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Relatório de Estágio do Mestrado Integrado em Ciências Farmacêuticas apresentado à Faculdade de Farmácia RESUMO MONOGRAFIA:O aumento da resistência aos antibióticos e o elevado números de reações adversas causadas por muitos fármacos têm conduzido à procura de novas soluções terapêuticas para diversas patologias, pelo que os óleos essenciais têm sido intensamente estudados. Esta Monografia descreve as potencialidades terapêuticas de vários óleos essenciais em algumas afeções respiratórias, que representam uma das maiores causas de morte em Portugal.Vários estudos relatam atividades terapêuticas de interesse dos óleos essenciais no campo das patologias do sistema respiratório, nomeadamente, atividade antimicrobiana, antitússica, mucolítica, anti-inflamatória, imunomoduladora, broncodilatadora, antiespasmódica e antivírica. Face às atividades biológicas demonstradas, os óleos essenciais podem vir a ser utilizados como adjuvantes em alguns tratamentos ou, até, como alternativa em situações como infeções por bactérias multirresistentes.Contudo, são necessários mais estudos in vitro e ensaios clínicos para calcular as doses efetivas de OEs, determinar as interações entre os componentes e revelar a sua possível toxicidade para que seja praticada uma utilização eficaz e segura dos mesmos.RELATÓRIO DE ESTÁGIO EM FARMÁCIA COMUNITÁRIA:O Mestrado Integrado em Ciências Farmacêuticas (MICF) da Faculdade de Farmácia da Universidade de Coimbra (FFUC) procura conferir aos estudantes uma formação pluridisciplinar, focada na área do medicamento e das ciências da saúde, mas que abranja outras áreas do conhecimento essenciais para a construção sólida de profissionais de saúde críticos, responsáveis, instruídos e capazes. Este processo de formação culmina no contacto com o mercado de trabalho, através da realização de estágio(s) curricular(es), sendo a área de Farmácia Comunitária (FC) basilar. A FC acolhe uma grande parte dos recém-formados do MICF, correspondendo à vertente que alberga um maior número de profissionais desta área. Assim, este curso inclui um estágio curricular obrigatório em FC, realizado no segundo semestre no quinto ano, que visa preparar os estudantes para o mercado de trabalho, dotando-os de competências pessoais, profissionais e relacionais que se revelam essenciais para o bom desempenho da profissão farmacêutica. É nesta fase que os alunos colocam em prática os conhecimentos adquiridos de modo concertado e percebem, verdadeiramente, o impacto da intervenção farmacêutica na sociedade. Este relatório apresenta-se sob a forma de uma análise SWOT (Strengths, Weaknesses, Opportunities, Threats) e retrata a minha experiência na Farmácia Monte Formoso, em Coimbra. Uma vez que o farmacêutico assume um papel de extrema importância na educação e promoção para a saúde, enquanto profissional de saúde inserido numa rede de cuidados que funciona, muitas vezes, como o local de primeiro contacto com os doentes, este documento possui também alguns exemplos práticos de ocasiões em que pude prestar aconselhamento aos utentes da farmácia supramencionada.RELATÓRIO DE ESTÁGIO EM INDÚSTRIA FARMACÊUTICA:A Indústria Farmacêutica (IF) corresponde a uma das possíveis saídas profissionais para os mestres em Ciências Farmacêuticas. Para além do estágio curricular (EC) obrigatório em Farmácia Comunitária, a Faculdade de Farmácia da Universidade de Coimbra oferece aos seus alunos a possibilidade de realizar estágio curricular noutra área de interesse, sendo a IF e Farmácia Hospitalar as mais usuais. Assim, tive a oportunidade de estagiar na Generis® Farmacêutica S.A., em Lisboa, durante três meses (maio, junho e julho), mais concretamente no laboratório de Controlo da Qualidade (CQ). A Generis® Farmacêutica S.A. foi criada em 2002 e é uma empresa especializada no mercado de genéricos e similares, dispondo de uma capacidade anual de produção de trinta milhões de embalagens de comprimidos, saquetas ou cápsulas. Para além do desenvolvimento e produção dos seus próprios produtos, a Generis® conta também com uma ampla experiência no fabrico de medicamentos para terceiros, usualmente designado por Contract Manufacturing, tanto com clientes em Portugal como em mais de vinte países por todo o mundo.[1] O presente documento constitui uma análise SWOT dessa experiência, focando-se na exploração dos pontos fortes e fracos, bem como nas oportunidades e ameaças da mesma. Este estágio revelou-se extremamente proveitoso e, apesar de algumas dificuldades sentidas, contribuiu fortemente para o meu desenvolvimento profissional e também pessoal. Increased resistance to antibiotics and high number of adverse reactions caused by many drugs have led to the research for new therapeutic solutions for various pathologies, therefore essential oils have been intensively studied. This monograph describes the therapeutic potential of essential oils identified in various respiratory conditions, which represent one of the leading causes of death in Portugal. Several studies report essential oils’ therapeutic activities of interest in the field of respiratory system pathologies, namely, antimicrobial, antitussive, mucolytic, anti-inflammatory, immunomodulatory, bronchodilator, antispasmodic and antiviral activities. Due to the biological activities shown, essential oils may be used as adjuvants in some treatments or even as alternative in situations such as infections caused by multiresistant bacteria. However, further in vitro studies and clinical trials are needed to calculate effective doses of essential oils, determine interactions between their components and reveal their possible toxicity for their effective and safe use.|Increased resistance to antibiotics and high number of adverse reactions caused by many drugs have led to the research for new therapeutic solutions for various pathologies, therefore essential oils have been intensively studied. This monograph describes the therapeutic potential of essential oils identified in various respiratory conditions, which represent one of the leading causes of death in Portugal. Several studies report essential oils’ therapeutic activities of interest in the field of respiratory system pathologies, namely, antimicrobial, antitussive, mucolytic, anti-inflammatory, immunomodulatory, bronchodilator, antispasmodic and antiviral activities. Due to the biological activities shown, essential oils may be used as adjuvants in some treatments or even as alternative in situations such as infections caused by multiresistant bacteria. However, further in vitro studies and clinical trials are needed to calculate effective doses of essential oils, determine interactions between their components and reveal their possible toxicity for their effective and safe use.

Dissertação de Mestrado Integrado em Engenharia Biomédica apresentada à Faculdade de Ciências e Tecnologia O objetivo do presente projeto é o de aprofundar um estudo sobre a deposição de filmes finos de ZnO, para revestir superfícies hospitalares, a partir da técnica de pulverização catódica por radiofrequência. Utilizando esta técnica, e pela variação da potência de deposição, foram obtidas diferentes topografias superficiais destas superfícies de ZnO. Todos os filmes finos foram estudados através da utilização de várias técnicas de caracterização. Os resultados evidenciaram que quanto menor a densidade de potência durante a deposição menor a espessura dos filmes finos e a respetiva topografia apresentava-se menos angular, com diminuição de rugosidade. Numa fase posterior, as superfícies de ZnO foram utilizadas na realização de testes antimicrobianos, de modo a inferir qual das superfícies teria uma maior atividade em relação a três estirpes bacterianas usualmente encontradas em ambiente hospitalar: Staphylococcus aureus (S. aureus), Escherichia coli (E. coli) e Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa). Os testes decorreram com e sem irradiação dos filmes finos de ZnO com UV, de modo a analisar o impacto deste tipo de radiação na inibição bacteriana das superfícies. A partir destes resultados, foi selecionado um dos tipos de filmes finos para a realização de testes conjuntamente com um material natural, reportado na literatura como um agente antibacteriano: o óleo de limão. Os halos de inibição avaliados em meio de cultura sólido foram satisfatórios para as estirpes de S. aureus e E. coli em ambas as condições, com e sem irradiação de luz UV. No entanto, o diâmetro dos halos obtidos para os filmes expostos a radiação ultravioleta foram superiores. Este estudo demonstrou a viabilidade de utilizar filmes finos para o revestimento de superfícies não deformáveis de equipamentos presentes em ambiente hospitalar. The aim of the present project is to deepen a study on deposition of ZnO thin films, to coat hospital surfaces, using radio frequency sputtering technique. From this technique, and by varying the deposition power, different surface topographies of ZnO coatings were obtained. All thin films were studied using several characterization techniques and the results showed that the lower the power density during the deposition, the thinner the thickness of the thin films and the respective topography was less angular, with decreased roughness. ZnO surfaces were used for antimicrobial testing to infer which surface would have the highest activity over three bacterial strains commonly found in a hospital setting: Staphylococcus aureus (S. aureus), Escherichia coli (E. coli) and Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa). The tests were carried out with and without irradiation of ZnO thin films with UV in order to analyze the impact of this type of radiation on bacterial inhibition of surfaces.Subsequently, one of the thin film types was selected to perform tests together with a natural material, reported in the literature as an antibacterial agent: lemon oil. The inhibition halos evaluated in solid culture medium were satisfactory for S. aureus and E. coli strains under both conditions, with and without UV light irradiation. However, the diameter of the halos obtained for films exposed to ultraviolet radiation were larger. This study demonstrated the viability of using thin films to coat non-deformable surfaces of hospital equipment.

Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2021-11-01T17:58:52Z No. of bitstreams: 1 2019 - Patr?cia Saraiva Vilas Boas de Almeida.pdf: 10195032 bytes, checksum: 9d3b66e0e8c89792bfdc9f439bad3a1b (MD5) Made available in DSpace on 2021-11-01T17:58:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2019 - Patr?cia Saraiva Vilas Boas de Almeida.pdf: 10195032 bytes, checksum: 9d3b66e0e8c89792bfdc9f439bad3a1b (MD5) Previous issue date: 2019-07-31 CAPES - Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico FAPERJ - Funda??o Carlos Chagas Filho de Amparo ? Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro Cancer and bacterial infections are diseases that cause a large number of deaths, and despite the existing treatments, drugs being less harmful to the patients and more active against resistant cells are still needed. Coumarin derivatives and several classes of Ru(II) complexes have been studied for their potential as antimicrobial and antitumor agents. For this reason, four novel coumarin-N-acylhydrazone hybrid ligands of the type (E)-7-(diethylamino)-N'-(4-R-benzylidene)-2-oxo-2H-chromene-3-carbohydrazide (HL2: R=H; HL3: R=Cl, HL4: R=Br, HL5: R= OCH3), were obtained from condensation reactions, using one hydrazide (7-(diethylamine)-2-oxo-2H-chromone-3-carbohydrazide, HL1) and different p-substituted aldehydes. Reactions between HL2-5 and cis-[RuCl2(DMSO)4] afforded the complexes trans-cis-[RuCl2(DMSO)2(HL2-5)], C2-5 (Ru(II)-Cl-DMSO class). Concomitantly, hydrolysis of the ligand occurred, resulting in the formation of the complex trans-cis-[RuCl2(DMSO)2(HL1)] C1, containing the hydrazide as ligand. Crystal structures of HL2, HL3 and the complexes C2-5 were determined by single crystal XRD, that revealed an E to Z isomerization of the coumarin-N-acylhydrazones upon coordination. Complexes C2-5 exhibited the Ru(II) atom in a distorted octahedral geometry, where the coumarin ligand is coordinated in the keto form through the hydrazone carbonyl and the iminic nitrogen. In an attempt to synthesize a second class of complexes, containing bipyridine as auxiliary ligand and charged, ([Ru(bipy)2(HLn)]PF6 -Ru(II)-bipy class), the reaction between HL2 and cis-[Ru(bipy)2Cl2] was carried out. However, possible hydrolysis of the ligand precluded the isolation of the desired complex. A similar methodology using cumarin-?-ketoester hybrids HL6-8 yielded the complexes of the Ru(II)-bipy class, [Ru(bipy)2(HL6-8)]PF6 C6-8. The XRD analysis of C7 shows the Ru(II) ion in a distorted octahedral environment with the ligand coordinated through the deprotonated ?-ketoester portion and two bypiridines in the coordination sphere. Antiproliferative evaluation of the compounds against tumor cell lines (4T1: murine mammary carcinoma and B16-F10: murine melanoma metastatic) and a non-tumor cell line (BHK-21: hamster kidney) showed that overall, the coumarin-N-acylhydrazone and coumarin-hydrazyde hybrids HL1-5 were more active than the complexes C1-5, where the IC50 (half of the maximum inhibitory concentration) values for the ligands were found in the range of 10.6 to 50.4 ?M and between 17.7, and 97.8 ?M for the complexes. On the other hand, the coumarin-?-ketoester ligands HL6-8 were inactive (IC50 > 100 ?M), yet the complexes C6-8 presented high cytotoxicity, with IC50 values ranging from 2.0 and 12.8 ?M. For the antimicrobial assays, HL1 was the only ligand active against one gram-negative bacteria strain, however its MIC was not determined within the studied concentrations. Among the complexes, all demonstrated activity only against gram-positive bacteria strains. Within the Ru(II)-Cl-DMSO series, only C3 and C4 (R = Cl and Br) exhibited MIC at the concentrations used (40.5 and 86 ?M). On the other hand, the complexes of the Ru(II)-bipy class C6-8 presented MIC between 2.20 and 9.22 ?M. Comparing the classes of complexes, Ru(II)-bipy and Ru(II)-DMSO, the higher activities presented by the former in both biological studies was attributed to the presence of charge and of bipyridine ligands. The investigation of DNA interaction of the complexes [Ru(bipy)2(HLn)]PF6 (C6-8) are in progress. C?ncer e infec??es bacterianas s?o doen?as que causam um grande n?mero de mortes e, apesar dos tratamentos existentes, ainda se fazem necess?rios novos f?rmacos que causem menos danos aos pacientes e que sejam mais ativos ?s c?lulas resistentes. Derivados de cumarina e diversas classes de complexos de Ru(II) v?m sendo estudados quanto ao seu potencial como agentes antimicrobianos e antitumorais. Sendo assim, quatro novos ligantes h?bridos de cumarina-N-acilidrazonas do tipo (E)-(N?-4-R-benzilideno-7-(dietilamino)-2-oxo-2H-cromona-3-carboidrazida (HL2: R=H; HL3: R=Cl, HL4: R=Br, HL5: R= OCH3), foram obtidos atrav?s da condensa??o de uma hidrazida (7-(dietilamino)-2-oxo-2H-cromona-3-carboidrazida, HL1) e diferentes alde?dos p-substitu?dos. Rea??es entre HL2-5 e cis-[RuCl2(DMSO)4] resultaram em complexos trans-cis-[RuCl2(DMSO)2(HL2-5)], C2-5 (classe Ru(II)-Cl-DMSO). Concomitantemente, a hidr?lise do ligante ocorreu, resultando na forma??o do complexo trans-cis-[RuCl2(DMSO)2(HL1)] C1, contendo a hidrazida coordenada. As estruturas cristalinas dos ligantes HL2 e HL3 e dos complexos C2-5 foram determinadas por DRX, que revelaram a isomeriza??o de E para Z das cumarinas-N-acilidrazonas resultante da coordena??o. Os complexos C2-5 exibiram o ?tomo de Ru(II) em uma geometria octa?drica distorcida com o ligante coordenado na forma ceto atrav?s da carbonila da hidrazona e do nitrog?nio im?nico. Na tentativa de sintetizar uma segunda classe de complexos carregados e contendo bipiridina como ligante auxiliar ([Ru(bipy)2(HLn)]PF6 - classe Ru(II)-bipy), realizou-se a rea??o entre HL2 e cis-[Ru(bipy)2Cl2]. Por?m, a poss?vel hidr?lise do ligante impossibilitou a obten??o do complexo desejado. Uma metodologia similar utilizando h?bridos de cumarina-?-ceto?ster HL6-8 originou os complexos da classe Ru(II)-bipy, [Ru(bipy)2(HL6-8)]PF6 C6-8. A an?lise de DRX de C7 mostrou o Ru(II) em um ambiente octa?drico distorcido com o ligante coordenado pela por??o ?-ceto?ster desprotonada e duas bipiridinas na esfera de coordena??o. A avalia??o antiproliferativa dos compostos contra linhagens de c?lulas tumorais (4T1: carcinoma mam?rio murino e B16-F10: melanoma murino metast?tico) e n?o tumoral (BHK-21: rim de hamster) mostrou que, de uma maneira geral, os ligantes h?bridos cumarina-N-acilidrazona e cumarina-hidrazida HL1-5 foram mais ativos que seus complexos C1-5, cujos valores de IC50 (metade da concentra??o inibit?ria m?xima) foram encontrados na faixa de 10,6 a 50,4 ?M para os ligantes e entre 17,7 e 97,8 ?M para os complexos. Por outro lado, os ligantes cumarina-?-ceto?ster HL6-8 foram inativos (IC50 > 100 ?M), mas os complexos C6-8 apresentaram alta citotoxicidade, com valores de IC50 entre 2,0 e 12,8 ?M. Para o teste antibacteriano, HL1 foi o ?nico ligante ativo frente a uma cepa de bact?ria gram-negativa, por?m seu MIC n?o foi determinado nas concentra??es estudadas. Todos os complexos demostraram atividade somente frente a cepas de bact?rias gram positivas. Para os complexos Ru(II)-Cl-DMSO, somente C3 e C4 (R = Cl e Br) apresentaram MIC nas concentra??es utilizadas (40,5 e 86 ?M). Por outro lado, os complexos Ru(II)-bipy C6-8 apresentaram MIC entre 2,20-9,22 ?M. A maior atividade apresentada pelos derivados Ru(II)-bipy em ambos os testes biol?gicos, comparada aos complexos Ru(II)-DMSO, foi atribu?da ? presen?a de carga no complexo e aos ligantes bipiridina. Estudos de intera??o com DNA dos complexos [Ru(bipy)2(HL6-8)]PF6 (C6-8) est?o em andamento.

CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior A óleorresina de copaíba possui diversas propriedades medicinais já comprovadas, entre elas destaca-se a atividade antimicrobiana. O objetivo desse trabalho foi avaliar a composição química da óleorresina de Copaifera reticulata Ducke, a citotoxicidade e a atividade antimicrobiana frente às cepas Staphylococcus aureus; S. aureus resistente a meticilina e S. simulans nos períodos sazonais (seco e chuvoso) da óleorresina, bem como obter uma formulação fitoterápica semissólida contendo a óleorresina de Copaifera reticulata Ducke. Para isso, foi realizada a cromatografia Gasosa acomplada a Espectrometria de Massa (CG EM), para avaliar a composição química da óleorresina, a atividade citotóxica in vitro utilizando células da linhagem VERO. A atividade microbiológica por difusão em poço e microdiluição em placas e a formulação foi obtida por fusão da manteiga de murumuru a 45º C e em seguida, com a adição do tensoativo, água e óleo para formação de um sistema emulsionado. Os resultados obtidos mostram que, foi possível identificar apenas três amostras, sendo descritas como Amostra 1 do período seco e chuvoso (1S e 1C) Amostra 2 do período seco e chuvoso (2S e 2C) e Amostra 3 do período seco e chuvoso (3S e 3C) botanicamente, na análise química o β- cariofileno foi identificado como componente majoritário em todas as amostras utilizadas, as amostras 2 C, 2 S, 3 C e 3 S apresentaram citotoxicidade apenas na concentração de 200 µg/mL, e a amostra 1 C e 1 S não apresentou citotoxicidade em nenhuma das concentrações utilizadas, nas bactérias utilizadas constatou ação antibacteriana indicando que houve ação da óleorresina. A determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) demostrou que a óleorresina coletada no período chuvoso mostrou forte inibição para a bactéria S. aureus meticilina resistente e S. aueures, enquanto que do período seco mostrou uma fraca inibição para todas as cepas testadas. A formulação incorporada com a óleorresina apresentou-se estável, com aspecto de gel, de cor amarelo claro e odor amadeirado, com aparecimento de anisotropia e birrefringerência, com textura em forma de estrias, característico de fase hexagonal que vem sendo empregada em alguns estudos para liberação sustentada de fármacos. Os resultados obtidos no presente trabalho reforçam ainda mais a importância da óleorresina de copaíba proveniente da região Amazônica como fitoterápico com potencial antibacteriano, sendo desta forma, uma fonte promissora para a síntese de novos fármacos com atividade antimicrobianos. The copaiba oleoresin has several proven medicinal properties, among them the antimicrobial activity. The aim of this work was to evaluate the chemical composition of Copaifera reticulata Ducke oleoresin, cytotoxicity and antimicrobial activity against Staphylococcus aureus strains; Methicillin-resistant S. aureus and S. simulans in the seasonal (dry and rainy) periods of oleoresin, as well as obtain a semi-solid herbal formulation containing Copaifera reticulata Ducke oleoresin. For this, Gas Chromatography with Mass Spectrometry (GC-MS) was performed to evaluate the chemical composition of the oleoresin, cytotoxic activity in vitro using VERO cells. Microbiological activity by well diffusion and plate microdilution and the formulation was obtained by melting the murumuru butter at 45 ° C and then with the addition of surfactant, water and oil to form an emulsified system. The results showed that it was possible to identify only three samples, being described as Sample 1 of dry and rainy period (1S and 1C) Sample 2 of dry and rainy period (2S and 2C) and Sample 3 of dry and rainy period (3S and 3C) botanically, in the chemical analysis β-caryophyllene was identified as the major component in all samples used, samples 2 C, 2 S, 3 C and 3 S showed cytotoxicity only at 200 µg / mL, and the sample 1 C and 1 S showed no cytotoxicity in any of the concentrations used, in the bacteria used it found antibacterial action indicating that there was action of oleoresin. The determination of the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) showed that the oleoresin collected in the rainy season showed strong inhibition for S. aureus methicillin resistant bacteria and S. aueures, while in the dry period showed a weak inhibition for all strains tested. The formulation incorporated with oleoresin was stable, gel like, light yellow in color and woody odor, with the appearance of anisotropy and birefringence, with streak-shaped texture, characteristic of hexagonal phase that has been used in some studies for sustained release of drugs. The results obtained in the present study further reinforce the importance of copaiba oleoresin from the Amazon region as a phytotherapic with antibacterial potential, thus being a promising source for the synthesis of new drugs with antimicrobial activity. Programa de Pós-graduação em Biociências

