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Brazilian spotted fever (BSF) is a rickettsiosis very similar to the Rocky Mountain spotted fever also caused by Rickettsia rickettsii, which is sustained in nature in a cycle involving vectors and mammals [1]. The state of Rio de Janeiro, with one of the highest population densities in Brazil, has one of the highest numbers of BSF cases. However, information about the epidemiology of this disease is lacking. The objectives of the present work were to analyse Rickettsia spp. in the host and vectors collected in municipalities of the Vale do Paraiba, where BSF fatal cases were recently recorded.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o perfil microbiológico e celular do leite no período lactante e de involução ativa de ovelhas da raça Santa Inês. Foram avaliadas amostras lácteas de 12 ovelhas durante estes distintos períodos. Realizou-se o exame físico da mama, sendo as amostras lácteas submetidas à contagem de células somáticas (CCS), ao California Mastitis Test (CMT), ao exame microbiológico e aos testes de sensibilidade in vitro dos patógenos encontrados. Foram observados maiores escores do exame físico, CCS, CMT durante o período de involução ativa, além de uma alta persistência da infecção durante estes períodos. O período de involução ativa não se mostrou como um momento de alta susceptilidade. Os estafilococos coagulase negativa representaram o único gênero isolado das glândulas infectadas. Uma alta sensibilidade dos agentes etiológicos envolvidos frente aos diferentes antimicrobianos in vitro foi também observada. The aim was to evaluate and compare the microbiological and cellular profile of the milk of Santa Ines ewes during the lactation period and the active involution. Milk samples were analyzed from 12 ewes during these distinct periods. Clinical examination of the mammary gland, somatic cell count (SCC), California Mastitis Test (CMT), bacteriologic screening and sensibility of the pathogens in vitro were performed. Most alterations were observed in the active involution period. SCC and CMT were higher in this same period. Besides this, a high persistency of infection occurred. The active involution period did not show high susceptibility. Coagulase-negative staphylococci were the only isolated bacteria. A high antimicrobial sensibility of these pathogens was also encountered.

Estudou-se quantitativamente e qualitativamente a citologia, os teores de imunoglobulinas, e a atividade bactericida dos fagócitos do colostro bovino contra a Escherichia coli enterotoxigênica (ECET), analisando-se a influência da opsonização prévia destas células. Para tal finalidade foram utilizadas 53 vacas da raça Holandesa, das quais realizou-se a colheita de um total 212 amostras de colostro obtidas antes da primeira e segunda ordenha. As amostras positivas (n=41) ao exame bacteriológico do leite foram excluídas desta pesquisa. Para a análise citológica quantitativa e qualitativa do colostro, foram utilizadas as técnicas de microscopia direta e citocentrifugação, respectivamente. As dosagens das imunoglobulinas (IgG, IgM e IgA) foram realizadas por meio da técnica de imunodifusão radial, utilizando-se Kits comerciais. Para a avaliação da atividade bactericida indireta dos fagócitos e verificação da influência da opsonização prévia da ECET, foram realizados os seguintes ensaios: utilizando somente suspensão de fagócitos mononucleares e polimorfonucleares em meio de cultura (Grupo Controle - C); suspensão de fagócitos mononucleares e polimorfonucleares adicionados a suspensão de ECET não opsonizada (Grupo NO); suspensão de fagócitos mononucleares e polimorfonucleares adicionados a suspensão de ECET previamente opsonizada com 10% de sobrenadante de colostro bovino delipidado (Grupo O). A atividade bactericida indireta dos fagócitos foi mensurada por meio da quantidade de nmoles de peróxido de hidrogênio liberado por estas células, nos ensaios C, NO e O. Após as avaliações dos resultados das determinações realizadas, conclui-se que: (1) o colostro bovino de segunda ordenha apresenta maior quantidade de células/mL, que aquele de primeira ordenha; (2) a predominância celular demonstrada com o uso das técnicas de microscopia direta e de citocentrifugação foi de células mononucleares; (3) colostro bovino de segunda ordenha possui maior quantidade de neutrófilos polimorfonucleares, quando comparada àquela da primeira ordenha, utilizando as técnicas de microscópica direta e de citocentrifugação, para a contagem dos tipos leucocitários; (4) os tipos celulares predominantes no colostro bovino de primeira e segunda ordenha foram macrófagos/células epiteliais, seguidos por linfócitos, neutrófilos e eosinófilos, respectivamente, utilizando a técnica de citocentrifugação para diferenciação celular; (5) o colostro bovino de primeira ordenha possui maiores teores de imunoglobulinas das classes G e M, que o da segunda ordenha, havendo predomínio da IgG, sobre a IgM e IgA independente da ordem de ordenha. (6) os fagócitos do colostro bovino de primeira ordenha apresentaram maior atividade celular avaliada pela liberação de peróxido de hidrogênio, que os da segunda ordenha; (7) a estimulação antigênica com ECET não foi suficiente para aumentar a atividade bactericida dos fagócitos do colostro bovino; (8) a opsonização da ECET com soro colostral não determinou diferenças significativas na atividade bactericida dos fagócitos do colostro bovino, mensurada pela quantidade de peróxido de hidrogênio liberado por estas células; (9) existe correlação positiva entre os teores de imunoglobulinas da classe M e a quantidade de peróxido de hidrogênio liberado pelos fagócitos do colostro bovino; (10) o comportamento quantitativo observado para as imunoglobulinas e células do colostro bovino, considerando a ordem das ordenhas, sugere que os anticorpos teriam função prioritária na imunidade do neonato, enquanto o aumento de neutrófilos estaria voltado aparentemente para a proteção da glândula mamária. Bovine collostrum citology, immunoglobulin content and bactericidal activity of phagocytes against enterotoxigenic Escherichia coli were studied qualitatively and quantitatively, analyzing the influence of previous opsonization of the bacterium. In order to achieve this aim, 53 Holstein cows were used to obtain 212 collostrum samples before the first and second milkings. Samples positive (n=41) in the bacteriological examination of milk were excluded from the trial. Direct microscopy and cytocentrifugation were used in the quantitative and qualitative cytological analysis of collostrum, respectively. Immunoglobulin (IgG, IgM and IgA) contents were determined by means of radial immunodiffusion using commercial kits. Indirect bactericidal activity of phagocytes and assessment of the influence of ETEC previous opsonization were carried out as follows: using only a suspension of mononuclear and polymorphonuclear phagocytes in culture medium (Control group - C); suspension of mononuclear and polymorphonuclear phagocytes added to a suspension of non-opsonized ETEC (NO group); suspension of mononuclear and polymorphonuclear phagocytes added to an ETEC suspension previously opsonized with 10% of supernatant of delipidated bovine collostrum (O group). Indirect bactericidal activity of phagocytes was measured by means of the amount of hydrogen peroxide nmoles released by these cells in assays C, NO and O. After results were evaluated, it was concluded that: (1) bovine collostrum obtained in the second milking showed more cells/mL than first milking collostrum; (2) the predominance of mononuclear cells was determined by both direct microscopy and cytocentrifugation; (3) bovine collostrum obtained in the second milking showed greater quantity of polymorphonuclear neutrophils than that of the first milking, as determined in cell type counts by direct microscopy and cytocentrifugation; (4) cell types predominating in bovine collostrum of the first and second milking were macrophages / epithelial cells, followed by lymphocytes, neutrophils and eosinophils, respectively, using cytocentrifugation for cell differentiation; (5) first milking bovine collostrum showed greater levels of immunoglobulins G and M than that of the second milking, with a predominance of IgG compared with IgM and IgA, no matter the milking order; (6) phagocytes in first milking collostrum showed greater cell activity than those in the second milking collostrum, as evaluated by hydrogen peroxide release; (7) antigenic stimulation of ETEC was not enough to increase bactericidal activity of phagocytes in bovine collostrum; (8) ETEC opsonization with collostral serum did not lead to significant differences in bactericidal activity of bovine collostrum phagocytes, as measured by the amount of hydrogen peroxide released by these cells; (9) there was a positive correlation between the contents of immunoglobulin M and the amount of hydrogen peroxide released by phagocytes in bovine collostrum; (10) quantitative behavior observed for immunoglobulins and cells of bovine collostrum considering the milking order, suggest that antibodies would have a essential function in neonate immunity, whereas the increase in neutrophils would apparently be linked to mammary gland protection.

Foi avaliado o perfil hematológico de bezerros da raça Holandesa durante o primeiro mês de vida. Foram colhidas 208 amostras de sangue total de 26 bezerras(os) do nascimento aos trinta dias de vida. Os valores hematológicos foram determinados por sistema automatizado associado à contagem diferencial dos leucócitos por metodologia manual. Foram detectadas variações nos componentes do hemograma do nascimento aos 30 dias de vida, exceto para os teores de hemoglobina (Hb) e concentração hemoglobínica corpuscular média (CHCM). Os maiores valores do hematócrito, volume corpuscular médio (VCM) e hemoglobina corpuscular média (HCM) foram observados ao nascimento, com decréscimo nos momentos subsequentes. Nos primeiros dias de vida foi observada leucocitose por neutrofilia e eosinopenia e com o avançar da idade houve aumento gradativo dos linfócitos. Com base nos resultados obtidos pode-se concluir que a adaptação dos bezerros no período pós-neonatal foi caracterizada por variações nos componentes do hemograma, observando-se hemoconcentração e padrão leucocitário compatível com resposta aos glicocorticoides até o 4º dia de vida, responsável pela relação neutrófilo-linfócito > 1,0 ao nascimento. The aim of this study was to evaluate the hematological profile of Holstein calves during the first month of life. Blood samples were harvested (n = 208) from 26 calves, from birth until 30 days of life. Hematologic values were determined by an automatic system associated with differential leukocyte count by manual methods. Variations in the erythrogram components were detected from birth up to the 30th day of life, except for hemoglobin (Hb) concentration and Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration (MCHC). At birth, higher values were observed for hematocrit, Mean Corpuscular Volume (MCV) and Mean Corpuscular Hemoglobin (MCH) that decreased in subsequent moments. During the first days of life, leukocytosis was found due to neutrophilia and eosinopenia. A gradual increase of lymphocytes with the increase of age was also observed. Finally, the present research showed that the first month of life is a hematological adaptation period. Based on the results, it detected that blood component variations, characterized by hemoconcentration and leukocyte prolife compatible with glucocorticoids response up to the 4th day of life, were responsible for neutrophil lymphocyte ratio > 1.0 at birth.

A influencia do estagio de lactacao na composicao do leite de cabras foi estudada em 27 animais lactantes da raca Saanen durante oito meses, colhendo-se o total de 304 amostras. Foram selecionados e mantidos, no decorrer do trabalho, animais saudaveis, sem qualquer alteracao no exame fisico da glândula mamaria e cujo leite manteve-se negativo ao exame microbiologico. Avaliaram-se os teores de gordura, proteina, lactose e solidos totais. A concentracao de solidos totais, gordura e lactose declinaram durante a lactacao, porem os teores de proteina foram praticamente estaveis durante o periodo estudado. Os resultados obtidos permitem concluir que a constituicao do leite de cabras sofreu influencia do estagio de lactacao.

RESUMO Esta pesquisa avaliou a dinâmica dos leucócitos e das subpopulações de linfócitos em vacas Holandesas soropositivas para o BLV no período de transição. Amostras de sangue (n=72) provenientes de 12 vacas foram coletadas entre as semanas -2 e +3 para a realização do leucograma, imunofenotipagem, dosagem de cortisol e haptoglobina (Hp). O perfil leucocitário foi caracterizado por leucocitose, neutrofilia, monocitose e eosinopenia próximo ao parto. Linfocitose e elevada proporção de linfócitos B CD21+ foram achados constantes entre as semanas -2 e +3; assim, as vacas foram testadas e confirmadas soropositivas para o BLV. Os valores das subpopulações de linfócitos T apresentaram-se baixos durante o período de transição, observando-se dois picos máximos que coincidiram com as elevações nas concentrações de cortisol no parto (2,11µg/dL) e semana +3 (1,97µg/dL). Hp apresentou aumento crescente de -2 (166µg/mL) a +3 (576µg/mL), provavelmente associada à elevada taxa de infecções uterinas observadas nas semanas +2 e +3. As vacas soropositivas para o BLV apresentaram leucograma de estresse próximo ao parto, exceto para linfócitos. A linfocitose e as elevadas proporções de células B CD21+, associadas com as baixas proporções de células T, podem ser indicativo de imunossupressão e predisposição aos processos inflamatórios no período pós-parto. ABSTRACT This research evaluated the dynamics of leukocytes and lymphocytes subsets in seropositive Holstein cows for BLV during the transition period. Blood samples (n=72) from 12 cows were harvested from week -2 up to week +3 to perform leukogram, immunophenotyping, cortisol and haptoglobin (Hp). Leukocytes pattern was characterized by leukocytosis, neutrophilia, monocytosis and eosinopenia around calving. Lymphocytosis and high proportions of B cells CD21+ were a constant finding between week -2 and +3, thus cows were tested and confirmed seropositive for BLV. The values of T lymphocytes subsets were low during the transition period, observing two peaks that coincided with high levels of cortisol at delivery (2.11µg/dL) and week +3 (1.97µg/dL). Hp had gradual increase from week -2 (166µg/mL) until week +3 (576g/mL) probably due to high rate of uterine infection detected between week +2 and +3. The seropositive cows for BLV presented stress leukogram around delivery, except for lymphocytes. Lymphocytosis and the high proportions of B cells, associated with the low proportions of T lymphocytes, can be indicative of immunosuppression and predisposition to the inflammatory process observed in the post-partum period.

The hematological and immunological development of calves from birth to 6 months of age was performed by hemogram and cellular phenotype. Ten male Holstein calves were assessed in 13 moments: before colostrum intake (D0), every 2 days until the 10th day of life (D2 to D10), at the 15th day after birth (D15), and then monthly up to 6 months (D180). Calves presented hemoconcentration on day (D) 0 and showed a gradual decrease in hematimetric rates until D180. The inversion of the neutrophilic for lymphocytic profile was observed on D4. The percentage of CD3+ cells on D10 was higher than D30 up to D180. The number of CD4+ and CD8+ cells did not change between time points. The number of CD21+ lymphocytes was significantly higher at early time points of D0 up to D15, compared on D30 until D150. In conclusion, the neonatal period was marked by stress leukogram in the first 4 days, and low number of B lymphocytes. These might be risk factors for bacterial infections responsible for navel inflammation and diarrhea. The increase in the number of B cells from 30 days of age demonstrated that the calves were functional and able to generate an immune response. RESUMO O desenvolvimento hematológico e o imunológico de bezerros do nascimento aos seis meses de idade foram avaliados por meio hemograma e imunofenotipagem dos linfócitos. Para tanto, 10 bezerros machos Holandeses foram avaliados em 13 momentos: antes da ingestão do colostro (D0), a cada dois dias até o 10º dia (D2 a D10), 15º dia (D15) e, em seguida, mensalmente até seis meses de idade (D180). Os bezerros apresentaram hemoconcentração em D0 e decréscimo gradual dos índices hematimétricos até D180. A inversão do perfil neutrofílico para linfocítico foi observada em D4. Os valores de CD3+ (%) em D10 foram maiores que aqueles observados em D30 até D180. CD4+ e CD8+ não apresentaram alterações entre os momentos. Os linfócitos B CD21+ aumentaram significativamente a partir dos primeiros momentos D0 até D15, em comparação com os momentos subsequentes D30 até D150. Em conclusão, o período neonatal foi caracterizado pelo leucograma de estresse nos primeiros quatro dias e o baixo número de linfócitos B. Esses fatos podem ser considerados como fatores de risco para infecções bacterianas responsáveis pelas inflamações umbilicais e pela diarreia. Por outro lado, o aumento de células B após os 30 dias de vida demonstrou que os bezerros foram capazes de gerar uma resposta imune.

CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico O objetivo deste estudo foi avaliar o impacto de uma mistura comercial de óleos essenciais na dieta líquida na: 1) ingestão alimentar, desempenho, desenvolvimento corporal, células sanguíneas e metabólitos, fator de crescimento semelhante à insulina-1 (IGF-1), fermentação rumenal, escores fecais e respiratórios; e 2) digestibilidade, peso e histologia dos órgãos, expressão genética e proliferação de células de baço de bezerros leiteiros. As variáveis foram avaliadas durante a fase de aleitamento (4 – 60 d de idade) para machos e fêmeas, bem como efeitos residuais no pós desaleitamento (61 – 90 d de idade) nas fêmeas. Foram utilizados 45 bezerros recém-nascidos Holandês e Girolando, com peso corporal (PC) ao nascimento de 32,6 ± 4,9 kg. As unidades experimentais foram atribuídas a um tratamento controle (CON, n = 15 fêmeas, e n = 8 machos) ou ao tratamento de suplementação de uma mistura de óleos essenciais (MEO, n = 14 fêmeas, e n = 8 machos). O MEO foi suplementado no sucedâneo com 1 g/d/bezerro (Apex Calf, Adisseo, China). Durante o aleitamento, todos os bezerros receberam 5 L de sucedâneo/d reconstituídos a 15% de sólidos totais, água e concentrado à vontade. Após o desaleitamento, as fêmeas receberam 3 kg de concentrado/d, e silagem de milho à vontade. A ingestão de alimentos, os escores fecais e respiratórios foram avaliados diariamente. O PC foi mensurado a cada três dias, e o desenvolvimento corporal semanalmente. Foram coletadas amostras de sangue nos dias 0, 30 e 60 dias para a contagem total de células sanguíneas, semanalmente para determinar ß-hidroxibutirato, ureia e glicose, e quinzenalmente para IGF-1. Os parâmetros ruminais (pH, ácidos graxos voláteis, amônia-N e proporção acetato:propionato - C2:C3) foram medidos nos dias 14, 28, 42, 60, 74 e 90. A digestibilidade aparente total de nutrientes foi determinada entre 55 e 60 dias de idade. No dia 60 ± 1 os machos foram eutanasiados para avaliação do peso de órgãos, histologia, proliferação de células de baço e análise de expressão genética intestinal. Os dados foram analisados por meio de modelos lineares mistos utilizando o método REML no pacote nlme em R para variáveis contínuas, e testes não paramétrico para variáveis categóricas. Não houve diferenças na ingestão de alimentos, desempenho, desenvolvimento corporal e metabólitos sanguíneos para as fêmeas e machos. No entanto, a proporção de C2:C3 do grupo BEO foi maior em todas as fases (P = 0,05). Durante o aleitamento, as fêmeas BEO apresentaram menores contagens de basófilo (P ≤ 0,001), plaquetas (P = 0,04), efeito cumulativo para linfócitos (P ≤ 0,001) e menores escores fecais (P = 0,04). O ensaio de digestibilidade, expressão gênica intestinal e ensaio de proliferação de células de baço para os machos não apresentou diferença. Os machos BEO apresentaram pH ruminal mais baixo, trato respiratório mais leve, pâncreas maior, intestinos mais pesados, vilos do íleo maiores, maiores concentrações de butirato cecal e uma maior contagem de eosinófilos (P< 0,05). Esses resultados demonstram que a suplementação com óleos essenciais para bezerros em aleitamento pode contribuir para a manipulação ruminal, desenvolvimento intestinal e função imunológica. The aim of this study was to evaluate if a commercial blend of essential oils supplemented in the liquid diet would affect 1) feed intake, performance, body development, blood cells and metabolites, insulin-like growth factor-1 (IGF-1), rumen fermentation, fecal scores, and respiratory scores; and 2) digestibility, internal organs weight and histology, gene expression, and a spleen cell proliferation of pre-weaned calves. All outcomes were evaluated during pre-weaning (4 – 60 d of age) for bull and heifer calves, and carry-over effects during post-weaning (61 – 90 d of age) for heifer calves. It was enrolled 45 newborn Holstein and Hostein × Gyr crossbred calves, with body weight (BW) at birth of 32.6 ± 4.9 kg. Experimental units were assigned to either a control (CON, n = 15 heifers, and n = 8 bull calves) or a blend of essential oil supplementation treatment (BEO, n = 14 heifers, and n = 8 bull calves). The BEO was supplemented in the milk replacer (MR) with 1 g/d/calf (Apex Calf, Adisseo, China). During the pre-weaning phase, all calves were fed daily 5 L of MR/d reconstituted to 15% with water and starter provision ad libitum. During the post-weaning, heifers received 3 kg of starter/d, and ad libitum corn silage. Feed intake, fecal and respiratory scores were evaluated daily. The BW was measured every three days, while body development was recorded weekly. Blood samples were collected on 0, 30, and 60 days of age for total blood cell count, weekly to determinate ß-hydroxybutyrate, urea and glucose, and biweekly for IGF-1. Ruminal parameters (pH, volatile fatty acids, ammonia-N, and acetate:propionate proportion - C2:C3) were measured on days 14, 28, 42, 60, 74 and 90. Apparent total nutrient digestibility was determined from d 55 to 60 of age, and on d 60 ± 1 animals were euthanized for organ weight, histology, spleen cell proliferation, and intestinal gene expression analysis. Data were analyzed independently using linear mixed models using the REML method in nlme package in R for continuous outcomes, and a non-parametric test was used for ordered categorical outcomes. There were no differences on feed intake, performance, body development, and blood metabolites during both pre-weaning and post-weaning periods for bulls and heifer calves. However, heifer’s proportion of C2:C3 during pre- and post-weaning (P = 0.05) were affected, as well as basophil (P ≤ 0.001), and platelet (P = 0.04) counts during pre-weaning, and a cumulative effect for lymphocytes (P ≤ 0.001). Heifers’ fecal scores were significant (P = 0.04) during pre-weaning, with lower values for BEO. There were no differences for digestibility, intestinal gene expression, and spleen cell proliferation assay for the bull calves. The BEO bull calves presented a lower ruminal pH, bigger pancreas, heavier intestines, bigger ileum villi, and higher cecum butyrate levels (P < 0.05). The bulls from the CON group had a heavier respiratory tract and a higher eosinophil count (P< 0.05). These results demonstrate that supplementing essential oils to dairy calves could contribute to ruminal manipulation, gut development, and immune function.

