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O objetivo desta Tese foi analisar os efeitos do treinamento de equilíbrio e coordenação e do treinamento aeróbico sobre variáveis funcionais, morfológicas do nervo isquiático e do músculo sóleo, bem como a imunorreatividade para sinaptofisina e da neurotrofina-3 na medula espinal após uma lesão por esmagamento do nervo isquiático. Para isso, ratos Wistar adultos foram divididos de maneira aleatória em 4 grupos experimentais: Sham-operado (SH), Não-treinados (NT), Treinamento Aeróbico (Endurance Training – ET) e Treinamento de Equilíbrio e Coordenação (Balance and Coordination Training – BCT), sendo que os três últimos grupos experimentais foram submetidos à lesão por esmagamento do nervo isquiático, que teve como consequência uma axonotmese. Os protocolos de treinamento tiveram início na fase aguda, 48 horas após o procedimento cirúrgico para o esmagamento do nervo e tiveram a duração de 4 semanas. Nossos resultados demonstraram que na análise funcional sensoriomotora (Teste da Escada Horizontal e Teste da Barra Estreita) os animais do grupo BCT apresentaram um melhor desempenho que os animais dos outros grupos. Entretanto, na análise funcional locomotora (Índice de Funcionalidade do Nervo Isquiático e Comprimento da Passada do Membro Lesionado), os resultados do Índice de Funcionalidade do Nervo Isquiático foram similares entre os grupos lesionados (NT, ET e BCT) enquanto no Comprimento da Passada do Membro Lesionado, os animais do ET apresentaram resultados mais satisfatórios que os demais grupos. No estudo morfológico quantitativo do músculo sóleo, a análise morfométrica muscular demonstrou que os grupos ET e BCT apresentaram resultados semelhantes entre si e melhores que o grupo NT nos parâmetros de área de tecido muscular, de tecido conjuntivo, de vasos sanguíneos, de densidade de fibras musculares e da área de secção transversal das fibras musculares. Na análise morfométrica da porção distal do nervo lesionado os resultados dos dois grupos treinados foram similares entre si em todos os parâmetros analisados. Esses animais treinados apresentaram melhores resultados quando comparado ao grupo NT para a variável diâmetro médio das fibras nervosas, enquanto o grupo ET na área total dos vasos sanguíneos e na densidade das fibras mielínicas. A análise qualitativa, tanto do músculo sóleo como do nervo isquiático, mostrou que os grupos lesionados apresentaram características de nervo e de músculo em regeneração, não sendo possível verificar diferenças entre os grupos treinados e o grupo não treinado. A imunorreação para sinaptofisina na medula espinal, por meio da análise da densitometria óptica no corno dorsal dos níveis L4-L6 da medula espinal revelou-se significativamente maior no grupo BCT quando comparado ao grupo NT. Na análise da neurotrofina-3 na mesma região da medula espinal, o grupo BCT apresentou resultados significativamente superiores aos demais grupos. Hipotetizamos que essa imunorreação específica do grupo BCT está diretamente relacionada com os melhores resultados deste grupo nos testes sensoriomotores, uma vez que nas análises morfológicas quantitativas e qualitativas os grupos ET e BCT apresentaram resultados similares. The aim of this thesis is to analyze the effects of balance and coordination training, and aerobic training on functional variables, morphological variables of the sciatic nerve and soleus muscle, as well as synaptophysin and neurotrophin-3 immureactivity in the spinal cord after a crush injury of the sciatic nerve. Therefore, adult Wistar rats were randomly divided into 4 groups: Sham-operated (SH); Non-trained (NT); Endurance Training (ET), and Balance and Coordination Training (BCT). The last three experimental groups were submitted to sciatic nerve crush injury, which resulted in an axonotmesis. The training protocols, which lasted for four weeks, were initiated early during the acute phase - 48 hours after the surgical procedures. Our results showed that for the sensorimotor functional analysis (Horizontal Ladder Rung Walking Test and Narrow Bar Test) the BCT group animals presented better performance than the other group’s animals. However, for the locomotor functional analysis (Sciatic Functional Index and Right Hindlimb Paw Stride Length), the Sciatic Functional Index presented similar results between the injured groups (NT, ET, and BCT) while the Right Hindlimb Paw Stride Length, the animals from the ET group showed better results than those from the other groups. In the quantitative morphological study of the soleus muscle, the muscular morphometric analysis showed that ET and BCT groups presented similar results in comparison to each other, and better results than NT group regarding the parameters of muscle tissue areas, connective tissue, blood vessels, muscle fiber density, and the muscle fibers cross-sectional area. In the morphometric analysis of the distal portion of the damaged nerve, the results from both trained groups were similar in comparison to each other in all analyzed parameters as well. This trained animals presented better results when compared to the NT group to the nerve fiber diameter, while the ET group presented better results regarding the blood vessel total area and the myelinated fiber density. The qualitative analysis - both of the soleus muscle and the sciatic nerve - showed that the injured groups had characteristics of nerve and muscle regeneration, not being possible to verify differences between the trained and untrained groups. The spinal cord synaptophysin immureactivity, through optical densitometry at spinal cord L4-L6 levels of the dorsal horn revealed to be significantly in the BCT in comparison to the NT group. In the same region of the spinal cord neurotrophin-3 analysis, the BCT group showed significantly better results than the other groups. We hypothesized that this specific immureactivity in group BCT is directly related to the best results from this group in the sensorimotor tests, once the quantitative and qualitative morphological analyzes of the ET and BCT groups showed similar results.

Phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) is an enzyme involved in different pathophysiological processes, including neurological disorders. However, its role in seizures and postictal outcomes is still not fully understood. We investigated the role of PI3Kγ on seizures, production of neurotrophic and inflammatory mediators, expression of a marker for microglia, neuronal death and hippocampal neurogenesis in mice (WT and PI3Kγ −/− ) subjected to intrahippocampal microinjection of pilocarpine. PI3Kγ −/− mice presented a more severe status epilepticus (SE) than WT mice. In hippocampal synaptosomes, genetic or pharmacological blockade of PI3Kγ enhanced the release of glutamate and the cytosolic calcium concentration induced by KCl. There was an enhanced neuronal death and a decrease in the doublecortin positive cells in the dentate gyrus of PI3Kγ −/− animals after the induction of SE. Levels of BDNF were significantly increased in the hippocampus of WT and PI3Kγ −/− mice, although in the prefrontal cortex, only PI3Kγ −/− animals showed significant increase in the levels of this neurotrophic factor. Pilocarpine increased hippocampal microglial immunolabeling in both groups, albeit in the prelimbic, medial and motor regions of the prefrontal cortex this increase was observed only in PI3Kγ −/− mice. Regarding the levels of inflammatory mediators, pilocarpine injection increased interleukin (IL) 6 in the hippocampus of WT and PI3Kγ −/− animals and in the prefrontal cortex of PI3Kγ −/− animals 24 h after the stimulus. Levels of TNFα were enhanced in the hippocampus and prefrontal cortex of only PI3Kγ −/− mice at this time point. On the other hand, PI3Kγ deletion impaired the increase in IL-10 in the hippocampus induced by pilocarpine. In conclusion, the lack of PI3Kγ revealed a deleterious effect in an animal model of convulsions induced by pilocarpine, suggesting that this enzyme may play a protective role in seizures and pathological outcomes associated with this condition.

Made available in DSpace on 2015-10-21T13:10:02Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-05-26. Added 1 bitstream(s) on 2015-10-22T09:53:04Z : No. of bitstreams: 1 WOS000355183900034.pdf: 1411034 bytes, checksum: c0a385ed9382e3e64549cc87bc043782 (MD5) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Golden retriever muscular dystrophy (GRMD) provides the best animal model for characterizing the disease progress of the human disorder, Duchenne muscular dystrophy (DMD). The purpose of this study was to determine steroid hormone concentration profiles in healthy golden retriever dogs (control group - CtGR) versus GRMD-gene carrier (CaGR) and affected female dogs (AfCR). Therefore, a sensitive and specific analytical method was developed and validated to determine the estradiol, progesterone, cortisol, and testosterone levels in the canine serum by isotope dilution liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry (LC-MS/MS). To more accurately understand the dynamic nature of the serum steroid profile, the fluctuating levels of these four steroid hormones over the estrous cycle were compared across the three experimental groups using a multivariate statistical analysis. The concentration profiles of estradiol, cortisol, progesterone, and testosterone revealed a characteristic pattern for each studied group at each specific estrous phase. Additionally, several important changes in the serum concentrations of cortisol and estradiol in the CaGR and AfCR groups seem to be correlated with the status and progression of the muscular dystrophy. A comprehensive and quantitative monitoring of steroid profiles throughout the estrous cycle of normal and GRMD dogs were achieved. Significant differences in these profiles were observed between GRMD and healthy animals, most notably for estradiol. These findings contribute to a better understanding of both dog reproduction and the muscular dystrophy pathology. Our data open new venues for hormonal behavior studies in dystrophinopathies and that may affect the quality of life of DMD patients. Univ Campinas UNICAMP, Inst Chem, ThoMSon Mass Spectrometry Lab, Campinas, SP, Brazil AB SCIEX Brazil, Sao Paulo, SP, Brazil Sao Paulo State Univ UNESP, Fac Vet Med, DAPSA, Aracatuba, SP, Brazil Univ Sao Paulo, FZEA, Pirassununga, SP, Brazil Univ Sao Paulo, Fac Vet Med &Anim Sci FMVZ, Sao Paulo, SP, Brazil Purdue Univ, Dept Chem, W Lafayette, IN 47907 USA Sao Paulo State Univ UNESP, Fac Vet Med, DAPSA, Aracatuba, SP, Brazil FAPESP: 2007/51222-2 FAPESP: 2010/15167-0 FAPESP: 2010/51677-2

A hiperplasia intimal ocorre em resposta à lesão vascular, pode complicar significantemente os procedimentos vasculares abertos e endovasculares, levando a diferentes graus de estenose do lume vascular e isquemia. De certo modo, a hiperplasia intimal está presente em todos os tipos de reconstruções vasculares, incluindo enxertos autólogos, homólogos e sintéticos, após angioplastias com ou sem colocação de stent e em órgãos transplantados. Um dos maiores desenvolvimentos experimentais nos últimos anos, para prevenção da hiperplasia intimal, é a utilização da radiação ionizante. A radiação ionizante inibe a proliferação de muitos tipos celulares, incluindo fibroblastos e células musculares lisas in vitro e a síntese de colágeno em culturas de fibroblastos. Modelos animais de experimentação têm sido utilizados para o desenvolvimento de novas estratégias de tratamento e entendimento dos mecanismos fisiopatológicos básicos da hiperplasia intimal. Assim, o objetivo desta revisão e atualização da literatura é o de expor os diferentes modelos de animais de experimentação para o desenvolvimento de hiperplasia intimal, o tipo de lesão empregada, as artérias mais utilizadas e os efeitos encontrados com o uso de diferentes tipos de fontes de radiação ionizante.Most complications that may occur in response to vascular injury of endovascular and open vascular procedures are due to intimal hyperplasia. To a certain extent, intimal hyperplasia is present in all types of vascular reconstruction, including autologous grafts, allografts, and prosthetic grafts found in solid organs transplanted, having a substantial role in chronic rejection and following angioplasty with or without stenting. One of the greatest developments in recent years towards prevention of intimal hyperplasia is the use of ionizing radiation. Ionizing radiation inhibits proliferation of many cell types including fibroblasts and smooth muscle cells in vitro, and also suppresses the synthesis of collagen by cultured fibroblasts. Animal models have been a cornerstone to develop strategies aimed at understanding the basic physiopathologic mechanisms of intimal hyperplasia and at evaluating novel treatment strategies for clinical conditions. So, the aim of this study was to analyze animals models of intimal hyperplasia, type of injury, artery segments most used, as to the effects of different kinds and sources of ionizing radiation.

Objetivo: Observar os efeitos da fratura experimental de corpo de mandíbula no crescimento da maxila e mandíbula. Métodos: Utilizando ratos com um mês de idade. Estes foram distribuídos em dois grupos: experimental, onde foi efetuada a fratura de corpo de mandíbula à direita, e controle-operado, no qual foi realizado apenas o acesso cirúrgico. Aos três meses de idade foi realizada a eutanásia e após a maceração, a mandíbula foi desarticulada. O crânio foi submetido à incidência radiográfica axial e as hemi-mandibulas à incidência radiográfica lateral. Com base nestas, foram feitas mensurações cefalométricas por meio de um sistema de computador e os valores submetidos a análises estatísticas. Resultados: O comprimento da maxila, bem como a altura e o comprimento da mandíbula apresentaram diferença significante a menor para o lado direito, no grupo experimental. No grupo controle-operado houve diferença significante a menor para o comprimento da porção posterior da maxila e para a altura e comprimento da mandíbula para o lado direito. O grupo experimental quando comparado ao grupo controle-operado mostrou ser significativamente menor em todas as mensurações da maxila e mandíbula para ambos os lados, com exceção do comprimento da mandíbula. Conclusão: A fratura de corpo da mandíbula, bem como a abordagem cirúrgica, tiveram efeitos negativos no crescimento da maxila e da mandíbula. Objective: The purpose of this study was to observe the effects of experimental fracture of the mandibular body on the growth of maxilla and mandible, by using one-month-old rats. Methods: These were distributed into two groups: experimental, which underwent a fracture of the right mandibular body, and sham-operated, which underwent the surgical access only. The animals were sacrificed at three months of age and, after dissection, the mandible was disarticulated. The skull was submitted to axial radiograph and the hemimandibles to a lateral radiograph. With these, cephalometric mensurations were made through a computer system, and the obtained values submitted to statistical analyses. Results: The length of the maxilla, as well as the height and length of the mandible presented significant difference with decrease to the right side, in the experimental group. In the sham-operated group there was significant difference with decrease to length of posterior part of the maxilla and to height and length of the mandible on the right side. The experimental group when compared to the sham-operated group was significantly lesser in all the mensurations of maxilla and mandible to both sides, except in mandibular length. Conclusion: It was concluded that fracture of the mandibular body, as well as the surgical access, had negative effects on growth of maxilla and mandible.

