensaios diferentes, o ensaio de exclusão do corante azul de tripano (integridade de membrana), ensaio de redução do sal MTT (atividade metabólica mitocondrial) e ensaio de retenção do corante vermelho neutro (viabilidade dos lisossomos). A indução de apoptose e necrose foi avaliada por citometria de fluxo. A genotoxicidade foi determinada pela observação da fragmentação do DNA por meio do ensaio do cometa, enquanto a mutagenicidade foi determinada pelo ensaio de micronúcleos com bloqueio da citocinese. A análise DLS mostrou que o SFB foi eficaz quanto à dispersão das nanopartículas e preveniu a formação de grandes aglomerados, o que permitiu a obtenção de respostas mais robustas relativas à toxicidade real das nanopartículas. Após 24 horas de tratamento, houve ruptura das membranas celulares diminuindo a viabilidade celular a 35,33%, na concentração mais elevada (1,0 μg mL-1). A atividade metabólica mitocondrial manteve-se inalterada, mas foi possível detectar a proliferação dos lisossomos, que foi atribuída principalmente à endocitose das NP. A indução de apoptose foi de 50,4%, e de necrose de 13,9%, ambos na concentração 1,0 μg mL-1 NP-TiO2. No caso da necrose, um resultado 10 vezes maior do que o apresentado pelo controle negativo. Necrose e apoptose somadas indicaram a diminuição da viabilidade celular a 35,7%. O teste do cometa mostrou a fragmentação do DNA, também foi possível observar a formação de micronúcleos, pontes e brotos demonstrados pelo ensaio do micronúcleo. Em geral, este estudo demonstrou que as NP-TiO2, após 24 horas de exposição, afetam significativamente a viabilidade celular e causam danos ao DNA, que podem se tornar irreversíveis. Em conclusão, este estudo mostrou o potencial citotóxico, genotóxicos e mutagênico das NP-TiO2 para células ZF-L. Respostas mitocondriais e dos lisossomos requerem novos estudos quanto ao efeito das NP-TiO2 sobre essas organelas.

Periodontal plastic surgery's main goal is to cover gingival recessions. This thesis aims to enable any practitioner (specialist or not) how to react in case of complications or failures during these surgeries. The first part reminds the fundamental principles to respect before, during and after periodontal plastic surgery. The second part describes and explains how to manage intraoperative and postoperative complications. The third part describes and explains how to manage failures both biological (necrosis) and aesthetics.; La chirurgie plastique parodontale a pour but principal de recouvrir les récessions gingivales. Cette thèse a pour objectif de permettre à tout praticien (spécialiste ou non)de savoir comment réagir en cas de complications ou d’échecs lors de ces chirurgies. La première partie rappelle les grands principes à respecter avant, pendant et après toute chirurgie plastique parodontale. La deuxième partie décrit et explique comment gérer les complications préopératoires puis post-opératoires. La troisième partie décrit et explique comment gérer les échecs à la fois biologiques(nécrose) et esthétiques.

Submitted by Boris Flegr (boris@uerj.br) on 2021-01-06T20:38:13Z No. of bitstreams: 1 DISSERTACAO_FINAL_PUBLICADA_Nsingi_Nsosolo_Antonio.pdf: 7124869 bytes, checksum: 75263cd4c30acd20ba58e53a0f22e152 (MD5) Made available in DSpace on 2021-01-06T20:38:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTACAO_FINAL_PUBLICADA_Nsingi_Nsosolo_Antonio.pdf: 7124869 bytes, checksum: 75263cd4c30acd20ba58e53a0f22e152 (MD5) Previous issue date: 2016-10-05 Randomized skin flaps are used very often in plastic surgery, especially for the reconstruction of tissues, but the possibility of necrosis has challenged its use. There have been several studies aimed at finding ways to reduce its occurrence. To evaluate the isolated and combined effect of pentoxifylline and hyaluronidase on randomized skin flaps were used 50 male Wistar rats divided into five groups of ten: Control I (CTL- I) no treatment before or after the surgical procedure; Control II (CTL -II) - saline solution intraperitoneally (IP) twice a day and intralesional (IL) once a day; Pentoxifylline (PTX) pentoxifylline intraperitoneally twice a day and saline solution intralesional once a day; Hyaluronidase (HLD) hyaluronidase intralesional once a day and saline solution intraperitoneally twice daily; Hyaluronidase - pentoxifylline (PTX - HLD) combination of both drugs at the same doses and routes of administration. All substances were administered from 1st to 13th days after surgery, necrotic area was measured on 7th and 14th post-operative days, the animals were killed in 14th of the experiment, then were collected samples for histological and immunohistochemical examination. In the 7th day necrotic area percent was reduced in PTX(M = 33.16 %; SD=±7.75), HLD(M = 21.04 %; SD =±7.13), and PTX-HLD(M = 28.04 %;SD=±10.50) (P