O tempo de gestação dos equinos é bastante variável, tendo um intervalo aproximado entre 320 e 360 dias e aproximadamente 370 dias nas gestações de asininos. Para os híbridos muares, há divergências na literatura, com alguns relatos de períodos superiores, semelhantes e inferiores ao de gestações de produtos equinos. Nas gestações de produtos clones não encontramos relatos publicados de tempo gestacional. Uma particularidade dos equídeos é que a maioria dos partos ocorrem no período noturno, momento este de maior tranquilidade ambiental e de menor atividade em uma propriedade. Desta forma, existe uma grande dificuldade no monitoramento dos partos, atividade esta tão importante para os equídeos, tornando a prática desafiadora e onerosa. Deste modo, uma maior exatidão na previsão da data do parto minimizaria o período de monitoramento, a mão de obra e consequentemente os custos despendidos neste processo. Usualmente, alguns métodos são empregados na previsão do parto, como avaliação de mudanças físicas em éguas periparturientes e o tempo de gestação. Ambos os métodos se mostram pouco confiáveis, já que há uma grande variação racial e individual. Estudos com alteração do pH, índice BRIX e das concentrações de eletrólitos das secreções da glândula mamária, em éguas próximas do momento do parto apresentam resultados consistentes, embora não haja relatos do uso destas técnicas em gestações de produtos híbridos e de clones equinos. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar parâmetros que auxiliem na busca da predição da parição de éguas gestantes de produtos muares e produtos clones equinos, estabelecendo um controle comparativo com as gestações de produtos espécie-específicos equinos não clones, com base nos parâmetros físicos de relaxamento vulvar e relaxamento dos ligamentos sacroisquiáticos e pH, índice BRIX e concentração de cálcio, fósforo, magnésio, sódio e potássio nas secreções mamárias dos seis dias que antecedem o parto até a data do parto. Foram utilizadas 60 éguas divididas em 3 grupos distintos: 25 éguas gestantes de produtos muares (GM), 20 éguas gestantes de produtos equinos clones (GCL) e 15 éguas gestantes de produtos equinos (GE). Todos os animais foram avaliados diariamente desde os 325 dias de gestação até o dia do parto, que foi supervisionado. Foram avaliados os relaxamentos dos ligamentos sacroisquiáticos e vulvares, aos quais foram atribuídos escores que variavam de 0 (sem relaxamento) a 3 (relaxamento intenso), e as secreções mamárias quanto ao pH em fitas colorimétricas e em pHmetro, índice BRIX e concentração de eletrólitos. Para a análise laboratorial e estatística, foram selecionados apenas os dados e amostras a partir do 6º dia pré-parto (D-6) até o dia do parto (D0), totalizando 7 dias avaliados por égua (D-6, D-5, D-4, D-3, D-2, D-1 e D0). Os parâmetros físicos de relaxamento avaliados tiveram um aumento gradativo no escore com a aproximação do dia do parto, com escores de 2,81, 2,79 e 2,68 para o GE, GM e GCL no dia do parto, respectivamente. Apenas no grupo de GM obteve-se um relaxamento maior no dia do parto quando comparado aos outros dias avaliados. A utilização das fitas colorimétricas para a mensuração do pH in vivo se mostrou válida por ter demonstrado diminuições expressivas do pH no dia do parto (D0). Foram detectadas diferenças entre grupos para o pH em fitas colorimétricas antes da congelação das amostras, com o pH menor nas gestações dos grupos GCL e GM. Na mensuração realizada com o pHmetro após a descongelação das amostras, apenas o grupo GCL obteve médias maiores de pH. Notavelmente, a congelação das amostras das secreções mamárias afetou diretamente seu pH. A avaliação do índice BRIX não mostrou diferenças entre os grupos estudados, mas sim entre os tempos. Todos os eletrólitos estudados tiveram relação positiva na predição do parto devido às alterações em suas concentrações na proximidade do parto, mas sem diferenças entre os grupos analisados. Assim, conclui-se que os parâmetros físicos avaliados foram insuficientes para a busca da predição do parto na espécie equina devido a sua grande variação, e que o pH em fitas colorimétricas compreende em um método eficaz e prático para esta finalidade. Além disso, o índice BRIX não demonstrou bom preditor do parto em nenhum grupo avaliado devido a grande variabilidade entre as éguas. As mensurações das concentrações de eletrólitos demonstraram ser bons preditores do parto, embora oneroso e pouco acessível pela metodologia utilizada. Desta forma, testes rápidos para mensuração de eletrólitos poderiam ser incluídos na rotina para que essas mensurações pudessem ser utilizadas com maior praticidade, incluindo a mensuração de fósforo, eletrólito relatado pela primeira vez neste trabalho como preditor do parto na espécie equina. Gestational length in horses is very variable, having an approximate interval of 320 and 360 days and approximately 370 days in donkey pregnancies. For mule hybrids, there are divergences in the literature, with some reports superior, similar and inferior periods than equine product pregnancies. In pregnancies with clone foals, we did not find published reports of gestational length. A peculiarity of equine is that most births occur at night, a time of greater environmental tranquility and less activity on a property. Thus, there is great difficulty in monitoring births, an activity that is so important in the equids, making the practice challenging and costly. Thus, greater accuracy in predicting the foaling date would minimize the monitoring period, the labor and, consequently, the costs incurred in this process. Usually, some methods are used to predict parturition, such as the assessment of physical changes in periparturient mares and the length of gestation. Both methods prove to be unreliable, as there is great breed and individual variation. Studies with changes in pH, BRIX index and electrolyte concentrations of mammary gland secretions in mares close to the time of parturition have shown consistent results, although there are no reports on the use of these techniques in pregnancies of hybrid foals and equine clones. Thus, the objective of this study was to evaluate parameters that help predicting foaling of pregnant mares of mule and equine clone foals, establishing a comparative control with the pregnancies of no clone species-specific equine foals, based on physical relaxation parameters vulvar and sacroischiatic ligament relaxation, and pH, BRIX index and concentration of calcium, phosphorus, magnesium, sodium and potassium in mammary gland secretions from the six days prior to parturition until foaling. Sixty mares were used, divided into 3 groups: 25 mares in the pregnant mule foal group (GM), 20 mares in the pregnant clones equine foal group (GCL) and 15 mares in the pregnant equine foal group (GE). All animals were evaluated daily from 325 days of gestation until the day of foaling, which was monitored. Relaxation of the sacroischiatic and vulvar ligaments, which were assigned scores ranging from 0 (no relaxation) to 3 (intense relaxation), and mammary gland secretions according to pH in colorimetric strips and pH meter, BRIX index and electrolyte concentration were evaluated. For laboratory and statistical analysis, data and samples were selected from the 6th pre-partum day (D-6) until the day of foaling (D0), totaling 7 days evaluated per mare (D-6, D-5, D-4, D-3, D-2, D-1 and D0). The physical relaxation parameters evaluated had a gradual increase in the score as the day of foaling approached, with scores of 2.81, 2.79 and 2.68 for the GE, GM and GCL on the day of delivery, respectively. Only in the GM group was there a greater relaxation on the day of delivery when compared to the other days evaluated. The use of colorimetric tapes to measure the pH in vivo proved to be valid having shown significant decreases in pH on the day of delivery (D0). Differences between groups were detected for pH on colorimetric strips before freezing the samples, with the lowest pH in pregnancies in the GCL and GM groups. In the measurement performed with the bench pH meter after thawing the samples, only the GCL group had higher pH means. Notably, freezing the mammary gland secretion samples directly affected their pH. BRIX assessment did not show differences between the groups studied, but between times. All electrolytes studied had a positive relationship in predicting delivery due to changes in their concentrations near delivery, but without differences between the analyzed groups. Thus, it is concluded that the physical parameters evaluated were insufficient to predict parturition in equine species due to its wide variation, and that the pH in strip test is an effective and practical method for this purpose. Furthermore, the BRIX index did not show a good predictor of parturition in any group evaluated due to the great variability between mares. Measurements of electrolyte concentrations have been shown to be good predictors of foaling, although costly and inaccessible by the methodology used. Thus, rapid tests for measuring electrolytes could be routinely included so that these measurements could be used with greater practicality, including the measurement of phosphorus, an electrolyte that was reported for the first time in this work as a predictor of parturition in the equine species.

Calves ′ bronchopneumonia is a multifactorial disease, which causes short- and long-term economic losses, being early detection a crucial factor in relation to therapeutical response, disease severity and mortality. Due these factors clinical scores have been developed in North America for screening sick animals at farm level, as well as the use of ultrasonographic scanning to detect consolidation lesions in lung parenchyma. Over the environmental conditions and raising system, the diagnostic methods developed at North America has been applied in subtropical and tropical countries. Due theses facts, this research evaluated the accuracy of five methods to diagnose bronchopneumonia in Holstein dairy calves at different raising system in subtropical conditions. The tests used to diagnose bronchopneumonia were thoracic ultrasound (TUS, positive if consolidation depth ≥1cm), auscultation (Ausc, positive in presence of crackles, wheezes and pulmonary silence areas), Wisconsin score (Wisc, positive if ≥4), Californian score (Calif, positive if ≥5) and serum haptoglobin concentration (Hap, positive if ≥15 mg/dL) for BRD diagnosis. Heifers with 30 days to weaning age (n= 482) of 17 commercial farms in São Paulo state were enrolled at winter, spring and summer seasons. Environmental data (Vmax, Vmed, Temperature, Chill, Dew Point, Humidity, Heat Index) was assessed in each farm in sampling and was compared between winter and spring/summer. Bayesian latent class models were used with informative priors for TUS, AUSC and Hap accuracy (sensitivity (Se) and specificity (Sp)) and non-informative priors for Wisc and Calif accuracies. Environmental data showed that São Paulo climate was predominantly hot and humid in the two seasons, and differs only at humidity levels presented difference in the middle day (p=0.03) and afternoon (p

A eficiência na transferência de imunidade passiva (TIP) está diretamente associada aos índices de morbidade e mortalidade de bezerros. Quando o colostro materno fresco (CF) não está disponível o colostro congelado (CC) ou o substituto de colostro (SC) são alternativas para evitar falhas na TIP (FTIP). O objetivo do presente estudo foi avaliar a utilização dessas diferentes fontes de colostro e seus efeitos na TIP, saúde, desempenho e metabolismo de bezerros Holandês. Foram utilizados 39 bezerros (machos e fêmeas) em delineamento de blocos casualizados de acordo com sexo, peso e data de nascimento e foram distribuídos em três grupos experimentais: 1) 10% PV em CF de alta qualidade; 2) 10% PV em CC de alta qualidade; 3) 1,5 doses de SC (705 g). Foram colhidas amostras de sangue ao nascimento, antes do fornecimento do colostro (0h) e com 12, 24 e 48h de vida para avaliar TIP e metabólitos. O período experimental foi de 63 dias. Os animais tiveram acesso ad libitum à água e concentrado durante todo o período e até os 56 dias receberam 6L/d de leite. Diariamente foi mensurado o consumo de concentrado, monitorada a saúde dos animais e a incidência de diarreia por meio do escore fecal. Semanalmente avaliou-se peso e medidas corporais, além de coleta de sangue para determinação de proteína total, albumina e glicose. A ingestão de imunoglobulinas foi maior (P < 0,01) para os animais que receberam colostro materno (CF: 304,77 g e CC: 292,57 g) quando comparados com aqueles que receberam SC (150 g). Isso influenciou (P < 0,01) a concentração sérica de IgG com 24 horas. Entretanto, apesar das diferenças apenas um bezerro apresentou FTIP (IgG sérica < 10 g/L). Na contagem diferencial de leucócitos foi observado efeito de interação da fonte de colostro e horário da coleta para os valores de linfócitos (P = 0,01) e eosinófilos (P = 0,03). Dos parâmetros sanguíneos avaliados nas primeiras 48 horas de vida, apenas os valores de insulina foram afetados (P = 0,01) pelas fontes de colostro, apresentando-se elevado nos animais alimentados com SC. O número médio de episódios de doença também foi influenciado (P = 0,02) pelas diferentes fontes de colostro de maneira que os animais que receberam SC apresentaram maior número de quadros de doença do que os animais que receberam CF ou CC (1,77 vs 0,65 e 0,59 episódios respectivamente). O GMD (CF: 613 CC: 551 e SC: 473 g/dia; P = 0,01) e a eficiência alimentar (CF: 0,688 CC: 0,626 e SC: 0,553 kg ganho/kg consumo; P = 0,005) diferiram entre os grupos experimentais, consequentemente, influenciando (P = 0,04) também o peso corporal ao final do experimento (CF: 71,17 CC: 65,03 e SC:64,36 kg). Parâmetros metabólicos como proteína sérica total (P < 0,01) e glicose (P = 0,02) também diferiram de acordo com o colostro ofertado. Concluímos que todas as fontes de colostro utilizadas neste experimento foram eficientes na TIP, entretanto protocolos de colostragem que possibilitem a ingestão de maiores quantidades de imunoglobulinas, proporcionam concentrações séricas de IgG mais elevados, melhores condições de saúde e consequentemente maiores ganho e desempenho. Efficiency in passive immunity transfer (PIT) is directly associated with calf morbidity and mortality rates. When fresh maternal colostrum (FMC) is not available, frozen colostrum (FC) or colostrum replacer (CR) is an alternative to avoid failures in PIT (FPIT). The objective of the present study was to evaluate the use of these different sources of colostrum and their effects in PIT, health, performance and metabolism of Holstein calves. Therefore, 39 calves (males and females) were allocated in randomized blocks according to sex, weight and birth date, and were distributed into three experimental groups: 1) 10% of body weight (BW) in high quality FMC; 2) 10% of BW in high quality FC; 3) 1.5 doses of CR (705 g). Blood samples were collected at birth, before colostrum fed (0h), and with 12, 24 and 48h of life to assess PIT and metabolites. The experimental period was 63 days. All animals had ad libitum access to water and received starter throughout the experimental period and received 6L/d of milk until 56 days of age. Starter intake was measured daily and animals\' health, including incidence of diarrhea, was monitored through fecal score. Weight and body measurements were measured weekly, and blood was collected to determine concentration of total protein, albumin and glucose. Immunoglobulins\' intake was higher (P < 0.01) for the animals that received maternal colostrum (FMC: 304.77 g and FC: 292.57 g) when compared to those that received CR (150 g). This influenced (P < 0.01) the serum IgG concentration at 24 hours. However, despite the differences, only one calf had FPIT (serum IgG < 10 g/L). The differential leukocyte count showed an interaction effect of the colostrum source and time of collection for the values of lymphocytes (P = 0.01) and eosinophils (P = 0.03). Considering blood parameters in the first 48 hours of life, only insulin values were affected (P = 0.01) by the sources of colostrum, being elevated in animals fed with CR. The average number of disease episodes was also influenced (P = 0.02) by the different sources of colostrum so that the animals that received CR had a higher number of illnesses than the animals that received FMC or FC (1.77 vs 0.65 and 0.59 episodes respectively). ADG (FMC: 613 FC: 551 and CR: 473 g/day; P = 0.01) and feed efficiency (FMC: 0.688 FC: 0.626 and CR: 0.553 kg gain/kg consumption; P = 0.005) differed between the experimental groups, consequently, influencing (P = 0.04) also the body weight at the end of the experiment (FMC: 71.17 FC: 65.03 and CR: 64.36 kg). Metabolic parameters such as total serum protein (P < 0.01) and glucose (P = 0.02) also differed according to the colostrum offered. In conclusion, although all sources of colostrum resulted in efficient PIT, those that allowed ingestion of greater amounts of immunoglobulins provided higher serum IgG concentrations, better health conditions and, consequently, greater gain and performance.

A diarreia neonatal dos bezerros (DNB) é um dos eventos de saúde mais importantes durante o período de criação de bezerros de corte, sendo responsável por grande parte da morbidade e mortalidade nesta fase. Entre as medidas para mitigar o risco de surtos de DNB, a vacinação da vaca na última fase da gestação é uma das mais importantes. O objetivo desta pesquisa foi avaliar a eficácia da vacinação pré-parto contra DNB, especialmente Rotavírus Bovino tipo A (BoRVA) e Coronavírus Bovino (BCoV), em animais da raça Nelore. Um total de 117 animais, divididos em vacas (n=81) e novilhas (n=36) foram distribuídos em dois grupos experimentais, sendo estes: grupo de animais vacinados (VAC: vacas=40; novilhas=19) e grupo de animais não vacinados (NVAC: vacas=41; novilhas=17). O tratamento dos animais ocorreu entre 60 a 50 dias antes da data prevista para o parto, sendo aplicado no grupo VAC uma única dose de uma vacina comercial (2mL), administrado por via intramuscular, e no grupo NVAC uma dose de solução salina 0,9%. Amostras de sangue foram coletadas imediatamente antes da vacinação e após 30 dias, para avaliar a resposta de anticorpos específicos (IgG1) contra BoRVA e BCoV. O nascimento dos bezerros foi monitorado e a transferência de imunidade passiva foi avaliada entre o segundo e o terceiro dias de vida. A diarreia foi monitorada nos primeiros 30 dias de idade, e amostras de fezes foram coletadas para identificação do agente etiológico em animais com diarreia. Como controle, amostras de fezes de bezerros saudáveis com idade semelhante à dos animais com diarreia, também foram coletadas. Os anticorpos específicos (IgG1) contra BoRVA e BCoV foram medidos usando a técnica Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay (ELISA). A comparação de médias pelo teste T de Student mostrou títulos mais elevados de IgG1 contra BoRVA e BCoV no grupo VAC quando comparado ao grupo NVAC na categoria de vacas (P < 0,0001) e no total de animais (P < 0,0001). Em relação aos bezerros, não houve diferenças (P >0,05) entre os grupos para a concentração de proteína total sérica (PTS) e taxa (%) de falha da transferência imune passiva (FTIP). O título de IgG1 específico no soro de bezerros refletiu a resposta das mães, observando títulos mais elevados de IgG1 para BoRVA (P < 0,0016) e BCoV (P 0,05). Entre bezerros com diarreia, o agente mais prevalente foi o BoRVA. A vacinação pré-parto com uma única dose da vacina testada aumentou os títulos de IgG1 contra BCoV e BoRVA, podendo ser utilizada como estratégia preventiva para diminuir a ocorrência de DNB em animais da raça Nelore. Neonatal calf diarrhea (NCD) is one of the most important health events during the rearing period of beef calves, accounting for much of the morbidity and mortality at this stage. Among the measures to mitigate the risk of NCD outbreaks, cow vaccination in the last stage of pregnancy is one of the most important. The objective of this research was to evaluate the effectiveness of prepartum vaccination against NCD, especially Bovine Rotavirus type A (BoRVA) and Bovine Coronavirus (BCoV), in Nelore animals. A total of 117 animals, divided into cows (n=81) and heifers (n=36) were divided into two experimental groups, namely: vaccinated animal group (VAC: cows=40; heifers=19) and animal group unvaccinated (NVAC: cows=41; heifers=17). The treatment of the animals occurred between 60 to 50 days before the expected date of calving, with a single dose of a commercial vaccine (2mL) being applied to the VAC group, administered intramuscularly, and to the NVAC group a dose of saline solution 0, 9%. Blood samples were collected immediately before vaccination and after 30 days to assess the specific antibody response (IgG1) against BoRVA and BCoV. The calf birth was monitored and the transfer of passive immunity was evaluated between the second and third days of life. Diarrhea was monitored in the first 30 days of age, and stool samples were collected to identify the etiologic agent in animals with diarrhea. As a control, fecal samples from healthy calves with age similar to that of animals with diarrhea were also collected. Specific antibodies (IgG1) against BoRVA and BCoV were measured using the Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay (ELISA) technique. Comparison of means by Student ′s t test showed higher IgG1 titers against BoRVA and BCoV in the VAC group when compared to the NVAC group in the cows category (P 0.05) between groups for serum total protein concentration (STP) and rate (%) of passive immune transfer failure (PITF). The specific IgG1 titer in the serum of calves reflected the response of the dams, observing higher IgG1 titers for BoRVA (P 0.05). Among calves with diarrhea, the most prevalent agent was BoRVA. Prepartum vaccination with a single dose of the tested vaccine increased IgG1 titers against BCoV and BoRVA, and can be used as a preventive strategy to reduce the occurrence of NCD in Nelore animals.

O objetivo geral deste estudo foi investigar as afecções umbilicais inflamatórias mais frequentes em bezerros neonatos da raça Holandesa e a sua associação com alterações em órgãos adjacentes como fígado e vesícula urinária, assim como determinar a ocorrência da enfermidade na região centro-leste do Estado de São Paulo. Foi realizado estudo com a inclusão inicial de 806 bezerros holandeses (126 machos e 680 fêmeas), provenientes de 16 propriedades leiteiras na região. Estes foram triados semanalmente, do nascimento aos 30 dias de vida, com exames de inspeção e palpação umbilical externa e abdominal, para a detecção de alterações umbilicais inflamatórias, que incluíram a presença de secreção purulenta ou aumento de volume em umbigo externo, sensibilidade durante a palpação de umbigo externo ou abdominal, massas abdominais palpáveis e/ou aumento de calibre de componentes. Foram então triados 52 animais dentre os 806 avaliados (52/806; 6,54%), no qual realizou-se avaliação ultrassonográfica, para confirmação ou exclusão do diagnóstico. Quando confirmado, o animal seria incluído no grupo D (doentes), composto por 39 bezerros (39/806, 4,83%), sendo nove machos e 30 fêmeas, que apresentaram alterações no calibre e aspecto dos vasos umbilicais. As principais doenças encontradas nesse grupo foram as onfalites (26/39; 66,66%), seguidas das onfaloarterites (10/39; 25,64%), onfaloflebite (1/39; 2,56%), onfalouracoarterite (1/39; 2,56%) e panvasculite (1/39; 2,56%). Também foram selecionados 16 bezerros, sem qualquer alteração no exame clínico geral e específico da região umbilical, para formação do grupo H (hígidos). Nos dois grupos foi realizada a avaliação hepática, em modo B, no qual não foram encontradas alterações em parênquima e aspecto das veias, e Doppler pulsado, no qual foram obtidos o índice de pulsatilidade, as velocidades mínima e máxima e o índice de resistividade da veia porta, além do coeficiente de proporcionalidade entre os diâmetros das veias porta e cava. O Doppler pulsado revelou diferenças (P=0,001) entre a velocidade máxima da veia porta no grupo H (48,92± 4,37 cm/s) e grupo D (29,2 ± 2,68) (P=0,001). Também foi realizada a mensuração da parede da vesícula urinária nos animais do grupo H (0,12 cm ± 0,004) e nos animais com alterações inflamatórias dos componentes umbilicais caudais (0,15 cm ± 0,0004), além da identificação das camadas que compõem essa estrutura, com o auxílio do exame ultrassonográfico. Em relação às análises hepáticas laboratoriais, observou-se que a atividade sérica da GGT foi maior no grupo H (283,06 U/L ± 105,21) em relação ao grupo D (119,15 U/L ± 22,38) (P=0,03). Concluiu-se que as afecções umbilicais inflamatórias, quando diagnosticadas precocemente, raramente causam complicações, como o acometimento das estruturas adjacentes, sendo o exame ultrassonográfico, em modo B e modo Doppler pulsado, de grande valia para essa avaliação e diagnóstico preciso e precoce dessa enfermidade. General objective of research was to investigate the most frequent inflammatory umbilical disorders in neonatal Holstein calves and their association with changes in adjacent organs such as liver and urinary bladder, as well as to determine the occurrence of the disease in the central-eastern region of the State of São Paulo. A study was carried out with the initial inclusion of 806 Holstein calves (126 males and 680 females), from 16 dairy farms in the region. These were screened weekly, from birth to 30 days of life, with inspection exams and external and abdominal umbilical palpation, for the detection of inflammatory umbilical changes, which included the presence of purulent secretion or increased volume in the external navel, sensitivity during palpation of the external or abdominal navel, palpable abdominal masses and/or increased caliber of components. 52 animals were then screened among the 806 evaluated (52/806; 6.54%), in which an ultrasound evaluation was performed, to confirm or exclude the diagnosis. When confirmed, the animal would be included in group D (sick), composed of 39 calves (39/806, 4.83%), nine males and 30 females, which showed changes in the caliber and aspect of the umbilical vessels. Main diseases found in this group were omphalitis (26/39; 66.66%), followed by omphaloarteritis (10/39; 25.64%), omphalophlebitis (1/39; 2.56%), omphalouracoarteritis (1/39; 2.56%) and panvasculitis (1/39; 2.56%). 16 calves were also selected, without any alteration in the general and specific clinical examination of the umbilical region, for the formation of group H (healthy). In both groups, hepatic assessment was performed, in mode B, in which no changes were found in parenchyma and aspect of the veins, and pulsed Doppler, in which the pulsatility index, the minimum and maximum speeds and the resistivity index of the portal vein, in addition to the proportionality coefficient between the diameters of the portal and vena cava veins. The pulsed Doppler revealed differences (P = 0.001) between the maximum velocity of the portal vein in group H (48.92 ± 4.37 cm/s) and group D (29.2 ± 2.68) (P = 0.001). Measurement of the urinary vesicle wall was also performed in animals in group H (0.12 cm ± 0.004) and in animals with inflammatory changes in the caudal umbilical components (0.15 cm ± 0.0004), in addition to identifying the layers that make up this structure, with the aid of ultrasound examination. In relation to laboratory liver analyzes, it was observed that the serum activity of GGT was greater in group H (283.06 U/L ± 105.21) compared to group D (119.15 U/L ± 22.38) (P = 0.03). It was concluded that the inflammatory umbilical disorders, when diagnosed early, rarely cause complications, such as the involvement of the adjacent structures, being the ultrasound examination, in B mode and pulsed Doppler mode, of great value for this assessment and accurate and early diagnosis of disease.

Em teoria, bezerros leiteiros nascem com o trato gastrintestinal estéril e durante o nascimento, inicia-se a colonização microbiana. A partir desse momento, a dieta torna-se um importante fator de manutenção da população microbiana, além de servir de substrato para a mesma. No entanto, pouco se sabe como diferentes dietas podem modificar o microbioma gastrintestinal em bezerros leiteiros durante a fase de aleitamento e desaleitamento. Com base nisso, dois estudos foram realizados. O primeiro estudou avaliou diferentes níveis e fontes de FDN no concentrado inicial. Foram utilizados 18 bezerros Holandeses, alimentados com um dos três tratamentos: 22FDN - concentrado convencional contendo 22% de FDN; 31FDN - concentrado com 31% de FDN, substituindo parte do milho por casca de soja; e 22Feno - concentrado convencional com 22% de FDN e feno coast cross a vontade. Foram alojados em gaiolas suspensas, sem cama até a 8ª semana de vida, desaleitados e depois alojados em abrigos do tipo tropical até a 10ª semana de vida. Foram avaliados o microbioma ruminal, nas semanas 2, 4, 6, 8 e 10, e o microbioma fecal nas semanas 0, 1, 2, 4, 8 e 10. O microbioma ruminal não mostrou diferenças em função da dieta, idade ou interação de ambos os fatores. O microbioma fecal foi afetado tanto pela idade quanto pela dieta. A inclusão de feno na dieta pode promover maior diversidade microbiana fecal. O segundo estudou avaliou diferentes dietas líquidas durante o aleitamento. Foram utilizados 15 bezerros Holandeses alimentados com uma das três dietas líquidas: leite integral, sucedâneo lácteo, e leite integral acidificado a pH 4,5 com ácido fórmico. Os animais foram alojados em abrigos tropicais, recebendo 6 litros de dieta líquida por dia, sendo desaleitados a partir da 8ª semana de vida, e alojados em abrigo coletivo a partir do desaleitamento. O microbioma fecal foi avaliado nas semanas 0, 1, 2, 4, 8 e 10. A diversidade microbiana foi afetada pela idade e dieta. A diversidade foi crescente a partir da semana 1. O leite promoveu maior diversidade microbiana fecal em comparação as demais dietas, além de promover o crescimento de bacterias benéficas e comensais no instetino. No entanto, após os animais deixarem de receber as dietas líquidas e serem alojados em conjunto, o microbioma fecal desses animais convergiu para uma maior similaridade. In theory, dairy calves are born with a sterile gastrointestinal tract and at birth, microbial colonization begins. From that moment on, the diet becomes an important factor for maintaining the microbial population, in addition to serving as a substrate for growth. However, it is necessary to know how different diets can modify the gastrointestinal microbiome in dairy calves during the pre-weaning and weaning phase. Based on that, two studies were performed. The first study evaluated different levels and sources of NDF in the starter concentrate. Eighteen Holstein calves were used, fed with one of three treatments: 22NDF - conventional starter concentrate containing 22% NDF; 31NDF - starter concentrated with 31% NDF, replacing part of the corn with soybean hull; and 22Hay - conventional concentrate with 22% NDF and coast cross hay at will. The animals were housed in suspended not-bedded cages, until the 8th week of life, weaned and then housed in tropical shelters until the 10th week of life. The rumen microbiome was evaluated at weeks 2, 4, 6, 8 and 10, and the fecal microbiome at weeks 0, 1, 2, 4, 8, and 10. The ruminal microbiome had no differences depending on diet, age, or interaction of both factors. The fecal microbiome was affected by both age and diet. The supply of hay in the diet can promote greater fecal microbial diversity. The second studied evaluated different liquid diets during the pre-weaning phase. Fifteen Holstein calves fed one of the three liquid diets were used: whole milk, milk replacer, and whole milk acidified to pH 4.5 with formic acid. The animals were housed in tropical shelters, receiving 6 liters of liquid diet per day, being weaned after the 8th week of life, and housed in a collective shelter from weaning. The fecal microbiome was evaluated at weeks 0, 1, 2, 4, 8, and 10. Microbial diversity was affected by age and diet. Diversity increased from week 1. Whole milk promoted greater fecal microbial diversity compared to other diets, in addition to promoting the growth of beneficial and commensal bacteria in the feces. However, after the animals stopped receiving liquid diets and were housed together, the fecal microbiome of these animals converged towards greater similarity.