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2019-08-22T12:56:26Z No. of bitstreams: 1 Noelly Bastos Cavalcante.pdf: 5253447 bytes, checksum: 3b254a602970297210b545539d50bdc3 (MD5) Made available in DSpace on 2019-08-22T12:56:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Noelly Bastos Cavalcante.pdf: 5253447 bytes, checksum: 3b254a602970297210b545539d50bdc3 (MD5) Previous issue date: 2019-06-04 Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Jatropha mollissima is a shrubby plant of the Euphorbiaceae family, endemic to the Caatinga biome. It is a species that has little reference, however it is used in folk medicine mainly for the treatment of ulcers and snake bites. The main objectives of this work were: to perform the phytochemical study of J. mollissima, to obtain silver nanoparticles by green synthesis using its aqueous extract and to evaluate its antibacterial and cytotoxic capacity. In this work the aqueous extract of J. mollissima was reported for the first time as a silver ion reducer. The plant material (leaves) was collected in the city São Raimundo Nonato-PI, in the rainy season and, after the drying and maceration of the material, crude ethanol extract (Jm-CEE) was obtained. After this procedure, the Jm-CEE was partitioned using the vacuum liquid chromatography method with solvents in increasing order of polarity, obtaining the hexane (Jm-Hex), chloroform (Jm-CHCl3), ethyl acetate (Jm-AcOEt) and methanol (Jm-MeOH). The aqueous extract for biosynthesis of silver nanoparticles, in turn, was obtained using 10 g of the powder of the leaves immersed in doubly distilled water, the mixture being then boiled for ten minutes. The material was centrifuged, filtered and stored at 4 °C. The crude extract and phases were submitted to GC-MS analysis for the identification of their chemical constituents. The chloroform and ethyl acetate phases were subjected to fractionation by column liquid chromatography using the solvents hexane, chloroform, ethyl acetate and methanol individually or in binary mixtures. In addition, all extracts were submitted to biological tests of antimicrobial activity (MIC and MBC) and cytotoxic activity, to determine the IC50 against the three tumor cell lines. The chromatographic fractionation allowed the isolation of two substances that, after being subjected to the uni and bidimensional 13C and 1H NMR analyzes, were identified as triacontanol and β-sitosterol. GC-MS analyzes revealed the presence of 51 peaks for Jm-CEE, 24 peaks for Jm-Hex, 60 peaks for Jm-CHCl3, 36 peaks for Jm-AcOEt and 16 peaks for Jm-MeOH, the compounds of class of the most representative terpenes. Several constituents were identified, such as phytol, lupeol, palmitic acid, linolenic acid and α-tocopherol, all with important biological activities reported in the literature. Analyzes by HPLC-DAD-IT-MS / MS and molecular networking application were also performed, making it possible to identify eight flavonoids described for the first time in this species. In the antimicrobial activity test, J. mollissima was able to promote a moderate inhibition of bacterial species of clinical importance, being Serratia marcescens the most sensitive species. In the tests of modulatory activity with antibiotics, it was evidenced that J. mollissima established an antagonistic relation with the antibiotic Norfloxacina, that is part of the class of fluoroquinolonas. The silver nanoparticles obtained by green synthesis, in turn, obtained significant antibacterial activity against all strains tested. Regarding the cytotoxic activity, J. mollissima showed a strong antiproliferative potential, mainly against prostate cancer cell lines (IC50 < 30 μg/mL). The same could be observed for the biosynthesized silver nanoparticles, whose best IC50 was 2.93 μg/mL, also against the prostate cancer lineage. These results are unprecedented for the species, which further encourages studies with this plant, in order to elucidate possible mechanisms of action. Jatropha mollissima é uma planta arbustiva da família Euphorbiaceae, endêmica do bioma Caatinga. É uma espécie que pouco se tem referência, no entanto é utilizada na medicina popular principalmente para o tratamento de úlceras e picadas de cobra. Os objetivos principais deste trabalho foram: realizar o estudo fitoquímico de J. mollissima, obter nanopartículas de prata por síntese verde utilizando seu extrato aquoso e avaliar sua capacidade antibacteriana e citotóxica. Neste trabalho foi relatado pela primeira vez o extrato aquoso de J. mollissima como redutor de íons prata. O material vegetal (folhas) foi coletado no município de São Raimundo Nonato-PI, em época chuvosa e, após o processo de secagem e maceração do material, foi obtido o extrato etanólico bruto (Jm-EEB). Após esse procedimento, o Jm-EEB foi particionado utilizando o método de cromatografia líquida a vácuo com solventes em ordem crescente de polaridade, obtendo-se as fases hexânica (Jm-Hex), clorofórmica (Jm-CHCl3), acetato de etila (Jm-AcOEt) e metanólica (Jm-MeOH). O extrato aquoso para a biossíntese de nanopartículas de prata, por sua vez, foi obtido utilizando 10 g do pó das folhas imersos em água bidestilada, sendo a mistura, em seguida, submetida à fervura por dez minutos. O material foi centrifugado, filtrado e armazenado a 4 °C. O extrato bruto e as fases foram submetidos à análise por CG-EM para a identificação dos seus constituintes químicos. As fases clorofórmica e acetato de etila foram submetidas ao fracionamento por cromatografia líquida em coluna utilizando os solventes hexano, clorofórmio, acetato de etila e metanol individualmente ou em misturas binárias. Além disso, todos os extratos foram submetidos aos testes biológicos de atividade antimicrobiana (CIM e da CBM) e atividade citotóxica, para determinação da CI50 frente a três linhagens de células tumorais. O fracionamento cromatográfico possibilitou o isolamento de duas substâncias que, após submetidas a análises por RMN de 13C e 1H uni e bidimensionais, foram identificadas como triacontanol e β-sitosterol. As análises por CG-EM revelaram a presença de 51 picos para Jm-EEB, 24 picos para Jm-Hex, 60 picos para Jm-CHCl3, 36 picos para Jm-AcOEt e 16 picos para Jm-MeOH, sendo os compostos da classe dos terpenos os mais representativos. Foram identificados diversos constituintes, tais como fitol, lupeol, ácido palmítico, ácido linolênico e α-tocoferol, todos com atividades biológicas importantes relatadas na literatura. Também foram realizadas análises por CLAE-MS/MS e aplicação de networking molecular, tornando possível a identificação de oito flavonoides descritos pela primeira vez na espécie. No teste de atividade antimicrobiana, J. mollissima foi capaz de promover uma inibição moderada de espécies bacterianas de importância clínica, sendo Serratia marcescens a espécie mais sensível. Nos testes de atividade modulatória com antibióticos, ficou evidenciado que J. mollissima estabeleceu uma relação antagônica com o antibiótico Norfloxacina, que faz parte da classe das fluoroquinolonas. As nanopartículas de prata obtidas por síntese verde, por sua vez, obtiveram atividade antibacteriana significativa contra todas as cepas testadas. Com relação à atividade citotóxica, J. mollissima apresentou um forte potencial antiproliferativo, principalmente contra linhagens celulares de câncer de próstata (CI50 < 30 μg/mL). O mesmo pôde ser observado para as nanopartículas de prata biossintetizadas, cuja melhor CI50 foi 2,93 μg/mL, também contra a linhagem de câncer de próstata. Estes resultados são inéditos para a espécie, o que incentiva ainda mais os estudos com esta planta, a fim de elucidar possíveis mecanismos de ação.

CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Dentre os organismos estudados na química dos produtos naturais, os fungos podem ser destacados devido às várias aplicações benéficas ao homem, como a atividade antibacteriana. Os fungos se diferenciam por suas características físicas e pelo tipo de hospedeiro que utiliza para sua sobrevivência. Os fungos estudados neste trabalho foram Beauveria bassiana e Verticillium sp., que são classificados como entomopatogênicos, e Cercospora brachiata que é fitopatógeno. Os danos que estes fungos causam em seus hospedeiros estão relacionados diretamente com os metabólitos produzidos. Com o intuito de conhecer mais sobre estes compostos, este trabalho teve como objetivos identificar, isolar e caracterizar as substâncias presentes nos extratos de caldos de crescimentos e de micélios destes fungos, por meio das técnicas de cromatografia (CC: cromatografia em coluna e CG-EM: cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massas) e ressonância magnética nuclear (RMN). A atividade antibacteriana dos extratos também foi avaliada. Entre os compostos identificados, destacam-se os ácidos graxos, ésteres e esteroides por estarem associados a várias atividades biológicas. Dentre os ácidos identificados, aqueles que foram identificados em maior concentração nos extratos foram: ácido hexadec-9-enóico, ácido hexadecanóico, ácido oleico, ácido octadecanóico, ácido láurico, ácido mirístico, ácido palmítico, ácido docos-13-enóico, ácido esteárico, ácido linoleico e ácido nonadecanóico. Além dos ácidos identificados foram isolados os esteroides ergosta-6,22-dien-3β,5α,8α-triol e brassicasterol. A atividade antibacteriana foi avaliada pelo o método de microdiluição em caldo. Foram encontrados valores de concentração inibitória mínima (CIM) promissores para o extrato em acetato de etila dos micélios de C. brachiata contra a bactéria Actinomyces naeslundii (CIM = 100 µg mL-1), e do extrato em acetato de etila do caldo de crescimento de B. bassiana contra as bactérias Porphyromonas gingivalis e Fusobacterium nucleatum (CIM = 100 µg mL-1). Among the organisms studied in the chemistry of natural products, fungi can be highlighted due to the various applications beneficial to man, such as antibacterial activity. Fungi differ by their physical characteristics and by the type of host they use for their survival. The fungi studied in this work were Beauveria bassiana and Verticillium sp., which are classified as entomopathogenic, and Cercospora brachiata which is phytopathogenic. The damages that these fungi cause in their hosts are directly related to the metabolites produced. In order to know more about these compounds, the objective of this work was to identify, isolate and characterize the substances present in extracts of broths of growths and mycelia of these fungi, using chromatography techniques (CC: column chromatography and GC-MS: gas chromatography coupled to mass spectrometry) and nuclear magnetic resonance (NMR). The antibacterial activity of the extracts was also evaluated. Among the identified compounds, fatty acids, esters and steroids stand out because they are associated with several biological activities. Among the identified acids, those that were identified in the highest concentrations in the extracts were: hexadec-9-enoic acid, hexadecanoic acid, oleic acid, octadecanoic acid, lauric acid, myristic acid, palmitic acid, docos-13-enoic acid, stearic acid, linoleic acid and nonadecanoic acid. In addition to the identified acids, ergoster-6,22-dien-3β,5α,8α-triol and brassicasterol steroids were isolated. The antibacterial activity was evaluated by the broth microdilution method. Prominent values of the minimum inhibitory concentration (MIC) were found for the ethyl acetate extract of the mycelia of C. brachiata against the Actinomyces naeslundii (MIC = 100 μg mL-1) and the ethyl acetate extract of the growth broth of B. bassiana against the Porphyromonas gingivalis and Fusobacterium nucleatum (MIC = 100 μg mL-1). Dissertação (Mestrado)

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2019-08-22T13:58:56Z No. of bitstreams: 1 Fernando Antonio Gomes da Silva Junior.pdf: 4508344 bytes, checksum: 595e11c23722d061c2f4c14d577c01ea (MD5) Made available in DSpace on 2019-08-22T13:58:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fernando Antonio Gomes da Silva Junior.pdf: 4508344 bytes, checksum: 595e11c23722d061c2f4c14d577c01ea (MD5) Previous issue date: 2019-03-29 Polypyrrole (PPy) is a conductive polymer that has several applications, and in recent years has stood out as an antibacterial agent. In this sense, this thesis aimed at the development of low cost polypyrrole devices with high antibacterial power, thus providing a new form of treatment against Escherichia coli, Staphylococcus aureus and Klebsiella pneumoniae. Based on the antibacterial power of PPy, polypyrrole nanoparticles were synthesized and tested against E. coli, S. aureus and K. pneumoniae. Through the time-of-death assays it can be determined that with less than 1 min the nanoparticles of PPy were able to inhibit the growth of the bacteria, zeroing the number of remaining colonies. From the electrophying technique were produced eudragit L100 and eudragit L100 wipes coated with PPy aiming the cleaning of a plate of metal contaminated with S. aureus. After cleaning, the wipe coated with PPy was shown to be more efficient, significantly reducing the UFC. Wearable polyurethane (PU) and cotton fibers coated with PPy applied to the disc-diffusion technique and the time-ofdeath assays against E. coli, S. aureus, and K. pneumoniae showed total efficiency against said bacteria, showing and inhibiting the growth of the microorganisms after 6 h and 4 h in contact with the PU / CNT / PPy and with the cotton / PPy fibers, respectively. Tests using the external electric field revealed potentiating the antibacterial effect of PPy. Applying tensions of 1 V and 2 V in PU/CNT/PPy sponges and Sandpaper/Graphite/PPy against E. coli and S. aureus, growth of inhibition halo and reduction of the number of remaining colonies measured in that the voltage is increased. O polipirrol (PPy) é um polímero condutor que possui diversas aplicações, e que nos últimos anos tem se destacado como um agente antibacteriano. Nesse sentido, esta tese teve como objetivo o desenvolvimento de dispositivos à base de polipirrol e de baixo custo com alto poder antibacteriano, fornecendo assim uma nova forma de tratamento contra Escherichia coli, Staphylococcus aureus e Klebsiella pneumoniae. Com base no poder antibacteriano do PPy, nanopartículas de polipirrol foram sintetizadas e testadas contra E. coli, S. aureus e K. pneumoniae. Através dos ensaios de tempo de morte pode-se determinar que com menos de 1 min as nanopartículas de PPy foram capazes de inibir o crescimento das bactérias, zerando o número de colônias remanescentes. A partir da técnica de eletrofiação foram produzidos lenços de eudragit L100 e eudragit L100 revestidos com PPy objetivando a limpeza de uma placa de metal contaminada com S. aureus. Após a limpeza, o lenço revestido com PPy mostrou-se mais eficiente, reduzindo significativamente a UFC. dispositivos vestíveis de poliuretano (PU) e de fibras de algodão revestidos com PPy aplicados à técnica de disco-difusão e aos ensaios de tempo de morte contra E. coli, S. aureus, K. pneumoniae revelaram total eficiência contra as referidas bactérias, mostrando halos de inibição significantes e inibindo o crescimento dos microrganismos após 6 h e 4 h em contato com o PU/CNT/PPy e com as fibras de algodão/PPy, respectivamente. Ensaios utilizando o campo elétrico externo revelaram potencializar o efeito antibacteriano do PPy. Aplicando tensões de 1 V e 2 V em esponjas de PU/CNT/PPy e Papel lixa/Grafite/PPy contra E. coli e S. aureus foi observado o crescimento do halo de inibição e a redução do número de colônias remanescentes a medida em que a tensão é aumentada.

Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2021-10-05T18:41:25Z No. of bitstreams: 1 PDF - Lidiane Gomes de Araújo.pdf: 1821612 bytes, checksum: 758538e3953058588ffcaa2b02c36e25 (MD5) Approved for entry into archive by Rosalvo Andrade (rosalvo_andrade@servidor.uepb.edu.br) on 2021-10-05T23:49:00Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PDF - Lidiane Gomes de Araújo.pdf: 1821612 bytes, checksum: 758538e3953058588ffcaa2b02c36e25 (MD5) Made available in DSpace on 2022-01-13T13:31:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Lidiane Gomes de Araújo.pdf: 1821612 bytes, checksum: 758538e3953058588ffcaa2b02c36e25 (MD5) Previous issue date: 2019-03-27 The genus Croton, one of the largest in the Euphorbiaceae family, has aromatic species that produce essential oils rich in monoterpenes and sesquiterpenes and phenylpropanoids. The essential oils synthesized by Croton species have been extensively studied because of their vast amount of substances and a broad spectrum of biological activities. The literature shows that Croton argyrophyllus, the target of this study, is used in folk medicine as a sedative and for heart problems, and the leaf essential oil has anti-inflammatory, antioxidant, cytotoxic, antinociceptive, insecticidal and gastroprotective activity, but the chemical composition variations. The present work aimed to investigate the chemical composition of the essential oils of the leaves of nine different specimens of Croton argyrophyllus, as well as to evaluate their antibacterial activity. Fresh leaves of nine specimens of C. argyrophyllus were extracted by hydrodistillation in a Clevenger dosing apparatus. The essential oils (OCA1 to OCA9) were analyzed by gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC/MS) to identify the chemical composition. In addition, it analyzed by near infrared spectroscopy (NIR) in order to verify the similarity between the analyzed samples. GC/MS analysis presented that the oils are composed exclusively of sesquiterpenes, and the major compound for all oils was bicyclogermacrene (mean 38.42%), followed by (Z)-cariophilene (mean of 14.06%), epi longipinanol (mean of 9.78%) and germacreno B (mean of 9.10%). The epi-longipinanol is being reported for the first time for the essential oil of C. argyrophyllus leaves. The data obtained from the analysis by NIR spectroscopy and CG/MS were treated by PCA and HCA, and showed similarity of the chemical samples’ profile. The essential oils OCA1 to OCA9 did not show variability in relation to the major compound. However, the quantitative analysis shows a significant difference in relation to the minority compounds. Statistical analyzes made it possible to form three clusters: OCA1-6, OCA7-8 and OCA9. These three clusters were submitted to evaluation of the antimicrobial activity against Staphlococcus aureus and all presented strong bactericidal activity, and the OCA7 + OCA8 group was the most active. O gênero Croton, um dos maiores da família Euphorbiaceae, possui espécies aromáticas produtoras de óleos essenciais ricos em monoterpenos e sesquiterpenos e fenilpropanoides. Os óleos essenciais sintetizados por espécies de Croton vêm sendo amplamente estudados, devido sua vasta quantidade de substâncias e amplo espectro de atividades biológicas. A literatura mostra que o Croton argyrophyllus, alvo desse estudo, é utilizado na medicina popular como calmante e para problemas cardíacos, e o óleo essencial das folhas apresenta atividade anti-inflamatória, antioxidante, citotóxica, antinociceptiva, inseticida e gastroprotetora, porém a composição química apresenta variações. O presente trabalho teve como objetivo investigar a composição química intraespecífica dos óleos essenciais das folhas de Croton argyrophyllus, bem como avaliar sua atividade antibacteriana. As folhas frescas de nove espécimes de C. argyrophyllus foram submetidas à extração por hidrodestilação em aparelho doseador tipo Clevenger. Os óleos essenciais (OCA1 a OCA9) foram submetidos a análises por cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massas (CG/EM) para identificação da composição química e análises por espectroscopia no infravermelho próximo (NIR) para verificação da similaridade entre as amostras analisadas. As análises por CG/EM mostraram que os óleos são compostos exclusivamente por sesquiterpenos, e o composto majoritário para todos os óleos foi o biciclogermacreno (média de 38,42%), seguido por (Z)- cariofileno (média de 14,06%), epi-longipinanol (média de 9,78%) e germacreno B (média de 9,10%). Epi-longipinanol está sendo relatado pela primeira vez para o óleo essencial das folhas de C. argyrophyllus. Os dados obtidos a partir das análises por espectroscopia NIR e CG/EM foram tratados por PCA e HCA, e mostraram similaridade do perfil químico das amostras. Os óleos essenciais OCA1 a OCA9 não apresentaram variabilidade em relação ao composto majoritário, contudo, a análise quantitativa mostra diferença significativa em relação aos compostos minoritários. As análises estatísticas tornaram possível a formação de três agrupamentos: OCA1-6, OCA7-8 e OCA9. Esses três agrupamentos foram submetidos a avaliação da atividade antimicrobiana contra Staphlococcus aureus e todos apresentaram forte atividade bactericida, sendo o grupo OCA7-8 o mais ativo.

The genus Piper is considered the largest of the family Piperaceae. With more than 2000 species already described, it is found mainly in tropical and neotropical regions. It has a high commercial value for its wide use in both popular medicine and traditional cuisine, becoming the target of several researches. They have a differentiated metabolism, producing classes of substances that are not usually found as alcamides aristolactamas, aporfínicos alkaloids and kavalactonas, increasing even more its therapeutic potential. Among the species of the genus Piper are Piper mollicomum Kunth, popularly known as jaborandi or jaborandi-meso, and in this work, chemical investigations were carried out with their roots that were collected in campus I of the Federal University of Paraíba, municipality of João Pessoa- PB. The methanolic extracts were subjected to conventional chromatography (silica gel adsorption and XAD-2 and dextran gel exclusion) resulting, after physical (melting point) and spectrometric (Infrared Spectrometry and Nuclear Magnetic Resonance 1H and 13C, including uni and bidimensional techniques) in four substances identified as two aristolactams - 10-Methylamine-4-hydroxy-2,3-dimethoxyphenanthren-1carboxylic acid-lactam and 10-methylamine-4-hydroxy -3-methoxyphenanthren-1carboxylic acid-lactam, in addition to an acid identified as 3,4,5-trimethoxyphenyl propanoic acid and an isobutyl amide identified as 2-Propenamide, 3- (6-methoxy1,3- benzodioxol-5-yl) -N- (2-methylpropyl) - (2E), the first 3 being reported for the first time in the species. The antimicrobial activity of these four substances in Grampositive bacteria (Bacillus subtilis CCT 0516; Staphylococcus aureus 47; Staphylococcus aureus ATCC8027; and Gram-negative strains (Escherichia coli 13, Escherichia coli ATCC 2536, Pseudomonas aeruginosa ATCC 8027, Pseudomonas aeruginosa 102), however none of them exhibited antibacterial activity since there was no inhibition of the growth of Gram-positive and Gram-negative strains tested. Fundação de Apoio à Pesquisa do Estado da Paraíba - FAPESQ O gênero Piper é considerado o maior da família Piperaceae. Com mais de 2000 espécies já descritas, é encontrado principalmente em regiões tropicais e neotropicais. Possui um alto valor comercial pelo seu amplo uso tanto na medicina popular como na culinária tradicional, se tornando alvo de diversas pesquisas. Possuem um metabolismo diferenciado, produzindo classes de substâncias que não são usualmente encontradas como alcamidas aristolactamas, alcaloides aporfínicos e kavalactonas, aumentando ainda mais seu potencial terapêutico. Dentre as espécies do gênero Piper encontra-se a Piper mollicomum Kunth, conhecida popularmente como jaborandi ou jaborandi-manso e nesse trabalho, investigações químicas foram realizadas com suas raízes que foram coletadas no campus I da Universidade Federal da Paraíba, município de João Pessoa-PB. Os extratos metanólicos foram submetidos às cromatografias convencionais (adsorção-gel de sílica e XAD-2 e exclusão- gel de dextrana) resultando, após análises por métodos físicos (ponto de fusão) e espectrométricos (Espectrometria na região do Infravermelho e Ressonância Magnética Nuclear de 1H e 13C, incluindo técnicas uni e bidimensionais), em quatro substâncias identificadas como sendo duas aristolactamas – a 10-Metilamina-4-hidroxi-2,3-dimetoxifenantreno-1-ácido carboxílico-lactama e a 10-Metilamina-4-hidroxi-3-metoxifenantreno-1-ácido carboxílico-lactama, além de um ácido identificado como Ácido 3,4,5-trimetoxifenilpropanóico e uma amida isobutílica identificada como a 2-Propenamida, 3-(6-metoxi1,3-benzodioxol-5-il)-N-(2-metilpropil)-(2E), sendo as 3 primeiras relatadas pela primeira vez na espécie. Foram analisadas a atividade antimicrobiana dessas quatro substâncias em bactérias Gram-positivas (Bacillus. subtilis CCT 0516; Staphylococcus aureus 47; Staphylococcus aureus ATCC8027; ); e Gram-negativas (Escherichia coli 13; Escherichia coli ATCC 2536; Pseudomonas aeruginosa ATCC 8027; Pseudomonas aeruginosa 102) no entanto nenhuma delas exibiu atividade antibacteriana visto que não houve inibição do crescimento das cepas Grampositivas e Gram-negativas testadas.

