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RESÚMEN Antecedentes: El peso fetal estimado es un dato de considerable utilidad para prevenir la prematurez y elegir la vía de terminación del embarazo, porque ayuda a evaluar la desproporción cefalopélvica y a detectar productos macrosómicos, que constituyen la primera causa de cesárea en México. El peso fetal estimado por ultrasonografía es considerado hoy el mejor predictor del crecimiento fetal, permitiendo diagnosticar oportunamente patrones de crecimiento fetal normales y anormales; sin embargo, algunos autores ponen en duda la validez de la técnica del cálculo del peso fetal por ultrasonido, debido a que este cálculo mediante fórmulas habituales en fetos grandes produce una sobrevaloración del 3% al 4%. Objetivos: El objetivo principal fue comparar el peso fetal estimado utilizando método de Johnson, ultrasonografía y el peso al nacimiento. Metodología: Fue un estudio retrospectivo, unicéntrico, observacional, analítico. Se incluyeron todos los expedientes de pacientes en el Hospital de la Mujer en Yautepec con embarazo a término, del 01 de enero del 2018 al 31 de diciembre del 2018. Resultados: Al comparar el promedio del peso de los recién nacidos (3,098 g) contra el peso obtenido por el método de Johnson (3,002 g), encontramos que este subestima en 96.76 g, 3.12% (p=0.0001). Al comparar el peso del recién nacido (3,098 g) con el método de ultrasonografía (3,141 g), encontramos que el ultrasonido sobrestima 42.12 g, 1.36% el peso del recién nacido y esta diferencia es estadísticamente significativa (p=0.03). Al comparar ambas técnicas encontramos una diferencia 138.88 g la cual es estadísticamente significativa (p=0.0001). Conclusiones: Se demostró que el método más exacto para calcular el peso fetal estimado comparándolo con el peso obtenido al nacimiento del producto, es el de ultrasonografía, sin embargo a pesar de esto, el método de Johnson sigue siendo el método más utilizado sobre todo en unidades donde no se cuenta con ultrasonido, así como en las pacientes que ingresan al área de toco-cirugía con trabajo de parto en periodo expulsivo, teniendo a la mano siempre la estimación del peso por método de Johnson. ABSTRACT Background: Estimated fetal weight is a useful data to prevent prematurity and choose the route of termination of pregnancy, because it helps to evaluate the cephalopelvic disproportion and to detect macrosomic products, which are the first cause of cesarean section in Mexico. The fetal weight estimated by ultrasonography is considered today the best predictor of fetal growth, allowing timely diagnosis of normal and abnormal fetal growth patterns; However, some authors question the validity of the technique of calculating fetal weight by ultrasound, because this calculation using formulas common in large fetuses produces an overestimation of 3% to 4%. Objetives: The main objective was to compare the estimated fetal weight using the Johnson method, ultrasonography and birth weight. Methodology: It was a retrospective, unicentric, observational, analytical study. All patient files were included in the Women's Hospital in Yautepec with full term pregnancy, from January 1, 2018 to December 31, 2018. Results: When comparing the weight of the newborn (3,098 g) with the Johnson technique (3,002 g) we find that Johnson underestimates the weight of the newborn in 96.76 g, 3.12% and this difference is statistically significant (p=0.0001). When comparing the weight of the newborn (3,098 g) with the ultrasonography method (3,141 g) we found that ultrasound overestimates 42.12 g, 1.36% the weight of the newborn and this difference is statistically significant (p=0.03). When comparing both techniques we found a difference of 138.88 g which is statistically significant (p=0.0001). Conclusions: It was shown that the most accurate method to calculate the estimated fetal weight compared to the weight obtained at the birth of the product, is the ultrasonography, however despite this, the Johnson method remains the most used method especially in units where Ultrasound is not available, as well as in patients who enter the toco-surgery area with labor in the expulsive period, always having the weight estimate by Johnson's method on hand.

RESUMEN Antecedentes: La bacteriuria asintomática es el recuento significativo de colonias bacterianas en muestras de orina de pacientes sin signos o síntomas atribuibles a infecciones del tracto urinario, considerándose su escrutinio y tratamiento como un procedimiento obligado en el cuidado prenatal. El tratamiento requiere un conocimiento de los gérmenes más frecuentes y debe prescribirse de acuerdo con la sensibilidad reportada por antibiograma. Objetivos: Identificar la frecuencia de bacteriuria asintomática, los uropatógenos asociados y su sensibilidad antimicrobiana in vitro en embarazadas que acuden a control obstétrico. Metodología: Estudio descriptivo de tipo observacional retrospectivo y transversal, analizando expedientes de embarazadas en control obstétrico en el Hospital de la Mujer en Yautepec Morelos durante enero a diciembre del 2016; identificando el diagnóstico de bacteriuria asintomática, el agente causal asociado y su sensibilidad antimicrobiana in vitro de acuerdo a la interpretación del antibiograma realizado por laboratorio institucional. Resultados: Se incluyeron525 expedientes de embarazadas, reportándose 70 casos de bacteriuria asintomática (13%). Los agentes aislados fueron Escherichia coli (81.4%), Streptococcus agalactiae (7.1%), Klebsiella pneumoniae (4.3%), Proteus mirabilis (2.9%), Enterobacter spp (2.9%) y Citrobacter spp (1.4%). La susceptibilidad in vitrode los 3 gérmenes más frecuentemente aislados fue a amikacina (100%) y nitrofurantoina (98%) para Escherichia coli. El 100% de sensibilidad a amoxicilina con ácido clavulánico, cefepima, cefoxitina, meropenem, penicilina, vancomicina, linezolida y levofloxacino para Streptococcus agalactiae y 100% de sensibilidad a cefalotina, cefepima, cefuroxima, nitrofurantoina, piperacilina, ticarcilina con ácido clavulánico, amikacina, ciprofloxacino, gentamicina, levofloxacino, ofloxacino, trimetoprima con sulfametoxazol y tobramicina para Klebsiella pneumoniae. Conclusiones: La frecuencia de bacteriuria asintomática reportada es acorde con la esperada en población mexicana. Escherichia coli fue el microorganismo aislado predominante. Los uropatógenos presentaron altas tasas de sensibilidad in vitro a nitrofurantoina y amoxicilina con ácido clavulánico, siendo los fármacos de primera línea al considerarse seguros en el embarazo, seguidos por los betalactámicos y en casos justificados, el uso de gentamicina, amikacina y trimetoprina con sulfametoxazol como tercera línea de tratamiento. ABSTRACT Background: Asymptomatic bacteriuria is the significant count of bacterial colonies in urine samples of patients without signs or symptoms attributable to urinary tract infections, considering their scrutiny and treatment as an obligatory procedure in prenatal care. The treatment requires knowledge of the most frequent germs and must be prescribed according to the sensitivity reported by antibiogram. Objectives: To identify the frequency of asymptomatic bacteriuria, associated uropathogens and their antimicrobial sensitivity in vitro in pregnant women who attend obstetric control. Methodology: A retrospective and transversal observational descriptive study, analyzing records of pregnant women in obstetric control in Hospital de la Mujer in Yautepec Morelos during January to December 2016; identifying the diagnosis of asymptomatic bacteriuria, causative agent and its antimicrobial sensitivity in vitro according to the interpretation of the antibiogram performed by the institutional laboratory. Results: 525 pregnant women participated, reporting 70 cases of asymptomatic bacteriuria (13%). The isolated agents were Escherichia coli (81.4%), Streptococcus agalactiae (7.1%), Klebsiella pneumoniae (4.3%), Proteus mirabilis (2.9%), Enterobacter spp (2.9%) and Citrobacter spp (1.4%). The susceptibility in vitro of the 3 most frequently isolated bacteria was amikacin (100%) and nitrofurantoin (98%) for Escherichia coli. 100% sensitivity to amoxicillin with clavulanic acid, cefepime, cefoxitin, meropenem, penicillin, vancomycin, linezolid and levofloxacin for Streptococcus agalactiae, and 100% sensitivity to cephalothin, cefepime, cefuroxime, nitrofurantoin, piperacillin, ticarcillin with clavulanic acid, amikacin, ciprofloxacin, gentamicin, levofloxacin, ofloxacin, trimethoprim with sulfamethoxazole and tobramycin for Klebsiella pneumoniae. Conclusions: The frequency of asymptomatic bacteriuria reported is in line with that expected in the Mexican population. Escherichia coli was the predominant isolated microorganism. The uropathogens showed high rates of sensitivity in vitro to nitrofurantoin and amoxicillin with clavulanic acid, being the first line drugs considered safe in pregnancy, followed by beta-lactams and in justified cases, the use of gentamicin, amikacin and trimethoprim with sulfamethoxazole as third line of treatment. (Key words: Asymptomatic

RESUMEN Antecedentes. Se ha observado una alta frecuencia en nuestro país de diabetes mellitus gestacional, por lo cual es necesario un diagnóstico y tratamiento oportuno para disminuir las complicaciones tanto maternas como fetales. Objetivo. Conocer la frecuencia de diabetes mellitus gestacional en las mujeres que acuden a la consulta de obstetricia del Hospital de la Mujer de Morelos, durante el periodo comprendido del 01 de enero al 31 de diciembre del año 2016. Metodología. Se realizó un estudio observacional, transversal, retrospectivo analítico, donde se estudiaron 778 pacientes que acudieron a consulta de obstetricia de primera vez en el Hospital de la Mujer de Morelos, de las cuales se seleccionaron las que tuvieron prueba diagnóstica positiva para diabetes mellitus gestacional, obteniendo una muestra de 109 pacientes. Recabándose los siguientes datos: edad, método diagnóstico de diabetes mellitus gestacional, paridad, obesidad, antecedentes heredofamiliares con diabetes mellitus, antecedente en embarazo previo de diabetes mellitus gestacional y/o feto macrosómico, tratamiento utilizado, vía de nacimiento, resultados perinatales adversos y complicaciones asociadas a diabetes mellitus gestacional. Se elaboró una base de datos para su análisis estadístico en Microsoft ExcelMacintosh 2011 y se utilizó estadística descriptiva; para variables cualitativas: se realizó tabla de frecuencia y porcentajes. Para variables cuantitativas: se empleó medidas de tendencia central (media), y dispersión (desviación estándar y rango). Resultados: se encontró una frecuencia de diabetes mellitus gestacional del 14.4%. La prueba diagnóstica mayormente utilizada fue la curva de tolerancia a la glucosa de 100 grs en un 76.2%. La edad media de diagnóstico fue de 29 + años con una prevalencia mayor en el rango de edad de 30-34 años en un 24.7%. El 43% de las pacientes fue multigesta y el 33% presentaba obesidad. En cuanto a los antecedentes el 78.8 % tenía carga genética de primer grado para diabetes mellitus tipo 2, el 3.6% tuvo un producto macrosómico, el 4.5 % cursó con diabetes mellitus gestacional en el embarazo anterior. Así mismo el 87.2 % de las pacientes respondieron adecuadamente al tratamiento con dieta. Resolviéndose el embarazo por vía abdominal en el 75%. Encontrándose como complicación neonatal más frecuente la hipoglucemia en el 10% de los casos, en cuanto a III las complicaciones maternas la DM2 no pudo ser estudiada por que la mayoría de las pacientes no acudieron para su reclasificación. Conclusiones. La frecuencia de diabetes mellitus gestacional es similar a los estudios reportados por otros hospitales del país. Por lo cual es necesario realizar pruebas diagnósticas a las pacientes embarazadas para un oportuno y adecuado manejo. SUMMARY Background. It has been observed a high prevalence in our country of gestational diabetes mellitus, so it is necessary a diagnosis and timely treatment to reduce complications as well as fetal relationships. Objetive. To know the frequency of gestational diabetes mellitus in woman who attend the obstetrics clinic of the Hospital de la Mujer de Morelos, during the period from January 1 to December 31, 2016. Methodology. An observational, cross-sectional, analytical retrospective study was carried out, where 778 patients who atended a first-time obstetric clinic at the Hospital de la Mujer de Morelos were studied, from which those who had a positive diagnostic test for gestational diabetes mellitus were selected. Obtaining a sample of 109 patients. Collecting the following data: age, diagnostic, method of gestational diabetes mellitus, parity, obesity, family history with type 2 diabetes mellitus, antecedent in pregnancy prior to gestational diabetes mellitus and/or macrosomic fetus, type of life, adverse perinatal outcomes and complications associated with gestational diabetes mellitus. A database was developed for statistical analysis in Microsoft ExcelMacintosh 2011 and descriptive statistics were used: for qualitative variables: frequency table and percentages were made. For quantitative variables: measures of central tendency (mean), and dispersion (standard deviation and rank) were used. Results. A prevalence of gestational diabetes mellitus of 14.4% was found. The diagnostical test was performed with a tolerance curve of 100 grs in 76.2%. The age of the average was 29+ years in 24.7%. 43% of the patients were multigesta and 33% had IV obesity. Regarding the background, 78.8% had a genetic load of first degree for diabetes mellitus type 2, 3.6% had a macrosomic product, 4.5% had gestational diabetes mellitus in the previous pregancy. Likewise, 87.2% of patients responded appropriately to diet tratment. Resolving the pregnancy by abdominal route in 75%. With hypoglycemia beiing most frequent complication in 10% of cases, in terms of maternal complications, DM2 could not be studiet because most of the patients did not attend for reclassification. Conclusions The frequency of gestational diabetes mellitus is similar to the studies reported by other hospitals in the country. Therefore, it is necessary to perform diagnostic tests on pregnant patients for timely and appropriate management.

La revisión taxonómica demuestra que existen géneros altamente complejos como Bollmannia, Gobiosoma, Microgobius, Parrella y Tigrigobius que deben ser meticulosamente revisados y, de igual manera, deben de ser revisadas molecularmente especies como T. inornatus Bussing, 1990 y T. digueti (Pellegrin, 1901), y Elacatinus puncticulatus (Ginsburg 1938a). Además, existen grandes áreas/sitios que aún deben ser prospectados mediante un muestreo dirigido al grupo y sistemático en áreas como el Archipiélago de Revillagigedos, las islas del Pacífico central de México, la brecha Chiapas-Nicaragua, así como la costa de Colombia y sus islas. Indudablemente, la descripción de especies nuevas (e.g., Gobiosoma heterolepidotum (Hoese, 1971)) y el registro de especies previamente reconocidas en otras áreas, incrementarán el número de especies reconocidas en la región en un futuro próximo. El presente capítulo aborda la intrincada historia sistemática y taxonómica de los peces de la familia Gobiidae, tomando el suborden Gobioidei como base, realizando un análisis hacia el interior de las familias-subfamilias en el área marina conocida como Pacífico oriental tropical. En general, la historia sistemática y taxonómica los peces de la familia Gobiidae se podría resumir en tres etapas: (1) Durante la mitad del siglo XVIII y hasta finales del siglo XIX, se describieron las primeras especies de peces gobios y se propusieron las bases para su clasificación basada en la anatomía y morfología externa de caracteres simples. (2) A principios del siglo XX, se consideraron características osteológicas para tratar de solucionar inconsistencias sistemáticas, particularmente debido a la complejidad de un grupo tan diverso; esto solucionó parcialmente algunos problemas, como el hecho de separar a las familias Eleotridae y Gobiidae; no obstante, fue insuficiente en algunos grupos (e.g. Gobionellinae y Gobiinae), por lo que fue necesario añadir otras características, como el patrón de distribución de las papilas y poros cefálicos. (3) Con el desarrollo de la filogenia molecular nuclear y mitocondrial, a principios del siglo XXI el número de subfamilias de Gobiidae ha variado continuamente. Mientras algunos autores aceptan ocho familias, otros proponen entre seis a nueve familias, e incluso hacen divisiones a nivel de clados. Por si esto no fuese suficiente, en el Pacífico y Atlántico existe un grupo de peces de la familia Gobiidae endémicos de América, denominados “American seven-spined gobies” o “gobios del Nuevo Mundo”, considerados como especies “derivadas” del grupo basal de los Gobioidei y agrupados dentro de la tribu Gobiosomatini, considerado uno de los grupos de peces más diversos con una amplia radiación adaptativa. Las relaciones filogenéticas de los peces Gobiidae basadas en análisis tradicionales ha sido problemática debido a la miniaturización de las especies y, por lo tanto, a la reducción de las características; por otra parte, el surgimiento de herramientas moleculares parece ser prometedoras y capaces de resolver grandes inconsistencias taxonómicas, no obstante, hasta el momento no han sido eficaces. La familia Gobiidae representa uno de los grupos de peces más diversos con 1,894 especies alrededor del mundo, caracterizados por experimentar una amplia radiación adaptativa que les ha permitido colonizar diversos ambientes acuáticos (e.g. dulceacuícolas, estuarinoslagunares, intermareales y marinos) y ecosistemas (e.g. pozas intermareales, zona altifótica, zona mesofótica, zona rarifótica). En el presente capítulo se revisó la diversidad, distribución y taxonomía de los peces gobios de la región biogeográfica marina conocida como Pacífico oriental tropical (POT), que abarca desde bahía Magdalena, Pacífico de Baja California hasta el sur del golfo de Guayaquil, Ecuador. Se identificaron organismos recolectados en campo, y resguardados en museos y colecciones ictiológicas. El ensamble de peces gobios del POT está conformado por 87 especies marinas y costeras someras, distribuidas en 27 géneros, dos subfamilias (Gobiinae y Gobionellinae), y una tribu (Gobiosomatini) endémica de América. La tribu Gobiosomatini está conformada por 67 especies, que representa el 77% del total de las especies del POT. De las especies aquí reportadas, tres especies provienen del Atlántico y Gran Caribe y mantienen poblaciones estables en el Pacífico, en la boca del Canal de Panamá: Barbulifer ceuthoecus (Jordan & Gilbert, 1884), Gobiosoma hildebrandi (Ginsburg, 1939) y Lophogobius cyprinoides (Pallas, 1770). Se incluye con cautela a Awaous transandeanus (Günther 1861) por su similitud con A. banana (Valenciennes, 1837). El reemplazo de especies es alto al norte (ecorregión Corteziana) y al sur (Ensenada de Panamá), mientras que, en un gradiente longitudinal, entre ecorregiones insulares y costeras. A nivel de provincia, la influencia del reemplazo de especies es alta (0.527); sin embargo, se mantiene un bajo (aunque significativo) valor de anidamiento de especies (0.322), que indica el flujo de genes/especies entre provincias. A nivel de ecorregiones, factores históricos y filogenéticos, han influido en los “hotspots” de peces gobios, particularmente de las ecorregiones Corteziana, Ensenada de Panamá e Isla del Coco, en donde el recambio de especies es alto tanto en un gradiente latitudinal, como longitudinal. A nivel de provincias, la fragmentación de especies y las barreras físicas y geográficas, posiblemente juegan un papel importante en el reemplazo de especies. Estos resultados resaltan la importancia y la inclusión exitosa de un componente criptobentónico de peces en estudios ecológicos y biogeográficos. Se utilizaron delimitaciones de ecorregiones marinas para analizar los componentes aditivos y multiplicativos de la diversidad- del Pacífico oriental tropical (POT), así como el reemplazo y pérdida/ganancia de especies en un diseño anidado jerárquico de cuatro escalas espaciales: unidades de muestreo, ecorregiones, provincias y reinos. Los datos provienen de tres fuentes: (i) Recolecta de peces gobios a lo largo del POT; (ii) Revisión, validación y corroboración de las especies de colecciones biológicas; (iii) Registros de base de datos de dominio público (GBIF) y literatura primaria (artículos científicos). La riqueza de peces gobios del POT está conformada por 87 especies, que representa el 93% de la riqueza total esperada de especies. A lo largo de un gradiente latitudinal/longitudinal, la diversidad- es explicada por la diversidadβ tanto en ecorregiones como en provincias. Por lo tanto, β es más importante a estos niveles. La partición de beta, a nivel global, demuestra que el reemplazo de especies es más importante (0.813) que el anidamiento (0.115).