Submitted by Isabela Jacob Moro null (isabela.jm87@gmail.com) on 2016-07-22T18:18:24Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao de Isabela Jacob Moro_corrigida.pdf: 4133116 bytes, checksum: e046f271d663b557edcdc98a5fc6eb8f (MD5) Rejected by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo a orientação abaixo: O arquivo submetido não contém a folha de aprovação e está sem a ficha catalográfica. A versão submetida por você é considerada a versão final da dissertação/tese, portanto não poderá ocorrer qualquer alteração em seu conteúdo após a aprovação. Corrija esta informação e realize uma nova submissão contendo o arquivo correto. Agradecemos a compreensão. on 2016-07-22T20:15:50Z (GMT) Submitted by Isabela Jacob Moro null (isabela.jm87@gmail.com) on 2016-07-22T20:54:52Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao de Isabela Jacob Moro_corrigida.pdf: 4201818 bytes, checksum: 6037a407d0b6213632ec0c0218c59ecc (MD5) Approved for entry into archive by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br) on 2016-07-28T19:24:20Z (GMT) No. of bitstreams: 1 moro_ij_me_arafcf.pdf: 4201818 bytes, checksum: 6037a407d0b6213632ec0c0218c59ecc (MD5) Made available in DSpace on 2016-07-28T19:24:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 moro_ij_me_arafcf.pdf: 4201818 bytes, checksum: 6037a407d0b6213632ec0c0218c59ecc (MD5) Previous issue date: 2016-06-23 Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Produtos derivados de fontes vegetais tem demonstrado seu potencial no combate a diversas doenças, inclusive o câncer, à exemplo dos alcaloides derivados de Catharantus roseus (L.)G. Don, vincristina e vimblastina. A diversidade estrutural das moléculas encontradas em espécies vegetais concebem perspectivas de uso in natura bem como servem de inspiração para o desenvolvimento de outras entidades químicas que serão destinadas ao combate de doenças. O material de estudo pertence a espécie Baccharis trimera (Less.) DC, popularmente conhecida como carqueja e com amplo uso tradicional, principalmente para o alívio de afecções digestivas. O estudo teve por objetivo o fracionamento cromatográfico de derivados vegetais de partes aéreas de B. trimera e a avaliação da citotoxicidade e estudo de morte em linhagens de células humanas normal e tumorais tratadas com o OE, suas frações e componentes, além da flavona eupatorina isolada do extrato acetato de etila. O potencial citotóxico foi avaliado através do método da sulforrodamina B e os estudos de morte através de ensaios de Anexina-V, Hoechst/iodeto de propídeo e ativação de caspase-3. As linhagens celulares humanas utilizadas foram de câncer de mama (MCF-7), hepatocarcinoma (HepG2) e a linhagem de mama normal (MCF-10). As amostras avaliadas foram o óleo essencial, suas frações e componentes (α-humuleno, trans-cariofileno e óxido de cariofileno), além da eupatorina. Os constituintes majoritários do óleo essencial identificados por CG-EM foram: trans-cariofileno(18,9 %), biciclogermacreno (15,6 %), germacreno D (10,5 %) e δ-cadineno (6,6 %); α-humuleno (2,3 %) e óxido de cariofileno (2,9 %) também foram identificados. As frações do óleo essencial foram obtidas por cromatografia em coluna (sílica gel) e analisadas por CG-DIC e CG-EM, tendo apresentado composições químicas distintas. A flavona eupatorina (pureza em 250 nm de 96 % m/m) foi isolada a partir do extrato acetato de etila utilizando cromatografia em camada delgada preparativa (sílica gel) e identificada por técnicas espectrométricas (EM, UV, RMN de 1H e 13C). Verificou-se o maior potencial de redução de sobrevida com o OE em HepG2 (CI50= 10,40 μg/mL), α-humuleno e trans-cariofileno em MCF7 (CI50 de 7,59 e 11,52 μg/mL, respectivamente) enquanto que a eupatorina mostrou-se mais citotóxica em MCF10A com valor de CI50 pouco distante do encontrado para MCF7 (5,08 e 6,73 μg/mL, respectivamente). Grande parte das frações do OE foi citotóxica às linhagens e foram necessárias concentrações mais altas para atingir o CI50. As amostras apresentaram morte mista em todas as linhagens ocorrendo tanto apoptose quanto necrose. Não houve significância estatística no ensaio de ativação da via de apoptose por caspase-3. Constatou-se a eficiência das técnicas cromatográficas no tocante à identificação e separação de constituintes químicos, das técnicas espectrométricas para a identificação e determinação estrutural da substância eupatorina, bem como o potencial de morte celular, e até mesmo antitumoral, de amostras analisadas neste trabalho. Natural products diversity is an important source to find potential treatments against various diseases, including cancer. Vincristine and vimblastine, alkaloids derived from Catharantus roseus (L.) L. Don, are some of the examples. The structural diversity of molecules from plant species allow the in natura usage and also the development of other chemical entities that will be used to diseases control. Baccharis trimera (Less.) DC., popularly known as carqueja, has an extensive traditional use, especially for digestive disorders. The aims of this study were the chromatographic fractionation of aerial parts from carqueja, in vitro evaluation of the cytotoxic potential through sulforhodamine B assay and cellular death by Annexin-V assay, Hoechst/propidium iodide method and caspase-3 activation, in normal and tumor cell lines treated with essential oil, its fractions and components, and the flavone eupatorin isolated from ethyl acetate extract. The cell lines used were human breast cancer (MCF-7), hepatocellular carcinoma (HepG2) and normal breast line (MCF-10a). The evaluated samples were: essential oil, its fractions and components (α-humulene, β- caryophyllene and caryophyllene oxide) and eupatorin. The major constituents of the essential oil identified by GC-MS were: β-caryophyllene (18.9%), bicyclogermacrene (15.6%), germacrene D (10.5%), δ-cadinene (6.6%). Other components of the essential oil, such as α-humulene (2.3%) and caryophyllene oxide (2.9%) were also identified. The essential oil fractions were obtained by column chromatography (silica gel) and analyzed by GC-FID and GC-MS, presenting different chemical compositions. The flavone eupatorin (96% purity in 250 nm; w/w) was isolated from ethyl acetate extract using preparative thin layer chromatography (silica gel) and identified by spectrometric methods (MS, UV, 1H and 13C NMR). The largest decrease in cell viability for HepG2 was observed with essential oil (IC50 = 10.40 μg / mL); α-humulene and trans-caryophyllene for MCF7 cells (IC50 7.59 and 11.52 μg / mL, respectively) and eupatorin for MCF10A (IC50= 5.08 μg / mL). IC50 for eupatorin in MCF7 cells was 6.73 μg / mL. Most of the essential oils fractions were cytotoxic to the cell lines and higher concentrations were required to achieve IC50. There was not a cell death standard since apoptosis and necrosis occurred as well. Statistical significance was not found in caspase-3 assay. Chromatographic techniques were efficient for compounds identification and separation, and spectrometry techniques for structural determination of eupatorin. The results from this research shown therapeutic potential against cancer for the studied samples. FAPESP: 2014/10552-3