FACEPE O aumento no número de microrganismos resistentes e a elevada toxicidade das drogas atualmente utilizadas torna necessária a busca por novos agentes com ação antimicrobiana. Lectinas são proteínas que se ligam de forma seletiva e reversível a carboidratos, apresentando diversas atividades biológicas, incluindo atividade antimicrobiana. A sarcotesta das sementes de romã (Punica granatum) contém uma lectina ligadora de quitina denominada PgTeL, já descrita como agente antibacteriano. A presente tese investigou a atividade antimicrobiana de PgTeL contra fungos do gênero Candida e isolados clínicos bacterianos de Staphylococcus aureus (não-resistente e resistente à meticilina, MRSA) e Escherichia coli (produtores de β-lactamases das famílias CTX-M, CMY e metalo-β-lactamases). Adicionalmente, foi investigada a toxicidade para células mononucleares de sangue periférico (PBMCs) humano. Atividade antifúngica de PgTeL foi detectada contra Candida albicans (concentração mínima inibitória, CMI: 25 μg/mL; concentração mínima fungicida, CMF: 50 μg/mL) e Candida krusei (CMI e CMF de 12,5 μg/mL). O tratamento das leveduras com PgTeL, mesmo em concentrações sub-inibitórias (½CMI e ¼CMI), resultou na diminuição do conteúdo de ATP intracelular e induziu peroxidação lipídica. Além disso, PgTeL danificou a integridade da parede celular de ambas as espécies, com efeitos mais pronunciados em C. krusei. Por fim, a lectina mostrou atividade antibiofilme contra C. albicans. Com relação aos efeitos sobre S. aureus, PgTeL apresentou atividade antibacteriana contra os isolados 8325-4 (não-resistente) e LAC USA300 (MRSA), interferindo tanto no crescimento (CMI de 6,25 e 12,5 μg/mL, respectivamente) quanto na sobrevivência (concentração mínima bactericida, CMB, de 25,0 e 50,0 μg/mL, respectivamente). O crescimento das culturas começou apenas na nona (8325-4) e na décima (LAC USA300) horas na presença de PgTeL na CMI, enquanto foi detectado desde a primeira hora no controle. A lectina causou alterações na morfologia celular como alongamento, enrugamento, perfurações, aumento no tamaho e lise celular, apresentou efeito anti-agregação e exibiu atividade antibiofilme contra ambos os isolados de S.aureus. Por outro lado, a lectina não interferiu com a atividade hemolítica de LAC USA300e na expressão dos genes hla e rnaIII que codificam hemolisina e RNAIII (efetor do sistema), respectivamente. PgTeL também não ativou a expressão de spa que codifica a proteína A. Os genes hla, rnaIII e spa estão ligados ao sistema de virulência Agr. Para os isolados de E. coli PgTeL apresentou tanto ação bacteriostática (CMI: 12,5 a 50 μg/mL) quanto bactericida (CMB: 25 a 100 μg/mL). A incubação com PgTeL atrasou o início da replicação das culturas em no mínimo 10 horas. Na CMI, a lectina causou alterações no tamanho, forma e estrutura das células de E. coli. A combinação PgTeL-ceftazidima apresentou efeito sinérgico com todos os isolados; efeito sinérgico também foi detectado com carbenicilina, cefotaxima, cefalexina e cefuroxima para um ou mais isolados de E. coli. Ainda, PgTeL apresentou ação antibiofilme contra todos os isolados. Quanto à citotoxicidade para células humanas PgTeL não interferiu na viabilidade das PBMCs quando testada nas concentrações de 1, 10 e 100 μg/mL. Em conclusão, PgTeL é uma molécula com potencial para tratamento de infecções fúngicas e bacterianas, inclusive contra isolados multirresistentes. The increase in the number of resistant microorganisms and the high toxicity of the currently used drugs makes necessary the search for new agents with antimicrobial action. Lectins are proteins that bind selectively and reversibly to carbohydrates, presenting several biological activities, including antimicrobial activity. The sarcotesta of pomegranate (Punica granatum L.) seeds contains a chitin-binding lectin called PgTeL, already described as antibacterial agent. The present thesis investigated the antimicrobial activity of PgTeL against fungi of Candida genus and bacterial clinical isolates of Staphylococcus aureus (non-resistant and methicillin resistant, MRSA) and Escherichia coli (producers of β-lactamases from the CTX-M, CMY and metallo-β-lactamases families). Additionally, toxicity to human peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) was investigated. Antifungal activity of PgTeL was detected against Candida albicans (minimum inhibitory concentration, MIC: 25 μg/mL, minimal fungicidal concentration, MFC: 50 μg/mL) and Candida krusei (MIC and MFC of 12.5 μg/mL). Treatment of yeasts with PgTeL, even at subinhibitory concentrations (½MIC and ¼MIC), resulted in a decrease in intracellular ATP content and induced lipid peroxidation. In addition, PgTeL damaged the cell wall integrity of both species, with more pronounced effects on C. krusei. Finally, the lectin showed antibiofilm activity against C. albicans. In respect to the effects on S. aureus, PgTeL presented antibacterial activity against the isolates 8325-4 (non-resistant) and LAC USA300 (MRSA), interfering in both growth (MIC of 6.25 and 12.5 μg/mL, respectively) and survival (minimum bactericidal concentration, MBC, 25.0 and 50.0 μg/mL, respectively). Growth of the cultures started only at the ninth (8325-4) and tenth (LAC USA300) hours in the presence of PgTeL at MIC, while it was detected since the first hour in the control. The lectin caused changes in cell morphology such as stretching, wrinkling, perforations, increase in size and cellular lysis, showed anti-aggregation effect and exhibited antibiofilm activity against both S. aureus isolates. On the other hand, the lectin did not interfere with the hemolytic activity of LAC USA300 and the expression of hla and rnaIII genes encoding hemolysin and RNAIII. PgTeL also did not activate expression of spa encoding protein A. The hla, rnaIII and spa genes are linked to the Agr virulence system. For E. coli isolates, PgTeL presented both bacteriostatic (MIC: 12.5 to 50 μg/mL) and bactericidal (MBC: 25 to 100 μg/mL) activities. Incubation with PgTeL delayed the start of culture replication in at least 10 hours. At the CMI, the lectin caused changes in the size, shape, and structure of E. coli cells. The PgTeL-ceftazidime combination showed synergistic effect with all isolates; synergistic effect was also detected with carbenicillin, cefotaxime, cephalexin and cefuroxime for one or more E. coli isolates. In addition, PgTeL presented antibiofilm action against all the isolates. In regard to the cytotoxicity to human cells, PgTeL did not interfere with the viability of PBMCs when tested at concentrations of 1, 10 and 100 μg/mL. In conclusion, PgTeL is a molecule with potential for the treatment of fungal and bacterial infections, including against multiresistant isolates.

Scientific evidence over time shows that Pseudomonas aeruginosa stands out among gram-negative, non-fermenting bacteria that promote high rates of morbidity, mortality and increased hospital costs worldwide. This microorganism is intrinsically resistant to the wide diversity of substances, being able to become resistant to several antimicrobial agents. There is now a significant limitation of the therapeutic arsenal that can be used to treat infections caused by this multiresistant bacterium, since Pseudomonas aeruginosa can develop resistance mechanisms during this therapy. Therefore, based on the resistance promoted by this bacterium, the researchers' attention is drawn to the possibility of the use of natural compounds, being these, medicinal plants and essential oils and their phytoconstituents in the prevention or treatment of diseases, among these phyto-constituents, , a phenylpropanoid. In this study, the antibacterial activity of isoeugenol against clinical strains of Pseudomonas aeruginosa was evaluated by means of in vitro assays: Determination of Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Bactericidal Concentration (MBC) and studies of the association of isoeugenol with conventional antimicrobials (gentamicin and meropenem). In the evaluation of the antibacterial activity, two standard strains and ten strains of microbial strains were used, isoeugenol had a MIC of 64 μg / mL and a CBM of 128 μg / mL, whereas for conventional antimicrobials gentamicin had an MIC of 1024 μg / mL and a CBM> 1024 μg / mL, whereas meropenem had its MIC and MBC of 32 μg / mL. The combination of phenylpropanoid with gentamicin showed a synergistic effect for both the standard strain and the microbial strain 297, whereas it was observed that the association of meropenem with the standard strain resulted in an additive or indifference effect and for the strain of microbial strain 297 an antagonistic effect. Therefore, the results obtained in this study suggest an antibacterial activity of isoeugenol against clonal strains of P. aeruginosa, either alone or in combination with standard antimicrobial agents. Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq Evidências científicas ao longo do tempo, demonstram que Pseudomonas aeruginosa destaca-se dentre as bactérias gram negativas não fermentadoras que promovem elevadas taxas de morbidade, mortalidade e aumento de custos hospitalares em âmbito mundial. Este micro-organismo é intrinsicamente resistente à ampla diversidade de substâncias, sendo capaz de se tornar resistente a diversos agentes antimicrobianos. Atualmente, verifica-se uma significativa limitação do arsenal terapêutico que pode ser empregado para o tratamento de infecções causadas por esta bactéria multirresistente, uma vez que a Pseudomonas aeruginosa pode desenvolver seus mecanismos de resistência durante essa terapia. Portanto, baseado na resistência promovida por essa bactéria desperta-se a atenção dos pesquisadores a possibilidade do uso de compostos naturais, sendo estes, plantas medicinais e óleos essenciais e seus fitoconstituintes na prevenção ou tratamento de enfermidades, dentre esses fitoconstituientes destaca-se o isoeugenol, um fenilpropanóide. Diante disso, foi avaliada atividade antibacteriana do isoeugenol contra cepas clínicas de Pseudomonas aeruginosa por meio de ensaios realizados in vitro: Determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericida Mínima (CBM) e estudos de associação do isoeugenol com antimicrobianos convencionais (gentamicina e meropénem). Na avaliação da atividade antibacteriana foram utilizados duas cepas padrões e dez cepas de linhagem microbianas, o isoeugenol apresentou uma CIM de 64 µg/mL e uma CBM de 128 µg/mL, já para os antimicrobianos convencionais a gentamicina apresentou uma CIM de 1024 µg/mL e uma CBM >1024 µg/mL, enquanto que o meropénem teve sua CIM e sua CBM de 32 µg/mL. A associação do fenilpropanoíde primeiramente com a gentamicina mostrou-se tanto para a cepa padrão quanto para a cepa de linhagem microbiana 297 um efeito sinérgico, diferentemente foi observado que na associação do meropénem com a cepa padrão resultou-se um efeito de aditividade ou indiferença e para a cepa de linhagem microbiana 297 um efeito de antagonismo. Com isso, os resultados obtidos nesse estudo sugerem uma atividade antibacteriana do isoeugenol frente a cepas clinas de P. aeruginosa, seja de forma isolada ou em associação com antimicrobiano padrão.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2019-08-22T14:28:00Z No. of bitstreams: 1 Marielly Bastos Cavalcante.pdf: 2397716 bytes, checksum: 6be77e2fb5df2b99bcd86bf968733efd (MD5) Made available in DSpace on 2019-08-22T14:28:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marielly Bastos Cavalcante.pdf: 2397716 bytes, checksum: 6be77e2fb5df2b99bcd86bf968733efd (MD5) Previous issue date: 2019-01-31 Staphylococcus spp. with ability to form biofilms are increasingly known to cause persistent intramammary infections and the search for alternatives to inhibit the development of biofilms is critical, especially when using plants with therapeutic potential. The objective of this study was to evaluate the antimicrobial, synergistic and antibiofilm effect of the crude ethanolic extract of Mimosa tenuiflora (CEEMT) against Staphylococcus aureus biofilm producers, in addition to verify the presence of efflux pump as mechanism of resistance of these bacteria. For the chemical characterization of the compounds present in CEEMT, phytochemical screening and ultra-performance liquid chromatography (UPLC) were performed. Phenotypic tests were used to analyze biofilm production, antimicrobial activity (with ethanolic extract and oxacillin) and antibiofilm, as well as synergism (checkerboard technique) and presence of efflux pump. From the analysis of the extract it was possible to identify the presence of phenolic compounds, anthocyanins, anthracene derivatives and hydrolysable tannins In the phenotypic test in microplates, all the isolates produced biofilm. The antimicrobial activity of the plant extract and oxacillin was observed in 100% of the isolates. Regarding biofilm formation, CEEMT was effective during its formation, but it was not able to revert the biofilm when it was already consolidated. In the checkerboard, it was possible to observe that the association of the extract with oxacillin was able to reduce the minimum bactericidal concentration of the antibiotic, showing that there was synergic interaction between both. Regarding the presence of efflux pump, no isolates were positive for the test. It is concluded that all the Staphylococcus aureus used in this study had the capacity to produce the biofilm, but did not present efflux pump. The ethanolic extract presented antimicrobial activity on all the isolates and also showed action against biofilm in formation, not being effective against already consolidated biofilm. Regarding the presence of efflux pump, no isolates were positive for the test. It is concluded that all the Staphylococcus aureus used in this study had the capacity to produce the biofilm, but did not present efflux pump. The association of EEBMT with oxacillin presented an important synergetic result, and the combination of the two substances proved to be more effective when compared to its use in isolation. From these results, it is possible to consider the ethanolic extract of M. tenuiflora as an important therapeutic alternative, being promising in the fight against S. aureus biofilm forming agents. Os Staphylococcus spp. com habilidade para formar biofilmes são cada vez mais conhecidos por causar infecções intramamárias persistentes e a busca por alternativas para inibir o desenvolvimento de biofilmes é fundamental, principalmente quando se utiliza plantas com potencial terapêutico. Desta forma, os objetivos desse estudo foram avaliar o efeito antimicrobiano, sinérgico e antibiofilme do extrato etanólico bruto de Mimosa tenuiflora (EEBMT) frente a Staphylococcus aureus produtores de biofilme, além de verificar a presença de bomba de efluxo como mecanismo de resistência dessas bactérias. Para a caracterização química dos compostos presentes no EEBMT, foram realizadas triagem fitoquímica e cromatografia líquida de ultra performance (UPLC). Testes fenotípicos foram utilizados para analisar a produção de biofilme, atividade antimicrobiana (com extrato etanólico e oxacilina) e antibiofilme, além do sinergismo (técnica de checkerboard) e presença de bomba de efluxo. A partir da análise do extrato foi possível identificar a presença de compostos fenólicos, antocianinas, derivados antracênicos e taninos hidrolisáveis. No teste fenotípico em microplacas, todos os isolados produziram biofilme. A atividade antimicrobiana do extrato vegetal e da oxacilina foi observada em 100% dos isolados. Com relação à formação de biofilme, o EEBMT foi eficaz durante a sua formação, porém não conseguiu reverter o biofilme quando o mesmo já estava consolidado. No checkerboard, foi possível observar que a associação do extrato com a oxacilina conseguiu reduzir a concentração bactericida mínima do antibiótico, mostrando que houve interação sinérgica entre ambos. Com relação à presença de bomba de efluxo, nenhum isolado foi positivo para o teste. Conclui-se que todos os Staphylococcus aureus utilizados nesse estudo apresentaram capacidade para produzir o biofilme, porém não apresentam bomba de efluxo. O extrato etanólico apresentou atividade antimicrobiana sobre todos os isolados e também mostrou ação contra biofilme em formação, não sendo eficaz contra biofilme já consolidado. A associação do EEBMT com oxacilina apresentou importante resultado sinérgico, sendo que a combinação das duas substâncias se mostrou mais eficaz quando comparado ao seu uso de forma isolada. A partir desses resultados, é possível considerar o extrato etanólico de M. tenuiflora como uma importante alternativa terapêutica, sendo promissora no combate a S. aureus formadores de biofilme.

Submitted by António Freitas (amsf@uma.pt) on 2019-02-26T10:26:02Z No. of bitstreams: 1 MestradoRafaelPinto.pdf: 2608791 bytes, checksum: 85d711797f546ab5864535f1775a1004 (MD5) Made available in DSpace on 2019-02-26T10:26:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MestradoRafaelPinto.pdf: 2608791 bytes, checksum: 85d711797f546ab5864535f1775a1004 (MD5) Previous issue date: 2019-01-14 Submitted by António Freitas (amsf@uma.pt) on 2019-02-26T10:26:09Z No. of bitstreams: 1 MestradoRafaelPinto.pdf: 2608791 bytes, checksum: 85d711797f546ab5864535f1775a1004 (MD5) Made available in DSpace on 2019-02-26T10:26:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MestradoRafaelPinto.pdf: 2608791 bytes, checksum: 85d711797f546ab5864535f1775a1004 (MD5) Previous issue date: 2019-01-14

Agradecimentos: The authors gratefully acknowledge FAPESP (Grant numbers: 2015/25406-5, 2017/11060-5, 2017/01167-7, 17/26471-0) and from Groupement de Recherches Liquides Ioniques et Polymères (GDR LIPS-CNRS #5223) Abstract: The design of new highly effective polymer materials as active surfaces or coatings against microorganisms such as Escherichia coli (E. coli) is a major challenge for public health. In the present work, novel imidazolium ionic liquid monomers (ILMs) having a similar structure of conventional Bisphenol A diglycidyl ether epoxy prepolymer (DGEBA) have been designed without requiring to the use of toxic and carcinogenic compounds i.e. Bisphenol A and epichlorohydrin. Then, a facile and efficient polyaddition reaction-based polymerization via a one step process was used in order to prepare unprecedented antibacterial epoxy-amine networks. The ultimate role of the monomers architecture on the epoxy conversion as well as on the reactivity of the epoxy-functionalized imidazolium ionic liquid monomers with an aliphatic amine (D-230) was investigated while the average molecular weight between crosslinks (Mc) and the relaxation temperature of the resulting networks were determined. Thus, new epoxy thermosets with an excellent thermal stability, high hydrophobic behavior and good storage modulus at room temperature were produced. Finally, antimicrobial tests against E. coli were performed for the first time on these new cross-linked epoxy networks leading to a very strong inhibition of E. coli biofilm formation (-95%) FUNDAÇÃO DE AMPARO À PESQUISA DO ESTADO DE SÃO PAULO - FAPESP Fechado

Orientadora: Profa. Dra. Amedea Barozzi Seabra Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do ABC. Programa de Pós-Graduação em Ciência e Tecnologia/Química, Santo André, 2019. As nanopartículas de prata (AgNPs) têm sido amplamente utilizadas em aplicações biomédicas devido ao seu potente efeito antimicrobiano. De maneira similar, o óxido nítrico (NO) apresenta uma atividade antitumoral e antibacteriana. O NO é uma molécula endógena, que está envolvida em diversos processos fisiológicos, possui um efeito antimicrobiano e tóxico para as células tumorais. Neste trabalho, as AgNPs foram sintetizadas biogenicamente a partir do extrato de chá verde, que possui polifenóis que atuam como agentes redutores e estabilizantes. Como o NO é um radical livre, sintetizou-se a S-nitrosoglutationa (GSNO), molécula que é capaz de doar o NO espontaneamente. Para aumentar as potencialidades de GSNO e AgNPs em aplicações biomédicas, a GSNO e as AgNPs foram incorporadas em filmes sólidos poliméricos de poli(álcool vinílico) (PVA) e poli(etilenoglicol) (PEG). As caracterizações das AgNPs demonstraram a formação bem-sucedida de nanopartículas esféricas, na nanoescala. Além disso, a presença dos polifenóis na superfície da nanopartícula foi confirmada, indicando que esses compostos atuam como agentes estabilizantes. As nanopartículas não demonstraram toxicidade significativa frente a queratinócitos humanos (HaCat) e uma potente ação antibacteriana frente a bactérias gram-positivas e gram-negativas. Os filmes obtidos foram caracterizados por diferentes técnicas, e os perfis de difusão de GSNO e AgNPs foram avaliados. Os resultados demonstraram a formação de filmes sólidos homogêneos de PVA/PEG contendo GSNO e/ou AgNPs na nanoescala distribuídos na matriz polimérica. Filmes de PVA/PEG contendo AgNPs demonstraram uma potente atividade antibacteriana contra diferentes linhagens bacterianas gram-positivas e gram-negativas. Os filmes de PVA/PEG contendo GSNO demonstraram toxicidade para as linhas celulares de carcinoma cervical humano (HeLa) e células de câncer da próstata humano (PC3) e não demonstraram toxicidade significativa frente a linhagens de células saudáveis. A incorporação simultânea de GSNO e de AgNPs em filmes de PVA/PEG diminuiu a viabilidade celular de ambas as linhas de células tumorais, em comparação com as células tratados com os filmes contendo GSNO ou AgNPs individualmente. O material obtido demonstra potencial em aplicações biomédicas como um material antimicrobiano e com propriedades antitumorais. Silver nanoparticles (AgNPs) have been widely used in biomedical applications due to their potent antimicrobial effect. Similarly, nitric oxide (NO) has antitumor and antibacterial activity. The NO is an endogenous molecule, which is involved in various physiological processes, that has an antimicrobial and toxic effects on tumor cells. In this work, AgNPs were biogenically synthesized by using the green tea extract, which has polyphenols that act as reducing and stabilizing agents. As NO is a free radical, S-nitrosoglutathione (GSNO), a spontaneous NO donor, was synthesized. To enhance the potential of GSNO and AgNPs in biomedical applications, GSNO and AgNPs were incorporated into poly(vinyl alcohol) (PVA) and poly(ethylene glycol) (PEG) polymeric films. The characterizations of AgNPs demonstrated the successful formation of spherical nanoparticles at nanoscale. In addition, the presence of the polyphenols on the surface of the nanoparticle was confirmed, indicating that these compounds act as stabilizing agents. The nanoparticles did not demonstrate significant toxicity to human keratinocytes (HaCat) cells and the nanoparticles demonstrated a potent antibacterial action against gram-positive and gram-negative bacteria. The obtained films were characterized by different techniques, and the diffusion profiles of GSNO and AgNPs were evaluated. The results demonstrated the formation of homogeneous solid films containing of PVA/PEG-containing GSNO and AgNPs, at the nanoscale distributed in the polymer matrix. PVA/PEG films containing AgNPs demonstrated potent antibacterial activity against different gram-positive and gram-negative bacterial strains and films of PVA/PEG containing GSNO and AgNPs showed toxicity to human cervical carcinoma (HeLa) cell lines and human prostate cancer cells (PC3) and the films did not demonstrate a significant toxicity against non-tumoral cells. The incorporation of GSNO and AgNPs into PVA/PEG films decreased the cell viability of both cancer cell lines, compared to the cells treated with the films containing GSNO or AgNPs individually. The obtained material demonstrates potential in biomedical applications as an antimicrobial material with antitumoral properties.

Agradecimentos: The authors thank the Research Support for Scientific and Technological Development Foundation of Maranhão [FAPEMA – BEPP 01087/18] and the National Council of Scientific and Technological Development, Brazil [CNPq - 237066/2012-2] for supporting this research. The authors also thank the University British of Columbia (UBC, Vancouver, Canada) Start-Up funds granted to RMC and APM Abstract: The aim of the study was to evaluate the effect of bioactive glass (45S5 and NbG) suspensions on bond strength (µTBS), hardness, modulus of elasticity, pH and antibacterial activity of the resin-dentin interfaces after 3 months. Groups with different concentrations (5% and 20%) of two types of glass (45S5 and NbG), and a control group (distilled water) were studied. Twenty-five extracted human third molars were etched with phosphoric acid. The data from µTBS, hardness and modulus of elasticity data were submitted to two-way ANOVA (suspension vs. time) and Holm-Sidak tests (=0.05). The antimicrobial activity data were analyzed by the Kruskal-Wallis test (a?=?5%). The interactions were significant among groups for µTBS (p?=?0.033). Significant reductions in µTBS were observed after 3 months storage in PBS for the Control and 5% NbG Groups. Suspensions with 5% and 20% 45S5 glass and 20% NbG resulted in stable µTBS values and increased hardness after 3 months. Both 20% suspensions (45S5 and NbG) increased the elastic modulus. A significant greater reduction in bacterial growth was observed with the use of 20% 45S5. Rewetting dentin with the suspension of 20% 45S5 glass prevented the reduction in bond strength; increased hardness; modulus of elasticity of the resin-dentin interface, and demonstrated antibacterial activity against Streptococcus mutans CONSELHO NACIONAL DE DESENVOLVIMENTO CIENTÍFICO E TECNOLÓGICO - CNPQ FUNDAÇÃO DE AMPARO À PESQUISA E AO DESENVOLVIMENTO CIENTÍFICO E TECNOLÓGICO DO MARANHÃO - FAPEMA Fechado

As alternativas naturais aos mais diversos produtos têm tido um foco de interesse cada vez mais relevante. Com os conhecimentos atuais sabe-se que químicos, como a clorexidina, têm um espectro de ação muito amplo destruindo também a flora benéfica oral. Os polifenóis são um produto natural que resulta de um metabolismo secundário de plantas e que tem vindo a ser falado pelos seus potenciais: anti-bacterianos, anti-placa, anti-inflamatório e remineralizante de esmalte dentário. Por este motivo foi feita uma revisão bibliográfica nos motores de pesquisa Pubmed ScienceDirect e Googleacadémico limitando as datas desde 2007 até à atualidade, para descobrir todos os potenciais dos polifenóis encontrados no vinho tinto e em extratos de grainha de uva. Concluiu-se que os polifenóis encontrados nestes dois compostos tiveram um efeito bactericida e que tinham um resultado positivo como coadjuvantes do flúor, aumentando a sua permanência na cavidade oral e potenciando a sua ação. Mais estudos terão de ser realizados para comprovar a eficácia destes compostos, embora, os polifenois pareçam realmente ser uma opção viável e que poderá, eventualmente, vir a substituir ou reduzir a utilização dos químicos na medicina dentária.