Submitted by Boris Flegr (boris@uerj.br) on 2021-01-06T20:31:59Z No. of bitstreams: 1 Neil Grant Venter Tese completa.pdf: 3989563 bytes, checksum: f1bead9323970d42bc785b8f0c2b16eb (MD5) Made available in DSpace on 2021-01-06T20:31:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Neil Grant Venter Tese completa.pdf: 3989563 bytes, checksum: f1bead9323970d42bc785b8f0c2b16eb (MD5) Previous issue date: 2014-11-26 Burns are common and recurring events in the daily lives of medical care. There is a constant search to understand itsphysiopathology, in order to minimize its devastating results. Platelet-rich plasma (PRP) is a platelet concentrate with capacity of local release of multiple growth factors (FC) that accelerate healing. This study consists in two experiments: the first to validate an experimental model for the creation of standardized burns in size and depth and the second to evaluate the use of PRP in burns. The burns were achieved in an experimental burn model using an equipment that we developed and allows precise temperature control and in association with a innovative fixation technique that creates a constant pressure. Twelve rats per group underwent burns at 60oC, 70oC or 80oC for 10 seconds, with a device that we developed. Half of the animals of each group was killed on the third day and their wounds were analyzed by histology, and in the other half the wounds were measured and monitored until their closure. In the use of PRP in burns, second degree burns (SD), second degree burns with induced diabetes mellitus (SDD) and third degree burns (TD) were evaluated. Ninety animals were divided into three groups (SD, SDD, and TD) and in each one10 animals were treated, 10 animals served as controls, and 10 animals were used for PRP preparation. The wound areas were accompanied until the twenty-first day, when the animals were killed and skin biopsies were obtained. The results of the validation of the model show that the burns derived from 60oC were of superficial SD (28% of the dermis involved); for 70 °C they were deep SD (72% of the dermis involved); and for 80oC they were TD (100% of the dermis involved). Regarding the use of PRP in burns, it was observed that in the SD and SDD treated groups the wound closure was accelerated and there was reduction in the number of CD31, CD163, CD68, MPO, and TGF-β positive cells, and increasing of the number of MMP2 positive cells. The neoepidermis was thinner in control of both SD and SDD groups, and the granulation tissue was reduced in both control SDD and TD. The model used is safe and reliable to produce regular and uniform burns of varying diameters, by its ability of the fine control of temperature, by the animal positioning, and by its reproducibility. PRP appears to accelerate the healing of burns of SD and SDD, but not TD. As queimaduras são eventos comuns e recorrentes no dia a dia dos atendimentos médicos. Há uma constante busca para entender a sua fisiopatologia, no intuito de minimizar seus resultados devastadores. Plasma rico em plaquetas (PRP) é um concentrado de plaquetas com capacidade de liberação local de múltiplos fatores de crescimento (FC) que aceleram a cicatrização. Este estudo consiste em dois experimentos: o primeiro visa validar um modelo experimental para a criação de queimaduras de tamanho e profundidade padronizados e, o segundo, avalia o uso de PRP em queimaduras. Para o desenvolvimento de queimaduras na validação do modelo experimental, foi idealizado um equipamento que permitisse o controle preciso da temperatura, além da utilização em conjunto de uma técnica inovadora de fixação que garante pressão constante no momento das queimaduras. Para o primeiro experimento, foram utilizados 12 ratos, por grupo, submetidos a queimaduras de 60 oC, 70 oC ou 80 oC por dez segundos, com um equipamento que desenvolvemos. Metade dos animais de cada grupo foi morta no terceiro dia e suas feridas foram analisadas por histologia, e, na outra metade, a ferida foi mensurada e acompanhada até o seu fechamento. No uso de PRP em queimaduras, foram avaliadas queimaduras de segundo grau (SG), segundo grau com diabetes mellitus induzido (SGD) e queimaduras de terceiro grau (TG). Noventa animais foram distribuídos em três grupos (SG, SGD e TG), onde, em cada um, dez animais foram tratados, dez serviram de controle e dez foram utilizados para o preparo do PRP. As áreas das feridas foram acompanhadas até o vigésimo primeiro dia, quando os animais foram mortos e biópsias de pele foram realizadas. Os resultados da validação do modelo mostram que as queimaduras produzidas com 60 oC foram de SG superficial (28% da derme envolvida); com 70 oC foram de SG profundo (72% da derme envolvida); e com 80 oC foram de TG (100% da derme envolvida). Em relação ao uso de PRP em queimaduras, observou-se que nos grupos tratados SG e SGD houve aceleração do fechamento da ferida e redução no número de células CD31, CD163, CD68, MPO e TGF-β positivas, e aumento do número de células MMP2 positivas. A neoepiderme foi mais fina nos controles dos grupos SG e SGD, e o tecido de granulação foi reduzido nos controles SGD e TG. O modelo utilizado é seguro e confiável para produzir queimaduras regulares e uniformes, de diâmetros variados, pela capacidade do controle fino da temperatura e pelo posicionamento do animal, e reprodutíveis. PRP parece acelerar a cicatrização de queimaduras de SG e SGD, mas não de TG.

A esplenectomia total está sendo cada vez mais evitada, devido aos riscos advindos da ressecção completa do baço. A esplenectomia subtotal com preservação do polo inferior (ESTPI) é a técnica mais recentemente descrita com a intenção de preservar o parênquima esplênico. Objetivo: verificar a vitalidade do polo inferior do baço, após ESTPI com ou sem fixação do polo inferior ao estômago e com secção total da membrana peritoneal gastroesplênica. Método: foram utilizados 60 ratos wistar, machos, com peso entre 280 e 320 g, distribuídos randomicamente em três grupos: grupo 1 - ESTPI (n=20), grupo 2 - ESTPI com fixação do polo inferior do baço na região do corpo gástrico (n=20), grupo 3 - ESTPI com secção da membrana peritoneal gastroesplênica (n=20). No 45º dia pós-operatório extirpou-se o polo inferior do baço e avaliou-se macroscopicamente a viabilidade por meio da coloração, forma, tamanho, aspecto da superfície, tecido necrótico, fibrótico e aderências; e microscopicamente pela presença de necrose, infiltrado inflamatório, proliferação vascular e fibrose. Os cálculos estatísticos foram realizados pelo programa Biostat 5.0 e utilizados: o teste t de student, a análise de variância (ANOVA), o teste de Kruskal Wallis e o teste exato de Fisher. O valor de p0,05 foi considerado significante. Resultados: na avaliação das alterações macroscópicas do polo inferior do baço entre os três grupos, verificou-se que não houve diferença significante entre eles. Na avaliação microscópica, constatou-se que não houve diferença quanto à necrose e à inflamação, porém a fibrose foi mais frequente no grupo 3 que no grupo 1 (85% no grupo 1, 95% no grupo 2 e 80% no grupo 3) (p0,05). Conclusão: a vitalidade do polo inferior do baço após a ESTPI não é alterada pela fixação do mesmo no estômago ou quando se secciona a membrana peritoneal gastroesplênica. Procedures on the spleen has changed in the last years, and in this scope, indication for total splenectomy has been reduced. Subtotal splenectomy preserving the lower pole is the newest option for preserving spleen parenchyma. Purpose: Verify the viablility of the spleen lower pole after subtotal splenectomy with suture to the stomach and after posterior peritoneal gastroesplenic membrane resection, using macro and microscopic avaliations. Methods: Sixty Wistar rats were used in this study and were randomly distributed in the 3 groups: Group 1: (n=20), subtotal splenectomy with lower pole preservation, Group 2: (n=20) subtotal splenectomy with lower pole preservation and suture to the stomach, Group 3: subtotal splenectomy with lower pole preservationa and posterior peritoneal ligament resection. The animals were sacrificed 45 days after the surgery and the spleen lower poles were removed for macroscopic and microscopic examination. Results: All animals in this series survived. No macroscopic diferences were encountered between the groups. Microscopic avaliation observed statistic diference about fibrosis between group 1 and 3 (p0,05), but no diferences when analysed necrosis or inflamation. Conclusions: Viability of the spleen lower pole after subtotal splenectomy is not modified when its fixed to the stomach or when the posterior peritoneal gastrosplenic ligament is resected.

This study aimed to demonstrate that congenital diaphragmatic hernia (CDH) results in vascular abnormalities that are directly associated with the severity of pulmonary hypoplasia and hypertension. These events increase right ventricle (RV) afterload and may adversely affect disease management and patient survival. Our objective was to investigate cardiac function, specifically right ventricular changes, immediately after birth and relate them to myocardial histological findings in a CDH model. Pregnant New Zealand rabbits underwent the surgical procedure at 25 days of gestation (n=14). CDH was created in one fetus per horn (n=16), and the other fetuses were used as controls (n=20). At term (30 days), fetuses were removed, immediately dried and weighed before undergoing four-parameter echocardiography. The lungs and the heart were removed, weighed, and histologically analyzed. CDH animals had smaller total lung weight (P

The increasing prevalence of type 2 diabetes mellitus is associated with a significant economic burden. We developed a dipeptidyl peptidase 4 (DPP4)-targeted immune therapy to increase glucagon-like peptide 1 hormone levels and improve insulin sensitivity for the prevention and treatment of type 2 diabetes mellitus. Immunization with the DPP4 vaccine in C57BL/6J mice successfully increased DPP4 titer, inhibited plasma DPP4 activity, and induced an increase in the plasma glucagon-like peptide 1 level. Moreover, this elevated titer was sustained for 3 mo. In mice fed a high-fat diet, DPP4 vaccination resulted in improved postprandial glucose excursions and insulin sensitivity and, in the diabetic KK-A(y) and db/db mice strains, DPP4 vaccination significantly reduced glucose excursions and increased both plasma insulin and pancreatic insulin content. Importantly, T cells were not activated following challenge with DPP4 itself, which suggests that this vaccine does not induce cell-mediated autoimmunity. Additionally, no significant immune-mediated damage was detected in cells and tissues where DPP4 is expressed. Thus, this DPP4 vaccine may provide a therapeutic alternative for patients with diabetes.

The aim of this study was to develop an experimental model of incisional hernia in rabbits. Thirty seven rabbits, weighing from 2220 to 2750 g, were submitted to musculoaponeurotic and peritoneum pattern resection of the abdominal wall and distributed in groups of 10 animals according to the postoperative time of 30, 45 or 60 days. The animals were submitted to reoperation at the end of the observation period. In the three groups were observed hernias larger than 60 and 45 cm in transversal and longitudinal measures, respectively, and with volumes greater than 129 ml. Adherences to the internal abdominal wall were present in 13,3%. Seven deaths occurred due to evisceration (5), pulmonary infection (1) and diarrhea(1). There was no significant difference in the three groups studied, according to the statistical methods applied. The experimental model is feasible, and is established at the 30 days of postoperative period.Com o objetivo de desenvolver e estudar um modelo experimental de hérnia incisional em coelhos foi realizado este estudo. Trinta e sete coelhos (2220 a 2750 g) foram submetidos à ressecção padronizada músculo-aponeurótica- peritoneal da parede abdominal e distribuídos em grupos de 10 animais conforme o tempo de observação pós-operatória de 30, 45 e 60 dias. Os animais ao término da observação pós-operatória foram reoperados e as hérnias incisionais desenvolvidas foram analisadas quanto a presença de aderências, dimensões lineares e de volume, força de ruptura e estudo histológico. Nos três grupos foram observadas hérnias incisionais com dimensões transversais e longitudinais que ultrapassaram 70 e 50mm respectivamente, volumes maiores que 120 ml e aderências presentes em 13,3%. Ocorreram 7 óbitos decorrentes de evisceração(5), infecção pulmonar (1) e diarréia (1). Na análise dos resultados não houve diferença significante nos três grupos estudados. Foi concluído que o modelo experimental é factível e está estabelecido aos 30 dias de observação pós-operatória.

Purpose: To compare the effects of bevacizumab applied either subconjunctivally or topically, in a rat model of corneal neovascularization induced by alkali burn. Methods: The right corneas of 24 Wistar-Albino rats were cauterized with silver nitrate sticks. The rats were divided randomly and equally into three groups: no treatment control (n=8), subconjunctival bevacizumab treatment (n=8), and topical bevacizumab treatment (n=8). Immediately following cauterization, the subconjunctival group was treated with a 0.05 ml (1.25 mg) bevacizumab subconjunctival injection. The topical group was treated with 10 mg/ml bevacizumab twice daily, and the control group received subconjunctival saline injections twice daily. The burn stimulus and neovascularization scores were evaluated using a technique previously described by Mahoney and Waterbury. Digital photographs were obtained before the eyes were enucleated and corneal sections were then analyzed by histopathology. Results: The mean burn stimulus score was 1.86 ± 0.6 and there was no statistical difference between the groups (p=0.730). The mean neovascularization scores in the subconjunctival and topical bevacizumab groups were statistically lower than the control group (p

Polymicrobial sepsis induces organ failure and is accompanied by overwhelming inflammatory response and impairment of microbial killing. Peroxisome proliferator-activated receptor (PPAR)-γ is a nuclear receptor with pleiotropic effects on lipid metabolism, inflammation, and cell proliferation. The insulin-sensitizing drugs thiazolidinediones (TZDs) are specific PPAR-γ agonists. TZDs exert anti-inflammatory actions in different disease models, including polymicrobial sepsis. The TZD pioglitazone, which has been approved by the U.S. Food and Drug Administration, improves sepsis outcome; however, the molecular programs that mediate its effect have not been determined. In a murine model of sepsis, we now show that pioglitazone treatment improves microbial clearance and enhances neutrophil recruitment to the site of infection. We also observed reduced proinflammatory cytokine production and high IL-10 levels in pioglitazone-treated mice. These effects were associated with a decrease in STAT-1–dependent expression of MyD88 in vivo and in vitro. IL-10R blockage abolished PPAR-γ–mediated inhibition of MyD88 expression. These data demonstrate that the primary mechanism by which pioglitazone protects against polymicrobial sepsis is through the impairment of MyD88 responses. This appears to represent a novel regulatory program. In this regard, pioglitazone provides advantages as a therapeutic tool, because it improves different aspects of host defense during sepsis, ultimately enhancing survival.

Restraint stress (RS) is an experimental model to study stress-related cardiovascular responses, characterized by sustained pressor and tachycardiac responses. We used pharmacologic and surgical procedures to investigate the role played by sympathetic nervous system (SNS) and parasympathetic nervous system (PSNS) in the mediation of stress-evoked cardiovascular responses. Ganglionic blockade with pentolinium significantly reduced RS-evoked pressor and tachycardiac responses. Intravenous treatment with homatropine methyl bromide did not affect the pressor response but increased tachycardia. Pretreatment with prazosin reduced the pressor and increased the tachycardiac response. Pretreatment with atenolol did not affect the pressor response but reduced tachycardia. The combined treatment with atenolol and prazosin reduced both pressor and tachycardiac responses. Adrenal demedullation reduced the pressor response without affecting tachycardia. Sinoaortic denervation increased pressor and tachycardiac responses. The results indicate that: (1) the RS-evoked cardiovascular response is mediated by the autonomic nervous system without an important involvement of humoral factors; (2) hypertension results primarily from sympathovascular and sympathoadrenal activation, without a significant involvement of the cardiac sympathetic component (CSNS); (3) the abrupt initial peak in the hypertensive response to restraint is sympathovascular-mediated, whereas the less intense but sustained hypertensive response observed throughout the remaining restraint session is mainly mediated by sympathoadrenal activation and epinephrine release; (4) tachycardia results from CSNS activation, and not from PSNS inhibition; (5) RS evokes simultaneous CSNS and PSNS activation, and heart rate changes are a vector of both influences; (6) the baroreflex is functional during restraint, and modulates both the vascular and cardiac responses to restraint.

Summary Objective This study aimed to evaluate the impact of concurrent administration of clinically relevant doses of zoledronic acid (ZA) and dexamethasone (DX) on bone healing after tooth extraction (EXO). Materials and Methods Forty-four Sprague–Dawley rats (6–8 month old) were randomized into five groups: ZA + DX = weekly injection of ZA with DX for 7 weeks; WD = ZA with DX for 3 weeks then DX alone for 4 weeks; C = control saline for 7 weeks; ZA = ZA alone for 7 weeks and DX = DX alone for 7 weeks. ZA was administered at 0.13 mg/kg/week and DX at 3.8 mg/kg/week and body weights recorded at the time of injection. All rats underwent extraction (EXO) of the mandibular and maxillary first molars at 3 weeks and were euthanized at 7 weeks. The extracted and non-extracted sides of both jaws were harvested for micro-CT analyses. Results All rats, particularly those injected with ZA, exhibited weight gain till EXO followed by decline then recovery. ZA + DX group demonstrated highest fractional bone to tissue volume (BV/TV) in the non-extracted side. ZA + DX rats exhibited also highest volume and surface of sequestra. Only sequestra volume was statistically higher in the WD group compared to C group. Conclusion Combined treatment with ZA and DX over a prolonged period inhibits bone remodeling and increased sequestra formation to a greater extent than either drug alone. Trauma caused by these sequestra cutting through the mucosa could play a key role in the development of BRONJ by potentially facilitating infection. ZA withdrawal may promote bone-remodeling reactivation following EXO.

Corticotropin-releasing factor (CRF) plays a critical role in the mediation of physiological and behavioral responses to stressors. In the present study, we investigated the role played by the CRF system within the dorsomedial hypothalamus (DMH) in the modulation of anxiety- and panic-related responses. Male Wistar rats were administered into the DMH with CRF (125 and 250 ng/0.2 μl, experiment 1) or with the CRFR1 antagonist antalarmin (25 ng/0.2 μl, experiment 2) and 10 min later tested in the elevated T-maze (ETM) for inhibitory avoidance and escape measurements. In clinical terms, these responses have been respectively related to generalized anxiety and panic disorder. To further verify if the anxiogenic effects of CRF were mediated by CRFR1 activation, we also investigated the effects of the combined treatment with CRF (250 ng/0.2 μl) and antalarmin (25 ng/0.2 μl) (experiment 3). All animals were tested in an open field, immediately after the ETM, for locomotor activity assessment. Results showed that 250 ng/0.2 μl of CRF facilitated ETM avoidance, an anxiogenic response. Antalarmin significantly decreased avoidance latencies, an anxiolytic effect, and was able to counteract the anxiogenic effects of CRF. None of the compounds administered altered escape responses or locomotor activity measurements. These results suggest that CRF in the DMH exerts anxiogenic effects by activating type 1 receptors, which might be of relevance to the physiopathology of generalized anxiety disorder.