Maternal status during the transition period can have carryover effects on several health and performance variables of Holstein dairy calves. However, the effects of maternal late gestation status on profile presented by dairy calves during the neonatal period are not well established. The general objective of this study was to evaluate the impact of maternal variables at the calving on the metabolism and immunity of dairy calves during the first month of life. Holstein cows (n=28) were blood sampled at calving. The mean of the results for the maternal variables [non-esterified fatty acids (NEFA), β-hydroxybutyrate (BHB), glucose, total protein, albumin, triglycerides, cholesterol, haptoglobin (Hp), iron, thoracic perimeter and body condition score (BCS)] was calculated and used as maternal factors. The 28 calves from these cows were subsequently divided into two groups according to their dams’ high or low degree of each factor. The responses of calves in each of these groups were compared throughout their first month of life. Calves were blood sampled following birth and at ~ 2, 7, 14 and 28 days of age by assessing of IgG levels, biochemical parameters, inflammatory status, and innate immunity response. At the same timepoints, the calves were evaluated clinically for diarrhea and other clinical indices. When compared when grouped as maternal groups of low or high glucose, a statistical difference was found only on D14 with calves from cows with higher blood glucose had a lower cholesterol concentration when compared with calves from dams with lower blood glucose. Inflammatory status also varied with calves born from dams with low NEFA had lower levels of haptoglobin (Hp) when compared to calves born to dams with high NEFA on D28. Calves from dams with low maternal albumin, low maternal cholesterol, and low maternal BCS had high levels of basal reactive oxygen species on D7 and D28. Calves from dams with low BCS also had neutrophils more reactive for S. aureus, S. hyicus, and E. coli, considering the AFU. The response ratio against S. aureus and S. hyicus was higher in the calves was born from the low maternal BCS. Collectively, these data suggest that prenatal exposure to different maternal factors may adversely affect metabolic, inflammatory and immune responses of the calves during the first month of life that could influence disease susceptibility and performance. O status materno durante o período de transição pode ter efeitos na saúde e desempenho de bezerras da raça Holandesa. No entanto, o efeito do perfil materno ao final da gestação sobre o status apresentado pelas bezerras durante o período neonatal não estão bem estabelecidos. O objetivo geral deste estudo foi avaliar o impacto de variáveis maternas no momento do parto sobre o metabolismo, a saúde e a imunidade de bezerras leiteiras durante o período neonatal. Vacas da raça Holandesa (n = 28) tiveram amostras de sangue coletadas no parto. A média dos resultados para as variáveis maternas [ácidos graxos não esterificados (AGNE), β- hidroxibutirato (BHB), glicose, proteína total, albumina, triglicerídeos, colesterol, haptoglobina (Hp), ferro, peso e escore de condição corporal (ECC)] foram calculados e utilizados como fatores maternos. As bezerras foram posteriormente divididas em grupos de acordo com o alto ou baixo grau de cada fator materno. As respostas das bezerras em cada um desses grupos foram comparadas ao longo do primeiro mês de vida. As bezerras tiveram amostras de sangue coletadas após o nascimento e em torno de 2, 7, 14 e 28 dias de vida, avaliando os níveis de IgG, parâmetros, estado e resposta imune inata. Nos mesmos momentos, as bezerras foram avaliadas por parâmetros vitais, frequência de diarreia e doenças respiratórias e desempenho. As bezerras nascidas de mães mais pesadas, com maior escore de condição corporal e nascidos na primavera, apresentaram maior frequência de diarreia. Vacas que pariram mais pesadas e com maior escore de condição corporal geraram bezerras com melhor desempenho desde a primeira semana de vida em relação à altura da cernelha e largura da garupa. Bezerras de mães com baixas concentrações de proteína apresentaram alta concentração de AGNE no D1. Vacas com alto nível de proteína também apresentaram alto nível de Hp e baixos níveis de albumina. Os filhos nascidos de vacas com alta concentração de ferro apresentaram altos valores de glicose. Em relação à resposta imune, as bezerras filhas de vacas com baixa albumina, baixo colesterol e baixo BCS apresentaram altos níveis basais de espécies reativas de oxigênio expressos em taxa média de fluorescência em D7 e D28. Os filhos nascidos de vacas com baixo BCS também apresentaram neutrófilos mais reativos para S. aureus, S. hyicus e E. coli, considerando a taxa média de fluorescência. A taxa de resposta contra S. aureus e S. hyicus foi maior nas bezerras nascidas da baixa BCS materna. Em suma, esses dados sugerem que a exposição pré-natal a diferentes fatores maternos pode afetar adversamente algumas respostas metabólicas, inflamatórias e imunológicas das bezerras durante o primeiro mês de vida que podem influenciar a suscetibilidade à doenças e o desempenho das bezerras.

Integration between healthy and microbiome in holstein cows immediately after calving The transition period includes physiological events such as parturitium, colostrogenesis and lactogenesis, which requires the activation of homeorrectic mechanisms to meet the energy demands imposed at this stage of the production cycle. The inadequate adaptation of the cow in the period can evolve to negative energetic balance, metabolic diseases, immunosuppression and high risk for infectious diseases. In this scenario, it is feasible to believe that the cow\'s microbiota undergoes important changes in different colonization sites, and as a cause or effect it interferes with the health of the host. The general objective of this research was to evaluate the correlations between metabolic parameters and the health status of the mammary gland with the microbiota of dairy cows immediately after calving. Blood samples were obtained from 20 multiparous Holstein cows for the determination of metabolic biomarkers, in addition to colostrum, feces and vaginal swabs to perform the metagenome. Archaea kingdom were only found in fecal and vaginal samples. Fecal samples showed a greater abundance of Firmicutes, followed by Bacteroidetes and Actinobacteria. Vaginal samples showed dominance of Firmicutes followed by Bacteroidetes and Proteobacteria. The colostrum microbiota, on the other hand, showed a predominance of Proteobacteria, followed by Firmicutes and Bacteroidetes. At the family taxonomic level, Ruminococcaceae was detected as the most abundant, followed by Bacteroidaceae, Lachnospiraceae and Clostridiceae in fecal and vaginal samples. On the other hand, the predominant families detected in the colostrum samples were Pseudomonadaceae, Staphylococcaceae and, to a lesser extent, Enterobacteriaceae. A positive Spearman correlation was observed between BHB and NEFA with Oscillospira, Treponema, Bacteroides and Methanocorpusculum (Archaea) bacteria. On the contrary, the genus Lactobacillus and Lachnospiraceae showed a negative association with the score of body condition, BHB and NEFA. In colostrum samples, the bacterium of the genus L7A-E11 showed a positive Spearman correlation with somatic cell count (SCC) and a negative correlation with biomarkers of energy metabolism. The Coprococcus and Treponema showed negative correlations with albumin, total protein, triglycerides and cholesterol. Finally, the Clostridiaceae had a positive correlation with the milk production of the cows. The analysis of vaginal samples showed that Methanocorpusculum had a positive correlation with biomarkers of energy metabolism, while Prevotella and L7A.E11 were negatively associated with these markers. The analysis of the entire ecosystem showed that the parameters associated with metabolism, mainly NEFA and BHB, are associated with some bacterial genera, mainly in fecal and vaginal samples from Holstein cows immediately after calving. O período de transição inclui eventos fisiológicos como o parto, colostrogênese e lactogênese, o que demanda o acionamento de mecanismos homeorréticos para atender as demandas energéticas impostas nesta fase do ciclo de produção. A inadequada adaptação da vaca no período pode evoluir para balanço energético negativo, doenças metabólicas, imunossupressão e alto risco para doenças infecciosas. Neste cenário, é factível acreditar que a microbiota da vaca sofre importantes alterações em diferentes sítios de colonização, e como causa ou efeito interfere na saúde do hospedeiro. O objetivo geral desta pesquisa foi avaliar as correlações entre parâmetros metabólicos e o estado de saúde da glândula mamária com a microbiota de vacas leiteiras imediatamente após o parto. Foram obtidas amostras sanguíneas de 20 vacas Holandesas multíparas para a determinação de biomarcadores metabólicos, além de colostro, fezes e swabs vaginais para a realização do metagenôma. Reino Archaea foram apenas encontrados em amostras fecais e vaginais. As amostras fecais apresentaram maior abundância de Firmicutes, seguidas por Bacteroidetes e Actinobacteria. Amostras vaginais mostraram domínio dos Firmicutes seguidos pelos Bacteroidetes e Proteobacteria. Já a microbiota do colostro apresentou predominância de p_Proteobacteria, seguido do Firmicutes e Bacteroidetes. No nível taxonômico familia, a Ruminococcaceae foi detectada como a mais abundante, seguida por Bacteroidaceae, Lachnospiraceae e Clostridiceae nas amostras fecais e vaginais. Por outro lado, as famílias predominantes detectadas nas amostras de colostro foram Pseudomonadaceae, Staphylococcaceae e, com menor abundância, Enterobacteriaceae. Foi observada correlação de Spearman positiva entre BHB e NEFA com as bactérias Oscillospira, Treponema, Bacteroides e Methanocorpusculum (Archaea). Ao contrário, o gênero Lactobacillus e a Lachnospiraceae apresentaram associação negativa com a condição de escore corporal, BHB e NEFA. Nas amostras de colostro, a bactéria do gênero L7A-E11 apresentou correlação de Spearman positiva com a contagem de células somáticas (CCS) e correlação negativa com biomarcadores do metabolismo energético. O Coprococcus e o Treponema apresentaram correlações negativas com a albumina, proteína total, triglicerídeos e colesterol. Por fim, o Clostridiaceae teve correlação positiva com a produção de leite das vacas. A análise das amostras vaginais mostrou que Methanocorpusculum teve uma correlação positiva com os biomarcadores do metabolismo energético, enquanto Prevotella e L7A.E11 foram negativamente associados a esses marcadores. A análise de todo o ecossistema demonstrou que os parâmetros associados ao metabolismo, principalmente NEFA e BHB, estão associados a alguns gêneros bacterianos, principalmente em amostras fecais e vaginais de vacas holandesas imediatamente após o parto.

The general aim of this research was to evaluate the hematological and innate immune profile in Holstein calves naturally exposed to microorganisms during pre-weaning phase. It was performed a transversal study including 175 dairy calves distributed in three age groups: Group 1 - 1 to 7 days of life (n=65), Group 2 - 30 to 40 days of life (n=52) and Group 3 - 60 to 89 days of life (n=58) and also distributed in 2 subgroups, healthy and unhealthy, according to clinical examination findings. Blood samples were harvested in tubes with and without EDTA anticoagulant and heparin for Red Blood Cells (RBC) and White Blood Cell (WBC) count determination by using ADVIA 2120 system, biochemical markers and for immune response assays. The flow cytometry technique was used to assess polymorphonuclear (PMN) and mononuclear (MN) cells phagocytosis of pre labeled Escherichia coli, Staphylococcus aureus and Mannheimia haemolytica. Production of Reactive Oxygen Species (ROS) was assessed in leucocytes by use of the fluorescent dye dihydrorhodamine 123 and then the response ratio (RR) was calculated to compare data between the groups/subgroups. The predominant disease detected in unhealthy neonate calves (G1) was diarrhea (46%), while Bovine Respiratory Disease (BRD) was the most important illness in G2 (63%) and G3 (59%). Regard to age physiological response, the most differences were observed contrasting G1 with G2 and G3 observing in neonates a decrease trend of RBC and serum iron also a pro inflammatory profile under natural challenges. Most of phagocytosis parameters (MN and PMN) were independent of age or healthy groups, although the amount of ROS (AFU) decreased through advance of age. G1 unhealthy subgroup presented low concentration of total solids and total protein associated with low number of RBC and leukocytosis due to neutrophilia and lymphopenia compared with healthy subgroup. Production of ROS (AFU) for M. haemolytica was higher in unhealthy than healthy neonates. G2 unhealthy subgroup presented subtle changes in hematological and innate immune response, however the concentration of total solids, protein and ROS production and RR for all antigens were lower in the unhealthy group. G3 unhealthy animals presented increase of MN cells in WBC count, and both MN and PMN cells were more phagocytic responsive for all antigens, especially M. haemolytica, also in ROS assay, compared with healthy calves. This research has evidences that neonate had a high innate immune response intensity against natural exposition to pathogens, while the intermediate heifers (G2) presented immunologically less responsive to antigens associated with the high rate of BRD. G3 group seen to be more prepared to face the challenges presented during pre-weaning phase as the immune response was more effective against the antigens. The assumption is that the differences reported are associated with the concentration of colostrum maternal factors that act enhancing the innate immune response of neonate calves, with a gradual decrease of immune response in animals with 30 to 40 days of life (G2) and subsequently development of the active adaptative response in G3. O objetivo geral desse estudo foi avaliar o perfil hematológico e imune inato de bezerras holandesas expostas naturalmente aos microorganismos na fase de aleitamento. Este estudo transversal incluiu 175 bezerras, distribuídas em 3 grupos: G1 - 1 a 7 dias de vida (n=65), G2 - 30 a 40 dias de vida (n=52) e G3 - 60 a 89 dias de vida (n=58), distribuídos em 2 subgrupos, saudáveis e doentes, de acordo com os achados do exame clínico. Foram obtidas amostras sanguíneas em tubos sem e com os anticoagulantes EDTA e heparina, para a determinação dos marcadores bioquímicos, realização do hemograma e leucograma no equipamento ADVIA 2120 e ensios imunológicos. A técnica citômetro de fluxo foi usada para a avaliação da fagocitose das bactérias marcadas Escherichia coli, Staphylococcus aureus e Mannheimia haemolytica pelas células sanguíneas mononucleares (MN) e polimorfonucleares (PMN). Espécies reativas de oxigênio (EROs) (AFU) foram mensuradas pelo uso do corante fluorescente Dihidrorodamina 123 por meio de fluorescência a partir de leucócitos assim calculado o response ratio (RR) para comparação entre os grupos/subgrupos. No subgrupo doente, a diarreia (46%) predominou no G1, enquanto a Doença Respiratória Bovina (DRB) foi à doença mais frequente no G2 (63%) e G3 (59%). As diferenças etárias para os parâmetros hematológicos foram encontradas contrastando-se os grupos G1 com o G2 e G3, observando-se em neonatos a tendência à diminuição dos parâmetros do RBC e ferro sérico e perfil pró-inflamatório mediante desafio natural. A maioria dos parâmetros de fagocitose (MN e PMN) mostrou-se independente da idade ou estado de saúde, no entanto a quantidade de EROs (AFU) diminui com o avançar da idade. Os doentes do G1 apresentaram menor Brix (%) e proteínas totais com diminuição de eritrócitos, leucocitose por neutrofilia, linfopenia e maior produção de ERO s (AFU) contra M. haemolytica em relação ao subgrupo G1 saudável. Doentes G2 apresentaram discretas alterações nas respostas hematológicas e imune inata, além de menor Brix (%) e proteína total em relação ao demais grupos de idade e menor resposta à produção de EROs (AFU) e response ratio (RR) para todos os antígenos em relação ao G2 saudável. G3 doentes em relação aos saudáveis apresentaram maior número de monócitos e ambos PMN e MN foram mais responsivos a fagocitose, EROs e RR, especialmente contra a M. haemolytica. Este estudo evidenciou que os neonatos apresentaram maior intensidade da resposta imune inata contra a exposição natural aos patógenos, enquanto que o grupo de bezerras da fase intermediária (G2) apresentaram-se menos responsivas imunologicamente aos antígenos associada à alta frequência de DRB. O grupo G3 apesar de enfrentar os desafios associados à fase final do aleitamento apresentou resposta imune mais efetiva em relação aos antígenos. Acredita-se que as diferenças relatadas estão associadas com a concentração dos fatores maternos do colostro que agem intensificando a resposta imune inata nos neonatos, com queda gradual no G2 e subsequente desenvolvimento da imunidade adaptativa nas novilhas do grupo G3.

O objetivo do presente estudo foi avaliar a transferência de imunidade passiva, saúde e o desempenho de bezerros colostrados com diferentes doses de imunoglobulinas provenientes do substituto de colostro SCCL® ou colostro materno. Os animais foram separados das mães imediatamente após o nascimento. Cinquenta bezerros da raça holandesa (machos e fêmeas) foram alocados em blocos casualizados de acordo com sexo, peso ao nascer e data de nascimento e distribuídos em diferentes protocolos de colostragem: 1) 2L de colostro materno (2CM); 2) 4L de colostro materno (4CM); 3) 2L de colostro materno + uma dose do substituto de colostro (2MC1SC); 4) 2 doses substituto de colostro ao nascer (2SC); e 5) 2 doses substituto de colostro ao nascer + uma dose substituto de colostro entre 6 a 8 horas após nascimento (3SC). Foram colhidas amostras de sangue ao nascimento, antes do fornecimento do colostro (0h) e com 48h após a ingestão do colostro para avaliar a transferência de imunidade passiva. Durante o período de aleitamento os bezerros receberam 6L/d de sucedâneo, tiveram acesso ad libitum à água e concentrado e foram alojados em abrigos individuais, tipo tropical. O consumo de concentrado foi avaliado diariamente, e semanalmente avaliou-se o peso e medidas corporais. A saúde dos animais foi monitorada diariamente e a incidência de diarreia foi avaliada através do escore fecal. Durante o aleitamento as amostras de sangue foram colhidas a cada 14 dias, para determinação de proteína total, albumina, glicose, BHBA, AGNE e insulina. A transferência de imunidade passiva não foi afetada pelos protocolos de colostragem (P>0,05). No entanto, doses mais elevadas de colostro resultaram em maior ingestão de imunoglobulinas, porém reduz a eficiência aparente de absorção (P 0,005). No entanto, afetou o número de tratamentos contra tristeza parasitária bovina (P=0,0042). O peso médio e o GMD, assim como os parâmetros sanguíneos avaliados durante o aleitamento, não foram afetados pelos protocolos de colostragem (P> 0,05). O substituto de colostro avaliado no presente estudo pode ser uma alternativa ao colostro materno, uma vez que, tanto o colostro materno como o substituto de colostro foram eficientes na transferência de imunidade passiva, resultando em desempenho similar mesmo em condições de alto desafio sanitário. The objective of the present study was to evaluate the passive transfer of immunity (PTI), health and performance of calves fed different doses of immunoglobulins from the SCCL® colostrum replacer or maternal colostrum. The animals were separated from the mothers immediately after birth. Fifty holstein calves (male and female) were allocated in randomized blocks according to sex, birth weight and date of birth and were distributed among different colostrum feeding protocols: 1) 2L of maternal colostrum (2MC); 2) 4L of maternal colostrum (4MC); 3) 2L of maternal colostrum + one dose of colostrum replacer (1MC+1CR); 4) 2 doses of colostrum replacer (2CR) and 5) 2 doses of colostrum replacer given at birth + one dose of colostrum replacer given between 6 and 8 hours after birth (3CR). Blood samples were taken at birth, before colostrum fed (0h) and at 48h after colostrum intake to assess passive immunity transfer. Calves were individually housed and bucket fed 6L/d of milk replacer, and had ad libitum access to water and starter. Starter intake was measured daily, and weekly assessed weight and body measurements. Animal health was monitored daily and the incidence of diarrhea was assessed by fecal score. During the pre-weaning, blood samples were harvested every 14 days to for determination of total protein, albumin, glucose, BHBA, NEFA and insulin. The passive transfer of immunity was not affected by colostrum feeding protocols (P>0.05). However, higher doses of colostrum resulted in higher immunoglobulins intake, but lower apparent efficiency absorption (P0.05), such as fecal score (P=0,5873), days with diarrhea (P=0,3685), days with fever (P=0,7072), number of treatments for diarrhea (P=0,8499) and number of treatments for pneumonia (P>0,005). However, affected the number of treatments for cattle tick fever (P=0.0042). The mean weight and ADG, as well as the blood parameters evaluated during pre-weaning were not affected by the colostrum feeding protocols (P> 0.05).The colostrum replacer evaluated in this study may be an alternative to maternal colostrum, once the, both maternal colostrum and colostrum replacer were efficient in the transfer of passive immunity, resulting in similar performance even under conditions of high sanitary challenge.

O objetivo geral desta pesquisa foi avaliar o impacto dos fatores maternos sobre o perfil sanitário, desempenho e performance reprodutiva do nascimento até o 1º parto. Para tanto, foram monitoradas 226 bezerras Holandesas por meio da análise dos registros da fazenda associado ao exame clínico e laboratorial entre T0 (1º dia do desmame), T1, T3, T5, T7, T15, T30 e T60. Apenas a sazonalidade influenciou na frequência de tratamentos para diarreias na fase de aleitamento, observando-se 4,04 vezes mais chances (IC 95% 1,84 - 8,85) de tratamento para os animais nascidos nos meses frios em relação aos meses quentes do ano. Em relação à época do desmame, as novilhas desaleitadas nos meses quentes apresentaram menores chances para diarreia no T3 (ODDs ratio = 0,053; IC 95% 0,007-429) e T5 (ODDs ratio= 0,009; IC 95% 0,007-0,495%). O exame clínico das bezerras ao desaleitamento (T0) revelou que as filhas das primíparas em relação às multíparas apresentaram 2,04 maiores chances de DRB (IC 95% 1,20- 3,47). As bezerras desaleitadas nos meses frios apresentaram maior 1,15 chances a mais de apresentarem DRB (IC95% 1,097-3,223). Fenômeno semelhante foi observado para Tristeza Parasitária Bovina, no qual as bezerras desaleitadas no inverno apresentaram 2,17 (IC 95% 0,21- 21,89). Em relação aos exames laboratoriais, as filhas de primíparas apresentaram maiores teores de haptoglobina - Hp (3,26±0,48 mg/dL) comparadas às multíparas (2,34±0,30mg/dL) no T7. O peso ao nascimento também influenciou nos teores de Hp no T0, observando-se maiores valores nos animais com peso entre 41 e 45 kg (3,06±0,50 mg/dL) comparados com novilhas nascidas com peso inferior a 35 kg (2,61±0,55 mg/dL) e entre 36-40 kg (2,60±0,43 mg/dL). A época do desmame influenciou à concentração de Hp, sendo que os maiores valores foram detectados nos animais desaleitados na primavera (2,20±1,00mg/dL) que outono (1,98±0,24mg/dL) e inverno (2,81±0,41mg/dL). Em relação ao desempenho entre T0 e T60 detectou-se as seguintes diferenças entre as variáveis independentes: menor peso nas novilhas nascidas de partos distócicos (P=0,05) no T60; menor peso ao nascimento (P

O presente estudo avaliou a dinâmica da onfalite, diarreia e Doença Respiratória Bovina (DRB), além do comportamento da haptoglobina (Hp) em bezerras Holandesas nos primeiros 41 dias de vida. Ainda, foi possível determinar os parâmetros de performance da Hp frente à detecção de doenças. Para tanto, foram avaliadas 216 bezerras nos momentos D2-6; D7-13; D14-20; D21-27 e D31-41. A haptoglobina (Hp) foi mensurada por técnica espectrofotométrica, enquanto a sanidade das bezerras foi avaliada segundo o Calf Health Scoring Criteria, da University of Wisconsin Madison. A diarreia foi monitorada pela avaliação da consistência das fezes, sendo adotada a seguinte classificação: escore 0 fezes com consistência normal; escore 1- fezes pastosas e semi-formada; escore 2- fezes pastosas com maior quantidade de água e conteúdo fecal aderido ao períneo e cauda; escore 3- fezes líquidas com conteúdo fecal aderido no períneo e cauda. Escores 2 e 3 foram considerados positivos para diarreia. A matéria seca das fezes também foi determinada para avaliação da saúde intestinal, sendo os animais com valores ≤15% classificados como positivos para diarreia. A DRB foi determinada adotando-se os seguintes parâmetros: tosse, secreção nasal, secreção ocular, posicionamento de orelhas e temperatura corpórea, sendo pontuados de 0 a 3 de acordo com a intensidade da sintomatologia. Soma das pontuações escore ≥5 foi adotada para classificar os animais positivos para DRB. As onfalites foram determinadas pela inspeção e palpação das estruturas umbilicais externas. O período de maior prevalência da onfalite foi no D7-13 (8,8%; 19/216), seguida pelas diarreias no D14-20 (42,9%; 76/177) e DRB no D31-41 (26,4%; 55/208). A média da concentração de Hp durante o experimento foi de 0,03±0,05 g/L, com valores mínimo e máximo de 0,00 e 0,52 g/L, respectivamente. Os picos de haptoglobina foram detectados nos momentos D7-13 (0,04±0,07) e D14-20 (0,04±0,05 g/L). Em relação às diarreias (escore fecal 2 e 3), a Hp apresentou sensibilidade de 56,9% e especificidade 74,07%, sendo o ponto de corte estabelecido equivalente a 0,02 g/L. Resultados semelhantes foram observados para diarreias determinadas pelo teor de matéria seca: sensibilidade 58,1; especificidade 76,2; e ponto de corte 0,02 g/L. Em relação a DRB, a sensibilidade e especificidade foi de 72,7 e 81,2%, respectivamente, quando utilizado a soma do escore respiratório≥ 5 associado à temperatura retal >39,5ºC, com ponto de corte de 0,02 g/L. O ciclo de doenças foi caracterizado cronologicamente pelas onfalites, diarreias e DRB nos primeiros 41 dias de vida. A haptoglobina pode ser usada como biomarcador para a detecção da DRB. Por outro lado, a proteína apresentou baixa sensibilidade para detecção de diarreia usando dois padrões-ouro. This research evaluated the dynamic of navel inflammation, diarrhea and Bovine Respiratory Disease (BRD), besides the haptoglobin (Hp) profile in Holstein heifers in the first 41 days of life. Moreover, it was possible to determine the development of haptoglobin to detect diseases. For this, it was evaluated 216 Holstein heifers in the following moments D2-6; D7-13; D14-20; D21-27 e D31-41. Haptoglobin was measured using spectrophotometric, and the health status of calves were assessed in accordance with the Calf Health Scoring Criteria from The University of Wisconsin (Madison). Diarrhea was monitored according to fecal consistency, using the following classification: score 0- normal consistency, score 1- pasty, semi-formed, score 2- pasty with largest amount of water, score 3- liquid with fecal content adhered in the perineum and tail. Calves were assessed having diarrhea when the score were 2 or 3. Fecal dry matter also was determined to evaluate the gut health, so animals with values ≤15% were classified such as positive for diarrhea. BRD was assessed using the following parameters: rectal temperature, nasal secretion, ocular secretion, cough and ear/head position with score of 0-3 based on severity of each. Calves were assessed having BRD when the sum of these scores was ≥5. Omphalitis was evaluated by inspection and palpation of navel external structures. The highest prevalence of omphalitis was observed on D7-D13 (8.8%; 19/216), followed diarrhea on D14-D20 (42.9%, 76/177) and BRD on D31-D41 (26.4%; 55/208). The mean of Hp along this research was 0.03±0.05 g/L, with minimum and maximum values of 0.00 e 0.52 g/L, respectively. The peak of haptoglobin was detected on D7-13 (0.04±0.07) e D14-20 (0.04±0.05 g/L). In relation to diarrhea (fecal score 2 and 3), the haptoglobin had sensibility of 56.9% and specificity of 74.07%, and the cut-off established was 0.02 g/L. Similar results was observed for diarrhea determined using fecal dry matter: sensibility of 58.1; specificity of 76.2; and cut-off of 0.02 g/L. In relation to BRD, sensibility and specificity detected was 72.7 and 81.2%, respectively, when the sum of score was ≥5 associated with rectal temperature >39.5ºC, with cut-off equal 0.02 g/L. The cycle of diseases was characterized by omphalitis, diarrhea and BRD in the first 41 days of life. Haptoglobin can be used as a biomarker to detect BRD. On the other hand, this protein had low sensibility to detect diarrhea using two gold standard.