The steroids fucosterol (F) and campesterol (C) were isolated from Lobophora variegata and Palythoa caribaeorum, respectively. The goal of this study was to evaluate the activities of the steroids F and C, and their derivatives F-1 to F-12, and C-1 to C-12, aiming to establish the structure-activity relationship. The present work describes the structural modifications of steroids F and C, as well as the antibacterial activity against the strains of Klebsiella pneumoniae (ATCC 10031), Escherichia coli (ATCC 10536), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 15442), Streptococcus mutans (ATCC 0046) and Staphylococcus aureus (ATCC 6538), on Aedes aegypti larvae, as well as on the human cancer cell lines: MCF-7 human tumor cell lines (breast carcinoma), HL-60 (promyelocytic leukemia), and HCT-116 (colorectal cancer) of its derivatives. It is noteworthy that from the fucosterol twelve derivatives were obtained: (3β,20R,24E)-3-acetoxystigmasta-5,24(28)-diene (F-1), (3β,20R,24E)-3-butoxystigmasta-5,24(28)-diene (F-2), (3β,20R,24E)-3-hexanoxystigmasta-5,24(28)-diene (F-3), (3β,20R,24E)-3-benzoxystigmasta-5,24(28)-diene (F-4), (3β,20R,24E)-3-succinoxystigmasta-5,24(28)-diene (F-5), (3β,20R,24E)-3-hexadecanoxystigmasta-5,24(28)-diene (F-6), (3β,20R,24E)-(3)-4-fluorobenzoxystigmasta-5,24(28)-diene (F-7), (3β,20R,24E)-(3)-4-chlorobenzoxystigmasta-5,24(28)-diene (F-8), (3β,20R,24E)-(3)-4-bromobenzoxystigmasta-5,24(28)-diene (F-9), (3β,20R,24E)-(3)-4-nitrobenzoxystigmasta-5,24(28)-diene (F-10), (3β,20R,24E)-3-formyloxystigmasta-5,24 (28)-diene (F-11), and (3β,20R)-stigmastan-3-ol (F-12). This is the first report on the F-3, F-5, and F-7 to F-11 derivatives. Additionally, derivatives from the campesterol were also prepared: (3β,20R,24R)-3-acetoxyergost-5-ene (C-1), (3β,20R,24R)-3-butoxyergost-5-ene (C-2), (3β,20R,24R)-3-benzoxyergost-5-ene (C-4), (3β,20R,24R)-3-succinoxyergost-5-ene (C-5), (3β,20R,24R)-3-hexadecanoxyergost-5-ene (C-6), (3β,20R,24R)-(3)-4-fluorobenzoxyergost-5-ene (C-7), (3β,20R,24R)-(3)-4-chlorobenzoxyergost-5-ene (C-8), (3β,20R,24R)-(3)-4-bromobenzoxyergost-5-ene (C-9), (3β,20R,24R)-(3)-4-nitrobenzoxyergost-5-ene (C-10), (3β,20R,24R)-3-formyloxyergost-5-ene (C-11), and (3β,20R,24R)-ergostan-3-ol (C-12). Derivatives C-7, C-8, C-9 and C-11 are being reported for the first time. The derivatives were purified by silica gel chromatography and were obtained in good yields (68-98%). The structures of these substances were characterized by spectroscopic (IR, 1H NMR and 13C NMR) and spectrometric (MS) methods. Campesterol (C) and its semisynthetic derivatives C-1 to C-12 were submitted to bioassays on Aedes aegypti larvae, but did not show satisfactory results. The cytotoxic activity of the steroids F and C and its derivatives was investigated using the MTT method, however, no sample showed inhibition. The antibacterial activity of all derivatives was evaluated by means of the microdilution method and with the exception of the F-11 derivative, all the samples showed activity against Gram-positve (S. aureus e S. mutans) or Gram-negative bacteria (E. coli, P. aeruginosa e K. pneumoniae), or against the two cell strains (S. aureus, S. mutans, E. coli, P. aeruginosa e K. pneumoniae). It is noteworthy that the F-12, C-7 and C-9 derivatives presented moderate activity. Os esteroides fucosterol (F) e campesterol (C) foram isolados de Lobophora variegata e Palythoa caribaeorum, respectivamente. Com o objetivo de avaliar as atividades dos esteroides F e C e de seus derivados F-1 a F-12 e C-1 a C-12, visando estabelecer uma relação estrutura-atividade, o presente trabalho descreve as modificações estruturais dos esteroides F e C, assim como a avaliação das atividades: antibacteriana, sobre cepas de bactérias Klebsiella pneumoniae (ATCC 10031), Escherichia coli (ATCC 10536), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 15442), Streptococcus mutans (ATCC 0046) e Staphylococcus aureus (ATCC 6538), sobre larvas do Aedes aegypti, bem como frente às linhagens de células tumorais humanas MCF-7 (carcinoma de mama), HL-60 (leucemia promielocítica) e HCT-116 (câncer colorretal). Vale ressaltar que a partir do fucosterol foram obtidos doze derivados: (3β,20R,24E)-3-acetoxiestigmasta-5,24(28)-dieno (F-1), (3β,20R,24E)-3-butoxiestigmasta-5,24(28)-dieno (F-2), (3β,20R,24E)-3-hexanoxiestigmasta-5,24(28)-dieno (F-3), (3β,20R,24E)-3-benzoxiestigmasta-5,24(28)-dieno (F-4), (3β,20R,24E)-3-succinoxiestigmasta-5,24(28)-dieno (F-5), (3β,20R,24E)-3-hexadecanoxiestigmasta-5,24(28)-dieno (F-6), (3β,20R,24E)-(3)-4-fluorobenzoxiestigmasta-5,24(28)-dieno (F-7), (3β,20R,24E)-(3)-4-clorobenzoxiestigmasta-5,24(28)-dieno (F-8), (3β,20R,24E)-(3)-4-bromobenzoxiestigmasta-5,24(28)-dieno (F-9), (3β,20R,24E)-(3)-4-nitrobenzoxiestigmasta-5,24(28)-dieno (F-10), (3β,20R,24E)-3-formiloxiestigmasta-5,24(28)-dieno (F-11) e (3β,20R)-estigmastan-3-ol (F-12), sendo os derivados F-3, F-5 e F-7 a F-11 inéditos na literatura. Adicionalmente, a partir do campesterol foram obtidos os derivados: (3β,20R,24R)-3-acetoxiergost-5-eno (C-1), (3β,20R,24R)-3-butoxiergost-5-eno (C-2), (3β,20R,24R)-3-hexanoxiergost-5-eno (C-3), (3β,20R,24R)-3-benzoxiergost-5-eno (C-4), (3β,20R,24R)-3-succinoxiergost-5-eno (C-5), (3β,20R,24R)-3-hexadecanoxiergost-5-eno (C-6), (3β,20R,24R)-(3)-4-fluorobenzoxiergost-5-eno (C-7), (3β,20R,24R)-(3)-4-clorobenzoxiergost-5-eno (C-8), (3β,20R,24R)-(3)-4-bromobenzoxiergost-5-eno (C-9), (3β,20R,24R)-(3)-4-nitrobenzoxiergost-5-eno (C-10), (3β,20R,24R)-3-formiloxiergost-5-eno (C-11) e (3β,20R,24R)-ergostan-3-ol (C-12), sendo os derivados C-7 a C-9 e C-11 inéditos na literatura. Os derivados foram purificados através de cromatografia em gel de sílica e foram obtidos em bons rendimentos (68-98%). As estruturas dessas substâncias foram caracterizadas através de métodos espectroscópicos (IV, RMN 1H e RMN 13C) e espectrométrico (EM). Campesterol (C) e seus derivados semissintéticos C-1 a C-12 foram submetidos a bioensaios sobre larvas de Aedes aegypti, porém não exibiram resultados satisfatórios. A atividade citotóxica dos esteroides F e C e de seus derivados foi investigada, através do método do MTT, no entanto, nenhuma amostra apresentou inibição. A atividade antibacteriana dos derivados foi avaliada por meio do método de microdiluição e com exceção do derivado F-11, todos a amostras apresentaram atividade frente às bactérias Gram-positvas (S. aureus e S. mutans) ou Gram-negativas (E. coli, P. aeruginosa e K. pneumoniae), ou frente aos dois tipos celulares (S. aureus, S. mutans, E. coli, P. aeruginosa e K. pneumoniae). Vale ressaltar que os derivados F-12, C-7 e C-9 apresentaram moderada atividade.

RESUMO O presente estudo teve como objetivo avaliar a atividade antibacteriana, antioxidante e citotóxica da espécie Opuntia cochenillifera (L.) Mill. Foi realizada a prospecção fitoquímica e espectroscopia de absorção de infravermelho (IV) dos extratos etanólicos brutos e frações dos cladódios grande e pequeno. A atividade antioxidante foi avaliada pelo método da capacidade sequestradora de radicais livres utilizando o radical sintético 2,2-difenil-1-picrilhidrazila (DPPH). A atividade citotóxica foi obtida através do método colorimétrico do Metiltetrazolium (MTT). Já a atividade antibacteriana foi avaliada pelo método de microdiluição em caldo para determinar a concentração inibitória mínima (CIM) frente às estirpes bacterianas Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Pseudomonas aeruginosa e Escherichia coli. A prospecção fitoquímica revelou principalmente a presença de fenóis, esteroides livres, alcaloides, alcanos, além de outras classes químicas. O IV apresentou grupos funcionais como alcanos, carbonilas, grupos de metila, duplas ligações de carbono, grupamentos alquilamina, entre outros. Sobre a citotoxicidade na concentração de 100 μg/mL, os dois extratos brutos, todas as frações do cladódio grande e as frações de clorofórmio e metanol do cladódio pequeno não apresentaram toxicidade. Os extratos brutos e frações do cladódio grande e pequeno, não demonstraram atividade antibacteriana e nem antioxidante. Esses resultados podem fornecer suporte para pesquisas futuras, visando outras atividades biológicas da presente espécie vegetal. ABSTRACT The purpose of this study was to evaluate the antibacterial, antioxidant, and cytotoxic activity of Opuntia cochenillifera (L.) Mill. A phytochemical screening and infrared (IR) absorption spectroscopy were performed in the crude ethanolic extracts and fractions of large and small cladodes. The antioxidant activity was evaluated through the qualitative method of free-radical scavenging capacity using the synthetic radical 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH). The cytotoxic activity was obtained by the cell viability assay using methyl thiazolyl tetrazolium (MTT). Antibacterial activity was evaluated by broth microdilution method to determine the minimum inhibitory concentration (MIC) against the bacterial strains Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Pseudomonas aeruginosa, and Escherichia coli. The phytochemical screening mainly revealed the presence of phenols, flavonoids, free steroids, alkaloids, alkanes, and other chemical classes. The IR spectroscopy presented functional groups such as alkanes, carbonyls, methyl groups, carbon double bonds, and alkylamino groups, among others. Regarding cytotoxicity in the concentration of 100 μg/mL, neither the crude extracts, the fractions of the large cladode, nor the chloroform and methanol fractions of small cladode presented toxicity. The crude ethanolic extracts and fractions of large and small cladode showed no antibacterial or antioxidant activity. These results may provide support for future research aimed at other biological activities of this plant species.

Os produtos naturais, saudáveis e seguros têm vindo a ser uma tendência crescente por parte dos consumidores, forçando a novas pesquisas de forma, a encontrar novos produtos com ingredientes funcionais, evitando, deste modo, o uso de antibióticos. Estes incluem as microalgas, que ganharam, nos últimos anos, um importante destaque pelos seus valiosos compostos com a sua aplicação em vários sectores, como a farmacêutica, cosmética, biocombustíveis e na alimentação humana e animal. A otimização dos processos de produção, à escala industrial, é fundamental para a evolução deste sector. O presente trabalho permitiu avaliar a performance de crescimento de Nannochloropsis sp. e Skeletonema costatum em condições ambientais naturais. Partindo de placas de Petri, foi realizado o aumento de escala até aos fotobiorreatores tubulares de 15000 L da Necton, S.A.. As maiores produtividades (areal e volumétrica) foram verificadas, em modo de crescimento semi-contínuo, com a microalga Nannochloropsis sp.. A biomassa proveniente das microalgas supracitadas e de outras espécies, facultadas pela empresa Necton, S.A., tais como, Phaeodactylum tricornutum, Porphyridium cruentum, Isochrysis galbana e Tetraselmis chuii, são produtoras de compostos bioativos com capacidades terapêuticas (anti-tumural, anti-inflamatório, entre outras). Neste estudo, foi investigada a atividade antibacteriana das microalgas e seus derivados usando quatro extratos orgânicos (acetato de etilo, acetona, etanol e hexano). O seu efeito inibitório foi testado através do método de difusão em poços, para patógenos causadores de perdas económicas em aquacultura (Vibrio alginolyticus, Vibrio anguillarum e Photobacterium damselae subsp. piscicida). A P. damselae subsp. piscicida revelou ser a bactéria mais sensível aos extratos testados. Os extratos de acetato de etilo e acetona de S. costatum destacaram-se pelo seu poder contra as bactérias testadas. Por sua vez, a purificação do extrato de acetato de etilo gerou sete frações, das quais duas (80% de acetato de etilo em hexano e acetato de etilo) se distinguiram pelo seu efeito antibacteriano. Quando, analisadas por cromatografia líquida de alta eficiência a fucoxantina foi detetada como sendo o composto bioativo mais relevante. Natural, healthy and safe products have been a growing trend among consumers, forcing the need for new research to find new products with functional ingredients, avoiding this way of using antibiotics. These include microalgae, which have gained in recent years, importance for their valuable compounds that have been applied to various sectors such as pharmaceuticals, cosmetics, biofuels and food and feed. The optimization of industrial production processes is fundamental for the evolution of this sector. The present work allowed the evaluation of the growth performance of Nannochloropsis sp. and Skeletonema costatum under natural environmental conditions. Starting from Petri dishes, the scale-up was performed up to the 15000 L tubular photobioreactors of Necton, S.A., in semi-continuous. There were higher yields (areal and volumetric) in Nannochloropsis sp.. Biomass from the above-mentioned microalgae and others, such as Phaeodactylum tricornutum, Porphyridium cruentum, Isochrysis galbana and Tetraselmis chuii, produce bioactive compounds with therapeutic properties (anti-tumor, anti-inflammatory, among others). In this study, the antibacterial activity of the microalgae was investigated using four organic extracts (ethyl acetate, acetone, ethanol and hexane). Its inhibitory effect was tested by the well diffusion method for pathogens causing economic losses in aquaculture (Vibrio alginolyticus, Vibrio anguillarum and Photobacterium damselae subsp. piscicida). That said, P. damselae subsp. piscicida proved to be the most sensitive bacteria to the extracts tested. The ethyl acetate and acetone extracts of S. costatum were distinguished by their inhibitory power. In turn, purification of the ethyl acetate extract originated seven fractions, where two (80% ethyl acetate in hexane and ethyl acetate) distinguished themselves because of their antibacterial effect. The fucoxanthin was detected by high-performance liquid chromatography, as the most relevant bioactive compound. Mestrado em Microbiologia

Submitted by Janaína Araújo de Alvarenga (janaina_2406@hotmail.com) on 2019-02-21T20:33:53Z No. of bitstreams: 1 Dissertação + Ficha catalográfica.pdf: 2085602 bytes, checksum: 18a60868e1ca2d325ea273f85b68c2d8 (MD5) Approved for entry into archive by Silvana Alvarez null (silvana@ict.unesp.br) on 2019-02-25T13:05:02Z (GMT) No. of bitstreams: 1 alvarenga_ja_me_sjc.pdf: 2085602 bytes, checksum: 18a60868e1ca2d325ea273f85b68c2d8 (MD5) Made available in DSpace on 2019-02-25T13:05:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 alvarenga_ja_me_sjc.pdf: 2085602 bytes, checksum: 18a60868e1ca2d325ea273f85b68c2d8 (MD5) Previous issue date: 2018-11-26 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) O uso de probióticos como método de prevenção para a cárie dental tem sido amplamente investigado com resultados promissores. Portanto, torna-se necessário o desenvolvimento de formulações, para aplicação na cavidade bucal, que contenham cepas probióticas com atividade contra Streptococcus mutans. Assim, o objetivo desse projeto foi avaliar os efeitos antimicrobianos de formulações probióticas de Lactobacillus paracasei 28.4 sobre a atividade antibacteriana em crescimento planctônico, produção de polissacarídeos e formação de biofilmes de S. mutans. Inicialmente, a atividade antibacteriana de 3 diferentes formulações probióticas (concentrações de 0,5, 0,75 e 1% p/v de gellan gum em CaCl2) foram testadas em culturas planctônicas sobre cepas de S. mutans (cepa padrão UA 159 e 5 cepas clínicas). Os resultados demonstraram inibição total do crescimento das cepas de S. mutans quando tratadas com todas as formulações probióticas testadas. Nos estudos subsequentes, foram avaliados os efeitos profiláticos da formulação probiótica na concentração de 1% p/v nos biofilmes de 4 e 24 horas de S. mutans, utilizando-se a cepa UA 159 e 2 cepas clínicas. Por meio do método sulfúrico-antrona, foi observado que a aplicação da formulação probiótica reduziu a capacidade de produção de polissacarídeos extracelulares pelas cepas de S. mutans em aproximadamente 80% nos dois tempos dos biofilmes testados. A formulação probiótica também foi capaz de reduzir significativamente a biomassa total dos biofilmes de S. mutans nos testes de absorbância do Cristal Violeta, com redução média na leitura de densidade óptica de 2,15 ± 0,10 no tempo de 4 horas e 2,67 ± 0,25 no tempo de 24 horas. A seguir, os efeitos antimicrobianos da formulação probiótica foram avaliados em biofilmes de S. mutans formados sobre a superfície de discos de hidroxiapatita, encontrando-se reduções de 0,57 a 1,54 UFC (Log) na contagem de células viáveis de S. mutans nos grupos tratados em relação aos grupos controle. Também foi possível observar redução na quantidade de células de S. mutans aderidas aos discos de hidroxiapatita pela Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). Por fim, utilizando-se análise de Realtime PCR, foram testados os efeitos das formulações probióticas sobre a expressão de genes de virulência de S. mutans relacionados à adesão e formação do biofilme. Os resultados mostraram que na presença da formulação probiótica, os genes luxS, brpA, gbpB e gtfB de S. mutans foram negativamente regulados. Concluiu-se que a formulação probiótica contendo L. paracasei 28.4 em gellan gum apresentou efeitos inibitórios sobre o crescimento planctônico e biofilme de S. mutans, interferindo na produção de polissacarídeos extracelulares, quantidade de biomassa total, viabilidade celular, aderência de células à hidroxiapatita e transcrição de genes de virulência. The use of probiotics as a prevention method for dental caries has been extensively investigated with promising results. Therefore, it becomes necessary to develop formulations, for application in the oral cavity, containing probiotic strains with activity against Streptococcus mutans. Thus, the objective of this project was to evaluate the antimicrobial effects of probiotic formulations of Lactobacillus paracasei 28.4 on the antibacterial activity in planktonic growth, polysaccharide production and biofilms formation of S. mutans using reference and clinical strains. Firstly, antibacterial activity of 3 different probiotic formulations (concentrations of 0.5, 0.75 and 1% w/v of gellan gum in CaCl 2) were tested in planktonic cultures on S. mutans strains (standard strain UA 159 and 5 clinical strains). The results demonstrated complete inhibition of S. mutans strains growth when treated with all probiotic formulations tested. In the subsequent studies, the prophylactic effects of the 1% w/v probiotic formulation on 4 and 24 hours S. mutans biofilms were evaluated using the UA 159 strain and 2 clinical strains. Using the sulfuric-anthrone method, it was observed that the application of the probiotic formulation reduced the production capacity of extracellular polysaccharides by S. mutans strains in approximately 80% in both times of the biofilms tested. The probiotic formulation was also able to significantly reduce the total biomass of S. mutans biofilms in the Crystal Violet absorbance tests, with a mean reduction in the optical density reading of 2.15 ± 0.10 in 4 hours and 2.67 ± 0.25 in 24 hours. Next, the antimicrobial effects of the probiotic formulation were evaluated in S. mutans biofilms formed on the surface of hydroxyapatite discs, with reductions of 0.57 to 1.54 CFU (Log) in the viable cells count of S. mutans in the treated groups compared to the control groups. It was also possible to observe a reduction in the amount of S. mutans cells adhered to the hydroxyapatite disks by Scanning Electron Microscopy (SEM). Finally, using Realtime PCR analysis, the effects of probiotic formulations on the expression of S. mutans virulence genes related to adhesion and biofilm formation were tested. The results showed that in the presence of the probiotic formulation, the luxS, brpA, gbpB and gtfB genes of S. mutans were down regulated. It was concluded that the probiotic formulation containing L. paracasei 28.4 in gellan gum presented inhibitory effects on planktonic growth and S. mutans biofilm, interfering in the production of extracellular polysaccharides, amount of total biomass, cell viability, cell adhesion to hydroxyapatite and transcription of virulence genes. FAPESP: 2017/15529-8

The study aimed to evaluate the antimicrobial activity, antioxidant, toxicity and phytochemical screening of the Red Propolis Alagoas. Antimicrobial activity was evaluated by disk diffusion method. Determination of antioxidant activity was performed using the DPPH assay (1.1-diphenyl-2-picrylhydrazyl), FTC (ferric thiocyanate) and determination of phenolic compounds by Follin method. Toxicity was performed by the method of Artemia salina and cytotoxicity by MTT method. The phytochemical screening for the detection of allelochemicals was performed. The ethanol extract of propolis of Alagoas showed significant results for antimicrobial activity, and inhibitory activity for Staphylococcus aureus and Candida krusei. The antioxidant activity of the FTC method was 80% to 108.3% hydrogen peroxide kidnapping, the DPPH method showed an EC50 3.97 mg/mL, the content of total phenolic compounds was determined by calibration curve gallic acid, resulting from 0.0005 mg/100 g of gallic acid equivalent. The extract was non-toxic by A. salina method. The propolis extract showed high activity with a higher percentage than 75% inhibition of tumor cells OVCAR-8, SF-295 and HCT116. Chemical constituents were observed as flavonones, xanthones, flavonols, and Chalcones Auronas, Catechins and leucoanthocyanidins. It is concluded that the extract can be tested is considered a potential source of bioactive metabolites. Resumo O trabalho teve como objetivo avaliar a atividade antimicrobiana, antioxidante, a toxicidade e a prospecção fitoquímica da Própolis Vermelha de Alagoas. A atividade antimicrobiana foi avaliada pelo método de difusão em disco. A determinação do potencial antioxidante foi realizada utilizando o método de DPPH (1,1-difenil-2-picrilhidrazil), FTC (Tiocianato Férrico) e determinação de compostos fenólicos pelo método de Follin. A toxicidade foi realizada pelo método de Artemia salina e a citotoxicidade pelo método do MTT. Foi realizada a prospecção fitoquímica para a pesquisa de aleloquímicos. O extrato etanólico da própolis vermelha de Alagoas apresentou resultados significantes para atividade antimicrobiana, tendo a atividade inibitória para Staphylococcus aureus e Candida krusei. Quanto a atividade antioxidante o método de FTC teve 80% a 108,3% de sequestro de peróxido de hidrogênio, o método de DPPH apresentou um CE50 de 3,97 μg/mL, o teor de compostos fenólicos totais foi determinado mediante curva de calibração do ácido gálico, tendo resultado de 0,0005 mg/100 g equivalente de ácido gálico. O extrato foi atóxico pelo método de A. salina. O extrato da própolis mostrou elevada atividade com percentual de inibição maior que 75% sobre células tumorais OVCAR-8, SF-295 e HCT116. Foram observados constituintes químicos como flavononas, xantonas, flavonóis, Chalconas e Auronas, Catequinas e Leucoantocianidinas. Conclui-se que o extrato testado pode ser considerado é uma fonte potencial de metabólitos bioativos.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-12-03T16:41:48Z No. of bitstreams: 1 Edson Rodrigues Vieira.pdf: 3053840 bytes, checksum: 6fa3005312136ba67921305ef4792c35 (MD5) Made available in DSpace on 2018-12-03T16:41:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Edson Rodrigues Vieira.pdf: 3053840 bytes, checksum: 6fa3005312136ba67921305ef4792c35 (MD5) Previous issue date: 2018-10-23 Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Three samples of Rhizopus stolonifer UCP1300, R. microsporus UCP1304, R. arrhizus UCP1295, isolated from caatinga soils of Northeastern Brazil, were evaluated, evaluating the biotechnological potential in the production of glycosphingolipids, chitin and chitosan. The investigations carried out with Rhizopus stolonifer and R. microsporus sources in the MOS demonstrated the presence of a new biomolecule characterized as monohexosilceramides (CMHs), a highly conserved glycosphingolipídeo, suggesting that the several cellular forms, mainly, without growth, in the differentiation and in the change morphological. The antimicrobial activity assays of HCM were evaluated by Gram-positive and Gram-negative by the diffusion test in agar, observing the bacteria positive for Gram positive and negative. However, an antibacterial activity was performed only for Gram negative bacteria. It was also observed that the viability of the cells form the structure of the biofilm, being the results of the unpublished. And a CMH isolated from R. microsporus was able to inhibit the biofilm formation of bacteria Staphylococcus aureus (MRSA) in all parameters tested. The production of the chitin and chitosan copolymers by Rhizopus arrhizus UCP 1295 was investigated using the effluent from the millet juice and juice industry with alternative and low cost substrates. The biomass obtained was lyophilized and subjected to alkaline-acid treatment to obtain chitin and chitosan. The polysaccharides were characterized by spectroscopy in the infrared region. It was observed that the highest production of biomass (14,11g / L) was produced without test 6 (8% industrial effluent, 5% corncine and pH 5). However, the highest yield of chitosan (23.91 mg / g) was higher in chitosan (16.93 mg / g) without test 3 (4% industrial effluent, 0% corn and pH 7). test 1 (4% industrial effluent, 0% corncine and pH 5). The chitin and chitosan polysaccharides have a degree of acetylation of 86% and a degree of deacetylation of 71.4%, respectively. The production of chitin and chitosan is based on the conversion of the sweet industrial product into the renewable and alternative substrate, into industrial production, production and product quality. The studies carried out with the strains of Rhizopus stolonifer UCP1300, R. microsporus UCP1304, R. arrhizus UCP1295, indicated potential of biotechnological growth, demonstrated promising antibacterial activity and applicability in the pharmaceutical industry. Foram testados três amostras de Rhizopus stolonifer UCP1300, R. microsporus UCP1304, R. arrhizus UCP1295, isoladas de solos da caatinga do Nordeste