Resultados La comparación basal de los parámetros de dominio y frecuencia de la variabilidad de la frecuencia cardiaca del grupo A versus grupo B mostró diferencias significativas en todos los valores del dominio de tiempo y frecuencia de la VFC. El tratamiento con moxibustión en V15 no originó cambios significativos en los valores de los dominios de tiempo y frecuencia de la VFC de la muestra total. En el grupo A se observaron cambios constantes pero no significativos en los valores del dominio de frecuencia de la VFC con disminución de HF e incremento de LF y LF/HF. En el grupo B no se observaron cambios significativos en los valores de la VFC. Sin embargo, los cambios originados por el tratamiento en los parámetros de tiempo y frecuencia de la VFC de los grupos A versus B tuvieron direccionalidad contraria. En el grupo A de predominio de tono parasimpático los cambios fueron en sentido de disminuir este predominio. Por el contrario, en el grupo B de predominio de tono simpático los cambios fueron en el sentido de disminuir esa orientación. Las mayores diferencias entre los grupos A y B se observaron en HF y LF. El análisis de Pearson entre las variables de tiempo y frecuencia de la VFC solo mostraron correlaciones significativas desde el punto de vista estadístico entre los valores de frecuencia en los tres grupos estudiados. Conclusión La estimulación del punto V15 mediante moxibustión modificó la VFC en forma diferenciada en los grupos estudiados dependiendo del estado basal del equilibrio parasimpático/simpático. En los sujetos con predominio basal parasimpático el tratamiento con moxa tendió a disminuir este predominio; mientras que en los sujetos con predominio basal simpático, se presentó un aumento de la actividad parasimpática. El tratamiento con moxibustión en V15 modificó de manera más marcada los valores del dominio de frecuencia que los de tiempo. Consideramos que en futuros estudios en que se intente modificar la VFC con estimulación de puntos de acupuntura deberá considerarse el estado basal del equilibrio parasimpático/simpático. Palabras clave: sistema nervioso autónomo, variabilidad de la frecuencia cardiaca, moxibustión, V15. La mayoría de los países presentan tasas elevadas y crecientes de enfermedades cardiovasculares. Estas enfermedades pueden ser evaluadas mediante la variabilidad de la frecuencia cardiaca (VFC). La VFC permite conocer el equilibrio de la actividad simpática y parasimpática del sistema nervioso autónomo (SNA). La moxibustión en el punto Vejiga 15 (V15), se sabe por experiencia clínica que modifica la fisiología y fisiopatología cardiovasculares; pero sus mecanismos no se han establecido de manera completa. Objetivo El objetivo de este estudio fue analizar la correlación entre la moxibustión en el punto de acupuntura V15 y los parámetros de frecuencia y tiempo de la VFC. Materiales y métodos Se estudiaron 14 sujetos voluntarios sanos de la comunidad de la Unidad Iztapalapa de la Universidad Autónoma Metropolitana. El estudio de la VFC se realizó utilizando el dispositivo SphygmoCor (AtCor Medical, Modelo EM3, Sydney, Australia). Se obtuvieron las variables del dominio de frecuencia y tiempo a partir del análisis espectral de intervalos sucesivos RR normales.

Resultados En comparación con las cifras basales: a) en la muestra total los parámetros de tiempo PNN50 y RMSSD aumentaron sus valores de una manera significativa; respecto a las variables de frecuencia HF disminuyó de forma no significativa, LF y LF/HF presentaron un aumento no significativo; b) en el grupo A con predominio parasimpático las variables de tiempo PNN50 y RMSSD incrementaron sus valores de una manera constante pero no significativa; respecto a las variables de frecuencia, HF disminuyó, LF y LF/HF aumentaron todos de forma significativa; c) en el grupo B con predominio de actividad simpática las variables de tiempo PNN50 y RMSSD aumentaron sus valores de una manera constante, pero no significativa; respecto a las variables de frecuencia, HF aumentó, LF y LF/HF disminuyeron de forma no significativa. Conclusión La aplicación del tratamiento en GS2 y PS originó en el grupo total un aumento constante pero no significativo en los valores del dominio de tiempo. En el grupo A con predominio parasimpático los valores del dominio de frecuencia se modificaron en el sentido de disminuir dicho predominio. En el grupo B con predominio simpático los valores del dominio de frecuencia se modificaron en el sentido de disminuir dicho predominio simpático. Palabras clave: sistema nervioso autónomo, Glándula Salival 2, Plexo Solar, auriculopuntura, variabilidad de la frecuencia cardiaca. El punto Glándula Salival 2 (GS2) se indica en trastornos de la salivación; el punto Plexo Solar (PS) se utiliza en trastornos gastrointestinales y como regulador neurovegetativo. La variabilidad de la frecuencia cardiaca (VFC) en sus parámetros del dominio de tiempo y frecuencia se emplean para conocer el estado de equilibrio de la función simpática y parasimpática del SNA. Se ha informado que el efecto de la acupuntura sobre la fisiología y fisiopatología cardiovascular puede depender del estado basal de las variables cardiovasculares. Objetivo Observar los cambios de la VFC en sus parámetros de dominio de tiempo y frecuencia en sujetos sanos antes y después de la aplicación de auriculopuntura en los puntos GS2 y PS; comparando el efecto del tratamiento con auriculopuntura en una muestra global y una división de esta en dos grupos: uno (A) con predominio de actividad parasimpática y otro (B) con predominio de actividad simpática. Población y métodos Se aplicó auriculopuntura en los puntos GS2 y PS en 26 sujetos clínicamente sanos de cualquiera de los dos sexos. Antes e inmediatamente después de la auriculopuntura se hicieron registros electrocardiográficos y se obtuvieron los parámetros de dominio de frecuencia y tiempo de la VFC. Se compararon los valores pre y posterior al tratamiento con auriculopuntura entre la muestra total y dos grupos derivados de esta: grupo A con predominio de actividad parasimpática y grupo B con predominio de actividad simpática.

Materiales y métodos. Mediante un sistema de dos termopares se obtuvieron registros continuos durante 120 s de la temperatura superficial del punto E4 y un punto adyacente situado a 1.5 cm. En el primero, se registró la temperatura diferencial en estado basal durante 30 s; a continuación, se aplicó moxibustión durante 60 s y en la tercera etapa se registraron las temperaturas diferenciales durante 30 s. La moxibustión se aplicó con un puro de moxa a base de hojas secas y pulverizadas de Artemisa spp. en el punto IG4 de la mano derecha del sujeto a una distancia promedio de 1.5 cm. Los datos se reportaron como media  desviación estándar; se empleó la prueba estadística t student para datos pareados y el coeficiente de correlación de Pearson para comparar variables. Los valores p de < 0.05 se consideraron significativos desde el punto de vista estadístico. Resultados En el estado basal se encontró una temperatura diferencial entre la superficie cutánea del punto E4 y su zona cutánea adyacente, con la temperatura menor en la superficie del punto. La estimulación del punto IG4 con moxibustión incrementó de manera significativa esta temperatura diferencial en el punto E4. La temperatura del punto facial E4 después del tratamiento con moxibustión del punto IG4, aumentó de manera no significativa; sin embargo, la temperatura de la piel adyacente al punto E4 se incrementó de manera significativa después del tratamiento con acupuntura. Además, se encontró que existe una correlación de Pearson negativa entre la temperatura de la piel adyacente al punto E4 y la temperatura basal del mismo. Introducción. Diversos estudios realizados en el Laboratorio de Enfermedades Crónicas y Degenerativas y Acupuntura compararon la temperatura de la superficie cutánea de diversos puntos de acupuntura y la piel circundante, y mostraron que la temperatura de puntos del miembro superior e inferior fueron menores de manera constante y significativa respecto a la zona cutánea adyacente. Por otra parte, se describen puntos de acupuntura que desde el punto de vista clínico y terapéutico modifican a distancia la evolución de trastornos morfofisiopatológicos en zonas corporales específicas, uno de los más usados es el punto Intestino Grueso 4 (IG4) que se emplea en diversos padecimientos relacionados con estructuras faciales y del estoma como: alteraciones de la secreción salival, dolor dental, parálisis facial, entre otras. Sin embargo, no se ha estudiado si la temperatura diferencial que se observa en puntos de acupuntura de los miembros superior e inferior se presenta también en puntos de la cara; y si esta temperatura diferencial puede ser modificada por un punto distal con influencia facial. Objetivo Analizar si existe una temperatura diferencial entre el punto Estómago 4 y la superficie cutánea adyacente y examinar si la estimulación mediante moxibustión en el punto Intestino Grueso 4 modifica esa probable temperatura diferencial. Conclusiones. Los resultados de esta investigación confirman los hallazgos de tres estudios previos realizados en el Laboratorio de Enfermedades Crónicas y Degenerativas y Acupuntura acerca de la existencia de una temperatura diferencial entre las superficies cutáneas de diversos puntos de acupuntura y sus zonas adyacentes. Además, se mostró que la estimulación de un punto distal a la cara originó cambios significativos desde el punto de vista estadístico en la temperatura diferencial del punto facial estudiado. La influencia del punto periférico, IG4, sobre la temperatura de la superficie del punto facial E4 y su piel circundante confirma de manera experimental la noción clínica y terapéutica de que este punto produce modificaciones fisiológicas y terapéuticas en estructuras faciales. Palabras clave: Intestino grueso 4, Estómago 4, moxibustión, termografía cutánea, punto de acupuntura.

Se compararon los valores pre y pos auriculopuntura entre la muestra total y dos grupos de esta: A con tasa de secreción salival menor y B con tasa de secreción salival mayor. Resultados En condiciones basales la (SSNE) se correlacionó de manera positiva y significativa con el RMSSD en el grupo total; en el grupo A y B con el PNN50 y RMSSD de manera positiva y significativa en ambos casos. Después de la aplicación de auriculopuntura en GS2 y PS la secreción salival disminuyó de manera no significativa en el grupo total; aumentó de manera significativa en el grupo A; y disminuyó de manera no significativa en el grupo B. Respecto a las mediciones del dominio de frecuencia de la VFC: el tratamiento facilitó los siguientes cambios: disminución de HF; incremento en LF y LF/HF, en todos los casos estos cambios fueron no significativos en el grupo total; HF disminuyó, LF y LF/HF aumentaron, en todos los casos los cambios fueron no significativos en el grupo A; HF disminuyó, LF y LF/HF aumentaron, en todos los casos los cambios fueron no significativos en el grupo B. Los análisis mediante el coeficiente de correlación de Pearson mostró las siguientes correlaciones entre los cambios consecutivos al tratamiento con auriculopuntura de la secreción salival y en los parámetros de frecuencia de la variabilidad de la frecuencia cardiaca: en el grupo A, una correlación negativa con HF con una tendencia a ser significativa, y positiva con LF y LF/HF, en el primer caso con tendencia a ser significativa y en el segundo no significativa en el grupo total; en el grupo B una correlación negativa con HF; y positiva con LF y LF/HF, en todos los casos significativa; una correlación negativa con HF; positiva con LF y negativa con LF/HF, en todos los casos no significativa. Diversos puntos del pabellón auricular se emplean en el tratamiento de alteraciones de la secreción salival; sin embargo, su mecanismo de acción y su efecto sobre la actividad del sistema nervioso autónomo (SNA) no han sido descritos. La variabilidad de la frecuencia cardiaca (VFC) y en especial sus parámetros del dominio de frecuencia se emplean para conocer el estado de equilibrio de la función simpática y parasimpática del SNA. Se ha descrito que el efecto de la acupuntura sobre la fisiología y fisiopatología del SNA puede depender del estado basal de los sujetos. Objetivo Examinar los cambios de la secreción salival no estimulada (SSNE) y correlacionarla con los parámetros del dominio de tiempo y frecuencia de la VFC en sujetos sanos antes y después de la aplicación de acupuntura en los puntos Glándula Salival 2 y Plexo Solar del pabellón auricular; comparando el efecto de esta intervención en una muestra global versus dos grupos: (A) con tasa de secreción salival menor y (B) con tasa de secreción salival mayor. Materiales y métodos Se aplicó auriculopuntura en GS2 y PS en 26 sujetos sanos de cualquier sexo. Antes e inmediatamente después de la auriculopuntura se midió la (SSNE) y se realizaron registros electrocardiográficos de 5 min; y se obtuvieron los parámetros de dominio de tiempo y frecuencia de la VFC. Respecto a las correlaciones de Pearson entre los cambios en las mediciones del dominio de frecuencia debidos al tratamiento con auriculopuntura, se observó que HF versus LF y HF versus LF/HF tuvieron una correlación inversamente proporcional y LF versus LF/HF una correlación directamente proporcional, en todos los casos estas correlaciones fueron significativas. Conclusiones La (SSNE) en condiciones basales mostró una correlación directa con la medición del parámetro de tiempo RMSSD de la VFC, que a su vez se correlaciona con el nivel de actividad parasimpática. Mientras que los cambios observados en la (SSNE) y los parámetros de dominio de frecuencia de la VFC después de la auriculopuntura en los puntos GS2 y PS son compatibles con un cambio hacia el predominio simpático en el equilibrio parasimpático-simpático del SNA evaluado por medio de la VFC. Palabras clave: secreción salival, sistema nervioso autónomo, variación de la frecuencia cardiaca, punto Glándula Salival 2, punto Plexo Solar.

El estudio de los ofiuroideos del Pacífico oriental tropical (POT) data de 1851 y casi todos los trabajos publicados al respecto han sido de índole taxonómica, de distribución, y listados de especies para áreas geográficas relativamente pequeñas, lo que se ha traducido en abundantes errores taxonómicos, de nomenclatura y de distribución para un gran número de taxa en la región. Debido a esto, el objetivo general de este trabajo fue revisar la taxonomía y biodiversidad de los ofiuroideos del POT a partir de la búsqueda intensiva de literatura, la revisión de material depositado en 15 colecciones científicas nacionales y extranjeras y la validación de coordenadas geográficas de los registros. Se encontró que en el área se han registrado 228 especies de ofiuros, de las cuales 180 son válidas (27 familias, 65 géneros), 45 inválidas y tres dudosas. Se provee por primera vez en la historia la revisión taxonómica (diagnosis, descripción, imágenes y comentarios relevantes) de las 180 especies válidas. Las familias con más problemas taxonómicos fueron Gorgonocephalidae, Ophiopyrgidae, Ophiacanthidae, Amphiuridae y Ophiotrichidae. Se considera necesaria la reasignación de géneros y/o subgéneros de algunas especies, la sinonimización de varios taxa y la descripción de varias más que corresponden a nuevas especies para la ciencia. La revisión taxonómica derivó en 26 nuevos registros de especies para el POT (12 Costa Rica, cinco Perú, tres Colombia, dos México, dos Panamá, uno Nicaragua, uno Ecuador), los cuales fueron encontrados en colecciones que no habían sido revisadas anteriormente. Además, se amplía el rango de distribución de 14 especies. La familia con el mayor número de especies fue Amphiuridae, y las especies más ampliamente distribuidas fueron Ophiocoma aethiops y Ophiocomella alexandri. El 66.1% de las especies son endémicas del POT, el resto se distribuye en otras áreas como el Atlántico e Indo-Pacífico. El mayor porcentaje de especies se distribuyó en la plataforma continental (57.2%) y en la zona batial (55%), lo cual concuerda con lo encontrado a nivel global. El país con el mayor número de especies fue México (115), seguido por Ecuador (90), Panamá (76), Costa Rica (65), Colombia (41), Perú (36), Nicaragua (19), El Salvador (16), Guatemala (seis) y Honduras (tres). El alto número en especies en México se puede atribuir a su mayor extensión y posición geográfica y al mayor esfuerzo de muestreo, mientras que el bajo número encontrado en América Central se debe a su homogeneidad ambiental y a la relativa baja intensidad de muestreo. De acuerdo a un análisis de rarefacción se espera encontrar cerca de 112 especies más respecto a lo observado, por lo que se concluye que el listado de ofiuros del POT no se encuentra completo, por lo que se recomienda incrementar la intensidad de muestreo en áreas geográficas poco estudiadas, en ecosistemas poco prospectados, una mayor cantidad de sustratos y a distintas profundidades. Finalmente, se recomienda utilizar una mayor variedad de métodos de muestreo (ROV´s, bombas de succión) y realizar estudios multidisciplinarios e inter-institucionales. The study of the eastern tropical Pacific (ETP) ophiuroids dates back to 1851 and almost all the works published in this respect have been of a taxonomic nature, of distribution, and checklists of relatively small geographical areas; these have generating abundant taxonomic, nomenclature and distribution errors for a large number of taxa in the region. Due to this, the main goal of this work was revisiting the taxonomy and the biodiversity of the ophiuroids from the TEP, starting from the intensive search of literature, the revision of the material deposited in 15 national and international scientific collections and the validation of the geographical coordinates of records. 228 species of ophiuroids have been recorded, of which 180 are valid (27 families, 65 genera), 45 invalid and three doubtful. The taxonomic revision (diagnosis, description, images and relevant comments) of the 180 valid species is provided for the first time in history. The families with the most taxonomic problems were Gorgonocephalidae, Ophiopyrgidae, Ophiacanthidae, Amphiuridae and Ophiotrichidae. The reassignment of genera and/or subgenera of some species, the synonymization of several taxa, and the description of several more that correspond to new species for science, are considered necessary. The taxonomic revision resulted in 26 new records of species for the POT (12 Costa Rica, five Peru, three Colombia, two Mexico, two Panama, one Nicaragua, one Ecuador), which were found in collections that had not been previously reviewed. In addition, the distribution range of 14 species is extended. The family with the highest number of species was Amphiuridae, and the most widely distributed species were Ophiocoma aethiops and Ophiocomella alexandri. 66.1% of the species are endemic to the TEP, the rest is distributed in other areas such as the Atlantic and Indo-Pacific. The highest percentage of species was distributed in the continental shelf (57.2%) and the bathyal zone (55%), which agrees with what is recorded globally. The country with the highest number of species was Mexico (115), followed by Ecuador (90), Panama (76), Costa Rica (65), Colombia (41), Peru (36), Nicaragua (19), El Salvador (16), Guatemala (six) and Honduras (three). The high number in species in Mexico can be attributed to its greater extension and geographic position and to the greater effort of sampling, whereas the low number found in Central America is due to its environmental homogeneity and to the relative low intensity of sampling. According to a rarefaction analysis it is expected to find about 112 species more than what was observed, so it is concluded that the list of the ophiuroids from the TEP is not complete, so it is recommended to increase the sampling intensity in geographic areas little studied, in poorly prospected ecosystems, a greater number of substrates and at different depths. Finally, it is recommended to use a greater variety of sampling methods (ROVs, suction pumps) and carry out multidisciplinary and inter-institutional studies.

"The most commonly in vitro model systems used for adipose tissue studies are murine cell lines, which have genetic and metabolic differences with the human adipocytes. To date, there is not a general in vitro model to study the human adipose tissue, because adipogenic human cell lines have a low adipogenic potential and their use is limited. This thesis includes two reports: the first one describes the characterization of a human subcutaneous adipose stromal cell population, “IPI-SA3-C4”, while the second one deals with the optimization of the culture medium for growing these cells. The IPI-SA3-C4 population is composed of non-tumorigenic diploid cells with high proliferative potential as well as strong adipogenic, osteogenic, and chondrogenic differentiation capabilities. In the second report, we proved that a dilution 1:1 of L15 and mTeSR1 culture media allow us to expand the life span of these cells by 20%, while retains their adipogenic capacity and normal diploid karyotype. Thus, this work describes the IPI-SA3-C4 cells as a new in vitro model system suitable but transient to study the human adipose tissue as well a cell culture strategy assuring high in vitro expansion of normal adult mesenchymal stromal cells useful for basic and translational research." "Los modelos in vitro más utilizados para el estudio del tejido adiposo son líneas celulares de origen múrido, las cuales presentan diferencias genéticas y metabólicas respecto a los adipocitos humanos. Hasta ahora no hay un modelo in vitro de adipogénesis humana de uso generalizado, porque las líneas celulares adiposas humanas descritas habitualmente tienen un bajo potencial adipogénico y su uso es limitado. Este trabajo de tesis resultó en dos reportes: El primero describe la caracterización de una población de células estromales adiposas subcutáneas humanas, “IPI-SA3-C4”, en tanto que el segundo trata de la optimización del medio de cultivo para el crecimiento de estas células. La población IPI-SA3-C4 está constituida por células diploides, no tumorigénicas, con alto potencial proliferativo y con una fuerte capacidad de diferenciación adipogénica, osteogénica y condrogénica. En el segundo reporte probamos que una mezcla 1:1 de medios de cultivo L15 y mTeSR1 permiten expandir la esperanza de vida de estas células en un 20%, al tiempo que mantiene su capacidad adipogénica y su cariotipo diploide normal. Así, este trabajo describe las células IPI-SA3-C4 como un modelo in vitro adecuado aunque transitorio para estudiar el tejido adiposo humano y una estrategia de cultivo celular que permite la alta expansión in vitro de células estromales mesenquimales adultas normales con utilidad para investigación básica y traslacional."