Dairy calves require nutrients for maintenance and growth, but in cold weather, the body alters physiologic processes to control body temperature through thermogenesis, which increases its requirements. In this regard, it is important a better understanding of how different feeding managements act in the calf thermogenesis, performance and health when raised in temperatures below thermoneutral conditions. Based on that, two studies were performed. The first study evaluated thermoregulation, performance and blood metabolites in thirty newborn calves fed 10%, 15% or 20% BW of colostrum. At 24h of life, calves were placed in a temperature-controlled chamber at 10ºC for 150 min. After the cold challenge, calves were individually housed in ambient temperature facilities (26.8 ± 5.9°C) until weaning. Calves given 15% or 20% of BW as colostrum exhibited increased thermoregulatory responses during cold challenge and increased immunity responses during preweaning. The second study compared performance and production cost of 75 calves fed milk replacer (MR) or whole milk (WM) and a traditional starter (TS) or an alternative starter (AS) during low environmental temperatures (1.4 ± 9.2°C). Calves were assigned to one of five treatment groups in a 2 x 2 + 1 factorial. The first treatment was a negative control (NC), 4 L/d of MR from d1 to 49; 2L/d of MR from d 50 to 56 of the study and ad libitum TS (commercial texturized ration). The others four treatments were a high rate (HR) of MR or WM (6L/d from d 1 to 7, 8 L/d from d 8 to 35, 4L/d from d 36 to 42, and 2 L/d from d 43 to 49 of the study) and ad libitum AS (cracked corn from d 1 to 21, low protein grower from d 22 to 28, high protein grower from d 29 to 49 of the study) or TS. After weaning, animals were maintained in group hutches in the same environment until 12 weeks of life. Restricted liquid feeding provided higher economic efficiency. However, the final BW was higher for calves fed HRTS. In addition, feeding calves higher volumes of WM increased growth and decreased morbidity. Besides, replacing commercial TS with an AS in high rate of nutrition presented minimal impact on performance. Bezerros leiteiros necessitam de nutrientes para mantença e crescimento, contudo, em baixas temperaturas, o corpo altera os processos fisiológicos para controlar a temperatura corporal por meio da termogênese, aumentando a exigência. Neste sentido, se torna importante uma melhor compreensão de como diferentes manejos alimentares atuam na termogênese, no desempenho e na saúde de bezerros criados em temperaturas abaixo das condições de termoneutralidade. Com base nisso, dois estudos foram realizados. O primeiro estudo avaliou a termorregulação, o desempenho e os metabólitos sanguíneos de trinta bezerros recém nascidos alimentados com 10%, 15% ou 20% de colostro em porcentagem de peso corporal. Vinte e quatro horas após o nascimento, os bezerros foram colocados em uma câmara de temperatura controlada a 10°C por 150 min. Após o desafio do frio, os bezerros foram individualmente alojados em instalação à temperatura ambiente (26,8 ± 5,9°C) até o desaleitamento. Bezerros que receberam 15% ou 20% de colostro exibiram aumento das respostas termorreguladoras durante o desafio pelo frio e aumento das respostas de imunidade durante o aleitamento. O segundo estudo comparou o desempenho e os custos de produção de 75 bezerras alimentadas com sucedâneo (S) ou leite (L) e uma ração tradicional (RT) ou uma ração inicial alternativa (RA) durante baixas temperaturas ambientais (1,4 ± 9,2°C). As bezerras foram designados para um dos cinco tratamentos em fatorial 2 x 2 + 1 O primeiro tratamento foi o controle negativo (CN), 4 L/d de S do d1 ao 49; 2L/d de S do d 50 ao 56 do estudo e RT ad libitum (ração comercial texturizada). Os outros quatro tratamentos foram alta taxa (AT) de S ou L (6L/d do d 1 ao 7, 8 L/d do d 8 ao 35, 2L/d do d 36 ao 42, e 1 L/d do d 43 ao 49 do estudo) e RA ad libitum (milho quebrado do d 1 ao 21, ração de crescimento com baixa proteína do d 22 ao 28, ração de crescimento alta proteína do d 29 ao 49 do estudo) ou RT. Após o desaleitamento, os animais foram mantidos em baias coletivas até 12 semanas de vida. Dieta líquida restrita promoveu maior eficiência econômica. No entanto, o peso final foi maior para bezerras alimentadas com ATRT. Adicionalmente, alimentar bezerras com maior volume de L aumentou o crescimento e diminui morbidade. Além disso, substituir RT comercial por uma RA em altas taxas de nutrição apresentou mínimo impacto no desempenho.

O objetivo deste estudo foi avaliar os aspectos clínicos, a eficiência produtiva, reprodutiva, a resposta imune inata e humoral em fêmeas da raça Holandesa persistentemente infectadas (PI) com BVDV. Para tanto, foram selecionadas 25 PI´s por meio do ELISA antígeno, das quais oito eram bezerras ≤ 12 meses; seis novilhas entre 13 e 24 meses; e onze animais de 25 a 36 meses de idade. O grupo não infectado (NI) foi composto por fêmeas negativas com faixas etárias pareadas às PIs. Em geral, as fêmeas PIs apresentaram maior frequência de diarreia (P=0,012) e Doença Respiratória Bovina (DRB) (P=0,004), especialmente àquelas entre 25 a 36 meses de idade. As PIs apresentaram maior concentração sérica de haptoglobina (P=0,017). As vacas NI´s produziram mais leite (8-12 litros) do que as PIs (P≤0.011). A contagem de células somáticas (CCS) foi maior para as vacas PI´s em relação NI´s durante a lactação (P≤0,066). A média de CCS observada foi de 0,2-0,5 x 105 (células/mL) e 2,0-10,5 x 105 (células/mL) nos grupos PI e NI, respectivamente. A idade na primeira inseminação (P=0,001) e o número de inseminação necessário para a primeira prenhez foi maior para PI do que nas novilhas NI´s (P=0,051). Na avaliação hematológica, as PI´s apresentaram menores valores de hemoglobina (P=0,098), hematócrito (P=0,084), hemoglobina corpuscular média (P=0,092), plaquetas (P=0,040), plaquetócrito (P=0,059) e linfócitos (número absoluto P=0,075; relativo P=0,092) em relação às NI´s. Em contraste, a porcentagem de monócitos foi maior em PI do que animais NI (P=0,014). Em geral, a proporção (%) e a intensidade da fagocitose (MFI) para Staphylococcus aureus e Escherichia coli foram maiores nas PIs do que animais NI (P

Novilhas Holandesas (n=35) foram vacinadas e distribuídas em grupos de acordo com os adjuvantes presentes nas vacinas comerciais contra BVDV e BoHV-1: Halum (hidróxido de alumínio, n=9), Oleosa (emulsão oleosa, n=10), Prezent A (composto saponina, n=10) e Salina (controle, n=6). As reações locais e sistêmicas foram avaliadas às zero horas (h), seis, 24, 48, 72 e 168h pós-vacinal. A produção de anticorpos (ACs) foi mensurada nos dias da vacinação (D0), D21 e D42. Capítulo 1 O objetivo deste estudo foi avaliar a resposta inflamatória sistêmica em novilhas vacinadas contendo diferentes tipos de adjuvantes. O número de hemácias (P=0,009) e hemoglobina (P=0,028) foram maiores no grupo Prezent A após a 2a dose. Os teores de ferro foram maiores no grupo controle após 1ª e 2ª dose (P=0,000; 0,000). Em geral, no leucograma os grupos vacinados apresentaram decréscimo nos números de leucócitos (P=0,001) em 2ª dose, neutrófilos (%) (P=0,000; 0,000) em ambas aplicações e monócitos (%) (P=0,010) após 1ª dose. Os linfócitos (%) apresentaram aumento gradual após as duas doses (P=0,031; 0,000), observando-se menores proporções nos grupos Prezent A e Oleosa. Basófilos (%) após 2ª dose (P=0,012) e eosinófilos (%) (P=0,000; 0,000) foram mais reativos nos grupos Prezent A e Halum entre 24 e 72h. As novilhas Prezent A apresentaram maiores valores (P=0,000; 0,000) haptoglobina às 24 e 48h em relação aos demais grupos após a 1ª e 2ª dose. Em geral, a produção de EROs foi suprimida nas novilhas vacinadas em relação ao controle após 1a dose (P=0,018) e entre 24 à 168h após a 2a dose (P=0,002). Capítulo 2 O objetivo desta pesquisa foi avaliar os efeitos adversos associados às reações locais e sistêmicas, assim como verificar a reposta imune humoral induzida pelas vacinas. A reatividade local foi mais intensa no grupo Oleosa após a 1a dose (P=0,000), em contrapartida o grupo Prezent A após a 2a dose foi mais reativo (P=0,000). A temperatura retal foi elevada em Prezent A entre 0 a 24h em 1a dose (P=0,000). O escore de Doença Respiratória Bovina foi mais intensa no grupo Prezent A e Oleosa às 48 horas (P=0,0024). Os ACs contra BVDV foram detectados apenas em D42, observando-se médias semelhantes entre Prezent A (log2=5) e Halum (log2=5). A soroconversão foi maior em Halum (78%) em comparação ao Prezent A (40%) e oleosa (10%). Em relação ao BoHV-1, observou-se títulos e soroconversão em D21 nos grupos Halum (log2=3; 67%) e Prezent A (log2=1; 80%). No D42 verificou-se uma maior intensidade de resposta para Prezent A (log2= 6; 100%), seguido de Halum (log2=4; 100%) e Oleosa (log2=3,0; 60%). Os dados permitem concluir que a vacina contendo o adjuvante oleoso e Prezent A ocasionaram maior reatividade local, porém a Prezent A induziu maior resposta inflamatória sistêmica. A produção de ACs contra o BVDV e BoHV-1 foi mais intensa na vacina com hidróxido de alumínio e Prezent A. Estudos futuros são necessários para demonstrar os efeitos benéficos da resposta inflamatória sistêmica do Prezent A sobre a resposta imune adquirida mediada por células do tipo Th1. Dairy heifers (n=35) were vaccinated and distributed according to adjuvants present in commercial vaccines against BVDV and BoHV-1: Halum (n=9), Oil (n=10), Prezent A (n=10) and Saline (n=6). The local and systemic reactions were evaluated at zero hours (h), 6, 24, 48, 72 and 168h post-vaccination. The production of antibodies (ABs) was measured at vaccination days (D0), D21 and D42. Chapter 1 The objective of this study was to evaluate the inflammatory systemic response in vaccinated heifers with products that contained different types of adjuvants. The numbers of red blood cells (P=0.009) and hemoglobin (P=0,028) were higher in Prezent A after the 2nd dose. The iron were higher in saline group after 1st and 2nd dose (P=0.000; 0.000). In leukogram, vaccinated groups showed a decrease in total leukocytes (P = 0.001) at 2nd dose, neutrophils (%) (P = 0.000; 0.000) in both applications and monocytes (%) (P = 0.010) . Lymphocytes (%) presented gradual increase after received two doses (P = 0.031; 0.000), showing smaller proportions in Prezent A and Oil groups. Basophils (%) after 2nd dose (P = 0.012) and eosinophils (%) (P = 0.000; 0.000) were more reactive in Prezent A and Halum groups between 24 and 72h. Prezent A group presented higher values (P = 0.000; 0.000) of haptoglobin at 24 and 48h compared to the other groups after the 1st and 2nd doses. In general, ROS production was suppressed in vaccinated heifers relative to control after the 1st dose (P = 0.018) and 24 to 168h after the 2nd dose (P = 0.002). Chapter 2 The objective of this research was to evaluate the adverse effects associated with local and systemic reactions as well measure humoral immune response induced by reproductive vaccines containing different adjuvants. Local reactivity was more intense in Oil group after the 1st dose (P = 0.000), in contrast, Prezent A group presented higher reactivity after the 2nd dose. Rectal temperature was higher in Prezent A between 0 and 48 hours in the 1st dose. Bovine Respiratory Disease score was higher in Prezent A and Oil groups at 48h (P=0.002). ABs against BVDV were detected only at D42, observing the similar averages between Prezent A (log2=5) and Halum (log2=5). The seroconversion was higher in Halum (78%) compared to Prezent A (40%) and oil (10%). The titers and seroconversion against BoHV-1 at D21 were observed in Halum (log2 = 3; 67%) and Prezent A (log2 = 1; 80%) groups. At D42 a higher response was observed for Prezent A (log2 = 6, 100%), followed by Halum (log2 = 4, 100%) and Oil (log2 = 3.0, 60%). The data allow to conclude that the vaccine containing oil adjuvant and Prezent A caused greater local reactivity, but Prezent A induced a greater systemic inflammatory response. The production of ABs against BVDV and BoHV-1 was more intense in Halum vaccine and Prezent A. Future studies are needed to demonstrate the beneficial effects of the systemic inflammatory response of Prezent A on the acquired Th1 cell-mediated immune response.

Os primeiros 30 dias pós-nascimento do bezerro, chamado período neonatal, é caracterizado por grande desenvolvimento imunológico. O sistema imune começa a se desenvolver ainda no início da gestação, porém, após o nascimento, mesmo que morfologicamente desenvolvido, não se apresenta totalmente funcional pela ausência de estímulos antigênicos. Ademais as particularidades anatômicas e fisiológicas da placentação dos bovinos são um impediente à transferência de imunidade durante a gestação, assim sendo o feto se desenvolve sem a influência das imunoglobulinas maternas, ficando altamente dependente ao início da vida extrauterina da transferência de imunidade passiva via colostro. As características do sistema imune do bezerro em seu período neonatal fazem com que este seja muito susceptível a doenças. Conhecer o comportamento imunitário dos bezerros recém-nascidos pode auxiliar a diminuir a incidência de doenças e o custo desse animal, além de aumentar o seu bem-estar. Deste modo, buscou-se avaliar o padrão de resposta imunitária do neonato nos primeiros 30 dias de vida, por meio de avaliações: da atividade fagocítica e do metabolismo oxidativo de neutrófilos circulantes e imunoenotipagem de linfócitos T (CD3+) e suas subpopulações (CD4+) e CD8+)) por citometria de fluxo e a expressão gênica das citocinas IL-4, IL-10, IL-12 e IFN-ϒ por PCR em Tempo Real. O exame físico, o hemograma e avaliação de transferência de imunidade passiva foram considerados como critério de inclusão para garantir a sanidade dos animais durante o período experimental. Com base nos resultados obtidos nesta pesquisa para pode se concluir que: a atividade de fagocitose dos granulócitos foi constante nos 30 dias avaliados; a produção de espécies reativas de oxigênio por granulócitos foi observada nos ensaios basal e estimulado; e com comportamento semelhante, apresentando os dois ensaios, maiores porcentagens nos dias 1, 25 e 30 p.n.; os linfócitos CD3+) e suas subpopulações:CD4+), CD8+), estes apresentaram porcentagens semelhantes àquelas encontradas nos bovinos adultos; e a relação CD4+) /CD8+) aumentou aos 30 dias de vida, pelo aumento de CD4+). Não foi possível mensurar a expressão gênica das citocinas IL-4 e IFN-ϒ em nenhum dos momentos avaliados; no entanto, foi verificada a expressão gênica de citocinas IL-10 e IL-12, com uma inclinação para o perfil Th2 induzido pela expressão mais frequente de IL-10, observando-se influência da expressão gênica das citocinas IL-10 e IL-12 no leucograma, na atividade dos granulócitos, e nas subpopulações de linfócitos T. The first 30 days post-birth of the calf, called the neonatal period, is characterized by large immunological development. The immune system begins to develop even at the beginning of gestation, but after birth, even if morphologically developed, it is not fully functional due to the absence of antigenic stimuli. In addition, the anatomical and physiological characteristics of bovine placentation are an impediment to the transfer of immunity during gestation, so the fetus develops without the influence of maternal immunoglobulins, being highly dependent at the beginning of the extrauterine life of the transference of passive immunity via colostrum. The characteristics of the immune system of the calf in its neonatal period make it very susceptible to diseases. Knowing the immune behavior of newborn calves can help reduce the incidence of diseases and the cost of this animal, and increase their well-being. The aim of this study was to evaluate the immune response pattern of the neonate in the first 30 days of life through evaluations of phagocytic activity and oxidative metabolism of circulating neutrophils and T lymphocyte (CD3 +) immuno-typing and its subpopulations (CD4 + and CD8 +) by flow cytometry and the gene expression of the IL-4, IL-10, IL-12 and IFN-ϒ cytokines by Real-Time PCR. Physical examination, blood count and passive immunity assessment were considered as inclusion criteria to guarantee the health of the animals during the experimental period. Based on the results obtained in this research it can be concluded that: granulocyte phagocytosis activity was constant in the 30 days evaluated; the production of reactive oxygen species by granulocytes was observed in the basal and stimulated assays; and with similar behavior, presenting the two trials, highest percentages on days 1, 25 and 30 p.n .; the CD3 + lymphocytes and their subpopulations: CD4 +, CD8 +, these presented percentages similar to those found in adult bovines; and the CD4 + / CD8 + ratio increased at 30 days of life, due to the increase in CD4 +. It was not possible to measure the gene expression of IL-4 and IFN-ϒ cytokines in any of the evaluated moments; However, IL-10 and IL-12 cytokine gene expression was observed, with an inclination to the Th2 profile induced by the more frequent expression of IL-10, with the influence of the gene expression of the cytokines IL-10 and IL- 12 on leukogram, granulocyte activity, and T lymphocyte subpopulations.

O objetivo deste trabalho foi identificar o padrão de vigor e status metabólico através da determinação da frequência dos sinais objetivos e metabólitos sanguíneos após o nascimento, possivelmente associados à transferência de imunidade passiva, além de determinar o melhor horário para o uso do refratômetro de Brix na avaliação da transferência de imunidade passiva em bezerros neonatos após a ingestão de colostro. No primeiro experimento foram utilizados 46 bezerros neonatos de ambos os sexos, nascidos entre setembro de 2013 e julho de 2014. A avaliação do vigor dos animais foi realizada entre 15 e 30 minutos após o nascimento com o auxílio da escala APGAR modificada pela Universidade de Guelph. A colheita de sangue para análise de metabólitos seguiu os horários de 0h (antes da ingestão), 1h, 2h, 4h, 6h, 12h, 24h, 48h contadas a partir da ingestão do colostro. Os parâmetros sanguíneos foram determinados por kit enzimático específico para cada parâmetro em Sistema Automático para Bioquímica. Todos os animais utilizados neste estudo foram oriundos de partos eutócicos e apresentaram, de acordo com a escala APGAR, vigor satisfatório. As concentrações de metabólicos sanguíneos dos neonatos mostraram que o consumo de colostro aumentou a disponibilidade de energia e a concentração de frações proteicas, comumente utilizadas como indicativos da transferência de imunidade passiva. No segundo experimento foram utilizados 47 bezerros neonatos de ambos os sexos, nascidos entre março e julho de 2014. O colostro foi ordenhado após o parto e a qualidade determinada com auxílio do colostrômetro e do refratômetro digital. A colheita do sangue para a análise dos parâmetros sanguíneos seguiu os horários de 0h (antes da ingestão), 1h, 2h, 4h, 6h, 12h, 24h, 48h, 72h, 96 e 120h, contadas a partir da ingestão do colostro. A concentração de proteína total foi determinada por refratômetro de Brix e por kit enzimático em Sistema Automático para Bioquímica. Os demais parâmetros sanguíneos foram determinados por kit enzimático específico para cada parâmetro em Sistema Automático para Bioquímica. A contagem global e diferenciada das células sanguíneas foi realizada nos tempos 0, 12 e 24h após o fornecimento do colostro. O colostro se manteve na faixa de boa qualidade, segundo os critérios de classificação de medidas pelo colostrômetro e refratômetro digital de Brix. O consumo de colostro foi o principal fator de variação dos parâmetros estudados neste trabalho. A avaliação da transferência de imunidade passiva em bezerros recém-nascidos deve ser realizada por volta das 24 horas após a ingestão do colostro, pois neste momento a absorção de macromoléculas colostrais já está encerrada e a PT alcança estabilidade. A partir deste período, não é possível determinar se as frações proteicas avaliadas são de origem colostral ou endógena, o que não garante avaliação segura sobre a transferência de imunidade passiva. The objective of this study was to identify the vigor and metabolic status through the determination of objective signs and blood metabolites just after birth of dairy calves, possibly associated with the passive immunity transfer. Also, determine the best time after colostrum intake to estimate the passive immunity transfer using a Brix refractometer. The first trial evaluated 46 newborn calves, males and females, born from September 2014 to July 2014. Animals\' vigor evaluations were carried out between 15 and 30 minutes after birth using the APGAR scale modified by the University of Guelph. The blood sample collection for metabolites analysis were done at 0h (before intake), 1h, 2h, 4h, 6h, 12h, 24h, and 48h after colostrum intake. Blood parameters were analyzed by enzymatic kits using an automatic biochemical system. All animals were born from eutocic births and presented, according to the APGAR scale, satisfactory vigor. The newborns metabolites blood concentrations revealed that colostrum intake increased the energy availability and the concentration of protein fractions, commonly used as indicative of passive immunity transfer. For the second trial 47 newborn calves of both sexes, born from March and July 2014, were used. The colostrum was milked after parturition and quality was determined using a colostrometer and digital Brix refractometer. Blood samples were taken from calves at 0h (before intake), 1h, 2h, 4h, 6h, 12h, 24h, 48h, 72h, 120h and 96, after colostrum intake. The total protein (TP) concentration was measured by a Brix refractometer and an enzymatic kit using an automatic biochemical system. Other blood parameters were determined by specific enzyme kit for each parameter in Automatic System for Biochemistry. The global and differential blood cell count were performed at times 0, 12 and 24h after colostrum feeding. Colostrum has remained in the range of good quality according to the criteria of classification measures by colostrometer and digital Brix refractometer. Colostrum intake was the main factor of variation of the studied parameters. The evaluation of the passive transfer of immunity to newborn calves should be performed at about 24 hours after colostrum intake, because at this time, the absorption of colostral macromolecules is already finished and TP reaches stability. From this period, it is not possible to determine whether the assessed protein fractions are from colostrum or endogenous origin, which does not guarantee reliable assessment on the transfer of passive immunity.