Submitted by Celso Magalhaes (celsomagalhaes@ufrrj.br) on 2021-05-27T11:55:01Z No. of bitstreams: 1 2018 - Elizabeth Teixeira de Almeida Ramos.pdf: 3348904 bytes, checksum: 4d2882d0af7f3a837dbca740e865f714 (MD5) Made available in DSpace on 2021-05-27T11:55:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2018 - Elizabeth Teixeira de Almeida Ramos.pdf: 3348904 bytes, checksum: 4d2882d0af7f3a837dbca740e865f714 (MD5) Previous issue date: 2018-09-27 Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES Gluconacin is a bacteriocin produced by the diazotrophic bacterium Gluconacetobacter diazotrophicus strain PAL5. The present study aimed to establish the best conditions for heterologous production and purification of this antimicrobial peptide and to evaluate its spectrum on phytopathogens and beneficial bacteria of importance for sugarcane and tomato crops. In vitro evaluations were performed to elucidate the mechanism of action of this bacteriocin, as well as to verify its stability against physical and chemical changes. The biotechnological potential of gluconacin was tested in vivo in tomato plants the protection against Xanthomonas perforans, causal agent of the bacterial spot. The results demonstrated that recombinant gluconacin was expressed and purified satisfactorily. This antimicrobial agent demonstrated a broad spectrum of action, inhibiting growth of all bacterial phytopathogens evaluated. In addition, gluconacin has also shown antagonism against some beneficial strains belonging to species of Bacillus and other strains of G. diazotrophicus. Phytopathogen Xanthomonas albilineans cells (model microorganism) treated with bacteriocin showed loss of inorganic phosphate and UV absorbing compounds. Scanning microscopy analyzes demonstrated that the cells were fully lysed after treatment, suggesting that bacteriocin gluconacin alters the integrity of the membrane and increases its permeability, resulting in complete cell lysis. The physico-chemical characterization results indicated stability of the antibacterial activity at high temperatures and acid pH's, while a reduction of this activity was observed after treatment with some proteases and surfactants. Greenhouse evaluations showed a significant reduction of bacterial spot symptoms in plants treated with the antimicrobial peptide, suggesting a great biotechnological potential Gluconacina ? uma bacteriocina produzida pela bact?ria diazotr?fica Gluconacetobacter diazotrophicus, estirpe PAL5. O presente estudo teve como objetivo estabelecer as melhores condi??es para produ??o heter?loga e purifica??o desse pept?deo antimicrobiano, e avaliar seu espectro de a??o sobre fitopat?genos e bact?rias ben?ficas de import?ncia para as culturas de cana-de-a??car e tomate. Foram realizadas avalia??es in vitro para elucidar o mecanismo de a??o dessa bacteriocina, al?m de verificar sua estabilidade frente ? altera??es f?sicas e qu?micas. O potencial biotecnol?gico da gluconacina foi testado in vivo em plantas de tomate na prote??o contra Xanthomonas perforans, agente causal da mancha bacteriana. Os resultados demonstraram que a gluconacina recombinante foi expressa e purificada de forma satisfat?ria. Este agente antimicrobiano demonstrou amplo espectro de atua??o, inibindo o crescimento de todos os fitopat?genos bacterianos avaliados. Em adi??o, a gluconacina tamb?m demonstrou antagonismo contra algumas estirpes ben?ficas pertencentes a esp?cies de Bacillus e outras estirpes de G. diazotrophicus. C?lulas do fitopat?geno X. albilineans (microrganismo modelo) tratadas com a bacteriocina apresentaram perda de fosfato inorg?nico e compostos absorventes de UV. As an?lises de microscopia de varredura demonstraram que as c?lulas foram totalmente lisadas ap?s o tratamento, sugerindo que a bacteriocina gluconacina altera a integridade da membrana e aumenta sua permeabilidade, resultando em completa lise celular. Os resultados de caracteriza??o f?sico-qu?mica indicaram estabilidade da atividade antibacteriana em altas temperaturas e pH?s ?cidos, enquanto foi observada redu??o dessa atividade ap?s o tratamento com algumas proteases e surfactantes. As avalia??es em casa de vegeta??o demonstraram significativa redu??o dos sintomas da mancha bacteriana em plantas tratadas com o pept?deo antimicrobiano, sugerindo grande potencial biotecnol?gico.

Submitted by Sandra Pereira (srpereira@ufrrj.br) on 2021-05-12T13:54:33Z No. of bitstreams: 1 2018 - Carla Cristina da Silva.pdf: 2750023 bytes, checksum: e8fe906b016884629b9bd10e5c1cca82 (MD5) Made available in DSpace on 2021-05-12T13:54:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2018 - Carla Cristina da Silva.pdf: 2750023 bytes, checksum: e8fe906b016884629b9bd10e5c1cca82 (MD5) Previous issue date: 2018-08-15 CAPES - Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior Bacteria are unicellular beings that can be found alone or in colonies. In the 19th century, scientists began to associate some diseases with certain species of bacteria. Researchers have since sought compounds capable of acting on these species of bacteria and minimizing the effects of infectious processes caused by some of them and considered serious. Several classes of compounds have been discovered throughout the 20th century capable of inhibiting the growth or even causing the death of pathogenic bacteria. However, the large capacity of these mutated bacteria led to the emergence of strains resistant to these substances. Thus, the development of new compounds with antibacterial potential is necessary. Several research groups have developed new prototypes to antibacterial drugs from natural products that already have satisfactory biological activity, such as quinones. In this work 11 compounds were synthesized from the reaction of 1,4-naphthoquinone and 11 different amines. The compounds obtained were characterized by infrared and 1H and 13C NMR spectroscopy. Six compounds were tested for Minimum Inhibitory Concentration against 4 strains of Gram-positive bacteria and 5 strains of Gram-negative bacteria. Of the compounds tested, three were active against various bacteria at concentrations ranging from 31.2 to 250 ?g / ml. For the compounds that showed better antibacterial activity, the interaction with human serum albumin, a protein present in large numbers in the higher mammals and responsible for the transport of biologically active molecules, was tested. The Ksv and Ka values obtained indicate moderate interaction formation between the HSA and the compounds tested, ensuring satisfactory bioavailability of the compounds in the blood plasma. Thus, the results obtained in this work indicate that the synthesized 1,4-naphthoquinone amino derivatives can be used as potential antibacterial agents against some species of Gram-positive and Gram-negative bacteria. As bact?rias s?o seres unicelulares que podem ser encontradas sozinhas ou em col?nias. No s?culo XIX, cientistas come?aram a associar algumas doen?as ? determinadas esp?cies de bact?rias. Desde ent?o os pesquisadores buscam compostos capazes de atuarem sobre essas esp?cies de bact?rias e minimizar os efeitos de processos infecciosos causados por algumas delas e considerados graves. Foram descobertas diversas classes de compostos ao longo do s?culo XX capazes de inibir o crescimento ou at? mesmo de causar a morte de bact?rias patog?nicas. Por?m, a grande capacidade destas bact?rias de sofrer muta??o levou ao surgimento de cepas resistentes a estas subst?ncias. Assim, o desenvolvimento de novos compostos com potencial antibacteriano ? necess?rio. Diversos grupos de pesquisa tem desenvolvido novos prot?tipos ? f?rmacos antibacterianos a partir de produtos naturais que j? apresentam atividade biol?gica satisfat?ria, como as quinonas. Neste trabalho de disserta??o foram sintetizados 11 compostos a partir da rea??o da 1,4-naftoquinona e 11 aminas diferentes. Os compostos obtidos foram caracterizados por espectroscopia de infravermelho e RMN 1H e 13C. Foram ensaiados 6 compostos para determina??o da Concentra??o Inibit?ria M?nima frente a 4 cepas de bact?rias Gram-positivas e 5 cepas de bact?rias Gram-negativas. Dos compostos ensaiados, tr?s mostraram-se ativos contra diversas bact?rias, em concentra??es que variaram entre 31,2 e 250 ?g/mL. Para os compostos que apresentaram melhor atividade antibacteriana foi testada a intera??o com a soro albumina humana, prote?na presente em grande quantidade nos mam?feros superiores e respons?vel pelo transporte de mol?culas biologicamente ativas. Os valores de Ksv e Ka obtidos indicam forma??o de intera??o moderada entre a HSA e os compostos ensaiados, garantindo biodisponibilidade satisfat?ria dos compostos no plasma sangu?neo. Assim, os resultados obtidos neste trabalho indicam que os amino-derivados da 1,4-naftoquinona sintetizados podem ser utilizados como potenciais agentes antibacterianos contra algumas esp?cies de bact?rias Gram-positivas e Gram-negativas.

Staphylococcus aureus are microorganisms of great clinical importance, as they are the main agents responsible for bacterial infection, both hospital and community, and are highly resistant to antibiotics. What is resistant to resistance to a challenge for the protection process are the antimicrobial characteristics that are effective in combating these microorganisms. In search of new therapeutic alternatives for the treatment of infections, vegetable products of plant origin can be important sources of new substances that can be used for these flippers, such as essences and their phytochemicals, such as Isoeugenol, a phenylpropanoid. Therefore, the antibacterial activity of isoeugenol against clinical strains of Staphylococcus aureus was evaluated through in vitro assays: Determination of Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Bacterial Concentration (MBC), determining the efficacy of the concentration on growth kinetics microbial. (time-kill) and association studies of isoeugenol with standard antibiotic (gentamicin). In the evaluation of the antibacterial activity, isoeugenol presented MIC of 512 μg / mL and in the CBM there was growth of the microorganism in all the concentrations. In the assay of death microbial (time-kill), isoeugenol showed bacterial activity that did not depend on the concentration, since the increase of the same did not provoke a significant increase of the activity. The association of phenylpropanoide with gentamicin was promoted for a clinical treatment of S. aureus S.A-116. With this, the results are studied with the use of isoeugenol presents antibacterial activity against S. aureus, either alone or in association with the antimicrobial standard. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Staphylococcus aureus são microrganismos de grande importância clínica, pois são um dos principais agentes responsáveis por infecções bacterianas, tanto no ambiente hospitalar como na comunidade, e apresentam grande resistência aos antibióticos. Sabendo que bactérias resistentes a múltiplas drogas representam um desafio para o tratamento das infecções é necessário encontrar novas substâncias com propriedades antimicrobianas que sejam eficazes no combate a estes microrganismos. Na busca de novas alternativas terapêuticas para o tratamento dessas infecções, os produtos naturais de origem vegetal constituem umas das mais importantes fontes de novas substancias que podem ser utilizadas para estes fins, destacando os óleos essências e seus fitoconstituintes, como o Isoeugenol, um fenilpropanoide. Diante disso, foi avaliada a atividade antibacteriana do isoeugenol frente cepas clínicas de Staphylococcus aureus através de ensaios realizados in vitro: Determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericida Mínima (CBM), avaliação do efeito da substância sobre a cinética de crescimento microbiano (time-kill) e estudos de associação do isoeugenol com antibiótico padrão (gentamicina). Na avaliação da atividade antibacteriana, o isoeugenol apresentou CIM de 512 μg/mL e na CBM houve crescimento do microrganismo em todas as concentrações. No ensaio de cinética de morte microbiana (time-kill), o isoeugenol demonstrou atividade bacteriostática que não dependente da concentração, já que o aumento da mesma não provoca aumento significativo da atividade. A associação do fenilpropanoide com a gentamicina mostrou que para a cepa clínica de S. aureus S.A-116 a associação resultou em um efeito sinérgico, e para a cepa ATCC-150 efeito de aditividade ou indiferença. Com isso, os resultados desse estudo sugerem que o isoeugenol apresenta atividade antibacteriana frente cepas de S. aureus, seja de forma isolada ou em associação com o antimicrobiano padrão.

This paper reports the synthesis and detailed characterization of six novel lanthanide complexes of La(III), Eu(III) and Nd(III) with N(4)-substituted thiosemicarbazones derived from the 2-carboxybenzaldehyde. The IR, 1H-NMR and 13C-NMR spectroscopic studies confirmed the coordination of the thiocarbonyl (C=S), azomethine (C=N) and carboxylate (COO-) groups to the metal centers, and the carboxylate was coordinated in a bidentate manner. The elemental and thermal analyses suggest that lanthanide complexes were formed in 1:2 molar ratios (metal:ligand). The molar conductivity values confirmed the non-electrolytic nature of the complexes. The interaction of these complexes with calf thymus DNA (CT-DNA) was investigated by UV absorption and viscosity measurements. It was found that the Eu(HI) and Nd(nI) complexes could roll along the DNA strands through groove interactions. Furthermore, lanthanide complexes could promote the oxidative cleavage of plasmid pBR322 in a high-oxidative stress environment. Finally, the Schiff base ligands (L) and their complexes were evaluated for their antibacterial activities against gram-positive and gram-negative bacteria using a microdilution procedure. The results indicate that the lanthanide complexes exhibit more potent antibacterial activity than the free ligands. Resumen Este articulo reporta la síntesis y caracterización detallada de seis nuevos complejos lantánidos de La(III), Eu(III) y Nd(III) con tiosemicarbazonas N(4)-sustituidas derivadas del 2-carboxibenzaldehído. Los estudios espectroscópicos de IR, 1H-NMR y 13C-NMR confirmaron la coordinación de los grupos tiocarbonilo (C=S), azometina (C=N) y carboxilato (COO-) a los centros metálicos, y el carboxilato se coordinó de forma bidentada. Los análisis elemental y térmico sugieren que los complejos lantánidos se formaron en proporciones molares 1:2 (metal:ligando). Los valores de conductividad molar confirmaron la naturaleza no eléctrica de los complejos. Por medio de medidas de absorción UV y de viscosidad se investigó la interacción entre estos complejos con DNA de timo de ternera (CT-DNA). Se encontró que los complejos Eu(III) y Nd(III) podrían correr a lo largo de cadenas de DNA a través de interacciones en el surco. Además, los complejos lantánidos podrían promover el clivaje oxidativo del plásmido pBR322 en un ambiente de alto estrés oxidativo. Finalmente, se evaluaron las actividades antibacteriales de las bases de Schiff como ligandos (L) y sus complejos contra bacterias gram-positivas y gram-negativas usando un procedimiento de microdilución. Los resultados indican que los complejos lantánidos exhiben una actividad antibacterial más potente que los ligandos libres. Resumo Este artigo reporta a síntese e caracterização detalhada de seis novos complexos lantanídeos de La(III), Eu(III) e Nd(III) com tiosemicarbazonas N(4)-substituídas derivadas do 2-carboxibenzaldeído. Os estudos espectroscópicos de IR, 1H-RMN e 13C-RMN confirmaram a coordenação dos grupos tiocarbonilos (C = S), azometina (C=N) e carboxilato (COO-) com os centros metálicos, e o carboxilato se coordenou de forma bidentada. As análises elementares e térmicas sugerem que os complexos lantanídeos se formaram em proporções molares 1:2 (metal:ligante). Os valores de condutividades molar confirmaram a natureza não-elétrica dos complexos. Se avaliou a interação entre estes complexos com DNA de vitela (CT-DNA) por meio de medidas de absorção UV e de viscosidade. Se observou que os complexos Eu(III) e Nd(III) poderiam deslocar-se ao longo da cadeia de DNA através de interações no sulco. Adicionalmente, os complexos lantanídeos poderiam promover a clivagem oxidativa do plasmídeo pBR322 em um ambiente de alto estresse oxidativo. Finalmente, se avaliaram as atividades antibacterianas das bases de Schiff como ligantes (L) e seus complexos contra bactérias gram-positivas e gram- negativas, usando o método de microdiluição. Os resultados indicam que os complexos lantanídeos exibem uma atividade antibacteriana mais potente que os ligantes livres.

Submitted by Karem Dantas (karem.c.dantas@gmail.com) on 2018-10-08T13:14:37Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Disserta????o - Karen Maciel PPGQ.pdf: 3765862 bytes, checksum: fbbb4a3ff00a9023a5d2df07e3afbb67 (MD5) Approved for entry into archive by Marcos Roberto Gomes (mrobertosg@gmail.com) on 2018-10-08T14:49:20Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Disserta????o - Karen Maciel PPGQ.pdf: 3765862 bytes, checksum: fbbb4a3ff00a9023a5d2df07e3afbb67 (MD5) Approved for entry into archive by Divis??o de Documenta????o/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-10-09T17:19:39Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Disserta????o - Karen Maciel PPGQ.pdf: 3765862 bytes, checksum: fbbb4a3ff00a9023a5d2df07e3afbb67 (MD5) Made available in DSpace on 2018-10-09T17:19:39Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Disserta????o - Karen Maciel PPGQ.pdf: 3765862 bytes, checksum: fbbb4a3ff00a9023a5d2df07e3afbb67 (MD5) Previous issue date: 2018-04-24 CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient??fico e Tecnol??gico The amazonian fruit residues are promising sources of chemical and metabolites constituents that are responsible for various biological activities. Many of these substances are able to inhibit the growth of microorganisms that cause infectious diseases. Among these fruits, the piqui?? (Caryocar villosum) is a native fruit of the Amazonian Forest, a species belonging to the family Caryocaraceae, much appreciated for its pulpy flesh and excellent quality of its wood. Recent studies describe bioactive substances in ethanolic and hydroalcoholic extracts of bark and seeds that have antioxidant, enzymatic and photoprotective properties. The present work studied the chemical composition of the bioactive extracts of peels and seeds of piqui??. After cleaning, drying and grinding, the peels and pulverized seeds were extracted by maceration and Soxhlet with ethanol and, comparatively, with increasing polarity solvents (hexane, ethyl acetate and methanol). The ethanolic extracts were submitted to the liquid-liquid partition with hexane, dichloromethane, ethyl acetate and methanol. All the extracts and fractions were submitted to tests in Fiocruz to evaluate the antibacterial activity by agar diffusion technique against Gram positive and negative bacteria and for antiplasmodial evaluation by flow cytometry. In biological activity tests, the FASP fraction was moderately active against the bacteria Staphylococcus aureus (12 mm), methicillin resistant Staphylococcus aureus (12 mm) and Shigella flexneri (15 mm), while the FHCP, EMCP, EMSP and EECP samples showed low activity against the bacterium Shigella flexneri with inhibition halos 11 mm, 11 mm, 10 mm and 9 mm, respectively. In the antiplasmodial evaluation only the EACP extract showed significant inhibition of the parasite Plasmodium falciparum, with a percentage of parasite inhibition above 60% in all concentrations tested. The phytochemical study of the bioactive samples was performed by chromatographic techniques and the identification of the substances was performed by spectroscopic and spectroscopic techniques. In the thin layer chromatography (TLC) analyzes of the samples, bands with characteristic coloration of phenolic compounds, flavonoids, saponins and terpenes were observed. The FHCP sample was analyzed by TLC and fractionated by flash column chromatography, one of the fractions was identified as a mixture of the phytosterols ??-sitosterol and stigmasterol by the spectrometric analyzes in comparison of the data with the literature. Chromatographic, spectroscopic and spectrometric data of the FASP fraction and the EMCP / EMSP / EACP extracts compared to the literature data allowed to identify the presence of gallic and ellagic acid derivatives and may be the main compounds responsible for the bioactivity of extracts and fractions of the fruit. Os res??duos de frutos amaz??nicos s??o fontes promissoras de constituintes qu??micos e metab??litos que s??o respons??veis por diversas atividades biol??gicas. Muitas dessas subst??ncias s??o capazes de inibir o crescimento de microorganismos causadores de doen??as infecciosas. Dentre esses frut??feros, o piqui?? (Caryocar villosum) ?? um fruto nativo da Floresta amaz??nica, uma esp??cie pertencente ?? fam??lia Caryocaraceae, bastante apreciado por sua polpa carnosa e ??tima qualidade de sua madeira. Estudos recentes descrevem subst??ncias bioativas em extratos etan??licos e hidroalco??licos de cascas e sementes que possuem atividades antioxidantes, enzim??ticas e capacidade fotoprotetora. O presente trabalho estudou a composi????o qu??mica dos extratos bioativos de cascas e sementes de piqui??. Ap??s limpeza, secagem e tritura????o, as cascas e sementes pulverizadas foram extra??das por macera????o e Soxhlet com etanol e, comparativamente, com solventes de polaridade crescente (hexano, acetato de etila e metanol). Os extratos etan??licos foram submetidos ?? parti????o l??quido-l??quido com hexano, diclorometano, acetato de etila e metanol. Todos os extratos e fra????es foram submetidos a testes na Fiocruz para avalia????o da atividade antibacteriana pela t??cnica de difus??o em ??gar contra bact??rias Gram positivas e negativas e para avalia????o antiplasm??dica por citometria de fluxo. Em testes de atividade biol??gica, a fra????o FASP mostrou-se moderadamente ativa frente ??s bact??rias Staphylococcus aureus (12 mm), Staphylococcus aureus resistente ?? meticilina (12 mm) e Shigella flexneri (15 mm), enquanto que as amostras FHCP, EMCP, EMSP e EECP apresentaram baixa atividade frente ?? bact??ria Shigella flexneri com halos de inibi????o 11 mm, 11 mm, 10 mm e 9 mm, respectivamente. Na avalia????o antiplasm??dica apenas o extrato EACP apresentou inibi????o significativa do parasita Plasmodium falciparum, com porcentagem de inibi????o parasit??ria acima de 60% em todas as concentra????es testadas. O estudo fitoqu??mico das amostras bioativas foi realizado por t??cnicas cromatogr??ficas e a identifica????o das subst??ncias foi realizada por t??cnicas espectrom??tricas e espectrosc??picas. Nas an??lises por cromatografia em camada delgada (CCD) das amostras, observou-se bandas com colora????o caracter??stica de compostos fen??licos, flavonoides, saponinas e terpenos. A amostra FHCP foi analisada por CCD e fracionada por cromatografia em coluna flash, uma das fra????es foi identificada como mistura dos fitoester??is ??-sitosterol e estigmasterol pelas an??lises espectrom??tricas em compara????o dos dados com a literatura. Dados cromatogr??ficos, espectrosc??picos e espectrom??tricos da fra????o FASP e dos extratos EMCP/EMSP/EACP em compara????o com os dados liter??rios permitiram identificar a presen??a de derivados de ??cidos g??lico e el??gico e podem ser os principais compostos respons??veis pela bioatividade dos extratos e fra????es do fruto.