A fasceíte necrotizante é uma infecção bacteriana que evolui rapidamente e possui um alto potencial de mortalidade. Quando associada a infecção polimicrobiana que acomete inicialmente o períneo é denominada síndrome de Fournier. É uma síndrome que acomente frequentemente crianças, sendo aquelas em situação de vulnerabilidade mais acometidas. A insuficiência hepática que leva a desnutrição, é um fator de risco muito atribuído, sendo facilitador ou até mesmo agravante.

Submitted by Alison Souza (alisonsouza@ufgd.edu.br) on 2019-04-05T16:12:18Z No. of bitstreams: 4 JaquelineFerreiraCampos.pdf: 1366151 bytes, checksum: 18f01a07ac44cb779b798defe0cdcd0b (MD5) JaquelineFerreiraCampos(Anexo1).pdf: 580385 bytes, checksum: 8d8c6feaf10f47ea675275a0fe1e5502 (MD5) JaquelineFerreiraCampos(Anexo2).pdf: 1831911 bytes, checksum: 99619d9f42d969fec173921ca2f6c1b0 (MD5) JaquelineFerreiraCampos(Anexo3).pdf: 240595 bytes, checksum: 481b2df3d174325eb3fed0ee977976f4 (MD5) Made available in DSpace on 2019-04-05T16:12:18Z (GMT). No. of bitstreams: 4 JaquelineFerreiraCampos.pdf: 1366151 bytes, checksum: 18f01a07ac44cb779b798defe0cdcd0b (MD5) JaquelineFerreiraCampos(Anexo1).pdf: 580385 bytes, checksum: 8d8c6feaf10f47ea675275a0fe1e5502 (MD5) JaquelineFerreiraCampos(Anexo2).pdf: 1831911 bytes, checksum: 99619d9f42d969fec173921ca2f6c1b0 (MD5) JaquelineFerreiraCampos(Anexo3).pdf: 240595 bytes, checksum: 481b2df3d174325eb3fed0ee977976f4 (MD5) Previous issue date: 2016-01-21 Fundação de Apoio ao Desenvolvimento do Ensino, Ciência e Tecnologia do Estado de Mato Grosso do Sul (FUNDECT) Própolis de abelhas sem ferrão são conhecidas por suas propriedades biológicas; no entanto, poucos são os estudos descritos na literatura que demonstram estes efeitos. Portanto, este estudo teve como objetivo investigar a composição química e atividades antioxidante, anti-inflamatória, citotóxica e toxicidade da própolis das abelhas sem ferrão Melipona orbignyi e Tetragonisca fiebrigi, encontradas no Mato Grosso do Sul, Brasil. Para isto, as composições químicas dos extratos etanólico de própolis de M. orbignyi (EEP-M) e T. fiebrigi (EEP-T) foram determinadas por GC-MS e ensaios colorimétricos. Foram identificados compostos fenólicos, álcoois e terpenos como principais classes de compostos, para ambos os extratos. Na avaliação do potencial antioxidante, os extratos de própolis atuaram na captura do radical livre ABTS e inibiram a peroxidação lipídica em eritrócitos humanos incubados com agente oxidante. Os potenciais anti-inflamatórios dos EEP foram confirmados pela inibição da enzima hialuronidase. Para ambos os extratos, as atividades citotóxicas foram concentração dependente contra células eritroleucêmica K562, com predominância de morte por necrose. A ação tóxica dos extratos foi avaliada no modelo animal Caenorhabditis elegans, sendo que o EEP-T não apresentou toxicidade, mas EEP-M induziu a efeitos tóxicos, no modelo e concentrações avaliadas. Estes resultados indicam que a própolis de M. orbignyi e T. fiebrigi apresentam importante atividades terapêuticas, sugerindo sua potencial aplicação na indústria farmacêutica e alimentícia. Propolis from stingless bees are known for their biologic properties; however, there are few studies described in the literature that demonstrate these effects. Therefore, this study aimed to investigate the chemical composition and antioxidant, anti-inflammatory, cytotoxic and toxicity activities of propolis from the stingless bee Melipona orbignyi and Tetragonisca fiebrigi, found in Mato Grosso do Sul, Brazil. For this, the chemical compositions of the ethanol extract of propolis from M. orbignyi (EEP-M) and T. fiebrigi (EEP-T) were determined by GC-MS and colorimetric assays. Was identified the presence of phenolic compounds, alcohol, and terpenes as its major class compounds. In evaluation the antioxidant potential, the propolis extracts acted in ABTS free radical scavenging and inhibiting lipid peroxidation in human erythrocytes incubated with an oxidizing agent. The antiinflammatory potentials of the EEP were confirmed by inhibition of the hyaluronidase enzyme, for both extracts. The cytotoxic activities were concentration-dependent against K562 erythroleukemia cells, with a predominance of death by necrosis. The toxic action of extracts was evaluated in animal model Caenorhabditis elegans, being that the EEP-T showed no toxicity, but EEP-M induced toxic effects, in the model and concentrations evaluated. These results show that propolis from M. orbignyi and T. fiebrigi has important therapeutic activities, suggesting its potential application in the pharmaceutical and/or food industry.

Este trabalho tem como objetivo avaliar o efeito da temperatura no osso devido ao aquecimento provocado pelo processo de furação. Foram realizadas visitas a duas clínicas para acompanhamento da técnica de implantologia dentária e recolhidas imagens termográficas para a leitura da temperatura gerada na broca após o processo de furação. Na colocação de implantes dentários por exemplo, as variáveis que interferem no processo de furação do osso são: a velocidade, o material, o diâmetro, o comprimento e a geometria da ponta da broca. Com este trabalho pretende-se verificar, experimental e numericamente, as variáveis que interferem no aquecimento da estrutura óssea. Para isso, são utilizados materiais compósitos com características similares ao osso cortical e trabecular. A metodologia apresentada revela-se útil e diferenciadora de outros trabalhos, pois são utilizados materiais com características similares aos materiais in vivo. Os métodos experimentais utilizados em laboratório são baseados nas técnicas de termografia e termopares durante a furação dos diferentes materiais. Paralelamente, são utilizados modelos teóricos numéricos, com o recurso à técnica de elementos finitos, para a discussão de resultados. Após a elaboração do trabalho conclui-se que a temperatura na broca é superior à temperatura no osso e aumenta consoante a estrutura do material, isto é, se o material possuir cavidades na sua estrutura a temperatura na broca não é tão elevada como no material compacto.