A hipertrofia cardíaca é caracterizada pelo aumento do músculo cardíaco devido aumento das dimensões dos cardiomiócitos. Em condições fisiológicas ou patológicas a hipertrofia está relacionada com o aumento da força do coração, provocando alterações nas células miocárdicas. O exercício ativa a via da proteína Akt relacionada à sobrevivência celular em resposta ao exercício e atua sobre a proteína quinase mTOR, ocasionando síntese proteica e hipertrofia. A mTOR participa da proliferação e crescimento celular através da regulação da tradução da proteína. Além disso, a mTOR também controla outros processos celulares como autofagia e parece estar relacionada com a sinalização de miostatina. Portanto, quando miostatina aumentada, inibe o crescimento muscular provavelmente através da inibição de mTOR. A autofagia é um mecanismo homeostático com a finalidade de degradação e reciclagem através da ação lisossomal reciclando organelas citoplasmáticas e proteínas a fim de remover esses materiais intracelulares. A ativação da autofagia ocorre em duas situações: uma em baixo nível de fluxo autofágico, devido uma baixa energética a fim de manter a sobrevivência celular e em outra situação há ativação pronunciada a fim de esgotar os elementos celulares culminando em morte celular. Esses dois extremos nas ações autofágicas são mecanismos potenciais pró ou anti-sobrevivência. Estudos mostram uma ativação da autofagia durante o exercício agudo e parece estar relacionado com a repressão da via AKT/mTOR. Por outro lado, no exercício crônico a autofagia é ativada em músculo esquelético através de aumento das proteínas autofágicas. Tal evento é explicado pela mudança do perfil muscular esquelético pós-exercício gerando maior quantidade de metabólitos que são reciclados pelo sistema, porém em músculo cardíaco ainda está sendo estudado. A miostatina é um regulador negativo do crescimento muscular esquelético. Em doenças seu aumento resulta em perda muscular, contudo, na hipertrofia fisiológica a miostatina está reduzida no músculo esquelético e no cardíaco. A miostatina aumentada bloqueia não só Akt, mas também mTOR, favorecendo a via de degradação proteica através da maquinaria autofágica. Assim, a miostatina tem ação na autofagia durante o exercício e essas vias podem estar relacionadas com o desenvolvimento da hipertrofia cardíaca.

Diabetes mellitus é uma doença caracterizada por hiperglicemia crônica, resultando em desequilíbrio metabólico e estresse oxidativo e promovendo dano tecidual. Fitoquímicos bioativos, como os polifenóis presentes na uva e seus subprodutos, especialmente quando cultivada sem agrotóxicos, representam alternativa terapêutica para prevenção das alterações metabólicas e oxidativas em indivíduos diabéticos. Portanto, nosso objetivo foi avaliar o efeito de extrato aquoso de folhas de videira, da variedade Bordô (Vitis labrusca), produzida por cultivo orgânico, sobre parâmetros metabólicos e de estresse oxidativo em ratos diabéticos. Foram utilizados ratos Wistar, machos (n = 88), pesando cerca de 300 g, randomicamente divididos em grupos de não diabéticos (CTR) e diabéticos (STZ), sendo o diabete induzido pela administração única de 60 mg/kg de estreptozotocina via intraperitoneal. Os animais receberam doses diárias de salina (grupos: CTR0 e STZ0) ou extrato aquoso da folha da videira orgânica, nas concentrações de 50 mg/kg (grupos: CTR50 e STZ50), 100 mg/kg (grupos: CTR100 e STZ100) ou 200 mg/kg (grupos: CTR200 e STZ200) administrados via gavagem, por 30 dias. No 30o dia, após 30 minutos da última administração, os animais foram decapitados e o sangue troncular coletado para a determinação da glicemia de jejum, triglicerídeos, colesterol total e frações, bem como ureia, creatinina e transaminases (AST e ALT). A resposta metabólica pelo uso do extrato foi avaliada pelo teste oral de tolerância à glicose (28o dia) e variações no consumo alimentar, hídrico e ganho de peso. Os tecidos cardíaco, renal e hepático foram dissecados e homogeneizados para avaliação da lipoperoxidação (TBARS) e da oxidação proteica (quantificação carbonilas), bem como para determinação das concentrações de antioxidantes não enzimáticos (sulfidrilas totais) e da atividade de antioxidantes enzimáticos como superóxido dismutase (SOD) e catalase (CAT). Nossos resultados mostraram que o diabete aumentou a ingestão hídrica e alimentar, bem como reduziu os depósitos de gordura corporal e o peso corporal. Adicionalmente, o diabete aumentou parâmetros séricos como, glicose, triglicerídeos, HDL-C, ureia, AST e ALT. A administração do extrato, na dose de 200 mg/kg, preveniu a perda de gordura epididimal e a redução de peso corporal nos animais diabéticos. Na dose de 50 mg/kg, o extrato reduziu a concentração sérica de LDL-C, ureia e cretinina nos ratos diabéticos. As doses de 50 e 100 mg/kg do extrato preveniram o aumento na atividade da AST. Em relação aos parâmetros oxidativos, o diabete promoveu lipoperoxidação, evidenciado pelo aumento de TBARS no fígado e no coração. A administração do extrato de folha de videira, nas três diferentes doses, reduziu a concentração de TBARS no fígado dos ratos diabéticos. Ainda, o diabete aumentou a concentração de carbonilas, e reduziu os níveis de sulfidrilas totais em todos os tecidos avaliados. Para a oxidação de proteínas, observamos que a administração do extrato, em todas as doses testadas, reduziu a concentração de carbonilas no coração e rins dos ratos diabéticos. No fígado, essa redução ocorreu apenas para as doses de 100 e 200 mg/kg. Houve aumento das defesas antioxidantes não enzimáticas (sulfidrilas totais) no fígado dos ratos diabéticos após administração de qualquer dose de extrato. No entanto, esse aumento foi observado no coração apenas nas doses de 100 e 200 mg/kg e no rim apenas na dose de 50 mg/kg. O diabete aumentou a CAT no fígado e no coração e a SOD no rim de ratos, enquanto que o extrato reduziu a atividade da CAT no fígado na dose de 50 mg/kg e no coração, na dose de 100 mg/kg. No entanto, o extrato reduziu a atividade da SOD no rim de ratos diabéticos apenas na dose de 50 mg/kg. Com base nos nossos resultados podemos concluir que a administração do extrato aquoso de folha de videira orgânica possui potencial terapêutico nos animais diabéticos, evidenciado pela proteção contra perda de peso e do depósito de tecido adiposo, bem como efeito hipocolesterolêmico, hepatoprotetor, cardioprotetor, nefroprotetor e antioxidante. Diabetes mellitus is a disease characterized by chronic hyperglycemia, resulting in metabolic imbalance, and oxidative stress, promoting tissue damage. Bioactive phytochemicals, such as polyphenols, present in grapes and their sub-products, especially when they are cultivated without pesticides, represent a therapeutic alternative for preventing metabolic and oxidative damage in diabetic individuals. Therefore, our objective was to evaluate the effect of aqueous extract of vine leaves, from the Bordô varietal (Vitis labrusca), produced by organic culture method, on metabolic parameters and oxidative stress in diabetic rats. Male Wistar rats (n=88), weighting around 300 g, were randomized in non-diabetic (CTR) and diabetic (STZ) groups, with diabetes induced by streptozotocin, 60 mg/kg, via intraperitoneal. The rats were given daily doses of saline (CTR0 and STZ0 groups) or organic vine leaves aqueous extract at concentrations of 50 mg/kg (CTR50 and STZ50 groups), 100 mg/kg (STZ100 and CTR100 groups), or 200 mg/kg (STZ200 and CTR200 groups), by oral gavage, for 30 days. On the 30th. day, 30 min from the last administration, rats were decapitated and trunk blood was collected to determine fasting glycemia, triglycerides, total and fractions cholesterol, as well as urea, creatinine, and transaminases (AST and ALT). The effect of the organic vine leaves aqueous extract on metabolic response in rats was evaluated by oral glucose tolerance test (28th. day) and intake of food, water and weight gain. Heart, liver and kidney were dissected and homogenized to evaluate the lipid peroxidation (TBARS) and protein oxidation (carbonyl quantification), as well as the concentration of non-enzymatic antioxidants (free sulfhydryl) and the concentration of enzymatic antioxidants, such as superoxide dismutase (SOD), and catalase (CAT) enzymes activity. Our results showed that diabetes increased water and food intake, and reduced body fat deposits, and body weight in rats. Additionally, diabetes increased serum glycemia, triglycerides, HDL-C, urea, and transaminases. The administration of the extract at dose of 200 mg/kg, prevented the loss of epididymal fat and body weight reduction in diabetic animals. At a dose of 50 mg/kg, the extract reduced the serum concentration of LDL-C, urea, and creatinine in diabetic animals. The doses of 50 and 100 mg/kg of the extract prevented the increase in the AST activity in diabetic rats. As to oxidative parameters, diabetes promoted lipid peroxidation, as evidenced by the increase in TBARS in liver and heart. The administration of the extract of vine leaf, in three different doses, reduced the concentration of TBARS in the liver of diabetic rats. Also, diabetes increased the concentration of carbonyl but reduced levels of free sulfhydryl in all the tissues analyzed. For the oxidation of proteins, it was observed that the administration of the extract at all doses tested reduced the concentration of carbonyls in the heart and kidney of diabetic rats. In the liver, this reduction was observed only for doses of 100 and 200 mg/kg. There was increase non-enzymatic antioxidant defenses (sulfhydryl) in the liver of diabetic rats after administration of any doses of extract. However, this increase was observed in the heart only at doses of 100 and 200 mg/kg and in the kidney, only at doses of 50 mg/kg. Diabetes increased the CAT in the liver and in the heart and it increased the SOD in the kidney of rats. The extract reduced CAT activity in the liver at a dose of 50 mg/kg and in the heart, at a dose of 100 mg/kg. However, the extract reduced SOD activity in the kidney of diabetic rats only at a dose of 50 mg/kg. Based on our results we concluded that the administration of aqueous leaves extract of organic vine presents therapeutic potential in diabetic individuals, as evidenced by protection against weight loss and deposit of adipose tissue, as well as hypocholesterolemic, hepatoprotective, cardioprotective, nephroprotective and antioxidant effects.

The aim was to investigate the beneficial effects of clopidogrel in thoracic aorta function and structure and to characterize if P2Y12 receptors contribute to these effects. Male Sprague Dawley rats were infused with angiotensin II [(Ang II) 60 ng x min(-1), 14 days] or saline (control rats) and were simultaneously treated with clopidogrel (10 mg x kg(-1) x day(-1)) or vehicle. After 14 days, systolic blood pressure (mmHg) was similar in Ang II-hypertensive rats treated with clopidogrel or vehicle (199±9 vs. 190±11, respectively). Systolic blood pressure in control rats was not altered by clopidogrel treatment (128±1 vs. vehicle, 134±2). Endothelium-dependent relaxation induced by 2-MeS-ADP was decreased in aortas from vehicle-treated Ang II-hypertensive rats, compared to vehicle-treated control rats. This response was elicited via activation of P2Y1 and P2Y12 receptors. In the presence of L-NAME and indomethacin, 2-MeS-ADP induced contraction and this response was augmented in vehicle-treated Ang II-hypertensive rats, compared to vehicle-treated control rats. The contraction to 2-MeS-ADP was evoked by P2Y13 and P2Y12 receptor activation. Clopidogrel-treatment did not normalize relaxation or contractile responses induced by 2-MeS-ADP in aortas from Ang II-hypertensive rats. P2Y1 and P2Y12 protein expression was increased, whereas P2Y13 receptor expression was reduced in aorta from vehicle-treated Ang II-hypertensive rats. Endothelium-dependent relaxation upon acetylcholine-stimulation was reduced in vehicle-treated Ang II-hypertensive rats, and clopidogrel treatment was effective in improving endothelial function. Clopidogrel also prevented vascular remodeling, evidenced by augmented media thickness in aortas from Ang II-hypertensive rats. Clopidogrel has beneficial effects on the aortic endothelium of Ang II-hypertensive rats, but its effects do not seem to be directly related to the presence of P2Y12 receptors in this vessel.

O Diabetes Mellitus é caracterizado por hiperglicemia resultante de defeitos na secreção de insulina, na ação da insulina, ou ambos. Recentemente foi demonstrado que além do comprometimento de órgãos como o fígado, o sistema nervoso central também sofre os efeitos deletérios do diabetes, uma vez que a encefalopatia diabética foi reconhecida como uma complicação deste distúrbio metabólico heterogêneo. Existe uma associação bem reconhecida entre a depressão e o diabetes, uma vez que a prevalência da depressão em indivíduos diabéticos é maior do que na população em geral, e o clonazepam vem sendo utilizado para tratar esta complicação. O estresse oxidativo parece desempenhar um papel importante no desenvolvimento e na progressão do diabetes e suas complicações. Foi analisado neste estudo o dano a proteínas e o status antioxidante no fígado e no córtex, hipocampo e estriado, além do dano ao DNA e a lipídeos nas referidas áreas cerebrais de ratos diabéticos induzidos por estreptozotocina submetidos ao teste da natação forçada. Além disso, foi avaliado o efeito antioxidante da insulina e/ou do clonazepam nas áreas cerebrais desses animais, bem como no fígado. Ainda, foi investigado o efeito do tratamento sobre os níveis de taurina no córtex cerebral e no plasma dos animais. Verificou-se que os animais diabéticos sob comportamento do tipo depressivo apresentaram dano a proteínas e alteração do status antioxidante no fígado e nas referidas áreas cerebrais, bem como dano ao DNA e a lipídeos nos tecidos cerebrais avaliados. O tratamento agudo com insulina e/ou clonazepam protegeu frente ao estresse oxidativo tanto no fígado quanto no córtex, hipocampo e estriado, uma vez que foi evidenciado o efeito antioxidante desses tratamentos. Ainda, foi verificado que as concentrações de taurina estão diminuídas no plasma e aumentadas no córtex cerebral desses animais, e que estes efeitos foram corrigidos pelo tratamento agudo de insulina e/ou clonazepam. Estes dados sugerem que a associação dos dois fármacos em questão pode proteger frente ao estresse oxidativo no fígado e no cérebro de ratos diabéticos submetidos ao teste da natação forçada. Diabetes Mellitus is characterized by hyperglycemia resulting from defects on insulin secretion, insulin action, or both. It was recently demonstrated that in addition to the involvement of organs such as the liver, the central nervous system is not spared from the deleterious effects of diabetes, since diabetic encephalopathy was recognized as a complication of this heterogeneous metabolic disorder. There is a well recognized association between depression and diabetes, once prevalence of depression in diabetic patients is higher than in general population, and clonazepam is being used to treat this complication. Oxidative stress is widely accepted as playing a key mediatory role in the development and progression of diabetes and its complications. In this work, damage to proteins and antioxidant status in liver and in cortex, hippocampus and striatum were analyzed, as well as DNA and lipid damage in the referred brain areas from streptozotocin-induced diabetic rats submitted to forced swimming test. Furthermore, the antioxidant effect of insulin and/or clonazepam was evaluated in liver and brain areas from the animals. Moreover, the effect of the treatment on the taurine levels in plasma and cortex from animals was also investigated. It was verified that diabetic animals under depressive-like behavior presented protein damage and an unbalance in antioxidant status in liver and in the referred brain areas. The animals also showed DNA and lipid damage in brain areas evaluated. The acute treatment with insulin and/or clonazepam protected against oxidative stress in liver and in the cortex, hippocampus and striatum, since the antioxidant effect of these treatments has been evidenced. In addition, it was shown that taurine concentrations are decreased in plasma and increased in the cerebral cortex from these animals, and that these effects were corrected by the insulin and/or clonazepam acute treatment. These data suggest that the association of these two drugs can protect against oxidative stress in liver and brain from diabetic rats submitted to forced swimming test.