Resumo Introdução: a espécie Hyptis martiusii Benth, comumente chamada de "cidrera del campo", têm múltiplas propriedades biológicas, como ser inseticida, antifúngica e anti-inflamatória. O objetivo deste estudo foi investigar a atividade moduladora do óleo essencial das folhas frescas de Hyptis martiusii em associação com diferentes antibióticos contra as bactérias Staphylococcus aureus, Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa, e avaliar a atividade citotóxica da espécie. Materiais e métodos: o estudo utilizou a concentração inibitória mínima (CIM) como uma forma de avaliar a modulação com uma inoculação de 100 microlitros de cada estirpe bacteriana. As provas de citotoxicidade se realizaram mediante cultivo in vitro de células do tecido conectivo de camundongo (fibroblastos de mamíferos). Resultados: a pesquisa demonstrou que o óleo essencial das folhas de Hyptis martiusii Benth (OEHM) apresenta sinergismo só em associação com os antibióticos gentamicina e imipenem contra as bactérias Pseudomonas aeruginosa e Escherichia coli. No entanto, apresenta antagonismo em associação com amicacina, gentamicina e imipenem contra as três bactérias estudadas. Para além da ciprofloxacina não demonstrou resultados relevantes. Em relação com a atividade citotóxica, a concentração letal média (LC50) expôs um valor de 263,12 [ig/ml. Conclusão: finalmente, revelou-se que a H. martiusii apresenta atividade citotóxica sinérgica contra as bactérias avaliadas. Resumen Introducción: la especie Hyptis martiusii Benth, comúnmente llamada "cidreira do campo", tiene múltiples propiedades biológicas, como ser insecticida, antifúngica y antiinflamatoria. El objetivo de este estudio fue investigar la actividad moduladora del aceite esencial de las hojas frescas de Hyptis martiusii en asociación con diferentes antibióticos contra las bacterias Staphylococcus aureus, Escherichia coli y Pseudomonas aeruginosa, y evaluar la actividad citotóxica de la especie. Materiales y métodos: el estudio utilizó la concentración mínima inhibitoria (CMI) como una forma de evaluar la modulación con una inoculación de 100 microlitros de cada cepa bacteriana. Las pruebas de citotoxicidad se realizaron mediante cultivo in vitro de células de tejido conectivo de ratón (fibroblastos de mamíferos). Resultados: la investigación demostró que el aceite esencial de las hojas de Hyptis martiusii Benth (OEHM) presenta sinergismo solo en asociación con los antibióticos gentamicina e imipenem contra las bacterias Pseudomonas aeruginosa y Escherichia coli. Sin embargo, presenta antagonismo en asociación con amikacina, gentamicina e imipenem contra las tres bacterias estudiadas. Además de la ciprofloxacina, no demostró resultados relevantes. En relación con la actividad citotóxica, la concentración letal media (CL50) exhibió un valor de 263,12 [ig/ml. Conclusión: finalmente, se reveló que la H. martiusii presenta actividad citotóxica sinérgica contra las bacterias evaluadas. Abstract Introduction: The species Hyptis martiusii Benth. commonly called "cidreira do campo" has multiple biological properties, such as antifungal, anti-inflammatory, and insecticide. The aim of this study was to investigate the modulating activity of the essential oil of the fresh leaves of Hyptis martiusii in association with different antibiotics against the bacteria Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa, as also the cytotoxic activity of this species. Materials and methods: The study used the MIC (minimum inhibitory concentration) as a way of assessing the modulation using an inoculation of 100 microliters of each bacterial strain. The cytotoxicity tests were conducted using in vitro culture of mouse connective tissue cells (fibroblasts of mammals). Results: The research demonstrated that the essential oil from leaves of Hyptis martiusii Benth (OEHM) presented synergism only when associated with the antibiotics gentamicin and imipenem against the bacteria Pseudomonas aeruginosa and Escherichia coli. However, it presented antagonism in association with amikacin, gentamicin and imipenem against the three studied bacteria. In addition to the ciprofloxacin showed no relevant results. In relation to the cytotoxic activity the lethal concentration (LC50) exhibited a value of 263.12 [ig/ml. Conclusion: Ultimately it was established, that H. Martiusii presents a synergistic cytotoxic activity against the evaluated bacteria.

Atraves de Testes de Diluicao em Sistema de Tubos Multiplos determinou-se, in vitro , atividade antibacteriana em inflorescencias de Achyrocline satureioides (Lam.) DC. – Asteraceae (“macela”, “marcela”), expressa como Intensidade de Atividade de Inibicao Bacteriana (IINIB/bacteriostasia) e Intensidade de Atividade de Inativacao Bacteriana (IINAB/bactericidia), a partir de formas de extracao etanolica (hidroalcoolaturas) e hidrica (decoctos), sobre inoculos padronizados de Enterococcus faecalis (ATCC 19433), Staphylococcus aureus (ATCC 25923), Escherichia coli (ATCC 11229) e Salmonella enteritidis (ATCC 11076). Enterococcus faecalis apresentou a maior sensibilidade, seguido por Staphylococcus aureus , enquanto Salmonella enteritidis e Escherichia coli apresentaram-se mais resistentes. Dentre as formas de extracao, a hidroalcoolatura apresentou capacidade de inibicao e/ou inativacao intensa e seletiva frente aos quatro inoculos bacterianos. Os decoctos mostraram-se completamente ineficazes frente as bacterias Gram-negativas, enquanto que as Gram-positivas apresentaram somente bacteriostasia/inibicao.

EnglishMedicated wound dressings are important barriers to avoid contamination and, when they contain antimicrobial additives, can be used as treatment for infected wounds. There are several types of polysaccharide materials that serve as matrices for medicated wound dressings, among them, sodium alginate. For the preparation of the films studied in this paper, sodium alginate was employed in combination with essential oils/oleoresins (EO/OL) of six peppers that are commonly used in cooking. The EO/OL were incorporated at three different concentrations (low, intermediate and high). Most of the films prepared had better dispersion of the EO/OL at the intermediate concentration. All films studied in this research were dissolved in water at different rates. The antibacterial activity of the prepared films showed significant results against Escherichia coli, Staphylococcus aureus and Bacillus cereus, and demonstrated that the films studied may be a new alternative for medicated wound dressings. Key words: medicated wound dressings; alginate-based films; essential oils; oleoresins; antibacterial activity portuguesOs curativos medicamentosos sao importantes barreiras para se evitar contaminacao e ainda, quando contem aditivos antimicrobianos, servem como tratamento para ferimentos infectados. Existem varios tipos de materiais polissacaridicos que servem como matrizes para curativos medicamentosos, dentre eles, destaca-se o alginato de sodio. Para a preparacao dos filmes estudados neste trabalho, utilizou-se alginato de sodio e incorporou-se oleos essenciais/oleoresinas (OE/OL) de seis pimentas utilizadas na culinaria, em tres diferentes concentracoes. A maioria dos filmes preparados apresentou melhor dispersao dos OE/OL na concentracao intermediaria destes. Todos os filmes estudados neste trabalho apresentam solubilidade em agua, em uma certa extensao. A atividade antibacteriana dos filmes preparados mostra resultados significantes contra Escherichia coli, Staphylococcus aureus e Bacillus Cereus, mostrando que os filmes estudados podem ser uma nova alternativa como curativos medicamentos. Palavras-chave: curativos medicamentosos; filmes de alginato; oleos essenciais; oleoresinas; pimentas; atividade antibacteriana

O desenvolvimento de cepas bacterianas multirresistentes tornou-se uma preocupação global. As plantas medicinais têm sido exploradas como uma fonte potencial terapêutica para o tratamento de várias doenças e para o desenvolvimento de medicamentos mais eficazes contra infecções bacterianas. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antibacteriana do extrato de cascas e folhas de Anacardium humile (St.) Hil, extrato de cascas de Davilla nítida (Vahl.) Kubitski, e extrato de folhas de Kalanchoe pinnata (Lam.) Pers. contra bactérias resistentes a múltiplos fármacos isoladas de infecções do pé diabético, e também contra cepas de referência da American Type Culture Collection (ATCC). A atividade antibacteriana foi avaliada pelos métodos de Ágar Disco-Difusão (DD), Microdiluição em Caldo (MC), Ensaio “Checkerboard” e Ensaio “Time-Kill”. O extrato das cascas de Davilla nitida (Vahl.) Kubitski mostrou atividade antibacteriana expressiva contra todos os grupos de bactérias testadas. O método de microdiluição em caldo foi mais sensível que o método disco-difusão para determinar a atividade antibacteriana presente no extrato das cascas. O extrato de cascas inibiu o crescimento de bactérias com altos níveis de resistência aos antibióticos, como Pseudomonas spp. (100,00%), Enterobacter spp. (88,89%), Staphylococcus aureus (54,55%), Streptococcus pneumoniae (75,00%), Staphylococcus saprophyticus (92,86%). A combinação do extrato das cascas com antibióticos resultou em efeito aditivo contra a maioria das cepas testadas. O perfil cinético de tempo de morte do extrato de cascas mostrou propriedades bactericidas tempo-dependentes. Nossos resultados sugerem a presença de compostos bioativos nesta planta que podem ser utilizados para o desenvolvimento de novos agentes antibacterianos. O extrato de folhas de Kalanchoe pinnata (Lam.) Pers. mostrou atividade antibacteriana contra Citrobacter spp. (100,00%), Citrobacter youngae (ATCC-29935) (100,00%), Enterobacter spp. (33,33%), Pseumodonas spp. (66,67%), Pseudomonas aeruginosa (ATCC-27853) (100,00%). O extrato de folhas quando associado com antibiótico amoxicilina/ácido clavulânico ou cefoxitina não evidenciou qualquer potencialização da atividade antibacteriana contra as bactérias Gram-positivas e Gram-negativas, sugerindo que extrato e antibióticos possuem mecanismos independentes relacionados à inibição do crescimento bacteriano. Nossos resultados mostraram que o extrato etanólico das folhas de Kalanchoe pinnata (Lam.) Pers. teve uma boa atividade antimicrobiana contra algumas bactérias resistentes a múltiplos fármacos. Entretanto, estudos adicionais e mais específicos são recomendados para determinar a eficácia deste extrato no tratamento de infecções bacterianas. O extrato das cascas e folhas de Anacardium humile (St.) Hil, tanto no método Disco-difusão quanto em microdiluição em caldo, inibiu significantemente o crescimento das bactérias Gram-positivas e Gram-negativas, como também o crescimento das bactérias comumente encontradas em lesões de pés diabéticos. Pelo método “Checkerboard”, a combinação do extrato das cascas (35,00%) e folhas (40,00%) sobre as bactérias Gram-negativas apresentaram efeitos sinérgicos semelhantes, enquanto que para as bactérias Gram-positivas, os extratos das folhas (45,00%) apresentaram um efeito sinérgico mais efetivo do que os extratos das cascas (17,50%). O perfil cinético “Time-Kill” apresentou atividade bactericida com propriedades dose e tempo dependente, sugerindo que os extratos das cascas e folhas podem potencializar os efeitos dos antibióticos, o que sugere que os extratos de Anacardium humile (St.) Hil podem ser usados com uma fonte alternativa de pesquisa para agentes antibacterianos com ação em bactérias Gram-positivas e Gram-negativas resistentes a multidrogas. No entanto, o isolamento dos compostos bioativos e estudos adicionais devem ser realizados para entender os mecanismos de ação bactericida, para definir a real eficácia e os efeitos tóxicos. Development of multidrug resistant bacterial strains has become a global concern. Medicinal plants have been explored as a source of molecules with therapeutic potential for the treatment of various diseases and to the development of better drug against bacterial infections. Thus, the aim of this study was to evaluate the antibacterial activity of the bark and leaves extracts of Anacardium humile (St.) Hil, bark extract of Davilla nitida (Vahl.) kubitski, of leaf extract of Kalanchoe pinnata (Lam.) Pers. and against multidrug resistant bacteria isolated from diabetic foot infections, and also of reference strains from the American Type Culture Collection (ATCC). Antibacterial activity of the bark extract was evaluated by agar Disk-Diffusion (DD), Broth Dilution (BD), “Checkerboard” and “Time-Kill” methods. The bark extract of Davilla nitida (Vahl.) kubistki showed a significant antibacterial activity against all groups of bacteria tested. Broth dilution was more sensitive for determining the antibacterial activity of the bark extract than the Disk-Difusion method. The bark extract inhibited the growth of bacteria with high-levels of antibiotic-resistance, such as Pseudomonas spp. (100,00%), Enterobacer spp. (88,89%), Staphylococcus aureus (54,55%), Streptococcus pneumoniae (75,00%), Staphylococcus saprophyticus (92,86%). The combination of extract with antibiotics resulted in an additive effect against most of the strains tested. “Time-Kill” kinetics profiles of bark extract showed bactericidal and time-dependent properties. Our results suggest the presence of bioactive compounds in this plant that could be useful for the development of new antibacterial agents. The leaf extract of Kalanchoe pinnata (Lam.) Pers. showed antibacterial activity against Citrobacter spp. (100,00%), Citrobacter youngae (ATCC-29935) (100,00%), Enterobacer spp. (33.33%), Pseumodonas spp. (66.67%), Pseudomonas aeruginosa (ATCC-27853) (100.00%). Extract of leaf associated with amoxicillin/clavulanic acid or cefoxitin antibiotics did not show any potentiation of antibacterial activity against both Gram-positive and Gram-negative bacteria, suggesting that extract and antibiotics have independent mechanisms related to inhibition of bacterial growth. Our results showed that the ethanolic leaf extract of Kalanchoe pinnata (Lam.) Pers. had a good antimicrobial activity against some multidrug resistant bacteria. However, further and more specific studies, are recommended to determine the efficacy of this extract in the treatment of bacterial infections. Barks and leaves extracts of Anacardium humile (St.) Hil, both in the Disk-Difusion and Broth Dilution methods, inhibited the growth of Gram-positive and Gram-negative bacteria, as well as the growth of bacteria commonly found in diabetic foot lesions. By the “Checkerboard” method, the combination of bark extract (35,00%) and leaves (40,00%) on Gram-negative bacteria had similar synergistic effects, while for Gram-positive bacteria, leaf extracts (45,00%) presented a synergistic effect more effective than the bark extracts (17,50%). The “Time-Kill” kinetic profile showed bactericidal activity with dose and time-dependent properties, suggesting that bark and leaf extracts may potentiate the effects of antibiotics, suggesting that Anacardium humile (St.) Hil extracts can be used with an alternative source of research for antibacterial agents acting on multidrug resistant Gram- positive and Gram- negative bacteria. However, the isolation of bioactive compounds and additional studies should be performed to understand the mechanisms of bactericidal action, to define real efficacy and toxic effects.

Submitted by Deyse Queiroz (deysequeirozz@hotmail.com) on 2018-06-05T13:11:17Z No. of bitstreams: 1 MARCELO HOLANDA DA CUNHA - DISSERTAÇÃO PPGSA PROFISSIONAL 2018..pdf: 1249369 bytes, checksum: 6fd10dae8346a148f59677b96d3a3f5a (MD5) Made available in DSpace on 2018-06-05T13:11:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MARCELO HOLANDA DA CUNHA - DISSERTAÇÃO PPGSA PROFISSIONAL 2018..pdf: 1249369 bytes, checksum: 6fd10dae8346a148f59677b96d3a3f5a (MD5) Previous issue date: 2018-03-05 Neste trabalho buscou-se investigar a composição química, o efeito antifúngico e antibacteriano do extrato da própolis preta, in vitro, em leveduras do gênero Candida e bactérias do grupo Staphylococcus aureus, respectivamente. A princípio obteve-se as amostras de 06 (seis) espécies de Candida spp. e 01(uma) de Sthaphylococus aureus por doação. Assim como, a própolis proveniente da jurema preta, cedida pelo apiário Edimel. A própolis preta foi extraída e sua composição química foi caracterizada por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência. Posteriormente, os extratos hidroalcoolicos da própolis preta foram elaborados por dois métodos, a saber: maceração a quente e Soxhlet, com o intuito de se obervar a melhor forma de obter a melhor síntese e seu rendimento do referido extrato. Em seguida, as leveduras do gênero Candida sp foram reidratadas e semeadas, enquanto que a bactéria Sthaphylococus aureus foi replicada. As amostras viáveis foram testadas quanto ao perfil de sensibilidade considerando-o como sensível, sensibilidade dose-dependente e resistente utilizando como método de referência o teste de difusão em disco, de acordo com os documentos M44-A2 e M2-A8 do Clinical and Laboratory Standards Institute, respectivamente. Os resultados evidenciaram que o perfil químico da própolis preta consta de 14 substâncias químicas, e dentre elas, destacam-se as maiores concentrações para o ácido 3,4-dihidroxibenzoico (14,19 mg/mL), a rutina (12,71 mg/mL), o ácido transcinâmico (6,25 mg/mL), sendo esses responsáveis por atividade antioxidante e antibacteriana. Os processos de extração hidroalcoólica da própolis por maceração a quente e por soxhlet, resultaram respectivamente, em 43,6% e 57,6% de rendimento. Sugerindo que a extração por soxhlet apresentou melhor viabilidade, em virtude de redução de tempo e aumento na temperatura frente à maceração a quente. No que concerne, a reidratação e semeaduras das culturas de leveduras do gênero Candida sp, 100% das amostras apresentaram crescimento satisfatório para o desenvolvimento dos testes de sensibilidade. No entanto, o extrato hidroalcoólico de própolis preta testado nas concentrações de 26,4 mg/mL (33%), 52,8 mg/mL (66%) e 79,2 mg/mL (99%) e do álcool etílico a 70%, todos frente ao crescimento das 06 (seis) espécies de Candida, que se observaram ser resistentes ao extrato, enquanto para o fluconazol na concentração de 25 mg/mL, marcador antifúngico, foram sensíveis. Já, para o teste de difusão em disco com o extrato hidroalcoólico de própolis preta testado nas concentrações de 26,4 mg/mL (33%), 52,8 mg/mL (66%) e 79,2 mg/mL (99%), bem como do cloranfenicol na concentração de 30 mg/mL e do álcool etílico a 70%, frente ao crescimento da espécie de Staphylococcus aureus, estes apresentaram sensibilidades frente ao marcador antibacteriano e aos extratos. A formação dos halos por S. Aureus, indicando a sensibilidade tanto para os extratos hidroalcoólicos da própolis preta, cujos diâmetros foram entre 19 a 25,3 mm, e no marcador (Cloranfenicol) com diâmetro entre 30 a 30,1 mm. Em suma, pode ser afirmado que a própolis preta apresentou atividade antibacteriana para bactérias da espécie Staphyloccocus aureus, não havendo atividade antifúngica frente as leveduras do gênero cândida. Efeito esse relacionado à presença de compostos fenólicos e flavonóides, e que a predominância da concentração desses compostos bioativos, influencia na ação biológica dos microorganismos, estudados neste trabalho, Candida sp e Staphylococus aureus, em virtude de ter apresentado inibição e sensibilidade, respectivamente para esses microorganismos. We studied the chemical composition of the black propolis extract, and its in vitro antifungal and antibacterial effects against yeasts of the genus Candida spp. (six species) and the bacterium Staphylococcus aureus. The propolis from Mimosa hostilis (Jurema-preta) flowers was provided by the Edimel apiary. Black propolis was extracted, and its chemical composition was measured by High-Performance Liquid Chromatography. Hydroalcoholic extracts of black propolis were done through two methods, hot maceration and Soxhlet, to obtain the best synthesis and yield. The yeasts were rehydrated and sown, whereas the bacterium was replicated. Viable samples were tested for sensitivity profile and classified as: sensitive, dose-dependent, and resistant. For the disc diffusion test, we followed reference methods described in the M44-A2 and M2-A8 documents of the Clinical and Laboratory Standards Institute, respectively for Candida spp. and S. aureus. The chemical profile of black propolis comprises 14 chemical substances. The compounds with highest concentrations were: protocatechuic acid (14.19 mg/mL), rutin (12.71 mg/mL), and transcinnamic acid (6.25 mg/mL), which were responsible for the antioxidant and antibacterial activity. The hydroalcoholic extraction processes of propolis by hot maceration and Soxhlet resulted in yields of 43.6% and 57.6%, respectively. Thus, the Soxhlet extraction showed better viability due to its faster extraction and increase in temperature. After rehydration and sowing, all samples of yeast cultures showed satisfactory growth for the sensitivity tests. All Candida species were resistant to the extract of black propolis (at the concentrations of 26.4 mg/mL – 33%; 52.8 mg/mL – 66%; and 79.2 mg/mL – 99%), and to 70% ethanol, whereas they were sensitive to fluconazole at 25 mg/mL, the antifungal marker. The S. aureus was sensitive to the extracts at all concentrations and to chloramphenicol at 30 mg/mL, the antibacterial marker. The halos around the discs show the sensitivity of S. aureus to both hydroalcoholic extracts of black propolis, whose diameters ranged from 19 to 25.3 mm, while the marker halos ranged from 30 to 30.1 mm. So, the black propolis showed antibacterial activity against S. aureus but no antifungal activity against Candida spp. The antibacterial activity occurred due to the presence of phenolic and flavonoid compounds. The predominance of these bioactive compounds affects the biological activity of microorganisms.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) O presente trabalho tem como finalidade a obtenção de complexos do sistema Fecyclam com ligantes carboxilatos, tais como salicilato (sal), ftalato (ph), benzoato (ben) e oxalato (ox), sintetizados a partir do cis-[Fe(cyclam)Cl2]Cl (1), para formação dos complexos [Fe(cyclam)sal]PF6 (2), [Fe(cyclam)ph]PF6 (3), cis-[Fe(cyclam)(ben)2]PF6 (4) e [Fe(cyclam)ox]PF6 (5). A caracterização foi realizada empregando-se análise elementar, espectroscópica (IV e Uv-Vis) e eletroquímica (CV e DPV). Os espectros de IV dos compostos apresentaram modos vibracionais na faixa de 3446-2869 cm-1 , referentes ao N-H e C-H do macrocíclico cyclam, bem como as(OCO) em 1705-1570 cm-1 , e s(OCO) em 1359-1348 cm1 , atribuídos aos carboxilatos atuando como ligantes bidentados, com exceção do benzoato. Já os espectros Uv-Vis em meio aquoso apresentaram transições IL nas regiões mais energéticas, enquanto que as transições LMCT foram observadas em menores energias, verificadas em 520 (2), 320 (3), 326 (4) e 292 e 355 nm para o complexo (5). Os voltamogramas exibiram uma redução no E1/2 (Fe3+/2+) comparativamente ao complexo (1), sendo dependente da natureza dos ligantes oxigenados. Adicionalmente o complexo (5) foi avaliado através da espectroscopia Mössbauer e teve sua atividade fotoquímica e antibacteriana investigada. O espectro Mössbauer em 300K apresentou um dubleto (D1) com  = 0,42 mm/s e EQ = 0,40 mm/s, típico de Fe3+ com configuração alto spin. Entretanto, com o abaixamento da temperatura, constatou-se a gradual redução da intensidade de D1 e o surgimento de um segundo dubleto (D2), com  = 0,30 mm/s e ΔEQ = 1,72 mm/s a 12 K, típico de Fe3+ baixo spin. Caracterizando a existência do efeito spin crossover dependente da temperatura. A reatividade fotoquímica do complexo (5) se mostrou relevante na síntese de novos compostos do sistema Fe-cyclam e na ativação antibacteriana. Através da reação fotoquímica do complexo obteve-se o binuclear [((cyclam)Fe)2(µ-SO4)](PF6)2.H2O, cuja estrutura foi identificada por difração de raios-X e o seu voltamograma mostrou dois processos redox, com E1/2= 169 mV e -10,5 mV, com Kc = 1,1x 103. A atividade antibacteriana foi avaliada frente a Pseudomonas aeruginosa (Pa) (ATCC 9027), Staphylococcus aureus (ATCC 29213) e Escherichia coli (ATCC 25922). Os melhores resultados foram obtidos para a Pa, com concentração inibitória mínima (CIM) igual a 294 µmol L-1 . Entretanto, a exposição do composto à luz branca ou azul durante 90 min, potencializou a atividade inibitória em torno de 59% frente a Pa, reduzindo os valores de CIM para 118,6 µmol L-1 (luz branca) e 119,5 µmol L-1 (luz azul). Portanto, a atividade fotoquímica do complexo em estudo representa uma alternativa promissora no combate bacteriano. The aim of the present work is to obtain complexes of the Fe-cyclam system with carboxylate ligands, such as salicylate (sal), phthalate (ph), benzoate (ben) and oxalate (ox), synthesized from cis-[Fe(cyclam)Cl2]Cl (1) to form the complexes [Fe(cyclam)sal]PF6 (2), [Fe(cyclam)ph]PF6 (3), cis-[Fe(cyclam)(ben)2]PF6 (4) e [Fe(cyclam)ox]PF6 (5). The characterization was performed using elemental, spectroscopic (IR and UV-Vis) and electrochemical analysis (CV and DPV). The IR spectrum of the compounds showed vibrational modes in the range of 3446-2869 cm-1 , referring to the N-H and C-H of the cyclam macrocyclic, as well as as(OCO) at 1705-1570 cm-1 , and s(OCO) at 1359-1348 cm-1 , attributed to the carboxylates acting as bidentate ligands, except for benzoate. However, the UV-Vis spectra in the aqueous medium presented IL transitions in the more energetic regions, whereas the LMCT transitions were observed at lower energies, verified in 520 (2), 320 (3), 326 (4) and 292 and 355 nm for the complex (5). The voltammograms exhibited a reduction in E1/2 (Fe3+/2+) compared to complex (1), being dependent on the nature of the oxygenated ligands. In addition, the complex (5) was evaluated by Mössbauer spectroscopy and its photochemical and antibacterial activity were investigated. The Mössbauer spectrum in 300K showed a doublet (D1) with =0.42 mm/s and ∆EQ=0.40 mm/s, typical of Fe3+ with high spin configuration. However, with the lowering of the temperature, it was observed the gradual reduction of the intensity of D1 and the appearance of a second doublet (D2), with =0.30 mm/s and ΔEQ=1.72 mm/s to 12 K, typical Fe3+ low spin. This behavior characterized the existence of the crossover spin effect dependent on the temperature. The photochemical reactivity of the complex (5) was shown to be relevant in the synthesis of new compounds of the Fe-cyclam system and in the antibacterial activation. Through the photochemical reaction of the complex the binuclear [((cyclam)Fe)2(μ-SO4)](PF6)2.H2O was obtained, whose structure was identified by X-ray diffraction and its voltammogram showed two redox processes, with E1/2 =169 mV and -10.5 mV, with Kc =1.1x103 . Antibacterial activity was evaluated against Pseudomonas aeruginosa (Pa), Staphylococcus aureus and Escherichia coli. The best results were obtained for Pa, with MIC of 294 μmol L-1 . However, exposure of the compound to white or blue light for 90 min, potentiated the inhibitory activity around 59% against Pa, reducing MIC values to 118.6 μmol L -1 (white light) and 119.5 μmol L-1 (blue light). Therefore, the photochemical activity of the complex under study represents a promising alternative in the combat of bacterial