Facultad de Ciencias Médicas y Biológicas. Maestría en Ciencias de la Salud Acute lymphoblastic leukemia (ALL) is a public health problem that represents 50% of malignancies cases diagnosed in children under 18 years, the most common being B-ALL. Current treatments target cells in the S and M phases of the cell cycle. eIF3f has been described as a possible prognostic marker in other malignancies and correlates with some prognostic markers. We propose to evaluate the utility of eIF3f as a prognostic marker and its possible correlation with other markers for B-ALL. Overall objective: To determine if the expression of eIF3f represents the proliferative activity and if it has value as a prognostic marker in B-ALL and / or in other blood diseases. Materials and methods: Descriptive, correlational, analytical, and longitudinal study. Bioinformatic phase dependent cell cycle detection panel development and its standardization in cell line A549 and lymphocytes from healthy volunteers. Standardization of the protocol for processing blood origin samples with a surface response analysis (ARS). The analysis of eIF3f expression was performed by flow cytometry in bone marrow samples from patients from the oncology area of the Children’s Hospital of Morelia “Eva Sámano de López Mateos” with de novo diagnosis of ALL, as well as in quiescent and proliferative lymphocytes, by the addition of a mitogen (PHA), from volunteers without erythrocyte abnormalities and under 18 years of age, in order to obtain paired samples. Results: Forty samples were analyzed, which were divided into 2 groups based on the fluorochrome used for the detection of eIF3f (AlexaFluor-647 or FITC) and in subgroups based on the diagnosis (ALL, AML, diagnosis other than leukemia and patients with probable leukemia); each group was analyzed with its corresponding control. La leucemia linfoblástica aguda (LLA) es un problema de salud pública que representa el 50% de los casos de neoplasias diagnosticadas en menores de 18 años, siendo la más común la LLA-B. El tratamiento actual está dirigido a células en las fases S y M del ciclo celular. eIF3f ha sido descrito como posible marcador pronóstico en otras neoplasias y se correlaciona con otros marcadores pronósticos. Se propone evaluar la utilidad de eIF3f como marcador pronóstico y su posible correlación con otros marcadores para LLA-B. Objetivo general: Determinar si la expresión de eIF3f representa la actividad proliferativa y si tiene valor como marcador pronóstico en LLA-B y/o en otras patologías hemáticas. Materiales y métodos: Estudio descriptivo, correlacional, analítico y longitudinal. Desarrollo bioinformático de un panel de detección de ciclo celular fase dependiente y su estandarización en la línea A549 y linfocitos de voluntarios sanos. Estandarización del protocolo de procesamiento de muestras de origen hemático con un análisis de respuesta de superficie (ARS). Se realizó un análisis de la expresión de eIF3f por citometría de flujo en muestras de médula ósea de pacientes con diagnóstico de novo de LLA del área de oncología del Hospital Infantil de Morelia “Eva Sámano de López Mateos”, así como en linfocitos en quiescencia y proliferativos por la adición de un mitógeno (PHA) en voluntarios sin alteraciones eritrocitarias y menores de 18 años, con la finalidad de obtener muestras pareadas. Resultados: Se analizaron 40 muestras que se dividieron en 2 grupos en base al fluorocromo utilizado para la detección de eIF3f (AlexaFluor-647 o FITC) y en subgrupos en base al diagnóstico (LLA, LMA, diagnóstico diferente a leucemia y pacientes con probable leucemia); cada grupo fue analizado con sus controles correspondientes.

El presente documento no cuenta con resumen.

"Rivaroxaban es un agente anticoagulante de nueva generación, usado en el tratamiento de enfermedades tromboembólicas como; trombosis venosa profunda (TVP) y embolia pulmonar, así como en el tratamiento preventivo en tromboembolismo venoso (TEV), accidente cerebrovascular y embolia sistémica. A pesar de ser un medicamento anticoagulante con un margen terapéutico amplio es necesario contar con metodologías analíticas que permitan monitorizarlo o bien que permitan caracterizar propiedades farmacocinéticas del fármaco, por lo tanto, se desarrolló y validó un método analítico para la cuantificación de Rivaroxaban en plasma humano, con EDTA K2 como anticoagulante, por Cromatografía de Líquidos de Ultra Resolución acoplado a Espectrometría de Masas/Masas y usando la técnica de extracción liquido-liquido con Éter etílico 100%. Las condiciones cromatográficas establecidas fueron en una columna Acquity UPLC BEH C18 (1.7μm 2.1 x 50mm) con Ácido fórmico 0.1% y Acetonitrilo en una proporción 65:35 v/v. La detección de los iones se realizó mediante una reacción de monitoreo múltiple siguiendo las transiciones 435.99 → 144.90 para Rivaroxaban y 440.00 → 144.96 para su estándar interno, Rivaroxaban-d4. El método analítico desarrollado fue validado de acuerdo con los lineamientos nacionales e internacionales, establecidos por la NOM-177-SSA1-2013 y las guías US FDA 2018, ANVISA 2012 y EMA 2011, demostró ser selectivo, especifico, lineal en un rango de trabajo de 0.483 a 577.736 ng/mL, preciso, exacto y robusto. El método analítico fue empleado para la cuantificación de Rivaroxaban en plasma humano en dos estudios clínicos para determinar bioequivalencia, entre el medicamento de prueba A y el medicamento de referencia B de dosis de 10 mg y 20 mg, bajo condiciones de ayuno y estado postprandial, respectivamente, en sujetos sanos sin potencial de reproducción. 10 El diseño de ambos estudios clínicos consistió en una dosis oral única, aleatorizado, balanceado, abierto, dos tratamientos, dos secuencias, dos periodos, cruzado con un periodo de lavado equivalente a 7 vidas medias. En la evaluación de la dosis de 10 mg de Rivaroxaban en condiciones de ayuno, se enrolaron 28 sujetos sanos, de los cuales 26 sujetos completaron el estudio, los datos de éstos fueron tomados para el cálculo estadístico, se encontraban entre 19 – 54 años con un IMC de 18.9 – 26.8 kg/m2. Los principales parámetros farmacocinéticos obtenidos para el medicamento de prueba y referencia, respectivamente..."

RESUMEN Este trabajo se llevó a cabo en el laboratorio 321 del Centro de Investigaciones Químicas (CIQ) bajo la dirección de la Dra. Mayra Yaneth Antúnez Mojica y en el laboratorio 7 y el cuarto de cultivo de la Facultad de Farmacia bajo la dirección de la Dra. Leticia González Maya, ambos en la Universidad Autónoma del Estado de Morelos. Numerosos estudios han demostrado que los compuestos fenólicos poseen gran variedad de actividades biológicas, entre las que destacan sus propiedades citotóxicas, y más recientemente, su actividad sobre enzimas relacionadas a la metilación del ADN, por lo anterior, en este trabajo se sintetizaron catorce derivados de ácidos fenólicos de tipo benzoico y cinámico, diez derivados ésteres y cuatro derivados O-metilo. La purificación se realizó utilizando cromatografía en columna, los compuestos puros se caracterizaron mediante RMN 1H. Una vez obtenidos los derivados, se evaluó su actividad citotóxica en la línea celular de hepatocarcinoma Hep3B. Los derivados 5, 6, 7, 10, 11, 12, 14 no fueron citotóxicos (CI50 >100 μg/mL) por lo que no se consideraron para posteriores evaluaciones. Los derivados de tipo cinámico sí fueron citotóxicos (CI50 100 μg/mL, comparados con el ácido gálico (molécula original), cuya CI50 es menor a 100 μg/mL es claro la actividad citotóxica no se incrementó con las modificaciones estructurales como en el caso de los derivados cinámicos. Los derivados de tipo cinámico (CI50 < 100 μg/mL) así como dos de tipo benzoico (3 y 11) se evaluaron como inhibidores de la metilación del ADN en células Hep3B. Tanto los derivados de tipo cinámico como benzoico fueron activos, esto indica que la actividad sobre la metilación del ADN no está relacionada al doble enlace alfa a carbonilo presente en los derivados de tipo cinámico. Todos los derivados evaluados tuvieron altos porcentajes de inhibición de la metilación del ADN, el compuesto menos activo (4) alcanzó un 63.08% de inhibición mientras que los derivados más activos (8, 9 y 13) tuvieron porcentajes de inhibición mayores a 90%. La adición de grupos metilo (esterificación y/o O-metilación) incrementó la actividad inhibitoria de la metilación de los derivados cinámicos respecto al ácido cafeico cuya inhibición fue de solo 39.88%, sin embargo, en los derivados de tipo benzoico (3 y 11) la adición de grupos metilo en la estructura no mejoró este tipo de actividad ya que estos compuestos tuvieron porcentajes de inhibición de 74.2% y 85.44% respectivamente. Comparados con el ácido gálico cuya inhibición de la metilación fue de 82.48% es evidente que no hubo diferencias entre los derivados y la molécula original. Los derivados 8, 9 y 13 se consideran los mejores candidatos debido a que fueron citotóxicos, selectivos y tuvieron altos porcentajes de inhibición de la metilación del ADN. ABSTRACT This work was performed in the laboratory 321 of the Chemical Research Center under the direction of the PhD. Mayra Yaneth Antunez Mojica and in the laboratory 7 and BSL-1 of the Faculty of Pharmacy under the direction of the PhD. Leticia González Maya, both at the Autonomic University of Morelos State. There are numerous studies that have shown that the phenolic compounds have a great variety of biological activities, the cytotoxicity is one of the best known and recently their activity on DNA methylation has been demonstrated. In this study where synthetized fourteen derivatives from phenolic acids of benzoic and cinnamic type, ten where ester derivatives and four O-methylated derivatives. The purification was made by column chromatography and then, the molecules where characterized by NMR 1H. Once obtained, the cytotoxicity of the compounds was evaluated by the MTS method on a hepatocarcinoma cell line Hep3B. The derivatives 5, 6, 7, 10, 11,12 and 14 where not cytotoxic (IC50>100 μg/mL) for that reason, these compounds where not included for the next assays. The cinnamic derivatives where cytotoxic (IC50< 100 μg/mL) which is an indicative that the double bound alpha to the carboxylic acid is necessary to the cytotoxic activity. The structural modifications (esterification and O-methylation) enhanced the cytotoxicity of the cinnamic compounds versus the caffeic acid (parental molecule) with a IC50>100 μg/mL, nevertheless, the benzoic derivatives (IC50 >100 μg/mL) versus the gallic acid (parental compound) whose IC50< 100 μg/mL demonstrate that the structural modifications not increased the cytotoxic activity in this case. The cinnamic derivatives (IC50< 100 μg/mL) as two benzoic compounds (3 and 11) where evaluated as DNA methylation inhibitors in Hep3B cells. In this case, both kind of compounds where active, this is an indicative that the inhibition of DNA methylation is not related to the double bound alpha to the carboxylic acid. All the compounds evaluated in this assay where active as DNA methylation inhibitors, the molecule 4 was the less active with a 63.08% of inhibition, in the other hand, the most active compounds where the derivatives 8, 9 and 13 with a DNA methylation inhibition higher than 90%. The esterification and/or O-methylation enhanced the inhibitory activity of cinnamic compounds versus the caffeic acid (parental compound) whose inhibition of DNA methylation was 39.88%, but in the case of the benzoic derivatives the activity on DNA methylation was not increased with the structural modifications. The inhibition of DNA methylation was 74.2% and 85.44% respectively to the derivatives 3 and 11 while the gallic acid (parental compound) had 82.48% of DNA methylation inhibition. The derivatives 8, 9, and 13 where cytotoxic, selective and had a high inhibitory effect on DNA methylation for that reason are the best candidates for future research.

RESUMEN El propósito de este trabajo fue obtener, optimizar y caracterizar nanovesículas ultraflexibles, también conocidas como Transferosomas®, cargadas con un antihipertensivo de la familia de las dihidropiridinas llamado felodipino, para ser evaluados como sistemas de administración transdérmica. Lo anterior radica en la importancia de proponer nuevos y mejores tratamientos para enfermedades de interés, como la hipertensión arterial (HTA), donde los tratamientos convencionales han llevado a la ineficacia terapéutica debido a la alta frecuencia de administración, altas dosis y una serie de efectos no deseados para el paciente que los consume, lo que como resultado ha llevado a una disminución en el apego al tratamiento. Existen diferentes grupos de fármacos antihipertensivos, formulados en formas farmacéuticas orales, donde han destacado los bloqueadores de canales de Ca+2, grupo donde se encuentra el felodipino. Este fármaco se ha caracterizado por tener una alta potencia y selectividad; sin embargo, su baja solubilidad, alto metabolismo de primer paso y efectos adversos, minimizan su eficacia cuando se administra por vía oral. Es por lo anterior y por sus propiedades fisicoquímicas que se han buscado alternativas para su administración y formulación. Aquí se propone la vía transdérmica y el uso de nanoacarreadores como estrategia debido a las ventajas que poseen, como su capacidad de llevar el fármaco a través de la piel para alcanzar un efecto sistémico terapéutico deseado. En particular los Transferosomas®, un tipo de liposomas o nanovesículas ultraflexibles, capaces de atravesar las capas de la piel debido a su facilidad de deformación sin pérdida medible del fármaco y su capacidad de acarrear tanto fármacos lipofílicos como hidrofílicos. Para el desarrollo del proyecto se seleccionaron materiales a partir de pruebas de solubilidad y la capacidad de los fosfolípidos de generar una película. Los Transferosomas® se obtuvieron mediante el método de hidratación de película, optimizando el proceso hasta la obtención de una talla promedio objetivo con un diseño experimental 24 obtenido con el software Statgraphics. La eficiencia de 2 encapsulación del felodipino en las nanovesículas se determinó haciendo uso de 8 métodos distintos de incorporación, en donde se usaron diferentes proporciones de etanol y diferentes pHs para favorecer la entrada del fármaco al nanosistema. Una vez seleccionados los Transferosomas® considerados como óptimos, se llevó a cabo una caracterización física de estos por tamaño promedio, PDI, potencial zeta, flexibilidad, rendimiento, morfología, interacción de los materiales y estabilidad, empleando técnicas como la espectrofotometría UV, calorimetría diferencial de barrido, espectroscopía infrarroja, y microscopía electrónica de transmisión. Así mismo se evaluó su eficacia in vitro con estudios de liberación y pruebas de permeabilidad en piel de cerdo. Como resultado se obtuvieron Transferosomas® sin fármaco con talla promedio de 200 nm y PDI

RESUMEN La HTA es una condición en la que los vasos sanguíneos presentan una presión por encima del límite establecido, la cual desencadena problemas cardiovasculares y/o cerebrovasculares. De acuerdo con la OMS se estima que en el mundo hay 1130 millones de personas con hipertensión y de éstos 1 de cada 5 tiene controlado el problema (Organización Mundial de la Salud, 2019). Su tratamiento requiere de cambios en los hábitos alimenticios, la rutina diaria de ejercicio y el uso de fármacos antihipertensivos. Estos tratamientos farmacológicos logran tener un efecto terapéutico pero con ciertas desventajas: un claro ejemplo es la hidroclorotiazida (de la familia de los diuréticos tiazídicos), ya que puede causar efectos metabólicos no deseados como depleción de potasio, disminución de la tolerancia a la glucosa e impotencia; también pueden estar contraindicados con otras patologías como los bloqueadores beta adrenérgicos dentro de los cuales se encuentra el atenolol, que es eficaz contra la HTA pero debe evitarse en la enfermedad pulmonar obstructiva crónica, bloqueo cardiaco e hipotensión, además de que se debe reducir la dosis en casos de insuficiencia renal (Velasco, et al, 2002); otros tienen efectos adversos frecuentes molestos para el paciente como lo es la tos seca y persistente al usar el enalapril (de la familia de los IECA); otros podrían causar el efecto contrario al esperado como el nifedipino, de los bloqueadores de los canales de calcio, ya que si es un preparado de corta duración puede causar variaciones grandes en la presión arterial e incluso taquicardia refleja; otros requieren de dosis altas como es el caso de la metildopa, de los fármacos que actúan sobre el sistema nervioso central, ya que requiere de hasta 250 mg de fármaco 2-3 veces al día llegando a un máximo de 3 g al día (World Health Organization, 2004). Dentro de los antagonistas de los receptores de la angiotensina II (ARA II) se encuentra el telmisartán, un fármaco clase II, prácticamente insoluble en agua con alta permeabilidad (

Introducción: La mayoría de los estudios cuyo objetivo es evaluar las tasas de recuperación y desarrollo post-vitrificación de ovocitos porcinos han reportado mejores tasas cuando estos son criopreservados en estados embrionarios, pero no así en ovocitos inmaduros. Por esta razón, para mejorar los protocolos de la vitrificación de ovocitos inmaduros, se ha evaluado el uso de diferentes tipos y concentraciones de crioprotectores, recipientes, y tiempos de incubación, pero muy pocos han evaluado cual técnica de fertilización permite incrementar las tasas de producción de blastocistos en ovocitos vitrificados. El objetivo de esta tesis fue evaluar el desarrollo embrionario hasta el estado de blastocisto a partir de ovocitos inmaduros vitrificados madurados con un sistema de co-cultivo con células de la granulosa y fertilizados por fertilización in vitro (FIV), inyección intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI) e inyección fisiológica intracitoplasmática de espermatozoides (PICSI). Así como, evaluar si la selección espermática con ácido hialurónico (AH) o con polivinilpirrolidona (PVP) antes de la inyección intracitoplasmática participan en forma importante en el incremento de las tasas de fertilización y producción de blastocistos. Resultados: Los espermatozoides seleccionados con AH-PICSI mostraron un mayor porcentaje de espermatozoides vivos/reaccionados en comparación con el control y los expuestos a la PVP. Altas tasas de espermatozoides muertos/reaccionados se obtuvieron después de la exposición a la PVP en comparación con el control y el AH. En ovocitos, la viabilidad disminuyó significativamente en el control de ovocitos denudados (DO) y en ovocitos vitrificados. Además, la maduración disminuyó significativamente en el control DO. En cuanto a los parámetros de fertilización, la FIV mostró mayores porcentajes de monospermia en comparación con la ICSI y la PICSI. Sin embargo, los resultados demostraron que la fertilización con PICSI incrementó la formación de blastocistos en los grupos control complejo ovocito-células del cúmulo (COCs), control ovocitos denudados co-cultivados con células de la granulosa (DO-GC) y ovocitos vitrificados en comparación con la FIV e ICSI. Conclusión: Para lograr altas tasas de formación de blastocitos a partir de ovocitos vitrificados en etapa de vesícula germinal (VG), se recomienda que el espermatozoide se seleccione antes de ser inyectado al ovocito con AH en lugar de la PVP, debido a que se obtienen mayores tasas de viabilidad y reacción acrosomal. Además, la fertilización por PICSI es el mejor método para producir mayores tasas de blastocistos en comparación con los procedimientos de FIV e ICSI.