O objetivo geral deste trabalho foi avaliar a influência dos leucócitos do colostro bovino na imunidade inata, desenvolvimento da microbiota intestinal e ocorrência de diarreias em bezerras Holandesas recém-nascidas. Para isso, 20 bezerras Holandesas foram acompanhadas nos seguintes momentos: antes da mamada do colostro (D0); 1-2 (D2); 7 (D7); 14 (D14); 21 (D21) e 28 (D28) dias após nascimento e foram distribuídas em dois grupos experimentais: grupo COL+ recebeu colostro fresco (4L) proveniente de suas respectivas mães; e grupo COL- recebeu colostro congelado e acelular (4L) de vacas doadoras. Capítulo 1 O objetivo deste capítulo foi avaliar a presença e influência dos leucócitos do colostro na colonização do trato gastrintestinal. Para isso, amostras de colostro foram semeadas em TSA e MacConkey para CBT e CCT; e amostras de fezes em agar sangue, MacConkey e Salmonella-Shiguella. Bezerras apresentaram maior frequência de diarreia no D14 (COL+=78%; COL-=60%). O grupo COL- apresentou maior CBT e CCT/mL (3,93x106 ufc/mL e 3,01x105 ufc/mL) em relação ao COL+ (0,94x106 ufc/mL e 0,78x105ufc/mL). Sobre as espécies bacterianas isoladas, as que foram mais frequentes no COL+ foram Proteus mirabilis (29,91%), Escherichia coli (28,04%), Citrobacter freundii (5,61%) e Staphylococcus spp (5,61%), no COL- foram Escherichia coli (28,70%), Proteus mirabilis (27,78%), Klebsiella pneumoniae (11,32%) e Morganella morganii (5,66%). O momento com maior isolamento em ambos os grupos foi o D2 (COL+ = 26 cepas; COL- = 27 cepas), período em que iniciou a diarreia nas bezerras. Não foi possível detectar diferenças entre as frequências de microrganismos entre os grupos COL+ e COL-. A administração de colostro COL+ e COL- não influenciou na proporção de bactérias aeróbias presentes nas fezes e na ocorrência de diarreia das bezerras durante o período neonatal. Capítulo 2 O objetivo deste capítulo foi avaliar a influência dos leucócitos do colostro na resposta imune inata em bezerras Holandesas. Os animais foram submetidos ao exame clínico, seguido da colheita das amostras sanguíneas para realização das provas laboratoriais. As concentrações de cortisol sérico e haptoglobina não apresentaram diferenças estatísticas, enquanto a concentração de ferro foi diferente entre os grupos no D7. No leucograma não foi detectada diferença para os leucócitos totais e neutrófilos absolutos, mas houve tendência entre os grupos no D7 para os valores de neutrófilos relativos. O marcador CH138+CD62L+ não apresentou diferença entre os grupos, apesar da maior expressão ter sido detectada no COL-. A expressão de CH138+CD62L- foi maior no COL+ no D14. A fagocitose e produção de H2O2 pelos neutrófilos sanguíneos apresentou perfil semelhante em relação ao S. aureus e E. coli entre os grupos, apesar do COL- apresentar maior intensidade de fagocitose do D7 ao D14. Houve tendência para o aumento da proporção de granulócitos liberando H2O2 basal no D14 para o COL-, entretanto o COL + apresentou tendência para maior intensidade da fagocitose no D21. A proporção de granulócitos (%), estimulados com S. aureus, liberando H2O2 foi maior no COL+ em D7, enquanto o estímulo com a E. coli não resultou em diferenças entre os grupos. A intensidade de fluorescência foi maior e gradual no COL+ quando as células foram estimuladas, porém não foram encontradas diferenças estatísticas. As células do colostro influenciaram no perfil sanitário apresentado pelas bezerras, observando-se maior intensidade de diarreias, menores teores de ferro sérico e anemias no grupo que recebeu colostro congelado. A migração dos granulócitos sanguíneos foi mais rápida e intensa no COL+ em relação ao COL-, após exposição natural aos patógenos causadores de diarreia. O índice de fagocitose (%) dos granulócitos apresentou semelhança entre os grupos, entretanto a intensidade da fluorescência foi mais intensa no COL-. Em contrapartida, o COL+ demonstrou maior habilidade em produzir H2O2 The aim of this study was to evaluate the influence of bovine colostrum leukocytes in innate immunity, in the development of the intestinal microbiota and the occurrence of diarrhea in newborn Holstein calves. For this, 20 Holstein calves were followed in the following moments: before colostrum intake (D0); 1-2 (D2); 7 (D7); 14 (D14); 21 (D21) and 28 (D28) days after birth. They were divided into two experimental groups: COL+ group, which received fresh colostrum (4L) from their mothers; and COL-group which received frozen and acellular colostrum (4L) of donor cows. Chapter 1 -The aim of this chapter was to evaluate the presence and influence of colostrum leukocytes in the colonization of the gastrointestinal tract. For this, colostrum samples were seeded in TSA and MacConkey for TPC and TCC; and stool samples on blood agar, MacConkey and Salmonella-Shiguella. Calves presented higher frequency of diarrhea in D14 (COL+ = 78%; COL- = 60%). The COL- group showed higher TPC and TCC/mL (3,93x106 cfu/mL and 3,01x105 cfu/mL) compared to COL+ (0,94x106 cfu/mL and 0,78x105 cfu/mL). Regarding the isolated bacterial species, those that were more frequent in the COL+ were Proteus mirabilis (29.91%), Escherichia coli (28.04%), Citrobacter freundii (5.61%) and Staphylococcus spp (5.61%); in the COL-were Escherichia coli (28.70%), Proteus mirabilis (27.78%), Klebsiella pneumoniae (11.32%) and Morganella morganii (5.66%). The moment with more insolation in both groups was the D2 (COL+ = 26 strains; COL- = 27 strains), period in which started the diarrhea in calves. It was not possible to detect differences between the frequencies of microorganisms between the COL+ and COL- groups. The COL+ and COL- colostrum management did not influence the proportion of aerobic bacteria present in feces and the occurrence of diarrhea in calves during the neonatal period. Chapter 2 The aim of this chapter was to evaluate the influence of colostrum leukocytes in the innate immune response in Holstein calves. The animals were submitted to clinical examination, followed by blood samples collection to perform laboratory tests. The serum cortisol and haptoglobin concentrations did not show statistical differences while the iron concentration was different between groups at D7. The leukogram did not show difference to total leukocytes and absolute neutrophils, but there was a trend between groups at D7 for relative values of neutrophils. The CH138+CD62L+ marker showed no difference between groups, despite an increased expression was detected in COL-. The expression of CH138+CD62L- was greater in COL+ at D14. The phagocytosis and production of H2O2 by blood neutrophils showed similar profile in relation to S. aureus and E. coli between groups, although COL- presented greater phagocytosis intensity from D7 to D14. There was a trend for the increase of granulocyte proportion, releasing basal H2O2 at D14 for COL-, however COL+ presented trend to a higher intensity of phagocytosis at D21. The proportion of granulocytes (%) stimulated with S. aureus releasing H2O2 was greater in COL+ at D7, while stimulation with E. coli resulted in no differences between the groups. The fluorescence intensity was higher and gradual in COL+ when cells were stimulated; however, it was not detected statistical differences. The colostrum cells influenced in the health profile presented by the calves, with a higher intensity of diarrhea, lower levels of serum iron and anemia in the group that received frozen colostrum. The migration of blood granulocytes was faster and more intense in COL+ in relation to COL- after natural exposure to pathogens that cause diarrhea. The phagocytosis rate (%) of granulocytes showed similarity between groups, although the fluorescence intensity of COL- was more intense. In contrast, the COL+ demonstrated greater ability in producing H2O2

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do suplemento de colostro (SC) associado ao colostro materno (CM) de alta ou média qualidade na saúde e desempenho de bezerros leiteiros. No primeiro experimento foram utilizados 44 machos da raça Holandesa, distribuídos nos tratamentos: 1) CM de alta qualidade fornecido em volume correspondente a 15% do peso ao nascer (PN); 2) CM de média qualidade (15%PN) e 3) CM de média qualidade (15% PN) + SC. O protocolo de colostragem afetou a concentração de proteína total nas primeiras 48 horas de vida e durante a fase de aleitamento (P0,05); no entanto, os animais que receberam CM de alta qualidade foram medicados por um menor número de dias (P0,05), embora tenha ocorrido efeito de idade (P0,05). Os parâmetros sanguíneos nas primeiras 24 horas não foram afetados pelos tratamentos (P>0,05). O consumo e o desempenho não foram afetados pela administração do suplemento de colostro (P>0,05), no entanto houve efeito de idade para ambos os parâmetros (P0,05). A taxa de mortalidade observada durante o experimento foi de 2,5%. O consumo adicional de Ig através do fornecimento de suplemento de colostro em associação ao colostro materno de alta qualidade não melhorou a imunidade, bem como não afetou o desempenho ou a saúde de bezerros leiteiros. No terceiro experimento, foram utilizadas 67 fêmeas da raça Holandesa ou mestiças Girolando nos seguintes tratamentos: 1) CM de alta qualidade fornecido em volume correspondente a 10% PN; e 2) CM de alta qualidade (10% PN) + SC. O consumo e o desempenho não foram afetados pelo SC (P>0,05). O escore fecal também não foi afetado (P>0,05), mas observou-se maior frequência de animais com escore de desidratação nas 2ª e 3ª semana de vida, quando os escores fecais foram mais altos para todos os tratamentos. Houve uma maior porcentagem de animais suplementados sendo medicados devido a diarreias na segunda semana de vida. Houve maior frequência dos animais do grupo não suplementado com escore 1 de descarga nasal nas semanas 3 a 7. O consumo adicional de imunoglobulinas através do fornecimento de suplemento de colostro em associação ao colostro materno de alta qualidade não afetou o desempenho ou a saúde dos animais. The aim of this study was to evaluate the effect of colostrum supplement (CS) associated with maternal colostrum (MC) of high and medium quality on health and performance of calves. In the first experiment 44 Holstein males were used in the following treatments: 1) high quality MC provided in a volume corresponding to 15% of birth weight (BW); 2) medium quality MC (15% BW) and 3) medium quality MC (15% BW) + CS. Colostrum feeding protocol affected the total protein concentration in the first 48 hours of life (P0.05); however, animals that received high quality colostrum were treated for a shorter number of days (P0.05) and were increased over the weeks (P 0.05). Blood parameters during the first 24h were not affected by treatments (P>0.05). The concentrate intake and performance were not affected by the administration of CS (P> 0.05), however there was an age effect (P 0.05). The mortality rate observed during the experiment was 2.5%. The additional intake of Ig via CS in combination with high quality MC have not improved immunity or affected the performance and health of dairy calves. In the third trial, 67 female Holstein or Holstein x Gir were assigned to two treatments: 1) high quality MC supplied in c volume corresponding to 10% BW; and 2) high quality MC (10% BW) + CS. Concentrate intake and performance were not affected by feeding a CS (P> 0.05). The fecal score was not affected by the CS (P> 0.05), but there was a higher frequency of animals with dehydration score during the 2nd and 3rd week of life, when the fecal scores were higher for both treatments. There was a higher percentage of supplemented animals being medicated because of diarrhea during the second week of life. There was a higher frequency of animals in the non-supplemented group with nasal discharge score 1 in weeks 3 to 7. The additional consumption of immunoglobulins through the colostrum supplement feeding in combination with high quality colostrum did not affect the performance or the health of animals.

Dentre as diversas doenças que podem acometer os neonatos bovinos, as onfalopatias destacam-se como sendo uma das mais importantes devido a sua alta incidência e consequentes perdas econômicas. A porção do umbigo que permanece em contato com o meio ambiente contaminado aumenta a exposição do neonato aos microrganismos e as chances de ocorrer uma onfalopatia infecciosa, principalmente quando há falhas no manejo dos bezerros (fornecimento de colostro e cura do umbigo) e de higiene do ambiente em que eles vivem. Os componentes do umbigo representam uma importante porta de entrada para os microrganismos, podendo levar à infecção ascendente, com complicações secundárias, o que aumenta a geração de prejuízos econômicos. Com a finalidade de se evitar tais consequências, a realização da identificação dos microrganismos mais frequentemente encontrados nessa circunstância, assim como o conhecimento do perfil de sensibilidade dos mesmos, faz-se necessária, pois, com eles, é possível se direcionar a antibioticoterapia, minimizando o desenvolvimento de resistência bacteriana, além do tempo e custos do tratamento. Diante da importância dessa enfermidade, da escassez de informações sobre o assunto e da premissa de que o umbigo é uma importante porta de entrada a agentes infecciosos, podendo ocorrer bacteremia e outras complicações, o presente estudo realizou a identificação dos agentes bacterianos isolados a partir da secreção do umbigo e de amostras de sangue de bezerros de até 30 dias de vida com onfalopatia infecciosa. Além disso, verificou a sensibilidade dos microrganismos isolados frente a alguns antimicrobianos e a influência de alguns fatores sobre a presença da enfermidade e características dos isolamentos bacterianos. Foram avaliados 417 bezerros da raça Holandesa, machos ou fêmeas, oriundos de propriedades leiteiras localizadas no interior do Estado de São Paulo, desde a primeira semana até os 30 dias de vida, dos quais, 32 apresentaram onfalopatia infecciosa. Os resultados obtidos evidenciaram influência de alguns fatores do ambiente com a ocorrência de onfalopatias infecciosas e com o tipo de isolamento (único ou misto) encontrado nas amostras de secreção do umbigo; alterações do exame físico em função da coloração de Gram das bactérias encontradas nas amostras de sangue; e características das culturas obtidas em função do local de isolamento das bactérias (umbigo ou sangue) e em função do tipo de isolamento em amostras de secreção do umbigo. Durante o exame físico específico dos componentes umbilicais, foi observado que o exame ultrassonográfico é um recurso semiológico mais acurado na identificação das afecções umbilicais, principalmente as intra-abdominais, do que a palpação abdominal bimanual. Ainda, neste estudo, foi possível verificar que os microrganismos isolados a partir da secreção das estruturas umbilicais de bezerros com onfalopatia infecciosa foram, em sua maioria, Gram negativos, sendo mais frequentemente isolada Escherichia spp. (31,03%). Outras bactérias também foram isoladas, como Streptococcus spp. (13,8%), Klebsiella spp. (10,34%) e Proteus spp. (10,34%). No geral, as bactérias isoladas nas estruturas umbilicais foram resistentes a cefalexina, clindamicina, enrofloxacina, tetraciclina, benzilpenicilina, trimetoprim/sulfametoxazol, ampicilina e oxacilina. Observou-se, ainda, que a maioria dos microrganismos isolados a partir do sangue de bezerros com onfalopatia infecciosa foram Gram positivos, sendo Staphylococcus spp. (62,5%) o gênero mais frequentemente isolado. As bactérias isoladas no sangue foram, em geral, resistentes a ácido fusídico, benzilpenicilina, eritromicina, amoxicilina/ácido clavulânico, cefpodoxima, ceftiofur, cloranfenicol, nitrofurantoína e piperacilina. Among the several diseases that can affect newborn calves, omphalopathies stand out as the most important due to their high incidence and consequent economic losses. The portion of the navel that remains in contact with the contaminated environment intensifies the neonate\'s exposure to the microorganisms and the chances of infectious omphalopathies occur; especially when there are errors in the management of the calves (colostrum supply and navel care) and in the sanitation of the environment in which they live. The components of the umbilicus represent an important entryway for microorganisms, which can lead to ascending infection with secondary complications, which increases the production of economic losses. In order to avoid such consequences, the identification of the most frequently found microorganisms in these circumstances, as well as the knowledge of their sensitivity profile, are required. Consequently, it is possible to target antibiotic therapy, minimizing both the development of bacterial resistance, and time and treatment costs. Given the importance of this disease, the scarcity of information on the subject, and the premise that the navel is an important entryway to infectious agents, leading to bacteremia and other complications, the present study isolated and identified the bacterial agents from the navel secretion and from blood samples of calves up to 30 days old with infectious omphalopathy; as well as verified the sensitivity of the microorganisms isolated against some antimicrobials, the influence of some factors on the presence of the disease, and characteristics of the bacterial isolates. We evaluated 417 male and female Holstein calves, raised in dairy farms placed in the State of Sao Paulo, from the first week up to 30 days of life. Thirty-two of the evaluated calves had infectious omphalopathy. Results evidenced the influence of some environmental factors on the occurrence of infectious omphalopathies and the type of isolation (single or mixed) found in the samples of navel secretion; the alterations found on physical examination along with the Gram staining of the bacteria found in the blood samples; and the characteristics of the cultures obtained along with the site of isolation of the bacteria (navel or blood) and the type of isolation in samples of navel secretion. During the specific examination of the umbilical components, it was observed that the ultrasonographic exam is a more accurate semiological resource in the identification of umbilical affections, mainly the intra-abdominal ones, than the bimanual abdominal palpation. Also, from this study it was possible to verify that microorganisms isolated from the umbilical structures of calves with infectious omphalopathy were Gram negative, and that Escherichia spp. was the most frequently isolated genus (31.03%). Other bacterial genus also isolated were: Streptococcus spp. (13.8%), Klebsiella spp. (10.34%), and Proteus spp. (10.34%). These isolated bacteria were, in general, resistant to cephalexin, clindamycin, enrofloxacin, benzylpenicillin, tetracycline, trimethoprim / sulfamethoxazole, ampicillin, and oxacillin. Most of the microorganisms isolated from the blood of calves with infectious omphalopathy were Gram positive, and Staphylococcus spp. was the most frequently isolated genus (62.5%). Bacteria isolated from blood were, in general, resistant to fusidic acid, benzylpenicillin, erythromycin, amoxicillin / clavulanic acid, cefpodoxime, ceftiofur, chloramphenicol, nitrofurantoin, and piperacillin.

O objetivo geral desta pesquisa foi avaliar o metabolismo e a resposta imune celular no sangue de vacas leiteiras no período de transição. Foram utilizadas 13 vacas Holandesas, de 2ª a 4ª parição, avaliadas nas semanas M-2, M-1 (pré-parto), M0 (dia da parição), M1, M2 e M3 (pós-parto). Foram realizadas análises das seguintes variáveis: produção leiteira, escore de condição corporal (ECC), mensuração sérica do beta-hidroxibutirato (BHB), ácidos graxos não esterificados (NEFA), IGF-1 (Fator de Crescimento Semelhante à Insulina Tipo 1), glicose (GLIC), colesterol (COL), triglicerídeos, proteína total (PT), albumina (ALB), globulina (GLOB), AST (Aspartato transaminase), GGT (Gamaglutamiltransferase) e cálcio total e cálcio ionizável. Além disso, a resposta imune celular das vacas forma avaliadas pelas interpretações do leucograma e imunofenotipagem dos linfócitos. Foram encontradas medianas do ECC equivalentes a 4,0; 3,8; 3,5; 3,0; 3,5 e 3,5 dos momentos M-2 ao M3. Em relação aos indicadores energéticos, observou-se aumento da concentração de NEFA e BHB no parto e pós-parto, ao contrário, os teores de triglicerídeos, colesterol e IGF- 1 diminuíram. Além disso, foi possível observar concentração máxima de glicose no momento da parição. Em relação ao metabolismo proteico e hepático, observam-se menores concentrações de proteína total e globulina no momento do parto; os teores de albumina diminuíram no pós-parto. A atividade sérica da AST aumentou a partir da parição, porém não foi possível detectar variações para a GGT. As concentrações de cálcio sério total e ionizado foram menores a partir da parição. A análise do leucograma das vacas no período de transição revelou leucocitose por linfocitose no momento do parto, apesar de não ter sido observada variações no número absoluto e relativo dos linfócitos durante o período de transição, foi possível observar que os linfócitos sanguíneos apresentaram-se elevados durante todo o período de estudo. O aumento no número de linfócitos decorreu da elevação dos linfócitos B (CD21+). A partir desse resultado realizou-se exame sorológico para o vírus da Leucose Enzootica Bovina, detectando 12/13 (92,30%) vacas soropositivas. O linfócito T (CD3+) e suas subpopulções auxiliar (CD3+CD4+) e citotóxica (CD3+CD8+) apresentaram ligeiras oscilações durante o período de estudo. Com base nos resultados obtidos pode-se concluir que: a) As vacas Holandesas apresentaram variações nos parâmetros do perfil energético indicadoras de balanço energético negativo e mobilização lipídica, caracterizados especialmente pela diminuição do ECC e elevações nos teores séricos de NEFA e BHB; b) os teores de PT e GLOB apresentaram variações em decorrência da colostrogênese e infecções uterinas pós-parto. A albumina apresentou diminuição no pós-parto, decorrente do aumento da demanda nutricional para a produção de leite e uso de aminoácidos como precursor energético no processo de gliconeogênese; c) os valores de IGF-I apresentaram acentuada redução no momento do parto, sinalizando para mobilização lipídica e desacoplamento do eixo somatotrópico a partir da parição; d) as vacas apresentaram hipocalcemia, especialmente na parição e primeira semana pós-parto; e) a infecção pelo Vírus da Leucose Enzoótica Bovina influenciou na resposta imune observada no período de transição, caracterizada por linfocitose e aumento da população de linfócitos B (CD21+). The general aim of this research was to evaluate the metabolism and cellular immune response in blood of dairy cows in transition period. Was evaluated 13 Holstein cows, from 2nd to 4th parturitions in the weeks M-2, M-1 (pre-partum), M0 (parturition day), M1, M2 and M3 (post-partum). Paremeter analysis were performed: milk production, body condition score (BCS), beta-hydroxybutyrate (BHB), nonesterified fatty acids (NEFA), IGF-1 (growth factor Insulin-like similar to insulin type 1), glucose (GLUC), cholesterol (CHOL), triglycerides, total protein (TP), albumin, globulin (GLOB), AST (aspartate transaminase), GGT (gamma-glutamyl transferase), total calcium and ionized calcium. Furthermore, cows cellular immune response was evaluated by WBC and lymphocyte immunophenotyping. Was find for BCS median 4.0; 3.8; 3.5; 3.0; 3.5 and 3.5 between the moments M-2 to M3. Regarding to energy indicators, an increase of NEFA and BHB in parturition and postpartum was observed, in contrast, the values of triglycerides, cholesterol and IGF-1 decreased. Moreover, it was possible to obtain maximum glucose concentration at parturition time. Regarding to protein and hepatic metabolic was find lower values of total protein and globulin was observed in pre-partum and parturition in relation to postpartum; values of albumin decreased in post-partum. The Aspartate aminotransferase activity increased from calving, but it was not possible to detect GGT variations. The concentration of total and ionized calcium serum were lower from calving. The analysis of cows leukogram in the transition period revealed leukocytosis by lymphocytosis at delivery, although no variation in the absolute and relative number of lymphocytes was observed during the transition period. The increase of lymphocytes number occurred due to the increase of B lymphocytes (CD21 +). From this result, serological test for the Enzootic Bovine Leukosis Virus was developed, detecting 12/13 (92,30%) of seropositive cows. T lymphocytes (CD3 +) and subpopulations T helper (CD3+ CD4+) and T cytotoxic (CD3+ CD8+) showed slight fluctuations during period. Based on the results, we can conclude the following: a) Holstein cows showed variations in the parameters of the energy profile indicator of negative energy balance and lipid mobilization, characterized especially by the decreasing of BCS and elevations in serum NEFA and BHB; b) the levels of TP and GLOB showed variations due to colostrogenesis and postpartum uterine infections. The albumin decreased in postpartum, due to increased nutrient requeriment for milk production and use of amino acids as energy precursor in the gluconeogenesis; c) the amounts of IGF-I showed significant reduction at delivery, signaling lipid mobilization and uncoupling of the somatotropic axis after calving; d) cows showed hypocalcemia, especially in calving and first week post-partum; e) Infection with Enzootic Bovine Leukosis Virus influenced the immune response observed in the transition period, characterized by lymphocytosis and the increase of B lymphocytes (CD21 +) population.