Submitted by JOELMA NASCIMENTO (joelma_goldmann@hotmail.com) on 2019-03-27T14:15:39Z No. of bitstreams: 1 ANDRÉIA KARLA ANACLETO DE SOUSA - DISSERTAÇÃO - PPGSA - ACADÊMICO 2018.pdf: 1755883 bytes, checksum: d2e5e90185f6361d44e6a4147c9fb908 (MD5) Made available in DSpace on 2019-03-27T14:15:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ANDRÉIA KARLA ANACLETO DE SOUSA - DISSERTAÇÃO - PPGSA - ACADÊMICO 2018.pdf: 1755883 bytes, checksum: d2e5e90185f6361d44e6a4147c9fb908 (MD5) Previous issue date: 2018-02-28 A atividade biológica de produtos naturais é reconhecida no Brasil e no mundo. Os produtos apícolas têm apresentado destaque por serem de fácil obtenção e mostrarem inúmeras propriedades farmacológicas. A própolis é uma matéria resinosa colhida por abelhas de diferentes exsudatos de plantas, com funções de selar e proteger as colmeias contra proliferação de microrganismos, dentre outras. Existem relatos sobre atividades da própolis relacionadas à ação antimicrobiana, cicatrizante, antioxidante, anti-inflamatória. Cepas de Streptococcus na cavidade oral apresentam resistência a múltiplas drogas, o que potencializa o interesse pelo uso de produtos de origem natural com propriedades farmacológicas. O objetivo do estudo foi avaliar a atividade antibacteriana do extrato hidroalcóolico da própolis vermelha sobre cepas de Streptococcus pyogenes; como também, verificar a interação do extrato da própolis vermelha em associação a antibióticos. A concentração inibitória mínima foi determinada pelo método de microdiluição em poços e serviu para avaliação das substâncias como moduladoras da resistência aos antibióticos. O ensaio de microdiluição não demonstrou atividade antimicrobiana relevante contra Streptococcus pyogenes. Na avaliação da atividade modulatória, foi observada ação sinérgica do extrato da própolis vermelha com amicacina, ciprofloxacino, oxacilina; em associação com benzilpenicilina, não houve efeito sinérgico. The biological activity of natural products is recognized in Brazil and in the world. Apiculture products have been highlighted because they are easy to obtain and show numerous pharmacological properties. Propolis is a resinous material harvested by bees of different plant exudates, with the functions of sealing and protecting hives against the proliferation of microorganisms, among others. There are reports on propolis activities related to antimicrobial, healing, antioxidant, anti-inflammatory action. Strains of Streptococcus in the oral cavity present resistance to multiple drugs, which increases the interest in the use of products of natural origin with pharmacological properties. The objective of the study was to evaluate the antibacterial activity of the hydroalcoholic extract of the red propolis on strains of Streptococcus pyogenes; as well as to verify the interaction of red propolis extract in combination with antibiotics. The minimum inhibitory concentration was determined by the microdilution method in wells and served for evaluation of the substances as modulators of resistance to antibiotics. The microdilution assay did not demonstrate relevant antimicrobial activity against Streptococcus pyogenes. In the evaluation of the modulatory activity, the synergistic action of the extract of the red propolis with amicacin, ciprofloxacin, oxacillin; in combination with benzylpenicillin, there was no synergistic effect.

Submitted by Auxiliadora Costa (aucydj@gmail.com) on 2019-04-22T18:20:28Z No. of bitstreams: 1 ROGÉRIA MÔNICA SEIXAS XAVIER DE ABREU - DISSERTAÇÃO PPGSA ACADÊMICO 2018.pdf: 2685964 bytes, checksum: 772c6b6a6c8cacc3e4a549f041a38a1e (MD5) Made available in DSpace on 2019-04-22T18:20:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ROGÉRIA MÔNICA SEIXAS XAVIER DE ABREU - DISSERTAÇÃO PPGSA ACADÊMICO 2018.pdf: 2685964 bytes, checksum: 772c6b6a6c8cacc3e4a549f041a38a1e (MD5) Previous issue date: 2018-02-28 A própolis vermelha é um produto resinoso popularmente consumido no Brasil, melhora a saúde e é considerado um nutraceutical. Sua origem botânica provém da Dalbergia ecastophyllum (L) Taub, conhecida popularmente como rabo-de-bugio, encontrada nos mangues e costa do mar e dos rios, nos estados de Alagoas, Paraíba, Pernambuco, Sergipe e Bahia, estados do Nordeste do Brasil. A Pseudomonas aeruginosa é um bacilo não fermentador, gram-negativo, presente em diversos ambientes naturais, como no solo, na água, em frutas e vegetais. Possui elevada resistência a antibióticos, capaz de infectar insetos, animais e seres humanos, além de necessidade nutricional mínima. O objetivo geral foi avaliar a atividade antibacteriana do extrato hidroalcoólico da própolis vermelha paraibana sobre a cepa de Pseudomonas aeruginosa (ATCC27853). E específicos, determinar a concentração inibitória mínima (CIM) do extrato da própolis vermelha; verificar a interação do extrato da própolis vermelha em associação com os antibióticos amicacina, benzilpenicilina, ciprofloxacino e oxacilina. O extrato hidroalcoólico da própolis foi diluído em Twim a 80% e água destilada estéril, a concentração inibitória mínima (CIM) foi determinada pelo método de microdiluição em placa de 96 poços. Para avaliar a atividade moduladora da ação dos antibióticos, utilizou-se a concentração subinibitória do extrato e os antibióticos em concentrações decrescentes, partindo de 1024μg/mL, diluídas sequencialmente até 16μg/mL. A análise estatística foi realizada utilizando o ANOVA. Os resultados dos testes mostraram que o extrato da própolis vermelha paraibana não possui atividade antimicrobiana clinicamente relevante para P. aeruginosa (ATCC27853), pois o valor do CIM foi ≥ 1024 μg/mL. Os antibióticos amicacina e ciprofloxacino demostraram atividade antibacteriana contra essa cepa, enquanto que a benzilpenicilina e oxacilina demonstraram não possuir este tipo de ação. Não foi observado efeito sinérgico quando associamos o extrato aos antibióticos. Mediante o fato de o extrato não ter demonstrado ação antibacteriana sobre a referida cepa da pseudomonas aeruginosa, cujos motivos não foi possível relatar, sugere-se identificar os componentes químicos da própolis vermelha paraibana, pois pode apresentar variação em virtude da sazonalidade, período de coleta, origens geográficas diferentes, presença de contaminantes, entre outros. Red propolis is a resinous product popularly consumed in Brazil, improves health and is considered a nutraceutical. Its botanical origin comes from the Dalbergia ecastophyllum (L) Taub, popularly known as the howler-tail, found in mangroves and coast of the sea and rivers, in the states of Alagoas, Paraíba, Pernambuco, Sergipe and Bahia, Northeastern Brazil . Pseudomonas aeruginosa is a gram-negative non-fermentative bacillus present in several natural environments, such as soil, water, fruits and vegetables. It has high resistance to antibiotics, capable of infecting insects, animals and humans, in addition to minimal nutritional need. The general objective was to evaluate the antibacterial activity of the hydroalcoholic extract of paraiban red propolis on the Pseudomonas aeruginosa strain (ATCC27853). And specific, to determine the minimum inhibitory concentration (MIC) of the red propolis extract; to verify the interaction of red propolis extract in combination with the antibiotics amikacin, benzylpenicillin, ciprofloxacin and oxacillin. The hydroalcoholic extract of propolis was diluted in Twim to 80% and sterile distilled water, the minimum inhibitory concentration (MIC) was determined by the 96-well plate microdilution method. The subinhibitory concentration of the extract and the antibiotics were used in decreasing concentrations, starting from 1024 μg / mL, diluted sequentially up to 16 μg / mL. Statistical analysis was performed using ANOVA. The results of the tests showed that the extract of paraibanic red propolis does not have clinically relevant antimicrobial activity for P. aeruginosa (ATCC27853), since the MIC value was ≥ 1024 μg / mL. The antibiotics amikacin and ciprofloxacin demonstrated antibacterial activity against this strain, while benzilpenicillin and oxacillin were shown to lack this type of action. No synergistic effect was observed when the extract was associated with antibiotics. Due to the fact that the extract did not show antibacterial action on the aforementioned pseudomonas aeruginosa strain, the reasons for which it was not possible to report, it is suggested to identify the chemical components of the red propolis of Paraiba, as it may present variation due to the seasonality, collection period , different geographic origins, presence of contaminants, among others.

Dissertação de mestrado em Biologia Molecular, Biotecnologia e Bioempreendedorismo em Plantas, Na Indústria Têxtil, os corantes sintéticos são maioritariamente usados devido principalmente ao seu baixo custo e à possibilidade de se obter uma vasta gama de cores. No entanto, o uso destes corantes na indústria leva a problemas ambientais, pela toxicidade dos efluentes resultantes do tingimento têxtil. De forma a contrariar esta problemática, a biocoloração foi introduzida como substituinte ecológico. No presente trabalho foi realizada a coloração de substratos têxteis com recurso a produtos naturais como plantas e cogumelos, obtendo-se cores diferentes consoante o produto, o auxiliar e o tipo de malha utilizada. As plantas S. Roberto, Alcachofra e Tomilho Bela Luz revelaram-se as mais promissoras em termos de coloração, assim como o cogumelo P. tinctorius. A solidez da cor é também um fator preponderante no contexto do tingimento têxtil, tendo-se realizado ensaios de avaliação da resistência da cor na malha face à luz solar e à lavagem com detergente. Através da determinação da diferença de cor (ΔE) e da força colorística (K/S) conclui-se que a planta Tomilho Bela Luz possibilitou não só uma maior manutenção da cor e por isso maior solidez, como também uma elevada força colorística. Nas malhas coloridas com P. tinctorius, apesar das cores obtidas terem sido promissoras e com força colorística elevada (no caso da lã), observaram-se diferenças consideráveis nas mesmas, principalmente após a lavagem com detergente. Com o objetivo da otimização do processo de coloração têxtil foram realizados ensaios de re-tingimento, que se revelaram promissores. Tendo em vista o caráter ecológico em que assenta este projeto, foi igualmente estudada a utilização de compostos naturais de plantas com ação mordente, como a Tanchagem, e a coloração têxtil com resíduos alimentares, como a casca de noz, com resultados satisfatórios. Por fim, foi avaliada a funcionalidade dos têxteis em termos de propriedades antibacterianas, tendo as malhas coloridas com Nogueira e Alcachofra revelado atividade contra o crescimento de S. aureus, assim como as de algodão cationizado tingido com P. tinctorius., In textile industry, synthetic dyes are mostly used due to their low cost and the possibility of having a large spectrum of colors. However, the use of these dyes in industry leads to environmental issues, due to the toxicity of the effluents from textile dyeing. To overcome this problem, biocoloration was introduced as an ecologic alternative. In the present project, the coloration of textile substrates was performed using natural products such as plants and mushrooms, in order to obtain different colors according to the product, the auxiliary and the type of knit used. The plants S. Roberto, Alcachofra and Tomilho Bela Luz were the most satisfactory in terms of coloration, as well as the mushroom P. tinctorius. The color fastness is also an essential parameter in terms of textile dyeing, and was also evaluated after exposure to sunlight and to washing process with detergent. Through the determination of color difference (ΔE) and color strength (K/S) it’s possible to conclude that textiles colored with Tomilho Bela Luz had the best results, regarding the color resistance and the color strength. Concerning the mushroom P. tinctorius, the textiles had intense colors and the values of K/S were high (in wool), however it was observed considerable differences, mainly after washing process with detergent. In order to optimize the textile coloration process, it was performed a trial with two consequent coloration processes, and the results were promising. Considering the ecological aim of this project, it was also studied the use of natural compounds with mordant properties, such as Tanchagem, and the coloration using food residues, such as walnut shell, with satisfactory results. Furthermore, the functionality of textiles in terms of antibacterial properties was evaluated, and the substrates dyed with Nogueira and Alcachofra revealed activity against S. aureus, as well as the cationized cotton colored with P. tinctorius., Este trabalho foi desenvolvido no âmbito do projeto “PICASSo: Processos e Ingredientes inovadores para geração de Cor – têxteis nAturais e SustentáveiS”, com referência nº 18013, cofinanciado pelo Fundo Europeu de Desenvolvimento Regional (FEDER), no âmbito do Portugal 2020 através do COMPETE2020 - Programa Operacional Competitividade e Internacionalização (POCI).

Devido à utilização indiscriminada de antimicrobianos e a consequente multirresistência dos microrganismos, faz-se necessário o desenvolvimento de novos compostos que sejam mais eficazes. Neste contexto, avaliamos a atividade antibacteriana de 14 compostos indólicos calcogênios, contendo enxofre e selênio, usando cepas ATCC cujo perfil de resposta aos antimicrobianos já é bem conhecido, através da técnica de microdiluição em caldo. Após a triagem inicial, foram selecionadas 3 moléculas promissoras para determinação da concentração inibitória mínima (CIM) frente a 42 isolados clínicos de S. aureus com diferentes perfis de susceptibilidade aos antimicrobianos convencionais. A partir destes resultados, 9 isolados clínicos foram selecionados para avaliar a atividade bactericida/bacteriostática do composto A10 (selecionado devido a sua atividade) através do método de curva de crescimento tempo-morte (Time Kill Assay). O composto A10 apresentou atividade bactericida para os 9 isolados clínicos testados e para a cepa ATCC 29213, nas concentrações de 1x CIM e 2x CIM. Com relação aos testes de toxicidade realizados, o composto A10 não foi citotóxico, mutagênico e alergênico nas concentrações testadas, o que representa um resultado promissor no desenvolvimento de um novo antimicrobiano. Due to the indiscriminate use of antimicrobials and the consequent multiresistance of microorganisms, it is necessary to develop new classes of antimicrobials that are more effective. In this context, we evaluated the antibacterial activity of 14 calcogenic indole compounds containing sulfur and selenium using ATCC strains that antimicrobial susceptibility profile is already well known, through the broth microdilution technique. After the initial screening, 3 molecules were selected to determine the minimum inhibitory concentration (MIC) against 42 clinical isolates of S. aureus with different susceptibility profiles to conventional antimicrobials. From these results, 9 clinical isolates were selected in order to evaluate the bactericidal / bacteriostatic activity of compound A10 through the Time Kill Assay method. Compound A10 showed bactericidal activity for the 9 clinical isolates tested and for strain ATCC 29213, in the concentrations of 1x MIC and 2x MIC. Regarding the toxicity tests performed, compound A10 was not cytotoxic, mutagenic and allergenic at the concentrations tested, which represents a promising result for development a new antimicrobial.

Dupla diplomação com a Universidad de Salamanca Submitted by Clarisse Pais (clarisse@ipb.pt) on 2020-02-10T10:55:39Z No. of bitstreams: 1 pauta-relatorio-12.pdf: 1563435 bytes, checksum: 57b7a19245341c420931a424710d95eb (MD5) Made available in DSpace on 2020-02-10T10:55:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 pauta-relatorio-12.pdf: 1563435 bytes, checksum: 57b7a19245341c420931a424710d95eb (MD5) Previous issue date: 2019 A realização deste trabalho foi possível mediante o apoio financeiro das seguintes entidades: CIMO - Centro de Investigação de Montanha, Instituto Politécnico de Bragança CITAB - Centro de Investigação e Tecnologias Agroambientais e Biológicas, Universidade de Trás-os-Montes e Alto Douro Projeto FUNGITECH – Tecnologia e inovação na cadeia de produção do shiitake e de outros cogumelos com valor nutracêutico e medicinal, N.º 33788, financiado pelo Fundo Europeu de Desenvolvimento Regional (FEDER) através do NORTE 2020 (Programa Operacional Regional do Norte)

Dupla diplomação com a Universidad de Salamanca A resistência bacteriana constitui atualmente uma das mais graves ameaças à Saúde Pública, havendo bactérias que são resistentes a mais do que uma classe de antibióticos. Uma das maiores problemáticas das resistências bacterianas são as IACS (Infeções associadas aos cuidados de saúde) provocadas por bactérias como Staphylococus aureus resistentes à meticilina (MRSA) e Klebsiella pneumoniae resistentes aos carbapenemos. Este fenómeno de resistência tem levado à procura de alternativas, quer seja pela síntese de novos compostos antibacterianos, quer seja pela procura de produtos naturais com propriedades antibacterianas. Atendendo à composição química dos cogumelos em compostos bioativos, e variedade de trabalhos que demonstram as suas propriedades antibacterianas, surge então a hipótese de que estes compostos poderiam ser promissores aplicados à antibioterapia. Nesse contexto, este trabalho teve como principal objetivo avaliar o potencial antimicrobiano de extratos de cogumelos da espécie Lentinula edodes (Shiitake), uma das espécies de cogumelos mais comercializada a nível mundial, em isolados de bactérias Gram-positivo e Gram-negativo, frequentemente relacionadas com as infeções associadas a cuidados de saúde. Dois tipos de extratos (aquoso e metanólico) obtidos de duas variedades de cogumelo Shiitake (Donko e Koshin) foram avaliados quanto ao seu potencial efeito antibacteriano em isolados responsáveis por IACS. O estudo incluiu um screening da atividade antimicrobiana, a avaliação do efeito sinérgico entre extratos e antibióticos e ainda a determinação da concentração mínima inibitória (CMI) e concentração mínima bactericida (CMB). Os resultados mostraram que na avaliação da atividade antimicrobiana, houve um aumento do tamanho dos halos de inibição nos isolados de Gram-positivo com o aumento da concentração dos extratos aquosos de ambas as variedades, sendo a variedade Koshin a que apresentou melhores resultados. Na avaliação do efeito sinérgico observou-se que para os Gram-positivos, o aumento da concentração do extrato levou a que a ação de alguns antibióticos fosse potenciada. Contudo, nos isolados de Gram-negativo verificou-se a ocorrência de antagonismo com a adição de extrato ao meropenemo. Na determinação das CMIs, determinada em Gram-positivos, ambos os extratos foram eficazes, verificando-se inibição do crescimento a menores concentrações com o extrato aquoso da variedade Koshin. Estas diferenças entre as duas variedades e entre os dois solventes (aquoso e metanólico) podem ser explicadas pelo conteúdo em fenóis totais versus atividade antioxidante, que foi maior no extrato aquoso da variedade Koshin. Assim sendo, valoriza-se o Shiitake como uma promissora fonte de compostos bioativos. La resistencia bacteriana constituye actualmente una de las más graves amenazas en la Salud Pública, esto debido a la existencia de bacterias que son resistentes a más de una clase de antibióticos. Una de las mayores problemáticas a las resistencias bacterianas son las IAAS (infecciones asociadas a la atencion en salud), provocadas por bacterias como Staphylococus aureus, resistentes a la meticilina (MRSA) y Klebsiella pneumoniae resistente a los carbapenems. Este fenómeno de resistencia ha llevado a la búsqueda de alternativas, ya sea con la síntesis de nuevos compuestos antibacterianos, o por la introducción de productos naturales con propiedades antibacterianas. En cuanto a la composición química de las setas, compuestos bioactivos, y variedad de trabajos que demuestran sus propiedades antibacterianas; surge entonces la hipótesis de que esos compuestos podrían ser grandes prometedores en la terapia con antibióticos. En este contexto, este trabajo tuvo como principal objetivo evaluar el potencial antimicrobiano de extractos de setas de la especie Lentinula edodes (Shiitake), una de las especies de setas más comercializadas a nivel mundial, en aislados de bacterias Gram-negativas y Gram-positivas, de ambiente hospitalario. Dos tipos de extractos (acuosos y metanólicos) obtenidos de dos variedades de setas Shiitake (Donko y Koshin) se estudiaron con el fin de evaluar su efecto antibacteriano en aislados responsables de las IAAS. El estudio incluyó un screening de la actividad antimicrobiana, la evaluación del efecto sinérgico entre extractos y antibióticos, así como la determinación de la concentración mínima inhibitoria (CMI) y concentración mínima bactericida (CMB). Los resultados mostraron que en la evaluación de la actividad antimicrobiana, hay un crecimiento en el tamaño de los halos de inhibición en Gram-positivos al aumentar la concentración de extractos acuosos de ambas variedades, arrojando mejores resultados la variedad Koshin. En la evaluación del efecto sinérgico, se observó que para Gram-positivos, el aumento de la concentración del extracto condujo a la acción de algunos antibióticos mejorados. Sin embargo, en Gram-negativos, se produjo antagonismo con la adición de extracto a meropenem. En la determinación de las CMI, analizadas en Gram-positivos, ambos extractos fueron efectivos, con inhibición del crecimiento a concentraciones más bajas con el extracto acuoso de la variedad Koshin. Estas diferencias entre las dos variedades de y entre los dos solventes (acuoso y metanólico) pueden explicarse por el contenido total de fenol versus la actividad antioxidante, que fue mayor en el extracto acuoso de la variedad Koshin. Por lo tanto, Shiitake se valora como una fuente prometedora de compuestos bioactivos. Bacterial resistance is currently one of the most serious threats to public health, with bacteria that are resistant to more than one class of antibiotics. One of the major problems of bacterial resistance is the HCAIs (Health care-associated infections), caused by bacteria such as methicillin resistant Staphylococus aureus (MRSA) and carbapenem resistant Klebsiella pneumoniae. This phenomenon of resistance has led to the search for alternatives, either by synthesizing new antibacterial compounds or by looking for natural products with antibacterial properties. Given the chemical composition of mushrooms, bioactive compounds, and the variety of works that demonstrate their antibacterial properties, it is hypothesized that these compounds could be promisingly applied to antibiotic therapy. In this context, the main objective of this work was to evaluate the antimicrobial potential of mushroom extracts of the species Lentinula edodes (Shiitake), one of the most traded mushroom species in the world, in Gram-negative and Gram-positive bacteria isolates, frequently related. with healthcare-associated infections. Two types of extracts (aqueous and methanolic) obtained from two varieties of Shiitake (Donko and Koshin) mushroom were evaluated for their potential antibacterial effect on isolates responsible for HCAIs. The study included screening for antimicrobial activity, evaluating the synergistic effect between extracts and antibiotics, and determining the minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC). The results showed that in the evaluation of antimicrobial activity, there was an increase in the size of inhibition halos in Gram-positive isolates with increasing concentration of aqueous extracts of both varieties, being Koshin variety the best results. In the evaluation of the synergistic effect, it was observed that for Gram-positive, the increased concentration of the extract led to the action of some antibiotics being enhanced. However, in Gram-negative isolates, antagonism occurred with the addition of extract to meropenemo. In the determination of CMIs, determined in Gram-positive, both extracts were effective, with growth inhibition at lower concentrations with aqueous extract of the Koshin variety. These differences between the two varieties and between the two solvents (aqueous and methanolic) can be explained by the total phenol content versus antioxidant activity, which was higher in the aqueous extract of the Koshin variety. Thus, Shiitake is valued as a promising source of bioactive compounds. A realização deste trabalho foi possível mediante o apoio financeiro das seguintes entidades: CIMO - Centro de Investigação de Montanha, Instituto Politécnico de Bragança CITAB - Centro de Investigação e Tecnologias Agroambientais e Biológicas, Universidade de Trás-os-Montes e Alto Douro Projeto FUNGITECH – Tecnologia e inovação na cadeia de produção do shiitake e de outros cogumelos com valor nutracêutico e medicinal, N.º 33788, financiado pelo Fundo Europeu de Desenvolvimento Regional (FEDER) através do NORTE 2020 (Programa Operacional Regional do Norte)