RESUMEN Una de las mayores emergencias en salud pública a nivel mundial, es el creciente número de casos de diabetes mellitus tipo 2, enfermedad que se caracteriza por un desequilibrio en los niveles de glucosa, consecuencia de la resistencia a la insulina desarrollada en la enfermedad. Algunos de los factores que propician esta enfermedad son una mala alimentación, el sedentarismo o factores genéticos. En este proyecto químico-farmacéutico, se propone generar una serie de 10 compuestos de tipo fenoxiacéticos que actúen de manera simultánea en diferentes blancos terapéuticos (multitarget o polifarmacológico) relacionados a la diabetes mellitus tipo 2 (PTP-1B, PPAR y GPR40), los cuales presentan un patrón farmacofórico unificado de moléculas antidiabéticas ampliamente reportado. Se lograron sintetizar y caracterizar nueve compuestos, los cuales fueron evaluados usando programas quimio-informáticos para determinar sus propiedades farmacocinéticas, farmacodinámicas y toxicológicas. Con los resultados obtenidos se generó un análisis de consenso farmacológico, el cual es la recopilación de todos los cálculos computacionales para priorizar la evaluación de una o varias moléculas en modelos in vitro e in vivo. Con este criterio de consenso, se decidió evaluar los compuestos FMC 5, 8 y 9. Como resultado del consenso farmacológico, se seleccionaron los compuestos FMC-5 y FMC-8 para un ensayo sobre células de insulinoma pancreático, que determinaría su actividad como secretagogo de insulina a través del movimiento de calcio intracelular. En este ensayo el compuesto FMC-8 presentó actividad como secretador de insulina a una concentración de 10 M y con una actividad similar a glibenclamida, siendo este el fármaco usado como referencia. Mientras que el compuesto FMC-5 no presentó una actividad significativa, pero mostró una tendencia como secretador de insulina similar al fármaco de referencia. xviii Posteriormente se realizó el ensayo in vivo de prueba de tolerancia a la glucosa oral, en ratones normoglucémicos, los tres candidatos del análisis de consenso farmacológico se administraron a una dosis exploratoria de 100 mg/kg. Sólo el compuesto FMC-5 produjo un descenso en los niveles de glucosa a los 30 y 60 minutos, manteniéndolos hasta finalizar el ensayo, mostrando un efecto antihiperglucemiante. Debido a este comportamiento, se sugiere que el compuesto pudiera actuar como inhibidor de la enzima PTP-1B y/o como agonista de PPAR. Adicionalmente, en este ensayo in vivo el compuesto FMC-8 pudo reducir los niveles de glucosa a los 90 minutos, efecto que mantuvo hasta finalizar la evaluación biológica. Este comportamiento de actividad puede relacionarse con problemas de absorción gastrointestinal del compuesto. Con respecto al compuesto FMC-9, los resultados obtenidos concluyen que no tiene efecto para la disminución de los niveles de glucosa. Con los datos obtenidos previamente, se seleccionó al compuesto FMC-5 para ser evaluado en un ensayo de diabetes no insulino dependiente a una dosis exploratoria de 100 mg/kg, donde se observó una disminución en los niveles de glucosa en sangre hasta la hora siete del ensayo. Con los resultados obtenidos este trabajo químico-farmacéutico, las moléculas FMC-5 y FMC-8 se consideran como hits experimentales, debido a que manifestaron actividad in vitro, así como in vivo. ABSTRACT One of the biggest issues on Public Health all-around of the World, it´s the increase of the number of cases of type 2 diabetes mellitus. This disease is characterized by an anomaly glucose levels on blood, because of insulin resistance that patients develop. Some of the factors that promote this disease are a poor diet, a sedentary lifestyle or genetic factors. In this medicinal chemistry project were design a series of ten compounds of fenoxiacetic kind, which could work in different targets of interest, related to type 2 diabetes mellitus (PTP-1B, PPAR y GPR40), these targets present an unified pharmacophorical pattern of antidiabetic molecules widely reported. They were able to synthesize and characterize nine compounds; chemioinformatics programs were the tools to determinate their pharmacokinetics, pharmacodynamics and toxicologist properties. The data obtained it was possible to generate a pharmacological consensus, this is a recompilation from all computational results to make a decision of which compound or compounds are more valuable to evaluate in the in vitro or in vivo models. Compounds FMC 5, 6 and 9 were chosen to be evaluated following this criteria. A pancreatic insulinoma cells model can determinate the activity of the molecules as insulin secretagogue, intracellular calcium output is responsible for this effect, accordingly this model is useful to evaluate the selected molecules. FMC-8 showed activity as an insulin secretor at a concentration of 10 M and with an activity similar to glibenclamide, this was the drug use as reference during the experiment. xx Afterward, an in vivo oral glucose tolerance test were performed using normoglycemic mice. In this test the three candidates chosen were administered in exploratory dose of 100mg/kg. FMC-5 decreased glucose levels at 30 and 60 minutes, maintaining them until the end of the test, showing an antihyperglycemic effect. Due to this behavior, perhaps the compound could act as an inhibitor of the PTP-1B enzyme and/or as a PPAR agonist. Additionally, in this in vivo test the compound FMC-8 was able to reduce glucose levels at 90 minutes, maintained this effect until the end of the biological evaluation. Problems of gastrointestinal absorption of this compound could be the reason of this activity behavior. Regarding the FMC-9 compound, the results obtained conclude that it has no effect for the decrease of glucose levels. FMC-5 was selected for evaluation in a non-insulin dependent diabetes trial, using an exploratory dose of 100 mg/kg, in this test a decrease in blood glucose levels was observed up to hour seven of the trial. All the results obtained in this chemical-pharmaceutical project support that the FMC-5 and FMC-8 molecules are experimental hits, because they showed activity in vitro, as well as in vivo.

RESUMEN La diabetes tipo 2 es la más común en poblaciones que padecen esta enfermedad. En este tipo de diabetes, la inhibición de α-glucosidasas es un tratamiento útil para retrasar la absorción de glucosa después de la ingesta de alimentos. El objetivo de este trabajo fue analizar los efectos antidiabéticos y la citotoxicidad de los extractos y metabolitos identificados en las partes aéreas de Coreopsis mutica en modelos in vitro. Para ello sus partes aéreas se extrajeron con n-hexano, acetona, metanol y finalmente con una mezcla hidroalcohólica al 85%. En el extracto hidroalcohólico se identificó 7-O-β-glucopiranósido de luteolina y ácido cafeico, mientras que en el extracto metanólico fueron obtenidos cumarato de bornilo y glucósido de β-sitosterol; en el extracto acetónico cafeato de bornilo y cumarato de bornilo y finalmente en el extracto hexánico ferulato de bornilo. Los extractos evaluados a una concentración de 1000 μg/mL tuvieron un efecto significativo sobre la inhibición de α-glucosidasas (mayor de 60%), mientras que los compuestos evaluados a 1000 μM, 7-O-β-glucopiranósido de luteolina y el cafeato de bornilo fueron los que presentaron mayor porcentaje de inhibición. Por otro lado, se determinó la citotoxicidad en tres líneas celulares no cancerígenas; HEK293, IHH y HDF utilizando la técnica de MTT, en donde los extractos y metabolitos fueron evaluados a diferentes concentraciones, siendo los extractos de mayor polaridad (hidroalcohólico y metanólico) y sus metabolitos los que exhibieron menores efectos tóxicos; sin embargo; los extractos de menor polaridad (acetónico y hexánico) y sus metabolitos mostraron tener un efecto citotóxico significativo frente a todas las líneas celulares. Se determino la IC50 de 7-O-β-glucopiranósido de luteolina y del cafeato de bornilo y se comparó con la CC50. ABSTRACT Type 2 is the most common diabetes in the population. In this type of diabetes, the inhibition of α-glucosidases is a useful treatment to delay the absorption of glucose after meals. The aim of this research was to analyze on in vitro assays the anti-diabetic effects and cytotoxicity from extracts and isolated metabolites obtained from the aerial parts of Coreopsis mutica. The aerial parts were extracted with n-hexane, acetone, methanol and hydroalcoholic mixture (85:15). In the hydroalcoholic extract luteolin-7-O-β-glucopyranoside and caffeic acid, were identified as major compounds; while bornyl coumarate and β-sitosterol glucoside were isolated in the methanol extract; to other side bornyl caffeate and bornyl coumarate were obtained in the acetone extract; and finally bornyl ferulate was identified in hexane extract. The extracts had a significant effect on the inhibition of α-glucosidases greater than 60%, while from the compounds just luteolin-7-O-β-glucopyranoside and bornyl caffeate shows the highest inhibition percent in this assay. On the other hand, the cytotoxicity in three non-cancer cell lines, HEK293, IHH and HDF was determined using the MTT assay where polar extracts (hydroalcoholic and methanolic) and their metabolites exhibited the least toxic effects; Nevertheless; extracts of lower polarity (acetone and hexane) and their metabolites shown to have a significant cytotoxic effect against all cell lines tested in this research. The IC50 from luteolin-7-O-β-glucopyranoside and the bornyl caffeate was determined and compared with the CC50.

RESUMEN. El género Croton (Euphorbiaceae) cuenta con un importante número de especies, las cuales son utilizadas para el tratamiento de diversos padecimientos, incluyendo la diabetes. Existen reportes sobre algunas especies de este género, que han documentado su efecto antidiabético, el cual ha sido atribuido a diversos compuestos, principalmente flavonoides. Sin embargo, algunas otras especies, como es el caso de C. ehrenbergii, no cuentan con reportes sobre la determinación de su actividad antidiabética, ni de la seguridad de su uso después de una administración por vía oral. En el presente trabajo se estudió el extracto hidroalcohólico de C. ehrenbergii, con la finalidad de determinar su potencial antihiperglucémico e insulinosensibilizador, así como su toxicidad oral aguda. Con la finalidad de determinar el contenido metabólico del extracto, se realizó una bipartición, obteniendo las fracciones de CH2Cl2, AcOEt, BuOH y el residuo acuoso y, a partir de procesos cromatográficos convencionales y del análisis de datos espectroscópicos y espectrométricos, se logró determinar que la fracción de CH2Cl2 está constituida principalmente por b-sitosterol y el flavonoide 7, 4’-di-O-metilnaringenina, así como otros metabolitos minoritarios; por su parte, la fracción de AcOEt se caracterizó por presentar abundantemente flavonoides, como tilirósido, rutina, nicotiflorina e isoquercetina; mientras que pinitol es el metabolito mayoritario de la fracción de BuOH y del residuo acuoso. Por otro lado, para evaluar el efecto antihiperglucemiante mediante la inhibición de las enzimas a-glucosidasas, se realizó un ensayo in vitro, el cual permitió determinar que la fracción de AcOEt inhibe de forma moderada la actividad enzimática (41.70 ± 1.06%), mientras que el extracto hidroalcohólico y las fracciones de CH2Cl2, BuOH y el residuo acuoso, no presentaron un efecto significativo (p< 0.05). RESUMEN. “Evaluación sobre la actividad de las enzimas PTP-1B y a-glucosidasas de la especie Croton ehrenbergii” 3 El efecto mostrado por la fracción de AcOEt se atribuye principalmente a tilirósido, metabolito mayoritario de esta fracción, pues al ser evaluado, tuvo un efecto similar al de la fracción total (37.84 ± 1.67 %). Adicionalmente, se realizaron curvas de tolerancia a sacarosa, administrando una dosis de 100 mg/Kg del extracto y sus fracciones. La fracción de AcOEt, contrariamente a lo observado en el ensayo in vitro, no presentó una actividad significativa, al igual que el extracto hidroalcohólico y la fracción de CH2Cl2; mientras que la fracción de BuOH y el residuo acuoso inhibieron significativamente el pico hiperglucémico (p< 0.05) generado tras la administración de la sacarosa, presentando un comportamiento similar al del fármaco de referencia. Este efecto se atribuye a pinitol, metabolito mayoritario de las dos muestras de prueba. Por otra parte, para determinar el efecto insulino-sensibilizador mediante la inhibición de la enzima PTP-1B, se llevó a cabo un ensayo in vitro, en el cual se observó que tanto el extracto hidroalcohólico como sus fracciones presentaron una actividad significativa (p< 0.05) al ser comparados con el vehículo. La fracción de BuOH presentó la mayor actividad, con un porcentaje de inhibición de 82.070 ± 0.004%. Por su parte, las fracciones de CH2Cl2 y AcOEt, cuyo contenido metabólico es abundante en flavonoides, presentaron porcentajes de inhibición de 72.421 ± 0.004 y 78.645 ± 0.001%, respectivamente. El ensayo permitió además sugerir que el efecto mostrado por la fracción de AcOEt se debe a la presencia de tilirósido, pues al ser evaluado, el flavonoide inhibió la actividad enzimática con un 83.433 ± 0.001%. Mientras que el flavonoide 7, 4’-di-O-metilnaringenina, obtenido de la fracción de CH2Cl2, inhibe la actividad de PTP-1B con un 40.599 ± 0.001%. RESUMEN. “Evaluación sobre la actividad de las enzimas PTP-1B y a-glucosidasas de la especie Croton ehrenbergii” 4 Finalmente, para determinar el grado de toxicidad del extracto hidroalcohólico, se realizó un estudio de toxicidad oral aguda, siguiendo las especificaciones descritas en la guía 420 de la OECD, en el cual el extracto mostró una baja toxicidad, y de acuerdo con lo observado a lo largo de todo el ensayo, se pudo clasificar dentro de la categoría 5 del GHS. De este modo, la presente investigación permite documentar el contenido metabólico de C. ehrenbergii y además, proporciona información sobre su potencial antidiabético, el cual puede deberse más a un efecto insulino-sensibilizador mediante la inhibición de la enzima PTP-1B, que a un efecto antihiperglucemiante. Asimismo, permite documentar la seguridad del uso de su extracto hidroalcohólico tras una única administración por vía oral ABSTRACT. Croton genus (Euphorbiaceae) is constituted by significant number of species, some of them are frequently used in traditional medicine to treat a variety of illness, including diabetes. There are several reports about antidiabetic effect from some species of this genus, which has been attributed to flavonoids. However, some species such as C. ehrenbergii does not have reports about their antidiabetic activity or safety after oral administration. Therefore, is considered important to conduct research on these no studied species that to obtain information about its biological activity and safety. In this work, hydroalcoholic extract from C. ehrenbergii was studied in order to evaluate its antihyperglycemic and insulin sensitizer potential as well as its acute toxicity. In order to determine the metabolic content of the extract, a bipartition was done, obtaining the CH2Cl2, AcOEt and BuOH fractions, as well as aqueous residue. Conventional chromatographic processes and analysis of spectroscopic and spectrometric data, allowed to determine that CH2Cl2 fraction is composed of b-sitosterol and flavonoid 7, 4’-di-Omethylnaringenin, as well as other minor compounds. While AcOEt fraction was constituted mainly by flavonoids, including tiliroside, rutin, nicotiflorin and isoquercetin. And finally, pinitol was the major compound in BuOH fraction and aqueous residue. On the other hand, with the aim to evaluate the antihyperglycemic effect, an in vitro assay through the inhibition of α-glucosidase enzymes was performed. From the assay, AcOEt fraction shown moderately enzymatic inhibition activity (41.70 ± 1.06%), while hydroalcoholic extract as well as CH2Cl2, BuOH fractions and aqueous residue did not show a significant effect (p< 0.05). The effect showed by AcOEt fraction is mainly attributed to tiliroside, major compound in this fraction, since it was evaluated, shown similar effect to the total fraction (37.84 ± 1.67%). ABSTRACT. “Evaluación sobre la actividad de las enzimas PTP-1B y a-glucosidasas de la especie Croton ehrenbergii” 7 Additionally, sucrose tolerance curves were performed, administering a dose of 100 mg / Kg of the extract and its fractions. AcOEt fraction did not shows significant activity, contrary to the observed in vitro, but neither hydroalcoholic extract nor CH2Cl2 fraction. BuOH fraction and aqueous residue displayed a significant inhibition in the hyperglycemic peak (p< 0.05) generated after sucrose administration, presenting a similar behavior to that of the reference. On the other hand, to determine the insulin-sensitizing effect an in vitro assay was carried out through the inhibition of the PTP-1B enzyme. In this assay both hydroalcoholic extract and its fractions showed significant activity (p< 0.05) compared with vehicle. BuOH fraction presented the highest activity, with an 82.070 ± 0.004 percent of inhibition. On the other hand, CH2Cl2 and AcOEt fractions, whose metabolic content is abundant in flavonoids, displayed 72.421 ± 0.004 and 78.645 ± 0.001 percent of inhibition, respectively. Assay also suggested that the effect shown by AcOEt fraction is due to the presence of tiliroside, since it was evaluated, and this flavonoid inhibited enzyme activity in 83.433 ± 0.001%. While flavonoid 7, 4’-di-O-methylnaringenin, obtained from CH2Cl2 fraction, inhibits the PTP-1B activity in 40.599 ± 0.001%. Finally, to determine the degree of toxicity of the hydroalcoholic extract, an acute oral toxicity study was carried out, in which the extract showed low toxicity, classifying it within category 5 of the GHS. Thus, present research allows report the metabolic content of C. ehrenbergii, and provides information about its antidiabetic potential, which may be due more to an insulin-sensitizing effect by the PTP-1B inhibition, to an antihyperglycemic effect. Likewise, it allows document the safety

RESUMEN El objetivo del presente trabajo ha sido desarrollar y optimizar la formulación de películas mucoadhesivas con Metronidazol, combinando excipientes y propiedades tecnológicas de éstos, para obtener propiedades físicas de la formulación idóneas en base a las características de desempeño preestablecidas. Se realizó una búsqueda bibliográfica recabando información acerca de los mejores polímeros para cumplir con los objetivos establecidos, de igual manera se hicieron algunas pruebas con los polímeros para seleccionar los adecuados junto con los disolventes idóneos para mantener las propiedades requeridas para la formulación. Se realizó un diseño experimental con el programa estadístico Statgraphics, mediante el cual se fabricaron formulaciones en orden aleatorio y fueron evaluados en espesor, resistencia al plegado, porcentaje de hinchamiento, tiempo de desintegración de la película, tiempo de disolución de la película, fuerza de adhesión, para posteriormente realizar una optimización en base a las variables de respuesta estudiadas. La película mucoadhesiva optimizada fue evaluada para conocer el contenido de fármaco por cm2, la fuerza de mucoadhesión, de igual manera a estas películas se les evaluó la estabilidad durante un lapso de un mes a una temperatura de 40 ºC, obteniendo que éstas se mantenían estables sin crear ningún tipo de interacción fármaco-excipiente. Las películas obtenidas tuvieron una liberación inmediata, en una prueba de liberación in vitro, debido a que a los primeros 5 minutos liberaron el 100% del fármaco. También las películas fueron sometidas a pruebas microbiológicas para observar su efectividad de inhibición frente a cepas de Candidas, las cuales han sido reportadas en una alta prevalencia en infecciones vaginales obteniendo que las películas mucoadhesivas tienen una mayor eficacia que el fármaco en solución, su efectividad es comparable al Fluconazol, fármaco que es reportado como control por el CLSI (Clinical & Laboratory Standards Institute). ABSTRACT The objective of this work has been developed and improved the formulation of mucoadhesive films with metronidazole, combining excipients and technological analysis properties, to obtain suitable physical properties of the formulation based on the pre-established performance characteristics. A bibliographic search was carried out, gathering information about the best protocols to meet the stated objectives. Similarly, some tests were carried out with the polymers to select the requirements together with the suitable solvents to maintain the properties required for the formulation. An experimental design was made with the statistical program, by which formulations were manufactured in random order and evaluated in thickness, resistance to folding, porcentage of swelling, time of disintegration of the film, concentration time of the film, strength of adhesion, to subsequently perform an optimization based on the response results studied. The optimized mucoadhesive film was controlled to know the content of the drug per cm2, the strength of mucoadhesion, in the same way, these films were evaluated for stability over a period of one month at a temperature of 40 ºC, obtaining that they remain stable without create any kind of excipient drug interaction. The films obtained had an immediate release, in an “in vitro” release test, because the first 5 minutes released 100% of the drug. The films also sometimes went to microbiological tests to observe their inhibition treatment against Candidas strains, which have been reported in a high prevalence in vaginal infections, obtaining the mucoadhesive films have a greater efficacy than the medicine in solution, their problem. It is comparable to Fluconazole, a drug that is reported as a control by the CLSI (Clinical & Laboratory Standards Institute).