O objetivo geral desta pesquisa foi avaliar a transferência de imunidade passiva e a sua influência na resposta vacinal para as viroses envolvidas na Doença Respiratória Bovina (DRB). Os dados obtidos nesta pesquisa estão apresentados em dois capítulos. Capítulo 1 - Objetivou-se avaliar a dinâmica de anticorpos (Acs) específicos para as viroses respiratórias e subpopulações de linfócitos em bezerros do nascimento aos 240 dias (d) de vida. Para tanto, acompanhou-se a transferência de imunidade passiva de Acs específicos para as viroses respiratórias em 19 bezerros, destes cinco foram selecionados para acompanhamento da dinâmica de Acs neutralizantes e subpopulações de linfócitos dos 14 aos 240d. O colostro fornecido era proveniente de vacas doadoras vacinadas. A análise da qualidade individual do colostro revelou índice Brix ≥21%, observando-se forte correlação desses valores com proteína total (r= 0,942 e P= 0,001). Após 48 horas da ingestão do colostro, pôde-se observar soroconversão dos 19 animais (100%) para os agentes virais envolvidos na DBR. As medianas (Log2) encontradas foram de 12,3, 9,0, 5,0 e 8,5 para BVDV, BoHV-1, BRSV e BPIV-3. Dos 14 aos 240d os 5 bezerros avaliados, demonstraram declínio gradual dos títulos de Acs (Log2) para BVDV (12,8-3,3), BoHV-1 (10,0-3,3) e BPIV-3 (10,0-2,0), embora o BVDV não tenha apresentado soronegatividade até os 240d. Manifestações clínicas de broncopneumonia foram observadas em 4/5 (80%) bezerros dos 80 aos 135 d. BRSV (11,3-2,0) apresentou perfil diferenciado na dinâmica de anticorpos em relação às demais viroses. Não foram detectadas diferenças estatísticas entre os momentos para as viroses apesar das variações detectadas (P>0,05). A meia-vida e tempo para soronegatividade foram de 36,2±6,1 e 367,01±68,7d para BVDV, 50,7±18,0 e 239,67±66,88d para BoHV-1 e, 46,8±21,1 e 303,36±60,15d para BPIV- 3. BRSV não respeitou modelo de regressão para cálculos de meia-vida e soronegatividade. Valores absolutos e relativos das populações de linfócitos não revelaram diferenças estatísticas entre os momentos (P>0,05). Contudo, a dinâmica das subpopulações de linfócitos revelou aumento de células B CD21+ até 150d; aumento nos valores relativos das subpopulações CD4+, CD8+ e CD3+CD4-CD8- principalmente aos 74-90d. Assim, pôde-se determinar uma janela de susceptibilidade a partir dos 74d especialmente ao BRSV e BoHV-1, momento que precede o aumento dos títulos de Acs após exposição natural. Capítulo 2 Objetivou-se avaliar a influência dos Acs maternos na resposta imune para DRB induzida pela vacinação. Foram selecionados 23 bezerros recém-nascidos, distribuídos aleatoriamente entre 4 grupos experimentais: G1 vacinado aos 14d e booster aos 44d; G2 aos 90d e aos 120d; G3 aos 180d e aos 210d. Além disso manteve-se um grupo controle não vacinado CG1, CG2 e CG3. Os bezerros foram vacinados com a mesma vacina comercial empregada para vacinação das doadoras de colostro. Observou-se: (1) a vacina com BVDV inativado não promoveu aumento dos títulos de Acs para nenhum dos grupos avaliados; (2) G1 não demonstrou soroconversão para nenhuma das viroses, enquanto controle CG1 exibiu decréscimo dos títulos para BVDV, BoHV-1 e BPIV-3; (3) o BRSV apresentou baixa soroconversão no G2, enquanto o controle demonstrou altos títulos dos 44-120d; (4) não foi possível distinguir entre quais tempos ocorreram diferenças entre títulos (P>0,0167); (5) linfócitos B (CD21+) aumentaram do T0-T2 para G1, diminuíram para G2, e aumentaram no G3; (6) linfócitos T CD3+ diminuíram ao longo do tempo para todos os grupos, exceto CG3; (7) apesar de oscilações, linfócitos T CD4+, CD8+ e WC1+ se mantiveram praticamente constantes até 240d, exibindo maiores proporções nos grupos vacinados; (8) a expressão do marcador CD25+foi mantida pelo grupo G1 até o T2, mas apresentou aumento no G2 e G3; (9) manifestações de broncopneumonias foram identificadas nos bezerros do grupo controle (4/5 - 80%) e podem ter exercido influência nas diferenças encontradas para as células entre os grupos. Em geral, a vacinação dos bezerros aos 90 (G2) e 180d (G3) manteve ou estimulou a produção de Acs para o BoHV-1, BRSV e BPIV-3, e a ativação das células T expressas pelo marcador CD25+ pode ter sido responsável pela proteção dos bezerros frente à DRB. Assim, com base nos resultados, concluiu-se que a intensidade da imunidade dos bezerros induzida pela vacinação aumentou de acordo com o desenvolvimento etário e diminuição dos títulos de Acs maternos. A conclusão geral desta dissertação aponta para a necessidade precoce de imunização dos bezerros, especialmente pela susceptibilidade observada para BRSV e BPIV-3 aos 74-90d de vida. Entretanto, esta pesquisa não encontrou resposta humoral induzida pela vacinação no grupo de bezerros vacinados aos 14 e 44 dias, apesar dos indícios de resposta imune celular. Assim, estudos futuros devem ser elaborados considerando estratégias para amplificar a resposta imune precoce dos bezerros para os agentes virais envolvidos na DRB The main purpose of this research was to evaluate the transfer of passive immunity and its influence on vaccine response to the viruses involved in bovine respiratory disease (BRD). The data obtained in this study are presented in two chapters. Chapter 1 - The objective was to evaluate the dynamics of specific antibodies to the respiratory viruses and lymphocyte subpopulations in the calves from birth to 240 days (d) of life. Thus, the transfer of passive immunity of specific antibodies to the respiratory viruses were assessed in 19 calves; from these, five were selected for monitoring the dynamic of neutralizing Abs and lymphocytes subpopulations from 14 to 240d. The colostrum was provided from donor vaccinated cows. The analysis of individual quality of the colostrum revealed Brix ≥21%, observing strong correlation of these values with total protein (r = 0.942 and P = 0.001). After 48 hours of colostrum intake, was observed seroconversion of the 19 animals (100%) for the viral agents involved in the DBR. The median (Log2) ratio found was 12.3, 9.0, 5.0 and 8.5 for BVDV, BoHV-1, BRSV and BPIV-3. The 5 calves followed from 14 to 240d showed gradual decline in antibody titers (Log2) to BVDV (12.8 to 3.3), BoHV-1 (10.0 to 3.3) and BPIV-3 (10, 0-2.0), although could not be detected seronegative calves for BVDV up to eight months of age. Clinical manifestations of bronchopneumonia were observed in 4/5 (80%) calves from 80 to 135 days of life. BRSV (11.3 to 2.0) showed a distinct profile in the dynamics of antibodies compared to other viruses. There were no statistical differences between times for viruses despite variations detected (P> 0.05). The half-life and time to become seronegative were 36.2±6.1 and 367.01±68.7d for BVDV, 50.7±18.0 and 239.67± 66.88d for BoHV-1 and, 46.8±21.1 and 303.36±60.15d for BPIV-3. BRSV did not respect regression model to perform half-life and seronegative calculations. Absolute and relative values of lymphocyte populations revealed no statistical differences between times (P> 0.05). However, the dynamics of lymphocyte subpopulations showed increase in B cells CD21+ up to 150d; increase in the relative values of CD4+, CD8+ and CD3+CD4-CD8- subpopulations, mainly to 74-90d. Thus, it was possible to determine a window of susceptibility since 74d especially for BRSV and BoHV-1, moment that precede the increase in antibody titers after natural exposure. Chapter 2 - The objective was to evaluate the influence of maternal antibodies in the immune response to respiratory viruses induced by vaccination. Was selected 23 newborn calves that were randomly distributed in four groups: G1 - vaccinated at 14d and booster at 44d; G2 - vaccinated at 90d and booster at 120d; G3 - vaccinated at 180d and booster at 210d. Furthermore were kept a non-vaccinated control group - CG1, CG2 and CG3. Calves were vaccinated with the same commercial vaccine in the colostrum donors. From these, could be observed: (1) the vaccine with inactivated BVDV did not promote increase of antibodies titers in any of the assessed groups; (2) G1 did not demonstrated seroconversion for any of the viruses while CG1 control exhibited decrease in the titers for BVDV, BoHV-1 and BPIV-3; (3) BRSV had low seroconversion in G2, while the control showed high titers from 44 to 120d; (4) where the differences between times occurred could not be distinguished (P

O presente estudo objetivou-se avaliar o perfil das citocinas como indicador prognóstico em diferentes protocolos de tratamento da mamite bovina. De um total de 130 vacas em lactação da raça holandesa foram selecionadas cinco vacas sem alteração ao exame do leite (C-), cinco vacas sem grumos no leite, mas com CMT positivo e 30 vacas com mamite clínica. Os animais com mamite clínica foram alocados em três grupos. O grupo G1 (n=10) recebeu tratamento com antibiótico sistêmico (enrofloxacina), enquanto o grupo G2 (n=10) recebeu somente antibiótico intramamário (sulfato de cefquinoma) e o grupo G3 (n=10) foi tratado com os dois princípios (enrofloxacina sistêmico e sulfato de cefquinoma intramamário). Os grupos controle foram formados respectivamente por animais negativos para as duas provas (C1; n=5), e negativos para a prova de fundo escuro e positivos para CMT (C2; n=5). Amostras de leite e sangue foram colhidas antes do tratamento (M0) e no segundo (M1), quinto (M2) e décimo segundo dia (M3) após o término do tratamento para serem submetidas a exame bacteriológico do leite, antibiograma do leite, dosagem de citocinas no leite e no sangue (IL-1, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, TNF-α INF-γ) e dosagem de imunoglobulinas no leite e no sangue (IgG1, IgG2, IgM e IgA). Foi verificada a normalidade da distribuição dos resultados, utilizando-se teste de Anderson-Darling. Para a avaliação das diferenças entre as médias dos resultados obtidos, foram realizados os testes de análise de variância ANOVA One-way (Unstacked) (para dados com distribuição normal) e Mann-Whitney (para dados que não apresentaram distribuição normal), sendo as análises consideradas significativas as que apresentaram P≤0,05. Todos os animais do G3 apresentaram cura clínica e 80% cura bacteriológica nos momentos subsequentes ao tratamento (M1a M3). Ao se avaliar a resposta imunológica desse grupo, notou-se primeiramente o aumento de IL-6 sérico no M1 acompanhado de IgG1 e IgG2, os quais juntamente com o aumento de IL-4 e TNF-α perpetuaram a inflamação até o M2, enquanto que na glândula mamária já se iniciava a resolução da inflamação com o aumento de IL-10. Por outro lado, os animais do grupo G2 apresentaram cura clínica e bacteriológica no M1, porém esta não se manteve. Imunologicamente, após o tratamento, o perfil predominante desse grupo foi o Th2 com aumento de IgG1 e IL-4. Ao final do experimento, alguns animais do grupo G2 voltaram a manifestar a doença clinicamente, e tal fato foi acompanhado da diminuição das concentrações de IL-4, IgG1 e de IL-6 no leite. Nos animais do grupo G1 houve cura clínica não absoluta e 40% de cura bacteriológica no M3. Imunologicamente, observou-se altos níveis de IL-6 e IL-8 no leite durante todo o período de tratamento e diminuição de IgG2 sérico no M3 correlacionado negativamente com a IgG2 láctea, caracterizando uma resposta local tardia. Os resultados permitem inferir que o acompanhamento por mais de duas semanas da dinâmica da resposta imunológica depende da eficiência do protocolo antimicrobiana para se estabelecer um prognóstico. Além disso, a definição precoce da resposta imune pode ser dificultada pelo mais intenso tratamento antimicrobiano observado nos animais do tratamento combinado (G3) sendo insuficiente para debelar precocemente a infecção quando usado um tratamento antimicrobiano ineficiente. The present study aimed to evaluate the cytokine profile as a prognostic in different treatment of bovine mastitis indicator. A total of 130 lactating cows of Holstein cows five without change to the examination of milk (C -), five cows in milk without lumps , but with positive CMT and 30 cows with clinical mastitis were selected . Animals with clinical mastitis were divided into three groups. The G1 (n = 10) received treatment with systemic antibiotics (enrofloxacin), while the G2 (n = 10) received only antibiotic intramammary (Cefquinome sulfate) and G3 (n = 10) group was treated with the two principles (systemic enrofloxacin and intramammary cefquinome sulfate). Control groups were formed respectively by the two negative tests (C1, n = 5) animals, and negative for evidence of dark and positive background for CMT (C2, n = 5). Milk and blood samples were collected before treatment (M0) and second (M1) , fifth (M2) and the twelfth day (M3) after completion of treatment to undergo bacteriological examination of milk , milk antibiogram, dosage cytokines in milk and blood (IL-1 , IL-2 , IL-4 , IL-6 , IL-8 , IL-10 , TNF- α IFN- γ ) and serum immunoglobulin in milk and blood (IgG1 , IgG2 , IgM and IgA) . Normal distribution of the results was verified using the Anderson- Darling test. For the evaluation of differences between the means of the results obtained , tests of ANOVA One -way (unstacked) (for data with normal distribution) and Mann - Whitney test ( for data that were not normally distributed) were performed and the analyzes considered significant if P ≤ 0.05 showed that . All G3 animals showed clinical cure and bacteriological cure in 80 % subsequent to treatment time (M1a M3). In evaluating the immune response of this group was noted primarily increased serum IL-6 in M1 together with IgG1 and IgG2, which together with the increased IL -4 and TNF- α to perpetuate inflammation M2 while mammary gland that has already started the resolution of inflammation with increased IL-10. On the other hand, the G2 group showed clinical and bacteriological cure in M1, but this was not maintained. Immunologically, after treatment, the predominant profile of this group was to increase the Th2 IgG1 and IL-4. At the end of the experiment, some animals from G2 again manifesting the disease clinically, and this fact was accompanied by decreased concentrations of IL - 4 , IgG1 and IL - 6 in milk. In animals of G1 there was no absolute clinical cure and bacteriological cure 40 % of the M3. Immunologically , it was observed high levels of IL-6 and IL-8 in the milk during the treatment period and a decrease in serum IgG2 M3 negatively correlated with milk IgG2 , featuring a late local response . The results may imply that monitoring for more than two weeks of the dynamics of the immune response depends on the efficiency of the antimicrobial protocol to establish a prognosis. In addition, the early definition of the immune response may be complicated by better antimicrobial treatment of animals observed in combined treatment (G3) being insufficient to overcome the infection early inefficient when used antimicrobials.

O nascimento de um bezerro é marcado pela passagem de um meio estéril, para um ambiente contaminado, aliado o fato da placentação (sindesmocorial), que não permite a passagem de anticorpos durante a gestação e sem um sistema imunológico desenvolvido funcionalmente, o neonato necessita da ingestão do colostro para lhe conferir imunidade nos primeiros dias de vida. Além das imunoglobulinas o colostro possui leucócitos, e citocinas que parecem participar do estabelecimento da imunidade neonatal. Apesar da potencial importância desses componentes do colostro, poucos são os estudos que avaliaram a transferência das citocinas do colostro bovino e seu papel na imunidade neonatal, razão pelo qual esse projeto teve como seguintes objetivos: mensurar as concentrações das citocinas IL-1&#946, IL-6, TNF-α e IFN-y presentes no soro de bezerros neonatos da raça Holandesa e avaliar a interferência do manejo do colostro bovino e do seu oferecimento, ou não, sobre as concentrações dessas citocinas no soro desses bezerros, durante os 15 primeiros dias pós-nascimento. Utilizaram-se bezerros nascidos de parto eutócico e distribuídos igualmente por três grupos experimentais (n=5): G1- receberam 4 litros de colostro fresco provenientes de suas próprias mães; G2- receberam 4 litros de colostro provenientes de pool de colostro congelado e o G3- foram alimentados apenas com leite. Para a avaliação das citocinas referidas no soro dos bezerros, foram feitas cinco coletas de sangue durante os quinze primeiros dias de vida pós-nascimento (p.n.): T0 (antes da primeira ingestão de colostro ou leite); T1 (1 a 2 dias p.n.); T2 (3 a 4 dias p.n.); T3 (5 a 6 dias p.n.) e T4 (10 a 15 dias p.n.). Também mensurou-se as citocinas TNF-α, IL-1β e IL-6 no sobrenadante do colostro fornecido aos bezerros do grupo G1, e citocinas TNF-α, IL-1β, IFN-y e IL-6 no sobrenadante do pool de colostro fornecido aos bezerros do grupo G2. Os bezerros do grupo G1 apresentaram valores detectáveis para as citocinas referidas, atingindo picos nos tempos T1(2 a 3 dias p.n.) ou T2 (3 a 4 dias p.n.) enquanto que os bezerros do grupo G2 apresentaram valores detectáveis apenas para o tempo T3(5 a 6 dias p.n.) para a citocina IL-6, enquanto que os bezerros do grupo G3, não apresentaram concentrações detectáveis para nenhuma citocina mensurada com exceção da citocina IL-1beta no tempo 4 (10 a 15 dias p.n.).Com base nos resultados encontrados nesta pesquisa foi possível: (a) verificar a transferência de citocinas IL-6, IL-1β, TNF-α e IFN-y para o soro de bezerros do grupo G1 via ingestão de colostro fresco. (b) verificar a transferência de citocina IL-6, para a circulação de bezerros do grupo G2, via ingestão de pool de colostro. (c) verificar que bezerros recém-nascidos privados de colostro (G3) não apresentaram concentrações detectáveis de citocinas IL-6, IL-1β , TNF-α e IFN-y nos primeiros quinze dias de vida, demonstrando que concentrações detectáveis das citocinas em questão provêm do colostro. (d) verificar que o grupo de bezerros que recebeu colostro de suas próprias mães (G1) obteve maior concentração de citocinas que o grupo que recebeu pool de colostro (G2), demonstrando que as células leucocitárias presentes no colostro fresco são capazes de expressar citocinas no sangue periférico de bezerros recém-nascidos até 15 dias pós-nascimento. The birth of a calf is marked by the passage of a sterile environment to a contaminated environment, coupled with the fact of placentation (sindesmocorial), which does not allow the passage of antibodies during pregnancy and without an immune system developed functionally, the needs of the neonate ingestion of colostrum to give it immunity during the first days of life. Besides the colostrum immunoglobulin has leukocytes and cytokines that seem to participate in the establishment of neonatal immunity. Despite the potential importance of these components of colostrum , there are few studies evaluating the transfer of cytokines from colostrum and its role in neonatal immunity, reason why this project had the following objectives: to measure the concentrations of IL- 1β, IL- 6, TNF-α and IFN-y in the serum of newborn Holstein calves and evaluate the interference of bovine colostrum management and of his offering , or not , on the concentrations of these cytokines in the serum of these calves during the first 15 days after birth. We used calves born from normal delivery and equally divided into three experimental groups (n = 5): G1 - received 4 liters of fresh colostrum from their mothers; G2- received 4 liters of colostrum from a \"pool\" of frozen colostrum and G3- were fed only milk. For the evaluation of these cytokines in the serum of calves, blood collections were made during the first fifteen days of postnatal life (p.n.): T0 (before the first intake of colostrum or milk), T1 (1st 2 days p.n.), T2 (3 to 4 days p.n.), T3 (5 to 6 days p.n.) and T4 (10 to 15 days p.n.). Also measured is the cytokine TNF-α , IL-1β and IL-6 in the supernatant of colostrum fed to calves in group G1, and cytokines TNF-α , IL- 1β, IFN-y and IL -6 in supernatant \" pool\" of colostrum fed to calves in G2. Calves from G1 group had detectable values for these cytokines, reaching peaks at T1 (2 to 3 days p.n.) or T2 (3 to 4 days p.n.) while calves in G2 showed detectable values only for the period T3 ( 5 to 6 days p.n. ) for the cytokine IL-6, whereas the calves of group G3 did not show any detectable for cytokine concentrations measured with the exception of IL- 1beta 4 time ( 10 to 15 days p.n.). Based on findings of this study it was possible to: (a) verify the transfer of IL- 6, IL- 1β, TNF-&#945 and IFN-y in the serum of calves from G1 via ingestion of fresh colostrum. (b) verify the transfer of cytokine IL -6 into the circulation of calves in G2 via ingestion of \"pool\" of colostrum. (c) verify that deprived newborn calves colostrum (G3) showed no detectable concentrations of IL - 6 , IL- 1β , TNF-α and IFN-y in the first fifteen days of life , demonstrating that detectable concentrations of cytokines in question come from the colostrum. (d) verify that the group of calves that received colostrum from their mothers (G1) had higher cytokine concentrations than the group that received \"pool\" of colostrum (G2), demonstrating that leukocytes present in fresh colostrum are able to express cytokines in peripheral blood of newborns up to 15 days after birth calves.

O objetivo geral desta pesquisa foi avaliar a resposta imune (RI) humoral e celular de bezerros recém-nascidos mediante imunização passiva e ativa, usando como modelo o Vírus da Diarreia Viral Bovina (BVDV) e o Herpesvírus Bovino tipo-1 (BoHV-1). Esta pesquisa foi dividida em duas etapas e seus dados estão apresentados em dois capítulos. Capítulo 1- Acompanhou-se a imunização passiva de bezerros do nascimento até os seis meses de idade e a influência da vacinação materna no período pré-parto nessa resposta. Os animais foram distribuídos em dois grupos experimentais que receberam colostro de mães não imunizadas (G1, n=4) e (G2, n=6) de mães imunizadas no período pré-parto para o BVDV e BoHV-1. A colostragem foi feita pela administração de seis litros de colostro nas primeiras doze horas de vida, distribuídas em duas mamadas. Nesta etapa foi possível verificar: (1) a presença de títulos de ACs neutralizantes apenas no grupo de bezerros que receberam colostro de mães imunizadas, obtendo soroconversão após a mamada de colostro em 2/6 (33%) bezerros para o BVDV e 6/6 (100%) para o BoHV-1; (2) manutenção dos títulos de ACs protetores até os três meses de vida. Em relação a RI celular: (3) observou-se maior proporção de células T auxiliares CD4+ (P=0,05) no grupo de bezerros que receberam colostro de mães imunizadas no período pré-parto; (4) o leucograma dos bezerros demonstrou respostas inflamatórias em alguns momentos desta pesquisa, mais intensa nos animais que ingeriram colostro proveniente de mães nãoimunizadas. Capítulo 2- Acompanhou-se a imunização de bezerros para BVDV e BoHV-1 aos seis meses de idade. Dez bezerros foram distribuídos em dois grupos de bezerros não vacinados (VAC-, n=5) e vacinados para o BVDV e BoHV-1 (VAC+, n=5), as análises foram realizadas antes da imunização aos 180 dias (T0), após a 1°dose aos 210 dias (T1) e após a 2° dose aos 240 dias (T2). Os resultados obtidos para avaliação da RI humoral foram: (1) soroconversão de 2/5 (40%) animais no momento T1 e 3/5 (60%) no T2 para o BVDV; (2) soroconversão em 2/5 (40%) no T1 e 5/5 (100%) no T2 para o BoHV-1. Para a RI celular observou-se: (3) maior expressão de CD25+ pelas subpopulações de linfócitos T gama-delta WC1+ no VAC+, observando-se diferença estatística no momento T1 (P=0,0016). Com base nos resultados obtidos nas duas etapas experimentais desta pesquisa pode-se concluir que a vacinação materna é uma estratégia para melhorar a qualidade do colostro e as repostas imunes humoral e celular dos bezerros para BVDV e BoHV-1; a duração da imunidade materna considerando-se níveis protetores de Acs foi de três meses; os componentes do colostro influenciaram na resposta inflamatória dos bezerros à exposição natural aos patógenos; a vacinação dos bezerros aos seis meses de idade estimulou a resposta imune humoral para BoHV-1 e parcial para BVDV. The aim of this research was to evaluate the humoral and cellular immune response (IR) of newborn calves by active and passive immunization, using by model the Bovine Viral Diarrhea Virus (BVDV) and Bovine Herpesvirus type-1 (BoHV-1). This research was divided in two stages and the datas are presented in two chapters. Chapter 1: Was followed the passive immunization of calves from birth until six months old and the maternal vaccination influence on pre-partum period on this response. The animals were divided in two experimental groups that received colostrum from unvaccinated mothers (G1, n = 4) and (G2, n=6) from immunized mothers in the pre-partum period to BVDV and BoHV-1. The calves received six liters of colostrums on the first twelve hours of life, divided in two feedings. At this stage was verified: (1) the presence of neutralizing titers antibodies (Abs) only in group of calves that received colostrum from immunized mothers, getting seroconversion after feeding in 2/6 (33%) of calves for BVDV and 6/6 (100%) for BoHV-1, (2) maintenance of Abs titers protectors up to three months of life. In relation to immune cellular response: (3) was observed higher proportion of helper T cells CD4+ (P = 0.05) in the group of calves that received colostrum from immunized mothers during pre-partum; (4) the leukogram of calves showed inflammatory responses in some moments of this research, more intense in animals that ingested colostrums from non-immunized mothers. Chapter 2: Was followed the immunization of calves for BVDV and BoHV-1 at six months old. Ten calves were divided in two groups of calves non-vaccinated (VAC-, n = 5) and vaccinated for BVDV and BoHV-1 (VAC +, n = 5). The analyzes were performed before immunization at 180 days (T0), after the 1st dose at 210 days (T1) and after the 2nd dose at 240 days (T2). The results for evaluation of immune humoral response were: (1) seroconversion 2/5 (40%) animals at the T1 moment and 3/5 (60%) of T2 for BVDV, (2) soroconversion on 2/5 (40 %) in the T1 to 5/5 (100%) at T2 for BoHV-1. For the immune cellular response was observed: (3) increased expression of CD25+ subpopulations of T lymphocytes by gamma-delta WC1+ in VAC+, observing statistical difference in T1 moment (P = 0.0016). Based on the results obtained in the two experimental stages of this research can be concluded that maternal vaccination is a strategy to improve the quality of colostrum and humoral and cellular immune response of calves to BVDV and BoHV-1, the duration of maternal immunity considering protective levels of Abs was three months. The components of colostrum influence the inflammatory response of calves to natural exposure to pathogens. The vaccination of calves at six months old stimulated the humoral immune response to BoHV-1 and partial for BVDV.