Fournier's gangrene is a progressive polymicrobial necrotizing fasciitis, caused by aerobic and anaerobic organisms. It causes an endarteritis obliterans leading to vessel thrombosis and subsequent cutaneous and subcutaneous necrosis of the perineal region. OBJECTIVE: It was to describe the clinical outcomes of Fournier's gangrene treated at the Hospital Santa Marcelina, São Paulo (SP), Brazil. METHODS: This was a retrospective study conducted at the Hospital Santa Marcelina, in São Paulo (SP), Brazil, with patients with necrotizing fasciitis from September 2008 to March 2011. RESULTS: We included 13 patients, most were males, and the mean age was 51.8 years old. Five of them presented with systemic inflammatory response syndrome, only two had no comorbidities and 23% were obese. The most prevalent etiologic agent was E. coli, and the most common antibiotic regimen consisted of a combination of metronidazole with ciprofloxacin. The average number of surgical procedures performed by patient was 2.07, and 7 patients (53.8%) underwent colostomy formation. The mortality rate was 30.8%. CONCLUSIONS: Fournier's gangrene is a severe disease, with high mortality rates. The physician should suspect its diagnosis early and have an aggressive treatment approach to achieve better outcomes. A gangrena de Fournier representa uma fasceíte necrotizante e progressiva de origem polimicrobiana, causada por organismos aeróbios e anaeróbios. Tem como fisiopatologia a endarterite obliterante, que leva à trombose dos vasos cutâneos e subcutâneos e à consequente necrose da região perineal. OBJETIVO: Foi descrever os casos de gangrena de Fournier atendidos no Hospital Santa Marcelina, São Paulo (SP), Brasil. MÉTODOS: Este estudo retrospectivo foi realizado no Hospital Santa Marcelina, em São Paulo (SP), com pacientes portadores de fasceíte necrotizante no período de setembro de 2008 a março de 2011. RESULTADOS: Este estudo incluiu 13 pacientes, a maioria do sexo masculino, com média de idade de 51,8 anos. Cinco apresentavam síndrome da resposta inflamatória sistêmica e somente dois não tinham comorbidades, sendo 23% deles obesos. O agente etiológico mais prevalente foi a E.coli, e o esquema de antibiótico mais utilizado foi a associação de metronidazol e ciprofloxacina. A média foi de 2,07 cirurgias por paciente, com realização de ostomia derivativa em 7 dos 13 pacientes (53,8%). A taxa de mortalidade foi de 30,8%. CONCLUSÃO: A gangrena de Fournier é uma doença grave, com alto índice de mortalidade. O médico assistente deve suspeitar precocemente essa afecção e realizar conduta terapêutica agressiva visando a melhores resultados.

One of the clinical limitations of the photodynamic therapy (PDT) is the reduced light penetration into biological tissues. Pulsed lasers may present advantages concerning photodynamic response when compared to continuous wave (CW) lasers operating under the same average power conditions. The aim of this study was to investigate PDT-induced response when using femtosecond laser (FSL) and a first-generation photosensitizer (Photogem) to evaluate the induced depth of necrosis. The in vitro photodegradation of the sensitizer was monitored during illumination either with CW or an FSL as an indirect measurement of the PDT response. Healthy liver of Wistar rats was used to evaluate the tissue response. The photosensitizer was endovenously injected and 30 min after, an energy dose of 150 J cm(-2) was delivered to the liver surface. We observed that the photodegradation rate evaluated via fluorescence spectroscopy was higher for the FSL illumination. The FSL-PDT produced a necrosis nearly twice as deep when compared to the CW-PDT. An increase of the tissue temperature during the application was measured and was not higher than 2.5 °C for the CW laser and not higher than 4.5 °C for the pulsed laser. FSL should be considered as an alternative in PDT applications for improving the results in the treatment of bulky tumors where higher light penetration is required.

The goal of this study was to determine the symptoms and microscopic damage caused by fluoride on Spondias dulcis, a fluoride-sensitive species. The plants were exposed to simulated fog with fluoride (0, 5, 10, 15 and 20 mg L-1) for 20 min daily during four consecutive days. Samples from leaflets without any apparent fluoride injury were collected to microscopic analysis. The percentage of necrosed leaf area was measured, and the level of pollutant in the dry matter from the basal and apical portions of the plant was determined. The necroses began 24 h after the first simulation mainly from the base of the leaflets. A higher level of necrosis was observed at the apical portion of the plants, a region of higher fluoride accumulation. The damage on the surface of the leaflets was characterized as plasmolysis, erosion of the epicuticular waxes and epidermal rupture. Structurally, the noticeable accumulation of granules and droplets green stained by toluidine blue in the spongy parenchima and the boundaries of ending veinlets was observed. The limb thickness reduction occurred due to plasmolysis in the mesophyll, showing an apparent correlation with the damage observed on the surface. The parameters observed in the laboratory are promising for field biomonitoring studies.O objetivo deste estudo foi determinar os sintomas e danos microscópicos causadas pelo flúor em Spondias dulcis, espécie sensível a essa substância. As plantas foram expostas a nevoeiros simulados com flúor (0, 5, 10, 15 e 20 mg L-1) por 20 minutos diários, durante quatro dias consecutivos. Amostras de folíolos sem qualquer lesão aparente ao flúor foram coletadas para análise microscópica. Mensurou-se a percentagem de área foliar necrosada e o teor do poluente na matéria seca das porções basal e apical da planta. As necroses surgiram 24 horas após a primeira simulação e tiveram início, principalmente, a partir da base dos folíolos. As necroses foram mais severas na porção apical das plantas, região com maior acúmulo de flúor. O dano na superfície dos folíolos foi caracterizado como plasmólise, erosão das ceras epicuticulares e ruptura da epiderme. Estruturalmente, observou-se considerável acúmulo de grânulos e gotas coradas de verde pelo azul de toluidina no parênquima lacunoso e nas proximidades das terminações xilemáticas. Houve redução da espessura do limbo devido a plasmólise no mesofilo, havendo aparente correlação com os danos observados na superfície. Os parâmetros observados em laboratório são promissores para estudos de biomonitoramento em campo.