Resumen La musculatura lisa se encuentra en varios tejidos de gran importancia fisiológica, entre ellos se encuentran la musculatura lisa de los vasos sanguíneos y de las vías aéreas. Estos desempeñan un papel crucial en la regulación de la presión arterial y el flujo de aire que ingresa a los pulmones, respectivamente. Cualquier anomalía que altere la función normal de estos, ocasionan distintas enfermedades crónicas, como la hipertensión arterial y el asma. Estas enfermedades son de alta prevalencia a nivel mundial y su tratamiento, en muchos países en vías de desarrollo, no se encuentra accesible o en muchos casos su alto costo no permite que el medicamento sea asequible para la población. En este sentido, la investigación científica en la búsqueda de nuevas moléculas bioactivas se ha enfocado en el estudio de los productos naturales, basándose en la medicina tradicional reconocida como un recurso fundamental para la salud entre la población para el tratamiento de diversas enfermedades, tales como la hipertensión, el asma, la diabetes, entre otras. Dada la situación actual, se propuso a Bocconia arborea para su estudio en la búsqueda de moléculas bioactivas con actividad relajante de la musculatura lisa, dicha planta es utilizada en la medicina tradicional para el tratamiento de enfermedades infecciosas y diabetes, adicionalmente, en el equipo de trabajo del Dr. Samuel Enoch Estrada Soto, se determinó el efecto relajante en tráquea aislada de rata de los extractos orgánicos de corteza y hoja, resultando el extracto metanólico de corteza el más activo de todos los evaluados. Dado a los antecedentes descritos, en el presente trabajo, se determinó el efecto vasorrelajante del extracto metanólico de corteza en anillos de aorta aislada de rata en presencia y ausencia de endotelio precontraidos con noradrenalina [0.1μM]. El efecto vasorrelajante del Extracto fue independiente de la presencia de endotelio y dependiente de la concentración (Emax 68.7± 5.59 % y una CE50 16.23±7.32 μg/mL, en presencia de endotelio; y Emax 88.59±8.17 % y una CE50 64 ± 7.41 μg/mL, en ausencia de endotelio). Continuando con el estudio, el extracto referido fue fraccionado por cromatografía en columna abierta, obteniendo un total de 11 grupos de fracciones primarias, de las cuales, las fracciones 4-9 fueron las más activas en la aorta y la tráquea. De la fracción 5, se aisló la angolina que tiene un efecto vasorrelajante interesante en presencia de endotelio (Emax 74.15± 2.78 % y una CE50 34.56± 8.96 μM), y ausencia de endotelio (Emax 79.46± 3.49 % y una CE50 35.3± 9.29 μM). Para finalizar, se determinó que el mecanismo de acción del extracto metanólio en aorta aislada de rata está mediado por un posible bloqueo de los canales de calcio, mientras que en tráquea el mecanismo esta mediado por la inhibición de fosfodiesterasas y la apertura de canales de potasio.

Resumen Introducción: Hoy en día la regulación de la salud en países como México, crea numerosos obstáculos administrativos y técnicos específicos para llevar a cabo el proceso farmacovigilancia (FV) adecuada. La falta de personal capacitado, especialmente epidemiólogos, farmacéuticos, farmacólogos clínicos y las dificultades para monitorear los estudios farmacoepidemiológicos sobre el uso de fármacos, son algunos de los problemas que surgen en el desarrollo de estas actividades. Contar con un sistema adecuado de FV permitirá la detección oportuna de posibles Sospechas de Reacciones Adversas a Medicamentos (SRAMs), describir las nuevas SRAMs que puedan detectarse, así como evaluar su gravedad, significancia clínica y confirmar su relación causal entre la manifestación clínica y el medicamento sospechoso, así como contar cada vez con mayor información sobre nuevas SRAMs para adoptar medidas para la posible prevención de las mismas. Objetivo: Evaluar la implementación de las modificaciones a la Norma Oficial Mexicana “NOM-220-SSA1-2016, Instalación y operación de la farmacovigilancia” sobre el impacto de la farmacovigilancia en hospitales del estado de Morelos. Metodología: En este estudio participaron 7 hospitales, los cuales fueron seleccionados mediante una revisión de la base de datos de notificaciones de SRAM del Centro Estatal de Farmacovigilancia (CEFV) del Estado de Morelos, considerando principalmente la frecuencia, causalidad y calidad de la información. Se realizó un análisis situacional en función de los requisitos establecidos en la NOM-220-SSA1-2016 (Recursos materiales, humanos y documentales) mediante un formato ad-hoc. Identificando problemas e indicadores que los hospitales no cumplían con lo establecido dicho formato, se les dio retroalimentación y se realizó una segunda visita 4 meses después para verificar el cumplimiento. El análisis de los resultados de causalidad, calidad, tiempo de notificación y la frecuencia de los informes SRAM se realizó con estadística descriptiva utilizando la prueba T-tudent para dos muestras relacionadas y una prueba de correlación de Pearson. Resultados: Con respecto a la primera visita realizada a los hospitales, se identificó que los hospitales contaban solo con el 68% de cumplimiento según lo establecido en el formato ad-hoc, siendo los recursos humanos el apartado con mayor cumplimento (90.5%) y los recursos documentales el apartado con menor cumplimento (29%). En la segunda visita los hospitales alcanzaron en promedio un cumplimento general del 85%, destacando el apartado de recursos documentales el mayor incremento de cumplimento (71%). Conclusión: Se logró un aumento del 42% de cumplimento en los tres apartados evaluados (Recursos humanos, materiales y documentales) gracias a el seguimiento a las Unidades de Farmacovigilancia (UFV) en los hospitales del estado de Morelos siendo este un factor fundamental para el cumplimento de la implementación de las modificaciones a la NOM-220-SSA1-2016. Abstract. Introduction: Today, health regulation in countries such as Mexico creates numerous specific administrative and technical obstacles to carrying out the proper pharmacovigilance (PV) process. The lack of trained personnel, especially epidemiologists, pharmacists, clinical pharmacologists and the difficulties in monitoring pharmacoepidemiological studies on the use of drugs are some of the problems that arise in the development of these activities. Having an adequate PV system will allow the timely detection of possible Suspected Adverse Drug Reactions (ADRs), describe the new ADR that may be detected, as well as evaluate their severity, clinical significance and confirm their causal relationship between the clinical manifestation and the suspected drug, as well as have more and more information about new ADRs to take measures for their possible prevention. Objective: To evaluate the implementation of modifications to the Mexican Official Standard "NOM-220-SSA1-2016, Installation and operation of pharmacovigilance" on the impact of pharmacovigilance in hospitals in the state of Morelos. Methodology: Seven hospitals participated in this study. They were selected through a review of the ADRs notification database of the State Pharmacovigilance Center (CEFV) of the State of Morelos, mainly considering frequency, causality and quality of information. A situational analysis was performed according to the requirements established in NOM-220-SSA1-2016 (Material, human and documentary resources) using an ad-hoc format. Identifying problems and indicators that the hospitals did not comply with this format, they were given feedback and a second visit was made 4 months later to verify compliance. Analysis of the results of causality, quality, reporting time and frequency of ADRs reports was done with descriptive statistics using the T-tudent test for two related samples and a Pearson correlation test. Results: With respect to the first visit to the hospitals, it was identified that the hospitals had only 68% compliance as established in the ad-hoc format, with human resources being the section with the highest compliance (90.5%) and documentary resources the section with the lowest compliance (29%). At the second visit, the hospitals achieved an average of 85% overall compliance, with the section on documentary resources showing the greatest increase in compliance (71%). range. Conclusion: A 42% increase in compliance was achieved in the three sections evaluated (human, material and documentary resources) thanks to the follow-up of the Pharmacovigilance Units (UFV) in the hospitals of the state of Morelos, which is a fundamental factor for the implementation of the modifications to the NOM-220-SSA1-2016.

RESUMEN Introducción: El Interferón gamma (tipo II) es una citocina pleiotrópica que regula diversas funciones biológicas. El IFN-γ recombinante se ha expresado en diferentes sistemas que presentan varias desventajas, siendo necesario buscar nuevas alternativas de expresión con mejor calidad y potencial terapéutico, por ejemplo, el uso de líneas celulares de mamíferos, ya que representa una herramienta atractiva para la sobreexpresión de proteínas recombinantes de manera estable. Objetivo: Desarrollar líneas celulares HEK293 que expresen de manera estable el Interferón gamma humano para obtener mayor producción en comparación con un sistema de expresión transitorio (Ad5/IFN-γ). Metodología: La construcción del vector plasmídico pcDNA3(+) se realizó con el inserto de IFN-γ proveniente del vector pVAX1/IFN-γ. Posteriormente, la bacteria E. coli DH5-α se transformó, amplificó y el plásmido se purificó y secuenció. Por otro lado, la línea celular HEK293 se creció en medio DMEM/F-12 al 10% de SFB y la transfección con el vector recombinante se realizó en placa de 6 pocillos. Los cultivos transfectados se mantuvieron y monitorearon para realizar la primera selección clonal a través del gen de resistencia a la neomicina, evaluando la viabilidad celular. Posteriormente, la segunda selección clonal se realizó mediante el método de dilución limitante y las clonas sobreproductoras de IFN-γ se expandieron, la expresión del IFN-γ se detectó por RT-PCR y Western Blot; y, se cuantificó por la técnica ELISA. Resultados: Se determinó que la construcción molecular pcDNA3+/IFN-γ se realizó correctamente ya que contiene la secuencia codificante del gen de Interferón gamma (fragmento ~520 pb); asimismo, la secuenciación y el análisis Blast mostraron una similitud del 100% con el gen IFN-γ humano. La caracterización celular mostró una tasa de crecimiento específica de 0.0234 h-1 y un tiempo de duplicación de 29.6 h. Asimismo, la curva de muerte con Geneticin® produjo una dosis letal de 550 μg/mL. El RT-PCR mostró que había transcripción para el gen IFN-γ humano en todas las clonas transfectadas (520 pb) y el análisis SDS-PAGE también mostró que el IFN-γ se encuentra glicosilado y es de tipo II secretándose al medio de cultivo (~20 kDa). Posteriormente, se observó que en la segunda selección clonal las células HEK293 individuales alcanzaron productividades de IFN-γ de 50 a 400 pg/mL. La caracterización celular de las clonas HEK293 productoras de IFN-γ produjo tiempos de duplicación de 36.86 y 34.83 h (clonas de alta producción), 37.87 h (clon de media producción) y 37.06 h (clon de baja producción) expresando aún la proteína de interés con los subsecuentes pases a excepción de la clona de baja producción. Finalmente, la adaptación a medios libres de suero y el proceso de congelación-descongelación mostró la estabilidad de la clona celular HEK293 recombinante ya que se mantiene a un pase #33 la expresión proteica y génica del IFN-γ. Conclusiones: El desarrollo de las líneas celulares HEK293 con expresión estable se realizó correctamente con el vector recombinante pcDNA3+/IFN-γ obteniendo una alta productividad de proteína de 2.6 ng/mL en comparación con un sistema de expresión transitorio (Ad5/IFN-γ, 0.019 ng/mL). Siendo las clonas estables a más de ~215 generaciones y 33 pases. ABSTRACT Introduction: Interferon gamma (type II) is a pleiotropic cytokine that regulates various biological functions. Recombinant IFN-γ has been expressed in different systems that have several disadvantages, and it is necessary to search for new expression alternatives with better quality and therapeutic potential, for example, the use of mammalian cell lines, since it represents an attractive tool for overexpression. of stably recombinant proteins. Objective: To develop HEK293 cell lines that stably express human Interferon gamma to obtain higher production compared to a transient expression system (Ad5/IFN-γ). Methodology: The construction of the plasmid vector pcDNA3(+) was performed with the IFN-γ insert from the vector pVAX1/IFN-γ. Subsequently, the E. coli DH5-α bacterium was transformed, amplified, and the plasmid was purified and sequenced. On the other hand, the HEK293 cell line was grown in DMEM/F-12 medium with 10% SFB and transfection with the recombinant vector was performed in a 6-well plate. Transfected cultures were maintained and monitored to perform the first clonal selection through the neomycin resistance gene, evaluating cell viability. Subsequently, the second clonal selection was performed using the limiting dilution method and the IFN-γ overproducing clones were expanded, IFN-γ expression was detected by RT-PCR and Western Blot; and, it was quantified by the ELISA technique. Results: It was determined that the pcDNA3+/IFN-γ molecular construction was carried out correctly since it contains the coding sequence for the Interferon gamma gene (fragment ~520 bp); likewise, sequencing and Blast analysis showed 100% similarity with the human IFN-γ gene. Cell characterization showed a specific growth rate of 0.0234 h-1 and a doubling time of 29.6 h. Likewise, the death curve with Geneticin® produced a lethal dose of 550 μg/mL. RT-PCR showed that there was transcription for the human IFN-γ gene in all transfected clones (520 bp) and SDS-PAGE analysis also showed that IFN-γ is glycosylated and is type II secreting into the culture medium (~20 kDa). Subsequently, it was observed that in the second clonal selection the individual HEK293 cells reached IFN-γ productivities of 50 to 400 pg/mL. The cellular characterization of the IFN-γ-producing clones HEK293 produced doubling times of 36.86 and 34.83 h (high production clones), 37.87 h (medium production clone) and 37.06 h (low production clone) still expressing the interest with subsequent passes except for the low production clone. Finally, adaptation to serum-free media and the freeze-thaw process showed the stability of the recombinant HEK293 cell clone since the protein and gene expression of IFN-γ is maintained at a #33 pass. Conclusions: The development of HEK293 cell lines with stable expression was carried out correctly with the recombinant vector pcDNA3+/IFN-γ obtaining a high protein productivity of 2.6 ng/mL compared to a transient expression system (Ad5/IFN-γ, 0.019 ng/mL). The clones being stable to more than ~215 generations and 33 passes.

RESUMEN Las nanopartículas poliméricas (NPs) han tenido gran relevancia durante los últimos años en la innovación de los sistemas de liberación de fármacos, debido a la variedad de ventajas que estas ofrecen, siendo de interés sobre todo para tratamientos de enfermedades crónicas, tal es el caso de la diabetes mellitus que se ha convertido en un problema de salud a nivel mundial. En el presente trabajo se obtuvo y caracterizó un nanosistema polimérico biodegradable cargado de una nueva molécula con acción farmacológica antidiabética nombrada ATAC, la cual es un análogo tetrazol del ácido clofíbrico, debido a su baja solubilidad acuosa y pobre biodisponibilidad oral se busca mejorar sus propiedades de solubilidad y permeabilidad mediante la incorporación a NPs poliméricas de policaprolactona (PCL), un polímero biocompatible y biodegradable aprobado por la FDA para aplicaciones biomédicas y para el uso de liberación de fármacos de manera prolongada gracias a su lenta degradación. Para comenzar la fabricación de nanopartículas (NPs) se implementó el método de nanoprecipitación y mediante pruebas de solubilidad en diferentes disolventes orgánicos se seleccionó la acetona para disolver ATAC y el polímero (PCL), mientras que para disolver el estabilizante alcohol polivinílico (PVA) se utilizó agua, debido a que mostraron ser los mejores disolventes para estos materiales y útiles para llevar a cabo el proceso; Posteriormente se realizó un diseño exploratorio de cribado el cual incluyó 3 factores (X1, X2, X3) que se consideran afectan las características deseadas del nanosistema, con base a la literatura se eligió; la concentración del polímero (PCL), del estabilizante (PVA) y la concentración de ATAC, explorando 2 niveles en cada factor. Fueron fabricados 9 lotes de NPs mediante el método de nanoprecipitación, con las condiciones de la matriz experimental obtenida por el programa estadístico StatGraphics Centurion XVI. Estas fueron caracterizadas en tamaño promedio (Y1), potencial Z (Y2) y eficiencia de encapsulación (Y3). Los resultados sirvieron para optimizar la formulación con los objetivos de la talla más pequeña posible, el mayor potencial Z y la mejor eficiencia de encapsulación (EE%). Las NPs optimizadas se fabricaron por triplicado (L1, L2, L3) así como NPs sin carga de ATAC. Se evaluaron nuevamente las variables de respuesta (Y1, Y2, Y3) para asegurar el modelo del diseño. Las NPs optimizadas se caracterizaron por capacidad de carga (%CC), índice de polidispersión (PDI), morfología, así como el estado cristalino por Difracción de Rayos X (DRX), la interacción de componentes por Calorimetría Diferencial de IX Barrido (DSC) e Infrarrojo (IR), así mismo se implementaron estudios in vitro de liberación y de permeabilidad a pH´s fisiológicos. Por otro lado, se implementó y modificó un método cromatográfico de cuantificación para ATAC por HPLC para los fines deseados en el proyecto. El método analítico implementado fue lineal (r2= 0.9998), preciso (CV=1.88 %) y exacto (CV= 2.78%) con recobro del 101.43 ± 2.82%. Las NPs optimizadas se formularon bajo las siguientes condiciones; PCL 14.94 mg/mL, PVA 10 mg/ml y ATAC 26.49 mg, con rendimiento de 63.67 ± 4.16 %. Estas mostraron un tamaño promedio de 359.63 ± 7.27 nm, un potencial Z de -10.23 ± 0.49 mV, un IPD de 0.36 ± 0.15 y una EE% de 62.60 ± 3.48%. De acuerdo con los resultados de IR se observó que no se generaron interacciones significativas entre los componentes y que ATAC se encuentra molecularmente disperso en las NPs ya que se pudo detectar una pequeña señal característica de este en los sistemas. Los estudios de DRX y DSC evidenciaron que ATAC se encuentra en estado amorfo al incorporarse a las NPs, esto debido a que en el difractograma y termograma de NPs con ATAC no se observan las señales características de este. Los perfiles de liberación muestran que las NPs liberaron más del 90% de ATAC en aproximadamente 8 horas considerándose como una liberación prolongada, mientras que ATAC no encapsulado solo libera el 45%. En los estudios de permeabilidad las NPs de ATAC permearon en mayor porcentaje comparadas con ATAC libre en un 30%. En conclusión, se logró desarrollar, caracterizar y evaluar NPs esféricas biodegradables de PCL, encapsulando ATAC para administrarse por vía oral con resultados aceptables y buena reproducibilidad. ABSTRACT Polymeric nanoparticles (PNs) have had great relevance in recent years in the innovation of drug delivery systems, due to the variety of advantages they offer, being of interest including all treatments of chronic diseases, such is the case of diabetes mellitus that has become a worldwide health problem. In the present work, a biodegradable polymeric nanosystem is loaded with a new molecule with antidiabetic pharmacological action named ATAC, which is a tetrazole analog of clofibric acid, was obtained and characterized. Due to its low aqueous solubility and poor oral bioavailability, it seeks to improve its properties of Solubility and permeability through incorporation into polymer PNs of Polycaprolactone (PCL), a biocompatible and biodegradable polymer approved by the FDA for biomedical applications and use of drug release in a prolonged manner thanks to its slow degradation. To begin the manufacture of nanoparticles (PNs), the nanoprecipitation method was implemented and, by means of solubility tests in different organic solvents, acetone was selected to dissolve ATAC and the polymer (PCL), while to dissolve the stabilizer polyvinyl alcohol (PVA), it used water, because they proved to be the best solvents for these materials and useful for carrying out the process; Subsequently, an exploratory screening design was carried out, which included 3 factors (X1, X2, X3) that are considered to affect the desired characteristics of the nanosystem. Based on the literature, it was chosen; the concentration of the polymer (PCL), the stabilizer (PVA) and the concentration of ATAC, exploring 2 levels in each factor. 9 batches of NPs were manufactured using the nanoprecipitation method, with the conditions of the experimental matrix obtained by the StatGraphics Centurion XVI statistical program. These were characterized in average size (Y1), Z potential (Y2) and encapsulation efficiency (Y3). The results served to optimize the formulation with the objectives of the smallest possible size, the highest Z potential and the best encapsulation efficiency (EE%). The optimized PNs were manufactured in triplicate (L1, L2, L3) as well as PNs without ATAC loading. Response variables (Y1, Y2, Y3) were re-evaluated to ensure the design model. The optimized PNs were characterized by load capacity (% CC), polydispersity index (PID), morphology, as well as the crystalline state by X-ray Diffraction (XRD), the interaction of components by Differential Scanning Calorimetry (DSC) and Infrared (IR), likewise in vitro studies of release and permeability at physiological pHs were implemented. On the other hand, a quantification chromatographic method for ATAC by HPLC was implemented and modified for the desired purposes in the project. The analytical method implemented was linear (r2 = 0.9998), precise (CV = 1.88%) and exact (CV = 2.78%) with XI recovery of 101.43 ± 2.82%. The optimized NPs were formulated under the following conditions; PCL 14.94 mg / mL, PVA 10 mg / ml and ATAC 26.49 mg, with a yield of 63.67 ± 4.16%. These showed an average size of 359.63 ± 7.27 nm, a Z potential of -10.23 ± 0.49 mV, an IPD of 0.36 ± 0.15 and an EE% of 62.60 ± 3.48%. According to the IR results, it was observed that no significant interactions were generated between the components and that ATAC is molecularly dispersed in the PNs since a small characteristic signal of this could be detected in the systems. The XDR and DSC studies showed that ATAC is in an amorphous state when incorporated into PNs, this because in the diffractogram and thermogram of PNs with ATAC, the characteristic signals of this are not observed. The release profiles show that the PNs released more than 90% of ATAC in approximately 8 hours, being considered as a prolonged release, while non-encapsulated ATAC releases only 45%. In the permeability studies, the PNs of ATAC permeated in a higher percentage compared to free ATAC in 30%. In conclusion, it was possible to develop, characterize and evaluate biodegradable spherical PNs of PCL, encapsulating ATAC to be administered orally with acceptable results and good reproducibility.