Introdução: na atualidade a obesidade tem se tornado epidemia, que pode ser atribuída, em parte, ao consumo exagerado de gordura saturada e açúcares simples e à redução da atividade física. Uma das suas consequências é a doença hepática gordurosa não alcoólica (NAFLD), cuja prevalência em obesos com diabetes mellitus tipo 2 é de aproximadamente 70%. Muitos aspectos da NAFLD ainda não são conhecidos. O objetivo deste estudo foi desenvolver modelo experimental de NAFLD para avaliação de alterações patogenéticas e fisiopatológicas relacionadas a essa entidade. Método: 30 ratos Wistar foram alimentados com dieta com adição de sacarose (grupo experimental GE) e 30 receberam dieta padrão (grupo-controle GC). Seis ratos de cada grupo foram sacrificados na 5ª, 10ª, 20ª e 30ª semanas. Na ocasião do sacrifício, foram avaliados os parâmetros antropométricos, bioquímicos, metabólicos, hormonais, marcadores de estresse oxidativo, enzimas antioxidantes e histologia hepática. Após obesidade estabelecida, 12 animais de cada grupo (GEex e GCex) foram submetidos a treinamento físico por cinco semanas, seguindo-se avaliação dos diversos parâmetros. Resultados: os níveis de glicose, colesterol-VLDL e triglicerídeos foram mais altos no GE na 30ª semana e os níveis de insulina e leptina foram superiores no GE em todos os tempos. Observou-se correlação positiva entre aumento do índice de massa corporal (IMC) e valores séricos de leptina. As enzimas antioxidantes superóxido dismutase e catalase foram inferiores no GE na 30ª semana. Esteatose e balonização hepatocelular foram verificadas apenas no GE, assim como a expressão de malondialdeído. Expressão hepática do receptor Ob-R da leptina foi positiva em ambos os grupos, enquanto a expressão de leptina foi mais intensa no GE. Os níveis de colesterol-HDL foram mais elevados e a peroxidação lipídica hepática inferior nos ratos que praticaram exercícios físicos. Conclusão: dieta enriquecida em carboidratos simples foi capaz de induzir obesidade com potencial desenvolvimento de NAFLD. O treinamento físico reduziu os níveis de peroxidação lipídica hepática. Introduction: Obesity is currently an epidemic disease caused in part by dietary consumption of saturated fats and simple sugars and a sedentary lifestyle; it can lead to non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) whose prevalence in obese patients with diabetes mellitus type 2 is of approximately 70%. Many aspects of NAFLD are as yet unknown. The aim of the study was to develop an experimental model of NAFLD to analyse pathogenic and pathophysiological changes related to this entity. Method: Thirty wistar rats were fed an added dietary sucrose (experimental group - GE); 30 received standard diet (control group - GC). Six rats from each group were sacrificed on the 5th, 10th, 20th and 30th weeks. At that occasion, anthropometric, biochemical, metabolic and hormonal parameters as well as oxidative stress markers, antioxidant enzymes and liver histology were evaluated. After obesity was established, 12 animals from each group (GEex and GCex) were submitted to physical training for five weeks and the various parameters were evaluated. Results: Glucose, VLDL-cholesterol and triglycerides levels were higher in the GE at 30 weeks; insulin and leptin levels were constantly higher in the GE. There was a positive correlation between an increase in BMI and serum leptin levels. The antioxidant enzymes superoxide dismutase and catalase were lower in the GE at 30 weeks. Steatosis and hepatocellular ballooning as well as malondialdehyde levels were observed only in the GE. Hepatic expression of the Ob-R receptor of leptin was positive in both groups, while leptin expression was more intense in the EG. HDL cholesterol levels were higher and hepatic lipid peroxidation lower in rats submitted to physical exercises. Conclusion: Diet rich in simple carbohydrates induced obesity that contributes to the development of NAFLD. Physical training reduced levels of hepatic lipid peroxidation.

Context To evaluate lung and liver changes in two experimental models using intraperitoneal carbon tetrachloride (CCl4) and bile duct ligation (BDL). Methods Twenty-four male Wistar rats were divided into a control group (CO) and an experimental group (EX). We evaluated the liver transaminases (AST, ALT, AP), arterial blood gases (PaO2, PCO2 and SpO2) and lipid peroxidation by TBARS (substances that react to thiobarbituric acid) and chemiluminescence. We also evaluated the antioxidant enzyme superoxide dismutase (SOD) and histology of lung tissue and liver. Results There were significant differences in AST, ALT, ALP and PaO2 between CO group and EX group (P

PURPOSE: To design an animal model of ischemia-reperfusion (I/R) in kidneys and evaluate the role that predetermined ranges of local hypothermia plays on markers of stress-oxydative as well as on histologic sections. METHODS: Twenty eight male rats Wistar, under general anesthesia, undergone right nephrectomy (G0, control group) followed by left kidney ischemia during 40 min. Four temperatures groups were designed, with seven animals randomized for each group: normothermic (G1, ±37oC), mild hypothermia (G2, 26oC), moderate hypothermia (G3, 15oC) and deep hypothermia (G4, 4oC). Left kidney temperature was assessed with an intraparenchymal probe. Left nephrectomy was performed after 240 min of reperfusion. After I/R a blood sample was obtained for f2-IP. Half of each kidney was sent to pathological evaluation and half to analyze CAT, SOD, TBARS, NO3, NO2. RESULTS: Histopathology showed that all kidneys under I/R were significantly more injured than the G0 (p

Introdução: As interposições intestinais são importantes em diversas operações do tubo digestivo. Contudo, são passíveis de complicações imediatas e tardias. Objetivo: Comparar as interposições com segmentos de jejuno e de colo em cães, quanto à evolução clínica e cirúrgica dos animais e aspecto anatomopatologico dos segmentos interpostos. Método: Foram utilizados 40 cães sem raça definida, imunizados e vermifugados, gênero masculino. Idade entre 36 meses e 72 meses, peso entre seis kg. a 16 kg. Distribuídos em grupos (G1 20 animais) e (G2=20 animais) e foram submetidos à anestesia e à lapatoromia para interposição gastroduodenal com segmento de jejuno e de colo entre o antro gástrico e o duodeno. Após 120 dias, foi realizada à relaparotomia, para remoção dos segmentos de jejuno e de colo e processada à ação do Bouin à cortes histológicos e corados pela hematoxilina-eosina para estudo anatomopatológico. Foram analisadas variáveis clínica e cirúrgica (peso, diarreia, fístula, infecção, deiscência e hérnia incisional) e aspecto anatomopatológico, (infiltração neutrofílica, aumento do número das células caliciformes e hipotrofia das vilosidades e criptas). Os testes de Mann-Whitney e o teste Exato de Fisher foram utilizado na comparação entre os grupos. . Resultados: Os cães submetidos à interposição gastrocoloduodenal produziram mais perda de peso (p

Early stress can cause metabolic disorders in adulthood. Omega-3 polyunsaturated fatty acids (n-3 PUFAs) deficiency has also been linked to the development of metabolic disorders. The aim of this study was to assess whether an early stressful event such as maternal separation interacts with the nutritional availability of n-3 PUFAs during the life course on metabolic aspects. Litters were randomized into: maternal separated (MS) and non-handled (NH). The MS group was removed from their dam for 3 hours per day and put in an incubator at 32 °C on days 1° to 10° postnatal (PND). On PND 35, males were subdivided into diets that were adequate or deficient in n-3 PUFAs, and this intervention was applied during the subsequent 15 weeks. Animal's body weight and food consumption were measured weekly, and at the end of the treatment tissues were collected. MS was associated with increased food intake (p = 0.047) and weight gain (p = 0.012), but no differences were found in the NPY hypothalamic content between the groups. MS rats had also increased deposition of abdominal fat (p

It has been shown that GABAA receptor blockade in the dorsomedial and ventromedial hypothalamic nuclei (DMH and VMH, respectively) induces elaborated defensive behavioural responses accompanied by antinociception, which has been utilized as an experimental model of panic attack. Furthermore, the prelimbic (PL) division of the medial prefrontal cortex (MPFC) has been related to emotional reactions and the processing of nociceptive information. The aim of the present study was to investigate the possible involvement of the PL cortex and the participation of local cannabinoid CB1 receptors in the elaboration of panic-like reactions and in innate fear-induced antinociception. Elaborated fear-induced responses were analysed during a 10-min period in an open-field test arena. Microinjection of the GABAA receptor antagonist bicuculline into the DMH/VMH evoked panic-like behaviour and fear-induced antinociception, which was decreased by microinjection of the non-selective synaptic contact blocker cobalt chloride in the PL cortex. Moreover, microinjection of AM251 (25, 100 or 400 pmol), an endocannabinoid CB1 receptor antagonist, into the PL cortex also attenuated the defensive behavioural responses and the antinociception that follows innate fear behaviour elaborated by DMH/VMH. These data suggest that the PL cortex plays an important role in the organization of elaborated forward escape behaviour and that this cortical area is also involved in the elaboration of innate fear-induced antinociception. Additionally, CB1 receptors in the PL cortex modulate both panic-like behaviours and fear-induced antinociception elicited by disinhibition of the DMH/VMH through microinjection of bicuculline.

A encefalopatia hepática (EH) é uma síndrome neuropsiquiátrica que resulta da falência hepática aguda (FHA), sendo uma de suas principais complicações. O seu surgimento implica em aumento da gravidade do quadro e da chance de morte nesses pacientes. Em seu processo fisiopatológico, a EH desenvolve-se por alterações cerebrais induzidas pelo aumento da amônia e resposta neuroinflamatória com aumento de citocinas proinflamatórias e estresse oxidativo/nitrosativo. A compreensão da neuroinflamação nesse cenário é fundamental paraampliar o espectro clínico de intervenção terapêutica na EH e aumentar a sobrevida na FHA. Sendo assim, o objetivo do presente estudo foi de elucidar o envolvimento celular e o perfil de resposta inflamatória no cérebro de camundongos com EH induzida por tioacetamida, umadroga hepatotóxica. A atividade locomotora foi utilizada como parâmetro clínico para avaliar a apresentação e a intensidade de sintomas nos modelos experimentais desse estudo. Observamos que, em 24, 36 e 48 horas pós-indução da EH, houve redução significativa da movimentação desses animais. Além disso, em 24 horas, essa redução foi mais relavante se comparados ao grupo controle. Em paralalo a esse quadro sintomático precoce e intenso, também notamos aumento no nível cerebral da citocina proinflamatória IL-1 e das quimiocinas CXCL1/KC, CCL2/MCP-1, CCL3/MIP-1 e CCL5/RANTES. Além disso, houve maior gradiente cerebral da citocina TNF-, quando comparado ao sangue, e queda na atividade das enzimas antioxidantes SOD, GSH-Px e catalase.Ao investigarmos a participação celular nesse processo, não observamos infiltrado leucocitário ou ativação de micróglia, célula mielóide residente no sistema nervoso central, embora houve evidência de acometimento de astrócitos, célula-alvo nesse processo. Dessa maneira, descrevemos, em um momento precoce no desenvolvimento da EH, um processo neuroinflamatório provavelmente relacionado ao astrócito, em que o estresse oxidativo e a produção de citocinas e quimiocinas cerebrais contribuem para a intensidade dos sintomas. Estudos posteriores serão necessários para elucidar mecanismos da participação do astrócito e de outras células na EH além de investigar a importância ponderada da inflamação e do estresse oxidativo em seu desenvolvimento. Hepatic encephalopathy (HE) is a neuropsychiatric syndrome that results from acute liver failure (ALF) and one of its major complications. HE emergence implies an increase in the severity and risk of death in these patients. In its pathophysiological process, HE develops in consequence of hyperammonemia in the brain and a neuroinflammatory response with increased proinflammatory cytokines and oxidative and nitrosative stress. The understanding of neuroinflammation in this scenario is important to expand the clinical spectrum of therapeutic intervention in HE and improve survival in ALF. Therefore, the objective of this study was to elucidate the cellular profile involvement and inflammatory response in the brain of mice with HE induced by thioacetamide, a hepatotoxic drug. The locomotor activity was used as a parameter to evaluate clinical presentation and severity of symptoms in the experimental models of this study. We observed that in 24, 36 and 48 hours post-induction of HE, there was significant reduction in the movement of these animals. Furthermore, in 24 hours, this reduction was more relevant compared to the control group. In parallel with this early and intense symptomatic scenario, we also noticed an increase in the level of brain proinflammatory cytokine IL-1 and chemokines CXCL1/KC,CCL2/MCP-1, CCL3/MIP-1 and CCL5/RANTES. Moreover, there was also a higher gradient of cytokine TNF- in the brain when compared to blood, and a diminished activity of antioxidant enzymes SOD, GSH-Px and catalase. By investigating the cellular participation in this process, we observed no leukocyte infiltration or activation of microglia, resident myeloid cells in the central nervous system, although there was evidence of involvement of astrocytes, the target cell in the process. Thus, we describe in a moment early in the development of HE, a neuroinflammatory process that is probably related to astrocyte, wherein the oxidative stress and the production of cytokines and chemokines in the brain may contribute to the intensity of symptoms. Further studies are needed to elucidate the mechanisms of participation of astrocytes andother cells of HE in addition to investigate the weighted importance of inflammation and oxidative stress in its development.

Objetivos do Estudo: O aumento do crescimento de melanoma foi avaliado em camundongos expostos a hipóxia intermitente. As proteínas que caracterizam a agressividade do tumor ainda não foram investigadas. O estudo teve como objetivo verificar se a hipóxia intermitente simulada pela apneia do sono afeta marcadores de melanoma na progressão tumoral. Desenho: Estudo prospectivo controlado em animais. Senário: Hospital Universitário. Participantes: Doze camundongos C57BL/6. Intervenções: Camundongos foram expostos a hipóxia intermitente ou simulada. Durante 8 horas por dia, o grupo hipóxia foi submetido a um total de 480 ciclos de 30 segundos de hipóxia progressiva SpO2 nadir de 8 ± 1%, seguidos por 30 segundos de normóxia. Um milhão de células de melanoma B16F10 foi injetado por via subcutânea. No dia 14, após a eutanásia, os tumores foram removidos, fixados e corados. Médias e resultados: coloração imunohistoquímica de Ki-67, PCNA, S100-B, HMB-45, Melan-A, TGF, Caspase-1 e HIF-1α foi quantificada por dois observadores que utilizaram captura digital e processamento em três lâminas de cada animal para cada marcador. O tamanho e o peso dos tumores foram semelhantes nas experiências de hipóxia e simulada. A percentagem da mediana [25-75 quartis] de área positiva corada para Ki-67 foi de 23% [15-28] no grupo hipóxia e 0,3% [0,2-1,1] no grupo controle (P = 0,02); para PCNA, as percentagens foram 31% [25-38] e 7% [5-18], respectivamente (P = 0,009). As diferenças entre os grupos para os marcadores restantes não foram significativas. Conclusões: Os marcadores da transcrição do RNA ribossomal e da síntese de DNA são mais expressos em tumores de camundongos expostos a hipóxia intermitente do que em controles, indicando que a apneia do sono pode levar a uma maior agressividade do tumor. Study Objectives: Increased melanoma growth has been reported in mice exposed to intermittent hypoxia. Proteins that characterize tumor aggressiveness have not been investigated. The study aims to verify whether intermittent hypoxia mimicking sleep apnea affects markers of melanoma tumor progression. Design: Prospective controlled animal study. Settings: University hospital. Participants: Twelve C57bl/6 mice. Interventions: Mice were exposed to intermittent or sham hypoxia. During 8 hours per day, the hypoxia group was submitted to a total of 480 cycles of 30 seconds of progressive hypoxia to a nadir FIO2 of 8±1%, followed by 30 seconds of normoxia. One million B16F10 melanoma cells were injected subcutaneously. On the 14th day, after euthanasia, tumors were removed, fixed and stained. Measurements and Results: Immunohistochemistry staining for Ki-67, PCNA, S100-B, HMB-45, Melan-A, TGFβ, Caspase-1 and HIF-1α was quantified by two observers using digital capture and processing in three slides from each animal for each marker. The size and weight of the tumors were similar in hypoxia and simulated experiments. Median [25-75 quartiles] percentage of positive area stained for Ki-67 was 23% [15-28] in the hypoxia group and 0.3% [0.2-1.1] the control group (P=0.02); for PCNA, the percentages were 31% [25-38] e 7% [5-18], respectively (P=0.009). The differences between the groups for the remaining markers were not significant. Conclusions: Markers of ribosomal RNA transcription and of DNA synthesis are more expressed in tumors of mice exposed to intermittent hypoxia than of controls, indicating that sleep apnea can lead to greater tumor aggressiveness.