INTRODUÇÃO: Hematoma é a complicação pós-operatória mais frequente em ritidoplastia. Sua ocorrência aumenta a morbidade e prejudica a recuperação. Pontos de adesão internos para fechamento das áreas descoladas em abdominoplastias evitam o surgimento de seroma. Baseados neste princípio, e com o objetivo de reduzir o número de pacientes com hematomas em ritidoplastia, foi desenvolvida tática cirúrgica análoga em que se confecciona uma rede hemostática de pontos contínuos e transfixantes de náilon 4-0, englobando a pele e o SMAS-platisma. MÉTODO: Foram incluídos no estudo 366 pacientes consecutivos, submetidos a ritidoplastia de pelo menos o terço médio da face, entre julho de 2009 e setembro de 2011. O grupo A, incluindo os primeiros 120 pacientes avaliados retrospectivamente, foi considerado controle. O grupo B foi constituído pelos demais 246 pacientes, operados com a tática cirúrgica proposta e avaliados prospectivamente. Observaram-se as incidências de hematoma, isquemia e necrose nas primeiras 72 horas de pós-operatório. RESULTADOS: No grupo A, 17 (14,2%) pacientes apresentaram hematoma, enquanto no grupo B não houve nenhum caso. A tática cirúrgica não aumentou significativamente a ocorrência de isquemia: 11 (9,2%) pacientes no grupo A e 16 (6,5%) no grupo B tiveram essa complicação (P < 0,3964). Também não houve alteração significativa na incidência de necrose, complicação observada em 3 (2,5%) pacientes do grupo A e em 4 (1,6%) do grupo B (P < 0,4298). CONCLUSÕES: A rede hemostática é método eficaz na prevenção de hematomas precoces em ritidoplastias. Essa tática cirúrgica não levou a aumento significativo da incidência de isquemia e necrose. BACKGROUND: Hematoma is the most common postoperative complication of rhytidoplasty. Its occurrence increases morbidity and impairs recovery. Internal sutures to close detached areas are used in abdominoplasty to prevent seromas. Taking this into account and in order to reduce the number of patients with hematomas post rhytidoplasty, we have developed a similar surgical procedure in which a hemostatic net is made of continuous nylon 4-0 transfixing stitches to include the skin and the superficial musculoaponeurotic system-platysma. METHODS: A total of 366 patients who underwent rhytidoplasty of at least the middle third of the face between July 2009 and September 2011 were included in the study. Group A was identified as the control group; it included the first 120 patients assessed retrospectively. The remaining 246 patients, who underwent the surgical procedure here proposed and who were evaluated prospectively formed group B. We observed the incidence of hematoma, ischemia, and necrosis in the first 72 postoperative hours. RESULTS: In group A, 17 (14.2%) patients developed hematomas, whereas none occurred in group B. The surgical procedure did not significantly increase the occurrence of ischemia: 11 (9.2%) patients in group A and 16 (6.5%) in group B had this complication (P < 0.3964). There was also no significant increase in the incidence of necrosis, which was observed in 3 (2.5%) patients in group A and 4 (1.6%) in group B (P < 0.4298). CONCLUSIONS: The hemostatic net is an efficient method for the prevention of early hematomas following rhytidoplasty. This surgical procedure did not result in a significant increase in the incidence of ischemia and necrosis.