Dentre os vários fatores que podem influenciar a polarização das respostas imunológicas nos animais destacam-se o tipo do agente agressor envolvido, as células apresentadoras de antígenos atuantes no processo e o microambiente formado pelas citocinas. Diferentes perfis de citocinas podem determinar o curso da doença, uma vez que distúrbios no equilíbrio da produção e liberação destes polipeptídeos têm papel significativo no desencadeamento e agravamento de diversas enfermidades. Vírus podem interferir com as funções das citocinas em vários níveis, influenciando na natureza da resposta imune do hospedeiro. Este desequilíbrio entre a produção de citocinas do tipo Th1 e Th2 é geralmente considerado como uma das causas da cronificação das infecções por retrovírus. O VLB, assim como outros retrovírus, também possui esta capacidade de manipular a resposta imune do hospedeiro a fim de direcionar os estágios alinfocitóticos (AL) e de linfocitose persistente (LP). No entanto, seu efeito diretamente sobre as citocinas no sangue e leite dos animais infectados ainda não foi completamente elucidado. Desta forma, o presente estudo objetivou a avaliação da resposta imune contra o VLB em vacas naturalmente infectadas por meio da quantificação de um perfil abrangente de citocinas presentes tanto no soro sanguíneo como no lácteo minimizados outros aspectos de estimulação que não fossem a presença do próprio vírus in vivo. Para tanto foram coletadas amostras de sangue e leite de 11 animais divididos em seus respectivos grupos experimentais (4, 3 e 4 animais para os grupos negativo, AL e LP, respectivamente) e determinadas as concentrações séricas e lácteas de IL-1β, IL-4, IL-10, TNF-α e IFN-γ. Para as comparações entre os grupos utilizou-se o teste não paramétrico de Kruskal-Wallis e quando estes apresentaramse significativos aplicou-se \"pós-teste\" para verificar onde tal diferença ocorreu. O nível de significância aplicado nos testes foi de 5 % (P≤0,05), sempre considerando hipóteses alternativas bicaudais. Verificou-se que não houve diferença nas concentrações das citocinas IL-1β, IL-4, IFN-γ e TNF-α no sangue dos animais pertencentes aos diferentes grupos experimentais. Quanto às concentrações das citocinas no soro lácteo dos bovinos testados nos diferentes grupos, os resultados demonstraram comportamentos semelhantes aos habitualmente descritos na literatura científica para o sangue periférico, sugerindo que a atuação do VLB sobre a glândula mamária promova interações análogas às observadas sistemicamente. Os resultados obtidos apontam para um envolvimento do VLB sobre o perfil de citocinas da glândula mamária nos animais sororreagentes. Among the many factors that can influence the polarization of immune responses in animals include the type of the offending agent involved, the antigen-presenting cells active in the process and the microenvironment formed by the cytokine. Different profiles of cytokines may determine the course of the disease, since disturbances in the balance of production and release of these polypeptides play a significant role in triggering and worsening of many diseases. Viruses can interfere with the functions of cytokines at various levels, influencing the nature of the host immune response. This imbalance in cytokine production from Th1 and Th2 is generally regarded as a cause of chronic infections by retroviruses. The BLV, like other retroviruses, also possess this ability to manipulate the host immune response in order to drive the stages non-lymphocytotic and persistent lymphocytosis. However, its effect directly on cytokines in blood and milk of infected animals has not been fully elucidated. Thus, this study aimed at evaluating the immune response against the BLV in cows naturally infected by quantifying a comprehensive profile of cytokines present in both the serum and in whey minimized others aspects of stimulation that was not the presence of the virus itself in vivo. For this purpose, samples of blood and milk of 11 animals divided into their respective experimental groups (4, 3 and 4 animals for groups negative, PL- and PL+, respectively) and certain whey and serum concentrations of IL-1β, IL- 4, IL-10, TNF-α and IFN-γ. For comparisons between groups used the nonparametric Kruskal-Wallis test and when they showed up was applied to significant \"post test\" to see where this difference occurred. The level of significance in the tests was 5 % (P≤ 0.05), when considering two-tailed alternative hypotheses. There was no difference in the concentrations of IL-1β, IL-4, IFN-γ and TNF-α in the blood of animals belonging to the different experimental groups. The concentrations of cytokines in the whey of cattle in different groups, the results showed behaviors similar to those usually described in scientific literature to the peripheral blood, suggesting that the action of BLV on the mammary gland promotes interactions similar to those seen systemically. The results indicate an involvement of BLV on the cytokine profile of the mammary gland in animals seropositive.

O colostro bovino contém fatores imunológicos, como imunoglobulinas, leucócitos e citocinas, absorvidos pela mucosa intestinal do neonato até 48 horas de vida, no entanto, pouco se conhece sobre a função de alguns desses componentes, como as citocinas, participantes da resposta imune inata e adaptativa. Acredita-se que estas substâncias possuem papel importante na imunidade dos neonatos nos seus primeiros dias de vida. Assim, os objetivos específicos desta pesquisa foram: determinar as concentrações das citocinas IL-1&#946, IL-6, IFN-γ e TNF-α no soro sanguíneo e colostro de fêmeas bovinas da raça Holandesa; verificar a liberação de citocinas pelas células mononucleares do colostro e sangue bovino "in vitro" antes e após a estimulação com Escherichia coli enterotoxigênica (ECET); avaliar a transferência das citocinas IL-1β, IL-6 e TNF-α do colostro aos bezerros neonatos, por meio da determinação das concentrações destas citocinas no soro sanguíneo dos bezerros, durante os quinze primeiros dias de vida. O trabalho foi realizado em duas etapas, em duas propriedades distintas: (1) avaliação do soro sanguíneo e colostro de primeira ordenha proveniente de 22 fêmeas; (2) avaliação das citocinas sanguíneas de 11 bezerros, antes e após a mamada de colostro. Nesta pesquisa foi possível determinar as medianas da concentração de citocinas IL-1β, IL-6, IFN-γ e TNF-α no colostro bovino e soro sanguíneo, correspondente a 70,5 e 41,5; 86,1 e 13,5; 41 e 57,9; 139,9 e 20,8 pg/mL, respectivamente, verificando menores valores de IFN-γ no colostro e TNF-α e IL-6 no soro sanguíneo. Observou-se diferença entre as citocinas no colostro e soro sanguíneo para a TNF-α. Observou-se produção de citocinas pelas células do colostro e sangue das mães mediante liberação espontânea e pela ECET com tendência ao aumento dessa produção entre os períodos de incubação celular e pela estimulação com ECET. A avaliação do soro dos bezerros mostrou ausência das citocinas IL-1β, IL-6 e TNF-α antes da ingestão de colostro, que atingiram pico após 48 horas de vida. Os valores médios das concentrações de citocinas presentes no soro das vacas e novilhas foram de 98,3; 88,4; 53,5 e 235,9 pg/mL e 144,5; 94,5; 83,9 e 116,2 pg/mL, para IL-1β, IL-6, IFN-γ e TNF-α, respectivamente. Os valores médios das concentrações de citocinas (pg/mL) presentes no colostro das vacas e novilhas foram de 97,4; 21,3; 143,3 e 35,1 pg/mL e 69,5; 6,4; 51,9 e 16,32 pg/mL, para as citocinas IL-1β, IL-6, IFN-γ e TNF-α, respectivamente. Quando se comparou os dois grupos analisados verificou-se que os valores médios de IFN-γ e TNF-α foram significativamente maiores nas vacas. Assim, com base nos resultados desta pesquisa foi possível: (a) determinar a concentração de citocinas do soro sanguíneo e colostro de fêmeas bovinas; (b) verificar a produção de citocinas pelas células do soro e colostro das vacas, verificando-se diferentes perfis nestas duas regiões; (c) verificar a absorção das citocinas do colostro pelo neonato bovino; (d) verificar que as vacas possuem maiores concentrações de citocinas IFN-γ e TNF-α no colostro, quando comparadas às novilhas; (e) não há diferenças entre a concentração das citocinas do colostro obtidas em diferentes quartos mamários. Bovine colostrum contains immunological factors, such as immunoglobulins, leukocytes and cytokines, which are absorbed by the intestinal mucous membrane of the neonate up to 48 hours of life. However, little is known about the function of some of these components, such as cytokines, which take part in innate and adaptive immune responses. It is believed that these substances have important roles in neonate immunity on their first days of life. Therefore, the specific objectives of this study were: to determine the concentration of cytokines IL-1β, IL-6, IFN-γ and TNF-α in serum and colostrum of Holstein cows; to assess the in vitro release of cytokines by mononuclear cells of colostrum and blood before and after stimulation with enterotoxigenic Escherichia coli (ECET); to evaluate IL-1β, IL-6 and TNF-α transfer from colostrum to neonate calves by determining cytokine concentrations in calf blood during the first 15 days of life. The study was carried out in two stages, in different farms: (1) evaluation of blood and first milking colostrum in 22 females; (2) evaluation of blood cytokines of 11 calves, before and after colostrum intake. In this study, it was possible to determine the medians of IL-1β, IL-6, IFN-γ and TNF-α concentration in blood and colostrum as equal to 70.5 and 41.5; 86.1 and 13.5; 41 and 57.9; 139.9 and 20.8 pg/mL, respectively. The lowest values of IFN-γ were observed in colostrum, and of TNF-α and IL-6, in serum. TNF-α concentration was different in serum and in blood. It was observed colostrum and blood cells of the cows produced cytokines spontaneously and by means of ECET, with a tendency to increase production in periods of cell incubation and stimulation with ECET. Evaluation of calf serum showed absence of cytokines IL-1β, IL-6 and TNF-α before colostrum ingestion, and these cytokines reached a peak after 48 hours of life. Mean values for cytokine concentration in the serum of cows and heifers were 98.3; 88.4; 53.5 and 235.9 pg/mL, and 144.5; 94.5; 83.9 and 116.2 pg/mL, for IL-1β, IL-6, IFN-γ and TNF-α, respectively. Mean values for cytokine concentration in the colostrum of cows and heifers were 97.4; 21.3; 143.3 and 35.1 pg/mL, and 69.5; 6.4; 51.9 and 16.32 pg/mL, for IL-1β, IL-6, IFN-γ and TNF-α, respectively. When the two groups were analyzed, it was observed that mean de IFN-γ and TNF-α were significantly greater in the cows. Thus, based on the results of this study, it was possible to: (a) determine the concentration of cytokines in serum and colostrum of cows; (b) assess cytokine production by cells of cow serum and colostrum, observing different profiles in the two samples; (c) observe cytokine absorption from colostrum by the calves; (d) assess that cows show greater concentrations of IFN-γ and TNF-α in the colostrum, when compared with heifers; (e) that there are no differences between cytokine concentrations observed in the different quarters.

O objetivo do presente estudo foi avaliar a atividade funcional dos polimorfonucleares (PMNs) do sangue de cabritos neonatos "in vitro" - metabolismo oxidativo e a fagocitose induzidos por S.aureus e E.coli, por meio da citometria de fluxo. Foram utilizados 32 cabritos da raça Saanen, acompanhados quanto ao estado de saúde do nascimento até os 15 dias de idade, distribuídos em quatro grupos: G1- colostro de cabra "in natura"; G2- colostro de cabra aquecido a 56ºC por 60 minutos; G3- colostro de vaca "in natura" e G4 - leite de cabra; sendo avaliados nos seguintes tempos: t0 (antes da ingestão do colostro); t1 (24-48h p.n.); t2 (72-96h p.n); t3 (168-192h p.n) e t4 (336-360h p.n). A avaliação estatística foi realizada pela análise de variância (ANOVA) para a comparação entre os grupos e intragrupos para amostras de pequeno tamanho, de acordo com as variáveis do estudo, com nível de significância de 5%. O metabolismo oxidativo basal não diferiu nos grupos e com a idade. O metabolismo oxidativo aumentou com o estímulo por S. aureus após a ingestão de colostro tratado pelo calor (G2), não apresentando diferenças nos demais grupos. O estímulo com E. coli o aumentou após a ingestão de colostro tratado (G2) e após a ingestão de leite de cabra (G4) a partir de t3, não diferindo nos grupos que receberam colostro de cabra e vaca "in natura" (G1 e G3 respectivamente). A comparação entre metabolismo oxidativo basal e induzido para o S. aureus foi maior antes e após a mamada do colostro nos grupos colostro de cabra "in natura" e sem colostro (G1 e G4); e, após a ingestão do colostro nos grupos que o receberam tratado pelo calor e de vaca respectivamente (G2 e G3). Para a E. coli a resposta foi maior após a ingestão de colostro tratado pelo calor (G2); antes e após a mamada de colostro de vaca (G3) ou leite (G4); não houve diferença entre o metabolismo basal e induzido para a E. coli no grupo que recebeu colostro de cabra "in natura" (G1). A fagocitose induzida pelo S.aureus não diferiu em nenhum dos grupos; o percentual de fagocitose aumentou após a ingestão de colostro de cabra "in natura" (G1) no momento t1. A fagocitose induzida pela E.coli foi maior após a ingestão de colostro de cabra nos dois grupos. O percentual de fagocitose foi maior após a ingestão do colostro tratado pelo calor e não diferiu nos demais grupos. Os resultados permitiram concluir que a ingestão do colostro não interferiu no metabolismo oxidativo basal; o desencadeamento da explosão respiratória de PMNs induzido pelas bactérias foi maior após a ingestão de colostro de cabra aquecido a 56ºC por 60 minutos; houve indícios de aumento da fagocitose para S. aureus e um aumento da intensidade de fluorescência e do percentual de fagocitose para E.coli nos grupos que receberam colostro de cabra (G1 e G2); não ficou esclarecida a influência da idade na atividade funcional de PMNs do sangue de cabritos neonatos "in vitro"; os resultados do presente estudo subsidiam propostas de melhoria do manejo da produção caprina baseada na utilização de colostro de cabra tratado pelo calor. The aim of this study was to evaluate "in vitro" functional activities of neonates goats blood polymorphonuclear leukocytes (PMNs) respiratory burst and phagocytosis induced by S. aureus and E. coli, by flow cytometry. We used 32 Saanen goats, accompanied on the health status from birth to 15 days of age divided into four groups: G1-goat colostrum \"in nature\"; G2- goat colostrum heated to 56 ° C for 60 minutes; G3-cow colostrum \"in nature\" and G4 - goat milk, being evaluated at the following times: t0 (before intake of colostrum), t1 (24-48h after birth), t2 (72-96h a.b), t3 (168-192h a.b), t4 (336-360h a.b). Statistical analysis was performed by analysis of variance (ANOVA) for comparison between groups and within groups for samples of small size, according to the study variables, with 5% of significance. The respiratory burst did not differ in basal and age groups. The stimulation of respiratory burst in S. aureus increased significantly after ingestion of colostrum treated by heat (G2) and it was not different in the other groups. Stimulation with E. coli increased after colostrum treated by heat intake (G2) and after ingestion of goat\'s milk (G4) from t3; no difference in the groups that received colostrum from goats and cows \"in nature\" (G1 and G3 respectively). The comparison of basal and induced respiratory burst for S. aureus was higher before and after the intake of colostrum or goat milk in the groups colostrum \"in nature\" and without colostrum (G1 and G4) and, after ingestion of colostrum in the groups treated with heat and bovine colostrum, respectively (G2 and G3). For E. coli, response was higher after ingestion of colostrum treated by heat (G2), before and after feeding cow colostrum (G3) or goat milk (G4), there was no difference between basal metabolism and induced to E. coli in the group that received goat colostrum \"in nature\" (G1). Phagocytosis induced by S. aureus did not differ in any group, the percentage of phagocytosis increased after ingestion of goat colostrum \"in nature\" (G1) at time t1. Phagocytosis induced by E. coli was increased after colostrum intake in both groups that received goat colostrum. The percentage of phagocytosis was increased after ingestion of colostrum but it did not differ in treated and other groups. The results showed that ingestion of colostrum did not affect the basal respiratory burst; triggering the respiratory burst of PMNs induced by bacteria was greater after eating goat colostrum heated to 56 ° C for 60 minutes, there was evidence of increased phagocytosis of S. aureus and there was an increase in fluorescence intensity and percentage of phagocytosis of E.coli in the groups receiving goat colostrum (G1 and G2); it was not clarified the influence of age on functional activity of PMNs from the blood of goats neonates "in vitro"; and the results of this study subsidize proposals for improving the management of goat production based on the use of goats colostrum treated by heat.

Esta pesquisa avaliou o efeito da transferência passiva dos leucócitos do colostro na imunidade específica de bezerras recém-nascidas. Foram acompanhadas 20 bezerras Holandesas durante o período neonatal, distribuídas em dois grupos experimentais: grupo COL+ recebeu colostro fresco (4L) proveniente de suas respectivas mães; e grupo COL- recebeu colostro congelado e acelular (4L), oriundo de vacas doadoras de colostro. As avaliações foram realizadas antes da mamada do colostro (M0), 1-2 (M1), 7 (M2), 14 (M3), 21 (M4) e 28 dias pós-nascimento (M5). As bezerras foram submetidas ao exame clínico, seguido da colheita das amostras sanguíneas para realização de hemograma, imunofenotipagem e cultivo celular. Os dois grupos foram colostrados com colostro de igual qualidade com relação à concentração de imunoglobulinas (70-120 g/L). A concentração de células do colostro fresco fornecido ao grupo COL+ foi de 1.895.849 células/mL. Não foi possível encontrar diferenças para as funções vitais em relação aos grupos experimentais. O exame específico dos sistemas revelou um caso de broncopneumonia, três de inflamação umbilical e maior frequência de escore de fezes 3 no COL-. As alterações clínicas foram refletidas no eritrograma das bezerras, sendo encontrado menor valor médio para a taxa de hemoglobina (HGB) no COL- em M3. Em relação à idade, observou-se redução gradativa dos valores médios para He (hemácias), HGB, HCT (hematócrito) e índices hematimétricos no primeiro mês de vida. A frequência de bezerras anêmicas foi maior no grupo COL- nos momentos M4 e M5. Em relação ao leucograma, observou-se diferença entre os grupos para linfócitos no M0 e M2 com valores superiores no COL-. Em relação aos momentos foi possível detectar leucocitose por neutrofilia no M0 e M1, observando-se inversão da relação neutrófilo:linfócito a partir desses momentos. Os valores de CD45+CD45RO- foram maiores em M0 no COL-, além disso, observou-se aumento da expressão do marcador de memória celular CD45RO+ do M0 ao M1 nos dois grupos experimentais. O CD3+gamma-delta- aumentou no decorrer do estudo, em contrapartida as células CD3+gamma-delta+ foram menores em M5 com relação ao M0-M3. Foi detectado também aumento dos valores de CD14+MHCII+ no primeiro mês de vida indicando maturação das células apresentadoras de antígeno. Em relação à produção de citocinas pelas células mononucleares sanguíneas, foi possível identificar maior concentração de IFN-gamma em M4, quando as células do COL- foram estimuladas com S. aureus (1 mononuclear:10 bactérias inativadas). A concentração de IL-17 detectada a partir das células do COL+ foi maior em M3, quando as células foram estimuladas com ConA. Com base nos resultados obtidos, pode-se concluir que: a) bezerras COL- apresentaram maior frequência e intensidade de doenças que evoluíram para anemia da inflamação; b) bezerras COL- apresentaram maior número absoluto de linfócitos, representadas especialmente pela subpopulação CD3+gamma-delta+ nos episódios de maior frequência de diarreias; c) Linfócitos de memória CD45RO+ aumentaram após a colostragem em ambos os grupos, sugerindo que outros componentes acelulares do colostro podem apresentar papel fundamental no desenvolvimento da resposta imunológica de bezerras recém-nascidas; d) a subpopulação CD3+gamma-delta- e as células CD14+MHCII- e CD14+MHCII+ aumentaram durante o primeiro mês de vida, indicando maturação imunológica; e) as células mononucleares das bezerras não responderam ao Herpesvírus Bovino tipo 1, porém responderam aos estímulos bacterianos, especialmente para a Escherichia coli; a interpretação do leucograma em conjunto com a análise das variações apresentadas para as citocinas inflamatórias IFN-gamma e IL-17 permitem afirmar que as bezerras apresentaram resposta inflamatória retardada e de menor magnitude no COL-. This study evaluated the effect of leukocytes passive transference from bovine colostrum in specific immunity of newborn calves. During neonatal period, 20 Holstein calves were followed. Animals were distributed in two experimental groups: COL+ which received fresh colostrum (4L) from their mothers, and COL- which received frozen and acellular colostrum (4L) that came from donor cows. The evaluations were performed in the following moments: before colostrum intake (M0), 1-2 (M1), 7 (M2), 14 (M3), 21 (M4) and 28 days after birth (M5). Heifers were submitted to clinical examination. Then, blood samples were harvested for hemogram, immunophenotyping and cell culture. Both groups were fed with the same quality of colostrum (immunoglobulin concentration 70-120 g/L). The cell concentration of fresh colostrum that was provided to COL+ group was 1.895.849 cells/mL. It was not possible to detect differences in vital functions concerning the experimental groups. The system specific examination reveled one case of bronchopneumonia, three cases of umbilical inflammation and major rates of diarrhea score 3 in group COL-. Clinical alterations were reflected in calves erythrogram. It was found lower mean value for hemoglobin (HGB) in M3 for COL-. Regarding age, a gradual reduction in mean values for erythrocytes, HGB, HCT (hematocrit) and hematimetric rates were observed in the first month of life. The frequency of anemic heifers was higher in COL- group at moments M4 and M5. Regarding leukogram, it was observed difference between groups for lymphocytes in M0 and M2 with higher values in COL-. Concerning moments, it was possible to detect leukocytosis by neutrophilia from M0 up to M1 and inversion of neutrophil:lymphocyte relation from this moment. Values of CD45+CD45RO- was higher in M0 for COL-, furthermore, increase of cellular memory marker expression CD45RO+ was observed from M0 to M1 in both groups. The CD3+gamma-delta- increased during the study. On the other hand, CD3+gamma-delta+ were lower in M5 in relation to M0-M3. Increase of CD14+MHCII+ values were also detected in the first month of life, indicating maturation of antigen presenting cells. Regarding cytokine production by mononuclear cells of heifers blood, it was possible to identify higher concentration of IFN-gamma in M4 when cells of COL- were stimulated with S. aureus (1 mononuclear: 10 inactivated bacteria). The concentration of IL-17 detected from COL+ cells was higher in M3, when cells were stimulated with ConA. Based on these results, it can be concluded that: a) COL- heifers presented higher frequency and intensity of diseases that evolved to anemia of inflammation; b) COL- heifers presented higher lymphocyte absolute number, represented specially by CD3+gamma-delta+ subsets in episodes of higher frequency of diarrhea; c) memory lymphocytes CD45RO+ increased after colostrum intake in both groups, suggesting that other acellular colostrum components can present fundamental role in development of immunological response in newborn heifers; d) the subset of CD3+gamma-delta- and the cells CD14+MHCII- and CD14+MHCII+ increased during the first month of life, indicating immunological maturation; e) heifers mononuclear cells did not respond for herpes virus bovine type 1, however, responded for bacterial stimulus, specially Escherichia coli. The interpretation of leukogram with the variation of presented analyses for inflammatory cytokines IFN-gamma and IL-17, allow to state that heifers presented delayed inflammatory response and of lesser magnitude in COL-.

O periparto é um período crítico no qual as adaptações fisiológicas e imunológicas ocorridas podem ser responsáveis pela susceptibilidade às infecções intramamárias, durante o processo de colostrogênese. Desta forma, o estudo da imunidade inata e sua resposta frente aos patógenos bacterianos são fundamentais para entendimento, diagnóstico e adoção de medidas profiláticas para a mastite bovina. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar a imunidade inata no sangue e secreção mamária de vacas da raça Holandesa no período periparto e sua resposta frente à exposição natural aos patógenos bacterianos durante a colostrogênese. Para tanto, foram avaliadas amostras de sangue (n= 91) e secreção mamária (n=208) de treze fêmeas bovinas de 2° a 4° parição. As vacas foram avaliadas semanalmente nas três semanas que antecedem e sucedem a parição prevista. A avaliação da resposta imune inata e detecção do processo inflamatório da glândula mamária (GM) foram realizadas por meio do exame específico da GM, exame bacteriológico, contagem de células somáticas da secreção mamária e provas imunológicas, tais como: viabilidade das células do colostro/leite; dosagem da citocina pró-inflamatória interferon-gama (IFN-γ), imunofenotipagem e avaliação funcional de leucócitos polimorfonucleares CH138+. Com base nos resultados obtidos, pode concluir-se que: a) A parição representou o momento com maior taxa de infecção mamária, no entanto, as alterações mamárias decorrentes do processo de colostrogênese limitaram o uso de exame específico do aparelho mamário para detecção da mastite clínica; b) A função dos neutrófilos sanguíneos nos momentos M-2 e M-1 apresentou-se diminuída, este fenômeno pode ter contribuído para maiores taxas de infecção mamária e exacerbação da função dos neutrófilos sanguíneos no momento da parição; c) A resposta nos neutrófilos sanguíneos não foi exclusiva da GM e apresentaram-se intensificadas nos momentos com alta frequência de inflamações uterinas no pós-parto; d) A GM apresenta-se altamente susceptível às infecções bacterianas no pós-parto imediato, decorrente da baixa viabilidade celular, reduzida proporção e atividade funcional dos neutrófilos CH138+ residentes. A adaptação ao pós-parto e aumento da atividade funcional dos neutrófilos da secreção mamária foi observada nas semanas subsequentes ao parto, resultando em diminuição da taxa de infecção bacteriana. Peripartum is a critical period in which physiological and immunological adaptations occurred may be responsible for susceptibility to mammary infections during colostrogenesis. Thus, the study of innate immunity and its response against bacterial pathogens are crucial for understanding, diagnosis and adoption of prophylactic measures for bovine mastitis. Therefore, the aim of this study was to evaluate the innate immunity in blood and mammary secretion of lactating Holstein cows in the peripartum period and its response due to natural exposure to bacterial pathogens during colostrogenesis. For this, blood (n = 91) and mammary secretion ( n = 208 ) samples of thirteen dry cows from 2° to 4° calving were evaluated. Cows were evaluated weekly in the three weeks preceding and following the predicted birth. The evaluation of the innate immune response and detection of inflammation of the mammary gland (MG) were performed using specific examination of MG , bacteriological, somatic cell count (SCC) of mammary secretions and immunological tests, such as: cell viability of colostrum / milk; dosage of pro-inflammatory cytokine interferon -gamma (IFN - γ ), immunophenotyping and functional assessment of polymorphonuclear leukocytes CH138+. Based on the results obtained, it can be concluded that : a) The calving represented the moment with the highest rate of mammary infection, however, the mammary changes resulting from the colostrogenesis limited the use of specific examination of the mammary system for clinic mastitis detection; b) The function of blood neutrophils in the moments M- 2 and M- 1 showed reduced, this phenomenon may have contributed to higher rates of mammary infection and exacerbation the blood neutrophils function of at parturition moment ; c) The response in blood neutrophils was not exclusive to MG and presented intensification in moments with high frequency of uterine inflammation in postpartum; d) The MG has to be highly susceptible to bacterial infections in the immediate postpartum period, due to low cellular viability ratio and reduced functional activity of residents CH138+ neutrophils . The adaptation to postpartum and increased functional activity of neutrophils in mammary secretion was observed in the following partum weeks, resulting in decreased rate of bacterial infection.