A sepse é um conjunto complexo de interações moleculares e celulares mediado pela estimulação de receptores celulares envolvidos na inflamação. O controle desta rede de sinalização é compensado pela resposta pró- e antiinflamatória do organismo. Os desequilíbrios inflamatórios induzidos alteram o estado fisiológico de diversos órgãos. No cérebro, observam-se diversas modificações que envolvem desde o aumento na permeabilidade da barreira hematoencefálica (BHE), morte de células neurais por apoptose ou necrose, redução do fluxo sanguíneo e aumento do estresse oxidativo, resultando no desenvolvimento do delirium associado à sepse. O delirium associado à sepse é um conjunto de disfunções neurológicas induzidas por uma resposta inflamatória sistêmica. Assim, é possível que diferentes mecanismos compensatórios estejam envolvidos durante a sepse. Este estudo objetivou analisar a influência do modelo de ligação cecal e punção (CLP), na excreção de ligantes do receptor para produtos finais de glicação avançada (RAGE) e as modificações ocasionadas no cérebro pela inflamação sistêmica decorrente da sepse. Nossos resultados demonstraram que os níveis séricos de TNF-α aumentaram após a indução da CLP, confirmando o estado inflamatório dos animais CLP, ocorrendo um aumento nos níveis de proteínas carboniladas, HSP70 e HMGB-1 no soro desses animais, indicando um aumento de estresse oxidativo nesses animais e liberação de proteínas associadas a manutenção e estabilização intracelular. Entretanto, encontramos uma redução no imunoconteúdo de destas proteínas no hipocampo e córtex, possivelmente por aumento nos níveis de necrose/lise celular ou por eliminação durante o período de disrupção da BHE. Assim, concluímos que durante a sepse ocorre uma aumento expressivo nos níveis séricos de proteínas associadas a resposta inflamatória crônica, além de alterações nos níveis destas proteínas relacionadas a proteção intracelular no hipocampo e córtex, que pode ter relação com as alterações observadas em pacientes e modelos animais. Sepsis is a complex whole of molecular and cellular interactions mediated stimulation of cellular receptors involved in inflammation. The control of this system is compensated by pro and anti-inflammatory response in organism. The imbalance induced inflammatory alters the physiological state of different organs. In the brain, there are various modifications that involve from the increase in permeability of the blood-brain barrier (BBB), neural cell death by apoptosis or necrosis, reduced blood flow and increased oxidative stress, resulting in the development of sepsis-associated delirium. Sepsis-associated delirium is a whole of neurological dysfunctions induced a systemic inflammatory response. Thus, it is possible that different compensatory mechanisms are involved during sepsis. The aim of the study was to analyze the influence of the model cecal ligation and puncture (CLP), in the excretion of agonists for receptor advanced glycation end products (RAGE) and alterations in the brain caused by systemic inflammation caused by sepsis. Our results showed that serum levels of TNF-α increased after the induction of CLP, confirming the inflammatory status of CLP animals, which results in increased levels of carbonylated proteins, HSP70 and HMGB-1 in the serum of these animals, indicating an increase of stress oxidative these animals and release of proteins associated with maintaining and stabilizing intracellular. However, happened a reduction in immunocontent these proteins in the hippocampus and cortex, possibly by increased levels of necrosis/lysis cell or by removal during the period of disruption of the BBB. Therefore, concluded that during sepsis occurs a significant increase in serum proteins associated with chronic inflammatory response and changes in levels of proteins related to intracellular protection in the hippocampus and cortex, which may be related to the changes observed in patients and models animals.

Introdução: O modelo teórico, no qual perfis extremos de desigualdade coexistem num cenário complexo promovendo desfechos de saúde similares, denominado “similaridades nas desigualdades”, surgiu de evidências em humanos. O objetivo deste trabalho foi propor um modelo animal para refletir o fenômeno "similaridades nas desigualdades". Métodos: As ratas prenhes foram randomizadas pelo peso corporal, mantidas individualmente e no dia 10 de gestação foram divididas em três grupos: Controle (Cont), que recebeu ração padrão à vontade; Restrição Alimentar 50% (R50%), que recebeu 50% do consumo do grupo controle e Dieta Rica em Gordura (RG), que recebeu uma dieta rica em gordura à vontade. Essas dietas foram oferecidas a partir do dia 10 de gestação até o dia 21 de lactação. Em até 24 horas após o nascimento, todos os filhotes foram adotados por outras mães, formando os seguintes grupos: Cont_Cont, R50%_Cont, R50%_R50%, Cont_R50%, RG_Cont, RG_RG, Cont_RG. Peso corporal e consumo alimentar das genitoras, peso ao nascer, peso ao longo da vida e exercício físico voluntário foram comparados entre grupos por Equação de Estimação Generalizada (GEE), usando diferentes modelos estatísticos. ANOVA de duas vias foi usada para avaliar os desfechos de gordura abdominal e medidas bioquímicas. Resultados: O peso corporal das genitoras Cont e RG foi maior, comparado ao peso das genitoras R50%. Além de alguns efeitos isolados da exposição às dietas R50% ou RG durante momentos específicos perinatais (gestação e/ou lactação), o efeito das "similaridades nas desigualdades" foi observado no peso ao nascer (ambos filhotes R50% e RG foram mais leves do que os Cont) e na atividade física (os grupos extremos R50%_Cont e RG_Cont foram igualmente diferentes do grupo de referência Cont_Cont, sendo machos menos ativos e fêmeas mais ativas). O acompanhamento do peso corporal ao longo da vida mostrou que os machos pesaram mais que as fêmeas. Nenhum dos três modelos estatísticos evidenciou diferenças entre grupos no total de gordura abdominal. Conclusão: Este estudo contribui com a idéia de que as desigualdades em saúde estão relacionadas a resultados similares em saúde para ambos os extremos populacionais, e propõe um modelo animal para explorar ainda mais este efeito. Introduction: We have previously proposed a theoretical model in which extreme unequal social backgrounds coexist in a complex scenario promoting similar health outcomes, named “Similarities in the inequalities”, and had evidence of this effect in humans. Our objective was to propose an animal model to reflect the “Similarities in the inequalities” phenomenon. Methods: Rats were time-mated and randomly allocated to: Control (Adlib), receiving an ad libitum diet of standard laboratory chow, 50% food restricted (FR), receiving 50% of the ad libitum-fed dam’s intake and high fat diet (HF), receiving a diet containing 45.0% fat. These diets were provided from day 10 of pregnancy throughout the 21-day of lactation. Within 24 hours after birth, all pups were cross-fostered to other dams, forming the following groups: Adlib_Adlib, FR_Adlib, FR_FR, Adlib_FR, HF_Adlib, HF_HF, Adlib_HF. Dam’s body weight and show consumption, pup’s birth weight, growth and physical activity in running wheels, was compared between groups through GEE, using different statistical models. Twoway ANOVA was used to evaluate abdominal fat and biochemical outcomes. Results: Body weight of Adlib and HF dams was higher compared to FR dams. Apart from some isolated effects of the exposure to the FR or HF diets during specific perinatal times (gestation and/or lactation), the “Similarities in the inequalities” effect was seen in birth weight (both FR and HF pups were smaller than Adlib pups) and physical activity (the extreme groups FR_Adlib and HF_Adlib were similarly different from the reference group Adlib_Adlib, being less active in males and more active in females). Body weight monitoring throughout life showed that males were heavier than females. None of the three statistical models showed differences between groups in total abdominal fat. Conclusion: Our study contributes to the idea that health inequalities are related to similar health outcomes for both populational extremes, and proposes an animal model to further explore this effect.

A síndrome da angustia respiratória é caracterizada por uma inflamação bilateral, infiltrado intersticial e insuficiência respiratória. Acredita-se que o exercício físico seja benéfico na prevenção de doenças pulmonares. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do exercício físico sobre alguns parâmetros de estresse oxidativo, metabolismo energético e alterações na mecânica respiratória (complacência, elastância e resistência do sistema respiratório) no pulmão de ratos submetidos à lesão pulmonar. O efeito protetor do exercício físico também foi avaliado sobre às alterações da barreira alvéolo-capilar (contagem total de células, atividade da LDH e proteína total) e o conteúdo de fosfolipíedeos no lavado broncoalveolar, bem como sobre o infiltrado inflamatório e o edema no parênquima pulmonar. Os animais foram submetidos a dois meses de exercício físico moderado, realizado 3 vezes por semana. Transcorrido o período de exercício, a lesão pulmonar foi induzida através da injeção intratraqueal de LPS (100 g/100g de peso corporal) e doze horas após foram submetido à avaliação da mecânica respiratória e/ou foram mortos para a coleta do material. Foram avaliados parâmetros de estresse oxidativo [formação de espécies reativas, lipoperoxidação, dano oxidativo a proteínas, atividade de enzimas antioxidantes superóxido dismutase (SOD) catalase (CAT) glutationa peroxidase (GPX), níveis de nitritos, capacidade antioxidante total (TRAP), conteúdo de glutationa (GSH)] e fator nuclear kappabeta (NF-кβ/p65) no pulmão de ratos submetidos à lesão pulmonar Parâmetros de metabolismo energético também foram avaliamos [succinato desidrogenase (SDH), complexo II e citocromo c oxidase e níveis de ATP]. Resultados mostraram um aumento nos níveis de espécies reativas, lipoperoxidação, danos a proteínas, níveis de nitritos, bem como no NF-кβ/p65 no pulmão de ratos submetidos a lesão pulmonar. O exercício físico foi capaz de prevenir o aumento das espécies reativas, os níveis de nitritos o NF-кβ/p65; e parcialmente preveniu o dano às proteínas. As atividades da SOD e CAT não foram alteradas nos animais submetidos à lesão pulmonar. No entanto, no grupo lesão pulmonar e exercício houve um aumento na atividade dessas enzimas. A atividade da GPX e G6PD, níveis de GSH e TRAP estão diminuídos nos animais submetidos à lesão pulmonar; o exercício preveniu totalmente tais alterações. Resultados mostraram que os animais submetidos à lesão pulmonar apresentaram uma diminuição na atividade das enzimas da cadeia transportadora de elétrons e nos níveis de ATP e formação de edema pulmonar. Também observamos uma redução da complacência pulmonar e um aumento da resistência alveolar. O exercício preveniu totalmente a diminuição nas atividades do complexo II e SDH e a formação do edema, bem como preveniu parcialmente a resistência alveolar. Ratos submetidos à lesão pulmonar aguda apresentaram um aumento na contagem total de células, na atividade da LDH nas proteínas e uma diminuição nos fosfolipídeos no lavado broncoalveolar; exercício preveniu parcialmente somente o aumento na atividade da LDH. Nossos achados sugerem que o exercício físico pode ter um importante papel na prevenção de algumas alterações presentes na lesão pulmonar. Acute respiratory distress syndrome is characterized by pulmonary inflammation, interstitial infiltrates and respiratory failure. It is believed that exercise is beneficial in preventing lung diseases. The objective of the present study was evaluated the effects of physical exercise on some parameters of oxidative stress, energy metabolism and respiratory mechanics (dynamic and static compliance, elastance and respiratory system resistance) in the lungs of rats submitted to lung injury. The protective effect of physical exercise was also evaluated with regard to the alterations in the alveolar-capillary barrier (total cell count, activity of LDH and total protein) and phospholipids content in the bronchoalveolar lavage, as well as on the inflammatory infiltration and edema in the pulmonary parenchyma. The animals were submitted to two months of moderate physical exercise three times per week. After this period of physical exercise, lung injury was induced by intratracheal instillation of LPS (100g/100g body weight) and twelve hours after the injury were performed the respiratory mechanical and/or were killed and collected material. It was evaluated oxidative stress parameters [formation of reactive species, lipid peroxidation, oxidative damage to protein, antioxidant enzymes superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), glutathione peroxidase (GPx), nitrite levels, total antioxidant capacity (TRAP), glutathione content (GSH)] and nuclear factor-kappa Beta (NF-кβ/p65) in lung of rats submitted to lung injury. Parameters of energy metabolism were also evaluating [succinate dehydrogenase (SDH), complex II and cytochrome c oxidase, and ATP levels]. Results showed an increase in reactive species production, lipid peroxidation, oxidative damage to protein, as well as nitrite levels, as well NF-кβ/p65 in lung of rats submitted to lung injury. Physical exercise was able to totally prevent the increase in reactive species, nitrite levels and NF-кβ/p65, but partially prevented the damage to protein. The activities of SOD and CAT were not changed in animals submitted to lung injury. However in exercise–lung injury rats group the activities of these enzymes were increased. The activity of GPx, GSH content and TRAP were decreased in lung of rats submitted to lung injury. Physical exercise totally prevented such effects. Results showed that rats subjected to lung injury presented a decrease in activities of the enzymes of the electron transport chain and ATP levels as well as presented the pulmonary edema formation. It was also observed decreased lung dynamic and static compliance and increased in respiratory system resistance. Physical exercise was able to totally prevent the decrease in SDH and complex II activities and the pulmonary edema formation, as well partially prevented the respiratory system resistance. Rats subjected to lung injury presented an increase in total cell, activity of LDH, total protein and phospholipids content in bronchoalveolar lavage; exercise only partially prevented the increase in the activity of LDH. Our findings suggest that exercise may have an important role as protector in some alterations presents in lung injury.