A síndrome da dilatação volvo gástrica (DVG) é uma condição grave, de caráter agudo, que confere alto índice de óbito em pequenos animais. A etiologia não está completamente estabelecida e, em contrapartida, diversas possibilidades de tratamento são descritas. A DVG causa grave redução na perfusão tecidual, afetando vários órgãos, incluindo os sistemas respiratório e cardiovascular. Este estudo tem como objetivo realizar uma revisão de literatura sobre a patogenia desta síndrome e seu tratamento. The syndrome of gastric dilatation volvulus (GDV) is a severe condition of acute character, which gives a high rate of death in small animals. The etiology is not fully established, however, several treatment options have been described. The DVG causes severe reduction in tissue perfusion, affecting many organs, including the respiratory and cardiovascular systems. This study aims to conduct a comprehensive literature review of the pathogenesis of this syndrome as well as its treatment.

Despite the importance of nickel (Ni) in the N metabolism of legumes, common bean (Phaseolus vulgaris L.) is considered very sensitive to Ni doses. The objective in this study was to characterize the toxicity symptoms of Ni in common bean cv. Pérola. The experiment was conducted in greenhouse in the campus of the Universidade Estadual do Norte Fluminense - Darcy Ribeiro, Campos dos Goytacazes - RJ. Solutions containing 0; 20; 40; 60 and 100 mg L-1 of Ni, in the form of nickel chloride hexahydrate (NiCl2.6H2O), were applied to shoots of common bean plants at the rate of 2.5 mL of solution per plant of common bean, 25 days after sowing. Plants of common bean treated with 0; 20; 40 and 60 mg L-1 of Ni showed no toxicity symptoms. Plants treated with 100 mg L-1 of Ni showed chlorotic leaves with gray spots that coalesced and became necrotic in a more advanced stage. Apesar de o Ni ser importante no metabolismo do N em leguminosas, o feijoeiro comum (Phaseolus vulgaris L.) é considerado bastante sensível a doses de Ni. Objetivou-se caracterizar os sintomas de fitotoxidez de Ni em feijoeiro comum cv. Pérola. O experimento foi conduzido em casa de vegetação na Universidade Estadual do Norte Fluminense - Darcy Ribeiro, Campos dos Goytacazes - RJ. Foram aplicados 0; 20; 40; 60 e 100 mg L-1 de Ni (2,5 mL de solução por planta) na forma de cloreto de níquel hexahidratado - NiCl2.6H2O, na parte aérea de plantas de feijoeiro comum aos 25 dias após a semeadura. Plantas de feijão tratadas com 0; 20; 40 e 60 mg L-1 de Ni não apresentaram sintomas de ftoxidez. Já as plantas que receberam a dose de 100 mg L-1 de Ni apresentaram folhas cloróticas e com manchas acinzentadas que coalesceram e se tornaram necróticas em um estádio mais avançado.

Objetivo: A ação do hidróxido de cálcio [Ca(OH)2] com o sistema imune e o mecanismo de neutralização das bactérias e seus subprodutos ainda não foi completamente esclarecida. Neste estudo foi avaliada a capacidade do Ca(OH)2 em neutralizar o lipopolissacarídeo (LPS) de Pseudomonas aeruginosa, utilizando-se duas metodologias: liberação de Óxido Nítrico (NO) e Fator de Necrose Tumoral Alfa (TNF-alfa) em cultura de macrófagos peritoneais de camundongos. Metodologia: No ensaio do NO, as células peritoneais foram expostas a uma solução de LPS (25mg/mL e 50mg/mL); e à suspensão de LPS/Ca(OH)2 em duas concentrações (50mg/ 25mg e 25mg/25mg). Após 8 horas de incubação, foi utilizado reagente de Griess, e a liberação de NO foi quantificada. No ensaio do TNF-alfa, a solução de LPS foi usada na concentração de 25mg/mL e o LPS/Ca(OH)2 a 25mg/25mg. Após 24 horas, as células foram fixadas e coradas com cristal violeta, e os valores de absorbância foram obtidos. Os resultados foram expressos em micromols. Todos os testes foram realizados em triplicata. Resultados: A presença de Ca(OH)2 nas duas concentrações avaliadas reduziu significativamente a liberação de NO e TNF-alfa. Conclusão: Pode-se concluir que o LPS bacteriano representa um forte estímulo para liberação destas citocinas, mas o hidróxido de cálcio foi capaz de neutralizar este efeito