RESUMEN La Diabetes Tipo 2 (DT2) consiste en un desorden metabólico caracterizado por hiperglicemia crónica como resultado de la incorrecta secreción y/o acción de la insulina y debido a su incidencia y prevalencia ésta se ha convertido en una emergencia de salud. Por lo tanto, para este proyecto se preparó una serie de amidas derivadas del ácido 3-(4-aminofenil)propiónico (YZN 1 – 11) mediante una ruta de síntesis de 5 pasos. Posteriormente, estos compuestos fueron purificados y caracterizados mediante técnicas espectrométricas y espectroscópicas. A la serie propuesta se le realizó un análisis de consenso farmacológico para el cual se utilizaron diversas herramientas quimioinformáticas, identificando así a los compuestos YZN-1, YZN-5 y YZN-10 como hits computacionales y estos fueron ensayados tanto in vivo como in vitro. Los tres compuestos seleccionados se comportaron como moléculas antihiperglicemiantes en una prueba de tolerancia a la glucosa oral a una dosis de 100 mg/kg y al analizar el área baja la curva de estos resultados, el compuesto YZN-10 demostró una actividad más pronunciada que YZN-1 y YZN-5. Debido a esto, se decidió probarlo en un ensayo antidiabético agudo, en el cual se demostró nuevamente su actividad como antihiperglicemiante al lograr la reducción en los niveles de glucosa en un 30 %. Adicionalmente, los compuestos YZN-5 y YZN-10 lograron influenciar la secreción tanto de calcio intracelular como insulina en células de insulinoma pancreático RINm5F en una manera que podría estar potencialmente atribuida a la activación de FFAR1 o GPR40. Los hallazgos encontrados en este proyecto significan un aporte importante en la búsqueda de compuestos con potencial acción antihiperglicemiante debido a que unificando estos resultados con los de tesis previamente desarrolladas, hemos confirmado que la inclusión de ácidos grasos saturados como región hidrofóbica aumenta la probabilidad de que estos compuestos presenten actividad. ABSTRACT Type 2 diabetes (T2D) consists of a metabolic disorder characterized by chronic hyperglycemia resulting from a deficient insulin secretion and/or action and due to both its incidence and prevalence is has become a health emergency. Therefore, for this project a series of 3-(4-aminophenyl)propionic acid amides (YZN 1 – 11) was prepared through a synthesis route consisting of five steps, these compounds were purified and characterized by NMR spectroscopy and mass spectrometry. A Pharmacological Consensus Analysis (PhaCA) was performed using several chemoinformatic tools thus establishing the order or priority in which compounds would be studied. The results allowed us to identify compounds YZN-1, YZN-5 and YZN-10 as computational hits so these molecules were further evaluated in vivo and in vitro. The three selected compounds behaved as antihyperglycemic agents when administered p.o. for an oral glucose tolerance test in mice at 100 mg/kg. When the area under the curve of these results was analyzed, YZN-10 proved to have a slightly better efficacy than YZN-1 and YZN-5. For this reason, it was decided that further testing was required and so an acute assay in streptozotocin/nicotinamide induced diabetic mice was performed and as a result, YZN-10 managed to show a decrease of 30 % in blood glucose levels. On the other hand, compounds YZN-5 and YZN-10 were able to also have effects on intracellular calcium and insulin release in RINm5F cells when tested in vitro in a manner that could potentially be attributed to FFAR1 (or GPR40) activation. However, more research is needed to confirm this theory. The findings in this project contribute with important facts that aid in the search for potential bioactive compounds for the management of T2D given that these results along with previous findings in prior theses, allow us to confirm that the inclusion of fatty acid residues to the hydrophobic region improves the probability of obtaining active compounds.

RESUMEN. En la producción de glicoproteínas como el interferón gamma (IFN-γ), la elección del sistema de expresión es crucial, porque influye en la calidad y cantidad de la proteína recombinante. Las células de mamíferos son los huéspedes preferidos para la producción de estas proteínas, ya que generan complejas modificaciones postraduccionales, pliegan correctamente la proteína y son capaces de segregar el producto en el medio de cultivo. El éxito generalizado de la línea de células CHO se debe a su incomparable adaptabilidad, generalmente utilizada en la expresión estable o constitutiva de las glicoproteínas, ya que estos sistemas permiten caracterizar la función y estructura de proteínas recombinantes complejas. Bajo este tenor dentro del grupo de trabajo se han generado sistemas transitorios utilizando células de mamífero como hospederos para producir la proteína interferón gamma dentro de los cuales con el sistema HEK293/AD5-IFN- se optimizó la expresión de la proteína obteniendo así 19.2 pg/mL, siendo esta la concentración más alta obtenida en un sistema transitorio. Por ello, en el presente trabajo se pretende generar una línea celular CHO-S que exprese de manera estable interferón gamma en altas concentraciones y en forma de homodímero glicosilado, así como realizar la caracterización tanto de la línea celular como de la proteína producida. Con el fin de lograr este objetivo se realizó primeramente la construcción del vector de expresión pcDNA3/IFN-γ, Durante el análisis de la secuenciación de la construcción del plásmido se corroboró que el transgén insertado corresponde con la proteína de interés (IFN-γ). Para la generación del sistema de expresión estable se realizó una selección policlonal obteniendo dos minipools con producciones bajas de interferón gamma. Seguido de la selección clonal para obtener dos clonas con producción alta de IFN-γ expresando más de 1000 pg/mL de manera constante el transgén de interés por más de 200 generaciones desde su transfección, siendo considerablemente mayores comparadas con el sistema el transitorio HEK293/AD5-IFN- el cual produce 19.22 pg/mL con lo cual se corrobora la hipótesis planteada en este proyecto. SUMMARY. During the production of glycoproteins such as gamma interferon (IFN-γ), the choice of the expression system is crucial, as it has a great influence on the quality and quantity of the recombinant protein. Mammalian cells are the preferred hosts to produce these proteins, as they generate complex post-translational modifications, correctly fold the protein and can secret the product into the culture medium. The widespread success of the CHO cell line is due to its incomparable adaptability, generally used in the stable or constitutive expression of glycoproteins, as these systems allow the characterization of the function and structure of complex recombinant proteins. In this sense, the working group has generated transitional systems using mammalian cells as hosts to produce the interferon-gamma protein. With the HEK293/AD5-IFN-γ system, the protein expression was optimized to obtain 19.2 pg/mL, which is the highest concentration obtained in a transitional system. Therefore, the present work aims to generate a CHO-S cell line that stably expresses gamma interferon in high concentrations and in the form of glycosylated homodimer, as well as to perform the characterization of both the cell line and the produced protein. In order to achieve this objective, the expression vector pcDNA3/IFN-γ was first constructed. During the analysis of the plasmid construction sequencing, it was corroborated that the inserted transgene corresponds to the protein of interest (IFN-γ). For the generation of the stable expression system a polyclonal selection was performed obtaining two minipools with low gamma interferon productions. Following the clonal selection to obtain two clones with high production of IFN-γ expressing more than 1000 pg/mL constantly the transgene of interest for more than 200 generations since its transfection, being considerably higher compared to the system the transitory HEK293/AD5-IFN-γ which produces 19.22 pg/mL which corroborates the hypothesis raised in this project.

Desde la antigüedad el ser humano ha conocido y utilizado las plantas para distintas actividades como la producción de medicinas debido a sus propiedades funcionales han sido parte de la medicina tradicional. Los avances en fitoquímica han permitido extraer compuestos de interés clínico, utilizados de manera específica contra enfermedades como el cáncer. El cáncer es considerado un problema de salud pública y debido a la limitación de las terapias dirigidas a disminuir los efectos negativos de esta enfermedad y la búsqueda de nuevas sustancias en matrices poco estudiadas de los frutos es una alternativa interesante pues tiene un gran número de metabolitos con posible potencial farmacológico. El saramuyo y el caimito han estado presentes en la medicina tradicional, utilizando diversas partes de la planta como las hojas, las semillas y las cáscaras que ayudan a combatir distintas enfermedades como la diabetes y el cáncer. El presente estudio tuvo como objetivo el evaluar el efecto antiproliferativo de los extractos metanólicos de cáscaras de saramuyo y caimito en líneas celulares cancerosas de MCF-7, MCF-7/Vin+ , HCT-15, HCT-116 y HeLa. Los análisis fitoquímicos indican que los extractos metanólicos contienen una gran cantidad de compuestos fenólicos que han reportado actividad antiproliferativa. Los análisis de sulforodamina B (SRB) indican que los extractos de saramuyo exhiben actividad citotóxica (extractos exhibe un efecto sinérgico en HCT-116 y MCF-7. Mediante el ensayo de CCK-8 se determinó que el extracto de saramuyo en concentración de 50 µg/ml exhibe un efecto antiproliferativo significativo (p=0.003) en el grupo EXTRACTO respecto al NT a las 72 horas de exposición en líneas celular HeLa, mientras que una combinación 50:50 v/v en la misma concentración exhibe solo efecto antiproliferativo en el grupo EXTRACTO respecto al NT, desde las 48 horas (p=0.01) Since ancient times the human being has known and used plants for different activities such as the production of medicines due to their functional properties have been part of traditional medicine. Advances in phytochemistry have allowed the extraction of compounds of clinical interest, specifically used against diseases such as cancer. Cancer is considered a public health problem and due to the limitation of therapies aimed at reducing the negative effects of this disease and the search for new substances in poorly studied matrices of fruits is an interesting alternative because it has many metabolites with possible pharmacological potential. The saramuyo and the caimito have been present in traditional medicine, using different parts of the plant such as leaves, seeds and peels that help to fight different diseases such as diabetes and cancer. The objective of the present study was to evaluate the antiproliferative effect of the methanolic extracts of saramuyo and caimito peels in cancer cell lines of MCF-7, MCF-7 / Vin + , HCT-15, HCT-116 and HeLa. Phytochemical analyzes indicate that methanolic extracts contain many phenolic compounds that have reported antiproliferative activity. Sulforhodamine B (SRB) analyzes indicate that saramuyo extracts exhibit cytotoxic activity (NT at 72 hours of exposure in HeLa cell lines, whereas a combination 50:50 v / v in the same concentration exhibits only antiproliferative effect in the EXTRACT group with respect to NT, from 48 hours (p = 0.01) to 72 hours (p = 0.002) in the cell line HCT-116. In conclusion, the methanolic extracts of saramuyo and caimito present metabolites that have been described as the main cause of the antiproliferative activity, in addition the SRB studies reveal that the extracts have cytotoxic activity in addition to exhibiting a synergistic effect in combination 50:50 v/v.

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Introducción: El sueño conmovimientos oculares rápidos (sueño MOR) es un estado fisiológico complejo, caracterizado por la aparición de movimientos oculares rápidos (MORs) asociados ala aparición de sueños con mayor contenido, así como por la inhibición de los músculos anti gravitatorios. Sin embargo, a pesar de la atonía muscular, durante esta misma etapa del sueño, en sujetos sanos se han observado activaciones específicas de los músculos faciales responsables de la expresión emocional en la vigilia (músculos miméticos), las cuales podrían estar asociadas con la modalidad (valencia) y la intensidad emocional (excitación) de los sueños, siendo así un marcador afectivo durante el sueño. La depresión, por otro lado, es uno de los cuadros clínicos más heterogéneos en su sintomatología. Varios estudios han analizado la influencia del desarrollo y la aparición del trastorno depresivo mayor (TDM) en diferentes componentes, tanto el sueño MORfásico como el tónico; sin embargo, los datos disponibles hasta la fecha no han permitido llegar a conclusiones definitivas con respecto a uno o varios marcadores afectivos específicos durante el sueño. En este trabajo proponemos que las contracciones musculares faciales (CMF), el contenido emocional del sueño y su posible asociación en pacientes con TDM pueden servir como un marcador afectivo confiable en la depresión mayor. Objetivo: Analizar las CMF durante el sueño MORen mujeres con TDM y su asociación con el contenido emocional del sueño en comparación con los controles femeninos. Método: Se obtuvieron dos registro spolisomnográficos(PSG) de sueño estándar de 8 h.de 10 mujeres sanas y 10 mujeres con TDMsin tratamiento. Se obtuvieron registros de EMG faciales del corrugador derecho e izquierdo y de los músculos cigomáticos derecho e izquierdo. Los despertares experimentales que exploraron el contenido emocional del sueñose llevaron a cabo durante las etapas del sueño MOR in vivo que duraran al menos tres minutos. Los despertares fueron determinados por una CMF que durara más de 100 ms y por la amplitud de cualquier músculo facial que excediera su actividad de fondo en un 500%. Después del registro PSG, se cuantificaron las CMF,se obtuvo el voltaje promedio por músculo durante el sueño MOR y se evaluaron estadísticamente las diferencias entre TDM y controles. Las puntuaciones generales del contenido emocional del sueño se obtuvieron a través de un cuestionario con cinco jueces ciegos a las condiciones personales del sujeto. Los coeficientes de correlación y regresión se calcularon para las puntuaciones generales de CMF y el contenido de sueño emocional, y las diferencias entre los grupos (control versus TDM) se evaluaron estadísticamente. Resultados: El voltaje medio tanto del corrugador como del cigomático aumentó significativamente en el grupo con TDM, mientras que la frecuencia promedio de los corrugadores y cigomáticos disminuyó en este mismo grupo. En particular, el informe del sueño fue significativamente menor en TDM en comparación con los controles, y, cuando hubo reporte de sueño en el grupo de depresión, el contenido emocional del mismo fue exiguo, con emociones más negativas y con menos intensidad (por ejemplo, tristeza) que en los controles, en los que las emociones variaron desde alto negativo (por ejemplo, ira), alto positivo (por ejemplo, alegría) hasta bajo positivo (por ejemplo, calma), mientras que bajo negativo (por ejemplo, apatía) estuvo prácticamente ausente. En TDM, por el contrario, la emoción más notificada fue alta negativa, seguida de baja negativa, baja positiva y finalmente alta positiva. En los controles, las emociones positivas altas predijeron la mayor actividad del cigomático, mientras que en el TDM no se observó asociación entre las variables. Finalmente, los análisis cuantitativos de EEG mostraron una disminución en la potencia absoluta y relativa de las bandas alfa y gamma 2 en las regiones temporal y frontal (T5 y F3)respectivamentedurante las etapas de sueño MORen TDMen comparación con los controles. Conclusiones: El presente estudio confirmó que el TDMdisminuye la apariciónde los sueños, su contenido afectivo, la potencia del EEG y la actividad muscular facial fásica durante el sueño MOR, mientras que aumenta la amplitud de lasCMF. Sugerimos que los mecanismos neurofisiológicos afectados en la depresión, es decir, la alteración de la conectividad de la amígdala y la corteza prefrontal, pueden modificar la capacidad de consolidar un sueño y, cuando están presentes, su contenido está principalmente lleno de emociones bajas y negativas. De esta manera, la inhibición de la actividad muscular facial fásica puede reflejar directamente esta alteración, actuando como un marcadorafectivo específico de la depresión durante el sueño.

Facultad de Ciencias Médicas y Biológicas. Maestría en Ciencias de la Salud The protein STAT3 has been involved in the development of breast cancer because it modulates genes involved in carcinogenesis. Bcl-xL is an anti-apoptotic protein that promotes greater survival to neoplastic cells. Both proteins are associated with poor prognosis. The aim of the present study was to associate the histological, molecular and clinical stage type with the expression of nuclear STAT3 and Bcl-xL proteins in breast cancer. In tumor microarrays (TMA) of 310 cases of breast cancer, the nuclear STAT3 protein phosphorylated (pSTAT3) and cytoplasmic and nuclear Bcl-xL, were analyzed by inmunohistochemistry. Nuclear expression was found in 78.2% and 72% of pSTAT3 and Bcl-xL cases, respectively. In analyzing the expression of nuclear pSTAT3 in relation to the histological type, statistically significant differences (P = 0.001) and with the clinical stage (P = 0.03) were found, but not with the molecular subtype (P = 0.52). A protective factor of nuclear pSTAT3 was found between IIA and IIB stages (RR, 0.68; IC 95%, 0.517-0.893; P = 0.014), and relative risk between stages IIA and IIIA (RR, 2,696; IC 95%, 1,169-6.218; P = 0.006); as well as between stages N0 and N1 (RR 1,845; IC 95%, 1.123-3.029; P = 0.006). The expression of total Bcl-xL (nuclear and cytoplasmic) showed no statistically significant differences with the histological type (P = 0.06 and P = 0.20), with the molecular subtype (P = 0.14 and P = 0.70) or with the clinical stage (P = 0.56 and P = 0.15). The results of this study suggest that STAT3 has a dual function in breast cancer, as it presents both as a protective factor in early clinical stages and as a risk factor in locally advanced clinical stages. La proteína STAT3 se ha visto implicada en el desarrollo del cáncer de mama porque modula genes implicados en la carcinogénesis. Bcl-xL es una proteína antiapoptótica que favorece mayor supervivencia a las células neoplásicas. Ambas proteínas se asocian con mal pronóstico. El objetivo de este estudio fue asociar el tipo histológico, molecular y estadio clínico con la expresión de las proteínas STAT3 nuclear y Bcl-xL en cáncer de mama. Mediante inmunohistoquímica en microarreglos de tumores (TMA) de 310 casos de cáncer de mama, se analizaron la proteína STAT3 nuclear fosforilada (pSTAT3) y Bcl-xL citoplasmática y nuclear. Se encontró expresión nuclear en 78.2% y 72% de los casos de pSTAT3 y Bcl-xL, respectivamente. Al analizar la expresión de pSTAT3 nuclear en relación al tipo histológico, se encontraron diferencias estadísticamente significativas (P = 0.001) y con el estadio clínico (P = 0.03), pero no con el subtipo molecular (P = 0.52). Se encontraron un factor protector de pSTAT3 nuclear entre los estadios IIA y IIB (RR, 0.68; IC 95%, 0.517-0.893; P = 0.014) y riesgo relativo entre los estadios IIA y IIIA (RR, 2.696; IC 95%, 1.169-6.218; P = 0.006); así como entre los estadios N0 y N1 (RR 1.845; IC 95%, 1.123-3.029; P = 0.006). La expresión de Bcl-xL total (nuclear y citoplasmática) no mostró diferencias estadísticamente significativas con el tipo histológico (P=0.06 y P=0.20), con el subtipo molecular (P=0.14 y P=0.70) ni con el estadio clínico (P=0.56 y P=0.15). Los resultados de este estudio sugieren que STAT3 tiene una función dual en el cáncer de mama, ya que se presenta como un factor de protección en estadios clínicos tempranos y como factor de riesgo en estadios clínicos localmente avanzados.