O status epilepticus (SE) é caracterizado por uma crise epiléptica com duração maior que 30 minutos ou crises sucessivas nas quais os níveis de consciência do paciente não são recuperados entre elas. O SE, quando ocorrido durante a infância, pode induzir morte neuronal e levar a alterações comportamentais e cognitivas na idade adulta. O dano cerebral induzido pelo SE têm sido frequentemente relacionado à excitotoxicidade glutamatérgica, principalmente através da hiperestimulação de receptores do tipo NMDA (NMDAR), levando a um excessivo influxo de íons Ca+2 no neurônio, podendo causar morte celular. No presente estudo, investigamos os efeitos de antagonistas de NMDAR sobre a morte neuronal e as alterações comportamentais em animais submetidos ao modelo de SE induzido por LiCl-pilocarpina durante períodos iniciais do desenvolvimento cerebral. Ratos Wistar de 16 dias de vida (P16) receberam uma injeção de pilocarpina (60 mg/kg i.p.) 12-18 h após terem recebido LiCl (3 mEq/kg i.p.). Animais controle receberam salina 0,9%. Na primeira parte deste trabalho, nós investigamos o efeito do antagonista não competitivo e não seletivo de NMDAR, cetamina, administrado após o início das crises, sobre a morte neuronal e as alterações comportamentais induzidas pelo SE. Neste trabalho, observou-se que o SE induzido no início da vida leva a uma expressiva perda neuronal na região CA1 do hipocampo, na habenula, na amigdala e no tálamo 24 após a convulsão. O tratamento com cetamina foi capaz de interromper as convulsões, prevenindo, também, a neurodegeneração. Além disso, o SE induzido em P16 causou aumento nos níveis de ansiedade durante o período adulto, e a intervenção com cetamina foi capaz de reduzir o efeito ansiogênico do SE. Além disso, observou-se um efeito ansiogênico da administração de cetamina per se em animais que não foram submetidos ao SE. Na segunda parte deste estudo, após identificar que o bloqueio de NMDAR é capaz de prevenir os danos a curto e longo prazo induzidos pelo SE, investigamos qual o papel dos NMDAR contendo a subunidade GluN2B na neurodegeneração induzida pelo SE. Neste trabalho, observamos que, diferentemente do bloqueio dos NMDAR através do uso da cetamina, a administração dos antagonistas específicos de NMDAR contendo a subunidade GluN2B, CP-101606 (taxoprodil) e CI-1041 (besonprodil), não foi capaz de terminar as crises convulsivas do SE. No entanto foi eficaz na redução da mortalidade em comparação com os animais SE. Observou-se ainda que diferentemente da cetamina, o bloqueio de NMDAR contendo a subunidade GluN2B não foi capaz de reverter totalmente o dano cerebral induzido pelo SE. Animais que sofreram SE e receberam CI-1041 durante as convulsões apresentaram uma redução na neurodegeneração somente em algumas regiões como hipocampo e amígdala, indicando um efeito neuroprotetor deste composto. No entanto, animais que receberam CP-101606 durante o SE não apresentaram redução na degeneração neuronal nas regiões analisadas. Nossos resultados sugerem, portanto, que o sistema glutamatérgico é um alvo em potencial para o tratamento da neurodegeneração induzida por crises epilépticas prologadas, e que o antagonismo de NMDAR pode servir, pelo menos, como terapia farmacológica complementar em pacientes que sofrem SE durante a infância. Além disso, nossos dados sugerem existir o envolvimento de outras subunidades do NMDAR, além da GluN2B, no dano neuronal induzido pelo SE. Status epilepticus (SE) is characterized as a prolonged seizure activity or repeated seizures lasting more than 30 min. For immature brains, SE is associated with cellular and behavioral alterations such as neuronal loss and behavioral impairment during adulthood. Brain damage induced by SE has frequently been related to glutamatergic excitotoxicity, mainly through NMDA receptors overstimulation (NMDAR), which can lead to neurodegeneration. In the present study, we investigated the effects of NMDAR antagonists on short- (neuronal death) and long-term (behavioral changes) alterations in animals subjected to SE early in life. Rat pups were injected with LiCl (3 mEq/kg i.p.) 12-18 h prior to pilocarpine (60 mg/kg i.p. - SE group) or saline (0.9%) administration on 16th postnatal day (P16). In the first part of this study, we administered the noncompetitive and non-selective NMDAR antagonist, ketamine, after SE onset to investigate the effect NMDAR blocking on neuronal death and behavioral changes induced SE. We observed that SE induced caused a significant neuronal loss in the CA1 region of the hippocampus, habenula, amygdala and thalamus 24 h after seizures. Treatment with ketamine was able to terminate seizures and to prevent neurodegeneration induced by SE. Moreover, young animal treated with LiCl-pilocarpine presented elevated levels of anxiety at adulthood. Treatment with ketamine prevented this ansiogenic effect of SE. In addition, administration of ketamine alone also induced an increase in anxiety levels in adulthood. In the second part of the study, we investigate the role of NMDAR-containing GluN2B subunit in the neurodegeneration induced by early-life SE. In this work, we found that blocking of NMDAR containing the GluN2B subunit by the compounds CP-101606 (taxoprodil) and CI-1041 (besonprodil) was unable to terminate seizures induced by SE, in contrast to that observed for ketamine treatment. However, treatment with antagonists of NMDAR-containing GluN2B subunit was effective in reducing mortality as compared to SE animals. CP-101606 and CI-1041 treatment were not able to completely reverse the brain damage induced by SE. Animals that were underwent SE and received CI-1041 during seizures presented a reduction in neurodegeneration in some regions such as the hippocampus and amygdala. However, animals that received CP-101606 during SE did not present a reduction in neuronal degeneration in all regions analyzed. Our results therefore suggest that glutamatergic system is a potential target for the treatment of SE, and that antagonism of NMDAR could be used at least as a complementary pharmacotherapy in patients suffering SE during childhood. Furthermore, our data suggest that there is involvement of other NMDAR subunits, beyond GluN2B, in neuronal damage induced by SE.

Gap junctions are communicating junctions which are important for tissue homeostasis, and their disruption is involved in carcinogenic processes. This study aimed to verify the influence of deletion of one allele of the Connexin 43 gene on cancer incidence in different organs. The 7, 12-dimethylbenzanthracene (DMBA) carcinogenic model, using hebdomadary doses by gavage of 9 mg per animal, was used to induce tumors in Connexin 43 heterozygous or wild-type mice. The experiment began in the eighth week of the mice life, and all of them were euthanized when reaching inadequate physical condition, or at the end of 53 weeks. No statistical differences occurred for weight gain and cancer survival time (P=0.9853) between heterozygous and wild-type mice. Cx43+/−mice presented significantly higher susceptibility to lung cancer (P=0.0200) which was not evidenced for benign neoplasms (P=0.3449). In addition, incidence of ovarian neoplasms was 2.5-fold higher in Cx43+/−mice, although not statistically significant. Other organs showed a very similar cancer occurrence between Cx43 groups. The experiment strengthens the evidence of the relationship between Connexin 43 deficiency and carcinogenesis.

Platelet-activating factor (PAF) and its receptor (PAFR) have been shown to be involved in several inflammatory events, including neutrophil chemoattraction and nociception. The present study addressed the role of PAF in the genesis of articular hyperalgesia in a model of joint inflammation. Zymosan-induced articular hyperalgesia, oedema and neutrophil migration were dose-dependently reduced following pretreatment with selective PAFR antagonists, UK74505 (5, 10 and 20 mg/kg) and PCA4248 (3, 10, 30 mg/kg). These parameters were also reduced in PAF receptor-deficient mice (PAFR(-/-)). The hyperalgesic action of PAF was further confirmed by the demonstration that joint injection of PAF induces a dose- (0.3, 1 and 3 μg/joint), time- and PAFR-dependent articular hyperalgesia and oedema. The PAF hyperalgesic mechanisms were dependent on prostaglandins, leukotrienes and neutrophils, as PAF-induced articular hyperalgesia was inhibited by indomethacin (COX inhibitor), MK886 (leukotrienes synthesis inhibitor) or fucoidan (leukocyte rolling inhibitor). Furthermore, PAF-induced hyperalgesia was reduced in 5-lypoxigenase-null mice. In corroboration of these findings, intra-articular injection of PAF promotes the production of LTB(4) as well as the recruitment of neutrophils to the joint. These results suggest that PAF may participate in the cascade of events involved in the genesis of articular inflammatory hyperalgesia via stimulation of prostaglandins, leukotrienes and neutrophil migration. Finally, targeting PAF action (e.g., with a PAFR antagonist) might provide a useful therapeutic approach to inhibit articular inflammatory hyperalgesia.

O pré-condicionamento (PC) é um fenômeno biológico decorrente da exposição de um tecido ou órgão a um estímulo sub-letal capaz de promover adaptações teciduais que levam a uma proteção a um evento subsequente similar. Alguns estímulos, no entanto podem levar a uma proteção mesmo quando a lesão subsequente é de natureza distinta, isto é chamado de tolerância cruzada. Estudos experimentais vêm utilizando esta estratégia para reduzir o dano provocado pelo acidente vascular encefálico. Com o objetivo de testar a possível tolerância cruzada que o evento isquêmico produziria sobre a lesão causada pela hemorragia, testamos um modelo de pré-condicionamento cruzado induzido por 10 ou 20 minutos de oclusão bilateral das artérias carótidas comuns sobre a hemorragia intracerebral (HIC) induzida por colagenase tipo IV-S no estriado dorsolateral. Para tanto, utilizamos 60 ratos Wistar machos adultos que foram divididos em 6 grupos: sham, PC10, PC20, HIC, PC10+HIC e PC20+HIC. De acordo com o grupo, os animais receberam 10 ou 20 minutos de pré-condicionamento isquêmico (exceto os grupos sham e HIC) e 24 horas após foram submetidos à hemorragia intracerebral ou a cirurgia sham, onde os animais receberam apenas salina. Os animais foram avaliados quanto ao seu desempenho motor através do teste do cilindro e teste da escada horizontal durante o período do experimento. Vinte dias após a indução da HIC, os animais foram perfundidos e foram obtidas amostras do tecido encefálico para a avaliação do volume da lesão e densidade óptica regional de astrócitos (GFAP+) e microglia (CD11b). Em nossos resultados detectamos que 10 ou 20 minutos de PC foram capazes de proteger o tecido da lesão promovida pela HIC (p

It is well recognized that the reference gene in a RT-qPCR should be properly validated to ensure that gene expression is unaffected by the experimental condition. We investigated eight potential reference genes in two different pilocarpine PILO-models of mesial temporal lobe epilepsy (MTLE) performing a stability expression analysis using geNorm, NormFinder and BestKepeer softwares. Then, as a validation strategy, we conducted a relative expression analysis of the Gfap gene. Our results indicate that in the systemic PILO-model Actb, Gapdh, Rplp1, Tubb2a and Polr1a mRNAs were highly stable in hippocampus of rats from all experimental and control groups, whereas Gusb revealed to be the most variable one. In fact, we observed that using Gusb for normalization, the relative mRNA levels of the Gfap gene differed from those obtained with stable genes. On the contrary, in the intrahippocampal PILO-model, all softwares included Gusb as a stable gene, whereas B2m was indicated as the worst candidate gene. The results obtained for the other reference genes were comparable to those observed for the systemic Pilo-model. The validation of these data by the analysis of the relative expression of Gfap showed that the upregulation of the Gfap gene in the hippocampus of rats sacrificed 24 hours after status epilepticus (SE) was undetected only when B2m was used as the normalizer. These findings emphasize that a gene that is stable in one pathology model may not be stable in a different experimental condition related to the same pathology and therefore, the choice of reference genes depends on study design.

Nifurtimox and benznidazole, medications currently used for the treatment of the Chagas disease, are not always successful. We determine whether (−)-cubebin and (−)-hinokinin could be used as alternative drugs for the treatment of parasitic infections by Trypanosoma cruzi. To this end, male BALB/c mice were treated with both drugs, and the nuclear parameters (largest diameter, smallest diameter, and perimeter) were determined from slides prepared from the spleen, liver, and heart. The cytotoxicity of the substances was determined after 24-h treatment. Results revealed increased cell nuclei in untreated infected animals as compared to uninfected mice. The values obtained for infected animals treated with (−)-cubebin and (−)-hinokinin were close to those observed for uninfected mice. For the spleen, perimeter values of 10.85 μm (p

Endometriosis is defined as the presence of endometrial tissue (gland and stroma) outside the uterus. The objective of this study was to design a model of subcutaneous endometriosis in rats for the evaluation of the effect of drugs and the pathophysiology of endometriosis. Initially, female Wistar rats (Rattus norvergicus) were implanted subcutaneously with 4x4 mm uterine fragments to evaluate endometrioma growth after 1, 7, 14 and 21 days. Endometrial tissue implants were confirmed by histological analysis. The greatest relative weight gain was observed on the 14th day (wet weight 29.17 ± 6.79 mg%; dry weight 5.36 ± 0.97 mg%). Subsequently, animals were assigned to treatment groups and given either estradiol (2.5 mg/kg, 5 mg/kg, 10 mg/kg sc), medroxyprogesterone acetate (0.5 mg/kg, 2 mg/kg, 5 mg/kg sc), triptorelin pamoate (0.18 mg/kg, 0.56 mg/kg sc) and acetylsalicylic acid (3 mg/kg gavage) on the fifth day following implantation. Wet and dry relative weight of the endometrioma were used as a indicator of growth for model of endometriosis. In the group treated with estradiol, the average wet weight and dry weight on the 14 th day following implantation was 36.62 ± 4.97 mg% and 3.97 ± 1 mg% (2.5 mg), 56.37 ± 20.19 mg% and 9.11 ± 3.85 mg% (5 mg), and 173.89 ± 69.53 mg% and 27.67 ± 10.27 mg% (10 mg), respectively. In the group treated with medroxyprogesterone acetate, the corresponding figures were 13.58 ± 2.53 mg% and 2.67 ± 0.5 mg% (0.5 mg), 14.29 ± 2.07 mg% and 3.71 ± 1.31 mg% (2 mg), and 15.33 ± 7.08 mg% and 2.68 ± 1.44 mg% (5 mg). In the group treated with triptorelin pamoate, the corresponding figures were 20.04 ± 4.02 mg% and 5.21 ± 1.54 mg% (0.18 mg), and 10.86 ± 1.88 mg% and 1.89 ± 0.29 mg% (0.56 mg). In the group treated with 3 mg acetylsalicylic acid, the corresponding figures were 12.81 ± 2.04 mg% and 2.09 ± 0.4 mg%. In the estradiol group, growth gain was dose-dependent: animals receiving 10 mg differed significantly from animals receiving lower doses and from untreated animals (p

A Paralisia Cerebral (PC) é causada por lesões não progressivas no encéfalo em desenvolvimento gerando comprometimentos secundários normalmente acompanhados de mudanças morfológicas, bioquímicas e fisiológicas no sistema neuromuscular. O enriquecimento ambiental (EA) é uma combinação de estímulos de interação social, atividade física e aprendizagem que busca mimetizar a intervenção fisioterápica. Assim, o objetivo desta dissertação foi estudar se o EA é capaz de prevenir o estabelecimento de comprometimentos motores em um modelo de PC em ratos. Foram utilizadas ratas Wistar grávidas para indução do modelo experimental de PC. Os filhotes machos foram divididos em 4 grupos: controle (grupo CT), animais mantidos no enriquecimento ambiental (grupo EA), animais com paralisia cerebral (grupo PC) e animais com paralisia cerebral mantidos em enriquecimento ambiental (grupo PC-EA). A avaliação das habilidades motoras foi realizada no vigésimo nono dia pós-natal utilizando os seguintes testes: Campo Aberto, Rotarod, Escada Horizontal, Barra Estreita e comprimento da passada. As análises histológicas avaliaram a área média das fibras do músculo sóleo, a área média dos somas dos motoneurônios e expressão de sinaptofisina no corno ventral da medula espinhal. O EA mostrou ser capaz de prevenir os déficits motores, porém não reverteu a atrofia das fibras musculares observadas nos animais PC. Além disso, foi verificado um aumento na área média dos motoneurônios e um aumento na expressão de sinaptofisina no corno ventral da medula espinhal de animais com PC mantidos em EA, em relação aos que viveram em ambiente padrão. Dessa forma, o incremento de estímulos proporcionado pelo EA pode prevenir a instalação de déficits motores e alterações histológicas em um modelo de PC em ratos. Cerebral Palsy (CP) results from nonprogressive lesions in the immature brain generating secondary impairments usually accompanied by morphological, biochemical and physiological changes in neuromuscular system. Environmental enrichment (EE) is a combination of stimuli including social interaction, physical activity and learning experiences that seeks to mimic the physiotherapy intervention. Therefore, the aim of this study was to verify whether EE is able to prevent the establishment of motor impairment in a rat model of CP. Pregnant Wistar rats were used to induce the experimental model of CP associating the maternal exposure to low doses of bacterial endotoxin, perinatal anoxia and sensorimotor restriction of the pups. Pups were divided into 4 groups: control (CT group), animals reared in environmental enrichment (EE group), animals submitted to cerebral palsy model (CP group) and animals submitted to cerebral palsy model reared in environmental enrichment (CP-EE group). The assessment of motor skills was held on the twenty-ninth post natal day using the following tests: Open Field Test, Rotarod, Horizontal Ladder, Narrow Suspended Bar and stride length. The histological analysis evaluated the mean cross-sectional area (CSA) of the soleus muscle fibers, the mean CSA of motoneuronal somata and expression of synaptophysin in the ventral horn of the spinal cord. EE was able to prevent the motor deficits, however did not reverse the muscle atrophy observed in CP animals. Furthermore, there was an average increase in the mean area of motoneurons and an increase in the expression of synaptophysin in the ventral horn of the spinal cord of animals submitted to CP model reared in EE in relation to CP animals reared in a standard environment. Hereupon, the stimulus increment provided by EE can prevent the onset of motor deficits and histological changes in a CP rat model.