rea de concentra??o: Ci?ncias Farmac?uticas. Submitted by Nivaldo Melo (nivaldo.melo@ufvjm.edu.br) on 2019-06-04T12:44:00Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) vinicius_lopes_cantuaria.pdf: 3105737 bytes, checksum: eced63d925208027d24051f977557b63 (MD5) Approved for entry into archive by Jos? Henrique Henrique (jose.neves@ufvjm.edu.br) on 2019-06-04T19:37:59Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) vinicius_lopes_cantuaria.pdf: 3105737 bytes, checksum: eced63d925208027d24051f977557b63 (MD5) Made available in DSpace on 2019-06-04T19:37:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) vinicius_lopes_cantuaria.pdf: 3105737 bytes, checksum: eced63d925208027d24051f977557b63 (MD5) Previous issue date: 2018 Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico (CNPq) Funda??o de Amparo ? Pesquisa do Estado de Minas Gerais (FAPEMIG) A esp?cie Eremanthus erythropappus (DC.) MacLeish., (Asteraceae) ? conhecida popularmente como Candeia e, ocorre naturalmente na regi?o de Cerrado, inclusive no munic?pio de Diamantina, regi?o do Vale do Jequitinhonha e Mucuri. Na medicina popular tem sido utilizada no tratamento de ?lceras estomacais, como anti-inflamat?ria, cicatrizante e contra infec??es bacterianas e f?ngicas. Apesar de sua rica biodiversidade, muitas esp?cies end?micas deste bioma ainda s?o pouco estudadas do ponto de vista qu?mico e biol?gico. Diante disso, ? necess?rio maiores investimentos em pesquisas com plantas medicinais, principalmente, quando se trata de doen?as cujo arsenal terap?utico ? limitado e/ou tratamento apresenta limita??es de efic?cia e efeitos colaterais, como ? o caso da Doen?a de Chagas, Leishmanioses, C?ncer e as infec??es bacterianas e f?ngicas. Estudos preliminares com cerca de 32 plantas desta regi?o j? foram realizados anteriormente pelo nosso grupo e, dentre elas a esp?cie E. erythropappus se mostrou promissora por apresentar importantes atividades biol?gicas, sendo selecionada neste estudo para dar prosseguimento nos seus estudos qu?micos e biol?gicos. Desta forma, o extrato etan?lico bruto obtido das partes a?reas de E. erythropappus foi utilizado inicialmente para obten??o das fra??es hex?nica, dicloromet?nica e hidroalco?lica, dos quais resultaram na identifica??o de oito metab?litos secund?rios, pertencentes ?s classes dos ?cidos e ?steres de ?cidos graxos, terpen?ide, composto fen?lico e flavon?ides. Os ensaios das atividades biol?gicas foram avaliados utilizando o extrato etan?lico bruto e suas respectivas fra??es hex?nica, dicloromet?nica e hidroalco?lica. Na atividade antitumoral, todos os extratos apresentaram-se ativos frente ambas as linhagens tumorais (MDA-MB-231 e A549), sendo que o mais promissor foi ? fra??o dicloromet?nica, em que foi encontrada a subst?ncia hidroquinona. A atividade tripanocida, verificada frente ? cepa Colombiana, tamb?m demonstrou potente atividade para todos os extratos (bruto e fra??es), de forma que a fra??o hidroalco?lica foi a mais ativa sobre a cepa de T. cruzi, que apresentou na caracteriza??o fitoqu?mica a presen?a dos flavonoides quercetina e rutina. Na avalia??o da atividade leishmanicida, tamb?m foi verificado potente efeito do extrato e fra??es frente ambas as cepas de leishmania (cepa M2269 de L. amazonensis e cepa PP75 de L. infantum), sendo que as fra??es dicloromet?nica e hidroalco?lica foram as mais ativas. Na atividade antimicrobiana, foi verificada que as fra??es inibiram ?s bact?rias P. aeruginosa, S. aureus e L. monocytogenes, no qual o mais ativo foi ? fra??o dicloromet?nica. Frente os fungos leveduriformes, a fra??o hex?nica apresentou forte atividade antif?ngica frente ? cepa C. tropicalis e, a fra??o dicloromet?nica forte atividade antif?ngica frente ?s cepas C. albicans e C. tropicalis, monstrando-se como as mais promissoras. Com rela??o ? citotoxicidade sobre fibroblastos de camundongos da linhagem L929 e sobre a linhagem de macr?fagos RAW 264.7, as fra??es apresentaram graus consider?veis de citotoxicidade, apresentando IS insatisfat?rios, sendo a fra??o dicloromet?nica a que apresentou maior percentagem de morte celular para ambas as linhagens. Diante disso, este trabalho contribuiu para o conhecimento qu?mico e biol?gico da esp?cie E. erythropappus, uma vez muitos compostos identificados nas fra??es s?o relatados pela primeira vez nesta esp?cie vegetal, contudo, praticamente todos estes metab?litos secund?rios j? s?o descritos por demonstrarem atividade frente os ensaios propostos, exceto o palmitato de etila, o ?cido linol?nico e o linolenato de etila, identificados na fra??o hex?nica e, que j? s?o descritos por apresentarem a??o antimicrobiana e antitumoral, por?m, carecem de estudos frente atividades tripanocidas e leishmanicidas. Disserta??o (Mestrado) ? Programa de P?s-gradua??o em Ci?ncias Farmac?uticas, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2018. The species Eremanthus erythropappus (DC.) MacLeish., (Asteraceae) is popularly known as Candeia and occurs naturally in the Cerrado region, including in the municipality of Diamantina, Jequitinhonha Valley and Mucuri region. In folk medicine it has been used in the treatment of stomach ulcers, such as anti-inflammatory, healing and against bacterial and fungal infections. Despite its rich biodiversity, many endemic species of this biome are still poorly studied concercening the chemical composition and biological activies. Consequently, it is necessary to invest more in research on medicinal plants, especially when dealing with diseases whose therapeutic arsenal is limited and / or treatment has limitations of efficacy and side effects, such as Chagas Disease, Leishmaniasis, Cancer and bacterial and fungal infections. Preliminary studies with about 32 plants of this region have already been carried out previously by our group and among them the species E. erythropappus was promising for several biological activies. Thus, it was selected and the crude ethanolic extract obtained from the aerial parts of E. erythropappus was initially used to obtain the hexane, dichloromethane and hydroalcoholic fractions. Their fitochemical identication showed eight secondary metabolites, belonging to the classes of acids and esters of fatty acids, terpenoid , phenolic compound and flavonoids. Prelimary the biological activies were tested to crude extract and results corrobaret the previous activities observed and their fractions were sequentialy also tested. In the antitumor activity evaluation, all fractions were active against both tumoral lines (MDA-MB-231 and A549) and the most promising was the dichloromethane fraction, in which hydroquinone was found. The trypanocidal activity verified against the Colombian strain was detected for fractions, but the hydroalcoholic fraction was the most active on the T. cruzi, which presented in the phytochemical characterization the presence of flavonoids quercetin and rutin. In the evaluation of the leishmanicidal activity, a potent effect of the extract and fractions on both leishmania strains (L. amazonensis strain M2269 and L. infantum strain PP75) was also verified, with the dichloromethane and hydroalcoholic fractions being the most active. In the antimicrobial activity investigation, fractions inhibited the bacteria P. aeruginosa, S. aureus and L. monocytogenes, but most active was the dichloromethane fraction. In contrast to the yeast fungi, the hexanic fraction showed strong antifungal activity against the C. tropicalis strain, and the dichloromethic fraction showed strong antifungal activity against the C. albicans and C. tropicalis strains. Cytotoxicity evaluation showed that both fractions presented considerable degrees of cytotoxicity againt fibroblast of mice of the L929 lineage and the RAW 264.7 macrophages, presenting unsatisfactory IS., The dichloromethane fraction presented the highest percentage of cell death to both lines This work contributed to the chemical and biological knowledge of the E. erythropappus species, since many compounds identified in the fractions are reported for the first time in this plant species, however, practically all these secondary metabolites are already described because they demonstrate activity against the tests , except for ethyl palmitate, linolenic acid and ethylene linolenate, identified in the hexane fraction, and which are already described as having antimicrobial and antitumor action, but lacking studies on trypanocidal and leishmanicidal activities.

Mestrado em Engenharia Agronómica - Protecção das Plantas - Instituto Superior de Agronomia As plantas desenvolveram mecanismos funcionais e metabólicos como uma estratégia de defesa para sobreviver em ambientes adversos. Terpenóides, alcalóides, flavonóides e compostos fenólicos são biosintetizados e acumulados em organelos celulares ou em estruturas secretoras. Sendo assim, as plantas são uma fonte valiosa de produtos naturais e são usadas em medicina tradicional. O estudo das plantas proporciona novas ferramentas para o tratamento várias doenças e infeções. O objetivo deste trabalho foi estudar a micromorfologia da folha, atividade antibacteriana e antifúngica, potencial sinérgico e determinação do perfil fitoquímico de três espécies nativas da Guiné-Bissau, conhecidas por possuírem propriedades etnobotânicas: Zanthoxylum zanthoxyloides, Zanthoxylum leprieurii e Hymenocardia acida. O material vegetal foi recolhido na Guiné-Bissau. As folhas foram observadas em microscopia de campo claro, microscopia de fluorescência e microscopia eletrónica de varrimento. Extratos de polaridade crescente foram obtidos por extração sequencial do material vegetal e posteriormente testados contra bactérias Gram-positivas, Gram-negativas e fungos. A concentração mínima inibitória (CMI) e a concentração mínima bacteriostática (CMB) foram determinadas. O potencial sinérgico foi avaliado e o índice da concentração inibitória fracionária (ICIF) foi calculado. O perfil fitoquímico foi realizado por TLC em sílica gel. Foi possível identificar características micromorfologicas que permitem a diferenciação das espécies de Zanthoxylum. Os testes histoquímicos revelaram que as diferenças entre estas são de natureza quantitativa e não qualitativa. Para H. acida foi detetada a presença de vários compostos, sendo que os extratos apolares são os mais ativos, capazes de inibir o crescimento de bactérias Gram-positivas. Extratos de espécies de Zanthoxylum revelaram atividade contra Grampositivas e fungos, e quando combinados com antibióticos demostraram um efeito sinérgico, revertendo a atividade antibacteriana em estirpes resistentes. Os resultados obtidos enfatizam o valor de estudos adicionais para melhor compreensão dos compostos e mecanismos que podem ser fundamentais para ultrapassar a problemática da resistência das bactérias aos antibióticos N/A

In this work, we used the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) technique to evaluate the antibacterial potential of the apitoxin produced by Apis mellifera bees against the causative agents of tooth decay. Apitoxin was assayed in naturaand in the commercially available form. The antibacterial actions of the main components of this apitoxin, phospholipase A2, and melittin were also assessed, alone and in combination. The following bacteria were tested: Streptococcus salivarius, S. sobrinus, S. mutans, S. mitis, S. sanguinis, Lactobacillus casei, and Enterococcus faecalis. The MIC results obtained for the commercially available apitoxin and for the apitoxin in natura were close and lay between 20 and 40µg / mL, which indicated good antibacterial activity. Melittin was the most active component in apitoxin; it displayed very promising MIC values, from 4 to 40µg / mL. Phospholipase A2 presented MIC values higher than 400µg / mL. Association of mellitin with phospholipase A2 yielded MIC values ranging between 6 and 80µg / mL. Considering that tooth decay affects people's health, apitoxin and its component melittin have potential application against oral pathogens. O presente estudo avaliou pela técnica da Concentração Inibitória Mínima (CIM) o potencial antibacteriano da apitoxina produzido pela abellha Apis melifera frente aos microrganismos causadores da cárie dental. Apitoxina foi avaliada na forma in naturae comercial. A ação antibacteriana dos principais componentes da apitoxina, fosfolipase A2 e melitina foram também avaliados, isolados e em combinação. As bactérias testadas foram: Streptococcus salivarius, S. sobrinus, S. mutans, S. mitis, S. sanguinis, Lactobacillus caseie Enterococcus faecalis. Os resultados da CIM da apitoxina comercial e in natura foram muito próximos, variando entre 20 µg/mL e 40µg/mL, ambas apresentaram uma boa atividade antibacteriana. Entre os componentes, a melitina foi a mais ativa, exibindo valores de CIM muito promissores, variando de 4 a 40μg/mL. A fosfolipase A2 apresentou resultados maiores que 400 µg/mL. A associação entre a melitina e fosfolipase A2apresentou resultados da CIM que variaram entre 6µg/mL e 80µg/mL. Considerando que a cárie dental afeta a saúde das pessoas, a apitoxina e seu composto, melitina, possuem potencial aplicação frente aos patógenos bucais.

RESUMO O uso de plantas medicinais no tratamento de doenças é uma estratégia antiga utilizada por praticamente todas as populações do mundo, e, embora novos antibióticos tenham sido desenvolvidos para o controle de micro-organismos infecciosos, às vezes são ineficazes. Diversos extratos de plantas medicinais têm efeitos antimicrobianos, principalmente quando associados à antibióticos de uso clínico, representando alternativa terapêutica para doenças infecciosas. Montrichardia linifera, conhecida popularmente como aninga, é espécie macrófita, aquática emergente de hábito herbáceo, pertencente a família Araceae e ocorre em áreas alagáveis. A utilidade farmacológica desta espécie é diversificada tendo sido relatada como cicatrizante, antirreumático, antidiurético e expectorante. Devido à relevância no campo etnofarmacológico, ampla utilização na medicina popular e escassez de trabalhos relacionados à atividade antibacteriana desta espécie, objetivou-se com este trabalho avaliar a atividade antibacteriana de extratos alcoólicos de folhas de Montrichardia linifera, coletadas na margem do rio Igaraçu, Parnaíba-PI. O extrato foi testado em oito cepas de bactérias: Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Enterococcus faecalis, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae e Pseudomonas aeruginosa. Foram utilizadas as técnicas de verificação da formação de halos de inibição e determinação das concentrações inibitórias e bactericidas mínimas. Os testes antibacterianos evidenciaram como principais resultados que o extrato metanólico seco (EMS), extrato metanólico fresco (EMF), e o extrato etanólico seco (EES), apresentaram ação antibacteriana, enquanto o extrato etanólico fresco (EEF) não apresentou atividade para as bactérias testadas. O EMS foi o mais eficiente, inibindo o crescimento bacteriano na concentração de 200 μg/mL para E. faecalis, 400 μg/mL para S. aureus, 400 μg/mL para S. epidermidis e 2.000 μg/mL para P. aeruginosa. O EMF obteve CIM de 2.000 μg/mL para E. faecalis e EES obteve CIM de 250 μg/mL para E. faecalis. Os resultados demonstraram que M. linifera constitui fonte eficiente de compostos bioativos antibacterianos. Os estudos sobre as propriedades farmacológicas de plantas da família Araceae são escassos, e os resultados deste trabalho são pioneiros em relação a atividade antibacteriana desta espécie. ABSTRACT For a long time, medicinal herbs have been used in the treatment of diseases by almost all populations in the world, and although new antibiotics have been developed for the control of infectious micro-organisms, they are sometimes ineffective. Many herbal extracts have antimicrobial effects and represent a potential alternative therapy for infectious diseases, especially when associated with the clinical use of antibiotics. The Montrichardia linifera, popularly known as Aninga, is a robust, herbaceous, emergent aquatic macrophyte belonging to the Araceae family, appearing along rivers and stream margins in the tropical America. The pharmacological application of this species are several ones, having been reported to own a healing, antirheumatic, anti-diuretic and expectorant effect. Due to the relevance in the ethnopharmacological field, the spread use in popular medicine and the few researches related to the antibacterial activity of this specie, the study aimed to evaluate the antibacterial activity of alcoholic leaf extracts of plants of Montrichardia linifera collected along the margins of Rio Igaraçu, Parnaíba, Piauí, Brazil. The extract was tested in eight strains of ATCC bacterial standards: Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Enterococcus faecalis, Escherichia coli, Klebsiella pneumonia and Pseudomonas aeruginosa. The verification techniques used were the formation of inhibition halos, and the determination of minimum inhibitory and bactericidal concentrations (MIC). The antibacterial tests showed, as main results, that dried methanol extract (EMS), fresh methanol extract (EMF) and dry ethanol extract (EES) exhibited antibacterial activity, while the fresh ethanol extract (EEF) was inactive against the tested bacteria. The EMS was the most efficient one, inhibiting bacterial growth at a concentration of 200 µg/mL for E. faecalis, 400 µg/mL for S. aureus 400 µg/mL for S. epidermidis and 2.000 µg/mL for P. aeruginosa. The EMF obtained a MIC of 2.000 µg/mL for E. faecalis and EES obtained a MIC of 250 µg/mL for E. faecalis. The results showed that M. linifera is an efficient source of bioactive antibacterial compounds. Studies about the pharmacological properties of plants of the family Araceae are scarce, and the results of this work are pioneer in regard to the antibacterial activity of this species.

The extracts and fractions of leaves and branches of Protium hebetatum D. C. Daly (Burseraceae) were investigated for their antibacterial activity and chemical composition. The methanol extract of branches (EMG) was considered active against the Escherichia coli and the Proteus vulgaris, showing an inhibition zone of 13 mm, and was selected for bioassay-guided phytochemical fractionation. From the technique of broth microdilution, the extract was considered a moderate inhibitor against Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa and Enterococcus faecalis, with a minimum inhibitory concentration (MIC) of 1 mg/mL. The dichloromethane fraction was considered a moderate inhibitor against S. aureus (MIC of 1 mg/mL) and a potent inhibitor against E. faecalis (MIC of 0.5 mg/mL). F1, F2, F5 and F6 from chromatographic column of dichloromethane fraction were considered moderate inhibitors against S. aureus (MIC of 1 mg/mL). Through analysis by a gas chromatography mass spectrometry, eighteen compounds were identified, from which thirteen (isoeugenol, p-vinylguaiacol, metoxyeugenol, coumarin, 5-hydroxy-scopoletin, 4,7-dihydroxy-6-metoxicromam-2-one, 4[(1E]-3-hydroxy-1-propenyl)-2-methoxyphenol, piperonal, scoparon, o-guaiacol, spathulenol, seringol and antiarol) are unprecedented in these species. We also identified the triterpenes α-amyrin and β-amyrin, the steroids stigmasterol and sitosterol and the coumarin scopoletin, which was closely linked to the antibacterial activity of the samples. RESUMO Atividade antibacteriana e compostos químicos de folhas e galhos de Protium hebetatum. Extratos e frações de folhas e galhos de Protium hebetatum D. C. Daly (Burseraceae) foram investigados quanto sua atividade antibacteriana e composição química. O extrato metanólico dos galhos (EMG) foi considerado ativo contra Escherichia coli e Proteus vulgaris, apresentando um halo de inibição de 13 mm, sendo selecionado para um fracionamento fitoquímico biomonitorado. A partir da técnica de microdiluição em caldo o EMG foi considerado um inibidor moderado contra Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa e Enterococcus faecalis, apresentando uma concentração inibitória mínima (CIM) de 1mg/mL. A fração diclorometânica foi considerada inibidora moderada contra S. aureus (CIM de 1 mg/mL) e inibidora potente contra E. faecalis (CIM de 0,5 mg/mL). F1, F2, F5 e F6 provenientes da fração diclorometânica foram consideradas inibidoras moderadas contra S. aureus (CIM de 1 mg/mL). Através da análise por cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massa, foram identificados dezoitos compostos, dos quais treze (isoeugenol, p-vinilguaiacol, metoxieugenol, cumarina, 5-hidroxi-escopoletina, 4,7-dihidroxi-6-metoxicromam-2-ona, 4[(1E]-3-hidroxi-1-propenil)-2-methoxifenol, piperonal, escoparona, o-guaiacol, espatulenol, seringol e antiarol) foram identificados pela primeira vez nesta espécie. Foram também identificados os triterpenos α-amirina e β-amirina, os esteroides estigmasterol e sitosterol e a cumarina escopoletina, que estão intimamente ligados à atividade antibacteriana da espécie.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-12-14T12:13:57Z No. of bitstreams: 1 Debora Lima Sales.pdf: 19549496 bytes, checksum: c724af08179f0f0c0f078740c985f375 (MD5) Made available in DSpace on 2018-12-14T12:13:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Debora Lima Sales.pdf: 19549496 bytes, checksum: c724af08179f0f0c0f078740c985f375 (MD5) Previous issue date: 2017-12-08 Bufonids have parotoid glands that produce important secretions in the passive defense process, they are activated through mechanical pressure, like the bite of some predator. In them, alkaloids, proteins, peptides, steroids and amines were identified, with important pharmacological functions. Rhinella jimi (Stevaux, 2002) is anuran amphibian popularly known as the "cururu toad" and are among the 47 species of amphibians cited with ethnozoological and zooterapeutic use. In this way the present work aims to analyze and compare the chemical composition of the glandular secretion of the species Rhinella jimi; Evaluate its action against bacteria of standard and multiresistant strains; To analyze the effect of secretion combined with antibacterial drugs. The animals were captured by active collection, anesthetized and then had the parotoid glands pressed for removal of the secretion. To identify cutaneous secretion, reverse phase high performance liquid chromatography (RP-HPLC) was used in a binary HPLC system, and mass spectrometry. Standard strains were used to determine the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and, for antibiotic modulating activity, the clinical isolates Escherichia coli 06, Pseudomonas aeruginosa 03 and Staphylococcus aureus 10. The modulatory activity was evaluated by the microdilution method in broth and Had aminoglycosides (amikacin and gentamicin) and β-lactams (Imipenem and Oxacillin) as antibiotics. The results showed similar profiles in the three samples studied, the peaks of 205 m/z, 203 m/z, 401 m/z, 403 m/z, 387 m/z, corresponding respectively to bufotenin, dehydrobufotenin, marinobufagine, telocinobufaline and bufalin. Secretions when used alone had no effect on the bacterial strains tested, but in combination with antibiotics they had a significant reduction of MIC in both aminoglycosides and β-lactams. Glandular secretion of Rhinella jimi demonstrated clinically relevant results at modulation. This is an interesting alternative since it can serve as a starting point for the production of new pharmaceutical compositions or a complement to existing antibiotics. Bufonídeos possuem glândulas parotóides produtoras de secreções importantes no processo de defesa passiva, elas são ativadas através de pressão mecânica, como a mordida de algum predador. Nelas foram identificadas alcaloides, proteínas, peptídeos, esteroides e aminas, com importantes funções farmacológicas. Rhinella jimi (Stevaux, 2002) é um anfíbio anuro popularmente conhecidos por “sapo cururu”, e estão entre as 47 espécies de anfíbios citadas com uso etnozoológico e zooterápico. Desta forma o presente trabalho tem por objetivo analisar e comparar a composição química da secreção glandular da espécie Rhinella jimi; avaliar a sua ação contra bactérias de linhagens padrão e multirresistentes; analisar o efeito da secreção combinado com drogas antibacterianas. Os animais foram capturados por coleta ativa, anestesiados e, então tiveram as glândulas parotóides pressionadas para retirada da secreção. Para identificação da secreção cutânea foi usada a cromatografia líquida de alta eficiência em fase reversa (RP-HPLC) em um sistema HPLC binário, e espectrometria de massas. Foram utilizadas cepas padrões para determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e, para a atividade moduladora de antibióticos, os isolados clínicos: Escherichia coli 06, Pseudomonas aeruginosa 03 e Staphyloccocus aureus 10. A atividade moduladora foi avaliada pelo método de microdiluição em caldo e teve como antibióticos alvos aminoglicosídeos (amicacina e gentamicina) e β-lactâmicos (Imipenem e Oxacilina). Os resultados obtidos mostraram perfis semelhantes nas três amostras estudadas, os picos de 205m/z, 203m/z, 401m/z, 403m/z, 387m/z, que correspondem respectivamente a bufotenina, dehidrobufotenina, marinobufagina, telocinobufalina e bufalina. As secreções quando usadas sozinhas não tiveram efeito sobre as linhagens bacterianas testadas, mas em associação com os antibióticos tiveram uma redução significativa da CIM tanto em aminoglicosídeos quanto em β-lactâmicos. A secreção glandular de Rhinella jimi demonstrou resultados clinicamente relevantes, à modulação. Isso representa uma alternativa interessante, uma vez que pode servir como ponto de partida para a produção de novas composições farmacêuticas ou complemento para os antibióticos já existentes.