O objetivo geral deste estudo foi avaliar o efeito da mastite subclínica sobre a composição e a qualidade higiênica do leite de tanque de rebanhos leiteiros. Especificamente, objetivou-se avaliar o efeito da contagem de células somáticas (CCS) do leite cru de rebanhos leiteiros sobre as concentrações de gordura, proteína, sólidos totais e extrato seco desengordurado e sobre a contagem bacteriana total (CBT), contagem de psicrotróficos (CP) e contagem de coliformes (CC) do leite cru. Foram selecionados 230 rebanhos leiteiros localizados no Sul de Minas Gerais e Oeste de São Paulo, com base na média geométrica da CCS de cinco análises do mês anterior ao início das coletas. Estes rebanhos foram classificados de acordo com a CCS em três grupos: baixa (< 250.000 células/mL), média (> 250.000 e < 750.000 células/mL) e alta CCS (> 750.000 células/mL). Após a seleção dos rebanhos, amostras de leite de tanque foram coletadas quinzenalmente, por um período de três meses, totalizando 1380 amostras, que foram submetidas às análises de composição, CBT, CP e CC. Foi observado menor CBT e CC nos rebanhos com menor CCS, no entanto, rebanhos de média e alta CCS apresentaram maiores teores de gordura, proteína e sólidos totais. Foi observada média correlação entre CBT e CP (r = 0,6215) e entre CP e CC (r = 0,3692). Entre os indicadores de higiene e a composição do leite foram observadas correlações baixas e negativas entre CBT e gordura (r = -0,0585), CP e gordura (r = -0,0688) e CP e ST (r = - 0,0662). Os rebanhos com CCS < 250.000 células/mL apresentam maior qualidade higiênica do leite de tanque, no entanto, quanto à composição, rebanhos com maior CCS apresentaram maiores teores de gordura e proteína. The general objective of this study was to evaluate the effect of subclinical mastitis on composition and hygienic quality in bulk tank milk of dairy herds. The specific objectives were to evaluated the effect of somatic cell count (SCC) of raw milk on contents of fat, protein, total solids and nonfat dry milk and on total bacterial count (TBC), psychrotrophic count (PC) and total coliform count (CC). A total of 230 dairy farms located in South of Minas Gerais and West of São Paulo were selected, based on SCC geometric mean obtained from five monthly analysis preceding the beginning of the study. These dairy farms were classified in three groups according to SCC: low (< 250,000 cells/mL), medium (> 250,001 and < 750,000 cells/mL) and high SCC (> 750,001 cells/mL). After herd selection, bulk milk samples were collected fortnightly during three months totalizing 1380 samples, which were subjected to analysis of composition, TBC, PC and CC. A decrease of TBC and CC was observed in herds with low SCC, however, herds with medium and high SCC had increase on - fat, crude protein and total solids contents. A medium correlation was observed among TBC and PC (r = 0.6215), and also among PC and CC (r = 0.3692). Based on hygiene indicators and the milk composition, it was observed a low and negative correlation among TBC and fat (r = -0.0585), PC and fat (r = -0.0688) and PC and total solids (r = -0.0662). Dairy herds with low SCC had higher hygienic quality of bulk tank milk, however, considering the composition, herds with higher SCC showed higher milk fat and protein concentration.

Neste estudo, foi avaliando o perfil metabólico de vacas leiteiras durante o período de transição emduas épocas do ano, verão e inverno. Foram utilizados 31 animais pluríparos mestiços girolando em cada estação, totalizando 62 vacas. No verão permaneciam a pasto com suplementação de silagem de milho e concentrado no cocho. No inverno, a silagem de milho e concentrado supriam as exigências nutricionais. Foram feitas um total de 11 coletas de sangue de cada animal segundo o seguinte protocolo: quatro coletas pré-parto espaçadas semanalmente, no dia do parto e com 2, 5, 10, 15, 21 e 30 dias pós-parto. Foram avaliados os seguintes parâmetros: cálcio (Ca), fósforo (P), magnésio (Mg),proteína total, albumina, globulina, relação albumina:globulina (A:G),ácidos graxos não esterificados (AGNE), beta-hidroxibutirato (BHB), glutamil transferase (GGT), lactato desidrogenase (LDH), aspartato amino transferase (AST), glicose, triglicerídeos (TG) e colesterol. Apenas AGNE e BHB não sofreram influência da estação. As concentrações médias de Ca, Mg, TG, proteína total e LDH foram maiores no verão do que no inverno, enquanto a glicose foi maior no inverno. Nas duas estações, as menores concentrações médias de cálcio ocorreram próximas ao parto, sendo que 75% dos animais no inverno e 35,48% dos animais no verão apresentaram concentrações de cálcio abaixo do fisiológico no dia do parto. As concentrações de magnésio foram menores no pós-parto do que no pré-parto nas duas estações e as concentrações de fósforo sofreram grande variação ao longo do peri-parto. As concentrações de AGNE no dia do parto, 2 e 5 dias pós-parto foram as maiores do período. No pré-parto32,26% dos animais no verão e 29,03% no inverno apresentavam concentrações de AGNE acima do ponto de corte de 0,4 mmol/L. Além disso, 22,58% dos animais no verão e 19,35% dos animais no inverno apresentaram concentrações de BHB acima de 1,2 mmol/L em algum momento do pós-parto, representando a condição de cetose subclínica. As concentrações de glicose foram menores no pós-parto em relação ao pré-parto e apresentaram seus maiores níveis no dia do parto. As concentrações de colesterol, em ambos os períodos, caíram continuamente até o dia do parto e aumentaram ao longo de todo o pós-parto. As concentrações de triglicerídeos tiveram os maiores valores até a semana anterior ao parto, decrescendo ao menor valor no dia do parto e permanecendo nestes níveis até o final das coletas.A concentração de albumina foi maior no inverno durante o pré-parto, porém na semana anterior ao parto se igualaram, com as concentrações no verão aumentando de valor e com as concentrações no inverno caindo. Em todo o pós-parto as concentrações de albumina no inverno passaram a ser menores do que as concentrações no verão. A proteína total juntamente com a globulina, tiveram suas concentrações diminuídas próximo ao parto. As concentrações de GGT, AST e LDH sempre permaneceram dentro dos valores de referência. As concentrações destas enzimas foram maiores no pós-parto que no pré-parto. O escore de condição corporal no pré-parto foi maior no período do inverno do que no verão, porém se igualouao parto, quando a condição corporal caiu em ambos os mementos até os 21 dias pós-parto. In this study, it was evaluated the metabolic profile of dairy cows during the transition period into two seasons, summer and winter. It was used in every season 31 crossbred girolando cowswith two or more calving, totaling 62 cows. During the summer, the animals remained on pasture and were supplemented with corn silage and concentrate in the trough. In winter, corn silage and concentrate was given as much tomeet nutritional requirements. It was made a total of 11 blood samples from each animal according to the following protocol: four samples antepartum spaced weekly, at birth and at 2, 5, 10, 15, 21 and 30 days postpartum. It was evaluated the following parameters: calcium (Ca), phosphorus (P), magnesium (Mg), total protein, albumin, globulin, albumin:globulin ratio (A:G), non-esterified fatty acids (NEFA), beta-hydroxybutyrate (BHB), glutamyl transferase (GGT), lactate dehydrogenase (LDH), aspartate aminotransferase (AST), glucose, triglycerides (TG) and cholesterol. All analyseshas influence of the physiological status. AGNE e BHB was the only not influenced by the season. The mean concentrations of Ca, Mg, TG, total protein and LDH were higher in the summer than in the winter, while glucose was higher in the winter. In both seasons, the lowest average concentrations of calcium occurred close to calving, with 75 % of the animals in winter and 35.48 % of the animals in the summer showed concentrations below the physiological rate. Magnesiums concentrations were lower postpartum than antepartum in both seasons, and phosphorus concentrations suffered great variation over peri-partum. The NEFA concentrations at calving, 2 and 5 days postpartum were the highest of the period. During antepartum 32.26% of the animals in summer and 29.03 % in winter had NEFA concentrations above the cutoff of 0.4 mmol/L. Moreover, 22.58 % of the animals in summer and 19.35 % of the animals during the winter exhibited BHB concentrations above 1.2 mmol/L at any time post-partum, representing the condition of subclinical ketosis. Glucose concentrations were lower postpartum in relation to antepartum and had higher levels at parturition. The cholesterol concentrations in both periods fell continuously until the day of parturition and increased throughout the postpartum period. Triglyceride concentrations had greater values until the week before parturition, decreased to the lowest value at calving and remained at these same levels uo to the end of the collection. The albumin concentration was higher in winter during the pre-partum, but in the week before calving it was equal of the summer season. Albumin concentrations in summer increased in value after calving with concentrations falling in winter. During postpartum albumin concentrations in winter became lower than the concentrations in the summer. The total protein along with globulin, had their lowest concentrations near parturition. The concentrations of GGT, AST and LDH always remained within the reference values. The concentrations of these enzymes were higher postpartum than in the pre-partum. The body condition score during labor was higher in winter than in summer, but equaled the birth, when the body condition declined in both mementos until 21 days postpartum.

Esse trabalho objetivou avaliar o efeito de crescentes quantidades de zinco dietético no metabolismo do cobre e na prevenção de intoxicação cúprica em ovinos. Foram utilizados 40 ovinos, machos, mestiços da raça Santa Inês, distribuídos em 5 grupos experimentais de 8 animais cada, submetidos a diferentes tratamentos com cobre (Cu) e zinco (Zn). Os grupos A, B, C e D receberam diariamente 12 mg de Cu por kg de PV sendo que adicionalmente o grupo A recebeu 1 mg de zinco por kg de PV/dia, o grupo B 4 mg de zinco por kg de PV/dia e o grupo C recebeu 8 mg de zinco por kg de PV/dia. O grupo H (controle), recebeu apenas a dieta basal. O experimento teve duração de 14 semanas. Foi realizada biópsia hepática ao início do estudo e sacrifício dos animais ao término do período experimental para coleta de tecidos e flúidos. Foram determinadas as concentrações de cobre e zinco no fígado, bile e sangue total. Semanalmente foram coletadas amostras de sangue para determinações bioquímicas e hematológicas, bem como realizada pesagem dos animais. Nenhum animal do grupo controle (H) e do grupo C (alto zinco) apresentou manifestação clínica, enquanto um animal dos grupos A, B e D, respectivamente, apresentou quadro clínico característico de intoxicação cúprica acumulativa (lCA). Observou-se uma elevação dos valores de cobre no fígado em todos os grupos experimentais entre o início e o final do experimento, contudo a elevação verificada no grupo H foi marcantemente menor, tendo ocorrido em decorrência de maiores níveis de cobre na dieta basal. Verificou-se ao final do experimento que os grupos A, B, C e D apresentaram maiores concentrações de cobre hepático em relação ao grupo H. O grupo C (alto Zn) teve menor concentração de cobre hepático do que o grupo D, que não recebeu zinco. Os grupos suplementados com zinco apresentaram maiores concentrações de metalotioneína (MT) no fígado em relação aos grupos não suplementados (D e H). Os grupos A e C apresentaram maiores valores de Cu ligado à MT em relação aos grupos D e H. Conseqüentemente houve maior proporção de Cu ligado à MT em relação ao Cu total nos grupos A e C em relação ao grupo D. Não foram verificadas diferenças significativas entre os valores da atividade da yGT entre os grupos suplementados com cobre, havendo apenas uma clara diferença entre o grupo controle e os demais. Ocorreu uma elevação dos valores da atividade da yGT em relação ao tempo zero nos grupos A, B C e D a partir da sétima semana. Observou-se uma elevação dos valores da atividade da AST em relação ao tempo zero nos grupos suplementados a partir da oitava semana do experimento. Não foram verificadas alterações nas variáveis bioquímicas e hematológicas nos grupos experimentais no decorrer do experimento, a exceção dos três animais que apresentaram quadro clínico de ICA. A quantidade de cobre utilizado para desafiar os ovinos foi suficiente para gerar um aumento substancial de cobre hepático e provocar em alguns dos animais quadros característicos de intoxicação cúprica. A adição de altos teores de zinco preveniu a morte de animais no decorrer do experimento; promoveu uma redução na quantidade de cobre acumulado no fígado; estimulou a síntese de metalotioneína hepática; incrementou a quantidade de cobre hepático ligado à metalotioneína; assim como o percentual de cobre hepático ligado a metalotioneína. Essas condições favoreceram a prevenção de quadros de intoxicação por cobre em ovinos. The objective of this study was to evaluate the effects of increasing quantities of dietary zinc on the metabolism of copper and the prevention of copper toxicosis in sheep. Forty male, mixed breed St. Inês, sheep were divided into 5 experimental groups, each containing 8 animais, and were submitled to different doses of copper (Cu) and zinc (Zn). Animais from Groups A, B, C, and D received 12 mg of Cu per kg of body weight daily (BW). Additionally, those in Group A, B, and C were supplemented with increasing levels of zinc: Group A, 1 mg of Znl kg BW; Group B 4 mg of Znl kg BW; and Group C 8 mg of Zn/kg BW. Group H animais served as controls and received only the basic diet. The experiment occurred during 14 weeks during which hepatic biopsies were done at the beginning of the study, and tissue fragments were collected at the end of the experiment after the animais were euthanized. The concentrations of Zn, Cu, bile, and whole blood were determined. Weekly blood samples were obtained to evaluate biochemical and hematological parameters during which the weight of each animal was recorded. Animais used as controls (Group H) and those that supplemented with elevated doses of Zn (Group C) did not demonstrate clinical manifestation of intoxication. However, one member from Group A, B, and D demonstrated clinical manifestations that were consistent with accumulative copper toxicosis (ACC). Elevated values of hepatic Cu occurred in ali groups between the beginning and the end of the experiment, but this elevation was drastically more reduced in Group H animais due to comparatively reduced Cu levels within the basic diet. At the end of the experiment it was verified that Group A, B, C, and D animais demonstrated more elevated concentrations of hepatic Cu relative to their counterparts from Group H. Members from Group C (elevated Zn) demonstrated reduced concentrations of hepatic copper relative to those from Group D, who did not receive any zinco Members from groups that received Zn supplement demonstrated more elevated concentrations of hepatic metallothionein (MT) relative to those from Groups D and H that did not receive any supplementation. Members from Groups A and D demonstrated more reduced values of Cu bound to MT (Cu-MT), relative to those from Groups D and H. Consequently, there was a greater proportion of Cu- MT relative to total Cu in animais from Groups A and C when compared with those from Group D. Significant differences in the values of yGT activity were not verified between the groups that were supplemented with Cu; there was only a distinct difference between members of the control group and the other groups. There was an elevation in the values of yGT activity relative to time 0 on Groups A, B, C and D effective from the eight week. An increase in the values of AST activity relative to time 0 was observed in animais from groups that were supplemented, this being effective from the tenth week of the experiment. Alterations to biochemical and hematological variables were not observed during the experiment; occurring only in those three animais that demonstrated clinical manifestations of ACC. The amount of copper used to challenge the sheep was adequate to induce a substantial increase of hepatic copper and produce the characteristic manifestations of copper toxicosis in some animais. The addition of elevated values of Zn prevented the death of animais during the experiment; promoted a reduction in the quantity of copper accumulated within the liver; stimulated the synthesis of metallothionein; incremented the quantity and the percentage of hepatic copper bound to metallothionein. These conditions favor the prevention of cupper toxicosis in sheep.

O vírus da leucose enzoótica bovina (VLEB) pode interferir na proporção e na funcionalidade dos linfócitos B e das demais células sanguíneas. Acreditando-se que essas alterações pudessem interferir nos mecanismos de defesa da glândula mamária, o presente estudo avaliou funcionalmente os fagócitos sanguíneos e lácteos de vacas naturalmente infectadas pelo VLEB, por meio da expressão de diferentes receptores de superfície celular de fagócitos e linfócitos; da morte celular dos fagócitos e do linfócito B; pelo potencial de fagocitose e produção intracelular de peróxido de hidrogênio pelas células CD14+ e CH138+. Foram selecionadas nove vacas negativas para a LEB (grupo negativo), dez positivas sem linfocitose (grupo AL) e seis positivas com linfocitose persistente (grupo LP). Independente do perfil hematológico das vacas positivas para a LEB, nas amostras de sangue foram observadas menor expressão de células mononucleares CD14+, de linfócitos T (CD3+) e de linfócitos B CD21+ CD11b+ e maior expressão de linfócitos B (CD21+). As vacas do grupo LP apresentaram menores quantidades de linfócitos T auxiliares (CD3+ CD4+) e de linfócitos B CD21+ CD5- CD11b- e maiores quantidades de linfócitos B CD21+ CD5+ CD11b+. Menores quantidades de linfócitos B CD21+ CD5+ foram observados nas vacas do grupo AL do que nas vacas do grupo negativo. As vacas do grupo LP apresentaram menores índices de fagocitose por Escherichia coli pelas células mononucleares CD14+, menor produção de peróxido de hidrogênio e menores índices de fagocitose por Staphylococcus aureus pelas células polimorfonucleares CH138+. As vacas do grupo LP apresentaram menores índices de necrose, de apoptose e/ou necrose e maior viabilidade das células mononucleares CD14+, das células polimorfonucleares CH138+ e dos linfócitos B (CD21+). Apenas os linfócitos B (CD21+) das vacas do grupo LP apresentaram menores índices de morte por apoptose, e as células mononucleares CD14+ das vacas do grupo AL manifestaram maiores índices de apoptose e/ou necrose do que as vacas negativas. Independente do perfil hematológico das vacas, nas amostras de leite foram observadas maiores quantidades de macrófagos e maiores expressões de linfócitos T (CD3+) e de linfócitos B (CD21+). As vacas do grupo AL apresentaram maior quantidade de linfócitos B (CD21+) do que as vacas negativas. As vacas do grupo LP apresentaram menores quantidades de linfócitos T citotóxicos (CD3+ CD8+), de linfócitos B CD21+ CD11b+ e de linfócitos B CD21+ CD5+ CD11b+ e maior quantidade de linfócitos B CD21+ CD5- CD11b-. As vacas do grupo AL apresentaram menores índices de fagocitose por Escherichia coli pelos macrófagos CD14+ e pelos leucócitos CH138+ e as vacas do grupo LP apresentaram maior produção de peróxido de hidrogênio intracelular. As vacas positivas para LEB apresentaram maiores índices de morte por necrose dos macrófagos CD14+ e dos linfócitos B (CD21+) e menores índices de morte por apoptose dos macrófagos CD14+, dos leucócitos CH138+ e dos linfócitos B (CD21+). Estas vacas também apresentaram maior viabilidade dos macrófagos CD14+ e dos leucócitos CH138+. As vacas do grupo LP apresentaram maiores índices de apoptose e/ou necrose dos macrófagos CD14+, de necrose de leucócitos CH138+ e de viabilidade de linfócitos B (CD21+). Resultados permitem concluir que a o VLEB altera a resposta imune da glândula mamária. The enzootic bovine leukemia virus (BLV) can influence the amount of lymphocytes B and other blood cells and their functions. Believing that these changes could interfere in the defense mechanisms of the mammary gland, this study evaluated blood and milk phagocytes functions from cows naturally infected VLEB through the expression of different cell surface receptors of phagocytes and lymphocytes; from death cell of phagocytes and B lymphocytes; the phagocytosis and intracellular production of hydrogen peroxide by CD14+ and CH138+ cells. We chose nine cows negative for the LEB (negative group), ten positive without lymphocytosis (LA group) and six positive with persistent lymphocytosis (LP group). In blood samples of positive cows for BLV, it was observed smaller expression of CD14+ mononuclear, T lymphocytes (CD3+) and CD21+ CD11b+ B lymphocytes, along with increased expression of B lymphocytes (CD21+). Cows of the LP group had lower amounts of T helper lymphocytes (CD3+ CD4+) and CD21+ CD5- CD11b- B lymphocytes and higher amounts of CD21+ CD5+ CD11b+ B lymphocytes. In cows of AL group it was observed lower amounts of CD21+ CD5+ B lymphocytes than in cows of negative group. Cows of LP group had lower rates of Escherichia coli phagocytosis by CD14+ mononuclear cells, lower intracellular production of hydrogen peroxide and lower rates of phagocytosis of Staphylococcus aureus by CH138+ polymorphonuclear cells. Cows of LP group showed less necrosis, apoptosis and/or necrosis and increased viability of CD14+ mononuclear cells, CH138+ polymorphonuclear cells and B lymphocytes (CD21+). Only the B-lymphocytes (CD21+) of the cows in the LP group showed less apoptosis, and CD14 + mononuclear cells from cows in the AL group showed higher rates of apoptosis and/or necrosis than the ones from negative cows. In the milk sample, the positive cows showed higher amounts of macrophages and increased expression of T lymphocytes (CD3+) and B lymphocytes (CD21+). Cows of AL group showed a higher amount of B lymphocytes (CD21+) than negative cows. Cows of LP group had lower amounts of T cytotoxic lymphocytes (CD3+, CD8+), CD21+ CD11b+ B lymphocytes and CD21+, CD5+, CD11b+, B lymphocytes and increased amount of CD21 + CD5- CD11b- B lymphocytes. Cows of the AL group had lower rates of Escherichia coli phagocytosis by CD14+ macrophages and CH138+ leukocytes and cows of group LP had higher production of intracellular hydrogen peroxide. The positive cows for LEB had higher rates of death by necrosis of CD14+ macrophages and B lymphocytes (CD21+) and lower rates of apoptosis of CD14+ macrophages, CH138+ leukocytes and B lymphocytes (CD21+). These cows also had higher viability of CD14+ macrophages and CH138+ leukocytes. Cows on the LP group had higher rates of apoptosis and/or necrosis of CD14+ macrophages, necrosis of CH138+ leukocytes and viability of B lymphocytes (CD21+). Results suggested that the VLEB influence the immune response of the mammary gland.

A transferência de imunidade passiva colostral é muito importante tanto para a saúde do neonato quanto para o seu desempenho. Com o objetivo de estudar a relação entre a eficiência ou não no estabelecimento da imunidade passiva colostral em neonatos e a suas interrelações com aspectos de desempenho e produção destes animais foram colhidas amostras de sangue de 354 bezerras com 30 horas de vida (24 a 36 h) em 10 propriedades localizadas no centro leste do Estado do Paraná, Brasil. Determinações bioquímicas do soro das amostras foram realizadas para avaliar a qualidade de transferência de imunidade passiva. A proteína sérica total foi determinada pelo método do Biureto e a albumina pelo método do verde de bromocresol para o cálculo das taxas de globulinas obtidas pela diferença entre os teores séricos de proteína e albumina. A fração gamaglobulina foi determinada por eletroforese. Uma análise multivariada, incluindo os teores séricos de proteína total, globulinas e gamaglobulinas, foi utilizada para determinar três grupos conforme à qualidade da transferência de imunidade passiva colostral apresentada (Proc cluster, SAS), a saber: baixa, moderada e alta. Durante o estudo, os produtores anotaram as informações referentes a práticas de manejo adotado na atenção a vaca (parturiente) e ao bezerro, incluindo os dados que poderiam ter influência sobre a transferência de imunidade passiva colostral. Os dados das bezerras, enquanto neonatas e depois quando adultas foram colhidos para a determinação da influência a curto e a longo prazo da falha da transferência de imunidade passiva (FTIP) colostral. Observou-se que os dados de escore de condição corporal da mãe da bezerra, da quantidade de colostro ingerida na primeira mamada e o momento em que ela foi realizada, da morbidade e da mortalidade das bezerras estavam relacionados com a FTIP (P0,05). Mas quando se correlacionou por regressão os dados de produção de leite das vacas que quando bezerras apresentaram teores de gamaglobulinas menores que 1,6 g/dL obteve-se valores de r2=0,47 (P=0,0005). Com os resultados desta pesquisa pode-se afirmar que práticas muito simples de manejo como fornecer pelo menos 2 L de colostro até 2 horas após o nascimento e a vaca parir numa boa condição corporal (ECC = 3 ou 3,5) podem prevenir a falha na transferência de imunidade passiva. A FTIP tem como conseqüências: maiores taxas de morbidade e mortalidade, primeiro parto mais tardio e diminuição do número de novilhas de reposição, podendo ainda estar correlacionada a menores produções leiteiras. Adequate passive transfer of maternal immunoglobulin is important for optimal health and performance in newborn calves. Blood samples were collected from 354 dairy calves, ranging from 24 to 36 hours of age, between July 2005 and May 2006 on 10 farms in the middle-eastern region of the state of Parana, Brazil. The objective was to study the relationship and effectiveness of the transfer of colostral passive immunity and its contributing factors as related to the development and production of animals. For each sample collected, total serum protein was determined by the biuret method and albumin by bromocresol green method, and the difference was used to evaluate the globulins. Electrophoresis was used to determine the -globulin fraction of the sample. A multivariable analysis, including total serum protein, globulins and gamma globulin, was used to create 3 groups to classify the quality of the transfer of colostral passive immunity (cluster procedure, SAS): failure or inadequate group, marginal group and adequate group. During the study, breeders were asked to provide information on calf and pre-partum cow management practices, including details on colostrum feeding. Data from the calves while newborn and as heifers was gathered to determine the long and short term effect of the failure of passive immunity transfer (FPIT). Body condition score of the mother at calving, quantity of colostrum ingested, timing of ingestion, morbidity and mortality of calves and age at calving time were related to FPIT (P0,05). However, when a regression was performed based on data of milk production from calves that had serum gamma globulins levels below 1,6g/dL, a correlation was identified (r2=0.47; P=0.0005). Basic management practices can prevent failure of passive immunity transfer by feeding calves 2 L of colostrum within 2 hours of life and ensuring that the cow calves with a good body condition score (BCS = 3 or 3.5). FPIT is responsible for higher morbidity and mortality rates, a delay in first parturition, a decrease in the number of replacement heifers and it can also be responsible for less milk production.