Congenital diaphragmatic hernia (CDH) is associated with pulmonary hypertension which is often difficult to manage and a significant cause of morbidity and mortality. Our aim was to study the pulmonary artery reactivity in an animal model of CDH. To investigate the reactivity of the aorta and left pulmonary artery in a rabbit model of CDH, we studied the in vitro responses to the α1-adrenoceptor agonist phenylephrine (PE) and to both the muscarinic receptor agonist (ACh) and the nitric oxide (NO) donor sodium nitroprusside (SNP). Rabbits underwent surgery at 25 days of gestation. CDH was created in one fetus per horn (n = 8). Remaining fetuses were considered controls (n = 18). At term (30 days), the lung, left pulmonary artery, and aorta were dissected. In a separate group, endothelium was mechanically removed. There were no differences in the contractile and relaxing responses of aorta in all groups. In left pulmonary artery, PE-induced contractions were significantly greater (p

O acidente vascular encefálico (AVE), classificado conforme a etiologia do dano em isquêmico ou hemorrágico, apresenta-se como uma importante causa de mortalidade e redução da capacidade funcional em adultos de todo o mundo. Apesar de alguns estudos em humanos sugerirem um perfil de recuperação sensório-motora diferenciado entre os subtipos isquêmico e hemorrágico, estes dados não são conclusivos dada a heterogeneidade desses insultos. Dessa forma, o objetivo da presente tese foi estabelecer um desenho experimental comparativo entre AVE isquêmico e hemorrágico, reduzindo a heterogeneidade das lesões, para que, então, pudéssemos avaliar de forma mais objetiva o perfil comportamental de recuperação sensório-motora e a reatividade astroglial positiva para a proteína glial fibrilar ácida (GFAP) entre os mencionados subtipos etiológicos de AVE. Para tanto, 36 ratos Wistar adultos foram utilizados, sendo os mesmos subdivididos nos grupos Sham, Isquemia e Hemorragia cerebral. Os modelos de AVE isquêmico e hemorrágico foram induzidos por microinjeções estereotáxicas de endotelina-1 (ET-1) e colagenase do tipo IV-S, respectivamente. Essas injeções foram realizadas no córtex sensoriomotor e no estriado dorsolateral dos animais, tendo em vista que as mencionadas estruturas são comumente acometidas pelo AVE. Todos os grupos foram avaliados quanto à recuperação espontânea nos testes do campo aberto, cilindro e teste da escada horizontal, em diferentes tempos pós-cirúrgicos, ao longo de 30 dias. Avaliações histológicas e estereológicas foram utilizadas para estimar o volume e a extensão das lesões produzidas. Além disso, a técnica imunoistoquímica para a GFAP foi empregada com o intuito de avaliar a densidade astrocitária, densidade óptica regional e celular no tecido perilesional. Nossos resultados demonstram que ambos os subtipos de AVE experimental exibiram um perfil comparável de recuperação sensório-motora, de dano morfológico (volume e extensão das lesões) e de imunorreatividade à GFAP no tecido adjacente à lesão. No entanto, quanto à habilidade na marcha em longo prazo, os animais hemorrágicos demonstram uma sutil, mas significativa, melhora na recuperação quando comparados aos seus pares isquêmicos. Dessa forma, sugerimos que o proposto desenho experimental pode ser útil para reduzir a heterogeneidade do AVE, de modo a permitir um adequado estudo comparativo da neurobiologia da recuperação funcional e do remodelamento plástico pós-lesão. Além disso, os nossos resultados evidenciam pontuais diferenças no processo de recuperação funcional entre os subtipos isquêmico e hemorrágico, as quais parecem não se relacionar com a imunorreatividade à GFAP. Stroke causes disability and mortality worldwide and is divided into ischemic and hemorrhagic subtypes. Although clinical trials suggest distinct recovery profiles for ischemic and hemorrhagic events, this is not conclusive due to stroke heterogeneity. The aim of this study was to produce similar brain damage, using experimental models of ischemic (IS) and hemorrhagic (HS) stroke and evaluate the motor spontaneous recovery profile and glial fibrillary acidic protein (GFAP) immunoreactivity. We used 36 Wistar rats divided into the following groups: Sham, ischemic stroke or hemorrhagic stroke. Brain ischemia or hemorrhage was induced by endotelin-1 (ET-1) and collagenase type IV-S (collagenase) microinjections, respectively. For both stroke subtypes, sensorimotor cortex and dorsolateral striatum were damaged. All groups were evaluated in the open field, cylinder and ladder walk behavioral tests at distinct time points as from baseline to 30 days post-surgery (30 PS). Histological and morphometric analyses were used to assess the volume of lost tissue and lesion length. GFAP immunoreactivity was assessed by estimation of astrocytic density plus cellular and regional optical density measures. Present results reveal that both forms of experimental stroke had a comparable long-term pattern of damage, since no differences were found in volume of tissue lost or lesion size 30 days after surgery. However, behavioral data showed that hemorrhagic rats were less impaired at skilled walking than ischemic in a long-term analysis. In addition, both forms of experimental stroke had a comparable long-term pattern of glial fibrillary acidic protein immunoreactivity for analyzed structures, including astrocytic density, cellular and regional optical density. We suggest that experimentally comparable stroke design is useful because it reduces heterogeneity and facilitates the assessment of neurobiological differences related to stroke subtypes. Also, spontaneous skilled walking recovery differs between experimental ischemic and hemorrhagic insults; behavioral differences probably are not related to GFAP immunoreactivity. Thus, behavioral and neuroplastic recovery differences after stoke subtypes is a matter that may needs more attention in basic and translational stroke research.

A restrição calórica (RC) é uma dieta caracterizada por redução na quantidade total de calorias consumidas sem que ocorra desnutrição e tem sido associada a efeitos benéficos sobre a saúde, incluindo modulação sobre o estado redox. Alguns estudos têm avaliado os efeitos da RC sobre o sistema nervoso central, especialmente na senescência e em condições neurodegenerativas. Entretanto, devido a dados inconsistentes e/ou controversos da literatura, novos estudos são necessários para ampliar o conhecimento no tema e consolidar mecanismos de ação da RC. No presente trabalho investigou-se os efeitos de 30% de RC crônica em ratos Wistar machos na fase adulta, totalizando 17 semanas, em dois contextos experimentais. No primeiro, avaliou-se os efeitos da RC crônica sobre parâmetros relacionados ao estado redox e ao dano celular e sobre defesas antioxidantes não-enzimáticas e enzimáticas em rim, coração e fígado. Demonstrou-se que a RC crônica causou um aumento significativo na atividade da catalase no rim, na carbonilação de proteínas no coração e no conteúdo de glutationa (GSH) no fígado, além de reduzir a geração de espécies reativas (ER) hepáticas. No segundo contexto experimental avaliou-se o possível efeito neuroprotetor da RC crônica sobre parâmetros cognitivos, bioquímicos e morfológicos no córtex cerebral frontal, no hipocampo e no estriado, mediante modelo de demência por infusão intracerebroventricular (ICV) de estreptozotocina (STZ). Demonstrou-se que a RC crônica melhorou todos os parâmetros da memória de referência avaliados através do teste do labirinto aquático de Morris. No córtex cerebral frontal, a RC e a infusão ICV de STZ causaram uma redução na geração de ER sem alterar os outros parâmetros. No hipocampo, a STZ causou uma diminuição significativa no conteúdo da GSH e da proteína sinaptofisina (SYN), sendo que a RC foi capaz de prevenir e/ou reverter a diminuição de GSH. Ainda a RC per se aumentou a geração de ER. As imagens obtidas com a microscopia confocal revelaram redução na imunoreatividade da SYN e aumento da imunoreatividade da GFAP no hipocampo dos animais submetidos à infusão ICV de STZ. No estriado, tanto a RC como a STZ causaram uma diminuição do conteúdo de GSH, sem alterar os outros parâmetros. Concluiu-se que a RC crônica é capaz de modular o estado redox em diferentes tecidos periféricos, entretanto, os efeitos da RC são tecido-específico, ou seja, podem variar dependendo do tipo de tecido estudado. Além disso, concluiu-se que a RC crônica é capaz de prevenir e/ou recuperar os prejuízos cognitivos e as alterações hipocampais encontradas no modelo de demência induzido por STZ. The caloric restriction (CR) diet is characterized by a reduction in the quantity of calories consumed without the occurrence of malnutrition. It has been associated with beneficial health effects, including modulation of the redox status. Studies have evaluating the effects of CR on central nervous system, particularly in aging and neurodegenerative conditions. However, due to inconsistent and/or controversial literature, further studies are needed to increase the knowledge and consolidate mechanisms of CR action. It was investigated the effects of 30% of chronic CR in adult male Wistar rats followed by 17 weeks, in two experimental contexts. At first, it was evaluated the effects of chronic CR on parameters related to oxidative status and oxidative damage and also on non-enzymatic and enzymatic cellular antioxidant defenses in the kidney, heart and liver. Chronic CR caused a significant increase in catalase activity in kidney, in protein carbonylation in heart and in glutathione (GSH) content in liver, and it caused a significant decrease in generation of reactive species (RS) in the liver. In the second experimental context, it was evaluated the effects of chronic CR on cognitive parameters and on biochemical and morphological changes in frontal cerebral cortex, hippocampus and striatum in model of dementia induced by intracerebroventricular (ICV) infusion of streptozotocin (STZ). Chronic CR was able to improve all deficits of reference memory assessed by the Morris water maze test. In the frontal cerebral cortex, CR and ICV infusion of STZ decreased RS generation without affecting other parameters. In the hippocampus, STZ decreased GSH and synaptophysin (SYN) contents. CR was able to prevent and/or revert the decrease in GSH content and it also has a per se effect in increasing RS generation. Images from confocal microcopy showed a reduction in SYN expression and an increase in GFAP expression in the hippocampus of rats submitted to ICV infusion of STZ. In the striatum, both CR and STZ decreased GSH levels without altering other parameters. In summary, chronic CR was able to modulate the redox state in various peripheral tissues, however, the effects of CR are tissue-specific, i.e, may vary depending on the type of tissue studied. The main conclusion is that chronic CR is able to prevent and/or revert cognitive impairments and hippocampal alterations in the animal model of dementia induced by STZ.

Introdução: As Mucopolissacaridoses (MPS) são doenças lisossômicas causadas pela deficiência de enzimas envolvidas na degradação dos glicoaminoglicanos. O acúmulo anormal dessa molécula compromete a função celular e orgânica, levando a um espectro de manifestações clínicas, de caráter multissistêmico e progressivo. Manifestações gastrointestinais, tais como episódios frequentes de fezes amolecidas e diarréia, têm sido frequentemente evidenciadas e relatadas por pacientes com MPS. Ainda que os sintomas gastrointestinais sejam frequentemente ofuscados pelos fenótipos neurológicos graves, eles podem afetar a qualidade de vida dos pacientes e de seus familiares. Objetivo: Avaliar as manifestações gastrointestinais em pacientes com MPS que estavam ou não recebendo Terapia de Reposição Enzimática (TRE). Adicionalmente, para melhor compreender o assunto, avaliamos a histologia da mucosa intestinal em camundongos com MPS I. Métodos: Estudo transversal com amostragem de conveniência. Foram incluídos no estudo pacientes com diagnóstico de qualquer tipo de MPS que estavam ou não em TRE. Os sujeitos foram avaliados através de inquérito alimentar, questionamentos quanto ao aparecimento de sintomas gastrointestinais e realização de uma série de exames bioquímicos. Adicionalmente, foram realizados testes de bioimpedância elétrica (para avaliação da composição corporal) e teste molecular para hipolactasia primária a partir de amostras de DNA dos pacientes, assim como análise da histologia da mucosa intestinal em um modelo de camundongo com MPS I. Resultados: Foram incluídos 27 pacientes com diferentes tipos de MPS, sendo 15 (55,6%) do sexo feminino e 12 (44,4%) do sexo masculino, com mediana de idade de 12 (1-28) anos. Os sintomas gastrointestinais mais prevalentes foram flatulência, distensão abdominal, dor abdominal e fezes amolecidas. Houve diferença significativa na prevalência de flatulência entre os tipos de MPS (p=0,004). A prevalência de flatulência e de distensão abdominal foi significativamente maior no grupo dos que não recebiam TRE, em comparação ao grupo dos que recebia TRE (p = 0,04 e 0,03, respectivamente). A maioria dos exames bioquímicos realizados para investigação e/ou exclusão de alguma patologia específica apresentaram resultados normais, sugerindo que o aparecimento de sintomas gastrointestinais nesses pacientes possa ser decorrente da própria MPS através de mecanismo fisiopatológico independente. A análise da histologia do intestino delgado de camundongos MPS I identificou células aumentadas de volume, sugerindo algum tipo de acúmulo intracelular. Em relação ao Teste Molecular para Hipolactasia, 58,8% dos pacientes apresentaram genótipo CC, o qual é compatível com intolerância à lactose. Os exames de Bioimpedância Elétrica sugerem que, os pacientes em TRE apresentam menor proporção de massa gorda (MG) em relação aos pacientes que não estavam em TRE. Conclusão: Este foi o primeiro estudo sobre manifestações gastrointestinais de pacientes brasileiros com MPS realizado em nosso meio. Inúmeros sinais e sintomas foram observados, com maior prevalência relativa nas MPS I, II, III e IV do que na MPS VI. O sintoma mais frequentemente relatado foi flatulência. Embora não tenha sido estatisticamente significativo a diferença, a proporção de pacientes com sintomas gastrointestinais foi menor nos pacientes que estavam em TRE. A Intolerância à lactose observada em maior proporção nos pacientes com MPS com manifestações gastrointestinais, a avaliação da composição corporal e as alterações observadas na mucosa intestinal do camundongo com MPS I devem ser levadas em consideração na interpretação dos resultados. Acreditamos que mais estudos, dirigidos para as manifestações gastrointestinais, devam ser realizados para comprovar esses achados e melhor compreender os mecanismos fisiopatológicos dos sintomas relacionados nos pacientes aferidos. Introduction: The mucopolysaccharidoses (MPS) are lysosomal storage disorders characterized by a deficiency in enzymes involved in glycosaminoglycan degradation. Abnormal accumulation of this molecule compromises cellular and organic function, leading to a spectrum of progressive, multisystem clinical manifestations. Gastrointestinal manifestations, such as frequent episodes of loose stools and diarrhea, are often reported by patients with MPS. Although these gastrointestinal symptoms are often overshadowed by severe neurological phenotypes, they can have a negative impact on the quality of life of patients and their family members. Objective: To assess gastrointestinal manifestations in patients with MPS who were or not receiving enzyme replacement therapy (ERT). Furthermore, we sought to assess bowel mucosa histology in a mouse model of MPS I. Methods: Cross-sectional study with a convenience sampling strategy. The sample comprised patients with a diagnosis of MPS of any type and regardless of ERT status. Patients were assessed by means of a dietary recordatory and an interview focused on gastrointestinal symptoms, as well as a battery of biochemical tests. Bioelectrical Impedance was performed for body composition assessment.Patient DNA samples were also tested by molecular tests for primary lactase hypolactasia, and bowel mucosa specimens from MPS I mice underwent histological examination. Results: A total of 27 MPS patients were included, 15 (55.6%) female and 12 (44.4%) male, with a median age of 12 (1-28) years. The most prevalent gastrointestinal symptoms were flatulence, abdominal distension, abdominal pain, and loose stools. A significant difference in the prevalence of flatulence was observed among different MPS types (p=0.004). The prevalence of flatulence and abdominal distension was significantly higher in the non-ERT group than in the ERT group (p = 0.04 and 0.03 respectively). Most biochemical tests performed to work up and/or rule out specific conditions were within normal limits, which suggests that the development of gastrointestinal systems in these patients may be due to MPS itself through an independent pathophysiological mechanism. Histological analysis of smallbowel tissue from MPS I mice found increased cell volume indicative of some form of intracellular accumulation. On molecular testing for lactase deficiency, 58.8% of patients had the CC genotype, which is consistent with lactose intolerance. Bioelectrical Impedance analysis suggest that patients with TRE have lower proportion of fat mass (FM) compared to patients who were not on ERT. Conclusion: This was the first study to assess gastrointestinal manifestations in Brazilian patients with different MPS subtypes.Several signs and symptoms were observed with higher relative prevalence in MPS I, II, III and IV to that in MPS VI. The most frequently reported symptom was flatulence. Although was no statistical difference the proportion of patients with gastrointestinal symptoms was lower in patients on ERT.The lactose intolerance observed in a higher proportion of MPS patients with gastrointestinal manifestations, body composition assessment and observed changes in the bowel mucosa of MPS I mice should be taken into account when interpreting the results. Further studies focusing on the gastrointestinal manifestations of MPS are warranted to corroborate our findings and provide a better understanding of the pathophysiological mechanisms associated with these symptoms in affected patients.