RESUMEN El creciente interés científico por la búsqueda y desarrollo de compuestos bioactivos con propiedades analgésicas ha llevado a la obtención, caracterización y evaluación farmacológica de metabolitos de fuentes naturales y sintéticas como potenciales agentes analgésicos. Sin embargo, para el desarrollo de fármacos a partir de nuevos compuestos bioactivos no sólo es necesario el estudio de la actividad farmacológica; se requiere el establecimiento del perfil toxicológico, farmacocinético y farmacodinámico de los nuevos compuestos con el fin de determinar la viabilidad de su uso en la terapéutica. En este estudio, afinina y hexahidroafinina demostraron ser alcamidas con alto potencial analgésico y baja toxicidad oral (DL50 = 1442.2 y > 5000 mg/kg, respectivamente). Tras la administración repetida de 50 mg/Kg durante 28 días de las alcamidas no se observaron daños macroscópicos en órganos principales ni alteraciones en los parámetros hematológicos y enzimáticos asociados a lesiones renales y hepáticas. Ambas alcamidas no mostraron efectos genotóxicos en la prueba de micronúcleos. En menor o mayor grado, la actividad antinociceptiva de afinina y hexahidroafinina se asoció a la activación de los receptores TRPV1, GABA y cannabinoides. La alta lipofilicidad de afinina se vio reflejada en su rápida absorción tras la administración oral de 2.5 mg/Kg con una Cmáx y tmáx de 8.3 ng/mL y 8 minutos, respectivamente. La concentración máxima detectada a la misma dosis, pero a través de la administración intravenosa fue de 841.1 ng/mL. De igual manera, se observó su rápida eliminación del sistema, dado que su presencia ya no fue detectada 120 minutos posteriores a su administración oral y 25 minutos posteriores a su administración intravenosa. Otros parámetros farmacocinéticos reforzaron el hecho de que afinina es un metabolito con rápido efecto farmacológico pero de corta duración antinociceptiva. En general, la presente investigación estableció el perfil fármaco-toxicológico de dos compuestos que pueden ser considerados viables para su desarrollo farmacéutico con el fin de incrementar la duración de su efecto farmacológico mediante tecnología farmacéutica adecuada de compuestos con estas características químicas. ABSTRACT The scientific interest to develop bioactive compounds with analgesic properties has led to obtaining and evaluating natural and synthetic metabolites as potential analgesic agents. However, to the new drugs development, it is necessary to establish the toxicological, pharmacokinetic and pharmacodynamic profile in order to determine the feasibility of their use in therapeutics. In this study, affinin and hexahydroaffinin shown to be alkamides with high analgesic potential and low oral toxicity (LD50 = 1442.2 and > 5000 mg/Kg, respectively). After subacute study (50 mg/Kg, p.o, 28 days) no macroscopic damage to the main organs or alterations in the hematological and enzymatic parameters associated with renal and hepatic lesions were observed. Both alkamides had no genotoxic effects on the micronucleus test. The antinociceptive activity of affinin and hexahydroaffinin was associated with the activation of the TRPV1, GABA and cannabinoid receptors. The high lipophilicity from this kind of compound was evident due rapid absorption after oral administration (2.5 mg/Kg) with a Cmáx and tmáx of 8.3 ng/mL and 8 minutes respectively. The maximum concentration detected at the same dose, but through intravenous administration was 841.1 ng/mL; 120 minutes after oral administration and 25 minutes after intravenous administration no affinin was detected in plasma samples. The main limitation of this compounds is the short antinociceptive duration however the pharmacological-toxicological profile showed that affinin and hexahydroaffinin are viable with the pharmaceutical technology development in order to increase duration of their pharmacological effect.

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Facultad de Ciencias Médicas y Biológicas. Maestría en Ciencias de la Salud Discoid and anucleate cells, platelets have traditionally been associated with the processes of haemostasis and thrombosis; however, its involvement in other biological processes has recently been described including the immune response against viruses. Dengue (DENV) and Zika (ZIKV) are arboviruses that have a genome that encodes 3 structural and 7 non-structural proteins. Non-structural protein 1 (NS1) is mainly involved in the replication of viral genetic material. NS1 can also be secreted by infected cells and their circulating presence has been associated with the evasion of the immune response against these viruses. Objective: Study platelet reactivity in response to stimulus with the NS1 protein of dengue and Zika virus. Materials and methods: Blood sample was obtained by venepuncture with Vacutainer system® volunteers who agree to participate in the protocol and meet the criteria of inclusion. Determination of the serological status of NS1 samples of dengue and Zika using ELISA method. Obtention of platelet-rich plasma (PRP) 1000, and platelet-poor-plasma (PPP). Determination of platelet stimulus conditions by flow cytometry (CytoFLEX, Beckman Coulter®). Standardization of atomic force microscopy (AFM) and quartz crystal microbalance (QCM) for further evaluation of post-stimulus cell reactivity with NS1 protein. NT-MDT microscope® NTEGRA and a QCMopen, Novaetech® microbalance was used. Results: The seronegativeness of the 3 working samples was confirmed. The increased expression of markers P-Selectin and GP aIIßI by flow cytometry were observed at 60 min with a protein concentration of 2.5 μg/mL and this was higher when compared to known agonists of activation (ADP, collagen and epinephrine), and the basal expression in inactive platelets. We determined PRP/Buffered Tyrodes onto glass surface for the assessment of platelet by AFM. Células discoides y anucleadas, las plaquetas han estado asociadas tradicionalmente a los procesos de hemostasia y trombosis; sin embargo, recientemente se ha descrito su participación en otros procesos biológicos incluida la respuesta inmunológica contra virus. El dengue (DENV) y el Zika (ZIKV) son arbovirus que poseen un genoma que codifica 3 proteínas estructurales y 7 no estructurales. La proteína no estructural 1 (NS1) participa principalmente en la replicación del material genético viral. NS1 puede también ser secretada por células infectadas y su presencia en circulación se ha asociado a la evasión de la respuesta inmune contra estos virus. Objetivo: Estudiar la reactividad plaquetaria en respuesta a estímulo con la proteína NS1 del virus de dengue y Zika. Materiales y métodos: Obtención de muestra sanguínea por venopunción con sistema Vacutainer® de voluntarios que acepten participar en el protocolo y cumplan con los criterios de inclusión. Determinación del estado serológico de las muestras contra NS1 de dengue y Zika mediante ELISA. Obtención de plasma rico en plaquetas (PRP) y de plasma pobre en plaquetas (PPP). Determinación de las condiciones de estímulo plaquetario mediante citometría de flujo (CytoFLEX, Beckman Coulter®). Estandarización de microscopia de fuerza atómica (AFM) y microbalanza de cristal de cuarzo (QCM) para posterior evaluación de la reactividad celular posterior a estímulo con proteína NS1. Se utilizó un microscopio NT-MDT® NTEGRA y una microbalanza QCMopen, Novaetech®. Resultados: Se confirmó la seronegatividad de las 3 muestras de trabajo. La mayor expresión de los marcadores P-Selectina y GP αIIβI por citometría de flujo se observaron a los 60 minutos con una concentración de proteína de 2.5 μg/mL y que esta fue mayor al compararse con ADP, colágeno y epinefrina y la expresión basal en plaquetas inactivas. Se determinó PRP/Buffer Tyrodes sobre superficie de vidrio para la evaluación de plaquetas mediante AFM.

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La esteatohepatitis no alcohólica es una de las principales causas de enfermedad hepática. Los factores dietéticos determinan la presentación clínica de la esteatohepatitis y pueden influir en la progresión de enfermedades relacionadas. El colesterol se ha convertido en un factor crítico en esta enfermedad y por lo tanto el consumo de una dieta enriquecida en colesterol puede conducir a su progresión. El objetivo fue investigar el impacto de la sobrecarga hepática de colesterol en la progresión de la colestasis obstructiva en ratones sometidos a cirugía de ligadura del conducto biliar. Los ratones fueron alimentados con una dieta alta en colesterol durante dos días y luego se sometieron a un procedimiento de cirugía; se llevaron a cabo análisis histológicos, bioquímicos, y moleculares para abordar el efecto del colesterol en el daño hepático. Los ratones bajo la dieta fueron más susceptibles al daño. Los resultados revelan que los ratones alimentados con colesterol muestran aumento en la apoptosis y el estrés oxidante, así como una reducción en la proliferación celular. La mortalidad después de la cirugía fue mayor en los ratones alimentados con la dieta HC. El colesterol hepático afecta la reparación de hígado durante la colestasis obstructiva y agrava la enfermedad con consecuencias fatales tempranas; asociando estos efectos fuertemente con el estrés oxidante.

El control de la respiración se ha usado exhaustivamente en muchas investigaciones en el mundo como modulador de las ramas nerviosas simpática y parasimpática con el fin de caracterizar la Arritmia Sinusal Respiratoria. El Laboratorio de Fisiología Médica de la Universidad Autónoma Metropolitana Iztapalapa ha utilizado algunas tecnologías para el control respiratorio, como lo son marcadores de tiempo audibles, marcadores de tiempo visuales con columnas de LED y por visualización de patrones en una pantalla; en el caso de los marcadores por tonos audibles quedaron descartados ya que presentaban errores absolutos grandes en frecuencia de ±0.19 Hz, los dispositivos por columna de LED fueron validados como aceptables, sin embargo carecen de la posibilidad de generar patrones con barridos en frecuencia y amplitud, carecen de portabilidad y no tienen entrada analógica para el seguimiento de los sujetos en tiempo real; por otro lado el método por computadora con seguimiento visual de los patrones en una pantalla LCD se encuentra sujeto a un hardware excesivo, consumo de energía de aproximadamente de 120W por computadora, limitado en movimiento y costoso por el uso de licencias diversas de software; de esta manera surgió la necesidad de diseñar un nuevo instrumento visual con columnas de LED con ventajas como generación por software de diversos patrones respiratorios con frecuencias y amplitudes fijas y variables (barridos en frecuencia y amplitud), hardware portable, consumo bajo de energía, modos de ahorro de energía (estado en espera cada que termina un protocolo), controlado remotamente hasta una distancia de 10 m por medio de un control remoto infrarrojo y no tiene costos de licencias. Los objetivos de esta tesis se centraron en tener un instrumento capaz de generar patrones respiratorios con amplitudes y frecuencias fijas así como amplitudes y frecuencias variables pero con su correspondiente calibración en cada patrón con lo que se obtuvieron cifras de mérito aceptables de 0.992 para precisión, 0.985 para exactitud y 0.998 para certeza respecto de la variable frecuencia, con respecto a la amplitud se obtuvieron cifras de mérito aceptables de 0.991 para precisión, 0.986 para exactitud y 0.996 para certeza; y su correspondiente validación que sustentó su utilidad fisiológica por medio de un diseño experimental donde se aplicó un protocolo de esfuerzo respiratorio a 11 sujetos de genero indistinto con tres patrones de respiración con duración de 1 minuto: Amplitud Constante Frecuencia Constante (1 litro, 0.2 Hz), Amplitud Constante Frecuencia Variable en incremento (1 litro, barrido en frecuencia lineal de 0.15 a 0.6 Hz), Amplitud Variable en incremento Frecuencia Constante (barrido en amplitud de 0.2 a 2 litros, 0.2 Hz). Para cada patrón respiratorio se midieron los errores absolutos de amplitud y frecuencia, de respiración a respiración entre el Generador de Patrones Respiratorios Visuales (GPRV) y el patrón III generado en MatLab y entre un método comprobado, por computadora con visualización en pantalla TFT y el patrón generado en MatLab. Las mediciones demostraron que los valores medios del error absoluto de las variables amplitud del volumen respiratorio y frecuencia respiratoria entre el método de referencia y el Generador de Patrones Respiratorios Visuales fueron no significativos: en la comparación entre el Generador de Patrones Respiratorios Visuales y la computadora respecto del patrón generado en MatLab se encontró para el patrón Amplitud Constante Frecuencia Constante (error GPRV 0.02 Hz ±0.03, error computadora 0.03 Hz ±0.03; error GPRV 42 ml ±46 ml, error computadora 34 ml ±30 ml); para el patrón Amplitud Constante Frecuencia Variable en incremento (error GPRV 0.08 Hz, error computadora 0.08 Hz; error GPRV 77 ml ±62ml, error computadora 57 ml ±45 ml); para el patrón Amplitud Variable en incremento Frecuencia Constante (error GPRV 0.02 Hz, error computadora 0.03 Hz; error GPRV 84ml ±75 ml, error computadora 57 ml ±62 ml). En el análisis los valores medios de la ASR fueron muy similares entre las tres maniobras: para el patrón Amplitud Constante Frecuencia Constante (GPRV 145±63, computadora 146±42); para el patrón Amplitud Constante Frecuencia Variable en incremento (GPRV 87±28, computadora 86±33) y para el patrón Amplitud Variable en incremento Frecuencia Constante (GPRV 132±56, computadora 141±45). Los resultados de esta tesis indican que el Generador de Patrones Respiratorios Visuales, logró reproducir adecuadamente patrones respiratorios en amplitud y frecuencia tanto constantes como variables, además mostró ser adecuado al incrementar o decrementar la función de la rama vagal cardiaca. Palabras clave: Generador de Patrones Respiratorios Visuales (GPRV). Arritmia Sinusal Respiratoria (ASR). Sistema embebido. Convertidor analógico digital CAD. Control de la respiración. Variabilidad de la frecuencia cardiaca (VFC). Amplitud del volumen de la respiración (AVOR). Sistema Nervioso Autónomo (SNA). Núcleos Generadores de Patrones respiratorios (NGPR). Núcleos Nerviosos Vagales (NNV). Baro receptores (BARORx). Volumen corriente (VC).

Se determinó la maduración, analizando los cambios en la distribución de carbohidratos en la membrana plasmática de las células, además, de los cambios en la fosforilación de los residuos de tirosina de las proteínas. Se observó los espermatozoides epididimarios del caput del epidídimo, mostraron menos de 2 porciento de xii movilidad espermática, mientras que a partir del corpus del epidídimo, los espermatozoides mostraron un aumento significativo de movilidad, que siguió aumentando en los espermatozoides de la cauda. Además de la movilidad espermática, en los carbohidratos N-acetil glucosamina y/o ácido siálico, principalmente a lo largo de todo el espermatozoide, también se observó un aumento a partir de la región del corpus del epidídimo durante los meses de reproducción (mayo-julio), lo que también se corroboró por citometría de flujo. No se detectó la presencia de fucosa en espermatozoides de ninguna de las regiones evaluadas en microscopía de fluorescencia, sin embargo, por citometría de flujo se logró detectar su presencia en cantidades menores respecto al resto de los carbohidratos analizados, incrementándose (no significativamente) a partir del corpus del epidídimo. La fosforilación de residuos de tirosina se observó en el espermatozoide completo, en la cabeza y en la región acrosomal, esta mostró un aumento cuando los espermatozoides fueron obtenidos del corpus. El incremento en la cantidad de N-acetilglucosamina y/o ácido siálico y la fosforilación de proteínas en residuos de tirosinas, se relacionó con un incremento en la movilidad espermática a partir de dicha región. Las evidencias bioquímicas obtenidas en el presente estudio permiten concluir que se producen cambios en los espermatozoides de la lagartija Sceloporus siniferus que podrían considerarse como un proceso de maduración espermática epididimaria. La maduración espermática epididimaria es el proceso de los espermatozoides de mamíferos, en el que adquieren su capacidad de fertilizar al óvulo después de su tránsito por el epidídimo. Este tránsito no es pasivo, los espermatozoides sufren cambios morfofisiológicos y bioquímicos, que son responsables de la adquisición de las características necesarias para fertilizar. Durante muchas décadas se consideró que en los reptiles el proceso de maduración espermática epididimaria no se llevaba a cabo. Existen trabajos muy puntuales en lagartijas, donde se encontró que, en algunas de ellas, la maduración parece ocurrir y puede ser determinante para que el espermatozoide fertilice. En este trabajo se utilizó como modelo a la lagartija ovípara Sceloporus siniferus (Cope, 1870), o lagartija espinosa, del orden Squamata, familia Phrynosomatidae. Esta presenta un patrón reproductivo estacional de marzo a julio. Los cambios que ocurren en los espermatozoides durante el tránsito por el epidídimo de esta lagartija no se han descrito, por lo que, en este trabajo se estudiaron los cambios en la fosforilación de los residuos de tirosina de las proteínas y en la distribución de los carbohidratos de la membrana de los espermatozoides de S. siniferus durante su tránsito epididimario, para determinar su posible relación el proceso de maduración espermática epididimaria. Debido a la poca existencia de investigaciones realizadas en la especie, para determinar el momento exacto de presencia de espermatozoides, fue necesario capturar organismos mensualmente. Se observó que, los testículos y epidídimos de S. siniferus incrementan su tamaño debido a la presencia de espermatozoides de abril a septiembre y de mayo a septiembre respectivamente.

Las nanopartículas de oro (AuNP) juegan un papel importante contra el cáncer de mama al servir como un excelente marcador de diagnóstico temprano, transportador de quimiofármacos y y regulador de la expresión de diferentes genes. Por lo cual comprender la interacción de las AuNP con la superficie celular y las modificaciones en sus propiedades biomecánicas de la membrana plasmática de las células cancerosas es esencial para el desarrollo de un eficiente sistema liberador de fármacos. En este estudio se empleó la Microscopia de Fuerza Atómica (AFM por sus siglas en inglés) para evaluar los cambios que suceden en la superficie de la membrana plasmática de células de carcinoma mamario humano MCF-7 por efecto de la incorporación de AuNP desnudas de 20 nm de diámetro y la Microscopía Confocal de Barrido Laser (CLSM por sus siglas en inglés) para monitorear la distribución intracelular de dichas nanopartículas. Los resultados demostraron que las células MCF-7 incubadas con AuNP a una concentración subletal de 80 µg/mL (concentración máxima que mostró efectos sobre la morfología celular sin llegar a ocasionar la muerte de las mismas, esto con base a los datos obtenidos en el análisis de viabilidad) a diferentes tiempos de exposición, mostraron incremento en la rugosidad superficial, mientras que las células incubadas solo con el vehículo (agua ultrapura) no mostraron cambios significativos en la rugosidad. Los efectos sobre esta propiedad biomecánica de la membrana plasmática se observaron con mayor intensidad a las 12 h de incubación. Por otra parte, la CMLS mostró la localización de las AuNP conformadas en conglomerados (clústeres) en el interior celular mediante el análisis espectral determinando que las nanopartículas emiten señal fluorescente a 623 nm de longitud de onda. A través de estos datos del análisis espectral fue posible monitorear la distribución intracelular de las AuNP mostrando que a las 6 h se encontraban dispersas en el citoplasma mientras que para las 12 h se localizaron en la periferia nuclear y para las 24 h provoca desestabilidad del núcleo. El análisis de Z-stak mostró que a partir de las 6 h varios conglomerados de AuNP lograron internalizarse en el núcleo lo cual sugiere la acumulación después de las 24 h de exposición provocando daño irreversible del organelo. Basados en estos resultados se concluyo que los cambios en la rugosidad de la membrana plasmática de la células cancerosas se asocian a la incorporación de las AuNP a través de los procesos de endocitosis y exocitosis para la excreción.