Cerca de 75 % dos pacientes irradiados para o tratamento do câncer de próstata desenvolverão sintomas proctológicos, como urgência, dor retal, tenesmo e sangramento. O objetivo deste relato é descrever a ocorrência de necrose pelvi-perineal difusa associada à radioterapia para câncer de próstata, já que casos semelhantes não foram encontrados na literatura. Descreve-se o caso de um paciente de 77 anos, com adenocarcinoma de próstata, que realizou radioterapia pélvica de 70 Gy como tratamento. Após 4 meses, identificou-se extensa lesão ulcerada de parede anterior do reto, extendendo-se superiormente até a junção retossigmoideana, com diagnóstico de proctite actínica, sem identificação de malignidade. O paciente desenvolveu necrose da pele perineal, próstata, reto e musculatura do assoalho pélvico, que foi tratada com colostomia e extenso debridamento. Apresentou boa evolução pós-operatória e realizou tratamento com oxigenoterapia hiperbárica para cicatrização da ferida. A prevenção parece ser a melhor forma de tratamento de lesões actínicas em órgãos pélvicos. Pacientes submetidos a altas doses de irradiação encontram-se em risco real de desenvolvimento de lesões mais graves. Around 75% of the patients submitted to radiotherapy for prostate cancer will develop anorectal symptoms, such as fecal urgency, bleeding, rectal pain and tenesmus. Perineal necrosis is a very rare event in these cases. The purpose of this report is the description of a diffuse perineal necrosis due to radiotherapy for the treatment of prostate cancer. This is a report of a 77-year old male, submitted to radiotherapy with 70 Gy of pelvic radiation for prostate cancer treatment. He came to outpatient practice after 4 months with anorectal complaints. Further investigation revealed severe radiation proctitis, with a perineal wound and external anal sphincter damage. The patient was submitted to a loop transverse colostomy with extended perineal debulking due to diffuse necrosis of pelvic structures, such as prostate, pelvic floor muscles and anterior rectal wall. Hyperbaric oxygen therapy was started for the extended perineal wound, with success. Prevention is the key to avoid radiation damage in pelvic organs. Doses above 70 Gy are associated with high risk of associated pelvic complications. The treatment of diffuse perineal necrosis must be prompt and aggressive. Fecal diversion is mandatory in cases with extended sphincter destruction.

OBJETIVO: Medir a reprodutibilidade da tomografia computadorizada sem e com contraste na avaliação da gravidade da pancreatite aguda. MATERIAIS E MÉTODOS: Cinqüenta e um exames de tomografia computadorizada abdominal sem e com contraste de pacientes com pancreatite aguda foram analisados por dois radiologistas (observadores 1 e 2). Calculamos o índice morfológico pela tomografia computadorizada sem e com contraste, separadamente, e o índice de gravidade da tomografia computadorizada para pancreatite aguda. Medimos a reprodutibilidade intra- e interobservador da tomografia computadorizada através do índice kappa (kapa). RESULTADOS: Para a concordância interobservador obtivemos kapa de 0,666, 0,705, 0,648, 0,547 e 0,631 para índice morfológico sem e com contraste, presença de necrose pancreática, extensão da necrose pancreática e índice de gravidade da tomografia computadorizada, respectivamente. Para a concordância intra-observador dos observadores 1 e 2 obtivemos, respectivamente, kapa de 0,796 e 0,732 para o índice morfológico sem contraste; 0,725 e 0,802 para o índice morfológico com contraste; 0,674 e 0,849 para a presença de necrose pancreática; 0,606 e 0,770 para a extensão da necrose pancreática; e 0,801 e 0,687 para o índice de gravidade da tomografia computadorizada. CONCLUSÃO: O estadiamento da pancreatite aguda pela tomografia computadorizada por meio do índice morfológico e do índice de gravidade da tomografia computadorizada é um método bastante reprodutível. O não-uso do contraste não afeta a reprodutibilidade da tomografia computadorizada para o cálculo do índice morfológico.OBJECTIVE: To evaluate the reproducibility of unenhanced and contrast-enhanced computed tomography in the assessment of patients with acute pancreatitis. MATERIALS AND METHODS: Fifty-one unenhanced and contrast-enhanced abdominal computed tomography studies of patients with acute pancreatitis were blindly reviewed by two radiologists (observers 1 and 2). The morphological index was separately calculated for unenhanced and contrast-enhanced computed tomography and the disease severity index was established. Intraobserver and interobserver reproducibility of computed tomography was measured by means of the kappa index (kappa). RESULTS: Interobserver agreement was kappa = 0.666, 0.705, 0.648, 0.547 and 0.631, respectively for unenhanced and contrast-enhanced morphological index, presence of pancreatic necrosis, pancreatic necrosis extension, and disease severity index. Intraobserver agreement (observers 1 and 2, respectively) was kappa = 0.796 and 0.732 for unenhanced morphological index; kappa = 0.725 and 0.802 for contrast-enhanced morphological index; kappa = 0.674 and 0.849 for presence of pancreatic necrosis; kappa = 0.606 and 0.770 for pancreatic necrosis extension; and kappa = 0.801 and 0.687 for disease severity index at computed tomography. CONCLUSION: Computed tomography for determination of morphological index and disease severity index in the staging of acute pancreatitis is a quite reproducible method. The absence of contrast-enhancement does not affect the computed tomography morphological index reproducibility.