A fenilcetonúria (PKU) é causada pela deficiência severa da atividade da fenilalanina hidroxilase (PAH), enzima responsável pela conversão de fenilalanina (Phe) em tirosina (Tyr), levando ao aumento dos níveis sanguíneos e teciduais de Phe, bem como de seus metabólitos fenilpiruvato (PPA), fenilactato (PLA) e fenilacetato (PAA). Os pacientes com PKU apresentam disfunção neurológica severa, manifestando convulsões, retardo mental e psicomotor, sintomas que estão associados ao acúmulo desse aminoácido e seus metabólitos. A restrição dietética, que faz parte do tratamento da PKU, nem sempre é mantida pelos pacientes e pode afetar o status antioxidante devido à restrição de nutrientes. Estudos recentes em ratos e com pacientes fenilcetonúricos mostram que o estresse oxidativo (EO) pode estar envolvido na neurofisiopatologia dessa doença, possivelmente devido ao aumento na produção de espécies reativas, e diminuição das defesas antioxidantes. O cérebro, órgão afetado na doença, é extremamente sensível ao EO devido a baixas defesas antioxidantes, alta concentração de ferro e lipídeos insaturados. Aparentemente o fígado não é afetado na PKU, mas é um importante órgão de detoxificação e reservatório de GSH (tripeptídeo antioxidante). O ácido lipoico (AL) é um potente antioxidante facilmente adquirido da dieta, absorvido pelo organismo e tem sido sugerido em estudos para o tratamento e prevenção de EO em modelos de doenças neurodegenerativas. Um estudo recente demonstrou um efeito protetor do AL contra o EO gerado por uma concentração tóxica de Phe em cérebro de ratos jovens. O objetivo do trabalho foi avaliar o efeito do AL na prevenção do EO gerado em um modelo crônico de PKU induzido por injeções diárias de Phe e α-metilfenilalanina (inibidor da PAH). No presente trabalho, o modelo de hiperfenilalaninemia (HPA) causou, no cérebro, aumento de dano a lipídeos, proteínas e DNA; aumento da atividade da superóxido dismutase e diminuição da atividade da catalase, além de mostrar que essas enzimas podem ter um papel importante neste processo, uma vez que suas atividades são afetadas diretamente pela presença de Phe e seus metabólitos. Também foi possível descrever algumas espécies reativas específicas geradas no processo oxidativo envolvido na HPA, como de H2O2, NO• e O2 •-. E ainda, identificou-se que o EO não está restrito ao cérebro e que o fígado pode ter um papel importante em defesa ao EO encontrado na doença. As enzimas glutationa peroxidase, glutationa redutase, glicose-6-fosfato desidrogenase e o conteúdo total de GSH foram diminuídos pela HPA em cérebro dos animais e a atividade da glutamato cisteína ligase foi aumentada. Já no fígado, todas as enzimas relacionadas ao metabolismo da GSH foram aumentadas pela HPA. O tratamento com AL foi capaz de prevenir as alterações enzimáticas além de impedir o dano a biomoléculas. O AL também preveniu o aumento da produção de H2O2 e NO• no cérebro dos animais submetidos ao tratamento de HPA. Quanto ao metabolismo da GSH, o AL foi capaz de manter as atividades enzimáticas aos níveis do controle além de restaurar a produção de GSH no cérebro dos animais afetados pela HPA. De acordo com os resultados, é possível que um tratamento com antioxidantes seja eficaz na manutenção da homeostasia redox nos pacientes servindo como uma abordagem terapêutica inovadora e adicional ao tratamento dietético já aplicado aos pacientes de PKU. Phenylketonuria (PKU) is caused by a severe deficiency of phenylalanine hydroxylase (PAH), the enzyme responsible for the conversion of phenylalanine (Phe) to tyrosine (Tyr), leading to increased blood and tissue levels of Phe and its metabolites phenylpyruvate (PPA), phenylactate (PLA) and phenylacetate (PAA). Patients with PKU have severe neurological dysfunction, characterized by seizures, mental retardation and psychomotor symptoms that are associated with the accumulation of this amino acid and its metabolites. A restrict diet important for PKU treatment, is not always maintained by patients and this can affect the antioxidant status due to nutrient limitation. Recent studies in rats and patients with PKU show that oxidative stress may be involved in the neuropathophysiology of this disease, possibly due to increased production of reactive oxygen species and decreased antioxidant defenses. The brain, organ affected in the disease, is extremely sensitive to oxidative stress due to low antioxidant defenses and high concentrations of Fe and unsaturated lipids. Apparently, the liver is not affected in PKU, but it is an important organ of detoxification and GSH reservoir (tripeptide antioxidant). Lipoic acid (LA) is a potent antioxidant easily acquired from the diet, absorbed by the body and has been suggested for the treatment and prevention of oxidative stress in different neurodegenerative diseases in many studies. A recent study showed a protective effect of LA against the oxidative stress generated by a toxic concentration of Phe in the brain of young rats. The aim of this study was to evaluate the effect of LA in preventing the oxidative stress generated in a chronic model of PKU induced by daily injections of Phe and α-methylphenylalanine (PAH inhibitor) for 7 days. The hyperphenylalaninemia (HPA) model caused in brain an increase of damage to lipids, proteins and DNA; increased superoxide dismutase activity and decreased catalase activity, showing that these enzymes may play an important role in this process, since their activities are directly affected by the presence of Phe and its metabolites. It was also reported some specific reactive species generated in the oxidation process involved in HPA as H2O2 , NO• and O2 • -. In addition, it was found that oxidative stress is not restricted to the brain, and the liver may play an important role in defense to oxidative stress found in the disease. Activities of glutathione peroxidase, glutathione reductase, glucose-6-phosphate dehydrogenase and total content of GSH were decreased by the HPA in the brain of animals and the activity of GCL was increased. In the liver, all enzymes related to GSH metabolism were increased by the HPA. Treatment with LA was able to prevent the enzymatic changes in addition to preventing damage to biomolecules. The overproduction of H2O2 and NO• by HPA model was inhibited by LA treatment. Regarding to GSH metabolism, LA was able to maintain enzyme activities and GSH production at control levels in the brain of animals affected by HPA. According to our results, it is possible that a treatment with antioxidants is effective in maintaining redox homeostasis in patients and may be a novel therapeutic approach additional to dietary treatment already applied to PKU patients.

O objetivo desta tese foi avaliar o efeito de distintos eventos agressivos, pertinentes ao contexto fisiopatológico da Paralisia Cerebral, na gênese de um modelo animal capaz de reproduzir as alterações anatômicas, bioquímicas e funcionais a fim de que se obtenha um fenótipo comportamental e neuropatológico mais semelhante à doença. Para isso, foram realizados três experimentos. No primeiro, foram examinados os efeitos de baixas doses da endotoxina bacteriana (lipopolissacarídeo, LPS), associada ou não com a anóxia perinatal (AP), nos parâmetros inflamatórios e de estresse oxidativo no córtex cerebral de filhotes de ratos Wistar machos recém nascidos. Foram avaliadas os níveis de TNF-α, IL-1, IL-4, SOD, CAT e DCF. Outros animais foram submetidos à avaliação dos marcos do desenvolvimento do dia 1º ao 21º dia de vida (P1 - P21). O comportamento motor também foi avaliado no P29 utilizando-se o campo aberto e o Rotarod. O LPS e a AP sozinhos obtiveram impactos diferentes na atividade de SOD e nos níveis de IL-1, TNF-α e radicais livres acompanhados com leve impacto no desenvolvimento e desempenho motor. Quando o LPS e a AP foram combinados, as mudanças nos parâmetros inflamatórios e de estresse oxidativo foram maiores. Adicionalmente, na combinação dos eventos, maiores limitações no desenvolvimento motor e na coordenação foram observadas. No segundo e terceiro experimentos, investigamos parâmetros de plasticidade morfológica na medula espinal de ratos submetidos à restrição sensório-motora (RS), associada ou não à estimulação locomotora. Ratos Wistar machos foram expostos à RS do P2 ao P28. Ratos controle e experimentais foram submetidos ao treinamento de estimulação locomotora em esteira com duração de três semanas (do P31 até P52). Foram determinadas a área de secção transversal (AST) de motoneurônios ao nível da lombar (L5), assim como de fibras nervosas mielinizadas do nervo isquiático (segundo experimento). Também, foram avaliadas a imunorreatividade à sinaptofisina e à caspase-3 no corno ventral da medula espinal (L5; terceiro experimento). Após a RS, a área média do soma dos motoneurônios foi reduzida, acompanhada pela redução da AST média das fibras nervosas do nervo isquiático. Adicionalmente, houve redução na imunorreatividade à sinaptofisina, associada a um aumento na expressão de caspase-3. Essas alterações foram revertidas, alcançando níveis do grupo controle, quando os animais submetidos à RS foram expostos à estimulação locomotora. Nossos resultados sugerem que, em ratos, infecções/inflamação, asfixia perinatal e a inatividade no início da vida pós-natal podem criar substratos para reproduzir um fenótipo clínico relevante e similar aos observados na PC. The aim of this thesis was to evaluate the effect of different aggressive events, relevant to pathophysiological context involved in Cerebral Palsy (CP), in the genesis of an animal model able to reproduce the anatomical, biochemical and functional alterations in order to obtain a behavioral and neuropathological phenotype more similar to CP. For this, we made three experiments. In the first one, the effects of maternal exposure to low doses of bacterial endotoxin (lipopolysaccharide, LPS) associated or not with perinatal anoxia (PA) on oxidative stress and inflammatory parameters which were examined in cerebral cortices of newborns Wistar male pups. Concentrations of TNF-α, IL-1, IL-4, SOD, CAT and DCF were measured. Other newborn rats were assessed for neonatal developmental milestones from day 1 to 21 (P1 – P21). Motor behavior was also tested at P29 using openfield and Rotarod. LPS and PA alone had different impacts on SOD activity and IL-1, TNF- α and free radicals levels accompanied with slight impact on development and motor performance. When LPS and PA were combined, changes in inflammatory and oxidative stress parameters were greater. In addition, greater motor development and coordination impairments were observed. In the second and third experiments, we investigated morphologic parameters of spinal cord plasticity in rats that undergone through sensorimotor restriction (SR), associated or not to locomotor stimulation. Male Wistar rats were exposed to SR from P2 to P28. Control and experimental rats underwent locomotor stimulation training in a treadmill for three weeks (from P31 to P52). The cross-sectional area (CSA) of spinal motoneurons at lumbar level (L5) as well of myelinated fibers from ischiatic were determined. Also, the intensity of the synaptophysin and caspase-3 immunoreaction was assessed within ventral horn of spinal cord (L5; third experiment). After SR, the mean motoneuron soma size was reduced accompanied by a reduction in the mean fiber and axon CSA of ischiatic nerve. In addition, there was a synaptophysin immunoreactivity reduction accompanied by an increased caspase-3 immunoreactivity. Those alterations were reversed and reached the control levels when animals submitted to SR were exposed to locomotor stimulation. Our results suggest that, in rodents, infections/inflammation, perinatal anoxia and inactivity during early postnatal life could play an important role by creating substrates for the pathological behavior thus, contributing to reproduce clinically relevant phenotype similar to those observed in CP.

Dentre as doenças cerebrovasculares, a isquemia cerebral (IC) é uma das principais causas de mortalidade em países industrializados. Dados do Ministério da Saúde (2008) apontam que aproximadamente 10% da mortalidade no Brasil foram devido a essas doenças. Como ainda não há um tratamento efetivo para a recuperação tecidual e/ou funcional do cérebro após a IC, isto leva à procura de novas terapias que consigam interromper a cascada bioquímica que leva à morte celular. A berberina é um alcalóide isolado de plantas medicinais de origem asiáticas. Esta droga vem sendo amplamente utilizada pela medicina popular chinesa e indiana. Devido a sua grande facilidade em atravessar a barreira hemtaoencefálica, ela se tornou uma alternativa para estudos em doenças neurodegenerativas e neuropsiquiátricas. Alguns relatos na literatura vêm demonstrando o potencial neuroprotetor da berberina em modelos in vivo e in vitro de isquemia cerebral global e/ou focal. No entanto, as bases moleculares para esta proteção não estão bem esclarecidas. Neste trabalho, avaliamos alguns mecanismos que são modulados pela berberina em um modelo in vitro de isquemia cerebral global com utilização de cultura organotípica de hipocampo de ratos. Nossos resultados demonstraram uma menor morte celular na região do Corno de Ammon (CA) das fatias submetidas à privação de oxigênio e glicose (POG) e tratadas com berberina durante 1 h. A análise das possíveis vias de sinalização envolvidas nas neuroproteção mostrou que o efeito da berberina está associado à modulação da via de sobrevivência PI3K/Akt e um de seus substratos a GSK-3β. Além desses, também foi visto que a ação da berberina diminuiu a fosforilação da proteína de sinalização Jun cinase (JNK) e a atividade da enzima caspase-3, indutora de apoptose. Tendo em vista que a berberina agiu sobre a ativação da JNK, investigamos o efeito desta droga em outros marcadores de inflamação. Foi observada diminuição de astrócitos e microglia ativados assim como a secreção de citocinas TNFα e IL-1β nos meios de cultivo das fatias submetidas à POG e tratadas com berberina. Em paralelo, a berberina reduziu a geração de espécies reativas do oxigênio (EROS), as quais são aumentadas rapidamente após um insulto isquêmico. Em conjunto, nossos resultados abrem uma perspectiva para a caracterização de uma nova droga neuroprotetora visando sua utilização como uma alternativa terapêutica contra os danos causados pela isquemia cerebral global. Cerebral ischemia is one of the leading causes of death in industrialized countries. Data from the Ministry of Health (Brazil) shows about 10% of Brazil’s mortality was due this kind of injury. There is no still effective treatment for tissue and/or functional recovery, what leads to search for new therapies that could block the cell death biochemical pathway. Berberine is an alkaloid isolated from medical herbs with Asian origin. This drug has been widely used by popular Chinese and Indian medicine. Berberine can cross the blood brain barrier, which makes an alternative for neurodegeneratives and neuropsychiatry disorders. Studies have shown the neuroprotection effect of berberine on in vivo and in vitroglobal and/or focal cerebral ischemia models. However, the molecular basis for this protection is still unclear. In this work, we evaluated mechanisms modulated by Berberine in global cerebral ischemia model in vitro on rat organotypic hippocampal culture. Our results demonstrated a lower cell death on Cornis Ammonis (CA) region of the slices under oxygen and glucose deprivation (OGD) treated with berberine for 1 hour. The analysis of the involvement of cellular signaling pathway with the neuroprotective effect observed, showed that berberine affect the PI3K/Akt pathway and one of its substrates the GSK3β protein. Also, berberine was able to decrease the phosphorylation of protein JNK and the caspase-3 activity, an apoptosis inducer. Once berberine modulated JNK, we investigated its effect on other inflammation markers. It was observed a decrease of astrocytes and microglia activation and cytokines (TNF- e IL-1β) secretion on OGDberberine treated culture medium. In the same way, berberine was able to reduce the reactive oxygen species (ROS) formation, which is a feature observed after an ischemic insult. Taken together, our findings open a perspective for the characterization of a new neuroprotective drug for future use as an alternative therapeutic strategy against damage caused by global cerebral ischemia.

Objetivo - Avaliar as alterações pulmonares e hepáticas em dois modelos experimentais de cirrose hepática pelo uso de tetracloreto de carbono intraperitoneal (CCl4) e ligadura de ducto biliar. Métodos - Vinte e quatro ratos machos Wistar foram divididos em grupo controle (CO) e experimental (EX). Foram avaliadas as transaminases hepáticas (AST, ALT, FA), gasometria arterial (PaO2, PCO2 e SatO2) e a lipoperoxidação através de TBARS (substâncias que reagem ao ácido tiobarbitúrico) e por quimiluminescência. Também foi avaliada a atividade antioxidante da enzima superóxido dismutase e a histologia do tecido pulmonar e hepático. Resultados - Nas enzimas hepáticas (AST, ALT e FA), bem como na PaO2 foram observadas diferenças significativas (P

CONTEXT: Transforming Growth Factor ß1 (TGFß1) plays a fundamental role in fibrogenesis, although its importance as a biomarker of liver disease is still matter of debate. OBJECTIVE: Quantify serum TGFß1 and its association to liver collagen content in rats exposed to Carbon Tetrachloride (CCl4). METHODS: Rats were submitted to a fibrosis model using CCl4 and sacrificed after 6, 10, 12 and 16 weeks of treatment. Serum levels of TGFß1 were measured by ELISA and collagen content was defined by morphometric analysis. RESULTS: Serum levels of TGFß1 increased between 6 and 10 weeks, whereas collagen density increased between 12 and 16 weeks. A negative correlation was observed between liver collagen deposition and serum levels of TGFß1 (r = -0. 48; P