La comparación de los índices de VFC entre grupos se realizó mediante las pruebas estadísticas de ANOVA y Kruskal Wallis por contrastes y considerando la edad materna como cofactor.Los resultados en el grupo de embarazadas con las patologías estudiadas y sin tratar con metformina, respecto al grupo control, mostraron diferencias estadísticamente significativas (p

En la inmunidad adaptativa contra Toxoplasma gondii el IFN-g juega un papel importante en la inducción de una respuesta efectora contra los taquizoitos, ya que activa a células tales como macrófagos, neutrófilos y NK; además promueve la producción de anticuerpos de la clase IgG1 e IgG3 por los linfocitos B; éstos a su vez, activan la vía clásica del complemento y funcionan como opsoninas a través de los receptores para el Fc de la IgG (FcgRs). Por otro lado, las cuatro subclases de IgG, principalmente la IgG1, atraviesan la placenta gracias al receptor neonatal, o FcRn, con un aumento exponencial a partir de la mitad de la gestación. Por lo anterior, se esperaría que la transmisión vertical de T. gondii fuera menor al final del embarazo que al principio; sin embargo, es más frecuente durante el último trimestre. Más aun, en un estudio previo encontramos anticuerpos IgG1 específicos más frecuentemente entre madres de recién nacidos con problemas clínicos, que en las madres de aquellos que nacieron asintomáticos. Una explicación a esto es que el recubrimiento de los taquizoitos por los anticuerpos IgG1 estén facilitando la entrada al sinciciotrofoblasto y a las células endoteliales de los vasos fetales en las vellosidades coriónicas, a través del FcRn, favoreciendo la transmisión congénita, con mayor probabilidad de desarrollo de problemas clínicos en etapas más tempranas. Con el fin de analizar lo anterior, se utilizó un modelo de invasión in vitro usando células endoteliales de cordón umbilical humano (HUVEC) y de microvasculatura (línea HMEC-1) y dos cepas de T. gondii, RH (virulenta) y ME49 (no virulenta), y se determinó el efecto de la sensibilización de los taquizoitos con anticuerpos IgG1 específicos, sobre su entrada a las células, mediante microscopía de luz en laminillas teñidas con Wright. Se observó que la cepa ME49 invadió más a las células endoteliales que la cepa RH, contrario a lo que se esperaba, y que las células de la línea HMEC-1 fueron más susceptibles a la invasión que las HUVEC. Se demostró que el recubrimiento de los taquizoitos por anticuerpos opsonizantes (IgG1) anti-Toxoplasma favorece la internalización a las células endoteliales, en comparación con el tratamiento con un suero negativo. Los resultados apoyan la hipótesis de que la unión de los anticuerpos a la superficie del taquizoito favorece la entrada a las células endoteliales, lo que podría sugerir un mecanismo de la transmisión de T. gondii de la madre al hijo durante le gestación.

En las hembras hámster Sirio Dorado (Mesocricetus auratus) el número promedio de ovocitos ovulados es de 10, los cuales tienen una vida fértil máxima de 13 horas. En hembras jóvenes (de 2 a 5 meses de edad), los ovocitos ovulados permanecen alrededor de 96 horas en el oviducto, donde envejecen y comienzan un proceso degenerativo, luego pasan al útero y de ahí son expulsados rápidamente al exterior por la vagina durante la micción. Sin embargo, en las hembras nulíparas adultas (más de 8 meses de edad) se ha observado en los oviductos la presencia de ovocitos degenerados (OD) provenientes de ovulaciones previas, simultáneamente a la de los ovocitos viables (OV) producto de la ovulación reciente; sin que se conozca el significado o efecto fisiológico de este fenómeno. Por ello, en este estudio se investigó si los OD pueden colaborar en la atracción de los espermatozoides. Para ello se utilizó un sistema de microcanal conteniendo medio HTF, que consistió en un dispositivo conformado por un pozo de entrada y dos pozos de salida conectados entre sí por microcanales formando una “Y”, emulando el aparato reproductor femenino. En los pozos de salida (A o B) se colocaron de manera independiente 4 OD, o 4 OV, o sin ovocitos, y se incubaron durante 2 horas. Posteriormente se colocaron 140,000 espermatozoides epididimarios capacitados en el pozo de entrada (C) y se volvió a incubar. A los 15 minutos se contaron los espermatozoides que migraron hacia los pozos A y B, encontrando que los que tienen mayor atracción son los ovocitos degenerados, seguidos de los viables (124 vs 113 espermatozoides, respectivamente, P>0.05) y ambos fueron mayores que los migrados donde no había ovocitos (30% vs.11%, P>0.05, respectivamente). Se concluye que la migración espermática inducida por los OD de hembras hámster adultas, puede contribuir en la fecundación.

El objetivo de esta investigación fue determinar indicadores de capacitación y reacción acrosomal en espermatozoides de halcón Harris (Parabuteo unicinctus) en eyaculados recién obtenidos y criopreservados con dimetilsulfóxido (DMSO) y Glicerol, así como los parámetros de viabilidad, movilidad y morfología en cada tratamiento. Se utilizó membrana perivitelina (MPV) heteróloga como inductor de la reacción acrosomal; se empleó clortetraciclina (CTC) para evaluar la actividad de Ca2+ membranal y el marcaje con la lectina Wheat Germ Aglutinin conjugada con Isotiocionato de Fluorosceína (WGA-FICT) para determinar la presencia y distribución de N-Acetil-Glucosamina y ácido siálico en relación a la capacidad fertilizante. Se determinaron 3 patrones de fluorescencia y su proporción en cada tratamiento, cada patrón se asoció a la capacitación espermática y reacción acrosomal. La movilidad espermática en fresco fue de 77.2% lo que fue mayor (P0.05), entre los eyaculados en fresco y post criopreservación.

El cerebro humano contiene aproximadamente 100 billones de neuronas y 10 veces más el número de células gliales; tal número resulta de una compleja red molecular de regulación durante la proliferación de las células pluripotentes y el adecuado desarrollo hasta establecer los circuitos funcionales encargados de controlar las funciones más importantes para mantener la homeostasis del organismo, tales como la ingesta de alimento, el comportamiento sexual y la termoregulacion, entre otros. La complejidad del Sistema nervioso asi como la gran diversidad de tipos celulares surge de la combinación de programas genéticos llevados a cabo por factores de transcripción en un grupo de Células Troncales Neurales (CTN). Por otro lado, el Sistema Nervioso Central (SNC) de mamíferos presenta una alta expresión de microRNAs, los cuales funcionan como importantes reguladores post transcripcionales de la expresión génica en procesos como, proliferación, adquisición y mantenimiento de un fenotipo dado, entre muchos otros. En este trabajo nos centramos en la regulación de un microRNA que se expresa de manera espacio-temporal en diferentes áreas del SNC, específicamente en el hipotálamo; el microRNA-7, que a su vez presenta un perfil de expresión diferencial en etapas cruciales de la neurogénesis hipotalámica y sugiere una participación en la diferenciación de las poblaciones neuronales. Por otro lado, la expresión de este microRNA al darse en etapas tempranas del desarrollo sugiere que puede estar rio abajo de señales neurogénicas, como son las neurotrofinas BDNF y NGF así como el factor de transcripción CREB.

El grupo 2B: se incluyeron 204 presuntos cigotos, las mórulas desarrolladas se vitrificaron por el mismo periodo del grupo anterior y se cultivaron por 72 horas para su desarrollo a blastocisto (día 8 post-inseminación) y por 48 horas más para determinar el porcentaje de eclosión. Los resultados fueron los siguientes: En el grupo de mórulas sin vitrificar, la división embrionaria fue de 73.6%, alcanzando un porcentaje de blastocistos de 32.8% y una relación blastocistos/mórulas de 23/36. La viabilidad de las mórulas desvitrificadas fue de 38.7%, mientras que en las mórulas cultivadas post-vitrificación el 27.9% alcanzó el estadio de blastocisto. Finalmente el porcentaje de eclosión de las mórulas que desarrollaron a blastocistos fue de 47.3%. El desarrollo embrionario obtenido en las mórulas no vitrificadas fue acorde a lo reportado en la literatura, demostrando que el protocolo de PIV de embriones es capaz de proveer embriones en estadio de mórula y blastocisto. La BES resultó ser un recipiente adecuado al conservar la viabilidad, recuperación y el potencial de desarrollo embrionario, con la ventaja de ser un recipiente económico y de fácil acceso. El presente trabajo es el primer reporte de mórulas PIV, vitrificadas en BES llegando a obtener la eclosión de los blastocistos. Palabras clave: Fertilización in vitro, mórula, bovinos, vitrificación, etilenglicol, trehalosa, pajilla con borde biselado (BES). Este estudio fue diseñado para evaluar la eficiencia de la vitrificación de embriones bovinos en estadio de mórula, utilizando etilenglicol (EG) y trehalosa en la pajilla con borde biselado (beveled edge straw; BES) y sus efectos en la viabilidad y el potencial de desarrollo post-desvitrificación. Para la producción in vitro (PIV) de embriones, los ovarios se colectaron en un rastro y se transportaron al laboratorio en solución salina al 0.9%, se puncionaron los folículos de 2-8 mm de diámetro para la obtención de los complejos ovocitos células del cúmulo (COCs), obteniendo un total de 678 COCs, los cuales fueron sometidos a la maduración in vitro (MIV) en el medio TCM-199 por 24 h; tomando aleatoriamente 84 ovocitos para la evaluación de la MIV mediante tinción de Hoechst. La fertilización in vitro (FIV) se llevó a cabo en el medio mTBM con semen descongelado, co-incubando los gametos por 18 h, finalizado este periodo se tomaron aleatoriamente 78 de ellos para evaluar la FIV. Los restantes 516 supuestos cigotos se dividieron en dos grupos: Grupo1: embriones sin vitrificar y desarrollados hasta mórulas en el día 5 post-inseminación, que fueron desarrolladas hasta blastocisto (grupo control). Grupo 2: se incluyeron un total de 421 presuntos cigotos que se dividieron en: grupo 2A: 217 presuntos cigotos para su desarrollo, las mórulas obtenidas se mantuvieron vitrificadas durante 15 días, posteriormente se desvitrificaron para evaluar la viabilidad.

Resultados. Se encontraron diferencias significativas entre las medias de ambos grupos para FA y BBB, evidenciando una mejor recuperación después de una LTME para el grupo implante con respecto al grupo control. En cuanto a la variable ADC se tuvieron diferencias significativas, con respecto a la semana de evaluación, entre medias de los grupos. También se encontró significancia estadística en la correlación de las variables ADC y FA para todo el conjunto de datos. Se muestra que cuando aumenta el valor de la variable ADC, disminuye el valor de FA. El estudio morfológico in-vivo, por Resonancia Magnética, permitió apreciar ligeras diferencias fisiológicas entre ambos grupos; entre ellas la formación de quistes menores para el grupo implante, así como mejor preservación de la arquitectura de la zona lesionada. Estas apreciaciones se corroboraron con el estudio morfométrico; el porcentaje de quistes fue mayor para el grupo control, mientras que el porcentaje de tejido preservado, después de la semana de implante fue mayor para el grupo con implante de polímero. Conclusiones. Este trabajo muestra la viabilidad del uso de PPyI como tratamiento de LTME en fase crónica. Además, se presentan datos que podrían ampliar el uso de variables cuantificables de MRI (FA, ADC y porcentaje de tejido preservado) como una herramienta complementaria en el diagnóstico de la lesión previamente mencionada. Es importante continuar este tipo de estudios ya que amplían las opciones de evaluación en LTME, y ofrecen propuestas de mejora para el tratamiento de estas lesiones. Introducción. En diversos estudios se ha mostrado un eficiente uso del implante de polipirrol dopado con yodo (PPyI), sintetizado por plasma, para la recuperación funcional, en sujetos experimentales, como tratamiento después de una Lesión Traumática de la Médula Espinal (LTME). Este trabajo muestra los resultados de la aplicación del implante de polímero PPyI como tratamiento después de una LTME, en fase crónica, mediante Imagenología de Resonancia Magnética (MRI). Objetivo. Estudiar el efecto del polímero polipirrol dopado con yodo en un modelo de lesión crónica de médula espinal a la altura de la novena vértebra torácica en sujetos experimentales, ratas, por medio de imágenes de resonancia magnética. Materiales y métodos. Se ocuparon 12 ratas, Long Evans, hembras adultas, con peso entre los 215-240g, dividas en 2 grupos, implante y control. Se provocó una LTME a la altura de la 9ª vertebra torácica, colocando PPyI al grupo implante, 4 semanas después de la lesión. Semanalmente, con dos evaluadores en ciego, se midió la recuperación de la función locomotora, bajo la escala de evaluación Basso, Beattie y Bresnahan (BBB). Se realizó un estudio longitudinal de MRI 7T después de la lesión. Los valores de Fracción de Anisotropía (FA) y Coeficiente de Difusión Aparente (ADC) se obtuvieron por procesamiento en el software DSI Studio. Los valores del porcentaje de tejido preservado se obtuvieron por procesamiento en el software Amira. Se realizaron pruebas estadísticas a las medias de las variables dependientes (FA, ADC, BBB y porcentaje de tejido preservado) del tiempo y tratamiento ocupado, por medio de ANOVA de muestras repetidas (p

Encontramos que el Cd en una dosis de 0.25 mg/Kg de CdCl2 por vía IP, del día 01 a 56 de vida, causa una disminución de los parámetros de determinación espermática (concentración y vitalidad), y afecta a la maduración espermática de la rata Wistar, pues se observó modificaciones en la distribución y composición de los carbohidratos N-acetilglucosamina y/o ácido siálico, manosa y fucosa, incrementó la fosforilación de residuos de tirosina en proteínas, y disminuyeron los porcentajes de compactación e integridad del DNA en los espermatozoides de las tres regiones del epidídimo de sujetos con exposición a este metal. De tal forma, que la fertilidad en el macho puede verse afectada por el Cd, y así contribuir con la infertilidad de etiología idiopática y ser la causa de la disminución en la concepción de la pareja. La infertilidad en varones es una problemática que ha incrementado, principalmente por alteraciones patológicas. Sin embargo, 34 a 40 % de los casos, se deben a causas de infertilidad idiopática, relacionadas con la exposición a agentes tóxicos en el ambiente como el cadmio (Cd), un metal pesado derivado de las actividades antropogénicas. El Cd está ligado con una disminución en los parámetros de calidad espermática en eyaculados de humanos y roedores, aunque a la fecha no está descrito sí estos efectos se asocian con una alteración en la funcionalidad del epidídimo, en el que los espermatozoides maduran, mediante una serie ordenada de cambios fisiológicos, morfológicos y bioquímicos, que les brindan las características del potencial fertilizante, dentro de ellos se puede mencionar: cambios en la glicosilación de la membrana plasmática, que involucra carbohidratos como: N-acetilglucosamina, ácido siálico, manosa y fucosa, importantes para el reconocimiento e interacción entre gametos, y posterior fertilización del ovocito, así como la fosforilación de residuos de tirosina en proteínas de espermatozoides, que es la base molecular para la adquisición de la movilidad espermática, aunado al mantenimiento de la integridad y compactación del DNA espermático. Por lo que el objetivo de este trabajo fue analizar el efecto del Cd sobre indicadores de la maduración espermática epididimaria en la rata Wistar.

RESUMEN El enlace de turno es una actividad cotidiana que realiza el personal de enfermería, la cual consiste en la transferencia de la responsabilidad del cuidado del paciente a otro profesional para la continuidad de los cuidados, es importante mencionar que las causas principales para que esta actividad se lleve a cabo de manera correcta es la comunicación efectiva y el apego a los indicadores de calidad. Objetivo: Evaluar al personal de enfermería durante el enlace de turno y la continuidad del cuidado en un hospital de segundo nivel, durante el periodo de febrero a mayo del 2019. Material y Métodos: Es un estudio cuantitativo; observacional, descriptivo y longitudinal; la muestra fue de 28 enfermeros y enfermeras del servicio de hospitalización, de medicina interna, cirugía y traumatología de todos los turnos del Hospital General de Huitzuco Guerrero. Se utilizó el instrumento validado por Yañez & Zarate, 2016 “Evaluación de la calidad del proceso de enlace de turno de enfermería”, con 45 ítems, de respuesta dicotómica y se analizó a través del programa SPSS Vs-19. Las limitantes para el desarrollo del enlace de turno son: falta de apego a la higiene de manos, la no verificación de las soluciones I.V., así como un déficit en los informes del comportamiento del paciente durante el turno anterior incluyendo los indicadores de calidad. Además la falta de eficiencia en la preparación del enlace de turno y la poca optimización del Talento Humano. Mediante el presente estudio se comprueba que los factores incidentes interfieren en el enlace de turno por el personal de enfermería, así mismo la comunicación efectiva, la optimización de recursos y la organización del mismo son fundamentales para lograr un apego y garantizar la continuidad de los cuidados. ABSTRACT The shift link is a daily activity carried out by the nursing staff, which consists in the transfer of the responsibility of patient care to another professional for the continuity of care, it is frequently important the main causes for this activity to take a carried out correctly is effective communication and adherence to quality indicators. Objective: To evaluate the nursing staff during the shift connection and the continuity of care in a second level hospital, during the period from February to May 2019. Material and Methods: It is a quantitative study; observational, descriptive and longitudinal; The sample consisted of 28 nurses from the hospitalization, internal medicine, surgery and traumatology service of all shifts of the Huitzuco Guerrero General Hospital. The instrument validated by Yañez & Zarate, 2016 “Evaluation of the quality of the nursing shift link process” was used, with 45 items, of dichotomous response and analyzed through the SPSS Vs-19 program. The limitations for the development of the shift link are: lack of adherence to hand hygiene, non-verification of IV solutions, as well as a deficit in the reports of patient behavior during the previous shift including quality indicators. In addition the lack of efficiency in the preparation of the shift link and poor optimization of Human Talent. Through this study, it is verified that the incident factors interfere in the liaison of the nursing staff, as well as effective communication, optimization of resources and the organization of the same are essential to achieve an attachment and ensure continuity of care.

El presente documento no cuenta con resumen.

Introducción: El pie diabético (PD) es una complicación importante en la población con diabetes mellitus (DM), la cual conlleva a la amputación de miembros. Actualmente, el PD es diagnosticado por medio de la evaluación física de los pies utilizando principalmente la escala de Wagner; sin embargo, es necesario la presencia de lesiones visibles para el diagóstico de PD, por lo que representa un diagnóstico tardío, lo que está asociado al alto índice de amputaciones. Es por ello que es de creciente interés la búsqueda de biomarcadores en fluidos biológicos, como muestras sanguíneas, que permita el diagnóstico oportuno del PD, lo cual puede ser obtenido por medio de análisis metabolómicos. Objetivo general: Identificar biomarcadores para el diagnóstico temprano y de progresión del PD. Métodos: El diseño del estudio fue observacional, transversal y comparativo. Se reclutaron personas aparentemente sanas y con DM tipo 2, a las cuales se les realizó el diagnóstico de PD de acuerdo a la escala de Wagner (0-5). Se obtuvieron muestras sanguíneas para el análisis bioquímico y el análisis metabolómico de fases polares en un equipo de UPLC-QTOF MSE. Se realizó el pre-procesamietno de datos (selección de aductos y alineamiento, selección y deconvolución de picos) mediante el software Progenesis QI. Posteriormente, los datos fueron sometidos a un Análisis Discriminante de Cuadrados Mínimos Parciales (PLS-DA) utlizando el paquete MixOmics del software R. Resultados: Se reclutaron 30 voluntarios sanos, 11 con PD con escala de Wagner 0 (sin lesiones visibles) y 58 con PD con escala de Wagner 1-5. El análisis metabolómico seguido del análisis multivariado permitió una ligera discriminación de los individuos en tres grandes grupos: sanos, DM tipo 2 y PD (estadios 1, 2 y 3). Sin embargo, no se observaron diferencias en los perfiles metabolómicos entre los estadios 1, 2 y 3 de PD. Se identificaron 10 metabolitos que presentaron el mayor impacto en la discriminación de grupos observada en el PLS-DA, los cuales incluyeron dos triglicéridos, siete fosfolípidos y un compuesto sin identificar. Conclusión: El análisis metabolómico indicó que el desarrollo de DM tipo 2 altera metabolitos involucrados principalmente en el metabolismo de lípidos, los cuales se encuentran alterados en mayor medida cuando el individuo desarrolla PD; sin embargo, no se observa una relación con respecto a la progresión del PD.